CH652931A5

CH652931A5 - Composition adjuvante pour aider l'absorption d'une substance pharmacologiquement active, administree par l'intermediaire de l'appareil digestif.

Info

Publication number: CH652931A5
Application number: CH1350/82A
Authority: CH
Inventors: Osamu Tanaka; Noboru Yata
Original assignee: Wakunaga Yakuhin Kk
Priority date: 1981-03-06
Filing date: 1982-03-05
Publication date: 1985-12-13
Also published as: US4501734A; DE3207841A1

Description

La présente invention a pour objet une composition adjuvante comprenant un extrait galénique contenant un composé du type sa-ÓH ponine ou un produit isolé à partir d'un tel extrait, cette composi-

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tion adjuvante étant plus particulièrement destinée à permettre d'aider l'absorption de médicaments absorbés ou administrés par l'intermédiaire de l'appareil digestif.

L'invention découle de la découverte du fait que cet extrait galénique présente des caractéristiques pharmacologiques le rendant apte à aider et à favoriser l'absorption d'une substance pharmacologiquement active administrée par l'intermédiaire de, ou dans l'appareil digestif, par exemple, par voie orale ou par insertion dans le rectum.

En raison des difficultés rencontrées dans l'isolation par purification de la saponine ainsi que de la structure compliquée de cette substance, ce n'est que récemment, c'est-à-dire depuis environ une dizaine d'années, qu'un progrès notable a pu être accompli dans le domaine des recherches sur la saponine.

Parmi les propriétés caractéristiques des saponines, on peut citer le fait qu'elles moussent lorsqu'on les agite en présence d'eau, qu'elles ont une puissante action hémolytique par dissolution des globules rouges du sang, qu'elles sont toxiques à l'égard des poissons et qu'elles peuvent former des complexes avec le cholestérol (stéroïde). Dans le domaine des produits pharmaceutiques, on a trouvé que les saponines présentent des activités pharmacologiques telles que des activités d'agents expectorants, antibéchiques, antiinflammatoires, de blocage du système nerveux central, antifatigue, antiulcère, favorisant le métabolisme du cholestérol, favorisant le métabolisme des lipides ainsi que la synthèse des acides nucléiques ou des protéines. En outre, on a récemment mis en évidence le fait qu'elles ont des activités anti-infectieuses et antitumeurs. Parmi les préparations galéniques contenant de la saponine, avec des teneurs relativement élevées en saponine, qui figurent dans la Pharmacopée japonaise, on peut mentionner les suivantes: le Senega, la racine de Polygala, la racine de Platycodon, le Glycyrrhiza, la racine d'Achyranthes, la racine de Bupleurum, le rhizome de Panax, le Ginseng, le tubercule d'Ophiopogon, la tige â'Akebia, etc.

On peut classer les saponines, suivant la structure chimique de leurs groupements sapogénines ou aglycones, en saponines stéroïdes et saponines triterpénoïdes. Les saponines triterpénoïdes contenant l'hédéragénine comme aglycone sont obtenues à partir de diverses plantes telles que: Akebia quinata Decne. [«Chem. Pharm. Bull.», 24, 1021 (1976)], Caulophyllum robustum Maxim. [«C.A.», 85, 106644h (1976)], Fatsiajaponica Decne. [«Phytochemistry», 15, 781 (1976)], Sapindus mukurossi Gaertn. [«C.A.», 73, 77544,110062m, 110071p (1970) et «C.A.», 74, 13384f (1971)], Lecaniodiscus cupa-nioides Pianch. ex Benth [«Phytochemistry», 20,1939 (1981)]. Toutefois, jusqu'à présent, aucune recherche pharmacologique systématique n'a été effectuée.

La saponine de racine du Bupleurum, qui fait partie du groupe des saponines triterpénoïdes, présente des activités hémolytique et d'excitation locale très puissantes, et manifeste en outre des effets sédatifs, antalgiques, hypothermiques, antipyrétiques et anti-inflam-matoires, et elle agit également contre les ulcères des organes digestifs. En ce qui concerne la saponine des pelures de Sapindus mukurossi Gaertn., qui est également une saponine triterpénoïde, elle n'a pas été utilisée, jusqu'à présent, à des fins médicales, mais elle a été l'objet de recherches concernant son action anti-inflammatoire en raison de similarités dans sa structure chimique. On a rapporté le fait que cette substance présente un effet d'inhibition sur l'œdème de la carragaheenine ainsi qu'un effet adjuvant sur l'arthrite des rats.

En dépit de la découverte d'activités pharmacologiques variées de la saponine, comme mentionné ci-dessus, la recherche pharmacologique systématique ne fait que commencer et on peut espérer qu'un nouvel effet pharmacologique inconnu dans le cas des produits pharmaceutiques de l'art antérieur sera découvert à l'avenir.

D'autre part, dans l'administration d'une préparation antibactérienne, on connaît la notion de concentration minimale efficace dans le sang. Lorsque sa teneur est inférieure à une telle concentration, un médicament n'est pas efficace même lorsqu'il peut être présent de manière persistante pendant une longue période dans l'organisme. A cause de cette raison, le pourcentage d'utilisation par absorption d'un médicament destiné à être absorbé par l'intermédiaire de l'appareil digestif est très important et des recherches ont été effectuées en vue de la mise au point de procédés pour maintenir des concentrations efficaces de médicaments dans le sang, en utilisant des quantités inférieures de médicaments, grâce à l'augmentation de leur efficacité d'absorption obtenue en agissant soit sur leur technique de préparation, soit sur leur mode d'administration.

Il apparaît cependant hautement souhaitable de pouvoir améliorer le pourcentage d'utilisation lors de l'administration d'un médicament de type connu selon un mode d'administration usuel par voie orale.

La présente invention a pour but d'apporter une solution au problème qui vient d'être indiqué. A cet effet, la composition adjuvante selon l'invention présente les caractéristiques spécifiées dans la revendication 1. Ainsi, le résultat visé par l'invention est atteint grâce à l'utilisation d'un extrait galénique contenant de la saponine ou d'un produit isolé à partir d'un tel extrait, sous la forme d'une composition adjuvante d'absorption.

Outre ledit extrait galénique ou ledit produit isolé à partir d'un tel extrait, la composition adjuvante peut éventuellement comprendre un véhicule acceptable du point de vue pharmaceutique.

Conformément à une forme d'exécution particulière de l'invention, le produit isolé est sous la forme d'une saponine triterpénoïde représentée par la formule suivante:

CH.

COOH

CH.

