CN103274927A - 一种天然脱落酸的提纯方法 - Google Patents
一种天然脱落酸的提纯方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103274927A CN103274927A CN2013102266217A CN201310226621A CN103274927A CN 103274927 A CN103274927 A CN 103274927A CN 2013102266217 A CN2013102266217 A CN 2013102266217A CN 201310226621 A CN201310226621 A CN 201310226621A CN 103274927 A CN103274927 A CN 103274927A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- abscisic acid
- natural abscisic
- solution
- purification method
- solvent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- JLIDBLDQVAYHNE-YKALOCIXSA-N (+)-Abscisic acid Chemical compound OC(=O)/C=C(/C)\C=C\[C@@]1(O)C(C)=CC(=O)CC1(C)C JLIDBLDQVAYHNE-YKALOCIXSA-N 0.000 title claims abstract description 43
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 27
- 238000000746 purification Methods 0.000 title claims abstract description 23
- FCRACOPGPMPSHN-UHFFFAOYSA-N desoxyabscisic acid Natural products OC(=O)C=C(C)C=CC1C(C)=CC(=O)CC1(C)C FCRACOPGPMPSHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 21
- 239000012043 crude product Substances 0.000 claims abstract description 18
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 14
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 11
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 claims abstract description 9
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000013078 crystal Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims abstract description 5
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 claims abstract 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 35
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 32
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Inorganic materials [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 23
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 5
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical group O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 3
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 claims description 3
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 2
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 2
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 claims description 2
- -1 after dissolving Substances 0.000 claims 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 abstract description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 abstract description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 abstract description 2
