Procédé de préparation d'acide ptéroy1glutainique. La présente invention a pour objet un pro <B>cédé</B> de préparation d'acide ptéroy-Iglutamique.
Cet acide, dont la désignation chimique est acide N-[4-1[(2-amino-4-hydroxy-6-pyrimido- [4,5-b] <B>-</B> pyrazy-1) <B>-</B> méthyl] <B>-</B> amino <B>1</B> -benzoyll <B>-</B> glutamique, est précieux dans<B>le</B> traitement de l'anémie macroeytique, la sprue et a-titres ma ladies dit sang apparentées.
Le procédé selon l'invention est caractérisé en ce que l'on fait réagir: de la 2,4,5-triamino-6-hydroxypyrimidine, une 1,1,3-trihaloacétone, et de l'acide p-aminobenzoylulutamiq-Lie.
Le procédé peut être réalisé en faisant réagir simultanément les trois réactifs ou au choix, en faisant réagir d'abord deux des trois réactifs puis le troisième avec le produit de cette réaction.
La réaction peut être effectuée<B>à</B> une tem pérature comprise entre<B>0</B> et<B>1000 C</B> et<B>à</B> un <B>pH</B> de<B>1 à 7</B> (de préférence compris entre<B>1</B> et<B>5).</B> La réaction peut être représentée par l'équation suivante:
EMI0001.0016
Dans ces foi-mules, X représente un atome d'halogène tel que le chlore, le brome ou l'iode et R représente le reste de l'acide glutamique.
La 2,4,5-t-riamino-6-hydroxypyrimidine petit être utilisée sous l'une ou l'autre de ses formes tautomères et, de préférence, sous forme d'un sel d'acide (sulfate, chlorhydrate).
Les 1,1,3-trihaloacétones sont également des composés connus. Les halogènes substituants peuvent être identiques ou différents. Exemple<B>1:</B> <B>A</B> une solution de 12,2 parties de ehlorure de baryum dihydraté dans<B>350</B> parties d'eau <B>à</B> 601, <B>C,</B> on ajoute<B>12,9</B> parties de sulfate de 2,4,5<B>-</B> triamino <B>- 6 -</B> hydroxy -pyrimidine. Après agitation<B>à 600 C</B> pendant<B>10</B> minutes, le mé lange est refroidi<B>à -100 C</B> et additionné de <B>13,
3</B> parties d'acide p-aminobenzoylglutamique. Le<B>pH</B> de la solution est immédiatement ajusté entre<B>3</B> et<B>3,5</B> environ par addition d'une solu tion de soude caustique<B>à</B> 201/o.
On ajoute alors lentement et en agitant en l'espace de<B>50</B> minutes une solution de<B>10,3</B> par ties de 1,1-dichloro-3-bromopropanone-2 dans <B>15</B> parties d'acide acétique glacial. On main tient une température de 400<B>C</B> pendant cette addition et un<B>pH</B> de<B>3 à 3,5</B> par -une addi tion nouvelle de solution de solide caustique<B>à</B> 201/o.
L'addition achevée, on agite le mélange pendant<B>15</B> minutes<B>à</B> 401, C puis on refroidit <B>à 151> C</B> par addition de glace. Après filtration et lavage du précipité au moyen d'eau et d'alcool, on obtient<B>23,5</B> parties d'un solide brun formé de sulfate<B>de</B> baryum et du pro duit de la réaction contenant l'acide ptéroyl- glutamique.
Le produit contient environ 10,8% d'acide ptéroy1glutamique. Il peut être employé tel que comme produit d'addition<B>à</B> la nourriture des animaux, mais dans la plupart des cas, particulièrement dans son emploi comme agent thérapeutique pour les hommes, il doit d'abord être purifié. La purification peut être réalisée par divers procédés, le procédé suivant étant l'un des préférés.
