CN101473024A - 洗涤剂组合物 - Google Patents

Abstract

此发明涉及包含纤维素酶和改性纤维素衍生物的衣物洗涤剂组合物，所述细菌碱性酶表现出内－β－1，4－葡聚糖酶活性(E.C.3.2.1.4)。

Description

洗涤剂组合物

发明领域

此发明涉及包含纤维素衍生物的清洁组合物。本发明还涉及包含纤维素酶的洗涤剂组合物，所述纤维素酶诸如表现出内-β-1，4-葡聚糖酶活性(E.C.3.2.1.4)的细菌碱性酶。本发明还涉及制备和使用此类产品的方法。

发明背景

纤维素酶由于它们已知的除毛、软化和颜色护理有益效果而迄今为止已被用于洗涤剂组合物中多年。然而，大多数纤维素酶的使用一直受到限制，这是由于纤维素酶可能经由水解结晶纤维素而对织物纤维的拉伸强度具有不利的影响。近年来，已研发出对非晶形纤维素具有高度专一性的纤维素酶来利用纤维素酶的清洁潜能，同时避免不利的拉伸强度降低。尤其已研发出碱性内葡聚糖酶，以更适用于碱性洗涤剂情况中。

例如，Novozymes在WO02/099091中公开了一种由菌株芽孢杆菌(DSM 12648)内生的表现出内-β-葡聚糖酶活性(EC 3.2.1.4)的新型酶以用于洗涤剂和纺织物应用中。Novozymes还在WO04/053039中描述了洗涤剂组合物，所述洗涤剂组合物包含抗再沉淀的内葡聚糖酶及其与某些纤维素酶的组合，所述纤维素酶对阴离子表面活性剂和/或其它具体酶的稳定性得以提高。Kao的EP 265 832描述了通过从芽孢杆菌KSM-635培养产物中分离而获得的新型碱性纤维素酶K、CMCase I和CMCase II。Kao还在EP 1 350 843中描述了碱性纤维素酶，所述纤维素酶可有利地作用于碱性环境中，并且由于具有高度的分泌性能或具有增强的特定活性而易于大量生产。

已证实，阴离子改性的纤维素衍生物诸如羧甲基纤维素(CMC)是洗涤剂组合物中的抗再沉淀聚合物。纤维素与CMC的组合已被公开于例如GB-A-2095275中。本发明人已发现，特定碱性细菌纤维素与特定改性纤维素的组合可致使纯棉抗沾色性显著改善。不受理论的束缚，据信经过多个洗涤循环，改性纤维素衍生物沉积在棉织品上，并且被碱性细菌纤维素作用，以封闭所洗织物表面纤维中的孔。这可获得不太可能与颗粒污垢形成牢固结合的织物表面。因此，改善了所洗织物外观，并且也改善了清洁效果。

发明概述

本发明涉及包含改性纤维素衍生物和纤维素酶的组合物，所述组合物的特征在于纤维素酶是表现出内-β-1，4-葡聚糖酶活性(E.C.3.2.1.4)的细菌碱性酶，并且改性纤维素组分与活性纤维素酶蛋白质的重量比率为1:1至10000:1。本发明的组合物通常不包含0.7％重量至0.9％重量的壬酰氧基苯磺酸钠。本发明的组合物通常不包含10％重量的过硼酸钠一水合物。本发明的组合物通常包含按重量计小于8％和/或按重量计大于8.5％的硫酸钠(无水)。更具体地讲，本发明的组合物不包含8.0％重量至8.3％重量的硫酸钠。

本发明还包括包含改性纤维素衍生物或它们的混合物以及纤维素酶的组合物，所述组合物的特征在于改性纤维素衍生物与活性纤维素酶蛋白质的重量比率为1:1至10000:1，并且其中所述组合物不包含按所述总组合物的重量计0.7％至0.9％的壬酰氧基苯磺酸钠，并且不包含按所述总组合物的重量计10％的过硼酸钠一水合物。在下文定义的“酶测试”中，所述酶产生大于5mM的还原末端量。

酶测试

发明人已发现，聚合物水解时形成的短低聚糖产物可促进内-β-(1，4)-葡聚糖酶/改性纤维素衍生物组合的效力。本发明人已发现，通过使用如下所述的根据J.Karlsson等人“Biopolymers”2002年第63卷第32至40页修改的还原末端测定，最有效的组合涉及使用如本文所述的改性纤维素衍生物和内-β-(1，4)-葡聚糖酶，所述内-β-(1，4)-葡聚糖酶将CMC聚合物有效水解成小低聚糖。

在pH5.0的50mM醋酸钠中，用过量的酶2βM将10g/L CMC(重均分子量250kDa，DS 0.7，由Aldrich，Stenheim，Germany供应)以72小时的持久水解时间进行水解。接着将水解产物冷却至+4℃，随后根据M.Bailey等人在“Enzyme Microb.Technol.”1981年第3卷第153至157页中描述的方案，使用葡萄糖作出标准曲线，使用二硝基水杨酸试剂来实施还原末端测定。

在此测试中，本发明所需的内-β-(1，4)-葡聚糖酶产生大于5mM的还原末端量，这相应于～10％的还原末端。采用酶测试，优选的酶产生大于10％，优选大于12％，或甚至大于15％的还原末端量。

序列列表

序列标识号：1显示了衍生自芽孢杆菌AA349的内葡聚糖酶的氨基酸序列。

序列标识号：2显示了衍生自芽孢杆菌KSM-S237的内葡聚糖酶的氨基酸序列。

发明详述

定义

如本文所用，除非另外指明，术语“清洁组合物”包括颗粒型或粉末型多功能或“重垢型”洗涤剂，尤其是衣物洗涤剂；液体、凝胶或糊剂型多功能洗涤剂，尤其是所谓的重垢液体型；液体精细织物洗涤剂；以及清洁辅剂，诸如漂白添加剂和“去污棒”或预处理类型。

如本文所用，术语“改性纤维素衍生物”包括包含纤维素主链的聚合物，其中所述纤维素被至少一个取代基或改性基团取代。纤维素单体如下所示。

R1、R2和R3显示了纤维素单体中可供取代的位置。在天然纤维素聚合物中，这些基团包括氢原子。根据本发明，所需的改性纤维素衍生物在所述聚合物的一个或多个这些位置处包含取代基。通常，改性基团是非离子或阴离子基团，分别制得非离子或阴离子改性的纤维素。作为另外一种选择，可通过其它β-1，4-连接的多糖诸如葡聚木糖(如衍生自罗望子胶)、葡甘露聚糖(如魔芋葡甘露聚糖)、半乳甘露聚糖(如衍生自瓜耳胶或刺槐豆胶)、侧链支化的半乳甘露聚糖(如黄原胶)、脱乙酰壳多糖或脱乙酰壳多糖盐，来提供改性纤维素衍生物。也可存在淀粉、α-1，4-连接多糖的衍生物。无论是β-1，4还是α-1，4天然多糖，均可被胺(伯胺、仲胺、叔胺)、酰胺、酯、醚、尿烷、醇、羧酸、甲苯磺酸根、磺酸根、硫酸根、硝酸根、磷酸根以及它们的混合物改性。适宜衍生物的实例示于WO 06/117071(Unilever)中，诸如羧甲基刺槐豆胶和刺槐豆胶乙磺酸盐。

优选阴离子改性的纤维素衍生物，诸如羧甲基纤维素。

组合物

本发明的组合物通常可包含按纯酶的重量计0.00002％至0.15％，0.00005％至0.12％，或甚至0.0002％至0.02％，或甚至0.005％至0.025％的一种或多种内葡聚糖酶。上述清洁组合物任何方面的余量由纤维素衍生物和一种或多种助剂材料组成。

