CN102448466A - 伊奈骨化醇的新治疗应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及用于治疗和/或预防佝偻病、骨质疏松、骨软化症、银屑病、自身免疫疾病如多发性硬化或I型糖尿病、甲状旁腺功能亢进症、良性前列腺增生、任何类型的癌症或任何维生素D相关疾病的方法，包括将伊奈骨化醇(inecalcitol)以包含于1mg/天至100mg/天之间的剂量给予需要其的人类患者。

Description

伊奈骨化醇的新治疗应用

维生素D为一类激素原，其两种主要形式是维生素D₂(或麦角钙化固醇)和维生素D₃(或胆钙化甾醇)。维生素D，其代谢产物和类似物具有对钙和磷代谢的潜在影响，并能够因此用于维生素D缺乏如佝偻病、以及其他血浆和骨盐平衡的疾病如骨质疏松和骨软化病的预防和治疗。而且，维生素D受体和维生素D的活性在许多其他组织和细胞中也已被证明，已知它们在其中参与了细胞增殖和分化。维生素D还影响免疫系统，因为维生素D受体表达于一些白血细胞中，包括单核细胞、巨噬细胞和T淋巴细胞以及B淋巴细胞。

维生素D的所谓的非血钙作用(非高血钙作用，non-calcemic effects)引起对于维生素D衍生物用于多种治疗的可能应用的考虑，如免疫系统、激素分泌、细胞分化或细胞增殖的疾病。尤其是，这些化合物可用于特征为细胞增殖增加的疾病的治疗，如银屑病和/或癌症。特别是，维生素D₃的活性代谢物，称为骨化三醇的1，25(OH)₂-维生素D₃已知在体外抑制多种来源的多种癌细胞系的增殖，并在体内减缓多种肿瘤异种移植物的发展。关于该化合物应用的主要缺点是它的血钙过高效应(高血钙效应，hypercalcemic effect)，其妨碍了药理学活性剂量的应用。骨化三醇和所有维生素D类似物的毒性作用是高钙血症的结果，导致在多种组织中的钙微结晶化，或诱发肌肉收缩性障碍。高钙血症可能通过损害心脏收缩(心脏停搏)或通过钙微结晶在肾小管中的堆积(肾功能衰竭)而因此引起死亡。高钙血症还可以引起关节炎或白内障(微结晶分别沉积在关节或眼晶状体中)或肌无力(受损性收缩)。因此对于维生素D类似物用于治疗最重要的是没有引起高钙血症的风险。

已报道了大量的在抗增殖性作用和(高)血钙作用(calcemic effect)之间表现出明确不相关的骨化三醇类似物。尤其是，EP 0 707 566 B1公开了多种骨化三醇类似物，如14-epianalogues(14-表类似物)。在骨化三醇的这些14-epianalogues中包括下面通式的伊奈骨化醇(inecalcitol)：

伊奈骨化醇(inecalcitol)是用于19-去甲-9，10-开环-14βH-胆甾-5(Z)，7(E)-二次乙基-23-ino-1α，3β，25-三醇-23-炔(19-nor-9，10-seco-14βH-cholesta-5(Z)，7(E)-dien-23-ino-1α，3β，25-triol-23-yne)(C₂₆H₄₀O₃)的国际非专利名称。

伊奈骨化醇是维生素D₃的天然活性代谢产物骨化三醇的合成衍生物。Eelen等(Molecular Pharmacology 67，1566-1573，2005)和Verlinden等(Journal of Bone and Mineral Research，volume 16(4)，625-638，2001)(的论文)显示伊奈骨化醇(具有)与骨化三醇相比增强的抗增殖和显著降低的血钙作用(calcemic effects)。Verlinden等(Cancer Research 60(10)，2673-2679，2000)还报道了伊奈骨化醇在抑制人乳腺癌细胞的生长中的体外和体内活性。这种概况使得伊奈骨化醇成为一种有效的最初用于癌症治疗的有效药物候选物。

考虑到维生素D和其类似物的血钙过高效应(高血钙效应)，给予低剂量的这些化合物，或给药频率低于一天一次已成为一般惯例。结果，维生素D或其衍生物一般以远低于200μg/天的剂量给予，并经常是每两天一次或每周一次。尤其是，骨化三醇用于维生素D缺乏的认可剂量是0.25或0.5μg/天，而对于骨化三醇在癌症临床试验中的测试剂量为45μg/患者一周一次；至于西奥骨化醇(seocalcitol)，在癌症临床试验中的测试剂量为10μg/天/患者；对于在临床试验中用于良性前列腺增生的艾洛骨化醇(elocalcitol)，测试剂量为150μg/天/患者；用于甲状旁腺激素分泌过多的治疗，帕立骨化醇(paricalcitol)认可的最大剂量是以2μg/天或4μg每两天而度骨化醇(doxercalciferol)的最大剂量是以3.5μg/天或2μg每两天的剂量。

