CN102552928A

CN102552928A - 一种治疗脑部肿瘤的双级靶向递药系统及其制备方法

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Publication number: CN102552928A
Application number: CN201010594309XA
Authority: CN
Inventors: 方晓玲; 辛洪亮; 沙先谊; 顾吉晋; 陈亮岑; 姜新义
Original assignee: Fudan University
Current assignee: Fudan University
Priority date: 2010-12-19
Filing date: 2010-12-19
Publication date: 2012-07-11

Abstract

本发明属生物医药技术领域，涉及治疗脑部肿瘤的靶向递药系统，具体涉及用于脑部肿瘤递药的载体系统-Angiopep-2修饰的聚合物纳米粒及其制备方法。本发明是以BBB和脑胶质瘤细胞上均高表达的低密度脂蛋白受体相关蛋白受体为作用靶点，构建通过LRP受体介导的BBB靶向和胶质瘤靶向双级靶向纳米递药系统。本发明的靶向递药系统能增加PTX的溶解性，延长体内循环时间，而且，PTX从载体中释放具有缓释作用，载体材料无毒、可生物降解和生物相容性好，能有效解决脑胶质瘤化疗同时存在的血-脑-肿瘤屏障的问题，可应用于治疗脑胶质瘤。

Description

一种治疗脑部肿瘤的双级靶向递药系统及其制备方法

技术领域

本发明属生物医药技术领域，涉及靶向递药系统，具体涉及一种用于治疗脑部肿瘤的双级靶向递药系统，尤其是用于脑部肿瘤递药的载体系统-Angiopep-2修饰的聚合物纳米粒及其制备方法。

背景技术

脑胶质瘤是临床最常见的肿瘤之一，研究表明，它是源于神经外胚层的肿瘤，约占颅内肿瘤发病率的40％～50％。由于胶质瘤呈恶性浸润性生长，且多生长在脑重要结构，如基底节，中央沟区，丘脑，脑干等部位，不仅手术难以全切，而且术后易复发。世界卫生组织数据显示，恶性胶质瘤是34岁以下肿瘤患者的第2位死亡原因，是35～54岁患者的第3位死亡原因。在全球，每年恶性脑胶质瘤无情地夺去18～60万中青年人的宝贵生命。

星状细胞瘤(Astrocytoma)是最常见的胶质瘤，占胶质瘤的70~80%，可生长在脑或脊髓内的任何地方。研究显示，成人的星状细胞瘤大多长在大脑，而儿童的星状细胞瘤则常长在小脑及脑干。就肿瘤的恶性度而言，星状细胞瘤可分为如下四级: 第一级-毛状星细胞瘤(Pilocytic Astrocytoma)，第二级-星细胞瘤(Astrocytoma)属低恶性肿瘤，第三级-分化不良星细胞瘤(Anaplastic Astrocytoma; AA)，第四级-多型性神经胶母细胞瘤(Glioblastoma Multiform; GBM)属恶性肿瘤^[1]。

胶质细胞瘤的生长特点为浸润性生长，与正常脑组织无明显界限，多数不限于一个脑叶，向脑组织外呈指状深入破坏脑组织，偏良性者生长缓慢，病程较长，自出现症状至就诊时间平均两年，恶性者瘤体生长快，病程短，自出现症状到就诊时多数在3个月之内，70-80%多在半年之内。

手术治疗基于胶质瘤的生长特点，理论上不可能完全切除，生长在脑干等重要部位的肿瘤有的则根本不能手术，所以手术的治疗目的只能局限于减少肿瘤体积降低肿瘤细胞数量、缓解荷瘤症状、暂时降低颅内压、完成肿瘤病理诊断等四个诊疗目的。然而手术却会激活处于休眠期的瘤细胞迅速进入增殖期，造成术后短期内肿瘤恶性程度升级而复发。

术后辅助放疗无论从理论还是实践上，均被证实对恶性脑胶质瘤效果不佳，因为只有在放射剂量达到73～80Gy时，才能对胶质瘤细胞形成有效杀伤，而正常脑组织所能耐受的剂量仅有60Gy，这一剂量实际上只是对脆弱脑组织本身的放射治疗。