适宜的内葡聚糖酶

待掺入到本发明的洗涤剂组合物中的内葡聚糖酶是表现出内-β-1，4-葡聚糖酶活性(E.C.3.2.1.4)的一种或多种细菌碱性酶。

如本文所用，术语“碱性内葡聚糖酶”应指具有高于7的最适宜pH并且可在pH10下保持其最佳活性70％以上的内葡聚糖酶。

优选地，所述内葡聚糖酶是由杆状菌属成员内生的细菌多肽。

更优选地，表现出内-β-1，4-葡聚糖酶活性(E.C.3.2.1.4)的所述碱性酶是多肽，包含(i)至少一种第17家族碳水化合物结合结构模块(第17家族CBM)和/或(ii)至少一种第28家族碳水化合物结合结构模块(第28家族CBM)。对于CBM的定义和分类，请参见例如：Y.Bourne和B.Henrissat在“Current Opinion in Structural Biology”(2001年593至600页)中题目为：“Glycoside hydrolases andglycosyltransferases：families and functional modules”的他们的文章。此外，对于第17和第28家族CBM的特性，请参见A.B.Boraston等人在“Biochemical Journal”(2002年，第361卷第35至40页)中题目为：“Identification and glucan-binding properties of a newcarbohydrate-binding module family”的他们的文章。

在更优选的实施方案中，所述酶包括由以下一种杆状菌菌种内生的多肽(或其变异体)：

 

芽孢杆菌	如下列文献中所述：
		AA349(DSM 12648)	WO 2002/099091A(Novozymes)，第2页，第25行WO 2004/053039A(Novozymes)，第3页，第19行
KSM S237	EP 1350843A(Kao)，第3页，第18行
		1139	EP 1350843A(Kao)，第3页，第22行
KSM 64	EP 1350843A(Kao)，第3页，第24行
		KSM N131	EP 1350843A(Kao)，第3页，第25行
KSM 635，FERM BP 1485	EP 265832A(Kao)，第7页，第45行
		KSM 534，FERM BP 1508	EP 0271044 A(Kao)，第9页，第21行
KSM 539，FERM BP 1509	EP 0271044 A(Kao)，第9页，第22行
		KSM 577，FERM BP 1510	EP 0271044 A(Kao)，第9页，第22行
KSM 521，FERM BP 1507	EP 0271044 A(Kao)，第9页，第19行
		KSM 580，FERM BP 1511	EP 0271044 A(Kao)，第9页，第20行
KSM 588，FERM BP 1513	EP 0271044 A(Kao)，第9页，第23行
		KSM 597，FERM BP 1514	EP 0271044 A(Kao)，第9页，第24行
KSM 522，FERM BP 1512	EP 0271044 A(Kao)，第9页，第20行
		KSM 3445，FERM BP 1506	EP 0271044 A(Kao)，第10页，第3行
KSM 425，FERM BP 1505	EP 0271044 A(Kao)，第10页，第3行

适用于本发明组合物中的内葡聚糖酶是：

1)表现出内-β-1，4-葡聚糖酶活性(E.C.3.2.1.4)的酶。当采用3.0的GAP产生罚分和0.1的GAP拓展罚分由GCG程序中提供的GAP来确定同一性时，所述酶具有与序列标识号：1(相应于WO02/099091中的序列标识号：2)中1位至773位氨基酸序列至少90％、优选94％、更优选97％、并且甚至更优选99％、100％同一性的序列；或者其具有内-β-1，4-葡聚糖酶活性的片段。所述酶以及相应的生成方法泛述于由Novozymes A/S在2002年12月12日公布的专利申请WO02/099091中。请参见发明详述第4页至17页以及实施例第20页至26页。一种此类酶可以商品名Celluclean^TM从Novozymes A/S商购获得。

GCG涉及由Accelrys(San Diego，CA，USA)提供的序列分析软件包。这并入了称为GAP的程序，其采用Needleman和Wunsch运算法则来发现匹配数最大并且空位数最小的两个完整序列对。

2)还适宜的是由Kao公司于2003年10月8日公布的EP 1 350843A中所描述的碱性内葡聚糖酶。对于酶及其制备的详细描述，请参见发明详述[0011]至[0039]和实施例1至4，[0067]至[0077]。所述碱性内葡聚糖酶变异体通过在序列标识号：2中(a)位置10、(b)位置16、(c)位置22、(d)位置33、(e)位置39、(f)位置76、(g)位置109、(h)位置242、(i)位置263、(j)位置308、(k)位置462、(l)位置466、(m)位置468、(n)位置552、(o)位置564、和/或(p)序列标识号：2中位置608和/或与其对应的位置用另一氨基酸取代纤维素酶的氨基酸残基来获得，所述纤维素酶的氨基酸序列与由序列标识号：2代表的氨基酸序列具有至少90％、优选95％、更优选98％、100％的同一性。

“具有由序列标识号：2表示的氨基酸序列的碱性纤维素酶”的实例包括Egl-237[衍生自芽孢杆菌菌株KSM-S237(FERM BP-7875)，Hakamada等人，“Biosci.Biotechnol.Biochem.”，64，2281-2289，2000]。“具有表现出与由序列标识号：2表示的氨基酸序列至少90％同源性的氨基酸序列的碱性纤维素酶”的实例包括具有表现出与由序列标识号：2表示的氨基酸序列优选至少95％同源性、更优选至少98％同源性的氨基酸序列的碱性纤维素酶。具体实例包括衍生自芽孢杆菌菌株1139(Egl-1139)的碱性纤维素酶(Fukumori等人，“J.Gen.Microbiol.”，132，2329-2335)(91.4％同源性)、衍生自芽孢杆菌菌株KSM-64(Egl-64)的碱性纤维素酶(Sumitomo等人，“Biosci.Biotechnol.Biochem.”，56,872-877，1992)(同源性：91.9％)、和衍生自芽孢杆菌菌株KSM-N131(Egl-N131b)的纤维素酶(日本专利申请2000-47237)(同源性：95.0％)。

所述氨基酸优选地被以下物质取代：谷氨酰胺、丙氨酸、脯氨酸或甲硫氨酸(尤其是谷氨酰胺)优选位于位置(a)，天冬酰胺或精氨酸(尤其是天冬酰胺)优选位于位置(b)，脯氨酸优选位于位置(c)，组氨酸优选位于位置(d)，丙氨酸、苏氨酸或酪氨酸(尤其是丙氨酸)优选位于位置(e)，组氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸、苏氨酸或丙氨酸(尤其是组氨酸)优选位于位置(f)，异亮氨酸、亮氨酸、丝氨酸或缬氨酸(尤其是异亮氨酸)优选位于位置(g)，丙氨酸、苯基丙氨酸、缬氨酸、丝氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、酪氨酸、苏氨酸、甲硫氨酸或甘氨酸(尤其是丙氨酸、苯基丙氨酸或丝氨酸)优选位于位置(h)，异亮氨酸、亮氨酸、脯氨酸或缬氨酸(尤其是异亮氨酸)优选位于位置(i)，丙氨酸、丝氨酸、甘氨酸或缬氨酸(尤其是丙氨酸)优选位于位置(j)，苏氨酸、亮氨酸、苯基丙氨酸或精氨酸(尤其是苏氨酸)优选位于位置(k)，亮氨酸、丙氨酸或丝氨酸(尤其是亮氨酸)优选位于位置(l)，丙氨酸、天冬氨酸、甘氨酸或赖氨酸(尤其是丙氨酸)优选位于位置(m)，甲硫氨酸优选位于位置(n)，缬氨酸、苏氨酸或亮氨酸(尤其是缬氨酸)优选位于位置(o)，以及异亮氨酸或精氨酸(尤其是异亮氨酸)优选位于位置(p)。

