CH661209A5

CH661209A5 - FATTY ACID COMPOSITION.

Info

Publication number: CH661209A5
Application number: CH5070/84A
Authority: CH
Inventors: David Rubin
Original assignee: Century Lab Inc
Priority date: 1983-10-24
Filing date: 1984-10-23
Publication date: 1987-07-15
Also published as: SE8405308L; GB2148713A; IT8449063A0; FR2553662B1; IT1178170B; FR2553662A1; GB8426765D0; DE3438630A1; GB2148713B; SE8405308D0; IT8449063A1; CA1239587A; SE462701B

Description

Die Erfindung betrifft pharmazeutische Zusammensetzungen und Nahrungsmittel mit einem Gehalt an einer speziellen Kombination an Fettsäuren. Diese pharmazeutischen Zusammensetzungen und Nahrungsmittel können zur Behandlung von Menschen oder anderen Säugetieren mit dem Ziel einer Senkung der Cholesterin- und Triglycerid-Blut-spiegel verwendet werden. The invention relates to pharmaceutical compositions and foods containing a specific combination of fatty acids. These pharmaceutical compositions and foods can be used to treat humans or other mammals with the aim of lowering cholesterol and triglyceride blood levels.

Es ist bekannt, dass bei Grönland-Eskimos selten athe-rosklerotische kardiovaskuläre Erkrankungen auftreten. It is known that Greenlandic Eskimos rarely develop atheosclerotic cardiovascular diseases.

Dies hat man der Tatsache zugeschrieben, dass Eskimos grosse Mengen an Fischöl zu sich nehmen. Die aktiven Bestandteile von Fischöl sind (durchgehend-Z)-5, 8,11,14,17-Eicosapentaensäure, gelegentlich als 20 : 5 co 3-Fettsäure bezeichnet (hier als «EPA» bezeichnet) und (durchgehend -Z)-4, 7,10,13,16,19-Docosahexaensäure, gelegentlich als 22: 6 co 3-Fettsäure bezeichnet (nachstehend als «DHA» bezeichnet). EPA und DHA sind bekannte Vorläufer bei der Biosynthese von Prostaglandin-PGE3. This has been attributed to the fact that Eskimos consume large amounts of fish oil. The active ingredients in fish oil are (continuous-Z) -5, 8,11,14,17-eicosapentaenoic acid, sometimes referred to as 20: 5 co 3 fatty acid (here referred to as «EPA») and (continuous -Z) -4 , 7,10,13,16,19-docosahexaenoic acid, sometimes referred to as 22: 6 co 3 fatty acid (hereinafter referred to as "DHA"). EPA and DHA are known precursors in the biosynthesis of prostaglandin PGE3.

Die vorstehenden alternativen Bezeichnungen, wie 20 : 5 co 3, geben vor dem Doppelpunkt die Anzahl der Kohlenstoffatome in der Kette; nach dem Doppelpunkt die Anzahl der Doppelbindungen; und nach dem Omega die Anzahl der Kohlenstoffatome, bei dem die erste Doppelbindung auftritt, von dem der Carbonsäuregruppe gegenüberliegenden Ende aus. Mitglieder einer bestimmten Omegareihe von Fettsäuren, wie co 3, können üblicherweise durch normale Körperenzyme in Säuren mit unterschiedlicher Länge und unterschiedlicher Gesamtzahl an Doppelbindungen umgewandelt werden, jedoch ist im allgemeinen ein Übergang von einer Verbindung aus einer Omegareihe in eine andere, z. B. cd 3 zu co 6, nicht möglich. Dies ist darauf zurückzuführen, dass Körperenzyme im allgemeinen Veränderungen der Länge und der Doppelbindungen vom Carbonsäureende der Kette her bewirken. The alternative names above, such as 20: 5 co 3, indicate the number of carbon atoms in the chain before the colon; after the colon the number of double bonds; and after the omega, the number of carbon atoms at which the first double bond occurs from the end opposite the carboxylic acid group. Members of a particular omega series of fatty acids, such as co 3, can usually be converted into acids of different lengths and different total number of double bonds by normal body enzymes, but in general there is a transition from one compound from one omega series to another, e.g. B. cd 3 to co 6, not possible. This is because body enzymes generally cause changes in length and double bonds from the carboxylic acid end of the chain.

In den GB-PSen 1 604 554 und 2 033 745 ist beschrieben, dass EPA als wirksames Mittel zur Therapie und Prophylaxe von thromboembolischen Zuständen, wie Myokardinfarkten, Schlaganfällen oder tiefliegenden Venenthrombosen im Verlauf von chirurgischen Eingriffen, verwendet werden kann. In diesen Druckschriften ist die Extraktion von EPA aus Fischöl, wie Lebertran oder Menhadenöl, beschrieben. EPA kann anstelle von Butter oder normaler Margarine in Form einer speziellen Margarine gegeben werden, die so zusammengestellt ist, dass beim normalen Verzehr die erforderliche Menge an EPA aufgenommen wird. In GB-PSs 1 604 554 and 2 033 745 it is described that EPA can be used as an effective agent for the therapy and prophylaxis of thromboembolic conditions such as myocardial infarctions, strokes or deep vein thromboses during the course of surgical interventions. These publications describe the extraction of EPA from fish oil, such as cod liver oil or menhaden oil. Instead of butter or normal margarine, EPA can be given in the form of a special margarine, which is designed so that the required amount of EPA is absorbed during normal consumption.

Diese Vorgehens weise hat trotz der Tatsache, dass sie sich einer natürlichen, leicht der täglichen Nahrung einzuverleibenden Substanz bedient, noch keine starke Verbreitung gefunden. Ein Grund hierfür kann darin liegen, dass es schwierig ist, zu einem vernünftigen Preis EPA aus Fischölen unter Bildung eines reinen Produkts abzutrennen. Ein weiterer Grund kann darin liegen, dass die Verabreichung von EPA keine so durchgreifenden Wirkungen besitzt, wie man angenommen hatte. Despite the fact that it uses a natural substance that is easy to incorporate into daily food, this approach has not yet become widespread. One reason for this may be that it is difficult to separate EPA from fish oils at a reasonable price to form a pure product. Another reason may be that the administration of EPA does not have as sweeping effects as was thought.

