CN101348466B

CN101348466B - N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺基]-喹唑啉-6-基}-丙烯酰胺的制备方法

Info

Publication number: CN101348466B
Application number: CN2007100939630A
Authority: CN
Inventors: 姜勇; 蔡璇; 郭建辉
Original assignee: JIANGSU ELLIS BIO-PHARMACEUTICAL Co Ltd
Current assignee: Jiangsu Ellis Bio-Pharmaceutical Co., Ltd.
Priority date: 2007-07-20
Filing date: 2007-07-20
Publication date: 2012-06-20
Anticipated expiration: 2027-07-20
Also published as: CN101348466A

Abstract

本发明提供一种制备N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺基]-喹唑啉-6-基}-丙烯酰胺(化合物I)的方法，是以N⁴-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺基]-喹唑啉-4，6-二胺(化合物IV)为原料，先与通式III所示的化合物发生酰化反应，得到化合物II，再在碱性条件下经消除反应得到所述的N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺基]-喹唑啉-6-基}-丙烯酰胺。

Description

N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺基]-喹唑啉-6-基}-丙烯酰胺的制备方法

技术领域

本发明涉及药物合成领域，具体涉及N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺基]-喹唑啉-6-基}-丙烯酰胺的制备方法。

背景技术

蛋白酪氨酸激酶(PTK)是一类在正常细胞生长中起重要作用的酶，它能够催化磷酸基团从ATP转移到蛋白底物的残基上。许多表皮生长因子受体(EGFR)蛋白都具有蛋白酪氨酸激酶的作用，而且这些受体和生长因子的相互作用也是正常调节细胞生长所必需的。然而EGFR的过度表达，通过其自身酪氨酸激酶的作用，会引起细胞的过度增殖，最终导致肿瘤的生成。

表皮生长因子受体家族按其结构不同可以分为EGFR(Erb-B1)、Erb-B2(HER-2/neu)、ErB-B3和Erb-B4。这些表皮生长因子受体目前均已经被证实与大部分的癌症疾病相关。

基于失调的受体激酶在癌症病理中所起的重要作用，特异性的PTK抑制剂作为潜在的抗癌治疗剂的开发是目前抗癌剂的研究热点，其中喹唑啉衍生物作为PTK抑制剂进而用于癌症治疗的研究引起了人们的广泛关注。

WO96/30347(中国专利CN96102992)、WO96/33980涉及一些4-(取代苯胺基)-喹唑啉衍生物、其前药和其药学上可接受的盐，以及它们在治疗细胞过度增生导致的疾病中的应用。

WO99/06378、WO2000/31048和WO2000/06555(中国专利CN99808949)也涉及某些取代的喹唑啉的衍生物具有不可逆的PTK抑制剂活性。

传统的喹唑啉衍生物在治疗细胞过度增生导致的疾病中，需要一个很大的剂量才能达到有效的治疗，这往往会加剧其产生的痢疾和皮疹等副作用。为此需要进行进一步研究去寻找有效且低毒副作用的药物。

PCT/CN2006/002786公开了一类新型的4-(取代苯胺基)-喹唑啉衍生物，以及其作为PTK抑制剂的应用。其中，实施例8涉及的化合物为N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺基]-喹唑啉-6-基}-丙烯酰胺，实验证明其对人表皮样鳞癌细胞A431、人乳腺癌细胞BT-474有较好的抑制生长的作用，对移植于裸鼠的人体表皮癌A431的抑瘤作用明显。此外，体外实验表明该化合物对Erb-B2激酶有优越的抑制活性。由于N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺基]-喹唑啉-6-基}-丙烯酰胺作为药物应用的前景，因此有必要对其合成工艺进行深入的研究。

WO2006/071017在实施例部分涉及了N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺基]-喹唑啉-6-基}-丙烯酰胺的制备，以N⁴-[3-氯4-(3-氟-苄氧基)-苯基]-喹唑啉-4，6-二胺(化合物IV)和丙稀酸为原料，以O-(1H-苯三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲四氟硼酸盐为缩和剂，在除酸剂的存在下通过缩和反应得到N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺基]-喹唑啉-6-基}-丙烯酰胺。该反应需要价格比较昂贵的缩和剂，且需要较长时间才完成反应，此外该反应的后处理不简便，需要通过柱层析纯化，不利于工业化生产。通过该工艺制备的产品不具有晶形，产品质量不高，需要进一步纯化，这也给后续进一步将其作为药用的研究带来不便。为此，需要对其进行进一步改进，以期找到一种所用试剂价格更加低廉、操作更为简便、产品易于纯化、适合工业化生产的方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对上述现有技术合成N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺基]-喹唑啉-6-基}-丙烯酰胺的方法所存在的缺陷，提供一种廉价、操作更为简便、产品易于纯化、适合工业化生产的方法。