通过使用已知的运算法则例如Lipman-Pearson方法中的运算法则并且对每种碱性纤维素酶氨基酸序列中的多个相似区域给出最大相似性得分来比对氨基酸序列可确定“与之相应位置处的氨基酸残基”。通过以此种方式排列纤维素酶的氨基酸序列(EP 1 350 843中的图1)可确定每种纤维素酶序列中同源氨基酸残基的位置，而不考虑氨基酸序列中存在的插入或缺失。可推测，同源位置存在于三维相同的位置处，并且它在目标纤维素酶的具体功效方面产生类似的效果。

对于具有表现出与序列标识号：2至少90％同源性的氨基酸序列的另一种碱性纤维素酶而言，相应于由序列标识号：2表示的碱性纤维素酶(Egl-237)中(a)位置10、(b)位置16、(c)位置22、(d)位置33、(e)位置39、(f)位置76、(g)位置109、(h)位置242、(i)位置263、(j)位置308、(k)位置462、(l)位置466、(m)位置468、(n)位置552、(o)位置564和(p)位置608的位置以及这些位置处氨基酸残基的具体实例将示于下文中：

 

	Egl-237	Egl-1139	Egl-64	Egl-N131b
					(a)	10Leu	10Leu	10Leu	10Leu
(b)	16Ile	16Ile	16Ile	无与之相对应
					(c)	22Ser	22Ser	22Ser	无与之相对应
(d)	33Asn	33Asn	33Asn	19Asn
					(e)	39Phe	39Phe	39Phe	25Phe
(f)	76Ile	76Ile	76Ile	62Ile
					(g)	109Met	109Met	109Met	95Met
(h)	242Gln	242Gln	242Gln	228Gln
					(i)	263Phe	263Phe	263Phe	249Phe
(j)	308Thr	308Thr	308Thr	294Thr
					(k)	462Asn	461Asn	461Asn	448Asn
(l)	466Lys	465Lys	465Lys	452Lys
					(m)	468Val	467Val	467Val	454Val
(n)	552Ile	550Ile	550Ile	538Ile
					(o)	564Ile	562Ile	562Ile	550Ile
(p)	608Ser	606Ser	606Ser	594Ser

3)还适宜的是由Kao于1988年5月4日公布的EP 265 832A中所描述的碱性纤维素酶K。对于酶及其制备的详细描述，请参见说明书第4页第35行至第12页第22行和第19页上的实施例1和2。所述碱性纤维素酶K具有以下物理和化学特性：

·(1)活性：具有作用于羧甲基纤维素的Cx酶活性以及弱C₁酶活性和弱β-葡萄糖氧化酶活性；

·(2)对基质的专一性：作用于羧甲基纤维素(CMC)、结晶纤维素、Avicell、纤维二糖和对硝基苯基纤维二糖(PNPC)；

·(3)具有在4至12范围内的工作pH和在9至10范围内的最佳pH；

·(4)当允许在40℃下分别静置10分钟和30分钟时，分别具有4.5至10.5和6.8至10的稳定pH值；

·(5)可在10至65℃的宽温度范围内工作，并且约40℃被认可为最佳温度；

·(6)螯合剂的影响：乙二胺四乙酸(EDTA)、乙二醇-二-(β--氨基乙基醚)N，N，N N′，N″-四乙酸(EGTA)、N，N-二(羧甲基)甘氨酸(氨三乙酸)(NTA)、三聚磷酸钠(STPP)和沸石不妨碍所述活性；

·(7)表面活性试剂的影响：活性几乎不受表面活性试剂的抑制，表面活性试剂诸如直链烷基苯磺酸钠(LAS)、烷基硫酸钠(AS)、聚氧乙烯烷基硫酸钠(ES)、α-烯烃磺酸钠(AOS)、α-磺酸钠脂族酸酯(α-SFE)、烷基磺酸钠(SAS)、聚氧乙烯仲烷基醚、脂肪酸盐(钠盐)和二甲基二烷基氯化铵；

·(8)对蛋白酶具有强抗性；和

·(9)分子量(由凝胶色谱法测定)：在180,000±0,000处具有最大峰。

优选地，通过从芽孢杆菌KSM-635的培养产品中分离可获得此类酶。

纤维素酶K可从Kao公司商购获得：例如称为

的纤维素酶制剂Eg-X是均衍生自芽孢杆菌KSM-635细菌的E-H和E-L混合物。纤维素酶E-H和E-L已被描述于S.Ito的“Extremophiles”(1997年，第1卷第61至66页)和S.Ito等人的“Agric Biol Chem”(1989年第53卷第1275至1278页)中。

4)由Kao于1988年6月15日公布的EP 271 004A中描述的碱性细菌内葡聚糖酶也适用于本发明目的。对于酶及其制备的详细描述，请参见说明书第9页第15行至第23页第17行以及第31页第1行至第33页第17行。它们是：

衍生自KSM 534(FERM BP 1508)的碱性纤维素酶K-534，

衍生自KSM 539(FERM BP 1509)的碱性纤维素酶K-539，

衍生自KSM 577(FERM BP 1510)的碱性纤维素酶K-577，

衍生自KSM 521(FERM BP 1507)的碱性纤维素酶K-521，

衍生自KSM 580(FERM BP 1511)的碱性纤维素酶K-580，

衍生自KSM 588(FERM BP 1513)的碱性纤维素酶K-588，

衍生自KSM 597(FERM BP 1514)的碱性纤维素酶K-597，

衍生自KSM 522(FERM BP 1512)的碱性纤维素酶K-522，

衍生自KSM 522(FERM BP 1512)的碱性纤维素酶E-II，

衍生自KSM 522(FERM BP 1512)的碱性纤维素酶E-III，

衍生自KSM 344(FERM BP 1506)的碱性纤维素酶K-344，和

衍生自KSM 425(FERM BP 1505)的碱性纤维素酶K-425。

5)最后，由Kao于2005年10月20日公布的JP2005287441A中描述的衍生自杆状菌菌种KSM-N的碱性内葡聚糖酶也适用于本发明的目的。对于酶及其制备的详细描述，请参见说明书第4页第39行至第10页第14行。此类碱性内葡聚糖酶的实例是：

衍生自芽孢杆菌KSM-N546的碱性纤维素酶Egl-546H

衍生自芽孢杆菌KSM-N115的碱性纤维素酶Egl-115

衍生自芽孢杆菌KSM-N145的碱性纤维素酶Egl-145

衍生自芽孢杆菌KSM-N659的碱性纤维素酶Egl-659

衍生自芽孢杆菌KSM-N440的碱性纤维素酶Egl-640

经由本领域技术人员已知的各种技术诸如定向进化获得的上述酶的变异体也包括在本发明中。

改性纤维素衍生物

本发明中所需的改性纤维素衍生物包括包含纤维素主链的聚合物。所述纤维素可以是阴离子或非离子改性的，优选阴离子改性的。纤维素单体如下所示。

R1、R2和R3显示了纤维素单体中可供取代的位置。在天然纤维素聚合物中，这些基团包括氢原子。可用于本文的改性纤维素衍生物在一个或多个这些位置处包含取代基。例如，对阴离子取代而言，所述聚合物中一个或多个这些位置可被阴离子基团取代，例如以下其酸或盐形式(优选钠盐(此处所示)或钾盐形式)的阴离子基团中的一个。

