CN102488619B - 连续生产艾塞那肽微球的装置及控制微球释放速度的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公布了一种连续生产艾塞那肽微球的装置及控制微球释放速度的方法。装置中高压容器内高压气体通过管道输送至挤压装置，挤压出微球后在初步固化装置中固化后进入软微球收集器，再通过液压输送阀输送到大容积装置，搅拌固化后，收集微球，冻干备用。首先将药物粉末溶解在强极性溶剂B1中，然后将该溶液按比例加入到溶解有聚合物的弱极性溶剂B2中，药物无法溶解在B2中，且B1和B2可以互溶；把水溶性物质C加入B1/B2混合溶剂中，通过高速搅拌使之混合均匀，再将形成的悬浊液分散到水相中，待有机溶剂挥发以后，得到包封了药物的缓控释微球。与现有技术相比，本发明成功的制备了高包封率，无突释现象，均匀释放完全的艾塞那肽PLGA缓释微球。

Description

连续生产艾塞那肽微球的装置及控制微球释放速度的方法

技术领域

本发明涉及到一种高效地将艾塞那肽包封入PLGA聚合物中，并通过加入不同浓度的碱性物质调节微球达到均匀完全释放的方法以及一种控制艾塞那肽微球均匀度的装置。

背景技术

缓控释微球是一种重要的缓控释型药物输送系统(Drug Delivery System DDS)。其通过将活性成分包封入聚合物中，使活性成分长期稳定可控的从微球中释放出来，从而达到缓释控释的目的。特别是针对蛋白或者多肽的缓控释微球还少之又少，随着医疗水平的不断提高，蛋白和多肽药物不可避免的会成为将来药物的主流，但是蛋白或多肽的缓控释微球还存在很多问题，比如载药量低，包封率低，突释严重，释放不完全等，严重影响了蛋白和多肽药物的发展。

已经报道的微球制备方法有多种，比如溶剂挥发法、凝聚法、喷雾干燥法、喷雾冷冻干燥法、Ultrasonic Atomization Method、Microfluidic Method以及Pore-closing method and thermoreversible-gel method。其中最常用的是水相中溶剂挥发法，它又可细分为单乳化法和复乳化法。

单乳化法的大致过程为：将蛋白质、多肽药物和聚合物一起溶解在一种有机溶剂或者多种有机溶剂的混合物中，然后将其分散在水相中。待有机溶剂挥发后，聚合物析出，得到包封了药物的微球。但是因为蛋白和多肽药物一般溶于水，而且蛋白存在复杂的精细结构，所以但乳化法的包封率很低，突释严重。

复乳化法的大致操作是将蛋白和多肽药物溶解在水溶液中，或者将蛋白和多肽药物制备成固体颗粒，然后将得到的含有药物的水溶液(W1)或者固体颗粒(S)分散在含有聚合物的有机相(O)中，形成一级乳液(W1/O, S/O)，再将其分散在另一个水相中，形成二级乳液（W1/O/W2, S/O/W），待有机溶剂挥发后，聚合物析出，得到包封了药物的微球。与单乳化法相比，复乳化法的包封率有了很大的提高。多肽和蛋白类药物微球的制备方法也多是复乳化法。

影响复乳化法包封率和突释的因素有很多，比如说高分子材料的浓度、分子量、活性成分的溶解度、制备工艺以及内外水相的比例。其中最重要的一点就是部分内水相会穿透中间有机相，并扩散到外水相，使得活性成分泄露出来，导致包封率降低；并且在冻干过程中使得微球产生很多孔洞，造成突释现象严重。因此，人们尝试各种方法来阻止或者减弱这一扩散现象，从而提高包封率，降低突释。常用的方法，有增加有机相中聚合物的浓度，聚合物的分子量，增加微球的粒径以及增加有机相和内水相两者之间的体积比。增加有机相中聚合物的浓度和聚合物的分子量均会使得有机相的粘度增加，从而是得活性成分向外扩散的能力减弱；增加微球的粒径使得微球表面积减小，从而降低了突释；增加有机相和内水相两者之间的体积比相当于内水相液滴大小相同的情况下，增加了中间有机相的厚度，从而减小扩散，提高包封率。

有研究者提出可以采用S/O/W法，即以及乳液不采用油包水(W/O)，而直接将多肽粉末悬浮在有机相中，然后将此悬浊液分散到水相中，形成S/O/W的复乳液。由于多肽粉末一般不溶于中间有机相溶剂，此方法可以避免W1/O/W2复乳化方法中内水相向外水相的扩散，提高了包封率。

