CN103285373A - 肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂制备及其应用 - Google Patents
肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂制备及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103285373A CN103285373A CN2013102090826A CN201310209082A CN103285373A CN 103285373 A CN103285373 A CN 103285373A CN 2013102090826 A CN2013102090826 A CN 2013102090826A CN 201310209082 A CN201310209082 A CN 201310209082A CN 103285373 A CN103285373 A CN 103285373A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- tumor necrosis
- necrosis factor
- peptide inhibitor
- alpha
- arthritis
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 title claims abstract description 45
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title claims abstract description 38
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 7
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title abstract description 16
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 title abstract description 14
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title abstract description 14
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 title abstract 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 24
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 claims abstract description 13
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 10
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 abstract description 9
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 abstract description 4
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 abstract 1
- 238000009509 drug development Methods 0.000 abstract 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 abstract 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 21
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 21
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 13
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 11
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 11
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 11
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 9
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 9
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 8
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 210000003423 ankle Anatomy 0.000 description 7
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 7
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 6
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 5
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 5
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 4
- 210000001258 synovial membrane Anatomy 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 description 4
- 102000002734 Collagen Type VI Human genes 0.000 description 3
- 108010043741 Collagen Type VI Proteins 0.000 description 3
- 208000009386 Experimental Arthritis Diseases 0.000 description 3
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000670 adrenergic alpha-2 receptor antagonist Substances 0.000 description 3
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 3
- 230000002917 arthritic effect Effects 0.000 description 3