-L-CO₂Na

-L-SO₃Na

-PO₃Na

-SO₃Na

其中：

L为C_1-6烷基，更优选C_1-4烷基

阴离子改性纤维素衍生物还可包含非离子取代基，其中位置R1、R2和R3中的一个或多个可被非离子基团取代，例如，

-A

-L-OH

-L-CN

-C(＝O)A

-C(＝O)NH₂

-C(＝O)NHA

-C(＝O)N(A)B

-C(＝O)OA

-(CH₂CH₂CH₂O)_nZ

-(CH₂CH₂O)_nZ

-(CH₂CH(CH₃)O)_nZ

-(CH₂O)_nZ

其中：

A和B为C_1-30烷基

L为C_1-6烷基

n＝1至100

Z为H或C_1-6烷基

适宜的改性纤维素衍生物的非限制性实例是以下物质的钠盐或钾盐：羧甲基纤维素、羧乙基纤维素、磺乙基纤维素、磺丙基纤维素、纤维素硫酸盐、磷酸化纤维素、羧甲基羟乙基纤维素、羧甲基羟丙基纤维素、磺乙基羟乙基纤维素、磺乙基羟丙基纤维素、羧甲基甲基羟乙基纤维素、羧甲基甲基纤维素、磺乙基甲基羟乙基纤维素、磺乙基甲基纤维素、羧甲基乙基羟乙基纤维素、羧甲基乙基纤维素、磺乙基乙基羟乙基纤维素、磺乙基乙基纤维素、羧甲基甲基羟丙基纤维素、磺乙基甲基羟丙基纤维素、羧甲基十二烷基纤维素、羧甲基十二烷酰基纤维素、羧甲基氰乙基纤维素和磺乙基氰乙基纤维素。

非离子改性的纤维素

代替或除了阴离子改性纤维素聚合物以外，还可由非离子改性纤维素衍生物来提供改性纤维素衍生物。非离子改性的纤维素聚合物的实例包括甲基纤维素、乙基纤维素、丙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、甲基羟乙基纤维素、乙基羟乙基纤维素、十二烷基羟乙基纤维素、乙基羟丙基纤维素、乙酸纤维素、甲基羟丙基纤维素、甲基乙基羟乙基纤维素、丁基缩水甘油基醚-羟乙基纤维素和月桂基缩水甘油基醚-羟乙基纤维素。

具体实例包括Finnfix BDA(得自Noviant)、Tylose CR1500 G2(得自Clariant)、Carbose编号D65、D72、LT-30和LT-20(得自PennCarbose)；疏水改性纤维素衍生物，例如WO99/61479(Noviant)中所述那些；聚乙二醇改性的纤维素衍生物，例如DE102004063766中所述那些。

尤其优选的改性纤维素衍生物具有至少20 000或至少50 000或甚至至少100,000或甚至至少150 000kDa的重均分子量。改性纤维素衍生物的重均分子量一般不大于500,000，或不大于300,000，或不大于250 000kDa。优选的取代度(DS)为0.3至、或0.4至、或0.45至最多例如0.7或甚至0.8或甚至0.9。尤其优选具有如本文所述此分子量和/或取代度和/或含量的改性甲基纤维素，诸如CMC。

基于洗涤剂组合物的总重量，改性纤维素衍生物在本发明的洗涤剂组合物中的含量通常为至少0.005％重量或0.01％重量或0.02％重量或至少0.05％重量或甚至至少0.1％重量。通常，所述含量按所述洗涤剂组合物的重量计不大于5％，或甚至按所述洗涤剂组合物的重量计不大于2％，或甚至按所述洗涤剂组合物的重量计不大于1.5％。在本发明尤其优选的实施方案中，改性纤维素衍生物与活性纤维素酶蛋白质的重量比率为1:1至10000:1，优选20:1至1000:1，最优选30:1至800:1。

多年来，已将纤维素衍生物诸如甲基纤维素掺入到洗涤剂组合物中。它们沉积在棉织物表面以形成带负电的防污层，其通过减少污垢沉积在织物表面上来防污。本发明人已发现，具有比传统所用纤维素衍生物更低分子量的纤维素衍生物由于它们通过使污垢悬浮在洗涤液体中而可用作抗再沉淀助剂，因此可提供更加令人惊奇的有益效果。通过具体纤维素试剂前体的反应，可就地生成这些纤维素衍生物。

所述改性纤维素衍生物可作为干燥颗粒组分加入，所述颗粒组分包含例如按重量计大于50％，或甚至大于60％或70％或80％至最多100％的改性纤维素衍生物。所述改性纤维素衍生物可作为由常规洗涤剂颗粒制备方法诸如喷雾干燥、附聚或挤出制得的处理颗粒的一部分，而被掺入到本发明洗涤剂组合物中。在此情况下，此类颗粒中的改性纤维素衍生物的含量按所述处理颗粒的重量计为至少0.1％或0.5％或1％，并且可能小于70％，并且更可能小于60％或50％、40％、30％或甚至小于20％或10％。对于包含低含量磷酸盐和/或沸石助洗剂，例如包含按总洗涤剂组合物的重量计小于15％，或甚至小于14％或12％或10％或8％下至0％磷酸盐和/或沸石助洗剂的洗涤剂组合物而言，作为处理颗粒的一部分来掺入改性纤维素衍生物是尤其优选的。由于在将洗涤剂组合物加入到水中时，其可通过有助于纤维素衍生物的溶解度促进纤维素在整个洗涤液体中的均匀分布，因此是优选的。在改性纤维素衍生物存在于处理洗涤剂颗粒中的情况下，所述处理洗涤剂颗粒可包含任何其它常规洗涤剂成分或其组分，诸如下文所述或例如JP 2002 265999(Kao)中所述或下文副标题“制备组合物方法”中所述任何方法中所述的任何助剂材料。具体地讲，以所述处理颗粒的重量为基准，此类颗粒可包含按重量计至少1％或至少5％或10％至最多15％或20％或30％的聚合聚羧酸酯聚合物，诸如基于丙烯酸和/或马来酸的均聚物或共聚物(例如得自BASF的Sokalan聚合物)。所述处理颗粒可包含阴离子、非离子、阳离子、两性离子的和/或两性表面活性剂，或它们的混合物。以所述处理颗粒的总重量为基准，所述量按重量计可为1％至70％，或2％至60％，或5％至850％。例如，处理颗粒可包含任选与阴离子和/或阳离子表面活性剂组合的非离子表面活性剂。适宜的表面活性剂描述于本说明书“表面活性剂”部分中。具体地讲，适宜的非离子表面活性剂包括烷基烷氧基化表面活性剂，例如具有3至20或甚至更高(诸如20至50)烷氧基化度的乙氧基化表面活性剂。

处理颗粒可包含含量按重量计为1％至30％，或2％至25％，或5％至20％的硅酸钠(尤其是1比2比率)。

根据本发明，优选的组合物包含聚合聚羧酸酯聚合物，并且其含量使得聚合聚羧酸酯与改性纤维素衍生物的重量比率为至少2:1，更优选至少2.5:1，并且最优选至少3:1或甚至4:1或5:1。在其中存在聚合聚羧酸酯上述处理颗粒中，此比率也是优选的。

本发明组合物和/或更具体地讲，包含改性纤维素衍生物的颗粒的堆积体积密度通常为至少450g/L或至少550g/L或650g/L或至少700g/L，最多1500g/L。可通过简单的漏斗-杯装置来测定堆积体积密度，所述装置包括圆锥形漏斗，所述漏斗牢固安装在基座上，并且在其最下端具有瓣阀以使漏斗内容物能够完全转移至安置在漏斗下方的轴向对齐的圆柱形杯中。所述漏斗高130mm，并且其最上端和最下端的内径分别为130mm和40mm。其被安装，以使得最下端比基座上表面高140mm。所述杯总高度为90mm，内高为87mm，并且内径为84mm。其额定容积为500ml。为进行测量，通过用手倒，将漏斗填满粉末，将瓣阀打开，并使使粉末把所述杯装得过满。从机架中移出填满的杯，并且通过用有直边的工具例如刀横越其上边缘，从杯中除去过多的粉末。然后称量填满的杯，并且将所获得的粉末重量值乘2，以获得g/L为单位的堆积体积密度。进行重复测量，并且取三次结果的平均值为堆积体积密度。

