CN101178410A - 一种用于检测人abo血型的反定型用红细胞试剂盒 - Google Patents
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Abstract
本发明的一种用于检测人ABO血型的反定型用红细胞试剂盒，试剂盒由A型试剂、B型试剂和O型试剂组成，A型试剂由红细胞保存液和A型压积红细胞组成、B型试剂由红细胞保存液和B型压积红细胞组成，O型试剂由红细胞保存液和O型压积红细胞组成，红细胞保存液由葡萄糖、枸橼酸三钠、枸橼酸、磷酸二氢钠、乙二胺四乙酸二钠、核苷酸和抗生素组成；本发明因为将葡萄糖、枸橼酸三钠、枸橼酸、磷酸二氢钠、乙二胺四乙酸二钠、核苷酸和抗生素按一定的配比制成红细胞保存液，由该红细胞保存液保存的压积红细胞，可以更好的保存压积红细胞，使得压积红细胞能够较长时间的保持稳定，增加长距离运输的可行性，使得本发明可以进行商品化的生产和销售。
Description
技术领域：
本发明涉及生物化学领域，尤其涉及鉴定血型的试剂，特别是一种用于检测人ABO血型的反定型用红细胞试剂盒。
背景技术：
由于ABO血型系统是临床输血、器官移植中最重要的血型系统，因此对献血者和受血者ABO血型的预先确认也是输血工作中最为重要的实验，错误的ABO血型定型导致的输血反应将给受血者带来十分严重的后果，因此ABO血型的鉴定必须以正、反定型试验结果相互参照来确定。所述的正定型检测是用已知的抗A和抗B血型定型试剂来测定红细胞上有无相应的A抗原或/B抗原。反定型检测是用已知的ABO血型来测定血清中有无相应的抗A抗体/或B抗体。
ABO试剂红细胞是体外诊断试剂，用于ABO血型鉴定的反定型检测，是血型定型的常规试剂，在临床上有着极为广泛的使用，过去由于存在体外长期保存时间短、运输不方便等许多问题，使得试剂的难以商品化生产和销售。基本是由各使用单位自行配制，基本上是现用现配。
发明内容：
本发明的目的是提供一种用于检测人ABO血型的反定型用红细胞试剂盒，所述的用于检测人ABO血型的反定型用红细胞试试剂盒要解决现有技术中试剂盒体外保存时间短、运输不方便的技术问题。
本发明的一种用于检测人ABO血型的反定型用红细胞试剂盒，由盒体和试剂组成，试剂设置在盒体中，试剂由A型试剂、B型试剂和O型试剂组成，所述的A型试剂由红细胞保存液和A型压积红细胞组成、所述的B型试剂由红细胞保存液和B型压积红细胞组成，所述的O型试剂由红细胞保存液和O型压积红细胞组成，所述的红细胞保存液由葡萄糖、枸橼酸三钠、枸橼酸、磷酸二氢钠、乙二胺四乙酸二钠、核苷酸和抗生素组成，其中，所述的葡萄糖占所述的红细胞保存液的质量百分比为1.7-2.1％，所述的枸橼酸三钠占所述的红细胞保存液的质量百分比为2.0-2.2％，所述的枸橼酸占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.030-0.040％，所述的磷酸二氢钠占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.20-0.30％，所述的乙二胺四乙酸二钠占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.08-0.12％，所述的核苷酸占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.040-0.045％，所述的抗生素占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.001-0.002％，余量为蒸馏水；所述的抗生素可以采用氯霉素、西力欣等医用的其它抗生素。
所述的A型压积红细胞通过如下方法制备，首先将至少三人份的A型血液去血浆，然后混合，然后用适量的生理氯化钠溶液洗涤红细胞至少两次，再分别用适量红细胞保存液洗涤红细胞至少一次，在3-5℃洗涤离心，3000-4000转/分10-20分钟，最后一次离心后，3000-4000转/分15-25分钟，弃血清，沉淀即为A压积红细胞；
所述的B型压积红细胞的制备方法同所述的A型压积红细胞的制备方法；
所述的O型压积红细胞的制备方法同所述的A型压积红细胞的制备方法；
在所述的A型试剂中，所述的A型压积红细胞占所述的A型试剂的浓度为2-5％，余量为所述的红细胞保存液；
在所述的B型试剂中，所述的B型压积红细胞占所述的A型试剂的浓度为2-5％，余量为所述的红细胞保存液；
在所述的O型试剂中，所述的O型压积红细胞占所述的A型试剂的浓度为2-5％，余量为所述的红细胞保存液。
进一步的，所述的一种用于检测人ABO血型的反定型用红细胞试剂盒，所述的葡萄糖占所述的红细胞保存液的质量百分比为1.9％，所述的枸橼酸三钠占所述的红细胞保存液的质量百分比为2.1％，所述的枸橼酸占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.035％，所述的磷酸二氢钠占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.25％，所述的乙二胺四乙酸二钠占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.1％，所述的核苷酸占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.043％，所述的抗生素占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.0015％，余量为蒸馏水。
