CN102764262B - 齐墩果酸和维甲酸药物组合在治疗胰岛素抵抗和糖尿病药物中的应用 - Google Patents

Abstract

发明公开了一种齐墩果酸和维甲酸药物组合的用途，用于治疗胰岛素抵抗和糖尿病的药物中。糖尿病动物腹腔注射齐墩果酸和维甲酸药物组合，可以使血糖水平显著降低，在培养肝细胞的培养液中加入齐墩果酸和维甲酸药物组合可以显著地促进胰岛素信号的传导。因此，齐墩果酸和维甲酸药物组合可用于治疗糖尿病、胰岛素抵抗以及和胰岛素抵抗密切相关的代谢综合征的药物中。

Description

齐墩果酸和维甲酸药物组合在治疗胰岛素抵抗和糖尿病药物中的应用

技术领域

本发明涉及齐墩果酸和维甲酸药物组合的用途，具体指齐墩果酸和维甲酸药物组合在治疗胰岛素抵抗和糖尿病药物中的应用。

背景技术

近年来，随着人们生活方式的转变，糖尿病的发病率逐年增加。美国糖尿病协会推测，至2030年，全球将有35亿人患有糖尿病及其并发症。最近，我国的一项调查显示，目前我国糖尿病患病人数已达9200万，仅次于印度。糖尿病对全球尤其是发展中国家的经济发展产生了巨大的压力，据统计，发展中国家用于糖尿病方面的费用支出超出了卫生费用预算的10%。糖尿病患者中90%以上是2型糖尿病患者，胰岛素抵抗是2型糖尿病的基本特征。胰岛素抵抗是指肝、肌肉、脂肪等胰岛素作用的靶组织，不能响应胰岛素导致胰岛素的降血糖作用减弱甚至缺失的病理状态。除2型糖尿病之外，胰岛素抵抗还与高血压、动脉粥样硬化、代谢综合征、卵巢囊肿、阿尔茨海默症、肿瘤的发生发展密切相关。因此，对胰岛素抵抗的发病机制及防治研究显得尤为重要。目前，用于治疗胰岛素抵抗和糖尿病的有效药物主要包括噻唑烷二酮类药物和二甲双胍等，这些药物的肝肾毒性比较大。

在正常的胰岛素信号传导中，胰岛素与其受体结合启动胰岛素信号，激活受体内源性蛋白酪氨酸激酶活性，导致受体细胞质一侧的酪氨酸磷酸化。激活的受体，反过来又募集并磷酸化一系列底物分子。进而激活磷脂酰肌醇-3-激酶（Phosphoinositide-3-kinase，PI3K）/蛋白激酶B（Protein kinase B，Akt）。蛋白激酶B是胰岛素信号传导过程中的一种重要的激酶，胰岛素刺激条件下其磷酸化水平的高低常被用来作为胰岛素信号传导是否正常的指标。胰岛素抵抗发生时，胰岛素刺激的蛋白激酶B磷酸化水平明显降低。

齐墩果酸（Oleanolic acid，OA）是一种天然三萜系化合物，并且是许多皂苷的苷配基，其结构式见图1。齐墩果酸大量存在于各种食物（菜子油）中，并且是许多植物叶子和根茎的成分，包括Olea europaea、Viscum album L.、Aralia chinensis L和其它超过120种天然植物。齐墩果酸作为中药的有效成分已经有20多年的使用历史，主要用于治疗病毒性肝炎。有研究发现齐墩果酸可以保护小鼠免受各种肝毒物和亲电子物，包括四氯化碳、对乙酰氨基酚、溴化苯和硫代乙酰胺等的损伤。给予齐墩果酸后，齐墩果酸主要分布于肝脏并在肝脏代谢。小鼠预先给予齐墩果酸，可以降低肝毒物引起的转氨酶的升高并抑制肝小叶中心坏死。此外，有大量的研究报道富含齐墩果酸的天然药物和齐墩果酸的合成衍生物表现出一系列的药理学功能，包括抗炎、抗肿瘤、促进凋亡等作用。

维甲酸（retinoic acid，RA），又称视黄酸、维生素甲酸、维A酸等，是动物体内维生素A的代谢中间产物，其结构式见图2。有着广泛的生理学和药理学活性。β-胡萝卜素在肠道被肠粘膜β-胡萝卜素加氧酶氧化生成2个分子的视黄醇，即维生素A。后者被吸收入体内被氧化成视黄醛．再进一步被氧化成视黄酸(即维甲酸）。