本发明人进一步提供了可提供污垢悬浮特性的洗涤剂组合物。

根据本发明的另一个实施方案，从而提供了一种包含低聚糖的洗涤剂组合物，所述低聚糖具有小于20,000kDa的重均分子量，此类低聚糖可通过如上所定义的酶与具有30,000kDa至500,000kDa平均分子量的阴离子改性纤维素的反应获得。在所述发明的另一个实施方案中，提供了一种包含洗涤剂组合物的含水洗涤液体，其中所述低聚糖的含量为0.5ppm至1000ppm，或0.8至1500ppm，或1.0至1000ppm。

根据本发明的另一个实施方案，提供了以低聚糖来制备洗涤剂组合物以用于悬浮污垢的应用，所述低聚糖具有小于20,000kDa的重均分子量，此类低聚糖可通过如上所述的酶与具有30,000kDa至500,000kDa重均分子量的阴离子或非离子(优选阴离子)改性纤维素衍生物的反应获得。

根据本发明的另一个方面，还提供了一种洗涤剂组合物，所述组合物包含如上所述的酶和至少2％重量，或甚至至少5％重量、10％重量、15％重量、20％重量或更高至例如最多50％重量或40％重量或30％重量或25％重量的磷酸盐助洗剂盐，至少25％重量、或30％重量或40％重量或45％重量或50％重量或甚至55％重量至最多100％重量或90％重量或80％重量的所述磷酸盐助洗剂包含焦磷酸盐助洗剂。

通过在喷雾干燥方法中，将包含三聚磷酸盐的钠盐或其它盐或其酸形式的组合物喷雾干燥，其中控制温度和/或气流和/或喷雾干燥浆液中的其它化学组分，以提供所期望的三聚磷酸盐至焦磷酸盐的反应，来就地生成此焦磷酸盐助洗剂。所述方法可按照例如WO03/091378或US4310431中所述来操作。

助剂物质

虽然对于本发明而言不是必需的，但下文所举例说明的助剂材料的非限制性列表适用于本发明的组合物，并且可期望将其掺入到本发明的某些实施方案中，以例如有助于或提高处理待清洁基底的清洁性能，或在含香料、着色剂、染料等的情况下调节清洁组合物的美观性。这些附加组分的明确性质及其掺入量将取决于组合物的物理形式以及其应用的清洁操作的性质。适宜的助剂材料包括但不限于表面活性剂、助洗剂、螯合剂、染料转移抑制剂、分散剂、附加的酶、和酶稳定剂、催化物质、漂白活化剂、过氧化氢、过氧化氢源、预成形的过酸、聚合物的分散剂、粘土污垢去除/抗再沉淀剂、增白剂、抑泡剂、染料、香料、结构弹性化剂、织物软化剂、载体、水溶助长剂、加工助剂、溶剂和/或颜料。除了以下公开内容外，这些其它助剂的合适实例和用量还存在于美国专利5,576,282、6,306,812 B1和6,326,348 B1中，所述文献以引用方式并入。当存在一种或多种助剂时，这些一种或多种助剂可如下详述存在：

漂白剂-本发明的清洁组合物可包含一种或多种漂白剂。不同于漂白催化剂的合适漂白剂包括其它光漂白剂、漂白活化剂、过氧化氢、过氧化氢源、预成形过酸以及它们的混合物。通常，当使用漂白剂时，本发明的组合物可包括按本主题清洁组合物的重量计约0.1％至约50％或者甚至约0.1％至约25％的漂白剂。合适漂白剂的示例包括：

(1)其它光漂白剂，例如维生素K3；

(2)预成形过酸：合适的预成形过酸包括但不限于选自由下列组成的组的化合物：过羧酸及其盐、过碳酸及其盐、过亚胺酸及其盐、过一硫酸及其盐(例如

)、以及它们的混合物。合适的过羧酸包括具有式R-(C＝O)O-O-M的疏水和亲水过酸，其中R为烷基，任选支链烷基，当过酸疏水时，其具有6至14个碳原子或者8至12个碳原子；当过酸亲水时，其具有小于6个碳原子或者甚至小于4个碳原子；并且M为抗衡离子，例如钠、钾或氢；

(3)过氧化氢源，例如无机过氢化合物盐，包括以下碱金属盐：如过硼酸钠盐(通常为一水合物或四水合物)、过碳酸钠盐、过硫酸钠盐、过磷酸钠盐、过硅酸钠盐以及它们的混合物。在本发明的一个方面，无机过氢化合物盐选自由下列组成的组：过硼酸钠盐、过碳酸钠盐以及它们的混合物。如果被采用，无机过氢化合物盐典型地以总组合物的0.05％至40％重量或者1％至30％重量的含量存在，并典型地作为可被涂敷的结晶固体掺入到这种组合物中。合适的涂层包括：无机盐如碱金属硅酸盐、碳酸盐或硼酸盐或它们的混合物，或有机物如水溶性或可分散聚合物、蜡、油或脂肪皂；和

(4)具有R-(C＝O)-L的漂白活化剂，其中R为烷基，任选支链烷基，当漂白活化剂是疏水的时，其具有6至14个碳原子或者8至12个碳原子，而当漂白活化剂是亲水的时，其具有小于6个碳原子或者甚至小于4个碳原子；并且L为离去基团。合适的离去基团的实例为苯甲酸及其衍生物-尤其是苯磺酸盐。合适的漂白活化剂包括十二烷酰氧基苯磺酸盐、癸酰氧基苯磺酸盐、癸酰氧基苯甲酸及其盐、3，5，5-三甲基己酰氧基苯磺酸盐、四乙酰基乙二胺(TAED)和壬酰氧基苯磺酸盐(NOBS)。合适的漂白活化剂还公开于WO 98/17767中。尽管可采用任何适宜的漂白活化剂，在本发明的一个方面，本主题的清洁组合物可包含NOBS、TAED或它们的混合物。

如果存在的话，过酸和/或漂白活化剂通常以基于所述组合物约0.1％至约60％重量，约0.5％至约40％重量或者甚至约0.6％至约10％重量的含量存在于所述组合物中。一种或多种疏水性过酸或其前体可与一种或多种亲水性过酸或其前体联合使用。

可选择过氧化氢源与过酸或漂白活化剂的量，使得可用氧(来自过氧化物源)与过酸的摩尔比为1:1至35:1，或者甚至为2:1至10:1。

表面活性剂-如本发明所述的清洁组合物可包含表面活性剂或表面活性剂体系，其中所述表面活性剂可选自非离子表面活性剂、阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、两性表面活性剂、两性离子表面活性剂、半极性非离子表面活性剂、以及它们的混合物。如果存在的话，表面活性剂典型地以按本主题组合物的重量计约0.1％至约60％，约1％至约50％或者甚至约5％至约40％的含量存在。

助洗剂-本发明的清洁组合物可包含一种或多种洗涤剂助剂或助洗剂体系。当使用助洗剂时，本主题组合物将通常包含按本主题组合物的重量计至少约1％，约5％至约60％或者甚至约10％至约40％的助洗剂。

