CN103142461B - 一种阴道用凝胶剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及医药领域，公开了一种阴道用凝胶剂及其制备方法。本发明所述凝胶剂由活性成分西多福韦与药学上适用的载体包括卡波姆，乙二胺四乙酸二钠，氢氧化钠丙三醇，苯甲醇，聚乙二醇400，吐温‑80和水制成。本发明还提供所述凝胶剂用于制备治疗阴道人乳头瘤病毒或疱疹病毒感染的药物的应用。本发明所述凝胶剂经加速稳定性试验、长期稳定性试验和影响因素试验显示其性质稳定。本发明所述西多福韦阴道凝胶剂插入给药后用于治疗HPV或HSV感染，具有良好的临床应用前景。

Description

一种阴道用凝胶剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及医药领域，特别涉及一种阴道用凝胶剂及其制备方法。

背景技术

西多福韦(cidofovir)为无环核苷磷酯衍生物，是一种广谱抗DNA 病毒药物。研究表明其抗病毒作用机理为抑制病毒DNA聚合酶，在细胞胸苷激酶的作用下转化为活性代谢物单磷酸酯、二磷酸酯和其他的磷酸胆碱的加成物，西多福韦二磷酸酯通过抑制DNA聚合酶，竞争性地抑制脱氧胞嘧啶核苷-5-三磷酸酯整合入病毒的DNA，减缓DNA的合成，并使病毒DNA失去稳定性，从而抑制病毒的复制，而发挥抗病毒作用。

目前国外批准的西多福韦临床适应症主要用于治疗艾滋病患者巨细胞病毒(CMV)性视网膜炎。西多福韦进入CMV感染的细胞后，通过二步磷酸化，转化为有活性的二磷酸西多福韦。它与脱氧核苷酸 (dNTP)类似，可掺入到延长的CMV DNA链，作为CMV DNA聚合酶的竞争性抑制剂阻止病毒DNA的进一步延长。如果出现两个连续的二磷酸西多福韦掺入，则会引起病毒DNA合成的完全终止。另外，掺入DNA链的二磷酸西多福韦不能被病毒DNA聚合酶的3′到5′端核酸外切酶活性所切除，故能产生持久的抗病毒效应，同时，由于它的代谢半衰期很长，西多福韦被细胞摄取后在细胞内形成HPMPCp、 HPMPCpp和HPMPCp－胆碱，特别是HPMPCp－胆碱可作为西多福韦在细胞中的储库，它在细胞中的半衰期特别长(48h)。由于HPMPC 分子中磷酸基团的存在，使修复酶极难切除西多福韦。

近年来西多福韦临床适用广泛，在治疗临床多种DNA病毒感染、肿瘤及皮肤病方面均取得了不同程度的疗效。

宫颈癌在女性肿瘤中位居第二，占癌症患者总数的15％。每年约有370000个新发病例，约200000人死亡。由于经济水平低下以及缺乏宫颈肿瘤普查手段等因素，80％的新发病例发生在发展中国家。我国宫颈癌的发生率和死亡率约占全世界的1/3。现已明确高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染是宫颈癌的根本致病因素，大多数宫颈上皮内瘤样病变(CIN)伴有HPV感染，90％宫颈癌标本可以检测出HPV DNA。我国宫颈癌高发区筛查资料也表明，几乎所有CINⅢ和宫颈癌患者 HPV均为阳性。由于HPV感染率仍在上升，宫颈癌已被认为是性传播性病原体所引起的全球流行最广泛的疾病之一。目前，还没有有效的治疗宫颈高危型HPV感染药物，国际上研制的HPV疫苗，也刚刚上市，可给年轻妇女带来福音。但是，对于已经感染的妇女唯一的方法是药物治疗。

西多福韦的抗人乳头瘤病毒(HPV)活性已为多个实验与临床研究所证实。研究显示，HPV感染细胞经西多福韦处理后细胞增殖明显受抑，细胞周期停滞于S期，提示其DNA合成被阻断；而未感染HPV的角质形成细胞则无改变。进一步的研究发现，西多福韦可以时间和浓度依赖性方式诱导HPV阳性细胞发生DNA碎裂和Caspase-3蛋白酶活化，并伴有细胞内p53蛋白、pRb蛋白与细胞周期素依赖激酶抑制因子 p21/WAF-1等水平的增高。西多福韦有望成为HPV宫颈感染防治药物。

发明内容

本发明要解决的技术问题为提供一种适用于治疗HPV或HSV病毒感染的阴道用凝胶剂，所述凝胶剂可阴道给药，大大减少药物在肾的蓄积，且药效学明显提高。

本发明提供的阴道用凝胶剂，由活性成分西多福韦和药学上适用的载体组成，药学上适用的载体包括卡波姆，乙二胺四乙酸二钠，氢氧化钠丙三醇，苯甲醇，聚乙二醇400，吐温-80和水。

西多福韦为白色或类白色结晶性粉末，无臭。熔点为250.27℃(分解)，紫外吸收系数(E1cm％)为463.62，为手性结构药物，其对映体含量小于3％，比旋度为-93°；在0.1mol/L氢氧化钠溶液中溶解；在水和0.1mol/L盐酸中微溶；在甲醇和乙腈中几乎不溶，在pH8-10范围内的水溶液中稳定，在酸性水溶液中易降解。其结构式如下：

作为优选，西多福韦含量为2-30g，其剂黏度为5～80(Pa·s)。

西多福韦的理化特性和生物学特性以及临床应用表明其适合制备水溶性凝胶剂。形成凝胶的亲水性聚合物常用来制备无脂性的半固体制剂，一些合成的聚合物凝胶如泊洛沙姆、卡波姆凝胶，具有高度透明，其黏度受pH和离子强度的影响，卡波姆934和卡波姆940在制剂生产中应用普遍，卡波姆(carbomer，Cb)是丙烯酸与烷基蔗糖交联而成的一旋丙烯酸聚合物，是目前应用较广泛的一种高分子物质。Cb易溶于水形成pH值为3左右的酸性胶体溶液，加入碱可中和成透明、稠厚的凝胶，对人安全，无刺激性、过敏性或变态反应，且与皮肤有良好耦合性的基质。采用适宜的pH值和浓度，对眼、鼻黏膜等均无刺激性。以卡波姆为基质的凝胶剂有较好的流变学特性，有塑性流动，且黏度稳定，释药快、易涂展、无油腻性、对皮肤和黏膜无刺激性、药膜的附着性和均匀性好、易洗脱、不污染衣物等优点。

