CN100496522C - 一种含蜂胶的药物组合物、制备方法及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种含蜂胶的药物组合物，主要由下列重量份的原料组成：蜂胶5～60，当归5～60，川芎5～60，以及这种药物组合物的一种制备方法，步骤包括：先取当归5～60重量份，川芎5～60重量份，提取挥发油，挥发油备用；再取提取挥发油后的药渣，加水提取，提取液离心、浓缩，得浓缩液；取步骤B提取得到的浓缩液，干燥，得干燥物，备用；取蜂胶、挥发油和干燥物经后处理，得组合物的成品制剂。上述药物组合物在制备提高人体免疫力药物方面的用途。本品具有祛邪、化瘀，而且又可以调整体内正气的作用，从而达到提高机体免疫力的作用。

Description

一种含蜂胶的药物组合物、制备方法及其用途

技术领域

本发明涉及一种药物组合物、制备方法及其用途，具体的说涉及一种由蜂胶、当归、川芎配伍，经提取有效部位制备得到的新的药物组合物、其制备方法及其用途。

背景技术

为蜜蜂科昆虫意大利蜂Apis mellifera L.的干燥分泌物。性味：苦，辛，寒。可抗菌消炎、调节免疫、抗氧化、加速组织愈合。文献报道，蜂胶提取物具有增强小鼠细胞免疫功能和体液免疫功能的作用；具有增强小鼠巨噬细胞吞噬功能和小鼠NK细胞活性的作用，表明蜂胶能增强小鼠免疫功能(邵燕，浦锦宝.蜂胶调节小鼠免疫功能实验研究[J].浙江中西医结合杂志，2005，15(2)：90；李淑华，于晓红，于英君，等.蜂胶对免疫功能低下模型鼠细胞免疫功能的影响[J].中医药学报，2001，29(3)：39)

蜂胶其性味苦、寒，需配辛温之物以抑其苦寒之性；当归，甘辛性温，质润而腻；川芎，辛温而燥。当归偏于养血和血，川芎偏于行血散血，二药每相使配对同用，可增强活血祛瘀、养血和血之功。此外，二药润燥相宜，当归之润可制川芎辛燥，川芎辛燥又防当归之腻，祛瘀而不耗伤气血，养血而不致血壅气滞。全方配伍，可抑蜂胶寒苦之性，又可使归、芎之性互相协调，不伤气血。

本组合物的特点：蜂胶配以当归、川芎等具有活血、行气作用的中药，使本品具有祛邪、化瘀，而且又可以调整体内正气的作用，从而达到提高机体免疫力的作用，不同于市场现有的产品。因此，与市场现有的蜂胶类产品比较，本品具有独特的优点。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新的药物组合物，具体的说是一种由蜂胶、当归、川芎配伍，经提取有效部位制备得到的新的药物组合物。

本发明的另一目的在于提供上述药物组合物的制备方法。

本发明的再一目的在于提供一种上述药物组合物在制备提高人体免疫力药物方面的用途。

本发明的目的可以通过以下措施达到：

一种含蜂胶的药物组合物，其特征在于主要由下列重量份的原料组成：蜂胶5～60，当归5～60，川芎5～60；优选：蜂胶25，当归50，川芎25。

上述的药物组合物加上辅料后可按本领域常规方法制成任何一种适宜的药物制剂。如散剂、口服液、颗粒剂、片剂或胶囊剂，优选为软胶囊、颗粒剂、口服液、泡腾片、分散片、咀嚼片、口腔崩解片或液体硬胶囊，最优选为软胶囊。

一种制备上述的药物组合物的方法，包括如下步骤：

A、取当归5～60重量份，川芎5～60重量份，提取挥发油，挥发油备用；

B、取提取挥发油后的药渣，加水提取，提取液离心、浓缩，得浓缩液；

C、取步骤B提取得到的浓缩液，干燥，得干燥物，备用；

D、取步骤A、C得到的物质以及蜂胶，经后处理，得组合物的成品制剂；

上述药物组合物在制备提高人体免疫力药物方面的用途。

本发明的目的具体可以以下措施来达到：

本发明所涉及的药物组合物，其原料药包括蜂胶、当归、川芎，其重量配比为：蜂胶5～60，当归5～60，川芎5～60。制备该组合物时，先提取当归、川芎中的挥发油，残渣再经提取、浓缩，得提取物，将挥发油和提取物分别或混合处理，得到该药物组合物的各种剂型。该药物组合物具有抗提高机体免疫力的作用。

