CN102302521B - 蜣螂提取物，以其为有效成份的抗焦虑药物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

以传统虫类中药为主要有效成份制备的药物或保健食品，以动物类中药材蜣螂为主要有效成份制成片剂、胶囊剂等口服给药剂型，以蜣螂提取物为有效成份的口服剂型可加入其它成份和辅料组成复方制剂，具有显著的抗焦虑效果，可用于焦虑症的保健和治疗。此外，还提供以蜣螂提取物和食品添加剂组合成的保健食品，药物和食品的制备方法。

Description

蜣螂提取物,以其为有效成份的抗焦虑药物及其制备方法和应用

本申请是专利申请“以蜣螂提取物为有效成份的抗焦虑药物及其制备方法和应用”(申请号：201010506196.3，申请日：2010年10月14日)的分案申请。

技术领域：

本发明属于药物技术领域，具体地，涉及一种以虫类中药蜣螂为主要有效成份制备的药物制剂或保健食品，其制备方法及其在抗焦虑药物和食品中的应用。

背景技术：

焦虑症是一类危害人们健康生活的精神疾病。随着经济发展和社会竞争的日渐加剧，人们在享受不断提高的物质生活水平的同时也承受着由生活压力加大所导致的越来越大的精神压力，造成焦虑症患者明显增加。据统计，我国城市人口中发病率约1-2％，而发达国家近10％，且仍呈增长趋势。据Decision Resources的一项最新研究，目前世界7个主要医药市场(美国，法国，德国，意大利，西班牙，英国和日本)上有8700多万焦虑症病人。目前临床应用的抗焦虑药种类主要有苯二氮卓类药物、择性5-羟色胺再摄取抑制剂、单胺氧化酶抑制剂、肾上腺素受体阻滞剂等。但是由于化学药物不同程度的毒副作用，因此寻找新的抗焦虑药是临床的需要。

当前，世界多个制药公司都在积极开展抗焦虑药的研究，主要靶点集中在γ-氨基丁酸受体(γ-GABA)、外周苯二氮卓受体、5-HT受体、神经类固醇、胆囊收缩素受体(CCKB)、促肾上腺皮质激素释放因子受体(CFR)、组胺H受体、NMDA受体和胆碱能离子通道几个方面。未来抗焦虑剂的发展趋势应该是发现与这些焦虑靶点相关的高选择性配体，尤其是寻找同时对介导焦虑的不同受体或受体亚型有作用的化合物。抗焦虑的动物模型较多，但主要分为条件反应性实验和非条件反应性实验。冲突实验属于条件反应性实验，测试动物在某些实验条件下的诱发行为；探究实验、群体实验、抗天敌实验等属于非条件反应性实验，测试动物自发的、本能的行为。高架十字迷宫是基于动物自发的、本能的探究实验，Vogel饮水冲突实验是大鼠饮水动机与它同时所遭受的足电击惩罚使大鼠处在冲突状态的一种简便、快速实验。因为焦虑的发病与紧张、恐惧等精神因素密切相关，而上述两种实验分别代表了抗焦虑实验非条件反应和条件反应性两大类模型，并且不需要长期训练动物，加上对抗焦虑药物特异性好，因此上述模型成为发现抗焦虑药物的经典模型，可靠和实用，在筛选抗焦虑药物研究中被广泛采用。

如上所述，焦虑是一种与社会相关的疾病，该疾病自古有之。实际上中医认为焦虑症属于“郁证”，是由于情志不舒、气机郁滞所引起的一大类病症。焦虑症相当于中医的“郁病”、“不寐”、“怔忡”、“百合病”、“卑惵”、“脏躁”“灯笼病”、“惊悸等”范畴。历代医家对焦虑症密切相关的情志疾病都进行了深入的研究，形成了不同的研究观点、学术思想与治疗方案。例如临床和实验研究资料都表明一些中药如治疗少阴病，得之二三日以上，心中烦，不得卧的黄连阿胶汤、具有养心安神作用的酸枣仁等都具有抗焦虑作用。因此根据焦虑症的临床表现、病因与病机针对性地从传统本草中去寻找抗焦虑药物是可行的，而且可能是一种风险性较低的捷径。在过去的基础研究中，蜣螂属于鞘翅目金龟子科昆虫蜣螂(Catharsiusmolossus L.)的干燥全虫，具有破瘀消肿、定惊、通便的功效，临床上将其配伍应用于治疗前列腺增生(BPH)有良好疗效。《本草纲目》在虫部有关于蜣螂的记载：“蜣螂，释名：推丸、推车客、黑牛儿、铁甲将军、夜游将军。气味：气味咸、寒、有毒。主治：小儿惊风、小儿疳疾、小儿重舌”，且《本经》有蜣螂主小儿惊痫瘈疭，腹胀寒热，大人癫疾狂易。

