CN102603861A - 丹参酮衍生物及其药物组合物和其在医药中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供通式(I)所示在A环、B环、C环及D环上不同基团取代的丹参酮衍生物，以其为活性成分的药物组合物，它们的制备方法，以及在制备1型11β-羟化类固醇脱氢酶(11β-HSD1)抑制剂中的应用。还提供了通式(I)化合物在制备治疗糖尿病及相关的代谢性疾病(高血压、肥胖、老年痴呆等)药物中的应用。

Description

丹参酮衍生物及其药物组合物和其在医药中的用途

技术领域：

本发明属于药物化合物和药物技术领域，具体涉及一类丹参酮化合物，该类化合物为活性成分的药物组合物，其制备方法以及该类化合物和其药物组合物在制备1型11-β-羟化类固醇脱氢酶(11β-HSD1)选择性抑制剂中和抗糖尿病及相关代谢性(高血压、肥胖、老年痴呆等)疾病的药物中的应用。

背景技术：

糖尿病及糖皮质激素相关的代谢性疾病(包括肥胖，血脂代谢障碍，高血压及心血管并发症等)已成为困扰现代人的主要健康问题(Rosenstock，J.et.Diabetes Care 2010，33，1516.)。据世界卫生组织(WHO)不完全统计显示，全球约有16亿人体重超重，其中有4亿人表现出临床的糖尿病症状(Wamil，M.et.Drug Discovery Today 2007，12，504)，且情况还在进一步恶化之中。因此，严峻的形势赋予了医药工作者责无旁贷的使命——寻找新型高效低副作用的糖尿病质激素是一类重要的甾体激素。它参与调节一些与胁迫相关的生理过程，如糖异生，炎症反应、脑功能、免疫应答等。人体内有两种形式的糖皮质激素，即：活性形式的氢化可的松和非活性形式的可的松。

11β-羟化类固醇脱氢酶(11β-HSD)在糖皮质激素水平调节中扮演的关键角色。自1988年11β-HSD被发现以来(Lakshmi，V.et.Endocrinology 1988，123，2390.)，研究人员对11β-HSD的研究热情经久不衰，对11β-HSD认识也越来越深入。生物体内有两种亚型的11β-羟化类固醇脱氢酶，11β-羟化类固醇脱氢酶1型酶(11β-HSD1)和2型酶(11β-HSD2)。11β-HSD1和11β-HSD2都是以烟酰胺腺嘌呤(NADPH)为辅酶因子，且均位于细胞内质网膜上，它们共同参与调节生物体内活性糖皮质激素和非活性糖皮质激素的水平。11β-HSD1具有氧化和还原的双重催化作用，广泛分布于糖皮质激素的靶器官，是一个具有组织特异性的糖皮质激素调节剂(Tomlinson，J.W.et.Endocr.Rev.2004，25，831.)。现在一般认为，11β-HSD1在细胞完整情况下(体内)主要为还原酶，在辅酶NADPH的存在下，将人体内的靶标部位将非活性的可的松再生为活性的氢化可的松——以肝脏、脂肪组织及脑组织中表现最为明显，从而在局部组织放大了糖皮质激素受体的活化作用(Tomlinson，J.W.et.Drug Discovery Today.：Therapeutic Strategies2005，2，93)。而11β-HSD2主要表现为氧化酶，催化上述逆反应(Staab，C.A.et.J.Steroid Biochem.Mol.Biol.2010，119，56)，主要在肾，大肠和唾液中表达。正常情况下人体内，一般只有5％的氢化可的松游离于血浆。绝大部分的氢化可的松与高亲和球蛋白或低亲和白蛋白结合，一旦受到环境胁迫，其含量迅速上升达到mM级(Stewart，P.M.et.Vitam.Horm.1999，57，249)。活性糖皮质激素自由扩散到血浆后，与血浆内的糖皮质激素(某些组织为盐皮质激素)受体结合形成复合物，复合物被转运至细胞核内，直接或与其它转录因子相互作用共同调控基因表达(Staab，C.A.et.J.Steroid Biochem.Mol.Biol.2010，119，56)(图-1)。

研究表明，11β-HSD1在胰岛素敏感性的控制及胰岛素耐药的发展过程扮演重要角色(Tomlinson，J.W.et.Drug Discovery Today：Therapeutic Strategies 2005，2，93)。转基因小鼠实验结果也证实了这一推论：过量表达11β-HSD1的小鼠几周内就表现出胰岛素抵抗，心饥肥胖，高血压等症状；而11β-HSD1基因敲除的小鼠不表现出这些症状(Boyle，C.D.Curr.Opin.Drug.Discov.Devel.2008，11，495；Wamil，M.et.Drug Discovery Today 2007，12，504)。此外，患有Cushing′s综合症的患者服用糖皮质醇受体拮抗剂后，病症能得到明显的缓解。嚼齿类动物和少量人类实验的研究结果也证实：抑制11β-HSD1的活性是治疗代谢综合症的有效途径(Odermatt，A.Curr.Enzyme Inhib.2005，1，107；Ge，R.et.Curr.Med.Chem.2010，17，412；Staab，C.A.et.J.Steroid Biochem.Mol.Biol.2010，119，56)。

目前临床上尚无选择性11β-HSD1抑制剂。早期开发的11β-HSD抑制剂主要是甘草次酸衍生物。生胃酮(CBX)是第一个被广泛研究的11β-HSD抑制剂，它是甘草次酸(GA)的琥珀酸单酯。瘦的代谢综合症患者服用CBX后，胰岛素敏感性和血脂总含量明显提高了，而肥胖的代谢综合症患者服用CBX后，胰岛素敏感性和血脂总含量并未提高，这可能是由于CBX不能进入到肥胖个体的脂肪组织内(Staab，C.A.et.J.Steroid Biochem.Mol.Biol.2010，119，56)。鉴于CBX是非选择性的11β-HSD1抑制剂，它能同时抑制11β-HSD1和11β-HSD2，其临床应用价值受到极大的限制。因此，研究开发新一代具有高度11β-HSD1专一性的抑制剂具有重要的现实意义。

丹参酮IIA及隐丹参酮为从我国传统中药丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.)干燥根及根茎的乙醇提取物中分离得到的两个脂溶性化合物。丹参酮类化合物往往具有广泛的生物活性——如抗血小板聚集、降血脂、抗肿瘤、乙酰胆碱酯酶抑制等，目前已有丹参磺酸钠在临床上用于治疗冠心病、脑中风、动脉粥样硬化等心血管疾病。目前关于丹参酮类化合物的专利主要集中在其提取分离方法(如：姚煜东，金波，胡耀昌，莫启武，刘汉槎，一种超临界二氧化碳萃取精制丹参酮IIA的方法，公开号CN1369485；褚治德，孟宪玲，一种丹参酮IIA的提取方法，公开号CN1923846；尹卫平，王忠东，马军营，吴云骥，王小伟，段文录，张延萍，吕本莲，药物中间体丹参酮II A提取工艺，公开号CN1935799；郑志刚，杨悦武，王双明，陆文亮，一种丹参酮的提取方法，公开号CN1670019；田桂连，张天佑，一种分离纯化丹参酮的方法，公开号CN1394870等)、制剂的制备方法(如储茂泉，古宏晨，刘国杰，丹参酮固体分散物及其制备方法，公开号CN1277840；储茂泉，古宏晨；，刘国杰，丹参酮前体脂质体球形粉末制剂及其制备方法，公开号CN1298697；储茂泉，古宏晨，刘国杰，丹参酮微粉制剂及其微波辅助共研磨制备方法，公开号CN1286083；刘力，丹参酮IIA磺酸或丹参酮IIA磺酸钠冻干粉针制剂及其制备方法，公开号CN1623538；吕炜锋，奚涛，任敏，丹参酮IIA滴丸及其制备方法和应用，公开号CN1698597；武春风，丹参酮IIA输液剂及其制备方法，公开号CN1732915；毛声俊，金辉，梁臻，吴宇，一种丹参酮乳剂及其制备方法，公开号CN1839818等)、丹参酮及丹参酮磺酸钠在治疗心血管疾病、抗肿瘤、抗老年痴呆疾病中的应用(如邹巧根，丹参酮I磺酸钠在医药领域中的应用，公开号CN1857250；邵鹏柱，何旨云，冯国培，温志昌，丹参酮作为乙酰胆碱酯酶抑制剂在治疗相关疾病中的应用，公开号CN1764447；袁淑兰，羊裔明，黄光琦，周清华，刘霆，王修杰，黄韧敏，周宏远，丹参酮在制备治疗肿瘤药物中的应用，公开号CN1264580等)。然而关于丹参酮衍生物的合成制备专利较少(如：秦引林，颜培玲，何龙其，丹参酮IIA在制药中的应用，公开号CN 1631364；秦引林，丹参酮I衍生物及其在制药中的应用，公开号CN 1837200；杜志云，张焜，方岩雄，古练权，黄宝华，赵肃清，周丽华，郑杰，丹参酮衍生物及在制备醛糖还原酶抑制剂药物中的应用，公开号CN 101012270；古练权，刘培庆，李贵华，丹参酮IIA用于制备预防和治疗动脉粥样硬化的药物，公开号CN 1426782等)，且在活性方面主要还是集中在传统的心血管和肿瘤领域。目前，现有技术中尚未有关于丹参酮衍生物的合成及报道，也没有其作为选择性11-β-HSD1抑制剂及其在制备治疗糖尿病和相关的代谢性疾病(高血压、肥胖、老年痴呆等)药物中的应用的报道。

