CN102715390A

CN102715390A - 一种护肝功能食品及其制备方法

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Publication number: CN102715390A
Application number: CN201210135110XA
Authority: CN
Inventors: 韩定献; 刘银水; 周军; 李秋莲; 田军; 霍春生; 谭照生
Original assignee: Hubei Yan Di Also Known As Shen Nong A Legendary Ruler's Agricultural Science And Technology Ltd Co; Huazhong University of Science and Technology
Current assignee: Hubei Yan Di Also Known As Shen Nong A Legendary Ruler's Agricultural Science And Technology Ltd Co; Huazhong University of Science and Technology
Priority date: 2012-05-03
Filing date: 2012-05-03
Publication date: 2012-10-10

Abstract

本发明公开了一种护肝功能食品及其制备方法，该护肝功能食品采用女贞子提取的齐墩果酸和茯苓、香菇提取的多糖作为主要原料，添加赋形辅料和维生素等制成，其有效成分结构明确，护肝作用确切，剂量和剂型稳定，防治效果显著。该功能食品不仅能降低肝脏MDA和TG含量，具有保肝护肝作用，而且安全无毒，长期服用无任何毒副作用。

Description

一种护肝功能食品及其制备方法

技术领域

本发明采用现代化生化技术，用女贞子提取的齐墩果酸和茯苓、香菇制得的多糖作为主要原料，制备出具有降低肝脏MDA和TG含量、保肝护肝作用的功能食品。

背景技术

我国是肝炎病高发区，尤其是乙型病毒性肝炎(简称乙肝)的重疫区。乙肝是危害人类健康的大敌，也是我国传染病中危害最大的疾病之一。据报道，我国约有乙型病毒携带者1.2亿(其中1/4的人终究会发展成慢性肝炎病)，慢性肝炎病患者约1200万例，其中每年因肝病而死亡的人数达30万，且40％携带乙肝病毒的母亲可将病毒传染给婴儿。研制出对乙肝病毒有切实疗效的药物和具有护肝作用的功能食品，是一件造福人民的大事，也是医疗卫生工作者的一项身份迫切的战略任务。

目前我国具有护肝作用的功能食品品种较少，这些功能食品或者是复方制品，或者是作用成分未明的食品，虽然经过人体或动物实验证明具有护肝作用，但尚不明确具有该项功能的有效成分或功能因子的结构极其含量标准、检测方法，只能进行功能性检测，而功能性检测受时间、经费等因素的影响。如下护肝功能食品：复方溪灵冲剂主要由溪黄草、黑灵芝、绞股蓝、茯苓、桂圆肉、枸杞子、香菇、银耳等混合而成，乳鸽保健酒是以乳鸽为主要药料，配以枸杞子、红枣、生茅根等中草药，经烘烤、三级浸泡、过滤制成，福星牌肝保胶囊是以泥鳅酶解蛋白为主要原料，上述功能食品虽然有保肝降酶的功能，但普遍存在成分复杂，有效成分不明的缺点，只能属于第二代功能食品。而有效成分结构和含量明确的功能食品，即第三代功能食品在我国的研究与开发较少，落后于欧美和日本。这使我国功能食品的开发与世界先进水平相比还有很大的差距，不利于打进国际市场。

发明内容

本发明的任务是提供一种具有护肝作用的功能食品，使该功能食品具有能显著降低酒精性肝损伤小鼠肝组织中MDA含量和TG含量，显著升高肝组织中还原型GSH含量，减轻肝组织脂肪变性程度，对酒精性肝损伤具有良好的保护作用，安全无毒，生产工艺简单、成本低廉、服用方便、效果显著等特点。

