CN102599346A - 谷氨酸铜或其衍生物作为动物促生长饲料添加剂的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种谷氨酸铜或其衍生物作为动物促生长饲料添加剂的应用。本发明首次发现谷氨酸铜具有低水溶性、较强的耐酸能力和高生物利用度，将谷氨酸铜作为促生长饲料添加剂，较其它铜源，如硫酸铜、碱式氯化铜和甘氨酸铜等，具有更高的安全性和抗菌活性，铜离子的添加量可减少60～80％，可降低生产成本并减少对环境的污染、同时降低高铜对动物的毒副作用。

Description

谷氨酸铜或其衍生物作为动物促生长饲料添加剂的应用

本发明专利申请是申请号为“201010122625.7”的分案申请，原申请的申请日为“2010年03月12日”，申请号为“201010122625.7”，发明名称为“谷氨酸铜或其衍生物作为动物促生长饲料添加剂的应用”。

技术领域

本发明特别涉及一种谷氨酸铜或其衍生物作为动物促生长饲料添加剂的应用，属于饲料领域。

背景技术

铜是动物必需的微量元素之一，参与动物的造血、新陈代谢、生长繁殖以及抗病等活动。动物对铜的营养需要量在5-8mg/kg，但自1945年发现高铜能明显地提高猪的生长性能以来，目前在幼龄仔猪阶段均采用200-250ppm(质量)的高铜(以铜离子计)，高铜具有凝固蛋白质、减少微生物的增殖、刺激神经肽Y(NPY)的分泌的作用，从而促进动物采食，提高消化酶活性，最终提高生长性能作用。于是猪用高铜在20世纪50年代至今已成为许多营养学家的“习惯”。

目前，仔猪饲料高铜的来源主是硫酸铜、碱式氯化铜或碱式硫酸铜等无机铜源，无机铜源本身的水溶性或其能在猪胃中被胃酸快速分解，从而大量的游离铜铜离子在胃中快速释放和被吸收，超过动物的生量限量从而导致毒性反应。然而被吸收的大量的游离铜离子中，只有少量的铜离子能到达小肠中后部起抗微生物的作用，从而需要在饲料中添加高浓度的铜离子才能起到抗菌促生长的作用。但是，使用高铜带来许多副作用，主要表现为：(1)高铜对机体脏器的损害，使用200ppm高铜会导致肝细胞肿大，胞浆颗粒变性，肾小球肿大，肾小管肿胀，肾小囊渗出蛋白，心肌纤维颗粒变性，脾下淋巴细胞减少，平滑肌纤维增生，通过试验证明了高铜断奶仔猪发生皮炎肾病综合病的比例比低铜高5％以上，说明高铜是猪皮炎肾病综合症的诱因之一，也是引起猪抵抗力下降的原因之一；(2)高铜在器官中残留超标，影响食品的安全性。我国肉类食品中铜限量卫生标准(GB15199-94)不超过10mg/kg，但在仔猪基础日粮中添加250ppm高铜，肝脏中铜含量为186.27mg/kg；(4)高铜能干扰其它营养成份的吸收，如高铜能氧化饲料中维生素与油脂造成猪维生素缺乏，皮毛粗乱及饲料品质下降；高铜拮抗铁、锌吸收造成缺铁性贫血及皮肤粗糙，被毛脱等缺锌症状；(4)高铜还有巨大的环境压力，以一个万头猪场计，每年排出铜的化合物达2.5吨，高铜粪水污染地下水源，使淡水鱼死亡，瓜果、蔬菜作物不育或产量低。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中所使用的无机铜源作为动物促生长饲料添加剂的不足之处，提供一种谷氨酸铜或其衍生物作为动物促生长饲料添加剂的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种谷氨酸铜或其衍生物作为动物促生长饲料添加剂的应用。

