CN102630164B - 用于治疗胰腺炎和胰腺功能不全的胰酶组合物及其用途 - Google Patents

Abstract

包含肠溶包衣和未包衣的含胰酶的珠的本发明的组合物用于治疗或预防胰腺炎疼痛和任选与消化酶缺乏相关的疾患。

Description

用于治疗胰腺炎和胰腺功能不全的胰酶组合物及其用途

相关申请的交叉引用

本申请要求2009年9月17日提交的美国临时申请号61/243,467的优先权，其完整内容在此为所有目的通过引用整体并入。

发明背景

在胰腺功能不全的情况下，胰脂肪酶和其他胰酶产物(PEP)可以被施用以至少部分弥补由影响胰腺的各种疾病引起的酶缺乏，所述疾病例如胰腺炎、胰腺切除、囊性纤维化等。在胰腺功能不全的治疗中使用胰酶是罹患囊性纤维化的患者的治疗的必要部分。如果没有这些补充，患者会变得严重营养障碍。如果不治疗，这种营养障碍可以威胁生命，特别是在婴儿的情况下。

除了营养障碍(例如，脂肪吸收不良，等等)，大部分罹患慢性胰腺炎的患者还经历与病症相关的严重且经常的衰弱性疼痛。胰腺疼痛的原因是不确定的，但已经假设是由胰腺过度刺激引起的，胰腺过度刺激是由于CCK释放肽的反馈调节的丧失。正常来说，响应于餐食摄入的胰蛋白酶释放导致上胃肠道中存在的CCK释放肽的降解，这导致在已经为消化产生足够的消化酶时胰腺收缩和酶分泌的减少。对于罹患胰腺功能不全的患者来说，CCK释放肽未充分降解，因此允许继续(过度)刺激胰腺。尽管不希望受任何特定理论束缚，根据疼痛产生的这种假设，蛋白酶(例如胰酶制剂中的蛋白酶)的施用应该降解CCK释放肽，从而缓解胰腺过度刺激和导致的胰腺疼痛。

胰酶在接近中性和弱碱性条件下显示最佳活性。在胃条件下，通常在治疗性酶组合物中存在的脂肪酶预期随着逐渐降低的pH和/或逐渐增加的暴露于低pH条件的持续时间而逐渐且不可逆地变得失活，导致生 物活性丧失。因此，外源施用的酶一般针对胃失活而受到保护，例如用肠溶包衣保护，以在其穿过胃并进入十二指肠期间保持完整并免受胃酸消化。然而，因为CCK释放肽在胃肠道中高度分泌，常规的肠溶包衣胰酶制剂可能不会足够快速地释放蛋白酶或者不会在胃肠道的适当部分释放蛋白酶以充分降解CCK释放肽并从而减少或消除胰腺疼痛。

未包衣的酶制剂不会产生在胃肠道中缓慢或不完全释放的问题，但预期在胃的低pH环境中变得大量失活，因此不提供足够水平的活性消化酶来治疗由胰腺功能不全引起的营养障碍。用未包衣的酶制剂治疗胰腺疼痛的一种方法是共施用未包衣的酶和质子泵抑制剂，质子泵抑制剂试图减少胃中的酶降解，使得一些活性酶，特别是脂肪酶，可以不被消化而进入十二指肠(Lieb等.，Aliment.Pharmacol.Ther.29，706-719(2009))。可选地，已经用相对高剂量的包衣或未包衣的胰酶治疗胰腺疼痛以保证足够的活性酶被递送至十二指肠(Winstead等.，Pancreatology 9，344-350(2009))。例如，建议剂量为64,000单位脂肪酶并具有240,000单位标称蛋白酶活性的未包衣的酶制剂(每餐)用于减轻胰腺疼痛(Lieb等.)。

基于其中未包衣的酶似乎比其他研究中使用的包衣的酶制剂表现更好的许多小临床研究(Lieb等)，传统意见是，包衣的酶制剂不被推荐用于治疗胰腺疼痛，而未包衣的酶制剂可能是适合的。然而迄今为止，还没有足以说明包衣或未包衣的胰酶在治疗与胰腺炎相关的疼痛中的效力的对照临床试验。

然而，为了治疗胰腺疼痛(例如，用未包衣的酶制剂)和营养障碍(例如，用包衣的酶制剂)，常规治疗方法建议需要非常高剂量的酶；即，每餐约4个肠溶包衣的胰酶制剂丸和4个未包衣的胰酶制剂丸。这是基于CREON 24的推荐中间剂量(mid-dosing)的中点以及关于给予未包衣的酶的专家推荐(Winstead等.)，因为目前没有被批准用于治疗疼痛的未包衣的产品。这对患者产生非常大的负担并且意味着给予患者的酶的总剂量可能产生安全性顾虑(Smyth等.Fibrosing colonopathy in cystic fibrosis：results of a case-control study(囊性纤维化的纤维化结肠病：病例对照研究 的结果).Lancet.1995；346：1247-1251；FitzSimmons等.High-dose pancreatic-enzyme supplements and fibrosing colonopathy in children with cystic fibrosis(具有囊性纤维化的儿童中高剂量胰酶补充物和纤维化结肠病).New England Journal of Medicine.1997；336：1283-1289)。

本发明人出乎意料地发现，包含相对较低量的肠溶包衣消化酶与未包衣消化酶的组合的单一剂型提供了胰腺疼痛的有效治疗和营养障碍例如脂肪吸收不良的有效控制。此外，本发明人出乎意料地发现，非常低剂量的肠溶包衣的酶在例如罹患慢性胰腺炎的患者中有效治疗胰腺功能不全导致的吸收不良。

发明概述

在一个实施方案中，本发明涉及包括肠溶包衣的含消化酶的珠和未包衣的含消化酶的珠的多微粒消化酶组合物，其中所述肠溶包衣的含消化酶的珠包括核心和置于所述核心上的肠溶包衣，其中所述核心包含治疗有效量的消化酶，并且所述肠溶包衣包含肠溶聚合物；并且所述未包衣的含消化酶的珠包含治疗有效量的消化酶，并且实质上不含肠溶聚合物包衣。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗胰腺炎疼痛的方法，所述方法包括给有相应需要的患者施用本发明的组合物。

而在另一实施方案中，本发明涉及治疗胰腺外分泌功能不全的方法，所述方法包括给有相应需要的患者施用治疗有效剂量的肠溶包衣的消化酶，其中所述剂量范围在约100至约300USP脂肪酶单位/kg/餐。

发明详述

本发明一方面涉及包括肠溶包衣的含消化酶的珠和未包衣的含消化酶的珠的组合的稳定的消化酶组合物。术语“稳定的消化酶”表示在长期贮存之后维持实质的酶活性的消化酶。术语“消化酶”指消化道中分 解食物成分而使得它们能够被生物体摄取或吸收的酶。

适用于本发明的消化酶的非限制性类别包括脂肪酶、淀粉酶和蛋白酶。消化酶的非限制性实例包括胰脂肪酶(还称为胰酶制剂(pancreatin))、脂肪酶、共脂肪酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胰凝乳蛋白酶B、胰肽酶(pancreatopeptidase)、羧肽酶A、羧肽酶B、甘油酯水解酶、磷脂酶、甾醇酯水解酶、弹性蛋白酶、激肽原酶、核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶、α-淀粉酶、木瓜蛋白酶、木瓜凝乳蛋白酶、葡聚糖酶(glutenase)、菠萝蛋白酶、无花果蛋白酶、β-淀粉酶、纤维素酶、β-半乳糖苷酶、乳糖酶、蔗糖酶、异麦芽糖酶及其混合物。

在本发明的一个实施方案中，稳定的消化酶是胰酶。本文使用的术语“胰酶”指胰腺分泌中存在的酶类型的任何一种，例如淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶或其混合物，或指任何具有酶活性的胰腺起源的提取物，例如胰酶制剂。胰酶可以通过从胰腺提取来获得，人工生产，或获自非胰腺的来源，例如获自微生物、植物或其他动物组织。

在本发明的另一实施方案中，稳定的消化酶是胰脂肪酶。术语“胰脂肪酶”或“胰酶制剂”指几种酶类型的混合物，包括淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶。胰脂肪酶可经商业途径获自例如Nordmark Arzneimittel GmbH或Scientific Protein Laboratories LLC。

在本发明组合物的一个实施方案中，稳定的消化酶包括脂肪酶。术语“脂肪酶”指催化脂质水解成甘油和简单脂肪酸的酶。

适合本发明的脂肪酶的实例包括但不限于动物脂肪酶(例如，猪脂肪酶)、细菌脂肪酶(例如，假单胞菌脂肪酶和/或伯克霍尔德菌脂肪酶)、真菌脂肪酶、植物脂肪酶、重组脂肪酶(例如，通过重组DNA技术由适合宿主细胞产生的重组脂肪酶，所述宿主细胞选自培养的细菌、酵母、真菌、植物、昆虫或哺乳动物宿主细胞的任何一种，或者包括与天然存在的序列同源或基本相同的氨基酸序列的重组脂肪酶，由与天然存在的脂肪酶编码核酸同源或基本相同的核酸编码的脂肪酶，等等)、化学修饰的脂肪酶或其混合物。