实现本发明的技术方案是：

一种具有护肝作用的功能食品，其特征在于，由以下重量配比的组分组成：

齐墩果酸10-50％，

茯苓多糖5％-25％，

香菇多糖5％-25％；

淀粉0-80％，

增稠剂0-10％，

调味剂0-5％，

维生素0-2％，

食用色素0-2％，

防腐剂0-1％，

食用香精0-2％。

2.根据权利要求1所述的具有护肝作用的功能食品，其特征在于，所述的齐墩果酸是从女贞子中提取得到的齐墩果酸。

3.根据权利要求1所述的具有护肝作用的功能食品，其特征在于，所述的茯苓多糖按以下方法制得：将茯苓切成碎片，于液体A中浸泡，40-80℃加热提取2-3次，每次1-6h，提取结束后过滤，滤液加入液体B进行沉淀结晶，并用液体C进行洗涤得茯苓多糖，所述的用于提取的液体A可以是水或含有复合酶的水溶液，所述的复合酶由木瓜蛋白酶与纤维素酶按质量比为2∶1-1∶1混合而成；所述的用于沉淀结晶的液体B可以是乙醇、丙酮或乙醚；所述的用于洗涤的液体C可以是乙醇、丙酮或乙醚。

4.根据权利要求1所述的具有护肝作用的功能食品，其特征在于，所述的香菇多糖按以下方法制得：

将香菇粉碎，加入10-30倍质量的水，调节pH值为5.5-6.5，然后加入复合酶，所述的复合酶由木瓜蛋白酶与纤维素酶按质量比为2∶1-1∶1混合而成，控制复合酶质量分数为0.1％-0.6％(复合酶质量占香菇粉质量的百分比)，于40-65℃下加热2-8小时后，将温度提高至70-100℃，加热5-30min灭酶，灭酶结束后冷却至室温，离心取上清液，向上清液中加入澄清剂澄清，过滤后取滤液加热浓缩得香菇多糖，所用的澄清剂可以是壳聚糖、凝胶、琼脂、ZTC 1+1天然澄清剂、鸡蛋清、羧甲基纤维素钠、明胶、海藻胶或果胶。

5.根据权利要求1所述的具有护肝作用的功能食品，其特征在于，淀粉可以用下列辅料代替：面粉、豆粉、魔芋粉、芝麻粉或花生粉。

6.根据权利要求1所述的具有护肝作用的功能食品，其特征在于，所述的增稠剂可以是羧甲基纤维素钠、琼脂、明胶、海藻胶或果胶。

7.根据权利要求1所述的具有护肝作用的功能食品，其特征在于：所述的调味剂可以是下列物质中的一种或多中的混合物：食盐、糖、蜂蜜、奶粉、蛋白糖、糖精、味精、鸡精、胡椒粉、花椒粉、葱、姜粉、蒜粉、薄荷。

8.根据权利要求1所述的具有护肝作用的功能食品，其特征在于：所述的维生素可以是维生素A、维生素B、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K、维生素P中的一种或多种；所述的食用色素可以是胡萝卜素、焦糖色素、巧克力素、咖啡色素、橘子色素中的一种或多种。

9.根据权利要求1所述的具有护肝作用的功能食品，其特征在于，所述的食用香精可以是荔枝香精、苹果香精、菠萝香精或草莓香精；所述的防腐剂可以是苯甲酸盐、抗菌肽或山梨酸盐。

10.一种具有护肝作用的功能食品的制备方法，包括以下步骤：

步骤一：将干女贞子用粉碎机粉碎，然后用浓度为60-80％乙醇回流提取2-3次，每次1-3小时，过滤，合并滤液；

步骤二：加入H₂SO₄至滤液中H₂SO₄最终质量百分比浓度为5％-10％，搅拌，回流反应2-4小时，回收乙醇；

步骤三：沉淀物用适量pH为8-9的NaOH水溶液洗涤，洗至滤液成中性，再加热水充分洗涤，过滤，得粗品，活性炭脱色；

步骤四：用90-99％乙醇重结晶1-2次，得白色晶体，即齐墩果酸；

步骤五：将香菇粉碎，加入10-30倍质量的水，调节pH值为5.5-6.5，然后加入复合酶，所述的复合酶由木瓜蛋白酶与纤维素酶按质量比为2∶1-1∶1的比例混合而成，控制复合酶质量分数，使复合酶占香菇粉的质量分数为0.1％-0.6％，即复合酶质量占香菇粉质量的百分比为0.1％-0.6％，于40-65℃下加热2-8小时后，将温度提高至70-100℃，加热5-30min灭酶，灭酶结束后冷却至室温，离心取上清液，向上清液中加入澄清剂澄清，过滤后取滤液加热浓缩得香菇多糖，所用的澄清剂可以是壳聚糖、凝胶、琼脂、ZTC 1+1天然澄清剂、鸡蛋清、羧甲基纤维素钠、明胶、海藻胶或果胶；