蜂胶，为蜜蜂科昆虫意大利蜂Apis mellifera L.的干燥分泌物；当归，为伞形科植物当归Angelica sinensis(Oliv.)Diels的根；川芎为伞形科植物川芎Li gusticum chuanxion Hort.的根。

上述药物组合在制备时，先提取当归、川芎的挥发油，将挥发油提取后的残渣再经提取，提取液浓缩，得浓缩的提取液，将挥发油与浓缩的提取液分别或混合处理，制备成该药物组合物的各种剂型。其具体过程包括如下步骤：

A、取当归5～60重量份，川芎5～60重量份，以CO₂超临界萃取法萃取其中的挥发油，萃取压力10～50MPa，解析压力4～6MPa，萃取温度20℃～45℃，萃取时间2h～8h，得挥发油，残渣备用。

B、取提取挥发油后的当归、川芎药渣，加水提取1～3次，每次0.5～3小时，提取液浓缩至每ml含1～4g药材时高速离心，离心液继续浓缩至相对密度为1.05～1.35(60℃)，得提取液的浓缩液。

C、取步骤B所得的浓缩液，干燥，得药物的干提取物。

D、将步骤A提得的挥发油和步骤C的提取物、蜂胶混合，经后处理，得组合物的成品制剂。

E、上述步骤D中成品制剂的剂型为药剂学上可接受的剂型，如软胶囊、片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、泡腾片、分散片、散剂、咀嚼片、口腔崩解片、液体硬胶囊等，优选为胶囊剂、软胶囊剂；最优选为软胶囊剂。

本发明最优选的药物组合物软胶囊的规格为：0.5g/粒，0.6g/粒，1g/粒。口服，一次2粒，一日3次，或遵医嘱。

本发明所述药物组合物具有提高免疫力的作用，可用于治疗免疫功能低下症。

本组合物中蜂胶配以当归、川芎等具有活血、行气作用的中药，使本品具有祛邪、化瘀，而且又可以调整体内正气的作用，从而达到提高机体免疫力的作用，不同于市场现有的产品。因此，与市场现有的蜂胶类产品比较，本品具有独特的优点。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明。

实施例1

取蜂胶2500g，粉碎，备用；再取当归5000g，防川芎2500g，置CO₂超临界流体萃取器萃取，温度：30℃，压力：30MPa，萃取3小时，6MPa解压，得挥发油，备用。提取挥发油后的药渣，加10倍量水，煎煮2次，每次煎煮1小时，滤过，合并滤液，浓缩至每1毫升含3g原生药的药液，高速离心；离心液继续浓缩至相对密度1.15～1.20(60℃)，喷雾干燥，得棕黄色干燥细粉，与蜂胶粉、上述挥发油混合，加入适量糊精、淀粉、硬脂酸镁，至总量4000g，混匀，制粒，压片，封装，即得。

实施例2

取蜂胶2500g，粉碎，备用；再取当归5000g，防川芎2500g，置CO₂超临界流体萃取器萃取，温度：30℃，压力：30MPa，萃取3小时，6MPa解压，得挥发油，备用。提取挥发油后的药渣，加10倍量水，煎煮2次，每次煎煮1小时，滤过，合并滤液，浓缩至每1毫升含3g原生药的药液，高速离心；离心液继续浓缩至相对密度1.15～1.20(60℃)，喷雾干燥，得棕黄色干燥细粉，与蜂胶粉、上述挥发油混合，加入适量糊精、淀粉，至总量4000g，混匀，装填于空心胶囊，即得。

实施例3

取蜂胶2500g，粉碎，备用；再取当归5000g，防川芎2500g，置CO₂超临界流体萃取器萃取，温度：30℃，压力：30MPa，萃取3小时，6MPa解压，得挥发油，备用。提取挥发油后的药渣，加10倍量水，煎煮2次，每次煎煮1小时，滤过，合并滤液，浓缩至每1毫升含3g原生药的药液，高速离心；离心液继续浓缩至相对密度1.15～1.20(60℃)，喷雾干燥，得棕黄色干燥细粉，与蜂胶粉、上述挥发油混合，加入适量聚乙二醇-400，至总量6000g，于50～60℃混匀，以软胶囊制备技术制成0.6g/粒的软胶囊，即得。

本药物组合的药效学实验研究：

将实施例3所得的软胶囊，经口给予小鼠不同剂量(300mg/kg.bw，600mg/kg.bw，1800mg/kg.bw)1个月，另设0mg/kg.bw组以食用油代替受试样品。

