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CN102711749A - 用于癌症治疗的色氨酸羟化酶抑制剂 - Google Patents

用于癌症治疗的色氨酸羟化酶抑制剂 Download PDF

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CN102711749A
CN102711749A CN2010800537524A CN201080053752A CN102711749A CN 102711749 A CN102711749 A CN 102711749A CN 2010800537524 A CN2010800537524 A CN 2010800537524A CN 201080053752 A CN201080053752 A CN 201080053752A CN 102711749 A CN102711749 A CN 102711749A
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aryl
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Lexicon Genetics Inc
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Abstract

本发明公开了用于癌症的治疗和/或管理的方法和组合物，其包含使用色氨酸羟化酶抑制剂。

Description

用于癌症治疗的色氨酸羟化酶抑制剂
本申请要求2009年11月5日提交的美国临时专利申请61/258,473号、2009年11月5日提交的61/258,476号和2010年2月11日提交的61/303,395号的优先权，所述临时专利申请的全部内容在此引为参考。
1.发明领域
本发明涉及色氨酸羟化酶抑制剂、包含它们的组合物及其用于癌症治疗的使用方法。
2.背景技术
神经递质血清素[5-羟色胺（5-HT）]参与多个中枢神经情绪控制方面，并参与调控睡眠、焦虑、酗酒、药物滥用、食物摄入和性行为。在外周组织中，血清素据报道牵涉血管紧张度、肠运动、一期止血和细胞介导的免疫应答的调控。Walther,D.J.等，Science299:76(2003)。
色氨酸羟化酶（TPH）催化血清素生物合成的限速步骤。已报道了TPH的两种同工型：TPH1，其表达在外周、主要是胃肠（GI）道中；以及TPH2，其表达在脑中。同上。同工型TPH1由tph1基因编码；TPH2由tph2基因编码。同上。
在某些癌症中涉及血清素合成和代谢的调节异常。例如可能沿着胃肠道并在肺中发生的类癌瘤以血清素生产为特征。当过度丰富的血清素进入体循环时，它引起所谓的“类癌综合征”，其以包括面红、腹泻和瓣膜损伤的症状为特征。在1960年代，研究人员报道了向类癌患者给药TPH抑制剂对氯苯基丙氨酸（pCPA）减轻了那些症状中的一部分。但是由于pCPA跨过血脑屏障，它的给药也引起不想要的心理效应，阻碍了其作为药物的使用。Cremata,V.Y.等，Clin.Pharmacol.Ther.7(6):768-76(1966)；Engelman,K.等，New Engl.J.Med.,277(21):1103-1108(1967)。最近，已经报道了据信更适合于制药应用的TPH抑制剂。参见例如美国专利申请公布US-2007-0191370-A1、美国专利7,553,840。
与血清素调节异常相关的更具破坏性的癌症是胆管癌，其是一种胆源癌症，治疗选择有限。Alpini,G.等，Cancer Res.,68(22):9184(2008)。最近，研究人员报道，胆管癌细胞系与正常胆管细胞相比表现出TPH1表达的增加。同上。他们也报道了胆管癌肿瘤的体内异种移植模型的pCPA治疗抑制了肿瘤生长。同上,在9191页。
最近的研究还表明血清素能够间接影响一些肿瘤的生长。参见例如Nocito,A.等，Cancer Res.68(13):5152-8(2008)（报道了血清素缺陷减缓了s.c.结肠肿瘤的生长）。一些癌症、包括神经内分泌肿瘤的血清素受体表达增加，并且已报道用血清素受体拮抗剂靶向这些肿瘤能够降低它们的增殖。参见Drozdov,I.等，Cancer 115(21):4934-4945(2009)。
3.发明概述
本发明部分涉及治疗和/或管理癌症的方法以及用于癌症治疗和/或管理的组合物。具体方法和组合物包含式I的化合物及其可药用盐：
Figure BDA00001690751800021
其中：A是任选被取代的环烷基、芳基或杂环；X是键（即A直接结合于D）、-O-、-S-、-C(O)-、-C(R4)=、=C(R4)-、-C(R3R4)-、-C(R4)=C(R4)-、-C≡C-、-N(R5)-、-N(R5)C(O)N(R5)-、-C(R3R4)N(R5)-、-N(R5)C(R3R4)-、-ONC(R3)-、-C(R3)NO-、-C(R3R4)O-、-OC(R3R4)-、-S(O2)-、-S(O2)N(R5)-、-N(R5)S(O2)-、-C(R3R4)S(O2)-或-S(O2)C(R3R4)-；D是任选被取代的芳基或杂环；R1是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基、烷基-杂环、芳基或杂环；R2是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基、烷基-杂环、芳基或杂环；R3是氢、烷氧基、氨基、氰基、卤素、羟基或任选被取代的烷基；R4是氢、烷氧基、氨基、氰基、卤素、羟基或任选被取代的烷基或芳基；每个R5独立地是氢或任选被取代的烷基或芳基；并且n是0-3。
4.详细描述
4.1.定义
除非另有指明，否则术语“烯基”是指具有2至20个（例如2至10或2至6个）碳原子并含有至少一个碳-碳双键的直链、支链和/或环状烃基。代表性的烯基部分包括乙烯基、烯丙基、1-丁烯基、2-丁烯基、异丁烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-甲基-1-丁烯基、2-甲基-2-丁烯基、2,3-二甲基-2-丁烯基、1-己烯基、2-己烯基、3-己烯基、1-庚烯基、2-庚烯基、3-庚烯基、1-辛烯基、2-辛烯基、3-辛烯基、1-壬烯基、2-壬烯基、3-壬烯基、1-癸烯基、2-癸烯基和3-癸烯基。
除非另有指明，否则术语“烷基”是指具有1至20个（例如1至10或1至4个）碳原子的直链、支链和/或环状（“环烷基”）烃。具有1至4个碳的烷基部分被称为“低级烷基”。烷基的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、戊基、己基、异己基、庚基、4,4-二甲基戊基、辛基、2,2,4-三甲基戊基、壬基、癸基、十一烷基和十二烷基。环烷基部分可以是单环或多环的，其实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基和金刚烷基。烷基部分的其他实例具有直链、支链和/或环状部分（例如1-乙基-4-甲基-环己基）。术语“烷基”包括饱和烃以及烯基和炔基部分。
除非另有指明，否则术语“烷氧基”是指-O烷基。烷氧基的实例包括-OCH3、-OCH2CH3、-O(CH2)2CH3、-O(CH2)3CH3、-O(CH2)4CH3和-O(CH2)5CH3。
除非另有指明，否则术语“烷基芳基”或“烷基-芳基”是指烷基部分与芳基部分结合。
除非另有指明，否则术语“烷基杂芳基”或“烷基-杂芳基”是指烷基部分与杂芳基部分结合。
除非另有指明，否则术语“烷基杂环”或“烷基-杂环”是指烷基部分与杂环部分结合。
除非另有指明，否则术语“炔基”是指具有2至20个（例如2至20个或2至6个）碳原子并包含至少一个碳-碳叁键的直链、支链或环状烃。代表性的炔基部分包括乙炔基、丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、1-戊炔基、2-戊炔基、3-甲基-1-丁炔基、4-戊炔基、1-己炔基、2-己炔基、5-己炔基、1-庚炔基、2-庚炔基、6-庚炔基、1-辛炔基、2-辛炔基、7-辛炔基、1-壬炔基、2-壬炔基、8-壬炔基、1-癸炔基、2-癸炔基和9-癸炔基。
除非另有指明，否则术语“芳基”是指由碳和氢原子构成的芳香族环或者芳香族或部分芳香族环系统。芳基部分可以包含结合或稠合在一起的多个环。芳基部分的实例包括蒽基、薁基、联苯基、芴基、茚满、茚基、萘基、菲基、苯基、1,2,3,4-四氢-萘和甲苯基。
除非另有指明，否则术语“芳基烷基”或“芳基-烷基”是指芳基部分与烷基部分结合。
除非另有指明，否则术语“卤素”和“卤”包含氟、氯、溴和碘。
除非另有指明，否则术语“杂烷基”是指其中至少一个碳原子已被杂原子（例如N、O或S）代替的烷基部分（例如，直链、支链或环状）。
除非另有指明，否则术语“杂芳基”是指其中至少一个碳原子已被杂原子（例如N、O或S）代替的芳基部分。其实例包括吖啶基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并异噻唑基、苯并异噁唑基、苯并喹唑啉基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、呋喃基、咪唑基、吲哚基、异噻唑基、异噁唑基、噁二唑基、噁唑基、酞嗪基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基（pyrimidinyl）、嘧啶基（pyrimidyl）、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、四唑基、噻唑基和三唑基。
除非另有指明，否则术语“杂芳基烷基”或“杂芳基-烷基”是指杂芳基部分与烷基部分结合。
除非另有指明，否则术语“杂环”是指包含碳、氢和至少一个杂原子（例如N、O或S）的芳香族、部分芳香族或非芳香族单环或多环的环或环系统。杂环可以包含稠合或结合在一起的多个（即两个或以上）环。杂环包括杂芳基。其实例包括苯并[1,3]二氧杂环戊烯基、2,3-二氢-苯并[1,4]二氧杂环己烯基、噌啉基、呋喃基、乙内酰脲基、吗啉基、氧杂环丁基、环氧乙烷基、哌嗪基、哌啶基、吡咯烷酮基、吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、四氢吡啶基、四氢嘧啶基、四氢噻吩基、四氢噻喃基和戊内酰胺基。
除非另有指明，否则术语“杂环烷基”或“杂环-烷基”是指与烷基部分结合的杂环部分。
除非另有指明，否则术语“杂环烷基”是指非芳香族杂环。
除非另有指明，否则术语“杂环烷基烷基”或“杂环烷基-烷基”是指与烷基部分结合的杂环烷基部分。
除非另有指明，否则术语“管理”涵盖在已患有特定疾病或病症的患者中防止所述疾病或病症或其一种或多种症状的复发，和/或延长患有所述疾病或病症的患者保持缓解的时间。该术语涵盖调节疾病或病症的阈值、发展和/或持续时间，或改变患者对疾病或病症响应的方式。
除非另有指明，否则术语“可药用盐”是指从可药用的无毒性酸或碱、包括无机酸和碱和有机酸和碱制备的盐。适合的可药用碱加成盐包括从铝、钙、锂、镁、钾、钠和锌制成的金属盐，或从赖氨酸、N,N’-二苯甲基乙二胺、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺（N-甲基葡萄糖胺）和普鲁卡因制备的有机盐。适合的无毒性酸包括无机和有机酸，例如乙酸、藻酸、邻氨基苯甲酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、乙磺酸、甲酸、延胡索酸、呋喃甲酸、半乳糖醛酸、葡萄糖酸、葡萄糖醛酸、谷氨酸、乙醇酸、氢溴酸、盐酸、羟乙磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、硝酸、扑酸、泛酸、苯乙酸、磷酸、丙酸、水杨酸、硬脂酸、琥珀酸、对氨基苯磺酸、硫酸、酒石酸和对甲苯磺酸。具体的无毒性酸包括盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和甲磺酸。因此，具体的盐的实例包括盐酸盐和甲磺酸盐。其他盐在本技术领域中是公知的。参见例如《Remington药物学》第18版（Remington’sPharmaceutical Sciences,18th ed.）(Mack Publishing,Easton PA:1990)和《Remington药物科学与实践》第19版（Remington:The Science andPractice of Pharmacy,19th ed.）(Mack Publishing,Easton PA:1995)。
除非另有指明，否则术语“强效TPH1抑制剂”是TPH1_IC50低于约10μM的化合物。
除非另有指明，否则术语“防止”考虑到了在患者开始患有特定疾病或病症之前发生的作用，所述作用抑制或减轻所述疾病或病症或其一种或多种症状的严重性。该术语涵盖了预防。
除非另有指明，否则化合物的“预防有效量”是足以阻止疾病或病症或与所述疾病或病症相关的一种或多种症状或阻止其复发的量。化合物的预防有效量是单独或与其他药剂组合的治疗药剂能够在防止疾病中提供预防益处的量。术语“预防有效量”可以涵盖改进总体预防或增强另一种预防药剂的预防功效的量。
除非另有指明，否则术语“选择性TPH1抑制剂”是其TPH2_IC50比其TPH1_IC50高至少约10倍的化合物。
除非另有指明，否则术语“取代的”当用于描述化学结构或部分时，是指该结构或部分中的一个或多个氢原子被原子、化学部分或官能团取代的衍生物，所述原子、化学部分或官能团例如但不限于醇、醛、烷氧基、烷酰氧基、烷氧基羰基、烯基、烷基（例如甲基、乙基、丙基、叔丁基）、炔基、烷基羰基氧基（-OC(O)烷基）、酰胺（-C(O)NH-烷基-或-烷基NHC(O)烷基）、脒基（-C(NH)NH-烷基或-C(NR)NH2）、胺（伯胺、仲胺和叔胺例如烷基氨基、芳基氨基、芳基烷基氨基）、芳酰基、芳基、芳氧基、偶氮基、氨甲酰基（carbamoyl）（-NHC(O)O-烷基-或–OC(O)NH-烷基）、甲氨酰基（carbamyl）（例如CONH2以及CONH-烷基、CONH-芳基和CONH-芳基烷基）、羰基、羧基、羧酸、羧酸酐、羧酰氯、氰基、酯、环氧化物、醚（例如甲氧基醚、乙氧基醚）、胍基、卤素、卤代烷基（例如-CCl3、-CF3、-C(CF3)3）、杂烷基、半缩醛、亚胺（伯亚胺和仲亚胺）、异氰酸酯、异硫氰酸酯、酮、腈、硝基、氧（即提供氧基）、磷酸二酯、硫化物、磺酰胺基（例如SO2NH2）、砜、磺酰基（包括烷基磺酰基、芳基磺酰基和芳基烷基磺酰基）、亚砜、硫醇（例如巯基、硫醚）和脲（-NHCONH-烷基-）。在特定实施方案中，术语“取代的”是指该结构或部分中的一个或多个氢原子被下列基团取代的衍生物：醇、烷氧基、烷基（例如甲基、乙基、丙基、叔丁基）、酰胺（-C(O)NH-烷基-或-烷基NHC(O)烷基）、脒基（-C(NH)NH-烷基或-C(NR)NH2）、胺（伯胺、仲胺和叔胺例如烷基氨基、芳基氨基、芳基烷基氨基）、芳基、氨甲酰基（-NHC(O)O-烷基-或-OC(O)NH-烷基）、甲氨酰基（例如CONH2以及CONH-烷基、CONH-芳基和CONH-芳基烷基）、卤素、卤代烷基（例如-CCl3、-CF3、-C(CF3)3）、杂烷基、亚胺（伯亚胺和仲亚胺）、异氰酸酯、异硫氰酸酯、硫醇（例如巯基、硫醚）或脲（-NHCONH-烷基-）。
除非另有指明，否则化合物的“治疗有效量”是足以在疾病或病症的治疗或管理中提供治疗益处、或延迟或最小化与所述疾病或病症相关的一种或多种症状的量。化合物的治疗有效量是治疗剂单独或与其他疗法组合能够在所述疾病或病症的治疗或管理中提供治疗益处的量。术语“治疗有效量”可以涵盖改进总体疗法、减轻或避免疾病或病症的症状或病因、或增强另一种治疗剂的的治疗功效的量。
除非另有指明，否则术语“TPH1_IC50”是使用下面实施例中描述的体外抑制测定法测定的化合物对TPH1的IC50。
除非另有指明，否则术语“TPH2_IC50”是使用下面实施例中描述的体外抑制测定法测定的化合物对TPH2的IC50。
除非另有指明，否则术语“治疗”考虑到了当患者患有特定疾病或病症时发生的作用，所述作用降低所述疾病或病症或其一种或多种症状的严重性，或延迟或减慢所述疾病或病症的发展。
除非另有指明，否则术语“包括”与术语“包括但不限于”具有同样含义。同样，术语“例如”与术语“例如但不限于”具有相同含义。
除非另有指明，否则紧靠一系列名词之前的一个或多个形容词应该被解释为适用于每个名词。例如，词组“任选被取代的烷基、芳基或杂芳基”与“任选被取代的烷基、任选被取代的芳基或任选被取代的杂芳基”具有相同含义。
应该指出，形成较大化合物的一部分的化学部分在本文中可以使用当它作为单一分子存在是通常指称它的名称或通常指称它的基团的名称来描述。例如，术语“吡啶”和“吡啶基”当用于描述附着到其他化学部分上的部分时，具有相同含义。因此，两个词组“XOH，其中X是吡啶基”和“XOH，其中X是吡啶”提供相同含义，并涵盖了化合物吡啶-2-酚、吡啶-3-酚和吡啶-4-酚。
还应该指出，如果结构或结构的一部分的立体化学没有用例如粗线或虚线标出时，所述结构或结构的所述部分应该被解释为涵盖了其所有立体异构体。同样，具有一个或多个手性中心但未指明那些中心的立体化学的化合物名称，涵盖了纯立体异构体及其混合物。此外，图中显示的具有未满足化合价的任何原子，被假定附着有足够的氢原子以满足化合价。此外，用一条实线平行于一个虚线描绘的化学键涵盖了单键和双键两者（例如芳香键），如果化合价允许的话。本发明涵盖了本文中公开的化合物的互变异构体和溶剂化物（例如水合物）。
4.2.化合物
本发明的方法和组合物利用TPH抑制剂，其实例公开在2007年8月16日提交的美国专利申请11/638,677号和2009年6月30日授权的美国专利7,553,840号中。
具体的TPH抑制剂是式I的化合物及其可药用盐：
Figure BDA00001690751800091
其中：A是任选被取代的环烷基、芳基或杂环；X是键、-O-、-S-、-C(O)-、-C(R4)=、
=C(R4)-、-C(R3R4)-、-C(R4)=C(R4)-、-C≡C-、-N(R5)-、-N(R5)C(O)N(R5)-、-C(R3R4)N(R5)-、-N(R5)C(R3R4)-、-ONC(R3)-、-C(R3)NO-、-C(R3R4)O-、-OC(R3R4)-、-S(O2)-、-S(O2)N(R5)-、-N(R5)S(O2)-、-C(R3R4)S(O2)-或-S(O2)C(R3R4)-；D是任选被取代的芳基或杂环；R1是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基、烷基-杂环、芳基或杂环；R2是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基、烷基-杂环、芳基或杂环；R3是氢、烷氧基、氨基、氰基、卤素、羟基或任选被取代的烷基；R4是氢、烷氧基、氨基、氰基、卤素、羟基或任选被取代的烷基或芳基；每个R5独立地是氢或任选被取代的烷基或芳基；并且n是0-3。
具体的化合物是式I(A)的化合物：
Figure BDA00001690751800101
本发明还涵盖了式II的化合物及其可药用盐：
Figure BDA00001690751800102
其中A是任选被取代的环烷基、芳基或杂环；X是键、-O-、-S-、-C(O)-、-C(R4)=、=C(R4)-、-C(R3R4)-、-C(R4)=C(R4)-、-C≡C-、-N(R5)-、-N(R5)C(O)N(R5)-、-C(R3R4)N(R5)-、-N(R5)C(R3R4)-、-ONC(R3)-、-C(R3)NO-、-C(R3R4)O-、-OC(R3R4)-、-S(O2)-、-S(O2)N(R5)-、-N(R5)S(O2)-、-C(R3R4)S(O2)-或-S(O2)C(R3R4)-；D是任选被取代的芳基或杂环；E是任选被取代的芳基或杂环；R1是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基、烷基-杂环、芳基或杂环；R2是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基、烷基-杂环、芳基,或杂环；R3是氢、烷氧基、氨基、氰基、卤素、羟基或任选被取代的烷基；R4是氢、烷氧基、氨基、氰基、卤素、羟基或任选被取代的烷基或芳基；R5是氢或任选被取代的烷基或芳基；并且n是0-3。
具体的化合物是式II(A)的化合物：
对于本文中公开的式（例如I、I(A)、II和II(A)）来说，具体的化合物包括其中A是任选被取代的环烷基（例如6-员和5-员环烷基）的化合物。在一些化合物中，A是任选被取代的芳基（例如苯基或萘基）。在其他化合物中，A是任选被取代的杂环（例如6-员和5-员杂环）。6-员杂环的实例包括吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪和三嗪。5-员杂环的实例包括吡咯、咪唑、三唑、噻唑、噻吩和呋喃。在一些化合物中，A是芳香族的。在其他化合物中，A是非芳香族的。在一些化合物中，A是任选被取代的二环部分（例如吲哚、异吲哚、吡咯并-吡啶或萘）。
具体的化合物是下式的化合物：
其中：A1和A2各自独立地是单环的任选被取代的环烷基、芳基或杂环。该式所涵盖的化合物包括其中A1和/或A2是任选被取代的环烷基（例如6-员和5-员环烷基）的化合物。在一些化合物中，A1和/或A2是任选被取代的芳基（例如苯基或萘基）。在其他化合物中，A1和/或A2是任选被取代的杂环（例如6-员和5-员杂环）。6-员杂环的实例包括吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪和三嗪。5-员杂环的实例包括吡咯、咪唑、三唑、噻唑、噻吩和呋喃。在某些化合物中，A1和/或A2是芳香族的。在其他化合物中，A1和/或A2是非芳香族的。
对于本文中所公开的式来说，具体的化合物包括其中D是任选被取代的芳基（例如苯基或萘基）的化合物。在其他化合物中，D是任选被取代的杂环（例如6-员和5-员杂环）。6-员杂环的实例包括吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪和三嗪。5-员杂环的实例包括吡咯、咪唑、三唑、噻唑、噻吩和呋喃。在某些化合物中，D是芳香族的。在其他化合物中，D是非芳香族的。在某些化合物中，D是任选被取代的二环部分（例如吲哚、异吲哚、吡咯并-吡啶或萘）。
对于本文中公开的各种式来说，具体的化合物包括其中E是任选被取代的芳基（例如苯基或萘基）的化合物。在其他化合物中，E是任选被取代的杂环（例如6-员和5-员杂环）。6-员杂环的实例包括吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪和三嗪。5-员杂环的实例包括吡咯、咪唑、三唑、噻唑、噻吩和呋喃。在某些化合物中，E是芳香族的。在其他化合物中，E是非芳香族的。在某些化合物中，E是任选被取代的二环部分（例如吲哚、异吲哚、吡咯并-吡啶或萘）。
对于本文中公开的各种式来说，具体的化合物包括其中R1是氢或任选被取代的烷基的化合物。
在某些化合物中，R2是氢或任选被取代的烷基。
在某些化合物中，n是1或2。
在某些化合物中，X是键或S。在其他化合物中，X是-C(R4)=、=C(R4)-、-C(R3R4)-、-C(R4)=C(R4)-或-C≡C-，并且例如R4独立地是氢或任选被取代的烷基。在其他化合物中，X是-O-、-C(R3R4)O-或-OC(R3R4)-，并且例如R3是氢或任选被取代的烷基，和R4是氢或任选被取代的烷基。在某些化合物中，R3是氢并且R4是三氟甲基。在某些化合物中，X是-S(O2)-、-S(O2)N(R5)-、-N(R5)S(O2)-、-C(R3R4)S(O2)-或-S(O2)C(R3R4)-，并且例如R3是氢或任选被取代的烷基，R4是氢或任选被取代的烷基，和R5是氢或任选被取代的烷基。在其他化合物中，X是-N(R5)-、-N(R5)C(O)N(R5)-、-C(R3R4)N(R5)-或-N(R5)C(R3R4)-，并且例如R3是氢或任选被取代的烷基，R4是氢或任选被取代的烷基，并且每个R5独立地是氢或任选被取代的烷基。
本发明的某些化合物由下式涵盖：
Figure BDA00001690751800131
其中，例如，R3是三氟甲基。其他化合物由下式涵盖：
Figure BDA00001690751800132
其中，例如，R3是氢。
某些化合物由下式涵盖：
Figure BDA00001690751800133
其中：Z1、Z2、Z3和Z4各自独立地是N或CR6；每个R6独立地是氢、氰基、卤素、OR7、NR8R9、氨基、羟基或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；每个R7独立地是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；每个R8独立地是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；每个R9独立地是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；并且m是1-4。某些这样的化合物具有下式：
Figure BDA00001690751800141
其他具有下式：
其中，例如，R3是三氟甲基。其他化合物具有下式：
其中例如R3是氢。
关于上述各式，在某些化合物中所有Z1、Z2、Z3和Z4都是N。在其他化合物中，Z1、Z2、Z3和Z4中只有三个是N。在其他化合物中，Z1、Z2、Z3和Z4中只有两个是N。在其他化合物中，Z1、Z2、Z3和Z4中只有一个是N。在其他化合物中，Z1、Z2、Z3和Z4都不是N。
某些具有下式：
Figure BDA00001690751800151
其中：Z'1、Z'2和Z'3各自独立地是N、NH、S、O或CR6；每个R6独立地是氨基、氰基、卤素、氢、OR7、SR7、NR8R9或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；每个R7独立地是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；每个R8独立地是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；每个R9独立地是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；并且p是1-3。某些这样的化合物具有下式：
Figure BDA00001690751800152
其他具有下式：
Figure BDA00001690751800153
其中例如R3是三氟甲基。其他这样的化合物具有下式：
Figure BDA00001690751800161
其中例如R3是氢。
关于上述各式，在某些化合物中所有Z’1、Z’2和Z’3都是N或NH。在其他化合物中，Z’1、Z’2和Z’3中只有两个是N或NH。在其他化合物中，Z’1、Z’2和Z’3中只有一个是N或NH。在其他化合物中，Z’1、Z’2和Z’3都不是N或NH。
某些化合物由下式涵盖：
Figure BDA00001690751800162
其中：Z"1、Z"2、Z"3和Z"4各自独立地是N或CR10；每个R10独立地是氨基、氰基、卤素、氢、OR11、SR11、NR12R13或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；每个R11独立地是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；每个R12独立地是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；并且每个R13独立地是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环。某些这样的化合物具有下式：
Figure BDA00001690751800163
其他具有下式：
Figure BDA00001690751800171
其中例如R3是三氟甲基。其他这样的化合物具有下式：
Figure BDA00001690751800172
其中例如R3是氢。
关于上述各式，在某些化合物中所有Z”1、Z”2、Z”3和Z”4都是N。在其他化合物中，Z”1、Z”2、Z”3和Z”4中只有三个是N。在其他化合物中，Z”1、Z”2、Z”3和Z”4中只有两个是N。在其他化合物中，Z”1、Z”2、Z”3和Z”4中只有一个是N。在其他化合物中，Z”1、Z”2、Z”3和Z”4都不是N。
某些具有下式：
Figure BDA00001690751800173
其中：Z"1、Z"2、Z"3和Z"4各自独立地是N或CR10；每个R10独立地是氨基、氰基、卤素、氢、OR11、SR11、NR12R13或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；每个R11独立地是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；每个R12独立地是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；并且每个R13独立地是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环。某些这样的化合物具有下式：
Figure BDA00001690751800181
其他具有下式：
Figure BDA00001690751800182
其中例如R3是三氟甲基。其他这样的化合物具有下式：
Figure BDA00001690751800183
其中例如R3是氢。
关于上述各式，在某些化合物中所有Z”1、Z”2、Z”3和Z”4都是N。在其他化合物中，Z”1、Z”2、Z”3和Z”4中只有三个是N。在其他化合物中，Z”1、Z”2、Z”3和Z”4中只有两个是N。在其他化合物中，Z”1、Z”2、Z”3和Z”4中只有一个是N。在其他化合物中，Z”1、Z”2、Z”3和Z”4都不是N。
某些具有下式：
Figure BDA00001690751800191
其取代基如本文中所定义。
其他具有下式：
其取代基如本文中所定义。
其他具有下式：
Figure BDA00001690751800193
其取代基如本文中所定义。
其他具有下式：
Figure BDA00001690751800194
其取代基如本文中所定义。
关于本文中公开的各式，具体的化合物包括下述化合物：在所述化合物中A和E二者都是任选被取代的苯基，并且例如X是-O-、-C(R3R4)O-或-OC(R3R4)-，并且例如R3是氢，R4是三氟甲基，并且例如n是1。
本发明的具体化合物是式III的化合物：
Figure BDA00001690751800201
其中：A2是任选被取代的杂环；R1是氢、C(O)RA、C(O)ORA或任选被取代的烷基、烷基-芳基、烷基-杂环、芳基或杂环；R2是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基、烷基-杂环、芳基或杂环；R10是卤素、氢、C(O)RA、ORA、NRBRC、S(O2)RA或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；每个R14独立地是卤素、氢、C(O)RA、ORA、NRBRC、S(O2)RA或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；RA是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；RB是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；RC是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；并且m是1-4。
某些具有下式：
某些具有下式：
Figure BDA00001690751800203
Figure BDA00001690751800211
其中：每个R15独立地是卤素、氢、C(O)RA、ORA、NRBRC、S(O2)RA或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；并且n是1-3。
某些具有下式：
Figure BDA00001690751800212
其中：每个R15独立地是卤素、氢、C(O)RA、ORA、NRBRC、S(O2)RA或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；并且p是1-4。
其他具有下式：
Figure BDA00001690751800213
其中：每个R15独立地是卤素、氢、C(O)RA、ORA、NRBRC、S(O2)RA或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；并且q是1-2。
某些化合物具有下式：
Figure BDA00001690751800221
其中：每个R15独立地是卤素、氢、C(O)RA、ORA、NRBRC、S(O2)RA或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；并且q是1-2。