- 239000005445 natural material Substances 0.000 abstract 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 17
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 3
- 238000003810 ethyl acetate extraction Methods 0.000 description 2
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 229940088592 immunologic factor Drugs 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 229930004725 sesquiterpene Natural products 0.000 description 1
- 239000001117 sulphuric acid Substances 0.000 description 1
- 235000011149 sulphuric acid Nutrition 0.000 description 1
Landscapes
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
本发明涉及的是一种天然脱落酸的提纯方法，属于天然物质的分离纯化领域。包括以下步骤：取天然脱落酸粗品用溶剂浸泡，然后浓缩，浓缩所得固体用碱液溶解，溶解后溶液用有机溶剂萃取除杂，再进行酸化，酸化后再用有机溶剂萃取，萃取液经减压浓缩，多次重结晶、过滤、洗涤，干燥，得到99%以上的天然脱落酸晶体，收率达80%以上。本方法具有提取效率高、提取物纯度高，并且易于工业化等优点。
Description
技术领域
本发明涉及的是一种天然脱落酸的提纯方法，属于天然物质的分离纯化领域。
背景技术
天然脱落酸（(+)～Abscisic acid, S～ABA〕是一种具有倍半萜羧酸结构的植物天然生长调节物质，是植物体的“抗逆免疫因子”，对农作物的生长发育具有很强的调节活性，能促进果实类、谷类、豆类的成熟发育，能大幅度提高其产量和质量，又能大大增强其耐寒、抗旱和抗盐碱能力，因而在农业及生物领域具有广阔的应用前景。
近二十年来，国内外一直在研究利用微生物发酵法来生产天然脱落酸，例如JP～A～6～247927、 JP～A～6～197775、JP～A～6～133786、JP～A～67180、JP～A～2～10988、JP～A～2～60590、JP～A～63～296696 JP～A～58～51895、CN1182798A、CN102399827A等，生物发酵法降低了天然脱落酸的生产成本，使其工业化成为可能。
然而，如何对发酵得到的天然脱落酸粗品进行提纯却依然困扰着产业发展，要提取并得到高纯度的天然脱落酸耗时费力且收率低下，使得高纯度的天然脱落酸产品价格居高不下，一定程度上限制了天然脱落酸的研究和应用。
发明内容
本发明目的是针对目前天然脱落酸的纯化效率低、能耗大、生产成本高等不足，提供一种天然脱落酸的提纯方法，本发明从低浓度的天然脱落酸粗品中提纯得到高纯度的天然脱落酸产品的方法，具有生产工艺简单、产品纯度和收率高、成本低、易于工业化等特点。
本发明一种天然脱落酸的提纯方法是通过以下技术方案实现：
取天然脱落酸粗品用溶剂浸泡，然后浓缩，浓缩所得固体用碱液溶解，溶解后溶液用有机溶剂萃取除杂，再进行酸化，酸化后再用有机溶剂萃取，萃取液经减压浓缩，多次重结晶、过滤、洗涤，干燥，得到99%以上的白色天然脱落酸晶体，收率达80%以上。
所述的天然脱落酸粗品选用天然脱落酸含量为5%～30%的天然脱落酸粗品，即所用的天然脱落酸粗品纯度为5%～30%。
天然脱落酸粗品用溶剂浸泡，所用的浸泡溶剂为蒸馏水或甲醇或乙醇或二者的混合液。
天然脱落酸粗品用溶剂浸泡，浸泡液温度为20～60℃，浸泡时间为1～5天，提取次数为3～5次。
本发明中浓缩所得固体用碱液溶解，所述碱液为氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液或碳酸氢钠溶液，碱液浓度为5%～20%水溶液，碱化后溶液的pH值为7～10。
本发明中的萃取除杂用萃取剂为乙酸乙酯或二氯甲烷或乙醚。
本发明中的酸化所用的酸为硫酸或盐酸，所用酸的浓度为1mol/L～5mol/L，酸化后溶液pH值为1～5。
本发明中的酸化后所用萃取剂为乙酸乙酯或二氯甲烷或乙醚。
本发明中的重结晶所用溶剂为乙酸乙酯或二氯甲烷或乙醚或甲醇或乙醇或水或两者的混合溶剂，重结晶次数为4～5次。
本发明一种天然脱落酸的提纯方法，是一种从低浓度的天然脱落酸粗品中提纯得到高纯度的天然脱落酸产品的方法，本发明的天然脱落酸的提纯方法，具有生产工艺简单、产品纯度和收率高、成本低、易于工业化等特点。
具体实施方式
以下将结合实施例对本发明作进一步说明：
实施例1、
本发明所述天然脱落酸的提纯方法按以下步骤进行：
（1）取含量为5%的天然脱落酸粗品1kg，用60%的甲醇水溶液2.5L浸泡，浸泡温度为20℃，浸泡时间为三天，反复浸泡三次。
（2）将浸泡液于50℃下减压浓缩，浓缩液可回收套用，得到褐色粘稠状产物。
（3）将褐色粘稠状产物用20%碳酸钠水溶液溶解并调节pH值至9～10。
（4）用乙酸乙酯萃取碱化后水溶液，至乙酸乙酯层为浅黄色止。
（5）将萃取后水溶液用3mol/L盐酸溶液调节pH值至4～5。
（6）酸化后溶液用二氯甲烷萃取，至二氯甲烷层为浅黄色止。
（7）减压浓缩萃取后二氯甲烷层溶液，得深黄色粘稠状产物。
（8）将深黄色粘稠物用乙醇反复重结晶5次，过滤，石油醚洗涤，50℃烘干，得白色天然脱落酸晶体40.5g，收率81%，HPLC检测产品纯度为99.2%。
实施例2、
本发明所述天然脱落酸的提纯方法按以下步骤进行：
（1）取含量为10%的天然脱落酸粗品1kg，用2.5L水浸泡，浸泡温度为60℃，浸泡时间为一天，反复浸泡五次。