步骤六：将茯苓切成碎片，于液体A中浸泡，40-80℃加热提取2-3次，每次1-6h，提取结束后过滤，滤液加入液体B进行沉淀结晶，并用液体C进行洗涤得茯苓多糖，用于提取的液体A可以是水或含有复合酶的水溶液，所述的复合酶由木瓜蛋白酶与纤维素酶按质量比为2∶1-1∶1的比例混合而成；用于沉淀结晶的液体B可以是乙醇、丙酮或乙醚；用于洗涤的液体C可以是乙醇、丙酮或乙醚；

步骤七：按照下述各组分及含量(重量百分比)混合均匀后制成相应剂型产品：

齐墩果酸10％-50％，

茯苓多糖5％-25％，

香菇多糖5％-25％；

淀粉0-80％，

增稠剂0-10％，

增味剂0-5％，

维生素0-2％，

食用色素0-2％，可以是：胡萝卜素、焦糖色素、巧克力素、咖啡色素、橘子色素；

食用香精0-2％，

防腐剂0-1％。

该具有护肝作用的功能食品有效成分结构明确、护肝作用确切、剂量和剂型稳定、防治效果显著的护肝功能食品。其有效成分为化学结构已知的齐墩果酸，齐墩果酸的结构见式I，并配以茯苓、香菇提取出的多糖作为营养添加剂。齐墩果酸在该功能食品中具有稳定的组成，含量标准明确，检测方法简便易行。

混匀后可制成片剂、散剂、胶囊、丸剂、冲剂、饼干、糕点、方便面、粥糊或供调糊用的干粉等各种形式的功能食品。本成品服用剂量为成人0.1-100克/天。

据《中药大辞典》等文献记载，女贞子归肝、肾经，具有滋补肝肾、明目乌发的功效，用于眩晕耳鸣，腰膝酸软，虚发早白，目暗不明。现代药理研究证明，女贞子的药效成分齐墩果酸对实验性急性肝损伤具有一定的治疗作用，可降低谷-丙转氨酶的活性，临床用于急、慢性肝炎的治疗，疗效颇佳。

本功能食品的中草药组分包括女贞子和茯苓、香菇，采用现代化生化技术提取其有效成分，按比例混合并加入有关辅料后制成。从女贞子中提取齐墩果酸的传统工艺采用柱层析法，该法成本较高，繁琐费时，不适合于工业生产。本发明采用溶剂提取法提取齐墩果酸，成本低廉，操作简便易行，所得产品纯度高。本产品配方中女贞子归肝、肾经，功能重在滋补肝肾，为君药；茯苓归心、肺、脾、肾经，功能重在利水渗湿，健脾宁心，为臣药。君、臣药以心、肺、肝、脾、肾经络为纽带，滋肝肾，补脾益肺，调补心肺肝脾肾五脏。佐以香菇扶正补虚、健脾益气，进一步加强护肝作用。功能学实验结果表明，该功能食品能显著降低酒精性肝损伤小鼠肝组织中MDA含量和TG含量，显著升高肝组织中还原型GSH含量，减轻肝组织脂肪变性程度，对酒精性肝损伤具有良好的保护作用。毒理学实验结果表明，将该样品按0.38、0.75、1.50g/kg BW剂量对SPF级Wistar大鼠连续给予30天，动物未见明显的中毒症状和死亡。受试样品各剂量组大鼠体重、进食量、食物利用率、血液学、血液生化、脏器重量、脏/体比值以及病理组织学等指标与阴性对照组比较，差异均无显著性。因此，该功能食品安全无毒，长期服用无任何毒副作用。总之，该功能食品生产工艺简单、成本低廉、服用方便、效果显著，具有推广应用的价值。