发明内容

本发明的目的是将齐墩果酸和维甲酸药物组合应用于治疗胰岛素抵抗和糖尿病的药物中。

为实现上述发明目的，本发明的技术方案如下：

一种用于治疗胰岛素抵抗和糖尿病的组合物，该组合物包括齐墩果酸和维甲酸药物。

一种齐墩果酸和维甲酸药物组合的用途，用于治疗胰岛素抵抗和糖尿病的药物中。

本发明的测定结果表明：在糖尿病大鼠中，齐墩果酸和维甲酸都可以使血糖降低，齐墩果酸和维甲酸联合应用使血糖降低更为明显。齐墩果酸和维甲酸培养细胞中，胰岛素刺激的蛋白激酶B磷酸化水平显著增强，明显抑制氧化应激诱导的蛋白激酶B磷酸化水平的降低，从而验证了齐墩果酸和维甲酸联合应用在治疗胰岛素抵抗和糖尿病中的有效性。

本发明的特点为应用具有保肝效用的齐墩果酸和维甲酸联合应用，治疗胰岛素抵抗和糖尿病，与现有糖尿病治疗药物相比，既保证了改善胰岛素抵抗和降血糖的有效性，又可发挥齐墩果酸的保肝效用。

附图说明

图1是齐墩果酸结构式。

图2是维甲酸结构式。

图3是齐墩果酸和维甲酸联合应用降血糖效果图。

图4是齐墩果酸和维甲酸联合应用增强蛋白激酶B磷酸化图。

具体实施方式

下面通过实例对本发明做进一步说明，其目的在于更好的理解本发明的内容，而非限制本发明的保护范围。

实施例

1.实验仪器

血糖测定仪（美国强生公司）、精密电子天平、1ml注射器等。

2.实验动物与材料

2.1实验动物

SD大鼠，清洁级，雄性，体重180±220g，有第四军医大学实验动物中心提供。

BRL-3A大鼠正常肝细胞系，购于武汉细胞典藏中心。

2.2实验材料

生理盐水、苦味酸、血糖试纸、胰岛素。

3.实验方法

选用40只SD大鼠，清洁级、雄性、体重180±220g，随机分为正常对照组（8只）和模型组（32），分别标记。模型组动物腹腔注射链脲佐菌素构建糖尿病动物模型。待模型组动物血糖升高，达到糖尿病诊断标准后，将模型组动物随机分为阳性对照组（8只）、齐墩果酸治疗组（8只）、维甲酸治疗组（8只）和齐墩果酸和维甲酸联合治疗组（8只），齐墩果酸治疗组动物每天腹腔注射20mg/kg齐墩果酸，维甲酸治疗组动物每天腹腔注射20mg/kg维甲酸治疗组，齐墩果酸和维甲酸联合治疗组每天腹腔注射10mg/kg齐墩果酸和10mg/kg维甲酸（两者的质量比为1∶1），持续2周。阳性对照组动物注射同样体积的给药溶剂。2周后，测定空腹血糖水平。

用DMEM培养基（加10%胎牛血清）在6孔板里培养大鼠正常肝细胞系（BRL-3A），当细胞生长至80-90%密度时，换成无血清DMEM培养基，用无血清DMEM培养基溶解不同浓度的齐墩果酸和维甲酸培养细胞24小时，培养结束后，用100nM胰岛素刺激15分钟，加入细胞裂解缓冲液，收集裂解细胞，进行蛋白检测（Western blot），测定蛋白激酶B的磷酸化水平。

4.实验结果

4.1如图3所示，阳性组动物平均空腹血糖值为24.62±2.26mmol/L，齐墩果酸治疗组动物平均空腹血糖值为20.06±1.48mmol/L，维甲酸治疗组动物平均空腹血糖值为20.36±1.04mmol/L，齐墩果酸和维甲酸联合治疗组动物平均空腹血糖值为12.30±3.23mmol/L。

4.2如图4所示，与正常对照相比，齐墩果酸和维甲酸联合处理组胰岛素刺激的蛋白激酶B磷酸化水平明显增高。

另外，将齐墩果酸和维甲酸分别取在组合物中的质量百分比为40％和60％；齐墩果酸和维甲酸分别取在组合物中的质量百分比为60％和40％；对上述两种不同组分的组合物进行试验，与单一使用齐墩果酸或维甲酸相比同样取得了较好的效果。

可见，本发明利用齐墩果酸和维甲酸联合用于治疗胰岛素抵抗和糖尿病的药物中是可行的。

Claims (3)

1.一种用于治疗胰岛素抵抗和糖尿病的组合物，其特征在于：该组合物由齐墩果酸和维甲酸组成，所述的齐墩果酸在组合物中的质量百分比为40%‐60%，维甲酸在组合物中的质量百分比为40%‐60%。

2.根据权利要求1所述的用于治疗胰岛素抵抗和糖尿病的组合物，其特征在于：所述的齐墩果酸、维甲酸在组合物中的质量百分比均为50%。

3.一种如权利要求1所述的组合物在制备治疗胰岛素抵抗和糖尿病的药物中的用途。

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