CH

0

CH

•CH.OH

H?/—O

OH

O

HO

CH

O OH

ou

OH

On peut obtenir ces saponines triterpénoïdes en soumettant les écorces de Sapindus mukurossi Gaertn. (désignées dans la suite de la description par le terme d'écorce de mukurossi), sans ou après traitement de dégraissage, à une extraction par un alcool aliphatique inférieur ou par un mélange d'eau et d'alcool aliphatique inférieur et en séparant ensuite des fractions d'extraits ainsi obtenus la saponine triterpénoïde représentée par la formule indiquée ci-dessus.

L'invention a également pour objet une composition pharmaceutique, administrable par l'intermédiaire de l'appareil digestif et renfermant la composition adjuvante susmentionnée, cette composition pharmaceutique étant caractérisée par le fait qu'elle comprend une combinaison d'une quantité inoffensive et efficace d'un extrait galénique contenant un composé du type saponine, ou d'un produit isolé à partir d'un tel extrait, et d'une quantité inoffensive et efficace d'une substance pharmacologiquement active.

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La composition adjuvante selon l'invention peut être utilisée pour améliorer les propriétés d'absorption, par l'intermédiaire de l'appareil digestif, d'une substance pharmacologiquement active. A cet effet, on peut administrer, par l'intermédiaire de l'appareil digestif, plus particulièrement par voie orale ou par insertion dans le rectum, la substance pharmacologiquement active en combinaison avec l'extrait galénique contenant une saponine ou avec le produit isolé à partir d'un tel extrait, la substance pharmacologiquement active et l'extrait galénique (ou le produit isolé à partir de cet extrait) étant sous forme de préparations séparées ou bien étant combinés dans la composition pharmaceutique susmentionnée.

L'extrait galénique utilisé conformément à la présente invention est un extrait de préparation galénique contenant une substance du type saponine.

On connaît un grand nombre de préparations galêniques contenant des substances du type saponine, chacune de ces préparations pouvant être utilisée dans la mise en œuvre de la présente invention.

Des exemples caractéristiques de préparations galêniques contenant des substances du type saponine utilisables pour la mise en œuvre de la présente invention sont énumérés ci-dessous. Dans la présente description, le terme préparation galénique est utilisé avec la même signification que, ou en remplacement de la mention de la plante correspondante.

1) (Pharm.) Akebia quinata Decne. ou plantes appartenant à la même famille (Lardizabalaceae).

2) Fatsia japonica Decne. et Pianch.

3) Caulophyllum robustum Maxim.

4) Fève de Hedera rhombea.

5) Clematis chinensis Osbeck.

6) Pulsatilla cernua Spreng.

7) Sapindus mukurossi Gaertn.

8) (Pharm.) Panax japonicum C.A. Meyer.

9) (Pharm.) Glycyrrhiza glabra L. var. glandulifera Regel et Herder, Glycyrrhiza uralensis Fisher ou plantes appartenant à la même famille (Leguminosae).

10) (Pharm.) Polygala senega L. ou Polygala senega L. var. lati-folia Torrey et Gray.

11) (Pharm.) Platycodon grandiflorum A.D.C.

12) (Pharm.) Polygala tenuifolia Willd.

13) (Pharm.) Achyranthes fauriei Lev. et Van ou Achyranthes bi-dentata Blume.

14) Cyclamen europaeum.

15) Primula officinalis.

16) (Pharm.) Bupleurum falcatum L. ou ses variétés (Umbellifere).

17) (Pharm.) Panax ginseng C.A. Meyer.

18) Panax notoginseng Burkill.

19) Panax quinquefolium L.

Remarques:

1) Les plantes 1 à 7 renferment des saponines contenant l'hédé-ragénine comme aglycone.

2) Une plante désignée par le terme (Pharm.) est une plante originale permettant l'obtention d'une préparation galénique figurant dans la liste de la Pharmacopée japonaise, 9e édition.

3) La racine de Bupleurum falcatum L. est désignée ci-dessous par le terme de racine de Bupleurum. Cette racine de Bupleurum ainsi que l'écorce de mukurossi sont des préparations galêniques bien connues depuis les temps anciens.

L'extrait galénique contenant de la saponine qui peut être utilisée pour la mise en œuvre de la présente invention peut être obtenu, selon un procédé connu en soi, en utilisant les plantes indiquées ci-dessus comme produits de départ pour les préparations galêniques correspondantes. Plus précisément, par exemple, la préparation galénique de départ est soumise, sans avoir été dégraissée ou après avoir subi un dégraissage au moyen d'un solvant organique usuel soluble dans les lipides, à une extraction de ses ingrédients actifs au moyen d'un agent d'extraction tel que l'eau, un alcool aliphatique inférieur,

plus particulièrement un alcool monohydrique de Q à C4, ou un mélange d'eau et d'alcool aliphatique inférieur. Outre ces agents d'extraction, on peut également utiliser une cétone inférieure, telle que l'acétone, un éther inférieur, tel que le diéthyléther, un ester d'un acide monocarboxylique inférieur et d'un alcool inférieur, tel que l'acétate d'éthyle.

L'extrait peut être utilisé tel quel ou après concentration. Toutefois, on le soumet habituellement à une certaine purification avant l'utilisation. Conformément à un exemple de purification, on met l'extrait concentré en suspension dans l'eau, on agite la suspension en y ajoutant du n-butanol et, après séparation de la couche de n-butanol, on évapore la couche aqueuse jusqu'à siccité.

Les plantes utilisées ne sont pas nécessairement des plantes se trouvant dans la nature. On peut également utiliser un produit obtenu par culture de cellules à partir d'une plante de départ. Lorsque le produit de culture se trouve encore à l'état non différencié mais contient déjà des substances du type saponine, il est également possible de le soumettre à une opération d'extraction.

Les produits d'extraction ainsi préparés contiennent des substances du type saponine.

Les saponines contenues dans l'extrait utilisé pour la mise en œuvre de l'invention ont des structures chimiques qui n'ont pas encore été complètement élucidées. Les caractéristiques spécifiques critiques qui doivent être possédées en commun par lex extraits convenant pour la mise en œuvre de l'invention consistent dans le fait que chacun de ces extraits doit être un constituant soluble dans le n-butanol, provenant d'une préparation galénique contenant une saponine, et doit avoir une aptitude à favoriser l'absorption d'une substance pharmacologiquement active administrable par voie orale.

