CN103130904A

CN103130904A - 一种虾夷扇贝下脚料高值化利用的方法

Info

Publication number: CN103130904A
Application number: CN2013100044325A
Authority: CN
Inventors: 袁春营; 崔青曼; 李广靖
Original assignee: Tianjin University of Science and Technology
Current assignee: Tianjin University of Science and Technology
Priority date: 2013-01-07
Filing date: 2013-01-07
Publication date: 2013-06-05

Abstract

本发明涉及一种虾夷扇贝下脚料高值化利用的方法，其主要技术特点是：将虾夷扇贝下脚料洗净、称重，加水制成匀浆液，在匀浆液中加入胰蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶酶解，将酶解液离心，分离上清液和沉淀两部分，上清液加双氧水脱色，离心，调pH值,离心除去酸性、中性蛋白质，上清液醇沉，得粗糖胺聚糖粗品，得率为0.265%，粗品加纯水溶解，加入0.4%胰蛋白酶二次酶解，离心，上清液醇沉，加入CTAB（十六烷基三甲基溴化铵），离心，将沉淀溶于乙酸钠溶液中，得解离液，透析、醇沉，获得高纯度糖胺聚糖，糖胺聚糖纯度可达90%以上，该糖胺聚糖具有较强的抗氧化作用，可以用作功能性食品的原料。所有蛋白沉淀合并，用作动物养殖良好的蛋白源。本发明的优点是将虾夷扇贝加工贝柱的下脚料高值化综合利用，整套工艺流程实现无污染、零排放。

Description

一种虾夷扇贝下脚料高值化利用的方法

技术领域

本发明属于食品技术领域，涉及下脚料高值化利用，尤其是一种虾夷扇贝下脚料高值化利用的方法。

背景技术

虾夷扇贝原产于日本、俄罗斯千岛群岛南部水域、日本北海道及本州北部，为大型冷水性贝类，现已引进我国，并已在山东、辽宁等北方沿海进行人工养殖、增殖生产，是近年来贝类水产品的重要品种。虾夷扇贝含有丰富的不饱和脂肪酸EPA和DHA，还具有滋阴、补肾等作用，对身体虚弱、食欲不振、营养不良等病有很好的疗效。虾夷扇贝的闭壳肌粗大，肉味鲜美营养丰富，广泛用于制作贝柱，满足市场的需要。目前加工贝柱的下脚料利用率低下，造成资源的浪费。本发明选取虾夷扇贝下脚料，提取高纯糖胺聚糖，为化妆品行业、保健品行业提供优质原材料，同时制备优质动物蛋白，满足动物养殖行业的需要。

通过检索，发现如下三篇与本专利申请相关的公开专利文献：1、虾夷扇贝多糖提取工艺（ZL200510047410.2）。本发明提供了一种虾夷扇贝多糖的提取方法，所述的方法包括包括原料处理、匀浆、超声、酶解、分离、浓缩、醇沉、干燥的工艺步骤。2、一种具有血管保护效应的活性物质——栉孔扇贝糖胺聚糖的提取制备方法（CN1746191），其提取制备工艺如下：将栉孔扇贝内脏团称重，加水制成匀浆液，在匀浆液中加入蛋白酶，加热反应得酶解液；将酶解液在离心机中离心，弃去沉淀物，对离心液加二次乙醇溶液，形成沉淀；将分离后的沉淀物加蒸馏水配成水溶液后加热并加入活性炭，冷却后经离心，收集上清液，对上清液抽滤，得清液；将清液用滤膜超滤，得分子量为5k～100k的滤液；将滤液冷冻干燥即制得栉孔扇贝糖胺聚糖。该方法操作简单、反应条件温和、成本低廉、得率及纯度高，在提取糖胺聚糖的同时还可大量回收蛋白质，有利于栉孔扇贝内脏团的综合利用，提取的物质对于防治心脏血管性疾病有重要价值。3、一种海湾扇贝多糖的提取方法（CN201010552250.8），本方法采用以下步骤：将海湾扇贝组织捣碎后烘干或冻干，经试剂浸泡回流脱寡糖、色素；以水为溶剂进行浸提；离心得上清液；真空旋转蒸发浓缩；向浓缩液中加入无水乙醇，乙醇达到一定浓度使多糖沉淀；干燥即得海湾扇贝多糖。

通过比对，上述公开专利文献的技术方案及提取客体均与本专利申请有本质的不同（二次酶解、CTAB络合纯化），本专利申请具有新颖性。

发明内容

本发明目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种虾夷扇贝下脚料高值化利用的方法，该方法的原料来源充足、提取成本低，为满足化妆品行业、保健品行业及海珍动物养殖业的广泛应用提供了可能。

本发明是通过如下技术方案实现的：

一种虾夷扇贝下脚料高值化利用的方法，步骤如下：

⑴原料处理：将虾夷扇贝下脚料洗净后，加入蒸馏水匀浆，形成匀浆液；

⑵酶解：向上述匀浆液中加胰蛋白酶和枯草杆菌中性蛋白酶，在40℃水浴条件下酶解3.5-4小时，酶解液煮沸灭酶后，5000r/min离心10min，分离上清液和沉淀；

