BRPI0713646A2 - molécula de ácido nucleico isolada, célula hospedeira, planta e semente transgênicas, polipetìdeo isolado com atividade pesticida e método para sua produção, anticorpo, composição e métodos para controle de população de pragas, para exterminar uma praga de lepidópteros ou coleópteros, para proteger uma planta de uma praga e de uma praga de nematóides - Google Patents

Abstract

MOLéCULA DE áCIDO NUCLéICO ISOLADA, VETOR, CéULA HOSPEDEIRA, PLANTA E SEMENTE TRANSGêNICAS, POLIPEPTìDEO ISOLADO COM ATIVIDDAE PESTICIDA E MéTODO PARA SUA PRODUçãO, ANTICORPO, COMPOISçãO E MéTODOS PARA CONTROLE DE POPULAçãO DE PRAGAS, PARA EXTERMINAR UM PRAGA DE LEPDóPTEROS OU COLéOPTEROS, PARA PROTEGER UMA PLANTA D EUMA PRAGA E DE UMA PRAGA DE NEMATóIDES. São fornecidos composições e métodos para conferir atividades pesticida a bactérias, plantas, células vegetais, tecidos e sementes. São fornecidas composições compreendendo uma sequência codificante de um polepeptídeo de delta-endotoxina. As sequências codificantes podem ser usadas em construções de DNA ou cassetes de expressão para transformação e expressão em plantas e bactérias. Composições também compreendem bactérias, plantas, células vegetais, tecidos e sementes transformadas. Em particular, são fornecidas moléculas de ácido nucléico de deltaendoxinas isoladas. Adicionalmente, são englobadas sequências de aminoácidos. Em particular, a presente invenção proporciona moléculas de ácido nucléico compreendendo as sequências de nucleotídeos codificantes das sequências de aminoácidos mostradas em SE ID NO:2, 4, 6, 8, 10, 12, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35 ou 38, ou a sequência de nucleotídeos apresentada em SE ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34 ou 37, bem como variantes e fragmentos destas.

Description

RELATÓRIO DESCRITIVO

MOLÉCULA DE ÁCIDO NUCLÉICO ISOLADA; VETOR; CÉLULA HOSPEDEIRA; PLANTA E SEMENTE TRANSGÊNICAS; POLIPEPTÍDEO ISOLADO COM ATIVIDADE PESTICIDA E MÉTODO PARA A SUA PRODUÇÃO; ANTICORPO; COMPOSIÇÃO E MÉTODO PARA CONTROLE DE POPULAÇÕES DE PRAGAS PARA EXTERMINAR UMA PRAGA DE LEPIDÓPTEROS OU COLEÓPTEROS; PARA PROTEGER UMA PLANTA DE UMA PRAGA DE UMA PRAGA DE NEMATÓIDE

CAMPO DA INVENÇÃO

Esta invenção diz respeito ao campo da biologia molecular. São fornecidos novos genes que codificam proteínas pesticidas. Estas proteínas e as seqüências de ácidos nucléicos que as codificam são úteis na preparação de formulações pesticidas e na produção de plantas transgênicas resistentes à praga.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

Bacillus thuringiensis é uma bactéria do solo Grara- positiva formadora de esporos caracterizada pela sua capacidade de produzir inclusões cristalinas que são especificamente tóxicas para certas espécies e ordens de insetos, mas são inofensivas para as plantas e outros organismos não-alvo. Por esta razão, composições incluindo cepas de Bacillus thuringiensis ou suas proteínas inseticidas podem ser utilizadas como inseticidas ambientalmente aceitáveis para controlar pragas agrícolas ou insetos vetores para uma variedade de doenças humanas ou animais. Proteínas Crystal (Cry) (endotoxinas delta) de Bacillus thuringiensis têm potente atividade inseticida predominantemente contra lepidópteros, dípteros, e larvas coleópteras. Estas proteínas também têm demonstrado atividade contra pragas das ordens Hymenoptera, Homoptera, Phthiraptera, Mallophaga e Acari, bem como de outros invertebrados, como os das ordens Nemathelminthes, Platyhelminthes, e Sarcomastigorphora (Feitelson (1993), The Bacillus Thuringiensis family tree. In Advanced Engineered Pesticides, Mareei Dekker, Inc., New York, N.Y.) Estas proteínas foram inicialmente classificadas como CryI a CryV baseado essencialmente em sua atividade inseticida. As principais classes foram Lepidoptera-específica (I) , Lepidoptera e Diptera-específica (II), Coleoptera-specífica (III), Díptera-específica (IV), e nematóide-específicas (V) e (VI) . As proteínas foram ainda classificadas em subfamílias; para proteínas mais fortemente relacionadas dentro de cada família foram atribuídas letras divisórias, como CrylA, CrylB, CrylC, etc. Para proteínas ainda mais estreitamente relacionadas dentro de cada divisão foram dados nomes como CrylCl, CrylC2, etc.

Uma nova nomenclatura foi descrita recentemente para os genes Cry com base em homologias de seqüência de aminoácidos, em vez de especificidade de insetos-alvo (Crickmore et al. (1998) Microbiol. Mol. Biol. Rev. 62:807-813). Na nova classificação, a cada toxina é atribuído um nome único incorporando uma categoria primária (um número arábico), uma categoria derivada (uma letra maiúscula), uma terceira categoria (uma letra minúscula), e uma categoria quaternária (outro número arábico). Na nova classificação, os numerais romanos foram trocados por números arábicos na primeira categoria. Proteínas com menos de 45% de identidade de seqüência têm diferentes categorias primárias, e os critérios para as categorias secundária e terciária são 78% e 95%, respectivamente.

A proteína cristal não apresenta atividade inseticida até ter sido ingerida e solubilizada no intestino médio do inseto. A protoxina ingerida é hidrolisada por proteases no trato digestivo do inseto a uma molécula ativa tóxica. (Hõfte e Whiteley (1989) Microbiol. Rev. 53: 242-255). Esta toxina se liga a escova apical dos receptores de borda no intestino médio das larvas alvo e se insere na membrana apical criando canais iônicos ou poros, resultando na morte larval.

Endotoxinas delta geralmente têm cinco domínios de seqüência conservados, e três domínios estruturais conservados (ver, por exemplo, de Maagd et al. (2001) Trends Genetics 17: 193-199). 0 primeiro domínio estrutural conservado consiste de sete alfa hélices e está envolvido na inserção da membrana e na formação dos poros. 0 domínio II consiste de três lâminas beta dispostas em uma configuração GreeK key, e o domínio III consiste de duas lâminas beta antiparalelas em formatoo "jelly-roll" (de Maagd et al., 2001, supra). Os domínios II e III estão envolvidos no reconhecimento e ligação do receptor, e, portanto, são considerados determinantes na especificidade da toxina.

Devido à devastação que os insetos podem conferir existe uma constante necessidade de descobrir novas formas de endotoxinas delta de Bacillus thuringiensis.

RESUMO DA INVENÇÃO

Composições e métodos para conferir resistência a pragas em bactérias, plantas, células vegetais, tecidos e sementes são fornecidos. Composições incluem moléculas de ácidos nucléicos codificando seqüências para polipeptídeos endotoxina delta, vetores compreendendo essas moléculas de ácidos nucléicos, e células hospedeiras compreendendo os vetores. Composições incluem também seqüências de polipeptídeo da endotoxina, e anticorpos para esses polipeptídeos. As seqüências nucleotídicas podem ser utilizadas em construções de DNA ou cassetes de expressão para transformação e expressão em organismos, incluindo microorganismos e plantas. Os nucleotídeos ou seqüências de aminoácidos podem ser sintéticos que tenham sido concebidos para a expressão em um organismo, incluindo, mas não se limitando a, um microorganismo ou uma planta. Composições também compreendem bactérias transformadas, plantas, células vegetais, tecidos e sementes.

Em particular, moléculas isoladas de ácidos nucléicos correspondentes a seqüências de ácido nucléico delta- endotoxina são fornecidas. Adicionalmente, seqüências de aminoácidos correspondentes aos polinucleotídeos são englobadas. Em particular, a presente invenção fornece uma molécula do ácido nucléico isolada compreendendo uma seqüência nucleotidica que codifica a seqüência de aminoácidos mostrada em SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 15, -17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, ou 38, uma seqüência nucleotidica estabelecida em SEQ ID NO: 1, 3, 5, -7, 9, 11, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, ou -37, ou as seqüências nucleotídicas endotoxina delta depositadas nas bactérias hospedeiras com Na de Acesso Β- -30935, B-30936, B-30937, e B-50046, bem como as variantes e os fragmentos destas. Seqüências nucleotídicas que são complementares a uma seqüência nucleotidica da invenção, ou que hibridiza para uma seqüência da invenção também são englobadas.

Métodos são fornecidos para produzir os polipeptídeos da invenção, e para utilizar esses polipeptídeos para controlar ou matar uma praga lepidóptera ou coleóptera. Métodos e kits para a detecção em uma amostra de ácidos nucléicos e polipeptídeos da invenção também estão incluídos.

Métodos para controlar ou matar uma população de praga nematóide são ainda fornecidos. Os métodos incluem introduzir em uma planta um polinucleotídeo codificando um polipeptídeo nematóide-ativo com um tamanho molecular superior a 22 kDa. Estes polipeptídeos nematóide-ativos são úteis para controlar ou matar nematodos parasitas de plantas, particularmente cistos de nematóides. As composições e métodos da invenção são úteis para a produção de organismos com resistência aos pesticidas, especialmente bactérias e plantas. Estes organismos e composições derivados deles são desejáveis para fins agrícolas. As composições da invenção também são úteis para gerar proteínas endotoxina delta alteradas ou melhoradas que têm atividade pesticida, ou para detectar a presença de proteínas ou ácidos nucléicos endotoxina delta em produtos ou organismos.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

A presente invenção é projetada para composições e métodos para regulação de resistência a pragas nos organismos, particularmente plantas ou células vegetais. Os métodos envolvem organismos transformados com uma seqüência nucleotídica que codifica uma proteína endotoxina delta da invenção. Em particular, as seqüências nucleotídicas da invenção são úteis para preparar plantas e microorganismos que possuem atividade pesticida. Assim, bactérias transformadas, plantas, células vegetais, tecidos vegetais e sementes são fornecidos. Composições são ácidos nucléicos e proteínas endotoxina delta de Bacillus thuringiensis. As seqüências encontram uso na construção de vetores de expressão para posterior transformação em organismos de interesse, como sondas para o isolamento de outros genes endotoxina delta, e para a geração de proteínas pesticidas alteradas por métodos conhecidos na arte, como a troca de domínio ou embaralhamento de DNA. As proteínas encontram utilização no controle ou morte de lepdópteros, coleópteros, e populações de pragas nematóides e para a produção de composições com atividade pesticida.

Plasmídeos contendo a seqüência nucleotídica da invenção foram depositados na coleção permanente do Agricultural Research Service Culture Collection, Northern Regional Research Laboratory (NRRL), 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604, Estados Unidos da América, em9 de junho de 2 006, e atribuídos os Nos. de Acesso

NRRL B-30935 (para axmi-031), NRRL B-30936 (para axmi-039), NRRL B-3 0937 (para axmi-040) e em 29 de maio de 2 007 e atribuído o No. de Acesso NRRL B-50046 (axmi-049) . Estes depósitos serão mantidos nos termos do Tratado de Budapeste sobre o Reconhecimento Internacional do Depósito de Microorganismos para fins de Processo de Patente. Estes depósitos foram feitos apenas como uma conveniência para aqueles habilitados na arte e não são uma admissão de que um depósito seja necessário sob 35 USC §112.

Por "endotoxina delta" entende-se uma toxina de Bacillus thuringiensis que possui atividade tóxica contra uma ou várias pragas, incluindo mas não limitando-se a, membros das ordens Lepidoptera, Dipt era e Coleoptera e membros do filo Nematoda, ou uma proteína que tenha homologia com essa proteína. Em alguns casos, proteínas endotoxina delta têm sido isoladas de outros organismos, incluindo Clostridium bifermentans e Paenibacillus popilliae. Proteínas endotoxina delta incluem seqüências de aminoácidos deduzidas de seqüências nucleotídicas de comprimento total divulgadas aqui, e seqüências de aminoácidos que são mais curtos que as seqüências de comprimento total, quer devido à utilização de um suplente a jusante no inicio do sitio, ou devido ao tratamento que produz uma proteína menor com atividade pesticida. 0 tratamento pode ocorrer no organismo da proteína que é expressa, ou na praga após a ingestão da proteína. Endotoxinas delta incluem proteínas identificadas como cryl, através de cry43, cytl e cyü2, e toxina Cyt. Existem atualmente mais de 2 50 espécies conhecidas de endotoxinas delta com uma vasta gama de especificidades e toxicidades. Para uma lista extensa ver Crickmore et al. (1998), Microbiol. Mol. Biol. Rev. 62: 807-813, e para as atualizações regulares ver Crickmore et al. (2003) "Bacillus thuringiensis toxin nomenclature", no

www.biols.susx.ac.uk/ Home/Neil_Crickmore/Bt/index.

Aqui são fornecidas novas seqüências isoladas de nucleotídeos que conferem atividade pesticida. São fornecidas, também, as seqüências de aminoácidos de proteínas endotoxina delta. A proteína resultante da tradução deste gene permite às células controlar ou matar pragas que a ingere.

Moléculas Isoladas de Ácido Nucléico, e variantes e fragmentos destas

Um aspecto da invenção pertence a moléculas de ácidos nucléicos isoladas ou recombinantes compreendendo seqüências nucleotídicas codificando proteínas endotoxina delta e polipeptídeos ou partes biologicamente ativas dos mesmos, bem como moléculas de ácidos nucléicos suficientes para utilização como sondas de hibridização para identificar endotoxinas delta codificando ácidos nucléicos. Conforme utilizado aqui, o termo "molécula de ácido nucléico"

destina-se a incluir moléculas de DNA (por exemplo, DNA recombinante, cDNA ou DNA genômico) e moléculas de RNA (por exemplo, mRNA) e análogos do DNA ou RNA gerados utilizando nucleotideos análogos. A molécula de ácido nucléico pode ser de fita única ou de fita dupla, mas de preferência é um DNA de dupla fita.

Uma molécula de ácido nucléico ou proteína "isolada" ou "purificada", ou uma porção biologicamente ativa dela é praticamente isenta de outros materiais celulares, ou meio de cultura quando produzida por técnicas recombinantes, ou substancialmente livres de precursores químicos ou outros produtos químicos quando quimicamente sintetizados. De preferência, um ácido nucléico "isolado" é livre de seqüências (de preferência proteína codificando seqüências) que naturalmente f lanqueiam o ácido nucléico (ou seja, seqüências localizadas nas extremidades 5' e 3' do ácido nucléico) no DNA genômico do organismo do qual o ácido nucléico é derivado. Para efeitos da invenção, "isoladas" quando usado para referir-se a moléculas de ácido nucléico exclui cromossomos isolados. Por exemplo, em vários experimentos, a endotoxina delta isolada codificando a molécula de ácido nucléico pode conter menos de cerca de 5 kb, 4 kb, 3 kb, 2 kb, 1 kb, 0,5 kb, ou 0,1 kb de seqüências nucleotídicas que naturalmente flanqueiam a molécula de ácido nucléico no DNA genômico da célula a partir do qual o ácido nucléico é derivado. A proteína endotoxina delta que é substancialmente livre de materiais celulares inclui preparações de proteína com menos de cerca de 30%, 20%, 10%, ou 5% (em peso seco) de proteína endotoxina não-delta (também aqui referida como uma "proteína contaminante") .

Seqüências nucleotídicas codificando as proteínas da presente invenção incluem a seqüência estabelecida na

SEQ ID NO: 1, 3, 5, 34 e 37, as seqüências nucleotídicas endotoxina delta depositadas em bactérias hospedeiras como No. De Acesso NRRL B-30935, B-30936, B-30937, e B-50046, e variantes, fragmentos e complementos das mesmas (por exemplo, SEQ ID NO: 7, 9, 11, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, e 32). Por "complementar" entende-se uma seqüência nucleotídica que seja suficientemente complementar a uma determinada seqüência nucleotídica que possa hibridizar a dada seqüência de nucleotídeos, para assim formar um duplex estável. A seqüência de aminoácidos correspondente a proteínas endotoxina delta codificada por esta seqüência nucleotídica é estabelecida na SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34 e 37.

Moléculas de ácidos nucléicos que são fragmentos destas seqüências nucleotídicas de codificação de endotoxina delta também são abrangidas pela presente invenção (por exemplo, SEQ ID NO: 9, 11, 14, 18, 20, 22 e 24). Por "fragmento" entende-se uma porção da seqüência nucleotídica que codifica uma proteína endotoxina delta. Um fragmento de uma seqüência nucleotídica pode codificar uma porção biologicamente ativa de uma proteína endotoxina delta, ou pode ser um fragmento que pode ser usado como uma sonda de hibridização ou iniciador de PCR utilizando métodos divulgados abaixo. Moléculas de ácidos nucléicos que são fragmentos de uma seqüência nucleotídica endotoxina delta compreende, pelo menos, cerca de 50, 100, 200, 300, .400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1050, 1100, 1150, 1200, .1250, 1300, 1350, 1400, 1450, 1500, 1550, 1600, 1650, 1700, .1750, 1800, 1850, 1900, 1950, 2000, 2050, 2100, 2150, 2200, .2250, 2300, 2350, 2400, 2450, 2500, 2550, 2600, 2650, 2700, .2750, 2800, 2850, 2900, 2950, 3000, 3050, 3100, 3150, 3200, .3250, 3300, 3350 nucleotídeos contíguos, ou até o número de nucleotídeos presentes em uma seqüência nucleotídica de codificação de endotoxina delta de comprimento total divulgada aqui (por exemplo, 3558 nucleotídeos para SEQ ID NO: 1,

.3984 nucleotídeos para SEQ ID NO: 3, 3720 nucleotídeos para SEQ ID NO: 5, e 3669 nucleotídeos para SEQ ID NO: 34), dependendo da uso pretendido. Por nucleotídeos "contíguos" é entendido resíduo de nucleotídeos que são imediatamente adjacentes um ao outro. Fragmentos das seqüências nucleotídicas da presente invenção irão codificar fragmentos de proteínas que mantêm a atividade biológica da proteína endotoxina delta e, consequentemente, manter a atividade pesticida. Por "manter atividade" entende-se que o fragmento terá pelo menos cerca de 3 0%, pelo menos cerca de 50%, pelo menos cerca de 70%, 80%, 90%, 95% ou mais de atividade pesticida da proteína endotoxina delta. Métodos para a medição da atividade pesticida são bem conhecidos na arte. Ver, por exemplo, Czapla e Lang (1990) J. Econ. Entomol. 83: 2480-2485; Andrews et al. (1988) Biochem. J. 252: 199-206; Marrone et al. (1985) J. of Economic Entomology 78: 290-293; e Patente US No. 5.743.477, todos os quais aqui incorporados por referência na sua totalidade.

Um fragmento de uma seqüência nucleotidica codificando uma endotoxina delta que codifica uma porção biologicamente ativa de uma proteína da invenção vai codificar, pelo menos, cerca de 15, 25, 30, 50, 75, 100, 125, 150, 175, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900, 950, 1000, 1050, 1100 aminoácidos contíguos, ou até o número total de aminoácidos presentes em uma proteína endotoxina delta de comprimento total da invenção (por exemplo, 1185 aminoácidos para SEQ ID NO: 2, 1327 aminoácidos para SEQ ID NO: 4, 123 9 aminoácidos para SEQ ID NO: 6, e

1223 aminoácidos de SEQ ID NO: 35).

Proteínas endotoxina delta preferidas da presente invenção são codificadas por uma seqüência nucleotidica suficientemente idêntica à seqüência de nucleotídeos SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, ou 37. Por "suficientemente idêntica" se entende um aminoácido ou seqüência nucleotidica que tem pelo menos cerca de 60% ou 65% de identidade de seqüência, cerca de 70% ou 75% de identidade de seqüência, cerca de 80% ou 85% de identidade de seqüência, cerca de 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% ou uma identidade de seqüência maior comparada com uma seqüência de referência usando um dos programas de alinhamento de seqüência descritos aqui utilizando parâmetros padrões. Um especialista na arte vai reconhecer que estes valores podem ser devidamente adaptados para determinar identidades correspondentes das proteínas codificadas por duas seqüências nucleotídicas, levando em conta a degeneração de códon, similaridade de aminoácidos, posicionamento do molde de leitura, e coisas do gênero.

Para determinar a identidade percentual de duas seqüências de aminoácidos ou de dois ácidos nucléicos, as seqüências são alinhadas para propósitos de uma comparação ótima. A identidade percentual entre as duas seqüências é uma função do número de posições idênticas partilhadas pelas seqüências (ou seja, identidade percentual = número de posições idênticas / número total de posições (por exemplo, sobreposição de posições) χ 100) . Em um experimento, as duas seqüências têm o mesmo comprimento. A identidade percentual entre as duas seqüências pode ser determinada utilizando técnicas semelhantes às descritas abaixo, com ou sem permitir espaços. No cálculo da identidade percentual, correspondências tipicamente exatas são contadas.

A determinação da identidade percentual entre duas seqüências pode ser realizada utilizando um algoritmo matemático. Um exemplo não limitante de um algoritmo matemático utilizado para a comparação das duas seqüências é o algoritmo de Karlin e Altschul (1990) Proc. Natl. Acad.

Sei. E.U.A. 87: 2264, modificado como no Karlin e Altschul (1993) Proc. Natl. Acad. Sei. E.U.A. 90: 5873-5877. Tal algoritmo é incorporado nos programas BLASTN e BLASTX de Altschul et al. (1990) J. Mol. Biol. 215: 403. Pesquisas de nucleotídeo BLAST podem ser realizadas com o programa BLASTN, escore = 100, comprimento de palavra = 12, para obter seqüências nucleotídicas homólogas de moléculas de ácido nucléico endotoxina delta da invenção. Pesquisas de proteína BLAST podem ser realizadas com o programa BLASTX, escore = 50, comprimento de palavra = 3, para obter aminoácidos homólogos às moléculas de proteína endotoxina delta da invenção. Para obter alinhamentos com lacunas para fins de comparação, Gapped BLAST (em BLAST 2.0) pode ser utilizado tal como descrito em Altschul et al. (1997) Nucleic Acids Res. 25: 3389. Alternativamente, PSI-Blast pode ser utilizado para a realização de uma pesquisa que detecta relações distantes entre as moléculas. Ver Altschul et al. (1997) supra. Quando se utilizar programas BLAST, Gapped BLAST, e PSI-Blast, os parâmetros padrão dos respectivos programas (por exemplo, BLASTX e BLASTN) podem ser utilizados. O alinhamento também pode ser realizado manualmente, por inspeção.

Outro exemplo não limitante de um algoritmo matemático utilizado para a comparação de seqüências é o algoritmo ClustalW (Higgins et al. (1994) Nucleie Aeids Res. 22:4673-4680). ClustalW compara seqüências, e alinha a totalidade dos aminoácidos ou seqüência de DNA, e assim pode fornecer dados sobre a conservação de toda a seqüência de aminoácidos. O algoritmo ClustalW é utilizado em vários software de soluções comercialmente disponíveis de análise de DNA/aminoácido, tais como o módulo ALIGNX do Vector NTI Program Suite (Invitrogen Corporation, Carlsbad, CA) . Após o alinhamento das seqüências de aminoácidos com ClustalW, a identidade percentual de aminoácidos pode ser avaliada. Um exemplo não-limitante de um programa de software útil para a análise de alinhamentos ClustalW é GENEDOC (TM). GENEDOC (TM) (Karl Nicholas) permite a avaliação de similaridade e de identidade de aminoácidos (ou DNA) entre várias proteínas. Outro exemplo não-limitante de algoritmo matemático utilizado para a comparação de seqüências é o algoritmo de Myers e Miller (1988) CABIOS 4:11-17. Tal algoritmo é incorporado no programa ALIGN (versão 2.0), que faz parte do Pacote de Software GCG Wisconsin Genetics, Versão 10 (disponível a partir de Accelrys, Inc., 9685 Scranton Rd., San Diego, CA, E.U.A.). Quando se utilizar o programa ALIGN para comparar seqüências de aminoácidos, uma mesa de resíduo PAM de peso 120, um comprimento de lacuna de 12, e um desnível de 4 podem ser usados.

Salvo indicação em contrário, o GAP Versão 10, que utiliza o algoritmo de Needleman e Wünsch (1970) J. Mol. Biol. 48 (3): 443-453, será utilizado para determinar a identidade de seqüência ou similaridade com os seguintes parâmetros: identidade % e similaridade % para uma seqüência nucleotídica usando peso de GAP de 50 e Comprimento de 3, e a matriz de pontuação nwsgapdna.cmp; identidade % e similaridade % de uma seqüência de aminoácidos utilizando peso de GAP de 8 e comprimento de 2, e o programa de escore BLOSUM62. Programas equivalentes também podem ser utilizados. Por "programa equivalente" entende-se qualquer programa de comparação de seqüência que, para quaisquer duas seqüências em questão, gera um alinhamento com resíduos de resíduos de nucleotídeos idênticos e uma identidade percentual de seqüência idêntica, quando comparada com o alinhamento correspondente gerado pelo GAP Versão 10. A invenção também engloba moléculas variantes de ácidos nucléicos (por exemplo, SEQ ID NO: 7, 9, 11, 16, 18, 22, 24, 26, 28, 30 e 32). "Variantes" de seqüências nucleotídicas de codificação de endotoxina delta incluem as seqüências que codificam as proteínas endotoxina delta divulgadas aqui, mas que diferem conservativãmente devido à degeneração do código genético, bem como aqueles que são suficientemente idênticos como discutido acima. Naturalmente variantes alélicos podem ser identificados com o uso das bem conhecidas técnicas de biologia molecular, tais como a reação em cadeia da polimerase (PCR) e técnicas de hibridização como descrito abaixo. Seqüências nucleotídicas variantes também incluem seqüências nucleotídicas derivadas sinteticamente que foram geradas, por exemplo, utilizando mutagênese sítio-dirigida, mas que ainda codificam proteínas endotoxina delta divulgadas na presente invenção como discutido abaixo. Proteínas variantes englobadas pela presente invenção são biologicamente ativas, isto é, elas continuam a possuir a atividade biológica desejada da proteína nativa, ou seja, mantendo atividade pesticida. Por "manter atividade" entende-se a variante que terá pelo menos cerca de 3 0%, pelo menos cerca de 50%, pelo menos cerca de 70%, ou pelo menos cerca de 80% da atividade pesticida da proteína nativa. Métodos para a medição da atividade pesticida são bem conhecidos na arte. Ver, por exemplo, Czapla e Lang (1990) J. Econ. Entomol. 83: 2480-2485; Andrews et al. (1988) Biochem. J. 252: 199-206; Marrone et al. (1985) J. of Economic Entomology 78: 290-293; e Patente US No.5.743.477, todos os quais são aqui incorporados por referência na sua totalidade.

0 especialista na arte irá apreciar ainda que as mudanças podem ser introduzidas por mutação das seqüências nucleotídicas da invenção, assim, levando a mudanças na seqüência de aminoácidos das proteínas endotoxina delta codificadas, sem alterar a atividade biológica das proteínas. Assim, variantes de moléculas de ácido nucléico isolado podem ser criadas através da introdução de um ou mais substituições de nucleotídeos, acréscimos ou supressões na seqüência nucleotídica correspondente divulgada aqui, de tal forma que uma ou mais substituições de aminoácidos, acréscimos ou supressões são introduzidas na proteína codificada. As mutações podem ser introduzidas pelas técnicas convencionais, tais como mutagênese sítio- dirigida e mutagênese mediada por PCR. Essas seqüências nucleotídicas variantes também são abrangidas pela presente invenção.

Por exemplo, substituições de aminoácidos

conservativas podem ser feitas em um ou mais resíduos de aminoácidos não essenciais previsíveis. Resíduo de aminoácidos "não essenciais" é um resíduo que pode ser alterado a partir da seqüência do tipo selvagem de uma proteína endotoxina delta, sem alterar a atividade biológica, enquanto que um resíduo de aminoácido "essencial" é necessário para a atividade biológica. Uma "substituição de aminoácido conservativa" é um aminoácido em que o resíduo é substituído por um resíduo de aminoácido com uma cadeia lateral semelhante. Famílias de resíduos de aminoácidos com cadeias laterais semelhantes foram definidas na arte. Essas famílias incluem aminoácidos com cadeias laterais básicas (por exemplo, lisina, arginina, histidina), cadeias laterais ácidas (por exemplo, ácido aspártico, ácido glutâmico), cadeias laterais polares não modificadas (por exemplo, glicina, asparagina, glutamina, serina, treonina, tirosina, cisteína), cadeias laterais não polares (por exemplo, alanina, valina, leucina, isoleucina, prolina, fenilalanina, metionina, triptofano), cadeias laterais beta-ramifiçadas (por exemplo, treonina, valina, isoleucina) e cadeias laterais aromáticas (por exemplo, tirosina, fenilalanina, triptofano, histidina).

Endotoxinas delta geralmente têm cinco domínios de seqüência conservados, e três domínios estruturais conservados (ver, por exemplo, de Maagd et al. (2001) Trends Genetics 17: 193-199). 0 primeiro domínio estrutural conservado consiste de sete alfa hélices e está envolvido na inserção da membrana e na formação dos poros. 0 domínio II é constituído por três beta-lâminas dispostas em uma configuração Greek key, e o domínio III é constituído por duas beta-lâminas antiparalelas em forma de "jelly-roll" (de Maagd et al., 2001, supra). Os domínios II e III estão envolvidos no reconhecimento e ligação de receptor, e, portanto, são considerados determinantes da especificidade da toxina.

Substituições de aminoácidos podem ser feitas em regiões não conservadas que mantêm função. Em geral, essas substituições não seriam feitas para resíduos de aminoácido conservados, ou para resíduos de aminoácidos residindo dentro de um motivo conservado, onde esses resíduos são essenciais para a atividade da proteína. Exemplos de resíduos que são conservados e que podem ser essenciais para a atividade da proteína incluem, por exemplo, resíduos que são idênticos entre todas as proteínas contidas em um alinhamento das seqüências de aminoácidos da presente invenção e seqüências endotoxina delta conhecidas. Exemplos de resíduos que são conservados, mas que podem permitir substituições conservativas de aminoácido e manter atividade incluem, por exemplo, resíduos que têm apenas substituições conservativas entre todas as proteínas contidas em um alinhamento das seqüências de aminoácidos da presente invenção e seqüências endotoxina delta conhecidas. No entanto, um habilitado na arte irá compreender que variantes funcionais podem ter menos alterações conservadas ou não conservadas nos resíduos conservados.

Alternativamente, seqüências nucleotídicas variantes podem ser feitas através da introdução de mutações aleatoriamente ao longo de todo ou parte do código da seqüência, tais como por mutagênese de saturação, e os mutantes resultantes podem ser rastreados para conferir capacidade de atividade endotoxina delta para identificar mutantes que mantenham a atividade. Após a mutagênese, as proteínas codificadas podem ser expressas recombinantemente e, a atividade da proteína pode ser determinada usando técnicas padrão de ensaio.

Utilizando métodos como PCR, hibridização, e as seqüências endotoxina delta correspondentes podem ser identificadas, tais seqüências tendo identidade substancial para as seqüências da invenção. Ver, por exemplo, Sambrook e Russell (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual. (Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY) e Innis, et al. (1990) PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications (Academic Press, NY).

Em um método de hibridização, o todo ou parte da

seqüência nucleotídica endotoxina delta pode ser utilizado para rastrear cDNA ou bibliotecas genômicas. Métodos para a construção de tais cDNA e bibliotecas genômicas são geralmente conhecidos na arte e são divulgados em Sambrook e Russell, 2001, supra. As chamadas sondas de hibridização podem ser fragmentos de DNA genômico, fragmentos de cDNA, fragmentos de RNA, ou outros oligonucleotídeos, e podem ser marcadas com um grupo detectável, como 32P, ou qualquer outro marcador detectável, como outros radioisótopos, um composto fluorescente, uma enzima, ou um co-fator enzimático. Sondas de hibridização podem ser feitas por marcação de oligonucleotídeos sintéticos baseados nas seqüências nucleotídicas que codificam a endotoxina delta divulgada aqui. Iniciadores degenerados concebidos com base nos nucleotídeos conservados ou resíduos de aminoácidos na seqüência nucleotídica ou seqüência codificada de aminoácidos podem também ser utilizados. A sonda tipicamente inclui uma região de seqüência nucleotídica que hibridiza sob rigorosas condições de, pelo menos, cerca de 12, pelo menos cerca de 25, pelo menos cerca de 50, 75,100, 125, 150, 175, 200, 250, 300, 350, ou 400 nucleotídeos consecutivos de seqüência nucleotídica de codificação da endotoxina delta da invenção ou um fragmento ou variante deste. Métodos para a preparação de sondas para hibridização são geralmente conhecidos na arte e são divulgados no Sambrook e Russell, 2001, supra, aqui incorporado por referência.

Por exemplo, uma seqüência endotoxina delta divulgada aqui, ou uma ou mais partes dos mesmos, pode ser usada como uma sonda capaz de hibridizar especificamente correspondentes seqüências endotoxina delta e RNAs mensageiros. Para atingir hibridização específica em uma variedade de condições, tais sondas incluem seqüências que são únicas e são de preferência pelo menos cerca de 10 nucleotídeos de comprimento, ou pelo menos cerca de 2 0 nucleotídeos de comprimento. Essas sondas podem ser usadas para amplificar seqüências endotoxina delta de um organismo escolhido por PCR. Esta técnica pode ser usada para isolar seqüências codificantes adicionais de um organismo desejado ou como um teste diagnóstico para determinar a presença de seqüências codificantes em um organismo. Técnicas de hibridização incluem triagem de hibridização de bibliotecas de DNA plaqueadas (ou placas ou colônias, ver, por exemplo, Sambrook et al. (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2d ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York ).

A hibridação de tais seqüências pode ser realizada sob condições severas. Por "condições severas" ou "condições severas de hibridização" entende-se as condições em que uma sonda irá hibridizar a sua seqüência alvo para um grau maior detectável do que de outras seqüências (por exemplo, pelo menos 2 vezes acima). Condições severas são dependentes da seqüência e serão diferentes em diferentes circunstâncias. Ao controlar o rigor da hibridização e/ou condições de lavagem, as seqüências alvo que são 100% complementar da sonda podem ser identificadas (sondagem homóloga). Alternativamente, condições severas podem ser ajustadas para permitir algumas inadequações nas seqüências para que menores graus de similaridade sejam detectados (sondagem heteróloga). Geralmente, uma sonda é inferior a cerca de 1000 nucleotideos de comprimento, de preferência com menos de 500 nucleotideos de comprimento.