迄今，现有技术未见蜣螂提取物具有抗焦虑作用的报道。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种抗焦虑药物或保健食品、其制备方法，它是一种以虫类中药蜣螂提取物为主要有效成份制成的片剂、胶囊剂等口服剂型；另一目的在于提供其提取物在制备抗焦虑药物或保健食品中的应用。

本发明的上述目的是通过下述的技术方案得以实现的：

一种蜣螂提取物，由下述方法提取：

乙醇提取：取蜣螂，干燥、粉碎，用乙醇冷浸、温浸提取或加热回流提取，过滤取滤液，回收乙醇并浓缩得浸膏；其中，所述乙醇冷浸、温浸提取是采用乙醇浓度10～95％，乙醇加入量是蜣螂药材质量的2～10倍，冷浸时间1～10天；温浸时间1～2小时，温度40～60℃，提取1～3次；所述加热回流提取是每次提取20分钟～4小时，提取1～3次。

水提取：取蜣螂，干燥、粉碎，用水冷浸、温浸提取或加热煎煮提取，过滤取滤液，浓缩得浸膏；其中，所述水冷浸、温浸提取是：水的加入量是蜣螂药材质量的2～10倍，冷浸时间1～10天；温浸时间1～2小时，温度40～60℃，提取1～3次；所述加热煎煮提取是每次加热3～20分钟，提取1～3次。

所述的蜣螂提取物乙醇提取是用蜣螂重量的5倍体积的70％乙醇加热回流提取3次，每次1小时；所述水提取是取干燥蜣螂粗粉，加入6倍体积的沸水中5分钟。

蜣螂提取物的制备方法，包括：乙醇提取：取蜣螂，干燥、粉碎，用乙醇冷浸、温浸提取或加热回流提取，过滤取滤液，回收乙醇并浓缩得浸膏；其中，所述乙醇冷浸、温浸提取是采用乙醇浓度10～95％，乙醇加入量是蜣螂药材质量的2～10倍，冷浸时间1～10天；温浸时间1～2小时，温度40～60℃，提取1～3次；所述加热回流提取是每次提取20分钟～4小时，提取1～3次。

水提取：取蜣螂，干燥、粉碎，用水冷浸、温浸提取或加热煎煮提取，过滤取滤液，浓缩得浸膏；其中，所述水冷浸、温浸提取是：水的加入量是蜣螂药材质量的2～10倍，冷浸时间1～10天；温浸时间1～2小时，温度40～60℃，提取1～3次；所述加热煎煮提取是每次加热3～20分钟，提取1～3次。

所述的蜣螂提取物的制备方法，其中乙醇提取是用蜣螂重量的5倍体积的70％乙醇加热回流提取3次，每次1小时；所述水提取是取干燥蜣螂粗粉，加入6倍体积的沸水中5分钟。

抗焦虑药物组合物，其中含有治疗有效量的本发明上述的蜣螂提取物和药学上可接受的载体。

保健食品，其中含有本发明上述的蜣螂提取物和食品常用添加剂。

本发明上述的蜣螂提取物在制备抗焦虑药物中的应用。

本发明上述的蜣螂提取物在制备抗焦虑保健食品中的应用。

本发明采用的蜣螂(Catharsius molossus L.)属于传统中药，为鞘翅目金龟子科昆虫蜣螂的干燥全虫。蜣螂自古加以药用，且单用效果显著；因属于传统中药，临床应用悠久，因此相对安全可靠；因为属于昆虫类中药，易于养殖和产业化。