在式III的具体化合物中，A2是芳香族的。在其他化合物中，A2是非芳香族的。在某些化合物中，A2任选被一个或多个卤素或低级烷基取代。在某些化合物中，R14是氢或卤素。在某些化合物中，m是1。在某些化合物中，R10是氢或氨基。在某些化合物中，R1是氢或低级烷基。在其他化合物中，R1是C(O)ORA并且RA是烷基。在某些化合物中，R2是氢或低级烷基。在某些化合物中，R15是氢或低级烷基（例如甲基）。在某些化合物中，n是1。在某些化合物中，p是1。在某些化合物中，q是1。
本发明涵盖了立体异构纯的化合物以及它们的立体异构富集的组合物。立体异构体可以不对称合成，或使用标准技术例如手性柱、手性拆分试剂或酶法拆分进行拆分。参见例如Jacques,J.等，《对映异构体、消旋体和拆分》（Enantiomers,Racemates and Resolutions）（WileyInterscience,New York,1981）；Wilen,S.H.等，Tetrahedron 33:2725(1977)；Eliel等，《碳化合物的立体化学》（Stereochemistry of CarbonCompounds）（McGraw Hill,NY,1962）；以及Wilen,S.H.，《拆分试剂表和光学拆分》（Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions），p.268（E.L.Eliel主编，Univ.of Notre Dame Press,Notre Dame,IN,1972）。
本发明的具体化合物是强强效TPH1抑制剂。特定化合物具有低于约10、5、2.5、1、0.75、0.5、0.4、0.3、0.2、0.1或0.05μM的TPH1_IC50。
具体化合物是选择性TPH1抑制剂。特定化合物所具有的TPH1_IC50比它们的TPH2_IC50低约10、25、50、100、250、500或1000倍。
当给药于哺乳动物（例如小鼠、大鼠、狗、猴或人类）时，本发明的某些化合物不容易穿过血脑屏障（例如血液中的化合物少于约5、2.5、2、1.5、1、0.5或0.01%进入到脑中）。化合物能否穿过血脑屏障可以通过本技术领域中已知的方法来确定。参见例如Riant,P.等，Journal  of Neurochemistry 51:421-425(1988)；Kastin,A.J.,Akerstrom,V.,J. Pharmacol.Exp.Therapeutics 294:633-636(2000)；W.A.Banks,W.A.等，J.Pharmacol.Exp.Therapeutics 302:1062-1069(2002)。
本发明的化合物可以通过本技术领域中已知的方法（参见例如2007年8月16日提交的美国专利申请11/638,677号，2009年6月30日授权的美国专利7,553,840号）和本文中描述的方法来制备。
4.3.使用方法
本发明涵盖了由血清素介导的癌症的治疗和管理方法。这样的癌症包括过表达TPH（例如TPH1）的癌症和过表达血清素受体的癌症。具体的癌症是原发癌症。具体癌症包括乳腺癌、胆管癌、结肠癌、结肠直肠癌、神经内分泌肿瘤（例如肺和胃肠道的）和前列腺癌。神经内分泌肿瘤的实例包括胰腺内分泌肿瘤。在具体实施方案中，神经内分泌肿瘤不包括类癌。
在本发明的一个实施方案中，患者正在、已经或将要经历放疗（例如质子束放疗）、高强度聚焦超声或外科手术（例如乳房切除术、胸廓切开术、睾丸摘除术）。
一个实施方案包含向患者同时或不同时给药治疗或预防有效量的第二种药物。给药途径可以相同或不同。具体的第二种药物是已知在所讨论的癌症的治疗中有用的药物，并可能取决于具体癌症。例如，在前列腺癌的情况下，第二种药物的实例包括肾上腺抑制剂（例如酮康唑、氨鲁米特）、抗雄激素物质（例如氟他米特、尼鲁米特）、芳香化酶抑制剂（例如氨鲁米特、睾内酯酮、阿那曲唑、来曲唑、依西美坦、伏氯唑、福美司坦、法倔唑）、卡铂、阿霉素、雌莫司汀、依托泊苷、GnRH类似物、黄体生成素释放激素激动剂（例如亮丙瑞林、戈舍瑞林、布舍瑞林）、米托蒽醌、紫杉醇、生长抑素类似物（例如奥曲肽）、替莫唑胺、长春花碱和长春瑞滨。
在乳腺癌的情况下，第二种药物的实例包括芳香化酶抑制剂（例如氨鲁米特、睾内酯酮、阿那曲唑、来曲唑、依西美坦、伏氯唑、福美司坦、法倔唑）、巴维昔单抗、环磷酰胺、阿霉素、氟尿嘧啶、氟维司群、GnRH类似物、HER1抗体（例如吉非替尼）、HER2+抗体（例如曲妥珠单抗）、IGF-1抗体、拉帕替尼、氨甲喋呤、PARP蛋白抑制剂（例如奥拉帕尼、BSI-201）、帕唑帕尼、雷帕霉素、利巴韦林、索拉非尼、舒尼替尼、他莫昔芬、紫杉烷类（例如多烯紫杉醇）、瓦他拉尼和VEGF抗体（例如贝伐单抗）。
在神经内分泌肿瘤的情况下，第二种药物的实例包括生长抑素类似物（例如奥曲肽）。
在本发明的具体方法中，在实现疾病或病症的治疗、管理和/或预防的同时避免了与中枢神经系统（CNS）血清素水平的改变相关的不良作用。这样的不良作用的实例包括躁动、焦虑症、抑郁和睡眠障碍（例如失眠或睡眠紊乱）。
4.4.药物组合物
本发明涵盖了包含本发明的一种或多种化合物的药物组合物。某些药物组合物是适合于口服、黏膜（例如鼻、舌下、阴道、颊、或直肠）、肠胃外（例如皮下、静脉内、推注、肌肉内或动脉内）或透皮给药于患者的单一单位剂型。剂型的实例包括但不限于：片剂、囊片、胶囊例如软质弹性明胶胶囊、扁囊剂、锭剂、菱形片、分散剂、栓剂、软膏、泥罨剂（泥敷剂）、糊剂、粉剂、敷料、霜剂、膏剂、溶液、贴片、气溶胶（例如鼻喷雾剂或吸入剂）、凝胶；适合于口服或黏膜给药于患者的液体剂型，包括悬液（例如水性或非水性液体悬液，水包油乳液或油包水液体乳液）、溶液和酏剂；适用于肠胃外给药于患者的液体剂型；以及可以重构以提供适用于肠胃外给药于患者的液体剂型的无菌固体（例如结晶或无定形的固体）。
制剂应该适合于给药方式。例如，易于在胃中降解的化合物的口服给药可以使用肠溶包衣来实现。同样地，制剂可以含有促进将活性成分递送至作用位点的成分。例如，化合物可以在脂质体制剂中给药，以便保护它们抵御降解酶、促进在循环系统中运输和实现它们跨细胞膜的递送。
同样地，溶解性不良的化合物可以在增溶剂、乳化剂和表面活性剂的协助下掺入到液体剂型（以及适合于重构的剂型）中，所述增溶剂、乳化剂和表面活性剂包括但不限于环糊精（例如α-环糊精、β-环糊精、
Figure BDA00001690751800251
和EncapsinTM（参见例如Davis和Brewster,Nat.Rev.Drug Disc.3:1023-1034(2004)）、
Figure BDA00001690751800252
蓖麻油聚氧乙烯醚和非水性溶剂例如但不限于乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苯甲酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜（DMSO）、生物相容性油类（例如棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油）、甘油、四氢呋喃甲基醇、聚乙二醇、失水山梨糖醇的脂肪酸酯及其混合物（例如DMSO：玉米油）。
溶解性不良的化合物也可以使用本技术领域已知的其他技术掺入到悬液中。例如，可以将化合物的纳米粒子悬浮在液体中以提供纳米悬液（参见例如Rabinow,Nature Rev.Drug Disc.3:785-796(2004)）。本文描述的化合物的纳米粒子形式可以通过下列文献中描述的方法来制备：美国专利申请2004-0164194、2004-0195413、2004-0251332、2005-0042177A1、2005-0031691A1号和美国专利5,145,684、5,510,118、5,518,187、5,534,270、5,543,133、5,662,883、5,665,331、5,718,388、5,718,919、5,834,025、5,862,999、6,431,478、6,742,734、6,745,962号，其每个的全部内容在此引为参考。在一个实施方案中，纳米粒子形式包含平均粒度小于约2000nm、小于约1000nm或小于约500nm的粒子。
剂型的组成、形状和类型典型地随着应用而变。例如，在疾病的急性治疗中使用的剂型与在同样疾病的慢性治疗中使用的剂型相比，它所包含的一种或多种活性成分可以含量较大。同样地，肠胃外剂型与用于治疗同样疾病的口服剂型相比它所包含的一种或多种活性成分可以含量较小。如何解释这些差异对于本技术领域的专业人员来说是显而易见的。参见例如《Remington药物学》第18版（Remington’s PharmaceuticalSciences,18th ed.）,Mack Publishing,Easton PA(1990)。
4.4.1.口服剂型
适合于口服给药的本发明的药物组合物可以呈现为分离的剂型，例如但不限于片剂（例如咀嚼片剂）、锭剂、胶囊和液体（例如调味糖浆）。这样的剂型含有预定量的活性成分，并可以通过本技术领域的专业人员已知的药学方法来制备。一般参见《Remington药物学》第18版（Remington’s Pharmaceutical Sciences,18th ed.,Mack Publishing,Easton PA (1990)）。
典型的口服剂型通过将活性成分与至少一种赋形剂按照常规制药混料技术合并成紧密混合物中来制备。取决于给药所需的制剂形式，赋形剂可以采取广泛的各种形式。
由于易于给药，片剂和胶囊代表了最有优势的口服单位剂型。如果需要，片剂可以通过标准的水性或非水性技术进行包衣。这样的剂型可以通过常规的制药方法来制备。一般来说，通过将活性成分与液体载体、细分的固体载体或两者均匀紧密地混合，然后如果需要，将产物造型成所需外观，来制备药物组合物和剂型。可以在固体剂型中掺入崩解剂以促进快速溶解。也可以掺入润滑剂来促进剂型（例如片剂）的制造。
4.4.2.肠胃外剂型
肠胃外剂型可以通过包括皮下、静脉内（包括推注）、肌肉内或动脉内的各种途径给药于患者。由于它们的给药典型地绕开了患者对抗污染物的天然防御，因此肠胃外剂型特意是无菌的或能够在给药于患者之前除菌。肠胃外剂型的实例包括即用注射溶液、即刻溶解或悬浮在可药用注射介质中的干燥产品、即用注射悬液、和乳液。
可用于提供本发明的肠胃外剂型的适合的介质对于本技术领域的专业人员来说是公知的。其实例包括：注射用USP水；水性介质例如氯化钠注射液、林格（Ringer’s）注射液、葡萄糖注射液、葡萄糖和氯化钠注射液和乳酸林格注射液；水混溶介质例如乙醇、聚乙二醇和聚丙二醇；以及非水性介质例如玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、油酸乙酯、肉豆蔻酸异丙酯和苯甲酸苯甲酯。
5.实施例
5.1.HPLC表征
在某些下面的合成实施例中，提供了高效液相色谱（HPLC）保留时间。除非另有注明，否则用于获得那些保留时间的各种条件如下所述：
方法A：YMC-PACK ODS-A 3.0x50mm；溶剂A=90%水，10%MeOH，0.1%TFA；溶剂B=90%MeOH，10%水，0.1%TFA；B%经4分钟从0至100%；流速=2ml/min；观察波长=220nm。
方法B：YMC-PACK ODS-A 3.0x50mm；溶剂A=90%水，10%MeOH，0.1%TFA；溶剂B=90%MeOH，10%水，0.1%TFA；%B经4分钟从10至100%；流速=3ml/min；观察波长=220nm。
方法C：YMC-PACK ODS-A 3.0x50mm；溶剂A=90%水，10%MeOH，0.1%TFA；溶剂B=90%MeOH，10%水，0.1%TFA；B%经5分钟从0至100%；流速=2ml/min.；观察波长=220nm。
方法D：Shim VP ODS 4.6x50mm；溶剂A=90%水，10%MeOH，0.1%TFA；溶剂B=90%MeOH，10%水，0.1%TFA；B%经4分钟内0至100%；流速=3ml/min.；观察波长=220nm。
方法E：Shim VP ODS 4.6x50mm；溶剂A=90%水，10%MeOH，0.1%TFA；溶剂B=90%MeOH，10%水，0.1%TFA；B%经4分钟内0至100%；流速=3ml/min；观察波长=254nm。
方法F：YMC-PACK ODS-A 4.6x33mm；溶剂A=90%水，10%MeOH，0.1%TFA；溶剂B=90%MeOH，10%水，0.1%TFA；B%经4分钟从0至100%；流速=3ml/min.；观察波长=220nm。
方法G：YMC-PACK ODS-A 4.6x50mm；溶剂A=90%水，10%MeOH，0.1%TFA；溶剂B=90%MeOH，10%水，0.1%TFA；B%经2分钟内0至100%；流速=2.5ml/min.；观察波长=220nm。
方法H：C184.6x20mm；溶剂A=90%水，10%MeOH，0.1%TFA；溶剂B=90%MeOH，10%水，0.1%TFA；B%经2分钟从0至100%；流速=2ml/min.；观察波长=220nm。
方法I：YMC PACK ODS-A 3.0x50mm；溶剂A=90%水，10%MeOH，0.1%TFA；溶剂B=90%MeOH，10%水，0.1%TFA；B%经4分钟从10至100%；流速=2ml/min.；观察波长=220nm。
方法J：YMC Pack ODS-A 3.0x50mm；溶剂A=H2O，0.1%TFA；溶剂B=MeOH，0.1%TFA；%B经4分钟从约10至约90%；流速=2ml/min.；观察波长=220nm。
方法K：Sunfire C1850mmx4.6mmx3.5μm；溶剂A=10mMNH4OAc的水溶液；溶剂B=MeCN；B%经2分钟从10至95%；流速=4.5ml/min.；观察波长=220nm。
方法L：Sunfire C1850mmx4.6mmx3.5μm；溶剂A=10mMNH4OAc；溶剂B=MeCN；B%经0.8分钟从2至20%，然后经2分钟至95%；流速=4.5ml/min.；观察波长=220nm。
方法M：YMC-PACK ODS-A 4.6x33mm；溶剂A=90%水，10%MeOH，0.1%TFA；溶剂B=90%MeOH，10%水，0.1%TFA；B%经5分钟从0至100%；流速=2.5ml/min.；观察波长=254nm。
方法N：YMC-PACK ODS-A 3.0x50mm；溶剂A=H2O，0.1%TFA；溶剂B=MeOH，0.1%TFA；B%经4分钟从10至90%；流速=2ml/min.；观察波长=220和254nm。
方法O：YMC-PACK ODS-A 3.0x50mm；溶剂A=90%水，含0.1%TFA的10%MeOH；溶剂B=90%MeOH，含0.1%TFA的10%水；B%经4分钟内0至100%；流速=2ml/min.；观察波长=220和254nm。
方法P：ShimPack VP ODS 4.6x50mm；溶剂A=90%H2O，10%MeOH，1%TFA；溶剂B=10%H2O，90%MeOH，1%TFA；B%经2分钟内从0至100%；流速=3.5ml/min.；观察波长=220和254nm。
方法Q：Shim VP ODS 4.6x50mm；溶剂A=含0.1%TFA的H2O；溶剂B=含0.1%TFA的MeOH；B%经4分钟内从0至100%；流速=3ml/min.；观察波长=254nm。
方法R：YMC Pack ODS-A 4.6x 33mm；溶剂A=H2O，0.1%TFA；溶剂B=含0.1%TFA的MeOH；B%经3分钟从10至90%；流速2ml/min.；观察波长220和254nm。
方法S：YMC-Pack ODS-A 3.0x50mm；溶剂A=90%H2O，10%MeOH，1%TFA；溶剂B=10%H2O，90%MeOH，1%TFA；B%经4分钟从10至90%；流速=2ml/min.观察波长=220和254nm。
方法T：YMC-PACK ODS-A 3.0x50mm；溶剂A=H2O，0.1%TFA；溶剂B=MeOH，0.1%TFA；B%经4分钟从10至90%；流速=2ml/min.；观察波长=220和254nm。
方法U：YMC-PACK ODS-A 3.0x50mm；溶剂A=90%水，含0.1%TFA的10%MeOH；溶剂B=90%MeOH，含0.1%TFA的10%水；B%经4分钟内0至100%；流速=2ml/min.；观察波长=220和254nm。
方法V：ShimPack VP ODS 4.6x50mm；溶剂A=90%H2O，10%MeOH，1%TFA；溶剂B=10%H2O，90%MeOH，1%TFA；B%经2分钟从0至100%；流速=3.5ml/min.；观察波长=220和254nm。
方法W：Shim VP ODS 4.6x50mm；溶剂A=含0.1%TFA的H2O；溶剂B=含0.1%TFA的MeOH；B%经4分钟从0至100%；流速=3ml/min.；观察波长=254nm。
方法X：YMC Pack ODS-A 4.6x33mm；溶剂A=H2O，0.1%TFA；溶剂B=含0.1%TFA的MeOH；B%经3分钟从10至90%；流速2ml/min.；观察波长220和254nm。
方法Y：YMC-Pack ODS-A 3.0x50mm；溶剂A=90%H2O，10%MeOH，1%TFA；溶剂B=10%H2O，90%MeOH，1%TFA；B%经4分钟从10至90%；流速=2ml/min.；观察波长=220和254nm。
5.2.(S)-2-氨基-3-(4-(4-氨基-6-((R)-1-(萘-2-基)乙基氨基)-1,3,5-三 嗪-2-基)苯基)丙酸的合成
将2-氨基-4,6-二氯-[1,3,5]三嗪（200mg，1.21mmol）、(R)-(+)-1-(2-萘基)乙胺（207mg，1.21mmol）和二异丙基-乙胺（3.63mmol）的混合物溶解在150ml 1,4-二噁烷中。将溶液在90℃下回流3小时。在反应完成后（通过LCMS监测），除去溶剂并将反应混合物用CH2Cl2（100ml）H2O（100ml）萃取。分离有机层并用H2O（2x100ml）洗涤，在Na2SO4上干燥，并在真空中浓缩以给出粗品中间体。将粗品化合物在20ml微波反应小瓶中溶解在5ml MeCN和5ml H2O中。向该溶液加入L-p-硼-苯丙氨酸（253mg，1.21mmol）、碳酸钠（256mg，2.42mmol）和催化量的二氯双(三苯基膦)-钯(II)（42.1mg，0.06mmol）。将混合物密封并在微波反应器中在150℃搅拌5分钟，然后通过硅藻土过滤。将滤液浓缩并溶解在MeOH和H2O（1:1）中，使用MeOH/H2O/TFA溶剂系统通过制备型HPLC进行纯化。将合并的纯级份在真空中蒸发，并在冻干机上进一步干燥，得到238mg 2-氨基-3-{4-[4-氨基-6-(1-萘-2-基)-乙基氨基)-[1,3,5]三嗪-2-基]-苯基}-丙酸（收率：46%，LC：柱：YMC Pack ODS-A3.0x50mm，%B=0~100%，梯度时间=4min，流速=2ml/min，波长=220，溶剂A=90:10的水:MeOH w/0.1%TFA，溶剂B=90:10MeOH:水w/0.1%TFA，RT=2.785min，MS：M+1=429）。NMR：1H-NMR (400MHz,CD3OD)：δ1.65(d,3H),3.22-3.42(m,2H),4.3(m,1H),5.45(m,1H),7.4(m,1H),7.6(m 4H),7.8(m,4H),8.2(m,2H)。
5.3.(S)-2-氨基-3-(4-(4-氨基-6-((R)-1-(萘-2-基)乙基氨基)-1,3,5-三 嗪-2-基)苯基)丙酸的别种合成法
通过形成萘胺（1当量）、二氰化钠（0.95eq.）的混合物，随后加入在n-BuOH:H2O（1:1）中的5N HCl（1eq.），来制备(R)-1-(1-(萘-2-基)乙基)氰基胍。将混合物在密封管中在160℃下回流1天，并通过LCMS监测反应进展。在反应完成后，在减压下除去溶剂（n-BuOH）并加入1N HCl以将pH调整至3-5的范围。将水性溶液用EtOAc（2x100）萃取，将合并的有机相在Na2SO4上干燥。在真空下除去溶剂以给出粗产物。使用溶剂系统EtOAc:己烷（7:3和1:1）通过ISCO柱层析对化合物进行纯化，以获得白色固体，在1g至22.5g规模上收率为48-71%。NMR:1H-NMR(400MHz,CD3OD)：δ1.5(d,3H),5.1(m,1H),7.5(m,4H),7.8(s,1H),7.9(m,2H)；LCMS：RT 1.69,M+1：239,收率：71%。
5.4.(S)-2-氨基-3-(4-(4-氨基-6-((4'-甲基联苯-4-基)甲基氨基)-1,3,5- 三嗪-2-基)苯基)丙酸的合成
在5ml微波小瓶中将2-氨基-4,6-二氯-[1,3,5]三嗪（100mg，0.606mmol）、4'-甲基-联苯-4-基-甲胺（142mg，0.606mmol）和碳酸铯（394mg，1.21mmol）的混合物溶解在1,4-二噁烷（1.5ml）和H2O（1.5ml）中。将混合物在微波反应器中在100℃搅拌15分钟。除去溶剂并将残留物溶解在CH2Cl2（20ml）中，并用H2O洗涤（2x20ml），在Na2SO4上然后在真空中干燥。然后在5ml微波小瓶中将粗品中间体溶解在1.5ml MeCN和1.5ml H2O中。向该溶液加入L-p-硼-苯丙氨酸（126mg，0.606mmol）、碳酸钠（128mg，1.21mmol）和催化量的二氯双(三苯基膦)-钯(II)（21.1mg，0.03mmol）。将混合物密封并在微波反应器中在150℃搅拌5分钟，然后通过硅藻土过滤。将滤液浓缩并溶解在MeOH和H2O（1:1）中，使用MeOH/H2O/TFA溶剂系统通过制备型HPLC进行纯化。将合并的纯级份在真空中蒸发，并在冻干机上进一步干燥，得到21.6mg 2-氨基-3-(4-{4-氨基-6-[(4’-甲基-联苯-4-基甲基)-氨基]-[1,3,5]三嗪-2-基}-苯基)-丙酸（LC:柱:YMC Pack ODS-A 3.0x50mm，%B=0~100%，梯度时间=4min，流速=2ml/min，波长=220,溶剂A=90:10的水:MeOH w/0.1%TFA，溶剂B=90:10的MeOH:水w/0.1%TFA，RT=3.096min，MS：M+1=455）。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ2.33(s,3H),3.24-3.44(m,2H),4.38(m,1H),7.02(d,2H),7.42(m,2H),7.50-7.60(m,6H),8.22(m,2H)。
5.5.(S)-2-氨基-3-(4-(4-吗啉-6-(萘-2-基甲基氨基)-1,3,5-三嗪-2-基) 苯基)丙酸的合成
在5ml微波小瓶中将2,4-二氯-6-吗啉-4-基-[1,3,5]三嗪（121mg，0.516mmol）、C-萘-2-基-甲胺盐酸盐（100mg，0.516mmol）、碳酸铯（336mg，1.03mmol）的混合物溶解在1,4-二噁烷（1.5ml）和H2O（1.5ml）中。将混合物在微波反应器中在180℃搅拌600秒。除去溶剂并将残留物溶解在CH2Cl2（10ml）中，并用H2O洗涤（2x20ml），在Na2SO4上然后在真空中干燥。将残留物通过制备型HPLC进行纯化，得到20mg中间体（收率11%，M+1=356）。然后在2ml微波小瓶中将中间体溶解在0.5ml MeCN和0.5ml H2O中。向该溶液加入L-p-硼-苯丙氨酸（11.7mg，0.0562mmol）、碳酸钠（11.9mg，0.112mmol）和催化量的二氯双(三苯基膦)-钯(II)（2.0mg，5%）。将混合物密封并在微波反应器中在150℃搅拌5分钟，然后通过硅藻土过滤。将滤液浓缩并溶解在MeOH和H2O（1:1）中，使用MeOH/H2O/TFA溶剂系统通过制备型HPLC进行纯化。将合并的纯级份在真空中蒸发，并在冻干机上进一步干燥，得到17mg 2-氨基-3-(4-{4-吗啉-4-基-6-[(萘-2-基甲基)-氨基]-[1,3,5]三嗪-2-基}-苯基)-丙酸（收率：63%，LC：方法B，RT=3.108min，MS：M+1=486）。
5.6.(2S)-2-氨基-3-(4-(2-氨基-6-(2,2,2-三氟-1-(2-(三氟甲基)苯基) 乙氧基)嘧啶-4-基)苯基)丙酸的合成
在0℃下，向2-三氟甲基-苯甲醛（1.74g，10mmol）和三氟甲基三甲基硅烷（TMSCF3）（1.8ml，12mmol）在10ml THF中的溶液加入四丁基氟化铵（0.1ml；在四氢呋喃中的1.0M溶液）。将形成的混合物升温至室温并搅拌4小时。然后将反应混合物用12ml 1N HCl处理并搅拌过夜。将产物用乙酸乙酯（3x20ml）萃取。分离有机层并在硫酸钠上干燥。将有机溶剂蒸发，得到2.2g 1-(2-三氟甲基苯基)-2,2,2-三氟-乙醇，收率90%。
向1-(2-三氟甲基苯基)-2,2,2-三氟-乙醇（244mg，1mmol）在10ml无水THF中的溶液加入NaH（80mg，60%，3.0mmol）。将混合物搅拌20分钟，加入2-氨基-4,6-二氯-嘧啶（164mg，1mmol），然后将反应混合物在70℃下加热1小时。在冷却后，加入5ml水，并用乙酸乙酯（20ml）萃取产物。将有机层在硫酸钠上干燥。通过旋转蒸发除去溶剂，得到267mg 4-氯-6-[2,2,2-三氟-1-(2-三氟甲基苯基)-乙氧基]-嘧啶-2-基胺，收率71%。
在微波小瓶中，加入4-氯-2-氨基-6-[1-(2-三氟甲基苯基)-2,2,2-三氟-乙氧基]-嘧啶（33mg，0.1mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（31mg，0.15mmol）和1ml乙腈、0.7ml水。向上述溶液加入0.3ml 1N碳酸钠水溶液，然后加入5mol.%二氯双(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封并用微波辐射在150℃下加热5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在2.5ml甲醇中，然后通过Prep-LC纯化，得到5.6mg 2-氨基-3-(4-{2-氨基-6-[2,2,2-三氟-1-(2-三氟甲基苯基)-乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.96(m,3H),7.80(d,J＝8.06Hz,1H),7.74(t,J＝7.91Hz 1H),7.63(t,J＝8.06Hz,1H),7.41(d,J＝8.3Hz,2H),7.21(m,1H),6.69(s,1H),3.87(m,1H),3.34(m,1H),3.08(m,1H)。
5.7.(2S)-2-氨基-3-(4-(2-氨基-6-(2,2,2-三氟-1-对甲苯基乙氧基)嘧 啶-4-基)苯基)丙酸的合成
在0℃下，向4-甲基-苯甲醛（1.2g，10mmol）和TMSCF3（1.8ml，12mmol）在10ml THF中的溶液加入四丁基氟化铵（0.1ml；在四氢呋喃中的1.0M溶液）。将形成的混合物升温至室温并搅拌4小时。然后将反应混合物用12ml 1N HCl处理并搅拌过夜。将产物用乙酸乙酯（3x20ml）萃取。分离有机层并在硫酸钠上干燥。将有机溶剂蒸发，得到1.6g 1-(4-甲基苯基)-2,2,2-三氟-乙醇，收率86%。
向1-(4-甲基苯基)-2,2,2-三氟-乙醇（190mg，1mmol）在10ml无水THF中的溶液加入NaH（80mg，60%，3.0mmol）。将混合物搅拌20分钟，加入2-氨基-4,6-二氯-嘧啶（164mg，1mmol），然后将反应混合物在70℃下加热1小时。在冷却后，加入5ml水，并用乙酸乙酯（20ml）萃取产物。将有机层在硫酸钠上干燥。通过旋转蒸发除去溶剂，得到209mg 4-氯-6-[1-(4-甲基苯基)-2,2,2-三氟-乙氧基]-嘧啶-2-基胺，收率66%。
在微波小瓶中装入4-氯-2-氨基-6-[1-(4-甲基苯基)-2,2,2-三氟-乙氧基]-嘧啶（33mg，0.1mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（31mg，0.15mmol）和1ml乙腈、0.7ml水。向上述溶液加入碳酸钠水溶液（0.3ml，1N），然后加入5mol.%二氯双(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封并用微波加热到150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在2.5ml甲醇中，然后通过Prep-LC纯化，得到14.6mg 2-氨基-3-(4-{2-氨基-6-[2,2,2-三氟-1-(4-甲基苯基)-乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸。1HNMR(300MHz,CD3OD)δ7.94(d,J＝8.20Hz,2H),7.47(d,J＝7.24Hz,4H),7.27(d,J＝8.01Hz,2H)6.80(s,1H),6.75(m,1H),4.30(t,1H),3.21-3.44(m,2H),2.37(s,3H)。
5.8.(2S)-2-氨基-3-(4-(2-氨基-6-(1-环己基-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶 -4-基)苯基)丙酸的合成
将环己烷甲醛（0.9g，5mmol）溶解在10ml 1,4-二噁烷水溶液中，向其加入200mg（10mmol）硼氢化钠。反应在室温下运行过夜。在反应完成后，加入5ml 10%HCl溶液，并将产物用乙酸乙酯萃取。分离有机层并在硫酸钠上干燥。将有机溶剂蒸发，得到0.8g 1-环己基-2,2,2-三氟-乙醇，收率88%。
向1-环己基-2,2,2-三氟-乙醇（182mg，1mmol）在10ml无水THF中的溶液加入NaH（80mg，60%，3.0mmol），将混合物搅拌20分钟，加入2-氨基-4,6-二氯-嘧啶（164mg，1mmol），然后将反应混合物在70℃下加热1小时。在冷却后，加入5ml水，并用乙酸乙酯（20ml）萃取产物。将有机层在硫酸钠上干燥。通过旋转蒸发除去溶剂，得到202mg 4-氯-6-[1-环己基-2,2,2-三氟-乙氧基]-嘧啶-2-基胺，收率65%。
在微波小瓶中，加入4-氯-2-氨基-6-[1-环己烷-2,2,2-三氟-乙氧基]-嘧啶（33mg，0.1mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（31mg，0.15mmol）和1ml乙腈、0.7ml水，向上述溶液加入0.3ml碳酸钠水溶液（1M），然后加入5mol.%氯双(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封并用微波加热到150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在2.5ml甲醇中，然后通过Prep-LC纯化产物，得到4.9mg 2-氨基-3-{4-[2-氨基-6-(1-环己基-2,2,2-三氟-乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸。1H NMR(300MHz,CD3Cl)δ7.95(d,J＝8.39Hz,2H),7.49(d,J＝8.39Hz,2H),6.72(s,1H),5.90(m,1H),4.33(t,1H),3.21-3.44(m,2H),1.73-2.00(m,6H),1.23-1.39(m,5H)。
5.9.(S)-2-氨基-3-(4-(6-(2-氟苯氧基)嘧啶-4-基)苯基)丙酸的合成
向2-氟苯酚（112mg，1mmol）在10ml无水THF中的溶液加入NaH（80mg，60%，3.0mmol），将混合物搅拌20分钟，加入4,6-二氯-嘧啶（149mg，1mmol），然后将反应混合物在70℃下加热1小时。在冷却后，加入5ml水，并用乙酸乙酯（20ml）萃取产物。将有机层在硫酸钠上干燥。通过旋转蒸发除去溶剂，得到146mg 4-氯-6-(2-氟苯氧基)-嘧啶，收率65%。
在微波小瓶（2ml）中装入4-氯-6-[2-氟苯氧基]-嘧啶（33mg，0.1mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（31mg，0.15mmol）和1ml乙腈、0.7ml水，向上述溶液加入0.3ml碳酸钠水溶液（1M），然后加入5mol.%二氯双(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封并用微波加热到150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干，将残留物溶解在2.5ml甲醇中，然后通过Prep-LC纯化产物，得到4.9mg 2-氨基-3-{4-[2-氨基-6-(1-2-氟苯基-2,2,2-三氟-乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.74(s,1H),8.17(d,J＝8.06Hz,2H),7.63(s,1H),7.50(d,J＝8.06Hz,2H),7.30(m,5H),4.33(m,1H),3.34(m,1H)。
5.10.(2S)-2-氨基-3-(4-(4-(3-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-1,3,5-三嗪-2-基) 苯基)丙酸的合成
