CN102335271A - 一种鱼腥草注射液的制备方法及质量控制方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种鱼腥草注射液的制备方法及质量控制方法。本发明注射液的制备方法为：取鲜鱼腥草全草进行水蒸汽蒸馏，收集初蒸馏液，再进行重蒸馏，收集重蒸馏液，加入渗透压调节剂及β-环糊精衍生物，调PH值，滤过，灌封，灭菌制成注射液。本发明制备方法首次实现制备无吐温-80的鱼腥草注射液，所制成的鱼腥草注射液无溶血作用，且含有效成份的浓度高，可以肌注也可静滴，使用更安全，更稳定。本发明质量控制方法包括对甲基正壬酮和癸酰乙醛的鉴别方法和对甲基正壬酮的含量测定方法，能有效控制产品质量。

Description

一种鱼腥草注射液的制备方法及质量控制方法

技术领域

本发明涉及一种注射液的制备方法及质量控制方法，特别是涉及一种含β-环糊精衍生物的鱼腥草注射液的制备方法及质量控制方法，属于医药技术领域，本申请是第200410037630.2号专利的分案申请。

背景技术

鱼腥草注射液现行工艺制法是取鲜鱼腥草全草进行水蒸汽蒸馏，收集初蒸馏液，再进行重蒸馏，收集重蒸馏液，加入氯化钠及吐温-80，混匀，加注射用水至配制量，滤过，灌封，灭菌而得。它具有抗菌、抗病毒、抗炎等功效，能提高机体免疫功能，属国家医保甲类药品。

鱼腥草注射液中含有鱼腥草挥发油，挥发油在水中溶解度极小，必须加助溶剂或增溶剂才能制成澄明溶液。现行工艺是在重蒸馏液中加入表面活性剂吐温-80增溶，质量标准中规定加吐温-80的用量为0.5％。而吐温-80是非离子型表面活性剂，有溶血作用，且有一定毒性，若一次输入鱼腥草注射液100ml，则输入的吐温-80量为0.5g，对人体不够安全，尤其是输注速度较快时，对人体的不良反应更大。且鱼腥草中挥发油含量随种质，产地，生长期，采收季节等因素变化，差异很大。通常全草中含挥发油0.0049％左右，有的全草中含0.025％。有人对不同居群，不同时期采收的鱼腥草全草中有效成份甲基正壬酮含量测定，最高达153.4μg/g，最低为7.68μg/g，相差近20倍[英卫，中国中药杂志200328(87：718)]。现行工艺中加吐温-80制备鱼腥草注射液，鱼腥草原料中挥发油含量高时，重蒸馏液中挥发油也多，而吐温-80的增溶作用有限，因此难以配制成澄明药液，不得不加入活性炭或滑石粉，滤除部分挥发油，使之澄明，这样有效成份不能得到充分利用，浪费了鱼腥草资源，同时也配制不成含高挥发油含量的鱼腥草注射液。

发明内容

本发明的目的是提供一种鱼腥草注射液的制备方法；本发明的第二个目的是提供一种含β-环糊精衍生物的，无吐温-80，无溶血作用，稳定性好的鱼腥草注射液的制备方法；本发明的第三个目的是提供一种鱼腥草注射液的质量控制方法；本发明的另一个目的是提供一种有效成分含量确切的鱼腥草注射液的质量控制方法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

将新鲜鱼腥草全草净选，洗净，投入蒸馏锅中，水蒸汽蒸馏，收集初蒸馏液至大部分有效成份蒸出，初蒸馏液重蒸馏，收集至重蒸馏液中有效成份含量在规定范围内；取重蒸馏液加β-环糊精衍生物0.5％～10％(w/v)，加渗透压调节剂氯化钠或葡萄糖成等渗，调PH值至4.0～6.0，滤过，灌封，灭菌即得。

鱼腥草注射液中含β-环糊精衍生物的用量为0.5％～10％W/V。β-环糊精衍生物是指各种取代的β-环糊精，包括羟甲基-β-环糊精，羟乙基-β-环糊精，羟丙基-β-环糊精。鱼腥草注射液主要有效成份为甲基正壬酮和癸酰乙醛，每毫升重蒸馏液中含甲基正壬酮的含量为1μg～20μg。