临床上化疗是继胶质瘤手术切除之后的诸多治疗环节中至关重要的一环，其成败对病人的生活质量和预后影响重大。恶性脑胶质瘤广泛浸润生长和瘤细胞在远离原发灶存在，决定了其术后应进行系统化疗，尤其在手术和放疗都难以达到疗效的情况下化疗是目前临床上重要的辅助治疗手段。目前该癌症的化学治疗已经取得很大进步，但术后辅助经静脉系统化疗最突出的问题是，由于脑血流量为全身血流量的1/5，同时存在脑部血脑屏障(BBB)的特殊结构，脑胶质瘤的化学治疗效果很不理想。因此，研究脑胶质瘤的靶向治疗方法显得尤为重要。

正常组织中的微血管内皮间隙致密、结构完整，大分子和脂质颗粒不易透过血管壁，而实体瘤组织中血管丰富、血管壁间隙较宽、结构完整性差，淋巴回流缺失，造成大分子类物质和脂质颗粒具有选择性高通透性和滞留性，这种现象被称作实体瘤组织的高通透性和滞留效应，简称EPR效应( enhanced permeability and retention effect)。实体瘤组织的病理结构特点，使得大分子抗癌药对实体瘤具有被动的靶向性或者选择性的特征，全身给药后在肿瘤组织中有较多的分布，又称为实体瘤的被动靶向性；而小分子抗癌药能够自由通过正常组织和肿瘤组织的血管壁，在正常组织和肿瘤组织中的药物分布一致，是造成抗癌效应选择性差、毒副作用较强的重要原因之一，不具备被动靶向作用。基于实体瘤组织的EPR特征的肿瘤治疗策略，可以在很大程度上增高抗癌药物的靶向性，提高药效，减轻毒副作用。

纳米粒是目前研究较多的一类用于脑部肿瘤治疗的递药载体系统，主要因为纳米粒的表面容易功能化（如PEG化延长体内循环时间）、借助肿瘤的EPR效应使携带化疗药物的纳米粒进入肿瘤部位而增强化疗效果。但是，单靠这种肿瘤的被动靶向效应很难突破性提高脑胶质瘤的化疗效果，主要是由于1）脑胶质瘤内部细胞致密、组织间隙压力大、缺氧等特殊生理环境阻碍了化疗药物的进入；2）脑胶质瘤呈浸润性生长，浸润到正常脑组织的肿瘤EPR效应不明显、丰富的BBB阻碍了化疗药物的渗透。目前临床治疗中，急需解决脑胶质瘤化疗同时存在的血-脑-肿瘤屏障(Blood Brain Tumor Barrier, BBTB)的问题。

研究发现，Angiopep-2是一种分子量为2.4K的小分子多肽，它可以同通过LRP受体介导显著增加BBB的转运，其脑部渗透能力是Transfferin 的10倍。Angiopep-2与紫杉醇（PTX）结合物ANG1005在美国进入抗脑胶质瘤的一期临床研究。但是该结合物仍然水溶性差，应用时与Taxol一样，需要借助聚氧乙烯蓖麻油和乙醇作为增溶剂，所以仍然存在致敏、毒性和体内循环时间短等缺点。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的缺陷和不足，提供一种治疗脑部肿瘤的靶向递药系统，具体涉及一种新的用于脑部肿瘤递药的载体系统-Angiopep-2修饰的聚合物纳米粒(简称：ANG-NP-PTX)及其制备方法。

本发明的治疗脑部肿瘤的靶向递药系统，以血脑屏障(BBB)和脑胶质瘤细胞上均高表达的低密度脂蛋白受体相关蛋白（LRP）受体为作用靶点，构建通过LRP受体介导的BBB靶向和胶质瘤靶向双级靶向纳米递药系统。

具体而言，本发明提供了Angiopep-2修饰的PEG-PCL-PTX纳米粒(简称：ANG-NP-PTX)。

本发明的靶向递药系统通过下述方法制备：

首先，将一定量 MePEG-PCL、Male-PEG-PCL和PTX 溶解于二氯甲烷中溶解，加入1%胆酸钠水溶液，冰浴下200 W ，60 s间断超声形成水包油(O/W)乳剂；其次，分散到0.5% 胆酸钠水溶液并磁力搅拌5 min；再次，40℃旋转蒸发至无气泡除去二氯甲烷，12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液即得NP-PTX；然后，将制备的NP-PTX用一定量HEPES液(pH 7.0)吹打分散，加入计算量的Angiopep-2，室温下充氮气、避光孵育；最后，12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液，制得ANG-NP-PTX。

