CN102144643A - 一种具有防腐功能的桑叶提取物及其应用 - Google Patents

Abstract

一种具有防腐功能的桑叶提取物及其应用，属于天然防腐剂技术领域。本发明以桑叶为原料，在一定条件下经过水浸提、溶剂处理等步骤得到具有防腐抑菌剂作用的桑叶提取物。主要包括以下步骤：桑叶水煎煮浸提，醇沉处理，离心浓缩，加溶剂液液萃取，回收溶剂，残留物真空干燥得成品防腐抑菌剂，主要应用于化妆品、食品领域。本发明具有工艺简单、成本低廉、操作方便、设备投资少、产品活性高、对环境无污染、易于工业化生产等优点。

Description

一种具有防腐功能的桑叶提取物及其应用

技术领域

一种具有防腐功能的桑叶提取物及其在化妆品、食品中的应用，涉及一种以桑叶为原料，在一定条件下经过水提取、溶剂处理等步骤得到高效防腐抑菌剂的方法，属于天然防腐剂技术领域。

背景技术

桑叶为桑科植物桑（Morus albal）的叶，是一种常见的中药。最早见于《神农本草经》，味甘，性平、寒，可清肝明目聪耳，镇静神经，润肺热，止咳，通关节。桑叶含有丰富的碳水化合物、蛋白质、多种维生素和矿物质元素。千百年来，桑叶主要被用于桑蚕养殖。近年来，对桑叶进行开发利用，主要应用于以下四个领域：（1）在医药工业中的应用：自古以来，桑叶就是中医临床中常见的中药材，在我国古代许多古典医药著作中都有记载，可“除寒热，出汗”。桑叶还用于一些医药制剂的研制和开发。（2）在食品工业中的应用：目前，利用桑叶开发食品的研究很多，包括普通食品、保健食品、饮料、调味料等。（3）桑叶在饲料中的应用：桑叶的营养价值比禾本科牧草高80%-100%，比热带豆科牧草高40%-50%，适口性好，易消化。（4）在化妆品工业中的应用：古代医书《宝生要录》中记载桑叶有“驻容颜，乌鬓发”的功能，桑叶所含的各种营养物质，对改善与调节皮肤组织的新陈代谢和抑制色素沉着有着积极的作用，在实际应用中，桑叶提取物一般添加在洗发水和护肤霜中起乌发和淡化色斑的作用。但是桑叶作为防腐剂添加到化妆品、食品中还未见文献报道。

公开号为CN1150016的中国专利公开了“桑叶洗发浸膏”，该专利涉及了从桑叶中提取桑叶浸膏的方法，并用于洗发水中。专利号为ZL 200610035578.6的中国专利公开了“一种桑叶护肤霜及其制备方法”，该专利涉及了桑叶提取物的制备方法并应用于护肤霜中。上述方法是近年来桑叶提取物有代表性的制备方法，但是，这些方法存在一定的不足：或者桑叶有效成分提取不完全，或者提取成本过高；另外所公开的专利中，未见有桑叶作为防腐剂添加到化妆品、食品中。

因此，如何开发出一种能以较低成本获得桑叶提取物的方法，是有效利用桑叶资源，发挥桑叶提取物抑菌作用的关键所在。本发明在前人研究基础上，改用水提醇沉法，不仅得到防腐抑菌剂产品，同时，在常规的提取、萃取操作中常被弃去的石油醚萃取液部分发现并得到了具有高效广谱抑菌作用的成分。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有防腐功能的桑叶提取物的提取方法，并将所得桑叶提取物做为防腐剂添加在化妆品、食品中的应用，所述的化妆品、食品可以为固体、液体、粉剂等形式。

本发明的技术方案：一种具有防腐功能的桑叶提取物，利用桑叶按下列工艺提取分离物：

（1）浸提：取桑叶为原料，在60-150℃的条件下，按照桑叶与水固液重量比为1:10-50的比例浸提0.5-3h，滤出桑叶，得到浸提液；重复浸提1-3次，合并浸提液。

（2）醇沉：取步骤（1）所得浸提液在常压或者减压条件下浓缩，加入乙醇至体系中乙醇终浓度为60%-70%，搅拌使之混合，静置沉淀过夜后过滤；取上层清液在常压或者减压条件下浓缩，得浓缩液或浸膏粗品。

（3）萃取：将步骤（2）所得的浓缩液用有机溶剂萃取；或将浸膏粗品用水分散后用有机溶剂萃取，得到有机溶剂萃取相和水相；剩余的水相用与之前萃取相同或不同的有机溶剂继续萃取，每种有机溶剂萃取操作进行2-4次，合并同一萃取剂萃取后的有机溶剂萃取相。

