CN101346130A - 包含奥曲肽和两种或更多种聚丙交酯-共-乙交酯聚合物的缓释制剂 - Google Patents

Abstract

本发明涉及包含作为活性成分的奥曲肽或其可药用盐以及两种或更多种不同的聚丙交酯－共－乙交酯聚合物(PLGA)的缓释制剂。

Description

包含奥曲肽和两种或更多种聚丙交酯-共-乙交酯聚合物的缓释制剂

本发明涉及包含作为活性成分的奥曲肽或其可药用盐以及两种或更多种不同的聚丙交酯-共-乙交酯聚合物(PLGA)的缓释制剂。

本发明的这些药物组合物意欲用于特别是肢端肥大患者的长期维持治疗以及与恶性类癌瘤和作用于血管的肠肽瘤(血管活性肠肽瘤)有关的严重腹泻和潮红的治疗。

肽类药物通常全身性施用，例如经胃肠道外施用。但是，胃肠道外施用可能是疼痛的并可引起不适，尤其对于反复每日施用而言如此。为了将给患者注射的次数减到最小，药物应当作为贮库制剂来施用。使用可注射贮库制剂的共同缺点是在整个释放过程中血浆水平的波动，例如峰水平高以及血浆水平接近于零。

本发明公开了包含作为活性成分(药物)的奥曲肽或其可药用盐的缓释制剂。奥曲肽(US 4,395,403)是具有下式的促生长素抑制素类似物：

活性成分可以是奥曲肽的可药用盐的形式，例如与如无机酸、聚合酸(polymeric acid)或有机酸形成的酸加成盐，例如与盐酸、乙酸、乳酸、枸橼酸、富马酸、丙二酸、马来酸、酒石酸、门冬氨酸、苯甲酸、琥珀酸或扑酸(双羟萘酸)形成的酸加成盐。酸加成盐可以作为单价或二价盐而存在，这例如取决于加入的是1个还是2个酸当量。优选奥曲肽的扑酸单盐。

药物的粒度分布影响药物从贮库制剂形式中的释放性质。用于制备贮库制剂的药物是结晶或无定形粉末形式。优选粒度为约0.1微米至约15微米(99％＞0.1微米，99％＜15微米)、优选1至小于约10微米(90％＞1微米，90％＜10微米)的无定形粉末。药物优选经过微粉化过程以呈现所需的粒度分布。

本发明还提供了包含作为活性成分的奥曲肽或其可药用盐的缓释药物组合物(贮库制剂)，所述的奥曲肽或其可药用盐被加入在例如微粒、植入物或半固体制剂形式的聚(丙交酯-乙交酯)共聚物(PLGA)的掺合物或混合物中。

作为PLGA掺合物的供选项，在本发明的另一方面，药物组合物包含含有活性成分的PLGA聚合物的混合物；即：活性成分可以被加入到一种或多种微粒、植入物或半固体制剂形式的PLGA中，然后与也包含活性成分和一种或多种PLGA的另一种微粒或植入物或半固体制剂混合。

本发明的药物组合物允许活性成分历经3个月以上的时间、优选在3至6个月之间缓慢释放。在活性成分释放过程中，奥曲肽的血浆水平在治疗范围内。可以理解，奥曲肽的准确剂量将取决于多种因素，包括所治疗的病症、所治疗病症的严重性、受治疗者的体重和治疗的持续时间。

出人意料的是，通过在本发明的药物组合物中使用2种或更多种不同PLGA的适宜组合可以显著减少血浆水平的波动。

药物被掺入到包含2种或更多种不同聚丙交酯-共-乙交酯聚合物(PLGA)的可生物降解的聚合物基质中。PLGA具有的丙交酯：乙交酯单体的比例为100∶0至40∶60，优选90∶10至40∶60，更优选85∶15至65∶35。丙交酯∶乙交酯单体的比例为100∶0(即不合乙交酯单体)的PLGA是聚丙交酯(PLA)，它也包括在本发明的PLGA的定义中。

本发明的PLGA具有的分子量(Mw)范围为1,000至500,000Da，优选5,000至100,000Da。聚合物的结构可以是以上结构单元的线形、分枝、高分枝、梳形分枝、树枝状分枝、T形或星形聚合物。在本发明优选的实施方案中，在药物组合物中的至少两种PLGA是线形。

