CN102573888A

CN102573888A - 长效y2 受体激动剂

Info

Publication number: CN102573888A
Application number: CN2010800412285A
Authority: CN
Inventors: J·科弗伊德; J·奥尔森; S·奥斯特伽德; R·乔根森
Original assignee: Novo Nordisk AS
Current assignee: Novo Nordisk AS
Priority date: 2009-09-18
Filing date: 2010-09-17
Publication date: 2012-07-11
Also published as: US20130040877A1; JP2013505221A; EP2477643A1; WO2011033068A1

Abstract

本发明涉及PYY类似物或其衍生物，其包含选自置换、插入、缺失和修饰的至少一个改变和包含具有至少14个碳原子的烷基链的任选血清白蛋白结合侧链。此外，本发明涉及关于此的组合物和治疗响应Y2受体调节的病状的方法。

Description

长效Y2 受体激动剂

发明领域

本发明涉及治疗性肽的领域，即新的持久肽类似物例如肽YY(PYY)类似物及其衍生物，其中所述类似物或衍生物包含选自下述在肽中的至少一种改变：针对蛋白酶解分解稳定化所述肽类似物的置换、缺失、插入和修饰。

发明背景

肽酪氨酸-酪氨酸(PYY)在用餐过程中由远端小肠和结肠中的L细胞释放。已知PYY具有在GI道中的外周作用并且也在中枢充当饱腹感信号。PYY作为PYY(1-36)释放，但切割为构成约50％循环PYY的PYY(3-36)。在体内主要负责降解成PYY(3-36)的酶是二肽基肽酶IV(DPP IV)。PYY(3-36)通过蛋白酶和其他清除机制被快速消除。PYY(3-36)的半衰期据报道在猪中是＜30分钟。因此，PYY展示亚最佳药物代谢动力学性质，且必须至少每天施用一次，以便发挥疗效。

虽然hPYY(1-36)以极少选择性激活Y1、Y2和Y5受体，但DPPIV加工的hPYY(3-36)展示对于Y2受体增加的选择性，虽然保留了某些Y1和Y5亲和力。已知Y2受体激活减少食欲和食物摄入，而Y1和Y5受体激活导致食欲和食物摄入中的增加。此外，Y1和Y5受体激活可以增加血压。

PYY通过Y2受体发信号并且关于与Y2受体结合的决定簇主要定位于肽的C末端部分。相应地，PYY的C末端部分中的变化涉及疗效丧失的危险。

基于这些肽中的一些在动物模型和人中证实的作用和基于肥胖的人具有PYY的低基础水平以及这种肽较低的用餐应答的事实，已建议将PYY用于在肥胖和相关疾病的治疗中使用。此外，Y2激动剂已证实在胃肠(GI)道中具有抗分泌和促吸收效应。已提出了Y2激动剂在许多胃肠病症治疗中的潜在用途。

关于响应Y2受体调节的病状例如肥胖和肠分泌过多的治疗，将希望使用持久的Y2受体选择性激动剂，例如持久的PYY。PYY(3-36)的相对短半衰期限制这种肽的治疗用途，因为稳定暴露水平将要求频繁给药，这对于患者将是非常不方便的。

生物活性肽需要在刺激其分别受体后被灭活。循环肽的灭活途径包括通过细胞表面或可溶性血浆肽酶的降解以及其他类型的清除机制。通过蛋白酶的所述降解由一组蛋白酶完成，包括调节肽的受体选择性的高度专门化肽酶以及负责完全肽灭活的广泛特异性肽酶。在所述清除机制中，肾清除是对于PYY去除是最重要的，虽然在某些情况下肝清除起重要作用，同时对于大多数肽和蛋白质，不存在通过出汗和呼吸的清除。相应地，希望延长PYY的体内半衰期。为了延长PYY的半衰期，该肽可以附着至较大的蛋白质例如白蛋白。

对于响应Y受体调节的病状例如肥胖的治疗，使用这样的PYY类似物将是有吸引力的，其激活Y受体亚型Y2并且重要的是还展示持久的药物代谢动力学性质，并且像这样可以用于具有比人PYY例如人PYY(3-36)更低施用频率的给药方案中。

在人中，已将恶心和呕吐描述为关于用Y2受体激动剂治疗的剂量限制性不利事件。已描述了在其中可以观察到施用的正面治疗效应而无任何不利事件的治疗窗，对于Y2受体激动剂是狭窄的。此外，动物研究暗示慢性暴露是获得最佳疗效必需的。由于在临床上对于PYY治疗描述的窄治疗窗，希望获得与人PYY(1-36)、人PYY(3-36)或具有等同于所述衍生物那种的血清白蛋白结合侧链的人PYY(3-36)相比，具有改善的药物代谢动力学性质的PYY类似物或其衍生物。所述改善的药物代谢动力学性质将允许在治疗窗内更佳的滴定和/或使得能够避免多重每日施用。

发明概述

在一个实施方案中，本发明涉及与人PYY(1-36)或人PYY(3-36)相比，针对降低所述类似物或衍生物的功能性的C末端蛋白酶解分解具有改善稳定性的PYY类似物或其衍生物，其中所述功能性通过如本文描述的测定(IV)、测定(I)或测定(V)进行确定。

在一个实施方案中，本发明涉及PYY类似物或其衍生物，其包含

i.包含具有至少14个碳原子的烷基链的至少一条血清白蛋白结合侧链，其中所述烷基链任选进一步包含远端羧酸或远端四唑基团；和

ii.选自下述的置换成蛋白质生成(proteinogenic)或非蛋白质生成氨基酸残基的至少一个氨基酸残基

其中R1是氨基酸的侧链，并且R是H或C1-C12烷基。

在一个实施方案中，本发明涉及用于在响应Y受体调节的病状的治疗中使用的如本文定义的PYY类似物或其衍生物，所述病状例如肥胖、肥胖相关疾病例如食物摄入减少或肥胖。在一个实施方案中，本发明涉及包含如本文定义的PYY类似物或其衍生物和至少一种药学赋形剂的组合物。

附图简述

图1显示了肽SEQ ID NO：3对消瘦的禁食后再喂食C57BL/6小鼠的食物摄入的作用。在食物恢复前30分钟，对小鼠s.c.施用以0.1、0.3和1.0umol/kg剂量的肽以及单独的媒介物，并且经过48小时测量累积食物摄入。

发明详述

在一个实施方案中，本发明涉及PYY类似物或其衍生物，其含有针对体内蛋白酶解分解稳定化所述类似物或衍生物的，在肽主链中的选自置换、缺失和修饰的至少一种改变。在一个实施方案中，所述类似物或衍生物针对C末端蛋白酶解分解得到稳定化。

如上所述，PYY(1-36)通过DPP IV快速降解为3-36形式。进一步的N末端降解通过聚脯氨酸螺旋得到阻止。本发明人已通过体外和体内研究发现PYY(3-36)在C末端被切割，导致Y2受体效力的完全丧失。因此，PYY(3-36)(以及PYY(1-36))展示具有短半衰期的亚最佳药物代谢动力学概况，并且将需要频繁施用，例如至少每天一次或至少每天2次，以便获得疗效。

在一个实施方案中，本发明涉及具有持久的药物代谢动力学性质的PYY类似物或其衍生物。在一个实施方案中，本发明涉及其为Y2受体的激动剂且具有持久的药物代谢动力学性质的PYY类似物或其衍生物。术语“激动剂”意指激活靶受体且引发通过所述受体的内源激动剂引起的至少一种体内或体外作用的任何化合物。在一个实施方案中，根据本发明的PYY类似物的衍生物显示令人惊讶地良好的持久的药物代谢动力学性质。

肽的“持久的性能”是延长的肽作用持续时间，这导致具有更低频率的给药方案，例如每天一次、每周一次或小于每周一次。根据本发明的PYY类似物或其衍生物的持久的性质可以表现为，与人PYY(1-36)、人PYY(3-36)或具有等同于所述类似物或衍生物的那种的血清白蛋白结合侧链的人PYY(3-36)相比，在血浆中延长的半衰期或延长的生物学活性。在一个实施方案中，使用如本文描述的方法，例如本文描述的测定(V)，PK i.v.小型猪，通过监控在施用于动物例如健康猪后其在血浆中的浓度，测定PYY类似物或其衍生物的持久。在一个实施方案中，通过监控所述类似物或衍生物在至少一种生物学测定中的作用持续时间来测定PYY类似物或其衍生物的持久，所述生物学测定例如本文描述的测定(V)、测定(VII)、测定(VI)、测定(VIII)或测定(IX)。

术语“人PYY”和“hPYY”意指PYY(1-36)。在一个实施方案中，人PYY是如通过SEQ ID NO：1定义的，并且具有在位置1和2中N末端氨基酸Tyr-Pro的添加。在一个实施方案中，人PYY是如通过SEQ ID NO：1定义的PYY(3-36)。在一个实施方案中，实现本文提及特征中的至少一个的组合。

PYY(3-36)的有利作用被认为通过Y2受体介导，而Y1和Y5受体的激活可以导致不利作用或取消疗效。因此，希望开发相对于Y1和/或Y5受体，对于Y2受体具有增加的选择性的PYY类似物或其衍生物。Y2受体选择性中的增加意指与Y2受体效力相比，在Y1和/或Y5受体效力中的相对减少，或与Y1和/或Y5受体效力相比，在Y2受体效力中的相对增加。因此，如分别通过测定(II)和/或(III)和(I)测定的，与hPYY(3-36)相比，PYY(3-36)类似物或其衍生物展示对Y1和/或Y5受体比对Y2受体的效力中的相对更大减少，具有增加的Y2受体选择性。在一个实施方案中，与hPYY(3-36)相比，相对于Y1和/或Y5受体，PYY类似物或其衍生物对于Y2受体具有增加的选择性。在一个实施方案中，与hPYY(3-36)相比，相对于Y1受体，PYY类似物或其衍生物对于Y2受体具有增加的选择性，即更高的Y1/Y2受体效力比。在一个实施方案中，与hPYY(3-36)相比，相对于Y5受体，PYY类似物或其衍生物对于Y2受体具有增加的选择性，即更高的Y5/Y2受体效力比。在一个实施方案中，相对于Y1和/或Y5受体，PYY类似物或其衍生物对于Y2受体具有增加的选择性，并且针对C末端降解是稳定的。在一个实施方案中，相对于Y1和/或Y5受体，PYY类似物或其衍生物对于Y2受体具有增加的选择性，并且具有持久的药物代谢动力学性质，例如更长的半衰期。

PYY类似物

在一个实施方案中，通过将选自置换、缺失和修饰的改变掺入PYY肽内，PYY类似物或衍生物获得持久的药物代谢动力学性质，其中所述PYY肽可以是人PYY(1-36)或人PYY(3-36)。通过在具有不由切割蛋白酶中的活性位点接受的残基的目的切割位点上或接近于所述目的切割位点掺入选自氨基酸残基的置换、缺失和修饰的改变，防止PYY类似物或其衍生物的蛋白酶解是可能的。

可以用于获得PYY类似物或其衍生物的概念基于与切割位点紧密接近的亚氨基酸脯氨酸的引入，破坏肽构象且减少肽主链弹性，导致肽的稳定化，然而，这种置换具有扰乱所述类似物或衍生物的疗效的危险。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物包含目的氨基酸残基的至少一个N-甲基氨基酸类似物。N-甲基氨基酸类似物具有保存PYY类似物或其衍生物的疗效的潜力，因为氨基酸侧链是未改变的且增强PYY类似物或其衍生物的蛋白酶解稳定性，由于与在肽键周围的脯氨酸的结构相似性。其他蛋白酶解稳定化概念包括使用烃稳定或肽键至还原肽键的改变。

如本文提及肽使用的，术语“类似物”意指这样的肽，其中该肽的至少一个氨基酸残基已由另一个氨基酸残基置换和/或其中至少一个氨基酸残基已从该肽中缺失和/或其中至少一个氨基酸残基已加入该肽中和/或其中该肽的至少一个氨基酸残基已被修饰。氨基酸残基的此类添加或缺失可以在肽的N末端和/或在肽的C末端发生。简单命名法用于描述根据本发明的肽，例如[N-甲基Arg35]hPYY(3-36)指定为人PYY的类似物，其中在位置35中天然存在的精氨酸已由N-甲基化的精氨酸置换，并且在位置1和2中天然存在的酪氨酸和脯氨酸分别已被缺失。

在一个实施方案中，本文提及肽或PYY类似物或其衍生物中的位置指在人PYY(1-36)例如人PYY(3-36)中的位置。在一个实施方案中，PYY(3-36)中的N末端位置被称为位置3。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物可以来自自脊椎动物，例如哺乳动物，包括人、小鼠、绵羊、山羊、牛或马。

如本文使用的，术语“肽”意指由通过肽键相连的至少5个组成成分氨基酸组成的化合物。在一个实施方案中，肽的N末端是氨基和/或所述C末端是羧酸基团。在一个实施方案中，在对于其未陈述为旋光异构体的PYY类似物或其衍生物中的所有氨基酸应理解为意指L-异构体。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物中的至少一个氨基酸是D-氨基酸。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物的组成成分氨基酸可以选自由遗传密码编码的蛋白质生成氨基酸和非蛋白质生成氨基酸例如不由遗传密码编码的天然氨基酸和合成氨基酸中的至少一个。在一个实施方案中，蛋白质生成氨基酸包含丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸、硒代半胱氨酸和吡咯赖氨酸。非蛋白质生成氨基酸包含其不由遗传密码编码的天然氨基酸，例如由遗传密码编码的氨基酸的D-异构体，例如但不限于D-丙氨酸、D-亮氨酸或D-谷氨酰胺；其他天然氨基酸，例如但不限于γ-羧基谷氨酸、鸟氨酸、羟脯氨酸或磷酸丝氨酸；合成化学制造的氨基酸例如氨基酸的β类似物，例如但不限于β-丙氨酸；C-α甲基化的氨基酸，例如但不限于Aib(α-氨基异丁酸)、C-α-甲基Phe或C-α-甲基Tyr；N-甲基氨基酸，例如但不限于N-甲基Asn、N-甲基His、N-甲基Arg或N-甲基Tyr；高氨基酸，例如但不限于高组氨酸、高谷氨酰胺、高精氨酸(2-氨基-6-胍基-己酸，高Arg)、高亮氨酸或高苯丙氨酸、β-高氨基酸，例如但不限于β-高Gln；正氨基酸，例如但不限于正亮氨酸，二氨基酸，例如但不限于二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸或鸟氨酸；N-取代甘氨酸，例如但不限于(2-氨基甲酰-乙氨基)-乙酸(NGln)或(3-胍基-丙氨基)-乙酸(NArg)；具有甲基化侧链官能团的氨基酸，例如但不限于N-ε-甲基赖氨酸、(N-ε、N-ε)二甲基赖氨酸、(N-ε、N-ε、N-ε)三甲基赖氨酸、N-ω-甲基精氨酸或(N-ω、N-ω)-二甲基精氨酸；具有缩短的侧链的氨基酸，例如但不限于2-氨基-3-胍基-丙酸(Agp)、2-氨基-4-胍基-丁酸(Agb)；其他精氨酸模拟氨基酸，例如但不限于(2-胍基-乙氨基)-乙酸、(4-胍基-丁氨基)-乙酸、2-氨基-3-(1-甲脒基-吡咯烷-2-基)-丙酸、2-氨基-4-(2-氨基-嘧啶-4-基)-丁酸、2-氨基-3-(4-胍基-苯基)-丙酸或氨基-(1-甲脒基-哌啶-4-基)-乙酸；或其他合成氨基酸，例如但不限于3-吡啶基丙氨酸、(4-羟基-苄氨基)-乙酸、Abu(α-氨基丁酸)、Tle(叔丁基甘氨酸)、3-氨基甲基苯甲酸、邻氨基苯甲酸、吡啶基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸、4-吡啶基丙氨酸、(1-氨基环丙基)羧酸、(1-氨基环丁基)羧酸、(1-氨基环戊基)羧酸、(1-氨基环己基)羧酸、(1-氨基环庚基)羧酸、(1-氨基环辛基)羧酸、硫代酪氨酸、3-巯基苯丙氨酸、3-或4-氨基苯丙氨酸、3-或4-乙酰苯丙氨酸、2-或3-羟基苯丙氨酸(邻或间酪氨酸)、羟基甲基甘氨酸、氨基乙基甘氨酸、1-甲基-1-巯基乙基甘氨酸、氨基乙基硫代乙基甘氨酸、2-氨基-组氨酸、β-羟基-组氨酸或巯基乙基甘氨酸等。在本发明中有用的许多非蛋白质生成氨基酸是商购可得的。其他可以通过本领域已知的方法进行制备。在一个实施方案中，非蛋白质生成氨基酸是可以经由肽键掺入肽内但不是蛋白质生成氨基酸的部分。在一个实施方案中，根据本发明的PYY类似物或其衍生物的组成成分氨基酸可以选自由遗传密码编码的氨基酸、不由遗传密码编码的蛋白质合成氨基酸和合成氨基酸中的至少一个。