所述有机溶剂为石油醚、三氯甲烷及乙酸乙酯。

（4）回收溶剂及真空干燥：将步骤（3）所得的不同有机溶剂萃取相旋蒸除去有机溶剂后得浸膏，浸膏真空干燥得产品具有防腐功能的桑叶提取物。

步骤（1）所述桑叶与水固液重量比为1:10-25。

步骤（1）所述的温度为60-100℃。

步骤（3）所述用不同有机溶剂萃取方式如下：

（1）单独用石油醚、三氯甲烷或乙酸乙酯萃取2-4次；

（2）先用三氯甲烷萃取2-4次，剩余水相再用乙酸乙酯萃取2-4次；

（3）先用石油醚萃取2-4次，剩余水相继而用三氯甲烷萃取2-4次，最后剩余水相用乙酸乙酯萃取2-4次。

步骤（4）所述用石油醚萃取得到产品Ⅰ；用三氯甲烷萃取得到产品Ⅱ；用乙酸乙酯萃取得到产品Ⅲ。

在化妆品中作为天然防腐剂使用，添加比例以质量计为0.5%-2.0%。

在食品中作为天然防腐剂的使用，添加比例以质量计为0.5%-2.0%。

本发明的有益效果：

1、本发明具有防腐功能的桑叶提取物生产方法，所采用的提取溶剂为水，一方面大大减少了企业的溶剂使用成本，另一方面也降低了对环境的污染。

2、本发明中所用到的乙醇等有机溶剂都可以回收重复利用，而且工艺流程简单，设备投入小，生产成本低，易于工业化生产。

3、本发明通过简单的液液萃取法可以同时得到三种具有防腐功能的桑叶提取物抑菌剂产品，也可以以其中一种溶剂萃取得到某一个抑菌剂产品，均具有良好的抑菌性。且本发明在常规的提取、萃取操作中常被弃去的非极性部分发现并得到了具有高效广谱抑菌作用的成分。

4、本发明具有防腐功能的桑叶提取物是一种天然防腐剂，添加到化妆品、食品中更加安全、卫生。

具体实施方式

下面通过实施例详细说明本发明的技术方案，但是不局限于所列举的例子。

实施例1

（1）将500g桑叶放入水槽中，加入12.5L水，加热到95℃浸提2h，将浸提液滤出；往残渣中加入7.5L水，同样条件下浸提2h，捞出残渣，合并两次浸提液；

（2）55℃水浴减压浓缩至1L；加入乙醇，使体系中乙醇终浓度为60%-70%，充分搅拌混合，静置过夜后过滤，浓缩清液至干，干燥后得浸膏粗品77.7g。

（3）将浸膏用100-200mL水分散后通过石油醚液液萃取，每次用石油醚50mL，萃取进行2-4次，萃至无色，合并上层石油醚清液，回收溶剂，浓缩物真空干燥得产品Ⅰ0.315g，为淡黄色油状物。在上步剩余水溶液中加入三氯甲烷液液萃取，每次用三氯甲烷50mL，取出下层黄色的三氯甲烷层部分，萃取进行2-4次，萃至无色，合并后减压浓缩回收溶剂，浓缩物真空干燥得产品Ⅱ1.155g，为棕色浸膏。在上层水液中继续加入乙酸乙酯萃取3次，每次用乙酸乙酯50mL，萃至无色，浓缩干燥，得产品Ⅲ1.80g，为棕黄色浸膏。

实施例2：

（1）称取500g桑叶，置于水槽中，加入10L水浸没桑叶，加热至85℃浸提两次，每次3h，第二次浸提时的需水量可视情况适当减少，以浸没桑叶为宜；合并两次浸提液。

（2）减压浓缩至约800mL，加入乙醇沉淀，使体系中乙醇终浓度为60%～70%，滤液浓缩至约1000mL。

（3）将浓缩液平均分为两份，每份浓缩液约500mL，一份直接用三氯甲烷萃取，每次用三氯甲烷125-250mL萃取进行2-4次，萃至无色后合并萃取相回收溶剂，干燥后得萃取物产品Ⅱ0.6037g；

另一份500mL浓缩液直接用乙酸乙酯萃取，每次用乙酸乙酯125-250mL，萃取进行2-4次，萃至无色，合并萃取相回收溶剂，干燥后得产品Ⅲ1.2504g。

应用实施例1 具有防腐功能的桑叶提取物加入护肤霜中抑菌性测试

以实施例1中制得三部分桑叶萃取物为例，另取未添加防腐剂的膏霜，实验分五组：

第一组：不添加任何防腐剂，作为空白对照；

第二组：按照0.5 %、1.0 %、1.5 %、2.0 %的比例添加石油醚部分萃取物Ⅰ；

第三组：按照0.5 %、1.0 %、1.5 %、2.0 %的比例添加三氯甲烷部分萃取物Ⅱ；

第四组：按照0.5 %、1.0 %、1.5 %、2.0 %的比例添加乙酸乙酯部分萃取物Ⅲ；

第五组：加入尼泊金甲酯0.15 %，尼泊金丙酯0.05 %和极美Ⅱ0.20 %。

先将各样品在室温下放置一个月，观察膏霜体系的性能是否发生变化。

再将各样品放入37 ℃生化培养箱，目的是为微生物提供合适的生长环境，以缩短实验周期。

每天打开各膏霜样品盖，使接触空气，保持15~20分钟，再盖上瓶盖，以模拟膏霜的实际使用情况。

测试方法：

（1）配置卵磷脂、吐温-80营养琼脂培养基：先将卵磷脂加到少量蒸馏水中，加热溶解，加入吐温-80，将除琼脂外的其他成分加到剩余的蒸馏水中溶解，再加入已溶解的卵磷脂、吐温-80，混匀，调节pH值为 7.1-7.4，加入琼脂，121℃高压灭菌20 min，储存于冷暗处备用。培养基配方见表1