发明内容：

本发明的目的在于提供一类丹参酮衍生物，以其为活性成分的药物组合物，它们的合成方法，及此类化合物在制备选择性11β-HSD1抑制剂药物中的应用，同时还提供了此类化合物在制备治疗糖尿病及相关代谢性疾病(高血压、肥胖、老年痴呆等)药物中的应用。

本发明的上述目的是通过下面的技术方案加以实现的：

通式(I)所示的丹参酮衍生物

R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆分别独立选自氢、卤素、羟基、酮羰基、低级烷氧基、环烷氧基、低级烷基取代的碳酰氧基、环烷基取代的碳酰氧基、芳基或杂环芳基取代的碳酰氧基、低级烷基取代的羰基、环烷基取代的羰基、芳基或杂环芳基取代的羰基、氨基、氰基、叠氮、低级烷基取代的胺基、环烷基取代的胺基、芳基或杂环芳基取代的胺基、低级烷基取代的酰胺基、环烷基取代的酰胺基、芳基或杂环芳基取代的酰胺基、低级烷基取代的磺酰胺基、环烷基取代的磺酰胺基、芳基或杂环芳基取代的磺酰胺基、低级烷基取代的磺酰基、环烷基取代的磺酰基、芳基或杂环芳基取代的磺酰基、OC(＝O)N(R₁₃)₂、O(CH₂)mN(R₁₃)₂、OC(＝O)(CH₂)mCOOR₁₃，其中m＝1-5，R₁₃为氢或低级烷基；

R₇分别独立选自氢、卤素、芳基或杂环芳基、低级烷基取代的羰基、环烷基取代的羰基、芳基或杂环芳基取代的羰基、硝基、氨基、低级烷基取代的胺基、环烷基取代的胺基、芳基或杂环芳基取代的胺基、低级烷基取代的酰胺基、环烷基取代的酰胺基、芳基或杂环芳基取代的酰胺基、低级烷基取代的磺酰胺基、环烷基取代的磺酰胺基、芳基或杂环芳基取代的磺酰胺基、低级烷基取代的磺酰基、环烷基取代的磺酰基、芳基或杂环芳基取代的磺酰基；

R₈、R₉分别独立选自氢、羧基、甲基、羟基亚甲基、低级烷氧基亚甲基、环烷氧基亚甲基、低级烷基取代的碳酰氧基亚甲基、环烷基取代的碳酰氧基亚甲基、芳基或杂环芳基取代的碳酰氧基亚甲基、低级烷基取代的胺基亚甲基、芳基取代的胺基亚甲基、低级烷基取代的酰胺基亚甲基、芳基取代的酰胺基亚甲基、氟代亚甲基、低级烷基取代的磺酰胺基亚甲基、环烷基取代的磺酰胺基亚甲基、芳基或杂环芳基取代的磺酰胺基亚甲基；

R₁₀、R₁₁分别独立选自氢、卤素、羧基、芳基或杂环芳基、羟基亚甲基、低级烷氧基亚甲基、环烷氧基亚甲基、低级烷基取代的碳酰氧基亚甲基、环烷基取代的碳酰氧基亚甲基、芳基或杂环芳基取代的碳酰氧基亚甲基、低级烷基取代的胺基亚甲基、芳基取代的胺基亚甲基、低级烷基取代的酰胺基亚甲基、芳基取代的酰胺基亚甲基、氟代亚甲基、低级烷基取代的磺酰胺基亚甲基、环烷基取代的磺酰胺基亚甲基、芳基或杂环芳基取代的磺酰胺基亚甲基、低级烷基取代的羰基、环烷基取代的羰基、芳基或杂环芳基取代的羰基、硝基、氨基、低级烷基取代的胺基、环烷基取代的胺基、芳基或杂环芳基取代的胺基、低级烷基取代的酰胺基、环烷基取代的酰胺基、芳基或杂环芳基取代的酰胺基、低级烷基取代的磺酰胺基、环烷基取代的磺酰胺基、芳基或杂环芳基取代的磺酰胺基；

R₁₂分别独立选自氢、烷基、环烷基、芳基或杂环芳基、低级烷基取代的羰基、环烷基取代的羰基、芳基或杂环芳基取代的羰基、低级烷基取代的磺酰基、环烷基取代的磺酰基、芳基或杂环芳基取代的磺酰基；

或R₁、R₃形成共价键；

或R₂、R₄形成共价键；

或R₈、R₁₀形成共价键；

或R₉、R₁₁形成共价键；

或R₅、R₆形成＝X₆，其中X₆选自C、O、S、NH等；

X₁、X₂、X₃、X₄分别独立选自酰氧基、烷氧基、羟基、β-羰基取代的烷基等；

或X₁、X₃形成共价键；

或X₂、X₄形成共价键；

或X₁、X₂形成＝X₆，其中X₆选自C、O、S、NH等；

或X₁、X₂形成＝X₆，其中X₆选自C、O、S、NH等；

或X₁、X₂、X₃、X₄形成2-取代咪唑环、2-取代的噻唑环、2，3-取代的噁唑、2，3取代的哌嗪环等；

或X₁、X₂、X₃、X₄形成C(＝O)OC(＝O)、C(＝O)NR₁₄C(＝O)，其中R₁₄选自氢或低级烷基；

X₃选自碳、氮、氧、硫原子等；

文中提到的“烷基”是指含1-10个碳原子的直链或支链碳氢官能团，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、异己基、3-甲基己基、2，2-二甲基戊基、2，3-二甲基戊基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基等，但并不仅限如上所列。

文中提到的“低级烷基”是指含1-4个碳原子的直链或支链碳氢官能团，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基等，但并不仅限如上所列。

文中提到的“环烷基”是指含3-8个原子的环状官能团，例如环丙烷基、环丁烷基、环戊烷基、环己烷基、环庚烷基、环辛烷基或者吡咯烷基、吗啡啉基、哌啶基等，但并不仅限如上所列。

文中提到的“芳基”是指含5-10个原子的芳环官能团，如苯基、萘基、呋喃基、噻唑基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、喹啉基、吲哚基等，但并不仅限如上所列。

文中提到的“卤素”是指氟、氯、溴、碘。

通式(I)丹参酮衍生物或其药理学上容许的盐，优选为下述结构式所示的化合物T4、T6、T7、T8、T9、T14、T21、T24、T25、T28、T31、T38、T39、T43、T51。

药物组合物，其中含有治疗有效量的权利要求1通式(I)丹参酮类化合物和药学上可接受的载体。

通式(I)丹参酮衍生物的制备方法，包括自由基介导的消除反应、烯丙位氧化、羟基氟代、苯环硝化、邻二羰基参与的三组分反应合成咪唑、催化氢化、苄位氧化、芳环卤代、Suzuki交叉偶联反应、锇酸钾催化的双羟化反应、Bransted酸催化的Fridiel-Craft反应、二酮合成吡咯反应。