实验方法按《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)之增强免疫力功能检验方法进行：

1)、ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化实验——MTT法

各剂量组动物连续灌胃1个月后，颈椎脱臼法处死动物，无菌取脾，置于盛有适量无菌Hank’s液的小平皿中，研磨脾脏，制成单个细胞悬液，经200目筛网过滤，用Hank’s液洗2次，每次离心10min(1000r/min)，然后将细胞悬浮于1mL RPMI640完全培养液中，台酚蓝染色计数活细胞数(均在95％以上)，用RPMI640完全培养液调整细胞浓度为3×10⁶个/mL。将细胞悬浮液分两孔加入24孔培养板中，每孔1mL，一孔加75μL ConA液，另一孔作为对照，置37℃、5％CO₂培养箱中培养72h。培养结束前4h，每孔轻轻吸去上清液0.7mL，加入0.7mL不含小牛血清的RPMI 1640培养液，同时加入MTT(5mg/mL)50μL/孔，继续培养4h。培养结束后，每孔加入1mL酸性异丙醇，吹打混匀，使紫色结晶完全溶解。将溶解液移入96孔培养板中，用酶标仪在波长570nm下测定各样品管光密度值。

由表1结果可见，1800mg/kg.bw组加ConA孔与不加ConA孔吸光度的差值显著高于0mg/kg.bw组。

表1 软胶囊对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化的影响

 

剂量(mg/kg.bw)	动物数(只)	加ConA孔与不加ConA孔吸光度的差值	P值(<img id="idf0001" file="C200610096429E00081.GIF" wi="36" he="75" img-content="drawing" img-format="GIF" />±s)
				0	10	0.010±0.007
300	10	0.021±0.013	0.145
				600	10	0.017±0.014	0.448
1800	10	0.028±0.016	0.006

2)、血清溶血素测定——半数溶血值(HC₅₀)

各剂量组动物连续灌胃1个月后，制备2％(v/v)的SRBC悬液，每只鼠腹腔注射0.2mL进行免疫，4d后摘除眼球取血于离心管内，放置1h，2000r/min离心10min，分离并收集血清。血清200倍稀释后，按检验方法测定样品管及SRBC半数溶血时的光密度值。溶血素的量以半数溶血值(HC₅₀)表示。

由表2结果可见，1800mg/kg.bw组HC₅₀显著高于0mg/kg.bw组。

表2 软胶囊对小鼠HC₅₀的影响(

±s)

 

剂量(mg/kg.bw)	动物数(只)	HC<sub>50</sub>	P值(<img id="idf0003" file="C200610096429E00081.GIF" wi="36" he="75" img-content="drawing" img-format="GIF" />±s)
				0	10	94±31
300	10	96±25	0.995
				600	10	104±28	0.709
1800	10	126±23	0.031

3)、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验——半体内法

各剂量组动物连续灌胃1个月，制备20％(v/v)的鸡红细胞悬浮液，每只鼠腹腔注射1mL，间隔30min，颈椎脱臼处死小鼠，将其仰位固定于鼠板上，正中剪开腹壁皮肤，经腹腔注入生理盐水2mL，转动鼠板1min，然后吸出腹腔洗液1mL，平均分滴于2片载玻片上，放入垫有湿纱布的搪瓷盒内，移置37℃恒温培养箱孵育30min，然后，于生理盐水中漂洗，晾干，以1：1丙酮甲醇溶液固定，4％(v/v)Giemsa-磷酸缓冲液染色3min，再用蒸馏水漂洗晾干，封片，光镜下观察。

由表3结果可见，600mg/kg.bw、1800mg/kg.bw组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率和吞噬指数均高于0mg/kg.bw组。

 

剂量(mg/kg.bw)	动物数(只)	吞噬百分率(％)	P值(<img id="idf0004" file="C200610096429E00081.GIF" wi="36" he="75" img-content="drawing" img-format="GIF" />±s)	吞噬指数	P值(<img id="idf0005" file="C200610096429E00081.GIF" wi="36" he="75" img-content="drawing" img-format="GIF" />±s)
						0	10	15.9±2.8		0.19±0.03
300	10	19.4±2.7	0.149	0.23±0.04	0.307
						600	10	24.2±5.7	0.000	0.28±0.09	0.007
1800	10	23.0±5.5	0.002	0.28±0.09	0.006