在0℃下，向2,4-二氯三嗪（149.97mg，1mmol）和300mg二异丙基乙胺在10ml THF中的溶液加入3-(4-氯苯基)哌啶（232mg，1mmol）。将形成的混合物升温至室温并搅拌1小时。将产物用乙酸乙酯（3x20ml）萃取。分离有机层并在硫酸钠上干燥。将有机溶剂蒸发，得到328mg 2-氯-4-[3-(4-氯苯基)-哌啶-1-基]-[1,3,5]三嗪。
在微波小瓶中装入2-氯-4-[3-(4-氯苯基)-哌啶-1-基]-[1,3,5]三嗪（62mg，0.2mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（60mg，0.3mmol）、1ml乙腈和0.7ml水。向溶液加入碳酸钠水溶液（0.6ml；1M），然后加入5mol.%二氯双(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封并用微波加热到150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在2.5ml甲醇中，然后通过Prep-LC纯化，得到5.1mg 2-氨基-3-(4-{4-[3-(4-氯苯基)-哌啶-1-基]-[1,3,5]三嗪-2-基}-苯基)-丙酸。1H NMR(400MHz,CD3Cl)δ8.58(d,2H),8.05(d,2H),7.47(m,5H),4.96(m,1H),4.23(m,2H),3.21-3.44(m,4H),2.37(m,5H)。
5.11.(2S)-2-氨基-3-(4-(4-氨基-6-(2,2,2-三氟-1-苯基乙氧基)-1,3,5- 三嗪-2-基)苯基)丙酸的合成
向2,2,2-三氟-1-苯基-乙醇（176mg，1mmol）在10ml无水1,4-二噁烷中的溶液加入NaH（80mg，60%，3.0mmol）。将混合物搅拌20分钟，然后在0℃下加入2-氨基-4,6-二氯-三嗪（164mg，1mmol）在30ml 1,4-二噁烷中的溶液1小时。然后将反应混合物升温至室温。在反应完成后，加入5ml水，并用乙酸乙酯（20ml）萃取产物。将有机层在硫酸钠上干燥。通过旋转蒸发除去溶剂，得到198mg 4-氯-6-[2,2,2-三氟-1-苯基-乙氧基]-[1,3,5]三嗪-2-基胺，收率65%。
在微波小瓶中装入4-氯-6-[2,2,2-三氟-1-苯基-乙氧基]-[1,3,5]三嗪-2-基胺（33mg，0.1mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（31mg，0.15mmol）、1ml乙腈和0.7ml水。向上述溶液加入碳酸钠水溶液（0.3ml，1M），然后加入5mol.%氯双(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封并用微波加热到150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在2.5ml甲醇中，然后通过Prep-LC纯化，得到3.2mg 2-氨基-3-{4-[4-氨基-6-(1-苯基-2,2,2-三氟-乙氧基]-[1,3,5]三嗪-2-基]-苯基)-丙酸。1HNMR(300MHz,CD3OD)δ8.22(d,J＝8.20Hz,2H),7.52(m,2H),7.33(m,5H)6.62(m,1H),4.19(t,1H),3.1-3.33(m,2H)。
5.12.(S)-2-氨基-3-(5-(4-氨基-6-((R)-1-(萘-2-基)乙基氨基)-1,3,5 嗪-2-基)吡啶-2-基)丙酸的合成
在微波小瓶中装入6-氯-N-[1-萘-2-基-乙基]-[1,3,5]三嗪-2,4-二胺（30mg，0.1mmol）、2-boc保护的-氨基-3-{5-[4,4,5,5,-四甲基-[1,3,2]二氧硼戊环-2-基)-吡啶2-基-]-丙酸（50mg，0.15mmol）、1ml乙腈和0.7ml水。向溶液加入碳酸钠水溶液（0.3ml；1N），然后加入5mol.%二氯双(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封并用微波加热至150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在2.5ml甲醇中，然后通过Prep-LC纯化，得到7mg boc保护的2-氨基-3-{5-[4-氨基-6-(1-萘-2-基-乙基氨基)-[1,3,5]三嗪-2-基]-吡啶-2-基}丙酸。
将上述产物（7.0mg）在0.1ml 10%TFA/DCM溶液中溶解2小时，以提供1.1mg 2-氨基-3-{3-[4-氨基-6-(1-萘-2-基-乙基氨基)-[1,3,5]三嗪-2-基]-吡啶-2-基}丙酸。1H NMR(300MHz,CD3Cl)δ9.35(d,1H),8.57(m,1H),7.85(m,4H),7.45(m,4H),6.94(s,1H),5.58(m,1H),4.72(m,2H),4.44(m,1H),1.42(d,3H)。
5.13.(S)-2-氨基-3-(3-(4-氨基-6-((R)-1-(萘-2-基)乙基氨基)-1,3,5-三 嗪-2-基)-1H-吡唑-1-基)丙酸的合成
6-氯-N-[1-萘-2-基-乙基]-[1,3,5]三嗪-2,4-二胺（30mg，0.1mmol）、2-boc-保护的氨基-3-{3-[4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼戊环-2-基)-吡唑-1-基]-丙酸（50mg，0.15mmol）、1ml乙腈和0.7ml水。向微波小瓶加入碳酸钠水溶液（0.3ml和1N），然后加入5mol.%氯双(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封并用微波加热至150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在2.5ml甲醇中，然后使用Prep-LC纯化，得到6.8mg boc保护的2-氨基-3-{3-[4-氨基-6-(1-萘-2-基-乙基氨基)[1,3,5]三嗪-2-基]-吡唑-1-基}丙酸。
将上述产物（6.8mg）在0.1ml 10%TFA/DCM溶液中搅拌2小时，以提供3mg 2-氨基-3-{3-[4-氨基-6-(1-萘-2-基-乙基氨基)-[1,3,5]三嗪-2-基]-吡唑-1-基}丙酸。1H NMR(300MHz,CD3Cl)δ8.52(s,1H),8.21(s,1H),7.74(m,4H),7.36(m,3H),5.35(m,1H),4.72(m,2H),4.44(m,1H),1.55(d,3H)。
5.14.(S)-2-氨基-3-(4'-(3-(环戊氧基)-4-甲氧基苯甲基氨基)联苯-4- 基)丙酸的合成
向4-溴-苯胺（252mg，1.47mmol）和3-环戊氧基-4-甲氧基-苯甲醛（324mg，1.47mmol）在10ml 1,2-二氯乙烷（DCE）中的溶液加入三乙酰氧基硼氢化钠（470mg，2.21mmol），加入0.5ml HOAc。将混合物在室温搅拌过夜，然后加入15ml DCE。将有机相用水洗涤，并在硫酸钠上干燥。通过旋转蒸发除去溶剂，得到656mg粗品(4-溴-苯基)-(3-环戊氧基-4-甲氧基-苯甲基)-胺。它不用进一步纯化直接用于下一步。
在Emrys微波处理小瓶（2-5ml）中装入(4-溴-苯基)-(3-环戊氧基-4-甲氧基-苯甲基)-胺（84mg，0.22mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（46mg，0.22mmol）和2ml乙腈。向上述溶液加入碳酸钠水溶液（2ml，1M），然后加入5mol.%氯双(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封并用微波加热至150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在2.5ml甲醇中，并使用Prep-LC纯化，得到5mg 2-氨基-3-[4’-(3-环戊氧基-4-甲氧基-苯甲基氨基)-联苯-4-基]-丙酸，收率5%。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ1.46(m,2H),1.62(m,4H),3.01(m,2H),3.64(s,3H),4.14(s,3H),4.66(m,1H),6.61(d,2H),6.81(s,2H),6.88(s,1H),7.18(d,2H),7.31(d,2H),7.44(d,2H),7.60(m,1H),8.19(s,3H)。
5.15.(S)-2-氨基-3-(4-(6-(3-(环戊氧基)-4-甲氧基苯甲基氨基)嘧啶 -4-基)苯基)丙酸的合成
向6-氯-嘧啶-4-基胺（200mg，1.55mmol）和3-环戊氧基-4-甲氧基-苯甲醛（682mg，3.1mmol）在25ml DCE中的溶液加入三乙酰氧基硼氢化钠（985mg，4.65mmol）。加入1ml HOAc，将混合物在50℃搅拌过夜，然后加入25ml DCE。将有机相用水洗涤，将产物用柱（硅胶，己烷:EtOAc 5:1）纯化，得到64mg(6-氯-嘧啶-4-基)-(3-环戊氧基-4-甲氧基-苯甲基)-胺，收率12%。
在Emrys微波处理小瓶（2-5ml）中装入(6-氯-嘧啶-4-基)-(3-环戊氧基-4-甲氧基-苯甲基)-胺（64mg，0.19mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（40mg，0.19mmol）和2ml乙腈。向上述溶液加入碳酸钠水溶液（2ml，1M），然后加入5mol.%二氯双(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封并用微波加热至150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在2.5ml甲醇中，并使用Prep-LC纯化，得到5.3mg 2-氨基-3-{4-[6-(3-环戊氧基-4-甲氧基-苯甲基氨基)-嘧啶-4-基]-苯基}-丙酸，收率6%。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ1.46(m,2H),1.62(m,4H),3.01(m,2H),3.08(m,2H),3.65(s,3H),4.20(m,1H),4.46(d,2H),4.68(m,1H),6.82(t,2H),6.87(d,2H),7.40(d,2H),7.90(s,2H),8.25(s,2H),8.6(s,1H)。
5.16.(S)-2-氨基-3-(4-(6-(3-(环戊氧基)-4-甲氧基苯甲基氨基)吡嗪 -2-基)苯基)丙酸的合成
向6-氯-吡嗪-2-基-胺（400mg，3.10mmol）和3-环戊氧基-4-甲氧基-苯甲醛（818mg，3.7mmol）在50ml DCE中的溶液加入三乙酰氧基硼氢化钠（1315mg，6.2mmol），加入1ml HOAc，将混合物在50℃搅拌过夜，然后再加入50ml DCE。将有机相用水洗涤，将产物用柱（硅胶，己烷:EtOAc 6:1）纯化，得到50mg(6-氯-吡嗪-2-基)-(3-环戊氧基-4-甲氧基-苯甲基)-胺，收率10%。
在Emrys微波处理小瓶（2-5ml）中装入(6-氯-吡嗪-2-基)-(3-环戊氧基-4-甲氧基-苯甲基)-胺（50mg，0.15mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（31mg，0.15mmol）和2ml乙腈。向溶液加入碳酸钠水溶液（2ml，1M），然后加入5mol.%二氯双(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封并用微波加热至150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在2.5ml甲醇中，并使用Prep-LC纯化产物，得到5.5mg 2-氨基-3-{4-[6-(3-环戊氧基-4-甲氧基-苯甲基氨基)-吡嗪-2-基]-苯基}-丙酸，收率6%。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ1.46(m,2H),1.62(m,4H),3.01(m,2H),3.08(m,2H),3.65(s,3H),4.0(m,1H),4.45(d,2H),4.65(m,1H),6.90(s,2H),6.95(s,1H),7.32(d,2H),7.60(t,1H),7.90(s,1H),7.95(d,2H),8.25(s,1H)。
5.17.(S)-2-氨基-3-(4-(5-((4'-甲基联苯-2-基)甲基氨基)吡嗪-2-基) 苯基)丙酸的合成
向4'-甲基-联苯基-2-甲醛和5-溴-吡嗪-2-基胺在5ml DCE中的溶液加入三乙酰氧基硼氢化钠（215mg，1.02mmol），加入0.1ml HOAc，将混合物在室温搅拌过夜，然后加入5ml DCE。将有机相用水洗涤，并用柱（硅胶，己烷:EtOAc 6:1）纯化，得到100mg(5-溴-吡嗪-2-基)-(4'-甲基-联苯-2-基甲基)-胺，收率55%。
在Emrys微波处理小瓶（2-5ml）中装入(5-溴-吡嗪-2-基)-(4'-甲基-联苯-2-基甲基)-胺（25mg，0.071mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（22mg，0.11mmol）和1ml乙腈。向溶液加入碳酸钠水溶液（1ml，1M），然后加入5mol.%二氯双(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封并用微波加热至150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在2.5ml甲醇中，并使用Prep-LC纯化产物，得到19mg 2-氨基-3-{4-[6-(3-环戊氧基-4-甲氧基-苯甲基氨基)-吡嗪-2-基]-苯基}-丙酸，收率63%。1H-NMR(400MHz,CD3OD):δ2.22(s,3H),3.09(m,1H),3.25(m,1H),4.18(t,1H),4.40(s,2H),7.07(d,2H),7.14(m,3H),7.24(m,4H),7.36(m,1H),7.72(d,2H),7.84(s,1H),8.20(d,1H)。
5.18.(2S)-2-氨基-3-(4-(6-(2,2,2-三氟-1-苯基乙氧基)-嘧啶-4-基)苯 基)丙酸的合成
向2,2,2-三氟-1-苯基-乙醇（350mg，2.03mmol）在5ml THF中的溶液加入NaH（60%，120mg，3.0mmol）。将混合物在室温下搅拌20分钟。加入4,6-二氯-嘧啶（300mg，2.03mmol），然后将反应混合物在70℃加热1小时。在冷却后，将THF蒸发以提供残留物，将其溶解在15ml EtOA中，然后用水洗涤，并在硫酸钠上干燥。通过旋转蒸发除去溶剂，得到550mg 4-氯-6-(2,2,2-三氟-1-苯基-乙氧基)-嘧啶，收率95%。
在Emrys微波处理小瓶（2-5ml）中装入4-氯-6-(2,2,2-三氟-1-苯基-乙氧基)-嘧啶（30mg，0.11mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（32mg，0.16mmol）、1ml乙腈和0.6ml水。向上述溶液加入碳酸钠水溶液（0.42ml，1M），然后加入10mol.%POPd2（二氢二-μ-氯二氯双(二叔丁基膦酰-κP)二钯酸盐。将反应容器密封并用微波加热至120℃30分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在2.5ml甲醇中，并使用Prep-LC纯化产物，得到4.8mg 2-氨基-3-{4-[6-(2,2,2-三氟-1苯基-乙氧基)-嘧啶-4-基]-苯基}-丙酸，收率11%。1H-NMR(400MHz,CD3OD):δ3.20(m,1H),3.40(m,1H),4.25(t,1H),6.82(dd,1H),7.43(m,5H),7.57(s,1H),7.60(m,2H),8.10(d,2H),8.75(s,1H)。
5.19.(2S)-2-氨基-3-(4-(6-(1-(3,4-二氟苯基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶 -4-基)苯基)丙酸的合成
在0℃下，向3,4-二氟-苯甲醛（1.42g，10mmol）和(三氟甲基)三甲基硅烷（1.70g，12mmol）在10ml THF中的溶液加入THF中的四丁基氟化铵（TBAF：0.1ml，1M）。将混合物升温至室温并搅拌4小时。将反应混合物用12ml 1M HCl处理并搅拌过夜。将产物用二氯甲烷（3x20ml）萃取，将有机层合并并通过硅胶垫。将有机溶剂蒸发，得到1.9g 1-(3,4-二氟-苯基)-2,2,2-三氟-乙醇，收率90%。
向1-(3,4-二氟-苯基)-2,2,2-三氟-乙醇（212mg，1mmol）在5ml THF中的溶液加入NaH（80mg，60%，3.0mmol），将混合物在室温下搅拌20分钟。加入4,6-二氯-嘧啶（149mg，1mmol），然后将反应混合物在70℃加热1小时。在冷却后，将THF蒸发。将残留物溶解在15mlEtOA中，然后用水洗涤，并在硫酸钠上干燥。通过旋转蒸发除去溶剂，得到230mg 4-氯-6-[1-(3,4-二氟-苯基)-2,2,2-三氟-乙氧基]-嘧啶，收率70%。
在Emrys微波处理小瓶（2-5ml）中装入4-氯-6-[1-(3,4-二氟-苯基)-2,2,2-三氟-乙氧基]-嘧啶（33mg，0.1mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（31mg，0.15mmol）、1ml乙腈和0.7ml水。向上述溶液加入碳酸钠水溶液（0.3ml，1M），然后加入5mol.%二氯双(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封并用微波加热至150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在2.5ml甲醇中，然后使用Prep-LC纯化，得到10mg 2-氨基-3-(4-{6-[1-(3,4-二氟-苯基)-2,2,2-三氟-乙氧基]-吡啶-4-基}-苯基)-丙酸，收率21%。1H-NMR(400MHz,CD3OD)：δ3.11(m,1H),3.27(m,1H),4.19(dd,1H),6.78(q,1H),7.26(m,2H),7.35(d,3H),7.49(m,2H),8.02(d,2H),8.66(s,1H)。
5.20.(S)-2-氨基-3-(4-(5-(3-(环戊氧基)-4-甲氧基苯甲基氨基)-吡嗪 -2-基)苯基)丙酸的合成
将3-环戊氧基-4-甲氧基-苯甲醛（417mg，1.895mmol）、2-氨基-5-溴吡嗪（300mg，1.724mmol）、三乙酰氧基硼氢化钠（1.5eq）和冰乙酸（3eq）在二氯甲烷（10ml）中的混合物在室温下搅拌过夜。然后将反应混合物用乙酸乙酯稀释，并用水洗涤。将有机层在MgSO4上干燥并过滤。将滤液浓缩，得到粗产物，将其通过ISCO（SiO2快速柱层析）（己烷/乙酸乙酯=100/0至3/2）纯化，得到约400mg 6-溴-吡嗪-2-基)-(3-环戊氧基-4-甲氧基-苯甲基)-胺，收率：61%。
向5ml微波小瓶加入上述6-溴-吡嗪-2-基)-(3-环戊氧基-4-甲氧基-苯甲基)-胺（50mg，0.132mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（30mg,0.144mmol）、Na2CO3（31mg，0.288mmol）、乙腈（2ml）和水（2ml）。加入二氯双(三苯基膦)-钯（5mg，0.007mmol）。将小瓶盖上盖子，并在微波辐射下在150℃搅拌5分钟。将反应混合物冷却，通过注射式滤器过滤，然后使用YMC-Pack ODS 100x30mm ID柱（MeOH/H2O/TFA溶剂系统）通过反相制备型HPLC进行分离。将纯级份在真空中浓缩。然后将产物悬浮在5ml水中，冷冻并冻干，得到作为三氟盐的标题化合物（12mg，20%）。1H NMR(CD3OD)δ8.41(s,1H),7.99(s,1H),7.83(d,J=9.0Hz,2H),7.37(d,J=6.0Hz,2H),6.90-6.95(m,3H),4.78(m,1H),4.50(s,2H),4.22-4.26(m,1H),3.79(s,3H),3.12-3.39(m,2H),1.80-1.81(m,6H),1.60(m,2H)。M+1=463。
5.21.(S)-2-氨基-3-(4-(5-((3-(环戊氧基)-4-甲氧基苯甲基)-(甲基)氨 基)吡嗪-2-基)苯基)丙酸的合成
向(6-溴-吡嗪-2-基)-(3-环戊氧基-4-甲氧基-苯甲基)-胺（70mg，0.185mmol）在乙腈（10ml）中的溶液加入甲醛（18.5mmol）和氰基硼氢化钠（17mg，0.278mmol）。然后逐滴加入浓HCl水溶液直到pH≈2。将混合物在室温下搅拌约6小时。然后将其用乙酸乙酯稀释，用水洗涤（3X5ml），在MgSO4上干燥。通过真空除去溶剂，得到70mg粗产物5-(溴-吡嗪-2-基)-(3-环戊氧基-4-甲氧基-苯甲基)-甲基-胺（95%粗品收率），其不需进一步纯化用于下一步骤中。
如上所述对5-(溴-吡嗪-2-基)-(3-环戊氧基-4-甲氧基-苯甲基)-甲基-胺（37mg，0.094mmol）进行Suzuki偶联反应，得到6mg标题化合物。收率：13%。1H NMR(CD3OD)δ8.59(s,1H),8.12(s,1H),7.85(d,2H),7.39(d,2H),6.81-6.91(m,3H),4.72(m,1H),4.30(m,1H),3.79(s,3H),3.20-3.40(m,2H),3.18(s,3H),3.79(s,3H),1.80(m,6H),1.58(m,2H)。M+1=477。
5.22.(S)-2-氨基-3-(4-(5-((1，3-二甲基-1H-吡唑-4-基)甲基氨基)吡嗪 -2-基)苯基)丙酸的合成
将1,3-二甲基-1H-吡唑-4-甲醛（142mg，1.145mmol）、2-氨基-5-溴吡嗪（200mg，1.149mmol）、硼烷三甲胺复合物（126mg，1.73mmol）和冰乙酸（137mg，2.29mmol）在无水甲醇（3ml）中的混合物在室温下搅拌过夜。然后将反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水洗涤，在MgSO4上干燥并过滤。将滤液浓缩，得到300mg作为粗产物的(5-溴-吡嗪-2-基)-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基甲基)胺，其不需进一步纯化用于下一步反应中。粗品收率：93%。
如上所述将(5-溴-吡嗪-2-基)-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基甲基)胺（40mg，0.142mmol）用于Suzuki偶联反应中，得到19mg标题化合物。收率：36.5%。1H NMR(CD3OD)δ8.48(s,1H),8.05(s,1H),7.87(d,2H),7.39(d,2H),6.10(s,1H),4.81(s,2H),4.30(m,1H),3.83(s,3H),3.11-3.38(m,2H),2.10(s,3H)。M+1=367。
5.23.(S)-2-氨基-3-(4-(4-氨基-6-((S)-1-(萘-2-基)乙基氨基)-1,3,5-三 嗪-2-基氧基)苯基)丙酸的合成
向250ml烧瓶加入R-(+)-1-(2-萘基)乙胺（400mg，2.424mmol）、2-氨基-4,6-二氯三嗪（373mg，2.181mmol）、无水1,4-二噁烷（40ml）和N,N-二异丙基乙胺（1ml，5.732mmol），并加热至轻度回流约4小时。仔细监测反应以避免形成二取代产物。（观察到反应越长，形成的二取代产物越多）。在4小时后，将反应混合物冷却，并在减压下除去溶剂。向残留物加入水，并将溶液超声处理2-3分钟。然后将溶剂过滤，用水洗涤并干燥，得到540mg（83%粗品收率）一氯化物6-氯-N-(1-萘-2-基-乙基)-[1,3,5]三嗪-2,2-二胺，其不需进一步纯化用于下一步反应中。
将6-氯-N-(1-萘-2-基-乙基)-[1,3,5]三嗪-2,2-二胺（90mg，0.300mmol）、2-叔丁氧基羰基氨基-3-(4-羟基-苯基)-丙酸叔丁酯（102mg，0.303mmol）和碳酸钾（82mg，0.594mmol）在异丙醇（8ml）中的混合物回流过夜。在减压下除去溶剂，并将残留物悬浮在乙酸乙酯中。将固体过滤并用乙酸乙酯洗涤。将滤液浓缩，然后重新溶解在甲醇/水（90:10）混合物中，并使用Sunfire C18OBD 100x30mm ID柱（MeOH/H2O/TFA溶剂系统）通过制备型LC进行纯化。将纯级份合并并浓缩，得到50mg纯产物3-{4-[4-氨基-6-(1-萘-2-基-乙基氨基)-[1,3,5]三嗪-2-基氧基]-苯基}2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸叔丁酯（28%收率）。
将上述产物（50mg，0.083mmol）溶解在三氟乙酸/二氯甲烷（8ml/2ml）中，并在室温搅拌过夜。在减压下除去溶剂。然后将残留物重新溶解在甲醇/水（90:10）混合物中，并使用Sunfire C18OBD 100x30mm ID柱（MeOH/H2O/TFA溶剂系统）通过制备型LC进行纯化。将纯级份合并并在减压下浓缩，得到约4ml，将其冷冻并冻干，得到4mg作为TFA盐的标题化合物（11%收率）。1H NMR(CD3OD)δ7.37-7.81(m,8H),7.19(m,2H),6.98(m,1H),5.37(m,1H),4.19(m,1H),3.17-3.38(m,2H),1.56(m,3H)。M+1=445。
5.24.(S)-2-氨基-3-(4-(4-氨基-6-((R)-1-(联苯-2-基)-2,2,2-三氟乙氧 基)-1,3,5-三嗪-2-基)苯基)丙酸的合成
将1-联苯-2-基-2,2,2-三氟-乙酮（300mg，1.2mmol）、硼烷四氢呋喃复合物（1.2ml，1M，在THF中，1.2mmol）和S-2-甲基-CBS-噁唑硼烷（0.24ml，1M，在甲苯中，0.24mmol）在THF（8ml）中的混合物在室温下搅拌过夜。加入几滴浓HCl，并将混合物搅拌30分钟。将产物通过SiO2层析（己烷/乙酸乙酯=100/0至3/1）进行纯化，得到290mg 1-联苯-2-基-2,2,2-三氟-乙醇（96%收率）。
将上述醇（290mg，1.151mmol）溶解在无水THF（10ml）中。将氢化钠（55mg，1.375mmol）一次全部加入，并将混合物在室温搅拌30分钟。然后将溶液转移至含有2-氨基-4,6-二氯-三嗪（190mg，1.152mmol）在THF（20ml）中的悬液的烧瓶中。将混合物在室温搅拌过夜。加入水，然后将混合物用乙酸乙酯稀释。将有机层用水洗涤，在MgSO4上干燥然后浓缩，得到400mg粗产物2-氨基-4-(1-联苯-2-基-2,2,2-三氟-乙氧基-6-氯-三嗪。
对2-氨基-4-(1-联苯-2-基-2,2,2-三氟-乙氧基-6-氯-三嗪（40mg，0.105mmol）进行与上述相同的Suzuki偶联反应，得到5mg标题化合物。收率：9.4%。1H NMR(CD3OD)δ8.18(d,2H),7.86(m,1H),7.40-7.52(m,9H),7.32(m,1H),7.07(m,1H),4.32(m,1H),3.22-3.41(m,2H)。M+1=510。
5.25.(2S)-2-氨基-3-(4-(4-氨基-6-(1-(6,8-二氟萘-2-基)乙基氨 基)-1,3,5-三嗪-2-基)苯基)丙酸的合成
在三颈烧瓶中，在氮气下向无水THF（60ml）加入碘化铜（CuI）（299mg，1.515mmol）和氯化锂（LiCl）（145mg，3.452mmol）。将混合物在室温下搅拌，直到获得浅黄色溶液。在冷却至0℃后，加入甲基乙烯基酮和三甲基氯硅烷，并将混合物搅拌至观察到橙色（~20min）。在冷却至约-40℃后，缓慢加入3,5-二氟苯基溴化镁（27.65ml，13.8mmol）在THF（0.5M）中的溶液。将反应混合物在约-40℃下搅拌0.5小时，然后移除冷浴，并允许温度缓慢升高至室温。将溶剂蒸发，并将残留物用己烷（4x20ml）萃取。将收集的萃取液用冷的10%NaHCO3水溶液洗涤，并在Na2SO4上干燥。将溶剂在减压下蒸发，得到3,5-二氟苯基-1-三甲基甲硅烷基氧基烯（2.03g，7.929mmol，57%粗品收率），其不用进一步纯化即用于后续反应中。
在氮气气氛下，向硝酸铈铵（10.430g，19.033mmol）在甲醇（40ml）中的溶液加入粉末碳酸钙（3.806g，38.06mmol）和乙基乙烯基醚（2.184g，30.329mmol）。在剧烈搅拌下，向得到的悬液逐滴加入上面制备的3,5-二氟苯基-1-三甲基甲硅烷基氧基烯（2.03g，7.929mmol）在乙基乙烯基（6ml，4.518g，62.75mmol）中的溶液，并将混合物在室温搅拌过夜。将固体通过硅藻土层过滤，并将滤液浓缩至其最初体积的四分之一。将得到的浓稠混合物在剧烈搅拌下缓慢倒入1:1v/v的二乙醚-10%NaHCO3水溶液中。过滤掉沉淀，分离醚溶液，将溶剂在减压下蒸发，得到清亮液体。在0℃下，向二氯二氰基苯醌（1.77g，7.797mmol）在80%硫酸水溶液中的悬液逐滴加入得到的液体（脂族和环状乙酸酯的混合物）在甲醇（4ml）中的溶液。在添加完成后，除去冰浴并继续搅拌30分钟。将混合物倒入冰水中，将得到的棕色沉淀物过滤并溶解在丙酮中。加入硅胶制成塞，并将粗产物通过层析（己烷/乙酸乙酯=100/0至3/1）进行纯化，得到760mg作为浅黄色固体的1-(5,7-二氟-萘-2-基)-乙酮（在两个步骤中的收率为48%）。
将上述酮（760mg，3.689mmol）溶解在甲醇（40ml）中。然后加入乙酸铵（2.841g，36.896mmol）、氰基硼氢化钠（232mg，3.389mmol）和分子筛
Figure BDA00001690751800481
将混合物在室温搅拌2天。将固体过滤并浓缩滤液。将残留物溶解在水中，逐滴加入浓HCl水溶液至pH≈2。然后将混合物用乙酸乙酯萃取以除去未反应的酮和其他副产物。将水层用氢氧化钠水溶液（1M）碱化至pH≈10，用二氯甲烷萃取，将有机层合并，在硫酸镁上干燥并浓缩，得到290mg 1-(5,7-二氟-萘-2-基)-乙胺（38%收率）。
将新鲜制备的胺（290mg，1.401mmol）直接加入到2-氨基-4,6-二氯三嗪（277mg，1.678mmol）在无水1,4-二噁烷（60ml）中的悬液中，然后加入N,N-二异丙基乙胺（1ml，5.732mmol）。将混合物加热至轻度回流约3小时。然后将反应混合物冷却，在减压下除去溶剂。向残留物加入水，并将混合物超声处理2-3分钟。将得到的固体过滤，用水洗涤并干燥，得到395mg（粗品收率60%）6-氯-N-[1-(6,8-二氟-萘-2-基-乙基]-[1,3,5]三嗪-2,4-二胺，其不用进一步纯化直接用于下一步反应。
对上面制造的一氯化物（48mg，0.144mmol）进行与上述相同的Suzuki偶联反应，得到12mg标题产物。收率：17.9%。1H NMR(CD3OD)δ8.14-8.22(m,2H),8.05(m,1H),7.92(m,1H),7.63(m,1H),7.32-7.51(m,3H),7.11(m,1H),5.48(m,1H),4.13(m,1H),3.13-3.41(m,2H),1.66(d,3H)。M+1=465。
5.26.(2S)-2-氨基-3-(4-(4-氨基-6-(2,2,2-三氟-1-(3'-甲基联苯-2-基) 乙氧基)-1,3,5-三嗪-2-基)苯基)丙酸的合成
在0℃下向3'-甲基-1-联苯基-2-甲醛（500mg，2.551mmol）和三氟甲基三甲基硅烷（435mg，3.061mmol）在THF（3ml）中的混合物加入四丁基氟化铵（13mg，0.05mmol）。使温度升温至室温。将混合物在室温下搅拌5小时，然后用乙酸乙酯稀释，用水和盐水洗涤，并用MgSO4干燥。在减压下除去溶剂，得到660mg（粗品收率97%）作为粗产物的2,2,2-三氟-1-(3’-甲基-联苯-2-基)-乙醇，其不用进一步纯化用于下一步骤。
将上面制造的醇（660mg，2.481mmol）溶解在无水1,4-二噁烷（10ml）中。将氢化钠（119mg，60%，在矿物油中，2.975mmol）全部一次加入，并将混合物在室温下搅拌30分钟。将溶液转移到含有2-氨基-4,6-二氯-三嗪（491mg，2.976mmol）的1,4-二噁烷（70ml）悬液的烧瓶中。将混合物在室温下搅拌6小时。除去溶剂，并将残留物悬浮在乙酸乙酯中，将其用水洗涤，在MgSO4上干燥然后浓缩，得到790mg粗产物，其含有约57%目标产物2-氨基-4-(1-(3’-甲基-联苯-2-基-2,2,2-三氟-乙氧基-6-氯-三嗪和约43%副产物（二取代产物）。粗产物不需进一步纯化即可使用。