如上所述的通式(I)丹参酮衍生物的制备方法，包括由自由基介导的消除反应合成化合物T4，由SeO₂参与的烯丙位氧化合成化合物T7和T8，由SeO₂参与的苄位氧化合成化合物T43，Pd(0)催化的Suzuki偶联反应合成化合物T29、T30、T31、T32、T33、T34。

通式(I)丹参酮衍生物或其药理学上容许的盐为有效成分在制备11β-HSD1选择性抑制剂药物中的应用。

通式(I)丹参酮衍生物或其药理学上容许的盐为有效成分在制备治疗糖尿病及相关的代谢性疾病(高血压、肥胖、老年痴呆等)药物中的应用。

本发明所述的丹参酮衍生物其药理学上容许的盐，可以列举例如与盐酸、硝酸、硫酸、磷酸、氢溴酸等无机酸，或者马来酸、富马酸、酒石酸、乳酸、柠檬酸、乙酸、甲磺酸、对甲苯磺酸，己二酸，棕榈酸，单宁酸等有机酸，锂，钠、钾等碱金属，钙、镁等碱土金属，赖氨酸等碱性氨基酸成的盐。

本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。该药物组合物含有0.1-99％，优选为0.5-90％的本发明化合物，其余为药物学上可接受的，对人和动物无毒和惰性的可药用载体。

所述的药学上可接受的载体是一种或多种固体、半固体和液体稀释剂、填料以及药物制品辅料。本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。应用本发明的药物可采用的剂型是惯用的盖伦给药剂型，例如：药膏、片剂、丸剂、栓剂乳剂、输入液和注射液等。这些剂型按照众所周知的方法，使用传统的添加剂和赋型剂制得。由此制得的药物根据需要可按局部、非肠道、口服等途径给药。

本发明化合物的施用量可根据用药途径、患者的年龄、体重、所治疗的疾病的类型和严重程度等变化，其日剂量可以是0.01-10mg/kg体重，优选0.1-5mg/kg体重。可以一次或多次施用。

本发明的特点和优异性在于，报道了一类新型的丹参酮衍生物，它们的制备方法，以及作为一类新颖的高效、高选择性11β-HSD1抑制剂，在制备治疗糖尿病及相关的代谢性疾病药物中有很好的应用前景。

附图说明：

图1为11β-HSD在糖皮质激素调节中的作用(引自J.Steroid Biochem.Mol.Biol.2010，119，56)；

图2为针对丹参酮IIA和隐丹参酮A环和B环衍生的化合物的反应流程图；

图3为针对丹参酮IIA和隐丹参酮C环衍生的化合物的反应流程图；

图4为针对丹参酮IIA和隐丹参酮D环衍生的化合物的反应流程图。

具体实施方式：

为了更好的理解本发明的实质，下面将用本发明的试验例、实施例和制剂实施例来说明本发明的通式(I)所示的丹参酮衍生物的制备方法和药理作用结果，但本发明的技术方案并不局限于此，任何采用类似本发明技术方案，不需要本领域普通技术人员创造性劳动即可做出的方案均认为属于本发明技术方案范畴。

实施例1：

本发明的具体实验方法为：以传统中药丹参中分离得到的丹参酮IIA及隐丹参酮为起始原料，合成通式(I)所示的丹参酮衍生物。具体的说，丹参酮IIA和隐丹参酮是用于制备该类化合物的起始原料，丹参酮IIA(T1)和隐丹参酮(T2)可从传统中药丹参的乙醇提取液中分离得到。

丹参酮IIA及隐丹参酮的结构式为：

通式(I)所示的丹参酮类化合物可通过实施例1中的反应流程由丹参酮IIA和隐丹参酮经1-4步反应得到(见反应流程图，图2、3、4)。

图2是针对丹参酮IIA和隐丹参酮A环和B环衍生的化合物的反应流程图；试剂及反应条件为：a)NBS，AIBN，CCl₄，reflux；b)NaOAc，TBAI，DMF，RT；c)K₂OsO₄，NMO，2，6-lutidine，t-BuOH/H₂O，RT；d)NBS，AIBN，CCl₄，reflux；e)SeO₂，1，4-dioxane，reflux；f)DAST，DCM，-78℃；g)succinic anhydride，Et₃N，DMAP，DCM，RT；h)H₂，Pd/C，HCOOH，MeOH，RT；i)HNO₃，H₂8O₄，0℃；

图3是针对丹参酮IIA和隐丹参酮C环衍生的化合物的反应流程图；试剂及反应条件为：a)Lewesson′s reagent，THF，RT；b)PhCHO，AcONH₄，EtOH，reflux；c)PtO₂，H₂，Pyridine，Ac₂O，RT；d)m-CPBA，NaHCO₃，DCM，RT；e)diethyl amine，acetone，-40℃；

图4是针对丹参酮IIA和隐丹参酮D环衍生的化合物的反应流程图；试剂及反应条件为：a)NaOH(2N)，THF/H₂O，ultrasound；b)NH₃·H₂O，EtOH，RT；c)RCOCl，Et₃N，DCM，RT；d)RSO₂Cl，DMAP，Pyridine，78℃-RT；e)IBX，DMSO，RT；Then，NH₄OAc(or PhNH₂)，HOAc，60℃；f)SeO₂，HOAc，reflux；g)MsCl，Et₃N，DMAP，THF，RT；then，PhNH₂，TBAI，THF，reflux；h)TBAI，nucleaphilic reagent，DMF，50℃；j)DAST，DCM，-78℃；k)succinic anhydride，Et₃N，DMAP，DCM，RT；1)IBX，DMSO，RT；Then，NaClO₂，iso-pentene，KH₂PO₄，acetone/H₂O，RT；n)NIS，TFA，DCM，RT；o)ArB(OH)₂，Pd(PPh₃)₄，PPh₃，K₂CO₃，DMF/H₂O，80℃；p)HCHO，HCl(con.)，H₂O，reflux；

丹参酮及隐丹参酮(化合物T1、T2)的制备用下述方法：

丹参提取物(提取方法参见：中华人民共和国药典2010版)，依次用丙酮、乙醇溶解，滤去不溶物，滤液硅胶拌样柱层析，石油醚/丙酮梯度洗脱，然后反复利用正相、反相柱层析以及石油醚/丙酮重结晶等方法纯化得到丹参酮(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1，R_f＝0.4)、隐丹参酮(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1，R_f＝0.3)单体。

实施例2：

化合物T3、T4、T5的制备：

向化合物T1(29mg，0.1mmol)的CCl₄(5mL)溶液中，依次加入NBS(27mg，0.15mmol)和过氧苯甲酰(36mg，0.15mmol)。加完后，抽换气(N₂)，然后室温条件下反应3小时。反应完毕后，加DCM稀释，然后用饱和Na₂SO₃水溶液洗，水相用DCM萃取三次(5mL×3)，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液洗，无水硫酸钠干燥浓缩后柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝15∶1)，得化合物T3(15mg，50％)。化合物T3的结构分析数据如下：

ESI-MS在shimadzu LCMS-2010EV质谱仪上测定；1D和2D NMR在BrukerAM-300及DRX-500核磁共振仪上测定，所用氘代试剂为Sigma Aldrich生产，TMS作为内标，δ单位为ppm，J单位为Hz。拌样用硅胶为100-200目，层析用硅胶为300-400目以及制备薄层板(厚度0.4-0.5mm)均为烟台江友硅胶开发有限公司生产；分析纯溶剂均是天津市化工有限公司产品。

化合物T3：红色固体，¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.62(s，1H)，6.77(s，1H)，2.38(t，J＝12Hz，12Hz，2H)，2.15(m，5H)，1.61(d，J＝12Hz，2H)，1.38(s，3H)，1.18(s，3H)；