在本发明组合物的另一实施方案中，稳定的消化酶包括淀粉酶。术语“淀粉酶”指分解淀粉的糖苷水解酶，例如α-淀粉酶、β-淀粉酶、γ-淀粉酶、酸性α-葡糖苷酶、唾液淀粉酶例如唾液素等。

适用于本发明组合物的淀粉酶包括但不限于动物淀粉酶、细菌淀粉酶、真菌淀粉酶(例如，Aspergillus^TM淀粉酶，并且优选是米曲霉淀粉酶)、植物淀粉酶、重组淀粉酶(例如，通过重组DNA技术由适合宿主细胞产生的重组淀粉酶，所述宿主细胞选自培养的细菌、酵母、真菌、植物、昆虫或哺乳动物宿主细胞的任何一种，或者包括与天然存在的序列同源或基本相同的氨基酸序列的重组淀粉酶，由与天然存在的淀粉酶编码核酸同源或基本相同的核酸编码的淀粉酶，等等)、化学修饰的淀粉酶或其混合物。

在本发明组合物的另一实施方案中，稳定的消化酶包括蛋白酶。术语“蛋白酶”一般指断裂蛋白的氨基酸之间的肽键的酶(例如，蛋白酶、肽酶或蛋白水解酶)。蛋白酶一般通过其催化类型来鉴定，例如天冬氨酸肽酶、半胱氨酸(硫醇)肽酶、金属肽酶、丝氨酸肽酶、苏氨酸肽酶、碱性或半碱性蛋白酶、中性和催化机制未知的肽酶。

适用于本发明组合物或口服剂型的蛋白酶的非限制性实例包括丝氨酸蛋白酶、苏氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶(例如，疟原虫天冬氨酸蛋白酶(plasmepsin))、金属蛋白酶、谷氨酸蛋白酶等等，此外，适用于本发明组合物或口服剂型的蛋白酶包括但不限于动物蛋白酶、细菌蛋白酶、真菌蛋白酶(例如，蜂蜜曲霉蛋白酶)、植物蛋白酶、重组蛋白酶(例如，通过重组DNA技术由适合宿主细胞产生的重组蛋白酶，所述宿主细胞选自培养的细菌、酵母、真菌、植物、昆虫或哺乳动物宿主细胞的任何一种，或者包括与天然存在的序列同源或基本相同的氨基酸序列的重组蛋白酶，由与天然存在的蛋白酶编码核酸同源或基本相同的核酸编码的蛋白酶，等等)、化学修饰的蛋白酶或其混合物。

本发明组合物或口服剂型可以包括一种或多种脂肪酶(即，一种脂肪酶，或两种或更多种脂肪酶)、一种或多种淀粉酶(即，一种淀粉酶，或两种或更多种淀粉酶)、一种或多种蛋白酶(即，一种蛋白酶，或两种或 更多种蛋白酶)、一种或多种脂肪酶与一种或多种淀粉酶的混合物、一种或多种脂肪酶与一种或多种蛋白酶的混合物、一种或多种淀粉酶与一种或多种蛋白酶的混合物、或一种或多种脂肪酶与一种或多种淀粉酶和一种或多种蛋白酶的混合物。

在一个实施方案中，消化酶是猪的胰腺提取物，包括各种脂肪酶(例如，脂肪酶、共脂肪酶、磷脂酶A2、胆固醇酯酶)、蛋白酶(例如，胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、羧肽酶A和B、弹性蛋白酶、激肽原酶、胰蛋白酶抑制剂)、淀粉酶和任选核酸酶(核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶)。在另一个实施方案中，消化酶与人的胰液基本类似。而在另一实施方案中，消化酶是胰脂肪酶USP。而在另一实施方案中，消化酶是具有69-120UUSP/mg的脂肪酶活性、大于或等于216U USP/mg的淀粉酶活性、大于或等于264U USP/mg的蛋白酶活性以及大于或等于264U USP/mg的总蛋白酶活性的胰脂肪酶USP。

在一个实施方案中，本发明组合物具有下表1所述的总脂肪酶、蛋白酶和淀粉酶活性(其中“总”活性指肠溶包衣衣的含酶珠和未包衣的含酶珠的组合活性)：

表1

在特定实施方案中，本发明组合物总共包括约25,000USP单位脂肪酶和约85,000USP单位蛋白酶。在另一实施方案中，本发明组合物总共 包括约20,000USP单位脂肪酶和68,000USP单位蛋白酶。在另一实施方案中，本发明组合物总共包括约15,000USP单位脂肪酶和51,000USP单位蛋白酶。在另一实施方案中，本发明组合物总共包括约10,000USP单位脂肪酶和34,000USP单位蛋白酶。在另一实施方案中，本发明组合物总共包括约5,000USP单位脂肪酶和17,000USP单位蛋白酶。肠溶包衣的珠中含有的脂肪酶或蛋白酶与未包衣的珠中含有的脂肪酶或蛋白酶的比例范围在约5/95至约50/50(包括约5/90、约10/90、约15/85、约20/80、约25/75、约30/70、约35/65、约40/60、约45/55或约50/50)，(基于酶活性)。例如，根据本发明的组合物中脂肪酶和蛋白酶的大致活性示于下表2中：

表2

包含适当比例的来自肠溶包衣的珠和未包衣的珠的脂肪酶和/或蛋白酶的本发明组合物可由包括肠溶包衣的含消化酶的珠和未包衣的含消化酶的珠的混合物的单个剂型例如胶囊提供，或者可以由分别包括肠溶包衣的含消化酶的珠和未包衣的含消化酶的珠的分开的剂型提供。可选地，包括不同比例的肠溶包衣的含消化酶的珠和未包衣的含消化酶的珠的个体剂型可以被组合以提供期望比例的肠溶包衣的含消化酶的珠和未包衣的含消化酶的珠。

在其他实施方案中，本发明组合物或口服剂型中脂肪酶∶蛋白酶∶淀粉酶的比例可以在约1∶10∶10至约10∶1∶1或约1.0∶1.0∶0.15(基于酶活性)的范围内。本发明组合物或口服剂型中淀粉酶/脂肪酶的比例范围可以是约1.8-8.2，例如约1.9-8.2和约2.0-8.2。本发明组合物或口服剂型中蛋白酶/脂肪酶的比例范围可以是约1.8-6.2，例如约1.9-6.1和约2.0-6.1。

本发明组合物或口服剂型中消化酶的总量(按重量计)可以是约20-100％、20-90％、20-80％、20-70％、20-60％、20-50％、20-40％、20-30％或约20％、约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约90％或约100％。在一个实施方案中，消化酶的总量是60-90％。在另一个实施方案中，消化酶(例如，胰脂肪酶)的总量是约68-72％。

在一个实施方案中，包含至少一种消化酶的本发明组合物或口服剂型具有约3％或更少、约2.5％或更少、约2％或更少、约1.5％或更少、或约1％或更少的含湿量，包括其间的所有范围和子范围(即，约2.5％至3％、2％至3％、1.5％至3％、1％至3％、2％至2.5％、1.5％至2.5％、1％至2.5％、1.5％至2％、1％至2％、1％至1.5％等的任何一个)。已经发现维持在低含湿量的本发明组合物或口服剂型明显比维持在较高含湿量(例如，高于约3％或更高)的常规组合物更稳定。

术语“含湿量”，还称为“含水量”，表示组合物含有的水的量。对 于不随着含湿量改变而改变体积的组合物而言，含湿量可被以体积计量地(即，按体积计)表示为水分质量与材料干体积的比例。对于随着改变的含湿量而改变体积的组合物而言，含湿量可被以重量计量地(即，按重量计)表示为每单位干质量的样本干燥时除去的水的质量。含湿量的测定可以通过本领域已知的任何常规方法实现。例如，含湿量可以通过化学滴定例如Karl Fischer滴定来测定，其中样品在电化学滴定池中溶解。来自样品的水在电化学反应中消耗，电化学反应的终点被电压计量地测量，从而提供样品中水的量的直接测量。可选地，可以使用相对简单的热解重量方法，例如“干燥失重”(LoD)，其中在受控的干燥之前和之后测量样品的质量。干燥后的质量损失归因于水分的损失。商业途径可获得的水分分析器(例如，可获自Mettler Toledo，Sartorius AG，等)也可用于测定含湿量。本发明组合物或口服剂型的含湿量可以通过本领域已知的任何适合的方法测量，例如LoD。

在另一个实施方案中，包含至少一种消化酶的本发明组合物或口服剂型具有约0.6或更少、约0.5或更少、约0.4或更少、约0.3或更少、约0.2或更少、或约0.1或更少的水活度，包括其间的所有范围和子范围(即，约0.5至0.6、0.4至0.6、0.3至0.6、0.2至0.6、0.1至0.6、0.4至0.5、0.3至0.5、0.2至0.5、0.1至0.5、0.3至0.4、0.2至0.4、0.1至0.4、0.2至0.3、0.1至0.3、0.1至0.2等的任何一个)。已经发现维持在低水活度的本发明组合物或口服剂型明显比维持在较高水活度水平的常规消化酶组合物更稳定。

