CN102718829A

CN102718829A - 牛磺熊去氧胆酸钠的制备方法

Info

Publication number: CN102718829A
Application number: CN2012101626935A
Authority: CN
Inventors: 江崇波
Original assignee: HANGZHOU BAOJI BIO-TECHNOLOGY CO LTD
Current assignee: HANGZHOU BAOJI BIO-TECHNOLOGY CO LTD
Priority date: 2012-05-23
Filing date: 2012-05-23
Publication date: 2012-10-10
Anticipated expiration: 2032-05-23
Also published as: CN102718829B

Abstract

本发明提出了一种牛磺熊去氧胆酸钠的制备方法，包括：(1)以熊去氧胆酸为原料，经过乙酰化、酰氯化反应得到混合酸酐溶液；(2)将牛磺酸溶于碳酸钠溶液中，得到牛磺酸的碳酸钠溶液；将所述牛磺酸的碳酸钠溶液滴加到步骤(1)中的混合酸酐溶液中，搅拌，滤除沉淀得滤液；(3)将步骤(2)中的滤液的pH调整为6～7，浓缩干燥得牛磺熊去氧胆酸粗品干燥物；(4)将步骤(3)中的浓缩干燥物脱盐纯化和重结晶，即得牛磺熊去氧胆酸。本发明成本低，工艺路线短，得率高达78％，适于工业化规模生产。

Description

牛磺熊去氧胆酸钠的制备方法

技术领域

本发明涉及医药领域，特别是指一种牛磺熊去氧胆酸钠的制备方法。

背景技术

牛磺熊去氧胆酸(tauroursodeoxycholicacid)是熊胆汁的主要有效成分，也是人工合成熊胆的主要成分，广泛存在于人和多种动物胆汁中的一种结合型胆汁酸，有着多种生理药理作用，该药及其制剂在国外已有二十年的上市临床经验，主要用于固醇性胆囊结石、胆汁郁积性肝病(如：原发性胆汁性肝硬化)、胆汁反流性胃炎、自身免疫性肝炎(AIH)、原发性胆汁性肝硬化(PBC)、原发性硬化性胆管炎(PSC)、慢性肝炎(乙肝、丙肝等)、酒精性脂肪肝、非酒精性脂肪肝、药物性肝损害、肝移植术前后预防及治疗并发症等。该药于1992年由Bruschettini S.R.L意大利贝斯迪大药厂首次注册上市，2007年获准在中国销售，目前在我国还没有人进行仿制药新药注册。

近年来人们对动物保护的关注，使天然熊胆备受热议，人工熊胆的开发是大势所趋，其主要成分牛磺熊去氧胆酸的合成工艺研究也成热门课题。国内外报道的文献主要有四种化学半合成方法：

1、以熊去氧胆酸为原料，先与氯甲酸乙酯形成混酐，再与牛磺酸钠反应合成牛磺熊去氧胆酸，最后用离子交换的方法合成牛磺熊去氧胆酸二水化合物；缺点是离子交换柱装柱及再生较麻烦。

2、熊去氧胆酸和牛磺酸在碱性条件下分别在EEDQ(N-ethoxy-carbonyl-ethoxy-1，2-dihydro-quinoline)或DEPC(diethylphosphorocyanidate)作为缩合剂制备牛磺熊去氧胆酸；所需EEDQ和DEPC，优点是反应条件温和。但价格昂贵，制备较繁琐。

3、熊去氧胆酸和2，2’-二硫二苯并噻唑在三乙胺和三苯膦作用下缩合，得熊去氧胆酸-2-苯并噻唑硫酯，再与碱性牛磺酸溶液反应即可得牛磺熊去氧胆酸。价格昂贵、制备复杂。

4、直接以禽胆汁为原料，经重铬酸钠氧化、金属钠还原二个过程制得牛磺熊去氧胆酸粗品，进一步纯化后得牛磺熊去氧胆酸。禽胆汁含有多种胆汁酸，成分复杂，经二次强烈氧化还原反应，甘氨型胆汁酸与牛磺酸型胆汁酸很难分离纯化，不宜制成高纯度牛磺酸结合型单体化学原料药。

发明内容

本发明提出一种牛磺熊去氧胆酸钠的制备方法，解决了现有技术中分离纯化困难的技术问题，且该方法简单，成本低。

本发明的技术方案是这样实现的：

一种牛磺熊去氧胆酸钠的制备方法，包括：

(1)以熊去氧胆酸为原料，经过乙酰化、酰氯化反应得到混合酸酐溶液；

(2)将牛磺酸溶于碳酸钠溶液中，得到牛磺酸的碳酸钠溶液；将所述牛磺酸的碳酸钠溶液滴加到步骤(1)中的混合酸酐溶液中，搅拌，滤除沉淀得滤液；

(3)将步骤(2)中的滤液的pH调整为6～7，浓缩干燥得牛磺熊去氧胆酸粗品干燥物；

(4)将步骤(3)中的浓缩干燥物脱盐纯化和重结晶，即得牛磺熊去氧胆酸。

作为优选的技术方案，所述步骤(1)中的乙酰化、酰氯化的具体过程如下：

在反应釜中加入质量比为8～10∶1的丙酮和熊去氧胆酸，分散均匀，冷却至-5～-10℃，得到冷却后的混合液；向冷却后的混合液中滴加用丙酮稀释后的三乙胺溶液，滴加完毕后再滴加氯甲酸乙酯，继续在-5～-10℃搅拌，过滤除去三乙胺盐，过滤后的滤液即为混合酸酐溶液；其中三乙胺与熊去氧胆酸的质量比为2～3∶10；三乙胺与用于稀释的丙酮的体积比为3∶2。