下面介绍功能学实验结果。

该功能食品对乙醇引起小鼠肝损伤的抑制作用：取SPF级昆明种雌性小鼠(20±2g)共50只，随机分成五组，即受试物低、中、高剂量组，空白对照组和模型对照组，每组10只。在受试物低、中、高剂量组中，将本功能食品分别配制成浓度为0.75％、1.5％、2.25％的溶液，每日经口灌胃给予，低、中、高剂量组剂量分别为0.15、0.30、0.45g/kg。空白对照组和模型对照组给予等量蒸馏水。试验第30天模型组及受试物各剂量组一次性灌胃给予50％乙醇14ml/kg.BW，空白对照组给予等容量的蒸馏水，禁食16小时称重后颈椎脱臼处死动物。肝脏称重计算脏/体比值，取0.5g肝脏制备肝匀浆后进行各项指标(MDA、还原型GSH、TG)的检测及肝脏病理组织学检查。实验结果表明，与肝损伤模型对照组比较，受试物低、中剂量组肝匀浆MDA值降低，低剂量组还原型GSH值升高；低、中、高剂量组TG值降低，差异均有显著性。因此，该受试样品对小鼠酒精性肝损伤具有良好的保护作用。

表1各组小鼠肝匀浆中MDA、还原型GSH、TG测定值

*与模型对照组比较P＜0.05 **与模型对照组比较P＜0.01

#与空白对照组比较P＜0.05 ##与空白对照组比较P＜0.01

具体实施方式

实施例1

将3kg干女贞子用粉碎机粉碎，然后用70％乙醇回流提取3次，每次2小时，过滤，合并滤液；②加入H₂SO₄至滤液中H₂SO₄最终质量百分比浓度为8％，搅拌，回流反应3小时，回收乙醇；③沉淀物用适量pH＝8的NaOH水溶液洗涤，洗至滤液成中性，再加热水充分洗涤，过滤，得粗品，活性炭脱色；④95％乙醇重结晶2次，得白色晶体，即齐墩果酸；⑤将3kg香菇粉碎至80目，加入20倍量的重蒸水以及0.4％的复合酶(木瓜蛋白酶∶纤维素酶＝2∶1)。于50℃下加热3小时后，将温度提高至85℃，加热20min灭酶。灭酶结束后冷却至室温，离心取上清液，向上清液中加入壳聚糖进行澄清，过滤后取滤液加热浓缩得香菇多糖。⑥将1kg茯苓切成碎片，于4倍量的水中浸泡，加热至50℃提取3次，每次2h，提取结束后过滤，滤液加入乙醇至醇含量80％进行沉淀结晶，沉淀物用80％的乙醇溶液进行洗涤得茯苓多糖。⑦按照下述各组分及含量(重量百分比)：齐墩果酸40％，茯苓多糖20％，香菇多糖20％，面粉10％，羧甲基纤维素钠5％，蜂蜜3％，维生素C1％，胡萝卜素0.5％，荔枝香精0.25％，苯甲酸盐0.25％，混匀制成片剂。本成品服用剂量为成人0.3克/天。