水活度，还称为“aw”，是物质中水的相对可用性。如本文使用的，术语“水活度”被定义为样品中水的蒸汽压除以相同温度下纯水的蒸汽压。纯蒸馏水具有正好1的水活度。水活度是温度依赖性的，即，水活度随温度变化而变化。在本发明中，水活度在约0℃至约50℃、优选约10℃至约40℃范围的温度下测量。

产物的水活度通过测量平衡时样品周围空气的相对湿度来确定。因此，样品中水活度的测量通常在封闭(通常是绝缘的)空间中进行，在所述空间中可以产生这种平衡。平衡时，样品的水活度和空气的相对湿度 是相等的，因此室中空气的平衡相对湿度(ERH)的测量提供了样品的水活度的测量。至少两种不同类型的水活度仪器是可经商业途径获得的。一个类型的水活度仪器利用冷镜露点技术(例如，可获自Decagon Devices，Inc.的AquaLab^TM水活度计量器)，而其他水活度仪器用改变电阻或电容的传感器测量相对湿度(例如，可获自Rotronic的水活度计量器)。本发明组合物或口服剂型的水活度可以通过本领域已知的任何适合的方法测量。

在另一个实施方案中，包含至少一种稳定的消化酶的本发明组合物或口服剂型在6个月加速稳定性测试之后表现出不超过约25％、不超过约20％、不超过约15％、不超过约12％、不超过约10％、不超过约8％或不超过约5％的酶活性损失。

术语“加速稳定性测试”或“加速贮存测试”指用于模拟相对长期贮存条件对酶活性的影响的测试方法，该方法可以在相对短的时间内进行。加速稳定性测试方法在本领域已知是实时稳定性测试的可靠替代方法，并且可以准确预测生物制品的贮存期限。此类“加速稳定性测试”条件是本领域已知的并且符合International Conference for Harmonization of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use：Stability Testing of New Drug Substances and Products Q1A(人用药物注册技术要求国际协调会议：新药物质和产品的稳定性测试Q1A)，在此通过引用整体并入。

加速稳定性测试的一种方法包括将消化酶组合物的样品在密封的Nialene(尼龙、铝、聚乙烯层压片；GOGLIO SpA，Milan)袋中在40℃/75％相对湿度下贮存6个月。

在贮存后(或在贮存期间定期地)，可以使用用于测定消化酶活性的常规方法(例如，美国药典，胰脂肪酶：脂肪酶活性测定法；在此通过引用整体并入)测试样品的酶活性。

本发明组合物或口服剂型还可以包含一种或多种增强或提高本发明组合物或口服剂型稳定性的稳定剂。适合的稳定剂的非限制性实例包括 脯氨酸、海藻糖、葡聚糖、麦芽糖、蔗糖、甘露糖醇、多元醇、硅胶、氨基胍、吡哆胺、无水金属盐，例如碳酸氢钠、氧化镁、氧化钙、氧化铝及其混合物。一种或多种稳定剂可以具有约3％或更少的含湿量和/或0.6或更少的水活度。

可用于本发明组合物或口服剂型的适合形式的海藻糖的非限制性实例包括二水合海藻糖(TD)、无定形海藻糖(AT)、无水海藻糖(例如，无水无定形海藻糖(AAT)、无水结晶海藻糖(ACT))。粉末化无水海藻糖可以含有任何AAT和/或ACT。如本文使用的，术语“海藻糖”指海藻糖的任何物理形式，包括无水的、部分水合的、完全水合的及其混合物和溶液。术语“无水海藻糖”指含有小于2％水的海藻糖的任何物理形式。海藻糖的无水形式可以含有0-2％的水。无定形海藻糖含有约2-9％的水，并且二水合海藻糖含有约9-10％的水。无水海藻糖可以如PCT/GB97/00367所述来制备，PCT/GB97/00367在此通过引用整体并入。在一个实施方案中，本发明组合物或口服剂型包含一种或多种稳定的消化酶和无水海藻糖。

本发明组合物中无水海藻糖(AAT或ACT)的量可以在约5-50％、5-40％、5-30％、5-20％、5-15％、5-10％、7-15％或约5％、约7％、约10％、约15％或约20％的范围内。

无水海藻糖可以作为粉末加入本发明组合物或口服剂型。无水海藻糖粉末的粒度可以在约2-2000μm范围内。

包含一种或多种稳定的消化酶和无水海藻糖的本发明组合物或口服剂型赋予提高的酶稳定性。认为无水海藻糖通过吸收或隔绝来自环境湿度的水分或来自生产或制剂本身中残留的水分而稳定本发明组合物或口服剂型。

根据组合物的预期用途和要求，稳定的消化酶与稳定剂的重量比例范围在约99∶1至80∶20。稳定剂可以通过湿混合或干混合至少一种稳定的消化酶与至少一种稳定剂而加入本发明组合物或口服剂型。在一个实施方案中，一种或多种稳定的消化酶与一种或多种稳定剂干混合。在另 一个实施方案中，一种或多种稳定的消化酶与一种或多种稳定剂湿混合。

除了稳定的消化酶和/或稳定剂，本发明组合物或口服剂型还可以包含一种或多种药学可接受的赋形剂。术语“赋形剂”包括被添加至组合物的活性组分(例如，稳定的消化酶)以改善加工、稳定性、可口性等的其他药学可接受的成分。适合的赋形剂的非限制性实例包括药学可接受的粘合剂、稳定剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、稀释剂及其混合物等。药物制剂领域技术人员将理解，特定的赋形剂可以在组合物中实现多功能。所以，例如，粘合剂还可以用作稀释剂等。赋形剂可以具有约3％或更少的含湿量和/或约0.6或更少的水活度。

适合的粘合剂的非限制性实例包括淀粉、糖(例如，乳糖)、糖醇(例如，木糖醇、山梨糖醇、麦芽糖醇)、纤维素(例如，微晶纤维素)、改性纤维素(例如，羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钠)、藻酸、聚乙烯吡咯烷酮(聚维酮)及其混合物。适合的崩解剂的非限制性实例包括磷酸氢钙、二水合磷酸氢钙、磷酸钙、藻酸、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠、交联羧甲基纤维素钠(cross-linked carboxymethylcellulose sodium)、可膨胀的离子交换树脂、藻酸盐、甲醛-酪蛋白、纤维素、交联羧甲基纤维素钠(croscarmellose sodium)、聚乙烯聚吡咯烷酮(例如，交联聚乙烯吡咯烷酮)、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、淀粉乙醇酸钠、淀粉(玉米淀粉、大米淀粉)及其混合物。适合的润滑剂的非限制性实例包括硬脂酸钙、硬脂酸镁、硬脂酰富马酸钠、硬脂酸、硬脂酸锌、滑石、蜡、 及其混合物。适合的助流剂的非限制性实例包括胶体二氧化硅、滑石及其混合物。适合的稀释剂的非限制性实例包括甘露糖醇、蔗糖、无水磷酸氢钙、无水二水合磷酸氢钙、磷酸钙、纤维素、乳糖、碳酸镁、微晶纤维素及其混合物。适合的稳定剂的非限制性实例包括海藻糖、脯氨酸、葡聚糖、麦芽糖、蔗糖、甘露糖醇、多元醇、硅胶、氨基胍、吡哆胺及其混合物。

在一个实施方案中，崩解剂是聚乙烯聚吡咯烷酮(例如，POLYPLASDONE XL、POLYPLASDONE XL-10)。在另一个实施方案中，崩解剂是交联羧甲基纤维素钠(例如，AC-DI-SOL)。在另一个实施方案 中，崩解剂是淀粉乙醇酸钠(例如，EXPLOTAB、EXPLOTAB CV)。在另一个实施方案中，本发明组合物或口服剂型可以包含崩解剂的组合，例如微晶纤维素和淀粉乙醇酸钠，或交联羧甲基纤维素钠和聚乙烯聚吡咯烷酮。

崩解剂的量可以在约0.1-30％、1％-30％、1％-25％、1％-20％、1％-15％、1％-10％、1％-5％、5％-10％、5％-15％、5％-20％、5％-25％或5％-30％的大约任何一个的范围内。在一个实施方案中，崩解剂的量是约2％-4％或约2％-3％或约2.5％。

适合的稀释剂的非限制性实例包括微晶纤维素、淀粉、磷酸钙、乳糖、蔗糖、甘露糖醇、山梨糖醇及其组合。在一个实施方案中，稀释剂是微晶纤维素(例如，Avicel)。在另一个实施方案中，稀释剂是淀粉。在另一个实施方案中，稀释剂是乳糖(例如，Pharmatol)。在另一个实施方案中，本发明组合物或口服剂型可以包含稀释剂的组合，例如微晶纤维素、淀粉和乳糖。

稀释剂的量可以在约0.1-99％、1％-30％、1％-25％、1％-20％、1％-15％、1％-10％、1％-5％、5％-10％、5％-15％、5％-20％、5％-25％或5％-30％的大约任何一个的范围内。在一个实施方案中，稀释剂的量是约2％-5％、3％-5％或约4％。