表1 卵磷脂、吐温-80营养琼脂培养基

成分	质量
		蛋白胨	20 g
牛肉膏	3 g
		氯化钠	5 g

琼脂 Agar	15 g
		卵磷脂	1 g
吐温-80	7 g
		蒸馏水	1000 mL

（2）采用平板计数法测定膏霜中的菌落总数：取膏霜，用无菌生理盐水按1︰10稀释后得到待检的检液，用灭菌吸管吸取稀释的检液2mL，分别注入到两个灭菌平皿内，每皿1mL。每皿中注入9mL无菌生理盐水（勿使吸管接触液面），充分混匀，制成1︰100检液。更换一支吸管，吸取1︰100检液2mL分别注入到两个灭菌平皿内，每皿1mL。

将融化并冷却至45-50℃的卵磷脂吐温-80营养琼脂培养基倾注到上述装有1︰100检液的平皿内，每皿约15 mL，随即转动平皿，使样品与培养基充分混合均匀，待琼脂凝固后，翻转平皿，置36±1 ℃培养箱内培养48±2h。另取一个不加样品的灭菌空平皿，加入约15 mL卵磷脂吐温-80琼脂培养基，待琼脂凝固后，翻转平皿，置36±1 ℃培养箱内培养48±2 h，作为空白对照。

培养周期为2个月。

从室温放置开始至培养结束，每周检测一次。

测试结果见表2

表2 测试结果

测试结论：

从上述表中可以看出，用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯萃取的桑叶提取物均有一定的抑菌效果，可以单独使用或者与其他防腐剂配合使用。

Claims (7)

1.一种具有防腐功能的桑叶提取物，其特征在于利用桑叶按下列工艺提取分离物：

（1）浸提：取桑叶为原料，在60-150℃的条件下，按照桑叶与水固液重量比为1:10-50的比例浸提0.5-3h，滤出桑叶，得到浸提液；重复浸提1-3次，合并浸提液；

（2）醇沉：取步骤（1）所得浸提液在常压或者减压条件下浓缩，加入乙醇至体系中乙醇终浓度为60%-70%，搅拌使之混合，静置沉淀过夜后过滤；取上层清液在常压或者减压条件下浓缩，得浓缩液或浸膏粗品；

（3）萃取：将步骤（2）所得的浓缩液用有机溶剂萃取；或将浸膏粗品用水分散后用有机溶剂萃取，得到有机溶剂萃取相和水相；剩余的水相用与之前萃取相同或不同的有机溶剂继续萃取，每种有机溶剂萃取操作进行2-4次，合并同一萃取剂萃取后的有机溶剂萃取相；

所述有机溶剂为石油醚、三氯甲烷及乙酸乙酯；

（4）回收溶剂及真空干燥：将步骤（3）所得的不同有机溶剂萃取相旋蒸除去有机溶剂后得浸膏，浸膏真空干燥得产品具有防腐功能的桑叶提取物。

2.根据权利要求1所述具有防腐功能的桑叶提取物，其特征在于步骤（1）所述桑叶与水固液重量比为1:10-25。

3.根据权利要求1所述具有防腐功能的桑叶提取物，其特征在于步骤（1）所述的温度为60-100℃。

4.根据权利要求1所述具有防腐功能的桑叶提取物，其特征在于步骤（3）所述用不同有机溶剂萃取方式如下：

（1）单独用石油醚、三氯甲烷或乙酸乙酯萃取2-4次；

（2）先用三氯甲烷萃取2-4次，剩余水相再用乙酸乙酯萃取2-4次；

（3）先用石油醚萃取2-4次，剩余水相继而用三氯甲烷萃取2-4次，最后剩余水相用乙酸乙酯萃取2-4次。

5.根据权利要求1所述具有防腐功能的桑叶提取物，其特征在于步骤（4）所述用石油醚萃取得到产品Ⅰ；用三氯甲烷萃取得到产品Ⅱ；用乙酸乙酯萃取得到产品Ⅲ。

6.权利要求1所述具有防腐功能的桑叶提取物的应用，其特征在于在化妆品中作为天然防腐剂使用，添加比例以质量计为0.5%-2.0%。

7.权利要求1所述具有防腐功能的桑叶提取物的应用，其特征在于在食品中作为天然防腐剂的使用，添加比例以质量计为0.5%-2.0%。