一般的说，微球的粒径应该控制在1-200μm，优选地，应该控制在10-100μm。因为微球通常用于注射给药，粒径太大将导致必须用更大号的注射针头，这就增加了患者的不适应性。通常多肽粉末或者经处理得到的蛋白质固体颗粒粒径在10-100μm，如果直接用如此大粒径的粉末悬浮在有机溶剂中形成S/O悬浊液，然后用S/O/W复原乳化法制备微球，将会得到粒径很大的微球，并且导致药物包封率很低，突释现象严重，不能完全释放，缓释结果不令人满意。因此一般要用物理方法预先将药物粉末平均粒径减小到1-10μm，然后将粉末用于S/O/W复原乳化制备缓释微球。在用物理方法减小多肽和蛋白颗粒粒径的时候，常常会引起多肽和蛋白结构的改变，从而导致蛋白和多肽失活和变形，从而降低了药效；同时，在生产过程中，物理方法减小颗粒粒径将会使用大量的机械能，造成成本上的大幅提高。

有研究者对S/O/W复乳化法制备微球做了改进，通过将多肽预先溶解在强极性溶剂中，然后再将此溶剂加入一种溶解有聚合物的弱极性溶剂中，利用反溶剂作用使得多肽在弱极性溶剂中析出，形成微细颗粒均匀分散的悬浊液，从而进一步采用S/O/W制备微球（专利200410053612.3，上海华谊生物技术有限公司）此法比物理方法减小多肽和蛋白颗粒粒径更有优势，但是其制备的微球依旧存在突释严重，释放不完全等现象。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术的不足，提供连续生产粒径径均匀的艾塞那肽微球的装置以及在该装置中进行的控制微球释放速度的方法。该方法直接使用大粒径的蛋白质、多肽粉末，通过S/O/W复乳化法制备艾塞那肽缓释微球，而且又能保证理想的包封率和减小突释、促使药物完全释放得到理想缓控释效果。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

本发明涉及一种连续生产粒径径均匀的艾塞那肽微球的装置，包括高压容器1、气体输送管道2、挤压装置3、微球初步固化装置4、软微球收集器5、液压输送阀6，搅拌桨7，大容积装置8；所述高压容器1中的高压气体通过气体输送管道2输送至挤压装置3， 挤压出大小一定的微球，然后在微球初步固化装置4的管柱中得到初步固化后进入软微球收集器5中，通过液压输送阀6输送到大容积装置8，通过搅拌桨7搅拌固化后，收集微球，冻干备用。

优选的，所述高压容器1内的高压气体为氮气或二氧化碳气。

优选的，所述气体输送管道2为软管或金属管道。

优选的，所述挤压装置3由一个带有固定孔径大小的膜或者喷头组成，用来挤压出粒径均匀的微球。

优选的，所述微球初步固化装置4的管柱为一个玻璃圆柱管或者其他材质的圆柱管，用于初步固化软微球，防止粘连。

优选的，所述软微球收集器5是由球形容器或其他形状的容器组成，用于承接初步固化的微球。

优选的，所述液压输送阀6由一个带有楔形接口和球形阀的管道组成，用于输送初步固化的微球到大容积装置8中。

优选的，所述搅拌桨7为一个双叶搅拌桨或单叶浆。

优选的，所述大容积装置8的材质为不锈钢。

本发明还涉及一种在前述的连续生产粒径径均匀的艾塞那肽微球的装置中，利用一种改善艾塞那肽PLGA微球匀速释放的方法生产微球，包括以下步骤：

a、将艾塞那肽粉末溶解于强极性溶剂B1中；

b、将步骤a制得的溶液加入到溶解了聚合物的弱极性溶剂B2中，并得到艾塞那肽微细颗粒均匀分散的悬浊液，其中艾塞那肽活性成分不溶于B2，B1与B2能够互溶，B2与水不互溶，且B2与B1的体积比为1～50；

c、将易溶于水的物质C混悬于步骤b制得的溶液中中，得到艾塞那肽与水溶性物质C微细颗粒均匀分散的悬浊液，其中水溶性物质C不溶于B1和B2；

d、将步骤c中制得的悬浊液加入到含有表面活性剂的水溶液中；

e、将步骤d中制得的混合后的水溶液加入到水中；

f、待溶剂B1与B2进入水溶液或挥发后，得到包封了艾塞那肽的微球。

优选的，所述B2与B1的体积比为10:1～30:1。

优选的，所述的艾塞那肽活性成分粉末平均粒径为5～500μm。

优选的，所述强极性溶剂B1为甲醇、乙腈、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、乙酸中的一种或几种的混合物；