Les structures chimiques des saponines isolées d'écorce de mukurossi (quatre espèces correspondant à quatre types de groupement sucre respectivement liés à l'hédéragénine) ont été décrites dans la publication «Abstracts of Lectures in lOlth Annual Symposium of Pharmacological Society of Japan», et l'utilisation de ces substances comme adjuvants d'absorption de médicaments dans un exemple de mise en œuvre de l'invention sera décrite en détail ci-dessous. La structure chimique de la saponine de racines de Bupleurum a été indiquée dans «J.C.S. Perkin», I, 2043 (1975), «Tetrahedron Letters», N° 46, 4167 (1976) et «Tetrahedron Letters», N° 14,1227 (1977). Les saponines d'écorce de mukurossi préparées par les inventeurs sont des substances qui se trouvent toutes sous forme de poudre blanche, indépendamment de leurs différences portant sur leur groupe sucre, et qui sont facilement solubles dans le méthanol et difficilement solubles dans l'eau. D'autre part, les saponines de racines de Bupleurum (y compris les saponines de racines de Bupleurum a, c, d, etc.) sont des substances hygroscopiques, sous forme de poudre brune, facilement solubles dans le méthanol et difficilement solubles dans l'eau.

Le terme d'extrait utilisé dans la présente description se rapporte aussi bien à l'extrait sous la forme d'une solution qu'au solide ou à la poudre obtenus à partir de cet extrait par élimination du solvant (c'est-à-dire essentiellement une saponine).

Les saponines isolées à partir d'écorce de mukurossi, qui constituent un exemple de saponine isolée selon l'invention, comprennent trois sortes de saponine, A, B et C, suivant la nature du radical R dans la formule indiquée plus haut, comme représenté ci-dessous:

(Tableau en page suivante)

Saponine A :

La saponine A est une substance connue [«Phytochemistry», 20, 1939 (1981)]. Plus précisément, la saponine A est la 3-0-[a-L-arabi-nopyrannosyl-(l ->3)-a-L-rhamnopyrannosyl-(l ->2)-a-L-arabinopy-rannosyl]hédéragénine.

Saponine B:

La saponine B est une substance connue [«C.A.», 73, 77544v (1970)]. Plus précisément, la saponine B est la 3-0-[ß-D-xylopyran-nosyl-(l -»3)-a-L-rhamnopyrannosyl-(l ->2)-a-L-arabinopyrannosyl]-hédéragénine.

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5

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Saponine

R

HO 1

A

o

O ' OH

r~\

B

iw

HO

OH

HOH_C ,O t

2!/ \f

C

OH

Saponine C:

La saponine C est une substance connue [«Phytochemistry», 20, 1939 (1981)]. Plus précisément, la saponine C est la 3-0-[ct-L-ara-binofurannosyl-(l -► 3)-a-L-rhamnopyrannosyl-(l -»-2)-a-L-arabmo-pyrannosyl]hédêragénine.

On peut préparer les saponines A, B et C à partir de l'écorce de mukurossi.

Conformément à un premier exemple de mise en œuvre de l'invention, les étapes de la préparation de la saponine sont décrites en détail ci-dessous.

L'écorce de mukurossi est soumise, sans dégraissage ou après avoir subi un dégraissage en utilisant un solvant organique dissolvant les lipides, à une extraction au moyen d'un agent d'extraction choisi parmi les alcools aliphatiques inférieurs, plus particulièrement les alcools monohydriques de Cj à C4, et un mélange d'eau et d'un alcool aliphatique inférieur. On traite l'extrait par Chromatographie normale, en utilisant un agent adsorbant (de préférence le gel de silice) ainsi qu'un éluant, constitué par un mélange de solvants renfermant un solvant organique insoluble (par exemple l'acétate d'éthyle, le chloroforme, le n-butanol), un alcool (par exemple le méthanol ou l'éthanol) et de l'eau, de façon à obtenir une séparation en fractions de saponine. On soumet ensuite les fractions ainsi obtenues à une opération de purification, telle qu'une recristallisation, si possible, de façon à obtenir la saponine isolée désirée.

La composition adjuvante de l'absorption d'une substance pharmaceutique renferme un extrait galénique ou un produit isolé à partir d'un tel extrait, comme décrit ci-dessus. Plus précisément, la composition adjuvante de l'absorption d'une substance pharmaceutique peut comprendre soit une seule sorte d'extrait galénique ou de produit isolé à partir d'un tel extrait, soit un mélange de plusieurs sortes de tels extraits galêniques ou produits isolés à partir d'extraits galêniques. En variante, une telle composition peut, en outre, contenir tout véhicule liquide ou solide pharmaceutiquement acceptable. En ce qui concerne la forme de dosage de la composition, elle peut être choisie parmi les poudres, les pilules, les comprimés, les émul-sions, les capsules, les mélanges officinaux, les granulés, les parvules (très petites pilules), les solutions (comprenant également les extraits fluides et les sirops), les pastilles et les trochisques, et toute autre forme de dosage administrable par voie orale ou par insertion dans le rectum.

La composition peut être administrée sous toute forme de dosage désirée du moment que l'effet d'amélioration de l'absorption de la substance pharmaceutique peut être décelé. La plupart des préparations galêniques contenant de la saponine sont connues, conformément à l'art antérieur, comme matières premières pour la préparation de médicaments végétaux et, par conséquent, des valeurs de dose appropriées sont déjà connues de manière empirique. Ainsi,

lors de la mise en œuvre de l'invention, la dose optimale pour l'obtention d'un effet d'amélioration désirée de l'absorption d'une substance pharmacologiquement active donnée peut être facilement déterminée à partir de ces doses empiriquement connues. Comme décrit ci-dessus, l'extrait utilisé pour la mise en œuvre de l'invention présente également une activité physiologique bien connue selon l'art antérieur et il sera parfois nécessaire de tenir compte de cette activité lors de la détermination des doses utilisées lors de la mise en œuvre de l'invention. Toutefois, afin d'obtenir un effet d'amélioration désiré de l'absorption d'une substance pharmaceutique, on administrera généralement l'extrait galénique ou le produit isolé à partir d'un tel extrait à une dose de 2,5 à 250 mg, de préférence de 20 à 50 mg, par dose, pour un adulte humain.

Habituellement, la préparation de la composition adjuvante d'absorption s'effectue séparément de la préparation de la substance pharmacologiquement active dont l'absorption doit être favorisée au moyen de cette composition adjuvante. Dans ce cas, le produit commercial prendra la forme d'un ensemble comprenant une préparation de la substance pharmaceutiquement active et une préparation de la composition adjuvante d'absorption. Toutefois, si désiré, la composition peut également prendre la forme d'une préparation intégralement combinée avec une substance pharmacologiquement active dont on désire améliorer l'absorption.