将2-氨基-4-(1-(3’-甲基-联苯-2-基-2,2,2-三氟-乙氧基-6-氯-三嗪（98mg，57%纯度，0.142mmol）用于运行与上述相同的Suzuki偶联反应，得到9mg标题化合物。收率：12.0%。1H NMR(CD3OD)δ8.09(m,2H),7.85(m,1H),7.50(m,2H),7.28-7.43(m,5H),7.17-7.26(m,2H),7.18(m,1H),3.85(m,1H),3.08-3.44(m,2H),2.33(s,3H)。M+1=524。
5.27.(S)-2-氨基-3-(4-(5-(3,4-二甲氧基苯基氨甲酰基)-吡嗪-2-基)苯 基)丙酸的合成
在0-5℃下向3,4-二甲氧基苯胺（0.306g，2mmol）和三乙胺（0.557ml，4mmol）在二氯甲烷（20ml）中的混合物加入5-氯-吡嗪-2-羰基氯（0.354g，2mmol）。让混合物在室温下搅拌3小时。将混合物用二氯甲烷（20ml）稀释，用饱和NaHCO3（20ml）、盐水（20ml）洗涤，干燥（无水Na2SO4）并浓缩，得到0.42g粗品5-氯-吡嗪-2-羧酸(3,4-二甲氧基-苯基)-酰胺，其直接使用在下一步反应中。
将5-氯-吡嗪-2-羧酸(3,4-二甲氧基-苯基)-酰胺（0.18g，0.61mmol）、L-p-硼-苯丙氨酸（0.146g，0.70mmol）、CH3CN（2.5ml）、H2O（2.5ml）、Na2CO3（0.129g，1.22mmol）合并在微波小瓶中。将混合物密封并在150℃保持5分钟。将混合物过滤并浓缩。将残留物溶解在甲醇/水（1:1）中，并使用MeOH/H2O/TFA作为溶剂系统通过制备型HPLC进行纯化，得到作为TFA盐的2-氨基-3-{4-[5-(3,4-二甲氧基-苯基氨甲酰基)-吡嗪-2-基]-苯基}-丙酸（HPLC：方法A，保留时间=2.846min，LCMS M+1423）。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.10-3.30(m,2H),3.72(d,6H),4.05(m,1H),7.42-7.62(m,4H),8.22(m,3H),9.30(m,2H)。
5.28.(S)-2-氨基-3-(4-(2-氨基-6-(4-(2-(三氟甲基)苯基)-哌啶-1-基) 嘧啶-4-基)苯基)丙酸的合成
在20ml微波小瓶中，将2-氨基-4,6-二氯嘧啶（0.164g，1mmol）、4-(2-三氟甲基-苯基)-哌啶盐酸盐（0.266g，1mmol）和碳酸铯（0.684g，2.1mmol）溶解在1,4-二噁烷（5ml）和H2O（5ml）的混合物中。将混合物在微波反应器中在210℃搅拌20分钟。除去溶剂，并将残留物溶解在含5%甲醇的CH2Cl2中（20ml），在Na2SO4上干燥并浓缩以得到粗品中间体4-氯-6-[4-(2-三氟甲基-苯基)-哌啶-1-基]-嘧啶-2-基胺（0.42g），其直接在下面步骤中使用。
在10ml微波小瓶中，将粗品中间体（0.42g）、L-p-硼-苯丙氨酸（0.209g，1mmol）、碳酸钠（0.210g，2mmol）和二氯双(三苯基膦)-钯(II)（35mg，0.05mmol）溶解在MeCN（2.5ml）和H2O（2.5ml）的混合物中。将小瓶密封并在微波反应器中在150℃搅拌6分钟。将混合物过滤，并将滤液浓缩。将残留物溶解在MeOH和H2O（1:1）中，并使用MeOH/H2O/TFA作为溶剂系统通过制备型HPLC进行纯化，得到作为TFA盐的2-氨基-3-(4-{4-(2-三氟甲基-苯基)-哌啶-1-基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸。HPLC：方法A，保留时间=3.203min。LCMS M+1486。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ1.80-2.20(m,5H),3.0-3.16(m,2H),3.22-3.42(m,2H),4.22(t,1H),4.42-4.54(m,1H),5.22-5.34(m,1H),6.80(s,1H),7.40(t,1H),7.50-7.60(m,4H),7.68(d,1H),7.82(d,2H)。
5.29.(S)-2-氨基-3-(4-(2-氨基-6-((R)-1-(萘-2-基)乙基氨基)嘧啶-4- 基)苯基)丙酸的合成
在20ml微波小瓶中，将2-氨基-4,6-二氯嘧啶（0.164g，1mmol）、(R)-(+)-1-(2-萘基)-乙胺（0.171g，1mmol）和碳酸铯（0.358g，1.1mmol）溶解在1,4-二噁烷（4ml）和H2O（4ml）的混合物中。将小瓶密封并在微波反应器中在210℃搅拌20分钟。除去溶剂并将残留物溶解在CH2Cl2（50ml）中，用水（20ml）、盐水（20ml）洗涤，干燥（Na2SO4）并浓缩，得到粗品中间体6-氯-N-4-(萘-2-基-乙基)-嘧啶-2,4-二胺（0.270g），其直接用于下面步骤中。
在微波小瓶中，将粗品中间体（0.27g）、L-p-硼-苯丙氨酸（0.210g，1mmol）、碳酸钠（0.210g，2mmol）和二氯双(三苯基膦)-钯(II)（25mg，0.036mmol）溶解在MeCN（2.5ml）和H2O（2.5ml）的混合物中。将小瓶密封并在微波反应器中在150℃搅拌6分钟。将混合物过滤，并将滤液浓缩。将残留物溶解在MeOH和H2O（1:1）中，并使用MeOH/H2O/TFA作为溶剂系统通过制备型HPLC进行纯化，得到作为TFA盐的2-氨基-3-{4-[2-氨基-6-(1-萘-2-基-乙基氨基)-嘧啶-4-基]-苯基}-丙酸。HPLC：方法A，保留时间=3.276min。LCMS M+1428。1HNMR(400MHz,CD3OD)δ1.68(d,3H),3.22-3.40(m,2H),4.30(t,1H),5.60(q,1H),6.42(s,1H),7.42-7.54(m,5H),7.72(m,2H),7.82-7.84(m,4H)。
5.30.(S)-2-氨基-3-(4-(2-氨基-6-(甲基((R)-1-(萘-2-基)乙基)氨基)嘧 啶-4-基)苯基)丙酸的合成
在20ml微波小瓶中，将2-氨基-4,6-二氯嘧啶（0.327g，2mmol）、甲基-(1-萘-2-基-乙基)-胺（0.360g，2mmol）和碳酸铯（0.717g，2.2mmol）溶解在1,4-二噁烷（7.5ml）和H2O（7.5ml）的混合物中。将小瓶密封并在微波反应器中在210℃搅拌20分钟。除去溶剂并将残留物溶解在CH2Cl2（50ml）中，用水（20ml）、盐水（20ml）洗涤，干燥（Na2SO4）并浓缩，得到粗品中间体6-氯-N-4-甲基-N-4-(1-萘-2-基-乙基)-嘧啶-2,4-二胺（0.600g），其直接用于下一步骤中。
在微波小瓶中，将粗品中间体（0.30g）、L-p-硼-苯丙氨酸（0.210g，1mmol）、碳酸钠（0.210g，2mmol）和二氯双(三苯基膦)-钯(II)（25mg，0.036mmol）溶解在MeCN（2.5ml）和H2O（2.5ml）的混合物中。将瓶密封并在微波反应器中在150℃搅拌6分钟。将混合物过滤，并将滤液浓缩。将残留物溶解在MeOH和H2O（1:1）中，并使用MeOH/H2O/TFA作为溶剂系统通过制备型HPLC进行纯化，得到作为TFA盐的2-氨基-3-(4-{2-氨基-6-[甲基-(1-萘-2-基-乙基)氨基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸（HPLC：方法C，保留时间=2.945min，LCMS M+1 442）。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ1.70(m,3H),2.92(s,3H),3.22-3.42(m,2H),4.28(m,1H),6.60(s,1H),6.72(m,1H),7.40-7.92(m,11H)。
5.31.(S)-2-氨基-3-(4-(2-氨基-6-((S)-2,2,2-三氟-1-(6-甲氧基萘-2-基) 乙氧基)嘧啶-4-基)苯基)丙酸的合成
在氮气气氛下，向无水二噁烷（20ml）加入2-氨基-4,6-二氯嘧啶（0.096g，0.6mmol）、2,2,2-三氟-1-(6-甲氧基-萘-2-基)-乙醇（0.140g，0.55mmol）和NaH（96mg，0.60mmol）。将反应在80℃搅拌12小时，冷却至室温，并用水（0.2ml）淬灭。将反应混合物浓缩，将残留物溶解在CH2Cl2（50ml）中，用水（20ml）、盐水（20ml）洗涤，干燥（Na2SO4）并浓缩，得到粗品中间体4-氯-6-[2,2,2-三氟-1-(6-甲氧基-萘-2-基)-乙氧基]-嘧啶-2-基胺（0.22g，其直接用于下一步骤中。
在微波小瓶中，将粗品中间体（0.22g）、L-p-硼-苯丙氨酸（0.126g，0.6mmol）、碳酸钠（0.126g，1.2mmol）和二氯双(三苯基膦)-钯(II)（15mg，0.021mmol）溶解在MeCN（2.0ml）和H2O（2.0ml）的混合物中。将小瓶密封并在微波反应器中在150℃搅拌6分钟。将混合物过滤，并将滤液浓缩。将残留物溶解在MeOH和H2O（1:1）中，并使用MeOH/H2O/TFA作为溶剂系统通过制备型HPLC进行纯化，得到作为TFA盐的2-氨基-3-(4-{2-氨基-6-[2,2,2-三氟-1-(6-甲氧基-萘-2-基)-乙氧基]-嘧啶-4-基]-苯基)-丙酸（HPLC：方法C，保留时间=3.190min。）LCMS M+1513。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ3.22-3.42(m,2H),3.86(s,3H),4.32(1H),6.88(m,1H),6.92(1H),7.20(dd,1H),7.26(s,1H),7.50(d,2H),7.63(d,1H),7.80-7.90(m,4H),8.05(s,1H)。
5.32.(S)-2-氨基-3-(4-(5-(联苯-4-基甲基氨基)吡嗪-2-基)苯基)丙酸 的合成
在室温下，将4-苯基苯甲醛（0.3g，1.65mmol）和2-氨基-5-溴吡嗪（0.24g，1.37mmol）用在二氯乙烷（7.0ml）和乙酸（0.25ml）中的Na(OAc)3BH（0.44g，2.06mmol）处理18小时。将混合物用二氯甲烷稀释，用1.0N NaOH洗涤，用盐水洗涤，在MgSO4上干燥并浓缩。层析（SiO2，EtOAc:Hex，1:1）得到0.18g N-(联苯-4-基甲基)-5-溴吡嗪-2-胺。
将N-(联苯-4-基甲基)-5-溴吡嗪-2-胺（60mg，0.176mmol）、L-p-硼苯丙氨酸（37mg，0.176mmol）、三苯基膦二氯化钯（3.6mg，0.0052mmol）、Na2CO3（37mg，0.353mmol）、乙腈（1.25ml）和水（1.25ml）在微波反应器中在150℃加热5分钟。将混合物浓缩，溶解在1.0NHCl中，用乙醚洗涤两次，浓缩并通过制备型HPLC进行纯化，得到41mg标题化合物。M+1=425；1H NMR(CD3OD)δ8.42(s,1H),8.05(s,1H),7.92(d,2H),7.58(d,4H),7.40(m,7H),4.60(s,2H),4.25(m,1H),3.40(m,1H),3.20(m,1H)。
5.33.(S)-2-氨基-3-(4-(5-(萘-2-基甲基氨基)吡嗪-2-基)苯基)丙酸的 合成
在室温下，将2-萘甲醛（0.6g，3.84mmol）和2-氨基-5-溴吡嗪（0.56g，3.201mmol）用在二氯乙烷（15.0ml）和乙酸（0.5ml）中的Na(OAc)3BH（1.02g，4.802mmol）处理18小时。将混合物用二氯甲烷稀释，用1.0N NaOH洗涤，用盐水洗涤，在MgSO4上干燥并浓缩。层析（SiO2，EtOAc:Hex，1:1）得到0.49g 5-溴-N-(萘-2-基甲基)吡嗪-2-胺。
将5-溴-N-(萘-2-基甲基)吡嗪-2-胺（0.2g，0.637mmol）、L-p-硼苯丙氨酸（0.13g，0.637mmol）、三苯基膦二氯化钯（13mg，0.019mmol）、Na2CO3（0.13g，1.27mmol）、乙腈（5ml）和水（5ml）在微波反应器中在150℃加热5分钟。将混合物浓缩，溶解在1.0N HCl中，用乙醚洗涤两次，浓缩，溶解在甲醇中，过滤并浓缩，得到0.12g标题化合物。M+1=399；1H NMR(CD3OD)δ8.51(s,1H),8.37(s,1H),7.90(m,6H),7.50(m,5H),4.85(s,2H),4.30(t,1H),3.38(m,1H),3.22(m,1H)。
5.34.(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-(5-(萘-2-基甲基氨基)吡嗪-2- 基)苯基)丙酸的合成
在0℃下将(S)-2-氨基-3-(4-(5-(萘-2-基甲基氨基)吡嗪-2-基)苯基)丙酸（0.15g，0.345mmol）用三乙胺（87mg，0.862mmol）和boc-酸酐（84mg，0.379）在二噁烷（3ml）和H2O（3ml）中进行处理。将反应混合物升温至室温并搅拌过夜。将混合物浓缩，并在EtOAc与H2O之间分配。将水性相用1.0N HCl酸化至pH=1，并用EtOAc萃取。将有机相合并，用盐水洗涤，在MgSO4上干燥并浓缩，得到48mg标题化合物。
5.35.2-氨基-3-(4-(5-(萘-2-基甲基氨基)吡嗪-2-基)苯基)丙酸(S)-2- 吗啉乙酯的合成
在室温下，将(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-(5-(萘-2-基甲基氨基)吡嗪-2-基)苯基)丙酸（48mg，0.090mmol）、4-(2-羟基乙基)吗啉（12mg，0.090mmol）、三乙胺（18mg，0.180mmol）和苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)-鏻六氟磷酸盐（BOP，18mg，0.090mmol）在二氯甲烷（3.0ml）中搅拌5小时。再加入三乙胺（18mg，0.180mmol）和BOP（18mg，0.090mmol），并将混合物搅拌过夜。将混合物浓缩并通过制备型HPLC纯化，得到2mg标题化合物。
5.36.(2S)-2-氨基-3-(4-(2-氨基-6-(2,2,2-三氟-1-(3'-氟联苯-4-基)乙 氧基)嘧啶-4-基)苯基)丙酸的合成
在0℃下，向THF（50ml）中的4'-溴-2,2,2-三氟乙酰苯（5.0g，19.76mmol）加入NaBH4（1.5g，39.52mmol）。将混合物升温至室温并搅拌1小时。通过TLC（CH2Cl2）检测反应的完成。将混合物用H2O淬灭，旋转蒸发以除去大部分THF，并用CH2Cl2萃取两次。将有机相合并，用盐水洗涤，浓缩至小体积并通过硅胶塞过滤。用CH2Cl2洗涤硅胶以洗脱产物，将得到的溶液浓缩，得到4.65g 1-(4-溴苯基)-2,2,2-三氟乙醇。收率92%。
在0℃下，用15分钟向Pd(PPh3)4（2.1g，1.823mmol）加入3-氟苯基溴化镁（55ml，1.0M，在THF中，55mmol）。移除冰浴，将混合物搅拌30分钟。用10分钟加入在THF（50ml）中的1-(4-溴苯基)-2,2,2-三氟乙醇（4.65g，18.23mmol）。将混合物加热至回流3小时，并通过LC（Sunfire柱，TFA）显示反应完成。将混合物冷却，用H2O淬灭，旋转蒸发以除去大部分THF，并用CH2Cl2萃取3次。将有机相合并，用盐水洗涤，在MgSO4上干燥并浓缩。层析（SiO2，CH2Cl2）得到4.64g 2,2,2-三氟-1-(3'-氟联苯-4-基)乙醇。收率94%。
在0℃下向THF（50ml）中的2,2,2-三氟-1-(3'-氟联苯-4-基)乙醇（1.4g，5.18mmol）加入NaH（60%，在矿物油中，0.31g，7.77mmol）。移除冰浴并将混合物搅拌30分钟。立即加入在THF（25ml）中的2-氨基-4,6-二氯嘧啶（1.0g，6.22mmol）。将混合物加热至50℃5小时。通过LCMS（Sunfire，TFA）检测反应完成。将混合物冷却，用盐水淬灭，并用CH2Cl2萃取3次。将有机相合并，用盐水洗涤，在MgSO4上干燥并浓缩。层析（SiO2，CH2Cl2）得到1.48g 4-氯-6-(2,2,2-三氟-1-(3'-氟联苯-4-基)乙氧基)嘧啶-2-胺。收率73%。
将4-氯-6-(2,2,2-三氟-1-(3'-氟联苯-4-基)乙氧基)嘧啶-2-胺（0.75g，1.89mmol）、L-p-硼苯丙氨酸（0.47g，2.26mmol）、Pd(PPh3)2Cl2（79mg，0.113mmol）、Na2CO3（0.44g，4.15mmol）、乙腈（10ml）和H2O（10ml）合并在20ml微波反应器中，并在微波中在150℃加热7分钟。通过LCMS（Sunfire，中性）检测反应完成。将混合物浓缩，溶解在NaOH（20ml，0.5N）中，过滤，用乙醚萃取3次，并冷却至0℃。在0℃下缓慢加入1.0N HCl，直到pH达到6.5。将混合物在0℃搅拌30分钟，并将产物过滤，在空气中干燥，用过量的2.0N HCl乙醚溶液处理，浓缩，然后用CH2Cl2研磨，得到1.12g，99%（纯度95.5%）。将385mg通过制备型HPLC（Sunfire，TFA）进行纯化，浓缩并用过量1.0N HCl（水溶液）处理，浓缩至小体积并冷冻干燥，得到240mg标题化合物。M+1=527；1H NMRδ(CD3OD)7.86(d,2H),7.64(s,4H),7.49(d,2H),7.36(m,2H),7.28(m,1H),7.02(m,1H),6.95(s,1H),6.75(q,1H),4.26(t,1H),3.32(m,1H),3.21(m,1H)。
5.37.(S)-2-氨基-3-(4-(2-氨基-6-(苄硫基)嘧啶-4-基)苯基)丙酸的合 成
将苄硫醇（0.14g，1.11mmol）用NaH（60%，在矿物油中，67mg，1.66mmol）在无水THF（15ml）中处理30分钟。加入2-氨基-4,6-二氯嘧啶（0.2g，1.22mmol）并将混合物搅拌过夜。将混合物用二氯甲烷稀释，用水、然后用盐水洗涤，在MgSO4上干燥并浓缩，得到0.11g4-(苄硫基)-6-氯嘧啶-2-胺。
将4-(苄硫基)-6-氯嘧啶-2-胺（0.1g，0.397mmol）、L-p-硼苯丙氨酸（0.1g，0.477mmol）、Pd(PPh3)2Cl2（17mg，0.024mmol）、Na2CO3（93mg，0.874mmol）、MeCN（2.5ml）和水（2.5ml）在微波中在150℃加热5分钟。将混合物浓缩并通过制备型HPLC纯化，得到0.42g标题化合物。M+1=381；1H NMR(CD3OD)δ7.8(d,2H),7.37(t,4H),7.23(m,2H),7.16(m,1H),6.98(s,1H),4.43(s,2H),4.20(t,1H),3.29(m,1H),3.13(M,1H)。
5.58.(S)-2-氨基-3-(4-(2-氨基-6-(萘-2-基甲硫基)嘧啶-4-基)苯基)丙 酸的合成
将2-巯基萘（0.2g，1.148）用NaH（60%，在矿物油中，92mg，2.30mmol）在无水THF（10ml）中处理30分钟。加入2-氨基-4,6-二氯嘧啶（0.21g，1.26mmol），并将混合物搅拌过夜。将混合物用二氯甲烷稀释，用水、然后用盐水洗涤，在MgSO4上干燥并浓缩，得到0.18g 4-氯-6-(萘-2-基甲硫基)嘧啶-2-胺。
将4-氯-6-(萘-2-基甲硫基)嘧啶-2-胺（0.1g，0.331mmol）、L-p-硼苯丙氨酸（83mg，0.397mmol）、Pd(PPh3)2Cl2（14mg，0.020mmol）、Na2CO3（77mg，0.729mmol）、MeCN（2.5ml）和水（2.5ml）在微波中在150℃加热5分钟。将混合物浓缩并通过制备型HPLC纯化，得到57mg标题化合物。M+1=431；1H NMR(CD3OD)δ7.85(s,1H),7.79(d,2H),7.72(d,3H),7.46(dd,1H),7.35(m,4H),6.95(s,1H),4.58(s,2H),4.17(m,1H),3.26(m,1H),3.11(m,1H)。
5.39.(2S)-2-氨基-3-(4-(2-氨基-6-(1-(3,4-二氟苯基)-2,2,2-三氟乙氧 基)嘧啶-4-基)苯基)丙酸的合成
将3,5-二氟苯基-三氟甲基酮用NaBH4（0.18g，4.76mmol）在THF（5ml）中处理2小时。将混合物用水淬灭，用二氯甲烷萃取（2x）。将有机相合并，通过硅胶过滤并浓缩，得到0.46g 1-(3,4-二氟苯基)-2,2,2-三氟乙醇。
将1-(3,4-二氟苯基)-2,2,2-三氟乙醇（0.1g，0.471mmol）用NaH（60%，在矿物油中，38mg，0.943mmol）在无水THF（3ml）中处理30分钟。加入2-氨基-4,6-二氯嘧啶（77mg，0.471mmol），并将混合物在50℃搅拌6小时。将混合物用水淬灭，并用二氯甲烷萃取（2x）。将有机相合并，用水、然后用盐水洗涤，在MgSO4上干燥并浓缩，得到0.14g 4-氯-6-(1-(3,4-二氟苯基)-2,2,2-三氟乙氧基)-嘧啶-2-胺。
将4-氯-6-(1-(3,4-二氟苯基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-2-胺（0.14g，0.421mmol）、L-p-硼苯丙氨酸（110mg，0.505mmol）、Pd(PPh3)2Cl2（18mg，0.025mmol）、Na2CO3（98mg，0.926mmol）、MeCN（2.5ml）和水（2.5ml）在微波中在150℃加热5分钟。将混合物浓缩并通过制备型HPLC纯化，得到74mg标题化合物。M+1=469；1H NMR(CD3OD)δ7.83(d,2H),7.47(m,1H),7.38(m,4H),7.28(m,1H),4.21(t,1H),3.29(m,1H),3.15(m,1H)。
5.40.(2S)-2-氨基-3-(4-(2-氨基-6-(2,2,2-三氟-1-(3'-甲基联苯-2-基) 乙氧基)嘧啶-4-基)苯基)丙酸的合成
在0℃下，向THF（50ml）中的4'-溴-2,2,2-三氟乙酰苯（5.0g，19.76mmol）加入NaBH4（1.5g，39.52mmol）。将混合物升温至室温并搅拌1小时。通过TLC(CH2Cl2)检测反应完成。将混合物用H2O淬灭，旋转蒸发以除去大部分THF，并用CH2Cl2萃取两次。将有机相合并，用盐水洗涤，浓缩至小体积并通过硅胶塞过滤。用CH2Cl2洗涤硅胶以洗脱产物，将得到的溶液浓缩，得到4.65g 1-(4-溴苯基)-2,2,2-三氟乙醇。收率：92%。
将1-(4-溴苯基)-2,2,2-三氟乙醇（0.13g，0.525mmol）、间甲苯基硼酸（0.1g，0.736mmol）、Fibercat（4.28%Pd，47mg，0.0157mmolPd）、K2CO3（0.22g，1.576mmol）、EtOH（3ml）和H2O（0.5ml）合并，并在80℃加热4小时。通过TLC（CH2Cl2）显示反应完成。将混合物冷却，过滤，浓缩，在CH2Cl2中浆化，并在硅胶上进行层析（CH2Cl2），得到0.1g2,2,2-三氟-1-(3'-甲基联苯-2-基)乙醇。收率：72%。
或者，将1-(4-溴苯基)-2,2,2-三氟乙醇（0.98g，3.86mmol）、间甲苯基硼酸（0.63g，4.63mmol）、Pd(PPh3)2Cl2（0.16g，0.232mmol Pd）、Na2CO3（0.90g，8.49mmol）、AcCN（10ml）和H2O（10ml）合并，并在微波中在150℃加热10分钟。通过TLC（CH2Cl2）显示反应完成。将混合物冷却，浓缩，在CH2Cl2中浆化，过滤，并在硅胶上进行层析（CH2Cl2），得到0.80g 2,2,2-三氟-1-(3'-甲基联苯-2-基)乙醇。收率：79%。
或者，在0℃下，向3-甲基-联苯基-2-甲醛（0.25g，1.27mmol）和三氟甲基三甲基硅烷（0.25g，1.53mmol）在THF（1.5ml）中的混合物加入四丁基氟化铵（TBAF，1.0N，在THF中，13μL，3.3mg，0.013mmol）。将反应升温至室温并搅拌4小时。加入HCl（3.0N，2.0ml），并将混合物搅拌3小时。将混合物浓缩，溶解在二氯甲烷中，通过硅胶过滤并浓缩，得到0.15g 2,2,2-三氟-1-(3'-甲基联苯-2-基)乙醇。
将2,2,2-三氟-1-(3'-甲基联苯-2-基)乙醇（0.15g，0.563mmol）用NaH（60%，在矿物油中，45mg，1.12mmol）在无水THF（5ml）中处理30分钟。加入2-氨基-4,6-二氯嘧啶（92mg，0.5633mmol），并将混合物在50℃搅拌6小时。将混合物用水淬灭并用二氯甲烷萃取（2x）。将有机相合并，用水、然后用盐水洗涤，在MgSO4上干燥并浓缩，得到0.16g 4-氯-6-(2,2,2-三氟-1-(3'-甲基联苯-2-基)乙氧基)嘧啶-2-胺。
将4-氯-6-(2,2,2-三氟-1-(3'-甲基联苯-2-基)乙氧基)嘧啶-2-胺（0.16g，0.406mmol）、L-p-硼苯丙氨酸（10mg，0.487mmol）、Pd(PPh3)2Cl2（17mg，0.024mmol）、Na2CO3（95mg，0.894mmol）、MeCN（2.5ml）和水（2.5ml）在微波中在150℃加热5分钟。将混合物浓缩并通过制备型HPLC进行纯化，得到105mg标题化合物。M+1=523；1H NMR(CD3OD)δ7.85(d,2H),7.70(d,1H),7.44(m,4H),7.31(t,1H),7.21(m,2H),7.10(m,2H),6.87(q,1H),6.84(s,1H),4.25(t,1H),3.30(m,1H),3.18(m,1H)。
5.41.(S)-2-氨基-3-(4-(5-(3-(环戊氧基)-4-甲氧基苯甲基氨基) -3-基)苯基)丙酸的合成
向5-溴-吡啶-3-胺(100mg，0.57mmol）和3-环戊氧基-4-甲氧基-苯甲醛（127mg，0.57mmol）在10ml 1,2-二氯乙烷（DCE）中的溶液加入三乙酰氧基硼氢化钠(245mg，1.16mmol），加入HOAc（66μL，2eq.1.16mmol），将混合物在室温搅拌过夜，然后加入15ml DCE。将有机相用水洗涤，并在硫酸钠上干燥。在减压下除去溶剂，得到200mg粗品5-溴-N-(3-(环戊氧基)-4-甲氧基苯甲基)吡啶-3-胺，其不用进一步纯化即用于下一步。
在Emrys微波处理小瓶（2-5ml）中装入5-溴-N-(3-(环戊氧基)-4-甲氧基苯甲基)吡啶-3-胺（40mg，0.106mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（22mg，0.106mmol）和2ml乙腈。向上述溶液加入碳酸钠水溶液（2ml，1M），然后加入10mol.%二氯双(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封并用微波加热至180℃10分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在2.5ml甲醇中并通过制备型LC进行纯化，得到20mg(S)-2-氨基-3-(4-(5-3-(环戊氧基-4-甲氧基-苯甲基氨基)吡啶-3-基)苯基)-丙酸。NMR：1H-NMR(400MHz,CD3OD):δ1.59(m,2H),1.7(m,6H),3.17(m,1H),3.3(m,1H),3.75(s,3H),4.2(dd,1H)4.39(s,2H),4.7(m,1H),6.9(m,3H),7.4(d,2H),7.6(d,2H),7.7(s,1H),7.9(s,1H),8.15(s,1H)；分析型HPLC:RT 2.69；M+1:462(RT:1.285)。
5.42.2-氨基-3-(3-(4-氨基-6-((R)-1-(萘-2-基)乙基氨基)-1,3,5-三嗪 -2-基)苯基)丙酸的合成
在-78℃下，用5分钟向2-(二苯基亚甲基-氨基)乙酸叔丁酯（400mg，1.35mmol）在THF（25ml）中的溶液加入LDA溶液（1.8M，在THF中，2eq，2.7mmol，来自Aldrich的新鲜瓶装产品），并将得到的混合物搅拌20分钟。用5分钟向反应混合物逐滴加入2-(3-(溴甲基)苯基)-5,5-二甲基-1,3,2-二氧杂硼烷（460mg，1.2eq.1.62mmol）在THF（10ml）中的溶液。将反应在相同温度（-78℃）下继续30分钟，并在室温留置3小时。将反应用饱和NH4Cl淬灭，然后添加水（30ml），并用EtOAc（2x40ml）萃取。将有机级份合并并在Na2SO4上干燥。然后将溶剂在减压下浓缩，并将粗3-(3-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基)-2-(二苯基亚甲基氨基)丙酸叔丁酯通过柱层析进行纯化，以提供作为半固体的产物。
在Emrys微波处理小瓶（20ml）中装入(R)-6-氯-N2-(1-(萘-2-基)乙基)-1,3,5-三嗪-2,4-二胺（100mg，0.33mmol），向上述溶液加入3-(3-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基)-2-(二苯基亚甲基氨基)丙酸叔丁酯（248mg，0.5mmol,1.5eq.）和6ml乙腈加6ml碳酸钠水溶液（1M），然后加入10mol.%二氯双(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封并用微波加热至190℃10分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在10ml THF中，向其加入5N HCl（5ml）。将混合物回流2小时，以便将二苯酮和叔丁基去保护。将得到的反应混合物浓缩并溶解在甲醇（8ml）中，用制备型LC进行纯化，得到15mg 2-氨基-3-(4(4-氨基-6-((R)-1-(萘-2-基)乙基氨基)-1,3,5-三嗪-2-基)苯基)丙酸。NMR：1H-NMR(400MHz,CD3OD)：δ1.85(d,3H),3.2-3.45(m,2H),4.37(m,1H),5.5(m,1H),7.4(m,1H),7.6(m 4H),7.9(m,4H),8.18(m,2H)，分析型HPLC：RT 2.79M+1:429(RT:1.35)。
5.43.2-氨基-3-(4-(4-氨基-6-((R)-1-(萘-2-基)乙基氨基)-1,3,5-三嗪 -2-基)-2-氟苯基)丙酸的合成
在-78℃下，用5分钟内2-(二苯基亚甲基-氨基)乙酸叔丁酯（1.1g，3.73mmol）在THF（30ml）中的溶液加入LDA溶液（1.8M，在THF中，1eq，3.73mmol，来自Aldrich的新鲜瓶装产品），并将得到的混合物搅拌20分钟。用5分钟内反应混合物逐滴加入4-溴-1-(溴甲基)-2-氟苯（1g，3.74mmol）在THF（10ml）中的溶液。将反应在-78℃下继续30分钟，然后在室温留置3小时。将反应用饱和NH4Cl淬灭，然后添加水（30ml）。将产物用EtOAc（2x40ml）萃取，将有机级份合并并在Na2SO4上干燥。将溶剂在减压下浓缩，并将粗产物3-(4-溴-2-氟苯基)-2-(二苯基亚甲基氨基)-丙酸叔丁酯通过柱层析进行纯化。获得的产物为固体。
在Emrys微波处理小瓶（20ml）中装入3-(4-溴-2-氟苯基)-2-(二苯基亚甲基-氨基)丙酸叔丁酯（600mg，1.24mmol）、Pd(dba)2（71mg，0.124mmol）、PCy3（35mg，0.124mmol）、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧硼戊环)（346mg，1.1eq.1.36mmol）和KOAc（182mg，1.5eq.，1.86mmol）以及20ml DMF。将反应容器密封并用微波加热至160℃20分钟。在冷却后，在减压下将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在H2O（30ml）中，用EtOAc（2x40ml）萃取，并用制备型LC纯化，得到220mg 2-(二苯基亚甲基氨基)-3-(2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)苯基)丙酸叔丁酯。
在Emrys微波处理小瓶（5ml）中装入(R)-6-氯-N2-(1-(萘-2-基)乙基)-1,3,5-三嗪-2,4-二胺（67mg，0.22mmol）、2-(二苯基亚甲基氨基)-3-(2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)苯基)丙酸叔丁酯（120mg，0.22mmol）和2ml乙腈。向上述溶液加入碳酸钠水溶液（2ml，1M），然后加入10mol.%氯双(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封并用微波加热至190℃10分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在10ml THF中，然后向其加入5N HCl（2ml）。将混合物回流2小时（将二苯酮和叔丁基去保护）。在两个基团去保护后，将混合物浓缩，溶解在甲醇（5ml）中，并用制备型LC进行纯化，得到10mg 2-氨基-3-(4-(4-氨基-6-((R)-1-(萘-2-基)乙基氨基)-1,3,5-三嗪-2-基)-2-氟苯基)丙酸。NMR：1H-NMR(400MHz,CD3OD)：δ1.6(d,3H),3.07(m,1H),3.45(m,1H),3.8(m,1H),5.45(m,1H),7.4(m,4H),7.6(m1H),7.8(m,4H),8.08(m,1H)，分析型HPLC：RT 2.88,M+1:447(RT:1.44)。