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 3
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 2
- 229960002964 adalimumab Drugs 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 2
- 230000003356 anti-rheumatic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003435 antirheumatic agent Substances 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 2
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 2
- 108010084652 homeobox protein PITX1 Proteins 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- LJRDOKAZOAKLDU-UDXJMMFXSA-N (2s,3s,4r,5r,6r)-5-amino-2-(aminomethyl)-6-[(2r,3s,4r,5s)-5-[(1r,2r,3s,5r,6s)-3,5-diamino-2-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3-amino-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-hydroxycyclohexyl]oxy-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl]oxyoxane-3,4-diol;sulfuric ac Chemical compound OS(O)(=O)=O.N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](N)C[C@@H](N)[C@@H]2O)O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)N)O[C@@H]1CO LJRDOKAZOAKLDU-UDXJMMFXSA-N 0.000 description 1
- PBQVHWFDMNCCIH-KNJAVFAGSA-N (4ar,7s,7ar,12bs)-9-methoxy-3-methyl-2,4,4a,7,7a,13-hexahydro-1h-4,12-methanobenzofuro[3,2-e]isoquinoline-7-ol;n,n-dimethyl-1-phenothiazin-10-ylpropan-2-amine;n-(4-hydroxyphenyl)acetamide;phosphoric acid;hydrochloride Chemical compound Cl.OP(O)(O)=O.CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1.C1=CC=C2N(CC(C)N(C)C)C3=CC=CC=C3SC2=C1.C([C@H]1C(N(CC[C@@]112)C)C3)=C[C@H](O)[C@@H]1OC1=C2C3=CC=C1OC PBQVHWFDMNCCIH-KNJAVFAGSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- MCTWTZJPVLRJOU-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-1H-imidazole Chemical compound CN1C=CN=C1 MCTWTZJPVLRJOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JAJIPIAHCFBEPI-UHFFFAOYSA-N 9,10-dioxoanthracene-1-sulfonic acid Chemical compound O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)C2=C1C=CC=C2S(=O)(=O)O JAJIPIAHCFBEPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 208000006820 Arthralgia Diseases 0.000 description 1
- 208000036487 Arthropathies Diseases 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 108010008165 Etanercept Proteins 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- UFPXDFOYHVEIPI-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Asp Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O UFPXDFOYHVEIPI-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 206010020880 Hypertrophy Diseases 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 208000012659 Joint disease Diseases 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 125000000393 L-methionino group Chemical group [H]OC(=O)[C@@]([H])(N([H])[*])C([H])([H])C(SC([H])([H])[H])([H])[H] 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002274 Matrix Metalloproteinases Human genes 0.000 description 1
- 108010000684 Matrix Metalloproteinases Proteins 0.000 description 1
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 description 1
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010033425 Pain in extremity Diseases 0.000 description 1
