CN102949721A - 一种含有睾酮和nos抑制剂的透皮吸收药物组合物 - Google Patents

Abstract

一种含有睾酮和NOS抑制剂的透皮吸收药物组合物，由作为活性成分的雄性激素和NOS抑制剂，与一种或多种的药物辅料共同组成。

Description

一种含有睾酮和NOS抑制剂的透皮吸收药物组合物

技术领域

本发明涉及一种药物组合物，一种含有睾酮的透皮吸收药物组合物。

背景技术

睾酮(睾丸素，testosterone)是一种重要的甾体雄性激素类药物，有促进男性性器官及副性征的发育、成熟，对抗雌激素，促进蛋白质合成及骨质形成等作用，但是由于口服过程中经肝脏代谢在体内分解，无法起到作用，所以临床很少使用

透皮给药系统(transdermal delivery systems，TDS)是指经皮肤给药而起全身治疗作用的控释制剂。TDS是一种极有前途的剂型，其研究已成为第3代药物制剂开发研究的中心内容之一。但是，由于皮肤的屏障作用，以及药物本身的理化性质等原因，很多药物穿过皮肤的通透率很低，经皮到达体内的药物很难达到有效的治疗浓度。其中睾酮就是一种不容易透过皮肤的药物，如何提高睾酮的吸收率就是制剂研究的重点。透皮吸收促进剂(penetrationenhancers，PE)的应用，为TDS的研究与应用带来了契机。PE已成为增加药物透皮吸收的首选方法，是许多药物TDS研究中的重要环节。透皮吸收促进剂是增加药物透过比率的重要药物辅料。透皮吸收促进剂是指能够渗透进入皮肤降低药物通过皮肤阻力的材料，可以辅助药物穿过角质层、扩散通过皮肤，由毛细血管进入体循环，但是由于药物性质和制剂配方的不同，同样得透皮吸收促进剂产生的效果也千差万别，尤其是不同种类得透皮吸收促进剂的组合更是无法计数。所以如何通过调整透皮吸收促进剂在在喷雾剂中的配比，使得睾酮透皮吸收得到更好的疗效就成为研究的重点。

NO是一种生物功能广泛的无机小分子，参与循环、神经、免疫等系统及骨的代谢，在体内由NOS(一氧化氮合酶)合成，NO代谢异常可导致风湿性关节炎、哮喘、中风、早老性痴呆等疾病，一氧化氮合酶(NOS)抑制剂是一类可以抑制一氧化氮合酶活性，从而降低体内NO含量的物质。在多项研究证明NOS抑制剂可以通过抑制NOS活性降低体内的NO含量从而用于治疗上述疾病如关节炎等炎症性疾病。但是其减少NO的合成可能产生血管内皮功能失调等副反应的主要机制，由于副反应较大，所以NOS抑制剂现在还没有作为药物施用。

发明内容：

在不断地科学研究中，我们惊奇的发现，NOS抑制剂与睾酮联合使用，与单用睾酮相比，能够提高体内睾酮的含量，同时也避免了NOS抑制剂对体内NOS的影响。特别是将睾酮与NOS抑制剂通过制备成透皮吸收剂型联合使用，与其他剂型相比，其提高体内睾酮的含量的效果更加明显，同时对于体内的NOS影响更小，这样对于血管的不良反应可以降到最低。同时通过调整制剂学配方，尤其是将透皮吸收促进剂与其他药用辅料进行调节，可以将睾酮制成经喷雾剂，并产生良好的透皮效果，形成皮给药系统，使在皮肤表面形成缓释层，经皮吸收，消除了肝脏首过效应，降低了不良反应，同时容易调整用药剂量，给药方便并可增加患者的顺应性。在实验中我们发现在喷雾剂中采用混合醇的稳定性更高，尤其是采用乙醇、丙二醇的混合物其稳定性较高，采用水杨酸辛酯或水杨酸辛酯、薄荷醇混合物作为透皮吸收促进剂效果较好。

本发明提供了一种药物组合物，由作为活性成分的雄性激素和NOS抑制剂，与一种或多种的药物辅料共同组成。

所述的药物组合物，其特征在于雄性激素为睾酮、二氢睾酮、甲睾酮、丙酸睾酮，十一酸睾酮。所述雄性激素优选为睾酮、二氢睾酮。

所述的药物组合物，其特征在于NOS抑制剂为氨基酸或其衍生物。所述氨基酸或其衍生物，所述的氨基酸或其衍生物为L-N⁶-(1-亚氨乙基)-赖氨酸、N-硝基-L-精氨酸、N-单甲基-L-精氨酸、Nω，Nω-非对称性二甲基精氨酸及上述化合物的酯或盐的一种或几种。