本发明注射液的质量控制方法如下：

鉴别：(1)取本发明注射液5ml，置分液漏斗中，加稀盐酸1ml，用氯仿振摇提取2～3次，每次5ml，分取氯仿液，挥干，残渣加氢氧化钠试液3ml使溶解，加二硝基苯肼试液1ml，振摇，即生成橙红色沉淀；(2)取本发明注射液2ml，加品红亚硫酸试液3～5滴，放置片刻，即显粉红色或红紫色；

含量测定：照气相色谱法(中国药典2000年版一部附录VID)测定；

色谱条件与系统适用性试验：OV-17毛细管柱，柱温120℃；理论板数按甲基正壬酮峰计算应不低于8000；

校正因子测定：取正十五烷适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含0.3mg的溶液；

作为内标溶液，另取甲基正壬酮对照品5mg，精密称定，置100ml量瓶中，加无水乙醇溶液并稀释至刻度；精密量取1ml，置具塞试管中，精密加入内标溶液50ul，摇匀，吸取2ul，注入气相色谱仪，计算校正因子；

供试品溶液的制备与测定：精密量取本发明注射液25ml，通过C₈小柱(100mg∶1ml)^【注】，用醋酸乙酯-乙醇(70∶30)混合液洗脱；收集洗脱液约1ml置具塞试管中，精密加入内标溶液50ul，摇匀，作为供试品溶液，吸取2ul，注入气相色谱仪，测定，即得；

本发明注射液每1ml含甲基正壬酮(C₁₁H₂₂O)不得少于1.0ug。

本发明中，初蒸馏液的收集量依据初蒸馏液中有效成分含量而定，至基本上无有效成分蒸出为止，而不是现有技术的收集初蒸馏液至1∶1[鲜鱼腥草(g)∶初蒸馏液(ml)]，使鱼腥草中的挥发油能充分利用。本发明中重蒸馏液的收集量依据重蒸馏液中有效成分含量而定，可规定范围。目前认为鱼腥草中主要的有效成分是甲基正壬酮和癸酰乙醛，都可用化学方法测定含量。现行鱼腥草注射液质量标准中规定每毫升含甲基正壬酮(C₁₁H₂₂O)不得少于1.0ug，未规定上限。本发明的鱼腥草注射液有效成分甲基正壬酮含量为1～20ug/ml，实际生产中根据临床需要及给药途径，确定含量范围。

本发明的制备方法中采用羟丙基-β-环糊精做鱼腥草注射液增溶剂，它极易溶于水，且无毒，无溶血和无刺激性。有人给病人静脉注射羟丙基-β-环糊精1.5g/Kg无影响，另一试验中注射羟丙基-β-环糊精的剂量为一日470mg/Kg，浓度5％，4天总剂量达到30g，也无不良影响(谢伯泰，国外医学合成药制剂分册2002 23(5)：302)。羟丙基-β-环糊精的增溶机理是利用它的中空筒状结构，中心有一空腔，药物分子可以进入空腔，形成包合物，而达到增溶目的。鱼腥草蒸馏液中加入羟丙基-β-环糊精，鱼腥草中挥发油可以进入羟丙基-β-环糊精的空腔生成包合物分散在药液中而制得澄明液体。因此本发明能充分利用不同产地，不同季节，不同种质鱼腥草中的挥发油，制成高含量有效成份的鱼腥草注射液，大幅度降低生产成本。且首次实现制备无吐温-80的鱼腥草注射液，所制得的注射液无溶血，无毒性，解决了现有技术中鱼腥草注射液因加入表面活性剂如吐温-80而产生的溶血作用和不能制成含高浓度挥发油注射液以及不能充分利用鱼腥草中挥发油等问题，质量稳定，澄明度好，配制简便；提高了药物疗效，降低了不良反应；可以肌注或加入葡萄糖或氯化钠注射液中静滴，也可直接静滴；注射剂剂量更准确，使用更安全、更方便，更稳定，并使其大量用药成为可能。

下面实验例用于进一步说明本发明。

实验例1：羟丙基-β-环糊精用作鱼腥草注射液增溶剂用量筛选及对澄明度影响工艺研究

取鲜鱼腥草全草，洗净，置蒸馏锅中，加适量水，进行水蒸汽蒸馏，收集初蒸馏液至全草重量的1倍(g/ml)，再重蒸馏，收集重蒸馏液至全草重量的1/2，重蒸馏液中加0.7％的氯化钠，搅拌溶解，加注射用水至配制量，备用。