在一个实施方案中，本发明涉及其为拟肽的特异性亚类的N-取代甘氨酸的使用。N-取代甘氨酸与蛋白质生成或非蛋白质生成氨基酸配对物紧密相关，但在化学上不同，因为其侧链追加至沿着分子主链的氮原子，而不是α-碳(如它们在氨基酸中)。为了方便，我们已给予N-取代甘氨酸单体对应于具有相似功能性的氨基酸的指名，具有前缀N。作为例子，NArg意指具有精氨酸侧链的N-取代甘氨酸，NGln并且意指具有谷氨酰胺侧链的N-取代甘氨酸，关于NArg和NGln的式参见下文。

在一个实施方案中，本发明涉及精氨酸模拟物的使用，其与蛋白质生成或非蛋白质生成氨基酸配对物紧密相关，但在化学上不同，因为其侧链是延伸或截短的。为了方便，我们已给予精氨酸模拟物单体下述指名：Agp意指其中含胍基侧链已缩短2个碳原子的2-氨基-3-胍基-丙酸；Agb意指其中含胍基侧链已缩短1个碳原子的2-氨基-4-胍基-丁酸；并且高精氨酸或高Arg意指其中含胍基侧链已延伸1个碳原子的2-氨基-6-胍基-己酸。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物不包括非蛋白质生成氨基酸残基。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物仅包括L-氨基酸残基和/或修饰的蛋白质生成L-氨基酸残基。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物包含由蛋白质生成和非蛋白质生成氨基酸置换的至少一个氨基酸残基，包括但不限于(考虑了D-和L-构型，然而，为了方便仅显示了L-构型)：

其中，R1意指选自下述的功能氨基酸侧链

其中虚线代表在功能侧链和氨基酸主链之间的断开；和

R选自H和C1-C12烷基。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物包含在所述类似物或衍生物的肽主链的至少一个位置中由式(C)代表的氨基酸残基。在一个实施方案中，式(C)的氨基酸残基在选自位置33、34、35和36的至少一个位置上。在一个实施方案中，式(C)的氨基酸残基在位置35中。在一个实施方案中，当式(C)的氨基酸残基在位置35中时，那么R是Arg的氨基酸侧链，并且R选自H、烷基(例如C1-C12烷基)、苄基或苯基。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物包含至少一个肽键，其被改变为还原的肽键或选自四唑、磺酰胺(sulphoneamide)和叠氮化物的肽键等排物(isoster)。

在一个实施方案中，与人PYY(1-36)相比，最大限度8个氨基酸已在PYY类似物或其衍生物中被置换、缺失、插入和/或修饰。在一个实施方案中，与人PYY(1-36)相比，最大限度7个氨基酸已在PYY类似物或其衍生物中被置换、缺失、插入和/或修饰。在一个实施方案中，与人PYY(1-36)相比，最大限度6个氨基酸已在PYY类似物或其衍生物中被置换、缺失、插入和/或修饰。在一个实施方案中，与人PYY(1-36)相比，最大限度5个氨基酸已在PYY类似物或其衍生物中被置换、缺失、插入和/或修饰。在一个实施方案中，与人PYY(1-36)相比，最大限度4个氨基酸已在PYY类似物或其衍生物中被置换、缺失、插入和/或修饰。在一个实施方案中，与人PYY(1-36)相比，最大限度3个氨基酸已在PYY类似物或其衍生物中被置换、缺失、插入和/或修饰。在一个实施方案中，与人PYY(1-36)相比，最大限度2个氨基酸已在PYY类似物或其衍生物中被置换、缺失、插入和/或修饰。在一个实施方案中，与人PYY(1-36)相比，1个氨基酸已在PYY类似物或其衍生物中被置换、缺失、插入和/或修饰。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物显示出在PYY(1-36)或PYY(3-36)的整个长度上分别与PYY(1-36)或PYY(3-36)至少60％、65％、70％、80％或90％序列同一性。作为用于测定2个类似物之间的序列同一性的方法的例子，比对2个肽[Ala34]PYY(1-36)和PYY(1-36)。Ala34类似物相对于PYY(1-36)的序列同一性由比对的等同残基数目减去不同残基数目再除以PYY(1-36)中的总残基数目给出。相应地，在所述例子中，序列同一性是(36-1)/36。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物包含至少一个改变，例如置换、插入、缺失和修饰中的至少一个。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物包括“非必需”氨基酸残基的至少一个置换、插入、缺失和修饰。“非必需”氨基酸残基意指这样的残基，其可以在肽序列中被改变，即被缺失或置换，而没有取消或基本上减少所述肽的活性。在一个实施方案中，如通过Y2受体效力测定来测定的，例如本文描述的测定(I)，Y2受体ACTOne测定，本发明的PYY类似物或其衍生物的“活性”是Y2受体效力。术语“置换”意指天然序列中一个氨基酸用另一个氨基酸的改变。术语“缺失”意指一个或多个氨基酸从天然序列中的去除。术语“插入”意指一个或多个氨基酸加入天然序列内。术语“修饰”意指共价附着至天然肽序列中一个或多个氨基酸的侧链或一个或多个氨基酸的α氮原子的改变。

在一个实施方案中，根据本发明的衍生物的C末端可以以酸或酰胺终止。在一个实施方案中，根据本发明的衍生物的C末端是酰胺。

置换。在一个实施方案中，与人PYY(1-36)相比，PYY类似物或其衍生物具有在氨基酸序列中单独或与至少一个插入或缺失组合的至少一个置换。在一个实施方案中，置换没有取消或基本上减少PYY类似物或其衍生物的活性。在一个实施方案中，与人PYY(1-36)的氨基酸序列相比，PYY类似物或其衍生物具有单个置换或超过一个氨基酸残基的连续和非连续置换。在一个实施方案中，与人PYY(1-36)的氨基酸序列相比，PYY类似物或其衍生物包括1、2或3个氨基酸置换。

在一个实施方案中，在PYY的螺旋C末端区域的氨基酸残基(例如残基20、24、25、27和29)、尾端残基(32-36)和/或在位置5和8上的N末端脯氨酸是未被置换的。在一个实施方案中，氨基酸残基在PYY的位置32到36是未被置换的。在一个实施方案中，PYY的氨基酸残基在选自下述的至少一个氨基酸序列位置上是未被置换的：5、7、8、20、24、25、27、29、32、33、34、35、36及其任何组合。

在一个实施方案中，氨基酸通过保守置换进行置换。如本文使用的，术语“保守置换”指示至少一个氨基酸被至少一个生物学相似的残基替换。例子包括具有相似特征的氨基酸残基的置换，例如小氨基酸、酸性氨基酸、极性氨基酸、碱性氨基酸、疏水性氨基酸和芳香族氨基酸。例如，在一个实施方案中，Met残基被正亮氨酸(Nle)或由亮氨酸、异亮氨酸或缬氨酸置换，与Met相反，它们是不容易氧化的。被内源、哺乳动物肽和蛋白质中未天然发现的残基的保守置换的另一个例子是Arg或Lys被例如鸟氨酸、刀豆氨酸、氨乙基半胱氨酸或其它碱性氨基酸的保守置换。关于涉及肽和蛋白质中表型上沉默的置换的进一步信息，参见例如，Bowie等人Science 247，1306-1310，1990。本发明的保守置换的类似物可以具有例如多至10个保守置换，例如多至5个或例如3个或更少保守置换。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物包括至少一个非蛋白质生成氨基酸和/或非氨基酸例如氨基酸模拟物置换到PYY的序列内。在一个实施方案中，插入PYY的序列内的非氨基酸是β转角模拟物或分子，例如-NH-X-CO-，其中X＝(CH2)_n(其中n可以是2-20)或-NH-CH2CH2(-O-CH2CH2-O-)_m-CH2-CO-(其中m＝1-5)。在一个实施方案中，插入PYY的序列内的分子可以选自氨基己酰基(“Aca”)、β-丙氨酰和8-氨基-3，6-二氧杂辛酰基。β-转角模拟物是商购可得的(BioQuadrant Inc，Quebec，加拿大)。

缺失。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物具有单独或与至少一个插入或置换组合的、从人PYY(1-36)的氨基酸序列中缺失的至少一个氨基酸残基。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物具有在PYY的氨基酸位置4到35上缺失的至少一个氨基酸残基。此类缺失可以包括在PYY的氨基酸位置4到35上的至少一个连续或非连续缺失。在一个实施方案中，在PYY的氨基酸位置24到36上的氨基酸残基是未被缺失的。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物包括N末端或C末端平截、或在氨基酸位置4-35上的内部缺失，只要人PYY(1-36)的至少一种生物学活性被保留。在一个实施方案中，PYY的位置1和2是被缺失的。在一个实施方案中，在PYY的位置5到8和24到36、更具体而言位置5到8和位置32到35上的氨基酸残基是未被缺失的。

插入。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物包括单独或与至少一个缺失和/或置换组合的、插入人PYY(1-36)的氨基酸序列内的至少一个氨基酸残基。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物具有进入人PYY(1-36)的氨基酸序列内的单个插入，或超过一个氨基酸残基的连续或非连续插入。在一个实施方案中，至少一个氨基酸插入PYY类似物或其衍生物的N末端或C末端。在一个实施方案中，氨基酸残基未插入PYY的位置24到36上。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物包含对于至少一个氨基酸残基的化学改变。此类化学改变包括酰胺化、糖基化、酰化、硫酸化、磷酸化、乙酰化和/或环化。化学改变可以在PYY类似物或其衍生物的N或C末端或在PYY类似物或其衍生物的序列内的氨基酸残基的侧链上罕见地发生。在一个实施方案中，这些肽的C末端可以具有游离-OH或-NH₂基团。在一个实施方案中，肽的N末端可以用异丁氧基羰基、异丙氧基羰基、正丁氧基羰基、乙氧羰基、异己酰基(异帽)、辛酰基或辛基甘氨酸基团(G(Oct))、8-氨基辛酸基团或Fmoc基团进行加帽。在一个实施方案中，存在沿着PYY类似物或其衍生物的肽的多个化学改变位点。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物包括至少一个非蛋白质生成氨基酸和/或非氨基酸插入人PYY(1-36)的序列内。在一个实施方案中，插入人PYY(1-36)的序列内的非蛋白质生成氨基酸可以是β-转角模拟物或插入PYY的序列内的分子。插入PYY的序列内的分子的例子包括氨基己酰基(“Aca”)、β-丙氨酰和8-氨基-3，6-二氧杂辛酰基。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物包含选自缺失、插入和置换的2个或更多个变化的组合。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物包含1、2或3个氨基酸置换。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物包含1、2或3个氨基酸修饰。

在一个实施方案中，与人PYY(3-36)或具有等同于所述类似物或衍生物的那种的血清白蛋白结合侧链的人PYY(3-36)相比，PYY类似物或其衍生物具有改善的酶促稳定性。在一个实施方案中，酶促稳定性通过本文描述的测定(IV)，在血浆中的体外半衰期进行确定。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物包含式(I)的氨基酸序列：

Xaa₁-Xaa₂-Xaa₃-Xaa₄-Xaa₅-Xaa₆-Xaa₇-Xaa₈-Xaa₉-Xaa₁₀-Xaa₁₁-Xaa₁₂-Xaa₁₃-Xaa₁₄-Xaa₁₅-Xaa₁₆-Xaa₁₇-Xaa₁₈-Xaa₁₉-Xaa₂₀-Xaa₂₁-Xaa₂₂-Xaa₂₃-Xaa₂₄-Xaa₂₅-Xaa₂₆-Xaa₂₇-Xaa₂₈-Xaa₂₉-Xaa₃₀-Xaa₃₁-Xaa₃₂-Xaa₃₃-Xaa₃₄-Xaa₃₅-Xaa₃₆

式(I)

其中

Xaa₁是Tyr、Phe、Ala、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸、Lys或不存在；

Xaa₂是Pro、Ala、Leu、Phe、羟脯氨酸、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸、Lys或不存在；

Xaa₃是Ile、Val、Leu(1-氨基环戊基)羧酸、(1-氨基环己基)羧酸、1-氨基丁酸、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸、Lys；

Xaa₄是Lys、Glu、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₅是Pro、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₆是Glu、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₇是Ala、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₈是Pro、Ala、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₉是Gly、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₁₀是Glu、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₁₁是Asp、Ala、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₁₂是Ala、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₁₃是Ser、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₁₄是Pro或羟脯氨酸；

Xaa₁₅是Glu、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₁₆是Glu、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₁₇是Leu、Val、Ile、高亮氨酸、正亮氨酸、(1-氨基环戊基)羧酸、(1-氨基环己基)羧酸或1-氨基丁酸；

Xaa₁₈是Asn、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₁₉是Arg、Ala、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₂₀是Tyr、Ala、Phe、3-吡啶基丙氨酸、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₂₁是Tyr、Ala、Phe、3-吡啶基丙氨酸、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₂₂是Ala、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₂₃是Ser、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₂₄是Leu、Ile、Val、高亮氨酸、正亮氨酸、(1-氨基环戊基)羧酸、(1-氨基环己基)羧酸、1-氨基丁酸、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₂₅是Arg、Ala、His、氨基异丁酸、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₂₆是His、Arg、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₂₇是Tyr、Ala、Phe、高Phe或3-吡啶基丙氨酸、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₂₈是Ile、Val、Leu、高亮氨酸、正亮氨酸、(1-氨基环戊基)羧酸、(1-氨基环己基)羧酸、氨基异丁酸、1-氨基丁酸、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₂₉是Asn、Gln、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₃₀是Met、Leu、Val、Ile、高亮氨酸、氨基异丁酸、正亮氨酸、(1-氨基环戊基)羧酸、(1-氨基环己基)羧酸、1-氨基丁酸、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₃₁是Leu、Val、Ile、氨基异丁酸、高亮氨酸、正亮氨酸、(1-氨基环戊基)羧酸、(1-氨基环己基)羧酸、1-氨基丁酸、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₃₂是Ser、Thr、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₃₃是Arg、N-甲基Arg、甲基赖氨酸、二甲基赖氨酸、三甲基赖氨酸、2-氨基-3-胍基-丙酸(Apg)、2-氨基-4-胍基-丁酸(Abg)、单甲基精氨酸、二甲基精氨酸、(2-胍基-乙氨基)-乙酸、(3-胍基-丙氨基)-乙酸(NArg)、(4-胍基-丁氨基)-乙酸、2-氨基-3-(1-甲脒基-吡咯烷-2-基)-丙酸、2-氨基-4-(2-氨基-嘧啶-4-基)-丁酸、2-氨基-3-(4-胍基-苯基)-丙酸或氨基-(1-甲脒基-哌啶-4-基)-乙酸；

Xaa₃₄是Gln、Asn、His、Pro、N-甲基Gln、β-高Gln、(2-氨基甲酰-乙氨基)-乙酸(NGln)、N-甲基Asn或N-甲基His；

Xaa₃₅是Arg、N-甲基Arg、甲基赖氨酸、二甲基赖氨酸、三甲基赖氨酸、2-氨基-3-胍基-丙酸(Agp)、2-氨基-4-胍基-丁酸(Agb)、高精氨酸(2-氨基-6-胍基-己酸、高Arg)、单甲基精氨酸、二甲基精氨酸、(2-胍基-乙氨基)-乙酸、(3-胍基-丙氨基)-乙酸(NArg)、(4-胍基-丁氨基)-乙酸、2-氨基-3-(1-甲脒基-吡咯烷-2-基)-丙酸、2-氨基-4-(2-氨基-嘧啶-4-基)-丁酸、2-氨基-3-(4-胍基-苯基)-丙酸或氨基-(1-甲脒基-哌啶-4-基)-乙酸；

Xaa₃₆是Tyr、Phe、N-甲基Tyr、C-α-甲基Phe、3-吡啶基丙氨酸、(4-羟基-苄氨基)-乙酸(NTyr)。

在一个实施方案中，Xaa₁是Tyr。在一个实施方案中，Xaa₁是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₂是Pro。

在一个实施方案中，Xaa₃是Ile。在一个实施方案中，Xaa₃是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₄是Lys。在一个实施方案中，Xaa₄是Lys。在一个实施方案中，Xaa₄是Arg。在一个实施方案中，Xaa₄是Asp。在一个实施方案中，Xaa₄是Glu。

在一个实施方案中，Xaa₅是Pro。在一个实施方案中，Xaa₅是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₆是Glu。在一个实施方案中，Xaa₆是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₇是Ala。在一个实施方案中，Xaa₇是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₈是Pro。在一个实施方案中，Xaa₈是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₉是Gly。在一个实施方案中，Xaa₉是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₁₀是Glu。在一个实施方案中，Xaa₁₀是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₁₁是Asp。在一个实施方案中，Xaa₁₁是Lys。在一个实施方案中，Xaa 11是Glu。

