CN103222996A - 两色金鸡菊精制提取物及其医药用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及医药学领域，特别是涉及一种两色金鸡菊精提物及其医药用途。所述两色金鸡菊提取物可由如下方法制得：步骤一，取两色金鸡菊头状花序，用水蒸汽蒸馏收集挥发油或芳香水，备用；步骤二，将上述原料用水提取，过滤，得提取液A，备用；步骤三，将上述过滤后的残渣再用水提取，过滤，得提取液B，备用；步骤四，取经步骤一收集的挥发油或芳香水与上述提取液A和B混合，减压浓缩，冷却，边搅拌边加入乙醇，静置沉淀，过滤，滤液回收乙醇，得精制液；步骤五，将上述精制液过860021型大孔吸附树脂，分别用30%乙醇和50%乙醇进行梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥。本发明的两色金鸡菊提取物可用于降血脂。
Description
技术领域
本发明涉及中药领域，特别是涉及一种中药提取物及其医药用途。
背景技术
两色金鸡菊（Corepsis tintoria Nutt）又名雪菊，系菊科（compositae）金鸡菊属（Coreopsis）的干燥头状花序，单瓣、重瓣或半重瓣，舌状花黄色或金黄色，花期6～9月。两色金鸡菊属于北温带植物，原产于北美，弗罗里达州及墨西哥州，我国1936年作为观赏植物引种子至庐山、南岳等地栽培，目前各地除供观赏外，还用全草入药，而且从花中提取的食用色素，具有清热解毒和降压之功效。新疆金鸡菊广泛分布于和田地区海拔高3000米左右的昆仑山区，有较丰富的野生资源，在民间经常将其干花用来泡茶。
中国发明专利申请CN102641317A公开了一种具有降血糖作用的金鸡菊水提物。
发明内容
本发明的目的旨在提供一种两色金鸡菊提取物及其医药用途。
具体地说，本发明提供了一种两色金鸡菊提取物，其可由如下方法制得：
步骤一，取两色金鸡菊头状花序，用水蒸汽蒸馏收集挥发油或芳香水，备用；
步骤二，将上述原料用水提取，过滤，得提取液A，备用；
步骤三，将上述过滤后的残渣再用水提取，过滤，得提取液B，备用；
步骤四，取经步骤一收集的挥发油或芳香水与上述提取液A和B混合，减压浓缩，冷却，边搅拌边加入乙醇，静置沉淀，过滤，滤液回收乙醇，得精制液；
步骤五，将上述精制液过860021型大孔吸附树脂，分别用30%乙醇和50%乙醇进行梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥。
在一优选例中，所述步骤一为：取两色金鸡菊头状花序，粉碎，加8～15倍量水，采用水蒸汽蒸馏收集挥发油或芳香水，备用。
在另一优选例中，所述步骤二为：将上述原料用8～15倍量水提取30～150min，温度为80～100℃，过滤，得提取液A；备用；
在另一优选例中，所述步骤三为：将上述过滤后的残渣再用8～15倍量水提取30～150min，温度为80～100℃，过滤，得提取液B，备用；
在另一优选例中，所述步骤四为：取经步骤一收集的挥发油或芳香水与上述提取液A和B混合，减压浓缩至比重为1.15～1.25，冷却至20～30℃，边搅拌边加入90%乙醇至醇沉液的含醇量为70％～75％，静置沉淀，过滤，滤液回收乙醇，得精制液。
本发明的第二方面是提供了上述两色金鸡菊提取物在制备降血脂的药物中的应用。
本发明还提供了一种药物组合物，它含有上述两色金鸡菊提取物。
本发明还提供了一种保健品，它含有上述两色金鸡菊提取物。
本发明各个方面的细节将在随后的章节中得以详尽描述。通过下文以及权利要求的描述，本发明的特点、目的和优势将更为明显。
附图说明
图1本发明的两色金鸡菊30%乙醇洗脱部位在280nm波长下的HPLC图谱。
图2本发明的两色金鸡菊50%乙醇洗脱部位在280nm波长下的HPLC图谱。
具体实施方式
本发明的问世部分是基于这样一个意外发现：两色金鸡菊的提取物在动物试验中可显著降低高脂血症小鼠血清胆固醇（CHO）和低密度脂蛋白（LDL）的水平，进而降低其血脂，因而其有望被开发成为一种降血脂的药物和/或保健品。