5.44.(2S)-2-氨基-3-(4-(4-氨基-6-(1-(金刚烷基)乙基氨基)-1,3,5-三 嗪-2-基)苯基)丙酸的合成
将金刚烷胺（1等量）、2-氨基-4,6-二氯-[1,3,5]三嗪（1等量）和二异丙基乙胺（5当量，Aldrich）在无水1,4-二噁烷中的溶液在130℃下回流3小时。在反应完成后，在减压下移除二噁烷。然后将反应冷却至室温，加入水，并将产物用二氯甲烷萃取（2x40ml）。将合并的有机溶液在Na2SO4上干燥并浓缩以得到产物，其不需纯化用于下一步骤中。
在Emrys微波处理小瓶（20ml）中装入氯化金刚三嗪（200mg，0.65mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（135mg，0.65mmol）和5ml乙腈。向上述溶液加入碳酸钠水溶液（5ml，1M），然后加入5mol.%氯双(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封，并用微波加热至190℃20分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在4ml甲醇中，并用制备型LC进行纯化，得到60mg偶联产物（收率21%）。NMR：1H-NMR(400MHz,CD3OD)：δ1.22(m,3H),1.6-1-8(m,12H),2.01(d,3H),3.25-3.42(m,2H),4.0(m,1H),4.40(m,1H),7.6(d,2H),8.2(d,2H)，分析型HPLC：RT 3.11,M+1:437(RT:1.76)。
5.45.(2S)-2-氨基-3-(4-(4-氨基-6-(1-(金刚烷基)乙基氨基)-1,3,5-三 嗪-2-基)苯基)丙酸的别种合成法
通过形成氰基胍（1当量）、(S)-2-氨基-3-(4-氰基苯基丙酸)（1当量）和叔丁醇钾（3.5当量，Aldrich）在无水正丁醇中的溶液，将其在密封管中在160℃剧烈回流2天，来制备金刚烷-(2-基)-乙基氰基胍。在反应完成后，使混合物冷却至室温，并将反应用水萃灭。在减压下除去溶剂。在再一次冷却至室温后，通过加入1N NaOH将反应混合物调至pH 12-14。然后，用乙醚:EtOAc（9:1，2x100ml）萃取以除去杂质。将水性溶液冷却至0℃，然后加入1N HCl以将pH调整至7。将浅黄色产物在H2O中缓慢碾碎，并将混合物在冰箱中放置30分钟，通过过滤获得固体，其纯度为92%。将化合物从MeOH结晶，得到白色固体（>98%纯，收率48-78%）。1H-NMR(400MHz,CD3OD)：δ1.0(d,3H),1.45-1.6(m,6H),4.62-4.8(m,4H)2.0(m,2H),3.3(m,1H),3.5(m,1H)；分析型HPLC：RT 2.69；M+1:462(RT:1.285)。
5.46.(S)-2-氨基-3-(4-(5-氟-4-((R)-1-(萘-2-基)乙基氨基)嘧啶-2-基) 苯基)丙酸的合成
在10ml微波小瓶中，将(R)-(+)-1-(2-萘基)乙胺（102.6mg，0.599mmol）、2,4-二氯-5-氟嘧啶（100mg，0.599mmol）和碳酸铯（390mg，1.2mmol）的混合物溶解在1,4-二噁烷（3ml）和H2O（3ml）中。将混合物在微波反应器中在80℃搅拌10分钟。将残留物溶解在CH2Cl2（50ml）中，用水（20ml）、盐水（20ml）洗涤，干燥（Na2SO4）并浓缩，得到粗品中间体2-氯-5-氟-嘧啶-4-基)-(1-萘-2-基-乙基)-胺。
然后在20ml微波小瓶中，将粗品中间体（250mg，0.83mmol）溶解在6.0ml MeCN和6ml H2O中。向该溶液加入L-p-硼-苯丙氨酸（173.6mg，0.83mmol）、碳酸钠（173.6mg，1.66mmol）和催化量的二氯双(三苯基膦)-钯(II)（11.6mg，0.0166mmol）。然后将反应小瓶密封，并在微波反应器中在150℃搅拌7分钟。然后将内含物过滤，并将滤液浓缩，溶解在MeOH和H2O（1:1）中，并使用MeOH/H2O/TFA作为溶剂系统通过制备型HPLC进行纯化。将合并的纯级份在真空中蒸发，并在冻干机上进一步干燥，得到154mg 2-氨基-3-{4-[5-氟-4-(1-萘-2-基-乙基氨基)-嘧啶-2-基]-苯基}-丙酸。NMR：1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ1.8(d,3H)3.2-3.4(m,2H),4.35(m,1H),5.7(q,1H),7.5(m,4H),7.6(d,1H),7.8-7.9(m,4H),8.1(d,2H),8.3(d,1H)。LCMS：M+1=431。
5.47.(S)-2-氨基-3-(4-(2-氨基-6-(4-(三氟甲基)-苯甲基氨基)嘧啶-4- 基)苯基)丙酸的合成
在20ml微波小瓶中，将三氟甲基苯甲胺（106.8mg，0.610mmol）、2-氨基-4,6-二氯嘧啶（100mg，0.610mmol）和碳酸铯（217mg，1.2mmol）的混合物溶解在1,4-二噁烷（6ml）和H2O（6ml）中。将混合物在微波反应器中在210℃搅拌25分钟。然后除去溶剂。将残留物溶解在CH2Cl2（50ml）中，用水（20ml）、盐水（20ml）洗涤，干燥（Na2SO4）并浓缩，得到粗品中间体6-氯-N-4'-(三氟甲基-苯甲基)-嘧啶-2-4-二胺。
然后在10ml微波小瓶中，将粗品中间体（150mg，0.497mmol）溶解在3.0ml MeCN和3ml H2O中。向该溶液加入L-p-硼-苯丙氨酸（104mg，0.497mmol）、碳酸钠（150mg，0.994mmol）和催化量的二氯双(三苯基膦)-钯(II)（6.9mg，0.00994mmol）。然后将反应小瓶密封，并在微波反应器中在150℃搅拌5分钟。将内含物过滤，并将滤液浓缩，溶解在MeOH和H2O（1:1）中，并使用MeOH/H2O/TFA溶剂系统通过制备型HPLC进行纯化。将合并的纯级份在真空中蒸发，并在冻干机上进一步干燥，得到2-氨基-3-{4-[2-氨基-6-(4-三氟甲基-苯甲基氨基)-嘧啶-4-基]-苯基}-丙酸。NMR：1H-NMR(300MHz,CD3OD)δ3.1-3.3(m,2H),4.2(t,1H),4.7(s,2H),6.3(s,1H),7.4-7.5(m,4H),7.6(d,2H),7.7(d,2H)。LCMS：M+1=432。
5.48.2-氨基-3-(5-(5-苯基噻吩-2-基)-1H-吲哚-3-基)丙酸的合成
向含有5-苯基-噻吩-2-硼酸（0.016g，0.078mmol）、Na2CO3（0.015g，0.142mmol）、乙腈（1.5ml）/水（1.5ml）和二氯双(三苯基膦)-钯（3mg，0.003mmol）的5ml微波小瓶加入2-氨基-3-(5-溴-1H-吲哚-3-基)-丙酸（0.020g，0.071mmol）。将微波小瓶盖上盖子，并在微波辐射下在150℃搅拌5min。将反应混合物冷却，通过注射式滤器过滤，然后使用YMC-Pack ODS 100x30mm ID柱（MeOH/H2O/TFA溶剂系统）通过反相制备型HPLC进行分离。将纯级份在真空中浓缩。然后将产物悬浮在5ml水中，冷冻并冻干，得到5mg纯产物2-氨基-3-[5-(5-苯基-噻吩-2-基)-1H-吲哚-3-基]-丙酸。1H-NMR(300MHz,CD3OD)：3.21-3.26(m,2H),4.25(q,1H),7.15-7.35(m,8H),7.58(d,2H),7.82(d,1H)。
5.49.(S)-2-氨基-3-(4-(4-(4-苯氧基苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)苯基) 丙酸的合成
将1-乙炔基-4-苯氧基-苯（126mg，0.65mmol）和(S)-3-(4-叠氮基-苯基)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸（200mg，0.65mg）在H2O:二噁烷（5:1）中的混合物，在密封管中在100℃加热过夜。在反应完成后，加入3N HCl（5ml）并将混合物在50℃搅拌2小时。除去溶剂得到粗产物，将其溶解在MeOH中并通过制备型HPLC进行纯化，得到45mg目标产物（收率:29%）。1H-NMR(400MHz,CD3OD)：δ(ppm)3.2(m,1H),3.4(m,1H),4.3(m,1H),6.9(d,2H),7.0(d,2H),7.2(m,1H),7.3(d,2H),7.4-7.55(m,6H),8.0(s,1H)。
5.50.(S)-2-氨基-3-(4-(4-(4-(噻吩-2-甲酰胺基)苯基)-1H-1,2,3-三唑 -1-基)苯基)丙酸和(S)-2-氨基-3-(4-(5-(4-(噻吩-2-甲酰胺基)苯 基)-1H-1,2,3-三唑基-1-基)苯基)丙酸的合成
将噻吩-2-羧酸(4-乙基-苯基)酰胺(117mg，0.49mmol）和(S)-3-(4-叠氮基-苯基)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸（150mg，0.49mg）在5ml H2O:二噁烷（5:1）中的混合物，在密封管中在100℃加热过夜。在反应完成后，加入3N HCl（5ml）并将混合物在50℃搅拌2小时。除去溶剂得到粗产物，将其溶解在MeOH中并通过制备型HPLC进行纯化。根据LCMS（保留时间）和NMR，获得两种区位异构体（总收率：70mg，66%）。主要产物是(S)-2-氨基-3-(4-(4-(4-(噻吩-2-甲酰胺基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)苯基)丙酸。NMR：1H-NMR(400MHz,CD3OD)：δ3.2(m,1H),3.4(m,1H),4.3(m,1H),7.15(m,1H),7.3(d,2H),7.6(m,4H),7.0(m,3H),7.95(d,1H),8.0(s,1H)。次要产物是(S)-2-氨基-3-(4-(5-(4-(噻吩-2-甲酰胺基)苯基)-1H-1,2,3-三唑基-1-基)苯基)丙酸。1H-NMR(400MHz,CD3OD)：δ3.2(m,1H),3.4(m,1H),4.35(m,1H),7.2(m,1H),7.3(d,2H),7.5-7.6(m,4H),7.75(m,3H),7.95(d,1H),8.05(s,1H)。
5.51.(S)-2-氨基-3-(4-(2-氨基-6-(苯基乙炔基)嘧啶-4-基)苯基)丙酸 的合成
将2-氨基-4,6-二氯嘧啶（0.180g，1.1mmol）、三甲基-苯基乙炔基-锡烷（0.264g，1mmol）溶解在THF（20ml）中，并将混合物在65℃搅拌12h。LCMS表明反应完成。除去溶剂并将残留物直接用于下面步骤中。
在10ml微波小瓶中，将粗品中间体（0.42g）、L-p-硼-苯丙氨酸（0.210g，1mmol）、碳酸钠（0.210g，2mmol）和二氯双(三苯基膦)-钯(II)（25mg，0.036mmol）溶解在MeCN（3ml）和H2O（3ml的混合物中。将小瓶密封并在微波反应器中在150℃搅拌6min。将混合物过滤并将滤液浓缩。将残留物使用MeOH/H2O/TFA作为溶剂系统通过制备型HPLC进行纯化，获得作为TFA盐的(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-苯基乙炔基-嘧啶-4-基(-苯基]-丙酸。1H-NMR(400MHz,CD3OD)：δ(ppm)3.20-3.42(m,2H),4.31(m,1H),7.40-7.51(m,6H),7.62(d,2H),8.18(d,2H)。
5.52.(S)-2-氨基-3-(4-{2-氨基-6-[2，2，2-三氟-1-(4-吡啶-4-基-苯基)- 乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸的合成
在0℃下，向4-吡啶-4-基-苯甲醛（500mg，2.73mmol）和三氟甲基三甲基硅烷（TMSCF3）（485μl，3.28mmol）在5ml THF中的溶液加入四丁基氟化铵（0.027ml；在四氢呋喃中的1.0M溶液）。将得到的混合物升温至室温，并在室温搅拌4小时。然后将反应混合物用5ml1N HCl处理，并在室温搅拌过夜。将溶剂蒸发至干，加入9ml 1M碳酸钠水溶液，将水相用氯仿萃取（3x10ml），并将合并的氯仿层用水洗涤，在MgSO4上干燥。在真空中除去有机溶剂，得到360mg 2,2,2-三氟-1-(4-吡啶-4-基-苯基)乙醇，收率：51%。
在50ml密封管中，将2,2,2-三氟-1-(4-吡啶-4-基-苯基)乙醇（100mg，0.40mmol）、2-氨基-4,6-二氯嘧啶（60mg，0.38mmol）和碳酸铯（468mg，1.44mmol）的混合物溶解在2ml 1,4-二噁烷中。将混合物在110℃加热过夜，然后冷却至室温；加入10ml乙酸乙酯，然后通过硅藻土过滤。将滤液浓缩，得到120mg 4-氯-6-[2,2,2-三氟-1-(4-吡啶-4-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶-2-基胺，收率：80%。
在微波小瓶中，将4-氯-6-[2,2,2-三氟-1-(4-吡啶-4-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶-2-基胺（30mg，0.080mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（21mg，0.098mmol）和1ml乙腈以及0.7ml水混合在一起。然后向混合物加入0.3ml1N碳酸钠水溶液，然后加入5mol.%二氯双-(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封并用微波辐射在150℃加热5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在2.5ml甲醇中，然后通过Prep-LC纯化，得到6.7mg(S)-2-氨基-3-(4-{2-氨基-6-[2,2,2-三氟-1-(4-嘧啶-4-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.82(s,2H),8.26(s,2H),8.02(d,J=8Hz,2H),7.97(d,J=8.4Hz,2H),7.86(d,J=8.4Hz,2H),7.45(d,J=8Hz 2H),6.89(q,J=6.8Hz,1H),6.81(d,J=2Hz,1H),4.29(t,J=1.6Hz,1H),3.39(m,1H),3.19(m,1H)。
5.53.(S)-2-氨基-3-(4-{6-[2,2,2-三氟-1-(2-吡啶-4-基-苯基)-乙氧基]- 嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸的合成
在0℃下，向2-吡啶-4-基-苯甲醛（500mg，2.73mmol）和三氟甲基三甲基硅烷（TMSCF3）（485μl，3.28mmol）在5ml THF中的溶液加入四丁基氟化铵（0.027ml；在四氢呋喃中的1.0M溶液）。将形成的混合物升温至室温，并在室温搅拌4小时。然后将反应混合物用5ml1N HCl处理，并在室温搅拌过夜。将溶剂蒸发至干，加入9ml 1M碳酸钠水溶液，将水相用氯仿萃取（3x10ml），并将合并的有机层用水洗涤，在MgSO4上干燥。将有机溶剂蒸发，得到300mg 2,2,2-三氟-1-(2-吡啶-4-基-苯基)乙醇，收率：43%。
2,2,2-三氟-1-(2-吡啶-4-基-苯基)乙醇（100mg，0.40mmol）、4,6-二氯-嘧啶（54mg，0.38mmol）、碳酸铯（468mg，1.44mmol）和1,4-二噁烷（1ml）的混合物。将混合物在110℃加热过夜。将反应混合物冷却至室温。加入10ml乙酸乙酯，然后将混合物通过硅藻土过滤。将滤液浓缩，得到110mg 4-氯-6-[2,2,2-三氟-1-(2-吡啶-4-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶，收率：76%。
在微波小瓶中，将4-氯-6-[2,2,2-三氟-1-(4-吡啶-4-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶（30mg，0.082mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（21mg，0.098mmol）、1ml乙腈和0.7ml水混合在一起。然后向混合物加入0.3ml 1N碳酸钠水溶液，然后加入5mol.%二氯双-(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封并用微波辐射在150℃加热5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在2.5ml甲醇中，然后通过Prep-LC纯化，得到19mg(S)-2-氨基-3-(4-{6-[2,2,2-三氟-1-(2-吡啶-4-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.94(d,J=6Hz,2H),8.79(d,J=1.2Hz,1H),8.15(m,4H),7.84(t,J=5.2Hz,1H),7.62(m,3H),7.46(m,3H).6.66(q,J=6.4Hz,1H),4.31(q,J=6Hz,1H),3.41(m,1H),3.26(m,1H)。
5.54.(S)-2-氨基-3-(4-{2-氨基-6-[2,2,2-三氟-1-(2-(4-甲基-噻吩-3- 基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸的合成
在微波小瓶中，将3-溴-4-甲基-噻吩（653mg，3.69mmol）、2-甲酰基苯基硼酸（500mg，3.36mmol）和7ml乙腈混合在一起。向上述溶液加入6.7ml 1N碳酸钠水溶液，然后加入5mol.%氯双(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封并用微波辐射在150℃加热5分钟。在冷却后，加入50ml乙酸乙酯，分离有机层，用水洗涤，用硫酸钠干燥。将有机溶剂蒸发得到粗产物，将其通过ISCO CombiFlash柱进行纯化，得到530mg 2-(4-甲基-噻吩-3-基)苯甲醛，收率：78%。
在0℃下，向2-(4-甲基噻吩-3-基)-苯甲醛（260mg，1.29mmol）和三氟甲基三甲基硅烷（TMSCF3）（228μl，1.54mmol）在5ml THF中的溶液加入四丁基氟化铵（0.013ml；在四氢呋喃中的1.0M溶液）。将形成的混合物升温至室温，并在室温搅拌4小时。然后将反应混合物用5ml 1N HCl处理，并在室温搅拌过夜。将产物用乙酸乙酯萃取（3x50ml）。分离有机层并在硫酸钠上干燥。将有机溶剂蒸发，得到340mg 2,2,2-三氟-1-[2-(4-甲基-噻吩-3-基)-苯基]-乙醇，收率97%。
将2,2,2-三氟-1-[2-(4-甲基-噻吩-3-基)-苯基]-乙醇（100mg，0.37mmol）、2-氨基-4,6-二氯-嘧啶（54mg，0.33mmol）、碳酸铯（481mg，1.48mmol）和1,4-二噁烷（1ml）的混合物在110℃加热过夜。将反应混合物冷却至室温；加入10ml乙酸乙酯。然后将混合物通过硅藻土过滤，将滤液浓缩，得到100mg 4-氯-6-{2,2,2-三氟-1-[2-(4-甲基-噻吩-3-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-2-基胺，收率：76%。
在微波小瓶中，将4-氯-6-{2,2,2-三氟-1-[2-(4-甲基-噻吩-3-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-2-基胺（30mg，0.075mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（19mg，0.09mmol）、1ml乙腈和0.7ml水混合。向混合物加入0.3ml 1N碳酸钠水溶液，然后加入5mol.%二氯双-(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封，并用微波辐射在150℃加热5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在2.5ml甲醇中，然后通过制备型HPLC进行纯化，得到15.1mg(S)-2-氨基-3-(4-{2-氨基-6-[2,2,2-三氟-1-(2-(4-甲基-噻吩-3-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)7.94(d,J=8Hz,2H),7.80(s,1H),7.50(m,5H),7.25(m,2H),7.03(s,1H),6.94(s,1H),4.31(t,J=5.6,1H),3.48(m,1H),3.26(m,1H),1.98(s,3H)。
5.55.(S)-2-氨基-3-(4-{2-氨基-6-[2,2,2-三氟-1-(2-(5-甲基-噻吩-3- 基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸的合成
在微波小瓶中，将4-溴-2-甲基-噻吩（653mg，3.69mmol）、2-甲酰基苯基硼酸（500mg，3.36mmol）和7ml乙腈进行混合。向上述溶液加入6.7ml  1N碳酸钠水溶液，然后加入5mol.%二氯双(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封，并用微波辐射在150℃加热5分钟。在冷却后，加入50ml乙酸乙酯，分离有机层，用水洗涤，用硫酸钠干燥，将有机溶剂蒸发并将残留物通过ISCO进行纯化，得到550mg 2-(5-甲基-噻吩-3-基)苯甲醛，收率81%。
在0℃下，向2-(5-甲基噻吩-3-基)-苯甲醛（550mg，1.29mmol）和三氟甲基三甲基硅烷（TMSCF3）（483μl，3.27mmol）在10ml THF中的溶液加入四丁基氟化铵（0.028ml；在四氢呋喃中的1.0M溶液）。将形成的混合物升温至室温，并在室温搅拌4小时。然后将反应混合物用10ml1N HCl处理，并在室温搅拌过夜。将产物用乙酸乙酯萃取（3x50ml）。分离有机层并在硫酸钠上干燥。将有机溶剂蒸发，得到650mg2,2,2-三氟-1-[2-(5-甲基-噻吩-3-基)-苯基]-乙醇，收率：87%。
将2,2,2-三氟-1-[2-(5-甲基-噻吩-3-基)-苯基]-乙醇（100mg，0.37mmol）、2-氨基-4,6-二氯-嘧啶(54mg，0.33mmol）、碳酸铯（481mg，1.48mmol）和1,4-二噁烷（2ml）的混合物在110℃加热过夜。将反应混合物冷却至室温；加入10ml乙酸乙酯。然后将混合物通过硅藻土过滤，将滤液浓缩，得到90mg 4-氯-6-{2,2,2-三氟-1-[2-(5-甲基-噻吩-3-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-2-基胺，收率：68%。
在微波小瓶中，将4-氯-6-{2,2,2-三氟-1-[2-(5-甲基-噻吩-3-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-2-基胺（30mg，0.075mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（19mg，0.09mmol）、1ml乙腈和0.7ml水混合。向混合物加入0.3ml 1N碳酸钠水溶液，然后加入5mol.%二氯双-(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封，并用微波辐射在150℃加热5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在2.5ml甲醇中，然后通过制备型LC进行纯化，得到10.1mg(S)-2-氨基-3-(4-{2-氨基-6-[2,2,2-三氟-1-(2-(5-甲基-噻吩-3-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)7.83(d,J=8.4Hz,2H),7.63(d,J=7.2Hz,1H),7.34(m,4H),7,26(m,1H),7.12(d,J=1.2Hz,1H),6.92(q,J=6.8,1H),6.82(d,J=1.2Hz,1H),6.64(s,1H),4.21(t,J=5.6Hz,1H),3.29(m,1H),3.20(m,1H),2.47(s,3H)。
5.56.(S)-2-氨基-3-(4-{2-氨基-6-[2,2,2-三氟-1-(4-呋喃-3-基-苯基)- 乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸的合成
在微波小瓶中，将3-溴-呋喃（590mg，4.02mmol）、4-甲酰基苯基硼酸（600mg，4.02mmol）和7ml乙腈混合。然后向混合物加入8ml1N碳酸钠水溶液，然后加入5mol.%二氯双-(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封并用微波辐射在150℃加热7分钟。在冷却后，加入50ml乙酸乙酯，分离有机层，用水洗涤，在硫酸钠上干燥。将有机溶剂蒸发，得到粗产物，将其通过ISCO进行纯化，得到410mg 4-呋喃-3-基-苯甲醛，收率：60%。
在0℃下，向4-呋喃-3-基-苯甲醛（410mg，2.38mmol）和三氟甲基三甲基硅烷（TMSCF3）（423μl,2.86mmol）在5ml THF中的溶液加入四丁基氟化铵（0.024ml；在四氢呋喃中的1.0M溶液）。将形成的混合物升温至室温，并在室温搅拌4小时。然后将反应混合物用5ml1N HCl处理，并在室温搅拌过夜。将产物用乙酸乙酯萃取（3x50ml）。分离有机层并在硫酸钠上干燥。将有机溶剂蒸发，得到480mg 2,2,2-三氟-1-(4-呋喃-3-基-苯基)-乙醇，收率：83%。
将2,2,2-三氟-1-(4-呋喃-3-基-苯基)-乙醇（100mg，0.4mmol）、2-氨基-4,6-二氯-嘧啶（60mg，0.36mmol）、碳酸铯（468mg，1.44mmol）和1,4-二噁烷（1ml）的混合物在110℃加热过夜。将反应混合物冷却至室温；加入10ml乙酸乙酯。然后将混合物通过硅藻土过滤，将滤液浓缩，得到110mg 4-氯-6-[2,2,2-三氟-1-(4-呋喃-3-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶-2-基胺，收率：72%。
在微波小瓶中，将4-氯-6-[2,2,2-三氟-1-(4-呋喃-3-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶-2-基胺（30mg，0.081mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（20mg，0.098mmol）、1ml乙腈和0.7ml水混合。然后向混合物加入0.3ml 1N碳酸钠水溶液，然后加入5mol.%二氯双-(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封，并用微波辐射在150℃加热5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在2.5ml甲醇中，然后通过制备型LC进行纯化，得到7.2mg(S)-2-氨基-3-(4-{2-氨基-6-[2,2,2-三氟-1-(4-呋喃-3-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)7.96(m,3H),7.61(m,5H),6.81(s,1H),6.77(d,J=6.8Hz,1H),6.74(d,J=4,8Hz,1H),4.27(q,J=5.6Hz,1H),3.36(m,1H),3.21(m,1H)。
5.57.(S)-2-氨基-3-[4-{2-氨基-6-{1-[2-(5-二甲基氨基甲基-呋喃-2- 基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸的合成
向5-溴-呋喃-2-甲醛（350mg，2mmol）和二甲基胺（2ml，在THF中的2M溶液）在10ml 1,2-二氯乙烷（DCE）中的溶液加入三乙酰氧基硼氢化钠（844mg，4mmol）。然后加入0.2ml HOAc。将混合物在室温搅拌过夜，然后加入15ml DCE。将有机相用水洗涤，在硫酸钠上干燥。通过旋转蒸发除去溶剂，得到400mg(5-溴-呋喃-2-基甲基)-二甲基-胺，收率：97%。
在微波小瓶中，将(5-溴-呋喃-2-基甲基)-二甲基-胺（385mg，1.88mmol）、2-甲酰基苯基硼酸（288mg，1.93mmol）和3.7ml乙腈进行混合。然后向该混合物加入3.7ml 1N碳酸钠水溶液，然后加入5mol.%二氯双(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封，并用微波辐射在150℃加热5分钟。在冷却后，加入20ml 1N HCl。将混合物用乙酸乙酯萃取（3x10ml），并将乙酸乙酯层舍弃。向水相加入1N NaOH溶液，将pH调整至10，然后用乙酸乙酯萃取（3x20ml）。将合并的有机层用水洗涤并在硫酸钠上干燥。蒸发掉溶剂，得到300mg 2-(4-二甲基氨基甲基-环戊-1,3-二烯基)-苯甲醛，收率：69%。
在0℃下，向2-(4-二甲基氨基甲基-环戊-1,3-二烯基)-苯甲醛（287mg，1.25）和三氟甲基三甲基硅烷（TMSCF3）（222μl，1.5mmol）在5ml THF中的溶液加入四丁基氟化铵（0.013ml；在四氢呋喃中的1.0M溶液）。将形成的混合物升温至室温，并在室温搅拌4小时。然后将反应混合物用5ml 1N HCl处理，并在室温搅拌过夜。将产物用乙酸乙酯萃取（3x50ml）。分离有机层并在硫酸钠上干燥。将有机溶剂蒸发，得到250mg 1-[2-(5-二甲基氨基甲基-呋喃-2-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙醇，收率66%。
将1-[2-(5-二甲基氨基甲基-呋喃-2-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙醇（225mg，0.75mmol）、2-氨基-4,6-二氯-嘧啶（111mg，0.67mmol）、碳酸铯（978mg，3.01mmol）和1,4-二噁烷（3ml）的混合物在110℃加热过夜。将反应混合物冷却至室温；加入10ml乙酸乙酯。然后将混合物通过硅藻土过滤，将滤液浓缩，得到110mg 4-氯-6-{1-[2-(5-二甲基氨基甲基-呋喃-2-基)-苯基]2,2,2-三氟-乙氧基}-嘧啶-2-基胺，收率87%。
在微波小瓶中，将4-氯-6-{1-[2-(5-二甲基氨基甲基-呋喃-2-基)-苯基]2,2,2-三氟-乙氧基}-嘧啶-2-基胺（37mg，0.087mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（22mg，0.10mmol）、1ml乙腈和0.7ml水混合。然后加入0.3ml 1N碳酸钠水溶液，然后加入5mol.%二氯双-(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封，并用微波辐射在150℃加热5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在2.5ml甲醇中，然后通过制备型LC进行纯化，得到16mg(S)-2-氨基-3-[4-{2-氨基-6-{1-[2-(5-二甲基氨基甲基-呋喃-2-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸。1HNMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)7.88(d,J=8.4Hz,2H),7.71(d,J=7.6Hz,1H),7.62(d,J=7.6Hz,1H),7.42(m,2H),7.40(d,J=1.6Hz,2H),7.34(d,J=8.4Hz,1H),6.89(q,J=3.6Hz,2H),6.66(s,1H),4.54(s,2H),4.20(q,J=6Hz,1H),3.3(m,1H),3.14(m,1H),2.84(s,6H)。
5.58.(S)-2-氨基-3[4-(2-氨基-6-{1-[2-(6-氰基-吡啶-3-基)-苯 基]-2,2,2-三氟-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸的合成