本发明中，PTX与 MePEG-PCL：Male-PEG-PCL=4～20﹕1，

本发明中，Male与Angiopep-2摩尔比为1～10﹕1

本发明用于治疗脑部肿瘤的靶向系统进行了体内外评价：

对本发明制备的Angiopep-2修饰PEG-PCL紫杉醇靶向纳米粒进行了体外药物释放试验、细胞毒试验、细胞摄取试验、体内外双级靶向性研究，结果表明，经Angiopep-2修饰后，没有显著改变PTX体外释放行为，但是显著增加U87 MG细胞的细胞毒性，增加U87 MG细胞的摄取能力，并且体内外结果证明呈现出双级靶向性。

1. 体外释放试验

对本发明的ANG-NP-PTX系统体外释放试验采用如下透析法：

取1 ml纳米粒溶液加入到截留分子量为1.4万的预溶胀透析袋内，扎紧袋口，投入37℃恒温，100 rpm 39 mL1M水杨酸钠溶液中；定时从释放介质中取出0.2 mL，同时补加等量37℃空白释放介质；样品PTX浓度HPLC方法测定，计算累积释放百分率F(t)(%)；结果见图1。

如图1所示，NP-PTX 与 ANG-NP-PTX在12 h的累积释放量分别为49.2 %和50.1 %(P > 0.05)，96 h累积释放量分别为77.2 %和79.1 %(P > 0.05)，可见两种纳米粒都呈现两相释放行为，前12 快速释放，后面基本呈零级释放，释药行为相似。

结果表明，对于ANG-NP-PTX，Angiopep-2的表面修饰并没有影响PTX的释放行为。

2. 细胞毒性试验

采用MTT法测定ANG-NP-PTX对U87 MG细胞的体外抑制试验，结果如图2所示。

如图2所示，Taxol, NP-PTX和ANG-NP-PTX三种制剂对U87 MG的IC₅₀值为225 ng/mL、248 ng/mL 和66 ng/mL ，结果表明，Angiopep-2修饰的纳米粒显著增大PTX对U87 MG的细胞毒作用(p<0.01)，其与ANG-NP/PTX通过U87 MG表面表达的LRP受体介导增加PTX入胞摄取量有关。

3. 细胞摄取

通过对载体材料进行异硫氰酸罗丹明(RBITC)荧光标记后用来考察载体系统的细胞定性摄取情况，

结果显示（如图 4和图5所示），在30-120 min内，ANG-NP组荧光强度（图4中的 B、 D、 F）明显强于NP组（图4中的A、C、E），并且该种摄取情况被200 μg/ml 游离Angiopep-2 和Aprotinin所抑制（如图5所示）。结果还显示，4℃条件下也可抑制ANG-NP的摄取，说明Angiopep-2修饰增加U87 MG细胞对纳米粒的摄取，该种摄取是通过LRP受体介导的，具有能量依赖性。

4. 体外双级靶向性评价

采用BCEC-U87 MG共培养模型来模拟体内脑胶质瘤的生理屏障，评价ANG-NP/PTX的双级靶向作用，结果见。

结果表明（如图5所示），ANG-NP/PTX对U87 MG细胞抑制率显著大于Taxol和NP/PTX (p<0.01)，这是由于BCEC和U87 MG都表达LRP受体，ANG-NP/PTX通过LRP介导增加BBB转运和U87 MG摄取的双重靶向结果，这种双级靶向效应可被200μg/mL 游离Angiopep-2 和 Aprotinin LRP受体的配体竞争抑制(p<0.01)。

5.体内双级靶向性评价

如图6中的A所示，DIR标记的纳米粒经尾静脉给药后，ANG-NP组在脑部荧光强度明显强于NP组，表明经过ANG修饰后增加了纳米粒的脑部趋向性。24 h后的离体器官荧光分布表明(见图6中的 B)，ANG-NP在脑部肿瘤部位的荧光强度明显强于NP组，且呈现全脑分布状态。

结果表明，1）ANG修饰的纳米粒增加血脑屏障的通透性；2）ANG修饰的纳米粒增加在胶质瘤部位的蓄积与滞留；因此，ANG-NP在体内显示出一定双级靶向性。

实验结果表明，本发明的靶向系统能增加PTX的溶解性，延长体内循环时间；具有通过LRP受体介导透过BBB和胶质瘤细胞的双级靶向功能；而且，PTX从载体中释放具有缓释作用，载体材料无毒、可生物降解和生物相容性好，有效解决脑胶质瘤化疗同时存在的血-脑-肿瘤屏障(Blood Brain Tumor Barrier, BBTB)的问题，可应用于治疗脑胶质瘤。