（2）将浸泡液于50℃下减压浓缩，得到褐色粘稠状产物。
（3）将褐色粘稠状产物用5%的氢氧化钠水溶液溶解并调节pH值至7～8。
（4）用二氯甲烷萃取碱化后水溶液，至二氯甲烷层为浅黄色止。
（5）将萃取后水溶液用1mol/L盐酸溶液调节pH值至1～2。
（6）酸化后溶液用乙酸乙酯萃取，至乙酸乙酯层为浅黄色止。
（7）减压浓缩萃取后乙酸乙酯层溶液，得深黄色粘稠状产物。
（8）将深黄色粘稠物用50%的甲醇水溶液反复重结晶4次，过滤，石油醚洗涤，50℃烘干，得白色天然脱落酸晶体80g，收率80%，HPLC检测产品纯度为99.0%。
实施例3、
本发明所述天然脱落酸的提纯方法按以下步骤进行：
（1）取含量为30%的天然脱落酸粗品1kg，用70%乙醇水溶液2.5L浸泡，浸泡温度为40℃，浸泡时间为五天，反复浸泡三次。
（2）将浸泡液于50℃下减压浓缩，浓缩液可回收套用，得到褐色粘稠状产物。
（3）将褐色粘稠状产物用10%的碳酸氢钠水溶液溶解并调节pH值至8～9。
（4）用乙醚萃取碱化后水溶液，至乙醚层为浅黄色止。
（5）将萃取后水溶液用5mol/L硫酸溶液调节pH值至2～3。
（6）酸化后溶液用乙醚萃取，至乙醚层为浅黄色止。
（7）减压浓缩萃取后乙醚层溶液，得深黄色粘稠状产物。
（8）将深黄色粘稠物用50%的乙酸乙酯/二氯甲烷溶液反复重结晶5次，过滤，石油醚洗涤，50℃烘干，得白色天然脱落酸晶体255g，收率85%，HPLC检测产品纯度为99.3%。
Claims (9)
1.一种天然脱落酸的提纯方法，其特征在于包括以下步骤：取天然脱落酸粗品用溶剂浸泡，然后浓缩，浓缩所得固体用碱液溶解，溶解后溶液用有机溶剂萃取除杂，再进行酸化，酸化后再用有机溶剂萃取，萃取液经减压浓缩，多次重结晶、过滤、洗涤，干燥，得到99%以上的天然脱落酸晶体，收率达80%以上。
2.根据权利要求1所述的天然脱落酸的提纯方法，其特征在于：所述的天然脱落酸粗品选用天然脱落酸含量为5%～30%的天然脱落酸粗品。
3.根据权利要求1所述的天然脱落酸的提纯方法，其特征在于：所述的天然脱落酸粗品用溶剂浸泡，浸泡溶剂为蒸馏水或甲醇或乙醇或二者的混合液。
4.根据权利要求1或3所述的天然脱落酸的提纯方法，其特征在于：所述的天然脱落酸粗品用溶剂浸泡，浸泡液温度为20～60℃，浸泡时间为1～5天，提取次数为3～5次。
5.根据权利要求1所述的天然脱落酸的提纯方法，其特征在于：浓缩所得固体用碱液溶解，所述碱液为氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液或碳酸氢钠溶液；碱液浓度为5%～20%水溶液；碱化后溶液的pH值为7～10。
6.根据权利要求1所述的天然脱落酸的提纯方法，其特征在于：萃取除杂的萃取剂为乙酸乙酯或二氯甲烷或乙醚。
7.根据权利要求1所述的天然脱落酸的提纯方法，其特征在于：酸化所用的酸为硫酸或盐酸；所用酸的浓度为1mol/L～5mol/L；酸化后溶液pH值为1～5。
8.根据权利要求1所述的天然脱落酸的提纯方法，其特征在于：酸化后所用萃取剂为乙酸乙酯或二氯甲烷或乙醚。
9.根据权利要求1所述的天然脱落酸的提纯方法，其特征在于：重结晶所用溶剂为乙酸乙酯或二氯甲烷或乙醚或甲醇或乙醇或水或两者的混合溶剂，重结晶次数为4～5次。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2013102266217A CN103274927A (zh) | 2013-06-08 | 2013-06-08 | 一种天然脱落酸的提纯方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2013102266217A CN103274927A (zh) | 2013-06-08 | 2013-06-08 | 一种天然脱落酸的提纯方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103274927A true CN103274927A (zh) | 2013-09-04 |
Family
ID=49057581
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2013102266217A Pending CN103274927A (zh) | 2013-06-08 | 2013-06-08 | 一种天然脱落酸的提纯方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103274927A (zh) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105439847A (zh) * | 2015-12-23 | 2016-03-30 | 江西新瑞丰生化有限公司 | 一种天然脱落酸的分离纯化方法 |
| CN105439846A (zh) * | 2015-12-23 | 2016-03-30 | 江西新瑞丰生化有限公司 | 一种天然脱落酸的提纯方法 |
| CN106905142A (zh) * | 2017-04-18 | 2017-06-30 | 四川龙蟒福生科技有限责任公司 | 一种s‑诱抗素的分离纯化方法 |
| CN106974323A (zh) * | 2017-04-13 | 2017-07-25 | 泉州美丽星空健康科技有限公司 | 一种清肺电子烟油及其加工工艺 |
| CN109704950A (zh) * | 2019-01-16 | 2019-05-03 | 徐州工程学院 | 一种3-羟基丙酸的分离提纯方法 |
| CN110156592A (zh) * | 2019-06-12 | 2019-08-23 | 广东广益科技实业有限公司 | 5(6)-癸烯酸的提纯方法 |