本发明组合物或口服剂型的一种或多种赋形剂可以用作干燥剂以进一步稳定组合物。用作干燥剂的适合赋形剂包括紧密结合水或降低组合物的水活度的任何药学可接受的赋形剂。例如，本发明组合物可以包括约1-4％硅胶或约2.5％硅胶。

如本文所描述的，本发明的多微粒组合物包含第一群体的肠溶包衣的含消化酶的珠和第二群体的未包衣的含消化酶的珠。肠溶包衣的含消化酶的珠包括核心和置于所述核心上的肠溶包衣。所述核心包含(1)至少一种脂肪酶或(2)消化酶例如脂肪酶、蛋白酶和淀粉酶的混合物，以及任选其他的如本文所述的赋形剂。所述肠溶包衣包含至少一种肠溶聚合物，和任选如本文所述的增塑剂和无机材料。

未包衣的含消化酶的珠包括(1)至少一种蛋白酶，(2)与肠溶包衣的含消化酶的珠在包衣之前的核心相同的消化酶混合物，或(3)与肠溶包衣的含消化酶的珠在包衣之前的核心不同的消化酶混合物，和任选其他的如本文所述的赋形剂。在一个实施方案中，未包衣的含消化酶的珠和肠溶包衣的含消化酶的珠的核心是基本上相同的。在一些实施方案中，未包衣的含消化酶的珠任选地用密封剂层包衣，所述密封剂层例如包含羟丙基甲基纤维素。

肠溶包衣的和未包衣的含消化酶的珠可以如本文所述制备，或者如美国专利公开号2005/0250817、2006/0128587、2006/0121017、2007/0148151、2007/0148152、2007/0148153、2008/0299185、2008/0274174或2008/0279953、或美国专利号4,079,125、5,260,074、5,302,400、5,324,514、5,378,462、5,460,812、5,578,304或5,750,104中任何一个所述制备。

本发明组合物可以任何适合的口服剂型制备。适合的剂型的非限制性实例包括片剂、胶囊或药袋。当本发明组合物被配制为片剂时，肠溶包衣和未包衣的含消化酶的珠以及任选的赋形剂可以使用本领域已知的方法“成片”(即，制成片剂)。在特定实施方案中，本发明组合物使用本领域已知的方法被填入胶囊。

如本文描述的，本发明的多微粒组合物包括肠溶包衣和未包衣的含消化酶的珠。术语“珠”指包含消化酶的任何适合的微粒形式，例如粉末、颗粒、小片(如本文所描述)或迷你片(如本文所描述)。术语“颗粒”指通过本领域已知的常规制粒方法形成的由初级粒子组成的聚集粒子，并且可以包括任选的粘合剂。

肠溶包衣的含消化酶的珠用包含至少一种肠溶聚合物的肠溶包衣来包衣。术语“肠溶聚合物”表示保护消化酶免受胃内容物作用的聚合物，例如在酸性pH下稳定但可以在较高pH下快速分解的聚合物，或者其水解或侵蚀速率足够缓慢而保证胃内容物与消化酶在胃中的接触与在胃肠道其余地方的接触相比相对较小的聚合物。肠溶聚合物的非限制性实例包括本领域已知的那些，例如改性或未改性的天然聚合物，例如乙酸邻 苯二甲酸纤维素、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、乙酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯和虫胶；或合成聚合物，例如丙烯酸类聚合物或共聚物、甲基丙烯酸聚合物和共聚物、甲基丙烯酸甲酯共聚物和甲基丙烯酸/甲基丙烯酸甲酯共聚物(例如， L或 S)。

肠溶聚合物包衣可以是合成的聚合物，任选包括无机材料，例如碱化剂。得到的包衣粒子提供了包括核心和包裹所述核心的肠溶包衣的肠溶包衣的珠，所述核心包含稳定的消化酶。包衣的稳定的消化酶粒子然后可以被配制成片剂或胶囊。

肠溶聚合物和至少一种无机材料对本发明肠溶包衣的珠赋予肠溶性质。即，肠溶包衣将用作屏障，保护包裹的消化酶免受胃的酸性环境的作用，并且基本上防止消化酶在达到小肠之前的释放(即，消化酶在胃中的释放小于组合物的肠溶包衣的珠部分中消化酶总量的约10-20％)。

无机材料可以包括例如二氧化硅、钠盐、钙盐、镁盐、铝盐、氢氧化铝、氢氧化钙、氢氧化镁、滑石及其组合。在一个实施方案中，无机材料是滑石。

肠溶聚合物与至少一种无机材料的比例范围可以在约10∶1至约1∶60(按重量计)。在另一个实施方案中，肠溶聚合物与至少一种无机材料的比例范围在约8∶1至约1∶50(按重量计)。在另一个实施方案中，肠溶聚合物与至少一种无机材料的比例范围在约6∶1至约1∶40(按重量计)。在另一个实施方案中，肠溶聚合物与至少一种无机材料的比例范围在约5∶1至约1∶30(按重量计)。在另一个实施方案中，肠溶聚合物与至少一种无机材料的比例范围在约4∶1至约1∶25(按重量计)。在另一个实施方案中，肠溶聚合物与至少一种无机材料的比例范围在约4∶1至约1∶9(按重量计)。在另一个实施方案中，肠溶聚合物与至少一种无机材料的比例范围在约10∶4至约10∶7(按重量计)。

在一个实施方案中，本发明组合物或口服剂型包括用肠溶包衣包覆的稳定的消化酶粒子，所述肠溶包衣包含肠溶聚合物和无机材料例如滑石。在特定实施方案中，肠溶包衣的无机材料占粒子总重量的约1-10％ 重量(按重量计)。在另一实施方案中，无机材料占粒子重量的约3％、约5％、约7％或约10％。在其他实施方案中，无机材料占包衣干重的约20-60％。在其他实施方案中，碱化剂是包衣干重的约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％或约55％(包括其间所有范围、子范围和值)。在特定实施方案中，无机材料是滑石。在另一特定实施方案中，粒子的干包衣包含约31％至约35％滑石。

在一些实施方案中，包衣基本不含增塑剂。在本发明的其他实施方案中，包衣还包含增塑剂。适合的增塑剂的实例包括但不限于三醋精、柠檬酸三丁酯、柠檬酸三乙酯、乙酰柠檬酸三正丁酯、邻苯二甲酸二乙酯、癸二酸二丁酯、聚乙二醇、聚丙二醇、蓖麻油、乙酰化单甘油酯、乙酰化二甘油酯及其混合物。

本发明的剂型可以是含有本发明组合物(例如，稳定的消化酶组合物的粒子，其一部分用肠溶聚合物和无机材料包衣)的胶囊。胶囊本身可以由本领域已知的任何常规生物可降解的材料构成，例如明胶、多糖例如支链淀粉、或改性的纤维素材料例如羟丙基甲基纤维素。为了提高稳定的消化酶的稳定性，胶囊可以在填充之前被干燥，或者可以选择由低含湿量材料构成的胶囊。在本发明剂型的一个实施方案中，胶囊由羟丙基甲基纤维素构成。在本发明剂型的另一实施方案中，胶囊由具有约6％或更少例如4％或更少、2％或更少、或2-6％、或4-6％的大约任何一个的含水量的羟丙基甲基纤维素构成。在另一个实施方案中，胶囊由具有小于约2％的含水量的羟丙基甲基纤维素构成。

本发明剂型可以包含单一消化酶或消化酶的混合物。本发明的多微粒组合物的未包衣的珠和肠溶包衣的珠的核心部分可以各自具有标称相同的组成，或者可以具有不同的组成。例如，未包衣的珠可以包含蛋白酶并且包衣的珠可以包含脂肪酶，或者未包衣的珠和包衣的珠可以各自包含消化酶的混合物(即，脂肪酶和蛋白酶)，或者未包衣的珠可以包含富含蛋白酶的消化酶的混合物并且包衣的珠可以包含富含脂肪酶的消化酶的混合物。例如，剂型可以是用肠溶包衣的珠和未包衣的珠填充的胶囊，每个所述肠溶包衣的珠具有包含胰脂肪酶的核心，并且所述未包衣 的珠包含胰脂肪酶。可选地，剂型可以是用肠溶包衣的珠和未包衣的珠填充的胶囊，其中一些肠溶包衣的珠具有包含胰脂肪酶的核心，而其他肠溶包衣的珠具有包含不同脂肪酶或蛋白酶或淀粉酶的核心。类似地，一些未包衣的珠可以包含胰脂肪酶，而其他未包衣的珠包含不同的脂肪酶、蛋白酶或淀粉酶。可选地，肠溶包衣的珠可以各自具有包含胰脂肪酶的核心，而一些或所有未包衣的珠可以包含不同的酶组成，例如蛋白酶。不同组成的包衣和未包衣的珠的任何适当组合可用于提供所需的治疗效果。

此外，个体肠溶包衣的珠可以各自具有相同的肠溶包衣组成，或者可以包括肠溶包衣的珠的混合物，其中一些具有不同的肠溶包衣组成。肠溶包衣组成的任何适合的组合可用于提供所需类型的治疗效果。