星形聚合物的实例有含有至少3个羟基的多元醇的酯，其可转化为聚(丙交酯-共-乙交酯)链。多元醇优选是糖，最优选是葡萄糖。

本发明的PLGA在氯仿中的固有粘度(IV)在0.9dl/g以下，优选在0.8dl/g以下。可以通过测定流出时间(flow time)的常规方法、如例如在“欧洲药典”(1997，第17-18页(毛细管法))中描述的那样来测定固有粘度。除非另有说明，这些粘度已经于25℃在氯仿中在0.5％的浓度下或者于30℃在六氟异丙醇(hexaisofluoropropanol)中在0.5％的浓度下进行了测定。

本发明的PLGA的端基可以但不限于是羟基、羧基、酯基等。

贮库制剂的药物含量(载药量)的范围为1％至30％，优选10％至25％，更优选15％至20％。载药量被定义为作为游离碱的药物与PLGA制剂总质量的重量比。

适宜的聚合物是众所周知的，但不限于可以作为如下商品自商业途径得到的那些：RESOMER

，勃林殷格翰国际公司(Boehringer IngelheimPharma GmbH & Co.KG)，殷格翰，德国；LACTEL

，可吸收聚合物国际公司(Absorbable Polymers International)(API)，Pelham，AL，美国/都爱特(DURECT)公司，Cupertino，CA，美国；MEDISORB

，阿尔科姆斯(Alkermes)公司，剑桥，MA，美国；PURASORB

，普拉克生物化学公司(PURAC biochem BV)，Gorinchem，荷兰。适宜聚合物的实例列于表1中。

表1：适宜的聚合物的实例

1)IV已经于25℃在氯仿中在0.1％的浓度下进行了测定。

2)IV已经于30℃在氯仿中在0.5g/dL的浓度下进行了测定。

3)IV已经于30℃在六氟异丙醇中在0.5g/dL的浓度下进行了测定。

仅使用本发明的药物组合物而不使用含有仅一种来自上表的单一聚合物的制剂，可以获得在3个月以上的时间、优选在3至6个月之间的低变异性的血浆水平。

此外，本发明的药物组合物可以在无菌条件或非无菌条件下制备并最终通过γ照射进行灭菌。优选最后通过γ照射进行灭菌，从而产生具有尽可能高的无菌保证的产品。

本发明的药物组合物还可以含有一种或多种0.1％至50％量的调节释放行为的药物赋形剂。这类物质的实例有：聚(乙烯吡咯烷酮)、羧甲基纤维素钠(CMC-Na)、糊精、聚(乙二醇)、适宜的表面活性剂如泊洛沙姆(还称为(氧乙烯-氧丙烯)嵌段聚合物)、已知的且以商品名吐温

(例如吐温20、吐温40、吐温60、吐温80、吐温65、吐温85、吐温21、吐温61、吐温81)可市售得到的聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯、失水山梨醇脂肪酸酯如已知的且以商品名司盘可市售得到的类型的那些、卵磷脂、无机盐如碳酸锌、氢氧化镁、碳酸镁或鱼精蛋白如人鱼精蛋白或鲑鱼精蛋白或者带有胺残基的天然或合成的聚合物如聚赖氨酸。

本发明的药物组合物可以就组成、分子量和/或聚合物结构而言不同的聚合物的贮库制剂混合物或聚合物掺合物。聚合物掺合物在本文中被定义为2种或更多种不同聚合物在同一植入物或微粒中的固体溶液或混悬剂。相比而言，贮库制剂混合物在本文中被定义为两种或更多种具有不同组成的贮库制剂如植入物或微粒或半固体制剂的混合物，每种贮库制剂含有一种或多种PLGA。优选其中PLGA作为聚合物掺合物存在的药物组合物。

本发明的药物组合物可以是植入物、半固体(凝胶)、注射后可在原位固化的液体溶液或混悬剂或者微粒的形式。优选微粒。包含奥曲肽或其可药用盐的微粒的制备是已知的，例如在US5,445,832或US5,538,739中被公开。

本发明的以下部分集中在聚合物微粒上，虽然这些描述同样可应用于植入物、半固体和液体。

本发明的微粒可以具有的直径为数亚微米至数毫米，例如约0.01微米至约2mm，例如约0.1微米至约500微米。对于药物微粒而言，直径最多为约250微米，例如10至200微米，优选10至130微米，更优选10至90微米。

本发明的微粒可以例如在预装注射器或小瓶中与抗凝结剂混合或被抗凝结剂包被或者被抗凝结剂层覆盖。适宜的抗凝结剂例如包括甘露醇、葡萄糖、右旋糖、蔗糖、氯化钠或水溶性聚合物如聚乙烯吡咯烷酮或聚乙二醇，例如具有上述性质的那些。