实施例2

将3kg干女贞子用粉碎机粉碎，然后用80％乙醇回流提取2次，每次3小时，过滤，合并滤液；②加入H₂SO₄至滤液中H₂SO₄最终质量百分比浓度为6％，搅拌，回流反应2小时，回收乙醇；③沉淀物用适量pH＝9的NaOH水溶液洗涤，洗至滤液成中性，再加热水充分洗涤，过滤，得粗品，活性炭脱色；④90％乙醇重结晶3次，得白色晶体，即齐墩果酸；⑤将2kg香菇粉碎至80目，加入15倍量的重蒸水以及0.6％的复合酶(木瓜蛋白酶∶纤维素酶＝2∶1)，于60℃下加热2.5小时后，将温度提高至85℃，加热20min灭酶。灭酶结束后冷却至室温，离心取上清液，向上清液中加入鸡蛋清进行澄清，过滤后取滤液加热浓缩得香菇多糖。⑥将1kg茯苓切成碎片，于6倍量的水中浸泡，加热至60℃提取2次，每次3h，，提取结束后过滤，滤液加入乙醇至醇含量75％进行沉淀结晶，沉淀物用80％的乙醇溶液进行洗涤得茯苓多糖。⑦按照下述各组分及含量(重量百分比)：齐墩果酸50％，茯苓多糖15％，香菇多糖15％，花生粉5％，琼脂7％，食盐3％，维生素D2％，巧克力素2％，苹果香精0.5％，山梨酸盐0.5％，混匀制成胶囊。本成品服用剂量为成人0.25克/天。

实施例3

①将2kg干女贞子用粉碎，然后用60％乙醇回流提取3次，每次2.5小时，过滤，合并滤液；②加入H₂SO₄至滤液中H₂SO₄最终质量百分比浓度为8％，搅拌，回流反应2小时，回收乙醇；③沉淀物应适量pH＝8.5的NaOH水溶液洗涤，洗至滤液成中性，再加热水充分洗涤，过滤，得粗品，活性炭脱色；④95％乙醇重结晶2次，得白色晶体，即齐墩果酸；⑤将2kg香菇粉碎，然后加入10倍量的水以及0.5％的复合酶(木瓜蛋白酶∶纤维素酶＝3∶2)，于40℃下加热4小时后，将温度提高至95℃，加热10min灭酶。灭酶结束后冷却至室温，离心取上清液，向上清液中加入琼脂进行澄清，过滤后取滤液加热浓缩得香菇多糖。⑥将2kg茯苓切成碎片，于30％乙醇中浸泡，加热至60℃提取3次，每次3h，提取结束后过滤，滤液加入乙醇至醇含量75％沉淀结晶，并用75％的乙醇溶液进行洗涤，得茯苓多糖。⑦按照下述各组分及含量(重量百分比)：齐墩果酸20％，茯苓多糖10％，香菇多糖10％，淀粉40％，果胶10％，胡椒粉2.5％，维生素E2.5％，咖啡色素2％，菠萝香精2％，抗菌肽1％，混匀制成糕点。

Claims

1. 一种具有护肝作用的功能食品，其特征在于，由以下重量配比的组分组成：

齐墩果酸10-50%，

茯苓多糖5%-25%，

香菇多糖5%-25%；

淀粉0-80%，

增稠剂0-10%，

调味剂0-5%，

维生素0-2%，

食用色素0-2%，

防腐剂0-1%，

食用香精0-2%。

3.根据权利要求１所述的具有护肝作用的功能食品，其特征在于，所述的茯苓多糖按以下方法制得：将茯苓切成碎片，于液体A中浸泡，40-80^oC加热提取2-3次，每次1-6h，提取结束后过滤，滤液加入液体B进行沉淀结晶，并用液体C进行洗涤得茯苓多糖，所述的用于提取的液体A可以是水或含有复合酶的水溶液，所述的复合酶由木瓜蛋白酶与纤维素酶按质量比为2：1-1：1混合而成；所述的用于沉淀结晶的液体B可以是乙醇、丙酮或乙醚；所述的用于洗涤的液体C可以是乙醇、丙酮或乙醚。

4.根据权利要求１所述的具有护肝作用的功能食品，其特征在于，所述的香菇多糖按以下方法制得：

将香菇粉碎，加入10-30倍质量的水，调节pH值为5.5-6.5，然后加入复合酶，所述的复合酶由木瓜蛋白酶与纤维素酶按质量比为2：1-1：1混合而成，控制复合酶质量分数为0.1%-0.6%（复合酶质量占香菇粉质量的百分比），于40-65^oC下加热2-8小时后，将温度提高至70-100^oC，加热5-30min灭酶，灭酶结束后冷却至室温，离心取上清液，向上清液中加入澄清剂澄清，过滤后取滤液加热浓缩得香菇多糖，所用的澄清剂可以是壳聚糖、凝胶、琼脂、ZTC 1+1 天然澄清剂、鸡蛋清、羧甲基纤维素钠、明胶、海藻胶或果胶。