肠溶包衣的珠的核心和未包衣的珠可以具有任何适当的粒度或形状。例如，珠可以是具有约50-5000微米的粒度范围的包衣粉末形式，或者可以是具有约2-5mm范围的标称粒径的“迷你片(minitabs)”形式。对于其他应用，包衣粒子的核心可以是具有小于约2mm、例如约1-2mm的标称粒径的“小片(microtabs)”。

含消化酶的珠(例如，未包衣的含消化酶的珠或肠溶包衣的含消化酶的珠的核心)可以包含消化酶、至少一种崩解剂、至少一种聚合物粘合剂或稀释剂和任选至少一种增塑剂、任选至少一种助流剂和任选至少一种润滑剂。在一个实施方案中，肠溶包衣或未包衣的珠可以包含约60-90％消化酶、约1-4％的至少一种崩解剂、约2-6％的至少一种聚合物粘合剂或稀释剂和任选约0.5-1.0％的至少一种增塑剂、任选约0.2-0.6％的至少一种助流剂和任选约0.2-0.6％的至少一种润滑剂。例如，含消化酶的珠可以包含约60-90％胰脂肪酶、约1-4％的交联羧甲基纤维素钠、约0.5-1.0％的氢化蓖麻油、约0.2-0.6％的胶体二氧化硅、约2-6％的微晶纤维素和约0.2-0.6％的硬脂酸镁。肠溶包衣可以包含至少一种肠溶聚合物、约20-35％的至少一种无机材料(基于肠溶包衣的干重)和任选至少一种增塑剂。在一个实施方案中，肠溶包衣可以包含约10-20％的至少一种肠溶聚合物、约4-10％的至少一种碱化剂和约1-2％的至少一种增塑剂(基于 包衣的珠的总重量)。例如，包衣可以包含约10-20％的羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、约4-10％的滑石和约1-2％的柠檬酸三乙酯(基于包衣的珠的总重量)。许多包衣的含消化酶的珠则可以与未包衣的含消化酶的珠组合并形成片剂或填充入胶囊。在一个实施方案中，胶囊包含羟丙基甲基纤维素。

本发明组合物和包含本发明组合物的剂型与常规消化酶(例如，胰脂肪酶)组合物和剂型相比具有提高的稳定性。因此，本发明剂型不需要“过量填充”(即，零过量填充)，而常规消化酶剂型需要“过量填充”以给有相应需要的患者递送临床有用量的消化酶。常规消化酶组合物和剂型需要多达65％过量填充水平(即，所需消化酶剂量的165％)以弥补差的酶稳定性。结果是通过常规消化酶组合物递送的剂量存在不确定性。因此，常规“过量填充的”剂型可能在生产后不久递送比预期高的消化酶剂量，但随着时间推移，酶活性可能降至预期剂量之下。

在一个实施方案中，包含本发明组合物的剂型是基本上零过量填充的。术语“基本上零过量填充”表示其中额外的消化酶活性的量(即，超过预期剂量的额外酶活性的量)小于或等于约10％(即，约10％、小于约10％)、小于或等于约9％、小于或等于约8％、小于或等于约7％、小于或等于约6％、小于或等于约5％、小于或等于约4％、小于或等于约3％、小于或等于约2％、小于或等于约1％或约0％)的本发明的组合物。因此，例如，如果预期剂量是约4500IU脂肪酶，则本发明的基本上零过量填充的剂型可以含有小于或等于约4950IU脂肪酶(即小于或等于4500IU脂肪酶的110％)。在另一个实施方案中，零过量填充的剂型含有4500IU脂肪酶。

包含肠溶包衣的含消化酶的珠和未包衣的含消化酶的珠的组合的本发明组合物或剂型还具有以比常规认为有效的剂量明显更低的剂量有效治疗胰腺疼痛以及潜在营养缺乏(例如，脂肪吸收不良)的优势。例如，考察用未包衣的胰酶组合物治疗胰腺疼痛的之前研究需要每餐64,000单位的脂肪酶和240,000单位的蛋白酶的剂量。脂肪吸收不良的治疗通常需要每餐约35,000-175,000单位的脂肪酶的剂量。因此，胰腺疼痛和脂 肪吸收不良的治疗将需要每餐约99,000-239,000脂肪酶单位(组合了未包衣的胰酶和包衣的胰酶)。令人惊讶地，本发明人发现，当以肠溶包衣的珠的形式提供约2000-20,000脂肪酶单位并且以未包衣的珠的形式提供约78,000-60,000脂肪酶单位(即，5/95至约25/75肠溶包衣的脂肪酶/未包衣的脂肪酶)时，约80,000脂肪酶单位的总脂肪酶剂量有效治疗胰腺疼痛和脂肪吸收不良。这些剂量可以每餐给予，或者在一天中多次给予。

在其他实施方案中，有效治疗胰腺疼痛和脂肪吸收不良的剂量包括含有约1000-10,000单位脂肪酶的肠溶包衣的珠和含有约65,000-34,000USP单位蛋白酶的未包衣的珠、含有约1000-5,000单位脂肪酶的肠溶包衣的珠和含有约3000-20,000单位蛋白酶的未包衣的珠、含有约1000-4,000单位脂肪酶的肠溶包衣的珠和含有约3000-15,000单位蛋白酶的未包衣的珠、含有约2000-5,000单位脂肪酶的肠溶包衣的珠和含有约6000-20,000单位蛋白酶的未包衣的珠、含有约2000-4,000单位脂肪酶的肠溶包衣的珠和含有约6000-15,000单位蛋白酶的未包衣的珠、含有约2000-6,000单位脂肪酶的肠溶包衣的珠和含有约6000-22,000单位蛋白酶的未包衣的珠、含有约3000-6,000单位脂肪酶的肠溶包衣的珠和含有约10,000-22,000单位蛋白酶的未包衣的珠、含有约3000-7,000单位脂肪酶的肠溶包衣的珠和含有约10,000-23,000单位蛋白酶的未包衣的珠、或含有约4000-7,000单位脂肪酶的肠溶包衣的珠和含有约15,000-23,000单位蛋白酶的未包衣的珠。本文描述的剂量可以作为单一剂型施用，或者作为两个或多个更小剂型施用，两个或多个更小剂型总共提供总剂量。

在特定实施方案中，未包衣的含消化酶的珠还包括脂肪酶(除了蛋白酶以外)，并且肠溶包衣的含消化酶的珠中脂肪酶活性与未包衣的含消化酶的珠中脂肪酶活性的比例范围在约5∶95至约50∶50，由此肠溶包衣的珠的脂肪酶活性范围在约1000USP单位至约10,000USP单位；或者未包衣的含消化酶的珠还包括脂肪酶(除了蛋白酶以外)，并且肠溶包衣的含消化酶的珠中脂肪酶活性与未包衣的含消化酶的珠中脂肪酶活性的比 例范围在约5∶95至约25∶75，由此包衣的珠的脂肪酶活性范围在约1000USP单位至约10,000USP单位。

在特定实施方案中，未包衣的含消化酶的珠还包括脂肪酶(除了蛋白酶以外)，并且肠溶包衣的含消化酶的珠中脂肪酶活性与未包衣的含消化酶的珠中脂肪酶活性的比例范围在约95∶5至约50∶50，由此肠溶包衣的珠的脂肪酶活性范围在约1000USP单位至约10,000USP单位；或者未包衣的含消化酶的珠还包括脂肪酶(除了蛋白酶以外)，并且肠溶包衣的含消化酶的珠中脂肪酶活性与未包衣的含消化酶的珠中脂肪酶活性的比例范围在约95∶5至约75∶25，由此包衣的珠的脂肪酶活性范围在约1000USP单位至约10,000USP单位。

在其他特定实施方案中，肠溶包衣的含消化酶的珠还包含蛋白酶(除了脂肪酶以外)，并且肠溶包衣的含消化酶的珠中蛋白酶活性与未包衣的含消化酶的珠中蛋白酶活性的比例范围在约5∶95至约50∶50，由此未包衣的珠的蛋白酶活性范围在约65,000USP单位至约34,000USP单位；或者肠溶包衣的含消化酶的珠还包含蛋白酶(除了脂肪酶以外)，并且肠溶包衣的含消化酶的珠中蛋白酶活性与未包衣的含消化酶的珠中蛋白酶活性的比例范围在约5∶95至约75∶25，由此未包衣的珠的脂肪酶活性范围在约65,000USP单位至约34,000USP单位。

在其他实施方案中，肠溶包衣的含消化酶的珠和未包衣的含消化酶的珠都包含脂肪酶和蛋白酶，肠溶包衣的含消化酶的珠中脂肪酶活性与未包衣的含消化酶的珠中脂肪酶活性的比例范围在约95∶5至约50∶50；肠溶包衣的含消化酶的珠中蛋白酶活性与未包衣的含消化酶的珠中蛋白酶活性的比例范围在约5∶95至约50∶50，从而提供了其中包衣的珠的脂肪酶活性范围在约1000USP单位至约10,000USP单位并且未包衣的珠中蛋白酶活性范围在约65,000USP单位至约34,000USP单位的组合物。