在微波小瓶中，将5-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼戊环-2-基)-吡啶-2-甲腈（279mg，1.51mmol）、2-溴-苯甲醛（230mg，1mmol）和2ml乙腈混合。然后加入2ml 1N碳酸钠水溶液，然后加入5mol.%二氯双(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封，并用微波辐射在100℃加热10分钟。在冷却后，加入50ml乙酸乙酯，分离有机层，用水洗涤，经硫酸钠干燥。将有机溶剂蒸发得到粗产物，将其通过ISCO进行纯化，得到150mg5-(2-甲酰基-苯基)-吡啶-2-甲腈，收率72%。
在0℃下，向5-(2-甲酰基-苯基)-吡啶-2-甲腈（110mg，0.53mmol）和三氟甲基三甲基硅烷（120μl，0.81mmol）在5ml THF中的溶液加入四丁基氟化铵（5.3μl，在四氢呋喃中的1.0M溶液）。将形成的混合物升温至室温，并在室温搅拌4小时。然后将反应混合物用5ml 1NHCl处理，并在室温搅拌过夜。将产物用乙酸乙酯萃取（3x50ml）。分离有机层并在硫酸钠上干燥。将有机溶剂蒸发，得到140mg5-[2-(2,2,2-三氟-1-羟基-乙基)-苯基]-吡啶-2-甲腈，收率95%。
将5-[2-(2,2,2-三氟-1-羟基-乙基)-苯基]-吡啶-2-甲腈（46mg，0.165mmol）、(S)-3-[4-(2-氨基-6-氯-嘧啶-4-基)-苯基]-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸（59mg，0.15mmol）、碳酸铯（195mg，0.6mmol）和1,4-二噁烷（1ml）的混合物在110℃加热过夜。将反应混合物冷却至室温，然后倒入5ml水中。加入1N HCl以将pH调整至4.5，将水相用乙酸乙酯萃取（3x10ml）。将合并的有机层用盐水洗涤并在硫酸钠上干燥。将溶剂蒸发，得到80mg粗品(S)-3-[4-(2-氨基-6-{1-[2-(6-氰基吡啶-3-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸，收率84%。
将80mg(S)-3-[4-(2-氨基-6-{1-[2-(6-氰基吡啶-3-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸溶解在30%三氟乙酸在二氯甲烷（5ml）中的溶液中。将混合物在室温搅拌1小时。将溶剂蒸发，并将残留物通过制备型HPLC进行纯化，得到12.6mg(S)-2-氨基-3[4-(2-氨基-6-{1-[2-(6-氰基-吡啶-3-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.86(s,1H),8.17(d,J=2Hz,1H),8.15(d,J=2Hz,1H),7.96(m,2H),7.59(m,1H),7.36(m,3H),6.7(s,1H),6.65(d,J=6.8Hz,1H),4.25(m,1H),3.47(m,1H),3.23(m,1H)。
5.59.(S)-2-氨基-3-(4-{2-氨基-6-[2,2,2-三氟-1-(2-咪唑-1-基-苯基)- 乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸的合成
向THF（8ml）中的2-咪唑基-1-基-苯甲醛（0.344g，2mmol）加入三氟甲基三甲基硅烷（0.341g，2.4mmol）。将反应混合物冷却至0-5℃（冰水浴），并加入四正丁基氟化铵（0.035ml，0.035mmol，1M，在THF中）。撤去冰浴，并将混合物在室温搅拌6小时。加入2N HCl（5ml），并将反应混合物在室温进一步搅拌3小时。在减压下在旋转蒸发仪上除去溶剂。将粗残留物溶解在DCM（30ml）中，用水（20ml）、盐水（20ml）洗涤，并用硫酸钠干燥。除去溶剂，得到粗品2,2,2-三氟-1-(2-咪唑基-1-基-苯基)-乙醇（0.45g，93%），将其直接用于下一步中。
在氮气下向无水THF（10ml）加入2-氨基-4,6-二氯嘧啶（0.107g，0.65mmol）、2,2,2-三氟-1-(2-咪唑-1-基-苯基)-乙醇（0.157g，0.65mmol）和NaH（0.03g，0.78mmol）。将反应在40-45℃搅拌6小时，然后冷却至室温，并用水（0.2ml）淬灭。将反应混合物浓缩，得到粗品4-氯-6-[2,2,2-三氟-1-(2-咪唑-1-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶-2-基胺（0.24g，LCMS表明纯度>90），将其直接用于下面步骤中。
在微波小瓶中，将上述粗品中间体（0.24g）、L-p-硼-苯丙氨酸（0.140g，0.67mmol）、碳酸钠（0.14g，1.32mmol）和二氯双(三苯基膦)-钯(II)（15mg，0.021mmol）溶解在MeCN（2.0ml）和H2O（2.0ml）的混合物中。将反应混合物密封，并在微波反应器中在150℃搅拌6分钟。将混合物过滤，并将滤液浓缩。将残留物溶解在MeOH和H2O（1:1）中，并使用MeOH/H2O/TFA作为溶剂系统通过制备型HPLC进行纯化，得到作为TFA盐的(S)-2-氨基-3-(4-[2-氨基-6-[2,2,2-三氟-1-(2-咪唑-1-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶-4-基]-苯基-丙酸。LCMS：M+1=499。1H-NMR(400MHz,CD3OD)：δ(ppm)3.20-3.41(m,2H),4.30(t,1H),6.61(m,1H),6.88(s,1H),7.48(d,2H),7.69(d,1H),7.72-7.81(m,2H),7.83(m,1H),7.98(m,3H),8.02(m,1H),9.40(m,1H)。
5.60.(S)-2-氨基-3-(4-{6-[2,2,2-三氟-1-(2-吡唑-1-基-苯基)-乙氧基]- 嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸的合成
向THF（8ml）中的2-吡唑-1-基-苯甲醛（0.344g，2mmol）加入三氟甲基三甲基硅烷（0.341g，2.4mmol）。将反应混合物冷却至0-5℃（冰水浴），并加入四正丁基氟化铵（0.035ml，0.035mmol，1M，在THF中）。撤去冰浴，并将混合物在室温搅拌6小时。加入2N HCl（5ml），并将反应混合物在室温进一步搅拌3小时。在减压下在旋转蒸发仪上除去溶剂。将粗残留物溶解在DCM（30ml）中，用水（20ml）、盐水（20ml）洗涤，并用硫酸钠干燥。在真空中除去溶剂，得到粗品2,2,2-三氟-1-(2-吡唑-1-基-苯基)-乙醇（0.45g，93%），将其直接用于下一实验中。
在氮气气氛下向无水THF（10ml）加入4,6-二氯嘧啶（0.082g，0.55mmol）、2,2,2-三氟-1-(2-吡唑-1-基-苯基)-乙醇（0.121g，0.50mmol）、NaH（0.03g，0.78mmol）。将反应在40-45℃搅拌6小时，然后冷却至室温，并用水（0.2ml）淬灭。将反应混合物浓缩，得到粗品4-氯-6-[2,2,2-三氟-1-(2-吡唑-1-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶(0.20g，LCMS表明纯度>90），将其直接用于下面步骤中。
在微波小瓶中，将粗品中间体（0.20g）、L-p-硼-苯丙氨酸（0.105g，0.50mmol）、碳酸钠（0.105g，1mmol）、二氯双(三苯基膦)-钯(II)（15mg，0.021mmol）溶解在MeCN（2.0ml）和H2O（2.0ml）的混合物中。将小瓶密封，并将反应混合物在微波反应器中在150℃加热6分钟。将混合物过滤，并将滤液浓缩。将残留物溶解在MeOH和H2O（1:1）中，并使用MeOH/H2O/TFA作为溶剂系统通过制备型HPLC进行纯化，得到作为TFA盐的(S)-2-氨基-3-(4-[6-[2,2,2-三氟-1-(2-吡唑-1-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶-4-基]-苯基-丙酸。LCMS：M+1=484。1H-NMR(400MHz,CD3OD):δ(ppm)3.20-3.40(m,2H),4.30(t,1H),6.63(s,1H),7.10(m,1H),7.50(m,3H),7.60(m,3H),7.84(m,2H),8.16(m,3H),8.68(s,1H)。
5.61.(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{2,2,2-三氟-1-[2-(3-三氟甲基-吡唑 -1-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸的合成
将2,2,2-三氟-1-(2-碘-苯基)-乙醇（0.331g，1.1mmol）、3-三氟甲基吡唑（0.136g，1.0mmol）、CuI（0.019g，0.1mmol）、K2CO3（0.290g，2.1mmol）、(1R,2R)-N,N′-二甲基-环己烷-1,2-二胺（0.028g，0.2mmol）和甲苯（10ml）合并在20ml压力管中。将混合物在130℃（油浴温度）加热12小时。将反应混合物用乙酸乙酯稀释，用H2O（2x 20ml）、盐水洗涤，并通过硫酸钠干燥。除去溶剂得到粗产物，使用含5-10%乙酸乙酯的己烷作为溶剂将其通过ISCO柱进行纯化，得到140mg 2,2,2-三氟-1-[2-(3-三氟甲基-吡唑-1-基)-苯基]-乙醇。
在氮气气氛下向无水THF（10ml）加入2-氨基-4,6-二氯嘧啶（0.074g，0.45mmol）、2,2,2-三氟-1-[2-(3-三氟甲基-吡唑-1-基)-苯基]-乙醇（0.140g，0.45mmol）和NaH（0.022g，0.59mmol）。将反应在40-45℃搅拌6小时，然后冷却至室温，并用水（0.2ml）淬灭。将反应混合物浓缩，得到粗品4-氯-6-[2,2,2-三氟-1-[2-(3-三氟甲基-吡唑-1-基)苯基]-乙氧基]-嘧啶-2-基胺(0.21g，LCMS表明纯度>90），将其直接用于下一步骤中。
在微波小瓶中，将粗品中间体（0.21g）、L-p-硼-苯丙氨酸（0.1g，0.48mmol）、碳酸钠（0.1g，0.94mmol）和二氯双(三苯基膦)-钯(II)（15mg，0.021mmol）溶解在MeCN（2.0ml）和H2O（2.0ml）的混合物中。将小瓶密封，并将反应混合物在微波反应器中在150℃加热6分钟。将反应混合物过滤，并将滤液浓缩得到粗产物，将其溶解在MeOH和H2O（1:1）中，并使用MeOH/H2O/TFA作为溶剂系统通过制备型HPLC进行纯化，得到作为TFA盐的(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-[2,2,2-三氟-1-(2-(3-三氟甲基-吡唑-1-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶-4-基]-苯基-丙酸。LCMS：M+1=567。1H-NMR(400MHz,CD3OD)：δ(ppm)3.2(m,1H),3.35(m,1H),4.30(t,1H),6.80(s,1H),6.85(m,1H),6.98(d,1H),7.45(d,2H),7.59(m,1H),7.68(m,2H),7.88(m,1H),7.95(d,2H),8.20(1H)。
5.62.(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{1-[2-(3,5-二甲基-吡唑-1-基)-苯 基]-2,2,2-三氟-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸的合成
将2,2,2-三氟-1-(2-碘-苯基)-乙醇（0.331g，1.1mmol）、3,5-二甲基吡唑（0.096g，1.0mmol）、CuI（0.019g，0.1mmol）、K2CO3（0.290g，2.1mmol）、(1R,2R)-N,N′-二甲基-环己烷-1,2-二胺（0.028g，0.2mmol）和甲苯（10ml）在20ml压力管中合并，并将混合物在130℃（油浴温度）加热12小时。将混合物用乙酸乙酯稀释，并用H2O（2x20ml）、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥。除去溶剂得到粗产物，使用含5-10%乙酸乙酯的己烷作为溶剂通过ISCO柱层析将其纯化，得到1-[2-(3,5-二甲基-吡唑-1-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙醇（120mg）。
在氮气气氛下向无水THF（10ml）加入2-氨基-4,6-二氯嘧啶（0.074g，0.45mmol）、1-[2-(3,5-二甲基-吡唑-1-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙醇（0.120g，0.45mmol）、NaH（0.022g，0.59mmol）。将反应在40-45℃搅拌6小时，然后冷却至室温，并用水（0.2ml）淬灭。将反应混合物浓缩，得到粗品4-氯-6-{1-[2-(3,5-二甲基-吡唑-1-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙氧基]-嘧啶-2-基胺（0.195g，LCMS表明纯度>90%），将其直接用于下面步骤中。
在微波小瓶中，将粗品中间体（0.195g）、L-p-硼-苯丙氨酸（0.10g，0.48mmol）、碳酸钠（0.10g，0.95mmol）和二氯双(三苯基膦)-钯(II)（15mg，0.021mmol）溶解在MeCN（2.0ml）和H2O（2.0ml）的混合物中。将小瓶密封，并将反应混合物在微波反应器中在150℃加热6分钟。将混合物过滤，并将滤液浓缩得到粗产物，将其溶解在MeOH和H2O（1:1）中，并使用MeOH/H2O/TFA作为溶剂系统通过制备型HPLC进行纯化，得到作为TFA盐的(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-[1-(2-(3,5-二甲基-吡唑-1-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸。LCMS：M+1=527。1H-NMR(400MHz,CD3OD)：δ(ppm)4.32(t,1H),3.39(m,1H),3.25(m,1H),2.30(s,3H),2.10(s,3H),7.92(m,3H),7.68(m,2H),7.50(d,2H),7.42(m,1H),6.92(m,1H),6.89(s,1H),6.17(s,1H)。
5.63.(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{2,2,2-三氟-1-[2-(3-苯基-吡唑-1- 基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸的合成
将2,2,2-三氟-1-(2-碘-苯基)-乙醇（0.331g，1.1mmol）、3-苯基吡唑（0.144g，1.0mmol）、CuI（0.019g，0.1mmol）、K2CO3（0.290g，2.1mmol）、(1R,2R)-N,N’-二甲基-环己烷-1,2-二胺（0.028g，0.2mmol）和甲苯（10ml）置于20ml压力管中，并将混合物在130℃（油浴温度）加热12小时。将混合物用乙酸乙酯稀释，并用H2O（2x 20ml）、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥。除去溶剂得到粗产物，使用含5-10%乙酸乙酯的己烷作为溶剂通过ISCO柱层析将其纯化，得到2,2,2-三氟-1-[2-(3-苯基-吡唑-1-基)-苯基]-乙醇（75mg）。
在氮气气氛下向无水THF（7ml）加入2-氨基-4,6-二氯嘧啶（0.041g，0.25mmol）、2,2,2-三氟-1-[2-(3-苯基-吡唑-1-基)-苯基]-乙醇（0.070g，0.22mmol）和NaH（0.012g，0.31mmol）。将反应在40-45℃搅拌6小时，然后冷却至室温，并用水（0.04ml）淬灭。将反应混合物浓缩，得到粗品4-氯-6-{2,2,2-三氟-1-[2-(3-苯基-吡唑-1-基)-苯基]-乙氧基]-嘧啶-2-基胺（0.110g，LCMS表明纯度>90%），将其直接用于下面步骤中。
在微波小瓶中，将粗品中间体（0.110g）、L-p-硼-苯丙氨酸（0.050g，0.24mmol）、碳酸钠（0.050g，0.48mmol）和二氯双(三苯基膦)-钯(II)（8mg，0.010mmol）溶解在MeCN（2.0ml）和H2O（2.0ml）的混合物中。将小瓶密封，并将反应混合物在微波反应器中在150℃加热6分钟。将混合物过滤，并将滤液浓缩得到粗产物，将其溶解在MeOH和H2O（1:1）中，并使用MeOH/H2O/TFA作为溶剂系统通过制备型HPLC进行纯化，得到作为TFA盐的(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{2,2,2-三氟-1-[2-(3-苯基-吡唑-1-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸。LCMS：M+1=575。1H-NMR(400MHz,CD3OD)：δ(ppm)3.20(m,1H),3.38(m,1H),4.30(t,1H),6.80(s,1H),7.00(s,1H),7.30-7.48(m,7H),7.62(m,3H),7.90(m,4H),8.10(s,1H)。
5.64.(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{2,2,2-三氟-1-[5-甲氧基-2-(4-甲基- 吡唑-1-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸的合成
将1-(2-溴-5-甲氧基-苯基)-2,2,2-三氟-乙醇（0.570g，2.0mmol）、4-甲基吡唑（0.164g，2.0mmol）、CuI（0.057g，0.3mmol）、K2CO3（0.580g,4.2mmol）、(1R,2R)-N,N′-二甲基-环己烷-1,2-二胺（0.071g，0.5mmol）和甲苯（10ml）合并在20ml压力管中，并将混合物在130℃（油浴温度）加热12小时。将混合物用乙酸乙酯稀释，并用H2O（2x 20ml）、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥。除去溶剂得到粗产物，使用含5-10%乙酸乙酯的己烷作为溶剂通过ISCO柱层析将其纯化，得到2,2,2-三氟-1-[5-甲氧基-2-(4-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-乙醇（90mg）。
在微波小瓶中，将2,2,2-三氟-1-[5-甲氧基-2-(4-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-乙醇（0.090g，0.31mmol）、(S)-3-[4-(2-氨基-6-氯-嘧啶-4-基)-苯基]-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸（0.122g，0.31mmol）、1,4-二噁烷（2ml）、Cs2CO3（0.503g，1.55mmol）合并并加热至180℃45min。将混合物过滤并浓缩。向残留物加入含5%甲醇的DCM（50ml）。将混合物过滤。将滤液浓缩得到粗产物，将其置于含20%TFA的DCM（30ml）中并在室温搅拌30分钟。LCMS表明反应完成并具有目标产物。将反应混合物浓缩以给出粗产物，将其溶解在MeOH和H2O（1:1）中，并使用MeOH/H2O/TFA作为溶剂系统通过制备型HPLC进行纯化，得到(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{2,2,2-三氟-1-[5-甲氧基-2-(4-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-乙氧基]-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸。
LCMS：M+1=543。1H-NMR(400MHz,CD3OD)：δ(ppm)2.20(s,3H),3.22(m,1H),3.40(m,1H),3.84(s,3H),4.35(t,1H),6.84(s,1H),6.98(m,1H),7.18(m,1H),7.26(m,1H),7.40(d,1H),7.48(d,2H),7.66(d,2H),7.96(d,2H)。
5.65.(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{(R)-2,2,2-三氟-1-[2-(3-甲基-吡唑 -1-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸的合成
将R-1-(2-溴-苯基)-2,2,2-三氟-乙醇（1.53g，6mmol）、3-甲基吡唑（0.492g，6mmol）、CuI（0.456g，2.4mmol）、K2CO3（2.07g，15mmol）、(1R,2R)-N,N′-二甲基-环己烷-1,2-二胺（0.170g，1.2mmol）和甲苯（10ml）合并在20ml压力管中，并将混合物在130℃（油浴温度）加热12小时。将反应混合物用乙酸乙酯稀释，并用H2O（2x 20ml）、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥。除去溶剂得到粗产物，使用含5-10%乙酸乙酯的己烷作为溶剂通过ISCO柱层析将其纯化，得到R-2,2,2-三氟-1-[2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-乙醇（1.8g）。
在氮气气氛下向无水THF（40ml）加入2-氨基-4,6-二氯嘧啶（1.2g，7.4mmol）、R-2,2,2-三氟-1-[2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-乙醇（1.8g，7.03mmol）和NaH（0.380g，10mmol）。将反应在40-45℃搅拌6小时，然后冷却至室温，并用水（0.1ml）淬灭。将反应混合物浓缩，得到4-氯-6-{R-2,2,2-三氟-1-[2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-乙氧基]-嘧啶-2-基胺（3.0g，LCMS表明纯度>90%），将其直接用于下面步骤中。
在微波小瓶中，将粗品中间体（0.750g）、L-p-硼-苯丙氨酸（0.420g，2.0mmol）、碳酸钠（0.430g，4.0mmol）和二氯双(三苯基膦)-钯(II)（30mg，0.043mmol）溶解在MeCN（7.0ml）和H2O（7.0ml）的混合物中。将小瓶密封，并将反应混合物在微波反应器中在150℃加热7分钟。将混合物过滤，并将滤液浓缩得到粗产物，将其溶解在MeOH和H2O（1:1）中，并使用MeOH/H2O/TFA作为溶剂系统通过制备型HPLC进行纯化，得到作为TFA盐的(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{R-2,2,2-三氟-1-[2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸。LCMS：M+1=514。1H-NMR(400MHz,CD3OD)：δ(ppm)2.40(s,3H),3.30(m,1H),3.42(m,1H),4.38(t,1H),6.21(s,1H),7.02(s,1H),7.18(m,1H),7.54(d,1H),7.61(m,4H),7.82(m,2H),7.97(d,2H)。
5.66.(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{1-[4-氯-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯 基]-2,2,2-三氟-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸的合成
将1-(4-氯-2-碘-苯基)-2,2,2-三氟-乙醇（0.840g，2.5mmol）、3-甲基吡唑（0.230g，2.8mmol）、CuI（0.190g，1.0mmol）、K2CO3（0.863g，6.25mmol）、(1R,2R)-N,N′-二甲基-环己烷-1,2-二胺（0.071g，0.5mmol）和甲苯（10ml）合并在20ml压力管中，并将混合物在130℃（油浴温度）加热12小时。将混合物用乙酸乙酯稀释，并用H2O（2x20ml）、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥。除去溶剂得到粗产物，使用含5-10%乙酸乙酯的己烷作为溶剂通过ISCO柱层析将其纯化，得到1-[4-氯-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙醇（240mg）。
将1-[4-氯-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙醇（0.120g，0.41mmol）、(S)-3-[4-(2-氨基-6-氯-嘧啶-4-基)-苯基]-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸（0.176g，0.45mmol）、1,4-二噁烷（4ml）和Cs2CO3（0.533g，1.64mmol）合并在20ml密封管中，并将混合物在100℃加热12小时。将混合物浓缩。向残留物加入含10%甲醇的DCM（50ml）并将混合物过滤。将滤液浓缩以给出粗产物，将其置于THF/3N HCl（30ml/15ml）中，并将得到的混合物在40-45℃搅拌12小时。LCMS表明反应完成并具有目标产物。将混合物浓缩以给出粗产物，将其溶解在MeOH和H2O（1:1）中，并使用MeOH/H2O/TFA作为溶剂系统通过制备型HPLC进行纯化，得到作为TFA盐的(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{1-[4-氯-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸。LCMS：M+1=547。1H-NMR(400MHz,CD3OD)：δ(ppm)2.30(s,3H),3.10-3.30(m,2H),4.20(t,1H),6.32(d,1H),6.74(s,1H),7.0(q,1H),7.38(d,2H),7.50(m,2H),7.72(m,1H),7.90(m,3H)。
5.67.(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{R-1-[4-氯-2-(3-甲基-吡唑-1-基)- 苯基]-2,2,2-三氟-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸乙酯的合成
如下所述逐步制备标题化合物：
步骤1：1-(2-溴-4-氯-苯基)-2,2,2-三氟-乙酮的合成。在0-5℃（冰水浴）下，用10分钟向含有无水甲醇（300ml）的500ml 2颈RB烧瓶逐滴加入亚硫酰氯（29.2ml，400mmol）。撤去冰水浴并加入2-溴-4-氯-苯甲酸（25g，106mmol）。将混合物加热至轻度回流12h。通过TLC和LCMS监测反应进展。在反应完成后，将反应混合物浓缩。将粗产物溶解在二氯甲烷（DCM，250ml）中，用水（50ml）、饱和NaHCO3水溶液（50ml）、盐水（50ml）洗涤，在硫酸钠上干燥，并浓缩得到2-溴-4-氯-苯甲酸甲酯（26g，99%），其直接用于下面步骤中。
2-溴-4-氯-苯甲酸甲酯（12.4g，50mmol）在甲苯（200ml）中冷却至-70℃，并加入三氟甲基三甲基硅烷（13ml，70mmol）。逐滴加入四丁基氟化铵（1M，2.5ml），并使混合物用4h升温至室温，然后将其在室温搅拌10小时。将反应混合物浓缩，得到粗品[1-(2-溴-4-氯-苯基)-2,2,2-三氟-1-甲氧基-乙氧基]-三甲基-硅烷。将该粗品中间体溶解在甲醇（100ml）中，并加入6N HCl（100ml）。将混合物在45-50℃保持12h。除去甲醇，将该粗品用二氯甲烷（200ml）萃取。将合并的DCM层用水（50ml）、NaHCO3（50ml）、盐水（50ml）洗涤，并在硫酸钠上干燥。除去溶剂得到粗产物，使用含1-2%乙酸乙酯的己烷作为溶剂，将其通过ISCO柱层析进行纯化，得到1-(2-溴-4-氯-苯基)-2,2,2-三氟-乙酮（10g，70%）。1H-NMR(300MHz,CDCl3)：δ(ppm)7.50(d,1H),7.65(d,1H),7.80(s,1H)。
步骤2：R-1-(2-溴-4-氯-苯基)-2,2,2-三氟-乙醇的合成。在氮气下，向2L 3颈RB烧瓶中的儿茶酚硼烷（1M，在THF中，280ml，280mmol）加入S-2-甲基-CBS噁唑硼烷（7.76g，28mmol），并将得到的混合物在室温下搅拌20min。将反应混合物冷却至-78℃（干冰/丙酮浴），并用2小时逐滴加入含1-(2-溴-4-氯-苯基)-2,2,2-三氟-乙酮（40g，139mmol）的THF（400ml）。使反应混合物升温至-36℃，并在该温度下搅拌24小时，并在-32℃下进一步搅拌24h。加入3N NaOH（250ml），并将冷却浴更换成冰水浴。然后用30分钟逐滴加入含30%过氧化氢的水（250ml）。撤去冰水浴，并将混合物在室温搅拌4小时。分离有机层，浓缩并重新溶解在乙醚（200ml）中。将水层用乙醚（2x 200ml）萃取。将合并的有机层用1N NaOH水溶液（4x 100ml）、盐水洗涤，并在硫酸钠上干燥。除去溶剂得到粗产物，使用含2至5%乙酸乙酯的己烷作为溶剂通过柱层析对其进行纯化，得到目标醇36.2g（90%，e.e.>95%）。将醇（36.2g）从己烷（80ml）结晶，获得R-1-(2-溴-4-氯-苯基)-2,2,2-三氟-乙醇28.2g（70%；99-100%e.e.）。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)5.48(m,1H),7.40(d,1H),7.61(d,2H)。
步骤3：R-1-[4-氯-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙醇的合 成。将R-1-(2-溴-4-氯-苯基)-2,2,2-三氟-乙醇（15.65g，54.06mmol）、3-甲基吡唑（5.33g，65mmol）、CuI（2.06g，10.8mmol）、K2CO3（15.7g，113.5mmol）、(1R,2R)-N,N′-二甲基-环己烷-1,2-二胺（1.54g，10.8mmol）和甲苯（80ml）合并在250ml压力管中，并加热至130℃（油浴温度）12小时。将反应混合物用乙酸乙酯稀释，并用H2O（4x 100ml）、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥。除去溶剂得到粗产物，用含5-10%乙酸乙酯的己烷作为溶剂将其通过ISCO柱层析进行纯化，得到R-1-[4-氯-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙醇（13.5g；86%）。1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ(ppm)2.30(s,3H),4.90(m,1H),6.20(s,1H),6.84(d,1H),7.20(s,1H),7.30(d,1H),7.50(d,1H)。
步骤4：(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{R-1-[4-氯-2-(3-甲基-吡唑-1-基)- 苯基]-2,2,2-三氟-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基}-丙酸乙酯的合成。将R-1-[4-氯-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙醇（17.78g，61.17mmol）、(S)-3-[4-(2-氨基-6-氯-嘧啶-4-基)-苯基]-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸（20.03g，51mmol）、1,4-二噁烷（250ml）和Cs2CO3（79.5g，244mmol）合并在3颈500ml RB烧瓶中，并加热至100℃（油浴温度）12-24小时。通过LCMS监测反应进展。在反应完成后，将混合物冷却至60℃，加入水（250ml）和THF（400ml）。分离有机层并用盐水（150ml）洗涤。除去溶剂得到BOC保护的粗产物，将其置于THF（400ml）、3N HCl（200ml）中。将混合物在35-40℃加热12小时。在真空中除去THF。将残留的水层用乙酸异丙酯（2x100ml）萃取并分开浓缩以回收未反应的醇（3.5g）。在真空下从水性级份中除去痕量的残留有机溶剂。