所述的药物组合物，其特征在于NOS抑制剂为S-甲基异硫脲、氨基胍及其盐中的一种或几种。

所述的药物组合物，其特征是所述雄性激素的用量为0.1％～5％，优选1％～2％。

所述的药物组合物，其特征在于雄性激素和NOS抑制剂的重量配比为1∶0.1-10。优选为1∶0.5-2。

所述的药物组合物，为透皮吸收给药。

所述的药物组合物，所述药物辅料为适用于透皮吸收的药物辅料。

所述的药物组合物，其特征是所述的适用于透皮吸收的药用辅料含有环糊精或其衍生物，所述的环糊精或其衍生物选自α环糊精或其衍生物、β-环糊精或其衍生物、γ环糊精或其衍生物。所述的β-环糊精或其衍生物可选自羟丙基-β-环糊精、二羟基-β-环糊精，羟乙基-β-环糊精，优选为羟丙基-β-环糊精。所述羟丙基-β-环糊精选自2-羟丙基-β-环糊精、3-羟丙基-β-环糊精、2，3-二羟丙基-β-环糊精、2，3，6-三羟丙基-β-环糊精，优选2-羟丙基-β-环糊精。

所述的药物组合物，其特征是所述雄性激素与环糊精或其衍生物的摩尔比为1∶1～5。

所述的药用组合物，当加入β-环糊精或其衍生物时，优选将部分或全部活性成分制备成为环糊精或其衍生物的包合物，所述包合物的制备方法如下：将环糊精或其衍生物、活性成分加入不含水的极性有机溶剂中，使其溶清，加入稀释水，蒸出有机溶剂，得到活性成分包合物的水溶液，所得包合物水溶液可以直接用来配制皮肤药物组合物。

所述的药物组合物，可以配制成软膏剂、硬膏剂、凝胶剂、溶液剂、喷雾剂、混悬剂

所述的药物组合物，其特征是所述的适用于透皮吸收的药用辅料还包括pH调节剂、抗菌防腐剂、抗氧化剂、助溶剂、渗透压调节剂、粘度调节剂、表面活性剂、流变调节剂、油相成分、保湿剂、稳定剂、透皮吸收促进剂、水、常温下为液态的醇中的一种或几种。所述pH调节剂为磷酸及其盐、硼酸及其盐、枸橼酸及其盐、醋酸及其盐、酒石酸及其盐、盐酸及其盐、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氨基丁三醇中的一种或几种。优选为磷酸及其盐、枸橼酸及其盐、醋酸及其盐、盐酸及其盐、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾中的一种或几种。所述渗透压调节剂为甘油、丙二醇、氯化钠、氯化钾、山梨糖醇、甘露醇中的一种或几种。所述粘度调节剂为羧甲基纤维素钠、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、聚乙烯基醇、羧乙烯聚合物、聚乙烯基吡咯烷酮中的一种或几种，用量为0.1％～2％。所述表面活性剂选自十二烷基硫酸钠或非离子表面活性剂，所述非离子表面活性剂选自吐温-80，聚氧乙烯氢化蓖麻油60，聚乙二醇-硬脂酸酯，聚乙二醇4000，卵磷脂，蔗糖酯，聚氧乙烯烷基醚，聚氧乙烯-聚氧丙烯二醇及其类似物、泊洛沙姆、泰洛沙泊、平平加A中的一种或几种，用量优选为0.1％～2％。所述的稳定剂为乙二胺四乙酸二钠。所述流变调节剂是卡波姆树脂，卡波姆934和/或卡波姆940和/或卡波姆941，用量为药物组合物重量的0.1％～1％，优选为药物组合物为0.2％至0.5％。