Normalmente, condições severas serão aquelas em que a concentração de sal é inferior a cerca de 1,5 M de ion Na, tipicamente cerca de 0,01 a 1,0 M de concentração de ions Na (ou outros sais) em pH 7,0 a 8,3 e a temperatura é de pelo menos cerca de 30°C para sondas curtas(por exemplo, 10 a 50 nucleotideos) e pelo menos cerca de 60°C para sondas longas (como por exemplo, superior a 50 nucleotideos) . Condições severas também podem ser alcançadas com a adição de agentes desestabilizadores, como a formamida. Condições de baixa severidade exemplares incluem hibridização com uma solução-tampão de 3 0 a 3 5% de formamida, 1 M de NaCl, 1% SDS (dodecil sulfato de sódio) a 37°C, e uma lavagem em IX a 2X de SSC (20X de SSC = 3,0 M NaCl/0.3 M de citrato trissódico) em 50 a 55°C. Condições de moderada severidade exemplares incluem hibridização em 40 a 45% de formamida, 1,0 M de NaCl, 1% de SDS a 37°C, e uma lavagem em 0.5X a IX de SSC em 55 a 60°C. Condições de elevada severidade exemplar incluem hibridização em 50% de formamida, 1 M de NaCl, 1% de SDS a 37°C, e uma lavagem em 0.IX de SSC em 60 a 65°C. Opcionalmente, tampões de lavagem podem incluir cerca de 0,1% a cerca de 1% de SDS. A duração da hibridização é geralmente inferior a cerca de 24 horas, normalmente cerca de 4 a cerca de 12 horas.

Especificidade é normalmente a função de lavagens pós- hibridização, os fatores críticos sendo a força iônica e a temperatura da solução final de lavagem. Para híbridos DNA-DNA, a Tm pode ser aproximada a partir da equação de Meinkoth e Wahl (1984) Anal. Biochem. 138: 267-284: Tm = 81,5°C + 16,6 (log M) + 0,41 (% de GC) - 0,61 (% form) - 500/L, onde M é a molaridade de cátions monovalentes, % de GC é o percentual dos nucleotídeos guanosina e citosina no DNA, % form é a percentagem de formamida na solução de hibridização, e L é o comprimento da base, em pares mistos. A Tm é a temperatura (abaixo força iônica definida e pH) em que 50% de uma seqüência alvo complementar hibridiza para uma sonda marcada perfeitamente. A Tm é reduzida em cerca de 1°C para cada 1% de inadequações; assim, Tm, hibridação e/ou condições de lavagem podem ser adaptadas para hibridizar seqüências de identidade desejada. Por exemplo, se seqüências com identidade ^ a 90% são procuradas, a Tm pode ser diminuída IO0C. Geralmente, as condições severas são selecionadas para serem cerca de 50C mais baixas do que o ponto de fusão térmico (Tm) para a seqüência específica e seu complemento em uma força iônica definida e pH. No entanto, condições muito severas podem utilizar uma hibridação e/ou lavagem em 1, 2, 3 ou 4°C mais baixa do que o ponto de fusão térmico (Tm); condições moderadamente severas podem utilizar uma hibridização e/ou lavagem a 6, . 7, 8, 9 ou IO0C menor do que o mesmo ponto de fusão (Tm) ; condições de baixa severidade podem utilizar uma hibridização e/ou lavagem em 11, 12, 13, 14, 15 ou 20°C inferior ao ponto de fusão térmico (Tm). Usando a equação, hibridização e composições de lavagem, e Tm desejada, um especialista na arte irá entender que as variações na severidade da hibridização e/ou soluções de lavagem são inerentemente descritas. Se o grau desejado de inadequações resulta em um Tm de menos de 45°C (solução aquosa) ou 32°C (solução de formamida) , é preferível aumentar a concentração de SSC de modo que uma temperatura mais alta possa ser utilizada. Um extenso guia para a hibridização de ácidos nucléicos é encontrado em Tijssen (1993) Laboratory Techniques in Biochemistry and Molecular Biology Hybridization with Nucleic Aeid Probes, Parte I, Capítulo .2, (Elsevier, Nova Iorque) e Ausubel et al. , Eds. (1995) Current Protocols in Molecular Biology, Capítulo 2 (Greene Publishing and Wiley-Interscience, Nova Iorque). Ver Sambrook et al. (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2d ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, Nova Iorque) . Proteínas Isoladas e Variantes e Fragmentos Desta

Proteínas endotoxina delta também são englobadas no âmbito da presente invenção. Por "proteína endotoxina delta" entende-se uma proteína com seqüência de aminoácidos estabelecida na SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 15, 17, 19,21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, ou 38. Fragmentos, biologicamente ativas porções, e variantes, são também fornecidos, e pode ser utilizada para praticar os métodos da presente invenção.

"Fragmentos" ou "partes biologicamente ativas" incluem fragmentos de polipeptídeo compreendendo seqüências de aminoácidos suficientemente idênticas à seqüência de aminoácidos estabelecida em SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12,16, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, ou 38 e que apresentam atividade pesticida (por exemplo, SEQ ID NO: 15,19, 21, 23 ou 25) . Uma porção biologicamente ativa de uma proteína endotoxina delta pode ser um polipeptídeo que é, por exemplo, 10, 25, 50, 100 ou mais aminoácidos em comprimento. Essas porções biologicamente ativas podem ser preparadas por técnicas recombinantes e avaliadas para atividade pesticida. Métodos de medição da atividade pesticida são bem conhecidos na arte. Veja, por exemplo, Czapla e Lang (1990) J. Econ. Entomol. 83: 2480-2485; Andrews et al. (1988) Biochem. J. 252: 199-206; Marrone et al. (1985) J. of Economic Entomology 78: 290-293; e Patente US No. 5.743.477, todos aqui incorporados por referência, na sua totalidade. Conforme utilizado aqui, um fragmento compreende pelo menos 8 aminoácidos contíguos da SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, ou 38. A invenção engloba outros fragmentos, porém, tal como qualquer fragmento de proteína maior do que cerca de 10, 20, 30, 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900, 950, 1000, 1050, 1100, 1150, 1200, 1250, ou 1300 aminoácidos.

Por "variantes" é entendido polipeptídeos ou proteínas tendo uma seqüência de aminoácidos que é, pelo menos, cerca de 60%, 65%, cerca de 70%, 75%, cerca de 80%, 85%, cerca de 90%, 91%, 92%, 93 %, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% ou 99% idêntica à seqüência de aminoácidos da SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 16, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, ou 38 (por exemplo, SEQ ID NO: 10, 12, 17, 19, 23, 25, 27, 29, 31, ou 33). Variantes incluem também polipeptídeos codificados por uma molécula de ácido nucléico que hibridiza a molécula de ácido nucléico da SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, ou 37, ou um complemento das mesmas, sob condições estritas. Variantes incluem polipeptídeos que diferem na seqüência de aminoácidos devido a mutagênese. Proteínas variantes englobadas pela presente invenção são biologicamente ativas, isto é, elas continuam a possuir a atividade biológica desejada da proteína nativa, ou seja, mantendo atividade pesticida. Métodos para a medição da atividade pesticida são bem conhecidos na arte. Ver, por exemplo, Czapla e Lang (1990) J. Econ. Entomol 83: 2480-2485; Andrews et al. (1988) Biochem. J. 252: 199-206; Marrone et al. (1985) J. of Economic Entomology 78: 290-293; e Patente US No. 5.743.477, os quais aqui incorporados por referência na sua totalidade.

Genes bacterianos, tais como os genes axmi-031, axmi-039, axmi-040, e axmi-049 desta invenção, muitas vezes possuem códons de iniciação de metionina múltiplos início na proximidade do início da abertura do molde de leitura. Muitas vezes, o início da tradução a um ou mais destes códons iniciadores levará à geração de uma proteína funcional. Estes códons iniciadores podem incluir códons ATG. No entanto, bactérias tais como bactérias Bacillus sp. também reconhecem o códon GTG como um códon de início, e as proteínas que iniciam a tradução de códons GTG contêm uma metionina no primeiro aminoácido. Além disso, não é muitas vezes determinada a priori qual destes códons são utilizados naturalmente na bactéria. Assim, é compreensível que a utilização de um dos códons de metionina alternativos possam também levar à geração de proteínas endotoxina delta que codificam atividade pesticida. Estas proteínas endotoxina delta são englobadas na presente invenção e podem ser utilizadas nos métodos da presente invenção.

Anticorpos contra os polipeptídeos da presente invenção, ou as variantes ou fragmentos destes, também estão englobados. Métodos de produção de anticorpos são bem conhecidos na arte (ver, por exemplo, Harlow e Lane (1988) Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY; Patente US No.4.196.265). Variantes Alteradas ou Aperfeiçoadas

É reconhecido que seqüências de DNA de uma endotoxina delta podem ser alteradas por vários métodos, e que estas alterações podem resultar em seqüências de DNA codificando proteínas com seqüências de aminoácidos diferentes do que codificadas por uma endotoxina delta da presente invenção. Esta proteína pode ser alterada de várias maneiras, incluindo substituições de aminoácidos, supressões, truncações, e inserções de um ou mais aminoácidos da SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, .33, 35, ou 38, incluindo-se cerca de 2, cerca de 3, cerca de 4, cerca de 5, cerca de 6, cerca de 7, cerca de 8, cerca de 9, cerca de 10, cerca de 15, cerca de 20, cerca de 25, cerca de 30, cerca de 35, cerca de 40, cerca de 45, cerca de 50, cerca de 55, cerca de 60, cerca de 65, cerca de 70, cerca de 75, cerca de 80, cerca de 85, cerca de 90, cerca de 100, cerca de 105, cerca de 110, cerca de 115, cerca de .120, cerca de 125, cerca de 130 ou mais substituições de aminoácidos, supressões ou inserções.

Métodos para tais manipulações são geralmente conhecidos na arte. Por exemplo, variantes de seqüência de aminoácido uma proteína endotoxina delta podem ser preparadas por mutações no DNA. Isso também pode ser realizado por uma das várias formas de mutagênese e/ou em evolução dirigida. Em alguns aspectos, as alterações codificadas na seqüência de aminoácidos não irão afetar substancialmente a função da proteína. Essas variantes vão possuir a desejada atividade pesticida. No entanto, entende-se que a capacidade de uma endotoxina delta para conferir atividade pesticida pode ser melhorada através da utilização de tais técnicas sobre as composições da presente invenção. Por exemplo, um pode expressar uma endotoxina delta em células hospedeiras que apresentam elevadas taxas de incorporação de base durante a replicação do DNA, como o XL-I Red (Stratagene) . Depois de propagação nessas linhagens, pode-se isolar o DNA endotoxina delta (por exemplo, através da preparação do DNA plasmidial, ou por amplificação por PCR e clonagem do fragmento resultante da PCR em um vetor) , cultivar as mutações endotoxina delta em uma estirpe não-mutagênica, e identificar genes endotoxina delta mutados com atividade pesticida, por exemplo, realizando um ensaio para testar a atividade pesticida. Geralmente, a proteína é misturada e utilizada nos ensaios de alimentação. Ver, por exemplo, Marrone et al. (1985) J. of Economic Entomology 78: 290-293. Tais testes podem incluir contatar plantas com uma ou mais pragas e determinar a capacidade da planta para sobreviver e/ou causar a morte dos parasitas. Exemplos de mutações que resultam em aumento da toxicidade são encontrados em Schnepf et al. (1998) Microbiol. Mol. Biol. Rev. 62: 775-806.

Alternativamente, alterações podem ser feitas para a seqüência da proteína de muitas proteínas no amino ou carboxi terminal sem afetar sensivelmente a atividade. Isto pode incluir inserções, deleções, ou alterações introduzidas pelos modernos métodos moleculares, como PCR, incluindo a amplificação por PCR que alteram ou estendem a 30 seqüência codificante da proteína em virtude da inclusão de aminoácidos codificando seqüências nos oligonucleotídeos utilizados na amplificação por PCR. Alternativamente, as seqüências protéicas acrescentadas podem incluir toda a seqüência de codificação de proteínas, como as usadas comumente na arte de produzir fusões de proteína. Essas proteínas fusionadas são freqüentemente utilizadas para (1) aumentar a expressão de uma proteína de interesse (2) introduzir um domínio de ligação, atividade enzimática, ou epítopo para facilitar a purificação de proteína, detecção de proteína, ou outras utilizações experimentais conhecidas na arte (3) secreção alvo ou tradução de uma proteína de uma organela subcelular, tais como o espaço periplasmático de bactérias gram-negativas, ou do retículo endoplasmático das células eucarióticas, o último dos quais muitas vezes resulta em glicosilação da proteína.

Nucleotídeos variantes e aminoácidos da presente invenção também englobam seqüências derivadas de procedimentos mutagênicos e recombinogênicos tais como embaralhamento de DNA. Com tal procedimento, uma ou mais proteínas endotoxina delta diferentes codificando regiões de podem ser usadas para criar uma nova proteína endotoxina delta que possua as propriedades desejadas. Desta forma, bibliotecas de polinucleotídeos recombinantes são geradas a partir de uma população de polinucleotídeos de seqüências relacionadas compreendendo regiões da seqüência que têm uma identidade de seqüência substancial e que podem ser homologamente recombinadas in vitro ou in vivo. Por exemplo, usando esta abordagem, motivos de seqüência codificando um domínio de interesse podem ser embaralhados entre um gene endotoxina delta da invenção e outros genes endotoxina delta conhecidos para obter um novo gene que codifica para uma proteína com uma melhoria da propriedade de interesse, tais como um aumento da atividade inseticida. Estratégias para tal embaralhamento de DNA são conhecidas na arte. Ver, por exemplo, Stemmer (1994) Proc. Natl. Acad. Sei. E.U.A. 91: 10747-10751; Stemmer (1994) Nature 370: .389-391; Crameri et al. (1997) Nature Biotech. 15: 436-438; Moore et al. (1997) J. Mol. Biol. 272: 336-347; Zhang et al. (1997) Proc. Natl. Acad. Sei. E.U.A. 94: 4504-4509; Crameri et al. (1998) Nature 391: 288-291, e Patentes US na .5.605.793 e 5.837.458.

A troca ou embaralhamento de domínio é outro mecanismo de geração de proteínas endotoxina delta alteradas. Os domínios II e III podem ser trocados entre proteínas endotoxina delta, resultando em toxinas híbridas ou quiméricas com melhor atividade pesticida ou espectro alvo. Métodos para a geração de proteínas recombinantes e teste da atividade pesticida são bem conhecidos na arte (ver, por exemplo, Naimov et al. (2001) Appl. Environ. Microbiol. 67: .5328-5330; de Maagd et al. (1996) Appl. Environ. Microbiol. .62: 1537-1543, Ge et al. (1991) J. Biol. Chem. 266: 17954- .17958; Schnepf et al. (1990), J. Biol. Chem. 265: 20923- .20930; Rang et al. (1999) Appl. Environ. Microbiol. 65: .2918-2925) .

Vetores

A seqüência endotoxina delta da invenção pode ser feita em um cassete de expressão para a expressão em uma planta de interesse. Por "cassete de expressão vegetal" entende-se uma construção de DNA que é capaz de resultar na expressão de uma proteína a partir de um molde de leitura aberta na célula vegetal. Tipicamente, estes contêm um promotor e uma seqüência codificante. Muitas vezes, essas construções também irão conter uma região 3' não traduzida. Essas construções podem conter uma "seqüência sinal" ou "seqüência líder" (ou seja, SEQ ID NO: 9, 11, 28, 30 e 32) para facilitar o transporte co-traducional ou pós- traducional do peptídeo a certas estruturas intracelulares, tais como o cloroplasto (ou outros plastídeos), retículo endoplasmático, ou aparelho de Golgi.

Por "seqüência sinal" entende-se uma seqüência que é conhecida ou suspeita para resultar em transporte de peptídeo co-traducional ou pós-traducional através da membrana celular. Em eucariotos, este normalmente envolve secreção no aparelho de Golgi, com alguns resultando em glicosilação. Por "seqüência líder" entende-se qualquer seqüência que, quando traduzida, resulta em uma seqüência de aminoácidos (ou seja, SEQ ID NO: 10, 12, 29, 31 e 33) suficiente para acionar o transporte co-traducional da cadeia peptídica para uma organela sub-celular. Assim, este inclui seqüências líder objetivando transporte e/ou glicosilação através da passagem para o retículo endoplasmático, passagem de vacúolos, plastídeos incluindo cloroplastos, mitocôndrias, e coisas do gênero.

Por "vetor de transformação de plantas" entende-se uma molécula de DNA que é necessária para transformação eficiente de uma célula vegetal. Essa molécula pode ser constituída por um ou mais cassetes de expressão vegetais, e pode ser organizada em mais de uma molécula de DNA "vetor". Por exemplo, vetores binários são vetores de transformação de plantas que utilizam dois vetores de DNA não contíguos para codificar todas as funções e operações eis- de transformação de células vegetais (Hellens e Mullineaux (2000) Trends in Plant Science 5: 446-451). "Vetor" refere-se a uma construção de ácido nucléico concebido para o transporte entre as diferentes células hospedeiras. "Vetor de expressão" refere-se a um vetor que tem a capacidade de incorporar, integrar e expressar seqüências de DNA heterólogas ou fragmentos de uma célula externa. O cassete incluirá seqüências reguladoras 5' e 3' operacionalmente ligadas a uma seqüência da invenção. Por "operacionalmente ligadas" entende-se uma ligação funcional entre um promotor e uma segunda seqüência, onde a seqüência do promotor inicia e medeia a transcrição da seqüência de DNA correspondente à segunda seqüência. Geralmente, operacionalmente ligado significa que as seqüências de ácido nucléico estando ligadas são contíguas e, quando necessário juntam duas regiões codificadoras de proteínas, contíguas e no mesmo molde de leitura. O cassete pode também conter, pelo menos, um gene adicional a ser co- transformado para o organismo. Alternativamente, o(s) gene(s) adicional(s) pode ser fornecido em múltiplos cassetes de expressão.

"Promotor" refere-se a uma seqüência de ácidos nucléicos que funciona para dirigir a transcrição a jusante de uma seqüência codificante. 0 promotor, juntamente com outras seqüências de ácidos nucléicos reguladoras transcricionais e traducionais (também denominadas "seqüências controle") são necessários para a expressão de uma seqüência de DNA de interesse.

Tal cassete de expressão é fornecido com uma pluralidade de restrições locais para a inserção de a seqüência endotoxina delta estar sob regulação transcricional das regiões reguladoras.

O cassete de expressão vai incluir na direção 5' -3 ' de transcrição, uma região de iniciação transcricional e traducional (ou seja, um promotor), uma seqüência de DNA da invenção, e uma região terminal traducional e transcricional (ou seja, região de terminação) funcional nas plantas. O promotor pode ser nativo ou análogo, ou externo ou heterólogo, para a planta hospedeira e/ou para a seqüência de DNA da invenção. Adicionalmente, o promotor pode ser a seqüência natural ou, alternativamente, uma seqüência sintética. Onde o promotor é "nativo" ou "homólogo" para a planta hospedeira, pretende-se que o promotor seja encontrado na planta nativa em que o promotor é introduzido. Onde o promotor é "externo" ou "heterólogo" para a seqüência de DNA da invenção, pretende-se que o promotor não seja o nativo ou de ocorrência natural para a seqüência de DNA operacionalmente ligada da invenção.

A região terminal pode ser nativa com a região de iniciação transcricional, pode ser nativo com a seqüência de DNA de interesse operacionalmente ligada, pode ser nativa com a planta hospedeira, ou pode ser derivada de uma outra fonte (ou seja, externa ou heteróloga para o promotor, a seqüência de DNA de interesse, a planta hospedeira, ou qualquer combinação das mesmas). Regiões de terminação convenientes encontram-se disponíveis a partir do plasmídeo-Ti de A. tumefaciens, tais como as regiões de terminação octopina sintase e nopalina sintase. Veja também Guerineau et al. (1991) Mol Gen. Genet. 262: 141-144;

Proudfoot (1991) Cell 64: 671-674; Sanfacon et al. (1991) Genes Dev. 5: 141-149; Mogm et al. (1990) Plant Cell 2: 1261-1272; Munroe et al. (1990) Gene 91: 51-158; Bailas et al. (1989) Nucleic Acids Res. 17: 7891-7903; e Joshi et al. (1987) Nucleic Acid Res. 15: 9627-9639.

Quando apropriado, o(s) gene(s) pode ser otimizado para uma maior expressão na célula hospedeira transformada. Ou seja, os genes podem ser sintetizados utilizando códons de células hospedeiras preferenciais para uma melhor expressão, ou podem ser sintetizados utilizando códons em um códon hospedeiro preferido de freqüência útil. Geralmente, o conteúdo GC do gene será alimentado. Ver, por exemplo, Campbell e Gowri (1990) Plant Physiol. 92: 1-11 para uma discussão de uso de códon hospedeiro preferido.

Métodos estão disponíveis na arte para síntese de genes vegetais preferidos. Ver, por exemplo, Patente US na 5.380.831 e 5.436.391, e Murray et al. (1989) Nueleie Aeids Res. 17: 477-498, aqui incorporados por referência. Em um experimento, a endotoxina delta é orientada para o cloroplasto para expressão. Desta forma, quando a endotoxina delta não está diretamente inserida no cloroplasto, o cassete de expressão irá conter adicionalmente um ácido nucléico codificando um peptídeo de trânsito para orientar a endotoxina delta aos cloroplastos. Esses peptideos de trânsito são conhecidos na arte. Ver, por exemplo, Von Heijne et al. (1991) Plant Mol. Biol. Rep.9: 104-126; Clark et al. (1989) J. Biol. Chein. 264: 17544-17550; Della-Cioppa et al. (1987) Plant Physiol. 84:965-968; Romer et al. (1993) Biochem. Biophys. Res. Cowmun.196: 1414-1421; e Shah et al. (1986) Science 233: 478-481.

0 gene endotoxina delta a ser orientado para a cloroplasto pode ser otimizado para a expressão em cloroplasto para levar em conta as diferenças do códon utilizado entre o núcleo da planta e esta organela. Desta forma, os ácidos nucléicos de interesse podem ser sintetizados utilizando códons de cloroplastos preferidos. Ver, por exemplo, Patente US No. 5.380.831, aqui incorporada por referência.

Transformação de Plantas

Métodos da invenção envolvem a introdução de uma construção de nucleotídeo em uma planta. Por "introdução" entende-se apresentar à planta a construção de nucleotídeo de tal forma que o constructo tenha acesso ao interior de uma célula da planta. Os métodos da invenção não exigem que um determinado método para a introdução de uma construção de nucleotídeo em uma planta seja utilizado, só que a construção de nucleotídeo ganhe acesso ao interior de, pelo menos, uma célula da planta. Métodos para introduzir construções de nucleotídeos em plantas são conhecidos na arte, incluindo, mas não se limitando a, métodos de transformação estável, métodos de transformação transientes, e métodos mediados por vírus.

Por "planta" entende-se a planta inteira, órgãos vegetais (por exemplo, folhas, caules, raízes, etc.), sementes, células vegetais, propágulos, embriões e descendentes do mesmo. Células vegetais podem ser diferenciadas ou indiferenciadas (por exemplo, calos, cultura de células em suspensão, protoplastos, células foliares, células de raiz, células de floema, pólen).

"Plantas transgênicas" ou "plantas transformadas" ou plantas "estavelmente transformadas" ou células ou tecidos se referem às plantas que têm incorporado ou integrado seqüências de ácido nucléico exógena ou fragmentos de DNA na célula vegetal. Estas seqüências de ácidos nucléicos incluem as que são exógenas, ou não presentes na célula vegetal não transformada, bem como aquelas que podem ser endógenas, ou presentes na célula vegetal não transformada. "Heterólogas" geralmente se refere às seqüências de ácido nucléico que não são endógenas para a célula ou parte do genoma nativo em que estão presentes, e foram adicionados à célula por infecção, transfecção, microinjeção, eletroporação, microprojeção, ou coisas do gênero.

Transformação de células vegetais pode ser realizada por uma das várias técnicas conhecidas na arte. 0 gene endotoxina delta da invenção pode ser modificado para obter ou melhorar a expressão em células vegetais. Normalmente, um construto que expressa uma proteína irá conter um promotor para conduzir uma transcrição do gene, assim como uma região 3' não traduzida para permitir o término da transcrição e poliadenilação. A organização de tais construções é bem conhecida na arte. Em alguns casos, pode ser útil para a engenharia o gene, tal que o peptídeo resultante seja secretado, ou outra forma segmentada dentro da célula vegetal. Por exemplo, o gene pode ser projetado para conter um peptídeo sinal para facilitar a transferência do peptídeo para o retículo endoplasmático. Também pode ser preferível a engenharia do cassete de expressão vegetal para conter um íntron, de tal forma que o processamento do mRNA no íntron seja necessário para a expressão.

Normalmente este "cassete de expressão vegetal" será inserido em um "vetor de transformação vegetal". Este vetor de transformação vegetal pode ser composto apenas por um ou mais vetores de DNA necessários para a realização da transformação de plantas. Por exemplo, é uma prática comum na arte utilizar vetores de transformação vegetal que são compostos por mais de um segmento de DNA contíguos. Esses vetores são muitas vezes referidos na arte como "vetores binários". Vetores binários, bem como vetores com plasmídios de socorro são mais freqüentemente utilizados para transformação mediada por Agrobacterium, onde a dimensão e complexidade dos segmentos de DNA necessários para alcançar a eficiente transformação é muito grande, e é vantajoso para separar funções nas moléculas de DNA separadas. Vetores binários normalmente contêm um vetor plasmidial que contém seqüências de ação eis exigidas para a transferência do T-DNA (tal como borda esquerda e borda direita), um marcador selecionável que está projetado para ser capaz de expressão em uma célula vegetal, e um "gene de interesse" (um gene projetado para ser capaz de expressão em uma célula vegetal para geração de plantas transgênicas é desejado). Também presentes neste vetor plasmidial estão seqüências necessárias para a replicação bacteriana. As seqüências de ação eis- são dispostas em uma forma eficiente para permitir a transferência em células vegetais e expressão. Por exemplo, o gene marcador selecionável e a endotoxina delta estão localizados entre a borda esquerda e a direita. Muitas vezes um segundo vetor plasmidial contém os fatores de ação trans- que medeiam a transferência de T- DNA de Agrobacterium para as células vegetais. Este plasmídeo freqüentemente contém as funções de virulência (genes Vir) que permitem a infecção das células vegetais por Agrobacterium, e a transferência de DNA pela clivagem das seqüências das bordas e transferência de DNA mediada por vir, como é entendida na arte (Hellens e Mullineaux (2000) Trends in Plant Science 5: 446-451). Vários tipos de cepas de Agrobacterium (por exemplo, LBA4404, GV3101, EHAlOl, EHAl05, etc.) podem ser utilizados para transformação de plantas. 0 segundo vetor plasmidial não é necessário para transformar as plantas através de outros métodos, tais como microprojeção, microinjeção, eletroporação, polietileno glicol, etc. Em geral, métodos de transformação vegetal envolvem transferência de DNA heterólogo em células vegetais alvo (por exemplo, embriões imaturos ou maduros, culturas em suspensão, calos indiferenciados, protoplastos, etc.), seguida pela aplicação de um limiar máximo de nível de seleção adequado (em função do gene marcador selecionável) para recuperar as células vegetais transformadas a partir de um grupo de massa de células não transformadas. Explantes normalmente são transferidos para um suprimento fresco do mesmo meio e cultivados rotineiramente. Posteriormente, as células transformadas são diferenciadas em brotações após a colocação no meio de regeneração suplementado com um limite máximo de nível de agente de seleção. Os brotos são então transferidos para um meio seletivo de enraizamento para recuperar a raiz ou broto. Os brotos transgênicos então crescem em uma planta madura e produzem sementes férteis (por exemplo, Hiei et al. (1994) The Plant Journal 6: 271-2 82; Ishida et al. (1996) Nature Biotechnology 14: 745-750). Explantes normalmente são transferidos para um suprimento fresco de um mesmo meio e cultivados rotineiramente. Uma descrição geral das técnicas e métodos para a geração de plantas transgênicas é encontrada em Ayres e Park (1994) Criticai Reviews in Plant Science 13: 219-239 e Bommineni e Jauhar (1997) Maydica 42:107-120. Uma vez que o material transformado contém muitas células, ambas as células transformadas e não transformadas estão presentes em qualquer parte do calo objeto alvo ou tecido ou grupo de células. A capacidade de matar células não transformadas e permitir células transformadas de 30 multiplicar resulta em culturas de plantas transformadas. Muitas vezes, a capacidade de eliminar células não transformadas é uma limitação a uma cobertura rápida de células vegetais transformadas e de geração bem sucedida de plantas transgênicas.

Protocolos de transformação, bem como protocolos para a introdução de seqüências nucleotidicas em plantas podem variar dependendo do tipo de planta ou de células vegetais, ou seja, monocotiledôneas ou dicotiledôneas, orientadas para a transformação. A geração de plantas transgênicas pode ser realizada por um de vários métodos, incluindo, mas não limitados a, microinjeção, eletroporação, transferência direta de genes, introdução de DNA heterólogo por Agrobacterium em células vegetais (transformação mediada por Agrobacterium), bombardeamento de células vegetais com DNA externo heterólogo aderido às partículas, aceleração de partícula balística, transformação por feixe de aerossóis (Pedido US Publicado No. 20010026941; Patente US No. 4.945.050; Internacional Publication No. WO 91/00915, Pedido US Publicado No. 2002015066), transformação Led, e diversos outros métodos mediados diretamente por não partículas de transferência de DNA.

Métodos de transformação de cloroplastos são conhecidos na arte. Ver, por exemplo, Svab et al. (1990) Proc. Natl. Acad. Sei USA 87: 8526-8530; Svab e Maliga (1993) Proe. Natl. Acad. Sci USA 90: 913-917; Svab e Maliga (1993) EMBO J. 12: 601-606. O método baseia-se na entrega de partícula de DNA que contém um marcador selecionável e segmentação do DNA para o genoma plastidial através de recombinação homóloga. Além disso, a transformação Pl astidial pode ser realizada por transativação de um transgene plastidial silencioso através da expressão do tecido preferido do núcleo codificado e da RNA polimerase dirigida pelo plastídio. Esse sistema tem sido relatado em McBride et al. (1994) Proc. Natl. Acad. Sci USA 91: 7301- 7305.

Seguindo a integração do DNA externo heterólogo em células vegetais, aplica-se um limite máximo de nível de seleção adequado a meio para matar as células não transformadas e separar e proliferar as células putativamente transformadas que sobrevivem a este tratamento de seleção regularmente pela transferência regular para um meio fresco. Por passagem e troca contínua com a seleção adequada, uma identifica e prolifera as células que são transformadas com o vetor plasmidial. Métodos moleculares e bioquímicos podem então ser utilizados para confirmar a presença do gene heterólogo integrado de interesse para o genoma da planta transgênica.

As células que foram transformadas podem ser cultivadas em plantas de acordo com as formas convencionais. Ver, por exemplo, McCormick et al. (1986) Plant Cell Reports 5: 81-84. Estas plantas podem então ser cultivadas, e polinizadas com a mesma linhagem transformada ou linhagens diferentes, e o híbrido resultante tendo expressão constitutiva da característica fenotípica pretendida identificada. Duas ou mais gerações podem ser cultivadas para garantir que a expressão das características fenotípicas desejadas sejam mantidas estáveis e herdáveis e, em seguida, as sementes colhidas a fim de garantir que a expressão das características fenotípicas pretendidas tenha sido alcançada. Desta forma, a presente invenção prevê sementes transformadas (também referidas como "sementes transgênicas"), com um constructo de nucleotídeo do invento, por exemplo, um cassete de expressão da invenção, estavelmente incorporado em seu genoma.

Avaliação da Transformação Vegetal

Após a introdução do DNA heterólogo externo em células vegetais, a transformação ou integração de genes heterólogos no genoma vegetal é confirmada por vários métodos, como a análise de ácidos nucléicos, proteínas e metabólitos associados com o gene integrado.

Análise por PCR é um método rápido para escanear células transformadas, tecidos ou ramo para a presença de genes incorporados na fase anterior, antes de transplantar para o solo (Sambrook e Russell (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY) . A PCR é realizada utilizando iniciadores oligonucleotídeos específicos para o gene de interesse ou vetor Agrobacterium, etc.

A transformação vegetal pode ser confirmada por análise de Southern blot do DNA genômico (Sambrook e Russell, 2001, supra). Em geral, o DNA total é extraído do transformante, digerido com enzimas de restrição apropriadas, fracionado em um gel de agarose e transferido para uma membrana de nitrocelulose ou nylon. A membrana ou "blot" é, então, analisada, por exemplo, com fragmento de DNA alvo radiomarcado com 32P para confirmar a integração do gene introduzido no genoma vegetal, de acordo com as técnicas padrão (Sambrook e Russell, 2 001, supra).

Na análise de Northern blot, o RNA é isolado a partir de tecidos específicos de transformantes, fracionado em um gel de agarose de formaldeído, e repassado para um filtro de nylon, de acordo com procedimentos padrão que são rotineiramente utilizados na arte (Sambrook e Russell, 2001, supra). A expressão de RNA codificada pela endotoxina delta é então testada por hibridização do filtro para uma sonda radioativa proveniente de uma endotoxina delta, através de métodos conhecidos na arte (Sambrook e Russell, 2001, supra).

Western Blot, ensaios bioquímicos e semelhantes podem ser realizados sobre as plantas transgênicas para confirmar a presença da proteína codificada pelo gene endotoxina delta por procedimentos padrão (Sambrook e Russell, 2 001, supra) , utilizando anticorpos que se ligam a um ou mais epítopos presentes na proteína endotoxina delta.

Atividade Pesticida em Plantas

Em outro aspecto da invenção, um pode gerar plantas transgênicas expressando uma endotoxina delta que tenha atividade pesticida. Métodos descritos acima, a título de exemplo podem ser utilizados para gerar plantas transgênicas, mas a maneira em que as células da planta transgênica são geradas não é crítica para esta invenção. Métodos conhecidos ou descritos na arte, como transformação mediada por Agrobacterium, transformação por biobalística, e métodos mediados por não-partículas podem ser utilizados a critério do experimentador. Plantas expressando uma endotoxina delta podem ser isoladas por métodos comuns descritos na arte, por exemplo, por transformação de calos, seleção de calos transformados, e regeneração de plantas férteis de tais calos transgênicos. Nesse processo, pode utilizar qualquer gene como um marcador selecionável tão longo quanto a sua expressão nas células vegetais conferindo a capacidade de identificar e selecionar para células transformadas.

Um certo número de marcadores tem sido desenvolvido para uso com células vegetais, tais como resistência ao cloranfenicol, a aminoglicosídeos G418, higromicina, ou coisas do gênero. Outros genes que codificam um produto envolvido no metabolismo do cloroplasto também podem ser utilizados como marcadores selecionáveis. Por exemplo, genes que oferecem resistência a herbicidas como o glifosato, bromoxinil, ou imidazolinona podem encontrar uso particular. Esses genes têm sido relatados (Stalker et al. (1985) J. Biol. Chew. 263: 6310-6314 (gene nitrilase com resistência ao bromoxinil) e Sathasivan et al. (1990) Nucl. Acids Res. 18: 2188 (gene com resistência a imidazolinona AHAS). Adicionalmente, os genes divulgados aqui são úteis como indicadores para avaliar a transformação de bactérias ou células vegetais. Métodos para detectar a presença de um transgene em uma planta, órgão vegetal (por exemplo, folhas, caules, raízes, etc.), sementes, células vegetais, propágulo, embrião ou descendentes dos mesmos são bem conhecidos na arte. Em um experimento, a presença do transgene é detectada pelo teste da atividade pesticida.

