CN103275022B

CN103275022B - 1-苄基-1,2,3-三氮唑类化合物及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN103275022B
Application number: CN201310229463.0A
Authority: CN
Inventors: 崔冬梅; 包爱情; 陈颖; 张辰
Original assignee: Zhejiang University of Technology ZJUT
Current assignee: Zhejiang Arthur Pharmaceutical Co ltd
Priority date: 2013-06-08
Filing date: 2013-06-08
Publication date: 2015-08-05
Anticipated expiration: 2033-06-08
Also published as: CN103275022A

Abstract

本发明公开了一种1-苄基-1,2,3-三氮唑类化合物，如式（II）所示，并公开了其制备方法，及其在制备抗胎盘绒毛癌药物中的应用。

Description

1-苄基-1,2,3-三氮唑类化合物及其制备方法和应用

（一）技术领域

本发明涉及一种新的1-苄基-1,2,3-三氮唑类化合物及其制备方法和抗肿瘤的应用。

（二）背景技术

1,2,3-三氮唑类化合物是一类重要的氮杂环化合物，易形成氢键和配位键，能形成多种共价键的相互作用。由于其特殊的结构，因而具有广泛的生物活性，包括抗癌活性，抗菌活性，抗病毒活性，抗HIV活性，抗惊厥等作用，以及有效的抗组织胺活性等。同时，三氮唑类化合物在农药和工业方面都有广泛的应用，可作为除草、杀虫剂和荧光增白剂。因此，制备新颖的1-苄基-1,2,3-三氮唑类化合物并研究其抗肿瘤方面的应用具有重要的意义。

（三）发明内容

本发明提供了一类新的1-苄基-1,2,3-三氮唑类化合物，具体如式（II）所示：

式（II）中，R为3,4-(亚甲二氧基)苯基或苯环上有取代基的取代苯基，所述取代基为C1～C6的烷基或C1～C6的烷氧基，优选R为3,4-(亚甲二氧基)苯基、4-乙氧基苯基、4-正戊基苯基、3,4-二甲氧基苯基或2，3-二甲氧基苯基，更优选R为3,4-二甲氧基苯基或2，3-二甲氧基苯基。

本发明还提供式（II）所示的1-苄基-1,2,3－三氮唑类化合物的制备方法，所述方法为：将式(I)所示的端基炔类化合物与苄基溴、叠氮化钠混合加入溶剂水中，在金属铜的催化作用下，于55～60℃温度下搅拌反应30～40小时，反应结束后，反应液后处理制得式(II)所示的1-苄基-1,2,3-三氮唑类化合物；所述苄基溴、式(I)所示的端基炔类化合物、叠氮化钠的物质的量之比为1：1～1.3：1.9～2.2;

式（I）中，R为3,4-(亚甲二氧基)苯基或苯环上有取代基的取代苯基，所述取代基为C1～C6的烷基或C1～C6的烷氧基；优选R为3,4-(亚甲二氧基)苯基、4-乙氧基苯基、4-正戊基苯基、3,4-二甲氧基苯基或2，3-二甲氧基苯基，更优选R为3,4-二甲氧基苯基或2，3-二甲氧基苯基。

所述金属铜的物质的量用量通常为苄基溴的物质的量的4～6%，优选5%。

所述反应液后处理方法为：反应结束后，反应液用乙酸乙酯萃取、饱和食盐水洗涤，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩后经柱层析分离，以石油醚、乙酸乙酯体积比5:1的混合溶剂为洗脱剂，收集Rf值为0.3～0.35的洗脱液，洗脱液减压蒸馏除去溶剂，干燥制得式（II）所示的1-苄基-1,2,3－三氮唑类化合物。

所述溶剂水的体积用量通常以式(I)所示的端基炔类化合物的质量计为15～30mL/g。

本发明反应的反应式如下：

本发明提供的式(II)所示的1-苄基-1,2,3-三氮唑类化合物具有抗肿瘤活性，可用于制备抗胎盘绒毛癌药物。进一步，本发明实施例数据表明，式（II-3）、式（II-4）所示化合物具有一定的抗人胎盘绒毛癌活性，可用于制备抗胎盘绒毛癌药物。

本发明的有益效果主要体现在：（1）1-苄基-1,2,3-三氮唑类化合物的制备条件温和，操作方便，成本低，有着广泛的工业应用前景。（2）本发明所提供的1-苄基-1,2,3-三氮唑类化合物显示一定的抗人胎盘绒毛癌活性，为新药筛选及开发奠定了基础，具有较好的实用价值。

（四）具体实施方式

下面将通过实施例对本发明作进一步的说明，但本发明的保护范围不限于此。

实施例1：化合物（II-1）的制备

在反应容器中加入苄溴(0.13ml)，叠氮化钠(0.1364g)，对乙氧基苯乙炔(0.2003g)，铜(0.0034g)，在水(4ml)中混合，55℃油浴中搅拌反应30小时；反应结束后反应液用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，饱和食盐水洗涤；合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析分离，以石油醚:乙酸乙酯体积比=5:1的混合溶剂为洗脱剂，收集R_f值0.3～0.35的洗脱液，减压蒸馏，干燥得到目标化合物（II-1）0.2633克，收率为90%。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ7.72(d,J=8.9Hz,2H),7.58(s,1H),7.43-7.36(m,3H),7.33-7.32(m,2H),6.93(d,J=8.9Hz,2H),5.58(s,2H),4.07(q,J=7.0Hz,2H),1.43(t,J=7.0Hz,3H);