本发明的技术方案的获取是从蜣螂可以定惊和治疗小儿惊痫得到启发，并通过动物筛选取得了肯定的结果。同时本发明开展的基础研究表明蜣螂含有结构多样的多巴胺二聚体，多巴胺是一类重要的神经递质，形成二聚体后具备了苯并1，4一二氧六环的独特结构，资料表明，这一独特结构具有5-HT1A受体亚型高度亲和性，而5-HT1A受体又是与焦虑症密切相关的靶点。因此本发明除了揭示和印证蜣螂的精神药理作用外，还为蜣螂提取物具有确切的抗焦虑作用提供了有力的分子基础佐证。

本发明提取物所采用的制备方法特征在于有效成份中所含有的化学成分包括多巴胺衍生物。因此制备有效部位也可以采用对准样品参照法，采用相应的大孔吸附树脂法同样可以获得。

本发明提取物为有效成分用作药物时可以单独直接应用，可以相互组合应用，也可以与其它药物包括植物提取物组成复方的形式使用，可以使用不同的药用辅料，制成多种固体制剂或液体制剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明的药物可经口服形式给药。使用量可根据给药途径、患者的年龄、体重、所治疗疾病的类型和严重程度等变化进行一次或多次使用。

具体实施方式：

下面用本发明的实施例来进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此来限定本发明。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。

实施例1：

蜣螂乙醇提取物的制备：取干燥蜣螂粗粉100g，用70％乙醇加热回流提取3次，每次1小时，每次用蜣螂粗粉重量的5倍体积溶剂，滤过，减压浓缩得干燥浸膏36g，提取率36％。

实施例2：

蜣螂水提取物的制备：取干燥蜣螂粗粉100g，加入6倍体积的沸水中烫约5分钟，滤过，减压浓缩得干燥浸膏13g，提取率13％。

实施例3：

将干燥的蜣螂粉碎成粉，称取500g置于容器内，用6倍体积75％乙醇冷浸5天，过滤取滤液，回收乙醇并减压浓缩得干燥浸膏90g。

实施例4：

将干燥的蜣螂粉碎成粉，称取300g置于容器内，用7倍体积85％的乙醇每次温浸2小时，温度50℃，提取3次，过滤取滤液，回收乙醇并减压浓缩得干燥浸膏75g。

实施例5：

片剂：取实施例1～4的方法制得的蜣螂提取物为活性成分30mg、乳糖160mg、淀粉55mg、硬脂酸镁5mg。

制备方法：将活性成分、乳糖和淀粉混合，用水均匀湿润，把湿润后的混合物过筛并干燥，再过筛，加入硬脂酸镁，然后将混合物压片，每片重250mg，活性成分含量为30mg。

实施例6：

胶囊剂：取实施例1～4的方法制得的蜣螂提取物为活性成分30mg、乳糖187mg、硬脂酸镁3mg。

制备方法：将活性成分与助剂混合，过筛，均匀混合，把得到的混合物装入硬明胶胶囊，每个胶囊重200mg，活性成分含量为30mg。

实施例7：

取实施例1～4的方法制得的蜣螂提取物1份，20份聚合度为300的醋酸乙烯酯树脂，2份邻苯二甲酸丁酯，3份巴西棕蜡和20份麦芽糖，在捏机中于50℃混合3分钟，再加入50份砂糖，1份薄荷，混炼均匀后在50℃恒温下，从挤出机中挤出口香糖，切割成规定厚度。

实施例8：

本发明蜣螂提取物及其与药用辅料组成的药物或保健品组合物的抗焦虑作用：小鼠高架十字迷宫。

(1)实验原理：啮齿类动物有探究新环境的特性，但又厌恶强光和开阔地。1985年Pellow等人根据这一特性设计了高架十字迷宫，并漆成黑色。它包括两个50cm×10cm的相对开臂(open arms)和两个50cm×10cm×40cm的相对闭臂(closed arms)，闭臂上部是敞开的。迷宫中央有一10cm×10cm的开阔部，迷宫离地面50cm，以增加动物进入开臂时的恐惧。抗焦虑剂增加开臂探究活动，致焦虑剂则相反。本实验采取这一原理进行。