5.根据权利要求１所述的具有护肝作用的功能食品，其特征在于，淀粉可以用下列辅料代替：面粉、豆粉、魔芋粉、芝麻粉或花生粉。

6.根据权利要求１所述的具有护肝作用的功能食品，其特征在于，所述的增稠剂可以是羧甲基纤维素钠、琼脂、明胶、海藻胶或果胶。

7.根据权利要求１所述的具有护肝作用的功能食品，其特征在于：所述的调味剂可以是下列物质中的一种或多中的混合物：食盐、糖、蜂蜜、奶粉、蛋白糖、糖精、味精、鸡精、胡椒粉、花椒粉、葱、姜粉、蒜粉、薄荷。

8.根据权利要求１所述的具有护肝作用的功能食品，其特征在于：所述的维生素可以是维生素A、维生素B、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K、维生素P中的一种或多种；所述的食用色素可以是胡萝卜素、焦糖色素、巧克力素、咖啡色素、橘子色素中的一种或多种。

9.根据权利要求１所述的具有护肝作用的功能食品，其特征在于，所述的食用香精可以是荔枝香精、苹果香精、菠萝香精或草莓香精；所述的防腐剂可以是苯甲酸盐、抗菌肽或山梨酸盐。

步骤一：将干女贞子用粉碎机粉碎，然后用浓度为60-80%乙醇回流提取2-3次，每次1-3小时，过滤，合并滤液；

步骤二：加入H₂SO₄至滤液中H₂SO₄最终质量百分比浓度为5%-10%，搅拌，回流反应2-4小时，回收乙醇；

步骤四：用90-99%乙醇重结晶1-2次，得白色晶体，即齐墩果酸；

步骤五：将香菇粉碎，加入10-30倍质量的水，调节pH值为5.5-6.5，然后加入复合酶，所述的复合酶由木瓜蛋白酶与纤维素酶按质量比为2：1-1：1的比例混合而成，控制复合酶质量分数，使复合酶占香菇粉的质量分数为0.1%-0.6%，即复合酶质量占香菇粉质量的百分比为0.1%-0.6%，于40-65^oC下加热2-8小时后，将温度提高至70-100^oC，加热5-30min灭酶，灭酶结束后冷却至室温，离心取上清液，向上清液中加入澄清剂澄清，过滤后取滤液加热浓缩得香菇多糖，所用的澄清剂可以是壳聚糖、凝胶、琼脂、ZTC 1+1 天然澄清剂、鸡蛋清、羧甲基纤维素钠、明胶、海藻胶或果胶；

步骤六：将茯苓切成碎片，于液体A中浸泡，40-80^oC加热提取2-3次，每次1-6h，提取结束后过滤，滤液加入液体B进行沉淀结晶，并用液体C进行洗涤得茯苓多糖，用于提取的液体A可以是水或含有复合酶的水溶液，所述的复合酶由木瓜蛋白酶与纤维素酶按质量比为2：1-1：1的比例混合而成；用于沉淀结晶的液体B可以是乙醇、丙酮或乙醚；用于洗涤的液体C可以是乙醇、丙酮或乙醚；

步骤七：按照下述各组分及含量（重量百分比）混合均匀后制成剂型产品：

齐墩果酸10%-50%，

茯苓多糖5%-25%，

香菇多糖5%-25%；

淀粉0-80%，

增稠剂0-10%，

增味剂0-5%，

维生素0-2%，

食用色素0-2%，可以是：胡萝卜素、焦糖色素、巧克力素、咖啡色素、橘子色素；

食用香精0-2%，

防腐剂0-1%。