Plantas férteis expressando uma endotoxina delta podem ser testadas para atividade pesticida, e as plantas que apresentam ótima atividade selecionadas para posterior reprodução. Métodos estão disponíveis na arte para ensaio da atividade de pragas. Geralmente, a proteína é misturada e utilizada nos ensaios de alimentação. Ver, por exemplo Marrone et al. (1985) J. of Economic Entomology 78: 290- 293.

A presente invenção pode ser utilizada para transformação de qualquer espécie vegetal, incluindo mas não limitada a, monocotiledôneas e dicotiledôneas. Exemplos de plantas de interesse incluem, mas não estão limitados a, cereais (milho), sorgo, trigo, girassol, tomate, crucíferas, pimentão, batata, algodão, arroz, soja, sacarina de beterraba, cana-de-açúcar, tabaco, cevada e colza, Brassica sp., alfafa, centeio, gramínea, cártamo, amendoim, batata doce, mandioca, café, coco, abacaxi, citros, cacau, chá, banana, abacate, figo, goiaba, manga, azeitona, mamão, caju, macadâmia, amêndoa, aveia, legumes, plantas ornamentais, e coníferas.

Legumes incluem, mas não estão limitados a, tomate, alface, feijão verde, feijões, ervilhas, e os membros do gênero Curcumis tais como pepino, melão, melancia e almíscar. Plantas ornamentais incluem, mas não estão limitadas a, azaléia, hortência, hibisco, rosas, tulipas, narcisos, petúnias, cravo, poinsétia e crisântemo. Preferencialmente, as plantas da presente invenção são espécies vegetais (por exemplo, milho, sorgo, trigo, girassol, tomate, crucíferas, pimentão, batata, algodão, arroz, soja, sacarina de beterraba, cana-de-açúcar, tabaco, cevada, colza, etc.).

Utilização em Controle de Peste

Métodos gerais para empregar linhagens compreendendo uma seqüência de nucleotideo da presente invenção, ou uma variante da mesma, em controle pesticida ou em engenharia de outros organismos como agentes pesticidas são conhecidos na arte. Ver, por exemplo, Patente US No. 5.039.523 e EP 0480762A2.

As linhagens de Bacillus contendo uma seqüência de nucleotideo da presente invenção, ou uma variante, ou os microorganismos que foram geneticamente alterados para conter um gene pesticida e proteína podem ser utilizados para proteger culturas agrícolas e produtos de pestes. Em um aspecto da invenção, células inteiras, ou seja, não lisadas, de um organismo produzindo uma toxina (pesticidas) são tratadas com reagentes que prolongam a atividade da toxina produzida na célula quando a célula é aplicada para o ambiente das pragas-alvo(s). Alternativamente, o pesticida é produzido através da introdução de um gene endotoxina delta em um hospedeiro celular. Expressão do gene endotoxina delta resulta, direta ou indiretamente, na produção e manutenção intracelular do pesticida. Em um aspecto da invenção, estas células são, em seguida, tratadas em condições que prolongam a atividade da toxina produzida na célula quando a célula é aplicada no ambiente das pragas-alvo. O produto resultante mantém a toxicidade da toxina. Estes pesticidas naturalmente encapsulados podem então ser formulados de acordo com técnicas convencionais de aplicação no ambiente das pragas hospedeiras alvo, por exemplo, solo, água e folhagem das plantas. Ver, por exemplo EPA 0192319, e as referências aí citadas. Alternativamente, pode formular as células para expressar o gene da presente invenção, como para permitir a aplicação do material resultante como um pesticida.

Controle de nematóide

Nematóides parasitas de plantas, incluindo cisto de nematóides, nematóides de nó de raiz, e outros nematóides, causam bilhões de dólares em danos para as culturas anuais . Nematóides parasitas de plantas furam paredes de células vegetais com seu estilete, que é formado por algumas das partes da boca e esôfago, e uma bomba até a célula vegetal em seu sistema digestivo. Numerosas publicações na arte concluem que nematóides parasitas de plantas sedentários não ingerem moléculas maiores que cerca de 23-28 kDa in vivo. Isto levou à crença generalizada de que o tubo de alimentação produzido por estes nematóides age como uma peneira molecular, restringindo o tamanho das moléculas que podem ser ingeridas. Bõckenhoff e Grundler ((1994) Parasitology 109: 249-254) injetaram dextranos fluorescentemente etiquetados em um sincício que estava sendo alimentado por Heterodera schachtii. Eles descobriram que os nematóides ingeriram 22 kDa de dextranos, mas não 40 kDa de dextranos. Urwin et al. ((1998) Plant 204:472-479) descobriram que uma proteína de fusão de 23 kDa expressa em Arabidopsis transgênica não pode ser ingerida por H. schachtii, apesar de uma proteína de cerca de 11 kDa poder ser ingerida. Do mesmo modo, Unwin et al. ((1997) Molecular Plant-Microbe Interactions 10: 394-400) constataram que uma proteína verde fluorescente (GFP) de 28 kDa, expressa em Arabidopsis transgênica não pode ser ingerida por H. schachtii. Assim, não foi anteriormente reconhecido ou demonstrado que nematóides podem ser controlados pela expressão de uma proteína maior do que 22 kDa em uma planta, uma vez que foi entendido que nematóides não ingerem essa proteína.

São fornecidos aqui métodos e composições para conferir resistência à nematóide em plantas. Os métodos incluem introdução, em uma planta de pelo menos uma seqüência nucleotídica que codifica um polipeptídeo nematóide-ativo e cultivo da planta em um campo contendo nematóides. Por "polipeptídeo nematóide-ativo" entende-se um polipeptídeo que, quando ingerido pelo nematóide, resulta na morte ou nanismo de crescimento ou proliferação de pelo menos um nematóide. Em um experimento, o polipeptídeo nematóide-ativo tem um peso molecular superior a cerca de 22 kDa, cerca de 23 kDa, cerca de 24, cerca de 25, cerca de 26, cerca de 27, cerca de 28, cerca de 29, cerca de 30, cerca de 31, cerca de 32, cerca de 33, cerca de 34, cerca de 35, cerca de 36, cerca de 37, cerca de 38, cerca de 39, cerca de 40, cerca de 41, cerca de 42, cerca de 43, cerca de 44, cerca de 45, cerca de 46, cerca de 47, cerca de 48, cerca de 49 , cerca de 50, cerca de 51, cerca de 52, cerca de 53, cerca de 54, cerca de 55, cerca de 56, cerca de 57, cerca de 58, cerca de 59, cerca de 60, cerca de 61, cerca de 62, cerca de 63, cerca de 64, cerca de 65, cerca de 66, cerca de 67, cerca de 68, cerca de 69, cerca de 70, cerca de 71, cerca de 72, cerca de 73, cerca de 74, cerca de 75, cerca de 76, cerca de 77, cerca de 78, cerca de 79, cerca de 80 kDa, ou maior.

Em outra incorporação, o polipeptídeo nematóide-ativo tem atividade contra nematóides parasitas de plantas. A expressão do polipeptídeo nematóide-ativo em uma planta reduz a capacidade dos nematóides para infestar ou alimentar raízes da planta. Exemplos de nematóides parasitas de plantas sensíveis às composições da presente invenção incluem nematóides de nó de raiz (Meloidogyne spp.), nematóide dublê (Tylenchorhynchus sp.), nematóide lança (Hoplolaimus sp.), nematóide em espiral (Helicotylenchus sp.), nematóide de lesão (Pratylenehus sp.), cisto de nematóide (Heterodera sp. e Globodera sp.), e nematóide anel (Crieonema sp.).

Composições pesticidas

Os ingredientes ativos da presente invenção são normalmente aplicados na forma de composições e podem ser aplicados para a área ou planta a ser tratada, simultaneamente ou em sucessão, com outros compostos. Estes compostos podem ser adubos, matadores de ervas daninhas, crioprotetores, tensoativos, detergentes, sabonetes pesticidas, óleos latentes, polímeros, e/ou formulações transportadoras biodegradáveis e com tempo de liberação que permitam dosagem a longo prazo de uma área-alvo seguida de uma única aplicação da formulação. Eles também podem ser herbicidas seletivos, inseticidas químicos, virucidas, microbicidas, amebicidas, pesticidas, fungicidas, bacteriocidas, nematocidas, moluscicidas ou misturas de várias destas preparações, se o desejar, juntamente com outras veículos agronomicamente aceitáveis, tensoativos ou adjuvantes de promoção de aplicação habitualmente empregados na arte da formulação. Veículos adequados e adjuvantes podem ser sólidos ou líquidos e correspondem às substâncias comumente empregadas na tecnologia da formulação, por exemplo, substâncias minerais naturais ou regeneradas, solventes, dispersantes, agentes molhantes, tackifiers, adesivos ou fertilizantes. As formulações também podem ser preparadas em "iscas" comestíveis ou em "armadilhas" de pragas para permitir a alimentação ou ingestão por uma praga alvo da formulação pesticida.

Métodos de aplicação de iam ingrediente ativo da presente invenção ou uma composição agroquímica da presente invenção que contêm pelo menos uma das proteínas pesticidas produzidas pelas cepas bacterianas da presente invenção incluem aplicação foliar, aplicação nas sementes do solo e aplicação de revestimento. O número de aplicações e a taxa de aplicação dependem da intensidade de infestação pela praga correspondente.

A composição pode ser formulada como um pó, poeira, sedimento, grânulo, spray, emulsão, colóide, solução, ou afins, e pode ser preparada por meios convencionais, tais como desidratação, Iiofilização, homogeneização, extração, filtração, centrifugação, decantação, ou concentração de uma cultura de células compreendendo o polipeptídeo. Em todas essas composições que contenham pelo menos um desses polipeptídeos pesticidas, o polipeptídeo pode estar presente em uma concentração de cerca de 1% para cerca de .99% em peso.

Parasitas lepidópteros, coleópteros, ou nematóides podem ser mortos ou reduzidos em número em uma dada área através dos métodos da invenção, ou pode ser aplicada profilaticamente a uma área ambiental para evitar a infestação de pragas suscetíveis. De preferência a praga ingere, ou é contatada com uma quantidade pesticidamente efetiva do polipeptídeo. Por "quantidade pesticidamente efetiva" entende-se uma quantidade de pesticida que é capaz de levar a morte a pelo menos uma praga, ou reduzir visivelmente o crescimento de pragas, alimentação, ou desenvolvimento fisiológico normal. Essa quantidade irá variar dependendo de fatores como, por exemplo, as pragas- alvo específicas a serem controladas, o ambiente específico, localização, planta, cultura, ou local agrícola a ser tratado, as condições ambientais, bem como o método, ritmo, concentração, estabilidade, e quantidade de aplicação da composição do polipeptídeo pesticidamente efetivo. As formulações também podem variar em relação às condições climáticas, ambientais, e/ou a freqüência de aplicação e/ou severidade da infestação por pragas. As composições pesticidas descritas podem ser feitas pela formulação tanto pela célula bacteriana, cristal e/ou suspensão de esporos, ou componente protéicos isolados com o veículo agronomicamente aceitável desejado. As composições podem ser formuladas antes da administração, em um meio adequado, como liofilizado, congelado a seco, desidratado, ou em um veículo aquoso, meio ou diluente adequado, como o soro fisiológico ou outros tampões. As composições podem ser formuladas sob a forma de um pó granular ou material, ou uma suspensão em óleo (vegetal ou mineral), ou água ou emulsões óleo/água, ou como um pó molhável, ou em combinação com qualquer outro material veículo adequado para aplicação agrícola. Veículos agrícolas adequados podem ser sólidos ou líquidos e são bem conhecidos na arte. 0 termo "veículo agronomicamente aceitável" abrange todos os adjuvantes, componentes inertes, dispersantes, agentes tensoativos, tackifiers, capas, etc., que são normalmente utilizados na tecnologia de formulação pesticida; estes são bem conhecidos para aqueles especialistas na formulação pesticida. As formulações podem ser misturadas com um ou mais adjuvantes sólidos ou líquidos e preparadas por diferentes meios, por exemplo, por misturar homogeneamente, misturar e/ou triturar a composição pesticidal com adjuvantes adequados utilizando técnicas convencionais de formulação. Formulações adequadas e métodos de aplicação são descritos na Patente US No. 6.468.523, aqui incorporada por referência.

"Pragas" incluem, mas não está limitado a, insetos, fungos, bactérias, nematóides, ácaros, carrapatos, e coisas do gênero. Insetos pragas incluem insetos selecionados a partir das ordens Coleoptera, Diptera, Hymenoptera, Lepidoptera, Mallophaga, Homopterar Hemiptera, Orthroptera, Thysanoptera, Dermaptera, Isoptera, Anoplurar Siphonaptera, Trichoptera, etc, especialmente Coleoptera, Lepidoptera e Diptera.

A ordem Coleoptera inclui as subordens Adephaga e Polyphaga. A subordem Adephaga inclui as superfamílias Caraboidea e Gyrinoidea, enquanto a subordem Polyphaga inclui as superfamílias Hydrophiloidea, Staphylinoideaf Cantharoidea, Cleroidea, Elateroidea, Dascilloidea, Dryopoidear Byrrhoidea, Cucujoidear Meloidear Mordelloidear Tenebrionoidear Bostrichoidea, Scarabaeoidear

Cerambycoidear Chrysomeloidear e Curculionoidea. A superfamília Caraboidea compreende as famílias Cieindelidaer Carabidae e Dytiseidae. A superfamília Gyrinoidea inclui a família Gyrinidae. A superfamília Hydrophiloidea inclui a família Hydrophilidae. A superfamília Staphylinoidea inclui as famílias Silphidae e Staphylinidae. A superfamília Cantharoidea inclui as famílias Cantharidae e Lampyridae. A superfamília Cleroidea inclui as famílias Cleridae e Dermestidae. A superfamília Elateroidea inclui as famílias Elateridae e Buprestidae. A superfamília Cucujoidea inclui a família Coccinellidae. A superfamília Meloidea inclui a família Meloidae. A superfamília Tenebrionoidea inclui a família Tenebrionidae. A superfamília Scarabaeoidea inclui as famílias Passalidae e Searabaeidae. A superfamília Cerambyeoidea inclui a família Cerambyeidae. A superfamília Chrysomeloidea inclui a família Chrysornelidae. A superfamília Curculionoidea inclui as famílias Cureulionidae e Seolytidae.

A ordem Diptera inclui as subordens Nematoeera,

Braehyeera, e Cyelorrhapha. A subordem Nematoeera inclui as famílias Tipulidae, Psyehodidae, Culieidael

Ceratopogonidae, Chironomidae, Simuliidae, Bibionidae, e Ceeidomyiidae. A subordem Braehyeera inclui as famílias

Stratiomyidae, Tabanidael Therevidael Asilidae, Mydidae, Bombyliidae, e Dolichopodidae. A subordem Cyelorrhapha inclui as divisões Asehiza e Asehiza. A divisão Asehiza inclui a famílias Phoridae, Syrphidae e Conopidae. A divisão Asehiza inclui as seções Aealyptratae e Calyptratae. A seção Acalyptratae inclui as famílias Otitidae, Tephritidae, Agromyzidae, e Drosophilidae. A seção Calyptratae inclui as famílias Hippoboscidae, Oestridaef Taehinidae, Anthomyiidaef Museidaef

Calliphoridae e Sareophagidae. A ordem Lepidoptera compreende as famílias Papilionidae, Pieridae, Lycaenidaef Nymphalidae, Danaidaef Satyridaef Hesperiidae, Sphingidae, Saturniidaef

Geometridaef Aretiidaef Noetuidaef Lymantriidaef Sesiidaef

e Tineidae. Os insetos-praga da invenção para as principais culturas são: Milho: Ostrinia nubilalis, broca do milho europeu; Agrotis ipsilon, lagarta-rosca; Helicoverpa zea, lagarta da espiga; Spodoptera frugiperda, lagarta militar; Diatraea grandiosella, lagarta do cartucho; Elasmopalpus lignosellus, broca do colo, Diatraea saccharalis, broca da cana-de-açúcar; Diabrotica virgifera, lagarta da raiz do milho; Diabrotica longicornis barberi, vaquinha do norte; Diabrotica undecimpunctata howardi, vaquinha do sul; Melanotus spp. Larva arame; Cyclocephala borealis, besouro mascarado do norte (grub branco); Cyeloeephala imnaculata, besouro mascarados do sul (grub branco); Popillia japoniea, besouro japonês; Chaetoenema puliearia, pulguinha do milho e do arroz; Sphenophorus maidis, broca do colmo; Rhopalosiphum maidis, pulgão das folhas do milho; Anuraphis maidiradieis, afideo da raiz do milho; Blissus leueopterus leueopterus, percevejo das gramíneas; Melanoplus femurrubrum, gafanhoto; Melanoplus sanguinipes, gafanhoto migratório; Hylemya platura, verme das sementes do milho; Agromyza parvieornis, traça do milho; Anaphothrips obserurus, tripés de erva; Solenopsis milesta, formigas ladrão; Tetranyehus urtieae, ácaro rajado; Sorgo: Chilo partellus, broca do sorgo; Spodoptera frugiperda, lagarta militar, Helieoverpa zea, lagarta da espiga; Elasmopalpus lignosellus, broca do colo; Feltia subterranea, vermes granulados; Phyllophaga erinita, grub branco; Eleodes, Conoderus, e Aeolus spp. vermes fio; Oulema melanopus, besouro da folha de cereais; Chaetoenema puliearia, pulguinha do milho e do arroz; Sphenophorus maidis, broca do colmo; Rhopalosiphum maidis; pulgão das folhas do milho; Siphaflava, afídeo amarelo da cana; Blissus leucopterus leucopterus, percevejo; Contarinia sorghicola, sorgo anão; Tetranychus cinnabarinus, ácaro vermelho; Tetranychus urticae, ácaro rajado; Trigo: Pseudaletia unipunctata, verme exército; Spodoptera frugiperda, lagarta militar, Elasmopalpus lignosellus, broca do colo; Agrotis orthogonia, lagarta do oeste; Elasmopalpus lignosellus, broca do colo; Oulema melanopus, besouro de cereais; Hypera

punctata, gorgulho da folha do trevo; Diabrotica undecimpunetata howardi, vaquinha do sul; afideo russo do trigo; Sehizaphis graminum, pulgão; Maerosiphum avenae, afideo inglês de grão; Melanoplus femurrubrum, gafanhoto vermelho; Melanoplus differentialis, gafanhoto diferencial;

Melanoplus sanguinipes, gafanhoto migratório; Mayetiola destruetor, Mosca Hesse; Sitodiplosis mosellana, trigo anão; Meromyza americana, verme do caule do trigo; Hylemya coarctata, mosca do bulbo do trigo; Frankliniella fusca, tripés do tabaco; Cephus cinctus, mosca do caule do trigo;

Aceria tulipae, ácaro do trigo; Girassol: Suleima helianthana, mariposa das gemas do girassol; Homoeosoma electellum, mariposa do girassol; Zygogramma exelamationis, besouro do girassol; Bothyrus gibbosus, besouro cenoura; Neolasioptera murtfeldtiana, praga da semente de girassol;

Algodão: Heliothis virescens, lagarta do algodão, Helicoverpa zea, lagarta do algodão; Spodoptera exígua, lagarta da beterraba; Peetinophora gossypiella, lagarta rosada; Anthonomus grandis, bicudo; Aphis gossypii, afídeo do algodão; Pseudatomoscelis seriatus, praga do algodoeiro;

Trialeurodes abutilonea, mosca branca da asa com banda; Lygus lineolaris, inseto manchado de planta; Melanoplus femurrubrum, gafanhoto vermelho; Melanoplus differentialis, gafanhoto diferencial, Thrips tabaci, tripés da cebola; Franklinkiella fusca, tripés do tabaco; Tetranychus cinnabarinus, ácaro carmim; Tetranychus urticae, ácaro rajado; Arroz: Diatraea saccharalis, broca da cana-de- açúcar; Spodoptera frugiperda, lagarta militar, Helicoverpa zea, lagarta da espiga; Colaspis brunnea, colaspis da uva; Lissorhoptrus oryzophilus, gorgulho aquático do arroz, Sitophilus oryzae, gorgulho do arroz; Nephotettix nigropictus, cigarrinha do arroz; Blissus leucopterus leucopterus, percevejo; Acrosternum hilare, percevejo verde; Soja: Pseudoplusia includens, lagarta mede-palmo da soja, Antiearsia gemmatalis, parasitóide de ovos; Plathypena seabra, verme verde do trevo; Ostrinia nubilalis, broca do milho europeu; Agrotis ipsilon, lagarta rosca; Spodoptera exigua, lagarta da beterraba; Heliothis virescens , lagarta das maçãs; Helieoverpa zea, lagarta do algodão; Epilaehna varivestis, besouro do feijão mexicano; Myzus persieae, pulgão; Empoasea fabae, cigarrinha da batata; Aerosternum hilare, percevejo verde; Melanoplus femurrubrum, gafanhoto vermelho; Melanoplus differentialis, gafanhoto diferencial; Hylemya platura, verme das sementes do milho; Serieothrips variabilis, tripés da soja, Thrips tabaci, tripés da cebola; Tetranychus turkestani, ácaro do morango; Tetranychus urticae, ácaro rajado; Cevada: Ostrinia nubilalis, broca do milho europeu; Agrotis ipsilon, lagarta rosca; Schizaphis graminum, pulgão ; Blissus leucopterus leucopterus, percevejo; Acrosternum hilare, percevejo verde; Euschistus servus, percevejo marrom; Delia platura, mosca da semente do milho; Mayetiola

destructor, Mosca Hesse; Petrobia latens, ácaro marrom do

trigo; Semente de colza: Brevicoryne brassicae, afídeo do

besouro; Phyllotreta cruciferae, besouro; Mamestra

configurata, lagarta Bertha; Plutella xylostella, traça das crucíferas; Delia ssp., vermes da raiz.

Nematóides incluem nematóides parasitas, como vermes de raiz, cisto, e nematóides de lesão, incluindo Heterodera spp., Meloidogyne spp., e Globodera spp.; em particular os membros dos nematóides do cisto, incluindo mas não limitados a, Heterodera glycines (nematóide de cisto da soja); Heterodera schachtii (nematóide de cisto da beterraba); Heterodera avenae (nematóide de cisto de cereais) e Globodera rostochiensis e Globodera pailida (nematóide de cisto da batateira). Nematóides de lesão incluem Pratylenchus spp. Métodos para aumento da produção vegetal

Métodos para aumentar as características de produção são fornecidos. Os métodos incluem introdução em uma planta ou em uma célula vegetal um polinucleotídeo compreendendo uma seqüência pesticida aqui divulgada. Tal como definido aqui, o "rendimento" da planta se refere à qualidade e/ou a quantidade de biomassa produzida pelas plantas. Por "biomassa" entende-se qualquer medida do produto vegetal. Um aumento na produção de biomassa é uma melhora no rendimento medido do produto vegetal. Aumentar a produção vegetal tem várias aplicações comerciais. Por exemplo, o aumento da biomassa vegetal da folha pode aumentar o rendimento das hortaliças folhosas para consumo humano ou animal. Adicionalmente, o aumento da biomassa foliar pode ser usado para aumentar a produção de produtos farmacêuticos ou produtos industriais derivados de plantas. Um aumento no rendimento pode incluir qualquer aumento estatisticamente significativo, incluindo, mas não se limitando a, pelo menos um aumento de 1%, pelo menos um 3% de aumento, pelo menos um aumento de 5%, pelo menos um aumento de 10%, pelo menos um aumento de 2 0%, pelo menos 30%, pelo menos 50%, pelo menos 70%, pelo menos 100%, ou um maior aumento na produtividade em comparação com uma planta não expressando a seqüência pesticida.

Nos métodos específicos, o rendimento vegetal é aumentado como resultado de uma melhoria da resistência a pragas em uma planta expressando uma proteína pesticida aqui divulgada. Expressão da proteína pesticida resulta em uma redução da capacidade de uma praga para infestar ou se alimentar da planta, assim, melhorando as características de produção.

Os seguintes exemplos são oferecidos a título de ilustração e não por meio de limitação.

EXPERIMENTAL

Exemplo 1. Crescimento de ATX9387, e preparação dos extratos.

A estirpe ATX93 87, identificada como um membro do grupo de Bacillus cereus/Bacillus thuringiensis pela análise de MIDI, foi cultivada em meio T3 a 30 graus por períodos variando de 16 horas a 5 dias. As culturas foram centrifugadas e os sobrenadantes foram passados através de filtros de 0,2 mícron, resultando em sobrenadantes estéreis

Exemplo 2. Bioensaio com C. elegans.

Caenorhabitis elegans ("C. elegans") hermafroditas foram criados como conhecido na arte, para gerar populações de animais saudáveis para bioensaio. Procedimentos gerais para o crescimento, a colheita, e a manipulação genética de C. elegans, incluindo o crescimento em meio, etc podem ser encontrados na arte, por exemplo, em Wood, ed. (1988) A Nematode Caenorhabditis elegans (Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY).

Sobrenadantes estéreis da estirpe ATX93 87 foram testados para a atividade em C. elegans. Os bioensaios foram realizados em 96 placas. Cinco a dez nematóides foram adicionados aos 80 μΐ de meio S (Wood, supra) e foram misturadas com 20 μΐ de sobrenadante estéril, 0.5 μΐ de HBlOl concentrado (preparado conforme descrito em Wood, supra) e rifampicina (concentração final de 0,1 μg/μl). Os ensaios foram autorizados a proceder em temperatura ambiente durante 3 dias e nematóides foram quantificados. Amostras de controle negativo (meio T3 estéril ou sobrenadantes inativos de cepas) continham centenas de nematóides ativos, enquanto amostras (contendo sobrenadantes ATX93 87) continham 5 a 10 nematóides que estavam letárgicos ou mortos. Os resultados do bioensaio de extratos de ATX9387 em C. elegans são apresentados na Tabela 1. Tabela 1. Atividade de extratos de ATX9387 em C. elegans

<table>table see original document page 63</column></row><table>

Exemplo 3. Atividade de ATX9387 sobre nematóides do cisto da soja.

Um sobrenadante estéril de uma cultura de 5 dias de ATX93 87 foi concentrado em 40 vezes e alimentado à nematóides SCN J2. Nematóides que se alimentaram do sobrenadante estéril foram reprodutivelmente observados por estarem lentos, e apresentaram maior motilidade que nematóides alimentados com o extrato de um controle negativo concentrado na mesma medida.

Exemplo 4. Atividade anti-nematóide a partir de ATX9387 é conferida por uma proteína.

Para identificar a atividade anti-nematóide em ATX9387, os seguintes testes foram realizados. Em primeiro lugar, a capacidade da atividade a ser destruída pelo calor foi testada por aquecimento a partir de amostras de sobrenadante estéril de ATX9387 a IOO0C durante 10 minutos e, em seguida, o material avaliado foi aquecido em um bioensaio com nematóide. 0 tratamento térmico de sobrenadantes estéreis de ATX9387 resultou em uma perda da atividade anti-nematóide. Em seguida, as amostras ativas foram tratadas com pronase para degradar proteínas. Este resultou em perda da atividade. Sobrenadantes estéreis de ATX93 87 foram passados através de 3 kDa de peso molecular de corte ("MWCO") de unidade de concentração. 0 ingrediente ativo foi mantido pelo filtro de 3 kDa de MWCO enquanto o que passou pelo fluxo não mostrou nenhuma atividade. Isso indica que a molécula ativa foi maior do que 3 kDa em tamanho.

Exemplo 5. Fracionamento de atividade a partir de ATX9387

O sobrenadante estéril de uma cultura de 4 dias de ATX9387 foi fracionado por cromatografia líquida em uma coluna de troca aniônica em 20 mM de Tris a pH 8, um gradiente de 0 a 1 mM de NaCl. Várias frações consecutivas foram ativadas. A fração mais ativa foi submetida a SDS-PAGE, e duas bandas proeminentes de aproximadamente 13Okd e aproximadamente 7 Okd foram observadas.

Em outro experimento a cepa ATX9387 foi cultivada durante 5 dias em meio T3 em 3 0°C. A cultura foi centrifugada a 8000 χ g por 10 minutos, e o sobrenadante foi passado através de um filtro de 0,2 |im. O sobrenadante filtrado foi dializado contra 20 mM de Tris em pH 8 usando Spectra/Por 1 tubulação de diálise (6-8000 MWCO), e foi então fracionado em uma coluna de troca de ânion (Mono Q), utilizando um gradiente de 0 a 1 M de NaCl mais de 2 0 volumes. As frações foram dializadas contra 20 mM de Tris em pH 8 em slides -A-Lyzer (Pierce Biotechnology, Rockford, IL) unidades de mini diálise (7000 MWCO), e bioensaiado em C. elegans utilizando 20μ1 da amostra em iam ΙΟΟμΙ de volume de bioensaio, conforme descrito a seguir. Frações 12 e 13 foram encontradas para ser ativas, e, em seguida, foram reunidas e concentradas 7 vezes usando uma Amicon concentrador Ultra-4 5000 MWCO. 0 material concentrado foi fracionado em uma coluna de filtração em gel (Superdex 200) em 50 mM de fosfato de sódio, 150 mM de NaCl, em pH 7.

Frações foram concentradas 10 vezes utilizando concentradores Centricon YM-3, e foram bioensaiados em C. elegans como acima. As frações 5 e 6 foram as mais ativas, e a fração 7 foi um pouco ativa. 0 SDS-PAGE das frações revelou que frações 5-7 partilharam várias proteínas: uma proteína com cerca de 130 kDa, um gibão com cerca de 75 kDa, e uma proteína com cerca de 53 kDa. As bandas mais proeminentes foram submetidas a sequenciamento da proteína N-terminal por degradação de Edman. A proteína de 13 0 kDa e a proteína de 70 kDa tinham muitas seqüências N-terminal semelhantes (a cisteína poderia não ser detectada pelo método utilizado) , e, portanto, são susceptíveis de resultar da mesma proteína inicial. Esta proteína foi designada AXMI-031 (SEQ ID NO: 2).

Tabela 2. Seqüência N-terminal da proteína de aproximadamentel30kDa de ATX9387

1 A, S+S', M

2 D, Q

3 ?, Ρ, N <table>table see original document page 66</column></row><table>

Tabela 3. Seqüência N-terminal da proteína de cerca de 7OkDa de ATX93 87

<table>table see original document page 66</column></row><table> 15 ?, V

Uma pesquisa das bases de dados de proteína com as seqüências N-terminal da proteína de ~130kDa e da proteína de ~70kDa demonstrou que os aminoácidos N-terminal de proteínas AXMI-031 têm grande semelhança com o N-terminal da endotoxina Cry 14Aa (SEQ ID NO: 13).

A seqüência N-terminal de Cryl4A: MDCNLQSQQNIPYNV (resíduos de aminoácido de 1 a 15 da SEQ ID NO: 13).

Exemplo 6. Clonagem da região codificadora axmi-031 de ATX9387.

Uma biblioteca de fragmento aleatório de ATX9387 foi gerada, e um clone de DNA (pAX031) que contém a seqüência de DNA codificando o N-terminal de axmi-031 foi identificado. Um segundo clone, pAX032, foi identificado como contendo o C-terminal de axmi-031. Clones pAX031 e pAX032 sobrepuseram substancialmente, de tal forma que é evidente para um técnico no assunto que os dois clones juntos compreendem toda a região codificadora axmi-031.

Para confirmar a natureza de AXMI-031, um clone genômico foi amplificado usando uma polimerase PFU ULTRA (TM) (Stratagene) de alta fidelidade do DNA total usando iniciadores desenhados para a extremidade de axmi-031 do molde de leitura aberta. O produto resultante da PCR foi clonado no vetor PCR-TOPOII Blunt (Invitrogen) para criar pAX980. A seqüência de DNA de pAX980 foi determinada e verificou-se que contém o mesmo molde de leitura aberta como na biblioteca de fragmento aleatório de clones de pAX031 e ρΑΧ032. A tradução deste molde de leitura aberta gera uma seqüência de proteína coerente com a seqüência N- terminal obtida a partir da proteína purificada AXMI-031. Assim, este molde de leitura aberta foi designado axmi-031 (SEQ ID NO: 1). 0 clone plasmidial pAX2515, contendo axmi-031 foi depositado em 9 de junho de 2006 e atribuído o número de acesso NRRL B-30935.

Exemplo 7. Comparação de AXMI-031 com outras endotoxinas conhecidas

Buscas no banco de dados usando seqüências de proteínas AXMI-031 demonstraram que AXMI-031 é um membro da classe de proteínas inseticidas endotoxina delta. AXMI-031 é muito semelhante a endotoxina cryl4Aal. A seqüência de aminoácidos AXMI-031 é 86,6% idêntica à CRYl4Aal (SEQ ID NO: 13).

Exemplo 8. Expressão do polipeptídeo AXMI-031 em E. coli

Para expressão solúvel em E. coli, iniciadores foram desenhados a fim de incluir o início da tradução e os códons de parada do ORF de axmi-031. Os iniciadores foram acrescentados em um RBS ótimo e em sítios de recombinação Gateway attB. A polimerase I Stratagene PFU foi utilizada para amplificar consistentemente o ORF de pAX980, e recombinada com pDONR221 (Invitrogen, Carlsbad, CA) para criar o vetor de entrada pAX2515 (como por protocolos da Invitrogen). 0 clone foi seqüenciado para verificação. Uma nova recombinação foi realizada para introduzir o ORF em pDESTl7 para ser expresso pelo promotor T7, rendendo pAX2530. A presença e orientação do fragmento inserido de axmi-031 foram verificadas pela digestão de restrição, e transformadas em células de E. coli BL21 (DE3) . Este vetor produz uma fusão traducional de 26 aminoácidos (3,17 kDa) , incluindo um His tag de 6x, sobre o N-terminal de AXMI-031.

0 His-AXMI-031 foi expresso a partir de pAX2530 em células BL21*(DE3) como se segue. Uma cultura de inicio de pAX2530 foi cultivado por toda a noite a 37°C em LB com 50 μg/ml de carbenicilina. No dia seguinte a cultura saturada foi diluída em meio fresco 1:100, e as novas culturas cultivadas a 37° para um OD de 0,4, no qual o tempo de cultura foi colocada em temperatura ambiente com agitação durante a noite. Como controle, um vetor de expressão axmi- .004 portador do gene (pAX253 0) foi construído como para axmi-031, e as proteínas AXMI-004 (Depósito de Patente US No. 10/782.020) foram expressas a partir de pAX2504 na mesma E. coli hospedeira. As culturas inteiras foram analisadas por SDS-PAGE. As culturas contendo pAX253 0 produziram uma banda proeminente da proteína em aproximadamente 135 kDa, o tamanho esperado para a proteína His-AXMI-031, enquanto culturas contendo pAX2504 não.