取上述鱼腥草重蒸馏液各400ml，按下表加不同用量的羟丙基-β-环糊精和吐温-80，混匀，置集热式恒温磁力搅拌器中，恒温于70℃，搅拌1小时。冷却至室温，用0.65μm滤膜抽滤，取滤液按照《中国药典》2000年版二部附录IX B澄清度检查法进行澄清度检查。结果见下表1和表2。

表1两种不同增溶剂增溶鱼腥草注射液灯检澄清度比较

表2两种不同增溶剂增溶鱼腥草注射液比浊吸收度比较

从上表1实验结果表明，加不同用量的羟丙基-β-环糊精作鱼腥草注射液增溶剂，用量等于或大于0.5％时均可制得澄清的鱼腥草注射液，说明鱼腥草中挥发油已包合溶解。而加不同用量的吐温-80作鱼腥草注射液增溶剂，不管用量大还是用量小都难以制成澄清的鱼腥草注射液，用量小则鱼腥草中挥发油溶解不完全，药液浑浊，用量大则鱼腥草注射液出现乳光，用量越大，乳光越强。

从上表2实验结果表明，加不同用量的羟丙基-β-环糊精作鱼腥草注射液增溶剂，采用标准比浊液作空白对照进行鱼腥草注射液吸收度检查，其吸收度结果均明显小于加不同用量的吐温-80作增溶剂的鱼腥草注射液。且羟丙基-β-环糊精用量等于或大于0.5％时，其药液的吸收度已基本相同。

综上所述，从上面实验结果分析表明，加羟丙基-β-环糊精的鱼腥草注射液澄清度明显优于加吐温-80的鱼腥草注射液澄清度，且羟丙基-β-环糊精用作鱼腥草注射液增溶剂其用量范围为0.5％-10％均可使鱼腥草注射液澄清。说明鱼腥草注射液用羟丙基-β-环糊精作增溶剂，其增溶剂的用量范围可在0.5％-10％。

实验例2：羟丙基-β-环糊精用于鱼腥草注射液增溶剂的稳定性研究

取含羟丙基-β-环糊精的鱼腥草注射液和含吐温-80的鱼腥草注射液，在50℃、60℃、70℃4个温度条件下进行加速实验，分别于2小时、4小时、6小时、8小时、10小时取样，测定各个温度各时间的鱼腥草注射液PH值、甲基正壬酮含量(气相色谱法检测)。重复实验三次，结果见表3，表4，表5。

表3实验一(恒温加速稳定性试验结果表)

表4实验二(恒温加速稳定性试验结果表)

表5实验三(恒温加速稳定性试验结果表)

统计上表3、表4、表5中各项检测指标，求出上表3，表4，表5中不同温度下各时间的PH值和甲基正壬酮含量的平均值(实验次数n＝3)，结果见表6。

表6恒温加速稳定性试验统计结果表

从上表6实验数据统计结果可知，不同温度条件下进行加速试验，加羟丙基-β-环糊精的鱼腥草注射液和加吐温-80的鱼腥草注射液PH值变化随时间延长，PH值均逐渐下降，且温度越高，下降的程度越大。但同样条件下加羟丙基-β-环糊精的鱼腥草注射液PH变化总值较加吐温-80的鱼腥草注射液变化总值小，且相对较为稳定。

从上表6实验数据统计分析表明，甲基正壬酮含量变化与反应温度和时间呈反比，以加热时间t和甲基正壬酮含量为变量，进行线性回归，其线性回归方程为y＝bt+a，求得加羟丙基-β-环糊精的鱼腥草注射液不同温度下的直线回归方程分别为y1_50℃＝-0.0054t+1.047，r＝0.8307，p＜0.05；y2_60℃＝-0.0114t+1.057，r＝0.7779，p＜0.05；y3_70℃＝-0.0217t+1.099，r＝0.7136，p＜0.05；加吐温-80的鱼腥草注射液不同温度下的直线回归方程分别为y4_50℃＝-0.0553t+0.9964，r＝0.7774，p＜0.05；y5_60℃＝-0.0617t+0.9786，r＝0.7996，p＜0.05；y6_70℃＝-0.0643t+0.9414，r＝0.8198，p＜0.05；

根据两样品不同温度下的直线回归方程，以甲基正壬酮含量和加速温度及反应时间作图，如图1，从图中可知，直线的斜率越大，则甲基正壬酮含量变化越快，说明样品稳定性越差。从图中直线斜率进行比较可知，加羟丙基-β-环糊精的鱼腥草注射液直线斜率明显小于加吐温-80的鱼腥草注射液。说明加羟丙基-β-环糊精的鱼腥草注射液稳定性优于加吐温-80的鱼腥草注射液。

