CN102140143B - 一种从蟹壳中提取甲壳质的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种从蟹壳中提取甲壳质的方法，包括步骤：将蟹壳干燥打粉，加入水混合，再加入浓度为10％～30％的碳酸酐酶溶液，25～35℃搅拌酶解4～20小时；当发酵液中的钙离子含量达到2.5％～4.5％时停止酶解，离心，取沉淀物；按沉淀物∶水＝1∶2～5w/w的比例加入水，再加入占沉淀物质量百分比为0.4％～0.8％的复合蛋白酶，52～55℃酶解2～5小时，离心，取沉淀物，洗涤，灭菌即得。本发明的从蟹壳中提取甲壳质的生产工艺简单，完全利用生物降解的方法，从原料到成品，没有化学物品的加入，不会对人体和环境造成威胁，得到的甲壳质，纯度高，完全达到食品和药品的要求，可用于食品、药品和保健品中。
Description
技术领域
本发明涉及一种从蟹壳中提取甲壳质的方法。
背景技术
蟹壳中大约有3/4为碳酸钙，余下的1/4中约有一半为甲壳质，余一半主要为蛋白质。甲壳素具有抗癌抑制癌、瘤细胞转移，提高人体免疫力及护肝解毒作用，尤其适用于糖尿病、肝肾病、高血压、肥胖等症，有利于预防癌细胞病变和辅助放化疗治疗肿瘤疾病。利用蟹壳作为生产甲壳素的原理主要是处理掉碳酸钙和蛋白质而得到甲壳素。
目前从蟹壳中提取甲壳质的前期处理都是稀酸脱钙，先采用较低浓度的盐酸喷洒蟹壳，使蟹壳软化，然后用复合或中性蛋白酶水解软化后的蟹壳中的蛋白质，滤出蛋白水解液后的固形物用3～5mol/L盐酸于30℃～45℃浸泡1h～2h，彻底脱除钙等矿物质，经自来水清洗、晒干获得甲壳素产品。这种方法提取的甲壳质纯度高，但生产中需要用到盐酸，对工人的身体健康造成威胁，而且生产排放的污水会对环境造成很大的污染。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种从蟹壳中提取甲壳质的方法，该方法不需使用化学物质，整个生产过程不会存在对人体和环境的安全隐患。
为实现上述目的，本发明采取了以下技术方案：
一种从蟹壳中提取甲壳质的方法，包括以下步骤：
(1)将蟹壳干燥打粉，按蟹壳∶水＝1∶20～30w/w的比例加入水混合，再按蟹壳∶碳酸酐酶溶液＝1∶3～5w/v的比例加入浓度为10％～30％的碳酸酐酶溶液，25～35℃搅拌酶解4～20小时；
(2)当发酵液中的钙离子含量达到2.5％～4.5％时停止酶解，离心，取沉淀物；
(3)按沉淀物∶水＝1∶2～5w/w的比例加入水，再加入占沉淀物质量百分比为0.4％～0.8％的复合蛋白酶，52～55℃酶解2～5小时，离心，取沉淀物，洗涤，灭菌即得。
本发明从蟹壳中提取甲壳质的方法的原理为：先用碳酸酐酶使碳酸钙逆反应，分解成水溶性钙离子、二氧化碳和水，离心后用复合蛋白酶降解蟹壳的蛋白质和残留的碳酸酐酶，再离心就得到纯度较高的甲壳质。
优选地，所述步骤(1)中碳酸酐酶溶液的浓度为12％，pH为7.5，初步溶解酶制剂，更容易混合均匀。
优选地，所述步骤(1)中蟹壳∶水＝1∶20w/w，蟹壳∶碳酸酐酶溶液＝1∶4w/v。优选地，所述步骤(1)中，于28～30℃搅拌酶解15小时。
优选地，所述步骤(2)中钙离子的含量为3.5％。
优选地，所述步骤(3)中加入占沉淀物质量百分比为0.4％的复合蛋白酶，52～55℃酶解3小时。
从成本核算方面考虑，上述优选工艺的性价比最高，得到的产品完全符合食品和药品的质量要求。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
(1)本发明的从蟹壳中提取甲壳质的生产工艺简单，完全利用生物降解的方法，从原料到成品，没有化学物品的加入，不会对人体和环境造成威胁，取之天然，成之天然；
(2)通过本发明的提取方法得到的甲壳质，纯度高，完全达到食品和药品的要求，可用于食品、药品和保健品中。
具体实施方式
以下结合具体实施例来详细说明本发明。
实施例1一种从蟹壳中提取甲壳质的方法
包括以下步骤：