所述的谷氨酸铜包括：谷氨酸与铜按摩尔比2∶1或1∶1形成的螯合物。

所述的衍生物包括：

(1)谷氨酸铜与不同酸形成的不同盐，如谷氨酸铜的盐酸盐、谷氨酸铜的磷酸盐和谷氨酸铜的硫酸盐等；

(2)谷氨酸成单酯后与铜离子形成的内络盐或螯合物；

(3)N-氨甲酰谷氨酸及不同盐、酰胺与铜离子形成的螯合物或盐；

(4)以谷氨酸铜为基础形成的不同shiff碱；

(5)以谷氨酸铜为基础形成的不同酰胺化合物；

(6)以谷氨酸和氨基酸中的一种形成的二肽与铜离子形成的螯合物；

(7)谷氨酰胺与铜离子形成的螯合物或盐。

所述的动物包括各种养殖动物，如：猪、鸡、鸭、鹅、肉牛、奶牛、羊、各种鱼虾类、狐、貂、貉等各种人工饲养动物。

所述谷氨酸铜或其衍生物作为动物促生长饲料添加剂的应用，应用于动物的不同生长阶段。

所述的动物饲料为全价配合饲料时，添加谷氨酸铜作为生长促进剂，谷氨酸铜的用量以铜元素计，其含量为20～100ppm。

本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：本发明首次发现谷氨酸铜或其衍生物作为动物促生长饲料添加剂的应用效果。本发明发现谷氨酸铜具有低水溶性、较强的耐酸能力和高生物利用度，将谷氨酸铜作为促生长饲料添加剂，较其它铜源(包括硫酸铜、碱式氯化铜和甘氨酸铜等)具有更高的安全性和抗菌活性，铜离子的添加量可减少60～80％，可降低生产成本并减少对环境的污染、同时降低高铜对动物的毒副作用。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1

(1)合成谷氨酸铜：

A、10％谷氨酸钠溶液的配制：称取100克谷氨酸钠(化学纯)溶于1000ml水中；

B、13.37％硫酸铜溶液的配制：准确精量133.7克五水硫酸铜(化学纯)溶于1000ml水中；

C、将10％谷氨酸钠溶液和13.37％硫酸铜溶液各1000ml混合，接着用NaOH溶液调节前述混合溶液的pH值至7.0，室温搅拌反应2h，离心，取沉淀，用水悬浮离心洗涤沉淀3遍，接着100℃烘干至恒重，得到117.4g谷氨酸铜，得率为96.31％。

(2)对步骤(1)得到的谷氨酸铜的谷氨酸和铜离子的含量分别测定：

A、铜离子含量的测定：精确称取1.0g谷氨酸铜，加水80ml，然后用0.1M HCl调pH值至2.0，搅拌至谷氨酸铜完全溶解，用原子吸收方法测定溶液中铜离子的含量，测得铜离子浓度为2.807mg/ml。

B、谷氨酸的含量测定：精确称取1.0克谷氨酸铜，加水80ml，然后用0.1MHCl调pH值至2.0，搅拌至谷氨酸铜全部溶解后，用氨基酸分析仪测定谷氨酸的含量，测得谷氨酸的含量为6.404mg/ml。

从而确定谷氨酸铜中铜离子和谷氨酸的摩尔比为1∶1，谷氨酸铜中结晶水含量为7.89％，因此，步骤(1)得到的谷氨酸铜的分子式为C₅H₈NO₄Cu·H₂O，分子量为228。

(3)步骤(1)得到的谷氨酸铜的体外抗菌活性研究

①试验材料

A、培养基：LB液体培养基：10g胰蛋白胨，5g酵母抽提物和10g NaCl溶于800ml双蒸水，用1M NaOH调pH值至7.4后定容至1000mL，高压灭菌20min；

B、菌株：大肠杆菌JM109、鼠伤寒沙门氏菌50772和金黄色葡萄球菌PNB14，均购自中国兽药监察所菌种保存中心；

C、试管：10ml带盖玻璃试管；

D、药物：CuSO₄·5H₂O溶液：0.2％(以铜离子计，质量/体积百分比浓度，下同)；碱式氯化铜(Cu₂Cl.(OH)₃)：0.2％(以铜离子计，用0.01M盐酸溶解)；谷氨酸铜溶液：0.2％(用DMSO溶解，以铜离子计)；

