CN101766667A - 一种紫锥菊提取物和其制备方法及其酚类成分的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种紫锥菊提取物，其含有咖啡酰酒石酸2.4％～3.1％，菊苣酸4.4％～5.7％和松果菊苷1.5％～2.0％，以上百分比均为各成分占提取物干重的重量百分比。本发明还公开了上述紫锥菊提取物的制备方法以及其中酚类成分的含量检测方法。本发明的紫锥菊提取物中酚类成分的含量均符合美国药典30版(USP30)中关于紫锥菊有效成分含量规定的要求，且与市售的紫锥菊提取物相比，酚类成分的含量高4～6％，且其制备方法工艺简单、成本低、能耗小，易于工业化。
Description
技术领域
本发明涉及一种植物提取物和其制备方法及其中成分的检测方法，具体的涉及一种紫锥菊提取物和其制备方法及其酚类成分的含量检测方法。
背景技术
紫锥菊为菊科紫锥菊属药用植物，原产美洲，我国有部分地区有引种，药用部位为根和根茎或全株。紫锥菊具有广泛的免疫调节功能，可明显提高机体的免疫调节水平，主要用于治疗感冒(上呼吸道感染)、伤寒、白喉、肺结核和昆虫、蛇咬伤等多种花期根细菌感染病症，此外紫锥菊还具有抗氧化和抗癌作用。紫锥菊属植物的的主要成分包括三大类，多糖、咖啡酸衍生物(主要是菊苣酸、松果菊苷、咖啡酰酒石酸等)和烷酰胺类化合物。紫锥菊在美国药典(USP24-30版)均有收载，美国药典收载的品种包括紫锥菊药材、紫锥菊粉末和紫锥菊提取物粉末。目前，国内市场上紫锥菊提取物的产品主要有4％总酚提取物(UV法测定)、4％总酚提取物(HPLC法测定)、4％菊苣酸提取物(HPLC法测定)，其中4％总酚提取物为主要出口产品。
国内关于紫锥菊提取物的专利有4个，现举例如下，公开号为CN1587251A的专利：该专利以紫锥菊为原料，经过乙醇水溶液提取、稀酸酸化、乙酸乙酯萃取、大孔树脂分离、冷却结晶等工艺过程制备紫锥菊提取物。由于其制备过程中使用乙酸乙酯等有机溶剂，该提取物具有食用安全隐患；公开号为CN1473602A的专利：该专利以30％的乙醇水溶液与紫锥菊药材混合进行回流提取，回流后回收提取液，药渣继续以30％的乙醇回流提取，合并2次提取液，然后用0.45μm的微孔滤膜过滤，滤液再真空干燥，得到提取物。其菊苣酸的制备工艺为滤液浓缩，用制备型液相进行分离得到菊苣酸。该方法由于生产成本昂贵，不适合工业化生产；公开号为CN1957961A的专利：该专利以紫锥菊药材新鲜的叶片、花蕾、侧枝为原料，先进行冷榨，得到榨汁，榨汁再以70～95％的乙醇溶液进行回流提取，提取液再浓缩，得到紫锥菊提取物。该方法只测定了菊苣酸在紫锥菊提取物的含量，并不能代表紫锥菊发挥药效的物质成分；公开号为CN101032541A的专利：该专利以40～70％乙醇水溶液回流提取紫锥菊药材，回收滤液，再以10～30％的乙醇水溶液回流提取药渣，合并2次提取液，浓缩，干燥，得到紫锥菊提取物。由于缺少纯化步骤，可能酚类成分的含量不符合美国药典(USP30)关于紫锥菊提取物的要求。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是为了克服现有的紫锥菊提取物的制备方法中有食用安全隐患、生产成本昂贵和不适合工业化生产的缺陷，而提供了一种紫锥菊提取物及其制备方法。本发明的紫锥菊提取物中酚类成分的含量均符合美国药典30版(USP30)中关于紫锥菊有效成分含量规定的要求，且与市售的紫锥菊提取物相比，酚类成分的含量高4％～6％(重量百分比)，且其制备方法工艺简单、成本低、能耗小，易于工业化。