本实验经验证，加羟丙基-β-环糊精的鱼腥草注射液经初步稳定性考察，PH值和甲基正壬酮两个主要变化指标稳定性均优于加吐温-80的鱼腥草注射液，说明加羟丙基-β-环糊精的鱼腥草注射液稳定性优于加吐温-80的鱼腥草注射液，更利于药物生产，贮存，运输。

实验例3：羟丙基-β-环糊精用作鱼腥草注射液增溶剂对溶血的影响实验研究

取兔血10ml，置20ml离心管中，用棉签搅拌去纤维，用生理盐水将血浆洗至上清液无色，倾去上清液；从中取2ml置100ml容量瓶中，加生理盐水至100ml，混匀，备用。

按表7配制不同样品，置10ml离心管中，混匀，置培养恒温箱中，于37±1℃放置1小时，取出，观察是否有下层液凝聚，并有溶血现象。将离心管置离心机中离心1分钟，取上清液，用紫外分光光度法(最大吸收波长为550nm)测定吸收度，比较各管中上清液的吸收度大小，吸收度越大，则溶血越大，从而比较加羟丙基-β-环糊精的鱼腥草注射液和加吐温-80的鱼腥草注射液的溶血情况。结果见表7。

表7(不同浓度的羟丙基-β-环糊精和吐温-80的鱼腥草注射液溶血和吸收度对比表)

注：表中“-”表示无溶血“±”表示有很轻微溶血“+”表示有轻微溶血“++”表示有较强溶血“++++”表示有很强溶血

上表中对加不同增溶剂的鱼腥草注射液进行溶血试验，从下层液溶血情况和上清液紫外吸收度结果可看出，加吐温-80的鱼腥草注射液有较大溶血，且加低浓度的吐温-80用量即有轻微溶血，而加羟丙基-β-环糊精的鱼腥草注射液溶血很小，且羟丙基-β-环糊精用量在1.0％内几乎无溶血。另外鱼腥草注射液的溶血与增溶剂的用量也有很大关系，增溶剂用量越大，则鱼腥草注射液的溶血越大，因此鱼腥草注射液中增溶剂应尽量少用。

本实验经多次实验验证，结果加羟丙基-β-环糊精的鱼腥草注射液溶血均小于加吐温-80的鱼腥草注射液，说明用羟丙基-β-环糊精作鱼腥草注射液增溶剂比现行工艺用吐温-80作增溶剂使用更安全，更利于药品生产推广。

附图说明

图1不同温度条件下甲基正壬酮含量与反应时间变化回归直线图

实施例1：含β-环糊精衍生物的鱼腥草注射液的制备方法

将新鲜鱼腥草全草净选，洗净，称取100Kg，投入蒸馏锅中，加适量水，水蒸汽蒸馏，收集初蒸馏液，至收取的蒸馏液2ml加品红亚硫酸试液3～5滴不显红色。初蒸馏液重蒸馏，至收取的重蒸馏液甲基正壬酮含量4～6μg/ml，加入羟丙基-β-环糊精0.5％(w/v)，氯化钠0.7％(w/v)，混匀，调PH值至4.5～5.5，滤过，灌封，灭菌，即得注射液约5000支。

实施例2：含β-环糊精衍生物的鱼腥草注射液的制备方法

将新鲜鱼腥草全草20Kg投入蒸馏锅中，加适量水，水蒸汽蒸馏，至收取的蒸馏液2ml加品红亚硫酸试液3-5滴不显红色，收集初蒸馏液。将初蒸馏液重蒸馏，至收取的重蒸馏液甲基正壬酮含量4～6μg/ml，加入0.75％W/V的羟甲基-β-环糊精，0.7％w/v氯化钠，调PH值至5.0～6.0，滤过，灌封，灭菌而制成注射液约1000支。

实施例3：含β-环糊精衍生物的鱼腥草注射液的制备方法

将新鲜鱼腥草全草50Kg投入蒸馏锅中，加适量水，水蒸汽蒸馏，至收取的蒸馏液2ml加品红亚硫酸试液3～5滴不显红色，收集初蒸馏液。将初蒸馏液重蒸馏，至收取的重蒸馏液甲基正壬酮含量4～6μg/ml，加入1.0％W/V的羟乙基-β-环糊精，5％w/v葡萄糖，调PH值至4.0～5.0，滤过，灌封，灭菌而制成注射液约2500支。