化合物T4：红色固体，红色固体，¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.86(d，J＝12Hz，1H)，7.57(s，2H)，7.23(s，1H)，6.33(dt，J＝8Hz，4Hz，4Hz，1H)，2.28(m，2H)，2.27(s，3H)，1.61(s，3H)，1.30(s，6H)；

实施例3：

化合物T6的制备：

向化合物T3(18mg，0.05mmol)的DMF(1.0mL)溶液中，依次加入NaOAc(16mg，0.2mmol)和TBAI(3mg)。加完后，室温条件下反应12小时。反应完毕后，加水(10mL)稀释，然后用EtOAc萃取三次(8mL×3)，合并有机相，依次用水和饱和氯化钠水溶液洗，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝6∶1)，得化合物T6(12mg，70％)。

化合物T6：：红色固体，¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.73(d，J＝10Hz，1H)，7.72(s，1H)，6.41(s，1H)，2.21(s，3H)，2.02(s，3H)，1.90-1.98(m，2H)，1.60(m，4H)，1.40(s，3H)，1.28(s，3H)；

实施例4：

化合物T7、T8的制备：

在N₂气氛下，向化合物T4(15mg)的1，4-二氧六环(1.0mL)溶液中，加入SeO₂(22mg)，加热至回流反应1.5小时。TLC检测反应完毕后，加水稀释，然后用EtOAc萃取三次，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液洗，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1→2∶1)，得化合物T7(10mg，67％)和T8(3mg，20％)。

化合物T7：红色固体，¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)δ8.92(d，J＝10Hz，1H)，7.72(d，J＝10Hz，1H)，7.65(d，J＝5Hz，1H)，7.23(s，1H)，6.34(d，J＝10Hz，1H)，2.22(s，3H)，1.44(s，6H).

化合物T8：红色固体，¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)δ8.98(d，J＝10Hz，1H)，7.79(d，J＝5Hz，1H)，7.71(d，J＝10Hz，1H)，7.29(s，1H)，6.41(d，J＝10Hz，1H)，2.28(s，3H)，1.59(s，2H)，1.50(s，6H).

实施例5：

化合物T9的制备

在N₂气氛下，向化合物T4(15mg)的t-BuOH/H₂0(0.8mL/0.2mL)溶液中，依次加入2，6-二甲基吡啶(10mg)和俄酸钾(4mg)，室温搅拌15分钟后，一次加入高碘酸钠(42mg)，室温反应4小时，TLC检测反应完毕后，加入饱和Na₂S₂O₃淬灭反应，加水稀释后，用EtOAc萃取三次，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液洗，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝1.5∶1)，得化合物T9(11mg，68％)。

化合物T9：红色固体，¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.70(s，1H)，7.26(s，1H)，5.00(d，J＝4Hz，1H)，3.93(dt，J＝12Hz，4Hz，4Hz，1H)，2.26(s，3H)，2.09(t，J＝12Hz，12Hz，1H)，1.76(dd，J＝12Hz，4Hz，1H)，1.39(s，3H)，1.32(s，1H).

实施例6：

化合物T10、T11的制备

向化合物T7(15mg)的MeOH/HCOOH(8.0mL/1.0mL)溶液中，加入Pd/C(3mg)，抽换气(H₂)，室温反应2.5小时。TLC检测反应完毕后，加水稀释，然后用EtOAc萃取三次，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液洗，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析(氯仿∶丙酮＝3∶1)，得化合物T10(8mg，54％)和T11(5mg，33％)。

化合物T10：红色固体，¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.66(d，J＝8Hz，1H)，7.60(d，J＝8Hz，1H)，7.24(s，1H)，3.78(d，J＝12Hz，1H)，3.40(dt，J＝20Hz，4Hz，4Hz，1H)，3.27(dt，J＝16Hz，4Hz，4Hz，1H)，1.94-2.04(m，4H)，1.35(s，3H)，1.34(s，3H)；

化合物T11：红色固体，¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.67(d，J＝12Hz，1H)，7.65(d，J＝8Hz，1H)，4.90(t，J＝8Hz，8Hz，1H)，4.38(t，J＝8Hz，4Hz，1H)，3.79(d，J＝8Hz，1H)，3.62(dd，J＝8Hz，4Hz，1H)，3.42-3.49(m，1H)，3.26-3.31(m，1H)，2.04-2.07(m，1H)，1.89-1.98(m，1H)，1.55-1.62(m，2H)，1.37(d，J＝12Hz，3H)，1.25(s，6H)；

实施例7：

化合物T12、T42、T48的制备(以化合物T48的制备为例)

在N₂气氛、-78℃条件下，向化合物T43(12mg)的DCM(1.0mL)溶液中，逐滴加入DAST(20mg)，在此温度下反应15分钟，LC检测反应完毕后，加水稀释，然后用EtOAc萃取三次，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液洗，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)，得化合物T48(8mg，68％)。化合物T48：红色固体，¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.70(d，J＝8Hz，1H)，7.64(m，2H)，7.57(d，J＝24Hz，1H)，6.28(d，J＝8Hz，1H)，5.64(t，J＝8Hz，8Hz，1H)，3.22(m，2H)，1.81(m，2H)，1.67(m，2H)，1.32(s，6H).

实施例8：

化合物T13、T49的制备(以化合物T49的合成为例)

冰水浴条件下，向化合物T43(16mg)的DCM(1.0mL)溶液中，依次加入DMAP(4mg)和丁二酸酐(10mg)，再向其中逐滴加入Et₃N(20mg)，升至室温反应3小时，TLC检测反应完毕后，加水稀释，然后用EtOAc萃取三次，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液洗，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析(氯仿∶甲醇＝30∶1)，得化合物T49(mg，％)。

化合物T49：黄色固体，¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.65(d，J＝8Hz，1H)，7.57(d，J＝8Hz，1H)，7.48(s，1H)，5.26(s，1H)，3.17(t，J＝8Hz，8Hz，1H)，2.64-2.69(M，4H)，1.79(d，J＝4Hz，2H)，1.66(d，J＝8Hz，2H)，1.58-1.63(m，2H)，1.31(s，3H)，1.25(s，3H)；

实施例9：

化合物T14的制备

冰水浴条件下，向化合物T1(16mg)的反应瓶中，逐滴加入浓硫酸(0.25mL)，然后向上述溶液中逐滴加入浓硝酸(0.1mL)的浓硫酸(0.15mL)溶液，在此温度下反应15分钟，TLC检测反应完毕后，加冰水稀释，然后用EtOAc萃取三次，合并有机相，依次用饱和碳酸氢钠溶液、水、饱和氯化钠水溶液洗，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得化合物T14(3mg，15％)。

化合物T14：红色固体，¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.52(s，2H)，4.80(t，J＝8Hz，8Hz，1H)，4.29(dd，J＝8Hz，8Hz，1H)，3.49-3.55(m，1H)，3.16(t，J＝8Hz，4Hz，1H)，1.75(d，J＝4Hz，2H)，1.61-1.63(m，2H)，1.56(s，4H)，1.30(d，J＝8Hz，3H)，1.26(s，6H)；

实施例10：

化合物T15的制备

向化合物T2(29mg，0.1mmol)的Ac₂O(5mL)溶液中，依次加入PtO₂(5mg)和吡啶(0.2mL)。加完后，抽换气(H₂)，室温条件下反应4小时。反应完毕后滤去不溶物，滤液减压浓缩至干，粗产品柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝7∶1)，得化合物T15(31mg，81％)。

化合物T15：红色固体，¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.74(d，J＝8Hz，1H)，7.42(d，J＝8Hz，1H)，4.86(t，J＝8Hz，8Hz，1H)，4.30(dd，J＝8Hz，8Hz，1H)，2.37(s，3H)，2.34(s，3H)，1.80(m，2H)，1.66(m，2H)，1.32(s，6H).