作为优选的技术方案，所述步骤(3)使用盐酸调节pH。

作为优选的技术方案，所述步骤(3)中的浓缩干燥为，将调节pH后的滤液蒸干，然后在70℃～90℃下减压抽干。

作为优选的技术方案，所述脱盐纯化的具体过程如下，向步骤(3)中的牛磺熊去氧胆酸粗品干燥物中加入无水乙醇，70～90℃回流处理，待盐松散后过滤，除盐和未反应的牛磺酸，在滤液搅拌下加入乙酸乙酯-丙酮混合溶液中，剧烈搅拌，产生白色沉淀，室温下静置12h～24h，吸取上层液，过滤收集滤饼；其中牛磺熊去氧胆酸粗品干燥物与无水乙醇的质量体积比1∶4～5g/L。

作为优选的技术方案，所述重结晶的具体过程如下，将所述滤饼用水溶解，再加入丙酮溶液中搅拌，2℃～5℃冷藏8h～12h，过滤得白色浆状物，70～90℃真空干燥，粉碎；其中水与丙酮溶液的体积比为1∶5～10。

作为优选的技术方案，所述的乙酸乙酯-丙酮为体积比为50∶50的乙酸乙酯和丙酮的混合液。

作为优选的技术方案，所述步骤(2)中的碳酸钠溶液为1mol/L；所述牛磺酸与碳酸钠溶液的质量体积比为18～23∶100g/mL。

本发明与现有技术相比，具有如下有益效果：

(1)本发明制备方法中的纯化工艺采用二次结晶法，而不是柱层析法，不仅避免了装柱及活化处理的麻烦，而且采用的结晶废液(如丙酮、乙酸乙酯等)，在生产完毕后，可以用精馏塔回收套用，进行再利用，大大降低生产成本；

(2)本发明制备方法将牛磺熊去氧胆酸缩合反应真空抽干，改进为放出静态隔膜真空干燥，节省了干燥时间，降低能源消耗；

(3)本发明制备方法工艺简单，得率高达78％，普通工艺为64％左右；溶剂廉价、常用、易得，可以精馏回收套用，利用率达60％，大大降低生产成本凸显经济效益，适于工业化规模生产。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明的反应式。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

一种牛磺熊去氧胆酸钠的制备方法，包括：

(1)10g熊去氧胆酸原料(25.5mmol)，2.7g三乙胺(26.5mmol)溶于丙酮100ml溶液中，冷却至-5～-10℃，向溶液中滴加2.9g氯甲酸乙酯(25.97mmol)，滴加完毕后继续在-5～-10℃搅拌20min，过滤除去三乙胺盐，滤液备用；

(2)牛磺酸缩合反应

将牛磺酸4g(31.875mmol)溶于22ml 1mol/L碳酸钠溶液中，滴加到前项所得混合酸酐溶液中，在20～30℃下30min内均速添加完毕，快速搅拌3h-4h，滤除沉淀，滤液备用；

(3)调酸与浓缩干燥

上述滤液用2mol/LHCL溶液调pH6-7，回收蒸干溶液，80℃下继续减压抽干，得牛磺熊去氧胆酸干燥物；所述的减压抽干可以选取的温度范围为70℃～90℃，本实施例中选取80℃；

(4)脱盐纯化

向上述干燥物中添加40ml无水乙醇80℃左右进行回流处理1h，待盐松散后过滤除盐和未反应的牛磺酸，将滤液搅拌下加入1000ml乙酸乙酯-丙酮(50∶50v/v)混合溶液中，剧烈搅拌，产生大量白色沉淀，室温下静置一夜，吸取上层液，过滤收集滤饼，待进一步纯化；所述的回流处理的温度可以选取70℃～90℃，本实施例中选取80℃，回流处理的时间根据具体情况可以为1h-2h；

(5)精制重结晶

上述滤饼用100ml水溶解，加入900ml丙酮溶液中搅拌，2℃～5℃冷藏12h，过滤得白色浆状物，80℃真空干燥，粉碎得牛磺熊去氧胆酸。所述的真空干燥的温度可以选取70～90℃，本实施例中选取80℃。