因此期望提供毒性更低并能够因此以高药理学活性剂量使用的维生素D衍生物。

EP 0 707 566 B1仅提到了维生素D类似物与局部制剂的重量相关的0.1至500μg/g的剂量被施用于皮肤以治疗银屑病。Verlinden等(上述癌症研究)仅提到了伊奈骨化醇以80μg/kg/每两天的剂量用于小鼠中的给药，而在人类患者中的给药方面中是没有报道的。

此外，为了从活性成份中获得可能最高的治疗效果，期望提高给药剂量而不引起副作用，如高钙血症与所有以上描述的其他有害后果。

现在惊奇地发现，伊奈骨化醇在对于所有其他已知的维生素D类似物一般认为毒性非常高的剂量时没有血钙过高的影响。

本发明，因此涉及用于治疗和/或预防佝偻病、骨质疏松、骨软化症、银屑病、自身免疫疾病如多发性硬化或I型糖尿病、甲状旁腺功能亢进症、良性前列腺增生、任何类型的癌症或任何维生素D相关的疾病，尤其是癌症的方法，包括将伊奈骨化醇以包含于1mg至100mg之间的剂量给予需要其的人类或动物患者。

本发明还涉及伊奈骨化醇用于治疗和/或预防佝偻病、骨质疏松、骨软化症、银屑病、自身免疫疾病如多发性硬化或I型糖尿病、甲状旁腺功能亢进症、良性前列腺增生、任何类型的癌症或任何维生素D相关的疾病，尤其是癌症的应用，包括将伊奈骨化醇以包含于1mg至100mg之间的剂量给予需要其的人类或动物患者。

所述给药剂量优选包含于1.5mg至20mg之间。

根据优选的实施方式，本发明的方法包括以包含于1.5mg至20mg之间的剂量给予伊奈骨化醇，用于以上疾病，尤其是任何类型癌症的治疗和/或预防，而在所治疗的病人中不引起增加的钙血症。

根据另一个实施方式，本发明的方法可包括伊奈骨化醇的所述剂量在包含于以每三天直至每天三次的频率给药，如每三天、每两天(隔天，qod)、每天一次(qd)、每天两次(bid)和每天三次(tid)。优选地，给药可每两天、每天一次或每天两次进行。

根据进一步的实施方式，本发明的方法还包括一种或多种进一步活性成份的给予，其中活性成分选自抗骨质疏松药、免疫调节剂、抗炎药、抗银屑病药、抗激素药、抗增生药或抗癌药。

优选地，所述抗癌药物选自紫杉烷衍生物，尤其是紫杉醇或多西他赛，或铂衍生物尤其是卡铂、奥沙利铂或沙铂。所述给予可以与伊奈骨化醇的给予是同时的、分开的或连续的。

根据另一个实施方式，本发明的方法是治疗多种形式的癌症，包括肿瘤或白血病。乳腺癌、前列腺癌、肺癌、结肠癌、膀胱癌、脑癌、胃癌、肾癌、肝癌、卵巢癌、口腔癌、皮肤癌、肠癌、子宫癌、头颈癌、咽喉癌以及血液癌症包括在此，尤其是前列腺癌。

根据另一个实施方式，本发明的方法是治疗皮肤的非癌性过增生疾病，尤其是银屑病，通过伊奈骨化醇以高剂量给药，单独地或与上市的或开发中的银屑病的全身性口服或肠胃外治疗联合(给药)，如阿维A酸(阿曲汀，acitretine)和通常的类维生素A(类视色酸，retinoids)、环孢菌素(cyclosporine)、voclosporine(voclosporin，一种钙神经蛋白抑制剂)、西罗莫司(sirolimus)、他罗利姆(tacrolimus)、甲氨蝶呤(methotrexate)和通常的免疫抑制剂类或免疫调节剂类、阿来法塞(alefacept)、依那西普(etanercept)、英夫利昔单抗(infliximab)阿达木单抗(adalimumab)、赛妥珠单抗(certolizumab)、戈利木单抗(golimumab)和通常的抗肿瘤坏死因子-α治疗药物(anti-Tumor Necrosis Factor-alpha therapeutics)、优特克单抗(ustekinumab)、贝伐珠单抗(布雷奴单抗，briakinumab)、和通常的抗白细胞介素治疗药物、阿普司特(apremilast，一种磷酸二酯酶抑制剂)、MAP激酶抑制剂(MAP Kinase inhibitors)、A3腺苷激动剂(A3adenosineagonists)等(Melnikova，Nature reviews drug discovery 2009，8，767-768)。