②试验方法：试管法测定硫酸铜、碱式氯化铜与谷氨酸铜对大肠杆菌JM109、鼠伤寒沙门氏菌50772和金黄色葡萄球菌PNB14的抗菌活性：

A、设9小组，每小组包括12支无菌试管，编号1～12；每大组设三个平行，即包括三个小组；

B、无菌条件下，分别加入2.0ml LB液体培养基至第1到11管；

C、将制备好的硫酸铜、碱式氯化铜或谷氨酸铜待检溶液分别加2.0ml至第1管，将第1管混合后取2.0ml至第3管，依次至第10管，再从第10管取2.0毫升丢去，第11管为不加抗药物作阳性对照；

C、另准备LB液体培养基管(第12管)2.0ml不加药物和细菌，作为阴性对照；

D、每大组的第1-11管分别加入供测试的大肠杆菌JM109、鼠伤寒沙门氏菌50772和金黄色葡萄球菌PNB14，每管5.0微升菌液(菌的浓度分别约为10⁸cfu/ml，菌龄为16-18小时)；

E、37℃静止培养16小时，肉眼观察有无细菌生长，不出现细菌生长的最后一管中药物浓度即是药物对相应细菌的最小抑菌浓度(μg/ml)；阳性对照应可见混浊生长，阴性对照应澄清。

③试验结果：

以铜离子计，硫酸铜和碱式氯化铜对大肠杆菌JM109、鼠伤寒沙门氏菌50772和金黄色葡萄球菌PNB14的最小抑菌浓度为500μg/ml、500μg/ml和500μg/ml(以铜离子计)，而谷氨酸铜对大肠杆菌JM109、鼠伤寒沙门氏菌50772和金黄色葡萄球菌PNB14的最小抑菌浓度为分别为125μg/ml、125μg/ml和125μg/ml(以铜离子计)，抗菌活性提高了4倍。

表1 硫酸铜和谷氨酸铜的抗菌活性比较研究结果

(4)步骤(1)得到的谷氨酸铜的安全性测定(大鼠LD₅₀测定、改进寇氏法)

①试验材料

大鼠：购自南方医科大学实验动物中心，体重120～150克，雌雄各半。

供试验样品：五水硫酸铜、碱式氯化铜和谷氨酸铜

器材：注射器、灌胃针头、鼠笼

②试验方法

A、通过预实验得到引起动物0％(Dn)和100％(Dm)死亡的剂量，其中五水硫酸铜、碱式氯化铜和谷氨酸铜的Dn和Dm见表2。

表2 不同铜源化合物大鼠LD50预试验结果(Dn和Dm)

化合物	Dn(mg/kg体重)	Dm(mg/kg体重)
			五水硫酸铜	1000	1800
碱式氯化铜	1200	2000
			谷氨酸铜	10000	15000

B、本实验要求最大反应率为100％，最小反应率为0％，或至少反应率接近100％或0％；组间剂量比值用根据上述各化合物的Dn和Dm值，在Dn至Dm间平均设置8个剂量，每组10只大鼠。如实验中出现相邻剂量有重复的100％和0％反应率时，应将靠边的组弃去不计，使大剂量组只有一个100％的反应率，小剂量组也只有一个0％的反应率；分组完毕后，分组灌服不同剂量的硫酸铜、碱式氯化铜或谷氨酸铜；给药后观察7天，观察期间逐日记录动物的毒性反应情况和死亡动物的分布

C、计算方式根据正式实验各组死亡率按下列公式不同铜源化合物对大鼠的LD50和可信限(P＝0.95)

a、当最小剂量组的死亡率为0％，最大剂量组的死亡率为100％时，按下列公式计算LD50：

LD₅₀＝lg^-1[Xm-i(∑p-0.5)]

b、当最小剂量组的死亡率大于0％而又小于30％，或最大剂量组的死亡率小于100％而又大于70％时，可按下列校正公式计算LD₅₀：

$L{D}_{50}=1g^{-1}\[\mathrm{Xm}-i(\mathrm{\Σp}-\frac{3-\mathrm{Pm}-\mathrm{Pn}}{4})\]$