乙二胺四乙酸二钠为常用的络合剂，在本发明所述阴道凝胶剂中作为抗氧剂和稳定剂。丙三醇是常用药用辅料，性质稳定，作保湿剂和渗透剂。

聚乙二醇400：常用辅料，性质稳定，用作水凝胶剂的稀释剂、渗透剂和释放促进剂。

苯甲醇为常用防腐剂；吐温-80为非离子表面活性剂，在本发明所述凝胶剂中作稳定剂，增加释药性；氢氧化钠用作pH调节剂和增稠剂。

经比较以卡波姆基质的凝胶在性状、稳定性方面都优于以羧甲基纤维素钠和羟乙基纤维素等半合成纤维素为凝胶基质的处方，以卡波姆为基质的凝胶剂有较好的流变学特性，凝胶会有塑性流动，且黏度稳定，释药快、易涂展、无油腻性、对皮肤和黏膜无刺激性、药膜的附着性和均匀性好、易洗脱、不污染衣物等优点。因此以卡波姆为基质进行处方的优化，同时，考察了pH值对凝胶剂稳定性的影响。结果表明，pH值越大，降解产物越少，说明药物的稳定性与pH值成反比。文献报道，西多福韦水溶液最稳定pH为8～10。因此，从凝胶剂成型工艺、黏度、延展性、体外释放度、相容性和药物顺应性等多因素考虑，确定西多福韦凝胶剂的pH值为6.0～8.0。

在具体实施方式中，本发明提供的阴道用凝胶剂组成为：

西多福韦1－50g，卡波姆5-20g，乙二胺四乙酸二钠0.1-0.5g，氢氧化钠0.6-30g，丙三醇50-200g，苯甲醇5-20g，聚乙二醇400 50-200g，吐温-80 1-5g，余量为水，制成1000g凝胶。

作为优选，本发明所述西多福韦凝胶剂组成为：

西多福韦2-30g、卡波姆8-15g、乙二胺四乙酸二钠0.2g、氢氧化钠1.2-12.0g、丙三醇100g、苯甲醇10.0g、聚乙二醇400 50-200g、吐温-80 2.0g，余量为水，制成1000g凝胶。

本发明所述西多福韦凝胶剂规格4g:0.004-0.12g，根据一般原则确定的含量限度为：本品含西多福韦(C₈H₁₄N₃O₆P)为标示量的 90.0-110.0％；本品性状稳定，无色透明半固体状物；每支制剂重量为 4g，黏度为50～80(Pa·s)，水溶液的pH值在6.0～8.0。

通过加速稳定性试验、长期稳定性试验和影响因素试验表明，所述西多福韦的阴道凝胶剂性质稳定。动物黏膜刺激性和过敏性研究表明本发明所述西多福韦水凝胶剂具备临床可用的生物学特性。

本发明还提供所述凝胶剂用于制备治疗阴道人乳头瘤病毒或疱疹病毒感染的药物的应用。

本发明所述西多福韦的阴道凝胶剂具有如下特点：生物粘附性(顺药性)：延长药物作用时间，起到缓释制剂的效果；良好的生物相容性；良好扩散性，药物可粘附在阴道粘膜上，从凝胶缓慢扩散到粘膜，从而发挥治疗作用；酸稳定性，体温非液化，润滑性，无油脂和无刺激性。

本发明还提供所述阴道凝胶剂的制备方法，包含以下步骤：

步骤1：将处方量的乙二胺四乙酸二钠、丙三醇溶于水中，加入处方量卡波姆细粉均匀撒在溶液表面上，浸泡使卡波姆充分浸润，加入氢氧化钠溶液，充分搅拌均匀，得到pH调至6-8卡波姆胶液；

步骤2：将处方量的苯甲醇和吐温-80与聚乙二醇400混合后加入步骤1制备的卡波姆胶液中搅拌均匀，加水充分搅拌使混匀，离心脱去气泡，得空白凝胶基质；

步骤3：将西多福韦过筛后用水稀释，再加入5％的氢氧化钠溶液使西多福韦溶液的pH调至6-8，经微孔滤膜过滤除菌后加到步骤2制备的空白凝胶基质中，用水补足至1000g，搅拌均匀，得到西多福韦凝胶剂。

本发明所述西多福韦阴道凝胶剂插入给药后生物利用度低，进入体循环较少，对全身系统影响较小，药物在肾组织中浓度与静脉注射给药相比，大大降低，因此可以减少药物在肾的蓄积。药效学试验表明0.2％、0.5％和1％的CDV凝胶剂对HSV-2感染小鼠阴道炎死亡保护率、平均生活日与病毒对照组和赋形剂对照组相比均具有可重复的统计显著性，均可显著降低HSV-2感染小鼠阴道病毒载量，效果优于阳性对照药3％阿昔洛韦软膏，具有良好的临床应用前景。

附图说明

图1示不同pH的原料药室温10天杂质的变化；

图2示不同pH的凝胶制剂高温试验杂质的变化；

图3为注射及阴道分别给予西多福韦注射液及凝胶家兔肾组织药物浓度-时间图；

图4为阴道给予1％西多福韦凝胶家兔肾、子宫组织及血浆药物浓度-时间图。

具体实施方式

本发明公开了一种阴道用凝胶剂及其制备方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的产品、方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面结合具体实施例对本发明作进一步的详细说明。

实施例1：本发明所述西多福韦凝胶剂处方确定

1、目前常用凝胶基质特点

1.1以合成聚集物作为凝胶基质

聚丙烯酰胺(PAAm)以及聚乙烯醇也常常作为凝胶基质，是一种亲水性聚合物，经物理老化后黏性下降。

1.2以半合成聚合物—纤维素衍生物作为凝胶基质：

羧甲基纤维素钠对酸稳定，比较适合制备阴道凝胶剂，但是容易滋生细菌；羟丙基纤维素水溶液对酸不稳定易发生水解不适合阴道用药，也可发生光降解和生物降解；羟乙基纤维素作为凝胶基质，相对稳定，文献报道了以羟乙基纤维素作为凝胶基质西多福韦制剂，其处方为1％(w/w)cidofovir作为活性治疗剂，20％(w/w)丙二醇，2％(w/w) 羟乙基纤维素，0.18％尼伯金甲酯，0.02％尼伯金丙酯和0.02％乙二胺四乙酸二钠。

1.3多糖为凝胶基质：

常用的多糖有海藻酸盐、果胶、透明质酸和淀粉等，各种多糖凝胶剂及其用途如表1所述。

表1多糖为凝胶基质的凝胶

2、西多福韦凝胶剂处方中凝胶基质筛选

在参考文献的基础上根据制剂的技术领域，首先对凝胶基质进行筛选，根据凝胶基质的特性和给药途径，选用卡波姆，羧甲基纤维素钠和羟乙基纤维素(纤维素类)较适合作为阴道给药西多福韦凝胶基质，设定他们为处方中的凝胶基质，以药物浓度1％进行了处方设计，筛选了2类处方，用相同的评价指标，综合评价各处方和各制剂工艺的优劣，筛选出适合工业生产的处方和工艺作为基本处方后进行优化。