实施例11：

化合物T16的制备

在N₂气氛、-40℃条件下，向化合物T2(29mg)的THF(1.0mL)溶液中，依次滴加无水丙酮(290mg)及二乙胺(73mg)，在此温度下反应4小时后，加入水稀释，水相用EtOAc萃取三次(5mL×3)，合并有机相，依次用水、饱和氯化钠水溶液洗，无水硫酸钠干燥浓缩后柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)，得化合物T16(12mg，72％brsm)，另回收原料(15mg)。

化合物T16：黄色固体，¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.70(d，J＝4Hz，1H)，7.49(d，J＝4Hz，1H)，4.60(s，1H)，4.53(s，1H)，4.29(s，1H)，4.24(m，1H)，4.02(d，J＝8Hz，1H)，3.85(s，2H)，3.06-3.10(m，3H)，2.93(d，J＝16Hz，2H)，2.83(d，J＝12Hz，1H)，2.67(d，J＝12Hz，1H)，2.31(s，3H)，2.20(s，2H)，2.15(s，3H)，1.96(s，3H)，1.79-1.81(m，2H)，1.49-1.55(m，4H)，1.24(d，J＝4Hz，3H)，1.21(s，3H)，1.18(s，3H)；

实施例12：

化合物T17的制备

向化合物T2(29mg)的甲苯(1.5mL)溶液中，依次加入Lawesson试剂(80mg)和NaHCO₃(27mg)，升温至50℃反应3小时，TLC检测反应完毕后，过滤不溶物，滤液浓缩后直接柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝20∶1)，得化合物T17(10mg，32％)

化合物T17：¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.65(d，J＝8Hz，1H)，7.59(d，J＝8Hz，1H)，7.23(s，1H)，3.19(t，J＝8Hz，4Hz，2H)，2.27(s，3H)，1.78-1.81(m，2H)，1.43(dd，J＝16Hz，8Hz，2H)，1.31(s，6H).

实施例13：

化合物T18的制备

在N₂气氛下，向化合物T1(29mg)的乙醇(1.5mL)溶液中，加入4-羟基苯甲醛(30mg)及乙酸铵(15mg)，加热至回流反应4小时后，TLC检测反应完毕，加入水稀释，水相用EtOAc萃取三次(5mL×3)，合并有机相，依次用水、饱和氯化钠水溶液洗，无水硫酸钠干燥浓缩后柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得化合物T18(19mg，44％)。

化合物T18：¹H-NMR(500MHz，D-pyr)δ8.62(d，J＝8Hz，2H)，8.52(d，J＝8Hz，1H)，7.80(s，1H)，7.73(d，J＝8Hz，1H)，7.31(d，J＝4Hz，1H)，2.67(s，3H)，2.02(s，2H)，1.76(s，2H)，1.40(s，6H)；

实施例14：

化合物T19的制备

在室温条件下，向化合物T1(29mg)的DCM(1.5mL)溶液中，加入CaSO₄(5mg)，搅拌15分钟后，再加入m-CPBA(27mg)，加完后室温反应10小时后，滤去不溶物，浓缩后直接柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝8∶1)，得化合物T19(15mg，75％brsm)，另回收原料(10mg)。

化合物T19∶无色胶状物，¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.66(d，J＝8Hz，1H)，7.63(d，J＝8Hz，1H)，7.33(s，1H)，2.89(t，J＝8Hz，4Hz，2H)，2.28(s，3H)，1.85(m，2H)，1.71(m，2H)，1.33(s，6H)。

实施例15：

化合物T2’的制备

在N₂气氛、-40℃条件下，向化合物T1(29mg)的THF(1.5mL)溶液中，依次滴加Et₃SiH(120mg)及BF₃·Et₂O(28mg)，加完后，令其自然升至室温反应，TLC检测反应完毕后，加入饱和NaHCO₃水溶液淬灭反应，水相用EtOAc萃取三次(5mL×3)，合并有机相，依次用水、饱和氯化钠水溶液洗，无水硫酸钠干燥浓缩后柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)，得化合物T2′(21mg，75％)。

化合物T2’：红色固体，¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.64(d，J＝8Hz，1H)，7.49(d，J＝8Hz，1H)，4.89(t，J＝8Hz，8Hz，1H)，4.37(dd，J＝4Hz，8Hz，1H)，3.60(m，1H)，3.21(t，J＝8Hz，8Hz，1H)，1.79(m，2H)，1.66(m，2H)，1.36(d，J＝8Hz，3H)，1.31(s，6H)；

实施例16：

化合物T20的制备

向化合物T2(29mg，0.1mmol)的THF(1.5mL)溶液中，滴加入NaOH的水溶液(2N，0.5mL)。加完后，室温条件下超声反应4小时。反应完毕后减压蒸去THF，加水稀释，然后用EtOAc萃取三次(5mL×3)，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液洗，无水硫酸钠干燥浓缩后柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1)，得化合物T20(32mg，100％)。

化合物T20：淡黄色泡沫状物，¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.98(d，J＝10Hz，1H)，7.73(d，J＝10Hz，1H)，3.93(dd，J＝10Hz，10Hz，1H)，3.83(dd，J＝10Hz，5Hz，1H)，3.44(dd，J＝5Hz，5Hz，1H)，3.23(t，J＝5Hz，5Hz，2H)，1.81(m，2H)，1.66(m，2H)，1.30(s，6H)，1.26(d，J＝10Hz，3H).

实施例17：

化合物T21的制备

向化合物T2(29mg，0.1mmol)的EtOH(0.5mL)溶液中，滴加入氨水(33％，1mL)。加完后，室温条件下超声反应6小时后，TLC发现反应完毕，减压蒸去EtOH，加水稀释，然后用EtOAc萃取三次(8mL×3)，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液洗，无水硫酸钠干燥浓缩后柱层析(氯仿∶甲醇＝6∶1)，得化合物T21(15mg，50％)。

化合物T21：红色固体，¹H-NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.72(d，J＝8Hz，1H)，7.69(d，J＝8Hz，1H)，3.87(dd，J＝4Hz，8Hz，1H)，3.74(dd，J＝4Hz，8Hz，1H)，3.27(s，2H)，3.14(t，J＝4Hz，4Hz，1H)，3.07(dd，J＝4Hz，8Hz，2H)，1.71(d，J＝4Hz，1H)，1.61(t，J＝8Hz，8Hz，1H)，1.26(s，6H)，1.21(d，J＝4Hz，3H)；

实施例18：

化合物T22、T23的制备(以化合物T22的合成为例)

在N₂气氛、-40℃条件下，向化合物T21(15mg)及DMAP(4mg)的DCM(1.5mL)溶液中，依次滴加Et₃N(15mg)和苯甲酰氯(12mg)，加完后令其自然升温反应1.5小时后，TLC发现反应完毕，加水淬灭反应，然后用EtOAc萃取三次(8mL×3)，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液洗，无水硫酸钠干燥浓缩后柱层析(氯仿∶甲醇＝30∶1)，得化合物T23(13mg，56％)。

化合物T23：红色固体，红色固体，¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.11(d，J＝8Hz，1H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，7.39-7.64(m，5H)，5.99(s，1H)，4.64(dd，J＝8Hz，4Hz，1H)，4.52(t，J＝8Hz，8Hz，1H)，3.25(m，1H)，3.18(t，J＝8Hz，8Hz，1H)，2.03(s，2H)，1.75-1.80(m，2H)，1.63-1.67(m，4H)，1.47(d，J＝4Hz，3H)，1.29(s，3H)，1.25(s，3H)；

实施例19：

化合物T24、T25的制备(以化合物T25的合成为例)

在N₂气氛、-40℃条件下，向化合物T21(15mg)及DMAP(3mg)的DCM(1.0mL)溶液中，依次滴加DIPEA(38mg)和MsCl(17mg)，加完后令其自然升温至室温反应3.5小时后，TLC发现反应完毕，加水淬灭反应，然后用EtOAc萃取三次(8mL×3)，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液洗，无水硫酸钠干燥浓缩后柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得化合物T24(11mg，62％)。

化合物T24：红色固体，¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)δ8.21(d，J＝4Hz，2H)，7.72(d，J＝4Hz，2H)，4.62(dd，J＝16Hz，4Hz，1H)，4.02(d，J＝16Hz 1H)，3.56(s，3H)，3.31(dd，J＝12Hz，4Hz，2H)，1.80(dt，J＝12Hz，4Hz，4Hz，2H)，1.67(t，J＝8Hz，8Hz，2H)，1.42((d，J＝8Hz，3H)，1.34(s，3H)，1.32(s，3H).