Comme mentionné ci-dessus, on peut obtenir des saponines triterpénoïdes contenant de l'hédéragénine comme aglycone à partir de diverses sortes de plantes. On peut cependant remarquer que l'activité pharmacologique d'une saponine dépend dans une large mesure de la nature des sapogénines, comme décrit, par exemple, dans «Bio-logically Active Natural Substances» publié par Shoji Shibata, 418, 1978. Par conséquent, on peut en déduire, en raisonnant par analogie, que les saponines contenues dans les extraits des produits de départ autres que l'écorce de mukurossi, ayant un effet promoteur de l'absorption d'une substance pharmaceutique, conforme à la présente invention, sont des saponines triterpénoïdes similaires aux saponines A, B et C indiquées ci-dessus et que certaines d'entre elles peuvent être des saponines triterpénoïdes contenant de l'hédéragénine comme aglycone, comme dans le cas des saponines A, B et C.

Les substances pharmacologiquement actives dont on désire favoriser l'absorption au moyen d'un extrait galénique renfermant une saponine ou d'un produit isolé à partir d'un tel extrait, sont des substances pharmaceutiques destinées à être administrées par voie orale ou dans le rectum et dont on désire maintenir de manière persistante, pendant une longue période, les concentrations dans le sang à un niveau correspondant au moins à la concentration minimale efficace.

Comme exemple de telles substances pharmacologiquement actives, on peut mentionner les antibiotiques du type ß-lactame, notamment les pénicillines et les céphalosporines, ainsi que les peptides physiologiquement actifs. Parmi ces substances, on peut mentionner, à titre d'exemple caractéristique, les antibiotiques du type ß-lactame, et, en particulier, les pénicillines et les céphalosporines, comme décrit ci-dessous.

Comme pénicillines, on peut mentionner l'ampicilline, la ciclacil-line, la cloxacilline, la benzylpénicilline, la carbénicilline, la pipéra-cilline, la mézolocilline, la sulbénicilline, la tricarcilline, l'apalcilline, l'amoxicilline, l'hétacilline, la talampicilline et leurs sels de sodium.

Comme céphalosporines, on peut mentionner la céfaléxine, la ceftézole, la cêfapirine, la céfalotine, la céfoxitine, la cefmétazole, la céfazoline, la céfaloridine, la céfacétrile, le céfotiam, la céforanide, la céphanone, le céfaclor, le céfadroxil, la céfatridine, la céfadrine, la céfaloglycine, la céfopêrazone (T-1551) et leurs sels de sodium.

Exemple expérimental (I) : extrait galénique Méthode expérimentale A :

Des rats ayant un poids de 180 à 220 g ont été anesthésiés au moyen de 30 mg/kg de pentobarbital sodique et fixés par supination

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sur un matelas à eau constitué par une pièce métallique à travers laquelle on a fait circuler de l'eau ayant une température réglée à une valeur constante de 39° C. On a préparé, de la manière habituelle, une boucle duodénale de 10 cm de longueur, ayant sa pointe placée à 1 cm au-dessous de la partie pylorique de l'estomac, comme point de départ. On a injecté dans la boucle une solution d'ampicilline sodique et un extrait galénique dissous dans un tampon au phosphate de pH 6,5, en proportions de 0,5 ml par 200 g de poids corporel des rats. On a saigné les rats, par les veines jugulaires, au bout de périodes de 10, 20, 40, 60, 90,120, 180 et 240 min après l'injection et on a mesuré la concentration d'activité dans le sang dans chaque cas, par la méthode d'analyse biologique. Plus précisément, conformément aux normes japonaises relatives aux médicaments antibiotiques, on a procédé, en utilisant le Bacillus subtilis comme micro-organisme d'essai, à des essais de culture par le procédé du disque de papier, à 37° C, pendant une période de 15 à 20 h.

La composition de la solution était la suivante:

ampicilline sodique: 20 mg/ml extrait galénique: 2-20 mg/ml.

On donne, dans les exemples 1A à 4A, des résultats obtenus en procédant conformément à la méthode expérimentale A.

Méthode expérimentale B:

On intube, au moyen d'un tube de polyéthylène (PE-10), branché sur l'artère fémorale au moyen d'une ligature, des rats ayant un poids de 200 à 230 g, sous anesthésie à l'éther. On fait passer l'autre extrémité du tube PE-10 par voie sous-cutanée jusqu'à la partie cer-vico-dorsale où on fait sortir le tube de la peau et on le fixe au moyen d'une capsule. Après réparation de la plaie dans la partie opérée (c'est-à-dire au bout de 24 h environ), chaque rat est prêt à subir l'expérience.

On administre, au moyen d'une sonde stomacale, une solution contenant de l'ampicilline sodique (5 mg/ml) et un extrait galénique (1 mg/ml) en solution dans de l'eau purifiée, en proportions de 1 ml/200 g de poids corporel du rat et on prélève le sang de manière périodique, au cours du temps, pour des mesures de concentration d'activité selon la méthode d'essai biologique.

Comme micro-organisme d'essai on utilise le Bacillus subtilis et l'on effectue l'essai par la méthode du disque de papier, conformément aux normes japonaises relatives aux médicaments antibiotiques.

Des résultats d'essais effectués conformément à la méthode expérimentale B sont donnés dans l'exemple 5B.

Exemple 1A:

Le tableau 1 indique les résultats obtenus en utilisant un extrait par le n-butanol de Bupleurum falcatum L.

Tableau 1

Concentration de substance pharmacologiquement active dans le sang

Concentration d'extrait de Bupleurum falcatum (mg/ml)

Rat N°

Concentration dans le sang (jim titre/ml)

10 min

20 min

40 min

60 min

90 min

120 min

180 min

240 min

20

1

6,9

17,5

18,4

14,2

9,0

4,1

2,5

2,1

2

5,8

16,0

15,5

14,0

8,0

4,1

2,3

1,7

5

1

3,2

9,0

6,3

4,7

3,3

1,5

1,0

2

2,4

7,5

7,7

5,5

2,9

1,6

0,5

0 (essai à blanc)

1

0,6

0,9

1,1

1,2

0,9

0,5

Exemple 2A :

Le tableau 2 indique les résultats obtenus en utilisant un extrait TN-4-Bu d'écorce de mukurossi en concentration de 2 mg/ml.

Tableau 2

Concentration de substance pharmacologiquement active dans le sang

Rat

N°

Concentration dans le sang (|ig titre/ml)

10 min

20 min

40 min

60 min

90 min

120 min

180 min

240 min

1

3,8

12,0

19,2

17,1

14,5

12,7

8,7

7,7

2

5,7

20,4

23,0

18,4

17,6

14,5

11,3

7,7

3

3,5

11,2

14,0

12,4

7,6

5,3

3,7

3,8

4

9,4

16,5

14,3

8,5

4,7

2,6

1,2

0,5

5 (essai à blanc)

0,6

0,9

1,1

1,2

0,9

0,5

Exemple 3A:

Le tableau 3 indique les résultats obtenus en utilisant un extrait TN-4-E3.5 d'écorce de mukurossi en concentration de 2 mg/ml.