实施例2：化合物（II-2）的制备

其它操作同实施例1，只是将对乙氧基苯乙炔换成4-正戊基苯乙炔(0.2017g)，制得目标化合物（II-2）0.1795克，收率为51%。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ7.70(d,J=8.1Hz,2H),7.62(s,1H),7.39-7.35(m,3H),7.30-7.29(m,2H),7.21(d,J=8.1Hz,2H),5.56(s,2H),2.60(t,J=7.6,2H),1.63-1.60(m,2H),1.34-1.30(m,4H),0.88(t,J=6.9Hz,3H);

实施例3：化合物（II-3）的制备

其它操作同实施例1，只是将对乙氧基苯乙炔换成3,4-二甲氧基苯乙炔（0.1986g），制得目标化合物（II-3）0.2580克，收率为84%。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ7.61(s,1H),7.48(s,1H),7.41-7.38(m,3H),7.35-7.30(m,2H),7.25(d,J=8.3Hz,1H),6.89(d,J=8.3Hz,1H),5.59(s,2H),3.96(s,3H),3.91(s,3H);

实施例4：化合物（II-4）的制备

操作同实施例1，只是将对乙氧基苯乙炔换成2,3-二甲氧基苯乙炔（0.2105g），制得目标化合物（II-4）0.2954克，收率为97%。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ8.01(s,1H),7.88(dd,J=8.0,1.4Hz,1H),7.40-7.35(m,3H),7.32-7.30(m,2H),7.16(t,J=8.0Hz,1H),6.90(dd,J=8.0,1.4Hz,1H),5.61(s,2H),3.89(s,3H),3.75(s,3H)

实施例5：化合物（II-5）的制备

操作同实施例1，只是将对乙氧基苯乙炔换成3，4－亚甲二氧基苯乙炔（0.1826g），制得目标化合物（II-4）0.2581克，收率为90%。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ7.57(s,1H),7.41-7.39(m,3H),7.34-7.32(m,3H),7.29(d,J=1.7Hz,1H),6.85(d,J=8.0Hz,1H),6.00(s,2H),5.58(s,2H)

实施例6：抗Bewo人胎盘绒毛癌生物活性测试：

体外抗Bewo人胎盘绒毛癌活性测试方法：MTT法

A原理：细胞通过线粒体水解酶将噻唑兰（MTT）分解为不溶于水的蓝紫色结晶并沉积在细胞中，结晶物能被二甲基亚砜溶解，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，间接反映细胞的增殖情况和数量变化。

B细胞：人胎盘绒毛癌细胞株Bewo（购自中国科学院上海生命科学院细胞库）

C实验步骤：

1）样品的准备：对于可溶样品，每1mg用20μL DMSO溶解，取2uL用1000μL培养液（即步骤2.1中的培养基）稀释，使浓度为100μg/mL，再用培养液连续稀释至使用浓度。

2）细胞的培养

2.1）培养基的配制:每1000mL培养基中含80万单位青霉素，1.0g链霉素，10％灭活胎牛血清。

2.2）细胞的培养：将肿瘤细胞接种于培养基中，置37℃，5％ CO₂培养箱中培养，3～5d传代。

3）测定样品对肿瘤细胞生长的抑制作用

将细胞用EDTA-胰酶消化液消化，并用培养基稀释成1×10⁵/mL，加到96孔细胞培养板中，每孔100uL，置37℃，5％ CO₂培养箱中培养。接种24h后，加入用培养基稀释的样品，每孔100μL，每个浓度加3孔，置37℃，5％ CO₂培养箱中培养，72h后在细胞培养孔中加入5mg/mL的MTT，每孔10μL，置37℃孵育4h，加入DMSO，每孔150μL，用振荡器振荡，使甲臢完全溶解，用酶标仪在570nm波长下比色。以同样条件用不含样品，含同样浓度DMSO的培养基培养的细胞作为对照，计算样品对肿瘤细胞生长的半数致死浓度（IC₅₀），结果如表1所示。

以人胎盘绒毛癌细胞株Bewo肿瘤细胞为模型，以顺铂为阳性对照品，测定了实施例1～5中制备的1-苄基-1,2,3-三氮唑类化合物（II-1）～（II-5）5个样品体外对人胎盘绒毛癌肿瘤细胞生长的抑制作用。结果显示，本实验所测试的样品中，化合物（II-3）、（II-4）对实验所用的Bewo肿瘤细胞有一定的抑制作用（结果详见表1）。

表1各化合物对Bewo的IC₅₀（ug/mL)

实施例	化合物	IC₅₀
			1	（II-1）	>50
2	（II-2）	>50
			3	（II-3）	45.24
4	（II-4）	39.31
			5	（II-5）	>50
6	顺铂	2.75

Claims

1.一种式(II)所示的1-苄基-1,2,3－三氮唑类化合物：

式(II)中，R为3,4-二甲氧基苯基或2，3-二甲氧基苯基。

2.如权利要求1所述的式(II)所示的1-苄基-1,2,3－三氮唑类化合物在制备抗胎盘绒毛癌药物中的应用。