Aufgabe der Erfindung ist es, die vorstehend erläuterten Nachteile des Stands der Technik zu überwinden und insbesondere die Zusammensetzungen, wie sie in den GB-PSen 1 604 554 und 2 033 745 beschrieben sind, zu verbessern. Dabei sollen Zusammensetzungen bereitgestellt werden, die im Vergleich zu herkömmlichen Produkten eine überlegene therapeutische Wirkung besitzen. Diese therapeutisch wirksamen Zusammensetzungen sollen auf natürliche Weise erhältliche Fettsäuren enthalten, die zur Senkung der Blutspiegel an Cholesterin und Triglyceriden dienen. Schliesslich sollen die therapeutischen Zusammensetzungen der Erfindung eine Erhöhung des PGEi : PGE2-Verhältnisses beim Patienten und eine Erhöhung der absoluten Menge an PGEi im System bewirken. The object of the invention is to overcome the disadvantages of the prior art explained above and, in particular, to improve the compositions as described in British Patents 1,604,554 and 2,033,745. The aim is to provide compositions that have a superior therapeutic effect compared to conventional products. These therapeutically active compositions are said to contain naturally available fatty acids which are used to lower blood levels of cholesterol and triglycerides. Finally, the therapeutic compositions of the invention are said to cause an increase in the PGEi: PGE2 ratio in the patient and an increase in the absolute amount of PGEi in the system.

Diese Aufgabe wird erfmdungsgemäss durch die in den Patentansprüchen 1 und 6 definierten Zusammensetzungen This object is achieved according to the invention by the compositions defined in claims 1 and 6

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gelöst, die eine gleichzeitige Verabreichung von EPA und/ oder DHA zusammen mit einem oder mehreren Bestandteilen aus der Gruppe Dihomo-y-linolensäure (8,11,14-Eico-satriensäure), d.h. 20 : 3 co 6-Fettsäure (nachstehend als DHLA bezeichnet), cis-Linolsäure ((Z,Z)-9,12-Octadecadi-ensäure), d.h. 18 :2 œ 6-Fettsäure, und y-Linolensäure ((Z,Z,Z-6, 9,12-Octadecatriensäure), d.h. 18 : 3 co 6-Fettsäure, entweder in Form eines pharmazeutischen Präparats, in Form eines Nahrungsmittels, wie Margarine oder Speiseöl, oder in Form einer Hautsalbe oder Lotion zur topischen Anwendung erlauben. solved, the simultaneous administration of EPA and / or DHA together with one or more components from the group dihomo-y-linolenic acid (8,11,14-eico-satrienoic acid), i.e. 20: 3 co 6 fatty acid (hereinafter referred to as DHLA), cis-linoleic acid ((Z, Z) -9,12-octadecadadic acid), i.e. 18: 2 - 6-fatty acid, and y-linolenic acid ((Z, Z, Z-6, 9,12-octadecatrienoic acid), ie 18: 3 co 6-fatty acid, either in the form of a pharmaceutical preparation, in the form of a food, such as margarine or cooking oil, or in the form of a skin ointment or lotion for topical use.

Die Prostaglandine stellen eine Familie von Substanzen dar, die eine Vielzahl von unterschiedlichen biologischen Wirkungen zeigen. Prostaglandine der 1-, 2- und 3-Serie weisen 1,2, oder 3 Doppelbindungen in der Grundstruktur einer Carbonsäure mit 20 Kohlenstoffatomen, die einen 5-gliedrigen Cyclopentenring umfasst, auf. Prostaglandins are a family of substances that show a variety of different biological effects. Prostaglandins of the 1, 2 and 3 series have 1, 2 or 3 double bonds in the basic structure of a carboxylic acid with 20 carbon atoms, which comprises a 5-membered cyclopentene ring.

Die 1-Serie von Prostaglandinen sind starke gefässerwei-ternde Mittel und hemmen die Biosynthese von Cholesterin und Kollagen sowie die Blutplättchenaggregation. Die Prostaglandine der 2-Serie verstärken die Blutplättchenaggregation, die Biosynthese von Cholesterin und Kollagen und bewirken auch eine verstärkte Proliferation von Endothelzel-len. Die Hauptwirkung der Prostaglandine der 3-Serie, insbesondere von PGE3, hegt in einer Repression der Prostaglandine der 2-Serie. The 1-series of prostaglandins are powerful vasodilators and inhibit the biosynthesis of cholesterol and collagen as well as blood platelet aggregation. The prostaglandins of the 2 series increase platelet aggregation, the biosynthesis of cholesterol and collagen and also cause an increased proliferation of endothelial cells. The main effect of the 3-series prostaglandins, in particular PGE3, lies in the repression of the 2-series prostaglandins.

Der Vorläufer der Prostaglandine der 2-Serie ist Arachi-donsäure ((durchgehend Z)-5, 8,11,14-Eicosatetraensäure), d.h. 20 :4 co 6-Fettsäure. DHLA ist der Vorläufer für die Prostaglandine der 1-Serie und EPA und DHA sind, wie vorstehend erläutert, die Vorläufer der Prostaglandine der 3-Serie. The precursor of the prostaglandins of the 2 series is arachidonic acid ((continuous Z) -5, 8,11,14-eicosatetraenoic acid), i.e. 20: 4 co 6 fatty acid. DHLA is the precursor to the 1-series prostaglandins and, as discussed above, EPA and DHA are the precursors to the 3-series prostaglandins.