本发明涉及一种紫锥菊提取物，其含有咖啡酰酒石酸2.4％～3.1％，菊苣酸4.4％～5.7％和松果菊苷1.5％～2.0％，以上百分比均为各成分占提取物干重的重量百分比。
其中，咖啡酰酒石酸、菊苣酸和松果菊苷即为总酚类成分，总酚类成分的含量为8.3％～10.8％，以上百分比均为各成分占提取物干重的重量百分比。
本发明进一步涉及上述紫锥菊提取物的制备方法，其包含下列步骤：
(1)提取、浓缩和离心：将紫锥菊药材用乙醇水溶液提取，将提取液浓缩，然后离心，得上清液；
(2)膜分离：将步骤(1)所得的上清液加水稀释，稀释药液依次经过有机膜、超滤膜和纳滤膜进行过滤，滤液即为紫锥菊提取物。
其中，步骤(1)中，所述的提取、浓缩和离心的方法和条件均可为本领域的常规方法和条件，优选的方法和条件如下：所述的紫锥菊药材较佳的为粉碎后的药材，优选粒径为40目；所述的提取的温度较佳的为70℃～100℃；更佳的为回流温度；所述的乙醇水溶液的浓度较佳的为体积百分比10％～60％；所述的乙醇水溶液每次提取的用量较佳的为紫锥菊药材重量的8～12倍；所述的提取的次数较佳的为1～3次，每次时间较佳的为0.5～2小时；所述的浓缩较佳的为将提取液浓缩为原药液体积的1/3；所述的离心的转速较佳的为4000～5000r/min；
步骤(2)中，所述的水较佳的为去离子水；水的用量较佳的为上清液体积的2倍；所述的有机膜的过滤孔径较佳的为250～400nm，有机膜的材质较佳的为亲水性聚偏二氟乙烯；所述的超滤膜的过滤孔径较佳的为5～15nm，超滤膜的材质较佳的为亲水性聚偏二氟乙烯；所述的纳滤膜的过滤孔径较佳的为0.1～1nm，纳滤膜的材质较佳的为聚酰胺；所述的经过有机膜进行过滤的操作压力较佳的为0～0.5Mpa，更佳的为0.2Mpa；所述的经过超滤膜进行过滤的操作压力较佳的为0～0.8Mpa，更佳的为0.6Mpa；所述的经过纳滤膜进行过滤的操作压力较佳的为0～3Mpa，更佳的为1.5Mpa；上述三种膜进行过滤时的操作温度较佳的为20℃～35℃；
步骤(2)中，在所述的过滤后较佳的还包含下列步骤：收集纳滤膜过滤后的滤液，将此滤液进行干燥，得到紫锥菊提取物粉末；所述的干燥的方法较佳的为喷雾干燥。
本发明的制备方法中，上述各工艺步骤的优选条件可任意组合，即得到本发明的各较佳实例。
本发明中，所述的紫锥菊提取物的制备方法的最佳步骤如下：
(a)乙醇回流提取：将紫锥菊药材粉碎至40目，加入体积百分比40％～60％乙醇水溶液回流提取2次，每次用量为紫锥菊药材重量的8～12倍量，每次时间为0.5～2小时，合并40％～60％乙醇提取液；残渣加10％～20％乙醇水溶液回流提取，用量为紫锥菊药材重量的8-12倍量，时间为1小时，然后合并40％～60％乙醇提取液以及10％～20％乙醇提取液；
(b)浓缩：将步骤(a)所得的提取液浓缩至原药液体积的1/3；
(c)离心：将步骤(b)所得的药液，以4000～5000r/min离心，取上清液；
(d)膜分离：取上清液，加入是上清液体积的2倍的去离子水充分稀释，稀释药液依次经过有机膜、超滤膜和纳滤膜进行进一步纯化，收集纳滤后的滤液；采用膜分离的分离系统为：有机膜的过滤孔径为250～400nm，有机膜的材质为亲水性聚偏二氟乙烯；超滤膜的过滤孔径为5～15nm，超滤膜的材质为亲水性聚偏二氟乙烯；所述的纳滤膜的过滤孔径为0.1～1nm，纳滤膜的材质为聚酰胺；所述的经过有机膜进行过滤的操作压力为0～0.5Mpa，更佳的为0.2Mpa；所述的经过超滤膜进行过滤的操作压力为0～0.8Mpa，更佳的为0.6Mpa；所述的经过纳滤膜进行过滤的操作压力为0～3Mpa，更佳的为1.5Mpa；上述三种膜进行过滤时的操作温度为20～35℃；
