CN103435678A - 一种山楂酸的制备方法及其在制备抗菌剂中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种山楂酸的制备方法及其在制备抗菌剂中的应用。本发明采用从我国较广泛分布的木通属药用植物中提取分离强效抗菌剂（药物），其制备过程简便、低成本、低污染，其植物来源丰富，提取方便，且在采用植物果实进行提取时还可以使得植物本身不经破坏而得到长期利用，对环境友好并有着较好的经济效益，且该单体化合物产品稳定、易存放。山楂酸抑菌活性谱广，抑菌活性高，极可能进一步发展为有效、安全的食品或果蔬的抗菌剂或新的预防和治疗受细菌感染所致疾病的抗菌药物，市场化前景较好。

Description

一种山楂酸的制备方法及其在制备抗菌剂中的应用

技术领域：

本发明属于抗菌防腐和医药技术领域，具体涉及一种山楂酸的制备方法及其在制备抗菌剂中的应用。

背景技术：

食品或果蔬的细菌侵染是人类感染疾病的重要途径，而致病性细菌的耐药性问题也正在对人们的健康构成越来越显著的威胁。开发有效、安全的食品或果蔬的抗菌剂和新的抗感染类药物一直有着现实而广泛的需求。山楂酸是一种五环三萜酸，是对人类和环境低毒安全的天然化合物，其化学结构如下图中式（Ⅰ）所示：

文献报道山楂酸存在于油橄榄、蛇麻草、丁香、红枣、水杨梅、薄荷、山楂、石榴和鼠尾等植物材料中，尤其被发现在橄榄果渣油中有较高含量（王博，仇文卫，喻艳华，杨帆，汤杰，山楂酸的研究进展，生命科学，2009,21（2）：264-269），并在近年有被发现其存在于木通属三叶木通植物茎组织中（Mimaki Y.,Kuroda M.,Yokosuka A.,Harada H.,FukushimaM.,Sashida Y.Triterpenes and Triterpene Saponins from the Stems of Akebia trifoliata.Chemical& Pharmaceutical Bulletin,2003，51：960-965），但尚未见有关其存在于木通属植物果实或其他木通属植物茎叶中的报道。

近些年来的研究表明，山楂酸具有抗癌、抗氧化、抗炎、抗2型糖尿病等诸多的药理活性，但山楂酸本身尚未见其具有抗菌活性的报道文献。

发明内容：

本发明的第一个目的是，基于本发明人发现的山楂酸（maslinic acid）的一种新来源及其显著的抗菌活性，提供山楂酸（maslinic acid）或其可药用的盐或酯化衍生物在制备抗菌剂中的应用。

本发明提供的山楂酸，经体外药理实验证实，其对革兰氏阳性菌和阴性菌均具有普遍强效的抑制作用。例如，其对苏云金杆菌的抑制作用甚至比阳性对照卡那霉素硫酸盐还强，其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、痢疾杆菌和沙门氏菌等菌株的抑制作用也跟阳性对照品接近或相当，因此可用于制备抗菌剂，尤其是抗苏云金杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、痢疾杆菌和沙门氏菌等菌的抗菌剂。如应用于制备有效、安全的果蔬等食品的抗菌剂或新的预防和治疗受细菌感染所致疾病的抗菌药物，应用潜质广泛。本发明提供的山楂酸能强效抑制的革兰氏阳性菌和阴性菌包括但不限于以下实施例中例举的金黄色葡萄球菌、苏云金杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌以及痢疾杆菌。