所述的组合物，当是乳膏时，辅料还含有保湿剂1％～15％、油相成分20％～30％。所述的保湿剂为甘油、丙二醇、山梨醇中的一种或几种，优选丙二醇、甘油。所述透皮吸收促进剂为薄荷醇、冰片、精油类、肉豆蔻酸异丙酯、油酸、油醇、环十五烷酮、脱水山梨酸糖醇单油酸酯、甘油单油酸酯、丙二醇单月桂酸酯、聚乙二醇单月桂酸酯、2-正壬基-1，3-二氧戊环、2-(N，N-二甲基氨基)-丙酸-十二烷基酯或其盐衍生物、2-乙基己酸-2-乙基己基酯、二甲基异山梨醇、4-癸基恶唑烷-2酮、3-甲基-4-癸基恶唑烷-2酮、二甲基-对氨基苯甲酸辛酯、对甲氧基肉桂酸辛酯、水杨酸辛酯中的一种或几种。优选为薄荷醇、水杨酸辛酯的混合物。

所述的药物组合物，所述的常温下为液态的醇为一元醇、多元醇的一种或几种。优选一元醇与多元醇混合物。所述一元醇为乙醇、异丙醇；多元醇为丙二醇、丙三醇，优选丙三醇。

所述的药物组合物，所述的防腐剂为尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、苯扎溴铵、苯扎氯铵、山梨酸、羟苯乙酯中的一种或几种。

所述的药物组合物，其特征在于所述抗氧化剂为维生素C、焦亚硫酸钠中的一种或几种。

所述的药物组合物，其特征在于所述抗菌防腐剂苯扎氯铵、苄索氯铵、山梨酸、山梨酸钾、对羟基苯甲酸甲酯(尼泊金甲酯)、对羟基苯甲酸乙酯(尼泊金乙酯)、对羟基苯甲酸丙酯(尼泊金丙酯)、氯代丁醇中的一种或几种。

所述的药物组合为，为口服或注射给药。

所述的药物组合物，其特征在于药物辅料为适用于口服或注射给药的药物辅料。

具体实施方式

以下实施例中的雄激素重量均以睾酮计。

一、含药环糊精液体的制备

实施例1、雄激素环糊精液体的制备

实施例号	雄性激素	环糊精
			1-1	睾酮	2-羟丙基-β环糊精
1-2	睾酮	2，3，6-三羟丙基-β-环糊精
			1-3	睾酮	α环糊精
1-4	睾酮	γ环糊精
			1-5	二氢睾酮	2-羟丙基-β环糊精
1-6	二氢睾酮	α环糊精
			1-7	甲睾酮	2-羟丙基-β环糊精
1-8	甲睾酮	α环糊精

1-9	丙酸睾酮	2-羟丙基-β环糊精
			1-10	丙酸睾酮	γ环糊精
1-11	十一酸睾酮	2-羟丙基-β环糊精
			1-12	十一酸睾酮	α环糊精

室温下将环糊精6g溶于95％乙醇100ml中，氮气保护下加入1g雄激素(以睾酮计)，搅拌溶清，再搅拌30分钟，过滤，加入20ml的注射用水，搅拌5分钟，减压浓缩，蒸除乙醇，得到雄激素/环糊精溶液，备用。

实施例2、NOS抑制剂环糊精液体的制备

实施例号	NOS抑制剂	环糊精
			2-1	N-硝基-L-精氨酸	2-羟丙基-β环糊精
2-2	N-硝基-L-精氨酸	2，3，6-三羟丙基-β-环糊精
			2-3	N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐	2-羟丙基-β环糊精
2-4	N-单甲基-L-精氨酸	2-羟丙基-β环糊精
			2-5	N-单甲基-L-精氨酸	2，3-二羟丙基-β-环糊精
2-6	N-单甲基-L-精氨酸单乙酸酯	2-羟丙基-β环糊精
			2-7	S-甲基异硫脲硫酸盐	2-羟丙基-β环糊精
2-8	S-甲基异硫脲硫酸盐	α环糊精
			2-9	S-甲基异硫脲	2-羟丙基-β环糊精
2-10	氨基胍盐酸盐	2-羟丙基-β环糊精
			2-11	氨基胍硝酸盐	γ-环糊精
2-12	氨基胍硝酸盐	2-羟丙基-β环糊精
			2-13	L-N6-(1-亚氨乙基)-赖氨酸	2-羟丙基-β环糊精
2-14	Nω，Nω-非对称性二甲基精氨酸	2-羟丙基-β环糊精

室温下将环糊精5g溶于95％乙醇100ml中，氮气保护下加入1gNOS抑制剂，搅拌溶清，再搅拌30分钟，过滤，加入15ml的注射用水，搅拌5分钟，减压浓缩，蒸除乙醇，得到NOS抑制剂/环糊精液体，氮气保护下备用。

制剂实施例3

实施例号	雄激素	NOS抑制剂	备注
				3-1	甲睾酮	N-硝基-L-精氨酸
3-2	甲睾酮	N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐

3-3	甲睾酮	N-单甲基-L-精氨酸单乙酸酯
				3-4	甲睾酮	L-N6-(1-亚氨乙基)-赖氨酸
3-5	甲睾酮	Nω，Nω-非对称性二甲基精氨酸
				3-6	甲睾酮	S-甲基异硫脲硫酸盐
3-7	甲睾酮	氨基胍盐酸盐
				3-8	甲睾酮	氨基胍硝酸盐
3-9	丙酸睾酮	S-甲基异硫脲硫酸盐
				3-10	十一酸睾酮	S-甲基异硫脲硫酸盐

活性成分

雄激素   5.0g(粒径为D90在30μm的微粉，)

NOS抑制剂10g(粒径为D90在30μm的微粉)

辅料：

按照处方量称取活性成分、预胶化淀粉、微晶纤维素、乳糖，分别过60-100目筛，混合均匀后，加入聚维酮水溶液适量制软材，20目筛制颗粒，干燥，整粒，加入，硬脂酸镁，羧甲淀粉钠，微粉硅胶，混合均匀后采用适合冲模压制成片剂。

制剂实施例4

活性成分：

丙酸睾酮        10.0g

氨基胍          100.0g

辅料：

将活性成分、微晶纤维素、乳糖分别过80目筛，混合均匀后，加入处方量的硬脂酸镁，混合均匀后装入适宜胶囊中即得。

制剂实施例5-1

活性成分：

十一酸睾酮环糊精液体(1-11)             10.0g

氨基胍盐酸盐环糊精液体(2-7)            1g

辅料：

取处方量十一酸睾酮环糊精液体、氨基胍盐酸盐环糊精液体、丙二醇、焦亚硫酸钠、氯化钠溶于部分注射用水中，用磷酸氢二钠、磷酸二氢钠的缓冲溶液调节PH为6.8，补加注射用水至1000ml，灭菌，无菌分装即得。

制剂实施例5-2

活性成分：

丙酸睾酮                           5.0g

Nω，Nω-非对称性二甲基精氨酸      0.5g

辅料：

1)油相配制：，取注射用大豆油、大豆卵磷脂、油酸置于容器中，加热至熔融，再加入丙酸睾酮，搅拌混合均匀后，温度保持在72±2℃；

(2)水相配制：按以上配比精确称量，取甘油、Nω，Nω-非对称性二甲基精氨酸加入水置于容器中，加热，温度保持在65±2℃；

(3)合相：将步骤(1)配制的油相倒入步骤(2)配制的水相中，高速剪切分散(6000rpm)，形成初乳；

(4)将步骤(3)得到的初乳降温至室温，用NaOH调节PH值至6.1后再次高速剪切分散(6000rpm)，过0.22μm微孔滤膜，灭菌，无菌分装即得。

制剂实施例6

活性成分：

甲睾酮    5.0g

L-N⁶-(1-亚氨乙基)-赖氨酸   50g

辅料：

按照处方量称取活性成分、预胶化淀粉、微晶纤维素、乳糖，分别过60-100目筛，混合均匀后，加入聚维酮水溶液适量制软材，20目筛制颗粒，干燥，整粒，加入，硬脂酸镁，羧甲淀粉钠，微粉硅胶，混合均匀后采用适合冲模压制成片剂。

制剂实施例7

活性成分(粒径为D90在7μm的微粉)：

十一酸睾酮    40.0g

Nω，Nω-非对称性二甲基精氨酸及上述化合物的酯  4g

辅料：

乳糖(粒径为D90在30μm的微粉)     200g

硬脂酸镁                         3g

共制成                           1000粒

将活性成分、乳糖分别过80目筛，混合均匀后，加入处方量的硬脂酸镁，混合均匀后装入适宜胶囊中即得。

制剂实施例8

实施例号	雄激素	NOS抑制剂	备注
				8-1	睾酮	N-硝基-L-精氨酸
8-2	睾酮	N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐
				8-3	睾酮	N-单甲基-L-精氨酸单乙酸酯
8-4	睾酮	L-N6-(1-亚氨乙基)-赖氨酸
				8-5	睾酮	Nω，Nω-非对称性二甲基精氨酸
8-6	睾酮	S-甲基异硫脲硫酸盐
				8-7	睾酮	氨基胍盐酸盐
8-8	睾酮	氨基胍硝酸盐
				8-9	丙酸睾酮	N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐

8-10	十一酸睾酮	N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐
				8-11	二氢睾酮	N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐
8-12	甲睾酮	N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐

活性成分：

雄激素10g(粒径为D90在20μm的微粉，重量以睾酮计)

NOS抑制剂20g(粒径为D90在20μm的微粉)

辅料：

十六醇90g，硬脂酸10g，白凡士林90g，液状石蜡90g，丙二醇120g，十二烷基硫酸钠10g，羧甲基纤维素钠1.5g、二甲基亚砜10ml，水杨酸辛酯3g，纯化水加至1000g。

配制：

取十六醇、硬脂酸、白凡士林、液状石蜡置同一容器内为油相，加热至70℃熔解备用；取雄激素、NOS抑制剂、羧甲基纤维素钠、纯化水、乙二胺四乙酸二钠、十二烷基硫酸钠置另一容器内搅拌均匀后加入丙二醇成为水相，加热至70℃备用；将油相缓缓倒入水相中，不断按顺时针进行搅拌，使冷却至40℃时，加入水杨酸辛酯和二甲基亚砜，快速搅拌均匀，凝固即得，分装。

实施例9

实施例号	雄激素环糊精液体	NOS抑制剂环糊精液体
			9-1	实施例1-1	实施例2-1
9-2	实施例1-1	实施例2-3
			9-3	实施例1-1	实施例2-6
9-4	实施例1-1	实施例2-13
			9-5	实施例1-1	实施例2-14
9-6	实施例1-1	实施例2-7
			9-7	实施例1-1	实施例2-10
9-8	实施例1-1	实施例2-12
			9-9	实施例1-9	实施例2-3
9-10	实施例1-11	实施例2-3
			9-11	实施例1-5	实施例2-3
9-12	实施例1-7	实施例2-3

活性成分：

雄激素环糊精液体10g(重量以睾酮计)

NOS抑制剂液体20g(重量以NOS抑制剂计)

辅料：

十六醇90g，硬脂酸10g，白凡士林90g，液状石蜡90g，丙二醇120g，十二烷基硫酸钠10g，羧甲基纤维素钠1.5g、二甲基亚砜10ml，水杨酸辛酯3g，纯化水加至1000g。

配制：

取十六醇、硬脂酸、白凡士林、液状石蜡置同一容器内为油相，加热至70℃熔解备用；取雄激素环糊精液体、NOS抑制剂环糊精液体、十二烷基硫酸钠、丙二醇、乙二胺四乙酸二钠、苯扎氯铵及纯化水，置另一容器内为水相，加热至70℃备用；将油相缓缓倒入水相中，不断按顺时针进行搅拌，使冷却至40℃时，加入水杨酸辛酯和二甲基亚砜，快速搅拌均匀，凝固即得，分装。

实施例10

实施例号	雄激素环糊精液体	NOS抑制剂
			10-1	实施例1-1	N-硝基-L-精氨酸
10-2	实施例1-1	N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐
			10-3	实施例1-1	N-单甲基-L-精氨酸单乙酸酯
10-4	实施例1-1	L-N6-(1-亚氨乙基)-赖氨酸
			10-5	实施例1-1	Nω，Nω-非对称性二甲基精氨酸
10-6	实施例1-1	S-甲基异硫脲硫酸盐
			10-7	实施例1-1	氨基胍盐酸盐
10-8	实施例1-1	氨基胍硝酸盐
			10-9	实施例1-9	N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐
10-10	实施例1-11	N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐
			10-11	实施例1-5	N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐
10-12	实施例1-7	N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐

活性成分：

雄激素环糊精液体10g(重量以睾酮计)

NOS抑制剂20g(重量以NOS抑制剂计)

辅料：

十六醇90g，硬脂酸10g，白凡士林90g，液状石蜡90g，丙二醇120g，十二烷基硫酸钠10g，羧甲基纤维素钠1.5g、二甲基亚砜10ml，水杨酸辛酯3g，纯化水加至1000g。

配制：

取十六醇、硬脂酸、白凡士林、液状石蜡置同一容器内为油相，加热至70℃熔解备用；取雄激素环糊精液体、、十二烷基硫酸钠、丙二醇、乙二胺四乙酸二钠、苯扎氯铵及NOS抑制剂放入纯化水中，置另一容器内为水相，加热至70℃备用；将油相缓缓倒入水相中，不断按顺时针进行搅拌，使冷却至40℃时，加入水杨酸辛酯和二甲基亚砜，快速搅拌均匀，凝固即得，分装。