(e)喷雾干燥：经过纳滤膜过滤后的滤液进行喷雾干燥，得到紫锥菊提取物粉末。
本发明中，所述的紫锥菊药材较佳的选自紫锥菊属植物紫锥菊(Echinacea purpurea)、狭叶紫锥菊(Echinacea angustifolia)或白紫锥菊(Echinacea pallida)。
本发明进一步涉及上述紫锥菊提取物中酚类成分的含量检测方法，其包含下列条件：以高效液相色谱方法进行检测；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈和体积浓度为0.1％的磷酸溶液为洗脱液进行梯度洗脱，具体条件见表1；检测波长为330nm，柱温为35℃，流速为1.5ml/min；
表1
以咖啡酰酒石酸、松果菊苷和菊苣酸为对照品；以上百分比均为体积百分比。
在此检测方法中，对照品溶液的制备、供试品溶液的制备、标准曲线绘制和含量测定均可为现有的常规方法和条件，优选以下方法和条件：
对照品溶液的制备：分别取咖啡酰酒石酸、松果菊苷和菊苣酸对照品适量，精密称定，加体积百分比70％乙醇制成每1ml含80μg的溶液，即得；
供试品溶液的制备：称取本发明的紫锥菊提取物粉末约1g，精密称定，置于50ml容量瓶中，加入体积百分比70％乙醇20ml，超声5分钟，冷却，加入体积百分比70％乙醇定容至刻度，摇匀，滤过，取滤液，即可；
标准曲线绘制：分别精密吸取咖啡酰酒石酸、松果菊苷和菊苣酸对照品溶液2、4、6、8、10、12、14μl注入液相色谱仪，测定各色谱峰峰面积，以对照品进样量(μg)为横坐标，色谱峰峰面积为纵坐标，绘制标准曲线；
含量测定：精密吸取3批供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定20分钟色谱图峰面积，计算含量即可。
除特殊说明外，本发明涉及的原料和试剂均市售可得。
本发明的积极进步效果在于：
(1)本发明的紫锥菊提取物中酚类成分的含量均符合美国药典30版(USP30)中关于紫锥菊有效成分含量规定的要求，且与市售的紫锥菊提取物相比，酚类成分的含量高4％～6％，且其制备方法工艺简单、成本低、能耗小，易于工业化。
(2)本发明的紫锥菊提取物的制备方法中，运用膜分离技术来除去提取物中的生物大分子如蛋白质、鞣质、胶体类化合物，效果明显，回收率较高，且运用膜分离纯化紫锥菊提取物对膜无损坏，可清洗后重复使用。
附图说明
图1为菊苣酸对照品的高效液相色谱图。
图2为咖啡酰酒石酸对照品的高效液相色谱图。
图3为松果菊苷对照品的高效液相色谱图。
图4为实施例6制得的紫锥菊提取物供试品的高效液相色谱图。
具体实施方式
下面用实施例来进一步说明本发明，但本发明并不受其限制。
以下实施例中，乙醇水溶液的浓度均为体积浓度。
实施例1紫锥菊提取物的制备
取紫锥菊全草干燥药材2kg，粉碎为40目，加入8倍量40％乙醇水溶液回流提取0.5小时，倾出提取液，残渣加10倍量10％乙醇水溶液回流提取1小时，合并全部提取液，减压浓缩至原体积的1/3，以4000r/min离心10min，倾出上清液，加入2倍上清液体积去离子水稀释，稀释液先通过有机膜滤过，膜孔径300nm，操作压力0.2MPa，操作温度28℃，得到有机膜透过液50L，有机膜透过液再通过超滤膜进行分离，膜孔径10nm，操作压力0.6MPa，得到超滤膜透过液41L。超滤膜滤过液再进行纳滤膜浓缩，操作压力1.5Mpa。收集纳滤后的滤液。经过纳滤膜过滤后的滤液进行喷雾干燥，喷雾干燥的参数为：入风温度180℃，出风温度102℃，流速3.2L/h，收集喷雾干燥粉末，即得紫锥菊提取物，咖啡酰酒石酸、松果菊苷和菊苣酸含量之和为8.3％，其含有咖啡酰酒石酸2.4％，菊苣酸4.4％和松果菊苷1.5％。