本发明所述的山楂酸或其可药用的盐或酯化衍生物，其中的实质性抗菌活性成分是山楂酸分子。所述山楂酸的可药用的盐，其抗菌实质是在组织液或人消化道中于胃酸等生理条件下可转化为活性分子山楂酸而起作用。所述的山楂酸的酯化衍生物是指山楂酸分子中的2,3-位二羟基被有机酸酯化或分子中的28-位羧基与醇类化合物酯化的衍生化合物，所述酯化衍生物可以是2,3-位二羟基和28-位羧基三个官能团中的一个或两个基团的部分酯化，亦可以是这三个基团的全酯化，这些基于山楂酸分子骨架的酯化衍生物在组织液或人消化道中于胃酸或肠碱等生理条件下可轻易转化为活性分子山楂酸，其实质也是山楂酸起抗菌作用，因而属于本发明的严格保护范围。其中分别与2,3-位二羟基和28-位羧基官能团酯化的有机酸和有机醇可以是在生理酸碱条件下相关酯键能水解的任何形式，优选C1到C4的能增强整个分子水溶性等特性的小分子有机酸和醇，以及C6到C10的含苯环的各种有机酸或有机醇。

因此，本发明的山楂酸或其可药用的盐或酯化衍生物能在制备抗菌剂中应用。

所述的抗菌剂优选为革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌的抗菌剂。进一步优选，所述的革兰氏阳性菌的抗菌剂为金黄色葡萄球菌或苏云金杆菌的抗菌剂；所述的革兰氏阴性菌的抗菌剂为大肠杆菌、痢疾杆菌或沙门氏菌的抗菌剂。

优选，所述的抗菌剂为食品或果蔬的抗菌剂或新的预防和治疗受细菌感染所致疾病的抗菌药物。

所述的山楂酸的酯化衍生物优选是山楂酸的2,3-位二羟基和28-位羧基三个官能团中的一个或两个或三个基团与有机酸或有机醇酯化得到的酯化衍生物。进一步优选，所述的有机酸或有机醇为C6到C10的含苯环的有机酸或有机醇，或C1到C4的直链或支链型小分子有机酸或有机醇。

本发明的山楂酸或其可药用的盐或酯化衍生物可与药学上常用辅料或载体结合，制备得到具有山楂酸抑菌活性的可用于抑制食品或果蔬的细菌侵染以及防治病原细菌感染相关疾病的药物或药物组合物。该药物或药物组合物可以采用可湿性粉剂、片剂、颗粒剂、胶囊、口服液、滴丸、注射剂、气雾剂等剂型；还可采用现代制药界所公知的控释或缓释剂型或纳米制剂。

因此，本发明的第二个目的是提供一种抗菌剂，其特征在于，包含有效量的作为活性成份的山楂酸或其可药用的盐或其酯化衍生物，和制剂允许的赋形剂或药物载体。

本发明的第三个目的是提供一种山楂酸的制备方法，其特征在于，所述的山楂酸是从木通（Akebia quinata(Thumb.)Decne.）、白木通（Akebia trifolia(Thumb.)Koidz.Var.australis(Diels)Rehd）或长序木通（Akebia longeracemosa Matsumura）的茎、叶或果实，或三叶木通（Akebia trifolia(Thumb.)Koidz.）的果实中制备分离得到的。

所述的茎、叶或果实，可以为干品，也可以为鲜品，优选为干品。

优选，其具体步骤为：

a、制备总浸膏：将木通、白木通或长序木通的茎、叶或果实，或三叶木通的果实粉碎后用乙醇水溶液浸提，提取液浓缩去除乙醇，得到总浸膏粗提物，将总浸膏粗提物悬浮于水中，先后用石油醚、乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取物经浓缩后得到乙酸乙酯总浸膏；

b、分离纯化：乙酸乙酯总浸膏经正相硅胶柱层析，以氯仿/甲醇为洗脱剂，依次从体积比98:2，95:5，90:10，85:15，80:20梯度洗脱，收集氯仿/甲醇80：20洗脱下来的馏分，再经正相硅胶柱层析，以氯仿/甲醇为洗脱剂，依次从体积比98:2，95:5为流动相梯度洗脱，收集氯仿/甲醇95:5洗脱的馏分，以甲醇为溶剂进行多次重结晶，得到纯化合物山楂酸。