LD₅₀的标准误： $S_{x50}=i\sqrt{\frac{P-P^2}{n-1}}$

LD₅₀的平均可信限：LD₅₀±4.5S_x50LD₅₀(P＝0.95)；

上式中，Xm为最大剂量组剂量的对数，i为相邻两组对数剂量之差值(大剂量组减小剂量组)，Pm为最大剂量组死亡率，Pn为最小剂量组死亡率，P为各组死亡率，n为每组动物数。

D、试验结果

以铜离子计，大鼠对所有受试样品的口服半数死剂量(LD50)见表3，结果显示谷氨酸铜比硫酸铜和碱式硫酸铜对的安全性分别提高10倍和4倍左右。

表3 硫酸铜、碱式氯化铜和谷氨酸铜对大鼠的口服半数致死量研究结果

受试样品	LD50(mg/kg体重，以化合物计)	LD50(mg/kg体重，以铜离子计)
			五水硫酸铜	1300	332.8
碱式氯化铜	1500	900
			谷氨酸铜	12000	3383.3

(5)步骤(1)得到的谷氨酸铜平衡溶解度的测定

①试验材料

磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氢氧化钠、盐酸、磷酸、五水硫酸铜和碱式氯化铜等均为化学纯试剂。

②试验方法

A、缓冲液的制备：配制pH值分别为2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0的磷酸盐缓冲液(PBS，0.1M)。

B、平衡溶解度的测定：取谷氨酸铜分别加入pH值为2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0的100ml PBS溶液中，60℃水浴加热并超声至谷氨酸铜不再溶解，放入水浴振荡器中，温度保持(37±1)℃，振摇24h；将饱和溶液离心沉淀后，用原子吸收法测定溶液中的铜离子，来计算谷氨酸铜的平衡溶解度；相同方法测定五水硫酸铜、碱式氯化铜的平衡溶解度。

③试验结果

结果显示五水硫酸铜易溶于水，碱式氯化铜不溶于水，酸性条件下易溶，而谷氨酸酮水溶性低，且耐酸耐力强(表4)。

表4 谷氨酸铜、硫酸铜和碱式氯化铜的平衡溶解度

(6)步骤(1)得到的谷氨酸铜的油水分配系数测定

①试验材料：正辛醇、谷氨酸铜、五水硫酸铜、碱式氯化铜

②试验方法，以谷氨酸铜为例，五水硫酸铜、碱式氯化铜同样用以下方法检测

A、谷氨酸铜在正辛醇溶液的平衡溶解度测定：称取5克谷氨酸铜，加入100毫升正辛醇溶液，60℃水浴加热并超声至谷氨酸铜不再溶解，放入水浴振荡器中，温度保持(37±1)℃，振摇24h；将饱和溶液离心沉淀后，用原子吸收法测定溶液中的铜离子，来计算谷氨酸铜在正辛醇溶液中的平衡溶解度。

B、涡旋时间考察：取质量浓度为400mg·L^-1的谷氨酸铜正辛醇溶液(被水相饱和后的正辛醇)0.5mL，加入被正辛醇饱和后的0.1mol·L^-1盐酸溶液5ml，分别涡旋5、10、20、45、60min，10000r·min^-1离心2min，取正辛醇层用原子吸收方法测定正辛醇中铜离子的含量；确定最适的涡旋时间。

C、油水分配系数测定：取谷氨酸铜的正辛醇溶液(已被水相饱和)0.5mL作为油相，加入水-缓冲溶液(被正辛醇饱和)5ml作为水相，涡旋(根据步骤B的结果定)，10000r·min^-1离心2min，取上层的油相0.1ml用原子吸收方法测定铜离子浓度，计算谷氨酸铜在油相和水相中的分布情况，计算油水分分配系数(P)＝Po/Pw。

③试验结果

在水中的溶解度硫酸铜最高，碱式氯化铜次之，谷氨酸铜最低。在正辛醇溶液中三者的溶解度硫酸铜的溶解度最高，谷氨酸铜次之，而碱式氯化铜最低。计算各化合物的油水分配系数分别为：谷氨酸铜0.0102、碱式氯化铜0.001，而硫酸铜只有0.0002。谷氨酸铜较碱式氯化铜和硫酸铜的抗菌活性高10倍和50倍(表5)，油水分配系越高，化合物的脂溶性越强，抗菌活性则越强。