优选的，所述强极性溶剂为二甲基亚砜。

优选的，所述弱极性溶剂B2为二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯中的一种或几种的混合物。

优选的，所述的水溶性物质C平均粒径为5～500μm。

优选的，所述的水溶性物质C平均粒径为5～50μm。

优选的，所述水溶性物质C为氯化钠、硝酸钠、硫酸钠、氯化钾、硝酸钾、硫酸钾、氯化镁、氯化锌、氢氧化钠、氢氧化镁、氢氧化钾、硝酸铵、甘露醇中的一种或几种混合物。

优选的，所述水溶性物质C为氢氧化镁。

优选的，所述水溶性物质C以1%～20%W/V的浓度悬浮在含有聚合物和活性成分的弱极性溶剂B2中。

优选的，所述水溶性物质C以5%～10%W/V的浓度悬浮在含有聚合物和活性成分的弱极性溶剂B2中。

优选的，所述聚合物为聚乳酸、聚羟基乙酸，其共聚物或共混物。

优选的，所述聚合物以5%～25%W/ V的浓度溶解在弱极性溶剂B2中。

优选的，所述聚合物以7.5%～20%W/V的浓度溶解在弱极性溶剂B2中。

优选的，所述表面活性剂为油酸钠、硬脂酸钠、十二烷基磺酸钠、聚乙烯醇、羧甲基纤维素、卵磷脂、明胶、透明质酸、吐温、、司盘中的一种或几种的混合物。

优选的，所述表面活性剂为聚乙烯醇。

优选的，所述表面活性剂以1%～5%W/V的浓度溶解在水中。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明提供的改进的S/O/W复乳化方法，能直接将平均粒径在5～500μm的艾塞那肽粉末应用于S/O/W复乳化法制备缓控释微球，并达到提高包封率，减小突释，释放完全等效果。

附图说明

图1为连续生产艾塞那肽微球的装置示意图；

图2为微球扫描电镜图；

图3为艾塞那肽微球体外释放曲线；

图4为艾塞那肽微球小鼠体内药效示意图；

图5为艾塞那肽微球大鼠体内药动示意图；

其中，1、高压容器，2、气体输送管道，3、挤压装置，4、微球初步固化装置，5、软微球收集器，6、液压输送阀，7、搅拌桨，8、大容积装置，9、支架台。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例对本发明进行进一步说明。但本发明的技术性范围并不局限于这些实施例。

本发明首先将该药物粉末溶解在强极性溶剂B1中，然后将该溶液按照一定的体积比例加入到溶解有聚合物的第二种有机溶剂B2中，其中，B2为弱极性溶剂，药物无法溶解在B2中，且B1和B2可以互溶；之后，在把水溶性物质C加入B1/B2混合溶剂中，通过高速搅拌使之混合均匀，再将形成的悬浊液分散到水相中，待有机溶剂挥发以后，得到包封了药物的缓控释微球。

本发明提供的改进的S/O/W复乳化方法具体为：

第一个步骤是将艾塞那肽粉末溶解于强极性溶剂B1中。强极性溶剂可以是甲醇、乙腈、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、乙酸中的一种或几种的混合物；由于二甲基亚砜几乎无毒，并且溶解性能好，本发明优先选择二甲基亚砜（DMSO）作为B1用于溶解被包封物。

第二个步骤是将前一步骤得到的艾塞那肽溶液加入到溶解有聚合物的弱极性溶剂B2，艾塞那肽因反溶剂作用而沉淀，得到艾塞那肽药物微细颗粒均匀分散的悬浊液。本发明中使用的弱极性溶剂B2为二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯中的一种或几种的混合物。这种弱极性溶剂不能溶解被包封物，但是跟强极性溶剂B1有很好的互溶性且不能跟水互溶；这样，B1和B2混合后，丧失了对药物的溶解能力，蛋白质、多肽药物由于反溶剂作而沉淀出来形成悬浊液均匀分散在B1/B2混合溶剂中。在将溶解了艾塞那肽的B1溶液加入到B2中时，为达到是药物充分沉淀的目的，会控制两种溶剂的比例。B2与B1的比例要足够大，从而保证反溶剂现象的发生。一般的，B2与B1的体积比为10:1～30:1。

