CN102851341A - 双酶复合法水解鳕鱼皮制备胶原多肽 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及双酶复合法水解鳕鱼皮制备胶原多肽，该方法以鳕鱼皮为原料，对原料进行清洗，去杂蛋白脱脂等前处理后，再采用胰蛋白酶和木瓜蛋白酶进行同步水解，得到高产率的胶原多肽产品。本发明工艺简单，变废为宝，制备得到的胶原多肽分子量小，产率高。鱼皮胶原多肽可作为哺乳动物胶原多肽的部分替代品应用到食品、化妆品等领域中。
Description
技术领域
本发明涉及蛋白质提取领域，特别是涉及双酶复合法水解鳕鱼皮制备胶原多肽。
背景技术
胶原多肽是胶原或明胶经蛋白酶降解处理后制成的，具有较高的消化吸收性。胶原多肽可促进骨的形成，达到预防骨质疏松症的作用，另外胶原多肽还具有其它许多特殊的生理功能：保护胃粘膜和抗溃疡作用，抗过敏作用，改善肌肤、美容作用等。
我国鳕鱼年加工量40万t～50万t，鳕鱼皮为加工副产品，约占加工量的7％～8％，鱼皮干物质中50％以上为胶原蛋白，而目前国内对鳕鱼皮的利用还处于初级阶段。
利用鳕鱼皮提取胶原多肽一方面是充分利用了鱼类加工的副产品，既减少了环境污染，又变废为宝，提高产品的附加值；另一方面是作为新型胶原资源的开发，无论是从疯牛病的角度，还是从民族宗教的角度考虑，鱼皮胶原多肽可作为哺乳动物胶原多肽的部分替代品。
发明内容
本发明的目的在于以海洋鱼类加工下脚料特别是鳕鱼皮为原料，采用双酶复合法制备胶原多肽，通过对提取条件的摸索，提高胶原多肽的得率。
本发明是以如下技术方案实现的：双酶复合法水解鳕鱼皮制备胶原多肽，鳕鱼皮自然解冻后，洗净、切碎，0.5％-1.0％的NaOH浸泡脱蛋白，水洗至中性，再加入0.5％-1.0％的H2SO4浸泡，水洗至中性；将经前处理的鳕鱼皮，进行酶解，酶解温度45-55℃，pH6.5-7.5，胰蛋白酶与鳕鱼皮重量比为1∶40-1∶25，木瓜蛋白酶与鳕鱼皮重量比为1∶25-1∶15，反应时间8-13h，酶解结束后产物于沸水中灭酶，自然冷却离心得上清液，对上清液进行冷冻干燥即为产品。所述的双酶复合法水解鳕鱼皮制备胶原多肽包括将原料清洗、切碎、去杂蛋白、酶解、灭酶、离心、干燥。
本发明的优点在于：
1、比较多种蛋白酶对鳕鱼皮进行酶解的效果，以水解度为指标，胰蛋白酶和木瓜蛋白酶较之其它实验用蛋白酶，酶解效果最好。
2、通过研究胰蛋白酶和木瓜蛋白酶双酶复合酶解的作用条件，包括酶解温度、时间、加酶量、pH以及加酶顺序，得到双酶复合酶解条件的最佳组合，提高胶原多肽的得率。
具体实施方式
(1)鳕鱼皮前处理
鳕鱼皮自然解冻后，洗净、切碎，加入0.5％-1.0％的NaOH溶液浸泡0.5h，水洗至中性，再加入0.5％-1.0％的H2SO4溶液浸泡0.5h，水洗至中性。
(2)酶解
对经过前处理的鳕鱼皮，进行酶解。酶解温度45-55℃，pH6.5-7.5，胰蛋白酶与鳕鱼皮重量比为1∶40-1∶25，木瓜蛋白酶与鳕鱼皮重量比为1∶25-1∶15，反应时间8-13h，在此条件下，水解度可达到23％-35％，酶解结束后产物于沸水中灭酶，自然冷却离心得上清液。
(3)干燥
上清液进行冷冻干燥成粉末，得分子量主要分布在＜5000D的产品。
Claims (3)
1.双酶复合法水解鳕鱼皮制备胶原多肽，其特征在于包括下列步骤：
①鳕鱼皮前处理
鳕鱼皮自然解冻后，洗净、切碎，0.5％-1.0％的NaOH浸泡脱蛋白，水洗至中性，再加入0.5％-1.0％的H2SO4浸泡，水洗至中性；
②酶解
将步骤①经前处理的鳕鱼皮，进行酶解，酶解温度45-55℃，pH6.5-7.5，胰蛋白酶与鳕鱼皮重量比为1∶40-1∶25，木瓜蛋白酶与鳕鱼皮重量比为1∶25-1∶15，反应时间8-13h，此时水解度可达到23％-35％，酶解结束后产物于沸水中灭酶，自然冷却离心得上清液；
③干燥
上清液进行冷冻干燥成粉末，得分子量主要分布在＜5000D的产品。
2.根据权利要求1所述的胶原多肽的制备方法，其特征在于步骤②中，酶解温度55℃，pH6.5，胰蛋白酶与鳕鱼皮重量比为1∶25，木瓜蛋白酶与鳕鱼皮重量比为1∶20，反应时间13h。
3.根据权利要求1所述的胶原多肽的制备方法，其特征在于步骤②中，胰蛋白酶和木瓜蛋白酶同时加入到鳕鱼皮溶液中，其酶解效果优于分步加入。
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