本发明的第四个目的是提供木通、白木通或长序木通的茎、叶或果实，或三叶木通的果实在制备山楂酸中的应用。

本发明采用从我国较广泛分布的木通属药用植物中提取分离强效抗菌剂（药物）山楂酸，其制备过程简便、低成本、低污染，其植物来源丰富，提取方便，且在采用植物果实进行提取时还可以使得植物本身不经破坏而得到长期利用，对环境友好并有着较好的经济效益，且该单体化合物产品稳定、易存放。山楂酸抑菌活性谱广，抑菌活性高，极可能进一步发展为有效、安全的食品或果蔬的抗菌剂以及新的抗感染类药物，市场化前景较好。

具体实施方式

以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制，根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。

实施例1：三叶木通果实干品中山楂酸的制备

1.1仪器与试剂

减压浓缩采用日本东京理化公司N-1000旋转蒸发仪、CCA-1110循环式冷却箱和SB-1000电热恒温水浴锅；HPLC采用日本岛津公司LC-20AT型液相色谱仪、SPD-M20A检测器和Shim-PackPRC-ODS色谱柱(粒径5μm,孔径12nm,250mm×20mm)；中压半制备采用上海利穗科技有限公司(Dr Flash-S)分离纯化系统；电喷雾质谱(ESIMS)采用美国应用生物系统公司MDS SCIEX API2000LC/MS/MS仪，以甲醇为溶剂直接进样测定；¹H NMR谱和¹³CNMR谱采用Bruker Avance600核磁共振仪，并以四甲基硅烷为内标测定。显色方法采用10%硫酸乙醇溶液或硫酸香草醛处理后加热显色或碘蒸气显色。

1.2植物来源与鉴定

供提取用植物材料三叶木通（Akebia trifolia(Thumb.)Koidz.）于2009年9月采自湖南省境内，由中国科学院华南植物园邢福武研究员鉴定。

1.3提取与分离

样品（三叶木通果实干品，重0.5公斤）粉碎后用体积分数95%乙醇室温下提取三次，合并提取液减压浓缩除去有机溶剂乙醇，得到总浸膏粗提物。将总浸膏粗提物悬浮于500ml水中，然后用等体积的石油醚提取后再用乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯萃取液经减压浓缩得到乙酸乙酯总浸膏（44g）。将乙酸乙酯总浸膏用1：1的氯仿/甲醇（100mL）进行溶解，加入正相硅胶（80-100目）以重量比1:1.5拌样，挥干溶剂，干法装柱（200-300目，800克），干法上样，依次用氯仿/甲醇=98:2，95:5，90:10，85:15，80:20，70:30，60:40，1:1，0:100v/v为流动相梯度洗脱，根据薄层板检测，各流份按照极性的差别从小到大依次收集9个组份F1–F9；将F5（氯仿/甲醇80:20洗脱的馏分，该组分以氯仿/甲醇85:15为展开剂进行正相TLC检测，并以10%硫酸-乙醇喷洒加热显色，主成分呈现Rf=0.8的淡红色斑点）再经正相硅胶柱层析（200-300目，150克）分离纯化，以氯仿/甲醇=98:2，95:5，90:10v/v为流动相梯度洗脱（每个梯度洗脱500ml，每20ml收集为一个组份），根据正相薄层板检测收集并恰当合并洗脱液，得到6个组份F5-1-F5-6；F5-3（氯仿/甲醇95:5洗脱部分）以甲醇为溶剂进行多次重结晶，得到无色（白色）结晶粉末状化合物1（15mg、山楂酸）。

1.4山楂酸的结构鉴定

化合物1为白色结晶粉末状物，分子式C₃₀H₄₈O₄；ESI-MS(neg.)m/z471[M-H]^–，975[2M-H]^–；ESI-MS(pos.)m/z511[M+Na]⁺，999[2M+Na]⁺；¹H(C₅D₅N,600MHz)and ¹³C NMR(C₅D₅N,151MHz)数据陈列如下表1所示：