产品得率为76％。

实施例2

下面以中试放大生产为实例，对本发明的牛磺熊去氧胆酸钠大生产工艺做进一步说明。

(1)对150L反应釜进行干燥处理，投入90L无水丙酮，在搅拌下投入10公斤熊去氧胆酸待分散均匀后，制冷泵预设-20℃进行冷循环，至釜内温度降至-5℃时，将2.7公斤三乙胺用2L丙酮稀释后，用恒压漏斗进行滴加，20min内均速滴完，保持釜内温度-5℃～-10℃，用2L丙酮冲洗恒压漏斗，取2.9公斤氯甲酸乙酯用2-3L丙酮稀释后加入恒压漏斗中，1h内滴加到反应釜中，保持温度-3℃～-5℃反应20min后，放出反应液过滤除去胺盐等沉淀物，滤液备用，直接用于下一步反应；

(2)将上述滤液转移至250L反应釜中，保持釜内温度20℃～30℃；称取4公斤牛磺酸和2.65公斤碳酸钠，用20L 80℃去离子水溶解，利用反应釜高位槽进行滴加，高速搅拌下，3h内添加完毕；放缓搅拌速度再反应2.5h，停止搅拌，放出反应液过滤，滤除未反应的牛磺酸，滤液备用；

(3)前步滤液用2mol/LHCL溶液调pH6-7，返回150L反应釜中减压回收溶剂，待没有气泡产生时，迅速放出浓缩液，将高温薄膜放于不锈钢方盘上，将浓缩液涂布在隔离膜上，进行真空干燥，80℃干燥4h后，取出干燥物粗粉，得粗品牛磺熊去氧胆酸钠；

(4)以上粗品置150L拥有回收装置的反应釜中，添加40L无水乙醇80℃左右进行回流处理1h，待溶液分层，下层盐松散后过滤除盐和未反应的牛磺酸，将滤液搅拌下加入500L乙酸乙酯-500L丙酮混合结晶溶液中，剧烈搅拌，产生大量白色絮状沉淀，室温下静置一夜，吸取上层液，剩余沉淀层经过滤收集滤饼；

(5)上述滤饼用100L去离子水彻底溶解后，搅拌下加入900L丙酮溶液中不断搅拌，进行二次结晶纯化；2℃-5℃冷藏一夜，结晶液底部形成白色浆状物，刮去浆状物，80℃真空干燥2h，取出蜂窝状干燥物，粉碎得牛磺熊去氧胆酸钠。

产品得率为78％。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种牛磺熊去氧胆酸钠的制备方法，包括：

2.根据权利要求1所述的一种牛磺熊去氧胆酸钠的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中的乙酰化、酰氯化的具体过程如下：

在反应釜中加入质量比为8～10∶1的丙酮和熊去氧胆酸，分散均匀，冷却至-5～-10℃，得到冷却后的混合液；向冷却后的混合液中滴加用丙酮稀释后的三乙胺溶液，滴加完毕后再滴加氯甲酸乙酯，继续在-5～-10℃搅拌，过滤，过滤后的滤液即为混合酸酐溶液；其中三乙胺与熊去氧胆酸的质量比为2～3∶10；三乙胺与用于稀释的丙酮的体积比为3∶2。

3.根据权利要求1所述的一种牛磺熊去氧胆酸钠的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)使用盐酸调节pH。

4.根据权利要求1所述的一种牛磺熊去氧胆酸钠的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中的浓缩干燥为，将调节pH后的滤液蒸干，然后在70℃～90℃下减压抽干。

5.根据权利要求1所述的一种牛磺熊去氧胆酸钠的制备方法，其特征在于，所述脱盐纯化的具体过程如下，向步骤(3)中的牛磺熊去氧胆酸粗品干燥物中加入无水乙醇，70～90℃回流处理，待盐松散后过滤，除盐和未反应的牛磺酸，在滤液搅拌下加入乙酸乙酯-丙酮混合溶液中，剧烈搅拌，产生白色沉淀，室温下静置12～24h，吸取上层液，过滤收集滤饼；其中牛磺熊去氧胆酸粗品干燥物与无水乙醇的质量体积比1∶4～5g/L。

6.根据权利要求5所述的一种牛磺熊去氧胆酸钠的制备方法，其特征在于，所述重结晶的具体过程如下，将所述滤饼用水溶解，再加入丙酮溶液中搅拌，2℃～5℃冷藏8～12h，过滤得白色浆状物，70～90℃真空干燥，粉碎；其中水与丙酮溶液的体积比为1∶5～10。

7.根据权利要求5所述的一种牛磺熊去氧胆酸钠的制备方法，其特征在于，所述的乙酸乙酯-丙酮为体积比为50∶50的乙酸乙酯和丙酮的混合液。

8.根据权利要求1所述的一种牛磺熊去氧胆酸钠的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中的碳酸钠溶液为1mol/L；所述牛磺酸与碳酸钠溶液的质量体积比为18～23∶100g/mL。

9.根据权利要求1～8任一权利要求所述的一种牛磺熊去氧胆酸钠的制备方法，其特征在于，制备得到的牛磺熊去氧胆酸钠应用于人工熊胆的配方中或原料药及其制剂中。