Le produit brut de la réaction est dissous dans de l'eau de chaux chaude<B>à</B> la concen tration d'environ<B>1</B> partie d'acide ptéroyl- glutamique vrai pour<B>100</B> parties de solution. La température de la solution est de préfé rence d'environ 701, <B>C</B> et le<B>pH</B> de<B>11</B> environ. La solution chai-ide est filtrée de manière<B>à</B> enlever les produits insolubles et ajustée<B>à</B> un pH de<B>3 à</B> 4. L'acide ptéroy1glutamique qui précipite est recueilli par filtration et est très pur.
Pour purifier encore l'acide ptéroy1glutami- que, on le traite au moyen d'acide eh#lorliv(li-i- que concentré<B>à</B> raison de<B>100</B> parties enviroi, d'acide chlorhydrique pour<B>5</B> parties en poids d'acide ptéroy1glutamique vrai. La majeure partie de la matière se dissout en donnant -une solution brune limpide. On ajoute<B>25</B> parties de charbon de bois activé et au bout, de vingt minutes on filtre le mélange.
Le gâteau du filtre est lavé a-Li moyen d'environ<B>30</B> parties d'acide chlorhydrique concentré et le filtrat et les eaux de lavage mélangées sont étendas au moyen de<B>100</B> parties d#eau et refroidis vers <B>50 C.</B> Au bout d'une heure environ, on recueille le précipité sur un filtre, on le lave<B>à.</B> l'eau et<B>à</B> l'acétone, puis on le sèche. La pareté du produit ainsi obtenu est supérieure<B>à</B> 80%; il convient pour la plupart des emplois théra peutiques.
<I>Exemple</I> _9: <B>A</B> une solution de 12,2 parties de chlorure de baryum dihydraté dans<B>350</B> parties d'eau<B>à</B> <B>600</B> C, on ajoute<B>12,9</B> parties de sulfate de 2,4,5-triamino-6-hydrox#7pyrimidine. Après agi tation<B>à</B> 601, <B>C</B> pendant<B>10</B> minutes, on refroi dit le mélange<B>à</B> 40"<B>C</B> et on ajoute<B>13,3</B> parties d'acide p-amino-benzo#-Iglutamique. On règle immédiatement le<B>pH</B> (le la solution entre<B>3</B> et<B>3,5</B> par addition de solution de solide eaus- tique <B>à</B> 20 %.
On ajoute alors goutte<B>à</B> goutte en agitant, en l'espace de<B>50</B> minutes,<B>10,3</B> parties de 1,3- dichloro-1-bromo-propanoiie-'2 dissoutes dans <B>15</B> parties d'acide acétique glacial. On main tient une température de 400<B>C</B> pendant cette addition et Lin<B>pH</B> de<B>3 à</B> 1345 par addition supplémentaire de solution de soude caustique <B>à</B> 20 %.
L'addition achevée, le mélange est agité. pendant<B>15</B> minutes<B>à</B> 4011C puis refroidi<B>à</B> <B>150 C</B> par addition de glace. Le mélange est filtré et, après lavage au moyen d'eau et d'al <B>cool,</B> on obtient 20 parties dun solide brun consistant en sulfate de baryum et en pro duit de la réaction contenant l'acide ptéro#7J- glutamique. On obtient encore<B>1,5</B> parties d'un produit plus pur par filtration de la liqueur mère après repos.
Le produit de cet exemple et des exemples suivants peut également être purifié par le <B>c</B> procédé décrit dans l'exemple<B>1.</B> <I>Exemple</I> 3: <B>A</B> une solution de 12,2 parties de chlorure de baryum dihydraté dans<B>350</B> parties d'eau <B>à 60" C</B> on ajoute<B>12,9</B> parties de sulfate de 2,4,5-triamino-6-hydroxypyrimidine. Après <B>10</B> minutes d'agitation<B>à</B> 60" <B>C,</B> on refroidit le mélange<B>à</B> 401, <B>C</B> et on ajoute<B>13,3</B> parties d'acide p-aminobenzoyl,)-lutamiqiie. Le<B>pH</B> de la solution est immédiatement ajusté<B>à 3-3,
5</B> par addition de solution de soude caustique<B>à</B> 201)/o.