实施例11混悬剂

丙酸睾酮微粉(粒径为D90≤20μm的微粉)10g，

L-N⁶-(1-亚氨乙基)-赖氨酸(粒径为D90≤30μm的微粉)100g

EDTA-2Na 0.2g，焦亚硫酸钠3g、氯化钠适量，羧甲基纤维素钠2.5g，聚乙二醇4000 2g，对甲氧基肉桂酸辛酯5g，氢氧化钠适量，加蒸馏水至1000g

配制方法：将处方量的EDTA、羧甲基纤维素钠、聚乙二醇4000溶于500ml注射用水中，搅拌溶清，加入处方量的L-N⁶-(1-亚氨乙基)-赖氨酸，焦亚硫酸钠、对甲氧基肉桂酸辛酯、用氢氧化钠调pH至7.0。再加入处方量的丙酸睾酮微粉，加入余量的注射用水。用氯化钠调至等渗，分装。

实施例12凝胶剂

二氢睾酮微粉10g(粒径为D90≤20μm的微粉)，

N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐5g

聚乙二醇600 100g，甘油100g，无水乙醇100g，肉豆蔻酸异丙酯5g、三乙醇胺适量，加蒸馏水至1000g。

配制方法：将卡波姆9345g均匀撒于200ml蒸馏水面上，静置，使之充分溶涨；将睾酮微粉、肉豆蔻酸异丙酯加入无水乙醇搅拌均匀后，后加入处方量的N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐水溶液、聚乙二醇600和甘油。将上述组分混合、搅匀，缓慢滴加三乙醇胺，边加边搅拌，控制pH6.0～7.0，分装即可。

实施例13乳膏剂

丙酸睾酮微粉10g(粒径为D90≤20μm的微粉)，

N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐100g

十六醇90g，硬脂酸10g，白凡士林90g，液状石蜡90g，丙二醇120g，十二烷基硫酸钠10g，、二甲基亚砜10ml，月桂氮卓酮10g，纯化水加至1000g。

配制：

取十六醇、硬脂酸、白凡士林、液状石蜡置同一容器内为油相，加热至70℃熔解备用；取氢化可的松环糊精包合物水溶液、十二烷基硫酸钠、丙二醇及纯化水，置另一容器内为水相，加热至70℃备用；取西洛司特加入二甲基亚砜中，搅拌均匀；将油相缓缓倒入水相中，不断按顺时针进行搅拌，使冷却至40℃时，加入含西洛司特的二甲基亚砜溶液及氮酮，快速搅拌均匀，凝固即得。

实施例14乳膏剂

十一酸睾酮微粉(粒径为D90≤20μm的微粉)10g，

N-硝基-L-精氨酸(粒径为D90≤20μm的微粉)15g

十六醇90g，硬脂酸10g，白凡士林90g，液状石蜡90g，丙二醇120g，十二烷基硫酸钠10g，二甲基亚砜15ml

取十六醇、硬脂酸、白凡士林、液状石蜡置同一容器内为油相，加热至70℃熔解备用；取N-硝基-L-精氨酸、十二烷基硫酸钠、丙二醇及纯化水，置另一容器内为水相，加热至70℃备用；；将油相缓缓倒入水相中，不断按顺时针进行搅拌，使冷却至40℃时，取十一酸睾酮微粉加入二甲基亚砜中，油相和水相混合物加入搅拌均匀二甲基亚砜溶液及氮酮，快速搅拌均匀，凝固即得，分装。

药理实施例1稳定性实验

90天稳定性试验：

将实施例得到的药物组合物密闭储存在在60℃±2℃，相对湿度75％±5％的情况下进行稳定性试验，在0天和存储至第90天，分别检测5个单位药物含量通过雄激素的含量，A＝平均第90天的含量/平均0天的含量。