本发明的靶向递药系统的优点有：

1．通过采用纳米技术，大大提高PTX的溶解度，避免使用过程中有机溶剂引起的安全性问题。

2．通过制备成纳米粒，利用纳米粒的纳米尺寸效应和胶质瘤的EPR效应，有利于PTX在肿瘤部位富集。

3．PEG化长循环纳米粒延长PTX在体内的循环时间，增加PTX向肿瘤部位聚集的机会，减少网状内皮系统吞噬，降低PTX系统毒副作用。

4．Angiopep-2修饰后，通过LRP介导增加了肿瘤细胞对纳米系统的摄取，增强PTX对肿瘤细胞的凋亡作用和G2/M的捕获能力。

5．Angiopep-2修饰后，通过LRP介导增加纳米系统穿透血脑屏障的能力。

6．Angiopep-2修饰后，通过LRP介导实现一个靶向头基，BBB和肿瘤双级靶向作用的“一头双靶”功能。

为了便于理解，以下将通过具体的附图和实施例对本发明的微乳给药系统进行详细地描述。需要特别指出的是，具体实例和附图仅是为了说明，显然本领域的普通技术人员可以根据本文说明，在本发明的范围内对本发明做出各种各样的修正和改变，这些修正和改变也纳入本发明的范围内。

附图说明

图1是本发明中PTX 体外释放曲线图(n = 3)。

图2是本发明中U87 MG 细胞存活曲线图 (n = 3)。

图3是本发明中U87 MG 细胞的摄取荧光图，其中，图A和图B作用时间为30 min，图C和图D作用时间为60 min，图E和图F作用时间为120 min，图A、图C、图E是NP的摄取情况，图B、图D、图F是对ANG-NP的摄取情况。

图4是本发明中U87 MG细胞在不同抑制条件下的摄取荧光图。

图5是本发明中U87 MG在共培养模型中的细胞活力图 (n =3)。

图6是本发明中ANG-NP/PTX的双级靶向作用的比较图，其中，图A是荷U87 MG 胶质瘤小鼠经时荧光分布图，图B是24小时后小鼠离体器官荧光图。

具体实施方式

实施例1

将 PTX与 MePEG-PCL：Male-PEG-PCL= 20﹕1加入到二氯甲烷中溶解 ，加入1%胆酸钠水溶液，冰浴下200 W ，60 s间断超声形成水包油(O/W)乳剂。分散到0.5% 胆酸钠水溶液并磁力搅拌5 min。40℃旋转蒸发至无气泡除去二氯甲烷，12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液。用一定量HEPES液(pH 7.0)吹打分散，加入Angiopep-2（Male与Angiopep-2摩尔比为3﹕1），室温下充氮气、避光孵育8 h。12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液即得ANG-NP-PTX。测得粒径为62.4±4.5，每个纳米粒上ANG个数为7±3。

实施例2

将 PTX与 MePEG-PCL：Male-PEG-PCL= 15﹕1加入到二氯甲烷中溶解 ，加入1%胆酸钠水溶液，冰浴下200 W ，60 s间断超声形成水包油(O/W)乳剂。分散到0.5% 胆酸钠水溶液并磁力搅拌5 min。40℃旋转蒸发至无气泡除去二氯甲烷，12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液。用一定量HEPES液(pH 7.0)吹打分散，加入Angiopep-2（Male与Angiopep-2摩尔比为3﹕1），室温下充氮气、避光孵育8 h。12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液即得ANG-NP-PTX。测得粒径为84.5±6.8，每个纳米粒上ANG个数为25±5。

实施例3

将 PTX与 MePEG-PCL：Male-PEG-PCL= 9﹕1加入到二氯甲烷中溶解 ，加入1%胆酸钠水溶液，冰浴下200 W ，60 s间断超声形成水包油(O/W)乳剂。分散到0.5% 胆酸钠水溶液并磁力搅拌5 min。40℃旋转蒸发至无气泡除去二氯甲烷，12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液。用一定量HEPES液(pH 7.0)吹打分散，加入Angiopep-2（Male与Angiopep-2摩尔比为3﹕1），室温下充氮气、避光孵育8 h。12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液即得ANG-NP-PTX。测得粒径为124.2±8.2，每个纳米粒上ANG个数为54±9。