Tableau 3

Concentration de substance pharmacologiquement active dans le sang

Rat

N°

Concentration dans le sang (|ig titre/ml)

10 min

20 min

40 min

60 min

90 min

120 min

180 min

240 min

1

10,3

22,1

27,5

20,0

—

10,3

7,1

—

2

5,4

14,5

19,7

18,1

—

10,9

9,2

8,1

3

13,6

20,6

24,9

22,0

—

14,4

11,1

11,0

4

6,3

15,4

19,2

17,6

—

4,3

3,7

3,1

5 (essai à blanc)

0,6

0,9

1,1

1,2

0,9

0,5

Exemple 4A:

Le tableau 4 indique les résultats obtenus en utilisant un extrait TN-4-E2 d'écorce de mukurossi en concentration de 2 mg/ml.

Tableau 4

Concentration de substance pharmacologiquement active dans le sang

Rat N°

Concentration dans le san g (|ig titre/ml)

10 min

20 min

40 min

60 min

90 min

120 min

180 min

240 min

1

5,6

13,7

19,5

15,0

—

5,5

4,9

—

2

5,5

20,3

25,5

12,8

—

3,1

2,6

2,1

3

5,5

21,1

26,5

16,9

—

5,9

2,6

2,2

4

7,8

20,7

25,0

14,3

—

5,4

3,1

2,8

5 (essai à blanc)

0,6

0,9

1,1

1,2

0,9

0,5

Exemple 5B

Tableau 5

Concentration de substance pharmacologiquement active dans le sang

Rat N°

Concentration dans le sang (|ig titre/ml)

10 min

20 min

40 min

60 min

90 min

120 min

180 min

240 min

1 +

— (essai a blanc)

0,4 0,4

0,9 0,8

2,0 1,2

1,7 0,8

1,0

0,3

0,6 traces

0,4 traces traces traces

2 +

— (essai à blanc)

0,8 0,3

1,8 0,6

2,1 1,3

1,7 0,5

1,2 traces

0,8 traces

0,2 traces traces traces

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

7

652 931

Dans les exemples ci-dessus, les échantillons d'extrait ont été préparés par les procédés décrits ci-dessous.

1) Extrait de Bupleurum falcatum L

On utilise 500 g de hachis de Bupleurum falcatum L bisannuel.

On effectue l'extraction pour ces parties aliquotes de 50 g chacune au moyen de 500 ml de méthanol/50 g, en utilisant un mixer, à la température ambiante, et l'on répète l'opération d'extraction trois fois pour chaque partie aliquote. (En conséquence, 500 g de Bupleurum falcatum L subissent l'extraction par 15 1 de méthanol.) On soumet la couche dans le méthanol à une évaporation de façon à obtenir 122 g d'extrait par le méthanol. On suspend l'extrait par le méthanol dans 750 ml d'eau et l'on soumet la suspension à une double extraction (après dégraissage) par 750 ml d'éther di-éthylique, de façon à obtenir 3 g d'un extrait par l'éther. Lors de la deuxième extraction, il se forme une émulsion que l'on sépare en couches aqueuses. On extrait à cinq reprises ces couches aqueuses par du n-butanol saturé d'eau (quantité totale 1,81) et on les soumet à une évaporation à une température de 38 à 40° C (pour éviter la décomposition thermique de la saponine de racine de Bupleurum) de façon à produire 52 g d'extrait par le butanol.

On lyophilise l'extrait par le butanol et on utilise 3 g du produit ainsi obtenu comme échantillon pour l'essai pharmacologique (cet échantillon était hygroscopique).

2) Extrait d'écorce de mukurossi

On réduit en morceaux, à la main, de l'écorce de mukurossi (100 g) et on dégraisse par immersion dans le benzène froid (température ambiante, 400 ml x 3).

On extrait, par immersion dans le méthanol chaud (70° C, 400 ml x 5) l'extrait galénique dégraissé. On soumet la couche d'extrait par le méthanol à une évaporation de façon à produire 65,6 g d'extrait par le méthanol (TN-4-M). De cet extrait par le méthanol, on garde en réserve 11,4 g et on en suspend 54,3 g dans 350 ml d'eau puis l'on extrait à l'acétate d'éthyle (300 ml x 5). Au cours de cette opération, il se forme une émulsion dans la couche aqueuse. Après évaporation de la couche d'acétate d'éthyle, on obtient 1,26 g (TN-4-4) comme premier extrait, 0,64 g (TN-4-E2) comme second extrait et 1,21 g(TN-4-E,,5) comme extraits numéros trois à cinq, respectivement, soit au total 3,11 g. On soumet encore la couche aqueuse,

après extraction par l'acétate d'éthyle, à une extraction par le N-butanol saturé d'eau (300 ml x 1 fois), suivi d'une évaporation de la couche de butanol, de manière à produire 16,42 g (TN-4-Bu).

Exemple expérimental (II) : saponine isolée 1) Extraction

On réduit en morceaux, à la main, de l'écorce de mukurossi (370 g) et on dégraisse par immersion dans le méthanol froid (température ambiante, 11). On extrait, par immersion dans le méthanol chaud (70° C, 11 x 2) la préparation galénique dégraissée. On soumet la couche d'extrait par le méthanol à une évaporation de façon à obtenir 200 g d'extrait par le méthanol. De cet extrait par le méthanol, on garde 140 g en réserve et on en suspend 60,0 g dans 200 ml d'eau suivi d'une extraction par le n-hexane. Au cours de cette opération, on ajoute 8 ml d'éthanol afin d'éviter la formation d'une émulsion. Après évaporation de la couche de n-hexane, on obtient 280 ml d'un extrait. On soumet la couche aqueuse, après extraction par le n-hexane, à une extraction par l'acétate d'éthyle (200 ml x 6). On évapore la couche d'acétate d'éthyle de façon à obtenir 2,7 g des extraits numéros 1 à 3, et 1,0 g des quatrième au sixième extraits, respectivement. On soumet encore la couche aqueuse, après extraction par l'acétate d'éthyle, à une extraction par le n-butanol saturé d'eau (200 ml x 1), cette opération étant suivie d'une évaporation de la couche de butanol de façon à obtenir 11,4 g d'extrait par le butanol (TN-3-Bu).