(1)配制12％的碳酸酐酶水溶液(上海易利生物科技有限公司)，调节pH 7.5，备用；
(2)将蟹壳干燥打粉，按蟹壳∶水＝1∶20w/w的比例加入水混合，再按蟹壳∶碳酸酐酶溶液＝1∶4w/v的比例加入步骤(1)的碳酸酐酶溶液，28～30℃搅拌酶解15小时；
(3)当发酵液中的钙离子含量达到3.5％时停止发酵，离心，取沉淀物；
(4)按沉淀物∶水＝1∶2w/w的比例加入水，再加入占沉淀物质量百分比为0.4％的复合蛋白酶(购自广州市微生物研究所)，52～55℃酶解3小时，离心，取沉淀物，用清水洗涤，灭菌即得甲壳质。
采用红外吸收光谱分析方法测定实施例1得到的甲壳质的含量，其含量为98％，完全达到了食品和药品的要求，可用于食品、药品和保健品中。
实施例2一种从蟹壳中提取甲壳质的方法
包括以下步骤：
(1)配制10％的碳酸酐酶水溶液，调节pH 7.5，备用；
(2)将蟹壳干燥打粉，按蟹壳∶水＝1∶25w/w的比例加入水混合，再按蟹壳∶碳酸酐酶溶液＝1∶3w/v的比例加入步骤(1)的碳酸酐酶溶液，25℃搅拌酶解5小时；
(3)当发酵液中的钙离子含量达到2.8％时停止发酵，离心，取沉淀物；
(4)按沉淀物∶水＝1∶4w/w的比例加入水，再加入占沉淀物质量百分比为0.6％的复合蛋白酶(购自广州市微生物研究所)，52～55℃酶解2小时，离心，取沉淀物，用清水洗涤，灭菌即得甲壳质。
采用红外吸收光谱分析方法测定实施例2得到的甲壳质的含量，其含量为92％，完全达到了食品和药品的要求，可用于食品、药品和保健品中。
实施例3一种从蟹壳中提取甲壳质的方法
包括以下步骤：
(1)配制25％的碳酸酐酶水溶液，调节pH 7.5，备用；
(2)将蟹壳干燥打粉，按蟹壳∶水＝1∶30w/w的比例加入水混合，再按蟹壳∶碳酸酐酶溶液＝1∶5w/v的比例加入步骤(1)的碳酸酐酶溶液，33℃搅拌酶解18小时；
(3)当发酵液中的钙离子含量达到4.2％时停止发酵，离心，取沉淀物；
(4)按沉淀物∶水＝1∶5w/w的比例加入水，再加入占沉淀物质量百分比为0.8％的复合蛋白酶(购自广州市微生物研究所)，52～55℃酶解4小时，离心，取沉淀物，用清水洗涤，灭菌即得甲壳质。
采用红外吸收光谱分析方法测定实施例3得到的甲壳质的含量，其含量为97％，完全达到了食品和药品的要求，可用于食品、药品和保健品中。
Claims (6)
1.一种从蟹壳中提取甲壳质的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将蟹壳干燥打粉，按蟹壳∶水＝1∶20～30w/w的比例加入水混合，再按蟹壳∶碳酸酐酶溶液＝1∶3～5w/v的比例加入浓度为10％～30％的碳酸酐酶溶液，25～35℃搅拌酶解4～20小时；
(2)当发酵液中的钙离子含量达到2.5％～4.5％时停止酶解，离心，取沉淀物；
(3)按沉淀物∶水＝1∶2～5w/w的比例加入水，再加入占沉淀物质量百分比为0.4％～0.8％的复合蛋白酶，52～55℃酶解2～5小时，离心，取沉淀物，洗涤，灭菌即得。
2.根据权利要求1所述的从蟹壳中提取甲壳质的方法，其特征在于，所述步骤(1)中碳酸酐酶溶液的浓度为12％，pH为7.5。
3.根据权利要求1所述的从蟹壳中提取甲壳质的方法，其特征在于，所述步骤(1)中蟹壳∶水＝1∶20w/w，蟹壳∶碳酸酐酶溶液＝1∶4w/v。
4.根据权利要求1所述的从蟹壳中提取甲壳质的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，于28～30℃搅拌酶解15小时。
5.根据权利要求1所述的从蟹壳中提取甲壳质的方法，其特征在于，所述步骤(2)中钙离子的含量为3.5％。
6.根据权利要求1-5任一项所述的从蟹壳中提取甲壳质的方法，其特征在于，所述步骤(3)中加入占沉淀物质量百分比为0.4％的复合蛋白酶，52～55℃酶解3小时。
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