在一个实施方案中，Xaa₁₂是Ala。在一个实施方案中，Xaa₁₂是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₁₃是Ser。在一个实施方案中，Xaa₁₃是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₁₄是Pro。在一个实施方案中，Xaa₁₅是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₁₅是Glu。在一个实施方案中，Xaa₁₆是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₁₆是Glu。在一个实施方案中，Xaa₁₇是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₁₇是Leu。在一个实施方案中，Xaa₁₈是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₁₈是Ala。在一个实施方案中，Xaa₁₈是Lys。在一个实施方案中，Xaa₁₈是Ala。在一个实施方案中，Xaa₁₈是Glu。在一个实施方案中，Xaa₁₈是Gln。

在一个实施方案中，Xaa₁₉是Arg。在一个实施方案中，Xaa₁₉是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₂₀是Tyr。在一个实施方案中，Xaa₂₀是Lys。在一个实施方案中，Xaa 20是Ala。

在一个实施方案中，Xaa₂₁是Tyr。在一个实施方案中，Xaa₂₁是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₂₂是Ala。在一个实施方案中，Xaa₂₂是Lys。在一个实施方案中，Xaa₂₂是Asp。在一个实施方案中，Xaa₂₂是Glu。

在一个实施方案中，Xaa₂₃是Ser。在一个实施方案中，Xaa₂₃是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₂₄是Leu。在一个实施方案中，Xaa₂₄是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₂₅是Arg。在一个实施方案中，Xaa₂₅是Lys。在一个实施方案中，Xaa₂₅是Aib。在一个实施方案中，Xaa 25是His。在一个实施方案中，Xaa 25是Aib。在一个实施方案中，Xaa 25是Tyr。

在一个实施方案中，Xaa₂₆是His。在一个实施方案中，Xaa₂₆是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₂₇是Tyr。在一个实施方案中，Xaa₂₇是Lys。在一个实施方案中，Xaa 27是Ala。

在一个实施方案中，Xaa₂₈是Leu。在一个实施方案中，Xaa₂₈是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₂₉是Asn。在一个实施方案中，Xaa₂₉是Lys。在一个实施方案中，Xaa₂₉是Gln。

在一个实施方案中，Xaa₃₀是Leu。在一个实施方案中，Xaa₃₀是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₃₁是Val。在一个实施方案中，Xaa₃₁是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₃₂是Thr。在一个实施方案中，Xaa₃₂是Lys。

在一个实施方案中，Xaa₃₃是Arg。在一个实施方案中，Xaa₃₃是Lys。在一个实施方案中，Xaa₃₃是N-甲基Arg。在一个实施方案中，Xaa₃₃是甲基赖氨酸。在一个实施方案中，Xaa₃₃是二甲基赖氨酸。在一个实施方案中，Xaa₃₃是三甲基赖氨酸。在一个实施方案中，Xaa₃₃是2-氨基-3-胍基-丙酸(Apg)。在一个实施方案中，Xaa₃₃是2-氨基-4-胍基-丁酸(Abg)。在一个实施方案中，Xaa₃₃是单甲基精氨酸。在一个实施方案中，Xaa₃₃是二甲基精氨酸。在一个实施方案中，Xaa₃₃是(2-胍基-乙氨基)-乙酸。在一个实施方案中，Xaa₃₃是(3-胍基-丙氨基)-乙酸(NArg)。在一个实施方案中，Xaa₃₃是(4-胍基-丁氨基)-乙酸。在一个实施方案中，Xaa₃₃是2-氨基-3-(1-甲脒基-吡咯烷-2-基)-丙酸。在一个实施方案中，Xaa₃₃是2-氨基-4-(2-氨基-嘧啶-4-基)-丁酸。在一个实施方案中，Xaa₃₃是2-氨基-3-(4-胍基-苯基)-丙酸。在一个实施方案中，Xaa₃₃是氨基-(1-甲脒基-哌啶-4-基)-乙酸。

在一个实施方案中，Xaa₃₄是Gln。在一个实施方案中，Xaa₃₄是Asn。在一个实施方案中，Xaa₃₄是His。在一个实施方案中，Xaa₃₄是Pro。在一个实施方案中，Xaa₃₄是Lys。在一个实施方案中，Xaa₃₄是N-甲基Gln。在一个实施方案中，Xaa₃₄是β-高Gln。在一个实施方案中，Xaa₃₄是(2-氨基甲酰-乙氨基)-乙酸(NGln)。在一个实施方案中，Xaa₃₄是N-甲基Asn。在一个实施方案中，Xaa₃₄是N-甲基His。

在一个实施方案中，Xaa₃₅是Arg。在一个实施方案中，Xaa₃₅是Lys。在一个实施方案中，Xaa₃₅是N-甲基Arg。在一个实施方案中，Xaa₃₅是甲基赖氨酸。在一个实施方案中，Xaa₃₅是二甲基赖氨酸。在一个实施方案中，Xaa₃₅是三甲基赖氨酸。在一个实施方案中，Xaa₃₅是2-氨基-3-胍基-丙酸(Agp)。在一个实施方案中，Xaa₃₅是2-氨基-4-胍基-丁酸(Agb)。在一个实施方案中，Xaa₃₅是高精氨酸(2-氨基-6-胍基-己酸，高Arg)。在一个实施方案中，Xaa₃₅是单甲基精氨酸。在一个实施方案中，Xaa₃₅是二甲基精氨酸。在一个实施方案中，Xaa₃₅是(2-胍基-乙氨基)-乙酸。在一个实施方案中，Xaa₃₅是(3-胍基-丙氨基)-乙酸(NArg)。在一个实施方案中，Xaa₃₅是(4-胍基-丁氨基)-乙酸。在一个实施方案中，Xaa₃₅是2-氨基-3-(1-甲脒基-吡咯烷-2-基)-丙酸。在一个实施方案中，Xaa₃₅是2-氨基-4-(2-氨基-嘧啶-4-基)-丁酸。在一个实施方案中，Xaa₃₅是2-氨基-3-(4-胍基-苯基)-丙酸。在一个实施方案中，Xaa₃₅是氨基-(1-甲脒基-哌啶-4-基)-乙酸。

在一个实施方案中，Xaa₃₆是Tyr。在一个实施方案中，Xaa₃₆是Phe。在一个实施方案中，Xaa₃₆是N-甲基Tyr。在一个实施方案中，Xaa₃₆是C-α-甲基Phe。在一个实施方案中，Xaa₃₆是3-吡啶基丙氨酸。在一个实施方案中，Xaa₃₆是(4-羟基-苄氨基)-乙酸(NTyr)。

在一个实施方案中，Xaa₁和Xaa₂都不存在。在一个实施方案中，Xaa₁、Xaa₂、Xaa₃和Xaa₄都不存在。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物不是[N-甲基Arg33]PYY(3-36)、[N-甲基Gln34]PYY(3-36)、[N-甲基Arg35]PYY(3-36)、[N-甲基Tyr36]PYY(1-36)或[N-甲基Tyr36]PYY(3-36)。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物包含在选自位置33、34、35和36的至少一个位置上的氨基酸置换。

PYY类似物的衍生物

在一个实施方案中，通过在体内类似物或衍生物与血清白蛋白的附着，所述PYY类似物或衍生物获得持久的药物代谢动力学性质。所述附着可以是共价或非共价的。在一个实施方案中，脂肪酸附着至PYY类似物或衍生物，促使其与白蛋白非共价结合。在一个实施方案中，本发明描述了包含血清白蛋白结合侧链的附着的肽的设计，所述侧链与白蛋白强烈结合且延长肽药物作用的持续时间，结果是肽药物可以比例如人PYY(3-36)更不频繁地例如每天一次或更罕见地给药。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物包含与白蛋白强烈结合的至少一条侧链即血清白蛋白结合侧链的附着。在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链包含远端羧酸基团或远端四唑基团。在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链包含脂肪二酸。术语“血清白蛋白结合侧链”、“血清白蛋白结合基团”和“白蛋白结合基团”在本文中可互换使用。在一个实施方案中，术语“白蛋白”意指“血清白蛋白”。

在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链包含具有至少14个碳原子的烷基链。在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链包含至少14个碳原子，例如16、18或20个碳原子。在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链包含酰胺。在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链包含远端羧酸基团或远端四唑基团。在一个实施方案中，烷基链包含远端羧酸基团或远端四唑基团。在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链包含具有至少14个碳原子的烷基链，其中所述烷基链包含远端羧酸或远端四唑基团。在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链包含C18二羧酸或C16二羧酸。在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链包含C16羧酸。

如本文与肽有关使用的，术语“衍生物”和相关术语“衍生的”和“衍生化”指其中至少一个取代基不存在于未经改变的肽中的化学改变的肽，即已共价改变的肽。一般的改变是酰胺、碳水化合物、烷基、酰基、酯等。在一个实施方案中，至少一条血清白蛋白结合侧链存在于PYY类似物或其衍生物的N末端、C末端或者PYY类似物或其衍生物的序列中氨基酸残基的侧链上。在一个实施方案中，用于衍生化的另外位点通过至少一个氨基酸被赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酸或半胱氨酸的置换提供。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物与1、2或3个血清白蛋白结合侧链分子缀合。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物中的任何氨基酸位置可以是衍生的。在一个实施方案中，其为衍生的氨基酸残基包含氨基。在一个实施方案中，其为衍生的氨基酸残基包含侧链中的伯氨基。在一个实施方案中，其为衍生的氨基酸残基是赖氨酸。在一个实施方案中，其为衍生的氨基酸残基是半胱氨酸。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物仅在一个位置中是衍生的，例如仅一个氨基酸残基是衍生的。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物的N末端位置是衍生的。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物的N末端位置是酰化的。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物的N末端位置是由包含CH₃(CH₂)_rCO-的白蛋白结合基团衍生的，其中r是16或18。在一个实施方案中，人PYY(3-36)或其类似物或衍生物的N末端位置是由包含CH₃(CH₂)_rCO-的白蛋白结合基团衍生的，其中r是16或18。

包含氨基的氨基酸残基的例子是在侧链中含有伯或仲氨基的赖氨酸、鸟氨酸、ε-N-烷基化赖氨酸例如ε-N甲基赖氨酸、O-氨基乙基丝氨酸、O-氨基丙基丝氨酸或更长的O-烷基化丝氨酸。在一个实施方案中，衍生的氨基酸残基包含在侧链中的伯氨基。包含伯氨基的氨基酸残基的例子是在侧链中含有伯氨基的赖氨酸鸟氨酸、O-氨基乙基丝氨酸、O-氨基丙基丝氨酸或更长的O烷基化丝氨酸。

在一个实施方案中，术语“血清白蛋白结合侧链”意指具有血清白蛋白结合性质的部分。在一个实施方案中，术语“血清白蛋白结合”指化合物与循环血清白蛋白结合的固有能力，并且所述结合任选是非共价的。在一个实施方案中，“血清白蛋白结合”各种化合物显示与白蛋白结合的不同能力。化合物与血清白蛋白结合的高能力导致结合化合物的高部分，而血清中相应未结合的部分将很低。

用于测定白蛋白结合的方法的例子如下：血清白蛋白结合可以通过使用具有来自人或其他物种的固定的血清白蛋白的柱进行测量。给定肽的亲和力可以通过来自柱的改变洗脱时间进行测量，并且在不同白蛋白结合肽之间的相对亲和力可以通过比较洗脱时间概况进行确定。在一种方法中，血清白蛋白肽可以是生物素化的，并且肽的结合可以通过酶联免疫测定(ELISA)技术进行确定，使用具有固定的白蛋白的微量滴定板。结合的显现通过使用与辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶缀合的抗生物素蛋白或链霉亲和素完成。可以测量不同白蛋白结合肽的相对亲和力。可以用于测量白蛋白结合的其他亲和力实验包括Biacore分析和微量热法。

在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链是亲脂的。在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链任选通过缀合化学例如通过烷基化、酰化、酯形成或酰胺形成经由间隔物附着至赖氨酸残基，或通过马来酰亚胺偶联附着至半胱氨酸残基。如本文使用的，术语“间隔物”意指分隔肽和血清白蛋白结合侧链的分子单位。在一个实施方案中，如本文使用的，术语“间隔物”意指用化学部分分隔肽和血清白蛋白结合侧链的间隔物，所述化学部分包含至少5个非氢原子，其中这些中的30-50％是N或O。

在一个实施方案中，白蛋白结合侧链在生理学pH是带负电的。在一个实施方案中，白蛋白结合侧链包含可以是带负电的基团。在一个实施方案中，白蛋白结合侧链包含羧酸基团。

在一个实施方案中，白蛋白结合侧链选自直链烷基、分支烷基、具有ω-羧酸基团的基团、和部分或全部氢化的环戊烯菲支架。

在一个实施方案中，白蛋白结合侧链是cibacronyl残基。

在一个实施方案中，白蛋白结合侧链具有6-40个碳原子、8-26个碳原子或8-20个碳原子。

在一个实施方案中，白蛋白结合侧链是选自CH₃(CH₂)_rCO-的酰基，其中r是4-38的整数，具体而言4-24的整数，更优选选自CH₃(CH₂)₆CO-、CH₃(CH₂)₈CO-、CH₃(CH₂)₁₀CO-、CH₃(CH₂)₁₂CO-、CH₃(CH₂)₁₄CO-、CH₃(CH₂)₁₆CO-、CH₃(CH₂)₁₈CO-、CH₃(CH₂)₂₀CO-和CH₃(CH₂)₂₂CO-。

在一个实施方案中，白蛋白结合侧链是直链或分支烷烃α，ω-二羧酸的酰基。

在一个实施方案中，白蛋白结合侧链是A-B-C-D-或A-C-D-或A-B-C-或A-C-，

其中A-是

其中p选自10、11、12、13和14，并且d选自0、1、2、3、4和5，和

-B-选自

其中x选自0、1、2、3和4，并且y选自1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12，

或A-是

其中n选自12、13、14、15、16、17、18和19，并且B选自

其中x选自0、1、2、3和4，和

-C-选自

其中b和e各自独立地选自0、1和2，并且c和f各自独立地选自0、1和2，前提是当c是0时b是1或2，或者当c是1或2时b是0，并且当f是0时e是1或2，或者当f是1或2时e是0，和

-D-附着至所述氨基酸残基并且是间隔物。

在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链附着至N末端氨基、酰胺化C末端的氨基或氨基酸的侧链，例如2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys的侧链。

在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链包含至少一个脂肪二酸，例如十六烷二酸、十八烷二酸或十二烷二酸，其由于所述脂肪酸的远端中的负电荷增加PYY类似物或其衍生物对于血清白蛋白的亲和力。在一个实施方案中，脂肪二酸或四唑可以附着至间隔物，例如但不限于带负电的氨基酸，例如L-γ-谷氨酸盐。在一个实施方案中，脂肪二酸或四唑可以附着至疏水性间隔物，例如但不限于氨甲环酸和异哌啶酸(isonipecotinic acid)。在一个实施方案中，组合的脂肪二酸或四唑和间隔物可以由间隔物分隔，所述间隔物例如但不限于8-氨基-3，6-二氧杂辛酸(Oeg)或几个Oeg间隔物。在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链包含1个Oeg分子。在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链包含2个Oeg分子。

在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链是2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4-({反式-4-[(19-羧基十九酰基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰-氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基。在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链是2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4-(19-羧基十九酰氨基)丁酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基-氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基。在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链是2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4-(17-羧基十七酰氨基)丁酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基-氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基。在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链是2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4-(15-羧基十五酰氨基)丁酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基-氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基。在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链是2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4-(十六酰氨基)丁酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基-氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基。在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链是[4-(16-(1H-四唑-5-基)十六酰氨磺酰)丁酰]乙氧基}乙氧基)乙酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]。

在一个实施方案中，-D-是提供白蛋白处理与肽的距离的间隔物，并且可以选自至少一个PEG分子例如至少2个连续PEG分子、至少一个甘氨酸例如至少2个连续甘氨酸、或其他小极性残基。在一个实施方案中，所述间隔物可以包含至少一个8-氨基-3，6-二氧杂辛酸(Oeg)分子，例如至少2个连续Oeg分子，或PEG类型的其他间隔物。在一个实施方案中，所述间隔物可以是肽，并且可以包含至少2个连续Gly分子或由至少2个连续Gly分子组成，形成甘氨酸聚合物。在一个实施方案中，间隔物由几个极性或亲水性氨基酸组成，例如但不限于(Ser-Gly)_n，其中n是整数；n＝1-20或1-10或1-5。在一个实施方案中，间隔物可以由非α-氨基酸组成，例如β-丙氨酸或8-氨基-辛酸或其组合。