On ajoute alors goutte<B>à</B> goutte en agitant en l'espace de<B>25</B> minutes de la 1,1,3-tribronio- acétone brute contenant<B>10,3</B> parties de 1,1,3- tribromoacétone vraie. On maintient une tem pérature de 401, <B>C</B> pendant l'addition et un<B>pH</B> de<B>3 à</B> 4 par une nouvelle addition de solution de soude caustique<B>à</B> 20%. L'addition achevée, le mélan-e est agité pendant<B>15</B> minutes<B>à</B> 40, <B>C</B> puis refroidi<B>à, 15, C</B> par addition de glace.
Après filtration du mélange, lavage<B>à</B> l'eau et<B>à</B> lalcool., on obtient<B>23</B> parties dema- tière solide brune formée de sulfate de baryum et du produit de la réaction contenant l'acide ptéroylglutamique.
<I>Exemple</I> -1: <B>A</B> une solution de 12,2 parties de chlorure <B>de</B> baryum dibydraté dans<B>350</B> parties d'eau <B>à<I>60, C</I></B> on ajoute<B>12,9</B> parties de sulfate<B>de</B> 2,4,5-triamiiio-6-hydroxvpyrimidiiie. Après ap- tation <B>à</B> 601> <B>C</B> pendant<B>10</B> minutes, le mélanele est refroidi<B>à</B> 401, C et additionné<B>de 13,3</B> par ties d'acide p-aminobenzovl,-I-Litaiiiique. Le<B>pH</B> de la solution est immédiatement ajusté<B>à</B> <B>3-3,
5</B> environ par addition de solution de soude caustique<B>à</B> 20%.
On ajoute alors goutte<B>à</B> goutte en agitant en l'espace de 45 minutes une solution de 14,7 parties de 1,1,3-tribromopropanone-2 dans <B>15</B> parties d'acide acétique. On maintient une température de 400<B>C</B> au cours de l'addition et le pH de la solution est maintenu entre<B>3</B> et <B>3,5</B> par une nouvelle addition de solution de soude caustique<B>à</B> 201/o. L'addition achevée, le mélange est agité pendant encore 20 minutes<B>à</B> 401, <B>C</B> puis re froidi<B>à 15" C</B> par addition de glace. Après lavage du précipité<B>à</B> l'eau et<B>à</B> lalcool, on obtient 24,5 parties d'un solide brun formé de sulfate de baryum et de l'acide folique brut.
L'essai montre que la matière filtrée et lavée contient<B>11,6</B> '/o diacide ptéroy1glutamique.
<I>Exemple<B>5:</B></I> <B>A</B> une solution de 12,2 parties de chlorure de baryum dihydraté dans<B>350</B> parties d'eau<B>à</B> <B>600</B> C on ajoute<B>12,9</B> parties du sulfate de '->,4,5-triamino-6-hydroxy yrimidine. Après <B>.</B> p a---itation <B>à 600 C</B> pendant<B>10</B> minutes, le mé lange est refroidi<B>à</B> 400<B>C</B> et additionné de <B>13,3</B> parties d'acide p-aminobeiizovlglutamique. Le<B>pH</B> de la solution est immédiatement ajusté vers 3-3,
5 par addition de solution de soude ea Listique <B>à</B> 20 %.