第三个步骤是将水溶性物质c混悬于B2中，得到艾塞那肽与水溶性物质C微细颗粒均匀分散的悬浊液，其中水溶性物质C不溶于B1和B2。做为代表性而非限制性的例子，本发明中使用的易溶于水的物质可以是氯化钠、硝酸钠、硫酸钠、氯化钾、硝酸钾、硫酸钾、氯化镁、氯化锌、氢氧化钠、氢氧化镁、氢氧化钾、硝酸铵、甘露醇中的一种或几种的混合物。由于氢氧化镁的调节释放的效果最为理想，本发明选择氢氧化镁做为水溶性物质C。为了得到粒径微细均匀的悬浊液，一般通过涡旋使得艾塞那肽和水溶性物质C的粒径控制到5～500μm （优选5～50μm ，更优选1～10μm之间）。同时为了控制艾塞那肽的释放行为，易水溶性物质C以1%～20%W/V （优选5%～10%W/V）的浓度悬浮在含有聚合物和活性成分的弱极性溶剂B2中最为合适。

本发明提供的改进的S/O/W复乳化方法，在得到艾塞那肽和易水溶性物质C的微细颗粒均匀分散的悬浊液后其他步骤与传统的W1/O/W2或者S/O/W方法相同，即将悬浊液加入到外水相中，然后通过搅拌或其他方式，待有机相进入水溶液或者挥发后，得到包封了药物的缓控释微球。然后溶静置、离心或者过滤等方法收集微球，并进行冻干。

本发明涉及到艾塞那肽（Exenatide）是美国西南部的大毒蜥在进食时所分泌唾液中的一种含有39 个氨基酸的多肽。 Exendin-4是胰高血糖素样肽－1（GLP-1）类似物，与哺乳动物的GLP-1氨基酸序列具有53%同源性，是有效的GLP-1受体激动剂，具有葡萄糖依赖型控制血糖浓度、刺激胰岛素分泌、抑制胰高血糖素分泌、抑制胰岛B细胞凋亡、减缓胃排空、减小食欲等生理活性，适于2 型糖尿病的治疗。Exendin-4的这些生理活性与GLP-1相似，但GLP-1在体内迅速的被二肽基肽酶IV（DPP－IV）所降解，半衰期只有1-2分钟，会很快被清除，而Exendin-4不易被DPP－IV降解，对DPP－IV的清除具有一定的抵抗作用，在体内循环的半衰期较长，可以达到60-90分钟。因此，艾塞那肽被认为下一代的理想的II型糖尿病治疗药物。

本发明涉及的用于包封药物的聚合物，包括生物可降解聚合物和生物不可降解聚合物。做为代表而非限制性的例子，聚合物可包括聚乳酸或聚羟基乙酸，其共聚物或共混物。优选地，聚合物以5%-25%W/V的浓度溶解在弱极性溶剂B2中，更优选地，为7.5%-2% W/V。

得到药物和水溶性物质C微细颗粒均匀分布的悬浊液后，将其加入到含有表面活性剂的水相中，待有机溶剂挥发后，即可得到缓控释微球。可用于本发明的表面活性剂包括但不局限于：油酸钠、硬脂酸钠、十二烷基磺酸钠、聚乙烯醇、羧甲基纤维素、卵磷脂、明胶、透明质酸、吐温、司盘中的一种或几种的混合物。优选为聚乙烯醇。外水相中表面活性剂浓度一般在1%-5%W/V之间。

本发明的能连续生产艾塞那肽微球的装置，如图1所示。装置共由九部分组成。第一部分是产生体系压力的装置（高压容器1），可是高压的氮气或二氧化碳等气体。第二部分是空心管道（气体输送管道2，为软管或金属管道）用于输送高压气体。第三部分是一种带有固定孔径的装置（挤压装置3，由一个带有固定孔径大小的膜或者喷头组成，用来挤压出粒径均匀的微球），用于在高压气体作用下产生具有一定均匀度的微球。第四部分是一个圆柱型容器（微球初步固化装置4，其管柱为一个玻璃圆柱管或者其他材质的圆柱管，用于初步固化软微球，防止粘连。）用于初步固化软微球，防止微球之间粘连。第五部分是一个收集初步固化的微球或其他形状的球形容器（软微球收集器5，用于承接初步固化的微球）。第六部分是一个带有楔形吸口和球形阀门的管道组成的液压输送阀6，用于输送初步固化的微球进入系统的下一部分。第七部分是一个双叶搅拌桨或单叶浆（搅拌桨7）。第八部分是一个用于固化的微球的容器（大容积装置8，其材质为不锈钢）。第九部分是一个支架台9，支架台9用于放置大容积装置8和固定搅拌桨7。所述高压容器1中的高压气体通过气体输送管道2输送至挤压装置3， 挤压出大小一定的微球，然后在微球初步固化装置4的管柱中得到初步固化后进入软微球收集器5中，通过液压输送阀6输送到大容积装置8，通过搅拌桨7搅拌固化后，收集微球，冻干备用。