进而，本发明提供了一种两色金鸡菊提取物，其可由如下方法制得：
步骤一，取两色金鸡菊头状花序，用水蒸汽蒸馏收集挥发油或芳香水，备用；
步骤二，将上述原料用水提取，过滤，得提取液A，备用；
步骤三，将上述过滤后的残渣再用水提取，过滤，得提取液B，备用；
步骤四，取经步骤一收集的挥发油或芳香水与上述提取液A和B混合，减压浓缩，冷却，边搅拌边加入乙醇，静置沉淀，过滤，滤液回收乙醇，得精制液；
步骤五，将上述精制液过860021型大孔吸附树脂，分别用30%乙醇和50%乙醇进行梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥。
较优选地，所述步骤一为：取两色金鸡菊头状花序，粉碎，加8～15倍量水，采用水蒸汽蒸馏收集挥发油或芳香水，备用。
较优选地，所述步骤二为：将上述原料用8～15倍量水提取30～150min，温度为80～100℃，过滤，得提取液A；备用；
较优选地，所述步骤三为：将上述过滤后的残渣再用8～15倍量水提取30～150min，温度为80～100℃，过滤，得提取液B，备用；
较优选地，所述步骤四为：取经步骤一收集的挥发油或芳香水与上述提取液A和B混合，减压浓缩至比重为1.15～1.25，冷却至20～30℃，边搅拌边加入90%乙醇至醇沉液的含醇量为70％～75％，静置沉淀，过滤，滤液回收乙醇，得精制液。
本发明还提供了上述两色金鸡菊提取物在制备降血脂的药物中的应用。
本发明还提供了一种药物组合物，它含有上述两色金鸡菊提取物。
本发明还提供了一种保健品，它含有上述两色金鸡菊提取物。
本发明的两色金鸡菊提取物可以单独使用或者进一步加入其他药用辅料制备成临床上使用的各种药物剂型，例如添加稀释剂、崩解剂、粘合剂、润湿剂、润滑剂、亲水性高分子材料、药用油、矫味剂和缓释材料中的一种或多种，制备成口服液、片剂、微丸、颗粒剂、胶囊、软胶囊、滴丸、缓释片、缓释微丸或缓释胶囊等剂型。其中稀释剂选自淀粉、预胶化淀粉、糊精、糖粉、乳糖、甘露醇、微晶纤维素、硫酸钙中的一种或多种；崩解剂选自交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、淀粉、羧甲基淀粉钠、羧丙基淀粉、低取代羟丙基纤维素、海藻酸、皂土、胶体硅酸镁铝中的一种或多种；粘合剂选自羟丙甲纤维素、聚维酮、淀粉浆、糊精、糖浆、胶浆、乙基纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠中的一种或多种；亲水性高分子材料选自聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、泊洛沙姆188、聚氧乙烯单硬脂酸酯（S-40）、硬脂酸钠、甘油明胶、尿素中的一种或多种；药用油选自大豆油、中链甘油三酸酯、聚乙二醇-400、甘油、丙二醇、植物油、芳香油中的一种或多种；矫味剂选自糖粉、阿斯巴甜、甘油、山梨醇、甘露醇、糖精钠中的一种或多种；润湿剂选自水和/或乙醇；润滑剂选自滑石粉、硬脂酸镁、微粉硅胶、氢化植物油、十二烷基硫酸镁、十二烷基硫酸钠、硬脂酰富马酸钠中的一种或多种；缓释材料选自羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、羧乙基纤维素、聚氯乙烯、单硬脂酸甘油脂、醋酸乙烯、卡波姆、丙烯酸树脂、阿拉伯胶、黄原胶中的一种或多种。
含有本发明的两色金鸡菊提取物的制剂可按本领域常规方法制备，例如可将药用辅料、两色金鸡菊提取物分别粉碎、过筛后，混合均匀即得。含有本发明的两色金鸡菊提取物的制剂可以通过肠道或非肠道或局部途径给药。口服（肠道）制剂包括片剂、颗粒剂、悬浮液、胶囊、溶液等，非肠道给药制剂包括注射液等。局部给药制剂包括霜剂、贴剂、软膏剂、喷雾剂等。
本发明的两色金鸡菊提取物及其制剂的给药途径可以为口服、舌下、经皮、经肌肉或皮下、皮肤粘膜、静脉、尿道、阴道等。