Es wird angenommen, dass die Wirksamkeit von EPA und DHA bei der Verhinderung von atherosklerotischen kardiovaskulären Erkrankungen sowohl auf ihrer Wirkung als Vorläufer für Prostaglandin PGE3, das die Bildung der Prostaglandine der 2-Serie unterdrückt, als auch auf der Tatsache beruht, dass EPA und/oder DHA selbst mit Arachi-donsäure um das gleiche enzymatische System konkurrieren und somit die Biosynthese der Prostaglandine der 2-Serie hemmen. Diese Hemmung der Prostaglandine der 2-Serie führt zu einem Anstieg des Verhältnisses von PGEi : PGE2. The effectiveness of EPA and DHA in preventing atherosclerotic cardiovascular disease is believed to be due both to its action as a precursor to prostaglandin PGE3, which suppresses the formation of 2-series prostaglandins, and to the fact that EPA and / or DHA itself compete with arachidonic acid for the same enzymatic system and thus inhibit the biosynthesis of the prostaglandins of the 2 series. This inhibition of the prostaglandins of the 2 series leads to an increase in the ratio of PGEi: PGE2.

Um die Wirkung der Verabreichung von EPA und/oder DHA allein zu verbessern, mit dem Ziel, das PGEi : PGE2-Verhältnis weiter zu steigern sowie für einen Anstieg in der absoluten Menge an PGEi im System zu sorgen, soll DHLA gleichzeitig mit dem reinen EPA und/oder DHA verabreicht werden. Da cis-Linolsäure und y-Linolensäure beide im Körperstoffwechsel DHLA bilden, kann DHLA ganz oder teilweise durch eine oder beide dieser Fettsäuren ersetzt werden. In order to improve the effect of the administration of EPA and / or DHA alone, with the aim of further increasing the PGEi: PGE2 ratio and to ensure an increase in the absolute amount of PGEi in the system, DHLA is said to coexist with the pure EPA and / or DHA can be administered. Since cis-linoleic acid and y-linolenic acid both form DHLA in the body's metabolism, DHLA can be replaced in whole or in part by one or both of these fatty acids.

Es wurde festgestellt, dass die Kombination von EPA (und/oder DHA) und DHLA (und/oder cis-Linolsäure und/ oder y-Linolensäure) eine wesentliche Verringerung an Cholesterin und Triglyceriden im Blut bewirkt. Neuere Forschungen haben endgültig bestätigt, dass ein Zusammenhang zwischen dem Cholesterinspiegel im Blut mit dem Auftreten von koronaren Herzerkrankungen besteht; The combination of EPA (and / or DHA) and DHLA (and / or cis-linoleic acid and / or y-linolenic acid) has been found to cause a significant reduction in blood cholesterol and triglycerides. Recent research has finally confirmed that there is a link between blood cholesterol levels and the occurrence of coronary artery disease;

JAMA, Bd. 251 (1984), S. 351 - 364 und JAMA, Bd. 251 (1984), S. 365 — 374. Ferner wird erwartet, dass eine derartige Kombination weitere günstige therapeutische Eigenschaften besitzt. Beispielsweise ist es bekannt, dass bei Schizophrenie, rheumatoider Arthritis und anderen Kollagen- und Autoimmunerkrankungen sowie bei einigen Formen von Krebs Anzeichen für extrem niedrige PGE]-Konzentratio-nen und hohe PGE2-Konzentrationen bestehen. Somit ist zu erwarten, dass die erfindungsgemässe Kombination zu einer wirksamen Behandlung derartiger Zustände beiträgt. Ferner wird angenommen, dass die entzündungshemmende Wirkung von Corticosteroiden und die schmerzstillende Wirkung von Acetylsalicylsäure (Aspirin) auf die Repression der PGE2-Bildung zurückzuführen ist. Somit lässt sich erwarten, dass die erfindungsgemässe Kombination ein natürliches und sehr wirksames entzündungshemmendes, schmerzstillendes Mittel darstellt. JAMA, Vol. 251 (1984), pp. 351-364 and JAMA, Vol. 251 (1984), pp. 365-374. Furthermore, such a combination is expected to have further favorable therapeutic properties. For example, it is known that schizophrenia, rheumatoid arthritis, and other collagen and autoimmune diseases, as well as some forms of cancer, show signs of extremely low PGE] concentrations and high PGE2 concentrations. It is therefore to be expected that the combination according to the invention will contribute to an effective treatment of such conditions. It is also believed that the anti-inflammatory effects of corticosteroids and the analgesic effects of acetylsalicylic acid (aspirin) are due to the repression of PGE2 formation. It can thus be expected that the combination according to the invention is a natural and very effective anti-inflammatory, analgesic agent.

Die Dosis der erfindungsgemässen Zusammensetzung, die eine Kombination aus EPA (und/oder DHA) und DHLA (und/oder cis-Linolsäure und/oder y-Linolensäure) enthält, die für eine therapeutische oder prophylaktische Wirkung erforderlich ist, variiert je nach dem Verabreichungsweg und der Art des zu behandelnden Zustands, beträgt aber im allgemeinen mindestens 1 g und vorzugsweise 1,5 bis 3 g pro Tag. Hierbei handelt es sich um die Dosis für einen Durchschnittspatienten mit 70 kg Körpergewicht. Die Dosis für andere Patienten oder Tiere kann dementsprechend in Abhängigkeit mit dem Gewicht variieren, d.h. etwa 20 bis 40 mg/kg. The dose of the composition according to the invention, which contains a combination of EPA (and / or DHA) and DHLA (and / or cis-linoleic acid and / or y-linolenic acid), which is required for a therapeutic or prophylactic effect, varies depending on the route of administration and the type of condition to be treated, but is generally at least 1 g and preferably 1.5 to 3 g per day. This is the dose for an average patient with a body weight of 70 kg. Accordingly, the dose for other patients or animals may vary depending on weight, i.e. about 20 to 40 mg / kg.

Die relativen Mengen an EPA (und/oder DHA) und DHLA (und/oder cis-Linolsäure und/oder y-Linolensäure) betragen in der erfindungsgemässen Zusammensetzung vorzugsweise 1:1, wobei dieses Verhältnis von 3 : 1 bis 1 : 3 variieren kann. The relative amounts of EPA (and / or DHA) and DHLA (and / or cis-linoleic acid and / or y-linolenic acid) are preferably 1: 1 in the composition according to the invention, this ratio varying from 3: 1 to 1: 3 .