On ajoute alors goutte<B>à</B> goutte en agitant, en l'espace d'une heure<B>à</B> 401, <B>C,</B> une solution de<B>7,3</B> parties<B>(0,05</B> mol.) de 1,1,3-trichloro- propanone-2 dans<B>15</B> parties d'acide acétique. Le<B>pH</B> du mélange est maintenu entre<B>3</B> et<B>3,5</B> par addition de solution de soude caustique <B>à</B> 20<B>0/0.</B>
L'addition terminée, le mélange est agité<B>à</B> 401, <B>C</B> pendant<B>15</B> minutes encore, puis refroidi <B>à</B> 151, <B>C</B> par addition de glace. Après encore <B>10</B> minutes d'agitation, on obtient par filtra tion et lavage du précipité<B>à</B> l'eau et<B>à</B> l'alcool 20 parties d'une matière solide brune formée de sulfate de bar#-um et d'acide folique brut.
Process for the preparation of pteroylglutainic acid. The present invention relates to a <B> Assigned </B> process for the preparation of pteroy-Iglutamic acid.
This acid, whose chemical designation is N- [4-1 [(2-amino-4-hydroxy-6-pyrimido- [4,5-b] <B> - </B> pyrazy-1) <B > - </B> methyl] <B> - </B> amino <B> 1 </B> -benzoyll <B> - </B> glutamic, is valuable in <B> the </B> processing of macroeytic anemia, sprue and a-titles ailments said blood related.
The process according to the invention is characterized in that one reacts: 2,4,5-triamino-6-hydroxypyrimidine, a 1,1,3-trihaloacetone, and p-aminobenzoylulutamiq-Lie acid .
The process can be carried out by reacting all three reactants simultaneously or, as desired, by reacting first two of the three reactants then the third with the product of this reaction.
The reaction can be carried out <B> at </B> a temperature between <B> 0 </B> and <B> 1000 C </B> and <B> at </B> a <B> pH </B> from <B> 1 to 7 </B> (preferably between <B> 1 </B> and <B> 5). </B> The reaction can be represented by the following equation:
EMI0001.0016
In these faith-mules, X represents a halogen atom such as chlorine, bromine or iodine and R represents the remainder of glutamic acid.
2,4,5-t-riamino-6-hydroxypyrimidine can be used in one or the other of its tautomeric forms and, preferably, in the form of an acid salt (sulfate, hydrochloride).
1,1,3-trihaloacetones are also known compounds. Substituting halogens can be the same or different. Example <B> 1: </B> <B> A </B> a solution of 12.2 parts of barium chloride dihydrate in <B> 350 </B> parts of water <B> to </ B > 601, <B> C, </B> add <B> 12.9 </B> parts of 2,4,5 <B> - </B> triamino <B> - 6 - </ B> hydroxy -pyrimidine. After stirring <B> at 600 C </B> for <B> 10 </B> minutes, the mixture is cooled <B> to -100 C </B> and added to <B> 13,
3 </B> parts p-aminobenzoylglutamic acid. The <B> pH </B> of the solution is immediately adjusted to between approximately <B> 3 </B> and <B> 3.5 </B> by adding a caustic soda solution <B> to </B> 201 / o.
A solution of <B> 10.3 </B> parts of 1,1-dichloro-3-bromopropanone-2 in <B> 10.3 </B> parts is then added slowly and with stirring over the space of <B> 50 </B> minutes. B> 15 </B> parts of glacial acetic acid. A temperature of 400 <B> C </B> is maintained during this addition and a <B> pH </B> of <B> 3 to 3.5 </B> by a new addition of solution of caustic solid <B> at </B> 201 / o.
When the addition is complete, the mixture is stirred for <B> 15 </B> minutes <B> at </B> 401, C and then cooled to <B> to 151> C </B> by adding ice. After filtration and washing of the precipitate with water and alcohol, <B> 23.5 </B> parts of a brown solid formed of <B> </B> barium sulfate and the product are obtained. of the reaction containing pteroyl-glutamic acid.
The product contains approximately 10.8% pteroylglutamic acid. It can be used as an additive <B> to </B> animal feed, but in most cases, particularly in its use as a therapeutic agent for humans, it must first be purified. The purification can be carried out by various methods, the following method being one of the preferred.