评价指标采用外观、粘性、延展性、高温及低温稳定性、冻融稳定性、离心稳定性为考察指标进行综合评价，筛选最优基质处方

参照国内外凝胶产品，经实验研究所设计2类凝胶基质处方如下: 2-1、以纤维素衍生物作为凝胶基质的凝胶剂

处方一(文献处方)

羟乙基纤维素为凝胶基质按上述处方制备西多福韦凝胶剂，为半透明凝胶，粘性和延展性较卡波姆为凝胶基质制备的西多福韦凝胶剂差，固体防腐剂的溶解性差，且在-15℃低温稳定性考察有药物析出现象。

处方二(改进处方)

在文献处方的基础上对羟乙基纤维素为凝胶基质进行改进，制备了西多福韦凝胶剂，固体防腐剂改为液体防腐剂，并提高了处方药物的pH值，经离心、高温和冻融试验，符合凝胶剂要求。

处方三

羧甲基纤维素钠为凝胶基质按上述处方制备西多福韦凝胶剂，为半透明淡黄色凝胶，粘性和延展性较卡波姆为凝胶基制备西多福韦凝胶剂差，且有细微颗粒状纤维。

2-2、以卡波姆为凝胶基质的凝胶剂

处方四(US2003007281A1公开处方)

美国专利US2003007281A1在实施例中公开了西多福韦凝胶制备工艺如下：

将卡波姆934P和乙二胺四乙酸二钠加入到225mL水中，慢速搅拌均匀；将波洛沙姆407溶于225mL的水溶液与卡波姆水溶液混合；将西多福韦溶于50mL水的溶液加入到上述混合物中，再将氢氧化钾溶于100mL水的溶液加入，低速搅拌均匀；另将吐温40和苯乙胺丁酯加到聚乙二醇中，所得溶液加热到65℃使化合物溶解，冷却至室温后加入苯甲醇，所得混合物加到西多福韦溶液中，低速搅拌得本凝胶制剂。

按国外公开的专利处方和工艺制备西多福韦凝胶剂，为透明半固体凝胶，但黏度较差，经离心、高温和冻融试验发现有分层现象。可能与中和碱量有关。

处方五(改进处方)

透明半固体凝胶，粘性和延展性略差，且放置后泊洛沙姆有析出现象，在60℃加热有分层现象。

处方六(优化处方)

透明半固体凝胶，粘性和延展性较好，附着性强，经离心、高温和冻融试验无分层现象，稳定性好。

处方七(比较处方)

粘性和延展性较好，附着性强，卡波姆-940样品透明度略差于卡波姆-934p样品。

按照以上各处方制备的凝胶相关参数指标如表2：

表2各处方制备的凝胶剂相关参数比较

每个指标以，以好，中，差三种程度进行评价，综合评价后得出优选处方。

结论：经比较以卡波姆基质的凝胶在性状、稳定性方面都优于以羧甲基纤维素钠和羟乙基纤维素等半合成纤维素为凝胶基质的处方。

3、处方中辅料的选择

3-1辅料选择的依据(表3)

根据文献和本制剂领域的技术和辅料理化性质和在处方中的作用进行了筛选。

3-2辅料选择

表3治疗药、辅料、来源、批号和作用

4、处方筛选和制备工艺优化

经比较以卡波姆基质的凝胶在性状、稳定性方面都优于以羧甲基纤维素钠和羟乙基纤维素等半合成纤维素为凝胶基质的处方，因此以卡波姆为基质进行处方的优化。以优选得到的处方6为基础，制备100g 西多福韦凝胶剂，对各辅料用量进行筛选，得到最优处方。

4-1以卡波姆为基质处方筛选和优化

在处方6的基础上，对卡波姆的用量、氢氧化钠用量、甘油及聚乙二醇-400用量进行了研究。选用卡波姆浓度(A)、甘油(B)和聚乙二醇400(C)用量等3因素分别设计3个水平，以黏度、稳定性和释放度为考察指标对西多福韦凝胶进行优化。

(1)卡波姆、丙三醇和聚乙二醇400的用量研究：

处方中氢氧化钠浓度为0.5％，在其他因素不变条件下，选用卡波姆浓度和甘油和聚乙二醇400用量3个因素，分别设计3个水平(表4)，制备100g西多福韦凝胶，以黏度、稳定性和释放度为考察指标对西多福韦凝胶进行考察：

表4因素水平设计表

考察指标及测定方法：

外观：目视，取制备样品适量，装入到10ml，透明离心管，3000rpm 离心30分钟，除去气泡观察，从凝胶剂的色泽，透明程度等方面综合考虑；

稳定性：进行-15℃低温和60℃高温以及离心实验，考察是否分层和沉淀物的产生；

黏附性：用NDJ-8S旋转黏度计进行黏度的测定；

溶液pH：取本品2g，加水25ml溶解后依法测定(中国药典2010 年版附录ⅥH)

释放度：(测定方法见制剂资料10)

取本品装入前处理好的半透膜中(分子量Mw＝8000)，封严后照 (中国药典2010年版二部附录ⅩD第一法)采用溶出度测定法第一法装置(中国药典2010年版二部附录ⅩC)以pH值为5.0的磷酸缓冲溶液 (0.2mol/L磷酸二氢钠用氢氧化钠调至pH5.0)500ml为释放介质，于37℃，转速为每分钟50转，依法操作。在1、4、8小时分别取样5ml，然后补充同等量缓冲溶液。将样品溶液稀释适宜的倍数，按紫外分光光度法，在280nm波长测定紫外吸光度，用对照品法，计算每个取样点药物累积释放百分量。结果如下5-6。

表5L₉3³正交实验结果

表6L₉3³正交实验体外释放结果

无论从黏度、pH、释放度和稳定性，影响因素最大的是A(A>B， C)，即卡波姆用量为主要因素，因为在氢氧化钠含量一定情况下，影响制剂pH的主要因素是卡波姆的用量，从影响制剂的释放度和黏度的结果表明，卡波姆的用量越大，制剂的黏度越大，而体外释放就越慢，因此在制剂稳定的条件下，尽可能降低制剂pH值，以满足生理环境(阴道环境pH为5-6)的需要，从适合的制剂黏度和pH及其稳定性评价，卡波姆的用量为1％，甘油为10％，聚乙二醇400为10％。