EPA (und/oder DHA) und DHLA (und/oder cis-Linol-säure und/oder y-Linolensäure) brauchen nicht als die Säuren selbst verabreicht werden, sondern können in Form ihrer pharmazeutisch verträglichen Salze, Ester oder Amide eingesetzt werden. Ester oder Amide, die in vivo in die Säure und andere pharmazeutisch verträgliche Produkte übergeführt werden können, können verwendet werden. Als Ester wird der Äthylester bevorzugt. Die bevorzugten Salze sind die Natrium- und Kaliumsalze. Ferner kommen beliebige andere pharmazeutisch verträgliche feste Salze in Frage, sofern sie sich zur Tablettierung eignen. EPA (and / or DHA) and DHLA (and / or cis-linoleic acid and / or y-linolenic acid) do not need to be administered as the acids themselves, but can be used in the form of their pharmaceutically acceptable salts, esters or amides. Esters or amides that can be converted to the acid and other pharmaceutically acceptable products in vivo can be used. The ethyl ester is preferred as the ester. The preferred salts are the sodium and potassium salts. Any other pharmaceutically acceptable solid salts are also suitable, provided they are suitable for tableting.

Die erfindungsgemässe Zusammensetzung wird vorzugsweise auf oralem Wege verabreicht, da dies den zweckmäs-sigsten Verabreichungsweg darstellt. Die Wirkstoffe können aber auch auf beliebigen anderen Wegen, bei denen eine erfolgreiche Resorption gegeben ist, verabreicht werden, z.B. parenteral (d.h. subkutan, intramuskulär oder intravenös), rektal oder vaginal sowie topisch, z. B. in Form von Hautsalben oder -lotionen. The composition according to the invention is preferably administered by the oral route, since this is the most convenient route of administration. However, the active compounds can also be administered in any other way in which there is successful absorption, e.g. parenterally (i.e. subcutaneously, intramuscularly or intravenously), rectally or vaginally as well as topically, e.g. B. in the form of skin ointments or lotions.

Es ist möglich, die Wirkstoffe als solche in Form eines einfachen Gemisches der Einzelbestandteile zu verabreichen. Vorzugsweise werden sie aber in Form von pharmazeutischen Präparaten dargereicht. Die erfindungsgemässen Präparate für tiermedizinische und humanmedizinische Zwecke umfassen die vorstehend definierten Wirkstoffe zusammen mit einem oder mehreren pharmazeutisch verträglichen Trägerstoffen hierfür und gegebenenfalls weitere therapeutische Bestandteile, wobei aber andere ungesättigte Fettsäuren, insbesondere Arachidonsäure, nach Möglichkeit vermieden werden sollen. Der oder die Trägerstoffe müssen pharmazeutisch verträglich sein, d.h. sie müssen mit den anderen Bestandteilen der Präparate verträglich sein und dürfen keine für den Empfanger nachteiligen Wirkungen besitzen. Zu diesen Präparaten gehören solche, die sich für die orale, rektale, vaginale, intrapulmonare oder parenterale (einschliesslich subkutan, intramuskulär und intravenös) Verabreichung eignen. Präparate für die orale Verabreichung, wie Tabletten oder Kapseln, werden bevorzugt. It is possible to administer the active substances as such in the form of a simple mixture of the individual components. However, they are preferably administered in the form of pharmaceutical preparations. The preparations according to the invention for veterinary and human medical purposes comprise the active substances defined above together with one or more pharmaceutically acceptable carriers therefor and optionally further therapeutic constituents, but other unsaturated fatty acids, in particular arachidonic acid, should be avoided if possible. The carrier (s) must be pharmaceutically acceptable, i.e. they must be compatible with the other components of the preparations and must not have any adverse effects on the recipient. These preparations include those suitable for oral, rectal, vaginal, intrapulmonary or parenteral (including subcutaneous, intramuscular and intravenous) administration. Preparations for oral administration such as tablets or capsules are preferred.

Die Kombination aus EPA (und/oder DHA) und DHLA (und/oder cis-Linolsäure und/oder y-Linolensäure) kann auch verabreicht werden, indem man Butter und/oder normale Margarine durch eine spezielle Margarine, z.B. vom Emulsionstyp, die so zusammengesetzt ist, dass bei normaler Anwendung durch den Verbraucher die erforderliche Menge The combination of EPA (and / or DHA) and DHLA (and / or cis-linoleic acid and / or y-linolenic acid) can also be administered by mixing butter and / or normal margarine with a special margarine, e.g. of the emulsion type, which is composed such that, under normal use by the consumer, the required amount

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der Kombination aufgenommen wird, ersetzt. Speiseöle und -fette können in ähnlicher Weise so bereitgestellt werden, dass sie die erfindungsgemässe Zusammensetzung enthalten. of the combination is replaced. Edible oils and fats can similarly be provided to contain the composition of the invention.

EPA (und/oder DHA) und DHLA (und/oder cis-Linolsäure und/oder y-Linolensäure), die in den erfindungsgemässen Zusammensetzungen verwendet werden, sollen so rein wie möglich sein. EPA und/oder DHA können nicht in Form von Fischöl direkt eingesetzt werden, da bei Verwendung von Fischöl in der Menge, die die gewünschte Menge an EPA und/oder DHA liefert, zu viele Kalorien und möglicherweise toxische Mengen an den Vitaminen A und D bereitgestellt werden. Somit sollen reines EPA und/oder DHA aus dem Fischöl extrahiert werden. Die Anwesenheit von anderen ungesättigten Fettsäuren ausser EPA, DHA, DHLA, cis-Linolsäure und y-Linolensäure sollte vermieden werden. EPA (and / or DHA) and DHLA (and / or cis-linoleic acid and / or y-linolenic acid) which are used in the compositions according to the invention should be as pure as possible. EPA and / or DHA cannot be used directly in the form of fish oil because using fish oil in the amount that provides the desired amount of EPA and / or DHA provides too many calories and possibly toxic amounts of vitamins A and D. will. Thus, pure EPA and / or DHA should be extracted from the fish oil. The presence of other unsaturated fatty acids other than EPA, DHA, DHLA, cis-linoleic acid and y-linolenic acid should be avoided.