本发明提供一种制备N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺基]-喹唑啉-6-基}-丙烯酰胺的方法，是以N⁴-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯基]-喹唑啉-4，6-二胺(化合物IV)为原料，先与通式III所示的化合物发生酰化反应得到化合物II，化合物II再在碱性条件下经消除反应得到所述的N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺基]-喹唑啉-6-基}-丙烯酰胺(化合物I)。

其中X可以是卤素，优选为氯、溴；Y可以是卤素或羟基，优选为卤素，更优选为氯。所述的酰化反应的所用的反应溶剂为本领域公知的常用溶剂，优选为四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿或者混合溶剂，所述酰化反应温度可以为0℃～反应所用溶剂的沸点，优选为室温。所述消除反应可以在碱存在下进行，合适的碱包括有机碱如三乙胺，无机碱如碱金属的碳酸盐、氢化物或氢氧化物，优选为氢氧化钠，所述消除反应的溶剂为质子极性溶剂如乙醇。

在本发明的制备方法中，所述酰化反应和消除反应可以在原位进行，即以不分离中间产物的单罐合成方式进行；也可以在酰化反应结束后，将中间产物分离纯化，再在碱存在条件下，将中间产物进行消除反应。在本发明的一个优选方案中，所述酰化反应和消除反应以单罐合成方式进行，从而使操作更为简便，达到较高的收率。

在本发明中，N⁴-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯基]-喹唑啉-4，6-二胺(化合物IV)可以通过以下方法制备：即由3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺(化合物VI)和4-氯-6-硝基喹唑啉(化合物VII)在质子极性溶剂如异丙醇里反应制得N-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯基]-6-硝基喹唑啉-4-胺(化合物V)，化合物V经本领域常用的还原试剂还原得到化合物IV。

上述4-氯-6-硝基喹唑啉(化合物VII)可以通过以下方法制备：以邻氨基苯甲酸和甲酰胺为原料，在140～150℃条件下发生缩和反应得到化合物IX；化合物IX与本领域常用的硝化试剂反应得到化合物VIII；化合物VIII再经卤素取代反应制得所述化合物VII。所述硝化反应可以在本领域公知的条件下进行，硝化试剂可以是强酸和浓硝酸形成的混酸，优选为浓硫酸和浓硝酸形成的混酸；所述卤素取代反应试剂优选为乙二酰氯，反应温度优选为0～50℃，更优选为20～30℃。

本发明提供的N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺基]-喹唑啉-6-基}-丙烯酰胺的制备方法相对于现有技术，避免使用价格昂贵的O-(1H-苯三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲四氟硼酸盐作为缩和剂，采用廉价易得的3-氯丙酰氯作为酰化试剂，该酰化反应在较为温和的条件(如室温)反应2～3h就可完成，然后可以不分离纯化酰化产物，将其直接溶于乙醇等常见溶剂，在碱性条件下(如氢氧化钠等存在下)通过消除反应得到N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺基]-喹唑啉-6-基}-丙烯酰胺。该法相对现有技术提供的方法，反应条件温和快速，收率更高。此外，现有技术的方法在产品纯化上采取了柱层析的方法，而且未能得到很好的结晶型产物。本发明提供的方法后处理简便，不需要经过柱层析，能通过重结晶的方法得到晶型较好的产品，简化了其纯化方法，使其适合工业化生产，而且通过该方法制备得到的产品质量较高，有利于进一步作为药用的研究。

本发明中采用的4-氯-6-硝基喹唑啉(化合物VII)的制备方法，相对现有技术而言，采用廉价易得的邻氨基苯甲酸和甲酰胺为原料，在后续硝化和卤代反应过程中分别采用常用的浓硫酸和浓硝酸形成的混酸作为硝化试剂、乙二酰氯作为卤代反应试剂，反应条件温和，不需要特殊试剂、成本低、适合工业化生产。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。其中，DMF指N，N-二甲基甲酰胺；TLC指薄层层析；THF指四氢呋喃。

具体实施方式

实施例1

3H-喹唑啉-4-酮

50mL甲酰胺搅拌升温至145℃，然后缓慢加邻氨基苯甲酸60g，加料完毕后，保温至有大量固体析出，终止反应，将反应液倾入冰水中，抽滤，滤饼水洗至无色，真空干燥得3H-喹唑啉-4-酮40g，产率62.6％，Mp215℃。

实施例2

6-硝基-3H-喹唑啉-4-酮

将60mL浓硫酸冷却至0℃，缓慢加上步所得的3H-喹唑啉-4-酮30g(加料温度控制在10℃以内)，加毕，继续搅拌10min，缓慢滴加60mL浓硝酸(滴加温度控制在10℃以内)，然后缓慢升温至98℃左右，保温反应3h。冷却至室温，将反应液倾入600mL冰水中，搅拌，有大量的黄色固体析出，抽滤，滤饼水洗至中性，真空干燥得6-硝基-3H-喹唑啉-4-酮32.6g，产率83.2％。

¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ10.21(1H，d)，9.11(1H，s)，8.39(1H，d)，8.03(1H，d)，7.65(3H，d).