表1：化合物1的NMR数据（in C₅D₅N）

以上波谱相关数据与文献（赵敏，王亚男，肖雪宾，钱文辉，王大成，张明军，邓旭明，尾叶香茶菜化学成分的研究，时珍国医国药，2011,22（12）：2881-2882）报道的化合物山楂酸maslinic acid一致，据此可确定所获化合物1为山楂酸。

实施例2：三叶木通果实鲜品中山楂酸的制备

2.1仪器与试剂：同实施例1

2.2植物来源与鉴定：同实施例1

2.3提取与分离

样品（三叶木通果实鲜品，重0.5公斤）捣碎后用体积分数95%乙醇室温下提取三次，合并提取液减压浓缩除去有机溶剂乙醇，得到总浸膏粗提物。将总浸膏粗提物悬浮于500ml水中，然后用等体积的石油醚提取后再用乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯萃取液经减压浓缩得到乙酸乙酯总浸膏（12g）。将乙酸乙酯总浸膏用1：1的氯仿/甲醇（50mL）进行溶解，加入正相硅胶（80-100目）以重量比1:1.5拌样，挥干溶剂，干法装柱（200-300目，300克），干法上样，依次用氯仿/甲醇=98:2，95:5，90:10，85:15，80:20，70:30，60:40，1:1，0:100v/v为流动相梯度洗脱，根据薄层板检测，各流份按照极性的差别从小到大依次收集9个组份F1–F9；将F5（氯仿/甲醇80:20洗脱的馏分，该组分以氯仿/甲醇85:15为展开剂进行正相TLC检测，并以10%硫酸-乙醇喷洒加热显色，主成分呈现Rf=0.8的淡红色斑点）再经正相硅胶柱层析（200-300目，90克）分离纯化，以氯仿/甲醇=98:2，95:5，90:10v/v为流动相梯度洗脱（每个梯度洗脱300ml，每15ml收集为一个组份），根据正相薄层板检测收集并恰当合并洗脱液，得到6个组份F5-1-F5-6；F5-3（氯仿/甲醇95:5洗脱部分）以甲醇为溶剂进行多次重结晶，得到无色（白色）结晶粉末状化合物2（6mg、山楂酸）。

2.4化合物2的结构鉴定：同实施例1，化合物2经结构鉴定为山楂酸。

实施例3：木通果实干品中山楂酸的制备

3.1仪器与试剂：同实施例1

3.2植物来源与鉴定：木通（Akebia quinata(Thumb.)Decne.）

3.3提取与分离

样品（木通果实干品，重0.5公斤）粉碎后用体积分数95%乙醇室温下提取三次，合并提取液减压浓缩除去有机溶剂乙醇，得到总浸膏粗提物。将总浸膏粗提物悬浮于500ml水中，然后用等体积的石油醚提取后再用乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯萃取液经减压浓缩得到乙酸乙酯总浸膏（44g）。将乙酸乙酯总浸膏用1：1的氯仿/甲醇（100mL）进行溶解，加入正相硅胶（80-100目）以重量比1:1.5拌样，挥干溶剂，干法装柱（200-300目，800克），干法上样，依次用氯仿/甲醇=98:2，95:5，90:10，85:15，80:20，70:30，60:40，1:1，0:100v/v为流动相梯度洗脱，根据薄层板检测，各流份按照极性的差别从小到大依次收集9个组份F1–F9；将F5（氯仿/甲醇80:20洗脱的馏分，该组分以氯仿/甲醇85:15为展开剂进行正相TLC检测，并以10%硫酸-乙醇喷洒加热显色，主成分呈现Rf=0.8的淡红色斑点）再经正相硅胶柱层析（200-300目，150克）分离纯化，以氯仿/甲醇=98:2，95:5，90:10v/v为流动相梯度洗脱（每个梯度洗脱500ml，每20ml收集为一个组份），根据正相薄层板检测收集并恰当合并洗脱液，得到6个组份F5-1-F5-6；F5-3（氯仿/甲醇95:5洗脱部分）以甲醇为溶剂进行多次重结晶，得到无色（白色）结晶粉末状化合物3（15mg、山楂酸）。