Im wesentlichen reines EPA und/oder DHA kann aus Fischöl, wie Lebertran, mittels eines Verfahrens, wie es beispielsweise in der US-PS 4 377 526 beschrieben ist, extrahiert werden. Eine andere Möglichkeit zu deren Abtrennung besteht in einer neuen Verfahrensweise gemäss Patentanspruch 10, bei der die Doppelbindungen der ungesättigten Fettsäuren im als Ausgangsprodukt verwendeten Fett oder Öl jodiert werden. Diese Jodierung erlaubt einen Schutz der Fettsäuren gegen Oxidation während der Weiterverarbeitung und erhöht die Auflösung der Fettsäuren bei der späteren Säulenchromatographie. Nach der Jodierung wird das Fett oder Ol verseift. Die jodierten Fettsäuren werden aus dem verseiften Gemisch extrahiert, sodann methyliert und säu-lenchromatographisch getrennt. Anschliessend werden die gewünschten Fraktionen entjodiert. Dieses Verfahren kann nicht nur zur Abtrennung von EPA und DHA aus Fischölen, sondern auch zur Abtrennung und Extraktion von anderen ungesättigten Fettsäuren, wie a-Linolensäure und y-Linolensäure, aus den Triglyceridformen, in denen sie natürlicherweise, z.B. in Sojaöl, Leinsamenöl, Safloröl, Öl aus der Nachtkerze und dergleichen, auftreten, angewandt werden. Die Abtrennung von ungesättigten Fettsäuren kann mittels des erfindungsgemässen Jodierungsverfahrens erleichtert werden. Substantially pure EPA and / or DHA can be extracted from fish oil such as cod liver oil using a method such as that described, for example, in U.S. Patent 4,377,526. Another possibility for their separation consists in a new procedure according to claim 10, in which the double bonds of the unsaturated fatty acids are iodinated in the fat or oil used as the starting product. This iodination allows protection of the fatty acids against oxidation during further processing and increases the dissolution of the fatty acids in the later column chromatography. After iodination, the fat or oil is saponified. The iodinated fatty acids are extracted from the saponified mixture, then methylated and separated by column chromatography. The desired fractions are then de-iodinated. This process can be used not only to separate EPA and DHA from fish oils, but also to separate and extract other unsaturated fatty acids, such as a-linolenic acid and y-linolenic acid, from the triglyceride forms in which they are found naturally, e.g. in soybean oil, linseed oil, safflower oil, evening primrose oil, and the like. The separation of unsaturated fatty acids can be facilitated by means of the iodination process according to the invention.

Beim Ausgangsmaterial des erfindungsgemässen Verfahrens kann es sich um natürliche Fette oder Fettöle handeln, wobei die erste Stufe die Jodierung ist und anschliessend die Verseifung folgt. Jedoch kann es sich beim Ausgangsmaterial auch um ein beliebiges Gemisch aus ungesättigten Fettsäuren handeln, die schwer zu trennen sind. In diesem Fall besteht die erste Stufe in der Jodierung, wobei aber keine Verseifung erforderlich ist, da es sich beim Ausgangsmaterial nicht um Triglyceride handelt. The starting material of the process according to the invention can be natural fats or fatty oils, the first stage being iodination and subsequent saponification. However, the starting material can also be any mixture of unsaturated fatty acids that are difficult to separate. In this case, the first step is iodination, but no saponification is necessary since the starting material is not triglycerides.

Die Jodierung findet statt, indem man Jod in einem organischen Lösungsmittel, vorzugsweise in Form einer 20-prozentigen Lösung in Äthanol, langsam zum Ausgangsmaterial gibt, bis die Färbung im Ausgangsmaterial nicht mehr verschwindet. Diese Reaktion findet bei Raumtemperatur unter ständigem Rühren statt. The iodination takes place by slowly adding iodine in an organic solvent, preferably in the form of a 20 percent solution in ethanol, to the starting material until the color in the starting material no longer disappears. This reaction takes place at room temperature with constant stirring.

Die Verseifungsstufe kann auf herkömmliche Weise durchgeführt werden, beispielsweise durch 2-stündige Behandlung mit einer 20-prozentigen Lösung von KOH in Äthanol. The saponification step can be carried out in a conventional manner, for example by treatment with a 20% solution of KOH in ethanol for 2 hours.

Die jodierten Fettsäuren werden aus dem Verseifungsge-misch nach herkömmlichen Verfahren, beispielsweise durch Extraktion mit Äther, extrahiert. The iodinated fatty acids are extracted from the saponification mixture by conventional methods, for example by extraction with ether.

Die nächste Verfahrensstufe besteht in der Methylierung der jodierten Fettsäuren, um sie für die Säulenchromatographie vorzubereiten. Auch hier handelt es sich um eine herkömmliche Stufe, die beispielsweise mit einer 5-prozentigen Lösung von Chlorwasserstoff in Methanol durchgeführt werden kann. The next step in the process is the methylation of the iodinated fatty acids to prepare them for column chromatography. This is also a conventional stage, which can be carried out, for example, with a 5 percent solution of hydrogen chloride in methanol.

Schliesslich werden die Fettsäuren vorzugsweise säu-lenchromatographisch aufgetrennt. Die Säulenchromatographie wird auf herkömmliche Weise mit einem herkömmlichen Elutionsgemisch durchgeführt. Während die Auftrennung der verschiedenen Fettsäuren bei herkömmlichen Verfahren sehr schlecht ist, wird diese Auftrennung stark verbessert, wenn die Fettsäuren bei der säulenchromatographi-schen Behandlung jodiert sind. Die Säule kann auf herkömmliche Weise mit Kieselgel gepackt werden. Als Elu-tionslösungen können beliebige herkömmliche Lösungen verwendet werden, z.B. Hexan/Äther/Essigsäure (85 : 10 : 5). Finally, the fatty acids are preferably separated by column chromatography. Column chromatography is carried out in a conventional manner with a conventional elution mixture. While the separation of the various fatty acids is very poor in conventional processes, this separation is greatly improved if the fatty acids are iodinated in the column chromatography treatment. The column can be packed with silica gel in a conventional manner. Any conventional solutions can be used as elution solutions, e.g. Hexane / ether / acetic acid (85: 10: 5).