实施例4

将PTX与 MePEG-PCL：Male-PEG-PCL= 4﹕1加入到二氯甲烷中溶解 ，加入1%胆酸钠水溶液，冰浴下200 W ，60 s间断超声形成水包油(O/W)乳剂。分散到0.5% 胆酸钠水溶液并磁力搅拌5 min。40℃旋转蒸发至无气泡除去二氯甲烷，12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液。用一定量HEPES液(pH 7.0)吹打分散，加入Angiopep-2（Male与Angiopep-2摩尔比为3﹕1），室温下充氮气、避光孵育8 h。12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液即得ANG-NP-PTX。测得粒径为614.7±102.8，每个纳米粒上ANG个数为85±23。

实施例5

将 PTX与 MePEG-PCL：Male-PEG-PCL= 9﹕1加入到二氯甲烷中溶解，加入1%胆酸钠水溶液，冰浴下200 W ，60 s间断超声形成水包油(O/W)乳剂。分散到0.5% 胆酸钠水溶液并磁力搅拌5 min。40℃旋转蒸发至无气泡除去二氯甲烷，12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液。用一定量HEPES液(pH 7.0)吹打分散，加入Angiopep-2（Male与Angiopep-2摩尔比为10﹕1），室温下充氮气、避光孵育8 h。12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液即得ANG-NP-PTX。测得粒径为73.4±3.1，每个纳米粒上ANG个数为14±4。

实施例6

将PTX与 MePEG-PCL：Male-PEG-PCL= 9﹕1加入到二氯甲烷中溶解，加入1%胆酸钠水溶液，冰浴下200 W ，60 s间断超声形成水包油(O/W)乳剂。分散到0.5% 胆酸钠水溶液并磁力搅拌5 min。40℃旋转蒸发至无气泡除去二氯甲烷，12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液。用一定量HEPES液(pH 7.0)吹打分散，加入Angiopep-2（Male与Angiopep-2摩尔比为5﹕1），室温下充氮气、避光孵育8 h。12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液即得ANG-NP-PTX。测得粒径为93.5±4.8，每个纳米粒上ANG个数为34±6。

实施例7

将PTX与 MePEG-PCL：Male-PEG-PCL= 9﹕1加入到二氯甲烷中溶解，加入1%胆酸钠水溶液，冰浴下200 W ，60 s间断超声形成水包油(O/W)乳剂。分散到0.5% 胆酸钠水溶液并磁力搅拌5 min。40℃旋转蒸发至无气泡除去二氯甲烷，12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液。用一定量HEPES液(pH 7.0)吹打分散，加入Angiopep-2（Male与Angiopep-2摩尔比为3﹕1），室温下充氮气、避光孵育8 h。12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液即得ANG-NP-PTX。测得粒径为113.5±7.2，每个纳米粒上ANG个数为62±8。

实施例8

将PTX与 MePEG-PCL：Male-PEG-PCL= 9﹕1加入到二氯甲烷中溶解，加入1%胆酸钠水溶液，冰浴下200 W ，60 s间断超声形成水包油(O/W)乳剂。分散到0.5% 胆酸钠水溶液并磁力搅拌5 min。40℃旋转蒸发至无气泡除去二氯甲烷，12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液。用一定量HEPES液(pH 7.0)吹打分散，加入Angiopep-2（Male与Angiopep-2摩尔比为1﹕1），室温下充氮气、避光孵育8 h。12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液即得ANG-NP-PTX。测得粒径为713.5±172.4，每个纳米粒上ANG个数为79±24。

实施例9

将PTX与 MePEG-PCL：Male-PEG-PCL= 9﹕1加入到二氯甲烷中溶解，加入1%胆酸钠水溶液，冰浴下200 W ，60 s间断超声形成水包油(O/W)乳剂。分散到0.5% 胆酸钠水溶液并磁力搅拌5 min。40℃旋转蒸发至无气泡除去二氯甲烷，12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液。用一定量HEPES液(pH 7.0)吹打分散，加入Angiopep-2（Male与Angiopep-2摩尔比为1﹕1），室温下充氮气、避光孵育4 h。12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液即得ANG-NP-PTX。测得粒径为74.3±1.1，每个纳米粒上ANG个数为8±2。

实施例10

将PTX与 MePEG-PCL：Male-PEG-PCL= 9﹕1加入到二氯甲烷中溶解，加入1%胆酸钠水溶液，冰浴下200 W ，60 s间断超声形成水包油(O/W)乳剂。分散到0.5% 胆酸钠水溶液并磁力搅拌5 min。40℃旋转蒸发至无气泡除去二氯甲烷，12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液。用一定量HEPES液(pH 7.0)吹打分散，加入Angiopep-2（Male与Angiopep-2摩尔比为1﹕1），室温下充氮气、避光孵育6 h。12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液即得ANG-NP-PTX。测得粒径为91.5±4.7，每个纳米粒上ANG个数为26±7。