3.4化合物3的结构鉴定：同实施例1，化合物3经结构鉴定为山楂酸。

实施例4：白木通果实干品中山楂酸的制备

4.1仪器与试剂：同实施例1

4.2植物来源与鉴定：白木通（Akebia trifolia(Thumb.)Koidz.Var.australis(Diels)Rehd）

4.3提取与分离

样品（白木通果实干品，重0.5公斤）粉碎后用体积分数95%乙醇室温下提取三次，合并提取液减压浓缩除去有机溶剂乙醇，得到总浸膏粗提物。将总浸膏粗提物悬浮于500ml水中，然后用等体积的石油醚提取后再用乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯萃取液经减压浓缩得到乙酸乙酯总浸膏（44g）。将乙酸乙酯总浸膏用1：1的氯仿/甲醇（100mL）进行溶解，加入正相硅胶（80-100目）以重量比1:1.5拌样，挥干溶剂，干法装柱（200-300目，800克），干法上样，依次用氯仿/甲醇=98:2，95:5，90:10，85:15，80:20，70:30，60:40，1:1，0:100v/v为流动相梯度洗脱，根据薄层板检测，各流份按照极性的差别从小到大依次收集9个组份F1–F9；将F5（氯仿/甲醇80:20洗脱的馏分，该组分以氯仿/甲醇85:15为展开剂进行正相TLC检测，并以10%硫酸-乙醇喷洒加热显色，主成分呈现Rf=0.8的淡红色斑点）再经正相硅胶柱层析（200-300目，150克）分离纯化，以氯仿/甲醇=98:2，95:5，90:10v/v为流动相梯度洗脱（每个梯度洗脱500ml，每20ml收集为一个组份），根据正相薄层板检测收集并恰当合并洗脱液，得到6个组份F5-1-F5-6；F5-3（氯仿/甲醇95:5洗脱部分）以甲醇为溶剂进行多次重结晶，得到无色（白色）结晶粉末状化合物4（15mg、山楂酸）。

4.4化合物4的结构鉴定：同实施例1，化合物4经结构鉴定为山楂酸。

实施例5：白木通果实鲜品中山楂酸的制备

5.1仪器与试剂：同实施例1

5.2植物来源与鉴定：白木通（Akebia trifolia(Thumb.)Koidz.Var.australis(Diels)Rehd）

5.3提取与分离

样品（白木通果实鲜品，重0.5公斤）捣碎后用体积分数95%乙醇室温下提取三次，合并提取液减压浓缩除去有机溶剂乙醇，得到总浸膏粗提物。将总浸膏粗提物悬浮于500ml水中，然后用等体积的石油醚提取后再用乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯萃取液经减压浓缩得到乙酸乙酯总浸膏（12g）。将乙酸乙酯总浸膏用1：1的氯仿/甲醇（50mL）进行溶解，加入正相硅胶（80-100目）以重量比1:1.5拌样，挥干溶剂，干法装柱（200-300目，300克），干法上样，依次用氯仿/甲醇=98:2，95:5，90:10，85:15，80:20，70:30，60:40，1:1，0:100v/v为流动相梯度洗脱，根据薄层板检测，各流份按照极性的差别从小到大依次收集9个组份F1–F9；将F5（氯仿/甲醇80:20洗脱的馏分，该组分以氯仿/甲醇85:15为展开剂进行正相TLC检测，并以10%硫酸-乙醇喷洒加热显色，主成分呈现Rf=0.8的淡红色斑点）再经正相硅胶柱层析（200-300目，90克）分离纯化，以氯仿/甲醇=98:2，95:5，90:10v/v为流动相梯度洗脱（每个梯度洗脱300ml，每15ml收集为一个组份），根据正相薄层板检测收集并恰当合并洗脱液，得到6个组份F5-1-F5-6；F5-3（氯仿/甲醇95:5洗脱部分）以甲醇为溶剂进行多次重结晶，得到无色（白色）结晶粉末状化合物5（6mg、山楂酸）。