Nach der säulenchromatographischen Auftrennung in Fraktionen werden die Fettsäuren entjodiert, beispielsweise unter Verwendung von Silbernitrat. After separation by column chromatography into fractions, the fatty acids are de-iodinated, for example using silver nitrate.

Obgleich vorstehend für die verschiedenen Stufen des erfindungsgemässen Verfahrens spezielle Reagentien und Verfahrensbedingungen angegeben worden sind, ist es für den Fachmann klar, dass auch andere Reagentien und Verfahrensbedingungen zur Durchführung der einzelnen gewünschten Verfahrensstufen geeignet sind. Der kritische Faktor besteht in der Jodierung vor der Chromatographie, um die Auftrennung bzw. Auflösung zu erhöhen und die Fettsäuren gegen Oxidation zu schützen. Although specific reagents and process conditions have been specified above for the various stages of the process according to the invention, it is clear to the person skilled in the art that other reagents and process conditions are also suitable for carrying out the individual desired process stages. The critical factor is iodination before chromatography in order to increase the separation or dissolution and to protect the fatty acids against oxidation.

Gemäss der vorstehenden Beschreibung wird die Auftrennung durch Säulenchromatographie bewerkstelligt. Es ist jedoch daraufhinzuweisen, dass auch andere Trennver-fahren möglich sind, z.B. eine Hochgeschwindigkeitszentri-fugation. Die Auftrennung wird auch bei derartigen anderen Trennverfahren durch die Jodierung verbessert. As described above, the separation is accomplished by column chromatography. However, it should be noted that other separation methods are also possible, e.g. a high-speed centrifugation. The separation is also improved in such other separation processes by the iodination.

Das folgende Beispiel dient zur Erläuterung des erfindungsgemässen Verfahrens zur Abtrennung von EPA und DHA aus Lebertran. The following example serves to explain the process according to the invention for separating EPA and DHA from cod liver oil.

Herstellungsbeispiel Manufacturing example

Eine 20-prozentige Lösung von Jod in Äthanol wird langsam zu 300 g Lebertran gegeben. Die Jodzugabe wird so lange fortgesetzt, bis die Jodfarbung im Öl verschwindet. Die Reaktion findet bei Raumtemperatur unter kontinuierlichem Rühren statt. Nach beendeter Jodierung wird die jodierte ölige Lösung durch 2-stündige Behandlung mit einer 20-prozentigen Lösung von KOH in Äthanol verseift. Die jodierten Fettsäuren (260 g) lassen sich leicht aus dem verseiften Gemisch extrahieren. A 20 percent solution of iodine in ethanol is slowly added to 300 g of cod liver oil. The iodine addition is continued until the iodine color disappears in the oil. The reaction takes place at room temperature with continuous stirring. After iodination is complete, the iodized oily solution is saponified by treatment with a 20% solution of KOH in ethanol for 2 hours. The iodinated fatty acids (260 g) can easily be extracted from the saponified mixture.

Die jodierten Fettsäuren werden sodann mit einer 5-pro-zentigen Lösung von Chlorwasserstoff in Methanol methyliert. EPA und DHA werden säulenchromatographisch (1500 g Kieselgel, 70 bis 230 mesh, Merck) abgetrennt. Die Elution wird mit 5 Liter Hexan/Äther/Essigsäure (85 : 10 : 5) durchgeführt. Bei der ersten extrahierten Fraktion handelt es sich um jodiertes DHA. Bei der zweiten Fraktion handelt es sich um jodiertes EPA. The iodinated fatty acids are then methylated with a 5 percent solution of hydrogen chloride in methanol. EPA and DHA are separated by column chromatography (1500 g silica gel, 70 to 230 mesh, Merck). The elution is carried out with 5 liters of hexane / ether / acetic acid (85: 10: 5). The first fraction extracted is iodinated DHA. The second fraction is iodized EPA.

Das erhaltene, im wesentlichen reine methylierte und jodierte Fettsäuregemisch kann auch durch andere herkömmliche Verfahrensweisen, z.B. durch Hochgeschwindigkeits-zentrifugation oder Destillation, aufgetrennt werden. Die Entjodierung wird durchgeführt, indem man das jodierte Me-DHA und Me-EPA getrennt mit einer 10-prozentigen wässrigen Silbernitratlösung schüttelt. Es bildet sich eine Sil-berjodidausfällung. Die organischen Phasen werden abgetrennt. Das gleiche Verfahren wird so lange wiederholt, bis keine Ausfallung mehr auftritt. Mikroanalyse, HPLC und NMR zeigen, dass die gewünschten Produkte erhalten worden sind. Die Ausbeute liegt über 90 Prozent und der Reinheitsgrad bei 96 bis 100 Prozent. Es ist nicht erforderlich, das Verfahren unter Stickstoff durchzuführen, da die Fettsäuren mit Jod gesättigt sind, wodurch eine Oxidation verhindert wird. The substantially pure methylated and iodinated fatty acid mixture obtained can also be obtained by other conventional procedures, e.g. by high-speed centrifugation or distillation. De-iodination is carried out by shaking the iodized Me-DHA and Me-EPA separately with a 10 percent aqueous silver nitrate solution. A silver-iodide precipitation forms. The organic phases are separated. The same procedure is repeated until no more failures occur. Microanalysis, HPLC and NMR show that the desired products have been obtained. The yield is over 90 percent and the degree of purity is between 96 and 100 percent. It is not necessary to carry out the process under nitrogen, since the fatty acids are saturated with iodine, which prevents oxidation.