在一个实施方案中，-D-是

其中k选自0、1、2、3、4、5、11和27，并且m选自0、1、2、3、4、5和6。

在一个实施方案中，A-B-C-D-选自下述且由下述中的任何一个组合：

在一个实施方案中，A-B-C-D-选自下述

在一个实施方案中，A-B-C-D由白蛋白结合片段A-B-C-和亲水性间隔物D组成。在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链可以与氨基、羧基或硫醇基团连接，并且可以通过N或C末端，或在赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酸或半胱氨酸的侧链上连接。在一个实施方案中，血清白蛋白结合侧链可以由二胺和二羧基团连接。在具有远端酸性基团的含有4-40个碳原子的线性和分支亲脂部分中，一系列白蛋白结合侧链是已知的。在一个实施方案中，来自本文式中所示的附着基团A、B、C和D的末端虚线键应被视为附着键，并且不以亚甲基结尾，除非这样陈述。在一个实施方案中，基团A、B、C和/或D通过酰胺键附着至彼此。

根据本发明的PYY类似物或其衍生物(SEQ ID NO：3至SEQ IDNO：30和SEQ ID NO：32至SEQ ID NO：35)以及PYY(3-36)(SEQID NO：1)及其衍生物(SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：31)显示于表1中。

表1.本发明的PYY类似物或衍生物和人PYY(3-36)列表

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：3。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：4。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：5。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：6。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：7。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：8。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：9。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：10。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ IDNO：20。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：21。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：22。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：25。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：26。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：29。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：30。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：33。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：35。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：11。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：13。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：16。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：17。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：18。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：19。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：23。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：24。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ IDNO：28。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：32。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物是SEQ ID NO：34。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物保留人PYY(1-36)生物学活性的至少约25％，具体而言约30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％、98％或99％百分比。在一个实施方案中，术语PYY的“生物学活性”意指在体内模型例如本文描述的用于小鼠中急性食物摄入的测定中诱导作用的能力。在一个实施方案中，PYY的“生物学活性”意指食物摄入的减少、对体重的作用、胃排空、呼吸商中的变化和/或对肠电解质分泌的作用。用于测定所述生物学作用的方法在本文中描述，例如在测定(V)、测定(VII)、测定(VI)、测定(VIII)和测定(IX)中。在一个实施方案中，与人PYY(1-36)相比，PYY类似物或其衍生物显示出改善的生物学活性。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物显示出人PYY(1-36)或人PYY(3-36)生物学活性的至少约110％、125％、130％、140％、150％、200％或更多。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物在本文描述的至少一个测定中具有作用，例如食物摄入、对体重的作用、胃排空、呼吸商中的变化、对肠电解质分泌的作用、测定(V)、测定(VII)、测定(VI)、测定(VIII)和测定(IX)，这等价于或大于人PYY(1-36)或人PYY(3-36)在相同测定中的效力。在一个实施方案中，与人PYY(1-36)或人PYY(3-36)相比，PYY类似物或其衍生物显示出改善的容易制造、稳定性和/或容易配制。

在一个实施方案中，与人PYY(1-36)、人PYY(3-36)或具有等同于所述衍生物的那种的血清白蛋白结合侧链的人PYY(3-36)相比，PYY类似物或其衍生物具有改善的药物代谢动力学概况。在一个实施方案中，根据本发明的包含血清白蛋白结合侧链的PYY类似物或其衍生物展示出持久的性质，这使得其适合于每天施用一次或以比每天一次更低的频率施用，例如在每周一次、每月2次或每月一次给药方案中。在一个实施方案中，所述药物代谢动力学概况或所述持久的性质通过测量PYY类似物或其衍生物的半衰期进行确定。

在一个实施方案中，本发明提供了具有高亲和力白蛋白结合作用的PYY类似物或其衍生物。在一个实施方案中，高亲和力白蛋白结合作用定义为，相对于人PYY(1-36)、人PYY(3-36)或具有等同于所述类似物或衍生物的那种的血清白蛋白结合侧链的人PYY(3-36)，根据本发明的PYY类似物或其衍生物的白蛋白结合是至少10倍，例如至少20倍、至少50倍或至少100倍。

在一个实施方案中，相对于人PYY(1-36)或人PYY(3-36)，PYY类似物或其衍生物具有基本上改善的半衰期。在一个实施方案中，相对于人PYY(1-36)或人PYY(3-36)，PYY类似物或其衍生物在啮齿类动物或非啮齿类动物模型中的半衰期改善至少3倍，例如至少6倍、10倍或50倍。在一个实施方案中，使用非啮齿类动物模型在体内测定的，与人PYY(3-36)相比，PYY类似物或其衍生物显示在5-500，例如10-500、20-500、50-500、10-400、20-400、50-400、100-500、100-400或200-500倍范围中的半衰期改善。在一个实施方案中，使用非啮齿类动物模型在体内测定的，与人PYY(3-36)相比，PYY类似物或其衍生物显示在1.2-4倍范围中的半衰期改善。在一个实施方案中，相对于人PYY(1-36)或人PYY(3-36)，PYY类似物或其衍生物具有在非啮齿类动物模型中基本上改善的半衰期，其中所述类似物或衍生物具有与人PYY(1-36)或人PYY(3-36)至少相同水平的对于Y2受体激活的效力。在一个实施方案中，相对于人PYY(1-36)或人PYY(3-36)，PYY类似物或其衍生物具有在非啮齿类动物模型中基本上改善的半衰期，其中所述类似物或衍生物具有人PYY(1-36)或人PYY(3-36)的至少50％，例如60％、70％、80％或80％对于Y2受体激活的效力。在一个实施方案中，相对于人PYY(1-36)、人PYY(3-36)或具有等同于所述类似物或衍生物的那种的血清白蛋白结合侧链的人PYY(3-36)测定半衰期或半衰期。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物具有在i.v.施用于小型猪后，至少10小时，例如至少20小时、至少30小时、至少40小时、至少50小时、至少100小时、至少150小时、至少200小时、至少250小时、至少300小时或至少350小时的体内半衰期，和在i.v.施用于小型猪后，备选地至少80小时的体内半衰期。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物的半衰期长于人PYY(3-36)的半衰期。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物的半衰期是人PYY(3-36)的半衰期的至少1.1，例如至少1.2、至少1.3、至少1.4或至少1.5倍。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物的半衰期是人PYY(3-36)的半衰期的至少2、至少4、至少6、至少8或至少10倍。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物的半衰期是人PYY(3-36)的半衰期的至少0.8、至少0.85、至少0.90％、至少0.95％或1倍。在一个实施方案中，半衰期通过如本文描述的测定(IV)，在血浆中的体外半衰期进行确定。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物的半衰期长于人PYY(3-36)的半衰期。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物的半衰期是人PYY(3-36)的半衰期的至少10倍，例如至少20、至少40、至少60、至少75、至少100、至少150、至少200、至少250、至少300、至少350或至少400倍。在一个实施方案中，根据本发明的PYY衍生物的半衰期长于具有等同于所述类似物或衍生物的那种的血清白蛋白结合侧链的人PYY(3-36)的半衰期。在一个实施方案中，根据本发明的PYY衍生物的半衰期是具有等同于所述类似物或衍生物的那种的血清白蛋白结合侧链的人PYY(3-36)的半衰期的至少2倍，例如至少3、至少4、至少5、至少6、至少7、至少8、至少9、至少10、至少12、至少15或至少20倍。在一个实施方案中，半衰期通过如本文描述的测定(V)，PK i.v.小型猪进行确定。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物包含至少一条血清白蛋白结合侧链和针对蛋白酶解分解进行稳定化的、选自置换、插入、缺失和修饰的至少一个改变，其中与人PYY(3-36)相比，所述血清白蛋白结合侧链和所述至少一个改变协同作用，以延长所述类似物或衍生物在体内的半衰期。术语“蛋白酶解分解”意指在体内或体外通过蛋白酶和肽酶的肽降解。在一个方面，术语“针对蛋白酶解分解的稳定性”意指对蛋白酶和肽酶的降解有抵抗力的肽。蛋白酶解分解以及针对蛋白酶解分解的稳定性可以使用如本文描述的测定(I)进行确定。

在一个实施方案中，PYY类似物或衍生物的Y2受体效力是人PYY(3-36)的Y2受体效力的1/2。在一个实施方案中，PYY类似物或衍生物的Y2受体效力shi人PYY(3-36)的Y2受体效力的1/5，例如1/10、1/20、1/50、1/100或1/150倍。在一个实施方案中，PYY类似物或衍生物的Y2受体效力小于人PYY(3-36)的Y2受体效力。在一个实施方案中，PYY类似物或衍生物的Y2受体效力在人PYY(3-36)的Y2受体效力的0.5和5倍之间。在一个实施方案中，Y2受体效力通过测定(I)，Y2受体ACTOne测定进行确定。在一个实施方案中，更低的受体效力对应于更高的EC50值。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物具有Y1受体效力，如通过测定(II)测定的，其高于人PYY(3-36)的Y1受体效力。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物具有Y5受体效力，如通过测定(III)测定的，其高于人PYY(3-36)的Y5受体效力。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物具有Y5/Y2受体效力比，如通过测定(III)和测定(I)分别测定的，其是至少5。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物具有Y5/Y2受体效力比，如通过测定(III)和测定(I)分别测定的，其至少等于或高于hPYY(3-36)的Y5/Y2受体效力比。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物具有Y5/Y2受体效力比，如通过测定(III)和测定(I)分别测定的，其是至少15或至少20。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物具有Y1/Y2受体效力比，如通过测定(II)和测定(I)分别测定的，其是至少2。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物具有Y1/Y2受体效力比，如通过测定(II)和测定(I)分别测定的，其高于hPYY(3-36)的Y1/Y2受体效力比。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物具有Y1/Y2受体效力比，如通过测定(II)和测定(I)分别测定的，其是至少15或至少20。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物具有Y1/Y2受体效力比，如通过测定(II)和测定(I)分别测定的，其是至少30或至少50。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物具有如通过测定(IV)测定的至少8小时的半衰期，和如通过测定(I)测定的小于10nM的Y2受体效力。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物具有如通过测定(IV)测定的至少8小时的半衰期，如通过测定(I)测定的小于10nM的Y2受体效力，和通过测定(III)和测定(I)分别测定的至少5的Y5/Y2受体效力比。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物具有如通过测定(IV)测定的至少8小时的半衰期，如通过测定(I)测定的小于10nM的Y2受体效力，和通过测定(III)和测定(I)分别测定的至少2的Y1/Y2受体效力比。

Y2受体选择性意指相对于Y1和/或Y5受体，选择性激活Y2受体的能力。相对于Y1或Y5受体的对于Y2受体的选择性分别通过Y1/Y2效力比或Y5/Y2效力比进行确定。Y2、Y1和Y5受体效力分别通过测定(I)、测定(II)和测定(III)进行确定。

在一个实施方案中，本文描述的PYY类似物或其衍生物的作用相对于具有等同于所述衍生物的那种的血清白蛋白结合侧链的hPYY(3-36)进行确定。

药物组合物

本发明还涉及药物组合物，其包含本发明的肽或衍生物；或其药学可接受的盐、酰胺或酯，和药学可接受的赋形剂。

本发明的一个目的是提供包含以0.1mg/ml-25mg/ml的浓度存在的PYY类似物或其衍生物的药物制剂，并且其中所述制剂具有3.0-9.0的pH。制剂可以进一步包含选自下述的至少一种：缓冲系统、一种或多种防腐剂、一种或多种张度剂、一种或多种螯合剂、一种或多种稳定剂和一种或多种表面活性剂。如本文使用的，术语“药物组合物”意指包含根据本发明的活性类似物或衍生物连同选自下述的药学赋形剂的产品：缓冲剂、防腐剂和任选地张度修饰剂和/或稳定剂。PYY类似物或其衍生物和含有其的组合物也用于制备用于本文提及的治疗应用的药物。

术语“赋形剂”泛指除一种或多种活性治疗成分外的任何组分。在一个特定实施方案中，赋形剂是惰性物质。在另一个实施方案中，它是灭活物质。在一个再进一步的实施方案中，它不是医学活性物质。

赋形剂可以发挥多个用途，例如作为载体、媒介物、稀释剂、片剂助剂和/或以改善活性物质的施用和/或吸收。

具有多种赋形剂的药学活性成分的配制是本领域已知的，参见例如Remington：The Science and Practice of Pharmacy(例如第19版(1995)和任何以后版本)。

用于在本发明的组合物中潜在使用的赋形剂的非限制性例子是：溶剂、稀释剂、缓冲剂、防腐剂、张度调节剂、螯合剂和稳定剂。这些中的任何一种或多种可以掺入本发明的药物组合物中。

在本发明的一个实施方案中，药物组合物是液体制剂。液体制剂的优选例子是水性制剂，即包含水的制剂。液体制剂可以是溶液或悬液。水性制剂一般包含至少50％w/w水，或至少60％、70％、80％，或甚至至少90％w/w的水。

在另一个实施方案中，药物组合物是固体制剂，例如冷冻干燥或喷雾干燥组合物，其可以像这样使用或在使用前医生或患者向其加入溶剂和/或稀释剂使用。

水性制剂中的pH可以是在pH 3到pH 10之间的任何。在本发明的一个实施方案中，制剂的pH是约7.0-约9.5。在本发明的另一个实施方案中，制剂的pH是约3.0-约7.0。

在本发明的一个进一步实施方案中，药物组合物包含缓冲剂。缓冲剂可以例如选自乙酸钠、碳酸钠、柠檬酸盐、甘氨酰甘氨酸、组氨酸、甘氨酸、赖氨酸、精氨酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠和三(羟基甲基)-氨基甲烷、N-二(羟乙基)甘氨酸、三(羟甲基)甲基甘氨酸、苹果酸、琥珀酸盐、马来酸、延胡索酸、酒石酸、天冬氨酸及其混合物。这些特异性缓冲剂中的每一种构成本发明的备选实施方案。

在本发明的一个进一步实施方案中，药物组合物包含防腐剂。防腐剂可以例如选自苯酚、邻甲酚、间甲酚、对甲酚、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、2-苯氧乙醇、对羟基苯甲酸丁酯、2-苯乙醇、苄醇、三氯叔丁醇和硫柳汞、溴硝丙二醇、苯甲酸、咪唑烷基脲(imidurea)、氯己定、脱氢乙酸钠、氯甲酚、对羟基苯甲酸乙酯、苄索氯铵、chlorphenesine(3p-氯苯氧基丙烷-1，2-二醇)及其混合物。防腐剂可以以0.1mg/ml-20mg/ml的浓度存在。这些特定防腐剂中的每一种构成本发明的备选实施方案。

在本发明的一个进一步实施方案中，药物组合物包含等渗剂。等渗剂可以例如选自盐(例如氯化钠)、糖或糖醇、氨基酸(例如甘氨酸、组氨酸、精氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、天冬氨酸、色氨酸、苏氨酸)、醛醇(例如甘油(丙三醇)、1，2-丙二醇(丙烯二醇)、1，3-丙二醇、1，3-丁二醇)聚乙二醇(例如PEG400)及其混合物。可以使用任何糖例如单、二或多糖，或水溶性葡聚糖，包括例如果糖、葡萄糖、甘露糖、山梨糖、木糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、海藻糖、右旋糖酐、支链淀粉、糊精、环糊精、α和βHPCD、可溶性淀粉、羟乙基淀粉和羟甲基纤维素-Na。糖醇定义为具有至少一个-OH基团的C4-C8烃，并且包括例如甘露醇、山梨糖醇、肌醇、半乳糖醇、卫矛醇、木糖醇和阿拉伯糖醇。在一个实施方案中，糖醇添加剂是甘露醇。这些特异性等渗剂中的每一种构成本发明的备选实施方案。

在本发明的一个进一步实施方案中，药物组合物包含螯合剂。螯合剂可以例如选自乙二胺四乙酸(EDTA)、柠檬酸和天冬氨酸的盐及其混合物。这些特异性螯合剂中的每一种构成本发明的备选实施方案。

在本发明的一个进一步实施方案中，药物组合物包含稳定剂。稳定剂可以例如是一种或多种氧化抑制剂、聚集抑制剂、表面活性剂和/或一种或多种蛋白酶抑制剂。这些各个种类稳定剂的非限制性例子公开于下文中。

术语“聚集物形成”指导致寡聚物形成的在肽分子之间的物理相互作用，这可以保留由溶液沉淀的可溶性或大的可见聚集物。在液体药物组合物的贮存过程中通过肽的聚集物形成不利地影响那种肽的生物学活性，导致药物组合物的治疗效果的丧失。此外，聚集物形成可以引起其他问题，例如当含多肽的药物组合物使用输注系统进行施用时，输液管、膜或泵的阻塞。

本发明的药物组合物可以包含在组合物的贮存过程中足以减少多肽的聚集物形成的量的氨基酸碱基。术语“氨基酸碱基”指一种或多种氨基酸(例如甲硫氨酸、组氨酸、咪唑、精氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、天冬氨酸、色氨酸、苏氨酸)或其类似物。任何氨基酸可以以其游离碱形式或以其盐形式存在。可以存在氨基酸碱基的任何立体异构体(即L、D或其混合物)。