化合物T25：¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.72(m，2H)，7.64(d，J＝5Hz，1H)，7.55(m，2H)，7.22(s，1H)，4.30(t，J＝10Hz，5Hz，2H)，4.09(d，J＝5Hz，1H)，3.18(t，J＝10Hz，5Hz，1H)，2.26(s，3H)，1.79(m，2H)，1.64(m，2H)，1.31(s，6H)，1.25(s，3H)；

实施例20：

化合物T26、T27的制备(以化合物T26的合成为例)

Step1：称取化合物T20(31mg)溶于DMSO(1mL)中，然后分两批向其中加入IBX(28mg/批)，在室温条件下反应3小时后，TLC发现反应完毕，向反应体系中加水稀释，然后用EtOAc萃取三次，合并有机相，依次用水、饱和氯化钠水溶液洗，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得C-16位羟基氧化产物(20mg，65％)。

Step 2：称取Step 1中得到的氧化产物(16mg)溶于0.5mL冰醋酸中，然后一次向其中加入醋酸铵(38mg)，加热至60℃反应1小时后，TLC检测发现反应完毕，向反应液中加入水淬灭反应，再用EtOAc萃取三次，合并有机相，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)，得化合物T26(12mg，79％)

化合物T26：黄色固体，¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ9.39(s，1H)，8.09(d，J＝8Hz，1H)，7.70(d，J＝8Hz，1H)，6.82(s，1H)，3.37(t，J＝8Hz，4Hz，2H)，2.42(s，2H)，1.82(m，2H)，1.67(m，2H)，1.62(s，3H)，1.34(s，6H)；

化合物T27：¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.54(m，3H)，7.39(m，2H)，7.13(d，J＝8Hz，1H)，6.48(s，1H)，6.43(d，J＝8Hz，2H)，3.11(t，J＝8Hz，4Hz，2H)，2.35(s，2H)，1.72(m，2H)，1.25(s，3H)，1.19(s，6H)；

实施例21：

化合物T28的制备

在N2气氛、-40℃条件下向化合物T1(29mg)的DCM(1mL)溶液中，加入NIS(34mg)，五分钟后再向体系中滴加TFA(11mg)，在此温度下反应3小时后，TLC检测反应完毕，向体系中加入饱和亚硫酸钠水溶液淬灭反应，加水稀释后，用EtOAc萃取三次，合并有机相，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝15∶1)，得化合物T28(38mg，92％)化合物T28：红色固体，¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.63(d，J＝10Hz，1H)，7.55(d，J＝5Hz，1H)，3.17(t，J＝5Hz，5Hz，2H)，2.22(s，2H)，1.80(m，2H)，1.66(m，2H)，1.31(s，6H)，1.25(s，3H)；

实施例22：

化合物T29、T30、T31、T32、T33、T34、T35的制备(以化合物T29的合成为例)

在N₂气氛下，向化合物T28(21mg)、苯硼酸(10mg)及K₂CO₃的DMF/H₂O(1mL/0.2mL)中加入Pd(PPh₃)₄(5mg)，然后加热至80℃反应3小时后，TLC检测反应完毕，冷却至室温，加水稀释后，用EtOAc萃取三次，合并有机相，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝8∶1)，得化合物T29(18mg，98％)。

化合物T29：红色固体，¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.63(d，J＝8Hz，2H)，7.57(s，2H)，7.43，7.41(t，J＝8Hz，8Hz，2H)，7.31(t，J＝8Hz，8Hz，1H)，3.12(t，J＝8Hz，8Hz，2H)，2.45(s，3H)，1.73(m，2H)，1.60(m，2H)，1.25(s，6H).

化合物T30：¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.67(m，2H)，7.64(m，2H)，7.18(t，J＝10Hz，10Hz，2H)，3.19(t，J＝5Hz，5Hz，2H)，2.50(s，3H)，1.79(m，2H)，1.66(m，2H)，1.32(s，6H)。

化合物T31：红色固体，¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ9.20(s，1H)，9.08(s，1H)，7.69(m，3H)，7.56，7.54(t，J＝8Hz，8Hz，1H)，7.47(m，2H)，3.19(t，J＝8Hz，4Hz，1H)，2.57(s，2H)，1.81(m，2H)，1.67(m，1H)，1.33(s，3H)，1.25(s，6H)。

化合物T32：红色固体，¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.75(d，J＝4Hz，1H)，7.83(d，J＝4Hz，1H)，7.73(s，1H)，7.67(m，2H)，7.55(t，J＝8Hz，8Hz，1H)，7.46(dt，J＝8Hz，8Hz，4Hz，2H)，3.21(t，J＝8Hz，8Hz)，2.69(s，3H)，1.82(m，2H)，1.68(m，2H)，1.34(s，6H)；

化合物T33：¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.62(dd，J＝20Hz，15Hz，2H)，7.57(m，1H)，7.46(m，2H)，3.18(t，J＝5Hz，5Hz，2H)，2.48(s，3H)，1.80(m，2H)，1.67(m，2H)，1.32(s，6H)；

化合物T34：红色固体，¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ9.34(s，1H)，8.65(s，1H)，8.10(d，J＝8Hz，1H)，8.00(d，J＝8Hz，1H)，7.79(t，J＝8Hz，8Hz，1H)，7.71(t，J＝8Hz，8Hz，1H)，7.64(dd，J＝16Hz，8Hz，2H)，3.23(t，J＝4Hz，4Hz，2H)，2.36(s，3H)，1.82(m，2H)，1.69(m，2H)，1.32(s，6H)，1.25(s，3H)

化合物T35：¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.64(d，J＝8Hz，1H)，7.56(d，J＝8Hz，1H)，7.23(s，1H)，3.19(t，J＝8Hz，8Hz，2H)，2.27(s，3H)，1.80(m，2H)，1.66(m，2H)，1.56(s，2H)，1.31(s，3H)，1.26(s，3H)；

实施例23：

化合物T38、T39的制备

N₂条件下，向化合物T1(29mg)的1，4-二氧六环(0.5mL)溶液中加入甲醛水溶液(38％，0.5mL)，再向其中加入一滴浓盐酸后，加热至回流反应2小时后，TLC检测反应完毕，冷却至室温，加水稀释后，用EtOAc萃取三次，合并有机相，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1→1∶1)，得化合物T38和T39(20mg，63％)。

化合物T38：红色固体，¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.60(d，J＝8Hz，1H)，7.52(d，J＝8Hz，1H)，4.66(s，2H)，3.16(t，J＝8Hz，4Hz，2H)，2.27(s，3H)，1.79(m，2H)，1.65(m，2H)，1.30(s，6H)；

化合物T39：¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.56(d，J＝8Hz，1H)，7.42(d，J＝8Hz，1H)，4.62(s，2H)，3.89(t，J＝4Hz，4Hz，2H)，3.09(t，J＝8Hz，4Hz，2H)，2.95(t，J＝8Hz，4Hz，2H)，1.78(m，2H)，1.65(m，2H)，1.31(s，6H)

实施例24：

化合物T40、T46的制备(以化合物T40的制备为例)

Step1：室温条件下，向化合物T38(16mg)的DMSO(0.8mL)溶液中，一次加入IBX(28mg)，室温反应4小时后，TLC检测反应完毕，加水稀释后，用EtOAc萃取三次，合并有机相，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)，得氧化产物(12mg，72％)。

Step2：在N₂气氛下，向NaClO₂(9mg)和NaH₂PO₄(8mg)的水(0.15mL)溶液中，滴加上步氧化产物(5mg)的丙酮(0.3mL)溶液，然后向其中加入异戊烯(7mg)。混合液在室温条件下反应1小时后，TLC检测反应完毕后，加少量饱和亚硫酸钠水溶液淬灭反应，加水稀释后，用EtOAc萃取三次，合并有机相，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析(氯仿∶甲醇＝10∶1)，得氧化产物(4mg，82％)。

化合物T40：¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ9.88(s，1H)，7.97(d，J＝8Hz，1H)，7.68(d，J＝8Hz，1H)，2.94(t，J＝8Hz，8Hz，2H)，2.66(s，3H)，2.09(t，J＝8Hz，8Hz，2H)，1.81(m，2H)，1.36(s，6H).