表5 谷氨酸铜、硫酸铜和碱式氯化铜的油水分配系数

(6)步骤(1)得到的谷氨酸铜的促生长效果试验

①试验材料

试验动物：350只1日龄岭南黄快大肉鸡(广东农业科学院畜牧研究所)；50头断奶仔猪(广东民丰种猪场)；

饲料：不含任何抗菌药物的102型鸡用全价配合饲料，广东省农业科学院畜牧研究所饲料厂特制；不含任何抗菌药物的303型猪用全价配合饲料，广东民丰畜牧发展有限公司饲料厂特制；

受试样品：谷氨酸铜、五水硫酸铜。

②试验方法

A、谷氨酸铜对岭南黄快大肉鸡的促生长试验

350只1日龄岭南黄快大型肉鸡随机分成7组，每组50只。各组在饲料中添加不同的生长促进剂(表6)后，自由采食，统计1～21日龄各试验组试验鸡的增重及饲料报酬，并比较硫酸铜与谷氨酸铜对肉鸡的促生长效应。

表6 谷氨酸铜对肉鸡的促生长试验分组

组别	动物数量	平均初重(g)	生长促进剂	浓度(ppm)*
					不加促长剂对照组	50	50	-	-
五水硫酸铜-150	50	50	五水硫酸铜	150
					五水硫酸铜-100	50	50	五水硫酸铜	100
五水硫酸铜-50	50	50	五水硫酸铜	50
					谷氨酸铜-150	50	50	谷氨酸铜	150
谷氨酸铜-100	50	50	谷氨酸铜	100
					谷氨酸铜-50	50	50	谷氨酸铜	50

^*：不同生长促进剂的使用浓度是以化合物中的铜离子计。

B、谷氨酸铜对猪的促生长试验

60头断奶仔猪如表7分组，每组10头。各组在饲料中添加不同的生长促进剂(见表7)后，自由采食，统计断奶后30天各试验组试验猪的增重及饲料报酬，并比较硫酸铜与谷氨酸铜对猪的促生长效应。

表7 谷氨酸铜对肉猪的促生长试验分组

组别	动物数量	平均初重(kg)	生长促进剂	浓度(ppm)*
					不加促长剂对照组	10	8.40	-	-
五水硫酸铜-250	10	8.45	五水硫酸铜	250
					谷氨酸铜-100	10	8.52	谷氨酸铜	100
谷氨酸铜-75	10	8.48	谷氨酸铜	75
					谷氨酸铜-50	10	8.25	谷氨酸铜	50
谷氨酸铜-30	10	8.36	谷氨酸铜	30

^*：不同生长促进剂的使用浓度是以化合物中的铜离子计。

③试验结果

A、谷氨酸铜对岭南黄快大肉鸡的促生长试验

在岭南黄快大肉鸡的饲养试验过程中，硫酸铜组尤其是铜离子150ppm和100ppm组在试验的第二周，岭南黄快大肉鸡出现羽毛凌乱、皮肤发干等中毒症状，在试验结束前还出现少量死鸡现象，说明硫酸铜在100ppm添加在饲料中长期使用会出现铜离子中毒。虽然50ppm铜离子的硫酸铜组没有出现临床可见的中毒症状，但试验期的相对增重率为99.6％，与不给药对照组接近，但料肉比较对照组高了0.052。谷氨酸铜3个剂量组都表现出良好的促生长作用，相对增重率可以提高6.3-7.3％，饲料报酬可以下降0.054-0.071(详见表8)。生长试验结果提示谷氨酸铜具良好的安全性和促生长效果。

表8 谷氨酸铜对肉鸡的促生长试验结果

B、谷氨酸铜对猪的促生长试验

在猪的饲养试验过程中，高剂量的五水硫酸铜组(250ppm)有明显的促生长作用，试验期间的平增均重较不给药对照组提高7.4％，饲料报酬降低0.177。不同剂量组的谷氨酸铜均表现出与高剂量硫酸铜的促生长效应，且50ppm与100ppm和150ppm剂量组的促生长效果相近(表9)，结果提示50ppm的谷氨酸铜可以代替250ppm的硫酸铜。