实施例4：含β-环糊精衍生物的鱼腥草注射液的制备方法

将新鲜鱼腥草全草100Kg投入蒸馏锅中，加适量水，水蒸汽蒸馏，至收取的蒸馏液2ml加品红亚硫酸试液3-5滴不显红色，收集初蒸馏液。将初蒸馏液重蒸馏，至收取的重蒸馏液甲基正壬酮含量4～6μg/ml，加入5％W/V的羟丙基-β-环糊精、5％w/v葡萄糖，调PH值至4.0～5.5，滤过，灌封，灭菌而制成注射液5000支。

实施例5：含β-环糊精衍生物的鱼腥草注射液的质量控制方法

鉴别：(1)取本发明注射液5ml，置分液漏斗中，加稀盐酸1ml，用氯仿振摇提取2次，每次5ml，分取氯仿液，挥干，残渣加氢氧化钠试液3ml使溶解，加二硝基苯肼试液1ml，振摇，即生成橙红色沉淀；(2)取本发明注射液2ml，加品红亚硫酸试液3-5滴，放置片刻，即显粉红色或红紫色。

含量测定：照气相色谱法(中国药典2000年版一部附录VID)测定；

色谱条件与系统适用性试验OV-17毛细管柱，柱温120℃；理论板数按甲基正壬酮峰计算应不低于8000；

校正因子测定：取正十五烷适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含0.3mg的溶液，

作为内标溶液，另取甲基正壬酮对照品5mg，精密称定，置100ml量瓶中，加无水乙醇溶液并稀释至刻度。精密量取1ml，置具塞试管中，精密加入内标溶液50ul，摇匀，吸取2ul，注入气相色谱仪，计算校正因子；

供试品溶液的制备与测定：精密量取本发明注射液25ml，通过C₈小柱(100mg∶1ml)^【注】，用醋酸乙酯-乙醇(70∶30)混合液洗脱；收集洗脱液约1ml置具塞试管中，精密加入内标溶液50ul，摇匀，作为供试品溶液，吸取2ul，注入气相色谱仪，测定，即得；

本发明注射液每1ml含甲基正壬酮(C₁₁H₂₂O)不得少于1.0ug。

Claims (9)

1.一种鱼腥草注射液的制备方法，其特征在于该制备方法为：

将新鲜鱼腥草全草投入蒸馏锅中，加适量水，水蒸汽蒸馏，至蒸馏液取2ml加品红亚硫酸试液3～5滴不显红色，收集初蒸馏液，将初蒸馏液重蒸馏，至收取的重蒸馏液中甲基正壬酮含量达1～20μg/ml，加入0.5％～10％W/V的β-环糊精衍生物及渗透压调节剂氯化钠或葡萄糖至等渗，调PH值到4.0～6.0，滤过，灌封，灭菌而制成注射液。

2.如权利要求1所述的一种鱼腥草注射液的制备方法，其特征在于该制备方法为：

将新鲜鱼腥草全草投入蒸馏锅中，加适量水，水蒸汽蒸馏，至收取的蒸馏液2ml加品红亚硫酸试液3～5滴不显红色，收集初蒸馏液，将初蒸馏液重蒸馏，至收取的重蒸馏液甲基正壬酮含量4～6ug/ml，加入0.5％W/V的β-环糊精衍生物及渗透压调节剂氯化钠至等渗，调PH值至4.5～5.5，滤过，灌封，灭菌而制成注射液。

3.如权利要求1所述的一种鱼腥草注射液的制备方法，其特征在于该制备方法为：

将新鲜鱼腥草全草投入蒸馏锅中，加适量水，水蒸汽蒸馏，至收取的蒸馏液2ml加品红亚硫酸试液3～5滴不显红色，收集初蒸馏液，将初蒸馏液重蒸馏，至收取的重蒸馏液甲基正壬酮含量4～6ug/ml，加入0.75％W/V的β-环糊精衍生物及渗透压调节剂氯化钠至等渗，调PH值至5.0～6.0，滤过，灌封，灭菌而制成注射液。