实施例25：

化合物T43的制备

向化合物T1(147mg)的冰醋酸(1mL)溶液中，一次加入SeO₂(55mg)。加完后，抽换气(Ar2)，加热至130℃反应15分钟。TLC检测反应完毕后，加水稀释，用EtOAc萃取三次，合并有机相，依次用水、饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1)，得化合物T43(127mg，82％)。化合物T43：红色固体，¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.66(d，J＝8Hz，1H)，7.58(d，J＝8Hz，1H)，7.39(s，1H)，4.66(s，2H)，3.18(t，J＝4Hz，4Hz，2H)，1.79(m，2H)，1.65(m，2H)，1.60(m，2H)，1.31(s，6H)；

实施例26：

化合物T45的制备

在N₂气氛、冰水浴条件下，向化合物T43(9mg)和DMAP(2mg)的THF(1mL)溶液中，依次滴加Et₃N(12mg)和MsCl(7mg)。加完后，自然升至室温反应2小时，再向反应液中加入TBAI(2mg)和Et₃N(6mg)，加完后室温搅拌10分钟，然后滴加苯胺(8mg)，继续反应2.5小时后，TLC检测反应完毕，加水稀释，用EtOAc萃取三次，合并有机相，依次用水、饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)，得化合物T45(5mg，34％)。

化合物T45：红色固体，¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.63(d，J＝8Hz，1H)，7.53(d，J＝8Hz，1H)，7.40(s，1H)，7.16(m，2H)，6.70(t，J＝8Hz，8Hz，1H)，6.66(d，J＝8Hz，2H)，4.39(s，2H)，3.18(t，J＝4Hz，4Hz，1H)，1.79(m，2H)，1.65(m，2H)，1.30(s，6H)，1.25(s，2H)；

实施例27：

化合物T51、T52的制备(以化合物T51的合成为例)

向化合物T5(7.5mg)的THF(1mL)溶液中，依次加入Et₃N(8mg)、TBAI(2mg)、t-BuNH₂(5mg)。室温反应4小时，TLC检测反应完毕后，加水稀释，用EtOAc萃取三次，合并有机相，依次用水、饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析(氯仿∶甲醇＝20∶1)，得化合物T51(4.5mg，61％)。

化合物T51：红色固体，¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.73(d，J＝12Hz，1H)，7.70(s，1H)，7.49(s，2H)，6.24-6.27(m，1H)，3.95(s，3H)，3.22(s，4H)，2.18(m，2H)，1.30(s，9H)，1.18(s，3H)，1.11(s，3H)。

以下通过试验例来进一步阐明本发明丹参酮衍生物的药理作用：

试验例1：

1体外小鼠或人源11β-HSD1抑制实验方法：

采用分子生物学方法，将购自NIH Mammalian Gene Collection(NIH MGC)的小鼠或人11β-HSD1基因序列克隆至PcDNA3-VSVtag真核表达载体，经限制性酶切及DNA测序验证后转染于HEK293细胞，经G418(0.75g/L)筛选后获得稳定转染的混合细胞克隆。胰酶消化混合细胞克隆并以单细胞接种96孔培养板，同时给予条件性细胞培养液(HEK293细胞培养上清液)，经14-20天后获得单细胞增殖克隆。扩增后胰酶消化收集细胞，超声破碎后离心(4℃，1500rpm，10min)，上清液再次超速离心(4℃，100000g，1h)，磷酸盐缓冲液(40mM Na₂HPO₄，1mMEDTA，5％glycerol)重悬沉淀后获得的小鼠或人11β-HSD1纯化酶，-80℃冻存备用。

采用SPA(Scintillation proximity assay)即液闪接近测定技术，测定化合物对小和人11-β-HSD1的抑制作用，计算抑制率及IC50值。对从实施例1-27得到的所有衍生物T4-T52进行了对小鼠和人11-β-HSD1抑制作用的初筛，选择1μM作为初筛浓度(筛选结果见表1)，对部分初筛抑制率超过50％的衍生物进一步进行量效关系研究，计算IC50(筛选结果见表2)。

2、实验结果：活性测试结果表明，1)在A环的C-1、C-2位引入羟基或烷氧基对人源及鼠源的11β-HSD1活性均较母体化合物有所下降，以人源11β-HSD1下降尤其明显；而引入烯基后，对鼠源的11β-HSD1活性有一定的提高，但对人源11β-HSD1活性下降。在C-3位引入羰基后，对人源11β-HSD1活性提高一倍，但对鼠源11β-HSD1活性明显下降；而且此位置的羟基和氟原子取代对人源及鼠源的11β-HSD1活性均不利。因此，可得出结论：A环的极性官能团对活性不利。

2)B环的硝基取代，对人源及鼠源的11β-HSD1活性均下降，其中人源11β-HSD1下降尤其明显。

3)针对C环邻二双羰基的所有改造活性均大幅下降，甚至完全消失，因此认为，邻二双羰基是此类化合物的关键药效团。

4)D环对人源和鼠源的11β-HSD1活性的影响并不一致，D环开环时(邻二双羰基结构不变的前提下)，鼠源11β-HSD1活性并未下降，反而有所升高；而对人源的11β-HSD1则大幅下降。在C-17位引入羟基，几乎完全保留对人源和鼠源的11β-HSD1抑制活性，而且此化合物的水溶性大幅提高，类药性明显增强，是比较有意思的改造；而在此位置引入非极性的F原子则活性几乎消失。C-15位引入芳基官能团在提高鼠源11β-HSD1抑制活性的同时也可增强分子的类药性。D环的呋喃环变为吡咯环时，对两种来源的11β-HSD1活性均大幅下降。

5)对丹参酮类化合物而言，人源的11β-HSD1对多种引入的官能团比较敏感，而鼠源的11β-HSD1的官能团容忍度则较好。

表1  丹参酮衍生物初筛结果

表2  部分丹参酮衍生物复筛结果

表3  文中涉及的缩写语一览表

Ac      乙酰基

AIBN    偶氮二异丁氰

t-Bu    叔丁基

DAST      二乙氨基三氟化硫

DBU       1，8-二氮杂二环-双环(5，4，0)-7-十一烯

DCM       二氯甲烷

DMAP      4-N，N-二二甲氨基吡啶

DMF       N，N-二甲基甲酰胺

DMP       Dess-Martin氧化剂

DMSO      二甲基亚砜

IBX       2-碘酰基苯甲酸

Ms        甲磺酰基

m-CPBA    间氯过氧苯甲酸

NBS       N-溴代丁二酰亚胺

NIS       N-碘代丁二酰亚胺

NMO       N-甲基吗啉-N-氧化物

PE       石油醚

PTSA     对甲苯磺酸

TBAI     四丁基碘化铵

TFA      三氟乙酸

THF      四氢呋喃

Ts       对甲苯磺酰基

制剂实施例1：

按实施例1-27的方法先制得丹参酮衍生物T3-T52，以及利用有机酸(酒石酸，柠檬酸，甲酸，乙二酸等)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸等)制成的盐，按常规加注射用水，精滤，灌封灭菌制成注射液。

制剂实施例2：

按实施例1-27的方法先制得丹参酮衍生物T3-T52，以及利用有机酸(酒石酸，柠檬酸，甲酸，乙二酸等)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸等)制成的盐，将其溶于无菌注射用水中，搅拌使溶，用无菌抽滤漏斗过滤，再无菌精滤，分装于2安瓿中，低温冷冻干燥后无菌熔封得粉针剂。

制剂实施例3：

将实施例1-27所得到的丹参酮衍生物T3-T52，以及利用有机酸(酒石酸，柠檬酸，甲酸，乙二酸等)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸等)制成的盐，与赋形剂重量比为9∶1的比例加入赋形剂，制成粉剂。