在本发明的一个进一步实施方案中，当充当治疗剂的多肽是包含对于如下氧化敏感的至少一个甲硫氨酸残基的多肽时，可以加入甲硫氨酸(或其他含硫氨基酸或氨基酸类似物)以抑制甲硫氨酸残基至甲硫氨酸亚砜的氧化。可以使用甲硫氨酸的任何立体异构体(L或D)或其组合。

在本发明的一个进一步实施方案中，药物组合物包含选自高分子量聚合物或低分子化合物的稳定剂。稳定剂可以例如选自聚乙二醇(例如PEG 3350)、聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮、羧基-/羟基纤维素或其衍生物(例如HPC、HPC-SL、HPC-L和HPMC)、环糊精、含硫物质如单硫代甘油、硫代乙醇酸和2-甲基硫代乙醇和不同的盐(例如氯化钠)。这些特异性稳定剂中的每一种构成本发明的备选实施方案。

本发明的药物组合物可以包含另外的稳定化试剂，例如但不限于保护多肽抵抗甲硫氨酸氧化的甲硫氨酸和EDTA，和保护多肽抵抗与冻融或机械剪切相关的聚集的非离子型表面活性剂。

在本发明的一个进一步实施方案中，药物组合物包含一种或多种表面活性剂，优选一种表面活性剂、至少一种表面活性剂或2种不同表面活性剂。术语“表面活性剂”指包含水溶性(亲水性)部分和脂溶性(亲脂性)部分的任何分子或离子。表面活性剂可以例如选自阴离子型表面活性剂、阳离子型表面活性剂、非离子型表面活性剂和/或两亲离子型表面活性剂。

在本发明的一个进一步实施方案中，药物组合物包含一种或多种蛋白酶抑制剂例如EDTA(乙二胺四乙酸)和/或苄脒HCl。

本发明的药物组合物另外、任选成分包括例如湿润剂、乳化剂、抗氧化剂、填充剂、金属离子、油性媒介物、蛋白质(例如人血清白蛋白、明胶)和/或两性离子(例如氨基酸例如甜菜碱、牛磺酸、精氨酸、甘氨酸、赖氨酸和组氨酸)。

在本发明的一个实施方案中，每个施用的剂量含有0.01mg-10mg衍生物。

本发明的衍生物优选以药物组合物的形式施用。它可以在几个部位施用于有此需要的患者，例如在局部部位例如皮肤或粘膜部位；在绕过吸收的部位例如在动脉、静脉或心脏中；和在涉及吸收的部位，例如在皮肤中、在皮肤下、在肌肉中或在腹部中。

施用途径可以是例如舌；舌下；经颊；在口中；经口；在胃中；在小肠中；经鼻；经肺例如通过细支气管、肺泡或其组合；肠胃外、表皮；皮肤；经皮；结膜；输尿管；阴道；直肠；和/或眼。在一个特定实施方案中，组合物是经口组合物，并且施用途径是经由口。

本发明的组合物可以以几种剂型进行施用，例如作为溶液；悬液；乳剂；微乳剂；多重乳剂；泡沫；油膏；糊剂；石膏；软膏；片剂；包衣片；口香糖；洗液；胶囊例如硬或软明胶胶囊；栓剂；直肠胶囊；滴剂；凝胶；喷雾剂；粉末；气溶胶；吸入剂；滴眼剂；眼用软膏；眼洗液；阴道子宫托；阴道环；阴道软膏；注射液；原位转化液例如原位胶凝、凝固、沉淀和原位结晶；输注液；或作为埋植剂。在一个特定实施方案中，本发明的组合物是片剂，任选包被的，胶囊或口香糖。

本发明的组合物可以进一步在药物载体或药物递送系统中化合，例如以便改善稳定性、生物利用度和/或可溶性。在一个特定实施方案中，本发明的化合物可以通过共价、疏水和/或静电作用附着至此类系统。此类化合的目的可以是例如减少不利效应、达到时间疗法和/或增加患者依从。

本发明的组合物还可以在控制、持续、延长、延迟和/或缓慢释放药物递送系统的制剂中使用。

肠胃外施用可以借助于注射器任选笔样注射器或借助于输注泵通过皮下、肌内、腹膜内或静脉内注射执行。

本发明的组合物可以以溶液、悬液或粉末的形式经鼻施用；或它可以以液体或粉末喷雾剂的形式经肺施用。

经皮施用是再进一步的选项，例如通过无针注射，由贴剂例如离子电渗疗法贴剂，或经由经粘膜途径例如经颊。

在一个特定实施方案中，本发明的组合物是稳定化的制剂。术语“稳定化的制剂”指具有增加的物理和/或化学稳定性优选两者的制剂。一般而言，制剂在使用和贮存过程中必须是稳定的(遵照推荐的使用和贮存条件)直至达到有效期。

术语“物理稳定性”指由于暴露于热机械应激，和/或与失稳界面和表面(例如疏水表面)的相互作用，多肽形成生物学灭活的和/或不溶性聚集物的趋势。在不同温度暴露于机械/物理应激(例如搅拌)各个时间段后，水性多肽制剂的物理稳定性可以借助于目视检查和/或通过浊度测量进行评估。备选地，物理稳定性可以使用多肽的构象状态的分光光度计试剂或探针进行评估，例如Thioflavin T或“疏水贴剂”探针。

术语“化学稳定性”指在多肽结构中的化学(特别是共价)变化，导致与完整多肽相比，潜在具有减少的生物学效力和/或增加的免疫原性作用的化学降解产物形成。在暴露于不同环境条件后的多个时间点，例如通过SEC-HPLC和/或RP-HPLC，化学稳定性可以通过测量化学降解产物的量进行评估。

用根据本发明的衍生物的治疗也可以与影响葡萄糖水平和/或液体稳态的手术组合，所述手术例如胃束带术或胃旁路术。

应当理解根据本发明的衍生物与一种或多种上述化合物和任选地一种或多种进一步的药理学活性物质的任何稳定组合视为在本发明的范围内。

临床适应症

在一个实施方案中，本发明涉及至少一种PYY类似物或其衍生物用于制备药物的用途。在一个实施方案中，提供了使用PYY类似物或其衍生物治疗由Y2受体激动剂调节的疾病、病状或病症的方法。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物外周地例如i.v、s.c.或经口施用。在一个实施方案中，待通过本发明的方法治疗的受试者是哺乳动物，例如人、猫或犬。在一个实施方案中，使用治疗有效量的PYY类似物或其衍生物。PYY类似物或其衍生物可以单独或与至少一种另外药学试剂组合使用，所述药学试剂在治疗疾病、病状或病症或所述疾病、病状或病症的共病中是有用的。在哺乳动物中由Y2受体激动剂调节的疾病、病状或病症包括肥胖且是过重。此类疾病、病状或病症的共病将可能通过此类疾病、病状或病症的治疗顺带地改善。在一个实施方案中，提供了使用PYY类似物或其衍生物治疗肥胖的方法。

如本文使用的，术语化合物的“治疗有效量”指就在治疗前或在媒介物处理的组中测定的合适对照值而言，足以治愈、减轻或部分停滞给定疾病和/或其并发症的临床表现的量。足以实现这点的量定义为“治疗有效量”。对于每个目的的有效量将取决于疾病或损伤的严重性、以及受试者的重量和一般状态。应当理解合适剂量的测定可以使用常规实验通过构建值的矩阵且测试矩阵中的不同点来达到，所有这些在受过训练的医生或兽医的普通技术水平内。

如本文使用的，术语“治疗”、“处理”及其其他变体指为了对抗病状例如疾病或病症的患者处置和护理。在一个实施方案中，该术语意欲包括对于患者患有其的给定病状的整个治疗范围，例如施用所讨论的PYY类似物或其衍生物以减轻其症状或并发症，以延迟疾病、病症或病状的进展，治愈或消除疾病、病症或病状，和/或预防病状，因为预防应理解为为了对抗疾病、病症或病状的患者处置和护理，并且包括施用所讨论的PYY类似物或其衍生物以预防症状或并发症的发作。术语“治疗”、“处理”包含预防即预防性和缓和性处理。在一个实施方案中，本发明涉及在哺乳动物中减轻重量或引起重量丧失(包括预防或抑制重量增长)的方法，这包括给哺乳动物外周施用重量控制或重量减轻的量的PYY类似物或其衍生物。

在一个实施方案中，本发明涉及通过施用PYY类似物或其衍生物而减少食物摄入的方法。在一个实施方案中，本发明涉及通过施用PYY类似物或其衍生物在受试者中诱导饱腹感的方法。在一个实施方案中，本发明涉及通过施用PYY类似物或其衍生物受试者中减少热量摄入的方法。

在一个实施方案中，本发明涉及通过施用PYY类似物或其衍生物以减少营养素利用度的方法。在一个实施方案中，本发明涉及通过施用PYY类似物或其衍生物而抑制食物摄入、减慢胃排空、抑制胃酸分泌和抑制胰腺酶分泌的方法。在一个实施方案中，本发明涉及通过施用PYY类似物或其衍生物而治疗或预防代谢疾病例如1型、2型或妊娠糖尿病、肥胖和胰岛素抗性综合征(综合征X)的其他表现的方法。

在一个实施方案中，本发明涉及通过施用PYY类似物或其衍生物用于改变受试者中的能量代谢的方法。在一个实施方案中，用于改变受试者中的能量代谢的方法包括施用PYY类似物或其衍生物。在一个实施方案中，本发明涉及通过施用PYY类似物或其衍生物以增加受试者中的能量消耗和降低热量利用效率的方法。在一个实施方案中，本发明涉及通过施用PYY类似物或其衍生物增加能量消耗的方法。

在一个实施方案中，本发明涉及用于治疗和/或预防肥胖的方法，其中所述方法包括给有此需要的受试者施用治疗或预防有效量的PYY类似物或其衍生物。在一个实施方案中，受试者是肥胖或过重受试者。虽然“肥胖”一般定义为体重指数超过30，但为了本公开内容的目的，需要或希望减少体重的、包括具有小于30的体重指数的任何受试者包括在“肥胖”的范围中。其为胰岛素抗性、葡萄糖不耐受或具有任何形式的糖尿病(例如1型、2型或妊娠糖尿病)的受试者可以获益于本文公开的方法。在一个实施方案中，本发明涉及减少食物摄入、减少营养素利用度、引起重量丧失、影响身体组成和改变身体能量含量或增加能量消耗、治疗糖尿病和/或改善液体概况(包括减少LDL胆固醇和甘油三酯水平和/或改变HDL胆固醇水平)的方法，其中所述方法包括PYY类似物或其衍生物的施用。在一个实施方案中，本发明的方法用于治疗或预防可以通过减少受试者中的营养素利用度而减轻的病状或病症，其包括给所述受试者施用PYY类似物或其衍生物，此类病状和病症包括但不限于高血压、血脂异常、心血管疾病、进食障碍、胰岛素抗性、肥胖和任何种类的糖尿病。

在一个实施方案中，本发明涉及通过施用PYY类似物或其衍生物用于治疗和/或预防肥胖相关疾病的方法，所述疾病例如食物摄入的减少、综合征X(代谢综合征)、糖尿病、2型糖尿病和非胰岛素依赖性糖尿病(NIDDM)、高血糖症、胰岛素抗性、葡萄糖耐量受损、心血管疾病、高血压、动脉粥样硬化、冠状动脉疾病、心肌梗塞、外周血管疾病、中风、血栓栓塞性疾病、高胆固醇血症、高脂血症、胆囊疾病、骨关节炎、睡眠呼吸暂停、生殖病症例如多囊卵巢综合征，或乳腺、前列腺或结肠的癌症。

在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物提供了与媒介物相比，至少5％，例如至少10％、15％、20％、25％或30％的食物摄入减少。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物提供了与媒介物相比，在5-30％例如至少5-20％、5-15％或10-20％范围中的食物摄入减少。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物提供了与媒介物相比，至少5％，例如至少10％、15％、20％、25％或30％的体重减少。在一个实施方案中，PYY类似物或其衍生物提供了与媒介物相比，在5-30％例如至少5-20％、5-15％或10-20％范围中的体重减少。

胃肠相关适应症

在一个实施方案中，本发明涉及通过施用PYY类似物或其衍生物用于治疗和/或预防与过量肠电解质和水分泌相关的疾病、减少的吸收或肠炎症病状的方法，例如感染性腹泻、炎症性腹泻、短肠综合征或一般在手术操作例如回肠造口术后发生的腹泻。感染性腹泻的例子包括但不限于急性病毒性腹泻、急性细菌性腹泻(例如沙门氏菌属(salmonella)、弯曲杆菌属(Campylobacter)和梭菌属(Clostridium)或由于原生动物感染)、或旅行者的腹泻(例如诺沃克病毒或轮状病毒)。炎症性腹泻的例子包括但不限于吸收不良综合征、热带口炎性腹泻、慢性胰腺炎、溃疡性结肠炎、克罗恩氏病、腹泻和肠激惹综合征。

PYY类似物或其衍生物显示出广泛范围的生物学活性，某些与其抗分泌和抗运动性质有关。通过与上皮细胞的直接相互作用或者可能通过抑制刺激肠分泌的激素或神经递质的分泌，PYY类似物或其衍生物可以压制胃肠分泌。抗分泌性质包括胃和/或胰腺分泌的抑制，并且可以在以下疾病和病症的治疗和预防中是有用的，包括胃炎、急性胰腺炎、Barrett′s食管和胃食管回流病。

PYY类似物或其衍生物在任何数目的胃肠病症(参见例如，Harrison′s Principles of Internal Medicine，McGraw-Hill Inco，NewYork，第12版)的治疗中可以是有用的，所述胃肠病症与过量肠电解质和水分泌以及降低的吸收有关。测量肠电解质分泌的方法在(Eto B等人，Comparison of the antisecretory effect of endogenous forms ofpeptide YY on fed and fasted rat jejunum，Peptides，1997；18(8)：1249-55)的第1250页上描述。

在一个实施方案中，本发明涉及通过施用PYY类似物或其衍生物用于治疗和/或预防特征在于对肠的损害的病状的方法(参见通过引用整体合并入本文的WO 03/105763)，所述病状例如化学治疗诱导的腹泻、溃疡性结肠炎、炎性肠病、肠萎缩、肠粘膜丧失和/或肠粘膜功能的丧失。如WO 03/105763中所述，用于此类活性的测定包括11周龄雄性HSD大鼠，范围为250-300克，在12:12光暗周期中饲养，且允许随意获得标准啮齿类动物饮食(Teklad LM 485，Madison，WI)和水。动物在实验前禁食24小时。慢性肠炎的简单和重现性大鼠模型先前已由Morris GP，等人，″Hapten-induced model of chronic inflammation andulceration in the rat colon″，Gastroenterology，1989；96：795-803所描述。它显示出相对长的炎症和溃疡持续时间，提供以特定的受控方式研究慢性炎性疾病的病理生理学，且评估可潜在应用于人的炎性肠病的新治疗的机会。大鼠用3％异氟烷进行麻醉，并且置于设为37℃的调节加热垫上。将管饲针经直肠插入结肠内7cm。通过管饲针将溶解于50％乙醇(v/v)中的半抗原三硝基苯磺酸(TNBS)递送到结肠的腔内，以30mg/kg的剂量，在0.4-0.6mL的总体积中，如Mazelin，等人，″Protective role of vagal afferents in experimentally-induced colitis inrats″，Juton Nerv Syst，1998；73：38 45中所述。对照组结肠内接受盐水溶液(NaCl 0.9％)。在结肠炎诱导后4天，将结肠从被麻醉的大鼠中切除，所述大鼠随后通过断头术实施安乐死。测量被切除的结肠和脾脏的重量，并且对结肠拍照用于肉眼形态损害的评分。炎症定义为充血和肠壁增厚的区域。

其中可以使用PYY类似物或其衍生物的进一步适应症以及测定所述类似物或衍生物与所述适应症有关的作用的方法在国际申请号PCT/EP2009/055989中描述。具体而言，如国际申请号PCT/EP2009/055989中所述，PYY类似物或其衍生物可以用于治疗和/或预防选自下述的适应症：加强、诱导、增强或恢复胰岛或细胞中的葡萄糖应答性，治疗或预防与代谢病症、焦虑、高血压、鼻炎、促进伤口愈合有关的病状，减少手术后的休养时间，促进动脉生成，其中还描述了测定所述类似物或衍生物在至少一种所述适应症中的作用的方法。

在一个实施方案中，可以执行在其中施用PYY类似物或其衍生物的急性测试，以在起始慢性治疗前确保所述类似物或衍生物在待治疗的受试者中具有预期作用。通过这些方法，确保仅对用PYY类似物或其衍生物的治疗敏感的受试者用所述类似物或衍生物进行治疗。