5.4化合物5的结构鉴定：同实施例1，化合物5经结构鉴定为山楂酸。

实施例6：木通茎叶干品中山楂酸的制备

6.1仪器与试剂：同实施例1

6.2植物来源与鉴定：木通（Akebia quinata(Thumb.)Decne.）

6.3提取与分离

样品（木通茎叶干品，重0.5公斤）粉碎后用体积分数95%乙醇室温下提取三次，合并提取液减压浓缩除去有机溶剂乙醇，得到总浸膏粗提物。将总浸膏粗提物悬浮于500ml水中，然后用等体积的石油醚提取后再用乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯萃取液经减压浓缩得到乙酸乙酯总浸膏（33g）。将乙酸乙酯总浸膏用1：1的氯仿/甲醇（100mL）进行溶解，加入正相硅胶（80-100目）以重量比1:1.5拌样，挥干溶剂，干法装柱（200-300目，800克），干法上样，依次用氯仿/甲醇=98:2，95:5，90:10，85:15，80:20，70:30，60:40，1:1，0:100v/v为流动相梯度洗脱，根据薄层板检测，各流份按照极性的差别从小到大依次收集9个组份F1–F9；将F5（氯仿/甲醇80:20洗脱的馏分，该组分以氯仿/甲醇85:15为展开剂进行正相TLC检测，并以10%硫酸-乙醇喷洒加热显色，主成分呈现Rf=0.8的淡红色斑点）再经正相硅胶柱层析（200-300目，150克）分离纯化，以氯仿/甲醇=98:2，95:5，90:10v/v为流动相梯度洗脱（每个梯度洗脱500ml，每20ml收集为一个组份），根据正相薄层板检测收集并恰当合并洗脱液，得到6个组份F5-1-F5-6；F5-3（氯仿/甲醇95:5洗脱部分）以甲醇为溶剂进行多次重结晶，得到无色（白色）结晶粉末状化合物6（10mg、山楂酸）。

6.4化合物6的结构鉴定：同实施例1，化合物6经结构鉴定为山楂酸。

实施例7：化合物山楂酸的抗菌活性检测

7.1实验用细菌种类

革兰氏阳性菌：金黄色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus），苏云金杆菌（Bacillusthuringiensis）；

革兰氏阴性菌：大肠杆菌（Escherichia coli），沙门氏菌（Salmonella enterica），痢疾杆菌（Shigella dysenteriae）。

7.2实验用药

阳性对照品：卡那霉素硫酸盐（kanamincy sulfate）

阴性对照品：MeOH

山楂酸maslinic acid由以上实验例制备

7.3实验方法：

将山楂酸maslinic acid、卡那霉素硫酸盐分别由甲醇（MeOH）配制成为1mg/ml的溶液。采用刃天青颜色反应法，采用96孔细胞培养板对五种细菌的最小抑菌浓度（MIC）进行测定，具体过程如下。

首先将100μg/mL的刃天青指示剂加入到96孔细胞培养板的第11列孔中，然后将7.5mL100μg/mL的刃天青溶液和5mL含细菌（10⁶cfu/mL，OD=0.07）的培养液混匀，然后分别往第1-10列和第12列的每个培养孔中加入100μL上述刃天青和细菌培养液的混合物。再往每列的第一个孔中加入100μL浓度为1mg/mL的测试样品，混匀，从中吸取100μL溶液打到第二个孔中，依此类推，一直到第十个孔，最后移走100μL。测试样品的浓度变化为：500μg/mL，250μg/mL，125μg/mL，62.5μg/mL，31.2μg/mL，15.6μg/mL，7.8μg/mL、3.9μg/mL、1.9μg/mL和0.9μg/mL。然后将培养板放在37℃的培养箱中，测试样品孔中弱蓝色没有变为粉红色表示有抑制效果，蓝色变为粉红色表示没有抑制效果，最后一个未由蓝色变为粉红色的孔中样品浓度为测试样品的最小抑制浓度（MIC），直至第12列培养液由蓝色变为粉红色（约5-6小时），观察化合物山楂酸maslinic acid对每种细菌的MIC值（Rahman M.&Gray A.，Phytochemistry,2005，66：1601-1606,）。

