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CN100400649C - 一种直投式双歧杆菌纯种冻干发酵剂的复合保护剂 - Google Patents

一种直投式双歧杆菌纯种冻干发酵剂的复合保护剂 Download PDF

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Abstract

一种直投式双歧杆菌纯种冻干发酵剂的复合保护剂的配方组成为:脱脂乳粉10g、乳糖3-6g、海藻糖1-2g、吐温80 0.05-0.1g、酵母膏0.5-1g、血清0.5-1g、维生素E 0.05-0.2g、蒸馏水100mL。采用本发明制成的双歧杆菌纯种冻干发酵剂活菌含量达1.0×1011cfu/g以上;常压封存、4℃下保藏1年,活菌含量下降不足1个log数量级,其活菌含量在1010cfu/g以上;以万分之一以下的接种量进行41℃酸奶发酵,6h~8h即可凝乳;以万分之一以下的接种量与乳酸菌混种进行41℃酸奶发酵,3h~5h即可凝乳,无论是双歧杆菌纯种发酵还是双歧杆菌与乳酸菌混种发酵的酸奶制品,酸度均达到70~80、pH值为4.5~5.0;在保藏期间,发酵性能稳定。其原料易得,成本低,制成的双歧杆菌冻干发酵剂,可作为生产双歧杆菌发酵乳制品的直投式发酵剂使用。