- 241001111421 Pannus Species 0.000 description 1
- 241000124033 Salix Species 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- 206010042674 Swelling Diseases 0.000 description 1
- XNTVWRJTUIOGQO-RHYQMDGZSA-N Thr-Met-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O XNTVWRJTUIOGQO-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 1
- 230000000078 anti-malarial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003430 antimalarial agent Substances 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 208000037979 autoimmune inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 229960002170 azathioprine Drugs 0.000 description 1
- LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N azathioprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC=NC2=C1NC=N2 LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000005482 chemotactic factor Substances 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 229960000403 etanercept Drugs 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001861 immunosuppressant effect Effects 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 210000001503 joint Anatomy 0.000 description 1
- 230000008407 joint function Effects 0.000 description 1
- 210000003041 ligament Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 206010025482 malaise Diseases 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 230000000116 mitigating effect Effects 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000041 non-steroidal anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 229960001639 penicillamine Drugs 0.000 description 1
- 150000003053 piperidines Chemical class 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000003068 rheumatic fever Diseases 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 238000012154 short term therapy Methods 0.000 description 1
- 239000003270 steroid hormone Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- GECHUMIMRBOMGK-UHFFFAOYSA-N sulfapyridine Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1S(=O)(=O)NC1=CC=CC=N1 GECHUMIMRBOMGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002211 sulfapyridine Drugs 0.000 description 1
- 238000002636 symptomatic treatment Methods 0.000 description 1
- 201000004595 synovitis Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 210000000707 wrist Anatomy 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂制备及其应用。本发明涉及药物领域，具体涉及具有抑制肿瘤坏死因子-α，能预防和治疗类风湿性关节炎的多肽。其序列为Gly-Gly-Asp-Thr-Met-Leu是全新的序列，本发明的有益效益是可用于治疗类风湿性关节炎，具有潜在的新药开发价值。
Description
技术领域：
本发明涉及药物领域，具体涉及用于预防和治疗或预防类风湿性关节炎的肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂。
背景技术：
类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是临床最常见的炎性关节病和主要致残因素之一。在全世界约为0.5%-1.0%，RA的发病在我国约为0.4%。RA可发生于任何年龄，随着年龄的增长，发病率也随之增高。女性高发年龄为45-55岁，性别与RA发病关系密切，男女之比约1:3。RA是一种病因尚未明了的慢性全身性炎症性疾病，以慢性、对称性、多滑膜关节炎和关节外病变为主要临床表现，属于自身免疫炎性疾病。患者常以手部或腕部疼痛及肿胀(特别是腕背部的肿胀)为首发症状，症状持续不缓解，普通的对症治疗虽可以缓解症状，但常常由于用药不规则或不足量而导致症状反复。病情进展时可以出现明显的晨僵，通常可达1小时以上，并不断加重；同时出现一定的关节功能障碍。
类风湿关节炎的病因和发病机制尚未完全明了，其基本病理特点是血管炎和滑膜炎。关节内滑膜血管增生，形成血管翳，导致滑膜增厚，渗出增多，分泌多种细胞因子，侵犯软骨并引起骨质损害。对其周围的肌腔、韧带、腱鞘以及肌肉等组织也均可侵蚀，从而影响关节的稳定，容易发生关节畸形而出现功能障碍。血管炎亦可侵犯周身各脏器组织，形成系统性疾病。