根据另一个实施方式，本发明的方法是治疗多发性硬化的症状、防止其复发或延长其缓解，通过伊奈骨化醇以高剂量给药，单独地或与上市的或开发中的多发性硬化的全身性口服或肠道外治疗联合(给药)，如α和β干扰素类以及它们的各种亚型、米托蒽醌(mitoxantrone)、拉喹莫德(laquinimod)、芬戈莫德(fingolimod)和通常的免疫抑制剂类或免疫调节剂类、那他珠单抗(natalizumab)、达克珠单抗(daclizumab)、克帕松(可舒松，copaxone)、克拉屈滨(cladribine)、特立氟胺(teriflunomide)等。

伊奈骨化醇可优选通过口服途径给药。

根据另一目的，本发明还涉及上面提到的药物治疗方法，该方法包括将伊奈骨化醇与药用载体或赋形剂一起给予需要其的患者。

当在本文中使用时，伊奈骨化醇指的是伊奈骨化醇或其药用盐。

对需要本文中所描述的疾病和病症的治疗的这些受试者的鉴定是在本领域的普通技术人员的能力和知识范围内的。本领域中的临床医生可以通过临床测试、身体检查、遗传测试和药物/家族史的应用，很容易地鉴定出需要这样的治疗的那些受试者(患者)。

治疗有效量可以很容易地由作为本领域的普通技术人员的主治诊断医生通过常规技术的使用并通过观察在相似情况下获得的结果而确定。在确定治疗有效量时，主治诊断医生考虑了多种因素，包括但不限于：受试者的种族；其个头、年龄、和一般健康(状况)；有关的特定疾病；疾病的受累或严重程度；个体受试者的反应；给予的特定化合物；给药方式；给及药剂的生物利用度特性；选择的给药方案；伴随药物的使用；以及其他相关情况。

要求达到所期望的生物效应的伊奈骨化醇的量将是变化的，其取决于多种因素，包括待给予的药物的剂量、疾病的类型、患者的疾病状态以及给药途径。

“药物的”或“药用的”指的是分子本体或组合物在适当地给予动物、或人时不产生有害的、过敏的或其他不期望的反应。

如本文中所使用的，“药用载体”包括任何的稀释剂、佐剂、赋形剂、或载体。这些载体用于药物活性物质的应用是本领域普通技术人员熟知的。

在本发明的内容中，术语“治疗”或“处治”，如在本文中所使用的，意思是逆转、减轻、抑制这些术语应用于其的障碍或病症或这些障碍或病症的一种或多种症状的发展，或预防障碍或病症或这些障碍或病症的一种或多种症状。

“治疗有效量”意思是根据本发明的化合物/药剂的量在产生期望的治疗效果中是有效的。

根据本发明，术语“患者”或“需要其的患者”是指受到或可能将受到佝偻病、骨质疏松、骨软化症、银屑病、自身免疫疾病如多发性硬化或I型糖尿病、甲状旁腺功能亢进症、良性前列腺增生、任何类型的癌症或任何维生素D相关的疾病影响的人类或非人哺乳动物。优选地，患者为人类。

一般而言，待给予的药物的优选剂量可能取决于这些变量，如疾病或障碍的类型和发展程度、特定患者的全面健康状况、所选化合物的相对生物效能、和化合物赋形剂的剂型、以及其给药途径，并且一般会超过1mg/天每位患者。

伊奈骨化醇能够以单位剂量形式给予，其中术语“单位剂量”意思是这样的单一剂量，其能够给予患者，并能够简单操作和包装，保持为物理和化学稳定的包含或者活性化合物本身的单一剂量或者作为药用组合物的单位剂量。

伊奈骨化醇可以通过与一种或多种药用赋形剂混合而被配制成药物组合物。

组合物可方便地以单位剂量形式给予并可通过任何在药物领域中熟知的方法制备，例如，如在Remington：The Science and Practice of Pharmacy，20^th ed.；Gennaro，A.R.，Ed.；Lippincott Williams & Wilkins：Philadelphia，PA，2000中所描述的。用于维生素D类似物口服给药的常用单位剂量为软明胶胶囊，其含有化合物(如骨化三醇、度骨化醇(doxercalciferol)或紫杉醇)溶解于其中的来自分馏椰子油中的中链甘油三酯。