Exemplo 9. Anticorpos contra AXMI-031

Para gerar anticorpos anti-AXMI-031, afinidade purificada de AXMI-031 (SEQ ID NO: 2) a proteína foi inoculada em coelhos e, antisoros para AXMI-031 isolados e titulados tal como é conhecido na arte. Os antisoros selecionados foram encontrados para também reagir com proteínas SYNAXMI-031 (SEQ ID NO: 8).

Exemplo 10. Atividade de AXMI-031 em C. elegans. Culturas de Ε. coli contendo pAX2530, foram preparadas, e encontradas para produzir uma proteína 13 5kDa não presente nas cepas controle, sugerindo a expressão de AXMI-031 em pAX2530 contendo as cepas. Essas culturas foram testadas para a atividade em C. elegans e foram ativadas contra C. elegans, enquanto culturas controle não mostraram nenhuma atividade contra C. elegans.

Exemplo 11. Expressão de AXMI A-031 em Bacillus

O gene inseticida axmi-031 é amplificado por PCR a partir de pAX980, e o produto da PCR é clonado no vetor de expressão pAX916 de Bacillus, ou outro vetor adequado, através de métodos bem conhecidos na arte. A estirpe resultante de Bacillus, contendo o vetor com axmi-031 é cultivado em meio de crescimento convencional, como o meio CYS (10 g/l de Bacto-casitone; 3 g/l de extrato de levedura; 6 g/l de KH2PO4; 14 g/l de K2HPO4, 0,5 mM de MgSO4; 0,05 mM de MnCl2; 0,05 mM de FeSO4), até esporulação ser evidente pelo exame microscópico. As amostras são preparadas, e a proteína AXMI-031 foi testada para a atividade em bioensaios contra C. elegans, e verificou-se que tinham atividade.

Exemplo 12. synaxmi-031, synaxmi-031 (apo) e synaxmi-031 (ER)

Em um aspecto da invenção, seqüências sintéticas de axmi-031 são geradas, por exemplo, synaxmi-031 (SEQ ID NO: 7). Estas seqüências sintéticas têm uma seqüência de DNA modificada em relação à seqüência axmi-031, e codifica uma proteína que é colinear com a proteína original AXMI-031, mas falta o "domínio cristal" C-terminal presente em AXMI-031. A seqüência do gene synaxmi-031 codifica proteínas SYNAXMI-031 (SEQ ID NO: 8), que compreende os primeiros 685 aminoácidos da proteína AXMI-031.

Em outro aspecto da invenção, versões modificadas do synaxmi-031 são projetadas tais que o peptídeo resultante é direcionado para uma organela vegetal, como o retículo endoplasmático ou o apoplasto. Seqüências peptídicas conhecidas para resultar no direcionamento da fusão de proteínas para organelas vegetais são conhecidas na arte. Por exemplo, a região N-terminal do gene da fosfatase ácida de White Lupin Lupinus albus (Genebank ID GI: 14276838, Miller et al. (2001) Plant Physiology 127: 594-606) é conhecida na arte de conduzir o retículo endoplasmático direcionando para proteínas heterólogas. Se a proteína de fusão resultante também contém uma seqüência de retenção endoplasmática compreendendo o peptídeo N-terminal lisina- ácido aspártico-ácido glutâmico-leucina (isto é, o motivo "KDEL" (SEQ ID NO: 36), o C-terminal, a proteína de fusão será orientada para o retículo endoplasmático. Se a proteína de fusão não tem um retículo endoplasmático direcionando a seqüência para o C-terminal, a proteína será orientada para o retículo endoplasmático, mas acabará por ser seqüestrado no apoplasto.

Assim, o gene synaxmi-03 IER (SEQ ID NO: 11) codifica uma proteína de fusão que contém trinta e um aminoácidos N- terminais do gene da fosfatase ácida de White Lupin Lupinus albus fundido para o N-terminal de SYNAXMI - 031, bem como a seqüência KDEL no C-terminal. Assim, a proteína resultante AXMI-03 IER (SEQ ID NO: 12) está prevista para ser direcionada para o retículo endoplasmático vegetal mediante a expressão em uma célula vegetal.

0 gene synaxmi-031 (apo) (SEQ ID NO: 9) codifica uma proteína de fusão que contém trinta e um aminoácidos N- terminais do gene da fosfatase ácida de White Lupin Lupinus albus fundido para o N-terminal de S YNAXMI - 031, mas carece da seqüência KDEL no C-terminal. Assim, a proteína resultante AXMI-031 (APO) (SEQ ID NO: 10) está prevista para ser direcionada para o apoplasto vegetal após expressão em uma célula vegetal.

Exemplo 13. Truncações de synaxmi-031 para o rendimento alternativo de proteínas AXMI-031

Construtos de DNA que resultaram na expressão de proteínas variantes AXMI-031 foram desenvolvidos e expressos, além de seqüências sintéticas de codificação de AXMI-031 e variantes e fragmentos destas (SEQ ID NO: 15- 27). Um subconjunto destes genes foi testado para atividade nematóide in vitro.

Tabela 4. Atividade nematicida de variantes de AXMI-

031 in vitro <table>table see original document page 73</column></row><table> NT = Não testado

Exemplo 14. Truncações e adição de domínio(s) celulares direcionando para expressão vegetal

Em outro aspecto da invenção, versões modificadas das seqüências synaxmi-031 são projetadas tais que o peptídeo resultante é direcionado para uma organela vegetal, como o retículo endoplasmático ou o apoplasto. Em outro aspecto da invenção, os genes são truncados, tais que o peptideo resultante é uma versão truncada do AXMI-031, que pode ou não ser modificado para direcionamento para organelas vegetais, tais como o apoplasto ou o retículo endoplasmático.

Em outro aspecto da invenção, versões modificadas são desenvolvidas, que resultam na expressão de variantes truncadas que contêm domínios concebidos para orientar as proteínas resultantes para organelas vegetais.

As seguintes seqüências nucleotídicas variantes foram concebidas:

aposynaxmi -031 (A-D) (SEQ ID NO: 28) codifica a

proteína APOAXMI-031 (A-D) (SEQ ID NO: 29) . apoSyn2axmi-031 (A-D) (SEQ ID NO: 30) codifica a proteína APOAXMI-031 (A-D) (SEQ ID NO: 31) . aposynaxmi-031 (fl) (SEQ ID NO: 37) codifica a proteína APOSYNAXMI-031 (FL) (SEQ ID NO: 38) . Synaxmi 031 (fl) -ER (SEQ ID NO: 32) codifica a proteína SYNAXMI-031 (FL)-ER (SEQ ID NO: 33).

Exemplo 15. Extração de DNA plasmidial de cepas ATX16538, ATXl6093 e ATX21049 Cepas ATX16538, ATX16093, e ATX21049 foram

selecionadas para análise. Culturas puras de cada linhagem foram cultivadas em grandes quantidades de meio rico. As culturas foram centrifugadas para colheita de células do sedimento. O sedimento celular foi então preparado por tratamento com EDS por métodos conhecidos na arte, resultando na quebra da parede celular e libertação de DNA. Proteínas e grandes DNAs genômicos foram então precipitados por uma elevada concentração de sal. 0 DNA plasmidial foi então precipitado com etanol. Em vários casos, o DNA plasmidial foi separado dos demais DNAs cromossômicos por centrifugação de alta velocidade através de um gradiente de cloreto de césio. Alternativamente, o DNA plasmidial foi purificado através da ligação a uma resina, tal como é conhecido na arte. Para cada cepa, a qualidade do DNA foi verificada pela visualização de um gel de agarose por métodos conhecidos na arte.

Exemplo 16. Clonagem de genes das cepas ATX 16538, ATX 16093, ATX21049 Bibl iotecas de DNA plasmidial foram preparadas a

partir do DNA de cada cepa. Isto pode ser alcançado de várias maneiras como conhecido na arte. Por exemplo, o DNA plasmidial purificado pode ser cisalhado em fragmentos de 5-10 kb e os fragmentos 5' e 3' de fita única reparados usando DNA polimerase T4 e fragmento de Klenow na presença de todos os quatro dNTPs, tal como é conhecido na arte. Fosfatos podem então ser anexados a extremidade 5' por tratamento com polinucleotídeo quinase T4, tal como é conhecido na arte. A reparação dos fragmentos de DNA podem então ser ligada por toda a noite em um vetor de cópia de padrão elevado (ou seja, pBLUESCRIPT®SK+), devidamente preparado para aceitar as inserções tal como é conhecido na arte (por exemplo, digestão com uma enzima de restrição produzindo extremidades blunt). A qualidade do DNA resultando bibliotecas digestão foi analisado por um subconjunto de clones com uma enzima de restrição conhecida por ter uma clivagem sítios flanqueiam a clonagem sítios. Uma alta porcentagem de clones foram determinados para conter inserções, geralmente com uma média inserir tamanho de 5-6 kb.

Exemplo 17. Sequenciamento através de Biblioteca de Placas Uma vez que a qualidade da biblioteca de DNA foi verificada e confirmada, colônias foram cultivadas em um caldo rico em 2ml de 96 blocos por toda a noite a 37°C, normalmente a uma velocidade de agitação de 3 50 rpm. Os blocos foram centrifugados para coletar as células, na parte inferior do bloco. Os blocos foram então preparados por Iise alcalina padrão em um formato de alto padrão.

As seqüências finais dos clones desta biblioteca foram, então, determinadas para um grande número de clones a partir de cada bloco da seguinte maneira: A seqüência do DNA de cada clone escolhido para análise foi determinada utilizando a técnica de sequenciamento com corante fluorescente terminal (Applied Biosystems), por métodos conhecidos na arte utilizando uma máquina automática de sequenciamento de DNA, e oligonucleotídeos iniciadores padrão que anelam o vetor plasmidial na região de flanqueamento do inserto.

Exemplo 18. Montagem e Análise de Dados do Sequenciamento

Seqüências de DNA obtidas foram compiladas em um projeto conjunto e alinhadas para formar contigs. Isto pode ser feito de forma eficiente usando um programa de computador, tais como Vector NTI, ou, em alternativa, utilizando os programas Pred/Phrap de alinhamento e análise de DNA, tal como descrito aqui. Estes contigs, juntamente com qualquer leitura individual que pode não ter sido adicionada a um contig, foram comparados com uma compilação de dados de todas as classes de genes pesticidas conhecidos. Contigs ou leituras individuais identificadas como tendo uma identidade para uma endotoxina ou gene pesticida conhecido foram analisados mais detalhadamente.

Da estirpe ATXl 6538, pAX2579 foi encontrado para conter uma um molde de leitura aberta com homologia para endotoxinas delta do tipo "cry". Este molde de leitura aberta (ORF) foi designado como axmi-039 (SEQ ID NO: 3), e a proteína codificada foi designada AXMI-039 (SEQ ID NO:5) . 0 ORF axmi-039 e a seqüência de acompanhamento (151 pb a montante do códon de início e 29 pb a jusante do códon de parada) foi amplificado por PCR, clonado em pRSFIB e sequenciado para gerar pAX2579. pAX2579 foi depositado junto ao ARS Patent Strain Collection em 9 de junho de2006, e atribuído o n2 NRRL B-30936. AXMI-039 é 43,9% de identidade de seqüência de aminoácidos para Cry5Bal, que é o homólogo mais próximo identificado.

Da estirpe ATX 16093, pAX4313 foi encontrado para conter um molde de 1 eitura aberto com homologia com a endotoxina delta do tipo "cry". Este molde de leitura aberto (ORF) foi designado axmi-040 (SEQ ID NO: 7) , e a proteína codificada foi designada AXMI-040 (SEQ ID NO: 8) . ΡΑΧ4313 foi depositada junto do ARS Patent Strain Collection em 9 de junho de 2006, e atribuído o na NRRL B-30937. AXMI-040 é 42,9% de identidade de seqüência de aminoácidos para Cry2lBal, que é o homólogo mais próximo identificado.

Da estirpe ATX21049, um molde de leitura aberto foi identificado que apresentou homologia com endotoxina delta do tipo "cry" . Este molde de leitura aberto foi designado axmi-049 (SEQ ID NO: 34) , e a proteína codificada foi designada AXMI-049 (SEQ ID NO: 35) . Este molde de leitura aberto foi amplificado por PCR e clonado em um vetor de rendimento pAX5039. pAX5039 foi depositado junto do ARS Patent Strain Collection em 29 de maio de 2 007, e atribuído o n2 NRRL B-50046. AXMI-049 tem 46,1% de identidade de seqüência de aminoácidos para Cry2lBal, que é o homólogo mais próximo identificado.

Exemplo 19. Vetorização dos genes pesticidas da invenção para expressão vegetal Cada uma das regiões codificantes dos genes da invenção estão conectadas independentemente com o promotor adequado e as seqüências terminadoras de expressão em plantas. Tais seqüências são bem conhecidas na arte e podem incluir o promotor actina do arroz ou o promotor ubiquitina do milho para expressão em monocotiledôneas, um promotor Arabidopsis UBQ 3 ou promotor CaMV 3 5S de expressão em dicotiledôneas, e os terminadores NSA ou PinII. Técnicas para produzir e confirmar construções promotor-gene- terminador também são bem conhecidas na arte. Exemplo 20. Transformação dos genes da invenção em células vegetais por Transformação mediada por Agrobacterium

Espigas foram colhidas 8-12 dias após a polinização.

Embriões foram isolados das espigas, e estes embriões de0,8-1,5 mm de tamanho foram utilizados para a transformação. Embriões foram plaqueados com o escutelo para cima sobre meios de incubação adequados, e incubados por toda a noite a 2 5 2C no escuro. No entanto, não é necessário, por si só para incubar os embriões durante a noite. Embriões são contatados com uma estirpe de Agrobacterium contendo os vetores adequados para transferência mediada por plasmidio Ti por 5-10 minutos e, em seguida, plaqueados em meio de co-cultura durante 3 dias (25°C no escuro). Depois do co-cultivo, os explantes são transferidos para o meio de recuperação por cinco dias (a250C no escuro). Explantes são incubados em meios de seleção por até oito semanas, dependendo da natureza e característica de cada seleção utilizada. Após o período de seleção, o calo resultante é transferido para o meio de maturação de embrião, até a formação de embriões somáticos maduros ser observada. Os embriões somáticos maduros resultantes são então colocados sob baixa luminosidade, e o processo de regeneração é iniciado como conhecido na arte. Os ramos resultantes são possibilitados de enraizar sobre o meio de enraizamento, e as plantas resultantes são transferidas para os potes creche e propagadas como plantas transgênicas. Exemplo 21. Plantas transgênicas expressando AXMI-031 e variantes.

Os cassetes de expressão vegetal descritos aqui são combinados com um marcador vegetal selecionável adequado para auxiliar nas seleções de células e tecidos transformados, e ligados em vetores de transformação vegetal. Estes podem incluir vetores binários de transformação mediada por Agrobacterium ou vetores plasmidiais simples para aerossol ou transformação por biobalística, synaxmi-031 (apo) foi clonado em um vetor de expressão vegetal, e esse vetor foi introduzido em Agrobacterium tumefaciens tal como é conhecido na arte. A região de codificação synaxmi-031 (apo) sob controle do promotor Arabidopsis UBQ3 (Norris et al. (1993) J. Plant Mol. Biol. 21: 895-906) foi introduzida em Arabidopsis thaliana por métodos florais conhecidos na arte, e plantas transgênicas foram selecionadas. A presença de synaxmi-031 (apo) na população transgênica Tl foi confirmada por análise por PCR tal como é conhecido na arte, utilizando oligonucleotídeos derivados da seqüência de synaxmi-031, que também anelam para synaxmi-031 (apo).

Tecido foliar e raiz de synaxmi-031 (apo) transgênicos contendo plantas foram preparados e separados em gel de poliacrilamida por controles não-transgênicos e diluições de proteínas AXMI-031, e transferidos para uma membrana como conhecido na arte. As amostras foram testadas para a presença do produto da expressão de synaxmi-031 (apo) por análise de Western Blot como conhecido na arte, utilizando anticorpos anti-AXMI-031 descritos a seguir. 0 produto de expressão de synaxmi-031 (apo) de tamanho esperado foi detectado em amostras de ambos os tecidos das folhas e raízes para plantas contendo synaxmi-031 (apo) transgênicos, mas não foi detectado nos controles não- transgênicos.

Tabela 5. Detecção de anticorpos SYNAXMI-031 (APO) em plantas transgênicas

<table>table see original document page 81</column></row><table>

Exemplo 22. Formação de cisto reduzido por plantas expressando AXMI-031.

Plantas transgênicas expressando synaxmi-031 (apo) foram testadas para a capacidade de resistir a infestação de Heterodera schachtii, em comparação com plantas controle. Plantas transgênicas, bem como plantas controle transformadas com vetor sozinho, foram infestadas com aproximadamente 100 hatchlings J2, e o número de nematóides entrando nas raízes, bem como o número de cistos formados, foram medidos. Plantas transgênicas expressando SYNAXMI-031 (APO) foram encontradas para ter reduzido consistentemente o número de nematóides que entram nas raízes, e reduzido o número de cistos formados em relação aos controles.

Tabela 6. Formação de cisto reduzido em plantas expressando AXMI-031

Formação de cisto Planta controle ++ Plantas expressando AXMI-031 (APO) +

Exemplo 23. Ensaios adicionais para atividade pesticida

A capacidade de uma proteína pesticida para agir como um pesticida sobre uma praga é freqüentemente avaliada de várias maneiras. Uma forma bem conhecida na arte é realizar um ensaio de alimentação. Nesse ensaio de alimentação, um expõe as pragas de uma amostra contendo compostos para serem testados, ou amostras controle. Freqüentemente este é feito colocando o material a ser ensaiado, ou uma diluição adequada de tais materiais, em um material que irá ingerir as pragas, tais como uma dieta artificial. O material a ser testado pode ser composto por um líquido, sólido ou chorume. O material a ser testado pode ser colocado sobre a superfície e, em seguida, secado. Alternativamente, o material a ser testado pode ser misturado com uma dieta artificial liqüefeita e, em seguida, dispensado na câmara de ensaio. A câmara de ensaio pode ser, por exemplo, um copo, um prato, ou uma placa de microplacas.

Ensaios para pragas sugadoras (pulgões, por exemplo) podem envolver a separação do material de teste para o inseto por uma divisão, idealmente uma porção que pode ser fracionada pelas partes bucais sugadoras dos insetos sugadores, a fim de permitir a ingestão de material de ensaio. Muitas vezes o material teste é misturado com um estimulante alimentar, como a sacarose, para promover a ingestão do composto teste.

Outros tipos de ensaios podem incluir microinjeção do material teste na boca, ou intestino das pragas, bem como o desenvolvimento de plantas transgênicas, seguido pelo teste da capacidade das pragas para se alimentar a partir da planta transgênica. Testes vegetais podem envolver isolamento das partes das plantas normalmente consumidas, por exemplo, pequenas gaiolas anexadas a uma folha, ou isolamento de plantas inteiras em gaiolas contendo insetos.

Outros métodos e abordagens para a análise de pragas são conhecidos na arte, e podem ser encontrados, por exemplo, em Robertson, J. L.& Η. K. Preisler. 1992. Pesticide bioassays with arthropods. CRC, Boca Raton, FL. Alternativamente, ensaios são comumente descritos nas revistas "Arthropod Management Tests" e "Journal of Economic Entomology" ou pela discussão com os membros da Sociedade Entomológica da América (ESA).

Exemplo 24. Transformação de células de milho com genes pesticidas da invenção

Espigas de milho foram colhidas 8-12 dias após a polinização. Embriões foram isolados das espigas, e os embriões de tamanho 0,8-1,5 mm foram utilizadas para a transformação. Embriões foram plaqueados com o escutelo para cima sobre um meio de incubação adequado, tais como meio DN62A5S (3,98 g/L de Sais N6; 1 mL/L (IOOOx de solução estoque) Vitaminas N6; 800 mg/L de L-asparagina; 100 mg/L de Mio-inositol, 1,4 g/L de L-prolina, 100 mg/L de Casaminoácidos, 50 g/L de sucrose; 1 mL/L (de 1 mg/ml de solução estoque) 2,4-D), e incubados por toda a noite a25°C no escuro.

Os explantes resultantes são transferidos para uma malha quadrada (3 0-40 por placa) , transferidos para meios osmóticos por 30-45 minutos e, em seguida, transferidos para uma placa irradiante (ver, por exemplo, Publicação PCT e No. WO/ 0138514 e Patente US No. 5.240.842).

Construções de DNA destinados para expressar os genes da invenção em células vegetais são acelerados em tecido vegetal utilizando um acelerador de feixe de aerossol, utilizando condições essencialmente como descritas na Publicação PCT No. WO/0138514. Após o irradiamento, os embriões são incubados por 3 0 min em meio osmótico e, em seguida, colocados sobre meios de incubação por toda a noite, a 25°C no escuro. Para evitar danificar os explantes irradiados, eles são incubados por pelo menos 24 horas antes da transferência para o meio de recuperação. Os embriões são então espalhados em um meio para o período de recuperação, por 5 dias, a 250C, no escuro, e em seguida, transferidos para iam meio de seleção. Explantes são incubados em meios de seleção por até oito semanas, dependendo da natureza e característica de cada seleção utilizada. Após o período de seleção, o calo resultante é transferido para o meio de maturação de embrião, até a formação de embriões somáticos maduros ser observada. Os embriões somáticos maduros resultantes são então colocados sob baixa luminosidade, e o processo de regeneração é iniciado através de métodos conhecidos na arte. Os ramos resultantes são possibilitados de enraizar sobre o meio de enraizamento, e as plantas resultantes são transferidas para os potes creche e propagadas como plantas transgênicas.

Materiais

Meio DN62A5S

<table>table see original document page 85</column></row><table> Ajustar o pH da solução para pH 5,8 com IN de KOH/IN de KCl, adicionar Gelrite (Sigma) para 3g/L, e autoclavar. Após arrefecimento a 50°C, adicionar 2 ml/L a 5 mg/ml de solução de nitrato de prata (Phytotechnology Labs). A receita produz cerca de 20 placas.

Todas as publicações e pedidos de patentes mencionados na especificação são indicativos do nível de habilidade das pessoas qualificadas na arte à qual pertence esta invenção. Todas as publicações e pedidos de patentes são aqui incorporados por referência à mesma medida, como se cada publicação ou pedido de patente fosse especificamente e individualmente indicado a ser incorporado por referência.

Apesar de a invenção exposta ter sido descrita em algum detalhe a título de ilustração e de exemplo para fins de clareza de entendimento, será evidente que algumas modificações e alterações possam ser praticadas no âmbito das reivindicações anexadas. LISTAGEM DE SEQÜÊNCIAS

<110> Depositante: Athenix Corporation

Nadine Carozzi Nicholas Duck Theodore Kahn Nalini Desai Shruti Jain Daniel John Tomso Rong Guo Julia Thissen

<120> Título da Invenção: AXMI-031, AXMI-039, AXMI-040 E AXMI-049, UMA FAMÍLIA

DE NOVOS GENES DE DELTA-ENDOTOXINA E MÉTODOS PARA SEU USO

<130> Referência do documento: 45600/329694

<150> Número do Documento de Prioridade: 60/813.774

<151> Data de Depósito do Documento de Prioridade: 14-06-2006

<160> Quantidade de SEQ ID NOs.: 38

<170> Software: FastSEQ for Windows Version 4.0

<210> SEQ ID NO: 1 <211> Comprimento: 3 558 <212> Tipo: DNA

<213> Organismo: Bacillus cereus/Bacillus thuringiensis

<220> Características:

<221> Nome/Chave: CDS

<222> Localização: (1)...(3558)

<400> Seqüência: 1

atg gat tgt aat tta caa tca caa caa aat att cca tat aat gta tta 48 Met Asp Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn IlePro Tyr Asn Val Leu .1 5 10 15

gca ata cca gta tct aat gtt aat tcg ttg act gat aca gtt gga gat 96 Ala Ile Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly Asp 20 25 30

tta aaa aaa gca tgg gaa gaa ttt caa aaa act ggt tct ttt tca tta 144 Leu Lys Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser Leu 35 40 45

aca gct tta caa caa gga ttt tct gct tca caa gga gga aca ttc aat 192 Thr Ala Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe Asn 50 55 60

tat tta aca tta cta caa tca gga ata tca tta gct ggt tct ttt gtt 240 Tyr Leu Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe Val .65 70 75 80 cct gga ggt act ttt gta gca cct att att aat atg gtt att ggt tgg 288 Pro Gly Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly Trp 85 90 95

tta tgg cca cat aaa aac aaa aat gcg gat aca gaa aat tta ata aat Leu Trp Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile Asn 100 105 HO

tta att gat tca gaa att caa aaa caa tta aac aaa gct tta tta gat Leu Ile Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu Asp 115 120 125

gca gat aga aat gag tgg age tet tat tta gaa tet ata ttt gat tet Ala Asp Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp Ser 130 135 140

tca aat aac cta aat ggt gca att gta gat gca cag tgg tca ggc act Ser Asn Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp Ser Gly Thr 145 150 155 160

gta aat act aca aat aga aca cta aga aat cca aca gaa tca gat tat Val Asn Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp Tyr 165 170 175

aca aat gtt gtt aca aat ttt att gca gcg gat ggt gac att gca aat 576 Thr Asn Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp Ile Ala Asn 180 185 190

aat gaa aat cac ata atg aat ggc aac ttt gac gta gct gca gca cct Asn Glu Asn His Ile Met Asn Gly Asn Phe Asp Val Ala Ala Ala Pro 195 200 205

tat ttt gtt ata gga gca aca gca cgt ttt gca gca atg caa tet tat Tyr Phe Val Ile Gly Ala Thr Ala Arg Phe Ala Ala Met Gln Ser Tyr 210 215 220

att aaa ttt tgt aat gct tgg att gat aaa gtt gga ttg agt gac gca Ile Lys Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp Ala 225 230 235 240

cag ctt act aca caa aag gct aat tta gat cgc acg aaa caa aat atg Gln Leu Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys Gln Asn Met 245 250 255

336

384

432

480

528

624

672

720

768

cgt aat gca att ctt aac tat aca caa caa gtt atg aaa gtt ttt aaa 816 Arg Asn Ala Ile Leu Asn Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys Val Phe Lys 260 265 270

gat tcc aaa aat atg cct aca ata ggt act aat aaa ttt agt gtt gat Asp Ser Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val Asp 275 280 285

acc tat aat gta tat att aaa gga atg aca tta aat gtt tta gat att Thr Tyr Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp Ile 290 295 300

864

912 gta gca Val Ala 305

gcc tta Ala Leu

gaa ggt Glu Gly

agt tat Ser Tyr

tat tat Tyr Tyr 370

cct aaa Pro Lys 385

tat gca Tyr Ala

c ta gga Leu Gly

gca act Ala Thr

gga gca Gly Ala 450

cca cct Pro Pro 465

aat cct Asn Pro

caa gct Gln Ala

ctt gtt Leu Val

ata tgg Ile Trp

gaa caa Glu Gln

aca gat Thr Asp 340

caa cat Gln His 355

aat gat Asn Asp

aaa gga Lys Gly

aac agt Asn Ser

gga tta Gly Leu 420

caa aac Gln Asn 435

tcc tta Ser Leu

ttt agt Phe Ser

tca gat Ser Asp

aat gta Asn Val 500

tca tat Ser Tyr 515

cct tca Pro Ser 310

aca cgt Thr Arg 325

gga age Gly Ser

agt cca Ser Pro

gaa tta Glu Leu

agt gga Ser Gly 390

aaa tat Lys Tyr 405

tet aca Ser Thr

agt aaa Ser Lys

cct ggt Pro Gly

tgt act Cys Thr 470

aca aat Thr Asn 485

aag gga Lys Gly

gat tta Asp Leu

tta tat Leu Tyr

gtc act Val Thr

cta aga Leu Arg

ata cct Ile Pro 360

caa aat Gln Asn 375

tac tet Tyr Ser

aaa tat Lys Tyr

cta tet Leu Ser

tat cta Tyr Leu 440

tat tgt Tyr Cys 455

tet acc Ser Thr

caa aaa Gln Lys

aac aca Asn Thr

aat cct Asn Pro 520

cca gat Pro Asp

ttt tca Phe Ser 330

att tac Ile Tyr 345

aat aat Asn Asn

cta gaa Leu Glu

tat cct Tyr Pro

ggt gat Gly Asp 410

gca cct Ala Pro 425

gat gga Asp Gly

act aca Thr Thr

gct aat Ala Asn

att aac Ile Asn 490

gga aaa Gly Lys 505

aaa aat Lys Asn

gat tat Asp Tyr 315

aat atg Asn Met

aat act Asn Thr

aat gtt Asn Val

tta gga Leu Gly 380

tat gga Tyr Gly 395

age aat Ser Asn

ata caa Ile Gln

gaa ate Glu Ile

gga tgt Gly Cys 460

ggc tat Gly Tyr 475

gct tta Ala Leu

tta gga Leu Gly

gta ttt Val Phe

act tca Thr Ser

gtt ggc Val Gly

ttt gat Phe Asp 350

aat tta Asn Leu 365

gta tat Val Tyr

ttt gtt Phe Val

gat cca Asp Pro

caa gtt Gln Val 430

cta aat Leu Asn 445

tca cca Ser Pro

aaa gca Lys Ala

tat cct Tyr Pro

gta ctg Val Leu 510

ggt gaa Gly Glu 525

caa aca Gln Thr 320

caa gaa Gln Glu 335

tet ttt Ser Phe

att tet Ile Ser

acc cct Thr Pro

tta aat Leu Asn 400

gaa tet Glu Ser 415

aat gca Asn Ala

gga ata Gly Ile

aca gaa Thr Glu

age tgt Ser Cys 480

ttt aca Phe Thr 495

gca agt Ala Ser

tta gat Leu Asp

960

1008

1056

1104

1152

1200

1248

1296

1344

1392

1440

1488

1536

1584 tca gat aca aat aat gtt atc tta aaa gga att cct gca gaa aaa gga 1632 Ser Asp Thr Asn Asn Val Ile Leu Lys Gly Ile Pro Ala Glu Lys Gly 530 535 540

tat ttt cct aat aat gcg cgt cct act gtt gta aaa gaa tgg att aat 1680 Tyr Phe Pro Asn Asn Ala Arg Pro Thr Val Val Lys Glu Trp Ile Asn 545 550 555 560

ggt gca agt gct gta cca ctt gat tca gga aat acc tta ttt atg acg 1728 Gly Ala Ser Ala Val Pro Leu Asp Ser Gly Asn Thr Leu Phe Met Thr 565 570 575

gat att aca tta caa att aca gga gga gat caa aaa ata ttt att gat 2016 Asp Ile Thr Leu Gln Ile Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile Phe Ile Asp 660 665 670

cga ata gaa ttt gtt cct act atg cct gta cct ggt aat act aac aac 2064 Arg Ile Glu Phe Val Pro Thr Met Pro Val Pro Gly Asn Thr Asn Asn 675 680 685

gct acg aat tta aca gct act caa tat aga att aga ata cgt tat gca 1776 Ala Thr Asn Leu Thr Ala Thr Gln Tyr Arg Ile Arg Ile Arg Tyr Ala 580 585 590

aat cca aat tca aat act caa atc ggt gta cga att aca caa aat ggt 1824 Asn Pro Asn Ser Asn Thr Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr Gln Asn Gly 595 600 605

tct cta att tcc agt agt aat cta aca ctt tat agt act act gat atg 1872 Ser Leu Ile Ser Ser Ser Asn Leu Thr Leu Tyr Ser Thr Thr Asp Met 610 615 620

aat aat act tta cca cta aat gta tat gta ata gga gaa aat gga aat 1920 Asn Asn Thr Leu Pro Leu Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu Asn Gly Asn 625 630 635 640

tat aca ctt caa gat tta tat aat act act aat gtt tta tca aca gga 1968 Tyr Thr Leu Gln Asp Leu Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu Ser Thr Gly 645 650 655

aat aac ggt aat aat aac ggt aat aat aat ccc cca cac cac gtt tgt 2112 Asn Asn Gly Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn Pro Pro His His Val Cys 690 695 700

gca ata gct ggt aca caa caa tct tgt tct gga ccg ccc aaa ttt gaa 2160 Ala Ile Ala Gly Thr Gln Gln Ser Cys Ser Gly Pro Pro Lys Phe Glu 705 710 715 720

caa gta agt gat tta gaa aaa att aca aca caa gta tat atg tta ttc 2208 Gln Val Ser Asp Leu Glu Lys Ile Thr Thr Gln Val Tyr Met Leu Phe 725 730 735

aaa tct tet ccg tat gaa gaa tta gct cta gaa gtt tcc agc tat caa 2256 Lys Ser Ser Pro Tyr Glu Glu Leu Ala Leu Glu Val Ser Ser Tyr Gln 740 745 750 att agt caa gta gca tta aaa gtt atg gca tta tct gat gaa cta ttt 2304 Ile Ser Gln Val Ala Leu Lys Val Met Ala Leu Ser Asp Glu Leu Phe 755 760 765

tgt gaa gaa aaa aac gta tta cga aaa tta gtc aat aaa gca aaa caa 23 52 Cys Glu Glu Lys Asn Val Leu Arg Lys Leu Val Asn Lys Ala Lys Gln 770 775 780

tta tta gaa gca agt aac tta cta gta ggt gga aat ttt gaa aca act 2400 Leu Leu Glu Ala Ser Asn Leu Leu Val Gly Gly Asn Phe Glu Thr Thr 785 790 795 800

caa aat tgg gta ctt gga aca aat gct tat ata aat tat gat tcg ttt 2448 Gln Asn Trp Val Leu Gly Thr Asn Ala Tyr Ile Asn Tyr Asp Ser Phe 805 810 815

tta ttt aat gga aat tat tta tct tta caa cca gca agt gga ttt ttc 2496 Leu Phe Asn Gly Asn Tyr Leu Ser Leu Gln Pro Ala Ser Gly Phe Phe 820 825 830

aca tct tat gct tat caa aaa ata gat gag tca aca tta aaa cca tat 2544 Thr Ser Tyr Ala Tyr Gln Lys Ile Asp Glu Ser Thr Leu Lys Pro Tyr 835 840 845

aca cga tat aaa gtt tct ggg ttc att ggg caa agt aat caa gta gaa 2 592 Thr Arg Tyr Lys Val Ser Gly Phe Ile Gly Gln Ser Asn Gln Val Glu 850 855 860

ctt att att tct cgt tat gga aaa gaa att gat aaa ata tta aat gtt 2640 Leu Ile Ile Ser Arg Tyr Gly Lys Glu Ile Asp Lys Ile Leu Asn Val 865 870 875 880

cca tat gca gga cct ctt cct ate act gct gat gca tca ata act tgt 2688 Pro Tyr Ala Gly Pro Leu Pro Ile Thr Ala Asp Ala Ser Ile Thr Cys 885 890 895

tgt gca cca gaa ata ggc caa tgt gat ggg gaa caa tct gat tct cat 2736 Cys Ala Pro Glu Ile Gly Gln Cys Asp Gly Glu Gln Ser Asp Ser His 900 905 910

ttc ttt aac tat age ate gat gta ggt gca ctt cac cca gaa tta aac 2784 Phe Phe Asn Tyr Ser Ile Asp Val Gly Ala Leu His Pro Glu Leu Asn 915 920 925

cct ggc att gaa att ggt ctt aaa att gtg caa tca aat ggt tat ata 2832 Pro Gly Ile Glu Ile Gly Leu Lys Ile Val Gln Ser Asn Gly Tyr Ile 930 935 940

aca att agt aat cta gaa att att gaa gaa cgt cca ctt aca gaa atg 2880 Thr Ile Ser Asn Leu Glu Ile Ile Glu Glu Arg Pro Leu Thr Glu Met 945 950 955 960

gaa att caa gca gtc aat cga aaa aat caa aaa tgg gaa aga gaa aaa 2 928 Glu Ile Gln Ala Val Asn Arg Lys Asn Gln Lys Trp Glu Arg Glu Lys 965 970 975 ctt cta gaa tgt gca agt att agt gaa ctt tta caa cca att att aat Leu Leu Glu Cys Ala Ser Ile Ser Glu Leu Leu Gln Pro Ile Ile Asn 980 985 990

caa ate gat tca ttg ttt aaa gat gga aac tgg tat aat gat att ctt Gln Ile Asp Ser Leu Phe Lys Asp Gly Asn Trp Tyr Asn Asp Ile Leu 995 1000 1005

cct cat gtc aca tat caa gat tta aaa aat att ata ata ccc gag tta Pro His Val Thr Tyr Gln Asp Leu Lys Asn Ile Ile Ile Pro Glu Leu 1010 1015 1020

cca aaa tta aaa cat tgg ttc ata gag aat ctc cca ggt gaa tat cat Pro Lys Leu Lys His Trp Phe Ile Glu Asn Leu Pro Gly Glu Tyr His 1025 1030 1035 1040

gaa att gaa caa aaa atg aaa gaa gct cta aaa tat gca ttt aca caa Glu Ile Glu Gln Lys Met Lys Glu Ala Leu Lys Tyr Ala Phe Thr Gln 1045 1050 1055

tta gac gag aaa aat tta ate cac aat ggt cac ttt aca act aac tta Leu Asp Glu Lys Asn Leu Ile His Asn Gly His Phe Thr Thr Asn Leu 1060 1065 1070