雄激素的含量使用外标法高效液相法进行检测：C18柱(150x4.6，5um)，甲醇-水(70∶30)为流动相，波长240nm，外标物为睾酮。

实施例号	雄激素	NOS抑制剂	A(％)
				8-1	睾酮	N-硝基-L-精氨酸	90.4
8-2	睾酮	N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐	92.2
				8-3	睾酮	N-单甲基-L-精氨酸单乙酸酯	91.5
8-4	睾酮	L-N6-(1-亚氨乙基)-赖氨酸	91.1
				8-5	睾酮	Nω，Nω-非对称性二甲基精氨酸	90.6
8-6	睾酮	S-甲基异硫脲硫酸盐	87.6
				8-7	睾酮	氨基胍盐酸盐	87.4
8-8	睾酮	氨基胍硝酸盐	86.3
				8-9	丙酸睾酮	N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐	93.2
8-10	十一酸睾酮	N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐	93.3
				8-11	二氢睾酮	N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐	92.4
8-12	甲睾酮	N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐	93.5
				9-1	实施例1-1	实施例2-1	92.9
9-2	实施例1-1	实施例2-3	95.2
				9-3	实施例1-1	实施例2-6	93.7

9-4	实施例1-1	实施例2-13	93.5
				9-5	实施例1-1	实施例2-14	91.9
9-6	实施例1-1	实施例2-7	91.2
				9-7	实施例1-1	实施例2-10	90.7
9-8	实施例1-1	实施例2-12	90.3
				9-9	实施例1-9	实施例2-3	95.7
9-10	实施例1-11	实施例2-3	95.9
				9-11	实施例1-5	实施例2-3	95.1
9-12	实施例1-7	实施例2-3	94.9

通过实验证明，使用环糊精的药物组合物的雄激素较为稳定，同时使用N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐的NOS抑制剂时雄激素较为稳定。

药理实施例2体外经皮渗透实验

取3月龄健康大鼠麻醉处死后，用剪刀除尽腹部毛，取下无损伤的皮肤，除去皮下组织，洗净后分别固定于Franz扩散池的释放口，接受室中加入PH7.4的磷酸缓冲生理盐水(PBS)和丙二醇(1∶1)和庆大霉素硫酸盐(50μg/ml)的混合液作释放介质，保持内皮层与溶液密切接触。每次所取的10个单位的药品进行渗透性试验。

每个药品单位取0.1ml药液涂布在皮肤上，调节水浴使外层套层温度恒定于(37土1)度，搅拌速度为100rpm，分别于0、0.5、1、2、3、6、12、24小时吸取释放介质0.2ml，同时补加等量液体。释放液用中国药典2010年版的方法确定浓度Ci，根据下式求得单位面积药物累积透过量Q：Q＝CiV/A

式中，Q为单位面积药物累积透过量，Ci为t时间内释放介质中的药物浓度，V为接收室体积，A为皮肤扩散面积。分别以Q和C对时间进行线性回归，求得3小时渗透率(J/μg.h^-1)，再利用以下公式计算累计释放量

$E_r=\frac{V_e\underset{1}{\overset{n-1}{\mathrm{\Σ}}}{C}_i+V_0{C}_n}{m_{\mathrm{drug}}}$

Er为累计释放量，；Ve为置换体积，V0为释放液的体积，Ci为t时间内释放介质中的药物浓度，m_drug为喷至皮肤上的药量，n为置换的次数。

试验药物：

取处方量的透皮吸收促进剂溶于乙醇300ml、100ml丙二醇中，将睾酮20g(平均粒径为5μm)、N-单甲基-L-精氨酸单乙酸酯20g(平均粒径为5μm)溶于乙醇500ml中，两液混合均匀，用3号垂熔漏斗过滤，用剩余乙醇洗涤3号垂熔漏斗，将上述制剂按照睾酮0.1g/瓶的要求灌装于药用喷雾瓶中。

按照上述体外经皮渗透实验的要求进行睾酮渗透性试验，得到3h的渗透率和12h的累计释放量，实验结果证明加入薄荷醇和水杨酸辛酯混合的促渗剂效果好于单独使用，更远好于其他促渗剂。

本实验中睾酮的含量测定参照药理实施例1中的检测方法计算。

通过实验证明，薄荷醇和水杨酸辛酯混合的透皮吸收促进剂效果好于单独使用，水杨酸辛酯在单独使用的透皮吸收促进剂中效果远好于其他促渗剂。

药理实施例3经皮渗透实验2

实验动物：Wistar大鼠

对大鼠血清睾酮含量的影响的实验方法：

取体重(201.4±11.5)g雄性大鼠，随机分组，每组10只进行脱毛。对照组1脱毛区皮肤给予相应实施例的赋形剂，对照组2腹腔注射环磷酰胺每日20mg/kg，连续5d，进行药物去势后脱毛区皮肤给予相应实施例的赋形剂，实验组腹腔注射环磷酰胺每日20mg/kg，连续5d，进行药物去势后脱毛区皮肤给予下表中的药物，剂量为6mg/kg(以睾酮计)，如果仅使用NOS抑制剂，用量为12mg/kg，每天1次，连续7天。在第一次给药后4小时、第8天从大鼠眼眶后静脉丛取血2ml，分离血清，使用美国DSL公司睾酮放射免疫试剂盒进行放射免疫法检测血清睾酮值，仪器为GC-1200r放射免疫计数器，测定体内睾酮的浓度。