5 5

10 10th

15 15

20 20th

25 25th

30 30th

35 35

40 40

45 45

50 50

55 55

60 60

65 65

5 5

661 209 661 209

Die nachstehenden klinischen Untersuchungen erläutern die synergistische Wirkung, die bei einer Anwendung der erfindungsgemässen Kombination erzielt wird. Zum Vergleich sind die Wirkungen bei alleiniger Verabreichung der Einzelkomponenten angegeben. s The following clinical studies explain the synergistic effect that is achieved when using the combination according to the invention. For comparison, the effects are given when the individual components are administered alone. s

Klinische Untersuchung 36 männliche und weibliche ambulante Patienten im Alter von 35 bis 75 Jahren werden in drei Gruppen von jeweils 12 Patienten eingeteilt. Die einzelnen Gruppen erhalten 45 io Tage lang zusätzlich zu ihrer normalen Diät 5 cm3/Tag freie Clinical examination 36 male and female outpatients aged 35 to 75 years are divided into three groups of 12 patients each. The individual groups receive 5 cm3 / day in addition to their normal diet for 45 days

Fettsäuren. Bei der Gruppe I besteht der Zusatz aus 5 cm' Tag im wesentlichen reiner EPA. Bei der Gruppe II wird die Diät mit 5 cm3/Tag im wesentlichen reiner cis-Linolensäure und bei der Gruppe III mit 3 cm3/Tag im wesentlichen reiner EPA und 2 cm3/Tag im wesentlichen reiner cis-Linolsäure versetzt. Unter dem Ausdruck «im wesentlichen rein» ist eine Reinheit von etwa 96 bis 100 Prozent zu verstehen. Fatty acids. In Group I, the addition consists of 5 cm 'day of essentially pure EPA. In group II the diet is mixed with 5 cm3 / day of essentially pure cis-linolenic acid and in group III with 3 cm3 / day of essentially pure EPA and 2 cm3 / day of essentially pure cis-linoleic acid. The expression “essentially pure” means a purity of approximately 96 to 100 percent.

Cholesterin und Triglyceride im Blut werden 1 Tag vor Behandlungsbeginn und nach der 45-tägigen Behandlung getestet. Die Behandlungsergebnisse sind in den nachstehenden Tabellen I, II und III zusammengestellt. Blood cholesterol and triglycerides are tested 1 day before the start of treatment and after 45 days of treatment. The treatment results are summarized in Tables I, II and III below.

Tabelle I: 5 cm3/Tag reine EPA Table I: 5 cm3 / day of pure EPA

Patient Nr. Patient no.

Alter Age

Geschlecht gender

Gesamtcholesterin 1 Tag vor der Behandlung, mg/100 ml Total cholesterol 1 day before treatment, mg / 100 ml

Gesamtcholesterin nach 45 Tagen, Total cholesterol after 45 days,

mg/100 ml mg / 100 ml

Triglyceride 1 Tag vor der Behandlung, Triglycerides 1 day before treatment,

mg/100 ml mg / 100 ml

Triglyceride nach 45 Tagen, mg/100 ml Triglycerides after 45 days, mg / 100 ml

1 1

45 45

M M

250 250

220 220

130 130

102 102

2 2nd

45 45

M M

248 248

220 220

115 115

95 95

3 3rd

47 47

M M

230 230

210 210

102 102

90 90

4 4th

73 73

M M

270 270

240 240

95 95

90 90

5 5

60 60

W W

280 280

240 240

115 115

95 95

6 6

56 56

M M

265 265

260 260

120 120

105 105

7 7

54 54

W W

215 215

205 205

95 95

90 90

8 8th

52 52

W W

285 285

250 250

115 115

100 100

9 9

63 63

M M

300 300

250 250

110 110

95 95

10 10th

64 64

M M

350 350

260 260

160 160

105 105

11 11

55 55

M M

190 190

95 95

80 80

12 12

35 35

M M

200 200

190 190

90 90

Mittelwert Average

256,9+43,2 256.9 + 43.2

227,9 + 24,4 227.9 + 24.4

111,8+18,6 111.8 + 18.6

94,95 + 7 94.95 + 7

% Verringerung % Reduction

11,2% 11.2%

15% 15%

Tabelle II: 5 cm3/Tag reine cis-Linolsäure Table II: 5 cm3 / day of pure cis-linoleic acid

Patient Nr. Patient no.

Alter Age

Geschlecht gender

Gesamtchlesterin 1 Tag vor der Behandlung, mg/100 ml Total cholesterol 1 day before treatment, mg / 100 ml

Gesamtcholesterin nach 45 Tagen, Total cholesterol after 45 days,

mg/100 ml mg / 100 ml

Triglyceride i Tag vor der Behandlung, Triglycerides i day before treatment,

mg/100 ml mg / 100 ml

Triglyceride nach 45 Tagen, mg/100 ml Triglycerides after 45 days, mg / 100 ml

1 1

47 47

M M

190 190

200 200

95 95

2 2nd

75 75

W W

350 350

340 340

90 90

95 95

3 3rd

60 60

W W

200 200

205 205

110 110

105 105

4 4th

60 60

w w

220 220

115 115

100 100

5 5

55 55

w w

240 240

210 210

90 90

100 100

6 6

37 37

M M

270 270

260 260

105 105

95 95

7 7

40 40

M M

220 220

230 230

80 80

8 8th

45 45

M M

400 400

350 350

165 165

150 150

9 9

62 62

W W

310 310

300 300

140 140

10 10th

54 54

M M

230 230

220 220

115 115

11 11

52 52

M M

260 260

250 250

110 110

12 12

61 61

W W

215 215

130 130

125 125

Mittelwert Average

265,3+61,75 265.3 + 61.75

250 + 50 250 + 50

112 + 22,8 112 + 22.8

109,16 + 19,4 109.16 + 19.4

% Verringerung % Reduction

5% 5%

2% 2%

Tabelle III: 3 cm3/Tag reine EPA und 2 cm3/Tag reine cis-Linolsäure Table III: 3 cm3 / day of pure EPA and 2 cm3 / day of pure cis-linoleic acid

Patient Nr. Patient no.