2976

3024

3072

3120

3168

3216

ata gat tgg caa gta gaa ggt gat gct caa atg aaa gta tta gaa aat Ile Asp Trp Gln Val Glu Gly Asp Ala Gln Met Lys Val Leu Glu Asn 1075 1080 1085

gat gct ctt gca tta caa ctt ttc aac tgg gat gct agt gct tca caa Asp Ala Leu Ala Leu Gln Leu Phe Asn Trp Asp Ala Ser Ala Ser Gln 1090 1095 1100

3264

3312

tet ata aat ata tta gaa ttt gat gaa gat aag gca tat aaa ctt cgc 3360 Ser Ile Asn Ile Leu Glu Phe Asp Glu Asp Lys Ala Tyr Lys Leu Arg 1105 1110 1115 1120

gta tat gct caa gga age gga aca ate caa ttt gga aac tgt gaa gat 3408 Val Tyr Ala Gln Gly Ser Gly Thr Ile Gln Phe Gly Asn Cys Glu Asp 1125 1130 1135

gaa gct ate caa ttt aat aca aac tca ttc ata tat caa gaa aaa ata Glu Ala Ile Gln Phe Asn Thr Asn Ser Phe Ile Tyr Gln Glu Lys Ile 1140 1145 1150

gtc tat ttc gat acc cca tca gtt aat tta cac ata caa tca gaa ggt Val Tyr Phe Asp Thr Pro Ser Val Asn Leu His Ile Gln Ser Glu Gly 1155 1160 1165

tet gaa ttt att gta agt agt ate gat cta att gaa tta tca gac gac Ser Glu Phe Ile Val Ser Ser Ile Asp Leu Ile Glu Leu Ser Asp Asp 1170 1175 1180

caa taa Gln * 1185

3456

3504

3552

3558 <210> SEQ ID NO: 2 <211> Comprimento: 1185 <212> Tipo: PRT

<213> Organismo: Bacillus cereus/Bacillus thuringiensis <400> Seqüência: 2

Met Asp Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr Asn Val Leu

1 5 10 15

Ala Ile Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly Asp

20 25 30

Leu Lys Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser Leu

35 40 45

Thr Ala Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe Asn

50 55 60

Tyr Leu Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe Val 65 70 75 80

Pro Gly Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly Trp

85 90 95

Leu Trp Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile Asn

100 105 HO

Leu Ile Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu Asp

115 120 125

Ala Asp Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp Ser

130 135 140

Ser Asn Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp Ser Gly Thr 145 150 155 160

Val Asn Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp Tyr

165 170 175

Thr Asn Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp Ile Ala Asn

180 185 190

Asn Glu Asn His Ile Met Asn Gly Asn Phe Asp Val Ala Ala Ala Pro

195 200 205

Tyr Phe Val Ile Gly Ala Thr Ala Arg Phe Ala Ala Met Gln Ser Tyr

210 215 220

Ile Lys Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp Ala 225 230 235 240

Gln Leu Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys Gln Asn Met

245 250 255

Arg Asn Ala Ile Leu Asn Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys Val Phe Lys

260 265 270

Asp Ser Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val Asp

275 280 285

Thr Tyr Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp Ile

290 295 300

Val Ala Ile Trp Pro Ser Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr Ser Gln Thr 305 310 315 320

Ala Leu Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln Glu

325 330 335

Glu Gly Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser Phe

340 345 350

Ser Tyr Gln His Ser Pro Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn Leu Ile Ser

355 360 365

Tyr Tyr Asn Asp Glu Leu Gln Asn Leu Glu Leu Gly Val Tyr Thr Pro

370 375 380

Pro Lys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr Gly Phe Val Leu Asn 385 390 395 400 Tyr Ala Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp Pro Glu Ser

405 410 415

Leu Gly Gly Leu Ser Thr Leu Ser Ala Pro Ile Gln Gln Val Asn Ala

420 425 430

Ala Thr Gln Asn Ser Lys Tyr Leu Asp Gly Glu Ile Leu Asn Gly Ile

435 440 445

Gly Ala Ser Leu Pro Gly Tyr Cys Thr Thr Gly Cys Ser Pro Thr Glu

450 455 460

Pro Pro Phe Ser Cys Thr Ser Thr Ala Asn Gly Tyr Lys Ala Ser Cys 465 470 475 480

Asn Pro Ser Asp Thr Asn Gln Lys Ile Asn Ala Leu Tyr Pro Phe Thr

485 490 495

Gln Ala Asn Val Lys Gly Asn Thr Gly Lys Leu Gly Val Leu Ala Ser

500 505 510

Leu Val Ser Tyr Asp Leu Asn Pro Lys Asn Val Phe Gly Glu Leu Asp

515 520 525

Ser Asp Thr Asn Asn Val Ile Leu Lys Gly Ile Pro Ala Glu Lys Gly

530 535 540

Tyr Phe Pro Asn Asn Ala Arg Pro Thr Val Val Lys Glu Trp Ile Asn 545 550 555 560

Gly Ala Ser Ala Val Pro Leu Asp Ser Gly Asn Thr Leu Phe Met Thr

565 570 575

Ala Thr Asn Leu Thr Ala Thr Gln Tyr Arg Ile Arg Ile Arg Tyr Ala

580 585 590

Asn Pro Asn Ser Asn Thr Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr Gln Asn Gly

595 600 605

Ser Leu Ile Ser Ser Ser Asn Leu Thr Leu Tyr Ser Thr Thr Asp Met

610 615 620

Asn Asn Thr Leu Pro Leu Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu Asn Gly Asn 625 630 635 640

Tyr Thr Leu Gln Asp Leu Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu Ser Thr Gly

645 650 655

Asp Ile Thr Leu Gln Ile Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile Phe Ile Asp

660 665 670

Arg Ile Glu Phe Val Pro Thr Met Pro Val Pro Gly Asn Thr Asn Asn

675 680 685

Asn Asn Gly Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn Pro Pro His His Val Cys

690 695 700

Ala Ile Ala Gly Thr Gln Gln Ser Cys Ser Gly Pro Pro Lys Phe Glu 705 710 715 720

Gln Val Ser Asp Leu Glu Lys Ile Thr Thr Gln Val Tyr Met Leu Phe

725 730 735

Lys Ser Ser Pro Tyr Glu Glu Leu Ala Leu Glu Val Ser Ser Tyr Gln

740 745 750

Ile Ser Gln Val Ala Leu Lys Val Met Ala Leu Ser Asp Glu Leu Phe

755 760 765

Cys Glu Glu Lys Asn Val Leu Arg Lys Leu Val Asn Lys Ala Lys Gln

770 775 780

Leu Leu Glu Ala Ser Asn Leu Leu Val Gly Gly Asn Phe Glu Thr Thr 785 790 795 800

Gln Asn Trp Val Leu Gly Thr Asn Ala Tyr Ile Asn Tyr Asp Ser Phe

805 810 815

Leu Phe Asn Gly Asn Tyr Leu Ser Leu Gln Pro Ala Ser Gly Phe Phe

820 825 830

Thr Ser Tyr Ala Tyr Gln Lys Ile Asp Glu Ser Thr Leu Lys Pro Tyr 835 840 845 <formula>formula see original document page 95</formula> <400> Seqüência: 3

atg gca aca ctt aat aat atg ttt tca gtt cct tat aat gta cta gct

Met Ala Thr Leu Asn Asn Met Phe Ser Val Pro Tyr Asn Val Leu Ala 1 5 10 15

48

cta ccc att ate ccc aat tet ate tta act ttt gaa gat aat cga aaa 96 Leu Pro Ile Ile Pro Asn Ser Ile Leu Thr Phe Glu Asp Asn Arg Lys 20 25 30

aaa ata gaa gag ggt att aaa gag ttt gaa aag act gga cgt ata aaa Lys Ile Glu Glu Gly Ile Lys Glu Phe Glu Lys Thr Gly Arg Ile Lys 35 40 45

144

ccc ctt aaa gat tta ata gag ctc ata ttc aaa ggg tat agt gac gat 192 Pro Leu Lys Asp Leu Ile Glu Leu Ile Phe Lys Gly Tyr Ser Asp Asp 50 55 60

gaa tet tet tac gca gca tta gtt caa act atg ctt gtc gtt att ccc 240 Glu Ser Ser Tyr Ala Ala Leu Val Gln Thr Met Leu Val Val Ile Pro 65 70 75 80

ttg gcg ttc cct gaa tta gcc cca gtt ctt cca att att ggc gta gta 288 Leu Ala Phe Pro Glu Leu Ala Pro Val Leu Pro Ile Ile Gly Val Val 85 90 95

att aat ttc gtt ttt cca ggt ttg aag ggt tet gct aaa tca acc tat 336 Ile Asn Phe Val Phe Pro Gly Leu Lys Gly Ser Ala Lys Ser Thr Tyr 100 105 110

aca atg att aca gag atg gtt gat aaa gcc att aac caa tca ttc acg 384 Thr Met Ile Thr Glu Met Val Asp Lys Ala Ile Asn Gln Ser Phe Thr 115 120 125

gcc cag att aca aat ata tta aca aac aat att act ggt ata caa aat 432 Ala Gln Ile Thr Asn Ile Leu Thr Asn Asn Ile Thr Gly Ile Gln Asn 130 135 140

aat ata caa tet gtt tac gac gca atg age aat gcc att gga aca aat 480 Asn Ile Gln Ser Val Tyr Asp Ala Met Ser Asn Ala Ile Gly Thr Asn 145 150 155 160

gac aca att cat aat ttc ate aga aat aat gat aca aca cct tgc tet 52 8 Asp Thr Ile His Asn Phe Ile Arg Asn Asn Asp Thr Thr Pro Cys Ser 165 170 175

caa aac aat cag cca gct tgt cct tgt cct cca aat aat caa tgt tta 576 Gln Asn Asn Gln Pro Ala Cys Pro Cys Pro Pro Asn Asn Gln Cys Leu 180 185 190

caa aaa gtt gtt gat gaa tat act aaa gca ata gct aat ate gat ctc 624 Gln Lys Val Val Asp Glu Tyr Thr Lys Ala Ile Ala Asn Ile Asp Leu 195 200 205

att ate cct caa ttt cat gat cca ctt act ggt gta att tcc gat tta 672 Ile Ile Pro Gln Phe His Asp Pro Leu Thr Gly Val Ile Ser Asp Leu 210 215 220 gct act gca aac atg tat att tta cct tta tac gct caa act gtt aat Ala Thr Ala Asn Met Tyr Ile Leu Pro Leu Tyr Ala Gln Thr Val Asn 225 230 235 240

tta aaa tta att ttg cgt cag agt ttc att gaa ttt atg gag aaa tat Leu Lys Leu Ile Leu Arg Gln Ser Phe Ile Glu Phe Met Glu Lys Tyr 245 250 255

aaa tat gat gaa aaa gaa act gtt ttt cag gct ttt att aat gct gat Lys Tyr Asp Glu Lys Glu Thr Val Phe Gln Ala Phe Ile Asn Ala Asp 260 265 270

att cca gaa caa att aaa aaa ctt cgt caa gat att ate acg tat aca Ile Pro Glu Gln Ile Lys Lys Leu Arg Gln Asp Ile Ile Thr Tyr Thr 275 280 285

aaa gat att tat atg caa ttt gaa gct cac gct ccc tac ccg act tat Lys Asp Ile Tyr Met Gln Phe Glu Ala His Ala Pro Tyr Pro Thr Tyr 290 295 300

aat tca aaa aaa caa cta aat gac tat ate cgt tat aca aga att ate Asn Ser Lys Lys Gln Leu Asn Asp Tyr Ile Arg Tyr Thr Arg Ile Ile 305 310 315 320

caa gta tat tgt ttg gat tta gta gca atg tgg cct acg ctt gat cga Gln Val Tyr Cys Leu Asp Leu Val Ala Met Trp Pro Thr Leu Asp Arg 325 330 335

gtg aat tat gca tta cct gtc caa caa aat atg aca cgc att ata ttt Val Asn Tyr Ala Leu Pro Val Gln Gln Asn Met Thr Arg Ile Ile Phe 340 345 350

gga gat ctt att ggc cct gta gaa act gtg cct cag gtt ccc cgc caa Gly Asp Leu Ile Gly Pro Val Glu Thr Val Pro Gln Val Pro Arg Gln 355 360 365

aat tca gat aac ttt cat ttt aat ttg tet gat gtt tat aga aac ccc Asn Ser Asp Asn Phe His Phe Asn Leu Ser Asp Val Tyr Arg Asn Pro 370 375 380

tta cct aat aat gat att ttt aat tac cgt tat ggc ggg ctt caa att Leu Pro Asn Asn Asp Ile Phe Asn Tyr Arg Tyr Gly Gly Leu Gln Ile 385 390 395 400

tet aaa gcg caa ttt atg aca tat tat aaa aaa ttc gga gct ttc agt Ser Lys Ala Gln Phe Met Thr Tyr Tyr Lys Lys Phe Gly Ala Phe Ser 405 410 415

acc cat gat gaa tat tat tat gta gat ggg cat cgc cta agt ttt aat Thr His Asp Glu Tyr Tyr Tyr Val Asp Gly His Arg Leu Ser Phe Asn 420 425 430

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720

768

816

864

912

960

1008

1056

1104

1152

1200

1248

1296

1344 <formula>formula see original document page 98</formula> caa ggt aat tat ata gta ttt cca cag cca aac att gat act gtc aca 2064 Gln Gly Asn Tyr Ile Val Phe Pro Gln Pro Asn Ile Asp Thr Val Thr 675 680 685

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aca ttt gat ttt acc att gta aat tct gga aac tca gat act att tta Thr Phe Asp Phe Thr Ile Val Asn Ser Gly Asn Ser Asp Thr Ile Leu 705 710 715 720

gat cga att gaa ttt gtt cct att gta act tct aat aaa att caa caa Asp Arg Ile Glu Phe Val Pro Ile Val Thr Ser Asn Lys Ile Gln Gln 725 730 735

gat ttc act att tct cct gga aca agt caa gta att tgg acc gga aat Asp Phe Thr Ile Ser Pro Gly Thr Ser Gln Val Ile Trp Thr Gly Asn 740 745 750

tca gct aac act ata gat att aca att att gac aac gta gat aca age Ser Ala Asn Thr Ile Asp Ile Thr Ile Ile Asp Asn Val Asp Thr Ser 755 760 765

ggt tta ttc gtt caa att ttc caa aaa ggt aag caa ctg cat gga gaa 23 52 Gly Leu Phe Val Gln Ile Phe Gln Lys Gly Lys Gln Leu His Gly Glu 770 775 780

2112

2160

2208

2256

2304

cta act ttg att gat ccc gct cat att caa cgt aca ttc tct gaa aaa Leu Thr Leu Ile Asp Pro Ala His Ile Gln Arg Thr Phe Ser Glu Lys 785 790 795 800

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2400

2448

2496

2544

2592

2640

2688 agt aaa gcg cgt aat ctt ctc cta gga gga agt ttt gat aat ttg gat 2736 Ser Lys Ala Arg Asn Leu Leu Leu Gly Gly Ser Phe Asp Asn Leu Asp 900 905 910

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ttt aaa agt gat cat ata tta tta cca cta cca aca aca ttg tat cca Phe Lys Ser Asp His Ile Leu Leu Pro Leu Pro Thr Thr Leu Tyr Pro 930 935 940

aag gtg caa cgt gct gct aga gat tgg aaa caa aag tat gat caa gag Lys Val Gln Arg Ala Ala Arg Asp Trp Lys Gln Lys Tyr Asp Gln Glu 1075 1080 1085

2784

2832

tct tat ctt ttc caa aaa gta gag gaa tct aaa tta aaa gca aat aca 2880 Ser Tyr Leu Phe Gln Lys Val Glu Glu Ser Lys Leu Lys Ala Asn Thr 945 950 955 960

cgt tat act gtc tct ggt ttc ate gcg cat gca gag gat tta gaa att Arg Tyr Thr Val Ser Gly Phe Ile Ala His Ala Glu Asp Leu Glu Ile 965 970 975

gtt gtt tct cgt tat ggg caa gaa ata aag aaa gtg gtg caa gtt cca Val Val Ser Arg Tyr Gly Gln Glu Ile Lys Lys Val Val Gln Val Pro 980 985 990

tat ggt gaa gca ttc cca ttg aca tcg age gga cca att tgt tgt aga Tyr Gly Glu Ala Phe Pro Leu Thr Ser Ser Gly Pro Ile Cys Cys Arg 995 1000 1005

cca cgt tct aga gta aat ggt aaa cct gct gat cca cat ttc ttt agt Pro Arg Ser Arg Val Asn Gly Lys Pro Ala Asp Pro His Phe Phe Ser 1010 1015 1020

tac age att gat gta ggt gca tta gat gtg gaa gca aat cct ggt att Tyr Ser Ile Asp Val Gly Ala Leu Asp Val Glu Ala Asn Pro Gly Ile 1025 1030 1035 1040

gaa tta ggg ttt cgt att gta gag cca act gga atg gca cgt gta agt Glu Leu Gly Phe Arg Ile Val Glu Pro Thr Gly Met Ala Arg Val Ser 1045 1050 1055

2928

2976

3024

3072

3120

3168

aac tta gaa att cgt gag gat cgc cca tta acg gca aat gaa ata cgt 3216 Asn Leu Glu Ile Arg Glu Asp Arg Pro Leu Thr Ala Asn Glu Ile Arg 1060 1065 1070

3264

cgt gcg gaa gta aga gcc ctg att caa cct gtt tta aat caa ate aat 3312 Arg Ala Glu Val Arg Ala Leu Ile Gln Pro Val Leu Asn Gln Ile Asn 1090 1095 1100

gcg ttg tat gaa aat gaa gat tgg aat gga gca att cgt tct gga gtt Ala Leu Tyr Glu Asn Glu Asp Trp Asn Gly Ala Ile Arg Ser Gly Val 1105 1110 1115 1120

3360 tct tat cat gac tta gaa gca att gtt tta cca aca tta cca aaa tta Ser Tyr His Asp Leu Glu Ala Ile Val Leu Pro Thr Leu Pro Lys Leu 1125 1130 1135

gct caa ttc caa gaa gca tta aat cgt gcg tat acg caa ctc gaa gga Ala Gln Phe Gln Glu Ala Leu Asn Arg Ala Tyr Thr Gln Leu Glu Gly 1155 1160 1165

gtg gaa aca cac ccg cat aag ttt gcg aat ttt aca act tct caa cgt Val Glu Thr His Pro His Lys Phe Ala Asn Phe Thr Thr Ser Gln Arg 1250 1255 1260

3408

aat cat tgg ttt atg tcc gat atg tta ggg gaa caa ggt tcc att tta 3456 Asn His Trp Phe Met Ser Asp Met Leu Gly Glu Gln Gly Ser Ile Leu 1140 1145 1150

3504

agt aca att ctg cat aat ggc cat ttc aca aca gat gca gca aat tgg 3 552 Ser Thr Ile Leu His Asn Gly His Phe Thr Thr Asp Ala Ala Asn Trp 1170 1175 1180

acg ata gaa ggc gat gca cat cag gta gta tta gaa gat ggt aga cgt Thr Ile Glu Gly Asp Ala His Gln Val Val Leu Glu Asp Gly Arg Arg 1185 1190 1195 1200

gta tta cga ttg cca gat tgg tct tcg agt ttg tct caa acg att gaa Val Leu Arg Leu Pro Asp Trp Ser Ser Ser Leu Ser Gln Thr Ile Glu 1205 1210 1215

ate gag aat ttt gat cca gat aaa gaa tat caa tta gta ttt cat ggg Ile Glu Asn Phe Asp Pro Asp Lys Glu Tyr Gln Leu Val Phe His Gly 1220 1225 1230

3600

3648

3696

caa gga gaa gga acg gtt acg ttg gag cat ggt gaa gaa gga gaa tat 3744 Gln Gly Glu Gly Thr Val Thr Leu Glu His Gly Glu Glu Gly Glu Tyr 1235 1240 1245

3792

caa gga att acg ttt gaa tca aat aaa gtg aca gtg act att tct tca 3 840 Gln Gly Ile Thr Phe Glu Ser Asn Lys Val Thr Val Thr Ile Ser Ser 1265 1270 1275 1280

gaa gat gga gaa ttc tta gcg gat aat att gca att gtg gaa gtt cct Glu Asp Gly Glu Phe Leu Ala Asp Asn Ile Ala Ile Val Glu Val Pro 1285 1290 1295

3888

atg ttt aac aag aat caa atg gtc aat gaa aat aga ggt gta aat ata 3 93 6 Met Phe Asn Lys Asn Gln Met Val Asn Glu Asn Arg Gly Val Asn Ile 1300 1305 1310

aat age aat aca aat atg aat agt age aat aac age aat aac caa taa Asn Ser Asn Thr Asn Met Asn Ser Ser Asn Asn Ser Asn Asn Gln * 1315 1320 1325

3984

<210> SEQ ID NO: 4 <211> Comprimento: 1327 <212> Tipo: PRT <213> Organismo: Desconhecido <220> Características:

<223> Outras Informações: Isolado de amostra de solo

<400> Seqüência: 4 Ala Met Ala Thr Leu Asn Asn Met Phe Ser Val Pro Tyr Asn Val Leu 1 5 10 15 Leu Pro Ile Ile Pro Asn Ser Ile Leu Thr Phe Glu Asp Asn Arg Lys 20 25 30 Lys Ile Glu Glu Gly Ile Lys Glu Phe Glu Lys Thr Gly Arg Ile Lys 35 40 45 Pro Leu Lys Asp Leu Ile Glu Leu Ile Phe Lys Gly Tyr Ser Asp Asp 50 55 60 Glu Ser Ser Tyr Ala Ala Leu Val Gln Thr Met Leu Val Val Ile Pro 65 70 75 80 Leu Ala Phe Pro Glu Leu Ala Pro Val Leu Pro Ile Ile Gly Val Val 85 90 95 Ile Asn Phe Val Phe Pro Gly Leu Lys Gly Ser Ala Lys Ser Thr Tyr 100 105 110 Thr Met Ile Thr Glu Met Val Asp Lys Ala Ile Asn Gln Ser Phe Thr 115 120 125 Ala Gln Ile Thr Asn Ile Leu Thr Asn Asn Ile Thr Gly Ile Gln Asn 130 135 140 Asn Ile Gln Ser Val Tyr Asp Ala Met Ser Asn Ala Ile Gly Thr Asn 145 150 155 160 Asp Thr Ile His Asn Phe Ile Arg Asn Asn Asp Thr Thr Pro Cys Ser 165 170 175 Gln Asn Asn Gln Pro Ala Cys Pro Cys Pro Pro Asn Asn Gln Cys Leu 180 185 190 Gln Lys Val Val Asp Glu Tyr Thr Lys Ala Ile Ala Asn Ile Asp Leu 195 200 205 Ile Ile Pro Gln Phe His Asp Pro Leu Thr Gly Val Ile Ser Asp Leu 210 215 220 Ala Thr Ala Asn Met Tyr Ile Leu Pro Leu Tyr Ala Gln Thr Val Asn 225 230 235 240 Leu Lys Leu Ile Leu Arg Gln Ser Phe Ile Glu Phe Met Glu Lys Tyr 245 250 255 Lys Tyr Asp Glu Lys Glu Thr Val Phe Gln Ala Phe Ile Asn Ala Asp 260 265 270 Ile Pro Glu Gln Ile Lys Lys Leu Arg Gln Asp Ile Ile Thr Tyr Thr 275 280 285 Lys Asp Ile Tyr Met Gln Phe Glu Ala His Ala Pro Tyr Pro Thr Tyr 290 295 300 Asn Ser Lys Lys Gln Leu Asn Asp Tyr Ile Arg Tyr Thr Arg Ile Ile 305 310 315 320 Gln Val Tyr Cys Leu Asp Leu Val Ala Met Trp Pro Thr Leu Asp Arg 325 330 335 Val Asn Tyr Ala Leu Pro Val Gln Gln Asn Met Thr Arg Ile Ile Phe 340 345 350 Gly Asp Leu Ile Gly Pro Val Glu Thr Val Pro Gln Val Pro Arg Gln 355 360 365 Asn Ser Asp Asn Phe His Phe Asn Leu Ser Asp Val Tyr Arg Asn Pro 370 375 380 Leu Pro Asn Asn Asp Ile Phe Asn Tyr Arg Tyr Gly Gly Leu Gln Ile

385 390 395 400 Ser Lys Ala Gln Phe Met Thr Tyr Tyr Lys Lys Phe Gly Ala Phe Ser

405 410 415

Thr His Asp Glu Tyr Tyr Tyr Val Asp Gly His Arg Leu Ser Phe Asn

420 425 430

Thr Ser Asp Lys Lys Thr Ile Glu Ile Asn Ala His Gln Asn Ser His

435 440 445

Asp Thr Ile Glu Lys Asp Val Ile Asp Gln Leu Gly Gly Tyr Val Thr

450 455 460

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Gly Asn Ala Ile Asp Arg Thr Ala Leu Thr Thr Ser Thr Gly Asp Lys

485 490 495

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500 505 510

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515 520 525

Val Gln Ala Ile Tyr Pro Val Gln Pro Asn Lys Tyr Glu Tyr Asp Asp

530 535 540

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Asp Val Ser Phe Ile Pro Gln Leu Asn Ala Glu Asp Val Ile Thr Thr

565 570 575

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580 585 590

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595 600 605

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610 615 620

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645 650 655

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675 680 685

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690 695 700

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725 730 735

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755 760 765

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805 810 815

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820 825 830

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1300 1305 1310

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<223> Outras Informações: Isolado de amostra de solo

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atg aat gat atg aca aat tta tct aaa tta tat tca cct gta cca tac 48 Met Asn Asp Met Thr Asn Leu Ser Lys Leu Tyr Ser Pro Val Pro Tyr 15 10 15

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96

144

192

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aat gat tat aaa agt gca gtt tct aaa att aat aat cca aat gtt ata 480 Asn Asp Tyr Lys Ser Ala Val Ser Lys Ile Asn Asn Pro Asn Val Ile 145 150 155 160

336

384 gat age gat ttt gaa tet tta cat gea aca att aat cta aca tta tca Asp Ser Asp Phe Glu Ser Leu His Ala Thr Ile Asn Leu Thr Leu Ser 165 170 175

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576

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672

720

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960

1008

1056

1104

1152 acg tat gat gat tat tac act tat ggc gga gat tct gct caa aat act 1200 Thr Tyr Asp Asp Tyr Tyr Thr Tyr Gly Gly Asp Ser Ala Gln Asn Thr 385 390 395 400

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1248

1296

1344

1392

1440

1488

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1584

1632

1680

1728

1776

1824 tat ata gag gga aat gct ggt aaa tat gct tta tat caa ttt aca caa Tyr He Glu Gly Asn Ala Gly Lys Tyr Ala Leu Tyr Gln Phe Thr Gln 610 615 620

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1872

1920

1968

2016

2064

2112

2160

2208

2256

2304

2352

2400

2448

2496 ctg agt aaa gca cgc aat gta tta gtc ggt gga aac ttt gaa gga aat 2 544 Leu Ser Lys Ala Arg Asn Val Leu Val Gly Gly Asn Phe Glu Gly Asn 835 840 845

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2976

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3120

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aaa gaa caa gaa gaa aaa caa taa 3720 Lys Glu Gln Glu Glu Lys Gln * 1235

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<213> Organismo: Desconhecido

<220> Características:

<223> Outras Informações: Isolado de amostra de solo <400> Seqüência: 6

Met Asn Asp Met Thr Asn Leu Ser Lys Leu Tyr Ser Pro Val Pro Tyr

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Asn Val Leu Ala Thr Pro Asn Val Leu Ala Thr Asn Lys Gln Pro Leu

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130 135 140

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Asp Ser Asp Phe Glu Ser Leu His Ala Thr Ile Asn Leu Thr Leu Ser

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Lys Ile Lys Gly Ser Leu Ser Tyr Phe Ser Ile Phe Asn Gln Pro Asp

180 185 190

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210 215 220

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Phe Lys Gln Asn Met Asn Ser Phe Val Leu Thr Ile Lys Asn Asn Tyr

245 250 255

Gln Thr Gly Phe Asn Tyr Ile Thr Asn Glu Ala Tyr Lys Ala His Pro

260 265 270

Thr Asn Pro Ser Lys Thr Ile Leu Pro Phe Glu Asn Lys Met Thr Leu

275 280 285

Asp Cys Phe Asp Tyr Val Ala Met Trp Pro Thr Leu Tyr Pro Asp Asp

290 295 300

Tyr Tyr Thr Glu Lys Thr Asn Leu Gln Lys Thr Arg Leu Leu Phe Ser 305 310 315 320

Pro Ile Leu Gly Arg Met Pro Asp Ser Arg Ser Gln Trp Leu His Ser

325 330 335

Lys Pro Tyr Ser Trp Asp Ser Asn Lys Thr Phe Thr Phe Asp His Tyr

340 345 350

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355 360 365

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370 375 380

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Ser Phe Thr Thr Asp Asn Pro Leu Ala Ile Met Tyr Pro Thr Arg Gly

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Gly Asn Tyr Val Gly Thr Ala Ile Lys Trp Phe Asp Asp Thr Val Gln

420 425 430

Gly Gly Arg Ser Ser Gly Tyr Thr Thr Pro Tyr Ser Gly Asp Pro Asp 435 440 445 Pro Ile Ile Thr Pro Asp Asp His Lys Val Asn Phe Leu Tyr Thr Val

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Thr Ser Ser Ser Gln Thr Glu Leu Ala Asn Thr Val Thr Asp Tyr Gly

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Gly Val Glu Lys Lys Ala Leu Arg Lys Leu Val Asn Gln Ala Lys Gln

Leu Ser Lys Ala Arg Asn Val Leu Val Gly Gly Asn Phe Glu Gly Asn

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Ala Asn Leu Gly Ile Glu Phe Gly Leu Arg Ile Val Lys Ser Asn Gly

980 985 990

Phe Ala Lys Ile Ser Asn Leu Glu Ile Lys Glu Asp Arg Pro Leu Thr

995 1000 1005

Asp Gln Glu Ile Lys Lys Val Gln His Lys Glu Gln Lys Trp Lys Lys

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Ala Phe Asn Lys Glu Gln Ala Glu Leu Thr Ala Thr Leu Gln Pro Thr 1025 1030 1035 1040

Leu Asn Gln Ile Asn Ala Leu Tyr Gln Gln Glu Asp Trp Asn Gly Ser

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Thr Leu Pro Lys Gln Thr His Trp Phe Met Glu Asn Arg Glu Gly Glu

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1090 1095 HOO

Gln Gln Ile Glu Glu Gln Asn Leu Ile His Asn Gly Ser Phe Thr Ser 1105 HlO 1H5 H20

Gly Leu Thr Asp Trp Thr Val Thr Gly Asp Ala Gln Ile Thr Ile Tyr

1125 1130 1135

Asp Glu Asp Pro Val Leu Glu Leu Ala His Trp Asp Ala Ser Val Ser

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Gln Thr Ile Glu Ile Thr Asp Phe Glu Glu Glu Lys Glu Tyr Lys Leu

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Arg Val Arg Gly Lys Gly Lys Gly Thr Val Thr Val Gln His Glu Glu

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Glu Leu Glu Thr Met Thr Phe Asn Thr Thr Ser Phe Thr Thr Lys Glu 1185 U90 1195 1200

Gln Thr Phe Tyr Phe Glu Gly Asn Thr Ile Asp Val His Val Gln Ser

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Glu Asn Asn Ala Phe Leu Val Asp Ser Val Glu Leu Ile Glu Val Val

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Lys Glu Gln Glu Glu Lys Gln 1235

<210> SEQ ID NO: 7 <211> Comprimento: 2059 <212> Tipo: DNA

<213> Organismo: Seqüência Artificial

<220> Características:

<223> Outras Informações: synaxmi-031

<221> Nome/Chave: CDS

<222> Localização: (1)...(2058) <400> Seqüência: 7

atg gat tgc aat ctc cag age cag cag aat ate cca tac aat gtg ctt Met Asp Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr Asn Val Leu 1 5 10 15

gct ate cct gtt age aat gtt aat age ctt acg gat acg gtt ggc gat Ala Ile Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly Asp 20 25 30

cta aag aag gea tgg gaa gag ttc cag aag acg ggc age ttc tcc ctt Leu Lys Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser Leu 35 40 45

acc gea ctc cag cag ggc ttc age gct tcc cag ggc ggg acg ttc aat Thr Ala Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe Asn 50 55 60

tac ctc acc ctc ctc cag tcc ggg ate tcc ctg gct ggc age ttc gtg Tyr Leu Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe Val 65 70 75 80

cct ggc ggc acc ttc gtt gct cca ate ate aat atg gtg ate ggc tgg Pro Gly Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly Trp 85 90 95

ctc tgg cct cat aag aat aag aat gea gat acg gaa aat ctg ate aat Leu Trp Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile Asn 100 105 HO

ctg ate gat tca gaa ate cag aag cag ctg aat aag gct ctg ctg gat Leu Ile Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu Asp 115 120 125

gct gat cgc aat gaa tgg age age tac ctc gag tcc ate ttc gat age Ala Asp Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp Ser 130 135 140

age aat aat ctg aat ggc gea ate gtt gat gct cag tgg tcc ggc acc Ser Asn Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp Ser Gly Thr 145 150 155 160

gtg aat acg acc aat cgt acg ctt cgt aat cct acg gaa tca gat tac Val Asn Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp Tyr 165 170 175

acc aat gtg gtg acg aat ttc ate gea gea gat ggg gat ate gct aat Thr Asn Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp Ile Ala Asn 180 185 190

aat gaa aat cat ate atg aat ggg aat ttc gat gtg gea gea gct cca Asn Glu Asn His Ile Met Asn Gly Asn Phe Asp Val Ala Ala Ala Pro 195 200 205

tac ttc gtt ate ggg gct acc gct aga ttc gea gct atg cag tcc tac Tyr Phe Val Ile Gly Ala Thr Ala Arg Phe Ala Ala Met Gln Ser Tyr 210 215 220

48

96

144

192

240

288

336

384

432

480

528

576

624

672 ate aag ttc tgc aat gea tgg ate gat aag gtt ggg ctg tca gat gct 720 Ile Lys Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp Ala 225 230 235 240

cag ctg acc acg cag aag gct aat ctg gat aga acg aag cag aat atg Gln Leu Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys Gln Asn Met 245 250 255

cgt aat gct ate ctt aat tac acc cag cag gtt atg aag gtt ttc aag Arg Asn Ala Ile Leu Asn Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys Val Phe Lys 260 265 270

gat tcc aag aat atg cca acg ate ggc acg aat aag ttc age gtt gat Asp Ser Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val Asp 275 280 285

acc tac aat gtt tac ate aag ggg atg acg ctt aat gtg ctt gat ate Thr Tyr Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp Ile 290 295 300

gtt gct ate tgg cca age ctg tac cca gat gat tac acg tca cag acg Val Ala Ile Trp Pro Ser Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr Ser Gln Thr 305 310 315 320

gct ctg gaa cag acc cgc gtg acg ttc tcc aat atg gtg ggg cag gaa Ala Leu Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln Glu 325 330 335

gaa ggc acg gat ggc age cte aga ate tac aat acc ttc gat age ttc Glu Gly Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser Phe 340 345 350

tcc tac cag cat age cct ate cct aat aat aat gtg aat etc ate age Ser Tyr Gln His Ser Pro Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn Leu Ile Ser 355 360 365

tac tac aat gat gaa ctt cag aat ctg gaa etc ggg gtt tac acc cca 1152 Tyr Tyr Asn Asp Glu Leu Gln Asn Leu Glu Leu Gly Val Tyr Thr Pro 370 375 380

768

816

864

912

960

100Í

1056

1104

cca aag aag ggc tca ggc tac age tac cca tac ggg ttc gtg ctg aat Pro Lys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr Gly Phe Val Leu Asn 385 390 395 400

tac gea aat age aag tac aag tac ggc gat tcc aat gat cca gaa tcc Tyr Ala Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp Pro Glu Ser 405 410 415

ctc ggc ggg ctt tcc acc ctt age gct cca ate caa cag gtt aat gct Leu Gly Gly Leu Ser Thr Leu Ser Ala Pro Ile Gln Gln Val Asn Ala 420 425 430

1200

1248

1296

gct acc cag aat age aag tac ctt gat ggc gaa ate ctg aat ggg ate 1344 Ala Thr Gln Asn Ser Lys Tyr Leu Asp Gly Glu Ile Leu Asn Gly Ile 435 440 445 ggc gca age ctg cct ggc tac tgc acg acc ggg tgc tca cct acc gaa 1392 Gly Ala Ser Leu Pro Gly Tyr Cys Thr Thr Gly Cys Ser Pro Thr Glu 450 455 460

cca cca ttc age tgc acg age acg gca aat ggg tac aag gca age tgc 1440 Pro Pro Phe Ser Cys Thr Ser Thr Ala Asn Gly Tyr Lys Ala Ser Cys 465 470 475 480

aat cca age gat acc aat cag aag ate aat gct ctc tac cca ttc acg 1488 Asn Pro Ser Asp Thr Asn Gln Lys Ile Asn Ala Leu Tyr Pro Phe Thr 485 490 495

cag gca aat gtg aag ggg aat acc ggg aag ctg ggc gtt ctc gca age 153 6 Gln Ala Asn Val Lys Gly Asn Thr Gly Lys Leu Gly Val Leu Ala Ser 500 505 510

ctt gtt age tac gat ctg aat cct aag aat gtt ttc ggg gaa ctc gat 1584 Leu Val Ser Tyr Asp Leu Asn Pro Lys Asn Val Phe Gly Glu Leu Asp 515 520 525

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tac ttc cca aat aat gca aga cca acc gtt gtg aag gaa tgg ate aat 1680 Tyr Phe Pro Asn Asn Ala Arg Pro Thr Val Val Lys Glu Trp Ile Asn 545 550 555 560

ggg gct tcc gca gtt cca ctt gat tcc ggc aat acc ctg ttc atg acg 1728 Gly Ala Ser Ala Val Pro Leu Asp Ser Gly Asn Thr Leu Phe Met Thr 565 570 575

gct acg aac ctg acg gct acc cag tac aga ate cgc ate cgt tac gct 1776 Ala Thr Asn Leu Thr Ala Thr Gln Tyr Arg Ile Arg Ile Arg Tyr Ala 580 585 590

aac cca aac tca aac acg cag ate ggc gtt aga ate acg cag aac ggg 1824 Asn Pro Asn Ser Asn Thr Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr Gln Asn Gly 595 600 605

age ctc ate tcc tcc tcc aac ctc acg ctg tac tca acc acc gat atg 1872 Ser Leu Ile Ser Ser Ser Asn Leu Thr Leu Tyr Ser Thr Thr Asp Met 610 615 620

aac aac acc ctg cca ctg aac gtt tac gtg ate ggg gaa aac ggg aac 192 0 Asn Asn Thr Leu Pro Leu Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu Asn Gly Asn 625 630 635 640

tac acc ctc cag gat ctc tac aac acg acg aac gtt ctg tcc acg ggc 1968 Tyr Thr Leu Gln Asp Leu Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu Ser Thr Gly 645 650 655

gat ate acc ctg cag ate acc ggc ggg gat cag aag ata ttc ate gat 2016 Asp Ile Thr Leu Gln Ile Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile Phe Ile Asp 660 665 670 cgc ate gag ttc gtg cct acg atg cca gtg cca ggc aac taa Arg Ile Glu Phe Val Pro Thr Met Pro Val Pro Gly Asn *

2058

675

680

685

a

2059

<210> SEQ ID NO: 8 <211> Comprimento: 685 <212> Tipo: PRT

<213> Organismo: Seqüência Artificial

<220> Características:

<223> Outras Informações: SYNAXMI-031

<400> Seqüência: 8

Met Asp Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr Asn Val Leu

15 10 15

Ala Ile Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly Asp

20 25 30

Leu Lys Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser Leu

35 40 45

Thr Ala Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe Asn

50 55 60

Tyr Leu Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe Val 65 70 75 80

Pro Gly Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly Trp

85 90 95

Leu Trp Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile Asn

100 105 110

Leu Ile Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu Asp

115 120 125

Ala Asp Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp Ser

130 135 140

Ser Asn Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp Ser Gly Thr 145 150 155 160

Val Asn Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp Tyr

165 170 175

Thr Asn Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp Ile Ala Asn

180 185 190

Asn Glu Asn His Ile Met Asn Gly Asn Phe Asp Val Ala Ala Ala Pro

195 200 205

Tyr Phe Val Ile Gly Ala Thr Ala Arg Phe Ala Ala Met Gln Ser Tyr

210 215 220

Ile Lys Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp Ala 225 230 235 240

Gln Leu Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys Gln Asn Met

245 250 255

Arg Asn Ala Ile Leu Asn Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys Val Phe Lys

260 265 270

Asp Ser Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val Asp

275 280 285

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290 295 300

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Ala Leu Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln Glu

325

330

335 Glu Gly Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser Phe 340 345 350 Ser Tyr Gln His Ser Pro Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn Leu Ile Ser 355 360 365 Tyr Tyr Asn Asp Glu Leu Gln Asn Leu Glu Leu Gly Val Tyr Thr Pro 370 375 380 Pro Lys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr Gly Phe Val Leu Asn 385 390 395 400 Tyr Ala Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp Pro Glu Ser 405 410 415 Leu Gly Gly Leu Ser Thr Leu Ser Ala Pro Ile Gln Gln Val Asn Ala 420 425 430 Ala Thr Gln Asn Ser Lys Tyr Leu Asp Gly Glu Ile Leu Asn Gly Ile 435 440 445 Gly Ala Ser Leu Pro Gly Tyr Cys Thr Thr Gly Cys Ser Pro Thr Glu 450 455 460 Pro Pro Phe Ser Cys Thr Ser Thr Ala Asn Gly Tyr Lys Ala Ser Cys 465 470 475 480 Asn Pro Ser Asp Thr Asn Gln Lys Ile Asn Ala Leu Tyr Pro Phe Thr 485 490 495 Gln Ala Asn Val Lys Gly Asn Thr Gly Lys Leu Gly Val Leu Ala Ser 500 505 510 Leu Val Ser Tyr Asp Leu Asn Pro Lys Asn Val Phe Gly Glu Leu Asp 515 520 525 Ser Asp Thr Asn Asn Val Ile Leu Lys Gly Ile Pro Ala Glu Lys Gly 530 535 540 Tyr Phe Pro Asn Asn Ala Arg Pro Thr Val Val Lys Glu Trp Ile Asn 545 550 555 560 Gly Ala Ser Ala Val Pro Leu Asp Ser Gly Asn Thr Leu Phe Met Thr 565 570 575 Ala Thr Asn Leu Thr Ala Thr Gln Tyr Arg Ile Arg Ile Arg Tyr Ala 580 585 590 Asn Pro Asn Ser Asn Thr Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr Gln Asn Gly 595 600 605 Ser Leu Ile Ser Ser Ser Asn Leu Thr Leu Tyr Ser Thr Thr Asp Met 610 615 620 Asn Asn Thr Leu Pro Leu Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu Asn Gly Asn 625 630 635 640 Tyr Thr Leu Gln Asp Leu Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu Ser Thr Gly 645 650 655 Asp Ile Thr Leu Gln Ile Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile Phe Ile Asp 660 665 670 Arg Ile Glu Phe Val Pro Thr Met Pro Val Pro Gly Asn 675 680 685

<210> SEQ ID NO: 9 <211> Comprimento: 2148 <212> Tipo: DNA

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: synaxmi-031(apo)

<221> Nome/Chave: CDS

<222> Localização: (1) . . . (2148) <400> Seqüência: 9

atg ggg tac tcc age ttc gtt gct ate gct ctt ctt atg age gtg gtt

Met Gly Tyr Ser Ser Phe Val Ala Ile Ala Leu Leu Met Ser Val Val

1 5 10 15

gtt gtt tgc aat ggg ggc aag acg tcc acc tac gtg cgt aat ctg gat

Val Val Cys Asn Gly Gly Lys Thr Ser Thr Tyr Val Arg Asn Leu Asp

20 25 30

tgc aat ctc cag age cag cag aat ate cca tac aat gtg ctt gct ate

Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr Asn Val Leu Ala Ile

35 40 45

cct gtt age aat gtt aat age ctt acg gat acg gtt ggc gat cta aag

Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly Asp Leu Lys

50 55 60

aag gea tgg gaa gag ttc cag aag acg ggc age ttc tcc ctt acc gea

Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser Leu Thr Ala

65 70 75 80

48

96

144

192

240

288

ctc cag cag ggc ttc age gct tcc cag ggc ggg acg ttc aat tac ctc Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe Asn Tyr Leu 85 90 95

acc ctc ctc cag tcc ggg ate tcc ctg gct ggc age ttc gtg cct ggc 336 Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe Val Pro Gly 100 105 110

ggc acc ttc gtt gct cca ate ate aat atg gtg ate ggc tgg ctc tgg 3 84 Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly Trp Leu Trp 115 120 125

cct cat aag aat aag aat gea gat acg gaa aat ctg ate aat ctg ate Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile Asn Leu Ile 130 135 140

gat tca gaa ate cag aag cag ctg aat aag gct ctg ctg gat gct gat Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu Asp Ala Asp 145 150 155 160

cgc aat gaa tgg age age tac ctc gag tcc ate ttc gat age age aat Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp Ser Ser Asn 165 170 175

aat ctg aat ggc gea ate gtt gat gct cag tgg tcc ggc acc gtg aat 576 Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp Ser Gly Thr Val Asn 180 185 190

432

480

528

acg acc aat cgt acg ctt cgt aat cct acg gaa tca gat tac acc aat Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp Tyr Thr Asn 195 200 205

gtg gtg acg aat ttc ate gea gea gat ggg gat ate gct aat aat gaa Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp Ile Ala Asn Asn Glu 210 215 220

624

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230 235 240

225

720

768

816

864

912

960

1008

1056

gtt ate ggg gct acc gct aga ttc gea gct atg cag tcc tac ate aag Val Ile Gly Ala Thr Ala Arg Phe Ala Ala Met Gln Ser Tyr Ile Lys 245 250 255

ttc tgc aat gea tgg ate gat aag gtt ggg ctg tca gat gct cag ctg Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp Ala Gln Leu 260 265 270

acc acg cag aag gct aat ctg gat aga acg aag cag aat atg cgt aat Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys Gln Asn Met Arg Asn 275 280 285

gct ate ctt aat tac acc cag cag gtt atg aag gtt ttc aag gat tcc Ala Ile Leu Asn Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys Val Phe Lys Asp Ser 290 295 300

aag aat atg cca acg ate ggc acg aat aag ttc age gtt gat acc tac Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val Asp Thr Tyr 305 310 315 320

aat gtt tac ate aag ggg atg acg ctt aat gtg ctt gat ate gtt gct Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp Ile Val Ala 325 330 335

ate tgg cca age ctg tac cca gat gat tac acg tca cag acg gct ctg Ile Trp Pro Ser Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr Ser Gln Thr Ala Leu 340 345 350

gaa cag acc cgc gtg acg ttc tcc aat atg gtg ggg cag gaa gaa ggc 1104 Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln Glu Glu Gly 355 360 365

acg gat ggc age ctc aga ate tac aat acc ttc gat age ttc tcc tac 1152 Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser Phe Ser Tyr 370 375 380

cag cat age cct ate cct aat aat aat gtg aat ctc ate age tac tac 1200 Gln His Ser Pro Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn Leu Ile Ser Tyr Tyr 385 390 395 400

aat gat gaa ctt cag aat ctg gaa ctc ggg gtt tac acc cca cca aag Asn Asp Glu Leu Gln Asn Leu Glu Leu Gly Val Tyr Thr Pro Pro Lys 405 410 415

aag ggc tca ggc tac age tac cca tac ggg ttc gtg ctg aat tac gea 1296 Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr Gly Phe Val Leu Asn Tyr Ala 420 425 430

aat age aag tac aag tac ggc gat tcc aat gat cca gaa tcc ctc ggc 1344 Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp Pro Glu Ser Leu Gly 435 440 445

1248 ggg ctt tcc acc ctt age gct cca ate caa cag gtt aat gct gct acc 1392

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Gln Asn Ser Lys Tyr Leu Asp Gly Glu Ile Leu Asn Gly Ile Gly Ala

465 470 475 480

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Ser Leu Pro Gly Tyr Cys Thr Thr Gly Cys Ser Pro Thr Glu Pro Pro 485 490 495

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1440

1488

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aat gtg aag ggg aat acc ggg aag ctg ggc gtt ctc gea age ctt gtt 1632 Asn Val Lys Gly Asn Thr Gly Lys Leu Gly Val Leu Ala Ser Leu Val 530 535 540

age tac gat ctg aat cct aag aat gtt ttc ggg gaa ctc gat tca gat 1680 Ser Tyr Asp Leu Asn Pro Lys Asn Val Phe Gly Glu Leu Asp Ser Asp 545 550 555 560

acc aat aat gtt ate ctt aag ggc ate cca gea gaa aag ggc tac ttc Thr Asn Asn Val Ile Leu Lys Gly Ile Pro Ala Glu Lys Gly Tyr Phe 565 570 575

cca aat aat gea aga cca acc gtt gtg aag gaa tgg ate aat ggg gct 177 6 Pro Asn Asn Ala Arg Pro Thr Val Val Lys Glu Trp Ile Asn Gly Ala 580 585 590

1728

tcc gea gtt cca ctt gat tcc ggc aat acc ctg ttc atg acg gct acg Ser Ala Val Pro Leu Asp Ser Gly Asn Thr Leu Phe Met Thr Ala Thr 595 600 605

aac ctg acg gct acc cag tac aga ate cgc ate cgt tac gct aac cca Asn Leu Thr Ala Thr Gln Tyr Arg Ile Arg Ile Arg Tyr Ala Asn Pro 610 615 620

aac tca aac acg cag ate ggc gtt aga ate acg cag aac ggg age ctc Asn Ser Asn Thr Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr Gln Asn Gly Ser Leu 625 630 635 640

ate tcc tcc tcc aac ctc acg ctg tac tca acc acc gat atg aac aac Ile Ser Ser Ser Asn Leu Thr Leu Tyr Ser Thr Thr Asp Met Asn Asn 645 650 655

acc ctg cca ctg aac gtt tac gtg ate ggg gaa aac ggg aac tac acc Thr Leu Pro Leu Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu Asn Gly Asn Tyr Thr 660 665 670

1824

1872

1920

1968

2016 ctc cag gat ctc tac aac Leu Gln Asp Leu Tyr Asn 675

acc ctg cag ate acc ggc Thr Leu Gln Ile Thr Gly 690

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acg acg aac gtt ctg tcc Thr Thr Asn Val Leu Ser 680

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cca gtg cca ggc aac taa Pro Val Pro Gly Asn * 715

acg ggc gat ate 2 064

Thr Gly Asp Ile

685

ate gat cgc ate 2112 Ile Asp Arg Ile

2148

<210> SEQ ID NO: 10 <211> Comprimento: 715 <212> Tipo: PRT

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: SYNAXMI-031(APO)

<400> Seqüência: 10

Met Gly Tyr Ser Ser Phe Val Ala Ile Ala Leu Leu Met Ser Val Val 1 5 10 15 Val Val Cys Asn Gly Gly Lys Thr Ser Thr Tyr Val Arg Asn Leu Asp 20 25 30 Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr Asn Val Leu Ala Ile 35 40 45 Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly Asp Leu Lys 50 55 60 Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser Leu Thr Ala 65 70 75 80 Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe Asn Tyr Leu 85 90 95 Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe Val Pro Gly 100 105 110 Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly Trp Leu Trp 115 120 125 Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile Asn Leu Ile 130 135 140 Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu Asp Ala Asp 145 150 155 160 Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp Ser Ser Asn 165 170 175 Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp Ser Gly Thr Val Asn 180 185 190 Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp Tyr Thr Asn 195 200 205 Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp Ile Ala Asn Asn Glu 210 215 220 Asn His Ile Met Asn Gly Asn Phe Asp Val Ala Ala Ala Pro Tyr Phe 225 230 235 240 Val Ile Gly Ala Thr Ala Arg Phe Ala Ala Met Gln Ser Tyr Ile Lys 245 250 255 Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp Ala Gln Leu 260 265 270 Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys Gln Asn Met Arg Asn 275 280 285

Ala Ile Leu Asn Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys Val Phe Lys Asp Ser

290 295 300

Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val Asp Thr Tyr 305 310 315 320

Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp Ile Val Ala

325 330 335

Ile Trp Pro Ser Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr Ser Gln Thr Ala Leu

340 345 350

Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln Glu Glu Gly

355 360 365

Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser Phe Ser Tyr

370 375 380

Gln His Ser Pro Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn Leu Ile Ser Tyr Tyr 385 390 395 400

Asn Asp Glu Leu Gln Asn Leu Glu Leu Gly Val Tyr Thr Pro Pro Lys

405 410 415

Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr Gly Phe Val Leu Asn Tyr Ala

420 425 430

Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp Pro Glu Ser Leu Gly

435 440 445

Gly Leu Ser Thr Leu Ser Ala Pro Ile Gln Gln Val Asn Ala Ala Thr

450 455 460

Gln Asn Ser Lys Tyr Leu Asp Gly Glu Ile Leu Asn Gly Ile Gly Ala 465 470 475 480

Ser Leu Pro Gly Tyr Cys Thr Thr Gly Cys Ser Pro Thr Glu Pro Pro

485 490 495

Phe Ser Cys Thr Ser Thr Ala Asn Gly Tyr Lys Ala Ser Cys Asn Pro

500 505 510

Ser Asp Thr Asn Gln Lys Ile Asn Ala Leu Tyr Pro Phe Thr Gln Ala

515 520 525

Asn Val Lys Gly Asn Thr Gly Lys Leu Gly Val Leu Ala Ser Leu Val

530 535 540

Ser Tyr Asp Leu Asn Pro Lys Asn Val Phe Gly Glu Leu Asp Ser Asp 545 550 555 560

Thr Asn Asn Val Ile Leu Lys Gly Ile Pro Ala Glu Lys Gly Tyr Phe

565 570 575

Pro Asn Asn Ala Arg Pro Thr Val Val Lys Glu Trp Ile Asn Gly Ala

580 585 590

Ser Ala Val Pro Leu Asp Ser Gly Asn Thr Leu Phe Met Thr Ala Thr

595 600 605

Asn Leu Thr Ala Thr Gln Tyr Arg Ile Arg Ile Arg Tyr Ala Asn Pro

610 615 620

Asn Ser Asn Thr Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr Gln Asn Gly Ser Leu 625 630 635 640

Ile Ser Ser Ser Asn Leu Thr Leu Tyr Ser Thr Thr Asp Met Asn Asn

645 650 655

Thr Leu Pro Leu Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu Asn Gly Asn Tyr Thr

660 665 670

Leu Gln Asp Leu Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu Ser Thr Gly Asp Ile

675 680 685

Thr Leu Gln Ile Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile Phe Ile Asp Arg Ile

690 695 700

Glu Phe Val Pro Thr Met Pro Val Pro Gly Asn 705 710 715 <210> SEQ ID NO: 11 <211> Comprimento: 2160 <212> Tipo: DNA

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: synaxmi-031(ER)

<221> Nome/Chave: CDS

<222> Localização: (1)...(2160)

<400> Seqüência: 11

atg ggg tac tcc age ttc gtt gct ate gct ctt ctt atg age gtg gtt Met Gly Tyr Ser Ser Phe Val Ala Ile Ala Leu Leu Met Ser Val Val 15 10 15

gtt gtt tgc aat ggg ggc aag acg tcc acc tac gtg cgt aat ctg gat Val Val Cys Asn Gly Gly Lys Thr Ser Thr Tyr Val Arg Asn Leu Asp 20 25 30

tgc aat ctc cag age cag cag aat ate cca tac aat gtg ctt gct ate Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr Asn Val Leu Ala Ile 35 40 45

cet gtt age aat gtt aat age ctt acg gat acg gtt ggc gat cta aag Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly Asp Leu Lys 50 55 60

aag gea tgg gaa gag ttc cag aag acg ggc age ttc tcc ctt acc gea Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser Leu Thr Ala 65 70 75 80

ctc cag cag ggc ttc age gct tcc cag ggc ggg acg ttc aat tac ctc Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe Asn Tyr Leu 85 90 95

acc ctc ctc cag tcc ggg ate tcc ctg gct ggc age ttc gtg cet ggc Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe Val Pro Gly 100 105 HO

ggc acc ttc gtt gct cca ate ate aat atg gtg ate ggc tgg ctc tgg Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly Trp Leu Trp 115 120 125

cet cat aag aat aag aat gea gat acg gaa aat ctg ate aat ctg ate Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile Asn Leu Ile 130 135 140

gat tca gaa ate cag aag cag ctg aat aag gct ctg ctg gat gct gat Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu Asp Ala Asp 145 150 155 160

cgc aat gaa tgg age age tac ctc gag tcc ate ttc gat age age aat Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp Ser Ser Asn 165 170 175

48

96

144

192

240

288

336

384

432

480

528 aat ctg aat ggc gca ate gtt gat gct cag tgg tcc ggc acc gtg aat 57 6 Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp Ser Gly Thr Val Asn 180 185 190

acg acc aat cgt acg ctt cgt aat cct acg gaa tca gat tac acc aat 624 Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp Tyr Thr Asn 195 200 205

gtg gtg acg aat ttc ate gca gca gat ggg gat ate gct aat aat gaa Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp Ile Ala Asn Asn Glu 210 215 220

aat cat ate atg aat ggg aat ttc gat gtg gca gca gct cca tac ttc Asn His Ile Met Asn Gly Asn Phe Asp Val Ala Ala Ala Pro Tyr Phe 225 230 235 240

gtt ate ggg gct acc gct aga ttc gca gct atg cag tcc tac ate aag Val Ile Gly Ala Thr Ala Arg Phe Ala Ala Met Gln Ser Tyr Ile Lys 245 250 255

ttc tgc aat gca tgg ate gat aag gtt ggg ctg tca gat gct cag ctg Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp Ala Gln Leu 260 265 270

acc acg cag aag gct aat ctg gat aga acg aag cag aat atg cgt aat Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys Gln Asn Met Arg Asn 275 280 285

gct ate ctt aat tac acc cag cag gtt atg aag gtt ttc aag gat tcc Ala Ile Leu Asn Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys Val Phe Lys Asp Ser 290 295 300

aag aat atg cca acg ate ggc acg aat aag ttc age gtt gat acc tac Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val Asp Thr Tyr 305 310 315 320

aat gtt tac ate aag ggg atg acg ctt aat gtg ctt gat ate gtt gct Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp Ile Val Ala 325 330 335

ate tgg cca age ctg tac cca gat gat tac acg tca cag acg gct ctg Ile Trp Pro Ser Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr Ser Gln Thr Ala Leu 340 345 350

gaa cag acc cgc gtg acg ttc tcc aat atg gtg ggg cag gaa gaa ggc Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln Glu Glu Gly 355 360 365

acg gat ggc age ctc aga ate tac aat acc ttc gat age ttc tcc tac 1152 Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser Phe Ser Tyr 370 375 380

672

720

768

816

864

912

960

1008

1056

1104

cag cat age cct ate cct aat aat aat gtg aat ctc ate age tac tac Gln His Ser Pro Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn Leu Ile Ser Tyr Tyr 385 390 395 400

1200 aat gat Asn Asp

aag ggc Lys Gly

aat age Asn Ser

ggg ctt Gly Leu 450

cag aat Gln Asn 465

age ctg Ser Leu

ttc age Phe Ser

age gat Ser Asp

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age tac Ser Tyr 545

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cca aat Pro Asn

tcc gea Ser Ala

aac ctg Asn Leu 610

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tca ggc Ser Gly 420

aag tac Lys Tyr 435

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cct ggc Pro Gly

tgc acg Cys Thr 500

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gat ctg Asp Leu

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aat gea Asn Ala 580

gtt cca Val Pro 595

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cag aat Gln Asn 405

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aag tac Lys Tyr

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tac ctt Tyr Leu 470

tac tgc Tyr Cys 485

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cag aag Gln Lys

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aat cct Asn Pro 550

ate ctt Ile Leu 565

aga cca Arg Pro

ctt gat Leu Asp

acc cag Thr Gln

ctg gaa Leu Glu

tac cca Tyr Pro

ggc gat Gly Asp 440

gct cca Ala Pro 455

gat ggc Asp Gly

acg acc Thr Thr

gea aat Ala Asn

ate aat Ile Asn 520

ggg aag Gly Lys 535

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aag ggc Lys Gly

acc gtt Thr Val

tcc ggc Ser Gly 600

tac aga Tyr Arg 615

ctc ggg Leu Gly 410

tac ggg Tyr Gly 425

tcc aat Ser Asn

ate caa Ile Gln

gaa ate Glu Ile

ggg tgc Gly Cys 490

ggg tac Gly Tyr 505

gct ctc Ala Leu

ctg ggc Leu Gly

gtt ttc Val Phe

ate cca Ile Pro 570

gtg aag Val Lys 585

aat acc Asn Thr

ate cgc Ile Arg

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gat cca Asp Pro

cag gtt Gln Val 460

ctg aat Leu Asn 475

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aag gea Lys Ala

tac cca Tyr Pro

gtt ctc Val Leu 540

ggg gaa Gly Glu 555

gea gaa Ala Glu

gaa tgg Glu Trp

ctg ttc Leu Phe

ate cgt Ile Arg 620

acc cca Thr Pro

ctg aat Leu Asn 430

gaa tcc Glu Ser 445

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ggg ate Gly Ile

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age tgc Ser Cys 510

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ctc gat Leu Asp

aag ggc Lys Gly

ate aat Ile Asn 590

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cca aag Pro Lys 415

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ctc ggc Leu Gly

gct acc Ala Thr

ggc gea Gly Ala 480

cca cca Pro Pro 495

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tca gat Ser Asp 560

tac ttc Tyr Phe 575

ggg gct Gly Ala

gct acg Ala Thr

aac cca Asn Pro

1248

1296

1344

1392

1440

1488

1536

1584

1632

1680

1728

1776

1824

1872 aac tca aac acg cag ate ggc gtt aga Asn Ser Asn Thr Gln Ile Gly Val Arg 625 630

ate tcc tcc tcc aac ctc acg ctg tac

Ile Ser Ser Ser Asn Leu Thr Leu Tyr 645

acc ctg cca ctg aac gtt tac gtg ate

Thr Leu Pro Leu Asn Val Tyr Val Ile

660 665

ctc cag gat ctc tac aac acg acg aac Leu Gln Asp Leu Tyr Asn Thr Thr Asn 675 680

acc ctg cag ate acc ggc ggg gat cag Thr Leu Gln Ile Thr Gly Gly Asp Gln 690 695

gag ttc gtg cct acg atg cca gtg cca Glu Phe Val Pro Thr Met Pro Val Pro 705 710

ate acg cag aac ggg age ctc 1920 Ile Thr Gln Asn Gly Ser Leu 635 640

tca acc acc gat atg aac aac 1968 Ser Thr Thr Asp Met Asn Asn 650 655

ggg gaa aac ggg aac tac acc 2016 Gly Glu Asn Gly Asn Tyr Thr 670

gtt ctg tcc acg ggc gat ate 2064 Val Leu Ser Thr Gly Asp Ile 685

aag ata ttc ate gat cgc ate 2112 Lys Ile Phe Ile Asp Arg Ile 700

ggc aac aag gat gaa ctg taa 2160 Gly Asn Lys Asp Glu Leu * 715

<210> SEQ ID NO: 12 <211> Comprimento: 719 <212> Tipo: PRT

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: SYNAXMI-031(ER) <400> Seqüência: 12

Met Gly Tyr Ser Ser Phe Val Ala Ile Ala Leu Leu Met Ser Val Val

15 10 15

Val Val Cys Asn Gly Gly Lys Thr Ser Thr Tyr Val Arg Asn Leu Asp

20 25 30

Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr Asn Val Leu Ala Ile

35 40 45

Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly Asp Leu Lys

50 55 60

Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser Leu Thr Ala 65 70 75 80

Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe Asn Tyr Leu

85 90 95

Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe Val Pro Gly

100 105 HO

Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly Trp Leu Trp

115 120 125

Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile Asn Leu Ile

130 135 140

Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu Asp Ala Asp 145 150 155 160

Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp Ser Ser Asn 165 170 175 Asn Leu Asn Gly 180

Thr Thr Asn Arg 195

Val Val Thr Asn 210

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Val Ile Gly Ala

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Asn Val Tyr Ile

Ile Trp Pro Ser 340

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Asn Asp Glu Leu

Lys Gly Ser Gly 420

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Gly Leu Ser Thr 450

Gln Asn Ser Lys 465

Ser Leu Pro Gly

Phe Ser Cys Thr 500

Ser Asp Thr Asn 515

Asn Val Lys Gly 530

Ser Tyr Asp Leu 545

Thr Asn Asn Val

Pro Asn Asn Ala 580

Ser Ala Val Pro 595

Asn Leu Thr Ala 610

Ala Ile Val Asp

Thr Leu Arg Asn 200

Phe Ile Ala Ala 215

Asn Gly Asn Phe 230

Thr Ala Arg Phe 245

Trp Ile Asp Lys

Ala Asn Leu Asp 280

Tyr Thr Gln Gln 295

Thr Ile Gly Thr 310

Lys Gly Met Thr 325

Leu Tyr Pro Asp

Val Thr Phe Ser 360

Leu Arg Ile Tyr 375

Ile Pro Asn Asn 390

Gln Asn Leu Glu 405

Tyr Ser Tyr Pro

Lys Tyr Gly Asp 440

Leu Ser Ala Pro 455

Tyr Leu Asp Gly 470

Tyr Cys Thr Thr 485

Ser Thr Ala Asn

Gln Lys Ile Asn 520

Asn Thr Gly Lys 535

Asn Pro Lys Asn 550

Ile Leu Lys Gly 565

Arg Pro Thr Val

Leu Asp Ser Gly 600

Thr Gln Tyr Arg 615

Ala Gln Trp Ser 185

Pro Thr Glu Ser

Asp Gly Asp Ile 220

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Val Gly Leu Ser 265

Arg Thr Lys Gln

Val Met Lys Val 300

Asn Lys Phe Ser 315

Leu Asn Val Leu 330

Asp Tyr Thr Ser 345

Asn Met Val Gly

Asn Thr Phe Asp 380

Asn Val Asn Leu 395

Leu Gly Val Tyr 410

Tyr Gly Phe Val 425

Ser Asn Asp Pro

Ile Gln Gln Val 460

Glu Ile Leu Asn 475

Gly Cys Ser Pro 490

Gly Tyr Lys Ala 505

Ala Leu Tyr Pro

Leu Gly Val Leu 540

Val Phe Gly Glu 555

Ile Pro Ala Glu 570

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Asn Thr Leu Phe

Ile Arg Ile Arg 620

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Ala Asn Asn Glu

Ala Pro Tyr Phe 240

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Phe Lys Asp Ser

Val Asp Thr Tyr 320

Asp Ile Val Ala 335

Gln Thr Ala Leu 350

Gln Glu Glu Gly 365

Ser Phe Ser Tyr

Ile Ser Tyr Tyr 400

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Leu Asn Tyr Ala 430

Glu Ser Leu Gly 445

Asn Ala Ala Thr

Gly Ile Gly Ala 480

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Phe Thr Gln Ala 525

Ala Ser Leu Val

Leu Asp Ser Asp 560

Lys Gly Tyr Phe 575

Ile Asn Gly Ala 590

Met Thr Ala Thr 605

Tyr Ala Asn Pro Asn Ser Asn Thr Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr Gln Asn Gly Ser Leu 625 630 635 640 Ile Ser Ser Ser Asn Leu Thr Leu Tyr Ser Thr Thr Asp Met Asn Asn 645 650 655 Thr Leu Pro Leu Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu Asn Gly Asn Tyr Thr 660 665 670 Leu Gln Asp Leu Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu Ser Thr Gly Asp Ile 675 680 685 Thr Leu Gln Ile Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile Phe Ile Asp Arg Ile 690 695 700 Glu Phe Val Pro Thr Met Pro Val Pro Gly Asn Lys Asp Glu Leu 705 710 715