表9 谷氨酸铜对猪的促生长试验结果

实施例2

谷氨酸铜衍生物对动物的促生长效果试验

(1)不同谷氨酸铜的衍生物的制备

A、谷氨酸铜盐酸盐：称取100克CuSO₄·5H₂O和74.8克谷氨酸钠，分别溶于1000ml水中，搅拌均匀至完全溶解后，将二者混合，用0.1M盐酸溶液将混合溶液的pH值调至4.0，加热并连续搅拌反应，收获结晶烘干至恒重。取产物用1克加水溶解并定容至100ml，测定溶液中铜离子(原子吸收法)、氯离子(莫尔法)和谷氨酸(氨基酸分析仪)的含量。结果铜离子浓度为2.607mg/ml，氯离子含量为1.446mg/ml，谷氨酸的含量为5.908mg/ml，由此可以推断所得的晶体为谷氨酸铜与盐酸按摩尔比1∶1形成的谷氨酸铜盐酸盐。

B、谷氨酸甲酯铜螯合物的制备：称取100克CuSO₄·5H₂O和129.0克谷氨酸甲酯，分别溶于1000ml水中，搅拌均匀至完全溶解后，将二者混合，用1M氢氧化钠溶液调味pH值至7.0，离心收集沉淀，并用水离心洗涤三次后100℃烘干至恒重。取1克产物用0.01M HCl溶液完全溶解后定容至100ml水，测定溶液中铜离子(原子吸收法)和谷氨酸(氨基酸分析仪)的含量。结果铜离子浓度为1.592mg/ml，谷氨酸的含量为7.314mg/ml，由此可以推断所得的产物是由谷氨酸甲酯与铜离子按摩尔比2∶1形成的带一分子结晶水的螯合物。

C、N-氨甲酰谷氨酸铜的制备：称取100克CuSO₄·5H₂O和76.8克N-氨甲酰谷氨酸，分别溶于1000ml水中，搅拌均匀至完全溶解后，将二者混合，用1M氢氧化钠溶液调味pH值至7.0，离心收集沉淀，并用水离心洗涤三次后100℃烘干至恒重。取1克产物用0.01M HCl溶液完全溶解后定容至100ml水，测定溶液中铜离子(原子吸收法)和谷氨酸(氨基酸分析仪)的含量。结果铜离子浓度为2.215mg/ml，谷氨酸的含量为5.087mg/ml，由此可以推断所得的产物是由N-氨甲酰谷氨酸与铜离子按摩尔比1∶1形成的带一分子结晶水的螯合物。

D、谷氨酰胺铜的制备：称取100克CuSO₄·5H₂O和116.8克谷氨酰胺，分别溶于1000ml水中，搅拌均匀至完全溶解后，将二者混合，用1M氢氧化钠溶液调味pH值至7.0，离心收集沉淀，并用水离心洗涤三次后100℃烘干至恒重。取1克产物用0.01M HCl溶液完全溶解后定容至100ml水，测定溶液中铜离子(原子吸收法)和谷氨酰胺(氨基酸分析仪)的含量。结果铜离子浓度为1.721mg/ml，谷氨酸的含量为7.850mg/ml，由此可以推断所得的产物是由N-氨甲酰谷氨酸与铜离子按摩尔比2∶1形成的带一分子结晶水的螯合物。

E、赖氨酰谷氨酸铜的制备：称取100克CuSO₄·5H₂O和110.0克赖氨酰谷氨酸，分别溶于1000ml水中，搅拌均匀至完全溶解后，将二者混合，用1M氢氧化钠溶液调味pH值至7.0，离心收集沉淀，并用水离心洗涤三次后100℃烘干至恒重。取1克产物用0.01M HCl溶液完全溶解后定容至100ml水，测定溶液中铜离子(原子吸收法)、赖氨酸和谷氨酸(氨基酸分析仪)的含量。结果铜离子浓度为1.803mg/ml，赖氨酸含量4.113mg/ml，谷氨酸的含量为4.141mg/ml，由此可以推断所得的产物是由赖氨酰谷氨酸与铜离子按摩尔比1∶1形成的带一分子结晶水的螯合物。