对于干燥状态的本发明的微粒，优选抗凝结剂以占微粒重量的约0.1至约10％、优选约3％至5％、例如约4％的量存在。在这方面优选的抗凝结剂是甘露醇。

或者，可以在微粒的制备过程中将抗凝结剂应用于微粒。例如，在过滤/洗涤微粒的步骤中，可以用抗凝结剂的水溶液将它们另外冲洗。这样，在微粒的表面可形成抗凝结剂层。优选在微粒中抗凝结剂以占微粒重量的10％以下、更优选2％以下、最优选0.5％以下的量存在。在这方面优选的抗凝结剂是甘露醇。

更详细地对微粒描述了本发明的贮库制剂的制备方法。

微粒可以通过本领域已知的数种方法来制备，例如凝聚或相分离、喷雾干燥、油包水(W/O)或水包油包水(W/O/W)或水包油包固体(S/O/W)乳化/混悬法且然后进行溶剂提取或溶剂蒸发。乳化/混悬法是优选的方法，该方法包括以下步骤：

(i)制备有机内相，包括

(ia)将一种或多种聚合物溶解在适宜的有机溶剂或溶剂混合物中；任选将适宜的添加剂溶解/分散；

(ib)将药物或药物水溶液在由步骤(ia)得到的聚合物溶液中溶解/混悬/乳化；

(ii)制备含有稳定剂和任选的、但优选的缓冲盐的水性外相；

(iii)将有机内相与水性外相混合，例如采用产生高剪切力的装置、例如用涡轮或静态混合器将有机内相与水性外相混合，以形成乳剂；和

(iv)通过溶剂蒸发或溶剂提取使微粒硬化；洗涤微粒，例如用水洗涤微粒；

任选用抗凝结剂如甘露醇的水溶液冲洗微粒；收集微粒并干燥，例如冷冻干燥或在真空下干燥，将微粒过140μm筛。

适用于聚合物的有机溶剂例如包括乙酸乙酯、丙酮、THF、乙腈或卤代烃如二氯甲烷、氯仿或六氟异丙醇。

适用于步骤(iib)的稳定剂的实例包括聚乙烯醇(PVA)，其量为0.1至5％；羟乙基纤维素(HEC)和/或羟丙基纤维素(HPC)，其总量为0.01至5％；聚乙烯吡咯烷酮；明胶，优选猪或鱼明胶。

最后可以通过γ照射将干微粒组合物灭菌(过度杀灭灭菌)，任选以散装或在装入最终容器中后灭菌，从而产生尽可能高的无菌保证。或者，可以将散装灭菌的微粒重新混悬在适宜的溶媒中，将其作为混悬液装入适宜的装置如双室注射器中，然后进行冷冻干燥。

含有微粒的本发明的药物组合物还可以含有溶媒以帮助重构。

在施用前，将微粒混悬在适于注射的溶媒中。优选所述的溶媒是含有为了确保等张性和改善微粒的润湿性和沉降性质的药物赋形剂的水基溶媒，所述的药物赋形剂例如有甘露醇、氯化钠、葡萄糖、右旋糖、蔗糖或甘油、非离子型表面活性剂(例如泊洛沙姆、聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯)、羧甲基纤维素钠(CMC-Na)、山梨醇、聚乙烯吡咯烷酮或单硬脂酸铝。润湿剂和增粘剂可以以0.01至2％的量存在；加入适宜量的等张剂以确保等张的可注射混悬液。

用于混悬液的液体溶媒的量优选为每剂约1至5ml、例如2至2.5ml。如果希望的话，可以将干燥形式的微粒和用于重构的水性溶媒分开装入双室注射器中。

本发明还提供了本发明的药物组合物特别在肢端肥大患者的长期维持治疗以及与恶性类癌瘤和作用于血管的肠肽瘤(血管活性肠肽瘤)有关的严重腹泻和潮红的治疗中的用途。

本发明的药物组合物的功效可以在标准临床或动物研究中显示出。

本发明还提供了药盒，该药盒包含在任选装配有转移装置的小瓶中的贮库制剂以及在安瓿、小瓶或预装注射器中的水基溶媒，或者该药盒作为在双室注射器中被隔开的微粒和溶媒。

实施例

以下实施例是说明性的，而非用于限制本文所述的本发明的范围。这些实施例仅意欲提示实施本发明的方法。

实施例1：微粒的制备

将适宜量的PLGA聚合物溶解在适宜量的二氯甲烷中，产生如在表2“PLGA浓度”一栏中规定的适宜的聚合物浓度。称取适宜量的药物，置于玻璃烧杯中，将聚合物溶液倒在药物上以使所得微粒具有如在“载药量”一栏中规定的载药量。