(2)氢氧化钠用量：

卡波姆其1％的水溶液PH约在3左右，加入碱可中和成透明、稠厚的凝胶，形成水凝胶时pH约在6～12时最为粘稠，pH约在5～11 之间凝胶稳定，根据阴道偏酸环境，西多福韦凝胶剂为阴道粘膜用药，应与环境的pH尽量一致(阴道环境pH为5～6)，但西多福韦属酸性药物，所能溶解西多福韦的最低pH约在5～6，因此在保证凝胶黏度和制剂稳定的前提下用量最小为宜。表8是氢氧化钠分别以0.18％、 0.21％、0.26％、0.36％、0.46％、0.50％、0.60％、0.75％处方量，其他成分及其用量按处方6固定，以黏度、稳定性、pH、透明度为考察指标进行单因素的处方筛选，评价结果列入表7：

表7处方中不同氢氧化钠的含量对处方的影响

直观分析，上述设计的8个处方制备的样品在室温、4℃和60℃高温条件下，凝胶剂成型工艺均符合要求，但进行剂型稳定性考察发现，在-15℃冻融实验中处方1、2、3有少量药物析出。结果表明，处方中其他成分固定时，氢氧化钠的临界选择量为0.18％，该处方pH为5.01，虽然能保证药物完全溶解，但在室温条件下放置一个月变浑浊，当氢氧化钠在0.21％～0.26％范围内，制备的制剂室温条件下稳定而冻融试验不符合要求。因此，选择适合的粘度，又可保证制剂pH 值在适合人体阴道内的生理环境的范围内，较理想的药物凝胶处方的 pH值不应低于5.5。

(3)西多福韦凝胶剂pH对制剂稳定性的影响

由于卡波姆与药物均属酸性，在保证药物能溶解的前提下，pH 约在5.5～11之间凝胶稳定，根据阴道偏酸环境，西多福韦凝胶剂为阴道粘膜用药，应与环境的PH尽量一致(阴道环境PH为5～6)，但西多福韦属酸性药物，所能溶解西多福韦的最低pH约在5～6，因此在保证凝胶黏度和制剂稳定的前提下用量最小为宜。室温条件下氢氧化钠在0.21％～0.75％范围内，其以黏度、制剂稳定性、pH、透明度为较为理想。因此，在此基础之上选用不同pH的凝胶制剂进行影响因素中的高温试验，考察西多福韦药物的含量和降解产物，以确定最稳定的pH，为此设计六个处方进行研究，结果见表8，杂质含量与pH关系参见图1 及图2：

表8不同pH值凝胶剂处方中药物含量和降解产物

在西多福韦原料药稳定性研究中，将药物用水溶液溶解，并用氢氧化钠溶液调配成不同pH值的溶液，于室温条件下考察含量及降解产物，结果见表9：

表9西多福韦药物不同pH水溶液中的含量和降解产物

经西多福韦药物水溶液和凝胶制剂在不同条件下考察发现，pH值对药物的稳定性影响是一致的，即pH值越大，降解产物越少。通过试验可以看出，当凝胶制剂的pH值在7-8之间，降解产物的变化基本趋于稳定。因此，从凝胶剂成型工艺、黏度、延展性、体外释放度和药物稳定性等综合因素考虑，确定西多福韦凝胶剂的pH值为6.5-7.5。

本品为阴道用药，为适应正常人的生理环境制剂的pH值不可太高；同时，制剂的pH值对制剂的稳定性有重要影响，所以制剂的pH 值应是重要的质量指标进行严格的控制。

西多福韦凝胶剂pH测定方法：

取本品2g，加水25ml溶解后依法测定(中国药典2010年版附录Ⅵ H)，pH值应为为6.5～7.5。

实施例2：制备本发明所述西多福韦凝胶剂

(1)制备1％西多福韦凝胶剂

按下表制成1000克处方(相当于250单剂)

制成1000g凝胶

本发明所述制剂制备工艺：

(1)将处方量的乙二胺四乙酸二钠、丙三醇溶于400ml水中，加入处方量卡波姆细粉均匀撒在溶液表面上，浸泡不少于24小时，使卡波姆充分浸润。加入5％的氢氧化钠溶液70ml，充分搅拌均匀，得卡波姆胶液。将处方量的苯甲醇和吐温-80与聚乙二醇400混合后加到卡波姆胶液中搅拌均匀，再用注射用水补足重量至750g，充分搅拌使混匀(可高压灭菌)，离心脱去气泡，得空白凝胶基质。

(2)将西多福韦过80目筛用150ml水稀释，再加入5％的氢氧化钠溶液50ml使溶解，得到西多福韦溶液，经微孔滤膜过滤除菌后加到方法(1)制备的空白凝胶基质中，用注射用水补足至1000g，搅拌均匀，得到1％西多福韦凝胶剂。

(3)将制备的1％西多福韦凝胶剂，按照每支4g的剂量分装，即得。

(2)制备2％西多福韦凝胶剂

按下表制成1000克处方(相当于250单剂)

制成1000g凝胶

本发明所述制剂制备工艺：

(1)将处方量的乙二胺四乙酸二钠、丙三醇溶于400ml水中，加入处方量卡波姆细粉均匀撒在溶液表面上，浸泡不少于24小时，使卡波姆充分浸润。加入5％的氢氧化钠溶液70ml，充分搅拌均匀，得卡波姆胶液。将处方量的苯甲醇和吐温-80与聚乙二醇400混合后加到卡波姆胶液中搅拌均匀，再用注射用水补足重量至750g，充分搅拌使混匀(可高压灭菌)，离心脱去气泡，得空白凝胶基质。

(2)将西多福韦过80目筛用150ml水稀释，再加入5％的氢氧化钠溶液100ml使溶解，得到西多福韦溶液，经微孔滤膜过滤除菌后加到方法(1)制备的空白凝胶基质中，用注射用水补足至1000g，搅拌均匀，得到2％西多福韦凝胶剂。

(3)将制备的2％西多福韦凝胶剂，按照每支4g的剂量分装，即得。

(3)制备0.5％西多福韦凝胶剂

按下表制成1000克处方(相当于250单剂)

制成1000g凝胶

本发明所述制剂制备工艺：

(1)将处方量的乙二胺四乙酸二钠、丙三醇溶于400ml水中，加入处方量卡波姆细粉均匀撒在溶液表面上，浸泡不少于24小时，使卡波姆充分浸润。加入5％的氢氧化钠溶液70ml，充分搅拌均匀，得卡波姆胶液。将处方量的苯甲醇和吐温-80与聚乙二醇400混合后加到卡波姆胶液中搅拌均匀，再用注射用水补足重量至750g，充分搅拌使混匀(可高压灭菌)，离心脱去气泡，得空白凝胶基质。