合成

本发明的PYY类似物或其衍生物可以通过标准固相肽合成(SPPS)进行合成，使用自动化肽合成仪或传统工作台合成。固体支持物可以是例如Tentagel S RAM、氯三苯甲基(Cl)或Wang(OH)树脂，所有这些是可容易商购获得的。那些树脂的活性氨基或羟基与N-Fmoc氨基酸的羧基容易反应，从而经由与附着至树脂的接头的连接使其与聚合物共价结合。树脂结合的Fmoc-氨基酸可以通过暴露于20％哌啶在N-甲基吡咯烷酮(NMP)中的混合物得到脱保护，所述混合物容易地切割Fmoc-基团。后续氨基酸使用偶联剂进行偶联，且随后为Fmoc-基团的另一次脱保护。促进引入氨基酸对树脂-结合的氨基酸链的偶联的试剂的例子是：二异丙基碳化二亚胺(DIC)、四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)、O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N\N’-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)、O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲四氟磷酸酯(TBTU)、1H-羟基苯并三唑(HOBt)。

以逐步方式继续SPPS直至获得所需序列。在合成结束，树脂结合的受保护肽进行脱保护，切割在侧链上的保护基团并且还从树脂中切割肽。这用含清除剂例如三异丙基硅烷(TIPS)的三氟乙酸(TFA)来完成。该肽随后在二乙醚中沉淀且分离。通过溶液化学而不是固相化学的肽合成也是可行的。

可能希望纯化通过本发明生成的PYY类似物或其衍生物。肽纯化技术是本领域技术人员众所周知的。在一个水平上，这些技术涉及对于肽和非肽级分的细胞环境粗分级。使肽与其他蛋白质分离后，目的肽可以使用色谱和电泳技术得到进一步纯化，以实现部分或完全纯化(或纯化至同质性)。特别适合于制备纯肽的分析方法是离子交换色谱、排阻色谱、聚丙烯酰胺凝胶电泳和等电点聚焦。纯化肽的特别有效的方法是反相HPLC，随后为通过液相色谱/质谱法(LC/MS)和基质辅助激光解吸电离(MALDI)质谱法的纯化产物表征。纯度的另外证实通过测定氨基酸分析获得。

本发明的一些实施方案涉及包括根据本发明的PYY类似物或其衍生物的肽的纯化，并且在特定实施方案中，涉及基本纯化。如本文使用的，术语“经纯化的肽”意指可与其他组分分离的组合物，其中将肽纯化至相对于其天然可获得状态的任何程度。经纯化的肽因此还指与它天然存在的环境游离的肽。一般地，“经纯化的”将指已实施分级以去除多种其他组分的肽组合物，并且所述组合物基本上保留其表达的生物学活性。当使用术语“基本上纯化的”时，这个命名将指其中肽构成组合物的主要组分的组合物，例如构成组合物中约50％、约60％、约70％、约80％、约90％、约95％或更多的肽。

适合于在肽纯化中使用的多种技术将是本领域技术人员众所周知的。这些包括例如用硫酸铵、PEG、抗体等的沉淀；热变性，随后离心；色谱步骤例如离子交换、凝胶过滤、反相、羟磷灰石和亲和色谱；等电点聚焦；凝胶电泳；和此类及其他技术的组合。如本领域一般已知的，认为可以改变进行多个纯化步骤的次序，或可以省略一些步骤，并且仍产生用于制备基本上纯化的蛋白质或肽的合适方法。

不存在肽始终以其最纯化的状态提供的一般要求。事实上，考虑较不基本上纯化的产物在一些实施方案中将具有效用。通过使用组合的较少纯化步骤，或通过利用相同一般纯化方案的不同fopins，可以完成部分纯化。例如，应当理解利用HPLC仪器执行的阳离子交换柱色谱一般将导致比利用低压色谱系统的相同技术更多“倍”的纯化。显示出更低程度的相对纯化的方法可以具有在蛋白质产物的总回收或维持所表达蛋白质的活性中的优点。

可以任选从加工过程中获得的其他组分中纯化且分离本发明的PYY类似物及其衍生物。用于纯化肽的方法可以在美国专利号5,849,883中发现。这些文件描述了用于G-CSF组合物的分离和纯化的具体示例性方法，其可以用于分离和纯化本发明的PYY类似物及其衍生物。考虑到这些专利的公开内容，显而易见的是本领域技术人员将充分知道可以用于纯化来自给定来源的本发明的PYY类似物及其衍生物的许多纯化技术。

还考虑阴离子交换和免疫亲和色谱的组合可以用于产生PYY类似物或其衍生物的经纯化的组合物。

本发明的实施方案

类似物

1.与人PYY(1-36)或人PYY(3-36)相比，针对C末端蛋白酶解分解具有改善的稳定性的PYY类似物或其衍生物，所述分解降低所述类似物或衍生物的功能性。

2.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述PYY类似物不包含在PYY(1-36)、PYY(2-36)、PYY(3-36)、PYY(4-36)或PYY(5-36)的任何一个中的[N-甲基Tyr36]或[D-Ala3]。

3.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述功能性通过如本文描述的测定(IV)，在血浆中的体外半衰期进行确定。

4.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述类似物或衍生物包含式(I)的氨基酸序列：

式(I)

其中

Xaa₃是Ile、Val、Leu(1-氨基环戊基)羧酸、(1-氨基环己基)羧酸、1-氨基丁酸、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₁₄是Pro或羟脯氨酸；

Xaa₂₅是Arg、Ala、His、Tyr、氨基异丁酸、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸或Lys；

Xaa₃₃是Arg、N-甲基Arg、甲基赖氨酸、二甲基赖氨酸、三甲基赖氨酸、2-氨基-3-胍基-丙酸、2-氨基-4-胍基-丁酸、单甲基精氨酸、二甲基精氨酸、(2-胍基-乙氨基)-乙酸、(3-胍基-丙氨基)-乙酸、(4-胍基-丁氨基)-乙酸、2-氨基-3-(1-甲脒基-吡咯烷-2-基)-丙酸、2-氨基-4-(2-氨基-嘧啶-4-基)-丁酸、2-氨基-3-(4-胍基-苯基)-丙酸或氨基-(1-甲脒基-哌啶-4-基)-乙酸；

Xaa₃₄是Gln、Asn、His、Pro、N-甲基Gln、β-高Gln、(2-氨基甲酰-乙氨基)-乙酸、N-甲基Asn或N-甲基His；

Xaa₃₅是Arg、N-甲基Arg、甲基赖氨酸、二甲基赖氨酸、三甲基赖氨酸、2-氨基-3-胍基-丙酸、2-氨基-4-胍基-丁酸、单甲基精氨酸、二甲基精氨酸、(2-胍基-乙氨基)-乙酸、(3-胍基-丙氨基)-乙酸、(4-胍基-丁氨基)-乙酸、2-氨基-3-(1-甲脒基-吡咯烷-2-基)-丙酸、2-氨基-4-(2-氨基-嘧啶-4-基)-丁酸、2-氨基-3-(4-胍基-苯基)-丙酸或氨基-(1-甲脒基-哌啶-4-基)-乙酸；

Xaa₃₆是Tyr、Phe、N-甲基Tyr、C-α-甲基Phe、3-吡啶基丙氨酸或(4-羟基-苄氨基)-乙酸。

5.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述肽衍生自脊椎动物，例如哺乳动物例如人。

6.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述类似物或衍生物包含选自下述的置换成蛋白质生成或非蛋白质生成氨基酸残基的至少一个氨基酸残基

其中R1是氨基酸的侧链；并且R是H或C1-C12烷基。

7.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述类似物或衍生物包含由式(C)代表的氨基酸残基

其中

R1是氨基酸的侧链和

R选自烷基、苄基或苯基。

8.根据实施方案7的PYY类似物或其衍生物，其中所述类似物或衍生物包含在位置35中由式(C)代表的氨基酸残基。

9.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述类似物或衍生物包含至少一个肽键，其改变为还原的肽键或肽键等排物，例如四唑、磺酰胺或叠氮化物。

10.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述类似物或衍生物包含用N-甲基氨基酸、N-取代甘氨酸、高氨基酸、β-氨基酸、β-高氨基酸、C-α-甲氨基、具有缩短的侧链的氨基酸、具有甲基化侧链的氨基酸、α-甲基氨基酸、类肽或β-氨基酸的至少一个置换。

11.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述类似物或衍生物包含在选自位置36、35、34、33、32、31、30、29、28、27、26、25、21、20、19和4的位置中的至少一个置换。

12.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中Xaa₂₀是Ala。

13.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中Xaa₂₅选自His、氨基异丁酸(Aib)和Tyr。

14.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中Xaa₂₇是Ala。

15.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中Xaa₃₃是N-甲基Arg、甲基赖氨酸、二甲基赖氨酸、三甲基赖氨酸、2-氨基-3-胍基-丙酸、2-氨基-4-胍基-丁酸、单甲基精氨酸、二甲基精氨酸、(2-胍基-乙氨基)-乙酸、(3-胍基-丙氨基)-乙酸、(4-胍基-丁氨基)-乙酸、2-氨基-3-(1-甲脒基-吡咯烷-2-基)-丙酸、2-氨基-4-(2-氨基-嘧啶-4-基)-丁酸、2-氨基-3-(4-胍基-苯基)-丙酸或氨基-(1-甲脒基-哌啶-4-基)-乙酸。

16.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中Xaa₃₃是N-甲基Arg。

17.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中Xaa₃₄是Pro、N-甲基Gln、β-高Gln、(2-氨基甲酰-乙氨基)-乙酸、N-甲基Asn或N-甲基His。

18.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中Xaa₃₄是N-甲基Gln。

19.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中Xaa₃₄是β-高Gln。

20.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中Xaa₃₅是N-甲基Arg、甲基赖氨酸、二甲基赖氨酸、三甲基赖氨酸、2-氨基-3-胍基-丙酸、2-氨基-4-胍基-丁酸、单甲基精氨酸、二甲基精氨酸、(2-胍基-乙氨基)-乙酸、(3-胍基-丙氨基)-乙酸、(4-胍基-丁氨基)-乙酸、2-氨基-3-(1-甲脒基-吡咯烷-2-基)-丙酸、2-氨基-4-(2-氨基-嘧啶-4-基)-丁酸、2-氨基-3-(4-胍基-苯基)-丙酸或氨基-(1-甲脒基-哌啶-4-基)-乙酸。

21.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中Xaa₃₅是N-甲基Arg。

22.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中Xaa₃₅是N-甲基Gln。

23.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中Xaa₃₆是Phe、N-甲基Tyr、C-α-甲基Phe、3-吡啶基丙氨酸或(4-羟基-苄氨基)-乙酸。

24.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中Xaa₃₆是N-甲基Tyr、C-α-甲基Phe、3-吡啶基丙氨酸或(4-羟基-苄氨基)-乙酸。

25.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中Xaa₃₆是α-甲基Phe。

26.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中Xaa₃₃、Xaa₃₄、Xaa₃₅和Xaa₃₆中的至少一个选自

Xaa₃₃是N-甲基Arg、甲基赖氨酸、二甲基赖氨酸、三甲基赖氨酸、2-氨基-3-胍基-丙酸、2-氨基-4-胍基-丁酸、单甲基精氨酸、二甲基精氨酸、(2-胍基-乙氨基)-乙酸、(3-胍基-丙氨基)-乙酸、(4-胍基-丁氨基)-乙酸、2-氨基-3-(1-甲脒基-吡咯烷-2-基)-丙酸、2-氨基-4-(2-氨基-嘧啶-4-基)-丁酸、2-氨基-3-(4-胍基-苯基)-丙酸或氨基-(1-甲脒基-哌啶-4-基)-乙酸；

Xaa₃₄是N-甲基Gln、β-高Gln、(2-氨基甲酰-乙氨基)-乙酸、N-甲基Asn或N-甲基His；

Xaa₃₅是N-甲基Arg、甲基赖氨酸、二甲基赖氨酸、三甲基赖氨酸、2-氨基-3-胍基-丙酸、2-氨基-4-胍基-丁酸、单甲基精氨酸、二甲基精氨酸、(2-胍基-乙氨基)-乙酸、(3-胍基-丙氨基)-乙酸、(4-胍基-丁氨基)-乙酸、2-氨基-3-(1-甲脒基-吡咯烷-2-基)-丙酸、2-氨基-4-(2-氨基-嘧啶-4-基)-丁酸、2-氨基-3-(4-胍基-苯基)-丙酸或氨基-(1-甲脒基-哌啶-4-基)-乙酸；

Xaa₃₆是N-甲基Tyr、C-α-甲基Phe、3-吡啶基丙氨酸或(4-羟基-苄氨基)-乙酸。

27.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中Xaa₁和Xaa₂不存在或Xaa₁、Xaa₂、Xaa₃和Xaa₄不存在。

28.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述类似物或衍生物选自SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：16、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：18、SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：24、SEQ ID NO：27和SEQ ID NO：28。

29.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述类似物或衍生物是SEQ ID NO：32或SEQ ID NO：34。

30.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述类似物或衍生物选自SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：16、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：18、SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：24、SEQ ID NO：28、SEQ ID NO：32和SEQ ID NO：34。

31.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述类似物或衍生物不包含衍生化基团，并且其中所述类似物或衍生物不是

[N-甲基Arg33]PYY(3-36)，

[N-甲基Gln34]PYY(3-36)，

[N-甲基Arg35]PYY(3-36)，

[N-甲基Tyr36]PYY(1-36)，或

[N-甲基Tyr36]PYY(3-36)。

衍生物

32.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述类似物或衍生物包含用包含远端羧酸或远端四唑基团的血清白蛋白结合侧链的至少一个衍生化。

33.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述蛋白质生成或非蛋白质生成氨基酸残基在选自位置33、34、35和36的至少一个位置中。

34.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述类似物或衍生物包含用A-B-C-D-或A-C-D-或A-B-C-或A-C-的至少一个衍生化，

其中A-是

其中p选自10、11、12、13和14，并且d选自0、1、2、3、4和5，和

-B-选自

或A-是

其中n选自12、13、14、15、16、17、18和19，并且B选自

其中x选自0、1、2、3和4，和

-C-选自

-D-附着至所述氨基酸残基并且是间隔物。

35.根据实施方案34的PYY类似物或其衍生物，其中用A-B-C-D-或A-C-D-或A-B-C-或A-C-的所述衍生化附着至氨基酸残基，例如赖氨酸和/或N末端氨基和/或C末端氨基。

36.根据实施方案33-35中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述血清白蛋白结合侧链附着至所述肽主链的氨基酸的侧链的氨基。

37.根据实施方案33-36中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述血清白蛋白结合侧链附着至选自2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鸟氨酸和Lys的所述肽主链的氨基酸的侧链的氨基。

38.根据实施方案33-37中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述间隔物-D-包含至少一个8-氨基-3，6-二氧杂辛酸(Oeg)分子。

39.根据实施方案33-38中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述血清白蛋白结合侧链包含至少14个碳原子，例如16、18或20个碳原子。

40.根据实施方案33-39中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述血清白蛋白结合侧链包含酰胺。

41.根据实施方案33-40中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述血清白蛋白结合侧链包含远端羧酸基团或远端四唑基团。

42.根据实施方案33-41中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述血清白蛋白结合侧链包含具有至少14个碳原子的烷基链，其中所述烷基链包含远端羧酸或远端四唑基团。

43.根据实施方案33-42中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述血清白蛋白结合侧链包含C18二羧酸或C16二羧酸。

44.根据实施方案33-43中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述血清白蛋白结合侧链包含C16羧酸。

45.根据实施方案33-44中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述衍生化是2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4-({反式-4-[(19-羧基十九酰氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰氨基]-乙氧基}乙氧基)乙酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基或2-(2-{2-[2-(2-{2-[4-羧基-4-(17-羧基十七酰氨基)丁酰氨基]乙氧基}-乙氧基)乙酰氨基]-乙氧基}乙氧基)乙酰基。

46.根据实施方案33-45中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述类似物或衍生物选自SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：22、SEQ ID NO：25、SEQ ID NO：26、SEQ ID NO：29、SEQ ID NO：30和SEQ ID NO：31。

47.根据实施方案33-46中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述类似物或衍生物是SEQ ID NO：33或SEQ ID NO：35。

功能性的测定

48.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述功能性通过选自如本文描述的测定(IV)、测定(I)、测定(V)、测定(VII)、测定(VI)、测定(VIII)和测定(IX)的测定进行确定。

49.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述功能性通过选自如本文描述的测定(II)和测定(III)的测定进行确定。

功能实施方案

50.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述类似物或衍生物具有与人PYY(3-36)相比持久的性质。

51.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述半衰期是PYY(3-36)的半衰期的至少2倍，例如至少3、4、5或8倍。

52.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述半衰期是PYY(3-36)的半衰期的至少50倍，例如至少75、100、200或300倍。

53.根据实施方案36或37的PYY类似物或其衍生物，其中所述半衰期通过本文描述的测定(IV)或测定(V)进行确定。

54.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述类似物或衍生物适合于在选自每天一次、每周一次、每月2次和每月一次给药方案的给药方案中施用。