目前治疗RA的药物分为两大类：控制症状药和控制疾病药。由于RA病因不明，故当今并无堪称控制疾病的药。控制症状的抗风湿药分为四类：一、非甾体类抗炎药，通常称为一线药，这类药物种类繁多，国内市场已多达数十种。二、类固醇激素，激素是一个非常好的止痛抗炎药，但长期单独使用不能改善病情，反而带来许多副作用，激素作为二线慢作用药起效前的过渡性用是可以的，但用量要小，时间不宜过长。在病情较重，伴有关节外表现的患者，短期治疗冲击，并联合二线药治疗时必须的。三、慢作用抗风湿药，通常称为二线药，所谓慢作用药包括抗疟药、金盐、青霉胺和柳氮碘胺吡啶，它们治疗RA起效慢，长期作用对RA病情有一定缓解作用，故也称病情改善药。四、免疫抑制剂：常用有甲氨喋呤、环磷酰胺、硫唑嘌呤、雷公藤、青风藤等。
在治疗RA的生物制剂中，临床上研究最多的就是肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的拮抗剂。TNF-α是活动期RA滑膜及血液中重要的细胞因子之一，主要由滑膜巨噬细胞产生。它能刺激滑膜成纤维细胞增生，分泌IL-6，粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、趋化因子以及基质金属蛋白酶和前列腺素等效应分子，在RA的发病中起着极其重要的作用。TNF-α拮抗剂的作用是特异性地拮抗TNF-α，抑制RA的病情进展。目前已批准上市的TNF-α拮抗剂主要有依那西普(etanercept)、英夫利西单抗(irdliximab)和阿达木单抗(adalimumab)。由于这些药物为单抗，存在着分子量较大，及产生抗原反应等缺点，大大限制了其在临床的使用。
发明内容：
本发明目的是针对现有TNF-α拮抗剂的特点，设计一种分子量小的TNF-α多肽拮抗剂，可以避免产生抗原反应，更加适用于临床的应用。
本发明技术方案是提供一种肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2,其序列为Gly-Gly-Asp-Thr-Met-Leu，及在制备治疗或预防类风湿性关节炎药物中的应用。
本发明的原理在于肿瘤坏死因子-α是以三聚体的形式与肿瘤坏死因子受体结合，产生生理或病理的效应，肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2并不直接作用于肿瘤坏死因子受体，而是抑制肿瘤坏死因子-α的三聚体的形成，间接的抑制肿瘤坏死因子受体的作用，从而起到预防和治疗类风湿关节炎的作用。
有益结果：
本发明中的肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2序列Gly-Gly-Asp-Thr-Met-Leu，可以靶向抑制肿瘤坏死因子-α, 抑制肿瘤坏死因子受体产生的生理或病理的效应，达到预防或治疗类风湿性关节炎的效果。
发明人经过大量实验获知肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2能够抑制佐剂型大鼠类风湿关节炎和DBA/1小鼠胶原型类风湿性关节炎的发展，体内实验证明具有显著的治疗类风湿型关节炎的效果，并且副作用少，用量少成本降低。说明本发明设计的肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2科学、合理、可行有效，能作为治疗或预防类风湿性关节炎药物。
附图说明:
附图1多肽抑制剂分子构像示意图。1.Gly 甘氨酸，2.Gly甘氨酸，3.Asp天冬氨酸， 4.Thr苏氨酸，5. Met甲硫氨酸， 6.Leu亮氨酸。
具体实施方式:
实施例1
多肽的化学合成方法
多肽用Fmoc化学方法合成。合成反应从C端向N端进行，Rink介质（可在Advanced ChemTech公司购得）上有自由氨基，顺序连接Leu，Met，Thr，Asp，Gly和Gly。每一步连接过程中，氨基酸残基都要活化，活化混合物中有4倍于介质上自由氨基的HBTU，HOBt，DIEA和Fmoc-氨基酸。每次氨基酸的连接反应之后，都用一个吡啶/醋酸/N-甲基咪唑（4:1:0.5）的混合物来封闭未连接的自由氨基，封闭反应10 min。每次氨基酸的连接反应之后，下一个氨基酸连接之前，都要把介质上的Fmoc-基团去掉，去Fmoc-基团使用含20%哌啶的二甲基甲酰胺，需15分钟。最后，当所有氨基酸残基顺序连接之后，多肽用98%三氟乙酸从介质上切割下来，切割在室温下进行2小时。
应用上述化学条件可合成并获得多肽，序列为Gly-Gly-Asp-Thr-Met-Leu，该序列为全新序列。也可委托上海生工合成。
实施例2
肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2在胶原诱导小鼠关节炎动物模型体内免疫保护作用
构建胶原型小鼠关节炎动物模型，研究肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2对小鼠胶原诱导性关节炎（collagen induced arthritis, CIA）的治疗作用。采用小鼠作为受试动物，SPF级DBA/1小鼠90只（由上海西普尔-必凯实验动物有限公司（Sino-British SIPPR Lab. Animal Ltd）提供，动物生产许可证号码：SCXK(沪)2008-0016），雄性，7-8周龄，体重为18-22 g，随机分成6组，分别是正常对照组，模型对照组，多肽抑制剂2低中高3个剂量组（0.4，0.8，1.6 mg/kg）和阳性药对照组(甲氨蝶呤2 mg/kg)。除正常组外，第0天各实验组建立小鼠CIA模型，方法是鸡软骨Ⅱ型胶原(cⅡ)用0.1 mol/l醋酸溶解成4 mg/ml的溶液，于4℃冰箱过夜。实验当天用Ⅱ型胶原与含4 mg/ml Myeobaeterium tuberculosis strain H37Rv的完全弗氏佐剂(CFA)等体积充分乳化，待DBA/1小鼠麻醉后，于其尾部皮内每只注射乳化剂50 μl进行致敏，21 d后用4 mg/ml的Ⅱ型胶原(cⅡ)与不完全弗氏佐剂(IFA)等体积充分乳化后以相同剂量的乳化剂于尾部进行再次免疫。造模第30 d起皮下注射给药：多肽2的3个剂量组（0.4，0.8，1.6 mg/kg ）：每日两次，连续10天；阳性药对照组(甲氨蝶呤2 mg/kg )：每五天一次，连续3次；正常对照组和模型对照组（生理盐水）：连续10天。分别于造模后第21天至第70天每3天称量体重、关节评分、分别检测左右后足足踝直径来观察药物对小鼠胶原型关节炎的影响。
结果：造模后小鼠与正常小鼠相比较，免疫后第27天，CIA小鼠足爪红肿，关节炎指数评分增高，模型组第45-60天为肿胀高峰，模型组自第35天开始体重几乎不增加，后期还略微有下降。肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2在胶原诱导小鼠关节炎动物模型体内免疫保护作用具体结果如下：
肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2对小鼠胶原型关节炎左足足爪肿胀度的影响，阳性对照组、肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2高、中、低剂量组左后足踝直径与模型组比较，均有极显著性差异（P<0.01）实验结果具有统计学意义。肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2对小鼠胶原型关节炎右足足爪肿胀度的影响，阳性对照组、肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2高、中、低剂量组右后足踝直径与模型组比较，均有极显著性差异（P<0.01），实验结果具有统计学意义。肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2对胶原型关节炎小鼠临床评分的影响，多肽2低、中、高剂量组四肢评分显著低于模型对照组（P＜0.01），与模型对照组比较极显著性差异，实验结果具有统计学意义。肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2对胶原型关节炎小鼠体重影响，多肽2高、中、低剂量组体重显著高于模型对照组（P＜0.01），与模型对照组比较极显著性差异，实验结果具有统计学意义。
结论：肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2对小鼠胶原型关节炎具有治疗作用。
实施例3
肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2对佐剂型大鼠关节炎动物模型体内免疫保护作用
构建佐剂型大鼠关节炎动物模型，研究肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2对佐剂性关节炎（Adjuvant arthritis, AA）大鼠的治疗作用。采用大鼠作为受试动物，SPF级SD大鼠90只（由上海西普尔-必凯实验动物有限公司（Sino-British SIPPR Lab. Animal Ltd）提供，动物生产许可证号码：SCXK(沪)2008-0016），雄性，体重为140 g—160 g，随机分成6组，分别是正常对照组，模型对照组，肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2低中高3个剂量组（0.2，0.4，0.8 mg/kg）和阳性药对照组(甲氨蝶呤1 mg/kg)。除正常组外，第0天各实验组建立大鼠AA模型，方法是在大鼠的左侧后足足跎注射含灭活的结核分枝杆菌(H37RA，10 mg/ml)完全弗氏佐剂0.08 ml造成大鼠佐剂性关节炎模型。造模第10天起皮下注射给药：多肽2的3个剂量组（0.2， 0.4， 0.8 mg/kg ）：每日两次，连续10天；阳性药对照组(甲氨蝶呤1 mg/kg )：每五天一次，连续3次；正常对照组和模型对照组（生理盐水）：连续10天。分别于造模后第8，11，14，17，20，23和26天，称量体重、关节评分、分别检测左右后足足踝直径来观察药物对大鼠佐剂型关节炎的影响。
结果：造模后大鼠与正常大鼠相比较，AA大鼠左后足会迅速产生原发性关节炎，出现明显的肿胀，并伴有溃烂；右后足大约10 d后开始出现继发性关节炎，评分的分值逐渐增大；同时耳部血管增生明显，红肿明显；尾部关节出现肿胀。肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2在佐剂性大鼠关节炎动物模型体内免疫保护作用，具体结果如下：
肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2对大鼠原发性关节炎足爪肿胀度的影响，大鼠阳性对照组、肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2的低、中、高剂量组左后足踝直径与模型组比较，有极显著性差异（P<0.01）；肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2低、中、高剂量组左后足踝直径与模型组比较，均有显著性差异（P<0.05），实验结果具有统计学意义。肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2对大鼠继发性关节炎足爪肿胀度的影响，大鼠阳性对照组、肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2低、中、高剂量组右后足踝直径与模型组比较，有显著性差异（P<0.05）。肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2Ⅰ对佐剂型关节炎大鼠临床评分的影响，多肽Ⅰ低、中、高剂量组四肢评分显著低于模型对照组（P＜0.05），与模型对照组比较差异均有统计学意义。肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2对佐剂型关节炎大鼠体重影响，多肽2高、中、低剂量组体重显著高于模型对照组（P＜0.05），与模型对照组比较差异均有统计学意义。
结论：肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2对AA大鼠关节炎具有治疗作用。
SEQUENCE LISTING
<110> 苏州普罗达生物科技有限公司
<120> 肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2制备及其应用
<130>
<160> 1
<170> Patent In version 3.3
<210> 1
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<400> 1
Gly Gly Asp Thr Met Leu
1 5
Claims (2)
1.肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2，其特征在于其序列为Gly-Gly-Asp-Thr-Met-Leu。
2.肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂2，在制备治疗或预防类风湿性关节炎药物中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2013102090826A CN103285373A (zh) | 2013-05-30 | 2013-05-30 | 肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂制备及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2013102090826A CN103285373A (zh) | 2013-05-30 | 2013-05-30 | 肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂制备及其应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103285373A true CN103285373A (zh) | 2013-09-11 |