制剂实施例4：

将实施例1-27所得到的丹参酮衍生物T3-T52，以及利用有机酸(酒石酸，柠檬酸，甲酸，乙二酸等)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸等)制成的盐，按其与赋形剂重量比为1∶5-1∶10的比例加入赋形剂，制粒压片。

制剂实施例5：

将实施例1-27所得到的丹参酮衍生物T3-T52，以及利用有机酸(酒石酸，柠檬酸，甲酸，乙二酸等)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸等)制成的盐，按常规口服液制法制成口服液。

制剂实施例6：

将实施例1-27所得到的丹参酮衍生物T3-T52，以及利用有机酸(酒石酸，柠檬酸，甲酸，乙二酸等)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸等)制成的盐，按其与赋形剂重量比为5∶1的比例加入赋形剂，制成胶囊或颗粒剂或冲剂。

制剂实施例7：

将实施例1-27所得到的丹参酮衍生物T3-T52，以及利用有机酸(酒石酸，柠檬酸，甲酸，乙二酸等)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸等)制成的盐，按其与赋形剂重量比为3∶1的比例加入赋形剂，制成胶囊或颗粒剂或冲剂。

Claims (9)

1.通式(I)所示的丹参酮衍生物或其药理学上容许的盐，

R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆分别独立选自氢、卤素、羟基、酮羰基、低级烷氧基、环烷氧基、低级烷基取代的碳酰氧基、环烷基取代的碳酰氧基、芳基或杂环芳基取代的碳酰氧基、低级烷基取代的羰基、环烷基取代的羰基、芳基或杂环芳基取代的羰基、氨基、氰基、叠氮、低级烷基取代的胺基、环烷基取代的胺基、芳基或杂环芳基取代的胺基、低级烷基取代的酰胺基、环烷基取代的酰胺基、芳基或杂环芳基取代的酰胺基、低级烷基取代的磺酰胺基、环烷基取代的磺酰胺基、芳基或杂环芳基取代的磺酰胺基、低级烷基取代的磺酰基、环烷基取代的磺酰基、芳基或杂环芳基取代的磺酰基、OC(＝O)N(R₁₃)₂、O(CH₂)mN(R₁₃)₂、OC(＝O)(CH₂)mCOOR₁₃，其中m＝1-5，R₁₃为氢或低级烷基；

R₇分别独立选自氢、卤素、芳基或杂环芳基、低级烷基取代的羰基、环烷基取代的羰基、芳基或杂环芳基取代的羰基、硝基、氨基、低级烷基取代的胺基、环烷基取代的胺基、芳基或杂环芳基取代的胺基、低级烷基取代的酰胺基、环烷基取代的酰胺基、芳基或杂环芳基取代的酰胺基、低级烷基取代的磺酰胺基、环烷基取代的磺酰胺基、芳基或杂环芳基取代的磺酰胺基、低级烷基取代的磺酰基、环烷基取代的磺酰基、芳基或杂环芳基取代的磺酰基；

R₈、R₉分别独立选自氢、羧基、甲基、羟基亚甲基、低级烷氧基亚甲基、环烷氧基亚甲基、低级烷基取代的碳酰氧基亚甲基、环烷基取代的碳酰氧基亚甲基、芳基或杂环芳基取代的碳酰氧基亚甲基、低级烷基取代的胺基亚甲基、芳基取代的胺基亚甲基、低级烷基取代的酰胺基亚甲基、芳基取代的酰胺基亚甲基、氟代亚甲基、低级烷基取代的磺酰胺基亚甲基、环烷基取代的磺酰胺基亚甲基、芳基或杂环芳基取代的磺酰胺基亚甲基；

R₁₀、R₁₁分别独立选自氢、卤素、羧基、芳基或杂环芳基、羟基亚甲基、低级烷氧基亚甲基、环烷氧基亚甲基、低级烷基取代的碳酰氧基亚甲基、环烷基取代的碳酰氧基亚甲基、芳基或杂环芳基取代的碳酰氧基亚甲基、低级烷基取代的胺基亚甲基、芳基取代的胺基亚甲基、低级烷基取代的酰胺基亚甲基、芳基取代的酰胺基亚甲基、氟代亚甲基、低级烷基取代的磺酰胺基亚甲基、环烷基取代的磺酰胺基亚甲基、芳基或杂环芳基取代的磺酰胺基亚甲基、低级烷基取代的羰基、环烷基取代的羰基、芳基或杂环芳基取代的羰基、硝基、氨基、低级烷基取代的胺基、环烷基取代的胺基、芳基或杂环芳基取代的胺基、低级烷基取代的酰胺基、环烷基取代的酰胺基、芳基或杂环芳基取代的酰胺基、低级烷基取代的磺酰胺基、环烷基取代的磺酰胺基、芳基或杂环芳基取代的磺酰胺基；

R₁₂分别独立选自氢、烷基、环烷基、芳基或杂环芳基、低级烷基取代的羰基、环烷基取代的羰基、芳基或杂环芳基取代的羰基、低级烷基取代的磺酰基、环烷基取代的磺酰基、芳基或杂环芳基取代的磺酰基；

或R₁、R₃形成共价键；

或R₂、R₄形成共价键；

或R₈、R₁₀形成共价键；

或R₉、R₁₁形成共价键；

或R₅、R₆形成＝X₆，其中X₆选自C、O、S、NH；

X₁、X₂、X₃、X₄分别独立选自酰氧基、烷氧基、羟基、β-羰基取代的烷基；

或X₁、X₃形成共价键；

或X₂、X₄形成共价键；

或X₁、X₂形成＝X₆，其中X₆选自C、O、S、NH；

或X₁、X₂形成＝X₆，其中X₆选自C、O、S、NH；

或X₁、X₂、X₃、X₄形成2-取代咪唑环、2-取代的噻唑环、2，3-取代的噁唑、2，3的哌嗪环；

或X₁、X₂、X₃、X₄形成C(＝O)OC(＝O)、C(＝O)NR₁₄C(＝O)，其中R₁₄选自氢或低级烷基；

X₃选自碳、氮、氧、硫原子。

2.如权利要求1所示的通式(I)丹参酮衍生物或其药理学上容许的盐，为下述结构式所示的化合物T4、T6、T7、T8、T9、T14、T21、T24、T25、T28、T31、T38、T39、T43、T51，

3.如权利要求1或2任一项所述的丹参酮衍生物的药理学上容许的盐，包括与无机酸盐酸、硝酸、硫酸、磷酸、氢溴酸；或者有机酸马来酸、富马酸、酒石酸、乳酸、柠檬酸、乙酸、甲磺酸、对甲苯磺酸，己二酸，棕榈酸，单宁酸；或者碱金属锂，钠、钾；碱土金属钙、镁；赖氨酸碱性氨基酸成的盐。

4.药物组合物，其中含有治疗有效量的权利要求1通式(I)丹参酮类化合物或其药理学上容许的盐和药学上可接受的载体。

5.权利要求1所示的通式(I)丹参酮衍生物的制备方法，包括自由基介导的消除反应、烯丙位氧化、羟基氟代、苯环硝化、邻二羰基参与的三组分反应合成咪唑、催化氢化、苄位氧化、芳环卤代、Suzuki交叉偶联反应、锇酸钾催化的双羟化反应、Bransted酸催化的Fridiel-Craft反应、二酮合成吡咯反应。

6.如权利要求5所示的通式(I)丹参酮衍生物的制备方法，其特征在于由自由基介导的消除反应合成化合物T4，由SeO₂参与的烯丙位氧化合成化合物T7和T8，由SeO₂参与的苄位氧化合成化合物T43，Pd(0)催化的Suzuki偶联反应合成化合物T29、T30、T31、T32、T33、T34。

7.权利要求1所示的通式(I)丹参酮衍生物或其药理学上容许的盐在制备11β-HSD1选择性抑制剂药物中的应用。

8.权利要求1所示的通式(I)丹参酮衍生物或其药理学上容许的盐在制备治疗糖尿病的药物中的应用。

9.权利要求1所示的通式(I)丹参酮衍生物或其药理学上容许的盐在制备治疗高血压、肥胖、老年痴呆病的药物中的应用。

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