Description

一种直投式双歧杆菌纯种冻干发酵剂的复合保护剂
技术领域
本发明涉及一种直投式双歧杆菌纯种冻干发酵剂的复合保护剂,属于双歧杆菌制品制备技术领域。
背景技术
随着乳制品工业的发展和人们健康意识的提高,功能性益生菌乳制品已成为大众的消费时尚。双歧杆菌(Bifidobacteria)作为典型的益生菌,其促进人体健康的有益作用已被公认,双歧杆菌发酵乳制品已成为面向21世纪的生物工程技术产品。双歧杆菌发酵剂制备是双歧杆菌发酵乳制品研发的重要环节。然而双歧杆菌具有专性厌氧、对营养要求苛刻和对酸敏感等生物学特性,这给发酵剂的制备带来很大困难。在按照以往培养普通乳酸菌液态发酵剂的方法来制备双歧杆菌纯种液态发酵剂时,存在的主要问题是:需要创造厌氧环境,工艺繁琐;发酵剂的活菌含量低,发酵凝乳时间长,生产效率低下;发酵剂很难进行正常的传代培养,贮藏稳定性差。目前,许多生产者采用双歧杆菌和乳酸菌混合培养的液态发酵剂来生产双歧杆菌发酵乳制品。但是,当双歧杆菌和乳酸菌混合培养时,由于双歧杆菌的生长繁殖力弱于乳酸菌,双歧杆菌的生长受到乳酸菌的抑制,很难保证具有足够的双歧杆菌活菌含量。高效浓缩型直投式双歧杆菌纯种发酵剂不仅活菌含量高(1010~1012cfu/g)、保藏期长(冻干发酵剂4℃,>1年),而且可以直接作为生产发酵剂使用,接种量较传统人工型液态发酵剂降低100~1000倍、省略了生产厂家发酵剂的制备工序、减少了菌种车间的投资和空间、防止了菌种的退化和污染,对于双歧杆菌发酵乳制品的进一步研发和工业化生产将带来革命性的变化。高效浓缩型直投式双歧杆菌纯种发酵剂系双歧杆菌优良菌种经液体深层高密度培养,浓缩分离,与保护剂介质混溶,再经冷冻或冷冻干燥,无菌包装,制成直投式冻藏发酵剂或直投式冻干发酵剂。直投式冻藏发酵剂在应用中,维持冷冻费用较高,运输不方便,需要配备专用冷藏车,对发酵剂中心的依赖性过强。而直投式冻干发酵剂保藏和运输方便,机械化程度高,便于工业化批量生产,是双歧杆菌发酵剂的主要发展方向。影响直投式双歧杆菌冻干发酵剂活菌含量(细胞冻干存活率)和活菌保藏期(细胞贮藏稳定性)的主要因素有:菌株特性、培养基、培养条件、收获期、起始细胞浓度、冻干保护剂及其pH值、冷冻速度、干燥过程、残留水分、包装形式、保藏温度等。其中,冻干保护剂是最为复杂、最难选择的关键因素,它不仅影响乳酸菌在冻干过程中的细胞存活率,也影响保藏期间的细胞稳定性。所以,冻干保护剂的配方及其制备方法属于生产企业的商业机密。
发明内容
本发明的目的是提供一种直投式双歧杆菌纯种冻干发酵剂的复合保护剂,用于直投式双歧杆菌纯种冻干发酵剂的生产,可确保双歧杆菌冻干发酵剂活菌含量,为双歧杆菌发酵乳制品的生产提供保障。
本发明的构思是这样的。发明者以自行分离选育的活力高、耐氧性和抗逆性强的双歧杆菌(两歧双歧杆菌Bbm和长双歧杆菌Blm)为试验菌株,研究了十九种食品级单一保护剂对双歧杆菌细胞冻干存活率的影响,初步筛选出抗冷冻或抗干燥的单一保护剂。在此基础上,研究了不同的复合保护剂对双歧杆菌细胞冻干存活率的影响,筛选优化出五种优良的抗冷冻干燥的复合保护剂配方。对五种优良的复合保护剂制成的双歧杆菌纯种冻干发酵剂进行细胞加速试验,进一步筛选出一种既抗冷冻干燥又耐贮藏的优良复合保护剂。具体地,本发明所说的一种直投式双歧杆菌纯种冻干发酵剂的复合保护剂配方为:脱脂乳粉10g、乳糖3-6g、海藻糖1-2g、吐温80 0.05-0.1g、酵母膏0.5-1g、血清0.5-1g、维生素E 0.05-0.2g、蒸馏水100mL。利用本发明的复合保护剂制成的双歧杆菌冻干发酵剂,以不同封存方式(常压封存、真空封存)进行包装,在不同温度(-18℃、4℃)下贮藏,定期检测发酵剂的活菌数及发酵性能,确定了采用既抗冷冻干燥又耐贮藏的优良复合保护剂制成的双歧杆菌冻干发酵剂的保藏条件和保藏期,从而也证实了该复合保护剂的实际应用效果:采用此复合保护剂配方制成的两歧双歧杆菌Bbm或长双歧杆菌Blm单一菌株冻干发酵剂,其活菌含量均达1.0×1011cfu/g以上;以万分之一以下的接种量进行41℃酸奶发酵,6h~8h即可凝乳,以万分之一以下的接种量与乳酸菌混种(双歧杆菌Bbm或Blm、保加利亚乳杆菌Lb-DR、嗜热链球菌St-3三者之间的活菌数比例为1∶1∶1)进行41℃酸奶发酵,3h~5h即可凝乳,无论是双歧杆菌纯种发酵还是双歧杆菌与乳酸菌混种发酵的酸奶制品,酸度均达到70~80°T、pH值为4.5~5.0,而且感官风味俱佳,接种量较传统液态发酵剂降低100倍~1000倍。采用该复合保护剂配方制成的两歧双歧杆菌Bbm或长双歧杆菌Blm的单一菌株冻干发酵剂,在同一封存方式不同保藏温度下或同一保藏温度不同封存方式下,保藏1年,活菌含量下降不足1个log数量级,均在1010cfu/g以上,而且发酵性能稳定,与初始冻干发酵剂相比,无显著差异,可以作为高效浓缩型直投式发酵剂使用。
本发明的复合保护剂制备工艺简单,其具体制备工艺为:
①按量分别称取血清和维生素E,过滤除菌;
②按量称取脱脂乳粉、乳糖、海藻糖、吐温80和酵母膏,按量量取蒸馏水,加热溶解混匀,冷却至室温;
③用NaOH溶液调解pH值至7.0左右;
④112℃灭菌10min,冷却至室温;
⑤加入上述经过过滤除菌的血清和维生素E,混匀即可。
本发明取得的技术效果在于:
(1)本发明的双歧杆菌纯种冻干发酵剂的复合保护剂,其主要原料为脱脂乳粉,其它添加成分用量很少,原料易得、成本低廉;采用该复合保护剂制成的两歧双歧杆菌Bbm或长双歧杆菌Blm冻干发酵剂,可以作为生产双歧杆菌发酵乳制品的直投式发酵剂使用。
(2)采用本发明的复合保护剂制成的双歧杆菌纯种冻干发酵剂,品质优良,解决了在研制高效浓缩型直投式双歧杆菌纯种发酵剂过程中的重大技术关键问题。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明。
实施例1
一、本发明的复合保护剂配方组成为:10g脱脂乳粉、5g乳糖、1g海藻糖、0.1g吐温80、1g酵母膏、1g血清、0.1g维生素E、蒸馏水100mL。
二、制备:
将组成该复合保护剂除血清、维生素E以外的各组分准确称量,混合;加热溶解,冷却至室温;用NaOH溶液调解pH值至7.0左右;112℃,10min灭菌,冷却至室温;采用无菌操作添加过滤除菌的血清和维生素E,混匀即得成品。双歧杆菌Bbm的冻干菌粉活菌数达1.52×1011cfu/g。
实施例2
一、本发明的复合保护剂配方组成为:10g脱脂乳粉、3g乳糖、2g海藻糖、0.05g吐温80、0.5g酵母膏、1g血清、0.05g维生素E、蒸馏水100mL。
二、制备:
将组成该复合保护剂除血清、维生素E以外的各组分准确称量,混合;加热溶解,冷却至室温;用NaOH溶液调解pH值至7.0左右;112℃,10min灭菌,冷却至室温;采用无菌操作添加过滤除菌的血清和维生素E,混匀即得成品。双歧杆菌Blm的冻干菌粉活菌数达1.41×1011cfu/g。
实施例3
一、本发明的复合保护剂配方:10g脱脂乳粉、5g乳糖、1g海藻糖、0.05g吐温80、1g酵母膏、0.5g血清、0.05g维生素E、蒸馏水100mL。
二、制备:
将组成该复合保护剂的各组分(血清、维生素E除外)准确称量,混合;加热溶解,冷却至室温;用NaOH溶液调解pH值至7.0左右;112℃,10min灭菌,冷却至室温;采用无菌操作添加过滤除菌的血清和维生素E,混匀即得成品。双歧杆菌Bbm的冻干菌粉活菌数达1.38×1011cfu/g。
实施例4
一、本发明的复合保护剂配方:10g脱脂乳粉、6g乳糖、1g海藻糖、0.05g吐温80、0.5g酵母膏、0.5g血清、0.05g维生素E、水100mL。
二、制备:
将组成该复合保护剂的各组分(血清、维生素E除外)准确称量,混合;加热溶解,冷却至室温;用NaOH溶液调解pH值至7.0左右;112℃,10min灭菌,冷却至室温;采用无菌操作添加过滤除菌的血清和维生素E,混匀即得成品。双歧杆菌Blm的冻于菌粉活菌数达1.47×1011cfu/g。
实施例5
一、本发明的复合保护剂配方:10g脱脂乳粉、4g乳糖、1.5g海藻糖、0.05g吐温80、0.5g酵母膏、1g血清、0.1g维生素E、水100mL。
二、制备:
将组成该复合保护剂的各组分(血清、维生素E除外)准确称量,混合;加热溶解,冷却至室温;用NaOH溶液调解pH值至7.0左右;112℃,10min灭菌,冷却至室温;采用无菌操作添加过滤除菌的血清和维生素E,混匀即得成品。双歧杆菌Blm的冻干菌粉活菌数达1.44×1011cfu/g。