例如对于载药量为20％及聚合物浓度为20％的微粒而言，数量如下：将3.547g PLGA聚合物溶解在17.7m1二氯甲烷中，产生20％(w/v)聚合物溶液。称取1.453g奥曲肽扑酸盐(相当于1.00g＝20％奥曲肽游离碱)，置于玻璃烧杯中，将聚合物溶液倒在药物上。

在用冰/水混合物冷却下用Ultra-Turrax转子-定子搅拌器在20’000rpm下将混悬液匀化1分钟。该混悬液称为S/O混悬液。

将10.00g聚乙烯醇PVA 18-88、3.62g KH₂PO₄和15.14g Na₂HPO₄溶解在2.00L去离子水中，形成缓冲至pH7.4的0.5％PVA 18-88溶液。

通过借助于软管泵(Perpex，Viton管)以10ml/min的速度将S/O混悬液泵入涡轮中并通过用齿轮泵(带有泵头P140的Ismatec MV-Z/B)以200ml/min的速度将水溶液泵入同一涡轮中，将S/O混悬液与0.5％PVA18-88溶液混合。在涡轮中以4’500rpm将两种溶液混合。将匀化的S/O/W乳剂收集到预装有200ml缓冲PVA溶液的2L玻璃烧杯中。

然后在3,5h-5h内将S/O/W乳剂加热至52℃。将52℃的温度另外保持30min-120min，然后将批料再次冷却至室温。在此过程中，通过真空除去选出的二氯甲烷，通过4桨螺旋桨式搅拌器以250rpm将批料搅拌。

结果，从S/O/W乳剂中形成了微粒。通过过滤(5μm)收集微粒。将它们用200ml水洗涤5次，在20℃和0.030mbar下干燥36小时。通过140μm筛分干燥的微粒，在氮气下将其装入玻璃小瓶中。将以这种方式制备的微粒通过30kGy剂量的γ照射进行灭菌。

通过激光衍射测定微粒的粒度。使用超声将微粒重新混悬在石油溶剂中。表2给出了超声处理120秒后的直径X₉₀(所有颗粒有90％在该值以下)。

用超声将微粒溶解在乙腈和甲醇的3∶2混合物中，用乙酸钠缓冲液(pH4)进一步进行1∶1稀释，然后通过HPLC进行了微粒的含量测定(活性成分的量)。通过离心将溶液从残余的颗粒物中除去。

表2：实施例1-1至1-82：由一种PLGA(参比实施例)、两种PLGA的掺合物和微粒混合物(由含有仅一种PLGA的微粒批料制得)制得的奥曲肽扑酸盐微粒

A：星形-PLG-D-葡萄糖50∶50酯0.3dL/g(％)

B：PLGA 65∶35酯0.6dL/g(％)

C：PLGA 75∶25酯0.4dL/g(％)

D：PLGA 75∶25酯0.6dL/g(％)

E：PLGA 85∶15酯0.4dL/g(％)

F：PLGA 85∶15酯0.6dL/g(％)

G：PLA 100∶0酸0.2dL/g(％)

方法信息＝更多的方法信息：

7：66mM PBS pH7.4

5：69mM枸橼酸盐-磷酸盐缓冲液pH5.0

4：69mM枸橼酸盐-磷酸盐缓冲液pH4.0

38：涡轮速度3800rpm代替4500rpm

1∶25：流速比SO/W＝1∶25代替1∶20

GP：齿轮泵代替蠕动泵

实施例2：载体组成A至G

在用磁力搅拌器剧烈搅拌下，将CMC-Na、甘露醇和普流罗尼克F68以如在表3中给出的量溶解在温度约90℃的约15ml热去离子水中。将所得澄清溶液冷却至20℃，用去离子水加至20.0ml。

表3：适于微粒的载体(量以g给出)

	A	B	C	D	E	F	G
								CMC-Na	0	0	0.05	0.14	0.28	0.35	0.40
甘露醇	0	1.04	0.99	0.90	0.76	0.74	0.68
								普流罗尼克F68	0.04	0.04	0.04	0.04	0.04	0.04	0.04

实施例3：微粒混悬液

在6R小瓶中将170mg实施例1-33的微粒混悬在1.0ml组成D(表3)的载体中。通过手工振摇约30秒使混悬液匀化。可以使用20号针头没有任何问题地将重构的混悬液注射。