Family
ID=49087262
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2013102090826A Pending CN103285373A (zh) | 2013-05-30 | 2013-05-30 | 肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂制备及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103285373A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103739670A (zh) * | 2013-12-31 | 2014-04-23 | 罗瑞雪 | 一种聚乙二醇修饰的抑制肿瘤坏死因子-α多肽及其应用 |
| CN103739677A (zh) * | 2013-12-31 | 2014-04-23 | 罗瑞雪 | 一种抑制核因子－κB多肽及其应用 |
| CN105111284A (zh) * | 2015-09-08 | 2015-12-02 | 苏州普罗达生物科技有限公司 | 肿瘤坏死因子抑制多肽及其应用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1997044036A1 (en) * | 1996-05-20 | 1997-11-27 | Darwin Discovery Limited | Quinoline carboxamides as tnf inhibitors and as pde-iv inhibitors |
| CN1198747A (zh) * | 1995-10-05 | 1998-11-11 | 达尔文发现有限公司 | 作为金属蛋白酶和tnf释放抑制剂的硫取代的肽 |
-
2013
- 2013-05-30 CN CN2013102090826A patent/CN103285373A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1198747A (zh) * | 1995-10-05 | 1998-11-11 | 达尔文发现有限公司 | 作为金属蛋白酶和tnf释放抑制剂的硫取代的肽 |
| WO1997044036A1 (en) * | 1996-05-20 | 1997-11-27 | Darwin Discovery Limited | Quinoline carboxamides as tnf inhibitors and as pde-iv inhibitors |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 钱钰等: "肿瘤坏死抑制剂的研究进展", 《现代药物与临床》 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103739670A (zh) * | 2013-12-31 | 2014-04-23 | 罗瑞雪 | 一种聚乙二醇修饰的抑制肿瘤坏死因子-α多肽及其应用 |
| CN103739677A (zh) * | 2013-12-31 | 2014-04-23 | 罗瑞雪 | 一种抑制核因子－κB多肽及其应用 |
| CN103739677B (zh) * | 2013-12-31 | 2015-09-09 | 河北万通金牛药业有限公司 | 一种抑制核因子-κB多肽及其应用 |
| CN105111284A (zh) * | 2015-09-08 | 2015-12-02 | 苏州普罗达生物科技有限公司 | 肿瘤坏死因子抑制多肽及其应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2022133426A (ja) | Ｇｎｒｈアンタゴニストであるデガレリクスを用いる前立腺癌の治療方法 | |
| CN103739670A (zh) | 一种聚乙二醇修饰的抑制肿瘤坏死因子-α多肽及其应用 | |
| WO2013097704A1 (zh) | 多肽在制备治疗或预防类风湿性关节炎药物中的应用 | |
| CN106539814A (zh) | 干扰素基因刺激蛋白（sting）激动剂在抗类风湿性关节炎等疾病中的应用 | |
| CN103285373A (zh) | 肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂制备及其应用 | |
| CN103254291B (zh) | 肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂及其应用 | |
| CN103265619A (zh) | 肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂及其应用 | |
| CN103739669B (zh) | 一种抑制白介素-6多肽及其应用 | |
| CN103211833B (zh) | 淫羊藿苷在制备治疗痛风药物中的应用 | |
| CN103772489B (zh) | 核因子-kb多肽抑制剂5及其应用 | |
| CN103819540B (zh) | 核因子-kb多肽抑制剂及其应用 | |
| CN103772491B (zh) | 核因子-kb多肽抑制剂3及其应用 | |
| CN103739671B (zh) | 一种聚乙二醇修饰的抑制核因子-κB多肽及其应用 | |
| CN103288922A (zh) | 肿瘤坏死因子-α多肽抑制剂及其应用 | |
| CN103288921A (zh) | 血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂及其应用 | |
| CN103739673B (zh) | 一种聚乙二醇修饰的抑制白介素-6多肽及其应用 | |
| CN103772492B (zh) | 核因子-kb多肽抑制剂4及其应用 | |
| CN103739677B (zh) | 一种抑制核因子-κB多肽及其应用 | |
| CN103923180A (zh) | 白介素-6多肽抑制剂及其应用 | |
| CN103923182A (zh) | 白介素-6多肽抑制剂及其应用 | |
| CN103923185A (zh) | 白介素-6多肽抑制剂及其应用 | |
| CN103923183A (zh) | 白介素-6多肽抑制剂及其应用 | |
| CN105061583A (zh) | 外周白介素35多肽及其应用 | |
| CN103254292A (zh) | 血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂及其应用 | |
| CN103751169A (zh) | 3’-甲氧基苯甲基-3,5-二甲氧基-4-（3’-甲氧基苄氧基）苯甲酸酯在制备治疗或预防类风湿关节炎中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20130911 |