Alter Age

Geschlecht gender

Gesamtcholesterin nach 45 Tagen, Total cholesterol after 45 days,

mg/100 ml mg / 100 ml

Triglyceride 1 Tag vor der Behandlung, Triglycerides 1 day before treatment,

mg/100 ml mg / 100 ml

Triglyceride nach 45 Tagen, mg/100 ml Triglycerides after 45 days, mg / 100 ml

1 1

48 48

M M

450 450

260 260

160 160

90 90

2 2nd

60 60

M M

310 310

240 240

70 70

40 40

3 3rd

45 45

M M

257 257

210 210

106 106

50 50

661209 6 661209 6

Tabelle III (Fortsetzung) Table III (continued)

Patient Nr. Patient no.

Alter Age

Geschlecht gender

Gesamtcholesterin nach 45 Tagen, Total cholesterol after 45 days,

mg/100 ml mg / 100 ml

Triglyceride 1 Tag vor der Behandlung, Triglycerides 1 day before treatment,

mg/100 ml mg / 100 ml

Triglyceride nach 45 Tagen, mg/100 ml Triglycerides after 45 days, mg / 100 ml

4 4th

40 40

M M

305 305

250 250

98 98

45 45

5 5

54 54

M M

210 210

200 200

95 95

55 55

6 6

35 35

W W

210 210

190 190

95 95

45 45

7 7

40 40

M M

290 290

240 240

100 100

70 70

8 8th

61 61

W W

270 270

220 220

116 116

45 45

9 9

45 45

W W

240 240

215 215

95 95

80 80

10 10th

50 50

W W

210 210

190 190

75 75

60 60

11 11

64 64

M M

300 300

220 220

130 130

80 80

12 12

64 64

M M

190 190

180 180

55 55

50 50

Mittelwert Average

270,1+67,5 270.1 + 67.5

• 217,9+24,4 • 217.9 + 24.4

99,5 99.5

59,16+16 59.16 + 16

% Verringerung % Reduction

19,3% 19.3%

40,5% 40.5%

Durch Verabreichung von 5 cm3/Tag EPA allein ergibt sich während der 45-tägigen Behandlung eine Verringerung der Seramspiegel von Cholesterin und Triglyceriden, nämlich eine durchschnittliche Verringerung von 11,2 für Gesamtcholesterin und von 15 Prozent für Triglyceride. Bei 45-tägiger Verabreichung von reiner cis-Linolsäure ist die Wirkung praktisch insignifikant. Tatsächlich steigt sogar bei vielen Patienten der Cholesterinspiegel. Administration of 5 cc / day EPA alone results in a 45-day reduction in serum levels of cholesterol and triglycerides, an average decrease of 11.2 for total cholesterol and 15 percent for triglycerides. With 45 days of pure cis-linoleic acid, the effect is practically insignificant. In fact, cholesterol levels rise even in many patients.

Bei Verabreichung von 3 cm3 EPA + 2 cm3 cis-Linolsäure pro Tag lässt sich jedoch eine ausgeprägte synergistische Wirkung feststellen. Bei Verwendung dieser Kombination ergibt sich eine deutlich signifikante Verringerung des Serumcholesterins (durchschnittliche Abnahme von 19,3 Pro-25 zent) und der Serumtriglyceride (durchschnittliche Abnahme von 40,5 Prozent). However, a pronounced synergistic effect can be observed when 3 cm3 EPA + 2 cm3 cis-linoleic acid are administered per day. When using this combination, there is a significantly significant decrease in serum cholesterol (average decrease of 19.3 percent-25 percent) and serum triglycerides (average decrease of 40.5 percent).

35 35

45 45

50 50

60 60

65 65

Claims

661 209

2nd

PATENT CLAIMS

1. Pharmaceutical composition for lowering the cholesterol and triglyceride blood level, consisting essentially of an effective amount of a combination of a first component from group 5, 8, 11, 14, 17-eicosapentaenoic acid, 4,7, 10, 13, 16,19-docosahexaenoic acid, its salts, esters and amides and combinations thereof and a second component from the group diho-mo-y-linoleic acid, cis-linoleic acid, y-linolenic acid, their salts, esters and amides and combinations thereof, wherein the first and second components are present in relative amounts from 3: 1 to 1: 3.

2. Composition according to claim 1, characterized in that it additionally contains a pharmaceutically acceptable carrier.

3. Composition according to claim 1, characterized in that it is essentially free of other unsaturated fatty acids.

4. Composition according to claim 1, characterized in that the first component is 5,8,11,14,17-eicosapentaenoic acid or its salts, esters and amides.

5. Composition according to claim 1 or 4, characterized in that the second component is cis-linoleic acid or its salts, esters and amides.

6. Foodstuffs containing a substantial amount of at least one fatty acid, characterized in that the fatty acid is essentially a combination of a first component from group 5, 8, 11, 14, 17-eicosapentaenoic acid, 4, 7, 10 , 13,16,19-docosahexaenoic acid, its salts, esters or amides and combinations thereof and a second component from the group diho-mo-y-linolenic acid, cis-linoleic acid, y-linolenic acid, their salts, esters and amides and Combinations thereof, the first and second components being present in relative amounts of 3: 1 to 1: 3.

7. Food according to claim 6, characterized in that it is essentially free of other unsaturated fatty acids.

8. Food according to claim 6, characterized in that the first component is 5, 8, 11, 14, 17-eicosapentaenoic acid or its salts, esters and amides.

9. Food according to claim 6 or 8, characterized in that the second component is cis-linoleic acid or its salts, esters and amides.

10. A process for the extraction of pure fatty acids, which is suitable for use in a composition according to one of claims 1 to 5 or a food according to one of claims 6 to 9, from natural sources, characterized by the following process steps:

Iodination of the double bonds of the unsaturated fatty acids and triglycerides in the starting material;

Saponification of the mixture obtained;

Extracting the iodinated fatty acids from the saponified mixture;

Methylating the iodinated fatty acids;

Separating the fatty acids; and de-iodizing the desired fraction.