而在其他实施方案中，肠溶包衣的含消化酶的珠和未包衣的含消化酶的珠都包含脂肪酶和蛋白酶，肠溶包衣的含消化酶的珠中脂肪酶活性与未包衣的含消化酶的珠中脂肪酶活性的比例范围在约95∶5至约75∶25；肠溶包衣的含消化酶的珠中蛋白酶活性与未包衣的含消化酶的珠中蛋白 酶活性的比例范围在约5∶95至约25∶75，从而提供了其中包衣的珠的脂肪酶活性范围在约1000USP单位至约10,000USP单位并且未包衣的珠中蛋白酶活性范围在约65,000USP单位至约34,000USP单位的组合物。

本发明组合物或剂型(例如，片剂或胶囊)可以在任何适合的包装中贮存。例如，包装可以是具有螺纹配合或压入配合的罩的玻璃瓶或塑料瓶。可选地，本发明的组合物或剂型可以作为单位剂量形式包装于“泡罩包装”中。申请人已经发现，可以通过提供防湿密封和/或防湿包装来提供消化酶组合物或剂型的提高的稳定性。适合的防湿包装的非限制性实例包括玻璃瓶、掺入隔湿树脂或涂层的塑料瓶、镀铝塑料(例如，Mylar)包装、等等。术语“防湿”指具有小于约0.5mg水/cm³容器容积/每年的水渗透性的包装。

容器(例如，瓶)可以用任何适合的罩封闭，特别是最大限度减少贮存期间湿气进入的罩。例如，本发明的组合物或剂型可以用诸如Saf-Cap III-A(Van Blarcom Closures，Inc.)的罩封闭，Saf-Cap III-A(Van Blarcom Closures，Inc.)含有印刷为密封衬里的HS 035 Heat Seal/20F(SANCAP Liner Technology，Inc.)。

为了确保包装完整性并最大限度减少贮存期间湿气进入，含有本发明组合物或剂型的密封的包装可以在分配本发明组合物或剂型并密封包装之后进行泄露测试。例如，可以通过将控制的真空应用至罩并检测真空随时间的减少来测试密封的包装。适合的泄露测试设备包括Bonfiglioli生产的那些(例如，型号LF-01-PKV或型号PKV 516)。

含有本发明组合物或剂型的包装还可以含有能够减少包装内部湿度的干燥剂(即，吸收水、与水反应或者吸附水的物质)，例如能够从包装内部密封的气氛“清除”湿气的干燥剂胶囊。可以放入此类包装内部的适合的干燥剂的非限制性实例包括沸石(例如，分子筛，例如 分子筛)、粘土(例如，蒙脱粘土)、硅胶、活性炭或其组合。在一个实施方案中，干燥剂包括分子筛。

此外，当包装口服药物单位剂量时的常规做法是将纤维素材料例如 棉花的“塞”加入容器顶部以填充容器顶部的空间，从而最大限度减少内容物的运动。纤维素材料具有一定的吸湿性，并且可以用作包装内部湿气的“储库”。因此，在本发明包装的一个实施方案中，包装中不存在纤维素或棉花“塞”。在本发明包装的另一实施方案中，包装没有纤维素或棉花塞，并且含有干燥剂。

本发明组合物可以使用如本文所示改良的常规技术来制备，以提供约3％或更少的含湿量、约0.6或更少的水活度，或者提供在三个月加速稳定性测试之后表现出不超过约15％的活性损失的稳定的消化酶组合物。例如，消化酶(例如，胰脂肪酶)的珠可以在配备除湿器的流化床包衣装置中包衣。在一个实施方案中，包衣装置在具有约4g/m³或更少、约3.5g/m³或更少、约3g/m³或更少、约2.5g/m³或更少、约2.0g/m³或更少、约1.5g/m³或更少、约1.0g/m³或更少或约0.5g/m³或更少(包括其间所有范围和子范围)的含水量的气氛中运行。在其中进行包衣的气氛可以包括除湿的空气、除湿的氮气或另一种除湿的惰性气体。

包衣可以作为肠溶聚合物(和任选的悬浮无机材料)在有机溶剂中的溶液而应用，所述有机溶剂例如醇(例如，乙醇)、酮(例如，丙酮)、二氯甲烷或其混合物(例如，丙酮乙醇混合物)。

本发明组合物有效用于治疗胰腺疼痛(即，减少或减轻胰腺疼痛，并且还提供在罹患与消化酶缺乏相关的病症或疾患的患者中脂肪、蛋白和糖类的改善的吸收。在一个实施方案中，本发明的组合物，特别是胰脂肪酶或胰酶制剂组合物，可用于治疗胰腺疼痛，例如与伴随各种疾病或病症的外分泌胰腺功能不全(EPI)相关的胰腺疼痛。此类疾病包括但不限于囊性纤维化(CF)或与酒精滥用相关的胰腺功能不全。

在一些实施方案中，此类组合物可以在囊性纤维化患者和其他患者(包括小儿患者)中明显缓解单独的胰腺疼痛或与EPI相关的吸收不良(例如，脂肪的吸收不良)组合的胰腺疼痛。在一些实施方案中，此类组合物可以使囊性纤维化患者的脂肪吸收系数(CFA)增加到至少约85％或更高。此类结果可以在与其他药剂或组合物共施用时实现，或者可以在不与其他药剂共施用时实现。在一个实施方案中，此类CFA结果在不与质子泵 抑制剂例如 和类似物共施用时实现。

对于被鉴定为具有低GI pH水平(例如，GI pH水平＜约4)的患者而言，可以通过与质子泵抑制剂、抗酸剂和增加胃肠道pH的其他药物一起施用本发明组合物或剂型来获得改善的结果。例如，本发明组合物或剂型可以与质子泵抑制剂、抗酸剂或其他药物分开施用(在质子泵抑制剂、抗酸剂等施用之前，与质子泵抑制剂、抗酸剂等施用同时或在质子泵抑制剂、抗酸剂等施用之后)。可选地，质子泵抑制剂、抗酸剂或其他药物可以与本发明的胰酶制剂组合物组合作为单一剂型。

而在另一实施方案中，本发明提供了治疗或预防胰腺疼痛和任选与消化酶缺乏相关的疾患的方法，该方法包括给有相应需要的哺乳动物施用本发明组合物。在一个实施方案中，哺乳动物是人。

在另一个实施方案中，本发明提供了治疗或预防胰腺疼痛和/或治疗与消化酶缺乏相关的疾患的方法，该方法包括给有相应需要的患者施用低剂量的胰酶(例如，如本文所述的7x 5000USP脂肪酶单位胶囊或类似剂量的本领域已知的商品组合物，例如 1206、1212或1224； 等)。

而在另一实施方案中，本发明提供了治疗或预防胰腺疼痛和任选与消化酶缺乏相关的疾患的方法，该方法包括给有相应需要的哺乳动物施用本发明组合物或剂型，其中本发明组合物或剂型除了至少一种消化酶以外还包含质子泵抑制剂、抗酸剂或增加胃肠道pH的其他药物。在另一实施方案中，本发明提供了治疗或预防与消化酶缺乏相关的疾患的方法，该方法包括与包含质子泵抑制剂、抗酸剂或增加胃肠道pH的其他药物的剂型组合施用本发明的组合物或剂型。

引起胰腺疼痛或与胰腺疼痛相关并且可以用本发明的组合物或剂型治疗的疾患包括其中患者没有或具有低水平消化酶或者其中患者需要消化酶补充的病症。例如，此类病症可以包括囊性纤维化、慢性胰腺炎、其他胰腺疾病(例如，遗传性胰腺炎、创伤后胰腺炎和同种异体移植性胰腺炎、血色病、Shwachman综合征、脂肪过多症或甲状旁腺功能亢进)、 癌症或癌症治疗的副作用、手术(例如，胃肠旁路手术、Whipple手术、整体胰腺切除等)副作用或其中胰酶不能达到肠的其他病症、药物治疗例如用二甲双胍或用于治疗HIV和自身免疫疾病(例如其中胰腺可能受损的糖尿病)的症状的那些药物治疗的不良混合(例如，Billroth II胃切除术、其他类型的胃旁路手术、胃泌素瘤等)副作用、阻塞(例如，胰管结石和胆管结石、胰腺和十二指肠肿瘤、导管狭窄)、与乳糜泻相关的吸收不良、食物过敏和老化。可用本发明的消化酶组合物治疗的其他病症包括孤独症、帕金森病、糖尿病和自主神经失调疾患。

每日给哺乳动物(例如，人)施用的本发明组合物或剂型的量取决于预期结果。熟练医师将能够根据他对待治疗病症的诊断而指定所需剂量。

例如，对于治疗人的消化酶不足(例如，与囊性纤维化相关)而言，根据US FDA的建议，通常的起始剂量应该是500至1000脂肪酶单位/kg/餐，总剂量不超过2500脂肪酶单位/kg/餐或4000脂肪酶单位/g脂肪/餐。通常，患者应该每天接受至少4个剂型，优选与食物一起施用。