(2)实验方法：小鼠每天称重，抚摸1分钟，连续3天。随机分组，正常组、药物组和阳性对照组，正常给药，每天一次，连续5天，给药组设低、中、高三个剂量，分别灌胃给予受试样品100mg/kg、200mg/kg、400mg/kg，地西泮作为阳性对照药(4mg/kg)，正常组给等剂量生理盐水。末次给药30分钟后，将小鼠置于迷宫中央开阔部，头朝闭臂。启动摄像监视系统，记录5分钟内小鼠进入开臂和闭臂的次数以及在两臂停留的时间。计算小鼠进入开臂的次数和时间分别占总次数(两臂次数之和)和总时间(在两臂滞留时间之和)的百分比。以此作为评价焦虑的指标。

(3)实验结果：开臂次数和开臂滞留时间分别占总次数(两臂次数之和)和总时间(在两臂滞留时间之和)的百分比如下表所示，QL-EtOH为实施例1所得本发明蜣螂乙醇提取物。

QL-EtOH小鼠高架十字迷宫实验(X±S)

^**P＜0.01，^*P＜0.05 vs正常组

实施例9：

本发明蜣螂提取物及其与药用辅料组成的药物或保健品组合物的抗焦虑作用：Vogel饮水冲突实验。

(1)实验原理：禁水大鼠的饮水动机与它同时所遭受的足电击惩罚形成矛盾冲突状态，抗焦虑剂增加冲突反应(冲突期舔水次数增多)，致焦虑剂则使冲突反应降低。本实验采取这一原理进行。

(2)实验方法：Model-102型焦虑仪(宁波安莱科技)，由自动计数器、电刺激器和有机玻璃操作箱三部分组成。操作箱(45cm×24cm×21cm)，底部为不锈钢栅栏，顶部加一网眼状不锈钢盖，瓶盖一端插入一个带有不锈钢嘴的水瓶，瓶嘴伸入箱内6cm，距离底部栅栏12cm，并与底部栅栏一起通过导线与刺激器相连。瓶嘴外套一绝缘胶皮，以防大鼠触及瓶嘴但未舔水时遭受电击。动物适应环境3天，并分组灌胃给药5天。之后实验分两阶段进行，第一阶段，于给药后第3天进行非惩罚饮水训练：称重，禁水，24小时后单个置于操作箱内，让其自由探究，大鼠发现瓶嘴后立即开始舔水，计数器自动记录大鼠3分钟内的舔水次数，淘汰舔水少于300次的大鼠。第二阶段，于第4天后进行惩罚实验：上述未被淘汰的大鼠继续禁水24小时(共48小时)，第5天末次给药30分钟后置于操作箱。大鼠能很快找到瓶嘴并开始舔水，舔够20次仪器自动开始计时并给予一次电击(舔水与电击次数之比为20∶1)，电击强度为0.3mA，持续2s，但大鼠如脱离瓶嘴，则电击终止。大鼠据此可控制遭受电击时间的长短。计数器自动记录惩罚期(3分钟)大鼠的舔水次数。

(3)实验结果：QL-EtOH为实施例1的蜣螂乙醇提取物。各组非惩罚条件下饮水次数几无差别，给予电击刺激后，给药组、阳性药组与正常组的差别如下表所示：

QL-EtOH大鼠Vogel饮水冲突实验(X±S)

^**P＜0.01，^*P＜0.05 vs正常组

本发明制成的蜣螂提取物及其制剂具有明显的抗焦虑作用，蜣螂可养殖，资源有保障，因此蜣螂制剂前景良好。

Claims (2)

1.一种蜣螂水提取物在制备抗焦虑药物中的应用，所述的蜣螂水提取物由下述方法制备：

取蜣螂，干燥、粉碎，用水冷浸、温浸提取或加热煎煮提取，过滤取滤液，浓缩得浸膏；其中，所述水冷浸、温浸提取是：水的加入量是蜣螂药材质量的2～10倍，冷浸时间1～10天；温浸时间1～2小时，温度40～60℃，提取1～3次；所述加热煎煮提取是每次加热3～20分钟，提取1～3次。

2.一种蜣螂水提取物在制备抗焦虑保健食品中的应用，所述的蜣螂水提取物由下述方法制备：

取蜣螂，干燥、粉碎，用水冷浸、温浸提取或加热煎煮提取，过滤取滤液，浓缩得浸膏；其中，所述水冷浸、温浸提取是：水的加入量是蜣螂药材质量的2～10倍，冷浸时间1～10天；温浸时间1～2小时，温度40～60℃，提取1～3次；所述加热煎煮提取是每次加热3～20分钟，提取1～3次。