实施例2紫锥菊提取物的制备
取紫锥菊全草干燥药材2kg，粉碎为40目，加入10倍量50％乙醇水溶液回流提取3次，每次0.5小时，倾出提取液，残渣加10倍量10％乙醇水溶液回流提取1小时，合并全部提取液，减压浓缩至原体积的1/3，以4000r/min离心10min，倾出上清液，加入2倍上清液体积去离子水稀释，稀释液先通过有机膜滤过，膜孔径300nm，操作压力0.2MPa，操作温度28℃，得到有机膜透过液50L，有机膜透过液再通过超滤膜进行分离，膜孔径10nm，操作压力0.6MPa，得到超滤膜透过液41L。超滤膜滤过液再进行纳滤膜浓缩，操作压力1.5Mpa。收集纳滤后的滤液。经过纳滤膜过滤后的滤液进行喷雾干燥，喷雾干燥的参数为：入风温度180℃，出风温度102℃，流速3.2L/h，收集喷雾干燥粉末，即得紫锥菊提取物，测定紫锥菊提取物中咖啡酰酒石酸、松果菊苷和菊苣酸含量之和为9.1％，其含有咖啡酰酒石酸2.6％，菊苣酸4.9％和松果菊苷1.6％。
实施例3紫锥菊提取物的制备
取紫锥菊全草干燥药材2kg，粉碎为40目，加入12倍量50％乙醇水溶液回流提取2小时，倾出提取液，残渣加10倍量10％乙醇水溶液回流提取1小时，合并全部提取液，减压浓缩至原体积的1/3，以4000r/min离心10min，倾出上清液，加入2倍上清液体积去离子水稀释，稀释液先通过有机膜滤过，膜孔径300nm，操作压力0.2MPa，操作温度28℃，得到有机膜透过液50L，有机膜透过液再通过超滤膜进行分离，膜孔径10nm，操作压力0.6MPa，得到超滤膜透过液41L。超滤膜滤过液再进行纳滤膜浓缩，操作压力1.5Mpa。收集纳滤后的滤液。经过纳滤膜过滤后的滤液进行喷雾干燥，喷雾干燥的参数为：入风温度180℃，出风温度102℃，流速3.2L/h，收集喷雾干燥粉末，即得紫锥菊提取物，咖啡酰酒石酸、松果菊苷和菊苣酸含量之和为10.8％，其含有咖啡酰酒石酸3.1％，菊苣酸5.7％和松果菊苷2.0％。
实施例4紫锥菊提取物的制备
取紫锥菊全草干燥药材2kg，粉碎为40目，加入12倍量60％乙醇水溶液回流提取2次，每次0.5小时，倾出提取液，残渣加10倍量10％乙醇水溶液回流提取1小时，合并全部提取液，减压浓缩至原体积的1/3，以4000r/min离心10min，倾出上清液，加入2倍上清液体积去离子水稀释，稀释液先通过有机膜滤过，膜孔径300nm，操作压力0.2MPa，操作温度28℃，得到有机膜透过液50L，有机膜透过液再通过超滤膜进行分离，膜孔径10nm，操作压力0.6MPa，得到超滤膜透过液41L。超滤膜滤过液再进行纳滤膜浓缩，操作压力1.5Mpa。收集纳滤后的滤液。经过纳滤膜过滤后的滤液进行喷雾干燥，喷雾干燥的参数为：入风温度180℃，出风温度102℃，流速3.2L/h，收集喷雾干燥粉末，即得紫锥菊提取物，咖啡酰酒石酸、松果菊苷和菊苣酸含量之和为8.8％，其含有咖啡酰酒石酸2.5％，菊苣酸4.7％和松果菊苷1.6％。
实施例5紫锥菊提取物的制备