在特定实施方案中，剂量将是每餐约80,000脂肪酶单位和约272,000蛋白酶单位，其中约5-25％的酶(基于活性)以肠溶包衣的珠的形式提供，并且约95-75％的酶以包衣的珠形式提供。

在其他实施方案中，本发明涉及用低剂量的肠溶包衣的消化酶组合物例如本文描述的肠溶包衣的珠治疗例如由本文描述的病症的任何一种引起的胰腺外分泌功能不全的方法。如本文描述的，用于治疗胰腺功能不全的常规剂量范围在约500至1000脂肪酶单位/kg/餐。例如， 胰脂肪酶胶囊的FDA标签指出，成人的酶剂量给药“对于年龄超过4岁的那些人应该开始于500脂肪酶单位/kg体重/餐，最高2,500脂肪酶单位/kg体重/餐”。因此，对于进食31/2餐/天(即，3餐和1次零食)的70kg成人而言， 胰脂肪酶的推荐日剂量范围在约122,500脂肪酶单位至约612,500脂肪酶单位。如本文所描述的，本发明人惊讶地发现，明显更低剂量的肠溶包衣的消化酶制剂有效治疗胰腺外分泌功能不全。因此，低至约100脂肪酶单位/kg/餐和高达约300脂肪酶单位/kg/餐的肠溶包衣消化酶的剂量有效治疗胰腺外分泌功能不全，但明显 减少了罹患此类病症的患者的“药物负担”。适合的剂量包括约100、约110、约120、约130、约140、约150、约160、约170、约180、约190、约200、约至10、至20、约230、约240、约250、约260、约270、约280、约290或约300脂肪酶单位/kg/餐，包括其间的所有范围和子范围，可以施用给有相应需要的患者。

实施例

实施例1：未包衣和肠溶包衣的胰脂肪酶迷你片

胰脂肪酶MT(迷你片)是胰脂肪酶原料(例如，获自Nordmark)和赋形剂(例如，交联羧甲基纤维素钠、氢化蓖麻油、胶体二氧化硅、微晶纤维素和硬脂酸镁)的混合物，使用圆形2mm直径斜面打孔器(beveled punch)制成片。胰脂肪酶MT在包衣之前的物理特征显示于以下表3中。

^*USP方法

在过程气流中使用配备有Munters ML 1350除湿器的流化床Glatt-GPCG1装置，将胰脂肪酶MT用包衣制剂(表4)包衣。包衣过程用处于三种不同的含湿量的过程空气(表5)进行。对于每一批次而言，包衣重量是包衣的珠的总重量的大约15％。每组过程条件的包衣珠的组成大致相同(表6)并且在显微镜检查时看起来统一、光滑和均匀。

三组样品(即，P9A165、P9A167和P9A170)显示对应于过程气流含湿量的残留含湿量(表7)。

实施例2：肠溶包衣的迷你片

胰脂肪酶MT粒子用含有不同量的滑石的两种包衣组合物包衣(表8)。

包衣试验使用配备有Munters ML 1350除湿器的流化床Glatt-GPCG1装置来进行以保证过程气流处于低含湿量(即，低于1g/m³)。包衣重量是大约15％。两批次的理论组成记录于表9。显微镜检查指示，所有样品上的包衣是平滑和均匀的。通过干燥失重测量残留含湿量(表10)。

实施例3：肠溶包衣的迷你片

“高滑石”和“低滑石”包衣组成类似于表6中描述的那些，除外的是乙醇(96％乙醇，4％水)/丙酮溶剂被100％丙酮替代(表11)。

包衣试验使用配备有Munters ML 1350除湿器的流化床Glatt-GPCG1装置来进行以保证过程气流处于低含湿量(低于1g/m³)。包衣重量是大约15％。两批次的理论组成记录于表12。

实施例7：肠溶包衣的迷你片

胰脂肪酶MT粒子用具有介于以上采用的“低”水平和“高”水平 之间的滑石中等水平(HP55∶TEC∶滑石＝10∶1∶5)的两种包衣组合物包衣，使用丙酮或乙醇/丙酮混合物作为包衣溶剂。两种包衣悬液的理论组成示于下表13。

包衣试验使用配备有Munters ML 1350除湿器的流化床Glatt-GPCG1装置来进行以保证过程气流处于低含湿量(低于1g/m³)。

通过以大约15％的包衣重量包衣胰脂肪酶MT来制备所述批次。三个批次用乙醇/丙酮包衣溶剂制备，而三个批次用丙酮包衣溶剂制备。对于所有六个批次相同的理论组成示于下表14。

所有六个样品的包衣的显微镜检查看起来是光滑且均匀的。

实施例8：肠溶包衣的和未包衣的小片

小片

为提供对剂量的进一步选择，制备了其中片剂尺寸显著减小的制剂。胰脂肪酶混合物用圆形1.5mm直径、1.2mm曲率半径的打孔器制成片剂。

设置压片参数以获得脆性低于2.5％(USP方法)的小片(“μT”)。批号9A402的特征显示于表15。

批号P9A402在配备有Munters ML 1350除湿器以保证过程气流处于低含湿量(低于1g/m³)的流化床Glatt-GPCG1装置中用具有表4所示的组成的悬液包衣。获得了22％的包衣重量。膜包衣的显微镜检查指示，所有样品看起来是光滑且均匀的。

批号P9A422的理论组成示于表16。

两个其他批次的肠溶包衣小片如上所述制备，其性质显示于下表17。

以上制备的小片是长椭圆形的(参见表15)；小片厚度与直径之间的比例在1.22∶1和1.15∶1之间。

为了进一步降低小片的尺寸，用接近1∶1的厚度直径比的比例制备新样品(批号Q9A006)，如下表18所示。

批号Q9A006用表19所示组合物包衣，包衣重量为22％。包衣试验使用配备有Munters ML 1350除湿器的流化床Glatt-GPCG1装置来进行以保证过程气流处于低含湿量(低于1g/m³)。

包衣小片批号Q9A019的理论组成与表19所示相同。显微镜检查指示包衣是平滑且均匀的。

实施例9：用肠溶包衣和未包衣的胰酶制剂的组合治疗

在慢性胰腺炎患者中进行评估不同胰酶产品(PEP)组合物A和组合物B的安全性和效力的单中心、随机、开放标签、交叉、活性对照研究。

组合物A的每个胶囊含有大约10个具有总计10,000USP脂肪酶单位和34,000USP蛋白酶单位的肠溶包衣的小珠和10个具有总计10,000USP脂肪酶单位和34,000USP蛋白酶单位的非包衣的珠。组合物B的每个胶囊含有大约2个具有总计2,000USP脂肪酶单位和6,800USP蛋白酶单位的肠溶包衣的小珠和18个具有总计18,000USP脂肪酶单位和61,200USP蛋白酶单位的非包衣的珠。使用肠溶包衣的PEP的个体现有胰酶替代疗法(PERT)用作活性对照。

第1组随机接受每餐4个胶囊的组合物A，每天分4餐16个胶囊，并且第2组随机接受组合物B，每天分4餐16个胶囊。第3组在筛选之前以每天固定胶囊剂量施用相同的PERT。

通过将疼痛严重度定量为疼痛发作次数/天和如以11分视觉模拟量表(11-point Visual Analog Scale)测量的疼痛严重度来评估效力。次要目的是通过评价CFA来测量脂肪的吸收不良。

患者纳入标准如下：

CP的诊断由异常ERP(修正的Cambridge II或III)伴随在基线处CFA≤70％的脂肪痢(100g脂肪摄入患者的每天粪便中＞7g脂肪)来确认；

复发的慢性上消化道疼痛，每天至少1次发作的频率；

能够从市场现有的PEP治疗转换； 

是临床上稳定的，在进入该临床试验前7天间隔期间没有伴随的疾病或急性上呼吸道或下呼吸道感染的证据。

该研究被分成3个时期：

1.筛选期：1周持续时间，合格性评价。

2.清除期(1周)：患者停止其现有的PEP，同时保持所有的其他被允许的共存药物治疗；具体地，患者被允许保持有关胃酸控制的药物治疗，包括PPI。在清除期结束时，测定CFA。

3.治疗期1(4周)：所有患者以控制脂肪痢所必需的个体固定剂量接受其现有PERT。

4.治疗期2(4周)：第1组以固定单位/kg剂量随机接受每餐4个胶囊的组合物A。第2组以固定单位/kg剂量随机接受组合物B。第3组在筛选之前以他们开始的剂量被施用相同的PERT持续4周。在治疗期2结束时，测定CFA。

5.在清除期和治疗期以天为基础记录疼痛的频率和严重度。

通过比较每个治疗组的治疗期之间疼痛的频率和严重度以及疼痛药物治疗的使用来评价效力。还通过比较每个治疗组的治疗期2与清除期之间从确定饮食和3天定量粪便收集而得到的CFA来评价效力。最后，比较治疗期2中组间的疼痛频率和严重度以及CFA。

在用组合物A和组合物B治疗之后，两种组合物均有效治疗胰腺疼痛，并且两种组合物均有效治疗胰腺退出慢性不全(pancreatic exit chronic insufficiency)。组合物B比组合物A更有效治疗胰腺疼痛。