向装备有温度控制器和pH计的1L烧杯加入H3PO4（40ml，85%，在水中）和水（300ml），然后加入50%NaOH水溶液，以将pH调整至6.15。将温度升高至58℃，并将上述酸性水溶液逐滴加入到缓冲液中，同时添加50%NaOH水溶液使得pH维持在6.1至6.3之间。在添加完成后，将沉淀的固体过滤，用热水（50-60℃）（2x200ml）洗涤，并干燥得到粗品(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{R-1-[4-氯-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基}-丙酸（26.8g；95%）。LCMS和HPLC分析表明化合物纯度约为96-97%。
在0-5℃下向无水乙醇（400ml）逐滴加入SOCl2（22ml，306mmol）。加入来自于上述反应的酸粗品（26.8g）。撤去冰水浴，并将反应混合物在40-45℃加热6-12小时。在反应完成后，真空除去乙醇。向残留物加入冰水（300ml），并用乙酸异丙酯（2x100ml）萃取。用饱和Na2CO3中和水性溶液以将pH调整至6.5。将溶液用乙酸乙酯（2x300ml）萃取。将合并的乙酸乙酯层用盐水洗涤并浓缩得到24g酯粗品（HPLC纯度为96-97%)。然后使用含5%乙醇的DCM作为溶剂将酯粗品通过ISCO柱层析进行纯化，得到(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{R-1-[4-氯-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基}-丙酸乙酯（20.5g；70%；HPLC纯度为98%）。LCMS M+1=575。1H-NMR(400MHz,CD3OD):δ(ppm)1.10(t,3H),2.25(s,3H),2.85(m,2H),3.65(m,1H),4.00(q,2H),6.35(s,1H),6.60(s,1H),6.90(m,1H),7.18(d,2H),7.45(m,2H),7.70(d,1H),7.85(m,3H)。
5.68.(S)-2-氨基-3-(4-(2-氨基-6-((R)-1-(4-氯-2-(3-甲基-1H-吡唑-1- 基)苯基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)苯基)丙酸的合成
将(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{R-1-[4-氯-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基}-丙酸乙酯（22.2g，38.6mmol）溶解在THF（220ml）和水（50ml）中。加入单水氢氧化锂（5.56g，132mmol）。将反应混合物在室温搅拌12h。除去THF，并向残留物加入水（100ml），以得到透明溶液。
向装备有温度控制器和pH计的1L烧杯加入H3PO4（40ml，85%，在水中）、水（300ml）和50%NaOH水溶液，以将pH调整至6.15。将温度升高至58℃，并将该化合物的锂盐水溶液逐滴加入到缓冲液中，同时添加3N HCl使得pH维持在6.1至6.2之间。在添加完成后，将沉淀的固体过滤，用热水（50-60℃）（2x200ml）洗涤，并干燥得到(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{R-1-[4-氯-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基}-丙酸（19.39g；92%）。LCMS和HPLC分析表明化合物纯度约为98-99%。LCMS M+1=547。1H-NMR(400MHz,CD3OD)：δ(ppm)2.40(s,3H),3.22-3.42(m,2H),4.38(t,1H),6.42(s,1H),7.10(s,1H),7.21(m,1H),7.60(m,4H),7.81(d,1H),7.92(m,3H)。
5.69.(S)-2-氨基-3-(4-{2-氨基-6-[2,2,2-三氟-1-(2-噻唑-2-基-苯基)- 乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸的合成
向40ml微波反应器加入1.04g 2-甲酰基苯基硼酸（6.9mmol）、1.14g 2-溴噻唑（6.9mmol）、240mg双(三苯基膦)二氯化钯（Pd(PPh3)2Cl2，0.34mmole）。然后向混合物加入13.8ml 1M Na2CO3（13.8mmol）和10ml CH3CN。将反应器密封，并将反应在微波下在160℃进行5分钟。LCMS显示反应完成并具有目标产物。然后将反应混合物倒入分液漏斗。然后加入200ml二氯甲烷和100ml水进行萃取。将二氯甲烷层在MgSO4上干燥。除去溶剂得到粗产物，将其通过硅胶柱层析进行纯化，用己烷/乙酸乙酯混合物（5/1至2/1）洗脱，得到纯的2-噻唑-2-基-苯甲醛（0.5g，收率：38%）。
向50ml圆底烧瓶加入184mg 2-噻唑-2-基-苯甲醛（0.97mmol）和10ml无水四氢呋喃（THF）。然后向溶液加入145.4mg三氟甲基三甲基硅烷（1.02mmole）和20μl含1M叔丁基氯化铵的THF（0.02mmol）。将混合物在室温搅拌过夜，然后加入10ml 1N HCl，并将反应混合物在室温搅拌15分钟。在真空中除去THF，并将混合物用二氯甲烷（3x50ml）萃取。将合并的CH2Cl2层在MgSO4上干燥。除去溶剂得到262mg粗产物，其纯度约为95%，并不需进一步纯化用于下一步骤中。
将2,2,2-三氟-1-(2-噻唑-2-基-苯基)-乙醇（260mg，1mmol）、(S)-3-[4-(2-氨基-6-氯-嘧啶-4-基)-苯基]-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸（390mg，1mmol）、碳酸铯（1.3g，4mmole）和10ml 1,4-二噁烷在50ml密封管中混合在一起。将反应混合物在100℃加热3天。加入水（20ml），然后缓慢加入1N HCl水溶液以将pH调整至4，然后在真空中除去1,4-二噁烷，并将得到的混合物用二氯甲烷（3x50ml）萃取。将合并的二氯甲烷层在MgSO4上干燥。除去溶剂得到粗产物，其不需进一步纯化用于下一步反应。
将上述粗产物溶解在5ml二氯甲烷中，加入0.4ml三氟乙酸。将混合物在室温搅拌过夜。然后在真空中除去三氟乙酸得到粗产物，将其通过制备型HPLC进行纯化，得到63mg纯产物。HPLC：YMC PackODS-A 3x50mm，7um；溶剂A=含0.1%TFA的水；溶剂B=含0.1%TFA的甲醇。溶剂B用4分钟从10至90%；流速=2ml/min；RT=3min。HPLC纯度=100%。LCMS：M+1=515.9。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.06ppm(2H,m);7.92(2H,d,J=8Hz);7.84(1H,m);7.81(1H,m);7.77(1H,d,J=4Hz);7.57(2H,m);7.45(2H,d,J=8Hz);6.84(1H,s);4.30(2H,dd,J=8Hz);3.38(2H,dd,J=12,2Hz);3.23(2H,dd,J=12,8Hz)。
5.70.(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{2,2,2-三氟-1-[5-氟-2-(3-甲基-吡唑 -1-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸的合成
将2-溴-5-氟-苯甲酸甲酯（1g，4.292mmol）、NaBH4（0.423g，11.159mmol）和LiCl（0.474g，11.159mmol）在THF/EtOH（20ml/10ml）中的混合物在室温搅拌过夜。加入HCl水溶液（10ml，2N）并搅拌约10分钟。然后在低真空下除去有机溶剂。将残留物用水稀释并用乙酸乙酯萃取。将有机层用NaHCO3水溶液（10%）、水和盐水洗涤，然后干燥（MgSO4）并浓缩，得到852mg（粗品收率96.8%）作为白色固体的粗产物(2-溴-5-氟-苯基)甲醇，其不需进一步纯化即可使用。
向(2-溴-5-氟-苯基)甲醇（0.852g，4.156mmol）在DCM（15ml）中的溶液加入MnO2（4.254g，85%，41.56mmol）。将混合物在室温搅拌两天，然后过滤并用DCM洗涤。将滤液浓缩，得到777mg 2-溴-5-氟-苯甲醛（收率92%）。然后将新制的醛（0.777g，3.828mmol）溶解在无水THF（10ml）中，并冷却至0℃。加入三氟甲基三甲基硅烷（1.13ml，7.656mmol），然后加入四丁基氟化铵（0.020g，0.076mmol）。然后使温度升温至室温。将混合物在室温搅拌5小时，然后用乙酸乙酯稀释，用水、盐水洗涤并通过MgSO4干燥。在减压下除去溶，得到1.1g（纯度90%）作为粗产物的2-溴-5-氟-苯基)2,2,2-三氟-乙醇，其不需进一步纯化用于下一步骤。
将2-溴-5-氟-苯基)2,2,2-三氟-乙醇（0.990g，3.263mmol，90%）、3-甲基吡唑（0.476g，4.895mmol）、CuI（0.367g，1.632mmol）、K2CO3（1.334g，8.158mmol）、(1R,2R)-N,N′-二甲基-环己烷-1,2-二胺（0.110g，0.653mmol）和甲苯（10ml）合并在20ml微波小瓶中，然后将其密封并在180℃加热40min。将混合物过滤并用乙酸乙酯洗涤。将滤液用水洗涤3次，然后加入硅胶制成塞。使用含5-10%乙酸乙酯的己烷作为溶剂通过ISCO柱层析对化合物进行纯化，得到75mg 1-(5-氟-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基)-2,2,2-三氟-乙醇。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:2.29(s,3H),4.90(m,1H),6.21(d,1H),7.07-7.11(m,1H),7.19-7.22(m,1H),7.29-7.32(m,1H),7.51(d,1H)。
将上面制备的醇（0.075g，0.273mmol）溶解在无水1,4-二噁烷（3ml）中。将氢化钠（0.013g，0.328mmol，60%，在矿物油中）全部一次加入，并将混合物在室温搅拌30分钟。加入2-氨基-4,6-二氯-嘧啶（0.045g，0.273mmol）。将混合物在80℃搅拌约2小时。除去溶剂，并将残留物悬浮在乙酸乙酯中，将其用水洗涤，在MgSO4上干燥，然后浓缩，得到目标单盐酸盐产物100mg（0.249mmol），将其加入到含有4-硼-L-苯丙氨酸（0.052g，0.249mmol）、Na2CO3（0.053g，0.498mmol）、乙腈（2ml）/水（2ml）和二氯双(三苯基膦)-钯（5mg，0.007mmol）的5ml微波小瓶中。将小瓶盖上盖子，在微波辐射下在150℃搅拌5分钟。将反应混合物冷却，通过注射式滤器过滤，然后使用YMC-Pack ODS 100x30mm ID柱通过反相制备型HPLC（MeOH/H-2O/TFA溶剂系统）进行分离。将纯的级份在真空中浓缩。然后将产物悬浮在5ml水中，冷冻并冻干，得到37mg作为三氟盐的(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{(R)-1-[5-氟-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基}-丙酸。1H-NMR(400MHz,CD3OD)：δ2.29(s,3H),3.08-3.30(m,2H),4.19(q,1H),6.32(d,1H),6.82(s,1H),6.85(m,1H),7.26(m,1H),7.33(d,2H),7.42(m,2H),7.75(d,1H),7.87(d,2H)。
5.71.(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6{2,2,2-三氟-1-[5-氯-2-(3-甲基-吡唑 -1-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸的合成
从使用与上述用于R-1-[4-氯-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙醇相同的方法制备的R-1-[5-氯-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙醇来制备标题化合物。具体来说，将R-1-[5-氯-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙醇（0.959g，3.318mmol）溶解在无水1,4-二噁烷（8ml）中。将氢化钠（0.159g，3.982mmol，60%，在矿物油中）全部一次加入，将混合物在室温搅拌30分钟。加入2-氨基-4,6-二氯-嘧啶（0.544g，3.318mmol）。将混合物在80℃搅拌约2小时。除去溶剂，将残留物悬浮在乙酸乙酯中，将其用水洗涤，在MgSO4上干燥，然后浓缩，得到目标一氯化物产物1.38g，其不需纯化直接使用。
将上面制造的一氯化物（0.460g，1.104mmol）添加到含有4-硼-L-苯丙氨酸（0.277g，1.325mmol）、Na2CO3（0.234g，2.208mmol）、乙腈（8ml）/水（8ml）和二氯双(三苯基膦)-钯（0.039g，0.055mmol）的20ml微波小瓶中。将小瓶盖上盖子，并将混合物在微波辐射下在150℃搅拌10分钟。将混合物冷却，通过注射式滤器过滤，然后使用YMC-Pack ODS 100x30mm ID柱通过反相制备型HPLC（MeOH/H-2O/TFA溶剂系统）进行分离。将纯的级份在真空中浓缩。然后将产物悬浮在5ml水中，冷冻并冻干，得到580mg(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{R-1-[5-氯-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基}-丙酸。1H-NMR(400MHz,CD3OD)：δ2.40(s,3H),3.29-3.46(m,2H),4.38(q,1H),6.45(d,1H),7.09(s,1H),7.24(m,1H),7.53-7.70(m,4H),7.82(s,1H),7.90(d,1H),7.97(d,2H)。
5.72.(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{2,2,2-三氟-1-[4-(2-氧-吡咯烷-1- 基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸的合成
将含4-(2-氧-吡咯烷-1-基)-苯甲醛（500mg，2.64mmol）的THF（20ml）冷却至0℃，并加入三氟甲基三甲基硅烷（375mg，2.64mmol）。逐滴加入四丁基氟化铵（1M，0.1ml），使混合物经1h内升温至室温，并在室温下进一步搅拌过夜。在反应完成后，加入3N HCl（5ml），并将反应混合物搅拌2小时。将混合物浓缩。加入水（20ml），将混合物用EtOAc（2x20ml）萃取，并用NaHCO3（20ml）、盐水（20ml）洗涤，在硫酸钠上干燥，并浓缩得到590mg 目标产物，其不需进一步纯化用于下一步骤中（收率为86%）。
将4,6-二氯-嘧啶-2-基胺（700mg，2.69mmol）、NaH（194mg，8.07mmol，60%）和1-(4-(2,2,2-三氟-1-羟基-乙基)-苯基)-吡咯烷-2-酮（441mg，2.69mmol）在无水THF（10ml）中的溶液，在室温下搅拌过夜。在反应完成后，在减压下除去THF。加入水（10ml），同时将混合物冷却至0℃。然后将混合物用二氯甲烷萃取（2x40ml）。将合并的有机溶液在Na2SO4上干燥。除去溶剂，得到498mg 目标产物，纯度为92%，其不需进一步纯化用于下一步骤中（得到498mg，48%）。
在Emrys微波处理小瓶（20ml）中装入1-(4-(2-氨基-6-氯-嘧啶-4-基氧基)-2,2,2-三氟-乙基)-苯基)-吡咯烷-2-酮（200mg，0.51mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（108mg，0.51mmol）和5ml乙腈。向上述溶液加入5ml碳酸钠水溶液（1M），然后加入5mol%二氯双(三苯基膦)-钯(II)。将反应容器密封并用微波辐射加热至160℃7分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在4ml甲醇中，用制备型LC纯化，得到153mg产物（收率58%）。1H-NMR(400MHz,CD3OD)：δ(ppm)2.1(m,2H),2.5(t,2H),3.05-3.4(m,2H),3.85(t,2H),4.2(m,1H),6.6(m,1H),6.75(s,1H),7.3(d,2H),7.5(d,2H),7.6(d,2H),7.9(d,2H)。
5.73.(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{(R)-2,2,2-三氟-1-[5-氟-2-(3-甲基- 吡唑-1-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸的合成
将R-1-(2-溴-5-氟-苯基)-2,2,2-三氟-乙醇（4.0g，14.65mmol）、3-甲基吡唑（1.56g，19.04mmol）、CuI（0.557g，2.93mmol）、K2CO3（4.25g，30.76mmol）、(1R,2R)-N,N′-二甲基-环己烷-1,2-二胺（0.416g，2.93mmol）和甲苯（15ml）装入50ml密封管，并将得到的混合物在130℃（油浴温度）加热2天。将混合物用乙酸乙酯稀释，并用H2O（4x30ml）、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥。除去溶剂得到粗产物，使用含5-10%乙酸乙酯的己烷作为溶剂通过ISCO柱层析将其纯化，得到1.75g R-2,2,2-三氟-1-[5-氟-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-乙醇（收率：44%）。1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ(ppm)2.35(s,3H),5.0(m,1H),6.3(s,1H),7.1(m,1H),7.20(s,1H),7.35(d,1H),7.50(s,1H)。
将4,6-二氯-嘧啶-2-基胺（938mg，5.72mmol）、NaH（188mg，1.5当量，8.17mmol，60%）和R-2,2,2-三氟-1-[5-氟-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基]-乙醇（1.5g，1当量，5.45mmol）在无水THF（10ml）中的溶液在室温在50℃下搅拌过夜。在反应完成后，在减压下除去THF。加入水（10ml）淬灭反应。然后将混合物用二氯甲烷萃取（2x40ml）。将合并的有机溶液在Na2SO4上干燥。除去溶剂，得到纯度为92%的目标产物，其不需纯化用于下一步骤中（收率：85%）。
在Emrys微波处理小瓶（20ml）中装入氯-6-R-2,2,2-三氟-1-(5-氟-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-苯基)-乙氧基)-嘧啶-2-基胺（2.18g，5.45mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（1.13g，5.45mmol），向上述溶液加入碳酸钠（1M，10.90ml，2eq.），然后加入5mol%氯双(三苯基膦)-钯(II)（191mg，0.27mmol）和5ml乙腈与5ml H2O。将反应容器密封，并将混合物用微波辐射在160℃加热10分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干。将残留物溶解在H2O（10ml）中，并用乙醚萃取。舍弃乙醚层。然后在真空中除去水相中的大部分水，随后加入10ml甲醇。将粗产物用制备型HPLC纯化，得到1.163g产物（收率75%）。1H-NMR(400MHz,CD3OD):δ(ppm)2.4(s,3H),3.35(m,1H),3.5(m,1H),4.36(m,1H),6.4(s,1H),7.0(s,1H),7.1(m,1H),7.4(m,1H),7.55(m,4H),7.85(s,1H),8.0(d,2H)。
5.74.(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{2,2,2-三氟-1-[4-(6-甲氧基-吡啶-2- 基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸的合成
在0℃下，向4-(6-甲氧基-吡啶-2-基)-苯甲醛（213mg，1mmol）和三氟甲基三甲基硅烷（0.2ml，1.2mmol）在10ml THF中的溶液加入四丁基氟化铵（TBAF）（0.1ml，1M，在THF中）。将混合物升温至室温并搅拌4小时。然后将反应混合物用12ml 1M HCl处理并搅拌过夜。将产物用乙酸乙酯（3x20ml）萃取。分离有机层并在硫酸钠上干燥。将有机溶剂蒸发，得到0.25g 1-[4-(6-甲氧基-吡啶-2-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙醇，其不需纯化直接用于下一步骤中。收率：90%。
向1-[4-(6-甲氧基-吡啶-2-基)-苯基]-2,2,2-三氟-乙醇（67mg，0.2mmol）在10ml无水1,4-二噁烷中的溶液加入Cs2CO3（375mg，1mmol）。将混合物搅拌5分钟，然后加入(S)-3-[4-(2-氨基-6-氯-嘧啶-4-基)-苯基]-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸（78mg，0.2mmol），并将混合物在110℃加热过夜。在冷却后，加入5ml水，并使用乙酸乙酯（20ml）萃取产物。将有机层在硫酸钠上干燥。通过旋转蒸发除去溶剂，得到112mg(S)-3-[4-(2-氨基-6-{2,2,2-三氟-1-[4-(6-甲氧基-吡啶-2-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸（收率：88%）。
将上述产物（112mg）加入到5ml 30%TFA/DCM溶液中。在反应完成后，将溶剂蒸发，得到粗产物，将其用制备型HPLC纯化，得到5mg(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{2,2,2-三氟-1-[4-(6-甲氧基-吡啶-2-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]丙酸。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ(ppm)8.18(d,J＝8.4Hz,2H),7.94(d,J＝8.4Hz,2H),7.74(m,3H),7.60(d,J＝8.4Hz,2H),7.52(d,J＝7.2Hz,1H),7.08(s,1H),6.86(m,1H),6.82(d,J＝8.1Hz 1H),4.37(t,1H),4.03(s,3H),3.5(m,2H)。
5.75.(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{2,2,2-三氟-1-[2-氟-4-(5-甲氧基-吡 啶-3-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸的合成
在0℃下，向4-溴-2-氟-苯甲醛（2.03g，10mmol）和TMSCF3（20ml，12mmol）在10ml THF中的溶液加入TBAF（0.1ml）。将形成的混合物升温至室温并搅拌4小时。然后将反应混合物用12ml 3M HCl处理并搅拌过夜。将产物用乙酸乙酯（3x20ml）萃取。分离有机层并在硫酸钠上干燥。将有机溶剂蒸发，得到2.4g 1-(4-溴-2-氟-苯基)-2,2,2-三氟-乙醇（收率：90%）。
向1-(4-溴-2-氟-苯基)-2,2,2-三氟-乙醇（1.4g，5.2mmol）在10ml无水1,4-二噁烷中的溶液加入Cs2CO3（8.45g，26mmol），将混合物搅拌5分钟，然后加入(S)-3-[4-(2-氨基-6-氯-嘧啶-4-基)-苯基]-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸（2.0g，5mmol），将得到的混合物在110℃加热过夜。在冷却后，加入5ml水，并用乙酸乙酯（20ml）萃取产物。将有机层在硫酸钠上干燥。通过旋转蒸发除去溶剂，得到2.6g(S)-3-(4-{2-氨基-6-[1-(4-溴-2-氟-苯基)-2,2,2-三氟-乙氧基]-嘧啶-4-基}苯基)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸（收率：82%）。
在微波小瓶（2ml）中装入(S)-3-(4-{2-氨基-6-[1-(4-溴-2-氟-苯基)-2,2,2-三氟-乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸（130mg，0.2mmol）、3-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼戊环-2-基)-吡啶（70mg，0.3mmol）、1ml乙腈和0.7ml水。向该混合物加入0.4ml碳酸钠水溶液（1M），然后加入14mg（5mol%）二氯双(三苯基膦)钯(II)。将反应容器密封，并使用微波辐射加热至150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干，将残留物溶解在2.5ml甲醇中，并用制备型HPLC纯化，得到51mg(S)-3-[4-(2-氨基-6-{2,2,2-三氟-1-[2-氟-4-(5-甲氧基-吡啶-3-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸。
将上述产物（51mg）溶解在5ml 30%TFA/DCM溶液中。将混合物在室温搅拌过夜。除去溶剂得到粗产物，将其用制备型HPLC纯化，得到17mg(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{2,2,2-三氟-1-[2-氟-4-(5-甲氧基-吡啶-3-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ(ppm)：8.73(s,1H),8.56(s,1H),8.25(s,1H),7.94(d,J＝8.2Hz,2H),7.77(m,3H),7.55(d,J＝8.4Hz,2H),7.16(m,1H),7.00(s,1H),4.35(t,1H),4.09(s,3H),3.4(m,2H)。
5.76.(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{(S)-2,2,2-三氟-1-[4-(2-氟-吡啶-4- 基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸的合成
向(S)-1-(4-溴-苯基)-2,2,2-三氟-乙醇（2.55g，11.0mmol）在10ml无水1,4-二噁烷中的溶液加入Cs2CO3（16.25g，50mmol），并将混合物搅拌5分钟，然后加入(S)-3-[4-(2-氨基-6-氯-嘧啶-4-基)-苯基]-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸（3.92g，10mmol）。将得到的混合物在110℃加热过夜。在冷却后，加入5ml水，并用乙酸乙酯（20ml）萃取产物。将有机层在硫酸钠上干燥。通过旋转蒸发除去溶剂，得到5.2g(S)-3-(4-{2-氨基-6-[(S)-1-(4-溴-苯基)-2,2,2-三氟-乙氧基]-嘧啶-4-基}苯基)-2-叔丁氧基-羰基氨基-丙酸（收率：82%）。
在微波小瓶（2ml）中装入(S)-3-(4-{2-氨基-6-[(S)-1-(4-溴-苯基)-2,2,2-三氟-乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸（139mg，0.23mmol）、2-氟吡啶-4-硼酸（40mg，0.27mmol）、1ml乙腈和0.7ml水。向该混合物加入0.4ml碳酸钠水溶液（1M），然后加入14mg（5mol%）二氯双(三苯基膦)钯(II)。将反应容器密封，并使用微波辐射加热至150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干，将残留物溶解在2.5ml甲醇中。将产物用制备型HPLC纯化，得到70mg(S)-3-[4-(2-氨基-6-{(S)-2,2,2-三氟-1-[4-(2-氟-吡啶-4-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸。
将上述产物（70mg）溶解在5ml含30%TFA的DCM中。将反应混合物在室温搅拌过夜。除去溶剂得到粗产物，将其用制备型HPLC纯化，得到52mg(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{(S)-2,2,2-三氟-1-[4-(2-氟-吡啶-4-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ(ppm)8.17(d,J＝5.7Hz,1H),7.85(d,J＝8.4Hz,2H),7.77(d,J＝6.9Hz,2H),7.67(d,J＝8.2Hz,2H),7.53(m,1H),7.38(d,J＝8.4Hz,,2H),7.30(s,1H),6.76(m,2H),4.21(t,1H),3.2(m,2H)。
5.77.(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{(S)-2,2,2-三氟-1-[4-(5-甲氧基-吡 啶-3-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸的合成
在微波小瓶（2ml）中装入(S)-3-(4-{2-氨基-6-[(S)-1-(4-溴-苯基)-2,2,2-三氟-乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸（139mg，0.23mmol）、3-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]-二氧硼戊环-2-基)-吡啶（69mg，0.27mmol）、1ml乙腈和0.7ml水。向该混合物加入0.4ml碳酸钠水溶液（1M），然后加入14mg（5mol%）二氯双(三苯基膦)钯(II)。将反应容器密封，并使用微波辐射加热至150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干，将残留物溶解在2.5ml甲醇中并用制备型HPLC纯化，得到60mg(S)-3-[4-(2-氨基-6-{(S)-2,2,2-三氟-1-[4-(5-甲氧基-吡啶-3-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸。
将上述产物（60mg）溶解在5ml含30%TFA的DCM中。将反应混合物在室温搅拌过夜。除去溶剂得到粗产物，将其用制备型HPLC纯化，得到48mg(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{(S)-2,2,2-三氟-1-[4-(5-甲氧基-吡啶-3-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ(ppm)：8.54(d,J＝1.5Hz,1H),8.37(d,J＝2.7Hz,1H),8.03(dd,J＝2.7Hz,1.5Hz,1H),7.84(d,J＝8.2Hz,2H),7.78(d,J＝8.4Hz,2H),7.70(d,J＝8.4Hz,2H),7.41(d,J＝8.4Hz,,2H),6.81(s,1H),6.75(m,1H),4.22(t,1H),3.95(t,3H),3.25(m,2H)。
5.78.(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{(S)-2,2,2-三氟-1-[4-(4-三氟甲基- 吡啶-3-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸的合成