(2)将西多福韦过80目筛用150ml水稀释，再加入5％的氢氧化钠溶液25ml使溶解，得到西多福韦溶液，经微孔滤膜过滤除菌后加到方法(1)制备的空白凝胶基质中，用注射用水补足至1000g，搅拌均匀，得到0.5％西多福韦凝胶剂。

(3)将制备的0.5％西多福韦凝胶剂，按照每支4g的剂量分装，即得。

(1)制备0.2％西多福韦凝胶剂

按下表制成1000克处方(相当于250单剂)

制成1000g凝胶

本发明所述制剂制备工艺：

(1)将处方量的乙二胺四乙酸二钠、丙三醇溶于400ml水中，加入处方量卡波姆细粉均匀撒在溶液表面上，浸泡不少于24小时，使卡波姆充分浸润。加入5％的氢氧化钠溶液70ml，充分搅拌均匀，得卡波姆胶液。将处方量的苯甲醇和吐温-80与聚乙二醇400混合后加到卡波姆胶液中搅拌均匀，再用注射用水补足重量至750g，充分搅拌使混匀(可高压灭菌)，离心脱去气泡，得空白凝胶基质。

(2)将西多福韦过80目筛用150ml水稀释，再加入5％的氢氧化钠溶液10ml使溶解，得到西多福韦溶液，经微孔滤膜过滤除菌后加到方法(1)制备的空白凝胶基质中，用注射用水补足至1000g，搅拌均匀，得到0.2％西多福韦凝胶剂。

(3)将制备的0.2％西多福韦凝胶剂，按照每支4g的剂量分装，即得。

实施例3：本发明所述西多福韦凝胶剂相关参数测定

(1)凝胶制剂粘度：

仪器：旋转粘度计：NDJ-8s(上海吉昌地质仪器有限公司)

黏度测定方法：将样品装于直径＞5cm，高度＞15cm的圆柱形容器中，装入适量凝胶剂后放置于离心机中以3000rpm离心10分钟，除去所有气泡，选用4号转子装备后，调节转子在被测样品中所要求高度，将被测样品放入37℃恒温水浴中，20分钟后，以6转/分钟转速进行粘度测定，每个样品测量三次，取平均值，黏度在50～75Pa·s。

(2)凝胶制剂的稳定性：

离心试验：取西多福韦凝胶剂10g，装入带刻度的离心管中，转速 3000rpm，离心30分钟，无分层变质现象；

高温稳定性及低温稳定性试验：取样品20g，装入密闭包装中，部分置60℃恒温干燥箱内，6小时后取出，另一部分置-15℃冰箱内，24小时后取出，恢复至室温后，观察凝胶无分层现象，且测定的黏度也无明显变化。

(3)凝胶制剂释放度：

照中国药典2010年版二部(附录ⅩD)释放度测定法测定。

取本品装入前处理好的半透膜中(分子量Mw＝8000)，封严后照溶出度测定法第一法装置(中国药典2010年版二部附录ⅩC)以pH值为5.0的磷酸缓冲溶液(0.2mol/L磷酸二氢钠用氢氧化钠调至pH5.0) 500ml为释放介质，于37℃，转速为每分钟50转，依法操作。在1小时、4小时、8小时分别取样5ml，然后补充同等量缓冲溶液。将样品溶液离心(3000rpm，10min)，取上清液稀释适宜的倍数(分别取1 小时、4小时、8小时取样3ml，2ml，2ml，置10ml量瓶，缓冲液稀释至刻度，摇匀)，按紫外分光光度法，在280nm波长测定紫外吸光度，用标准品对照法，计算每个取样点药物累积释放百分量，本品每支在1小时、4小时、8小时的溶出量应为表示量的20％～35％、55％～75％、80％～95％。

实施例4：本发明所述西多福韦凝胶剂药效学研究

西多福韦凝胶剂用于治疗人HPV感染的双盲安慰剂对照的安全性和有效性的II期临床研究表明，西多福韦凝胶剂没有出现与西多福韦有关的肾毒性的报道，30例入选病例；其中19例为接受西多福韦治疗组，11例为接受安慰剂治疗组，比较两组疣数量的中值和疣基线中值，西多福韦治疗组9/19(47％)有完全响应(总体治愈)，相比较之下安慰剂组为0响应(p＝0.006)。西多福韦治疗组没有一例病人的病情有发展，相比较之下安慰剂组有5/11例(45％)病人有发展，所报道的两组副作用有可比性。3例病人出现等级为严重的副作用，其中2例发生在安慰剂组，1例发生在药物治疗组。接受西多福韦治疗病人仅仅出现大阴唇和小阴唇的溃疡，认为与药物治疗有关。西多福韦治疗组有4例病人非因为完成治疗或病情发展而过早离开治疗：其中2例失去随访，另2例要求终止治疗。所报道最常见的副作用是在药物应用部位出现疼痛、搔痒症和皮疹；在西多福韦治疗组所报道这样的反应有13例(68％)，相比之下安慰剂组为7例(64％)(p＝1.0)，终止药物应用后为可逆的。有应用部位反应的20例病人中11例出现腐蚀或溃疡(6例接受西多福韦；5例接受安慰剂)。出现溃疡的西多福韦治疗组病人，通过PCR证实1例认为实验室毒性的HSV感染。安慰剂组1例病人出现嗜中性白血球减少症。

CDV凝胶剂单次阴道给药给予家兔的毒性试验结果显示，给药后第7天，供试品3％组1只动物出现软便、肛周污秽、精神不振、俯卧和消瘦症状，持续2天，于给药后第9天死亡。供试品1％组1只动物于给药后第12天出现软便，持续两天。其它动物均未见异常表现。在本试验条件下，CDV凝胶剂单次阴道给予家兔的安全剂量为129.6mg/只(含 CDV)，相当于临床拟用剂量的72～90倍。

西多福韦阴道凝胶剂反复阴道注入给予大鼠13周的毒性试验结果表明，试验期间，所有动物均按计划安乐死，没有发现动物死亡。临床观察可见，1.62mg/只和4.86mg/只剂量组部分动物外阴部一过性轻度红肿，其它动物未见其他与药物毒性相关的异常临床反应。各剂量组动物的体重、食量、血细胞计数、凝血功能、血液生化、眼科、尿液、脏器重量、脏器系数等指标未见有毒理学意义的规律性改变。病理学检查结果显示，1.62和4.86mg/只剂量组动物的阴道和宫颈可见与供试品相关的反应，主要包括阴道黏膜上皮和阴道壁坏死、炎症及宫颈增生肥大；该药对阴道的毒性损害作用与给药剂量和持续给药时间有关；恢复期该药对阴道的毒性损害作用明显缓解，其它组织器官的病理学检查未见与供试品毒性病理相关的改变。1％和3％西多福韦阴道凝胶剂反复阴道注入给予Wistar大鼠，对阴道和宫颈有一定的刺激作用；在4.86mg/只的剂量下(相等于16.2mg/kg)，未见全身毒性反应。