实施例1

本实施例中使用的聚合物为聚乳酸-聚羟基乙酸(Poly(lactic-co-glycolic acid)) (PLGA) 2A DL (lactide:glycolide=50:50) 特性粘度（即IV）为0.39。

改进的S/O/W复乳化法

将艾塞那肽冻干粉末5mg直接加入到100μlDMSO溶液中溶解，再转移至1ml溶有150mgPLGA(50:50)2A的二氯甲烷(DCM)中，使用涡旋仪高速涡旋使之分散均匀。再将10mg氢氧化镁粉末加入到DCM中，放入磁子高速涡旋得到艾塞那肽与氢氧化镁微细颗粒均匀分散的悬浊液。然后将混悬液加入图1的装置中，进行乳化。通过调节气压大小和第三部分孔径大小控制为微球的粒径。在基础上，按此处方进行投药量放大生产直至一次性投入200mg艾塞那肽。

艾塞那肽的高效液相色谱分析（HPLC）

使用Agilent 1260 HPLC（Agilent Technologies， 美国），C-18反相色谱柱，流动相A为0.05% TFA溶液，流动相B为0.05%TFA in 30% ACN，梯度为30%-55%B/20分钟。

微球载药量分析

取5mg微球，溶于1ml二甲基亚砜(DMSO)中，是充分溶解，离心，取上清液用HPLC分析其中的艾塞那肽浓度。所有微球中包封的药物总质量与投药量的比值即为药物的包封率。

微球的形态和粒径分布

微球表面和内部形态使用扫描电镜观察。微球的粒径分布使用力度测定仪进行测量。图2是改进的S/O/W复乳化法制备的PLGA微球的的电镜图。可以看到，该方法制备的微球表面都比较光滑。

微球的体外释放试验

称取PLGA微球10～15mg（多管）置于释放小管中，加入1ml pH 7.4 的PBS缓冲液，37℃中100rpm 恒温振荡，隔一定时间取出一管进行冻干，然后按照载药量测定方法测定微球中剩余艾塞那肽药物含量，通过计算得出释放出艾塞那肽药物的含量。载药量和包封率的实验结果如表1所示，所有实验均重复三次。由表1可知：该法得到的包封率均在80%以上。微球的体外释放实验如图3所示，实验结果表明，改进的S/O/W复乳化法制备的微球几乎没有突释现象，两周内的累计释放达到90%。这就说明，本发明中加入易水溶性盐类在保证包封率的前提下，能够促使药物从微球中以均匀可控的速度释放出来，而且不引起突释现象，得到了具备优良缓控释效果的微球。

将按上面处方制备好的微球皮下注入C57小鼠体内评价药效。具体方案如下：实验前，所有动物进行空腹血糖检测，结果正常后方可开始正式实验。所有动物于实验第一天上午9：00注射相应工作液（0.2ml/20g b.w.）糖负荷为测血糖前半小时腹腔注射，20%葡萄糖水溶液，0.2ml/20g b.w.。然后取小鼠血用葡萄糖氧化酶试剂盒测血糖。图4是注射不同剂量微球后小鼠的血糖值，由图4可知：C57小鼠体内药效试验表明当注射微球量超过25mg/只时，在两周时间内有显著地降低血糖的效果。

将按上面处方制备的微球皮下注入SD大鼠的体内，定时尾静脉取血，用ELISA试剂盒测定血液中艾塞那肽的浓度。结果如图5所示，由图5可知：SD大鼠体内的艾塞那肽释放浓度，也表明制备的微球子在体内能有效地维持2周的时间。

表1：不同规模制备的微球包封率

Claims (19)