4)、NK细胞活性测定——乳酸脱氢酶测定法

各剂量组动物连续灌胃1个月后，颈椎脱臼法处死下鼠，无菌取脾，置于盛有适量无菌Hank’s液的小平皿中，研磨脾脏，制成单个细胞悬液，经200目筛网过滤，用Hank’s液洗2次，每次离心10min(1000r/min)，弃上清将细胞浆弹起，加入0.5mL灭菌水20秒，裂解红细胞后再加入0.5mL2倍Hank’s液及8mL Hank’s液，离心10min(1000r/min)，用1mL含10％小牛血清RPMI 1640完全培养液重悬，用1％冰乙酸稀释后计数，台酚蓝染色计数活细胞数(均在95％以上)，用RPMI 1640完全培养液调整细胞浓度为2×10⁷个/mL。

实验前24h将靶细胞(YAC-1细胞)传代培养，应用前以Hank’s液洗3次，用RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为4×10⁵个/mL。取YAC-1细胞和脾细胞各100μl(效靶比50：1)加入U型96孔培养板中，YAC-1细胞自然释放孔加YAC-1细胞和培养液各100μl，YAC-1细胞最大释放孔加YAC-1细胞和1％NP40各100μL，上述各项均设三个平行孔，于37℃、5％CO₂培养箱中培养4h，然后将96孔培养板以1500r/min离心5min，每孔吸取上清液100μL置平底96孔培养板中，同时加入LDH基质液100μL，反应8min，每孔加入1mol/L的HCl 30μL，在酶标仪490nm处测定光密度值。

由表4结果可见，600mg/kg.bw组小鼠NK细胞活性显著高于0mg/kg.bw组。

表4 软胶囊对小鼠NK细胞活性的影响(

±s)

 

剂量(mg/kg.bw)	动物数(只)	NK细胞活性(％)	P值(<img id="idf0007" file="C200610096429E00081.GIF" wi="36" he="75" img-content="drawing" img-format="GIF" />±s)
				0	10	58.6±16.2
300	10	85.3±25.8	0.068
				600	10	94.8±40.5	0.014
1800	10	80.1±30.5	0.181

由以上实验可见，本组合物具有增强免疫力功能。

本药物组合毒性实验：

(1)本组合物的软胶囊经雌、雄小鼠口服，急性毒性剂量大于22.4g/kg.bw，属于无毒类；

(2)本组合物的软胶囊连续给予大鼠30天，剂量分别为1800mg/kg.bw，3900mg/kg.bw，6000mg/kg.bw，受试动物一般情况良好，体重、食物利用率、脏器重量、脏器系数均无异常改变；血液学指标及生化指标结果显示，各项指标均在正常范围；各脏器病理组织学检查均未见有关的病理改变。

Claims (9)

1、一种含蜂胶的药物组合物，其特征在于由下列重量份的原料组成：

蜂胶5～60，当归5～60，川芎5～60。

2、根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于蜂胶、当归和川芎的重量配比为：

蜂胶25，当归50，川芎25。

3、一种药物组合物，其特征在于将权利要求1所述的药物组合物加上辅料后可按本领域常规方法制成任何一种适宜的药物制剂。

4、根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于所述的制剂为散剂、口服液、颗粒剂、片剂或胶囊剂。

5、根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于所述的制剂为软胶囊、颗粒剂、口服液、泡腾片、分散片、咀嚼片、口腔崩解片或液体硬胶囊。

6、根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于所述的制剂为软胶囊。

7、一种制备权利要求3所述的的药物组合物的方法，包括如下步骤：

A、取当归5～60重量份，川芎5～60重量份，提取挥发油，挥发油备用；

B、取提取挥发油后的药渣，加水提取，提取液离心、浓缩，得浓缩液；

C、取步骤B提取得到的浓缩液，干燥，得干燥物，备用；

D、取步骤A、C得到的物质以及蜂胶，经后处理，得组合物的成品制剂。

8、根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

A、取当归5～60重量份，川芎5～60重量份，以CO2超临界萃取法萃取其中的挥发油，萃取压力10～50MPa，解析压力4～6MPa，萃取温度20℃～45℃，萃取时间2h～8h，得挥发油，残渣备用；

B、取提取挥发油后的当归、川芎药渣，加水提取1～3次，每次0.5～3小时，提取液浓缩至每ml含1～4g药材时高速离心，离心液继续浓缩至相对密度为60℃时1.05～1.35，得提取液的浓缩液；

C、取步骤B所得的浓缩液，干燥，得药物的干提取物；

D、将步骤A提得的挥发油和步骤C的提取物、蜂胶混合，经后处理，得组合物的成品制剂。

9、权利要求1所述的药物组合物在制备提高人体免疫力药物方面的用途。