进一步的，所述的A型压积红细胞通过如下方法制备，首先将至少三人份的A型血液去血浆，然后混合，然后用适量的生理氯化钠溶液洗涤红细胞三次，再分别用适量红细胞保存液洗涤红细胞一次，在4℃洗涤离心，3500转/分15分钟，最后一次离心后，3500转/分20分钟，弃血清，沉淀即为压积红细胞。
进一步的，所述的B型压积红细胞通过如下方法制备，首先将至少三人份的B型血液去血浆，然后混合，然后用适量的生理氯化钠溶液洗涤红细胞三次，再分别用适量红细胞保存液洗涤红细胞一次，在4℃洗涤离心，3500转/分15分钟，最后一次离心后，3500转/分20分钟，弃血清，沉淀即为压积红细胞。
进一步的，所述的O型压积红细胞通过如下方法制备，首先将至少三人份的O型血液去血浆，然后混合，然后用适量的生理氯化钠溶液洗涤红细胞三次，再分别用适量红细胞保存液洗涤红细胞一次，在4℃洗涤离心，3500转/分15分钟，最后一次离心后，3500转/分20分钟，弃血清，沉淀即为压积红细胞。
本发明的工作原理是：ABO血型系统是以人体红细胞上的抗原与血清中抗体而定型的。凡红细胞上含有A抗原，而血清中含有抗B抗体的称为A型；红细胞上含有B抗原，而血清中含有抗A抗体的称为B型；红细胞上含有A和B抗原，而血清中无抗A、抗B抗体的称为AB型；红细胞上不含有A、B抗原，而血清中含有抗A和抗B抗体称为O型。反定型检测是用已知的ABO血型来测定血清中有无相应的抗A抗体/或B抗体。具体可见下表：
正定型
受检者血型 反定型
抗A 抗B A细胞 B细胞 O细胞
+ - A - + -
- + B + - -
- - O + + -
+ + AB - - -
本发明与已有技术相对照，其效果是积极和明显的。本发明因为将葡萄糖、枸橼酸三钠、枸橼酸、磷酸二氢钠、乙二胺四乙酸二钠、核苷酸和抗生素按一定的配比制成红细胞保存液，由该红细胞保存液保存的压积红细胞，可以更好的保存压积红细胞，使得压积红细胞能够较长时间的保持稳定，增加长距离运输的可行性，使得本发明可以进行商品化的生产和销售。
具体实施方式：
实施例1
本发明的一种用于检测人ABO血型的反定型用红细胞试剂盒，由盒体和试剂组成，试剂设置在盒体中，试剂由A型试剂、B型试剂和O型试剂组成，所述的A型试剂由红细胞保存液和A型压积红细胞组成、所述的B型试剂由红细胞保存液和B型压积红细胞组成，所述的O型试剂由红细胞保存液和O型压积红细胞组成，所述的红细胞保存液由葡萄糖、枸橼酸三钠、枸橼酸、磷酸二氢钠、乙二胺四乙酸二钠、核苷酸和抗生素组成，其中，所述的葡萄糖占所述的红细胞保存液的质量百分比为1.9％，所述的枸橼酸三钠占所述的红细胞保存液的质量百分比为2.1％，所述的枸橼酸占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.035％，所述的磷酸二氢钠占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.25％，所述的乙二胺四乙酸二钠占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.1％，所述的核苷酸占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.043％，所述的抗生素占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.0015％，余量为蒸馏水；所述的抗生素可以采用氯霉素、西力欣等医用的其它抗生素。
所述的A型压积红细胞通过如下方法制备，首先将至少三人份的A型血液去血浆，然后混合，然后用适量的生理氯化钠溶液洗涤红细胞三次，再分别用适量红细胞保存液洗涤红细胞一次，在4℃洗涤离心，3500转/分15分钟，最后一次离心后，3500转/分20分钟，弃血清，沉淀即为压积红细胞；
所述的B型压积红细胞通过如下方法制备，首先将至少三人份的B型血液去血浆，然后混合，然后用适量的生理氯化钠溶液洗涤红细胞三次，再分别用适量红细胞保存液洗涤红细胞一次，在4℃洗涤离心，3500转/分15分钟，最后一次离心后，3500转/分20分钟，弃血清，沉淀即为压积红细胞；
所述的O型压积红细胞通过如下方法制备，首先将至少三人份的O型血液去血浆，然后混合，然后用适量的生理氯化钠溶液洗涤红细胞三次，再分别用适量红细胞保存液洗涤红细胞一次，在4℃洗涤离心，3500转/分15分钟，最后一次离心后，3500转/分20分钟，弃血清，沉淀即为压积红细胞；
在所述的A型试剂中，所述的A型压积红细胞占所述的A型试剂的浓度为2-5％，余量为所述的红细胞保存液；
在所述的B型试剂中，所述的B型压积红细胞占所述的A型试剂的浓度为2-5％，余量为所述的红细胞保存液；
在所述的O型试剂中，所述的O型压积红细胞占所述的A型试剂的浓度为2-5％，余量为所述的红细胞保存液。
实施例2
采用试管法检测血型
1.取被检者血清(或血浆)各一滴分别加于标记好的小试管中；
2.分别各加1滴A型、B型、O型试剂；
3.摇动试管，离心，速度和时间可选择以下任意一种：
转速1000RPM，时间1分钟；
转速3400RPM，时间15秒；
4.先观察是否溶血(溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染)，然后轻轻摇晃，使细胞再悬浮起来；
5.观察凝集状况，并立即记录结果。参照表1可知血型。
实施例3
微量板法检测血型
1.在U型板三个孔内分别加入25-35ul的被检者血清(血清)；
2.每孔内分别加入与血清等量的A、B、O型试剂；
3.混匀；
4.离心，转速2000RPM，时间30秒；