55.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中与人PYY、PYY(3-36)或具有等同于所述类似物或衍生物的那种的血清白蛋白结合基团的PYY(3-36)相比，所述类似物或衍生物显示改善的PK概况。

56.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中与人PYY、PYY(3-36)或具有等同于所述类似物或衍生物的那种的血清白蛋白结合基团的PYY(3-36)相比，所述类似物或衍生物显示持久的性质。

57.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中与人PYY、PYY(3-36)或具有等同于所述类似物或衍生物的那种的血清白蛋白结合基团的PYY(3-36)相比，所述类似物或衍生物显示改善的体内半衰期。

58.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中与人PYY、PYY(3-36)或具有等同于所述类似物或衍生物的那种的血清白蛋白结合基团的PYY(3-36)相比，治疗有效剂量的所述类似物或衍生物引起更少的副作用。

59.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中与hPYY(3-36)相比，所述类似物或衍生物具有增加的Y1/Y2受体效力比。

60.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中与hPYY(3-36)相比，所述类似物或衍生物具有增加的Y5/Y2受体效力比。

组合物

61.一种组合物，其包含如前述实施方案中任一项中定义的PYY类似物或其衍生物和至少一种药学赋形剂。

适应症

62.根据前述实施方案中任一项的PYY类似物或其衍生物用于在响应Y受体调节的病状治疗中使用。

63.根据实施方案62的PYY类似物或其衍生物，其中响应Y受体调节的所述病状是肥胖。

64.根据实施方案62或63的PYY类似物或其衍生物，其中所述类似物或衍生物每天一次、每周2次或每周一次地进行施用。

65.如实施方案1-60中任一项中定义的PYY类似物或其衍生物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗响应Y受体调节的病状，例如肥胖或肥胖相关疾病，例如食物摄入的减少。

66.如实施方案1-60中任一项中定义的PYY类似物或其衍生物用于在哺乳动物中施用的用途，其中与人PYY、PYY(3-36)或具有等同于所述类似物或衍生物的那种的血清白蛋白结合基团的PYY(3-36)相比，所述类似物或衍生物显示持久的性质。

67.通过施用如实施方案1-60中任一项中定义的PYY类似物或其衍生物治疗响应Y受体调节的病状的方法。

68.根据实施方案67的方法，其中响应Y受体调节的所述病状是肥胖。

69.根据实施方案67或68的方法，其中所述类似物或衍生物每天一次、每周2次或每周一次地进行施用。

70.根据实施方案67-69中任一项的治疗方法，其中响应Y受体调节的所述病状是肥胖相关疾病，例如食物摄入的减少、综合征X(代谢综合征)、糖尿病、2型糖尿病和非胰岛素依赖性糖尿病(NIDDM)、高血糖症、胰岛素抗性或葡萄糖耐量受损。

71.根据实施方案67-70中任一项的治疗方法，其中响应Y受体调节的所述病状是肥胖相关疾病，例如多囊卵巢综合征(PCOS)。

72.根据实施方案67-71中任一项的治疗方法，其中响应Y受体调节的所述病状是肥胖相关心血管疾病，例如高血压、动脉粥样硬化、冠状动脉疾病、心肌梗塞、外周血管疾病、中风、血栓栓塞性疾病、高胆固醇血症或高脂血症。

73.根据实施方案67-72中任一项的治疗方法，其中响应Y受体调节的所述病状是腹泻，例如感染性腹泻、炎症性腹泻、化学治疗诱导的腹泻、短肠综合征或一般在手术操作例如回肠造口术后发生的腹泻。

74.根据实施方案67-73中任一项的治疗方法，其中响应Y受体调节的所述病状是特征在于对于肠的损害的病状，例如化学治疗诱导的腹泻、溃疡性结肠炎、克罗恩氏病、肠萎缩、肠粘膜丧失和/或肠粘膜功能的丧失。

75.根据实施方案67-74中任一项的治疗方法，其中响应Y受体调节的所述病状是肠炎症性病状，例如溃疡性结肠炎或克罗恩氏病。

76.根据实施方案67-75中任一项的治疗方法，其中响应Y受体调节的所述病状是变应性或非变应性鼻炎。

77.根据实施方案67-76中任一项的治疗方法，其中响应Y受体调节的所述病状是焦虑。

78.根据实施方案67-77中任一项的治疗方法，其中与人PYY、PYY(3-36)或具有等同于所述类似物或衍生物的那种的血清白蛋白结合基团的PYY(3-36)相比，所述类似物或衍生物显示改善的PK概况。

79.根据实施方案67-78中任一项的治疗方法，其中与人PYY、PYY(3-36)或具有等同于所述类似物或衍生物的那种的血清白蛋白结合基团的PYY(3-36)相比，所述类似物或衍生物显示持久的性质。

80.根据实施方案67-79中任一项的治疗方法，其中与人PYY、PYY(3-36)或具有等同于所述类似物或衍生物的那种的血清白蛋白结合基团的PYY(3-36)相比，所述类似物或衍生物显示改善的体内半衰期。

81.根据实施方案67-80中任一项的治疗方法，其中与人PYY、PYY(3-36)或具有等同于所述类似物或衍生物的那种的血清白蛋白结合基团的PYY(3-36)相比，所述类似物或衍生物的治疗有效剂量引起更少的副作用。

实施例

使用的缩写

实施例1

树脂结合的肽的合成，SPPS法：根据在来自Protein Technologies的Prelude Solid Phase Peptide Synthesizer上的Fmoc策略以0.25mmol规模合成受保护的肽基树脂，使用在NMP中DIC和HOAt介导的偶联。用于合成肽酰胺的起始树脂是Rink-Amide树脂。使用的受保护的氨基酸衍生物是标准Fmoc-氨基酸(由例如Anaspec、Bachem、Iris Biotech、Watanabe或Novabiochem供应)。在某些情况下，Fmoc-氨基酸使用本领域已知的方法进行定制合成。待酰化的赖氨酸的ε氨基用Mtt进行保护。在某些情况下，肽的合成可以通过使用二肽例如来自Novabiochem，Fmoc-Ser(tbu)-ψSer(Me，Me)-OH的假脯氨酸得到改善，参见例如，来自Novobiochem 2002/2003或更新版本的目录，或W.R.Sampson(1999)，J.Pep.Sci.5，403。

用于从树脂中切掉肽的程序：在合成后，将树脂用DCM洗涤且干燥，并且通过用TFA/TIPS/水(92.5/5/2.5)或TFA/TIPS(95/5)的2小时处理，随后用二乙醚沉淀，从树脂中切掉肽。将肽再溶解于30％乙酸或类似溶剂中，并且通过标准RP-HPLC在C18柱上使用乙腈/TFA进行纯化。肽的同一性通过MALDI-MS加以证实。

用于去除Mtt-保护的程序：将树脂置于注射器中，并且用六氟异丙醇处理2 X 10分钟，以去除Mtt基团。如上所述，随后将树脂用DCM和NMP洗涤。

用于将侧链附着至赖氨酸残基的操作：使用标准酰化试剂例如但不限于DIC、HOBt/DIC、HOAt/DIC或HBTU，通过对于树脂结合的肽的酰化或在溶液中对于未受保护的肽的酰化，白蛋白结合侧链A-B-C-D、A-C-D、A-B-C或A-B可以附着至肽。

用于去除Fmoc-保护的操作：将树脂(0.25mmol)置于在手动振动器中的抽滤瓶中，并且用N-甲基吡咯烷酮/二氯甲烷(1∶1)(2x20ml)，且用N-甲基吡咯烷酮(1x20ml)，溶于N-甲基吡咯烷酮中的20％哌啶溶液(3x20ml，各10分钟)处理。将树脂用N-甲基吡咯烷酮(2x20ml)、N-甲基吡咯烷酮/二氯甲烷(1∶1)(2x20ml)和二氯甲烷(2x20ml)洗涤。

用于产物分析的操作

MALDI-MS：使用在Microflex(Bruker)上记录的基质辅助激光解吸飞行时间质谱法(MALDI-MS)测量肽的分子量。使用α-氰基-4-羟基肉桂酸的基质。基于MALDI-MS分析的结果计算产物的分子量。

UPLC(方法04_A3_1)：使用配备Waters Acquity UPLC HSS T31.8μm，2.1x150mm柱的Waters Acquity UPLC系统执行UPLC分析。在214和254nm处收集UV检测。烘箱温度是30℃。使用下述洗脱剂：洗脱剂A)溶于水/乙腈(90∶10)中的0.25M碳酸氢铵和洗脱剂B)乙腈/水(70∶30)。将柱用下述洗脱剂组成进行平衡：75％洗脱剂A，25％洗脱剂B。在注射后，将样品在16分钟过程中用溶于洗脱剂A中的25％-55％洗脱剂B的梯度以0.4ml/分钟洗脱。

UPLC(方法04_A4_1)：使用配备Waters Acquity UPLC HSS T31.8μm，2.1x150mm柱的Waters Acquity UPLC系统执行UPLC分析。在214和254nm处收集UV检测。烘箱温度是30℃。使用下述洗脱剂：洗脱剂A)溶于水/乙腈(90∶10)中的0.25M碳酸氢铵和洗脱剂B)乙腈/水(70∶30)。将柱用下述洗脱剂组成进行平衡：65％洗脱剂A，35％洗脱剂B。在注射后，将样品在16分钟过程中用溶于洗脱剂A中的35％-65％洗脱剂B的梯度以0.4ml/分钟洗脱。

UPLC(方法04_A6_1)：使用配备双波段检测器的Waters UPLC系统执行RP-分析。使用ACQUITY UPLC BEH130，C18，

1.7um，2.1mm x 150mm柱，40℃，在214和254nm处收集UV检测。使UPLC系统与含有下述的2个洗脱剂储库连接：A：10mM TRIS、15mM硫酸铵、80％H₂O、20％、pH 7.3；B：80％CH₃CN、20％H₂O。使用下述线性梯度：在16分钟过程中以0.35ml/分钟的95％A、5％B至10％A、90％B。

UPLC(方法07_B4_1)：使用配备Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm，2.1x150mm柱的Waters Acquity UPLC系统执行UPLC分析。在214和254nm处收集UV检测。烘箱温度是40℃。使用下述洗脱剂：洗脱剂A)溶于水中的0.05％三氟乙酸和洗脱剂B)溶于乙腈中的0.0％三氟乙酸。将柱用下述洗脱剂组成进行平衡：95％洗脱剂A，5％洗脱剂B。在注射后，将样品在16分钟过程中用溶于洗脱剂A中的5％-95％洗脱剂B的梯度以0.4ml/分钟洗脱。

UPLC(方法07_B4_2)：使用配备Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm，2.1x50mm柱的Waters Acquity UPLC系统执行UPLC分析。在214和254nm处收集UV检测。烘箱温度是40℃。使用下述洗脱剂：洗脱剂A)溶于水中的0.05％三氟乙酸和洗脱剂B)溶于乙腈中的0.0％三氟乙酸。将柱用下述洗脱剂组成进行平衡：95％洗脱剂A，5％洗脱剂B。在注射后，将样品在16分钟过程中用溶于洗脱剂A中的5％-95％洗脱剂B的梯度以0.4ml/分钟洗脱。

UPLC(方法07_B4_3)：使用配备Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm，2.1x150mm柱的Waters Acquity UPLC系统执行UPLC分析。在214和254nm处收集UV检测。烘箱温度是40℃。使用下述洗脱剂：洗脱剂A)溶于水中的0.05％三氟乙酸和洗脱剂B)溶于乙腈中的0.0％三氟乙酸。将柱用下述洗脱剂组成进行平衡：95％洗脱剂A，5％洗脱剂B。在注射后，将样品在16分钟过程中用溶于洗脱剂A中的5％-95％洗脱剂B的梯度以0.4ml/分钟洗脱。

UPLC(方法07_B2_1)：使用配备Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm，2.1x150mm柱的Waters Acquity UPLC系统执行UPLC分析。在214和254nm处收集UV检测。烘箱温度是40℃。使用下述洗脱剂：洗脱剂A)溶于水中的0.05％三氟乙酸和洗脱剂B)溶于乙腈中的0.0％三氟乙酸。将柱用下述洗脱剂组成进行平衡：95％洗脱剂A，5％洗脱剂B。在注射后，将样品在16分钟过程中用溶于洗脱剂A中的5％-60％洗脱剂B的梯度以0.4ml/分钟洗脱。

UPLC(方法07_B2_2)：使用配备Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm，2.1x50mm柱的Waters Acquity UPLC系统执行UPLC分析。在214和254nm处收集UV检测。烘箱温度是40℃。使用下述洗脱剂：洗脱剂A)溶于水中的0.05％三氟乙酸和洗脱剂B)溶于乙腈中的0.0％三氟乙酸。将柱用下述洗脱剂组成进行平衡：95％洗脱剂A，5％洗脱剂B。在注射后，将样品在16分钟过程中用溶于洗脱剂A中的5％-60％洗脱剂B的梯度以0.4ml/分钟洗脱。

基于UPLC分析的结果计算保留时间(RT)。

化合物的分析结果显示于下文：

n/a：未分析的

生物学测定

本发明的PYY类似物或其衍生物作为药学活性剂在减少哺乳动物(例如人)中的重量增长和肥胖治疗中的效用，可以通过激动剂在常规测定以及下文描述的体外和体内测定中的活性得到证实。

此类测定还提供了由此本发明的PYY类似物或其衍生物的活性可以与已知化合物的活性比较的方式，所述已知化合物例如人PYY(1-36)、人PYY(3-36)或具有等同于所述衍生物的那种的血清白蛋白结合侧链的人PYY(3-36)。

测定(I)：Y2受体ACTOne效力测定

这个测定提供了用于测定肽对Y2受体活性的体外作用的方法，使用基于ACTOne的FLIPR测定。ACTOne^TM是来自BD Biosciences(SanJose，CA)的可容易缩放的cAMP生物传感器HTS平台，用于测量Gs和Gi偶联的7TM受体发信号。细胞表达围绕修饰的大鼠嗅觉环状核苷酸门控的(CNG)钙通道开发的生物传感器-响应cAMP和cGMP的相当非区分性的离子通道。CNG已经改造为cAMP选择性的，并且因此充当cAMP应答生物传感器，其通过钙或膜电位应答染料发信号。表达Y2受体的ACTOne HEK-293细胞得自BD Biosciences。将细胞装载仅分布在细胞质中的钙响应染料。加入丙磺舒，有机阳离子转运蛋白的抑制剂，以阻止染料离开细胞。加入磷酸二酯酶抑制剂，以阻止格式化的cAMP被降解。加入异丙基肾上腺素(β1/β2激动剂)，以激活腺苷酸环化酶。当加入Y2或Y4受体激动剂时，腺苷酸环化酶被灭活。随后检测作为荧光降低的细胞质中降低的钙浓度。连同测试物质，将以匹配EC₈₀的浓度的异丙基肾上腺素加入所有孔中。如下执行测定：将细胞铺平板到Greiner 384-孔板中。使用Multidrop^TM(来自Labsystems，芬兰的384-Multidrop)，将含有560细胞/μl的25μl细胞悬液加入所有孔中。随后将细胞平板在温箱中在37℃伴随5％CO₂以最多至9块平板的堆叠温育过夜。使用Multidrop^TM，将细胞平板装载来自FLIPR calcium4试剂盒(Molecular Devices，CA，USA)的25μl探针。将细胞平板送回温箱，且在37℃以最多至9块平板的堆叠温育60分钟。随后在使用前，将细胞平板置于室温60分钟，不堆叠平板。将平板用锡箔覆盖以避光(该染料可以通过日光激发，这导致更高的基线和变动)。FLIPR(来自Molecular Devices，CA，USA的FLIPRtetra)同时加入1μl样品和1μl异丙基肾上腺素(0.05μM终浓度)。在FLIPR上的样品添加后330秒，测量来自孔的荧光信号。EC50计算为诱导荧光信号中的50％减少的Y2受体激动剂浓度。1000nM的报道值意指至少1000nM，因为这是测定的检测极限。

测定(II)-Y1受体ACTOne效力测定

这个测定提供了用于测量肽对Y1受体活性的体外作用的方法，使用基于ACTOne的FLIPR测定。该测定如对于Y2受体ACTOne效率测定(测定(I))所述的执行，除使用表达Y1受体的ACTOne HEK-293细胞外。1000nM的报道值意指至少1000nM，因为这是测定的检测极限。