Claims (6)

1.一种直投式双歧杆菌纯种冻干发酵剂的复合保护剂,其特征在于:其组成为:脱脂乳粉10g、乳糖3-6g、海藻糖1-2g、吐温80 0.05-0.1g、酵母膏0.5-1g、血清0.5-1g、维生素E 0.05-0.2g、蒸馏水100mL;
将组成该复合保护剂除血清、维生素E以外的各组分准确称量,混合,加热溶解,冷却至室温,用NaOH溶液调解pH值至7.0,112℃,10min灭菌后冷却至室温,采用无菌操作添加过滤除菌的血清和维生素E,混匀即得成品。
2.按权利要求1所述的复合保护剂,其特征在于:其组成为:脱脂乳粉10g、乳糖5g、海藻糖1g、吐温800.1g、酵母膏1g、血清1g、维生素E 0.1g、蒸馏水100mL。
3.按权利要求1所述的复合保护剂,其特征在于:其组成为:脱脂乳粉10g、乳糖3g、海藻糖2g、吐温80 0.05g、酵母膏0.5g、血清1g、维生素E 0.05g、蒸馏水100mL。
4.按权利要求1所述的复合保护剂,其特征在于:其组成为:脱脂乳粉10g、乳糖5g、海藻糖1g、吐温80 0.05g、酵母膏1g、血清0.5g、维生素E 0.05g、蒸馏水100mL。
5.按权利要求1所述的复合保护剂,其特征在于:其组成为:脱脂乳粉10g、乳. 糖6g、海藻糖1g、吐温80 0.05g、酵母膏0.5g、血清0.5g、维生素E 0.05g、蒸馏水100mL。
6.按权利要求1所述的复合保护剂,其特征在于:其组成为:脱脂乳粉10g、乳糖4g、海藻糖1.5g、吐温80 0.05g、酵母膏0.5g、血清1g、维生素E 0.1g、蒸馏水100mL。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011114182A1 (en) * 2010-03-17 2011-09-22 Compagnie Gervais Danone Dried fermented dairy product containing a high density of living bifidobacteria