F、水杨醛谷氨酸铜(谷氨酸铜shiff碱)的制备：0.02mmol氢氧化钾溶于1000mL蒸馏水中.滴加到500mL含0.02mmol谷氨酸钠和0.02mmol水杨醛乙醇溶液中，在水浴80℃下，搅拌反应2h，然后加入1000mL含0.02mmol CuSO₄·5H₂O水溶液，调节pH至7.0，继续反应8h，冷却过滤收集沉沉并烘干至恒重。取1克产物用0.01M HCl溶液完全溶解后定容至100ml水，测定溶液中铜离子(原子吸收法)和谷氨酸(氨基酸分析仪)的含量。结果铜离子浓度为1.835mg/ml，谷氨酸的含量为4.200mg/ml，由此可以推断所得的产物是由水杨醛谷氨酸与铜离子按摩尔比1∶1形成的带一分子结晶水的螯合物。

(2)谷氨酸铜衍生物对动物促生长效果的研究

①试验材料

试验动物：90头断奶仔猪：广东民丰种猪场提供；

饲料：不含任何抗菌药物的303型猪用全价配合饲料，广东民丰畜牧发展有限公司饲料厂特制；

受试样品：谷氨酸铜、步骤(1)制备的六种谷氨酸铜衍生物(谷氨酸铜盐酸盐、谷氨酸甲酯铜螯合物、N-氨甲酰谷氨酸铜、谷氨酰胺铜、赖氨酰谷氨酸铜和水杨醛谷氨酸铜)、CuSO₄·5H₂O。

②试验方法

90头断奶仔猪如表9分组，每组10头。各组在饲料中添加不同的生长促进剂(见表10)后，自由采食，统计断奶后30天各试验组试验猪的增重及饲料报酬，并比较硫酸铜与谷氨酸铜或其衍生物对猪的促生长效应的差异。

表10 不同谷氨酸铜衍生物对肉猪的促生长试验分组

组别	动物数量	平均初重(kg)	生长促进剂	浓度(ppm)*
					1	10	8.32	-	-
2	10	8.35	五水硫酸铜	250
					3	10	8.42	谷氨酸铜	50
4	10	8.40	谷氨酸铜盐酸盐	50
					5	10	8.45	谷氨酸甲酯铜螯合物	50
6	10	8.46	谷氨酸铜	50
					7	10	8.30	N-氨甲酰谷氨酸铜	50
8	10	8.35	赖氨酰谷氨酸铜	50

9

10

8.36

水杨醛谷氨酸铜

50

^*：不同生长促进剂的使用浓度是以化合物中的铜离子计。

③谷氨酸铜衍生物对肉猪的促生长试验试验结果

实施例1中的试验结果已证实50ppm的谷氨酸铜铜源与250ppm的五水硫酸铜铜源有相当的促生长作用。本实施例中50ppm的谷氨酸铜铜源(组3)和250ppm的五水硫酸铜铜源(组2)较对照组的平均增重分别提高了11.36％和10.63％，料肉比也分别降低了0.273和0.261，再次证实了在饲料配制过程中50ppm的谷氨酸铜铜源可以替代250ppm的五水硫酸铜铜源。此外，谷氨酸铜的各种衍生物与谷氨铜有相当的促生长效果(表11)，结果提示谷氨酸铜的衍生物与谷氨酸铜有相当的生物学效应。

表11 不同谷氨酸铜衍生物对猪的促生长试验结果

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (3)

1.谷氨酸铜或其衍生物作为动物促生长饲料添加剂的应用，其特征在于：所述的衍生物为谷氨酸铜与酸形成的盐。

2.根据权利要求1所述谷氨酸铜或其衍生物作为动物促生长饲料添加剂的应用，其特征在于：所述的动物为养殖动物。

3.根据权利要求1所述谷氨酸铜或其衍生物作为动物促生长饲料添加剂的应用，其特征在于：所述谷氨酸铜或其衍生物应用于动物的各个生长阶段。