本发明的两色金鸡菊提取物及其制剂的用量可根据给药途径、患者的年龄和体重、病症严重程度的不同而不同，其日剂量可以是0.001～100mg/kg，可以一次或多次给药。
除了制成药剂之外，亦可在本发明的两色金鸡菊提取物中加入抗氧化剂、色素、酶制剂等各种添加剂，按本领域的常规方法制成保健品。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例、或份数按重量计。
除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
本发明提到的上述特征，或实施例提到的特征可以任意组合。本专利说明书所揭示的所有特征可与任何组合物形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例子。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例、或份数按重量计。
除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
本发明提到的上述特征，或实施例提到的特征可以任意组合。本专利说明书所揭示的所有特征可与任何组合物形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例子。
一、制备两色金鸡菊提取物
实施例1
两色金鸡菊头状花序100g经粉碎，加8倍量水，采用水蒸汽蒸馏萃取收集挥发油或芳香水，备用。将上述原料加8倍量水浸泡，100℃水煮两次，每次60min，过滤，合并两次滤液，得提取液，备用。
取上述挥发油或芳香水与上述提取液混合，过滤，滤液减压浓缩至比重为1.2，冷却至20℃，边搅拌边加入90%乙醇至醇沉液的含醇量为70％，静置沉淀，过滤，滤液回收乙醇，得精制液。
将上述精制液过860021型大孔吸附树脂，分别用30%乙醇和50%乙醇进行梯度洗脱，收集各洗脱液，经旋转蒸发仪浓缩，恒温干燥箱干燥，得到棕色粉末，其收率分别为：30%醇洗脱物（5.545%）、50%醇洗脱物（1.428%）。
对上述两种醇洗脱物进行HPLC分析。
1、分析条件
色谱柱：Diamonsil C-18，5μm，4.6×250mm；检测波长：280nm；柱温：35℃；流速：1.0ml/min。
2、流动相条件
表1流动相梯度洗脱表
3、HPLC图谱（见图1和图2）。
实施例2
两色金鸡菊头状花序100g经粉碎，加12倍量水，采用水蒸汽蒸馏萃取收集挥发油或芳香水，备用。将上述原料加12倍量水浸泡，90℃水煮两次，每次30min，过滤，合并两次滤液，得提取液，备用。
取上述挥发油或芳香水与上述提取液混合，过滤，滤液减压浓缩至比重为1.1，冷却至20℃，边搅拌边加入90%乙醇至醇沉液的含醇量为75％，静置沉淀，过滤，滤液回收乙醇，得精制液。
将上述精制液过860021型大孔吸附树脂，分别用30%乙醇和50%乙醇进行梯度洗脱，收集各洗脱液，经旋转蒸发仪浓缩，恒温干燥箱干燥，得到棕色粉末。
实施例3
两色金鸡菊头状花序100g经粉碎，加15倍量水，采用水蒸汽蒸馏萃取收集挥发油或芳香水两次，合并两次收集的挥发油及芳香水，备用。将上述原料加15倍量水浸泡，90℃水煮两次，每次90min，过滤，合并两次滤液，得提取液，备用。
取上述挥发油或芳香水与上述提取液混合，过滤，滤液减压浓缩至比重为1.15，冷却至30℃，边搅拌边加入90%乙醇至醇沉液的含醇量为75％，静置沉淀，过滤，滤液回收乙醇，得精制液。
将上述精制液过860021型大孔吸附树脂，分别用30%乙醇和50%乙醇进行梯度洗脱，收集各洗脱液，经旋转蒸发仪浓缩，恒温干燥箱干燥，得到棕色粉末。
实施例4
两色金鸡菊头状花序100g经粉碎，加10倍量水，采用水蒸汽蒸馏萃取收集挥发油或芳香水，备用。将上述原料加10倍量水浸泡，80℃水煮两次，每次150min，过滤，合并两次滤液，得提取液，备用。