取紫锥菊全草干燥药材2kg，粉碎为40目，加入12倍量60％乙醇水溶液回流提取2小时，倾出提取液，残渣加10倍量10％乙醇水溶液回流提取1小时，合并全部提取液，减压浓缩至原体积的1/3，以4000r/min离心10min，倾出上清液，加入2倍上清液体积去离子水稀释，稀释液先通过有机膜滤过，膜孔径300nm，操作压力0.2MPa，操作温度28℃，得到有机膜透过液50L，有机膜透过液再通过超滤膜进行分离，膜孔径10nm，操作压力0.6MPa，得到超滤膜透过液41L。超滤膜滤过液再进行纳滤膜浓缩，操作压力1.5Mpa。收集纳滤后的滤液。经过纳滤膜过滤后的滤液进行喷雾干燥，喷雾干燥的参数为：入风温度180℃，出风温度102℃，流速3.2L/h，收集喷雾干燥粉末，即得紫锥菊提取物，咖啡酰酒石酸、松果菊苷和菊苣酸含量之和为10.2％，其含有咖啡酰酒石酸2.9％，菊苣酸5.4％和松果菊苷1.8％。
实施例6紫锥菊提取物的制备
取紫锥菊全草干燥药材2kg，粉碎为40目，加入10倍量60％乙醇水溶液回流提取2小时，倾出提取液，残渣加10倍量10％乙醇水溶液回流提取1小时，合并全部提取液，减压浓缩至原体积的1/3，以4000r/min离心10min，放出上清液，加入2倍上清液体积去离子水稀释，稀释液先通过有机膜滤过，膜孔径300nm，操作压力0.2MPa，操作温度28℃，得到有机膜透过液50L，有机膜透过液再通过超滤膜进行分离，膜孔径10nm，操作压力0.6MPa，得到超滤膜透过液41L。超滤膜滤过液再进行纳滤膜浓缩，操作压力1.5Mpa。收集纳滤后的滤液。经过纳滤膜过滤后的滤液进行喷雾干燥，喷雾干燥的参数为：入风温度180℃，出风温度102℃，流速3.2L/h，收集喷雾干燥粉末，即得紫锥菊提取物，咖啡酰酒石酸、松果菊苷和菊苣酸含量之和为10.8％，其含有咖啡酰酒石酸3.1％，菊苣酸5.7％和松果菊苷2.0％。
实施例7紫锥菊提取物的制备
取紫锥菊全草干燥药材2kg，粉碎为40目，加入8倍量60％乙醇水溶液70℃提取1小时，倾出提取液，残渣加8倍量20％乙醇水溶液回流提取1小时，合并全部提取液，减压浓缩至原体积的1/3，以5000r/min离心10min，放出上清液，加入2倍上清液体积去离子水稀释，稀释液先通过有机膜滤过，有机膜的材质为亲水性聚偏二氟乙烯，膜孔径250nm，操作压力0～0.2MPa，操作温度20℃，得到有机膜透过液50L，有机膜透过液再通过超滤膜进行分离，超滤膜的材质为亲水性聚偏二氟乙烯，膜孔径5nm，操作压力0～0.3MPa，得到超滤膜透过液41L。超滤膜滤过液再进行纳滤膜浓缩，纳滤膜的材质为聚酰胺，膜孔径0.1nm，操作压力0～0.3Mpa。收集纳滤后的滤液。经过纳滤膜过滤后的滤液进行喷雾干燥，喷雾干燥的参数为：入风温度180℃，出风温度102℃，流速3.2L/h，收集喷雾干燥粉末，即得紫锥菊提取物，咖啡酰酒石酸、松果菊苷和菊苣酸含量之和为10.8％，其含有咖啡酰酒石酸3.1％，菊苣酸5.7％和松果菊苷2.0％。
实施例8紫锥菊提取物的制备
取紫锥菊全草干燥药材2kg，粉碎为40目，加入12倍量60％乙醇水溶液100℃提取1小时，倾出提取液，残渣加12倍量15％乙醇水溶液回流提取1小时，合并全部提取液，减压浓缩至原体积的1/3，以4500r/min离心10min，放出上清液，加入2倍上清液体积去离子水稀释，稀释液先通过有机膜滤过，有机膜的材质为亲水性聚偏二氟乙烯，膜孔径400nm，操作压力0.5MPa，操作温度35℃，得到有机膜透过液50L，有机膜透过液再通过超滤膜进行分离，超滤膜的材质为亲水性聚偏二氟乙烯，膜孔径15nm，操作压力0.8MPa，得到超滤膜透过液41L。超滤膜滤过液再进行纳滤膜浓缩，纳滤膜的材质为聚酰胺，膜孔径1nm，操作压力3Mpa。收集纳滤后的滤液。经过纳滤膜过滤后的滤液进行喷雾干燥，喷雾干燥的参数为：入风温度180℃，出风温度102℃，流速3.2L/h，收集喷雾干燥粉末，即得紫锥菊提取物，咖啡酰酒石酸、松果菊苷和菊苣酸含量之和为10.8％，其含有咖啡酰酒石酸3.1％，菊苣酸5.7％和松果菊苷2.0％。