5.检测溶血情况(溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染)；
6.用振荡仪振动微量板，振动能使阳性反应出现凝集的细胞扣，若是阴性反应，细胞扣很快消除；
7.记录结果，参照表1可知血型。
Claims (5)
1.一种用于检测人ABO血型的反定型用红细胞试剂盒，由盒体和试剂组成，试剂设置在盒体中，试剂由A型试剂、B型试剂和O型试剂组成，所述的A型试剂由红细胞保存液和A型压积红细胞组成、所述的B型试剂由红细胞保存液和B型压积红细胞组成，所述的O型试剂由红细胞保存液和O型压积红细胞组成，其特征在于：所述的红细胞保存液由葡萄糖、枸橼酸三钠、枸橼酸、磷酸二氢钠、乙二胺四乙酸二钠、核苷酸和抗生素组成，其中，所述的葡萄糖占所述的红细胞保存液的质量百分比为1.7-2.1％，所述的枸橼酸三钠占所述的红细胞保存液的质量百分比为2.0-2.2％，所述的枸橼酸占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.030-0.040％，所述的磷酸二氢钠占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.20-0.30％，所述的乙二胺四乙酸二钠占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.08-0.12％，所述的核苷酸占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.040-0.045％，所述的抗生素占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.001-0.002％，余量为蒸馏水，所述的A型压积红细胞通过如下方法制备，首先将至少三人份的A型血液去血浆，然后混合，然后用适量的生理氯化钠溶液洗涤红细胞至少两次，再分别用适量红细胞保存液洗涤红细胞至少一次，在3-5℃洗涤离心，3000-4000转/分10-20分钟，最后一次离心后，3000-4000转/分15-25分钟，弃血清，沉淀即为A压积红细胞，所述的B型压积红细胞的制备方法同所述的A型压积红细胞的制备方法，所述的O型压积红细胞的制备方法同所述的A型压积红细胞的制备方法，在所述的A型试剂中，所述的A型压积红细胞占所述的A型试剂的浓度为2-5％，余量为所述的红细胞保存液，在所述的B型试剂中，所述的B型压积红细胞占所述的A型试剂的浓度为2-5％，余量为所述的红细胞保存液，在所述的O型试剂中，所述的O型压积红细胞占所述的A型试剂的浓度为2-5％，余量为所述的红细胞保存液。
2.如权利要求1所述的用于检测人ABO血型的反定型用红细胞试剂盒，其特征在于：所述的葡萄糖占所述的红细胞保存液的质量百分比为1.9％，所述的枸橼酸三钠占所述的红细胞保存液的质量百分比为2.1％，所述的枸橼酸占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.035％，所述的磷酸二氢钠占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.25％，所述的乙二胺四乙酸二钠占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.1％，所述的核苷酸占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.043％，所述的抗生素占所述的红细胞保存液的质量百分比为0.0015％，余量为蒸馏水。
3.如权利要求1所述的用于检测人ABO血型的反定型用红细胞试剂盒，其特征在于：所述的A型压积红细胞通过如下方法制备，首先将至少三人份的A型血液去血浆，然后混合，然后用适量的生理氯化钠溶液洗涤红细胞三次，再分别用适量红细胞保存液洗涤红细胞一次，在4℃洗涤离心，3500转/分15分钟，最后一次离心后，3500转/分20分钟，弃血清，沉淀即为压积红细胞。
4.如权利要求1所述的用于检测人ABO血型的反定型用红细胞试剂盒，其特征在于：所述的B型压积红细胞通过如下方法制备，首先将至少三人份的B型血液去血浆，然后混合，然后用适量的生理氯化钠溶液洗涤红细胞三次，再分别用适量红细胞保存液洗涤红细胞一次，在4℃洗涤离心，3500转/分15分钟，最后一次离心后，3500转/分20分钟，弃血清，沉淀即为压积红细胞。
5.如权利要求1所述的用于检测人ABO血型的反定型用红细胞试剂盒，其特征在于：所述的O型压积红细胞通过如下方法制备，首先将至少三人份的O型血液去血浆，然后混合，然后用适量的生理氯化钠溶液洗涤红细胞三次，再分别用适量红细胞保存液洗涤红细胞一次，在4℃洗涤离心，3500转/分15分钟，最后一次离心后，3500转/分20分钟，弃血清，沉淀即为压积红细胞。
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Cited By (9)
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|---|---|---|---|---|
| CN102338800A (zh) * | 2011-05-25 | 2012-02-01 | 上海血液生物医药有限责任公司 | 抗体筛选红细胞试剂盒 |
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-
2006
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