1.一种连续生产粒径均匀的艾塞那肽微球的装置，其特征在于，包括高压容器(1)、气体输送管道(2)、挤压装置(3)、微球初步固化装置(4)、软微球收集器(5)、液压输送阀(6)，搅拌桨(7)，大容积装置(8)；其中，所述微球初步固化装置(4)的管柱为一个基本竖直的玻璃圆柱管或者其他材质的圆柱管，用于初步固化软微球，防止粘连；所述软微球收集器(5)连接在所述微球初步固化装置(4)的底部；所述液压输送阀(6)由一个带有楔形接口和球形阀的管道组成，用于输送初步固化的微球到大容积装置(8)中；

所述高压容器(1)中的高压气体通过气体输送管道(2)输送至挤压装置(3)，挤压出大小一定的微球，然后在微球初步固化装置(4)的管柱中得到初步固化后进入软微球收集器(5)中，通过液压输送阀(6)输送到大容积装置(8)，通过搅拌桨(7)搅拌固化后，收集微球，冻干备用。

2.根据权利要求1所述的连续生产粒径均匀的艾塞那肽微球的装置，其特征在于，所述高压容器(1)内的高压气体为氮气或二氧化碳气。

3.根据权利要求1所述的连续生产粒径均匀的艾塞那肽微球的装置，其特征在于，所述气体输送管道(2)为软管或金属管道。

4.根据权利要求1所述的连续生产粒径均匀的艾塞那肽微球的装置，其特征在于，所述挤压装置(3)由一个带有固定孔径大小的膜或者喷头组成，用来挤压出粒径均匀的微球。

5.根据权利要求1所述的连续生产粒径均匀的艾塞那肽微球的装置，其特征在于，所述软微球收集器(5)是由球形容器或其他形状的容器组成，用于承接初步固化的微球。

6.根据权利要求1所述的连续生产粒径均匀的艾塞那肽微球的装置，其特征在于，所述搅拌桨(7)为一个双叶搅拌桨或单叶浆。

7.根据权利要求1所述的连续生产粒径均匀的艾塞那肽微球的装置，其特征在于，所述大容积装置(8)的材质为不锈钢。

8.利用权利要求1所述的连续生产粒径均匀的艾塞那肽微球的装置生产艾塞那肽微球的方法，用于改善艾塞那肽PLGA微球匀速释放，其特征在于，包括以下步骤：

a、将艾塞那肽粉末溶解于强极性溶剂B1中；

b、将步骤a制得的溶液加入到溶解了聚合物的弱极性溶剂B2中，并得到艾塞那肽微细颗粒均匀分散的悬浊液，其中艾塞那肽活性成分不溶于B2，B1与B2能够互溶，B2与水不互溶，且B2与B1的体积比为1～50；

c、将易溶于水的物质C混悬于步骤b制得的溶液中，得到艾塞那肽与水溶性物质C微细颗粒均匀分散的悬浊液，其中水溶性物质C不溶于B1和B2；

d、将步骤c中制得的悬浊液加入到含有表面活性剂的水溶液中；

e、将步骤d中制得的混合后的水溶液加入到水中；

f、待溶剂B1与B2进入水溶液或挥发后，得到包封了艾塞那肽的微球；

其中，所述的水溶性物质C平均粒径为5～50μm；所述水溶性物质C以1％～20％W/V的浓度悬浮在含有聚合物和活性成分的弱极性溶剂B2中。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述B2与B1的体积比为10:1～30:1。

10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述的艾塞那肽活性成分粉末平均粒径为5～500μm。

11.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述强极性溶剂B1为甲醇、乙腈、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、乙酸中的一种或几种的混合物。

12.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述弱极性溶剂B2为二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯中的一种或几种的混合物。

13.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述水溶性物质C为氯化钠、硝酸钠、硫酸钠、氯化钾、硝酸钾、硫酸钾、氯化镁、氯化锌、氢氧化钠、氢氧化镁、氢氧化钾、硝酸铵、甘露醇中的一种或几种混合物。

14.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述水溶性物质C以5％～10％W/V的浓度悬浮在含有聚合物和活性成分的弱极性溶剂B2中。

15.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述聚合物为聚乳酸或聚羟基乙酸，或者为其共聚物或共混物。

16.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述聚合物以5％～25％W/V的浓度溶解在弱极性溶剂B2中。

17.根据权利要求16所述的方法，其特征在于，所述聚合物以7.5％～20％W/V的浓度溶解在弱极性溶剂B2中。

18.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述表面活性剂为油酸钠、硬脂酸钠、十二烷基磺酸钠、聚乙烯醇、羧甲基纤维素、卵磷脂、明胶、透明质酸、吐温、司盘中的一种或几种的混合物。

19.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述表面活性剂以1％～5％W/V的浓度溶解在水中。