⑶脱色：上清液中加入双氧水脱色；

⑷去除蛋白质：先用HCl调pH至2.0，离心除去沉淀；再用NaOH调pH至7.0，离心除去沉淀；

⑸醇沉法提取粗糖胺聚糖：上清液在不断搅拌下缓缓加入乙醇至醇含量为70%，于4℃条件下静置24小时，移去上清液，8000r/min离心10min后回收粗糖胺聚糖；

⑹二次酶解：将粗糖胺聚糖溶于蒸馏水，加入0.4%胰蛋白酶二次酶解，pH8.0，酶解时间3小时，煮沸灭酶后5000r/min离心10min，分离上清液和沉淀；

⑺沉淀合并：所有蛋白沉淀合并，制作动物蛋白源；

⑻CTAB结合与解离：上清液加入2倍体积的5%CTAB（十六烷基三甲基溴化铵），45℃下沉淀1-2小时，8000r/min离心30min，收集沉淀，45℃下将沉淀溶于2mol/L的CH3COONa溶液，使GAG-CTAB络合物解离，形成解离液；

⑼醇沉、透析、再醇沉：上述解离液加入乙醇，使醇量达70%，8000r/min离心10min，收集沉淀，将沉淀溶于蒸馏水，用截流量7000的透析袋透析48h，在透析液中加入乙醇－乙酸钠试剂，使醇量达70%，按醇沉法回收糖胺聚糖，将沉淀物烘干，即制得纯泥螺糖胺聚糖。

而且、所述步骤⑴中蒸馏水的加入量为下脚料重量的2-3倍。

而且，所述步骤⑵中胰蛋白酶和枯草杆菌中性蛋白酶的总添加量为下脚料总重量的0.8-1%，且胰蛋白酶和枯草杆菌中性蛋白酶各占一半。

而且、所述步骤⑶中双氧水的添加量为上清液重量的5-7%。

本发明的优点和积极效果是：

1、本方法反应条件温和、糖胺聚糖纯度高，与其他贝类的糖胺聚糖提取相比，工艺简化，时间缩短。

2、本方法采用虾夷扇贝下脚料作为客体，原材料成本低，产品附加值高，整套工艺流程无污染，零排放。

3、本方法在提取糖胺聚糖的同时还可大量回收蛋白质，有利于虾夷扇贝下脚料的综合利用，所提取的糖胺聚糖具有较强的抗氧化能力，回收的蛋白质可以作为海珍动物养殖业良好的蛋白源。

具体实施方式

下面结合实施例，对本发明进一步说明，下述实施例是说明性的，不是限定性的，不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。

本实施例所采用的客体是选自虾夷扇贝下脚料。

一种虾夷扇贝下脚料高值化利用的方法，包括以下步骤：

⑶脱色：上清液中加入双氧水脱色；

⑺沉淀合并：所有蛋白沉淀合并，制作动物蛋白源。

⑼醇沉、透析、再醇沉：上述解离液加入乙醇，使醇量达70%，8000r/min离心10min，收集沉淀，将沉淀溶于蒸馏水，用截流量7000的透析袋透析48h，在透析液中加入乙醇－乙酸钠试剂，使醇量达70%，按醇沉法回收糖胺聚糖，将沉淀物烘干，即制得纯糖胺聚糖。

实例1

⑴原料处理：将虾夷扇贝下脚料洗净后，加入2倍重量的蒸馏水匀浆，制成匀浆液；

⑵酶解：向上述匀浆液中加胰蛋白酶和枯草杆菌中性蛋白酶，酶添加量为下脚料总重量的0.8%，且胰蛋白酶和枯草杆菌中性蛋白酶各占一半，在40℃水浴条件下酶解3.5小时；分离取上清液：酶解液煮沸灭酶后，5000r/min离心10min，分离上清液和沉淀；

⑶脱色：上清液中加入5%双氧水脱色；

⑺沉淀合并：所有蛋白沉淀合并，制作动物蛋白源；

⑻CTAB结合与解离：上清液加入2倍体积的5%CTAB（十六烷基三甲基溴化铵），45℃下沉淀2小时，8000r/min离心30min，收集沉淀，45℃下将沉淀溶于2mol/L的CH3COONa溶液，使GAG-CTAB络合物解离，形成解离液；

通过阿利新蓝法测定，得到的糖胺聚糖纯度可达90.56%。

实例2

⑴原料处理：将虾夷扇贝下脚料洗净后，加入3倍重量的蒸馏水匀浆，制成匀浆液；

⑵酶解：向上述匀浆液中加胰蛋白酶和枯草杆菌中性蛋白酶，酶添加量为下脚料总重量的1%，且胰蛋白酶和枯草杆菌中性蛋白酶各占一半，在40℃水浴条件下酶解4小时；分离取上清液：酶解液煮沸灭酶后，5000r/min离心10min，分离上清液和沉淀；

⑶脱色：上清液中加入7%双氧水脱色；

⑺沉淀合并：所有蛋白沉淀合并，制作动物蛋白源；

通过阿利新蓝法测定，得到的糖胺聚糖纯度可达91.13%。

Claims

1.一种虾夷扇贝下脚料高值化利用的方法，其特征在于，步骤如下：

⑶脱色：上清液中加入双氧水脱色；

⑺沉淀合并：所有蛋白沉淀合并，制作动物蛋白源；

2.根据权利要求1所述的虾夷扇贝下脚料高值化利用的方法，其特征在于：所述步骤⑴中蒸馏水的加入量为下脚料重量的2-3倍。

3.根据权利要求1所述的虾夷扇贝下脚料高值化利用的方法，其特征在于：所述步骤⑵中胰蛋白酶和枯草杆菌中性蛋白酶的总添加量为下脚料总重量的0.8-1%，且胰蛋白酶和枯草杆菌中性蛋白酶各占一半。

4.根据权利要求1所述的虾夷扇贝下脚料高值化利用的方法，其特征在于：所述步骤⑶中双氧水的添加量为上清液重量的5-7%。