助洗剂包括但不限于：碱金属、铵和链烷醇铵的聚磷酸盐，碱金属硅酸盐，碱土金属和碱金属碳酸盐，硅铝酸盐助洗剂和聚羧酸盐化合物，醚羟基聚羧酸盐，马来酸酐与乙烯或乙烯基甲基醚的共聚物，1，3，5-三羟基苯-2，4，6-三磺酸，和羧基甲氧基苹果酸，多元乙酸如乙二胺四乙酸和氨三乙酸的各种碱金属盐、铵盐和取代铵盐，以及多元羧酸盐如苯六甲酸、琥珀酸、柠檬酸、氧联二琥珀酸、多元马来酸、1，3，5-三苯甲酸、羧甲基苹果酸以及它们的可溶性盐。

螯合剂-本文的清洁组合物可包含螯合剂。合适的螯合剂包括铜、铁和/或锰螯合剂以及它们的混合物。当使用螯合剂时，本主题组合物可包含按本主题组合物的重量计约0.005％至约15％或者甚至约3.0％至约10％的螯合剂。

染料转移抑制剂-本发明的清洁组合物还可包含一种或多种染料转移抑制剂。合适的聚合染料转移抑制剂包括但不限于：聚乙烯吡咯烷酮聚合物、聚胺N-氧化物聚合物、N-乙烯基吡咯烷酮和N-乙烯基咪唑的共聚物、聚乙烯基噁唑烷酮和聚乙烯基咪唑、或它们的混合物。当存在于本主题组合物中时，染料转移抑制剂可以按所述组合物的重量计约0.0001％至约10％，约0.01％至约5％或者甚至约0.1％至约3％的含量存在。

荧光增白剂-本发明的清洁组合物还优选包含可给待清洁制品着色的附加组分，诸如荧光增白剂。适用于衣物洗涤剂组合物中的任何荧光增白剂可用于本发明的组合物中。最常用的荧光增白剂是属于以下类别中的那些：二氨基芪磺酸衍生物、二芳基吡唑啉衍生物和联苯基二苯乙烯基衍生物。二氨基芪磺酸衍生物型荧光增白剂的实例包括以下物质的钠盐：

4，4′-二-(2-二羟乙基氨基-4-苯氨基-s-三嗪-6-基氨基)二苯乙烯-2，2′-二磺酸盐，

4，4′-二-(2，4-二苯胺基-s-三嗪-6-基氨基)二苯乙烯-2.2′-二磺酸盐，

4，4′-二-(2-苯氨基-4(N-甲基-N-2-羟乙基氨基)-s-三嗪-6-基氨基)二苯乙烯-2，2′-二磺酸盐，

4，4′-二-(4-苯基-2，1，3-三唑-2-基)二苯乙烯-2，2′-二磺酸盐，

4，4′-二-(2-苯氨基-4(1-甲基-2-羟乙基氨基)-s-三嗪-6-基氨基)二苯乙烯-2，2′-二磺酸盐，和

2-(二苯乙烯基-4＂-萘并-1.，2′：4，5)-1，2，3-三唑-2＂-磺酸盐。

优选的荧光增白剂是得自Ciba-Geigy AG(Basel，Switzerland)的 DMS和

 CBS。 DMS是4，4′-二-(2-吗啉基-4-苯氨基-s-三嗪-6-基氨基)二苯乙烯二磺酸二钠盐。

CBS是2，2′-二-(苯基苯乙烯基)二磺酸二钠盐。

还优选具有以下结构的荧光增白剂：

其中R₁和R₂与连接它们的氮原子合起来形成未取代的或C₁-C₄烷基取代的吗啉、哌啶或吡咯烷环，优选吗啉环(可以商品名Parawhite KX商购获得，由Paramount Minerals and Chemicals(Mumbai，India)提供)。

其它适用于本发明的荧光剂包括1-3-二芳基吡唑啉和7-烷基氨基香豆素。

合适的荧光增白剂含量包括从约0.01％重量、0.05％重量、约0.1％重量、或甚至约0.2％重量的较低含量至0.5％重量或甚至0.75％重量的较高含量。

织物着色剂-当被配制到洗涤剂组合物中时，染料或颜料可在所述织物与包含所述洗涤组合物的洗涤液体接触时沉积在织物上，从而通过吸收可见光改变所述织物的色彩。荧光增白剂发出至少部分可见光。与之相反，织物着色剂能改变表面颜色是因为它们吸收至少一部分可见光谱。适宜的织物着色剂包括染料和染料-粘土结合物，并且还可包括颜料。适用的染料包括小分子染料和聚合物染料。适宜的小分子染料包括选自由下列组成的组的小分子染料：属于以下颜色索引(C.I.)分类的染料：直接蓝、直接红、直接紫、酸性蓝、酸性红、酸性紫、碱性蓝、碱性紫和碱性红，或它们的混合物，例如如WO2005/03274、WO 2005/03275、WO 2005/03276和2006年7月7日提交的共同未决的欧洲专利申请6116780.5中所述的那些。

分散剂-本发明的组合物还可包含分散剂。合适的水溶性有机物包括均聚或共聚酸或它们的盐，其中多元羧酸包含至少两个相隔不超过两个碳原子的羧基。

酶-除了细菌碱性内葡聚糖酶以外，所述清洁组合物还可包含一种或多种可提供清洁性能和/或织物护理有益效果的其它酶。适宜酶的实例包括但不限于，半纤维素酶，过氧化物酶、蛋白酶、其它纤维素酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、甘露聚糖酶、果胶裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂氧合酶、木素酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、麦拉宁酶、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶和淀粉酶，或它们的混合物。在优选的实施方案中，本发明的组合物还包含脂肪酶，以进一步改善清洁和增白性能。典型的组合是可包含例如与淀粉酶结合的蛋白酶和脂肪酶的酶组合。当存在于清洁组合物中时，上述附加酶可以按所述组合物重量计约0.00001％至约2％，约0.0001％至约1％或者甚至约0.001％至约0.5％酶蛋白的含量存在。

酶稳定剂-可通过各种技术来稳定用于洗涤剂的酶。本发明使用的酶可由最终组合物中存在的钙和/或镁离子水溶性源来稳定，最终产物将这种离子提供给酶。在包含蛋白酶的含水组合物情况下，可加入可逆蛋白酶抑制剂例如硼化合物以进一步改善稳定性。

催化金属配合物-申请人的清洁组合物可包含催化金属配合物。一类含金属的漂白催化剂是这样的催化剂体系，该体系包含具有确定漂白催化活性的过渡金属阳离子，如铜阳离子、铁阳离子、钛阳离子、钌阳离子、钨阳离子、钼阳离子或锰阳离子；包含具有很低的或者没有漂白催化活性的辅助金属阳离子，如锌阳离子或铝阳离子；以及包含对于催化的和辅助的金属阳离子有确定稳定性常数的螯合剂，尤其是乙二胺四乙酸、乙二胺四(亚甲基膦酸)以及它们的水溶性盐。上述催化剂公开于U.S.4,430,243中。

如果需要，本发明组合物可借助锰化合物进行催化。这些化合物和用量是本领域熟知的，并且包括例如公开于U.S.5,576,282中的锰基催化剂。

可用于本发明的钴漂白催化剂是已知的，并且描述于例如U.S.5,597,936、U.S.5,595,967中。上述钴催化剂易于通过已知的方法制备，例如U.S.5,597,936和U.S.5,595,967中所提出的方法。

本文的组合物还可适宜地包含配体的过渡金属配合物，所述配体例如双环哌啶(WO 05/042532 A1)和/或大多环刚性配体(简写为“MRL”)。作为实施项，而不受限制，可调节本文的组合物和方法，使得在含水洗涤介质中提供大约至少一亿分之一的活性MRL物质，并且在洗涤液体中将典型地提供为约0.005ppm至约25ppm，约0.05ppm至约10ppm，或甚至约0.1ppm至约5ppm的MRL。