| CN114671754A (zh) * | 2022-04-28 | 2022-06-28 | 江西新瑞丰生化股份有限公司 | 一种脱落酸粗品提纯方法 |
| CN116548442A (zh) * | 2023-05-11 | 2023-08-08 | 江西新瑞丰生化股份有限公司 | 一种简单、高效的脱落酸粗品母液的处理方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH06312975A (ja) * | 1993-04-30 | 1994-11-08 | Toray Ind Inc | アブシジン酸の単離方法 |
| CN1944385A (zh) * | 2005-10-08 | 2007-04-11 | 中国科学院成都生物研究所 | 用离子交换和反相色谱分离提取发酵液中脱落酸的方法 |
-
2013
- 2013-06-08 CN CN2013102266217A patent/CN103274927A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH06312975A (ja) * | 1993-04-30 | 1994-11-08 | Toray Ind Inc | アブシジン酸の単離方法 |
| CN1944385A (zh) * | 2005-10-08 | 2007-04-11 | 中国科学院成都生物研究所 | 用离子交换和反相色谱分离提取发酵液中脱落酸的方法 |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105439847A (zh) * | 2015-12-23 | 2016-03-30 | 江西新瑞丰生化有限公司 | 一种天然脱落酸的分离纯化方法 |
| CN105439846A (zh) * | 2015-12-23 | 2016-03-30 | 江西新瑞丰生化有限公司 | 一种天然脱落酸的提纯方法 |
| CN106974323A (zh) * | 2017-04-13 | 2017-07-25 | 泉州美丽星空健康科技有限公司 | 一种清肺电子烟油及其加工工艺 |
| CN106905142A (zh) * | 2017-04-18 | 2017-06-30 | 四川龙蟒福生科技有限责任公司 | 一种s‑诱抗素的分离纯化方法 |
| CN109704950A (zh) * | 2019-01-16 | 2019-05-03 | 徐州工程学院 | 一种3-羟基丙酸的分离提纯方法 |
| CN110156592A (zh) * | 2019-06-12 | 2019-08-23 | 广东广益科技实业有限公司 | 5(6)-癸烯酸的提纯方法 |
| CN114671754A (zh) * | 2022-04-28 | 2022-06-28 | 江西新瑞丰生化股份有限公司 | 一种脱落酸粗品提纯方法 |
| CN116548442A (zh) * | 2023-05-11 | 2023-08-08 | 江西新瑞丰生化股份有限公司 | 一种简单、高效的脱落酸粗品母液的处理方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103274927A (zh) | 一种天然脱落酸的提纯方法 | |
| CN102399146B (zh) | 一种制备高纯度绿原酸的方法 | |
| CN102408314B (zh) | 一种制备高纯度厚朴酚与和厚朴酚的方法 | |
| CN102002082A (zh) | 一种黄芩苷的制备方法 | |
| CN102617668A (zh) | 一种高纯度阿维菌素精粉生产工艺 | |
| CN102942547B (zh) | 一种ga4和/或ga7的分离纯化方法 | |
| CN103739638B (zh) | 一种微生物发酵纯化茶皂素的方法 | |
| CN111269171A (zh) | 一种高纯度1-脱氧野尻霉素的制备方法 | |
| CN103073561B (zh) | 一种生物酶-渗漉法提取青蒿素的工艺 | |
| CN104974124A (zh) | 一种从兴安落叶松树皮中提取原花青素的方法 | |
| CN103709021B (zh) | 一种香兰素的提取方法 | |
| CN103665922A (zh) | 一种花青素≥25%的蓝莓提取物的生产工艺 | |
| CN102206244B (zh) | 从梧桐树科树皮中提取桦木酸的方法 | |
| CN102660619A (zh) | 一种用黄姜清洁生产皂素的方法 | |
| CN105037133A (zh) | 一种从蒜头果中提取神经酸的方法 | |
| CN114751955A (zh) | 一种双相水解法制备皂苷元的方法 | |
| CN101962386A (zh) | 生物复合酶法提取青蒿素的工艺 | |
| CN105439846A (zh) | 一种天然脱落酸的提纯方法 | |
| WO2021237841A1 (zh) | 一种有机膜在大麻提取中的应用 | |
| CN102285976A (zh) | 从竹叶黄酮中提取异荭草素的方法 | |
| CN114933529B (zh) | 一种从元宝枫种仁中分离制备高纯神经酸乙酯的方法 | |
| CN103641870B (zh) | 一种从芦笋中提取芦丁的方法 | |
| CN103483358B (zh) | 一种超临界co2萃取印楝生产印楝原药的方法 | |
| CN105343130B (zh) | 一种利用膜分离技术将毛蜂胶分离纯化为黄蜂胶的方法 | |
| CN104072352A (zh) | 一种利用植物破碎提取法提取生姜中姜黄素的新方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20130904 |