2) Séparation

On soumet l'extrait TN-3-Bu (11,4 g) préparé au cours de l'opération précédente à une Chromatographie sur colonne, en utilisant une colonne de gel de silice et un éluant constitué par un mélange ~ d'acétate d'éthyle/éthanol/eau (15/2/0,8; 15/3/1,2) de façon à obtenir les fractions Nos 1 à 50.

L'évaporation du solvant de la fraction N° 31 produit 350 mg d'un résidu que l'on soumet ensuite à une recristallisation à partir d'un mélange méthanol/acétate d'éthyle de façon à obtenir 110 mg de saponine A. ,

L'évaporation du solvant des fractions Nos 19 à 22 produit 1,32 g d'un résidu que l'on soumet à une Chromatographie à travers une colonne de gel de silice en utilisant un éluant constitué par un mélange d'acétate d'éthyle/éthanol/eau (8/2/1) de façon à obtenir les fractions Nos 51 à 100. A partir de 330 mg des résidus restant après évaporation du solvant des fractions Nos 80 et 81, on obtient 270 mg de saponine B par recristallisation à partir d'une solution diluée dans le méthanol.

On soumet le résidu (630 mg) obtenu par évaporation du solvant des fractions N°s 16, 18 et 19 à une Chromatographie sur colonne en utilisant du gel de silice et un éluant constitué par un mélange d'acétate d'éthyle/éthanol/eau (16/2/1) de manière à obtenir les fractions Nos 101 à 110. On soumet également à une Chromatographie à travers une colonne de gel de silice, en utilisant un éluant constitué d'un mélange acétate d'éthyle/éthanol/eau (45/10/1) le résidu (170 mg) obtenu par évaporation du solvant de la fraction N° 17, de manière à obtenir les fractions Nos 111 à 120. A partir du résidu restant après évaporation du solvant des fractions Nos 103 et 112, on obtient 210 mg de saponine C.

3) Essais pharmacologiques

On répète la méthode expérimentale A mais en utilisant, respectivement, les saponines A, B et C, utilisées en concentration de 5 mg/1 au lieu de l'extrait galénique, dans la solution à administrer.

Les exemples 6, 7 et 8 indiquent les résultats ainsi obtenus. Dans chacun de ces exemples, on n'observe aucun dommage de muqueuse (par exemple ablation de muqueuse) ou anomalie telle qu'un point hémorragique, sur le duodénum utilisé pour l'expérience. Ce résultat peut être attribué à la faible toxicité aiguë de l'adjuvant d'absorption de substance pharmaceutiquement active conforme à l'invention, ce qui se comprend aisément compte tenu du fait que les préparations galêniques utilisées selon l'invention ont été largement admises comme médicament végétal ou produit de ce genre.

Exemple 6:

Le tableau 6 indique les résultats obtenus en utilisant la saponine A isolée.

Tableau 6

Concentration de substance pharmacologiquement active dans le sang

Rat

Concentration dans le sang ((ig titre/ml)

N°

10

20

40

60

90

120

180

min mm min mm mm mm mm

1

2,08

6,23

6,64

6,79

5,41

4,58

2,34

2

0,90

3,91

4,43

4,46

2,47

2,07

1,15

3

4,93

7,02

7,32

5,15

2,78

2,34

2,85

4

1,06

2,22

3,93

4,35

3,60

2,67

2,53

5

1,35

4,06

3,52

2,03

1,10

0,89

0,57

6

2,01

5,63

5,15

3,79

2,88

2,07

2,01

(essai à

0,55

0,89

1,28

1,41

1,42

1,25

0,85

blanc)

±0,04

±0,07

±0,09

±0,16

±0,04

+0,12

±0,11

Exemple 7:

Le tableau 7 indique les résultats obtenus en utilisant la saponine B isolée.

5

io

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

652931

8

Tableau 7

Concentration de substance pharmacologiquement active dans le sang

Rat

Concentration dans le sang ([xg titre/ml)

N"

10

20

40

60

90

120

180

min min mm mm mm mm min

1

3,18

6,34

4,08

2,62

1,61

1,04

1,11

2

3,18

9,25

8,63

6,23

2,58

1,72

1,19

3

1,73

4,63

5,98

4,28

3,07

2,70

3,14

(essai à

0,55

0,89

1,28

1,41

1,42

1,25

0,85

blanc)

±0,04

±0,07

±0,09

±0,16

±0,04

±0,12

±0,11

Exemple 8:

Le tableau 8 indique les résultats obtenus en utilisant une saponine C isolée.

Tableau 8

Concentration de substance pharmacologiquement active dans le sang

4) Essais de suppositoire (exemples 11-15)

On a étudié l'efficacité des saponines A, B et C, sous forme de suppositoires, en effectuant des essais selon une méthode similaire à la méthode expérimentale A décrite ci-dessus.

Pour ces essais, des rats ayant un poids de 180 à 220 g ont été . anesthésiés avec 30 mg/kg de pentobarbital sodique et fixés par supination sur un matelas à eau constitué par une pièce métallique à travers laquelle on fait circuler de l'eau dont la température est s réglée à la valeur constante de 39°C. On introduit dans l'anus un suppositoire à raison de 1 g/kg de poids corporel du rat et on pousse le suppositoire au moyen d'une tige en verre jusqu'à ce qu'il atteigne le point de raccordement du pubis.

Les suppositoires soumis à l'essai avaient la composition sui-i° vante:

Ampicilline sodique: 50 mg/kg-rat,

Saponine A, B ou C: 0,5-2 mg/kg-rat, et

Véhicule* : quantité restante pour l'obtention d'une proportion de 1 g de suppositoire/kg-rat.

* Witepsol® produit par Dynamit Nobel A.G.

La nature de la saponine et la quantité de cette substance utilisée dans chacun des exemples étaient les suivantes:

Exemple 11: saponine A 0,5 mg/kg-rat.

20 Exemple 12: saponine A 1,0 mg/kg-rat.

Exemple 13: saponine A 2,0 mg/kg-rat.

Exemple 14: saponine B 1,0 mg/kg-rat.

Exemple 15: saponine C 1,0 mg/kg-rat.

25 Chacun des rats auxquels on a administré un suppositoire de la manière mentionnée ci-dessus a subi une saignée par les veines jugulaires, à des intervalles déterminés, après le moment de l'administration du suppositoire, comme indiqué au tableau 8A, et on a mesuré, par la méthode d'essai biologique, la concentration en ampicilline 30 sodique dans chaque échantillon de sang. Ainsi, on a effectué l'essai par la méthode du disque de papier conformément aux normes japonaises relatives aux antibiotiques, en utilisant le Bacillus subtilis comme micro-organisme d'essai.