实施例5：本发明所述西多福韦凝胶剂药代动力学研究

采用平行试验设计，进行了西多福韦阴道凝胶剂家兔阴道给药的药代动力学研究。药代动力学研究分为单次给药及多次给药(连续7 天)两种方式；单次给药采用10mg/kg注射液组作为对照组，西多福韦阴道凝胶剂分为1％及3％两个剂量组；多次给药采用1％西多福韦阴道凝胶剂连续7天给药，每天给药1次；各剂量组单独进行。测定注射给药以及阴道凝胶给药两种方式的药物的血药浓度数据，研究药物在毒性靶器官(肾)及作用部位(子宫)的蓄积情况。采用 HPLC/MS/MS方法进行测定，以内标法计算血浆及组织中药物浓度，依据动物体内的药物浓度时间数据，计算西多福韦的药代动力学参数并评价其安全性。

在单次给药研究中，比较了家兔单次阴道内应用1％及3％两种浓度西多福韦阴道凝胶剂和西多福韦静脉给药的药代动力学特征，结果表明(表10)，西多福韦阴道凝胶剂通过阴道给药后，药物入血较少 (1％或3％浓度西多福韦阴道凝胶剂绝对生物利用度分别为3.99％和 2.18％)，主要集中于给药部位，1％或3％浓度西多福韦阴道凝胶剂C_max分别为1362±146μg·L^-1和2979±1461μg·L^-1；T_max(h)分别为 0.43±0.27和0.58±0.17；随给药剂量增大，AUC_0-tn相应增加，但不与剂量成比例关系，说明西多福韦凝胶的吸收不具有剂量依赖性。西多福韦静脉给药平均滞留时间MRT(1.17h)，1％和3％浓度西多福韦阴道凝胶阴道插入给药后的平均滞留时间MRT分别为1.74h和1.80h，表明阴道凝胶插入给药，药物吸收迅速并很快被代谢。

通过测定药物在毒性靶器官(肾)中的浓度(表11)，发现1％西多福韦凝胶阴道给药，肾组织药物浓度在2h达到最高浓度 35424±26709.8μg·L^-1；西多福韦注射液静脉注射给药，药物在肾组织 20min即达到最大浓度525600±40047.47μg·L^-1，两者最高浓度相差14 倍。至12h，给与1％西多福韦阴道凝胶，肾中药物浓度为 1701.6±2049.9μg·L^-1；而西多福韦注射液静脉注射给药，肾中药物浓度为87780±22591.41μg·L^-1，为阴道凝胶给药方式的51倍；至24h，西多福韦注射液静脉注射给药，肾中药物浓度任高达 50940±7593.62μg·L^-1。说明西多福韦凝胶阴道给药在肾组织中药物的蓄积量大大低于注射给药方式。在测定时间范围内，肾组织中药物暴露为采用同剂量注射给药方式的3.6％(AUC比值)，说明西多福韦阴道凝胶给药由于进入血液循环药物较少，与注射给药相比，可以减少在肾中蓄积。通过对比1％西多福韦凝胶阴道给药不同时间点，药物在作用部位(子宫)及毒性器官(肾)的浓度(表12及图3-4)，发现药物在子宫中浓度大大高于肾，说明药物给药后主要集中于子宫，但浓度下降较肾迅速。

在多次给药研究中，采用1％西多福韦凝胶连续7天给药，对比第1天与第7天相关药代参数(表13)，平均C_max分别为972±1461 和909±817μg·L^-1μg·L^-1；AUC_0-tn平均值分别为939.10±1359.28和 593.92±405.17μg·h·L^-1。肾清除率CL分别为0.76±0.75和 0.45±0.26L·kg^-1·h^-1，至第7天略有下降。与之前1％西多福韦阴道凝胶单次给药肾清除率CL0.42±0.41L·kg^-1·h^-1相比，无明显差异，说明由于西多福韦阴道凝胶剂给药，生物利用度低，药物入血较少，在肾组织蓄积量较低，7天连续给药在体内无蓄积，对肾组织影响较小，且无不良事件发生。

目前西多福韦上市产品为注射剂，临床剂量为375mg/人份，本发明所述西多福韦阴道凝胶剂临床剂量为40mg/人份，大大低于上市产品的剂量。西多福韦阴道凝胶插入给药后生物利用度低，进入体循环较少，对全身系统影响较小，药物在肾组织中浓度与静脉注射给药相比，大大降低，因此可以减少药物在肾的蓄积。给药后，药物主要集中于给药部位，主要发挥局部抗病毒作用，因此用药安全。

表10家兔单次给予西多福韦注射液及高低浓度凝胶剂后平均药代动力学参数

表11注射及阴道给予西多福韦注射液及凝胶家兔肾及血浆药物浓度- 时间数据

表12阴道给予1％西多福韦凝胶家兔肾、子宫组织及血浆药物浓度- 时间数据

表13家兔单次给予西多福韦注凝胶剂与多次给药以后平均药代动力学参数对比

实施例6：本发明所述西多福韦注凝胶剂药效试验

供试药：按照实施例2制备的西多福韦注凝胶剂：0.05％CDV凝胶剂、0.2％CDV凝胶剂、0.5％CDV凝胶剂、1％CDV凝胶剂、赋形剂 (空白凝胶)

规格：0.05％：4g。0.2％：4g。0.5％：4g。1％：4g。

1、HSV-2传代和小鼠阴道感染毒力测定

病毒用维持液稀释为10^-3接种长成单层的Vero细胞，5％CO2培养箱37℃培养2天后，出现细胞病变，收取病毒液，冻化3次后离心。上清液作病毒原液，用培养液稀释成1：15、1：30、1：60、1：120、 1：240。接种雌性小鼠阴道，每鼠20μl，每浓度6只小鼠，观察发病、记录死亡，计算死亡率，平均生活日数。

2、CDV凝胶剂治疗试验：

小鼠阴道感染病毒2小时后，阴道局部用注射器(针头加套管) 给药，每次每只小鼠给药25μl，每天2次共7天，每天记录死亡情况。连续观察14天，14天仍存活作14天计算，计算死亡率和平均生活日，与病毒对照组和赋形剂对照组比较，计算保护率和延长生命率。每组 10只小鼠。

第一批实验：

CDV凝胶剂剂量：0.2％，0.5％，1％，病毒感染后2小时阴道局部给药，每次每只小鼠给药25μl，每天2次，连续7天。病毒对照组和正常对照组给予生理盐水，阳性对照药阿昔洛韦软膏(3％)，赋型剂给予空白凝胶剂，所有对照组给药时间同CDV凝胶剂治疗组。第二批实验：