本发明过渡金属漂白催化剂中合适的过渡金属包括例如锰、铁和铬。合适的MRL包括5，12-二乙基-1，5，8，12-四氮杂双环[6.6.2]十六烷。

通过已知步骤易于制备合适的过渡金属MRL，例如在WO00/32601和U.S.6,225,464中所提出的。

溶剂-合适的溶剂包括水和其它溶剂如亲脂性流体。合适的亲脂性流体的实例包括硅氧烷、其它硅酮、烃、二元醇醚、甘油衍生物如甘油醚、全氟胺、全氟化和氢氟醚溶剂、低挥发性无氟有机溶剂、二醇溶剂、其它对环境友好的溶剂以及它们的混合物。

软化体系-本发明的组合物可包含软化剂诸如粘土并且还任选具有絮凝剂和酶；任选用于通过洗涤来软化。

制备组合物的方法

本发明的组合物可被配制成任何合适的形式并采用配方师选择的任何方法制备，其非限制性实例描述于申请人的实施例和美国专利4,990,280，美国专利20030087791A1；美国专利20030087790A1；美国专利20050003983A1；美国专利20040048764A1；美国专利4,762,636；美国专利6,291,412；美国专利20050227891A1；EP1070115A2；美国专利5,879,584；美国专利5,691,297；美国专利5,574,005；美国专利5,569,645；美国专利5,565,422；美国专利5,516,448；美国专利5,489,392；美国专利5,486,303中，这些专利均以引用方式并入本文。

使用方法

本发明包括用于洗涤织物的方法。所述方法包括以下步骤：将待洗涤的织物与所述清洁洗涤溶液接触，所述洗涤溶液包含申请人的清洁组合物、清洁助剂或它们的混合物的至少一个实施方案。织物可包括任何能够在正常消费者使用条件下洗涤的大部分任何织物。所述溶液优选具有约8至约10.5的pH。所述组合物可以溶液中约500ppm至约15,000ppm的浓度使用。水温典型地为约5℃至约90℃。水与织物的比率通常为约1:1至约30:1。

实施例

除非另外指明，原料可获自Aldrich，P.O.Box 2060，Milwaukee，WI 53201，USA。

(a)实施例1至6

颗粒状衣物洗涤组合物设计用于手洗或顶部加载的洗涤机器。

实施例7至12

颗粒状衣物洗涤组合物设计用于前加载式自动洗涤机器。

在20℃至90℃下，以7000至10000ppm的水溶液浓度，以及5:1的水与织物的比率，使用任何上述组合物来洗涤织物。典型的pH是约10。

上文制剂中CMC与活性酶蛋白质的比率示于下表中：

 

实施例	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12
													CMC％	1	0.3	0.3	0.1	1.1	0.9	0.15	1.4	0.2	1.4	1	0.5
Celluclean5T      ％(15.6mg/g)	0.1	0.2	0.1	0.2	0.3	0.1	0.2	0.15	0.2	0.3	0.15	0.15
													活性纤维素酶％	0.00156	0.00312	0.00156	0.00312	0.00468	0.00156	0.00312	0.00234	0.00312	0.00468	0.00234	0.00234
CMC与纤维素酶比率	641	96	192	32	235	577	48	598	64	299	427	214

用于组合物实施例1至12中的原料和说明

线性烷基苯磺酸盐，它的平均脂肪碳链长度为C₁₁-C₁₂，由Stepan，Northfield，Illinois，USA供应

C_12-14二甲基羟乙基氯化铵，由Clariant GmbH，Sulzbach，Germany供应

AE3S是C_12-15的烷基乙氧(3)硫酸酯，由Stepan，Northfield，Illinois，USA供应

AE7是C_12-15的醇乙氧基化物，其平均乙氧基化度为7，由Huntsman，Salt Lake City，Utah，USA供应

三聚磷酸钠，由Rhodia，Paris，France供应

沸石A，由Industrial Zeolite(UK)Ltd，Grays，Essex，UK供应

1.6R硅酸盐，由Koma，Nestemica，Czech Republic供应

碳酸钠，由Solvay，Houston，Texas，USA供应

分子量为4500的聚丙烯酸酯，由BASF，Ludwigshafen，Germany供应

羧甲基纤维素为由CPKelco的Noviant分部(Arnhem，Netherlands)供应的 BDA

由Novozymes(Bagsvaerd，Denmark)供应

专利申请US 6312936B1中所述的蛋白酶(实施例7至12)，由Genencor International(Palo Alto，California，USA)供应

荧光增白剂1为

 AMS，荧光增白剂2为 CBS-X。磺酸化酞菁锌由Ciba Specialty Chemicals(Basel，Switzerland)供应

二亚乙基三胺五乙酸，由Dow Chemical，Midland，Michigan，USA供应

过碳酸钠，由Solvay，Houston，Texas，USA供应

过硼酸钠，由Degussa，Hanau，Germany供应

NOBS是壬酰氧基苯磺酸钠，由Eastman，Batesville，Arkansas，USA供应

TAED是四乙酰基乙二胺，商品名

由Clariant GmbH，Sulzbach，Germany供应

去污剂是

 PF，由Rhodia，Paris，France供应

丙烯酸/马来酸共聚物的分子量为70,000，丙烯酸根与马来酸根的比率为70:30，由BASF，Ludwigshafen，Germany供应

1，2-乙二胺-N，N′-二琥珀酸的钠盐，(S，S)异构体(EDDS)由Octel，Ellesmere Port，UK供应

羟基乙叉二膦酸盐(HEDP)，由Dow Chemical，Midland，Michigan，USA供应

抑泡剂附聚物，由Dow Corning，Midland，Michigan，USA供应

序列表

<110>The Procter & Gamble Company

<120>洗涤剂组合物

<130>CM3098FM

<150>EP06115574.3

<151>2006-06-16

<160>2

<170>PatentIn version 3.3

<210>1

<211>773

<212>PRT

<213>芽孢杆菌属物种(Bacillus sp.)

<400>1

<210>2

<211>824

<212>PRT

<213>芽孢杆菌属物种(Bacillus sp.)KSM-S237

<400>2

Claims (20)

1.一种包含改性纤维素衍生物或其混合物和纤维素酶的组合物，其特征在于所述改性纤维素衍生物与所述活性纤维素酶蛋白质的重量比率为1:1至10000:1，并且其中所述组合物不包含按所述总组合物的重量计0.7％至0.9％的壬酰氧基苯磺酸钠，并且不包含按所述总组合物的重量计10％的过硼酸钠一水合物，其中所述酶为表现出内-β-1，4-葡聚糖酶活性(E.C.3.2.1.4)的细菌碱性酶。

2.一种包含改性纤维素衍生物或其混合物和纤维素酶的组合物，其特征在于所述改性纤维素衍生物与所述活性纤维素酶蛋白质的重量比率为1:1至10000:1，并且其中所述组合物不包含按所述总组合物的重量计0.7％至0.9％的壬酰氧基苯磺酸钠，并且不包含按所述总组合物的重量计10％的过硼酸钠一水合物，在本文定义的“酶测试”中，所述酶产生大于5mM的还原末端量。

3.如权利要求1或权利要求2所述的组合物，其中所述酶是由杆状菌属成员内生的细菌多肽。

4.如权利要求1至3中任一项所述的组合物，其中所述酶是多肽，所述多肽包含(i)至少一种第17家族碳水化合物结合结构模块和/或(ii)至少一种第28家族碳水化合物结合结构模块。