4.如权利要求1所述的一种鱼腥草注射液的制备方法，其特征在于该制备方法为：

将新鲜鱼腥草全草投入蒸馏锅中，加适量水，水蒸汽蒸馏，至收取的蒸馏液2ml加品红亚硫酸试液3～5滴不显红色，收集初蒸馏液，将初蒸馏液重蒸馏，至收取的重蒸馏液甲基正壬酮含量4～6ug/ml，加入1.0％W/V的β-环糊精衍生物及渗透压调节剂葡萄糖至等渗，调PH值至4.0～5.0，滤过，灌封，灭菌而制成注射液。

5.如权利要求1所述的一种鱼腥草注射液的制备方法，其特征在于该制备方法为：

将新鲜鱼腥草全草投入蒸馏锅中，加适量水，水蒸汽蒸馏，至收取的蒸馏液2ml加品红亚硫酸试液3～5滴不显红色，收集初蒸馏液，将初蒸馏液重蒸馏，至收取的重蒸馏液甲基正壬酮含量4～6ug/ml，加入5％W/V的β-环糊精衍生物及渗透压调节剂葡萄糖至等渗，调PH值至4.0～5.5，滤过，灌封，灭菌而制成注射液。

6.如权利要求1、2、3、4、5所述的一种鱼腥草注射液的制备方法，其特征在于：β-环糊精衍生物包括羟甲基-β-环糊精、羟乙基-β-环糊精、羟丙基-β-环糊精。

7.一种鱼腥草注射液的质量控制方法，其特征在于该质量控制方法中鉴别方法包括下列方法中的一种或两种：

A.取注射液5ml，置分液漏斗中，加稀盐酸1ml，用氯仿振摇提取2～3次，每次5ml，分取氯仿液，挥干，残渣加氢氧化钠试液3ml使溶解，加二硝基苯肼试液1ml，振摇，即生成橙红色沉淀；

B.取注射液2ml，加品红亚硫酸试液3～5滴，放置片刻，即显粉红色或红紫色。

8.如权利要求7所述的一种鱼腥草注射液的质量控制方法，其特征在于该质量控制方法中含量测定方法为：

用照气相色谱法测定；

色谱条件与系统适用性试验0V-17毛细管柱，柱温120℃；理论板数按甲基正壬酮峰计算应不低于8000；

校正因子测定取正十五烷适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含0.3mg的溶液；

作为内标溶液，另取甲基正壬酮对照品5mg，精密称定，置100ml量瓶中，加无水乙醇溶液并稀释至刻度；精密量取1ml，置具塞试管中，精密加入内标溶液50ul，摇匀，吸取2ul，注入气相色谱仪，计算校正因子；

供试品溶液的制备与测定精密量取注射液25ml，通过C₈小柱，用比例为70∶30的醋酸乙酯-乙醇混合液洗脱；收集洗脱液约1ml置具塞试管中，精密加入内标溶液50ul，摇匀，作为供试品溶液，吸取2ul，注入气相色谱仪，测定，即得；

注射液每1ml含甲基正壬酮不得少于1.0ug。

9.如权利要求7所述的一种鱼腥草注射液的质量控制方法，其特征在于该质量控制方法为：

鉴别：A.取注射液5ml，置分液漏斗中，加稀盐酸1ml，用氯仿振摇提取2～3次，每次5ml，分取氯仿液，挥干，残渣加氢氧化钠试液3ml使溶解，加二硝基苯肼试液1ml，振摇，即生成橙红色沉淀；

B.取注射液2ml，加品红亚硫酸试液3～5滴，放置片刻，即显粉红色或红紫色；

含量测定：

照气相色谱法测定；

色谱条件与系统适用性试验OV-17毛细管柱，柱温120℃；理论板数按甲基正壬酮峰计算应不低于8000；

校正因子测定取正十五烷适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含0.3mg的溶液；

作为内标溶液，另取甲基正壬酮对照品5mg，精密称定，置100ml量瓶中，加无水乙醇溶液并稀释至刻度；精密量取1ml，置具塞试管中，精密加入内标溶液50ul，摇匀，吸取2ul，注入气相色谱仪，计算校正因子；

供试品溶液的制备与测定精密量取注射液25ml，通过C₈小柱，用比例为70∶30的醋酸乙酯-乙醇混合液洗脱；收集洗脱液约1ml置具塞试管中，精密加入内标溶液50ul，摇匀，作为供试品溶液，吸取2ul，注入气相色谱仪，测定，即得；

注射液每1ml含甲基正壬酮不得少于1.0ug。

Images