图1图示说明在雄性成年猴子中进行的每天一次口服伊奈骨化醇的9个月的毒理学研究期间所获得的对于时间的平均血浆浓度。

图2图示说明在雄性幼年猴子中进行的每天两次口服伊奈骨化醇的2周的毒理学研究期间获得的对于时间的平均血浆浓度。

图3图示说明口服伊奈骨化醇以300、600和1000μg给予人类患者所获得的平均药代动力学曲线。

图4图示说明口服伊奈骨化醇以2和4mg给予人类患者所获得的平均药代动力学曲线。

下面的实施例作为本发明的代表性而非限制性说明加以提供。

实施例1：在猴子中进行的每天一次口服伊奈骨化醇的9个月的毒理学和 毒代动力学(toxicokinetic)研究

通过每天口服给予伊奈骨化醇，在雄性成年食蟹猴(cynomolgusmonkey)中进行的9个月的毒理学研究期间，甚至以每天每只猴子1.8毫克(mg)的最高测试剂量，尽管受到血液中伊奈骨化醇的影响而(出现)一致性的高峰，但是没有观察到高钙血症和毒性作用。在图1中，绘制了在研究的第一天至接近其结束的第272天的伊奈骨化醇对时间的平均血浆浓度。平均毒代动力学(toxicokinetic)曲线(分布)几乎是可重叠的(superimposable)，口服摄入后15分钟就达到约1.2ng/ml的平均峰，并在4小时内从循环中稳定消失。在研究中没有测试的更高剂量，也可能是没有高钙血症和毒性作用的，因为还未达到最高耐受剂量。在下面的表中，研究期间在不同时间点的血浆钙水平(以毫摩尔/L，均值±s.e.m.)在对照的猴子与经治疗的猴子之间没有表现出任何差别。

研究天数	第-12天	85天	第175天	第268天
					对照(n＝6)	2.48±0.02	2.59±0.06	2.46±0.05	2.53±0.03
治疗(n＝6)	2.54±0.11	2.53±0.03	2.49±0.05	2.51±0.05

实施例2：在猴子中进行的每天两次口服伊奈骨化醇的2周的毒理学和毒 代动力学研究

通过每天两次口服给予伊奈骨化醇，在雄性幼年食蟹猴中进行的2周的毒理学研究期间，尽管频繁受到伊奈骨化醇非常高的血浆水平的影响，但是以每天2x 1.6毫克(mg)的剂量没有观察到高钙血症和毒性作用。在图2中，绘制了在治疗第一天的大约8AM和7PM，即间隔约11小时，伊奈骨化醇相继两次的给予对时间的伊奈骨化醇平均血浆浓度。观察到了两个几乎相同的峰，分别达到2.75ng/ml和2.50ng/ml。在两种情形下，伊奈骨化醇的水平在4小时内回复至基础水平。在下面的表中，在治疗期间之前和之中的两周监测了相同的4只动物的血浆钙水平(以毫摩尔/L，均值±s.e.m.)。没有观察到血浆钙水平的显著变化。

研究天数	第-13天	第-6天	第7天	第13天
					血浆Ca	2.66±0.08	2.61±0.06	2.68±0.15	2.76±0.12

实施例3：在激素难治的前列腺癌(hormone-refractory prostate cancer，HRPC)患者中，与多西他赛-泼尼松方案联合的伊奈骨化醇的剂量发现(dose finding)和临床耐受研究

3.1方法

在首次用于实验的HRPC患者中，将提高的(escalating)伊奈骨化醇口服剂量与化学疗法联合。在每两天(隔天，qod)或每天(qd)接受伊奈骨化醇的3-6个患者的组中评估安全性，周期为21天，并与静脉注射多西他赛(75mg/m2q3w(每3周))和口服泼尼松(5mg每天2次)联合。患者(pts)一直接受了6个周期，除非出现不能接受的毒性或疾病进展。主要终点(endpoint)是在第一周期内定义为3级高钙血症的剂量限制性毒性(dose limiting toxicity，DLT)。每周评估钙血症、creatininemia和全血细胞计数(complete blood counts)；每3周评估生物化学、心电图和前列腺特异抗原(PSA)。效能终点为定义为在3个月内下降≥30％的PSA反应。

伊奈骨化醇以取决于所研究的剂量水平的不同号码、形状和强度的软明胶胶囊给予患者：一个、两个或四个40μg的胶囊(号码11，长方形)分别用于40、80或160μg/天的给药；三个或六个100μg的胶囊(号码4，圆形)分别用于300或600μg/天的给药；五个200μg的胶囊(号码7.5，椭圆形)用于1000μg/天的给药；五个400μg的胶囊(号码14，长方形)用于2mg/天的给药，以及4个1mg的胶囊(号码14，长方形)分别用于4mg/天的给药。在所有的胶囊中，伊奈骨化醇以取决于胶囊强度的不同浓度存在于填充内容物中，作为来自分馏椰子油的中链甘油三酯中的溶液。