The crude reaction product is dissolved in hot lime water <B> at </B> the concentration of about <B> 1 </B> part of pteroyl-glutamic acid true for <B> 100 </B> parts of the solution. The temperature of the solution is preferably about 701, <B> C </B> and the <B> pH </B> about <B> 11 </B>. The chai-ide solution is filtered so as <B> to </B> remove the insoluble products and adjusted <B> to </B> a pH of <B> 3 to </B> 4. The pteroy1glutamic acid which precipitate is collected by filtration and is very pure.
To further purify the pteroylglutamic acid, it is treated with eh # lorliv acid (concentrated liquid <B> to </B> an amount of <B> 100 </B> parts approx. Hydrochloric acid to <B> 5 </B> parts by weight of true pteroylglutamic acid. Most of the material dissolves to give a clear brown solution. <B> 25 </B> parts of charcoal are added of activated wood and after twenty minutes the mixture is filtered.
The filter cake is washed a-Li with an average of about <B> 30 </B> parts of concentrated hydrochloric acid and the filtrate and mixed washings are expanded with <B> 100 </B> parts. water and cooled to <B> 50 C. </B> After about an hour, the precipitate is collected on a filter, washed <B> with. </B> water and <B > to </B> acetone, then it is dried. The parity of the product thus obtained is greater than <B> </B> 80%; it is suitable for most therapeutic uses.
<I> Example </I> _9: <B> A </B> a solution of 12.2 parts of barium chloride dihydrate in <B> 350 </B> parts of water <B> to </ B > <B> 600 </B> C, <B> 12.9 </B> parts of 2,4,5-triamino-6-hydroxy # 7pyrimidine sulfate are added. After stirring <B> at </B> 601, <B> C </B> for <B> 10 </B> minutes, the mixture is cooled <B> to </B> 40 "<B> C </B> and add <B> 13.3 </B> parts of p-amino-benzo # -Iglutamic acid. The <B> pH </B> is immediately adjusted (the solution enters <B > 3 </B> and <B> 3.5 </B> by addition of a solution of water solid <B> at </B> 20%.
Then add <B> to </B> drop by drop with stirring, over the course of <B> 50 </B> minutes, <B> 10.3 </B> parts of 1,3-dichloro-1 -bromo-propane-'2 dissolved in <B> 15 </B> parts of glacial acetic acid. We maintain a temperature of 400 <B> C </B> during this addition and Lin <B> pH </B> of <B> 3 to </B> 1345 by additional addition of caustic soda solution <B> at </B> 20%.
When the addition is complete, the mixture is stirred. for <B> 15 </B> minutes <B> at </B> 4011C then cooled <B> to </B> <B> 150 C </B> by adding ice. The mixture is filtered and, after washing with water and al <B> cool </B>, 20 parts of a brown solid consisting of barium sulphate and the reaction product containing ptero acid are obtained. # 7J- glutamic. A further <B> 1.5 </B> parts of a purer product are obtained by filtration of the mother liquor after standing.
The product of this example and the following examples can also be purified by the <B> c </B> method described in Example <B> 1. </B> <I> Example </I> 3: <B > A </B> a solution of 12.2 parts of barium chloride dihydrate in <B> 350 </B> parts of water <B> at 60 "C </B> is added <B> 12.9 </B> parts of 2,4,5-triamino-6-hydroxypyrimidine sulfate. After <B> 10 </B> minutes of stirring <B> at </B> 60 "<B> C, </ B> the mixture is cooled to <B> to </B> 401, <B> C </B> and <B> 13.3 </B> parts of p-aminobenzoyl acid,) - lutamiqiie are added. The <B> pH </B> of the solution is immediately adjusted <B> to 3-3,
5 </B> by addition of caustic soda solution <B> to </B> 201) / o.