实施例11

将PTX与 MePEG-PCL：Male-PEG-PCL= 9﹕1加入到二氯甲烷中溶解，加入1%胆酸钠水溶液，冰浴下200 W ，60 s间断超声形成水包油(O/W)乳剂。分散到0.5% 胆酸钠水溶液并磁力搅拌5 min。40℃旋转蒸发至无气泡除去二氯甲烷，12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液。用一定量HEPES液(pH 7.0)吹打分散，加入Angiopep-2（Male与Angiopep-2摩尔比为1﹕1），室温下充氮气、避光孵育8 h。12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液即得ANG-NP-PTX。测得粒径为103.2±7.2，每个纳米粒上ANG个数为52±6。

实施例12

将PTX与 MePEG-PCL：Male-PEG-PCL= 9﹕1加入到二氯甲烷中溶解，加入1%胆酸钠水溶液，冰浴下200 W ，60 s间断超声形成水包油(O/W)乳剂。分散到0.5% 胆酸钠水溶液并磁力搅拌5 min。40℃旋转蒸发至无气泡除去二氯甲烷，12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液。用一定量HEPES液(pH 7.0)吹打分散，加入Angiopep-2（Male与Angiopep-2摩尔比为1﹕1），室温下充氮气、避光孵育12 h。12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液即得ANG-NP-PTX。测得粒径为184.3±10.2，每个纳米粒上ANG个数为67±6。

实施例13

将PTX与 MePEG-PCL：Male-PEG-PCL= 9﹕1加入到二氯甲烷中溶解，加入1%胆酸钠水溶液，冰浴下200 W ，60 s间断超声形成水包油(O/W)乳剂。分散到0.5% 胆酸钠水溶液并磁力搅拌5 min。40℃旋转蒸发至无气泡除去二氯甲烷，12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液。用一定量HEPES液(pH 7.0)吹打分散，加入Angiopep-2（Male与Angiopep-2摩尔比为1﹕1），室温下充氮气、避光孵育16 h。12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液即得ANG-NP-PTX。测得粒径为694.3±102.1，每个纳米粒上ANG个数为88±32。

以上实施例的结果表明，本发明用于治疗脑部肿瘤的靶向系统增加PTX的溶解性，延长体内循环时间；具有通过LRP受体介导透过BBB和胶质瘤细胞的双级靶向功能；而且，PTX从载体中释放具有缓释作用，载体材料无毒、可生物降解和生物相容性好，有效解决脑胶质瘤化疗同时存在的血-脑-肿瘤屏障(Blood Brain Tumor Barrier, BBTB)问题，可应用于治疗脑胶质瘤。

Claims

1.一种治疗脑部肿瘤的靶向递药系统，其特征在于，所述的靶向递药系统为Angiopep-2修饰的PEG-PCL-PTX纳米粒，其通过下述方法制备：

首先，将一定量 MePEG-PCL、Male-PEG-PCL和PTX 溶解于二氯甲烷中溶解，加入1%胆酸钠水溶液，冰浴下200 W ，60 s间断超声形成水包油 O/W 乳剂；

其次，分散到0.5% 胆酸钠水溶液并磁力搅拌5 min；再次，40℃旋转蒸发至无气泡除去二氯甲烷，12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液得NP-PTX；

然后，将制备的NP-PTX用一定量HEPES液 pH 7.0 吹打分散，加入计算量的Angiopep-2，室温下充氮气、避光孵育；

用一定量HEPES液(pH 7.0)吹打分散，加入Angiopep-2（Male与Angiopep-2摩尔比为1﹕1），

最后，12000 rpm 4℃离心60 min后弃去上清液，制得ANG-NP-PTX纳米粒。

2.按权利要求1所述的治疗脑部肿瘤的靶向递药系统，其特征在于，所述的制备方法中，PTX与 MePEG-PCL：Male-PEG-PCL=4～20﹕1。

3.按权利要求1所述的治疗脑部肿瘤的靶向递药系统，其特征在于，所述的制备方法中，所述的Angiopep-2中的Male与Angiopep-2摩尔比为1～10﹕1。

4.权利要求1的治疗脑部肿瘤的靶向递药系统在治疗脑胶质瘤药物中的用途。