3.2临床结果

八个剂量水平：已经评估了40μg(qd)、80μg(qod，qd)、160μg(qod，qd)、300μg(qod，qd)、600μg(qod，qd)、1,000μg(qod，qd)、2mg(qd)和4mg(qd)；已经治疗了50位患者(pts)；47位患者已经完成了6个周期。平均年龄为71岁[范围在49-87岁]，平均格里森分数(Gleason score，Gs)为7以及平均PSA为35.7ng/mL[范围在0.9-962.4]。已报道没有增加的钙血症。最多的不利事件(adverse event，AE)为G1-2，虚弱(22位患者)、便秘(15位患者)、腹泻(13位患者)。G3-4不利事件(AE)是嗜中性白血球减少症(36位患者)、淋巴细胞减少(12位患者)、虚弱(3位患者)、心律失常(2位患者)、一般健康劣化(3位患者)以及腹泻(1位患者)。所有这些不利事件(AE)都与多西他赛相关，而与伊奈骨化醇无关。在42位可评估的在治疗的三个月内对于PSA反应的患者中，35位(83％)表现出PSA多于30％的下降。

3.3伊奈骨化醇在HRPC患者中的药代动力学

伊奈骨化醇以300μg(qod，qd)、600μg(qod，qd)、1000μg(qod，qd)、2mg(qd)或4mg(qd)的剂量口服给予激素难治的前列腺癌症患者，不引起任何高钙血症或任何的毒性作用。图3示出以300、600和1000μg的前三个剂量获得的平均药代动力学曲线(分布)。伊奈骨化醇通过液相色谱和接着的串联质谱法(LC/MS/MS)测定为在血浆中无变化的循环化合物。在300μg，峰值仅在LC/MS/MS方法达到的定量下限上方可检测到，即10pg/ml(0.01ng/ml)。在600μg和1000μg，分别在90分钟和45分钟达到约35和45pg/ml(0.035和0.045ng/ml)的平均峰值。图4示出2mg和4mg伊奈骨化醇的平均药代动力学曲线(分布)：分别在90和45分钟达到约70和260pg/ml(0.07和0.26ng/ml)的平均峰值。在600μg至4mg之间所获得的四个平均药代动力学曲线(分布)中，伊奈骨化醇的消失为规律性的，具有包含于1至1.5之间的大致半衰期。

Claims (13)

1.伊奈骨化醇以包含于1mg/天至100mg/天之间的剂量用于治疗和/或预防佝偻病、骨质疏松、骨软化症、银屑病、自身免疫疾病如多发性硬化或I型糖尿病、甲状旁腺功能亢进症、良性前列腺增生、任何类型的癌症或任何维生素D相关疾病的应用。

2.根据权利要求1所述的伊奈骨化醇的应用，其中，所述给药剂量包含于1.5mg至20mg之间。

3.根据权利要求1或2所述的伊奈骨化醇的应用，其不会在所治疗的患者中同时引起增加的钙血症。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的伊奈骨化醇的应用，其包括伊奈骨化醇所述剂量的给予，所述给予以选自每三天、每两天(qod)、每天一次(qd)、每天两次(bid)和每天三次(tid)的频率。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的伊奈骨化醇的应用，其中，所述给予以选自每两天、每天一次和每天两次的频率。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的伊奈骨化醇的应用，其还包括一种或多种另外的活性成份的给予，所述另外的活性成分选自抗骨质疏松药、免疫调节剂、抗炎药、抗银屑病药、抗激素药、抗增生药和抗癌药。

7.根据权利要求6所述的伊奈骨化醇的应用，其中，所述另外的给予与伊奈骨化醇的给予是同时的、分开的或连续的。

8.根据权利要求1至7中任一所述的伊奈骨化醇的应用，其是用于治疗癌症、肿瘤或白血病。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的伊奈骨化醇的应用，其中，伊奈骨化醇通过口服途径给药。

10.根据权利要求1至9中任一所述的伊奈骨化醇的应用，其是用于治疗银屑病。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的伊奈骨化醇的应用，其是用于治疗多发性硬化。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的伊奈骨化醇的应用，其是用于治疗甲状旁腺功能亢进症。

13.根据权利要求1至12中任一所述的伊奈骨化醇的应用，其是用于治疗良性前列腺增生。

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