测定(III)-Y5受体IPOne效力测定

IPOne-Tb测定(Cisbio，Bagnols-sur-Cèze Cedex，法国)是充当竞争性免疫测定的均相时间分辨荧光(HTRF)测定，其使用穴状化合物标记的抗IP1单克隆抗体和d2标记的IP1来测量IP1水平，其中IP1在与Gq途径偶联的7次跨膜受体激活后积累。在hY5 IPOne测定中，使用稳定表达人Y5受体和嵌合G蛋白Gqi5的HEK293细胞系，其中Gqi5确保Gi偶联的Y5受体的Gq发信号。用于该测定的缓冲液和试剂由IPOne-Tb试剂盒(Cisbio，Bagnols-sur-Cèze Cedex，法国)供应。该测定如下执行：在测定前一天，将细胞以在20μl中40,000细胞/孔的密度种植到384-孔小容量白色组织培养板，Greiner#784080中，并且在37℃伴随5％CO₂温育过夜。在测定当天，去除培养基，并且加入补充有0.005％Tween-20的10μl刺激缓冲液，连同5μl激动剂系列稀释物。随后将平板在37℃温育1小时。根据IPOne-Tb试剂盒方案，在裂解缓冲液中重构IP1-d2和IP1-穴状化合物。将各3μl的IP1-d2和IP1-穴状化合物工作溶液加入每个孔中。将平板在室温温育1小时。平板在具有665nm和620nm发射滤波器的Mithras LB 940 HTRF相容阅读器(Berthold Technologies，Bad Wildbad，德国)上阅读，并且信号计算为荧光比665nm/620nm。1000nM的报道值意指至少1000nM，因为这是测定的检测极限。

测定(IV)：在血浆中的体外半衰期

将1μM测试化合物在37℃与来自小型猪的肝素稳定化的血浆温育，向所述血浆中加入20％磷酸盐缓冲液(0.2M，pH 7.4)。在预定时间点获得等分试样，并且用有机溶剂沉淀血浆样品，并且通过LC-MS分析所得到的上清液，用于定量非降解的测试化合物。由时间曲线图测定体外半衰期，所述时间曲线图拟合为一阶动力学。

测定(V)：PK i.v.小型猪

用于测量PP类似物或其衍生物的药物代谢动力学(PK)概况的测量是下述小型猪PK测定。

在研究中包括来自Ellegaard

Minipigs A/S，丹麦的称重约18-30kg的5只雄性

小型猪。小型猪具有插入的2个中心静脉导管，其用于静脉内(i.v.)给药和血液取样。将测试化合物溶解于50mM K2HPO4，0.05％tween 80，pH＝8.0中至100-180nmol/ml的浓度或50mM NaHPO4，145mM NaCl，0.05％Tween 80，pH 7.4。

对于比较，可以施用对照化合物例如人PP(1-36)。猪用6-10nmol测试化合物/kg体重进行给药。血样在下述时间点获得：给药前，给药后30分钟、1、2、4、8、24、48、72、96、120、168和240小时。将血样收集到含有EDTA缓冲液用于稳定的试管内，且在离心前保持在冰上最大限度20分钟。分离血浆的离心操作可以是4℃，约2500g共10分钟。收集血浆且立即转移至贮存于-20℃的Micronic管直至测定时。

用于血浆样品的定量测定

通过与液体色谱偶联的紊流色谱伴随后续质谱检测(TFC/LC/MS)测定血浆中的测试物质。该方法的选择性允许在一个样品中定量多种化合物，例如4种化合物的药液筒给药/动物。

使用峰面积作为量的函数，计算在未知样品中的测试物质浓度。通过回归分析构建基于由分析物掺料的血浆样品的校准曲线。用于标准测定的一般动态范围是1-2,000nmol/l。该方法的性能通过以3个浓度水平共测定一式两份的质量控制(QC)样品得到确保。

分析物的储液和工作溶液在血浆中制备且在37℃温育1小时。

样品制备：将40.0μl EDTA-血浆加入160μl 50％甲醇、1％甲酸，随后涡旋且以14300rpm(16457g)在4℃离心20分钟。将上清液转移至96孔板，随后将板与0.4％BSA，37℃温育

小时。注射体积是25μl。

对于样品净化，使用来自Thermo Scientific，Franklin，MA，USA的TurboFlow C8(0.5 x 50mm)或Cyclone柱(0.5 x 50mm)，并且在来自Phenomenex，Torrance，CA，USA的Proteo 4μm柱(2.0 x 50mm)或Onyx C18柱(2.0 x 50mm)上完成LC分离。洗脱剂是甲醇、乙腈、Milli-Q水和甲酸的等度和梯度组合。通过以正模式电离操作的质谱仪完成选择性检测。

非区室分析(NCA)：使用WinNonlin Professional 5.0(PharsightInc.，Mountain View，CA，USA)，通过非区室药物代谢动力学分析(NCA)分析血浆浓度-时间曲线图。使用来自每只动物的单独血浆浓度-时间曲线图执行NCA。

测定(VI)：用于确定对急性食物摄入的作用的测定

在用于自动化监控食物摄入的BioDaq系统中确定在消瘦小鼠中的单次给药后的平均累积食物摄入。在研究中使用32只消瘦的C57Bl6J小鼠，8周龄。小鼠每笼饲养2只，但具有含孔的分隔壁，以分开小鼠。它们以相反昼夜节律饲养且伴随随意获取食物和水。在研究起始前，使小鼠适应系统2周。该系统由具有与每个盒相连的天平的32个单独盒组成，所述天平自动登记对于小鼠可获得的食物。登记每次小鼠食用的食物重量减少，并且在计算机上收集数据。连续收集数据。使用GraphPadPrism软件分析收集的数据。

在研究起始前，将小鼠禁食约18小时。小鼠用溶解于50mMNa₂HPO₄、0.145M NaCl、0.05％Tween 80，pH 7.4中的类似物进行s.c.(10ml/kg)处理。处理在光熄灭前30分钟发生。收集数据直到给药后48小时。

测定(VII)：确定对体重和/或身体组成的作用

对于本发明有用的另外测定包括可以确定PYY类似物或其衍生物对体重和/或身体组成的作用的那些。示例性测定是下述，其涉及ob/ob小鼠模型用于代谢疾病的利用：使用在相反日/夜周期上且伴随获得常规饮食(Altromin 1324，Brogaarden，丹麦)的ob/ob小鼠(Taconic，Hudson，NY)。小鼠在每周一次基础上进行称重。当小鼠已达到至少40克的体重时，它用于研究中。在起始研究前，就身体组分扫描(NMR扫描)所有小鼠。在起始研究前1周，小鼠每天称重一次，以获得稳定基线且使它们适应操作。将小鼠分成接受媒介物的s.c.给药的1个组(n＝10)和通过不同剂量或给药间隔的s.c.给药接受PYY类似物或其衍生物的n＝10动物的组。至少一种PYY类似物或其衍生物和任选地至少一种对照化合物，例如人PYY(1-36)或人PYY(3-36)，溶解于50mMNaH₂PO₄、165mM NaCl，pH＝7.4中。给药在每天相同时间点每天执行1次，在光灭前不久。作为s.c.施用的备选方案，某些或所有PYY类似物或其衍生物可以经由Alzet渗透微型泵递送。泵可以设为递送任何量的PYY类似物或其衍生物，例如1μmol/kg/24小时。对小鼠给药3周。与给药相组合，每天记录一次关于所有小鼠的体重。在处理1周和3周后，使用QNMR系统(Echo Medical Systems，Houston，Texas)就身体组分扫描小鼠。其后小鼠用颈部脱臼实施安乐死。在Graph PadPrism中分析数据。通过用ANOVA比较组及随后的Tukey’s事后检验评估统计显著性。p值＜0.05视为统计上显著的。

呼吸商(RQ，定义为CO₂生产除以O₂消耗)和代谢速率可以使用全动物间接量热法(Oxymax，Columbus Instruments，Columbus，OH)进行确定。小鼠可以通过异氟烷过剂量实施安乐死，并且测量肥胖指数(双侧附睾脂肪垫重量)。在本发明的方法中，PYY类似物或其衍生物是在本文描述的测定之一中具有效力的那些，例如确定食物摄入、胃排空、胰腺分泌、重量减少或身体组分测定的测定。

测定(VIII)：胃排空的测量

用于测量胃排空的示例性测定在Asakawa A等人，Characterization of the effects of pancreatic polypeptide in theregulation of energy balance，Gastroenterology，2003，124，1325-1336中在标题“胃排空”下在材料与方法部分第1326页中描述。

测定(IX)：食欲的测量

食欲可以通过本领域技术人员已知的任何方法进行测量。例如，在人中，降低的食欲可以通过心理学评估进行评估。在此类实施方案中，受体激动剂的施用导致感觉到的饥饿、饱腹感和/或充满度中的变化。饥饿可以通过本领域已知的任何方式进行评估。在一个实施方案中，使用心理学测定评估饥饿，例如通过使用例如问卷的饥饿感和感官知觉评估。

实施例2

PYY(3-36)类似物在小型猪血浆(测定(IV))以及Y2、Y1和Y5受体效力(分别地测定(I)、(II)和(III))中确定的体外半衰期比较显示于表2中。这个实验显示一些修饰引入PYY内延长PYY在体外的半衰期。

表2.PYY(3-36)化合物在小型猪血浆以及Y2、Y1和Y5受体效力中的体外半衰期

(Y2R、Y1R和Y5R分别是Y2、Y1和Y5受体)。

n/a：未分析的

实施例3

对于PYY类似物的衍生物和人PYY(3-36)测定Y2、Y1和Y5受体效力(分别地测定(I)、(II)和(III))，并且结果显示于表3中。

表3.PYY(3-36)化合物的Y2、Y1和Y5受体效力(Y2R、Y1R和Y5R分别是Y2、Y1和Y5受体)。

^*＝[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4-({反式-4-[(19-羧基十九酰氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)-丁酰氨基]-乙氧基}乙氧基)乙酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]；

^#＝{2-(2-{2-[2-(2-{2-[4-羧基-4-(17-羧基十七酰氨基)丁酰氨基]-乙氧基}乙氧基)-乙酰氨基]-乙氧基}乙氧基)乙酰基}；

n/a：未分析的

实施例4

根据如本文描述的测定(V)，PK i.v.小型猪确定PYY类似物或其衍生物和hPYY(3-36)的半衰期。结果显示于表4中。这个实验显示一些修饰引入PYY内延长PYY在体内的半衰期。

表4.在小型猪中确定的PYY(3-36)化合物的衍生物的体内半衰期

¹)RoA：施用途径。

^*＝[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4-({反式-4-[(19-羧基十九酰氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)-丁酰氨基]-乙氧基}乙氧基)乙酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]

^#＝{2-(2-{2-[2-(2-{2-[4-羧基-4-(17-羧基十七酰氨基)丁酰氨基]-乙氧基}乙氧基)-乙酰氨基]-乙氧基}乙氧基)乙酰基}

实施例5

根据测定(VI)在消瘦的禁食后再喂食C57BL/6小鼠中确定PYY衍生物对食物摄入的作用。在食物恢复前30分钟，小鼠施用以0.1、0.3和1.0μmol/kg的s.c.剂量的肽以及单独的媒介物，并且经过48小时测量累积食物摄入。关于SEQ ID NO：3的结果显示于表5和图1中。

表5.平均累积食物摄入(n＝5-8/组)

^*p＜0.05，^**p＜0.01，^***p＜0.001(ANOVA，Dunnetts事后)

实施例6

根据测定(VI)确定PYY衍生物对平均累积食物摄入的作用。结果显示于表6-8中。

表6.平均累积食物摄入(n＝7-8/组)

^*p＜0.05，^**p＜0.01，^***p＜0.001(ANOVA，Dunnetts事后)

表7.平均累积食物摄入(n＝6-8/组)

^*p＜0.05，^**p＜0.01，^***p＜0.001(ANOVA，Dunnetts事后)

表8.平均累积食物摄入(n＝7-8/组)

^*p＜0.05，^**p＜0.01，^***p＜0.001(ANOVA，Dunnetts事后)

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本发明包括如由可应用的法律允许的在与之附着的权利要求中所述的主题的所有修饰和等价物。

Claims

1.一种PYY类似物或其衍生物，其包含

ii.选自下述的置换成蛋白质生成或非蛋白质生成氨基酸残基的至少一个氨基酸残基

其中R1是氨基酸的侧链，并且R是H或C1-C12烷基。

2.根据前述权利要求中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述蛋白质生成或非蛋白质生成氨基酸残基在选自位置36、35、34、33、32、31、30、29、28、27、26、25、21、20、19和4或位置33、34、35和36的至少一个位置中。

3.根据前述权利要求中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述血清白蛋白结合侧链选自A-B-C-D-、A-C-D-、A-B-C-和A-C-，

其中A-是

其中p选自10、11、12、13和14，并且d选自0、1、2、3、4和5，和

-B-选自

或A-是

其中n选自12、13、14、15、16、17、18和19，并且B选自

其中x选自0、1、2、3和4，和

-C-选自

-D-附着至所述氨基酸残基并且是间隔物，例如至少一个8-氨基-3，6-二氧杂辛酸(Oeg)分子。

4.根据前述权利要求中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述血清白蛋白结合侧链是

2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4-({反式-4-[(19-羧基十九酰氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰氨基]-乙氧基}乙氧基)乙酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基或

2-(2-{2-[2-(2-{2-[4-羧基-4-(17-羧基十七酰氨基)丁酰氨基]乙氧基}-乙氧基)乙酰氨基]-乙氧基}乙氧基)乙酰基。

5.根据前述权利要求中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述类似物或衍生物包含式(I)的氨基酸序列：

式(I)

其中

Xaa₁₄是Pro或羟脯氨酸；

Xaa₃₆是Tyr、Phe、N-甲基Tyr、C-α-甲基Phe、3-吡啶基丙氨酸或(4-羟基-苄氨基)-乙酸；

其中Xaa₃₃、Xaa₃₄、Xaa₃₅和Xaa₃₆中的至少一个选自

6.根据前述权利要求中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中Xaa₃₃是N-甲基Arg、甲基赖氨酸、二甲基赖氨酸、三甲基赖氨酸、2-氨基-3-胍基-丙酸、2-氨基-4-胍基-丁酸、单甲基精氨酸、二甲基精氨酸、(2-胍基-乙氨基)-乙酸、(3-胍基-丙氨基)-乙酸、(4-胍基-丁氨基)-乙酸、2-氨基-3-(1-甲脒基-吡咯烷-2-基)-丙酸、2-氨基-4-(2-氨基-嘧啶-4-基)-丁酸、2-氨基-3-(4-胍基-苯基)-丙酸或氨基-(1-甲脒基-哌啶-4-基)-乙酸。

7.根据前述权利要求中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中Xaa₃₄是Pro、N-甲基Gln、β-高Gln、(2-氨基甲酰-乙氨基)-乙酸、N-甲基Asn或N-甲基His。

8.根据前述权利要求中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中Xaa₃₅是N-甲基Arg、甲基赖氨酸、二甲基赖氨酸、三甲基赖氨酸、2-氨基-3-胍基-丙酸、2-氨基-4-胍基-丁酸、单甲基精氨酸、二甲基精氨酸、(2-胍基-乙氨基)-乙酸、(3-胍基-丙氨基)-乙酸、(4-胍基-丁氨基)-乙酸、2-氨基-3-(1-甲脒基-吡咯烷-2-基)-丙酸、2-氨基-4-(2-氨基-嘧啶-4-基)-丁酸、2-氨基-3-(4-胍基-苯基)-丙酸或氨基-(1-甲脒基-哌啶-4-基)-乙酸。

9.根据前述权利要求中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中Xaa₃₆是N-甲基Tyr、C-α-甲基Phe、3-吡啶基丙氨酸或(4-羟基-苄氨基)-乙酸。

10.根据前述权利要求中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中Xaa₁和Xaa₂不存在或Xaa₁、Xaa₂、Xaa₃和Xaa₄不存在。

11.根据前述权利要求中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述类似物或衍生物选自SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：22、SEQ ID NO：25、SEQ ID NO：26、SEQ ID NO：29、SEQ ID NO：30、SEQ ID NO：33和SEQ ID NO：35。

12.根据前述权利要求中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中与人PYY(1-36)或人PYY(3-36)相比，所述类似物或衍生物针对C末端蛋白酶解分解具有改善的稳定性，所述分解降低所述类似物或衍生物的功能性，其中所述功能性通过如本文描述的测定(IV)、测定(I)或测定(V)进行确定。

13.根据前述权利要求中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述类似物或衍生物不包含衍生化基团，并且其中所述类似物或衍生物不是

[N-甲基Arg33]PYY(3-36)，

[N-甲基Gln34]PYY(3-36)，

[N-甲基Arg35]PYY(3-36)，

[N-甲基Tyr36]PYY(1-36)，或

[N-甲基Tyr36]PYY(3-36)。

14.根据前述权利要求中任一项的PYY类似物或其衍生物，其中所述类似物或衍生物选自SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：16、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：18、SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：24、SEQ ID NO：28、SEQ ID NO：32和SEQ ID NO：34。

15.根据前述权利要求中任一项的PYY类似物或其衍生物，用于治疗响应Y受体调节的病状，例如肥胖、肥胖相关疾病例如食物摄入的减少或糖尿病。

16.一种组合物，其包含如前述权利要求中任一项中定义的PYY类似物或其衍生物和至少一种药学赋形剂。