CDV凝胶剂剂量：0.05％，0.2％，0.5％，1％，病毒感染后2小时阴道局部给药，每次每只小鼠给药25μl，每天2次，连续7天。病毒对照组和正常对照组给予生理盐水，阳性对照药阿昔洛韦软膏 (3％)，赋型剂给予空白凝胶剂，所有对照组给药时间同CDV凝胶剂治疗组。

第三批实验：

CDV凝胶剂剂量：0.05％，0.2％，1％，病毒感染后2小时阴道局部给药，每次每只小鼠给药25μl，每天2次，连续7天。病毒对照组和正常对照组给予生理盐水，阳性对照药阿昔洛韦软膏(3％)，赋型剂给予空白凝胶剂，所有对照组给药时间同CDV凝胶剂治疗组。

3、病毒分离试验：

在感染后72小时用无菌棉拭子取小鼠阴道分泌物，置入1ml维持液中作为病毒原液，再以维持液10倍稀释为10^-1，10^-2，10^-3，10^-4， 10^-5，接种96孔培养板Vero细胞单层，5％CO₂培养箱37℃培养144 小时，计算TCID₅₀，测定药物治疗72小时后对局部病毒分泌量的影响。每组6只小鼠。

第一批实验：

CDV凝胶剂剂量：0.05％，0.2％，1％，病毒感染后2小时阴道局部给药，每次每只小鼠给药25μl，每天2次，连续3天。病毒对照组和正常对照组给予生理盐水，阳性对照药阿昔洛韦软膏(3％)，赋型剂给予空白凝胶剂，所有对照组给药时间同CDV凝胶剂治疗组。第二批实验：

CDV凝胶剂剂量：0.05％，0.2％，1％，病毒感染后2小时阴道局部给药，每次每只小鼠给药25μl，每天2次，连续3天。病毒对照组和正常对照组给予生理盐水，阳性对照药阿昔洛韦软膏(3％)，赋型剂给予空白凝胶剂，所有对照组给药时间同CDV凝胶剂治疗组。

4结果计算与分析

死亡保护率＝(病毒对照组死亡率-实验组死亡率)×100％

11.4.3半数有效剂量ED₅₀，Reed-Muench法计算。

A＝log<50％累加抑制率的药物浓度B<50％累加抑制率C ＝>50％累加抑制率，D＝log稀释倍数

5、统计学处理

采用统计程序，用卡方法比较死亡率，卡迈(Kaplan-Meier)法比较平均生活日。

6、试验结果

6.1 HSV-2感染小鼠阴道毒力测定

HSV-2 333株，2倍稀释为5个稀释度(1/15—1/240)，每组6只动物，阴道感染20μl/只。观察两周，按Reed&Muench法计算半数感染量LD₅₀，测得LD₅₀＝10^-2.78。小鼠的病毒感染剂量为：1/30，相当于 20LD₅₀。

第一批试验CDV凝胶剂的三个剂量组0.2％、0.5％和1％与病毒对照组比较，对HSV-2感染小鼠阴道炎死亡保护率分别为100％、100％和100％，延长生命率分别为137.3％、137.3％和137.3％，死亡保护率和延长生命率均有统计显著性。阳性对照药3％阿昔洛韦软膏对HSV-2 感染小鼠阴道炎死亡保护率为90％，延长生命率为128.8％，死亡保护率和延长生命率均有统计显著性。CDV凝胶剂的三个剂量组0.2％、 0.5％和1％与赋形剂对照组比较，对HSV-2感染小鼠阴道炎死亡保护率分别为100％、100％和100％，延长生命率分别为154.5％、154.5％和154.5％，死亡保护率和延长生命率均有统计显著性。阳性对照药3％阿昔洛韦软膏对HSV-2感染小鼠阴道炎死亡保护率为90％，延长生命率为145.5％，死亡保护率和延长生命率均有统计显著性。本批试验CDV凝胶剂的三个剂量组0.2％、0.5％和2％均优于阳性对照药3％阿昔洛韦软膏，数据结果见表14。

第二批试验CDV凝胶剂的四个剂量组0.05％、0.2％、0.5％和1％与病毒对照组比较，对HSV-2感染小鼠阴道炎死亡保护率分别为90％、 100％、100％和100％，延长生命率分别为131.0％、141.4％、141.4％和141.4％，死亡保护率和延长生命率均有均有统计显著性。阳性对照药3％阿昔洛韦软膏对HSV-2感染小鼠阴道炎死亡保护率为60％，延长生命率为119.0％，死亡保护率和延长生命率均有统计显著性。CDV 凝胶剂的四个剂量组0.05％、0.2％、0.5％和1％与赋形剂对照组比较，对HSV-2感染小鼠阴道炎死亡保护分别为90％、100％、100％和100％，延长生命率分别为123.3％、133.3％、133.3％和133.3％，死亡保护率和延长生命率均有统计显著性。阳性对照药3％阿昔洛韦软膏对HSV-2 感染小鼠阴道炎死亡保护率为90％，延长生命率为111.7％，死亡保护率和延长生命率均有统计显著性。本批试验CDV凝胶剂的四个剂量组0.05％、0.2％、0.5％和1％均优于阳性对照药3％阿昔洛韦软膏。数据结果见表14。

第三批试验CDV凝胶剂的三个剂量组0.05％、0.2％和1％与病毒对照组比较，对HSV-2感染小鼠阴道炎死亡保护率分别为20％、100％和100％，延长生命率分别为92.5％、164.2％和164.2％，0.05％的CDV 凝胶剂死亡保护率无统计显著性，延长生命率具有统计显著性，0.2％和1％的CDV凝胶剂死亡保护率和延长生命率均有统计显著性。阳性对照药3％阿昔洛韦软膏对HSV-2感染小鼠阴道炎死亡保护为70％，延长生命率为141.5％，死亡保护率和延长生命率均有统计显著性。 CDV凝胶剂的三个剂量组0.05％、0.2％和1％与赋形剂对照组比较，对HSV-2感染小鼠阴道炎死亡保护率分别为20％、100％和100％，延长生命率分别为75.9％、141.4％和141.4％，0.05％的CDV凝胶剂死亡保护率无统计显著性，延长生命率具有统计显著性，0.2％和1％的CDV 凝胶剂死亡保护率和延长生命率均有统计显著性。阳性对照药3％阿昔洛韦软膏对HSV-2感染小鼠阴道炎死亡保护率为70％，延长生命率为120.7％，死亡保护率和延长生命率均有统计显著性。本批试验阳性对照药3％阿昔洛韦软膏优于0.05％的CDV凝胶剂，0.2％和1％的CDV 凝胶剂均优于阳性对照药3％阿昔洛韦软膏。数据结果见表14。