Crude 1,1,3-tribronioacetone containing <B> 10.3 </ is then added dropwise with stirring over <B> 25 </B> minutes. B> parts of true 1,1,3-tribromoacetone. A temperature of 401, <B> C </B> is maintained during the addition and a <B> pH </B> of <B> 3 to </B> 4 by a new addition of caustic soda solution <B> at </B> 20%. When the addition is complete, the mixture is stirred for <B> 15 </B> minutes <B> at </B> 40, <B> C </B> then cooled <B> at, 15, C < / B> by adding ice.
After filtration of the mixture, washing <B> with </B> water and <B> with </B> alcohol., <B> 23 </B> parts of a brown solid formed of barium sulphate are obtained. and the reaction product containing pteroylglutamic acid.
<I> Example </I> -1: <B> A </B> a solution of 12.2 parts of <B> </B> barium chloride dibydrate in <B> 350 </B> parts of water <B> at <I> 60, C </I> </B> add <B> 12.9 </B> parts of <B> </B> 2,4,5-triamiiio- sulfate 6-hydroxvpyrimidiiie. After applying <B> to </B> 601> <B> C </B> for <B> 10 </B> minutes, the mixture is cooled <B> to </B> 401, C and added <B> 13.3 </B> parts of p-aminobenzovl, -I-Litaiiiic acid. The <B> pH </B> of the solution is immediately adjusted <B> to </B> <B> 3-3,
About 5 </B> by adding a <B> </B> 20% caustic soda solution.
A solution of 14.7 parts of 1,1,3-tribromopropanone-2 in <B> 15 </B> parts of is then added dropwise while stirring over the course of 45 minutes. 'acetic acid. A temperature of 400 <B> C </B> is maintained during the addition and the pH of the solution is maintained between <B> 3 </B> and <B> 3.5 </B> by a new addition of caustic soda solution <B> at </B> 201 / o. When the addition is complete, the mixture is stirred for a further 20 minutes <B> at </B> 401, <B> C </B> then re-cooled <B> to 15 "C </B> by adding ice. After washing the precipitate <B> with </B> water and <B> with </B> alcohol, 24.5 parts of a brown solid formed of barium sulfate and crude folic acid are obtained.
The test shows that the filtered and washed material contains <B> 11.6 </B> '/ o pteroylglutamic diacid.
<I>Example<B>5:</B> </I> <B> A </B> a solution of 12.2 parts of barium chloride dihydrate in <B> 350 </B> parts of water <B> to </B> <B> 600 </B> C add <B> 12.9 </B> parts of '->, 4,5-triamino-6-hydroxy yrimidine sulfate. After <B>. </B> p a --- itation <B> at 600 C </B> for <B> 10 </B> minutes, the mixture is cooled <B> to </B> 400 <B> C </B> and added to <B> 13.3 </B> parts of p-aminobeiizovlglutamic acid. The <B> pH </B> of the solution is immediately adjusted to 3-3,
5 by addition of a Listique <B> </B> 20% sodium hydroxide solution.
Drop <B> to </B> drop is then added while stirring, over the course of one hour <B> at </B> 401, <B> C, </B> a solution of <B> 7 , 3 </B> parts <B> (0.05 </B> mol.) Of 1,1,3-trichloropropanone-2 in <B> 15 </B> parts of acetic acid. The <B> pH </B> of the mixture is maintained between <B> 3 </B> and <B> 3.5 </B> by adding a solution of caustic soda <B> to </B> 20 < B> 0/0. </B>
When the addition is complete, the mixture is stirred <B> at </B> 401, <B> C </B> for another <B> 15 </B> minutes, then cooled <B> to </B> 151 , <B> C </B> by adding ice. After a further <B> 10 </B> minutes of stirring, the precipitate is obtained by filtration and washing <B> with </B> water and <B> with </B> alcohol 20 parts of A brown solid formed from bar # -um sulfate and crude folic acid.