取上述挥发油或芳香水与上述提取液混合，过滤，滤液减压浓缩至比重为1.25，冷却至25℃，边搅拌边加入90%乙醇至醇沉液的含醇量为70％，静置沉淀，过滤，滤液回收乙醇，得精制液。
将上述精制液过860021型大孔吸附树脂，分别用30%乙醇和50%乙醇进行梯度洗脱，收集各洗脱液，经旋转蒸发仪浓缩，恒温干燥箱干燥，得到棕色粉末。
二、验证两色金鸡菊提取物的降脂活性
1、实验动物：雄性ICR小鼠，体重29±10g。
2、给药剂量：本发明的两色金鸡菊提取物（按实施例1制备）分为高、低剂量两组，高剂量组为相当于生药10g/kg，低剂量组为相当于生药5g/kg，按0.5ml/30g灌胃给药。阳性药为辛伐他丁，给药量为10mg/kg。
3、乳剂配制：将猪油80g置于500ml烧杯中并在电炉上加热融化，加入胆固醇40g并使之溶化，再加入胆酸钠8g和丙基硫氧嘧啶片4g，充分搅匀，然后加入适量的蒸馏水及吐温-80、丙二醇各80ml，不断搅匀，再加双蒸水至400ml并充分混匀，即成100g/l胆固醇、200g/l猪油、20g/l胆酸钠和10g/l丙基硫氧嘧啶的脂肪乳剂。放入冰箱保存，用时需加热融化。
4、实验方法：除正常对照组外，其余各组每天下午灌服乳剂（0.5ml），1h后口服给药，连续14d，最后一天眼眶动脉采血。离心取血清后，测高脂血症小鼠血清胆固醇(CHO)、低密度脂蛋白（LDL）两个生化指标，结果见表2。
表2两色金鸡菊提取物对高血脂小鼠CHO和LDL的影响
##p<0.01vs正常组；*p<0.05vs模型组；**p<0.01vs模型组
结果显示：模型组与空白组比较，大鼠体内CHO和LDL含量具有极显著性升高，证明实验造模成功。辛伐他丁给药组与模型组比较，小鼠体内CHO和LDL含量具有极显著性降低，证明实验方法及给药方式正确，本发明的两色金鸡菊提取物与模型组比较，其能够显著地降低小鼠体内CHO和LDL的含量，且给药后动物状态良好。
本发明所涉及的多个方面已做如上阐述。然而，应理解的是，在不偏离本发明精神之前提下，本领域专业人员可对其进行等同改变和修饰，所述改变和修饰同样落入本申请所附权利要求的覆盖范围。
Claims (5)
1.一种两色金鸡菊提取物，其特征在于，其可由如下方法制得：
步骤一，取两色金鸡菊头状花序，用水蒸汽蒸馏收集挥发油或芳香水，备用；
步骤二，将上述原料用水提取，过滤，得提取液A，备用；
步骤三，将上述过滤后的残渣再用水提取，过滤，得提取液B，备用；
步骤四，取经步骤一收集的挥发油或芳香水与上述提取液A和B混合，减压浓缩，冷却，边搅拌边加入乙醇，静置沉淀，过滤，滤液回收乙醇，得精制液；
步骤五，将上述精制液过860021型大孔吸附树脂，分别用30%乙醇和50%乙醇进行梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥。
2.根据权利要求1所述的两色金鸡菊提取物，其特征在于，
所述步骤一为：取两色金鸡菊头状花序，粉碎，加8～15倍量水，采用水蒸汽蒸馏收集挥发油或芳香水，备用；
所述步骤二为：将上述原料用8～15倍量水提取30～150min，温度为80～100℃，过滤，得提取液A；备用；
所述步骤三为：将上述过滤后的残渣再用8～15倍量水提取30～150min，温度为80～100℃，过滤，得提取液B，备用；
所述步骤四为：取经步骤一收集的挥发油或芳香水与上述提取液A和B混合，减压浓缩至比重为1.15～1.25，冷却至20～30℃，边搅拌边加入90%乙醇至醇沉液的含醇量为70％～75％，静置沉淀，过滤，滤液回收乙醇，得精制液。
3.权利要求1或2所述的两色金鸡菊提取物的应用，其特征在于，用于制备降血脂的药物。
4.一种药物组合物，其特征在于，它含有如权利要求1所述的两色金鸡菊提取物。
5.一种保健品，其特征在于，它含有如权利要求1所述的两色金鸡菊提取物。
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