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101715815B (zh) * 2009-11-20 2012-10-03 润盈生物工程(上海)有限公司 一种含耐热保护剂的直投式发酵剂的生产方法
CN102358884B (zh) * 2011-10-13 2013-02-13 陕西农产品加工技术研究院 一种两歧双歧杆菌冻干复合保护剂及其应用方法
CN107772477A (zh) * 2017-11-27 2018-03-09 内蒙古普泽生物制品有限责任公司 一种富含硒的复合益生菌粉制剂及其制备方法
CN108546647A (zh) * 2018-04-26 2018-09-18 九江牧威利元科技中心(普通合伙) 一种双歧杆菌冻干制剂及其专用保护剂

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1219583A (zh) * 1997-12-11 1999-06-16 中国科学院成都生物研究所 双歧杆菌的培养和制粉剂新技术
CN1230411A (zh) * 1998-03-27 1999-10-06 内蒙古自治区畜牧科学院 双歧乳酸益生素
CN1373207A (zh) * 2001-02-28 2002-10-09 上海双金生物科技有限公司 高存活性的活菌制剂及其制备方法
CN1119154C (zh) * 1998-01-20 2003-08-27 上海信谊药业有限公司 双歧三联活菌制剂及制备方法
CN1555815A (zh) * 2004-01-10 2004-12-22 内蒙古双奇药业股份有限公司 利用双歧杆菌对硒进行生物转化的方法及其产品

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1219583A (zh) * 1997-12-11 1999-06-16 中国科学院成都生物研究所 双歧杆菌的培养和制粉剂新技术
CN1119154C (zh) * 1998-01-20 2003-08-27 上海信谊药业有限公司 双歧三联活菌制剂及制备方法
CN1230411A (zh) * 1998-03-27 1999-10-06 内蒙古自治区畜牧科学院 双歧乳酸益生素
CN1373207A (zh) * 2001-02-28 2002-10-09 上海双金生物科技有限公司 高存活性的活菌制剂及其制备方法
CN1555815A (zh) * 2004-01-10 2004-12-22 内蒙古双奇药业股份有限公司 利用双歧杆菌对硒进行生物转化的方法及其产品

Non-Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
保护剂在冷冻干燥双歧杆菌中的作用. 曹永梅等.食品与发酵工业,第26卷第2期. 2000
保护剂在冷冻干燥双歧杆菌中的作用. 曹永梅等.食品与发酵工业,第26卷第2期. 2000 *
用微型包囊法研制新型高效微生态活性制剂. 杨汝德等.广东药学院学报,第16卷第2期. 2000
用微型包囊法研制新型高效微生态活性制剂. 杨汝德等.广东药学院学报,第16卷第2期. 2000 *
高活性双歧杆菌菌粉的研制. 谭海运.西藏农业科技,第27卷第3期. 2005
高活性双歧杆菌菌粉的研制. 谭海运.西藏农业科技,第27卷第3期. 2005 *
鼠李糖乳杆菌发酵及冻干保护的研究. 程波财等.中国乳品工业,第30卷第1期. 2002
鼠李糖乳杆菌发酵及冻干保护的研究. 程波财等.中国乳品工业,第30卷第1期. 2002 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011114182A1 (en) * 2010-03-17 2011-09-22 Compagnie Gervais Danone Dried fermented dairy product containing a high density of living bifidobacteria
WO2011113771A1 (en) * 2010-03-17 2011-09-22 Compagnie Gervais Danone Dried fermented dairy product containing a high density of living bifidobacteria
EA028428B1 (ru) * 2010-03-17 2017-11-30 Компани Жервэ Данон Высушенный ферментированный молочный продукт, содержащий высокую концентрацию живых бифидобактерий

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Assignor: HEIBEI AGRICULTURAL UNIVERSITY

Contract fulfillment period: 2008.8.13 to 2013.8.13

Contract record no.: 2009440001695

Denomination of invention: Composite protectant for freeze dried fermenting prepn of directly thrown bifidobacterium

Granted publication date: 20080709

License type: Exclusive license

Record date: 20091022

LIC Patent licence contract for exploitation submitted for record

Free format text: EXCLUSIVE LICENSE; TIME LIMIT OF IMPLEMENTING CONTACT: 2008.8.13 TO 2013.8.13; CHANGE OF CONTRACT

Name of requester: SHAOGUAN WAHAHA BEVERAGE CO., LTD.

Effective date: 20091022

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Granted publication date: 20080709

Termination date: 20120512