CH401989A

CH401989A - Procédé de préparation de la phosphocréatine

Info

Publication number: CH401989A
Application number: CH752565A
Authority: CH
Inventors: Anatol Jesus
Original assignee: Kuhlmann Ets
Priority date: 1958-09-26
Filing date: 1959-09-15
Publication date: 1965-11-15
Also published as: GB937931A; DE1793730C3; DE1793730A1; CH395110A; DE1793730B2; DE1518793A1

Description


  



  Procédé de préparation de la phosphocréatine
 La présente invention concerne un procédé de préparation de la   phosphocréatine.   



   La   phosphocréatine    a été isolée du muscle par
C. H. Fiske et Subarrow (Journal of   Biological    Cbe  mistry,    81, 1929, p. 620). Ces auteurs ont établi aussi sa constitution qui répond à la formule :
EMI1.1     

 Le rôle, que joue cette substance dans la contraction musculaire, est bien connu en tant que donneur de l'ion phosphate, d'où dérive l'appellation        Phosphagene    .   



   Jusqu'à 1938, la   phosphooréatime    était isolée du muscle sous forme de sels   alcalmo-terreux.    C'est à cette date que K. Zeile et G. Fawaz (Hoppe Seyler's
Zeitschrift fur Physiologische Chemie, 256, 1938, p. 1994) réussirent à obtenir de petites quantités de   phosphocréatin, ate    de calcium, en   phosphorylant    la créatine, en milieu très fortement basique, par de l'oxychlorure de phosphore.



   A. H. Ennor et L. A.   Stocken (Biochemical   
Journal, 43, 1948, p. 190) ont fait appel à la technique de phosphorylation de   Zeile,    puis à une variante du procédé d'isolement de   Fiske et ont obtenu    également de petites quantités de phosphooréatinate de sodium tétra ou   hexahydraté.    C'est, à peu de chose près, le procédé d'Ennor et Stocken qui est décrit dans Biochemical Preparations V, 1957, p. 9.



  Ce procédé est long et les séparations sont   labo-    rieuses. Tous les autres essais de synthèse de la phosphocréatine ont été infructueux.



   Le présent t procédé permet la fabrication à l'échelle industrielle de la   phosphocréatine,    par exemple sous forme de son, sel de sodium. Il est caractérisé en ce que   l'on,    soumet la   dibenzyloxyphos-      phorylcréatinine    de formule :
EMI1.2     
 à une   hydrogénolyse    et à l'action de la chaleur en présence   d'alcali.   



   Le composé de formule ci-dessus est, décrit dans le brevet   Nô 395110.   



     L'hydrogénolyse    peut être effectuée en présence d'un catalyseur   d'hydrogénation tel que le moir    palladié. On opère, par exemple, en milieu   hydro-alco-    olique. On peut   faire Toagir la dibenzyloxyphospho-      rylcréatinine    d'abord avec l'hydrogène à la tempéra  tu. re ambiante    en présence d'alcali et ensuite avec de l'alcali sous l'action de la chaleur ou encore faire réagir le   diester    avec l'hydrogène et l'alcali simultanément en chauffant le milieu. réactionnel.



   L'absorption d'hydrogène est rapide.



   On obtient ainsi une   phosphocréatine très pure,    exempte de phosphates minéraux et de créatine libre.



  Le produit cristallise   avec 4 molécules d'eau    de cris  tallisation. Il    est stable, n'est pas hygroscopique et se conserve très bien en flacons bouchés, sans   précau-    tions spéciales.



   Dans l'exemple   ci-dessous donné à titre non    limitatif les parties indiquées sont en poids, sauf indication contraire. 



  Exemple :
 186, 5 parties de la   dibenzyloxyphosphorylcréa-      tinine    sont dissoutes dans un mélange de 500 parties en volume de soude 2N et 150 parties en volume d'alcool. A cette solution on ajoute du noir palladié (préparé par hydrogénation d'un mélange de 93 parties de noir de carbone, de 1000 parties d'eau et de 9, 3 parties de chlorure de palladium) et l'on hydrogène à température et pression ordinaires. 20500 parties en volume d'hydrogène sont absorbées en deux heures. On'sépare le catalyseur par filtration ; on   le lave avec 250+100+10    parties   d'eau.    Au filtrat on ajoute   47,    4 parties de soude caustique dissoutes dans 85 parties d'eau.

   On chauffe en 10 minutes à   80  C.    La solution est ensuite refroidie à 10 C environ ; on ajuste à pH 7, 8 en présence de phénolphtaléine avec 1182 parties en volume d'acide chlorhydrique normal ; on filtre et Ó cette solution on ajoute 9480 parties   d'alcool.    Le sel   disodique    de la phosphocréatine se sépare en forme d'huile.



  On abandonne à la cristallisation pendant 2 ou 3 jours à la température ambiante. On filtre, lave à   l'alcool à 80  /n    puis à l'alcool absolu et à l'éther.



  On-sèche dans le vide à la température ordinaire sur   P.,    et sous   une pression d'environ 20 mm    de   mercure. On obtient ainsi    163 parties de sel disodique de la phosphocréatine   hexahydratée,    soit un rendement de 90 %.



   Cette   phosphocréatine    présente une courbe de   titration    identique a celles décrites dans la   littéra-    ture.



  Analyse pour   C. H8NsO, PNa.    6 H2 2O P. M. 363   Calculé"/ : p    8, 54 Na 12, 67
Trouvé   alun :    8, 54 12, 66
 8, 77 12, 92
 Pour la faire recristalliser, la   phosphocréatine    est dissoute dans 7 parties d'eau à froid et après filtration on ajoute 21 parties d'alcool et   l'on    procède comme précédemment. Le rendement de la recristal  lisaltion est d, e 85  /0.   



  Analyse pour C4H8N3O5Pna2. 6 H2O P. M. 363
CalculÚ % :
C 13, 22; H 5, 51 ; N 11, 57 ; P 8, 54 ; Na 12, 67 ;
Trouve  /o :
C 13,94; H 5,40; N 11,95; P 8,58; Na 12,74;
CalculÚ %: H2O 29,75
TrouvÚ %: 28,91
 Cet   hexahydrate    du sel disodique de la phosphocréatine a été séché sous un vide de 3   it    et à   60ç) C    jusqu'à poids constant puis on l'a laissé se   réhydrater    à l'air libre jusqu'à poids constant. Le produit renferme alors 4 molécules d'eau de cristallisation.



  Analyse pour C, H8N3O5Pna2. 4 H.   O P.    M. 327   Calculé"/.    :
C 14, 68 ; H 4, 89 ; N 12, 84 ; P 9, 48 ; Na 14, 07 ;
TrouvÚ % :
C 14, 66 ; H 5, 78 ; N 12, 73 ; P 9, 17 ; Na 13, 61 ;
C   14,    45 ; H 5, 68 ; N 12, 40 ;
 On   obtient, d'ailleurs,    parfois d'emblée le tétrahydrate.



   La courbe de titration est identique aux   précé-    dentes. Ces données sont en parfait accord avec celles de A. H. Ennor et L. H. Stocken   (Biochem.    J.



  43, 1948, p. 190) et de Peanasky et col. (Biochemical préparations V, 1957, p. 9) qui ont préparé des petites quantitÚs de sel disodique de la phosphocréatine par u, procédé différent.

Claims

REVENDICATION Procédé pour la préparation de la phosphocréa- tine, caractérisé en ce que l'on soumet la dibenzyloxyphosphorylcréatinine à une hydrogénolyse et à l'action de la chaleur en présence d'alcali.