本发明所使用的设备均为化工制药行业所用的通用设备，如膜分离设备、离心机等。
实施例9紫锥菊提取物中酚类成分的检测
酚类成分的检测方法：
高效液相色谱方法进行检测，色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈～体积浓度为0.1％磷酸溶液梯度洗脱，具体条件见表1，检测波长为330nm，柱温为35℃，流速为1.5ml/min，表中百分比均为体积百分比。
表1
对照品溶液的制备：分别取咖啡酰酒石酸、松果菊苷、菊苣酸对照品适量，精密称定，加70％乙醇制成每1ml含80μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备：称取本发明的实施例6制得的紫锥菊提取物粉末约1g，精密称定，置于50ml容量瓶中，加入70％乙醇20ml，超声5分钟，冷却，加入70％乙醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
标准曲线绘制：分别精密吸取咖啡酰酒石酸、松果菊苷、菊苣酸对照品溶液2、4、6、8、10、12、14μl注入液相色谱仪，测定各色谱峰峰面积，以对照品进样量(μg)为横坐标，色谱峰峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。
测定法：精密吸取3批供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定20分钟色谱图峰面积，计算含量。
对照品和供试品色谱图见附图1～4。
Claims (10)
1.一种紫锥菊提取物，其特征在于：其含有咖啡酰酒石酸2.4％～3.1％，菊苣酸4.4％～5.7％和松果菊苷1.5％～2.0％，以上百分比均为各成分占提取物干重的重量百分比。
2.如权利要求1所述的紫锥菊提取物的制备方法，其特征在于包含下列步骤：
(1)提取、浓缩和离心：将紫锥菊药材用乙醇水溶液提取，将提取液浓缩，然后离心，得上清液；
(2)膜分离：将步骤(1)所得的上清液加水稀释，稀释药液依次经过有机膜、超滤膜和纳滤膜进行过滤，滤液即为紫锥菊提取物。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：
步骤(1)中，所述的紫锥菊药材为粉碎后的药材；所述的提取的温度为70℃～100℃；所述的乙醇水溶液的浓度为体积百分比10％～60％；所述的乙醇水溶液每次提取的用量为紫锥菊药材重量的8～12倍；所述的提取的次数为1～3次，每次时间为0.5～2小时；所述的浓缩为将提取液浓缩为原药液体积的1/3；所述的离心的转速为4000～5000r/min。
4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述的紫锥菊药材的粒径为40目；所述的提取的温度为回流温度。
5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：