实施例4：微粒的冷冻干燥

将170mg实施例1-33的微粒在1ml组成F(表3)的载体中重构，通过搅拌1至12小时进行匀化，然后在冷冻干燥机中冷冻干燥。用1ml纯水(注射用水)将冷冻干燥的微粒重构，产生润湿快速而良好的微粒，可以使用20号针头没有任何问题地将其注射。

实施例5：体内释放性质(兔)

将含有奥曲肽的微粒混悬在1ml适宜的水性载体、优选载体D中，将所得混悬液以4mg/kg的剂量经肌内(i.m.)注射到雄性新西兰白色杂种兔中。对于各剂型(受试组)，使用了4只动物。在规定的时间期限(表4中所示)后，取血浆样品并分析奥曲肽的浓度。

表4：血浆水平(剂量校正值)；浓度(ng/mD

^＊剂量＝12mg/kg

Claims (23)

1.缓释药物组合物，包含作为活性成分的奥曲肽或其可药用盐以及两种或更多种不同的聚丙交酯-共-乙交酯聚合物(PLGA)。

2.根据权利要求1的药物组合物，其中PLGA作为聚合物掺合物存在。

3.根据权利要求1的药物组合物，其中PLGA存在于贮库制剂混合物中。

4.根据权利要求1至3任一项的药物组合物，其中PLGA具有的丙交酯∶乙交酯单体的比例为100∶0至40∶60。

5.根据权利要求4的药物组合物，其中PLGA具有的丙交酯∶乙交酯单体的比例为90∶10至40∶60。

6.根据权利要求5的药物组合物，其中PLGA具有的丙交酯∶乙交酯单体的比例为85∶15至65∶35。

7.根据权利要求1至6任一项的药物组合物，其中PLGA在氯仿中的固有粘度在0.9dl/g以下。

8.根据权利要求7的药物组合物，其中PLGA在氯仿中的固有粘度在0.8dl/g以下。

9.根据权利要求1至8任一项的药物组合物，其中至少两种PLGA是线形的。

10.根据权利要求1至9任一项的药物组合物，包含奥曲肽的扑酸盐。

11.根据权利要求1至10任一项的药物组合物，其中活性成分的释放为3个月或3个月以上。

12.根据权利要求11的药物组合物，其中活性成分的释放在3个月至6个月之间。

13.微粒、半固体或植入物形式的根据权利要求1至12任一项的药物组合物。

14.微粒形式的根据权利要求13的药物组合物。

15.根据权利要求14的药物组合物，其中微粒具有的直径在10μm至90μm之间。

16.根据权利要求14或15的药物组合物，其中另外将微粒与抗凝结剂混合、用抗凝结剂覆盖或包被。

17.根据权利要求16的药物组合物，其中将微粒用抗凝结剂包被，抗凝结剂以占微粒重量的2％以下的量存在。

18.根据权利要求16或17的药物组合物，其中抗凝结剂是甘露醇。

19.通过γ照射灭菌的根据权利要求1至18任一项的药物组合物。

20.根据权利要求1至19任一项的药物组合物在肢端肥大患者的长期维持治疗以及与恶性类癌瘤和作用于血管的肠肽瘤(血管活性肠肽瘤)有关的严重腹泻和潮红的治疗中的用途。

21.施用奥曲肽或其可药用盐用于肢端肥大患者的长期维持治疗以及与恶性类癌瘤和作用于血管的肠肽瘤(血管活性肠肽瘤)有关的严重腹泻和潮红的治疗的方法，所述方法包括给需要奥曲肽或其可药用盐的患者施用根据权利要求1至19任一项的药物组合物。

22.制备根据权利要求14的微粒的方法，该方法包括：

(i)制备有机内相，包括

(ia)将一种或多种聚合物溶解在适宜的有机溶剂或溶剂混合物中；

(ib)将药物在由步骤(ia)得到的聚合物溶液中溶解/混悬/乳化；

(ii)制备含有稳定剂的水性外相；

(iii)将有机内相与水性外相混合，以形成乳剂；和

(iv)通过溶剂蒸发或溶剂提取使微粒硬化，洗涤微粒，干燥微粒，将微粒过140μm筛。

23.施用性药盒，该药盒包含在小瓶中的根据权利要求1至19任一项的药物组合物以及在安瓿、小瓶或预装注射器中的水基溶媒，或者该药盒作为在双室注射器中被隔开的微粒和溶媒。