5.如权利要求1至4中任一项所述的组合物，其中所述酶包括由以下杆状菌菌种之一内生的多肽，所述杆状菌菌种选自由下列组成的组：AA349(DSM 12648)、KSM S237、1139、KSM 64、KSM N131、KSM635(FERM BP 1485)、KSM 534(FERM BP 1508)、KSM 53(FERM BP1509)、KSM 577(FERM BP 1510)、KSM 521(FERM BP 1507)、KSM580(FERM BP 1511)、KSM 588(FERM BP 1513)、KSM 597(FERMBP 1514)、KSM 522(FERM BP 1512)、KSM 3445(FERM BP 1506)、KSM 425(FERM BP 1505)、以及它们的混合物。

6.如权利要求1至5中任一项所述的组合物，其中所述酶选自由下列组成的组：

(i)内葡聚糖酶，所述内葡聚糖酶具有序列标识号：1中位置1至位置773的氨基酸序列；

(ii)内葡聚糖酶，所述内葡聚糖酶在采用3.0的GAP产生罚分和0.1的GAP拓展罚分由所述GCG程序中提供的GAP来确定同一性时具有与序列标识号：1中位置1至位置773的氨基酸序列至少90％，优选94％，更优选97％，并且甚至更优选99％、100％同一性的序列；或者其片段具有内-β-1，4-葡聚糖酶活性；

(iii)它们的混合物。

7.如权利要求1至6中任一项所述的组合物，其中所述酶为碱性内葡聚糖酶变异体，所述碱性内葡聚糖酶变异体通过在序列标识号：2中(a)位置10、(b)位置16、(c)位置22、(d)位置33、(e)位置39、(f)位置76、(g)位置109、(h)位置242、(i)位置263、(j)位置308、(k)位置462、(l)位置466、(m)位置468、(n)位置552、(o)位置564、和/或(p)序列标识号：2中位置608和/或与其对应的位置用另一氨基酸取代纤维素酶的氨基酸残基来获得，所述纤维素酶的氨基酸序列与由序列标识号：2代表的氨基酸序列具有至少90％、优选95％、更优选98％、100％的同一性。

8.如权利要求6所述的组合物，其中所述酶的特征在于下列取代基中的至少一种：

(a)在位置10：谷氨酰胺、丙氨酸、脯氨酸或甲硫氨酸，优选谷氨酰胺；

(b)在位置16：天冬酰胺或精氨酸，优选天冬酰胺；

(c)在位置22：脯氨酸；

(d)在位置33：组氨酸；

(e)在位置39：丙氨酸、苏氨酸或酪氨酸，优选丙氨酸；

(f)在位置76：组氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸、苏氨酸或丙氨酸，优选组氨酸；

(g)在位置109：异亮氨酸、亮氨酸、丝氨酸或缬氨酸，优选异亮氨酸；

(h)在位置242：丙氨酸、苯基丙氨酸、缬氨酸、丝氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、酪氨酸、苏氨酸、甲硫氨酸或甘氨酸，优选丙氨酸、苯基丙氨酸或丝氨酸；

(i)在位置263：异亮氨酸、亮氨酸、脯氨酸或缬氨酸，优选异亮氨酸；

(j)在位置308：丙氨酸、丝氨酸、甘氨酸或缬氨酸，优选丙氨酸；

(k)在位置462：苏氨酸、亮氨酸、苯基丙氨酸或精氨酸，优选苏氨酸；

(l)在位置466：亮氨酸、丙氨酸或丝氨酸，优选亮氨酸；

(m)在位置468：丙氨酸、天冬氨酸、甘氨酸或赖氨酸，优选丙氨酸；

(n)在位置552：甲硫氨酸；

(o)在位置564：缬氨酸、苏氨酸或亮氨酸，优选缬氨酸；和/或

(p)在位置608：异亮氨酸或精氨酸，优选异亮氨酸。

9.如权利要求7或权利要求8所述的组合物，其中所述酶选自由下列内葡聚糖酶变异体组成的组：Egl-237、Egl-1139、Egl-64、Egl-N131b以及它们的混合物。

10.如权利要求1至4中任一项所述的组合物，其中所述酶为碱性纤维素酶K，所述碱性纤维素酶K具有以下物理和化学特性：

(1)活性：具有作用于羧甲基纤维素的Cx酶活性以及弱C1酶活性和弱β-葡萄糖氧化酶活性；

(2)对基质的专一性：作用于羧甲基纤维素(CMC)、结晶纤维素、Avicell、纤维二糖和对硝基苯基纤维二糖(PNPC)；

(3)具有在4至12范围内的工作pH和在9至10范围内的最佳pH；

(4)当允许在40℃下分别静置10分钟和30分钟时，分别具有4.5至10.5和6.8至10的稳定pH值；

(5)可在10℃至65℃的宽温度范围内工作，并且约40℃被认可为最佳温度；

(6)螯合剂的影响：乙二胺四乙酸(EDTA)、乙二醇-二-(β-氨基乙基醚)N，N，N′，N″-四乙酸(EGTA)、N，N-二(羧甲基)甘氨酸(氨三乙酸)(NTA)、三聚磷酸钠(STPP)和沸石不妨碍所述活性；

(7)表面活性试剂的影响：活性几乎不受表面活性试剂的抑制，表面活性试剂诸如直链烷基苯磺酸钠(LAS)、烷基硫酸钠(AS)、聚氧乙烯烷基硫酸钠(ES)、α-烯烃磺酸钠(AOS)、α-磺酸钠脂族酸酯(α-SFE)、烷基磺酸钠(SAS)、聚氧乙烯仲烷基醚、脂肪酸盐(钠盐)和二甲基二烷基氯化铵；

(8)对蛋白酶具有强抗性；和

(9)分子量(由凝胶色谱法测定)：在180,000±10,000处具有最大峰。

11.如前述任一项权利要求所述的组合物，其中表现出内-β-1，4-葡聚糖酶活性的所述细菌碱性酶的含量按纯酶的重量计为0.00005％至0.15％，优选0.0002％至0.02％，或更优选0.0005％至0.01％。

12.如前述任一项权利要求所述的组合物，其中所述改性纤维素衍生物与所述活性纤维素酶蛋白质的重量比率为20:1至1000:1，优选30:1至800:1。

13.如前述任一项权利要求所述的组合物，其中所述改性纤维素衍生物具有20,000至500,000，优选100,000至300,000kDa的分子量。

14.如前述任一项权利要求所述的组合物，其中所述改性纤维素衍生物在所述组合物中的含量按重量计为0.02％至5％，优选0.05％至2％，或更优选0.1％至1.5％。

15.如前述任一项权利要求所述的组合物，其中所述改性纤维素衍生物选自由下列组成的组：阴离子和非离子改性纤维素，优选为阴离子改性。

16.如前述任一项权利要求所述的组合物，其中所述改性纤维素衍生物具有0.3至0.9，优选0.4至0.8的平均取代度。

17.一种包含低聚糖的洗涤剂组合物，所述低聚糖具有小于20,000kDa的重均分子量，此类低聚糖可通过如权利要求1至10中任一项所定义的酶与具有30,000至500,000kDa重均分子量的阴离子改性纤维素的反应来获得。

18.一种含水洗涤液体，所述含水洗涤液体包含如权利要求17所述的洗涤剂组合物，其中所述低聚糖的含量为0.5ppm至1000ppm，优选0.1ppm至500ppm。

19.一种清洁和/或处理表面或织物的方法，所述方法包括以下步骤：任选地洗涤和/或漂洗所述表面或织物，使所述表面或织物与如前述任一项权利要求所述的组合物接触，然后任选地洗涤和/或漂洗所述表面或织物。

20.具有小于20,000kDa重均分子量的低聚糖的用途，此类低聚糖可通过如权利要求1至10中任一项所定义的酶与具有30,000至500,000kDa重均分子量的阴离子改性纤维素的反应来获得，所述低聚糖可用于制备洗涤剂组合物以用于悬浮污垢。