步骤(2)中，所述的水为去离子水；所述的水的用量为上清液体积的2倍；所述的有机膜的过滤孔径为250～400nm，有机膜的材质为亲水性聚偏二氟乙烯；所述的超滤膜的过滤孔径为5～15nm，超滤膜的材质为亲水性聚偏二氟乙烯；所述的纳滤膜的过滤孔径为0.1～1nm，纳滤膜的材质为聚酰胺；所述的经过有机膜进行过滤的操作压力为0～0.5Mpa；所述的经过超滤膜进行过滤的操作压力为0～0.8Mpa；所述的经过纳滤膜进行过滤的操作压力为0～3Mpa；上述三种膜进行过滤时的操作温度为20℃～35℃。
6.如权利要求5所述的提取物的制备方法，其特征在于：所述的经过有机膜进行过滤的操作压力为0.2Mpa；所述的经过超滤膜进行过滤的操作压力为0.6Mpa；所述的经过纳滤膜进行过滤的操作压力为1.5Mpa。
7.如权利要求2所述的提取物的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，在所述的过滤后还包括下述步骤：收集纳滤膜过滤后的滤液，将此滤液进行干燥，得到紫锥菊提取物粉末。
8.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述的制备方法包含下列步骤：
(a)乙醇水溶液回流提取：将紫锥菊药材粉碎至40目，加入体积百分比40％～60％乙醇水溶液回流提取2次，每次用量为紫锥菊药材重量的8～12倍量，每次时间为0.5～2小时，合并40％～60％乙醇提取液；残渣加10％～20％乙醇水溶液回流提取，用量为紫锥菊药材重量的8～12倍量，时间为1小时，然后合并40％～60％乙醇提取液以及10％～20％乙醇提取液；
(b)浓缩：将步骤(a)所得的提取液浓缩至原药液体积的1/3；
(c)离心：将步骤(b)所得的药液，以4000～5000r/min离心，取上清液；
(d)膜分离：取上清液，加入是上清液体积2倍的去离子水充分稀释，稀释药液依次经过有机膜、超滤膜和纳滤膜进行进一步纯化，收集纳滤后的滤液；采用膜分离的分离系统为：有机膜的过滤孔径为250～400nm，有机膜的材质为亲水性聚偏二氟乙烯；超滤膜的过滤孔径为5～15nm，超滤膜的材质为亲水性聚偏二氟乙烯；所述的纳滤膜的过滤孔径为0.1～1nm，纳滤膜的材质为聚酰胺；所述的有机膜进行过滤的操作压力为0～0.5Mpa；所述的超滤膜进行过滤的操作压力为0～0.8Mpa；所述的纳滤膜进行过滤的操作压力为0～3Mpa；上述三种膜进行过滤时的操作温度为20℃～35℃；
(e)喷雾干燥：经过纳滤膜过滤后的滤液进行喷雾干燥，得到紫锥菊提取物粉末。
9.如权利要求2～8任一项所述的制备方法，其特征在于：所述的紫锥菊药材选自紫锥菊属植物紫锥菊、狭叶紫锥菊或白紫锥菊。
10.一种紫锥菊提取物中酚类成分的含量检测方法，其特征在于其包含下列条件：以高效液相色谱方法进行检测；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈和体积浓度为0.1％的磷酸溶液为洗脱液进行梯度洗脱，具体条件见表1；检测波长为330nm，柱温为35℃，流速为1.5ml/min；
表1
以咖啡酰酒石酸、松果菊苷和菊苣酸为对照品；以上百分比均为体积百分比。
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| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Open date: 20100707 |