Les résultats des essais mentionnés ci-dessus sont indiqués au 35 tableau 8A.

Rat

Concentration dans le sang (fxg titre/ml)

N°

10

20

40

60

90

120

180

mm min mm mm mm min min

1

2,2

5,97

5,44

4,27

3,00

2,07

1,48

2

1,15

4,11

5,28

5,32

3,92

3,63

3,08

3

0,40

2,44

3,38

3,75

2,28

2,06

1,79

(essai à

0,55

0,89

1,28

1,41

1,42

1,25

0,85

blanc)

±0,04

±0,07

±0,09

±0,16

±0,04

±0,12

±0,11

Tableau 8A

Concentration de substance pharmacologiquement active dans le sang

Concentration dans le sang (|ig/ml)

5 min

10 min

15 min

35 min

60 min

100 min

Exemple 11 (n=6) Exemple 12 (n=6) Exemple 13 (n=4) Essai à blanc (n = 8)

5,91 ±3,08 8,27 + 3,37 13,56±3,12 3,12±1,66

8,13 ±3,29 12,03 ±3,20 14,43 ±3,48 3,98 ±1,89

7,57 ±2,36 10,41 + 3,06 12,61 ±2,96 3,74±1,80

4,28 ±1,89 5,71 ±1,49 6,30 ±0,97 1,91 ±0,89

2,49 + 1,38 3,16±0,93 2,76 ±0,40 0,93 ±0,54

0,92 ±0,90 1,85+0,64 1,02±0,11 trace

10 min

20 min

30 min

50 min

100 min

150 min

Exemple 14 (n=3) Exemple 15 (n=4)

10,73 ±5,42 11,72 ±4,57

9,39 ±5,27 9,33 ±0,88

6,30 ±3,22 6,30 + 1,22

3,16±0,87 3,37 ± 1,31

1,58 ±0,91 1,15+0,53

1,28 ±1,21 0,54+0,37

Les propriétés physiques et chimiques des saponines A, B et C, tableau 9. Les résultats de mesure de résonance magnétique nu-préparées de la manière qui vient d'être décrite, sont indiqués au cléaire au carbone 13 (13C-NMR) sont indiqués au tableau 10.

Tableau 9

Aspects

Saponine A

Saponine B

Saponine C

Poudre blanche

Poudre blanche p.f. (°C)

227-230 (MeOH-EtOAc)

239-240 (aq.MeOH)

indéterminé

Rotation optique

15°

[a] j-j = + 12,1° (C=l,03, MeOH)

1 oo

[a]Dö =+5,96° (C= 1,36, MeOH)

15°

[a]p = —14,3' (C = 0,58, MeOH)

;lyc<

M

2

3

4

5.

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

17

18

19

20

21

22

23

24

25

26

27

28

29

30

a 1'

2'

3'

4'

5'

al'

2'

3'

4'

5'

6'

onc

■mil

V

2'

r

4'

5''

9

652 931

Aspects

Saponine A

Saponine B

Saponine C

Poudre blanche

Poudre blanche io KBr -1 IR v cm max

—COOH

-OH

1690 3400

El — Mass (m/z) (acétate)

259 (ara1) 489 (rha-ara)

259 (xyl) 489 (rha-xyl) 705 (ara-rha-xyl)

259 (ara terminal) 489 (rha-ara)

1 ara = arabinose; rha = rhamnose; xyl = xylose.

Tableau 10

Saponine A

Saponine B

Saponine C

Saponine PG ( Akebia quinata Decne.)

38,9

38,8

26,1

81,2

80,9

81,3

80,9

43,5

43,4

47,7

47,5

47,8

47,5

18,2

18,4

18,3

33,2

39,7

39,6

39,7

39,6

48,1

48,0

36,8

23,7

122,5

122,3

122,6

122,3

144,6

144,4

144,7

144,4

42,0

28,2

28,3

28,1

23,7

46,5

46,6

46,5

42,0

41,8

42,0

41,8

46,5

46,6

46,5

30,9

30,8

30,9

30,8

34,2

34,1

34,2

33,2

64,1

63,9

64,1

64,0

14,0

14,1

13,9

14,0

16,0

16,1

16,0

17,4

.26,1

26,1

180,1

179,8

180,2

179,7

33,2

23,7

104,4

104,3

104,4

104,2

75,2

75,4*

75,4

75,3

74,6

74,8

74,6

74,7

69,3

69,4

65,8

65,9

65,8

101,2

101,1

101,2

101,0

71,7

71,6

71,7

82,5

82,6

82,2

82,6

72,9

72,7

72,3

72,6

69,3

69,4

18,2

18,3

ara xyl ara(fur)

xyl

107,0

107,1

110,8

107,0

72,9

75,2*

(79,2)

75,3

74,3

78,1

(78,7)

78,0

69,3

70,8

87,2

70,8

66,9

67,1

62,7

67,1

15

En se fondant sur les résultats de la mesure de "C-NMR, on a déterminé les structures des saponines A, B et C en procédant de la manière suivante.

D'après les résultats de mesure de 13C-NMR, indiqués ci-dessus, 20 on constate que chacun des composés présente trois groupements sucres du fait que le nombre des annomères est de trois. On soumet ensuite chacun de ces composés à une hydrolyse en milieu acide, et on identifie les sucres par les méthodes d'analyse TLC et GLC, ce qui permet d'obtenir des résultats indiqués ci-dessous.

Tableau 11

Saponine A

arabinose, rhamnose

Saponine B

arabinose, rhamnose, xylose

Saponine C

arabinose, rhamnose

Par mesure de 13C-NMR, on a pu déterminer que l'aglycone 35 contenu dans chacune des saponines était l'hédéragénine.

La mesure de FD-MS dans laquelle apparaît m/z 905 (M+Na)+ suggère le fait que la saponine A a deux molécules d'arabinose et une molécule de rhamnose liées à l'hédéragénine.

D'autre part, on effectue une hydrolyse enzymatique partielle, au 40 moyen de pectinase I brute, et on sépare la prosapogénine (désignée par le terme de prosapogénine A) par Chromatographie sur colonne de gel de silice. D'après les résultats de mesure de 13C-NMR, on trouve qu'elle est entièrement identique à la saponine Po [Kawasaki et al., «Chem. Pharm. Bull.», 24,1021 (1976)] obtenue à partir 45 d'écorce d'Akebia quinata Decne. Dans le tableau 12, les résultats obtenus avec les deux composés sont comparés.

( Tableau en page suivante)

Ainsi, on identifie la prosapogénine A en tant qu'hédéragénine 3-50 0-a-L-rhapyr-(l -►2)-a-L-arapyranoside. Le groupe sucre terminal, scindé par hydrolyse enzymatique partielle, a été identifié par les méthodes TLC et GLC en tant qu'arabinose.