在微波小瓶（2ml）中装入(S)-3-(4-{2-氨基-6-[(S)-1-(4-溴-苯基)-2,2,2-三氟-乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸（139mg，0.23mmol）、4-三氟甲基吡啶-3-硼酸（61mg，0.3mmol）、1ml乙腈和0.7ml水。向该混合物加入0.4ml碳酸钠水溶液（1M），然后加入14mg（5mol%）二氯双(三苯基膦)钯(II)。将反应容器密封，并使用微波辐射加热至150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干，将残留物溶解在2.5ml甲醇中，并用制备型HPLC纯化，得到20mg(S)-3-[4-(2-氨基-6-{(S)-2,2,2-三氟-1-[4-(4-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸。
将上述产物（20mg）溶解在5ml含30%TFA的DCM中。将混合物在室温搅拌过夜。除去溶剂得到粗产物，将其用制备型HPLC纯化，得到10mg(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{(S)-2,2,2-三氟-1-[4-(4-三氟甲基-吡啶-3-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ(ppm)：8.72(d,J＝5.1Hz,1H),8.55(s,1H),7.87(d,J＝8.2,2H),7.72(d,J＝5.0Hz,1H),7.63(d,J＝8.2Hz,2H),7.36(m,4H),6.81(m,1H),6.70(s,1H),4.20(t,1H),3.22(m,2H)。
5.79.(S)-2-氨基-3-(4-{2-氨基-6-[(S)-2,2,2-三氟-1-(4-异噁唑-4-基- 苯基)-乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸的合成
在微波小瓶（2ml）中装入(S)-3-(4-{2-氨基-6-[(S)-1-(4-溴-苯基)-2,2,2-三氟-乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸（139mg，0.23mmol）、4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼戊环-2-基)-异噁唑（57.5mg，0.3mmol）、1ml乙腈和0.7ml水。向该混合物加入0.4ml碳酸钠水溶液（1M），然后加入14mg二氯双(三苯基膦)钯(II)。将反应容器密封，并使用微波辐射加热至150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干，将残留物溶解在2.5ml甲醇中，并用制备型HPLC纯化，得到20mg(S)-3-(4-{2-氨基-6-[(S)-2,2,2-三氟-1-(4-异噁唑-4-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-2-叔丁氧基羰基氨基丙酸。
将上述产物（20mg）溶解在5ml含30%TFA的DCM中。将混合物在室温搅拌过夜。除去溶剂得到粗产物，将其用制备型HPLC纯化，得到10mg(S)-2-氨基-3-(4-{2-氨基-6-[(S)-2,2,2-三氟-1-(4-异噁唑-4-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ(ppm)9.03(s,1H),8.77(s,1H),7.84(m,2H),7.63(d,J＝8.2,1H),7.56(d,J＝8.4Hz,1H),7.50(m,1H),7.37(m,3H),6.70(m,2H),4.20(t,1H),3.22(m,2H)。
5.80.(S)-2-氨基-3-(4-{2-氨基-6-[2,2,2-三氟-1-(2-嘧啶-5-基-苯基)- 乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸的合成
在微波小瓶（20ml）中装入2-甲酰基苯基硼酸（290mg，2.0mmol）、5-溴-嘧啶（316mg，2.0mmol）和8ml乙腈。向该混合物加入0.4ml碳酸钠水溶液（1M），然后加入100mg二氯双(三苯基膦)钯(II)。将反应容器密封，并使用微波辐射加热至150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层蒸发以提供粗品，将其通过ISCO纯化，得到220mg 2-嘧啶-5-基-苯甲醛。
在0℃下，向2-嘧啶-5-基-苯甲醛（184mg，1mmol）和三氟甲基三甲基硅烷（TMSCF3，0.2ml，1.2mmol）在10ml THF中的溶液加入四丁基氟化铵（TBAF，0.1ml在THF中的1M溶液）。将混合物升温至室温，并搅拌4小时。然后将混合物用3ml 1M HCl处理并搅拌过夜。将产物用乙酸乙酯萃取（3x20ml）。分离有机层并在硫酸钠上干燥。将有机溶剂蒸发，得到0.21g2,2,2-三氟-1-(2-嘧啶-5-基-苯基)-乙醇（收率：84%），其不需纯化直接用于下一步骤中。
向2,2,2-三氟-1-(2-嘧啶-5-基-苯基)-乙醇（72mg，0.28mmol）在10ml无水THF中的溶液加入Cs2CO3（325mg，1.0mmol）。将混合物搅拌20分钟，加入2-氨基-4,6-二氯-嘧啶（36.7mg，0.22mmol），然后将反应混合物在110℃加热，直到反应完成。在冷却至室温后，加入5ml水，并用乙酸乙酯（20ml）萃取产物。将有机层在硫酸钠上干燥。通过旋转蒸发除去溶剂，得到76mg粗品4-氯-6-[2,2,2-三氟-1-(2-嘧啶-5-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶-2-基胺（收率：92%）。
在微波小瓶（2ml）中装入上述粗品中间体（38mg，0.1mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（31mg，0.15mmol）、1ml乙腈和0.7ml水。向该混合物加入0.3ml碳酸钠水溶液（1M），然后加入4mg 5mol%二氯双(三苯基膦)钯(II)。将反应容器密封，并使用微波辐射加热至150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干，将残留物溶解在2.5ml甲醇中，并用制备型HPLC纯化，得到10mg(S)-2-氨基-3-(4-{2-氨基-6-[2,2,2-三氟-1-(2-嘧啶-5-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ(ppm)9.21(s,1H),8.87(s,2H),7.86(d,J＝8.4,2H),7.75(m,1H),7.53(m,2H),7.37(d,J＝8.2,1H),7.33(m,1H),6.72(s,1H),6.58(m,1H),4.20(t,1H),3.22(m,2H)。
5.81.(S)-2-氨基-3-(4-{2-氨基-6-[2,2,2-三氟-1-(2-噻吩-3-基-苯基)- 乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸的合成
在微波小瓶（20ml）中装入2-甲酰基苯基硼酸（290mg，2.0mmol）、3-溴-噻吩（326mg，2.0mmol）和8ml乙腈。向该混合物加入0.4ml碳酸钠水溶液（1M），然后加入50mg二氯双(三苯基膦)钯(II)。将反应容器密封，并使用微波辐射在150℃下加热5分钟。在冷却后，将反应混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层蒸发以提供粗品，将其通过ISCO纯化，得到211mg 2-噻吩-3-基-苯甲醛。
在0℃下，向2-噻吩-3-基-苯甲醛（100mg，0.53mmol）和三氟甲基三甲基硅烷（0.1ml，0.64mmol）在10ml THF中的溶液加入四丁基氟化铵（TBAF，0.1ml在THF中的1M溶液）。将混合物升温至室温，并搅拌4小时。然后将混合物用3ml 1M HCl处理并搅拌过夜。将产物用乙酸乙酯萃取（3x20ml）。分离有机层并在硫酸钠上干燥。将有机溶剂蒸发，得到0.12g 2,2,2-三氟-1-(2-嘧啶-5-基-苯基)-乙醇，其不需纯化直接用于下一步骤中（收率：89%）。
向2,2,2-三氟-1-(2-噻吩-3-基-苯基)-乙醇（72mg，0.28mmol）在10ml无水THF中的溶液加入Cs2CO3（325mg，1.0mmol），并将混合物搅拌20分钟。然后加入2-氨基-4,6-二氯-嘧啶（36.7mg，0.22mmol），将混合物在110℃加热，直到反应完成。在冷却后，加入5ml水，并用乙酸乙酯（20ml）萃取产物。将有机层在硫酸钠上干燥。通过旋转蒸发除去溶剂，得到67mg 4-氯-6-[2,2,2-三氟-1-(2-嘧啶-5-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶-2-基胺（收率：78%）。
在微波小瓶（2ml）中装入上述粗品（40mg，0.1mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（31mg，0.15mmol）、1ml乙腈和0.7ml水。向该混合物加入0.3ml碳酸钠水溶液（1M），然后加入5mol%氯双(三苯基膦)钯(II)。将反应容器密封，并使用微波辐射加热至150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干，将残留物溶解在2.5ml甲醇中，然后用制备型HPLC纯化，得到11.8mg(S)-2-氨基-3-(4-{2-氨基-6-[2,2,2-三氟-1-(2-噻吩-3-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ(ppm)：7.84(d,J＝8.0Hz,2H),7.66(d,J＝7.6Hz,1H),7.53(m,1H),7.40(m,5H),7.30(m,1H),7.17(m,1H),6.91(m,1H),6.82(s,1H),4.23(t,1H),3.25(m,2H)。
5.82.(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{2,2,2-三氟-1-[2-(1-甲基-1H-吡唑 -4-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸的合成
在微波小瓶（20ml）中装入2-溴-苯甲醛（208mg，1.0mmol）、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼戊环-2-基)-1H-吡唑（222mg，1.2mmol）和8ml乙腈。向该混合物加入2.4ml碳酸钠水溶液（1M），然后加入50mg二氯双(三苯基膦)钯(II)。将反应容器密封，并使用微波辐射在150℃加热5分钟。在冷却后，将反应混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层蒸发以提供粗品，将其通过ISCO纯化，得到181mg 2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯甲醛（收率96%）。
在0℃下，向2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯甲醛（100mg，0.53mmol）和三氟甲基三甲基硅烷（0.12ml，0.6mmol）在10ml THF中的溶液加入四丁基氟化铵（0.1ml在THF中的1M溶液）。将混合物升温至室温，并搅拌4小时。然后将混合物用3ml 1M HCl处理并搅拌过夜。将产物用乙酸乙酯萃取（3x20ml）。分离有机层并在硫酸钠上干燥。将有机溶剂蒸发，得到0.12g 2,2,2-三氟-1-[2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基-苯基)-乙醇，其不需纯化直接用于下一步骤中（收率：89%）。
向2,2,2-三氟-1-[2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇（60mg，0.2mmol）在10ml无水THF中的溶液加入Cs2CO3（325mg，1.0mmol），并将混合物搅拌20分钟。加入2-氨基-4,6-二氯-嘧啶（32mg，0.2mmol），然后将反应混合物在110℃加热，直到反应完成。在冷却后，加入5ml水，并用乙酸乙酯（20ml）萃取产物。将有机层在硫酸钠上干燥。通过旋转蒸发除去溶剂，得到70mg 4-氯-6-{2,2,2-三氟-1-[2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-2-基胺（收率：92%）。
在微波小瓶（2ml）中装入上述粗品（38mg，0.1mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（31mg，0.15mmol）、1ml乙腈和0.7ml水。向该混合物加入0.3ml碳酸钠水溶液（1M），然后加入5mol%氯双(三苯基膦)钯(II)。将反应容器密封，并使用微波辐射加热至150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干，将残留物溶解在2.5ml甲醇中，然后用制备型HPLC纯化，得到5.6mg(S)-2-氨基-3-[4-(2-氨基-6-{2,2,2-三氟-1-[2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯基]-乙氧基}-嘧啶-4-基)-苯基]-丙酸。
5.83.(S)-2-氨基-3-(4-{6-[2,2,2-三氟-1-(2-呋喃-3-基-苯基)-乙氧基]- 嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸的合成
在微波小瓶（20ml）中装入2-甲酰基苯基硼酸（298mg，2.0mmol）、3-溴-呋喃（350mg，2.4mmol）和8ml乙腈。向该混合物加入4ml碳酸钠水溶液（1M），然后加入100mg二氯双(三苯基膦)钯(II)。将反应容器密封，并使用微波辐射在150℃加热5分钟。在冷却后，将反应混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层蒸发以提供粗品，将其通过ISCO纯化，得到110mg 2-呋喃-3-基-苯甲醛（30%收率）。
在0℃下，向2-呋喃-3-基-苯甲醛（110mg，0.64mmol）和三氟甲基三甲基硅烷（109mg，0.78mmol）在10ml THF中的溶液加入四丁基氟化铵（0.1ml在THF中的1M溶液）。将混合物升温至室温，并搅拌4小时。然后将混合物用3ml 1M HCl处理并搅拌过夜。将产物用乙酸乙酯萃取（3x20ml）。分离有机层并在硫酸钠上干燥。将有机溶剂蒸发，得到0.130g 2,2,2-三氟-1-(2-呋喃-3-基-苯基)-乙醇，其不需纯化直接用于下一步骤中（收率：90%）。
向2,2,2-三氟-1-(2-呋喃-3-基-苯基)-乙醇（54mg，0.2mmol）在10ml无水THF中的溶液加入60%的NaH（12mg，0.3mmol）。将混合物搅拌20分钟，然后加入4,6-二氯-嘧啶（30mg，0.2mmol）。然后将混合物在70℃加热，直到反应完成。在冷却后，加入5ml水淬灭反应，并用乙酸乙酯（20ml）萃取产物。将有机层在硫酸钠上干燥。通过旋转蒸发除去溶剂，得到67mg 4-氯-6-[2,2,2-三氟-1-(2-呋喃-3-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶（收率：94%）。
在微波小瓶（2ml）中装入上述粗品（38mg，0.1mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（31mg，0.15mmol）、1ml乙腈和0.7ml水。向该混合物加入0.3ml碳酸钠水溶液（1M），然后加入5mol%二氯双(三苯基膦)钯(II)。将反应容器密封，并使用微波辐射加热至150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干，将残留物溶解在2.5ml甲醇中，然后用制备型HPLC纯化，得到6mg(S)-2-氨基-3-(4-{6-[2,2,2-三氟-1-(2-呋喃-3-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ(ppm)：8.82(s,1H),8.13(d,J＝8.4Hz,2H),7.73(m,2H),7.46(m,6H),6.82(m,1H),6.54(s,1H),4.20(t,1H),3.22(m,2H)。
5.84.(S)-2-氨基-3-(4-{6-[2,2,2-三氟-1-(2-呋喃-2-基-苯基)-乙氧基]- 嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸的合成
在微波小瓶（20ml）中装入2-甲酰基苯基硼酸（298mg，2.0mmol）、2-溴-呋喃（350mg，2.4mmol）和8ml乙腈。向该混合物加入4ml碳酸钠水溶液（1M），然后加入100mg二氯双(三苯基膦)钯(II)。将反应容器密封，并使用微波辐射在150℃加热5分钟。在冷却后，将反应混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层蒸发以提供粗品，将其通过ISCO纯化，得到123mg 2-呋喃-2-基-苯甲醛（34%收率）。
在0℃下，向2-呋喃-2-基-苯甲醛（123mg，0.71mmol）和三氟甲基三甲基硅烷（120mg，0.86mmol）在10ml THF中的溶液加入四丁基氟化铵（0.1ml在THF中的1M溶液）。将混合物升温至室温，并搅拌4小时。然后将反应混合物用3ml1M HCl处理并搅拌过夜。将产物用乙酸乙酯萃取（3x20ml）。分离有机层并在硫酸钠上干燥。将有机溶剂蒸发，得到0.150g 2,2,2-三氟-1-(2-呋喃-3-基-苯基)-乙醇，其不需纯化直接用于下一步骤中（收率：90%）。
向2,2,2-三氟-1-(2-呋喃-2-基-苯基)-乙醇（55mg，0.2mmol）在10ml无水THF中的溶液加入60%的NaH（12mg，0.3mmol）。将混合物搅拌20分钟，然后加入4,6-二氯-嘧啶（29mg，0.2mmol）。然后将混合物在110℃加热，直到反应完成。在冷却后，加入5ml水，并用乙酸乙酯（20ml）萃取产物。将有机层在硫酸钠上干燥。通过旋转蒸发除去溶剂，得到60mg 4-氯-6-[2,2,2-三氟-1-(2-呋喃-2-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶（收率80%）。
在微波小瓶（2ml）中装入上述粗品（60mg，0.2mmol）、4-硼-L-苯丙氨酸（62mg，0.3mmol）、1ml乙腈和0.6ml水。向该混合物加入0.4ml碳酸钠水溶液（1M），然后加入5mol%二氯双(三苯基膦)钯(II)。将反应容器密封，并使用微波辐射加热至150℃5分钟。在冷却后，将反应混合物蒸发至干，将残留物溶解在2.5ml甲醇中，并用制备型HPLC纯化，得到6mg(S)-2-氨基-3-(4-{6-[2,2,2-三氟-1-(2-呋喃-2-基-苯基)-乙氧基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ(ppm):8.66(s,1H),8.11(d,J＝8.4Hz,2H),7.77(m,2H),7.54(m,6H),6.86(d,J＝3.3Hz,1H),6.66(m,1H),4.20(t,1H),3.22(m,2H)。
5.85.其他化合物
使用本技术领域中已知的和/或本文中描述的方法制备的其他化合物列于下表中：
Figure BDA00001690751801051
Figure BDA00001690751801061
Figure BDA00001690751801071
Figure BDA00001690751801091
Figure BDA00001690751801101
Figure BDA00001690751801111
Figure BDA00001690751801121
Figure BDA00001690751801141
Figure BDA00001690751801151
5.86.体外抑制测定法
完全使用分别具有下列登录号的基因：X52836、AY098914、X05290和U49897，产生了人类TPH1、TPH2、酪氨酸羟化酶（TH）和苯丙氨酸羟化酶（PH）。
将人类TPH1的全长编码序列克隆到细菌表达载体pET24（Novagen,Madison,WI,USA）中。将携带表达载体的BL21(DE3)细胞的单菌落接种到50ml L营养肉汤（LB）-卡那霉素培养基中，并在37℃下振摇生长过夜。然后将一半培养物（25ml）转移到含有1.5%酵母提取物、2%细菌蛋白胨、0.1mM色氨酸、0.1mM硫酸亚铁铵和50mM磷酸盐缓冲液（pH 7.0）的3L培养基中，并在37℃、使用40%的氧气供应、将pH维持在7.0并添加葡萄糖的条件下，生长至OD600=6。使用15%D-乳糖，在25℃下经10小时时间段诱导TPH1的表达。将细胞离心下来，并用磷酸盐缓冲盐水（PBS）清洗一次。
TPH1根据其与蝶呤的结合通过亲和层析进行纯化。将细胞沉淀团重悬浮在含50mM Tris-Cl、pH 7.6、0.5M NaCl、0.1%Tween-20、2mMEDTA、5mM DTT、蛋白酶抑制剂混合物（Roche Applied Science,Indianapolis,IN,USA）和1mM苯甲基磺酰氟（PMSF）的裂解缓冲液（100ml/20g）中，并将细胞用高压微射流纳米均质机裂解。将裂解液离心，并将上清液载样到结合了蝶呤的琼脂糖凝胶4B柱上，该柱用含50mM Tris、pH 8.0、2M NaCl、0.1%Tween-20、0.5mM EDTA和2mMDTT的缓冲液平衡。将柱用50ml该缓冲液清洗，使用含30mMNaHCO3、pH 10.5、0.5M NaCl、0.1%Tween-20、0.5mM EDTA、2mMDTT和10%甘油的缓冲液将TPH1洗脱。将洗脱的酶立即用200mMKH2PO4、pH 7.0、0.5M NaCl、20mM DTT、0.5mM EDTA和10%甘油中和，并储存在-80℃下。
以基本上相同的方式表达并纯化人类色氨酸羟化酶II型（TPH2）、酪氨酸羟化酶（TH）和苯丙氨酸羟化酶（PAH），区别在于细胞在生长期间，用于TH的增补酪氨酸，用于PAH的增补苯丙氨酸。
在含有50mM 4-吗啉丙磺酸（MOPS）、pH 7.0、60μM色氨酸、100mM硫酸铵、100μM硫酸亚铁铵、0.5mM三(2-羧基乙基)膦（TCEP）、0.3mM 6-甲基四氢蝶呤、0.05mg/ml过氧化氢酶和0.9mMDTT的反应混合物中，测量TPH1和TPH2的活性。通过加入TPH1至终浓度为7.5nM来起始反应。反应的起始速度通过追踪360nm处的荧光变化（激发波长=300nm）来测定。TPH1和TPH2的抑制通过在各种化合物浓度下测量其活性来测定，给定化合物的效价使用下列方程来计算：
v = b + v 0 - b 1 + ( [ C ] [ I c 50 ] ) D
其中v是在给定化合物浓度C下的起始速度，v0是C=0时的v，b是背景信号，D是Hill斜率，其约等于1，Ic50是抑制最大酶活力的一半的化合物浓度。
人类TH和PAH的活性通过分别使用L-[3,4-3H]-酪氨酸和L-[4-3H]-苯丙氨酸测量产生的3H2O的量来测定。首先将酶（100nM）与其0.1mM的底物温育约10分钟，然后加入到含有50mM MOPS、pH 7.2、100mM硫酸铵、0.05%Tween-20、1.5mM TCEP、100μM硫酸亚铁铵、0.1mM酪氨酸或苯丙氨酸、0.2mM 6-甲基四氢蝶呤、0.05mg/ml过氧化氢酶和2mM DTT的反应混合物中。使反应进行10-15分钟，并通过加入2MHCl终止反应。然后将混合物通过活性炭过滤，并通过闪烁计数测定滤液中的放射活性。使用该测定法测定化合物对TH和PAH的活性，并使用与TPH1和TPH2相同的方式进行计算。
5.87.基于细胞的抑制测定法
使用了两种类型的细胞系进行筛选：RBL2H3是大鼠肥大细胞瘤细胞系，其含有TPH1并自发制造5-羟色胺（5HT）；BON是人类类癌细胞系，其含有TPH1并制造5-羟基色氨酸（5HTP）。CBA以96孔板格式执行。在HPLC中使用的流动相含有97%的100mM乙酸钠、pH 3.5和3%乙腈。使用Waters C18柱（4.6x 50mm）以及Waters HPLC（2795型）。使用多通道荧光检测器（2475型），通过将激发波长设为280nm并将发射波长设为360nm来监测通流。
RBL CBA：将细胞在完全培养基（含5%牛血清）中生长3-4小时以使细胞附着于板孔（7K个细胞/孔）。然后以0.016μM至11.36μM的浓度范围向每个孔加入化合物。对照是不存在任何化合物的完全培养基中的细胞。在37℃温育3天后收获细胞。不存在化合物的细胞>95%合生。从板中除去培养基，并将细胞用相等体积的0.1N NaOH裂解。将大部分细胞裂解液通过与等体积1M TCA混合、然后通过玻璃纤维过滤来处理。将滤液载样到反相HPLC上，用于分析5HT的浓度。还取少部分细胞裂解液测量细胞的蛋白质浓度，其反映出化合物在所使用浓度下的细胞毒性。蛋白质浓度使用BCA方法来测量。
将未用化合物处理的细胞中5HT的平均水平用作按照上面提供的方程推导IC50中的最大值。5HT的最小值被设定为0或来自于用最高浓度的化合物处理的细胞，如果化合物在该浓度下无细胞毒性的话。
BON CBA：将细胞在含有5%牛血清的等体积DMEM和F12K中生长3-4小时（20K个细胞/孔），并以0.07μM至50μM的浓度范围添加化合物。将细胞在37℃温育过夜。然后取50μL培养上清液用于5HTP测量。将上清液与等体积1M TCA混合，然后通过玻璃纤维过滤。将滤液载样到反相HPLC上，用于5HTP浓度测量。通过将剩余细胞用Promega Celltiter-Glo发光细胞存活力测定试剂进行处理，来测量细胞存活力。然后以与RBL CBA中相同的方式来计算化合物效价。
在本文中引用的所有参考文献（例如专利和专利申请），在此以其全文引为参考。

Claims (15)

1.一种抑制过表达THP的肿瘤的生长的方法，其包含将肿瘤与下式的化合物或其可药用盐相接触：
其中：
A是任选被取代的环烷基、芳基或杂环；
X  是键、-O-、-S-、-C(O)-、-C(R4)=、=C(R4)-、-C(R3R4)-、-C(R4)=C(R4)-、-C≡C-、-N(R5)-、-N(R5)C(O)N(R5)-、-C(R3R4)N(R5)-、-N(R5)C(R3R4)-、-ONC(R3)-、-C(R3)NO-、-C(R3R4)O-、-OC(R3R4)-、-S(O2)-、-S(O2)N(R5)-、-N(R5)S(O2)-、-C(R3R4)S(O2)-或-S(O2)C(R3R4)-；
D是任选被取代的芳基或杂环；
R1是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基、烷基-杂环、芳基或杂环；
R2是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基、烷基-杂环、芳基或杂环；
R3是氢、烷氧基、氨基、氰基、卤素、羟基或任选被取代的烷基；
R4是氢、烷氧基、氨基、氰基、卤素、羟基或任选被取代的烷基或芳基；
每个R5独立地是氢或任选被取代的烷基或芳基；并且
n是0-3。
2.一种抑制产生血清素的肿瘤的生长的方法，其包含将肿瘤与下式的化合物或其可药用盐相接触：
Figure FDA00001690751700012
其中：
A是任选被取代的环烷基、芳基或杂环；
X是键、-O-、-S-、-C(O)-、-C(R4)=、=C(R4)-、-C(R3R4)-、-C(R4)=C(R4)-、-C≡C-、-N(R5)-、-N(R5)C(O)N(R5)-、-C(R3R4)N(R5)-、-N(R5)C(R3R4)-、-ONC(R3)-、-C(R3)NO-、-C(R3R4)O-、-OC(R3R4)-、-S(O2)-、-S(O2)N(R5)-、-N(R5)S(O2)-、-C(R3R4)S(O2)-或-S(O2)C(R3R4)-；
D是任选被取代的芳基或杂环；
R1是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基、烷基-杂环、芳基或杂环；
R2是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基、烷基-杂环、芳基或杂环；
R3是氢、烷氧基、氨基、氰基、卤素、羟基或任选被取代的烷基；
R4是氢、烷氧基、氨基、氰基、卤素、羟基或任选被取代的烷基或芳基；
每个R5独立地是氢或任选被取代的烷基或芳基；并且
n是0-3。
3.权利要求2的方法，其中所述肿瘤不是类癌瘤。
4.一种下式的化合物或其可药用盐：
Figure FDA00001690751700021
其用于治疗癌症，其中：
A是任选被取代的环烷基、芳基或杂环；
X是键、-O-、-S-、-C(O)-、-C(R4)=、=C(R4)-、-C(R3R4)-、-C(R4)=C(R4)-、-C≡C-、-N(R5)-、-N(R5)C(O)N(R5)-、-C(R3R4)N(R5)-、-N(R5)C(R3R4)-、-ONC(R3)-、-C(R3)NO-、-C(R3R4)O-、-OC(R3R4)-、-S(O2)-、-S(O2)N(R5)-、-N(R5)S(O2)-、-C(R3R4)S(O2)-或-S(O2)C(R3R4)-；
D是任选被取代的芳基或杂环；
R1是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基、烷基-杂环、芳基或杂环；
R2是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基、烷基-杂环、芳基或杂环；
R3是氢、烷氧基、氨基、氰基、卤素、羟基或任选被取代的烷基；
R4是氢、烷氧基、氨基、氰基、卤素、羟基或任选被取代的烷基或芳基；
每个R5独立地是氢或任选被取代的烷基或芳基；并且
n是0-3。
5.权利要求4的应用，其中所述癌症是乳腺癌。
6.权利要求4的应用，其中所述癌症是胆管癌。
7.权利要求4的应用，其中癌症是神经内分泌肿瘤。
8.权利要求7的应用，其中所述神经内分泌肿瘤不是类癌瘤。
9.权利要求4的应用，其中所述癌症是前列腺癌。
10.权利要求4的应用，其中所述化合物是下式的化合物：
Figure FDA00001690751700031
其中：A1和A2各自独立地是单环任选被取代的环烷基、芳基或杂环；并且E是任选被取代的芳基或杂环。
11.权利要求10的应用，其中所述化合物是下式的化合物：
Figure FDA00001690751700032
其中：
Z"1、Z"2、Z"3和Z"4各自独立地是N或CR10；
每个R10独立地是氨基、氰基、卤素、氢、OR11、SR11、NR12R13或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；
每个R11独立地是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；
每个R12独立地是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；并且
每个R13独立地是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环。
12.权利要求11的应用，其中所述化合物是下式的化合物：
Figure FDA00001690751700041
其中：
A2是任选被取代的杂环；
R10是卤素、氢、C(O)RA、ORA、NRBRC、S(O2)RA或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；
每个R14独立地是卤素、氢、C(O)RA、ORA、NRBRC、S(O2)RA或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；
RA是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；
RB是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；
RC是氢或任选被取代的烷基、烷基-芳基或烷基-杂环；并且
m是1-4。
13.权利要求12的应用，其中A2是任选被取代的吡唑。
14.权利要求12的应用，其中R1是氢。
15.权利要求12的应用，其中R10是氨基。
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