实施例3

4-氯-6-硝基-喹唑啉

将上步所得的6-硝基-3H-喹唑啉-4-酮30g加至400mL二氯甲烷中，通氩气保护，冰水浴冷却。然后加30mL DMF后，缓慢滴加60mL乙二酰氯，有大量气体产生。滴加完毕后，升温至25℃，保温至液体澄清，TLC确定反应终点。然后在搅拌下将反应液缓慢倾入冰水中。静置、分层，有机层依次用饱和Na₂CO₃溶液、饱和NaCl溶液洗，无水Na₂SO₄干燥，抽滤，减压浓缩至于得4-氯-6-硝基-喹唑啉28.0g，产率84.8％。

¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ9.18(1H，m)，8.60(1H，s)，8.39(1H，dd)，7.89(1H，dd)，7.65(3H，d).

实施例4

N-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)-苯基]-6-硝基-喹唑啉-4-胺

将上步所得的4-氯-6-硝基-喹唑啉25g溶于750mL异丙醇中，加3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺30g，回流搅拌2h，冷却，有大量黄色固体析出，抽滤，滤饼依次用异丙醇、乙酸乙酯和二氯甲烷洗。真空干燥得N-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯基]-6-硝基喹唑啉-4-胺50.0g，产率98.7％。

¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ10.37(1H，s)，9.56-9.55(1H，d)，8.67(1H，s)，8.52-8.49(1H，dd)，7.98-7.97(1H，d)，7.89-7.87(1H，d)，7.72-7.69(1H，dd)，7.48-7.42(1H，m)，7.32-7.25(3H，m)，7.19-7.14(1H，m)，5.24(2H，s).

实施例5

N⁴-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯基]-喹唑啉-4，6-二胺

将上步所得的N-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)-苯基]-6-硝基喹唑啉-4-胺20g溶于1.2L无水乙醇中，加Pd/C2.1g，升温至60℃，通入氢气(常压)。TLC确定反应终点，反应完全后，过滤，滤液浓缩至大量固体析出后，冷却，抽滤。滤饼用乙醇洗，真空干燥，母液浓缩后，再次析晶，共得到N⁴-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯基]-喹唑啉-4，6-二胺16.0g，产率86.1％。

¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ9.32(1H，s)，8.29(1H，s)，8.02(1H，s)，7.72-7.69(1H，dd)，7.51-7.49(1H，d)，7.48-7.42(1H，m)，7.32-7.28(2H，m)，7.21-7.18(2H，dd)，7.16-7.14(1H，m)，5.57(2H，s)，5.22(2H，s).

实施例6

N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺基]-喹唑啉-6-基}-丙烯酰胺

将上步所得的N⁴-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯基]-喹唑啉-4，6-二胺11g溶于700mL THF中，加6.55mL三乙胺，温度控制在-15℃以下。缓慢滴加1.96mL3-氯丙酰氯的THF溶液(体积含量10％)，有烟雾产生。滴加完毕后，升温到25℃，继续搅拌3h。浓缩到干，得约13g粗品，将其溶于700mL乙醇中。加入NaOH固体1.1g(温度控制在-10℃以下)。然后将反应液升温至50℃，继续搅拌3h。减压浓缩到干，在THF和甲醇的混合溶剂中重结晶，得N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺基]-喹唑啉-6-基}-丙烯酰胺8.1g，产率64.8％，Mp234℃。

¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ10.49(1H，s)，9.81(1H，s)，8.76(1H，s)，8.50(1H，s)，7.96(1H，d)，7.87-7.84(1H，d)，7.77-7.75(1H，d)，7.70-7.68(1H，d)，7.67-7.43(1H，m)，7.33-7.17(3H，m)，6.54-6.47(1H，m)，6.34-6.30(1H，d)，5.84-5.81(1H，d)，5.24(2H，s).

实施例7

N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺基]-喹唑啉-6-基}-3-氯-丙酰胺

将N⁴-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯基]-喹唑啉-4，6-二胺1.08g溶于70mL THF中，加655μL三乙胺，温度控制在-15℃以下。缓慢滴加196μL3-氯丙酰氯的THF溶液(体积含量10％)，有少量烟雾产生。滴加完毕后，升温到25℃，搅拌3h。浓缩到干，重结晶得N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺]-喹唑啉-6-基}-3-氯-丙酰胺1.26g，产率94.9％。

实施例8

N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺]-喹唑啉-6-基}-丙烯酰胺

将上步所得的N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺]-喹唑啉-6-基}-3-氯-丙酰胺300mg将其溶于18mL乙醇中。加入氢氧化钠固体30mg(温度控制在-10℃以下)。然后将反应液升温至50℃，继续搅拌3h。减压浓缩到干，在THF和甲醇的混合溶剂中重结晶，得N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)-苯胺]-喹唑啉-6-基}-丙烯酰胺180mg，产率65.0％，Mp234℃。