D'après les résultats ci-dessus, on identifie les piques de mesure de 13C-NMR comme indiqué au tableau 10, et on attribue la 55 formule structurelle indiquée ci-dessus à la saponine A.

On constate que la saponine B présente des résultats de I3C-NMR complètement identiques à ceux de la saponine PG de VAkebia quinata Decne. (qui sont également indiqués au tableau 10), comme publiés par R. Higuchi et al. [«Chem. Pharm. Bull.», 24, 1021 «o (1976)] et, par conséquent, on attribue à ce composé la formule structurelle indiquée ci-dessus.

Après hydrolyse enzymatique partielle, la saponine C correspond à une tache ayant une valeur de Rf identique à celle de la prosapogénine A, susmentionnée, sur TLC. En tenant également compte du 65 fait que la coupure du groupe terminai se produit avec la naringi-nase ou l'hespériginase de manière similaire au cas de la pectinase I, on peut conclure que la saponine C présente des groupes sucres terminaux différents de ceux de la saponine A.

652 931

10

Tableau 12

Prosapogénine A

Saponine Po (Akebia quinata Decne.)

aglycone

C-l

38,9

2

26,1

3

81,1

81,0

4

43,5

43,4

5

47,7

6

18,2

18,1

7

32,8

8

39,7

9

48,1

10

36,9

36,8

11

23,8

12

122,7

122,5

13

144,7

14

42,1*

42,1

15

28,3

16

23,8

17

46,6

18

42,0*

42,1

19

46,6

46,4

20

31,0

30,9

21

34,2

22

33,2

23

64,0

63,9

24

14,0

13,9

25

16,1

16,0

26

17,5

17,4

27

26,1

28

180,2

180,1

29

33,2

30

23,8

ara C-l'

104,2

104,3

2'

75,8

3'

74,4

74,6

4'

69,1

69,2

5'

65,3

65,5

rha C-l"

101,5

101,6

2"

72,3

72,5

3"

72,3

4"

74,1

5"

69,7

6"

18,4

18,5

D'autre part, afin de déterminer la position des groupes sucres liés, on effectue une perméthylation selon la méthode de Hakomori [«J. Biochem. (Tokyo)», 55, 205 (1964)], suivie par méthanolyse et GLC, ce qui confirme la présente d'arabinose en tant que groupement sucre terminal.

D'après les résultats indiqués ci-dessus, on attribue à la saponine C la formule structurelle indiquée ci-dessus.

R

Claims

652 931

1) Akebia quinata Decne. ou plantes appartenant à la même famille (Lardizabalaceae)',

1. Composition adjuvante pour aider l'absorption d'une substance pharmacologiquement active administrée par l'intermédiaire de l'appareil digestif, caractérisée par le fait qu'elle comprend un extrait galénique contenant un composé du type saponine ou un produit isolé à partir d'un tel extrait.

2) Fat sia japonica Decne. et Pianch. ;

2. Composition selon la revendication 1, caractérisée par le fait qu'elle comprend un extrait galénique contenant un composé du type saponine ou un produit isolé à partir d'un tel extrait et un véhicule acceptable du point de vue pharmaceutique.

2

REVENDICATIONS

3) Caulophyllum robustum Maxim. ;

3. Composition selon la revendication 1, dans laquelle l'extrait galénique est un extrait d'une plante choisie dans le groupe constitué par:

4. Composition selon la revendication 1, caractérisée par le fait que le produit isolé est une saponine triterpénoïde représentée par la formule:

4) Hedera rhombea Bean;

'5 8. Composition pharmaceutique selon l'une des revendications 5 à 7, caractérisée par le fait que la substance pharmacologiquement active est un antibiotique du type ß-lactame.

5 d'un extrait galénique contenant un composé du type saponine, ou d'un produit isolé à partir d'un tel extrait, et d'une quantité inoffensive et efficace d'une substance pharmacologiquement active.

5. Composition pharmaceutique, administrable par l'intermédiaire de l'appareil digestif et renfermant la composition adjuvante selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisée par le fait qu'elle comprend une combinaison d'une quantité inoffensive et efficace

5) Clematis chinensis Osbeck;

6. Composition pharmaceutique selon la revendication 5, caractérisée par le fait que l'extrait galénique est un extrait d'une plante io choisie dans le groupe spécifié dans la revendication 3.

6) Pulsatilla eernua Spreng;

7. Composition selon la revendication 5, caractérisée par le fait que le produit isolé à partir de l'extrait galénique est une saponine triterpénoïde représentée par la formule spécifiée dans la revendication 4.

7) Sapindus mukurossi Gaertn. ;

8) Panax japonicum C.A. Meyer;

9. Composition pharmaceutique selon la revendication 8, caractérisée par le fait que l'antibiotique du type ß-lactame est choisi dans

20 le groupe formé par les pénicillines et les céphalosporines.

9) Glycyrrhiza glabra L. var. glandulifera Regel et Herder, Gly-cyrrhiza uralensis Fisher ou plantes appartenant à la même famille (Leguminosae);

10. Procédé de préparation de la composition selon la revendication 4, caractérisé par le fait qu'il comprend la préparation d'une saponine triterpénoïde en soumettant des pelures de Sapindus mukurossi Gaertn. à une extraction par un alcool aliphatique inférieur ou

25 par un mélange d'eau et d'alcool aliphatique inférieur et en séparant ensuite des fractions d'extraits ainsi obtenus la saponine triterpénoïde représentée par la formule:

30

-CH,

COOH

O OH

dans laquelle R est HO

©

HOH2C yO .

OH

HO

55

OH

O OH

10) Polygala senega L. ou Polygala senega L. var. latifolia Torrey et Gray;

11) Platycodon grandiflorum A.D.C. ;

12) Polygala tenuifolia Willd. ;

13) Achyranthes fauriei Lev. et Van ou Achyranthes bidentata Blume;

14) Cyclamen europaeum;

15) Primula officinalis',

16) Bupleurumfalcatum L. ou ses variétés (Umbelliferae);

17) Panax ginseng C.A. Meyer;

18) Panax notoginseng Burkill, et

19) Panax quinquefolium L.

11. Procédé selon la revendication 10, caractérisé par le fait que l'on effectue l'extraction des pelures de Sapindus mukurossi Gaertn. par un alcool aliphatique inférieur ou un mélange d'eau et d'un tel alcool, après avoir soumis ces pelures à un traitement de dégrais-60 sage.

dans laquelle R est HO

OH

HOH2C ,0

OH

HO

OH