表14.CDV凝胶剂对HSV-2 333感染小鼠的治疗效果

与病毒对照作Kaplan-Meier法检验，*p＜0.05；**p＜0.001

与病毒对照作卡方检验，#p＜0.05；##p＜0.001

2、本发明所述CDV凝胶剂对HSV-2 333感染小鼠阴道分泌病毒的抑制作用。

HSV-2感染阴道炎小鼠局部用药3天(72小时)，取小鼠阴道分泌物，置于培养液中，10倍稀释，在Vero细胞中测定TCID₅₀。

第一批试验与病毒对照组比较：0.05％的CDV凝胶剂降低小鼠阴道病毒载量213.8倍，0.2％的CDV凝胶剂降低小鼠阴道病毒载量大于 1778.3倍，1％的CDV凝胶剂降低小鼠阴道病毒载量大于1778.3倍，阳性对照药3％阿昔洛韦软膏降低小鼠阴道病毒载量63.1倍；与赋形剂对照组比较：0.05％的CDV凝胶剂降低小鼠阴道病毒载量2630.3 倍，0.2％的CDV凝胶剂降低小鼠阴道病毒载量大于21877.6倍，1％的CDV凝胶剂降低小鼠阴道病毒载量大于21877.6倍，阳性对照药 3％阿昔洛韦软膏降低小鼠阴道病毒载量776.2倍。本批试验CDV凝胶剂的三个剂量组0.05％、0.2％和1％均优于阳性对照药3％阿昔洛韦软膏。结果见表15。

第二批试验与病毒对照组比较：0.05％的CDV凝胶剂降低小鼠阴道病毒载量3162.3倍，0.2％的CDV凝胶剂降低小鼠阴道病毒载量大于26302.7倍，1％的CDV凝胶剂降低小鼠阴道病毒载量大于26302.7 倍，阳性对照药3％阿昔洛韦软膏降低小鼠阴道病毒载量100倍；与赋形剂对照组比较：0.05％的CDV凝胶剂降低小鼠阴道病毒载量416.9 倍，0.2％的CDV凝胶剂降低小鼠阴道病毒载量大于3467.4倍，1％的 CDV凝胶剂降低小鼠阴道病毒载量大于3467.4倍，阳性对照药3％阿昔洛韦软膏降低小鼠阴道病毒载量13.2倍。本批试验CDV凝胶剂的三个剂量组0.05％、0.2％和1％均优于阳性对照药3％阿昔洛韦软膏。本批试验CDV凝胶剂的三个剂量组0.05％、0.2％和1％均优于阳性对照药3％阿昔洛韦软膏。结果见表15。

表15.CDV凝胶剂对HSV-2 333感染小鼠阴道分泌病毒的作用

7、总结

在本试验条件下，0.2％、0.5％和1％的CDV凝胶剂对HSV-2感染小鼠阴道炎死亡保护率、平均生活日与病毒对照组和赋形剂对照组相比均具有统计显著性。0.05％、0.2％和1％的CDV凝胶剂均可显著降低HSV-2感染小鼠阴道病毒载量。

阳性对照药3％阿昔洛韦软膏对HSV-2感染小鼠阴道炎死亡保护率、平均生活日、病毒载量降低与病毒对照组和赋形剂对照组相比均具有统计显著性，说明实验模型成立。

8、结论与分析

0.2％、0.5％和1％的CDV凝胶剂对HSV-2感染小鼠阴道炎死亡保护率、平均生活日与病毒对照组和赋形剂对照组相比均具有可重复的统计显著性。本发明0.05％、0.2％和1％的CDV凝胶剂均可显著降低 HSV-2感染小鼠阴道病毒载量，均优于阳性对照药3％阿昔洛韦软膏。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种阴道用凝胶剂，其特征在于，其组成为：

西多福韦 0.5－50g

卡波姆 5-20g

乙二胺四乙酸二钠 0.1-0.5g

氢氧化钠 3-8g

丙三醇 50-200g

苯甲醇 5-20g

聚乙二醇400 50-500g

吐温-80 1-5g

余量为水，制成1000g凝胶；

所述阴道用凝胶剂的pH值为6.0～8.0。

2.根据权利要求1所述的阴道用凝胶剂，其特征在于，西多福韦含量为2-30g。

3.根据权利要求1所述的阴道用凝胶剂，其特征在于，其剂黏度为5～80(Pa·s)。

4.根据权利要求1所述的阴道用凝胶剂，其特征在于，其组成为：

西多福韦 2-20g

卡波姆 8-15g

乙二胺四乙酸二钠 0.2g

氢氧化钠 6.0g

丙三醇 100g

苯甲醇 10.0g

聚乙二醇400 50-200g

吐温-80 2.0g

余量为水，制成1000g凝胶。

5.根据权利要求1所述的阴道用凝胶剂，其特征在于，其组成为：

西多福韦 5-20

卡波姆 8-10g

乙二胺四乙酸二钠 0.2g

氢氧化钠 6.0g

丙三醇 100g

苯甲醇 10.0g

聚乙二醇400 100g

吐温-80 2.0g

余量为水，制成1000g凝胶。

6.根据权利要求1所述的阴道用凝胶剂，其特征在于，其组成为：

西多福韦 10.0g

卡波姆 10.0g

乙二胺四乙酸二钠 0.2g

氢氧化钠 6.0g

丙三醇 100g

苯甲醇 10.0g

聚乙二醇400 100g

吐温-80 2.0g

余量为水，制成1000g凝胶。

7.权利要求1-6任一项所述阴道用凝胶剂用于制备治疗阴道人乳头瘤病毒感染的药物的应用。

8.权利要求1-6任一项所述阴道用凝胶剂用于制备治疗阴道内疱疹病毒感染的药物的应用。

9.权利要求1-6任一项所述阴道用凝胶剂的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：

步骤1：将处方量的乙二胺四乙酸二钠、丙三醇溶于水中，加入处方量卡波姆细粉均匀撒在溶液表面上，浸泡使卡波姆充分浸润，加入氢氧化钠溶液，充分搅拌均匀，得到pH调至6-8卡波姆胶液；

步骤2：将处方量的苯甲醇和吐温-80与聚乙二醇400混合后加入步骤1制备的卡波姆胶液中搅拌均匀，加水充分搅拌使混匀，离心脱去气泡，得空白凝胶基质；

步骤3：将西多福韦过筛后用水稀释，再加入5％的氢氧化钠溶液使西多福韦溶液的pH调至6-8，经微孔滤膜过滤除菌后加到步骤2制备的空白凝胶基质中，用水补足至1000g，搅拌均匀，得到西多福韦凝胶剂。