实施例10

进行随机、双盲、剂量响应对照的交叉研究以评估根据本发明的组合物的效力。筛选之后，合格的患者开始安慰剂基线门诊阶段(4天)。在第5天，他们住院3至5天以经历在控制饮食下并使用粪便标志物指示控制饮食期的开始和结束的“基线”72小时脂肪吸收系数(CFA)测定， 同时他们继续接受安慰剂治疗。在安慰剂基线阶段结束时，患者被随机分入“高剂量之后低剂量”或“低剂量之后高剂量”EUR-1008剂量顺序，并进行第一交叉阶段。每个交叉阶段由以下组成：在家6天的稳定期，随后3至5天的住院以经历使用控制饮食并使用粪便标志物指示控制饮食期的开始和结束的72小时CFA测定。

该研究的主要效力目的是评估在患有伴有诊断的慢性胰腺炎的EPI患者中体征和症状的治疗以及吸收不良的处理中用高剂量肠溶包衣胰酶制剂与低剂量肠溶包衣胰酶制剂治疗的患者的脂肪吸收系数(CFA)的差异。

合格患者开始于安慰剂基线门诊阶段(4天)。在第5天，他们住院3至5天以经历在控制饮食下并使用粪便标志物指示控制饮食期的开始和结束的“基线”72小时CFA测定，同时他们继续接受安慰剂治疗。在安慰剂基线阶段结束时，患者被随机分入“高剂量之后低剂量”或“低剂量之后高剂量”肠溶包衣胰酶制剂剂量顺序，并进行第一交叉阶段。每个交叉阶段由以下组成：在家6天的稳定期，随后3至5天的住院以经历使用控制饮食并使用粪便标志物指示控制饮食期的开始和结束的72小时CFA测定。

高剂量(7x 20,000USP脂肪酶单位胶囊，组合物4，表20)以每个完整日历天7个胶囊的固定日剂量施用，根据餐的大小(估计的脂肪含量)来分配(可能的实施例：早餐2个胶囊，午餐2个胶囊，晚餐2个胶囊，以及零食1个胶囊)。

低剂量(7x 5,000USP脂肪酶单位胶囊，组合物1，表20)以每个完整日历天7个胶囊的固定日剂量施用，根据餐的大小(估计的脂肪含量)来分配(可能的实施例：早餐2个胶囊，午餐2个胶囊，晚餐2个胶囊，以及零食1个胶囊)。

关于活性治疗，匹配的安慰剂以每个完整日历天7个胶囊的固定日剂量施用。每个交叉治疗阶段由在家6天的稳定期、随后3至5天的住院组成。

在用两个剂量水平治疗之后的平均CFA显著高于安慰剂基线期结束时的平均CFA。距安慰剂基线期的平均变化对于低剂量是7.19±14.49(p＜0.001)并且对于高剂量是8.18±17.35(95％CI，4.10至12.26)。高剂量和低剂量的LS平均值之间的差异是1.023％(95％CI，-0.656至2.701)，因此显示了剂量之间的差异不是统计学上显著的(p＝0.228)。因此，本研究令人惊讶地发现，低水平的包衣酶在慢性胰腺炎患者中有效校正脂肪吸收不良，而较高剂量不导致脂肪吸收系数(CFA)的任何增加。

这些结果显示，与常规使用的剂量相比明显较低剂量的肠溶包衣的 消化酶有效治疗胰腺外分泌功能不全。例如， 胰脂肪酶胶囊的FDA标签指出，成人的酶剂量给药“对于年龄超过4岁的那些人应该开始于500脂肪酶单位/kg体重/餐，最高2,500脂肪酶单位/kg体重/餐”。因此，对于进食31/2餐/天(即，3餐和1次零食)的70kg成人而言， 胰脂肪酶的推荐日剂量范围在约122,500脂肪酶单位至约612,500脂肪酶单位。相反，本研究显示，低至35,000脂肪酶单位的日剂量有效治疗胰腺外分泌功能不全-小于常规接受的消化酶最低剂量的30％。

此外，本研究结果还显示，小量包衣酶可用于校正脂肪吸收不良，而较大量的未包衣酶可包含在单一剂型中以治疗胰腺疼痛。这种产品不会过度增加超过目前使用量的药剂负担或总体显著增加服用的酶水平，因此保持了药物的安全性特征，同时保留了其治疗吸收不良的效力。具体地，将是在从胃排出时立即可用于充分降解CCK释放肽的足够的未包衣蛋白酶，并因此将用单一药物治疗有效治疗慢性胰腺炎的两个主要症状，疼痛和吸收不良。因此，在单个丸剂或胶囊中含有肠溶包衣和未包衣的消化酶的剂型将有效治疗慢性胰腺炎和表现为疼痛和吸收不良的任何胰腺疾病。

已经出于说明和描述目的而提出了本发明的前述说明。它不是意图为穷尽性的或将本发明限制于所公开的确切形式。根据上述教导的修改和变化是可能的。实施方案的描述被选择以解释和描述本发明的原理及其实际应用，而不是要限制权利要求的范围。

本文引用的所有出版物和专利或专利申请通过引用整体并入，如同每个出版物、专利或专利申请被具体地且单独地指明通过引用并入。

Claims (16)

1.一种多微粒消化酶组合物，包含肠溶包衣的含消化酶的珠和未包衣的含消化酶的珠，其中：

所述肠溶包衣的含消化酶的珠包括核心和置于所述核心上的肠溶包衣，其中所述核心包含治疗有效量的脂肪酶，并且所述肠溶包衣包含肠溶聚合物；并且

所述未包衣的含消化酶的珠包含治疗有效量的蛋白酶，并且实质上不含肠溶聚合物包衣；

其中包衣的珠的脂肪酶活性范围在2000USP单位至10,000USP单位，并且未包衣的珠的蛋白酶活性范围在61,200USP单位至34,000USP单位。

2.如权利要求1所述的多微粒消化酶组合物，其中包衣的珠的脂肪酶活性范围在2000USP单位至5000USP单位。

3.如权利要求1所述的多微粒消化酶组合物，其中包衣的珠的脂肪酶活性范围在2000USP单位至4000USP单位。

4.如权利要求1所述的多微粒消化酶组合物，其中：

所述肠溶包衣的含消化酶的珠和所述未包衣的含消化酶的珠各自包含脂肪酶和蛋白酶；

所述肠溶包衣的含消化酶的珠的脂肪酶活性与所述未包衣的含消化酶的珠的脂肪酶活性的比例范围在10:90至50:50；并且

所述肠溶包衣的含消化酶的珠的蛋白酶活性与所述未包衣的含消化酶的珠的蛋白酶活性的比例范围在10:90至50:50。

5.如权利要求2所述的多微粒消化酶组合物，其中：

所述肠溶包衣的含消化酶的珠的脂肪酶活性与所述未包衣的含消化酶的珠的脂肪酶活性的比例范围在10:90至25:75；并且

所述肠溶包衣的含消化酶的珠的蛋白酶活性与所述未包衣的含消化酶的珠的蛋白酶活性的比例范围在10:90至25:75。

6.一种剂型，所述剂型包含权利要求1所述的多微粒消化酶组合物。

7.如权利要求6所述的剂型，其中所述未包衣的含消化酶的珠具有范围在34,000USP蛋白酶单位至61,200USP蛋白酶单位的总蛋白酶活性。

8.如权利要求6所述的剂型，其中所述未包衣的含消化酶的珠具有范围在47,000USP蛋白酶单位至61,200USP蛋白酶单位的总蛋白酶活性。

9.如权利要求6所述的剂型，所述剂型是装填了所述多微粒消化酶组合物的胶囊形式。

10.权利要求1所述的组合物在制备用于治疗胰腺炎疼痛的药物中的用途，其中所述药物被施用至有相应需要的患者。

11.权利要求1所述的组合物在制备用于治疗胰腺炎疼痛和胰腺功能不全的药物中的用途，其中所述药物被施用至有相应需要的患者。

12.如权利要求11所述的用途，其中所述施用包括每餐施用一定量的多微粒消化酶组合物，该量使得所述肠溶包衣的含消化酶的珠的脂肪酶活性范围在1000至5,000USP脂肪酶单位。

13.权利要求1所述的多微粒组合物在制备用于治疗胰腺外分泌功能不全的药物中的用途，其中所述药物被以治疗有效剂量施用至有相应需要的患者，其中所述治疗有效剂量中肠溶包衣的含消化酶的珠的量范围在100至300USP脂肪酶单位/kg/餐。

14.如权利要求13所述的用途，其中所述肠溶包衣的含消化酶的珠的脂肪酶的日剂量范围在35,000至90,000USP脂肪酶单位。

15.权利要求1所述的组合物在制备用于治疗胰腺疼痛的药物中的用途，其中所述药物被施用至有相应需要的患者。

16.如权利要求15所述的用途，其中所述施用包括每餐施用一定量的多微粒消化酶组合物，该量使得所述未包衣的含消化酶的珠的蛋白酶活性范围在130,000至260,000USP蛋白酶单位。