7.4实验数据参见表2：

表2：化合物山楂酸maslinic acid对五种细菌的最小抑制浓度（MIC），μg/mL

7.5实验结论：

本实验表明，山楂酸maslinic acid对革兰氏阳性菌（包括金黄色葡萄球菌，苏云金杆菌等）和革兰氏阴性菌（包括大肠杆菌,沙门氏菌，痢疾杆菌等）均具有显著的抑制作用，其对苏云金杆菌的抑制作用甚至比阳性对照品卡那霉素硫酸盐还强，其对金黄色葡萄球菌，大肠杆菌，痢疾杆菌和沙门氏菌等菌株的抑制作用跟阳性对照品也极为接近和相当，体现出山楂酸具有强效广谱的抗菌活性，因而具有较强的开发潜质，可望能发展用于制备有效、安全的食品抗菌剂或新的抗细菌感染类药物，应用潜质广泛。

Claims (10)

1.山楂酸或其可药用的盐或其酯化衍生物在制备抗菌剂中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的抗菌剂为革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌的抗菌剂。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的革兰氏阳性菌的抗菌剂为金黄色葡萄球菌或苏云金杆菌的抗菌剂；所述的革兰氏阴性菌的抗菌剂为大肠杆菌、痢疾杆菌或沙门氏菌的抗菌剂。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的抗菌剂为果蔬或食品的抗菌剂，或预防和治疗受细菌感染所致疾病的抗菌药物。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的山楂酸的酯化衍生物是山楂酸的2,3-位二羟基和28-位羧基三个官能团中的一个或两个或三个基团与有机酸或有机醇酯化得到的酯化衍生物。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的有机酸或有机醇为C6到C10的含苯环的有机酸或有机醇，或C1到C4的直链或支链型小分子有机酸或有机醇。

7.一种抗菌剂，其特征在于，包含有效量的作为活性成份的山楂酸或其可药用的盐或其酯化衍生物，和制剂允许的赋形剂或药物载体。

8.一种山楂酸的制备方法，其特征在于，所述的山楂酸是从木通（Akebia quinata(Thumb.)Decne.）、白木通（Akebia trifolia(Thumb.)Koidz.Var.australis(Diels)Rehd）或长序木通（Akebia longeracemosa Matsumura）的茎、叶或果实，或三叶木通（Akebia trifolia(Thumb.)Koidz.）的果实中制备分离得到的。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，其具体步骤为：

a、制备总浸膏：将木通、白木通或长序木通的茎、叶或果实，或三叶木通的果实粉碎后用乙醇水溶液浸提，提取液浓缩去除乙醇，得到总浸膏粗提物，将总浸膏粗提物悬浮于水中，先后用石油醚、乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取物经浓缩后得到乙酸乙酯总浸膏；

b、分离纯化：乙酸乙酯总浸膏经正相硅胶柱层析，以氯仿/甲醇为洗脱剂，依次从体积比98:2，95:5，90:10，85:15，80:20梯度洗脱，收集氯仿/甲醇80：20洗脱下来的馏分，再经正相硅胶柱层析，以氯仿/甲醇为洗脱剂，依次从体积比98:2，95:5为流动相梯度洗脱，收集氯仿/甲醇95:5洗脱的馏分，以甲醇为溶剂进行多次重结晶，得到纯化合物山楂酸。

10.木通、白木通或长序木通的茎、叶或果实，或三叶木通的果实在制备山楂酸中的应用。