实验药物及见下表：

药理实施例4口服体内试验

不同药物对大鼠血清睾酮含量的影响：取体重(201.4±12.8)g的18个月雄性大鼠，随机分为组，每组10只。对照组处方中涉及的雄激素为5.0g(粒径为D90在30μm的微粉)、NOS抑制剂为10g(粒径为D90在30μm的微粉)，并按照实施例3的方式得到类似的药物组合物。下表中的药物以雄激素2.5mg/kg/天或是NOS抑制剂5mg/kg/天的标准口服给药，从开始给药后第7天从大鼠眼眶后静脉丛取血2ml，分离血清，进行检测睾酮、一氧化氮(NO)。

睾酮检测方法：使用美国DSL公司睾酮放射免疫试剂盒进行放射免疫法检测血清睾酮值，仪器为GC-1200r放射免疫计数器，测定各样品中睾酮的浓度。

NO检测方法：由北京军事医学科学院出品的NO测试盒，测试方法见说明书

通过上述实验可以说明，雄激素与NOS抑制剂联合使用，效果较雄激素或NOS抑制剂单独使用体内睾酮含量明显上升，同时对体内NO水平影响较小，同时雄激素中十一酸睾酮与NOS抑制剂中的N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐联合使用效果较佳。

Claims (10)

1.一种药物组合物，由作为活性成分的雄性激素和NOS抑制剂，与一种或多种的药物辅料共同组成。

2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于雄性激素为睾酮、二氢睾酮、甲睾酮、丙酸睾酮，十一酸睾酮。

3.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于NOS抑制剂为L-N⁶-(1-亚氨乙基)-赖氨酸、N-硝基-L-精氨酸、N-单甲基-L-精氨酸、Nω，Nω-非对称性二甲基精氨酸及上述化合物的酯的一种或几种。

4.如权利要求1所述的药物组合物，其特征是所述雄性激素的用量为0.1％～5％。

5.如权利要求1-4所述的药物组合物，其特征在于药物辅料为适用于透皮吸收的药物辅料。

6.如权利要求5所述的药物组合物，其特征是所述的适用于透皮吸收药用辅料含有环糊精或其衍生物，所述的环糊精或其衍生物选自α环糊精或其衍生物、β-环糊精或其衍生物、γ环糊精或其衍生物。

7.如权利要求6所述的药物组合物，其特征是所述的适用于透皮吸收的药用辅料还包括pH调节剂、抗菌防腐剂、抗氧化剂、助溶剂、渗透压调节剂、粘度调节剂、表面活性剂、流变调节剂、油相成分、保湿剂、稳定剂、透皮吸收促进剂、水、常温下为液态的醇中的一种或几种。

8.如权利要求7所述的药物组合物，其特征在于透皮吸收促进剂为薄荷醇、冰片、精油类、肉豆蔻酸异丙酯、油酸、油醇、环十五烷酮、脱水山梨酸糖醇单油酸酯、甘油单油酸酯、丙二醇单月桂酸酯、聚乙二醇单月桂酸酯、2-正壬基-1，3-二氧戊环、2-(N，N-二甲基氨基)-丙酸-十二烷基酯或其盐衍生物、2-乙基己酸-2-乙基己基酯、二甲基异山梨醇、4-癸基恶唑烷-2酮、3-甲基-4-癸基恶唑烷-2酮、二甲基-对氨基苯甲酸辛酯、对甲氧基肉桂酸辛酯、水杨酸辛酯中的一种或几种。

9.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于雄性激素和NOS抑制剂的重量配比为1∶0.1-10。

10.如权利要求6所述的所述药用组合物，将部分或全部活性成分制备成为环糊精或其衍生物的包合物，所述包合物的制备方法如下：将环糊精或其衍生物、活性成分加入不含水的极性有机溶剂中，使其溶清，加入稀释水，蒸出有机溶剂，得到活性成分包合物的水溶液，所得包合物水溶液可以直接用来配制药物组合物。