<210> SEQ ID NO: 13 <211> Comprimento: 1186 <212> Tipo: PRT

<213> Organismo: Bacillus thuringiensis

<400> Seqüência: 13 Met Asp Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr Asn Val Leu 1 5 10 15 Ala Ile Pro Val Ser Asn Val Asn Ala Leu Val Asp Thr Ala Gly Asp 20 25 30 Leu Lys Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser Leu 35 40 45 Thr Ala Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Ala Phe Asn 50 55 60 Tyr Leu Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe Val 65 70 75 80 Pro Gly Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Val Asn Met Val Ile Gly Trp 85 90 95 Leu Trp Pro His Lys Asn Lys Thr Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile Lys 100 105 110 Leu Ile Asp Glu Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu Asp 115 120 125 Gln Asp Arg Asn Asn Trp Thr Ser Phe Leu Glu Ser Ile Phe Asp Thr 130 135 140 Ser Ala Thr Val Ser Asn Ala Ile Ile Asp Ala Gln Trp Ser Gly Thr 145 150 155 160 Val Asp Thr Thr Asn Arg Gln Gln Lys Thr Pro Thr Thr Ser Asp Tyr 165 170 175 Leu Asn Val Val Gly Lys Phe Asp Ser Ala Asp Ser Ser Ile Ile Thr 180 185 190 Asn Glu Asn Gln Ile Met Asn Gly Asn Phe Asp Val Ala Ala Ala Pro 195 200 205 Tyr Phe Val Ile Gly Ala Thr Leu Arg Leu Ser Leu Tyr Gln Ser Tyr 210 215 220 Ile Lys Phe Cys Asn Ser Trp Ile Asp Ala Val Gly Phe Ser Thr Asn 225 230 235 240 Asp Ala Asn Thr Gln Lys Ala Asn Leu Ala Arg Thr Lys Leu Thr Met 245 250 255 Arg Thr Thr Ile Asn Glu Tyr Thr Gln Arg Val Met Lys Val Phe Lys 260 265 270 Asp Ser Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val Asp 275 280 285 Ala Tyr Asn Val Tyr Val Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp Met

290 295 300

Val Ala Ile Trp Ser Ser Leu Tyr Pro Asn Asp Tyr Thr Ser Gln Thr 305 310 315 320

Ala Ile Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln Glu

325 330 335

Glu Gly Thr Asp Gly Thr Leu Lys Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser Leu

340 345 350

Ser Tyr Gln His Ser Leu Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn Leu Ile Ser

355 360 365

Tyr Tyr Thr Asp Glu Leu Gln Asn Leu Glu Leu Ala Val Tyr Thr Pro

370 375 380

Lys Gly Gly Ser Gly Tyr Ala Tyr Pro Tyr Gly Phe Ile Leu Asn Tyr 385 390 395 400

Ala Asn Ser Asn Tyr Lys Tyr Gly Asp Asn Asp Pro Thr Gly Lys Pro

405 410 415

Leu Asn Lys Gln Asp Gly Pro Ile Gln Gln Ile Asn Ala Ala Thr Gln

420 425 430

Asn Ser Lys Tyr Leu Asp Gly Glu Thr Ile Asn Gly Ile Gly Ala Ser

435 440 445

Leu Pro Gly Tyr Cys Thr Thr Gly Cys Ser Ala Thr Glu Gln Pro Phe

450 455 460

Ser Cys Thr Ser Thr Ala Asn Ser Tyr Lys Ala Ser Cys Asn Pro Ser 465 470 475 480

Asp Thr Asn Gln Lys Ile Asn Ala Leu Tyr Ala Phe Thr Gln Thr Asn

485 490 495

Val Lys Gly Ser Thr Gly Lys Leu Gly Val Leu Ala Ser Leu Val Pro

500 505 510

Tyr Asp Leu Asn Pro Lys Asn Val Phe Gly Glu Leu Asp Ser Asp Thr

515 520 525

Asn Asn Val Ile Leu Lys Gly Ile Pro Ala Glu Lys Gly Tyr Phe Pro

530 535 540

Asn Asn Ala Arg Pro Thr Val Val Lys Glu Trp Ile Asn Gly Ala Ser 545 550 555 560

Ala Val Pro Phe Tyr Ser Gly Asn Thr Leu Phe Met Thr Ala Thr Asn

565 570 575

Leu Thr Ala Thr Gln Tyr Lys Ile Arg Ile Arg Tyr Ala Asn Pro Asn

580 585 590

Ser Asp Thr Gln Ile Gly Val Leu Ile Thr Gln Asn Gly Ser Gln Ile

595 600 605

Ser Asn Ser Asn Leu Thr Leu Tyr Ser Thr Thr Asp Ser Ser Met Ser

610 615 620

Ser Asn Leu Pro Gln Asn Val Tyr Val Thr Gly Glu Asn Gly Asn Tyr 625 630 635 640

Thr Leu Leu Asp Leu Tyr Ser Thr Thr Asn Val Leu Ser Thr Gly Asp

645 650 655

Ile Thr Leu Lys Leu Thr Gly Gly Asn Gln Lys Ile Phe Ile Asp Arg

660 665 670

Ile Glu Phe Ile Pro Thr Met Pro Val Pro Ala Pro Thr Asn Asn Thr

675 680 685

Asn Asn Asn Asn Gly Asp Asn Gly Asn Asn Asn Pro Pro His His Gly

690 695 700

Cys Ala Ile Ala Gly Thr Gln Gln Leu Cys Ser Gly Pro Pro Lys Phe 705 710 715 720

Glu Gln Val Ser Asp Leu Glu Lys Ile Thr Thr Gln Val Tyr Met Leu 725 730 735 Phe Lys Ser Ser Ser Tyr Glu Glu Leu Ala Leu Lys Val Ser Ser Tyr

Gln Ile Asn Gln Val Ala Leu Lys Val Met Ala Leu Ser Asp Glu Lys

Phe Cys Glu Glu Lys Arg Leu Leu Arg Lys Leu Val Asn Lys Ala Asn

Gln Leu Leu Glu Ala Arg Asn Leu Leu Val Gly Gly Asn Phe Glu Thr

Thr Gln Asn Trp Val Leu Gly Thr Asn Ala Tyr Ile Asn Tyr Asp Ser

Phe Leu Phe Asn Gly Asn Tyr Leu Ser Leu Gln Pro Ala Ser Gly Phe

Phe Thr Ser Tyr Ala Tyr Gln Lys Ile Asp Glu Ser Thr Leu Lys Pro

Tyr Thr Arg Tyr Lys Val Ser Gly Phe Ile Gly Gln Ser Asn Gln Val

Glu Leu Ile Ile Ser Arg Tyr Gly Lys Glu Ile Asp Lys Ile Leu Asn

Val Pro Tyr Ala Gly Pro Leu Pro Ile Thr Ala Asp Ala Ser Ile Thr

Cys Cys Ala Pro Glu Ile Asp Gln Cys Asp Gly Gly Gln Ser Asp Ser

His Phe Phe Asn Tyr Ser Ile Asp Val Gly Ala Leu His Pro Glu Leu

Asn Pro Gly Ile Glu Ile Gly Leu Lys Ile Val Gln Ser Asn Gly Tyr

Ile Thr Ile Ser Asn Leu Glu Ile Ile Glu Glu Arg Pro Leu Thr Glu

Met Glu Ile Gln Ala Val Asn Arg Lys Asp Gln Lys Trp Lys Arg Glu

Lys Leu Leu Glu Cys Ala Ser Val Ser Glu Leu Leu Gln Pro Ile Ile

Asn Gln Ile Asp Ser Leu Phe Lys Asp Ala Asn Trp Tyr Asn Asp Ile

Leu Pro His Val Thr Tyr Gln Thr Leu Lys Asn Ile Ile Val Pro Asp

Leu Pro Lys Leu Lys His Trp Phe Ile Asp His Leu Pro Gly Glu Tyr

His Glu Ile Glu Gln Lys Met Lys Glu Ala Leu Lys His Ala Phe Thr

Gln Leu Asp Glu Lys Asn Leu Ile His Asn Gly His Phe Ala Thr Asn

Leu Ile Asp Trp Gln Val Glu Gly Asp Ala Arg Met Lys Val Leu Glu

Asn Asn Ala Leu Ala Leu Gln Leu Ser Asn Trp Asp Ser Ser Val Ser

Gln Ser Ile Asp Ile Leu Glu Phe Asp Glu Asp Lys Ala Tyr Lys Leu

Arg Val Tyr Ala Gln Gly Ser Gly Thr Ile Gln Phe Gly Asn Cys Glu

Asp Glu Ala Ile Gln Phe Asn Thr Asn Ser Phe Val Tyr Lys Glu Lys

Ile Ile Tyr Phe Asp Thr Pro Ser Ile Asn Leu His Ile Gln Ser Glu

Gly Ser Glu Phe Val Val Ser Ser Ile Asp Leu Val Glu Leu Ser Asp Asp Glu 1185

<210> SEQ ID NO: 14 <211> Comprimento: 2190 <212> Tipo: DNA

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: axmi-031(truncado)

<221> Nome/Chave: CDS

<222> Localização: (1)...(2190)

<400> Seqüência: 14

atg tcg tac tac cat cac cat cac cat cac ctc gaa tca aca agt ttg

Met Ser Tyr Tyr His His His His His His Leu Glu Ser Thr Ser Leu 15 10 15

tac aaa aaa gca ggc ttc att gaa gga cgt atg gat tgt aat tta caa Tyr Lys Lys Ala Gly Phe Ile Glu Gly Arg Met Asp Cys Asn Leu Gln 20 25 30

tca caa caa aat att cca tat aat gta tta gca ata cca gta tct aat Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr Asn Val Leu Ala Ile Pro Val Ser Asn 35 40 45

gtt aat tcg ttg act gat aca gtt gga gat tta aaa aaa gca tgg gaa Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly Asp Leu Lys Lys Ala Trp Glu 50 55 60

gaa ttt caa aaa act ggt tct ttt tca tta aca gct tta caa caa gga Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser Leu Thr Ala Leu Gln Gln Gly 65 70 75 80

ttt tct gct tca caa gga gga aca ttc aat tat tta aca tta cta caa Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe Asn Tyr Leu Thr Leu Leu Gln 85 90 95

tca gga ata tca tta gct ggt tct ttt gtt cct gga ggt act ttt gta Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe Val Pro Gly Gly Thr Phe Val 100 105 HO

gca cct att att aat atg gtt att ggt tgg tta tgg cca cat aaa aac Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly Trp Leu Trp Pro His Lys Asn 115 120 125

aaa aat gcg gat aca gaa aat tta ata aat tta att gat tca gaa att Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile Asn Leu Ile Asp Ser Glu Ile 130 135 140

caa aaa caa tta aac aaa gct tta tta gat gca gat aga aat gag tgg Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu Asp Ala Asp Arg Asn Glu Trp 145 150 155 160

48

96

144

192

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288

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384

432

480 624

672

720

age tet tat tta gaa tet ata ttt gat tet tca aat aac cta aat ggt 528 Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp Ser Ser Asn Asn Leu Asn Gly 165 170 175

gea att gta gat gea cag tgg tca ggc act gta aat act aca aat aga 576 Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp Ser Gly Thr Val Asn Thr Thr Asn Arg 180 185 190

aca cta aga aat cca aca gaa tca gat tat aca aat gtt gtt aca aat Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp Tyr Thr Asn Val Val Thr Asn 195 200 205

ttt att gea gcg gat ggt gac att gea aat aat gaa aat cac ata atg Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp Ile Ala Asn Asn Glu Asn His Ile Met 210 215 220

aat ggc aac ttt gac gta gct gea gea cct tat ttt gtt ata gga gea Asn Gly Asn Phe Asp Val Ala Ala Ala Pro Tyr Phe Val Ile Gly Ala 225 230 235 240

aca gea cgt ttt gea gea atg caa tet tat att aaa ttt tgt aat gct 768 Thr Ala Arg Phe Ala Ala Met Gln Ser Tyr Ile Lys Phe Cys Asn Ala 245 250 255

tgg att gat aaa gtt gga ttg agt gac gea cag ctt act aca caa aag 816 Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp Ala Gln Leu Thr Thr Gln Lys 260 265 270

gct aat tta gat cgc acg aaa caa aat atg cgt aat gea att ctt aac Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys Gln Asn Met Arg Asn Ala Ile Leu Asn 275 280 285

tat aca caa caa gtt atg aaa gtt ttt aaa gat tcc aaa aat atg cct 912 Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys Val Phe Lys Asp Ser Lys Asn Met Pro 290 295 300

aca ata ggt act aat aaa ttt agt gtt gat acc tat aat gta tat att 9 60 Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val Asp Thr Tyr Asn Val Tyr Ile 305 310 315 320

864

aaa gga atg aca tta aat gtt tta gat att gta gea ata tgg cct tca 1008 Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp Ile Val Ala Ile Trp Pro Ser 325 330 335

tta tat cca gat gat tat act tca caa aca gcc tta gaa caa aca cgt Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr Ser Gln Thr Ala Leu Glu Gln Thr Arg 340 345 350

gtc act ttt tca aat atg gtt ggc caa gaa gaa ggt aca gat gga age Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln Glu Glu Gly Thr Asp Gly Ser 355 360 365

cta aga att tac aat act ttt gat tet ttt agt tat caa cat agt cca 1152 Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser Phe Ser Tyr Gln His Ser Pro 370 375 380

1056

1104 ata cct aat aat aat gtt aat tta att tct tat tat aat gat gaa tta 1200

Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn Leu Ile Ser Tyr Tyr Asn Asp Glu Leu

385 390 395 400

caa aat cta gaa tta gga gta tat acc cct cct aaa aaa gga agt gga 1248

Gln Asn Leu Glu Leu Gly Val Tyr Thr Pro Pro Lys Lys Gly Ser Gly

405 410 415

tac tct tat cct tat gga ttt gtt tta aat tat gca aac agt aaa tat 1296

Tyr Ser Tyr Pro Tyr Gly Phe Val Leu Asn Tyr Ala Asn Ser Lys Tyr

420 425 430

aaa tat ggt gat age aat gat cca gaa tct cta gga gga tta tct aca 1344

Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp Pro Glu Ser Leu Gly Gly Leu Ser Thr

435 440 445

cta tct gca cct ata caa caa gtt aat gca gca act caa aac agt aaa 1392

Leu Ser Ala Pro Ile Gln Gln Val Asn Ala Ala Thr Gln Asn Ser Lys

450 455 460

tat cta gat gga gaa ate cta aat gga ata gga gca tcc tta cct ggt 1440

Tyr Leu Asp Gly Glu Ile Leu Asn Gly Ile Gly Ala Ser Leu Pro Gly

465 470 475 480

tat tgt act aca gga tgt tca cca aca gaa cca cct ttt agt tgt act 1488

Tyr Cys Thr Thr Gly Cys Ser Pro Thr Glu Pro Pro Phe Ser Cys Thr

485 490 495

tct acc gct aat ggc tat aaa gca age tgt aat cct tca gat aca aat 1536

Ser Thr Ala Asn Gly Tyr Lys Ala Ser Cys Asn Pro Ser Asp Thr Asn

500 505 510

caa aaa att aac gct tta tat cct ttt aca caa gct aat gta aag gga 1584

Gln Lys Ile Asn Ala Leu Tyr Pro Phe Thr Gln Ala Asn Val Lys Gly

515 520 525

aac aca gga aaa tta gga gta ctg gca agt ctt gtt tca tat gat tta 1632

Asn Thr Gly Lys Leu Gly Val Leu Ala Ser Leu Val Ser Tyr Asp Leu

530 535 540

aat cct aaa aat gta ttt ggt gaa tta gat tca gat aca aat aat gtt 1680

Asn Pro Lys Asn Val Phe Gly Glu Leu Asp Ser Asp Thr Asn Asn Val

545 550 555 560

ate tta aaa gga att cct gca gaa aaa gga tat ttt cct aat aat gcg 1728

Ile Leu Lys Gly Ile Pro Ala Glu Lys Gly Tyr Phe Pro Asn Asn Ala

565 570 575

cgt cct act gtt gta aaa gaa tgg att aat ggt gca agt gct gta cca 1776

Arg Pro Thr Val Val Lys Glu Trp Ile Asn Gly Ala Ser Ala Val Pro

580 585 590

ctt gat tca gga aat acc tta ttt atg acg gct acg aat tta aca gct 1824

Leu Asp Ser Gly Asn Thr Leu Phe Met Thr Ala Thr Asn Leu Thr Ala

595 600 605 act caa tat aga att aga ata cgt tat gca aat cca aat tca aat act 1872 Thr Gln Tyr Arg Ile Arg Ile Arg Tyr Ala Asn Pro Asn Ser Asn Thr 610 615 620

caa ate ggt gta cga att aca caa aat ggt tet cta att tcc agt agt 1920 Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr Gln Asn Gly Ser Leu Ile Ser Ser Ser 625 630 635 640

aat cta aca ctt tat agt act act gat atg aat aat act tta cca cta 1968 Asn Leu Thr Leu Tyr Ser Thr Thr Asp Met Asn Asn Thr Leu Pro Leu 645 650 655

aat gta tat gta ata gga gaa aat gga aat tat aca ctt caa gat tta 2016 Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu Asn Gly Asn Tyr Thr Leu Gln Asp Leu 660 665 670

tat aat act act aat gtt tta tca aca gga gat att aca tta caa att 2064 Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu Ser Thr Gly Asp Ile Thr Leu Gln Ile 675 680 685

aca gga gga gat caa aaa ata ttt att gat cga ata gaa ttt gtt cct 2112 Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile Phe Ile Asp Arg Ile Glu Phe Val Pro 690 695 700

act atg cct gta cct ggt aat act aac aac aat aac ggt aat aat aac 2160 Thr Met Pro Val Pro Gly Asn Thr Asn Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn 705 710 715 720

ggt aat aat aat ccc cca cac cac gtc tag 2190

Gly Asn Asn Asn Pro Pro His His Val * 725

<210> SEQ ID NO: 15 <211> Comprimento: 729 <212> Tipo: PRT

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: AXMI-031(TRUNCADO) <400> Seqüência: 15

Met Ser Tyr Tyr His His His His His His Leu Glu Ser Thr Ser Leu

15 10 15

Tyr Lys Lys Ala Gly Phe Ile Glu Gly Arg Met Asp Cys Asn Leu Gln

20 25 30

Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr Asn Val Leu Ala Ile Pro Val Ser Asn

35 40 45

Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly Asp Leu Lys Lys Ala Trp Glu

50 55 60

Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser Leu Thr Ala Leu Gln Gln Gly 65 70 75 80

Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe Asn Tyr Leu Thr Leu Leu Gln

85 90 95

Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe Val Pro Gly Gly Thr Phe Val 100 105 110 Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly Trp Leu Trp Pro His Lys Asn

115 120 125

Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile Asn Leu Ile Asp Ser Glu Ile

130 135 140

Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu Asp Ala Asp Arg Asn Glu Trp 145 150 155 160

Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp Ser Ser Asn Asn Leu Asn Gly

165 170 175

Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp Ser Gly Thr Val Asn Thr Thr Asn Arg

180 185 190

Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp Tyr Thr Asn Val Val Thr Asn

195 200 205

Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp Ile Ala Asn Asn Glu Asn His Ile Met

210 215 220

Asn Gly Asn Phe Asp Val Ala Ala Ala Pro Tyr Phe Val Ile Gly Ala 225 230 235 240

Thr Ala Arg Phe Ala Ala Met Gln Ser Tyr Ile Lys Phe Cys Asn Ala

245 250 255

Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp Ala Gln Leu Thr Thr Gln Lys

260 265 270

Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys Gln Asn Met Arg Asn Ala Ile Leu Asn

275 280 285

Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys Val Phe Lys Asp Ser Lys Asn Met Pro

290 295 300

Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val Asp Thr Tyr Asn Val Tyr Ile 305 310 315 320

Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp Ile Val Ala Ile Trp Pro Ser

325 330 335

Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr Ser Gln Thr Ala Leu Glu Gln Thr Arg

340 345 350

Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln Glu Glu Gly Thr Asp Gly Ser

355 360 365

Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser Phe Ser Tyr Gln His Ser Pro

370 375 380

Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn Leu Ile Ser Tyr Tyr Asn Asp Glu Leu 385 390 395 400

Gln Asn Leu Glu Leu Gly Val Tyr Thr Pro Pro Lys Lys Gly Ser Gly

405 410 415

Tyr Ser Tyr Pro Tyr Gly Phe Val Leu Asn Tyr Ala Asn Ser Lys Tyr

420 425 430

Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp Pro Glu Ser Leu Gly Gly Leu Ser Thr

435 440 445

Leu Ser Ala Pro Ile Gln Gln Val Asn Ala Ala Thr Gln Asn Ser Lys

450 455 460

Tyr Leu Asp Gly Glu Ile Leu Asn Gly Ile Gly Ala Ser Leu Pro Gly 465 470 475 480

Tyr Cys Thr Thr Gly Cys Ser Pro Thr Glu Pro Pro Phe Ser Cys Thr

485 490 495

Ser Thr Ala Asn Gly Tyr Lys Ala Ser Cys Asn Pro Ser Asp Thr Asn

500 505 510

Gln Lys Ile Asn Ala Leu Tyr Pro Phe Thr Gln Ala Asn Val Lys Gly

515 520 525

Asn Thr Gly Lys Leu Gly Val Leu Ala Ser Leu Val Ser Tyr Asp Leu

530 535 540

Asn Pro Lys Asn Val Phe Gly Glu Leu Asp Ser Asp Thr Asn Asn Val 545 550 555 560 Ile Leu Lys Gly Ile Pro Ala Glu Lys Gly Tyr Phe Pro Asn Asn Ala

565 570 575

Arg Pro Thr Val Val Lys Glu Trp Ile Asn Gly Ala Ser Ala Val Pro

580 585 590

Leu Asp Ser Gly Asn Thr Leu Phe Met Thr Ala Thr Asn Leu Thr Ala

595 600 605

Thr Gln Tyr Arg Ile Arg Ile Arg Tyr Ala Asn Pro Asn Ser Asn Thr

610 615 620

Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr Gln Asn Gly Ser Leu Ile Ser Ser Ser 625 630 635 640

Asn Leu Thr Leu Tyr Ser Thr Thr Asp Met Asn Asn Thr Leu Pro Leu

645 650 655

Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu Asn Gly Asn Tyr Thr Leu Gln Asp Leu

660 665 670

Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu Ser Thr Gly Asp Ile Thr Leu Gln Ile

675 680 685

Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile Phe Ile Asp Arg Ile Glu Phe Val Pro

690 695 700

Thr Met Pro Val Pro Gly Asn Thr Asn Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn 705 710 715 720

Gly Asn Asn Asn Pro Pro His His Val 725

<210> SEQ ID NO: 16 <211> Comprimento: 3 5 58 <212> Tipo: DNA

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: axmi-031(ml)

<221> Nome/Chave: CDS

<222> Localização: (1)...(3558)

<400> Seqüência: 16

atg gat tgt aat tta caa tca caa caa aat att cca tat aat gta tta 48 Met Asp Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr Asn Val Leu 15 10 15

gca ata cca gta tct aat gtt aat tcg ttg act gat aca gtt gga gat 96 Ala Ile Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly Asp 20 25 30

tta aaa aaa gca tgg gaa gaa ttt caa aaa act ggt tct ttt tca tta 144 Leu Lys Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser Leu 35 40 45

aca gct tta caa caa gga ttt tct gct tca caa gga gga aca ttc aat 192 Thr Ala Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe Asn 50 55 60

tat tta aca tta cta caa tca gga ata tca tta gct ggt tct ttt gtt 240 Tyr Leu Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe Val 65 70 75 80 cct gga ggt act ttt gta gca cct att att aat atg gtt att ggt tgg 2 88

Pro Gly Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly Trp 85 90 95

tta tgg cca cat aaa aac aaa aat gcg gat aca gaa aat tta ata aat 336

Leu Trp Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile Asn 100 105 110

tta att gat tca gaa att caa aaa caa tta aac aaa gct tta tta gat 3 84

Leu Ile Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu Asp 115 120 125

gca gat aga aat gag tgg age tet tat tta gaa tet ata ttt gat tet 432

Ala Asp Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp Ser 130 135 140

tca aat aac cta aat ggt gca att gta gat gca cag tgg tca ggc act 480

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145 150 155 160

gta aat act aca aat aga aca cta aga aat cca aca gaa tca gat tat 528

Val Asn Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp Tyr 165 170 175

aca aat gtt gtt aca aat ttt att gca gcg gat ggt gac att gca aat 576

Thr Asn Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp Ile Ala Asn 180 185 190

aat gaa aat cac ata atg aat ggc aac ttt gac gta gct gca gca cct 624

Asn Glu Asn His Ile Met Asn Gly Asn Phe Asp Val Ala Ala Ala Pro 195 200 205

tat ttt gct ata gga gca aca gca cgt ttt gca gca atg caa tet tat 672

Tyr Phe Ala Ile Gly Ala Thr Ala Arg Phe Ala Ala Met Gln Ser Tyr 210 215 220

att aaa ttt tgt aat gct tgg att gat aaa gtt gga ttg agt gac gca 720

Ile Lys Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp Ala

225 230 235 240

cag ctt act aca caa aag gct aat tta gat cgc acg aaa caa aat atg 768

Gln Leu Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys Gln Asn Met 245 250 255

cgt aat gca att ctt aac tat aca caa caa gtt atg aaa gtt ttt aaa 816

Arg Asn Ala Ile Leu Asn Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys Val Phe Lys 260 265 270

gat tcc aaa aat atg cct aca ata ggt act aat aaa ttt agt gtt gat 864

Asp Ser Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val Asp 275 280 285

acc tat aat gta tat att aaa gga atg aca tta aat gtt tta gat att 912

Thr Tyr Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp Ile 290 295 300 gta gca ata tgg cct tca tta tat cca gat gat tat act tca caa aca 960 Val Ala Ile Trp Pro Ser Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr Ser Gln Thr 305 310 315 320

gcc tta gaa caa aca cgt gtc act ttt tca aat atg gtt ggc caa gaa 1008 Ala Leu Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln Glu 325 330 335

gaa ggt aca gat gga age cta aga att tac aat act ttt gat tet ttt 1056 Glu Gly Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser Phe 340 345 350

agt tat caa cat agt cca ata cct aat aat aat gtt aat tta att tet 1104 Ser Tyr Gln His Ser Pro Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn Leu Ile Ser 355 360 365

tat tat aat gat gaa tta caa aat cta gaa tta gga gta tat acc cct 1152 Tyr Tyr Asn Asp Glu Leu Gln Asn Leu Glu Leu Gly Val Tyr Thr Pro 370 375 380

cct aaa aaa gga agt gga tac tet tat cct tat gga ttt gtt tta aat 1200 Pro Lys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr Gly Phe Val Leu Asn 385 390 395 400

tat gca aac agt aaa tat aaa tat ggt gat age aat gat cca gaa tet 1248 Tyr Ala Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp Pro Glu Ser 405 410 415

cta gga gga tta tet aca cta tet gca cct ata caa caa gtt aat gca Leu Gly Gly Leu Ser Thr Leu Ser Ala Pro Ile Gln Gln Val Asn Ala 420 425 430

gca act caa aac agt aaa tat cta gat gga gaa ate cta aat gga ata Ala Thr Gln Asn Ser Lys Tyr Leu Asp Gly Glu Ile Leu Asn Gly Ile 435 440 445

gga gca tcc tta cct ggt tat tgt act aca gga tgt tca cca aca gaa Gly Ala Ser Leu Pro Gly Tyr Cys Thr Thr Gly Cys Ser Pro Thr Glu 450 455 460

cca cct ttt agt tgt act tet acc gct aat ggc tat aaa gca age tgt Pro Pro Phe Ser Cys Thr Ser Thr Ala Asn Gly Tyr Lys Ala Ser Cys 465 470 475 480

aat cct tca gat aca aat caa aaa att aac gct tta tat cct ttt aca 1488 Asn Pro Ser Asp Thr Asn Gln Lys Ile Asn Ala Leu Tyr Pro Phe Thr 485 490 495

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1296

1344

1392

1440

ctt gtt tca tat gat tta aat cct aaa aat gta ttt ggt gag tta gat Leu Val Ser Tyr Asp Leu Asn Pro Lys Asn Val Phe Gly Glu Leu Asp 515 520 525

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tat ttt Tyr Phe 545

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gct acg Ala Thr

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tct cta Ser Leu 610

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cga ata Arg Ile

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aat tta Asn Leu 580

aat tca Asn Ser 595

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aca tta Thr Leu 660

gaa ttt Glu Phe 675

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gct ggt Ala Gly

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aat gcg Asn Ala 550

gta cca Val Pro 565

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aat act Asn Thr

agt agt Ser Ser

cca cta Pro Leu 630

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gtt cct Val Pro

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aca caa Thr Gln 710

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cgt cct Arg Pro

ctt gat Leu Asp

act caa Thr Gln

caa ate Gln Ile 600

aat cta Asn Leu 615

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tat aat Tyr Asn

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act atg Thr Met 680

ggt aat Gly Asn 695

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gaa tta Glu Leu

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tca gga Ser Gly 570

tat aga Tyr Arg 585

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tat gta Tyr Val

act act Thr Thr 650

gga gat Gly Asp 665

cct gta Pro Val

aat aat Asn Asn

tgt tct Cys Ser

aca aca Thr Thr 730

gct cta Ala Leu 745

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gta aaa Val Lys 555

aat acc Asn Thr

att aga Ile Arg

cga att Arg Ile

tat agt Tyr Ser 620

ata gga Ile Gly 635

aat gtt Asn Val

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ata cgt Ile Arg 590

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gaa aat Glu Asn

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ata ttt Ile Phe 670

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tat atg Tyr Met

tcc age Ser Ser 750

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gga aat Gly Asn 640

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1632

1680

1728

1776

1824

1872

1920

1968

2016

2064

2112

2160

2208

2256 att agt caa gta gca tta aaa gtt atg gca tta tct gat gaa cta ttt Ile Ser Gln Val Ala Leu Lys Val Met Ala Leu Ser Asp Glu Leu Phe 755 760 765

tgt gaa gaa aaa aac gta tta cga aaa tta gtc aat aaa gca aaa caa Cys Glu Glu Lys Asn Val Leu Arg Lys Leu Val Asn Lys Ala Lys Gln 770 775 780

tta tta gaa gca agt aac tta cta gta ggt gga aat ttt gaa aca act Leu Leu Glu Ala Ser Asn Leu Leu Val Gly Gly Asn Phe Glu Thr Thr 785 790 795 800

caa aat tgg gta ctt gga aca aat gct tat ata aat tat gat tcg ttt Gln Asn Trp Val Leu Gly Thr Asn Ala Tyr Ile Asn Tyr Asp Ser Phe 805 810 815

tta ttt aat gga aat tat tta tct tta caa cca gca agt gga ttt ttc Leu Phe Asn Gly Asn Tyr Leu Ser Leu Gln Pro Ala Ser Gly Phe Phe 820 825 830

aca tct tat gct tat caa aaa ata gat gag tca aca tta aaa cca tat Thr Ser Tyr Ala Tyr Gln Lys Ile Asp Glu Ser Thr Leu Lys Pro Tyr 835 840 845

aca cga tat aaa gtt tct ggg ttc att ggg caa agt aat caa gta gaa Thr Arg Tyr Lys Val Ser Gly Phe Ile Gly Gln Ser Asn Gln Val Glu 850 855 860

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cca tat gca gga cct ctt cct ate act gct gat gca tca ata act tgt Pro Tyr Ala Gly Pro Leu Pro Ile Thr Ala Asp Ala Ser Ile Thr Cys 885 890 895

tgt gca cca gaa ata ggc caa tgt gat ggg gaa caa tct gat tct cat Cys Ala Pro Glu Ile Gly Gln Cys Asp Gly Glu Gln Ser Asp Ser His 900 905 910

ttc ttt aac tat age ate gat gta ggt gca ctt cac cca gaa tta aac Phe Phe Asn Tyr Ser Ile Asp Val Gly Ala Leu His Pro Glu Leu Asn 915 920 925

cct ggc att gaa att ggt ctt aaa att gtg caa tca aat ggt tat ata Pro Gly Ile Glu Ile Gly Leu Lys Ile Val Gln Ser Asn Gly Tyr Ile 930 935 940

aca att agt aat cta gaa att att gaa gaa cgt cca ctt aca gaa atg Thr Ile Ser Asn Leu Glu Ile Ile Glu Glu Arg Pro Leu Thr Glu Met 945 950 955 960

gaa att caa gca gtc aat cga aaa aat caa aaa tgg gaa aga gaa aaa Glu Ile Gln Ala Val Asn Arg Lys Asn Gln Lys Trp Glu Arg Glu Lys 965 970 975

2304

2352

2400

2448

2496

2544

2592

2640

2688

2736

2784

2832

2880

2928 ctt cta gaa tgt gca agt att agt gaa ctt tta caa cca att att aat 2976 Leu Leu Glu Cys Ala Ser Ile Ser Glu Leu Leu Gln Pro Ile Ile Asn 980 985 990

caa ate gat tca ttg ttt aaa gat gga aac tgg tat aat gat att ctt 3 024 Gln Ile Asp Ser Leu Phe Lys Asp Gly Asn Trp Tyr Asn Asp Ile Leu 995 1000 1005

cct cat gtc aca tat caa gat tta aaa aat att ata ata ccc gag tta 3072 Pro His Val Thr Tyr Gln Asp Leu Lys Asn Ile Ile Ile Pro Glu Leu 1010 1015 1020

cca aaa tta aaa cat tgg ttc ata gag aat ctc cca ggt gaa tat cat 312 0 Pro Lys Leu Lys His Trp Phe Ile Glu Asn Leu Pro Gly Glu Tyr His 1025 1030 1035 1040

gaa att gaa caa aaa atg aaa gaa gct cta aaa tat gca ttt aca caa 3168 Glu Ile Glu Gln Lys Met Lys Glu Ala Leu Lys Tyr Ala Phe Thr Gln 1045 1050 1055

tta gac gag aaa aat tta ate cac aat ggt cac ttt aca act aac tta 3216 Leu Asp Glu Lys Asn Leu Ile His Asn Gly His Phe Thr Thr Asn Leu 1060 1065 1070

ata gat tgg caa gta gaa ggt gat gct caa atg aaa gta tta gaa aat 3264 Ile Asp Trp Gln Val Glu Gly Asp Ala Gln Met Lys Val Leu Glu Asn 1075 1080 1085

gat gct ctt gca tta caa ctt ttc aac tgg gat gct aat gct tca caa 3312 Asp Ala Leu Ala Leu Gln Leu Phe Asn Trp Asp Ala Asn Ala Ser Gln 1090 1095 1100

tet ata aat ata tta gaa ttt gat gaa gat aag gca tat aaa ctt cgc 3360 Ser Ile Asn Ile Leu Glu Phe Asp Glu Asp Lys Ala Tyr Lys Leu Arg 1105 1110 1115 1120

gta tat gct caa gga age gga aca ate caa ttt gga aac tgt gaa gat 3 408 Val Tyr Ala Gln Gly Ser Gly Thr Ile Gln Phe Gly Asn Cys Glu Asp 1125 1130 1135

gaa gct ate caa ttt aat aca aac tca ttc ata tat caa gaa aaa ata 3456 Glu Ala Ile Gln Phe Asn Thr Asn Ser Phe Ile Tyr Gln Glu Lys Ile 1140 1145 1150

gtc tat ttc gat acc cca tca gtt aat tta cac ata caa tca gaa ggt 3 504 Val Tyr Phe Asp Thr Pro Ser Val Asn Leu His Ile Gln Ser Glu Gly 1155 1160 1165

tet gaa ttt att gta agt agt ate gat cta att gaa tta tca gac gac 3 552 Ser Glu Phe Ile Val Ser Ser Ile Asp Leu Ile Glu Leu Ser Asp Asp 1170 1175 1180

caa taa 3558

Gln *

1185 <210> SEQ ID NO: 17 <211> Comprimento: 1185 <212> Tipo: PRT

<213> Organismo: Seqüência Artificial

<220> Características:

<223> Outras Informações: AXMI-031(M1)

<400> Seqüência: 17

Met Asp Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn Ile Pro

15 10

Ala Ile Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp

20 25

Leu Lys Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly

35 40

Thr Ala Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly

50 55 60

Tyr Leu Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala 65 70 75

Pro Gly Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met

85 90

Leu Trp Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu

100 105

Leu Ile Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys

115 120

Ala Asp Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser 130 135 140

Ser Asn Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln 145 150 155

Val Asn Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr

165 170

Thr Asn Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly

180 185

Asn Glu Asn His Ile Met Asn Gly Asn Phe Asp Val

195 200

Tyr Phe Ala Ile Gly Ala Thr Ala Arg Phe Ala Ala 210 215 220

Ile Lys Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly 225 230 235

Gln Leu Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr

245 250

Arg Asn Ala Ile Leu Asn Tyr Thr Gln Gln Val Met

260 265

Asp Ser Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys

275 280

Thr Tyr Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn 290 295 300

Val Ala Ile Trp Pro Ser Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr 305 310 315

Ala Leu Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met

325 330

Glu Gly Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr

340 345

Ser Tyr Gln His Ser Pro Ile Pro Asn Asn Asn Val

355 360

Tyr Tyr Asn Asp Glu Leu Gln Asn Leu Glu Leu Gly 370 375 380

Tyr Asn Val Leu 15

Thr Val Gly Asp 30

Ser Phe Ser Leu 45

Gly Thr Phe Asn

Gly Ser Phe Val 80

Val Ile Gly Trp 95

Asn Leu Ile Asn 110

Ala Leu Leu Asp 125

Ile Phe Asp Ser

Trp Ser Gly Thr 160

Glu Ser Asp Tyr 175

Asp Ile Ala Asn 190

Ala Ala Ala Pro 205

Met Gln Ser Tyr

Leu Ser Asp Ala 240

Lys Gln Asn Met 255

Lys Val Phe Lys 270

Phe Ser Val Asp 285

Val Leu Asp Ile

Thr Ser Gln Thr 320

Val Gly Gln Glu 335

Phe Asp Ser Phe 350

Asn Leu Ile Ser 365

Val Tyr Thr Pro Pro Lys Lys Gly 385

Tyr Ala Asn Ser

Leu Gly Gly Leu 420

Ala Thr Gln Asn 435

Gly Ala Ser Leu 450

Pro Pro Phe Ser 465

Asn Pro Ser Asp

Gln Ala Asn Val 500

Leu Val Ser Tyr 515

Ser Asp Thr Asn 530

Tyr Phe Pro Asn 545

Gly Ala Ser Ala

Ala Thr Asn Leu 580

Asn Pro Asn Ser 595

Ser Leu Ile Ser 610

Asn Asn Thr Leu 625

Tyr Thr Leu Gln

Asp Ile Thr Leu 660

Arg Ile Glu Phe 675

Asn Asn Gly Asn 690

Ala Ile Ala Gly 705

Gln Val Ser Asp

Lys Ser Ser Pro 740

Ile Ser Gln Val 755

Cys Glu Glu Lys 770

Leu Leu Glu Ala 785

Gln Asn Trp Val

Leu Phe Asn Gly 820

Ser Gly Tyr Ser 390

Lys Tyr Lys Tyr 405

Ser Thr Leu Ser

Ser Lys Tyr Leu 440

Pro Gly Tyr Cys 455

Cys Thr Ser Thr 470

Thr Asn Gln Lys 485

Lys Gly Asn Thr

Asp Leu Asn Pro 520

Asn Val Ile Leu 535

Asn Ala Arg Pro 550

Val Pro Leu Asp 565

Thr Ala Thr Gln

Asn Thr Gln Ile 600

Ser Ser Asn Leu 615

Pro Leu Asn Val 630

Asp Leu Tyr Asn 645

Gln Ile Thr Gly

Val Pro Thr Met 680

Asn Asn Gly Asn 695

Thr Gln Gln Ser 710

Leu Glu Lys Ile 725

Tyr Glu Glu Leu

Ala Leu Lys Val 760

Asn Val Leu Arg 775

Ser Asn Leu Leu 790

Leu Gly Thr Asn 805

Asn Tyr Leu Ser

58/123

Tyr Pro Tyr Gly 395

Gly Asp Ser Asn 410

Ala Pro Ile Gln 425

Asp Gly Glu Ile

Thr Thr Gly Cys 460

Ala Asn Gly Tyr 475

Ile Asn Ala Leu 490

Gly Lys Leu Gly 505

Lys Asn Val Phe

Lys Gly Ile Pro 540

Thr Val Val Lys 555

Ser Gly Asn Thr 570

Tyr Arg Ile Arg 585

Gly Val Arg Ile

Thr Leu Tyr Ser 620

Tyr Val Ile Gly 635

Thr Thr Asn Val 650

Gly Asp Gln Lys 665

Pro Val Pro Gly

Asn Asn Pro Pro 700

Cys Ser Gly Pro 715

Thr Thr Gln Val 730

Ala Leu Glu Val 745

Met Ala Leu Ser

Lys Leu Val Asn 780

Val Gly Gly Asn 795

Ala Tyr Ile Asn 810

Leu Gln Pro Ala 825

Phe Val Leu Asn 400

Asp Pro Glu Ser 415

Gln Val Asn Ala 430

Leu Asn Gly Ile 445

Ser Pro Thr Glu

Lys Ala Ser Cys 480

Tyr Pro Phe Thr 495

Val Leu Ala Ser 510

Gly Glu Leu Asp 525

Ala Glu Lys Gly

Glu Trp Ile Asn 560

Leu Phe Met Thr 575

Ile Arg Tyr Ala 590

Thr Gln Asn Gly 605

Thr Thr Asp Met

Glu Asn Gly Asn 640

Leu Ser Thr Gly 655

Ile Phe Ile Asp 670

Asn Thr Asn Asn 685

His His Val Cys

Pro Lys Phe Glu 720

Tyr Met Leu Phe 735

Ser Ser Tyr Gln 750

Asp Glu Leu Phe 765

Lys Ala Lys Gln

Phe Glu Thr Thr 800

Tyr Asp Ser Phe 815 Ser Gly Phe Phe 830 Thr Ser Tyr Ala Tyr Gln Lys Ile Asp Glu Ser Thr Leu Lys Pro Tyr 835 840 845 Thr Arg Tyr Lys Val Ser Gly Phe Ile Gly Gln Ser Asn Gln Val Glu 850 855 860 Leu Ile Ile Ser Arg Tyr Gly Lys Glu Ile Asp Lys Ile Leu Asn Val 865 870 875 880 Pro Tyr Ala Gly Pro Leu Pro Ile Thr Ala Asp Ala Ser Ile Thr Cys 885 890 895 Cys Ala Pro Glu Ile Gly Gln Cys Asp Gly Glu Gln Ser Asp Ser His 900 905 910 Phe Phe Asn Tyr Ser Ile Asp Val Gly Ala Leu His Pro Glu Leu Asn 915 920 925 Pro Gly Ile Glu Ile Gly Leu Lys Ile Val Gln Ser Asn Gly Tyr Ile 930 935 940 Thr Ile Ser Asn Leu Glu Ile Ile Glu Glu Arg Pro Leu Thr Glu Met 945 950 955 960 Glu Ile Gln Ala Val Asn Arg Lys Asn Gln Lys Trp Glu Arg Glu Lys 965 970 975 Leu Leu Glu Cys Ala Ser Ile Ser Glu Leu Leu Gln Pro Ile Ile Asn 980 985 990 Gln Ile Asp Ser Leu Phe Lys Asp Gly Asn Trp Tyr Asn Asp Ile Leu 995 1000 1005 Pro His Val Thr Tyr Gln Asp Leu Lys Asn Ile Ile Ile Pro Glu Leu 1010 1015 1020 Pro Lys Leu Lys His Trp Phe Ile Glu Asn Leu Pro Gly Glu Tyr His 1025 1030 1035 1040 Glu Ile Glu Gln Lys Met Lys Glu Ala Leu Lys Tyr Ala Phe Thr Gln 1045 1050 1055 Leu Asp Glu Lys Asn Leu Ile His Asn Gly His Phe Thr Thr Asn Leu 1060 1065 1070 Ile Asp Trp Gln Val Glu Gly Asp Ala Gln Met Lys Val Leu Glu Asn 1075 1080 1085 Asp Ala Leu Ala Leu Gln Leu Phe Asn Trp Asp Ala Asn Ala Ser Gln 1090 1095 1100 Ser Ile Asn Ile Leu Glu Phe Asp Glu Asp Lys Ala Tyr Lys Leu Arg

1105 1110 1115 1120

Val Tyr Ala Gln Gly Ser Gly Thr Ile Gln Phe Gly Asn Cys Glu Asp

1125 1130 1135

Glu Ala Ile Gln Phe Asn Thr Asn Ser Phe Ile Tyr Gln Glu Lys Ile

1140 1145 1150

Val Tyr Phe Asp Thr Pro Ser Val Asn Leu His Ile Gln Ser Glu Gly

1155 1160 1165

Ser Glu Phe Ile Val Ser Ser Ile Asp Leu Ile Glu Leu Ser Asp Asp 1170 1175 1180

Gln 1185

<210> SEQ ID NO: 18 <211> Comprimento: 2112 <212> Tipo: DNA

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: axmi-031(ml)truncado <221> Nome/Chave: CDS

<222> Localização: (1) . . . (2112)

<400> Seqüência: 18

atg gat tgt aat tta caa tca caa caa aat att cca tat aat gta tta Met Asp Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr Asn Val Leu

gca ata cca gta tct aat gtt aat tcg ttg act gat aca gtt gga gat Ala Ile Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly Asp

tta aaa aaa gca tgg gaa gaa ttt caa aaa act ggt tct ttt tca tta Leu Lys Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser Leu

aca gct tta caa caa gga ttt tct gct tca caa gga gga aca ttc aat Thr Ala Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe Asn

tat tta aca tta cta caa tca gga ata tca tta gct ggt tct ttt gtt Tyr Leu Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe Val

cct gga ggt act ttt gta gca cct att att aat atg gtt att ggt tgg Pro Gly Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly Trp

tta tgg cca cat aaa aac aaa aat gcg gat aca gaa aat tta ata aat Leu Trp Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile Asn

tta att gat tca gaa att caa aaa caa tta aac aaa gct tta tta gat Leu Ile Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu Asp

gca gat aga aat gag tgg age tct tat tta gaa tct ata ttt gat tct Ala Asp Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp Ser

tca aat aac cta aat ggt gca att gta gat gca cag tgg tca ggc act Ser Asn Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp Ser Gly Thr gta aat act aca aat aga aca cta aga aat cca aca gaa tca gat tat Val Asn Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp Tyr

aca aat gtt gtt aca aat ttt att gca gcg gat ggt gac att gca aat Thr Asn Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp Ile Ala Asn

aat gaa aat cac ata atg aat ggc aac ttt gac gta gct gca gca cct Asn Glu Asn His Ile Met Asn Gly Asn Phe Asp Val Ala Ala Ala Pro tat ttt Tyr Phe 210

att aaa Ile Lys 225

cag ctt Gln Leu

cgt aat Arg Asn

gat tcc Asp Ser

acc tat Thr Tyr 290

gta gca Val Ala 305

gcc tta Ala Leu

gaa ggt Glu Gly

agt tat Ser Tyr

tat tat Tyr Tyr 370

cct aaa Pro Lys 385

tat gca Tyr Ala

cta gga Leu Gly

gct ata Ala Ile

ttt tgt Phe Cys

act aca Thr Thr

gca att Ala Ile 260

aaa aat Lys Asn 275

aat gta Asn Val

ata tgg Ile Trp

gaa caa Glu Gln

aca gat Thr Asp 340

caa cat Gln His 355

aat gat Asn Asp

aaa gga Lys Gly

aac agt Asn Ser

gga tta Gly Leu 420

gga gca Gly Ala

aat gct Asn Ala 230

caa aag Gln Lys 245

ctt aac Leu Asn

atg cct Met Pro

tat att Tyr Ile

cct tca Pro Ser 310

aca cgt Thr Arg 325

gga age Gly Ser

agt cca Ser Pro

gaa tta Glu Leu

agt gga Ser Gly 390

aaa tat Lys Tyr 405

tet aca Ser Thr

aca gca Thr Ala 215

tgg att Trp Ile

gct aat Ala Asn

tat aca Tyr Thr

aca ata Thr Ile 280

aaa gga Lys Gly 295

tta tat Leu Tyr

gtc act Val Thr

cta aga Leu Arg

ata cct Ile Pro 360

caa aat Gln Asn 375

tac tet Tyr Ser

aaa tat Lys Tyr

cta tet Leu Ser

cgt ttt Arg Phe

gat aaa Asp Lys

tta gat Leu Asp 250

caa caa Gln Gln 265

ggt act Gly Thr

atg aca Met Thr

cca gat Pro Asp

ttt tca Phe Ser 330

att tac Ile Tyr 345

aat aat Asn Asn

cta gaa Leu Glu

tat cct Tyr Pro

ggt gat Gly Asp 410

gca cct Ala Pro 425

gca gca Ala Ala 220

gtt gga Val Gly 235

cgc acg Arg Thr

gtt atg Val Met

aat aaa Asn Lys

tta aat Leu Asn 300

gat tat Asp Tyr 315

aat atg Asn Met

aat act Asn Thr

aat gtt Asn Val

tta gga Leu Gly 380

tat gga Tyr Gly 395

age aat Ser Asn

ata caa Ile Gln

atg caa Met Gln

ttg agt Leu Ser

aaa caa Lys Gln

aaa gtt Lys Val 270

ttt agt Phe Ser 285

gtt tta Val Leu

act tca Thr Ser

gtt ggc Val Gly

ttt gat Phe Asp 350

aat tta Asn Leu 365

gta tat Val Tyr

ttt gtt Phe Val

gat cca Asp Pro

caa gtt Gln Val 430

tet tat Ser Tyr

gac gca Asp Ala 240

aat atg Asn Met 255

ttt aaa Phe Lys

gtt gat Val Asp

gat att Asp Ile

caa aca Gln Thr 320

caa gaa Gln Glu 335

tet ttt Ser Phe

att tet Ile Ser

acc cct Thr Pro

tta aat Leu Asn 400

gaa tet Glu Ser 415

aat gca Asn Ala

672

720

768

816

864

912

960

1008

1056

1104

1152

1200

1248

1296 gca act Ala Thr

gga gca Gly Ala 450

cca cct Pro Pro 465

aat cct Asn Pro

caa gct Gln Ala

ctt gtt Leu Val

tca gat Ser Asp 530

tat ttt Tyr Phe 545

ggt gca Gly Ala

gct acg Ala Thr

aat cca Asn Pro

tct cta Ser Leu 610

aat aat Asn Asn 625

tat aca Tyr Thr

caa aac Gln Asn 435

tcc tta Ser Leu

ttt agt Phe Ser

tca gat Ser Asp

aat gta Asn Val 500

tca tat Ser Tyr 515

aca aat Thr Asn

cct aat Pro Asn

agt gct Ser Ala

aat tta Asn Leu 580

aat tca Asn Ser 595

att tcc Ile Ser

act tta Thr Leu

ctt caa Leu Gln

agt aaa Ser Lys

cct ggt Pro Gly

tgt act Cys Thr 470

aca aat Thr Asn 485

aag gga Lys Gly

gat tta Asp Leu

aat gtt Asn Val

aat gcg Asn Ala 550

gta cca Val Pro 565

aca gct Thr Ala

aat act Asn Thr

agt agt Ser Ser

cca cta Pro Leu 630

gat tta Asp Leu 645

tat cta Tyr Leu 440

tat tgt Tyr Cys 455

tct acc Ser Thr

caa aaa Gln Lys

aac aca Asn Thr

aat cct Asn Pro 520

ate tta Ile Leu 535

cgt cct Arg Pro

ctt gat Leu Asp

act caa Thr Gln

caa ate Gln Ile 600

aat cta Asn Leu 615

aat gta Asn Val

tat aat Tyr Asn

gat gga Asp Gly

act aca Thr Thr

gct aat Ala Asn

att aac Ile Asn 490

gga aaa Gly Lys 505

aaa aat Lys Asn

aaa gga Lys Gly

act gtt Thr Val

tca gga Ser Gly 570

tat aga Tyr Arg 585

ggt gta Gly Val

aca ctt Thr Leu

tat gta Tyr Val

act act Thr Thr 650

gaa ate Glu Ile

gga tgt Gly Cys 460

ggc tat Gly Tyr 475

gct tta Ala Leu

tta gga Leu Gly

gta ttt Val Phe

att cct Ile Pro 540

gta aaa Val Lys 555

aat acc Asn Thr

att aga Ile Arg

cga att Arg Ile

tat agt Tyr Ser 620

ata gga Ile Gly 635

aat gtt Asn Val

cta aat Leu Asn 445

tca cca Ser Pro

aaa gca Lys Ala

tat cct Tyr Pro

gta ctg Val Leu 510

ggt gag Gly Glu 525

gca gaa Ala Glu

gaa tgg Glu Trp

tta ttt Leu Phe

ata cgt Ile Arg 590

aca caa Thr Gln 605

act act Thr Thr

gaa aat Glu Asn

tta tca Leu Ser

gga ata Gly Ile

aca gaa Thr Glu

age tgt Ser Cys 480

ttt aca Phe Thr 495

gca agt Ala Ser

tta gat Leu Asp

aaa gga Lys Gly

att aat Ile Asn 560

atg acg Met Thr 575

tat gca Tyr Ala

aat ggt Asn Gly

gat atg Asp Met

gga aat Gly Asn 640

aca gga Thr Gly 655

1344

1392

1440

1488

1536

1584

1632

1680

1728

1776

1824

1872

1920

1968 gat att aca Asp Ile Thr

cga ata gaa Arg Ile Glu 675

aat aac ggt Asn Asn Gly 690

tta caa att Leu Gln Ile 660

ttt gtt cct Phe Val Pro

aat aat aac Asn Asn Asn

aca gga gga Thr Gly Gly 665

act atg cct Thr Met Pro 680

ggt aat aat Gly Asn Asn 695

gat caa aaa Asp Gln Lys

gta cct ggt Val Pro Gly

aat ccc cca Asn Pro Pro 700

ata ttt att Ile Phe Ile 670

aat act aac Asn Thr Asn 685

cac cac gtc His His Val

gat 2016 Asp

aac 2064 Asn

tag 2112

<210> SEQ ID NO: 19 <211> Comprimento: 703 <212> Tipo: PRT

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: AXMI-031(Ml)TRUNCADO <400> Seqüência: 19

Met Asp Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr Asn Val Leu 1 5 10 15 Ala Ile Pro Val 20 Ser Asn Val Asn Ser 25 Leu Thr Asp Thr Val 30 Gly Asp Leu Lys Lys 35 Ala Trp Glu Glu Phe 40 Gln Lys Thr Gly Ser 45 Phe Ser Leu Thr Ala 50 Leu Gln Gln Gly Phe 55 Ser Ala Ser Gln Gly 60 Gly Thr Phe Asn Tyr Leu Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe Val 65 70 75 80 Pro Gly Gly Thr Phe 85 Val Ala Pro Ile Ile 90 Asn Met Val Ile Gly 95 Trp Leu Trp Pro His 100 Lys Asn Lys Asn Ala 105 Asp Thr Glu Asn Leu 110 Ile Asn Leu Ile Asp 115 Ser Glu Ile Gln Lys 120 Gln Leu Asn Lys Ala 125 Leu Leu Asp Ala Asp 130 Arg Asn Glu Trp Ser 135 Ser Tyr Leu Glu Ser 140 Ile Phe Asp Ser Ser Asn Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp Ser Gly Thr 145 150 155 160 Val Asn Thr Thr Asn 165 Arg Thr Leu Arg Asn 170 Pro Thr Glu Ser Asp 175 Tyr Thr Asn Val Val 180 Thr Asn Phe Ile Ala 185 Ala Asp Gly Asp Ile 190 Ala Asn Asn Glu Asn 195 His Ile Met Asn Gly 200 Asn Phe Asp Val Ala 205 Ala Ala Pro Tyr Phe 210 Ala Ile Gly Ala Thr 215 Ala Arg Phe Ala Ala 220 Met Gln Ser Tyr Ile Lys Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp Ala 225 230 235 240 Gln Leu Thr Thr Gln 245 Lys Ala Asn Leu Asp 250 Arg Thr Lys Gln Asn 255 Met Arg Asn Ala Ile 260 Leu Asn Tyr Thr Gln 265 Gln Val Met Lys Val 270 Phe Lys Asp Ser Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val Asp

275 280 285

Thr Tyr Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp Ile

290 295 300

Val Ala Ile Trp Pro Ser Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr Ser Gln Thr 305 310 315 320

Ala Leu Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln Glu

325 330 335

Glu Gly Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser Phe

340 345 350

Ser Tyr Gln His Ser Pro Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn Leu Ile Ser

355 360 365

Tyr Tyr Asn Asp Glu Leu Gln Asn Leu Glu Leu Gly Val Tyr Thr Pro

370 375 380

Pro Lys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr Gly Phe Val Leu Asn 385 390 395 400

Tyr Ala Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp Pro Glu Ser

405 410 415

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420 425 430

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485 490 495

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675 680 685

Asn Asn Gly Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn Pro Pro His His Val 690 695 700 <210> SEQ ID NO: 20 <211> Comprimento: 2219 <212> Tipo: DNA

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: axmi-031(A-D)

<221> Nome/Chave: CDS

<222> Localização: (1)...(2216)

<400> Seqüência: 20

atg gat tgt aat tta caa tca caa caa aat att cca tat aat gta tta Met Asp Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr Asn Val Leu 15 10 15

gca ata cca gta tct aat gtt aat tcg ttg act gat aca gtt gga gat Ala Ile Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly Asp 20 25 30

tta aaa aaa gca tgg gaa gaa ttt caa aaa act ggt tct ttt tca tta Leu Lys Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser Leu 35 40 45

48

96

144

aca gct tta caa caa gga ttt tct gct tca caa gga gga aca ttc aat 192 Thr Ala Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe Asn 50 55 60

tat tta aca tta cta caa tca gga ata tca tta gct ggt tct ttt gtt 240 Tyr Leu Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe Val 65 70 75 80

cct gga ggt act ttt gta gca cct att att aat atg gtt att ggt tgg 2 88 Pro Gly Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly Trp 85 90 95

tta tgg cca cat aaa aac aaa aat gcg gat aca gaa aat tta ata aat 336 Leu Trp Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile Asn 100 105 110

tta att gat tca gaa att caa aaa caa tta aac aaa gct tta tta gat 384 Leu Ile Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu Asp 115 120 125

gca gat aga aat gag tgg age tct tat tta gaa tct ata ttt gat tct

Ala Asp Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp Ser

130 135 140

tca aat aac cta aat ggt gca att gta gat gca cag tgg tca ggc act

Ser Asn Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp Ser Gly Thr

145 150 155 160

gta aat act aca aat aga aca cta aga aat cca aca gaa tca gat tat Val Asn Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp Tyr

165 170 175

432

480

528 aca aat Thr Asn

aat gaa Asn Glu

tat ttt Tyr Phe 210

att aaa Ile Lys 225

cag ctt Gln Leu

cgt aat Arg Asn

gat tcc Asp Ser

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gcc tta Ala Leu

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tta tat Leu Tyr

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tta aat Leu Asn 300

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gca aat Ala Asn

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gac gca Asp Ala 240

aat atg Asn Met 255

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gtt gat Val Asp

gat att Asp Ile

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tta aat Leu Asn 400

576

624

672

720

768

816

864

912

960

1008

1056

1104

1152

1200 tat gca aac agt aaa tat aaa tat ggt gat age aat gat cca gaa tet Tyr Ala Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp Pro Glu Ser 405 410 415

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cca cct ttt agt tgt act tet acc gct aat ggc tat aaa gca age tgt Pro Pro Phe Ser Cys Thr Ser Thr Ala Asn Gly Tyr Lys Ala Ser Cys 465 470 475 480

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caa gct aat gta aag gga aac aca gga aaa tta gga gta ctg gca agt Gln Ala Asn Val Lys Gly Asn Thr Gly Lys Leu Gly Val Leu Ala Ser 500 505 510

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tet cta att tcc agt agt aat cta aca ctt tat agt act act gat atg Ser Leu Ile Ser Ser Ser Asn Leu Thr Leu Tyr Ser Thr Thr Asp Met 610 615 620

1248

1296

1344

1392

1440

1488

1536

1584

1632

1680

1728

1776

1824

1872 aat aat act tta cca cta aat gta tat gta ata gga gaa aat gga aat 192 0 Asn Asn Thr Leu Pro Leu Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu Asn Gly Asn 625 630 635 640

tat aca ctt caa gat tta tat aat act act aat gtt tta tca aca gga 1968 Tyr Thr Leu Gln Asp Leu Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu Ser Thr Gly 645 650 655

gat att aca tta caa att aca gga gga gat caa aaa ata ttt att gat 2016 Asp Ile Thr Leu Gln Ile Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile Phe Ile Asp 660 665 670

cga ata gaa ttt gtt cct act atg cct gta cct ggt aat act aac aac 2064 Arg Ile Glu Phe Val Pro Thr Met Pro Val Pro Gly Asn Thr Asn Asn 675 680 685

aat aac ggt aat aat aac ggt aat aat aat ccc cca cac cac gtt tgt 2112 Asn Asn Gly Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn Pro Pro His His Val Cys 690 695 700

gca ata gct ggt aca caa caa tct tgt tct gga ccg ccc aaa ttt gaa 2160 Ala Ile Ala Gly Thr Gln Gln Ser Cys Ser Gly Pro Pro Lys Phe Glu 705 710 715 720

caa gta agt gat tta gaa aaa att aca aca caa gta tat atg tta ttc 2 2 08 Gln Val Ser Asp Leu Glu Lys Ile Thr Thr Gln Val Tyr Met Leu Phe 725 730 735

7719

aaa tct ta tag ^x*

Lys Ser

<210> SEQ ID NO: 21 <211> Comprimento: 738 <212> Tipo: PRT

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: AXMI-031(A-D)

<400> Seqüência: 21 Val Leu Met Asp Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr Asn 1 5 10 15 Ala Ile Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly Asp 20 25 30 Leu Lys Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser Leu 35 40 45 Thr Ala Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe Asn 50 55 60 Val Tyr Leu Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe 65 70 75 Gly 80 Pro Gly Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Trp 85 90 95 Leu Trp Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile Asn 100 105 110 Leu Ile Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu Asp

115 120 125

Ala Asp Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp Ser

130 135 140

Ser Asn Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp Ser Gly Thr 145 150 155 160

Val Asn Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp Tyr

165 170 175

Thr Asn Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp Ile Ala Asn

180 185 190

Asn Glu Asn His Ile Met Asn Gly Asn Phe Asp Val Ala Ala Ala Pro

195 200 205

Tyr Phe Val Ile Gly Ala Thr Ala Arg Phe Ala Ala Met Gln Ser Tyr

210 215 220

Ile Lys Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp Ala 225 230 235 240

Gln Leu Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys Gln Asn Met

245 250 255

Arg Asn Ala Ile Leu Asn Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys Val Phe Lys

260 265 270

Asp Ser Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val Asp

275 280 285

Thr Tyr Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp Ile

290 295 300

Val Ala Ile Trp Pro Ser Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr Ser Gln Thr 305 310 315 320

Ala Leu Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln Glu

325 330 335

Glu Gly Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser Phe

340 345 350

Ser Tyr Gln His Ser Pro Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn Leu Ile Ser

355 360 365

Tyr Tyr Asn Asp Glu Leu Gln Asn Leu Glu Leu Gly Val Tyr Thr Pro

370 375 380

Pro Lys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr Gly Phe Val Leu Asn 385 390 395 400

Tyr Ala Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp Pro Glu Ser

405 410 415

Leu Gly Gly Leu Ser Thr Leu Ser Ala Pro Ile Gln Gln Val Asn Ala

420 425 430

Ala Thr Gln Asn Ser Lys Tyr Leu Asp Gly Glu Ile Leu Asn Gly Ile

435 440 445

Gly Ala Ser Leu Pro Gly Tyr Cys Thr Thr Gly Cys Ser Pro Thr Glu

450 455 460

Pro Pro Phe Ser Cys Thr Ser Thr Ala Asn Gly Tyr Lys Ala Ser Cys 465 470 475 480

Asn Pro Ser Asp Thr Asn Gln Lys Ile Asn Ala Leu Tyr Pro Phe Thr

485 490 495

Gln Ala Asn Val Lys Gly Asn Thr Gly Lys Leu Gly Val Leu Ala Ser

500 505 510

Leu Val Ser Tyr Asp Leu Asn Pro Lys Asn Val Phe Gly Glu Leu Asp

515 520 525

Ser Asp Thr Asn Asn Val Ile Leu Lys Gly Ile Pro Ala Glu Lys Gly

530 535 540

Tyr Phe Pro Asn Asn Ala Arg Pro Thr Val Val Lys Glu Trp Ile Asn 545 550 555 560 Gly Ala Ser Ala Val Pro Leu Asp Ser Gly Asn Thr Leu Phe Met Thr 565 570 575 Ala Thr Asn Leu 580 Thr Ala Thr Gln Tyr 585 Arg Ile Arg Ile Arg 590 Tyr Ala Asn Pro Asn 595 Ser Asn Thr Gln Ile 600 Gly Val Arg Ile Thr 605 Gln Asn Gly Ser Leu 610 Ile Ser Ser Ser Asn 615 Leu Thr Leu Tyr Ser 620 Thr Thr Asp Met Asn Asn Thr Leu Pro Leu Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu Asn Gly Asn 625 630 635 640 Tyr Thr Leu Gln Asp Leu Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu Ser Thr Gly 645 650 655 Asp Ile Thr Leu Gln Ile Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile Phe Ile Asp 660 665 670 Arg Ile Glu Phe Val Pro Thr Met Pro Val Pro Gly Asn Thr Asn Asn 675 680 685 Asn Asn 690 Gly Asn Asn Asn Gly 695 Asn Asn Asn Pro Pro 700 His His Val Cys Ala Ile Ala Gly Thr Gln Gln Ser Cys Ser Gly Pro Pro Lys Phe Glu 705 710 715 720 Gln Val Ser Asp Leu Glu Lys Ile Thr Thr Gln Val Tyr Met Leu Phe

725 730 735

Lys Ser

<210> SEQ ID NO: 22 <211> Comprimento: 2 015 <212> Tipo: DNA

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: axmi-031(B-C)

<221> Nome/Chave: CDS

<222> Localização: (1) . . . (2012)

<400> Seqüência: 22

atg gca ata cca gta tct aat gtt aat tcg ttg act gat aca gtt gga 48

Met Ala Ile Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly

15 10 15

gat tta aaa aaa gca tgg gaa gaa ttt caa aaa act ggt tct ttt tca 96

Asp Leu Lys Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser

20 25 30

tta aca gct tta caa caa gga ttt tct gct tca caa gga gga aca ttc 144

Leu Thr Ala Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe

35 40 45

aat tat tta aca tta cta caa tca gga ata tca tta gct ggt tct ttt 192 Asn Tyr Leu Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe

50 55 60

gtt cct gga ggt act ttt gta gca cct att att aat atg gtt att ggt 240 Val Pro Gly Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly

65 70 75 80 tgg tta tgg cca cat aaa aac aaa aat gcg gat aca gaa aat tta ata Trp Leu Trp Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile 85 90 95

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gat gca gat aga aat gag tgg age tet tat tta gaa tet ata ttt gat Asp Ala Asp Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp 115 120 125

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act gta aat act aca aat aga aca cta aga aat cca aca gaa tca gat Thr Val Asn Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp 145 150 155 160

tat aca aat gtt gtt aca aat ttt att gca gcg gat ggt gac att gca Tyr Thr Asn Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp Ile Ala 165 170 175

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tat att aaa ttt tgt aat gct tgg att gat aaa gtt gga ttg agt gac Tyr Ile Lys Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp 210 215 220

gca cag ctt act aca caa aag gct aat tta gat cgc acg aaa caa aat Ala Gln Leu Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys Gln Asn 225 230 235 240

atg cgt aat gca att ctt aac tat aca caa caa gtt atg aaa gtt ttt Met Arg Asn Ala Ile Leu Asn Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys Val Phe 245 250 255

aaa gat tcc aaa aat atg cct aca ata ggt act aat aaa ttt agt gtt Lys Asp Ser Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val 260 265 270

gat acc tat aat gta tat att aaa gga atg aca tta aat gtt tta gat Asp Thr Tyr Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp 275 280 285

att gta gca ata tgg cct tca tta tat cca gat gat tat act tca caa Ile Val Ala Ile Trp Pro Ser Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr Ser Gln 290 295 300

288

336

384

432

480

528

576

624

672

720

768

816

864

912 aca gcc tta gaa caa aca cgt gtc act ttt tca aat atg gtt ggc caa 960 Thr Ala Leu Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln 305 310 315 320

gaa gaa ggt aca gat gga age cta aga att tac aat act ttt gat tet Glu Glu Gly Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser 325 330 335

ttt agt tat caa cat agt cca ata cct aat aat aat gtt aat tta att Phe Ser Tyr Gln His Ser Pro Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn Leu Ile 340 345 350

tet tat tat aat gat gaa tta caa aat cta gaa tta gga gta tat acc Ser Tyr Tyr Asn Asp Glu Leu Gln Asn Leu Glu Leu Gly Val Tyr Thr 355 360 365

cct cct aaa aaa gga agt gga tac tet tat cct tat gga ttt gtt tta 1152 Pro Pro Lys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr Gly Phe Val Leu 370 375 380

aat tat gea aac agt aaa tat aaa tat ggt gat age aat gat cca gaa Asn Tyr Ala Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp Pro Glu 385 390 395 400

tet cta gga gga tta tet aca cta tet gea cct ata caa caa gtt aat Ser Leu Gly Gly Leu Ser Thr Leu Ser Ala Pro Ile Gln Gln Val Asn 405 410 415

gea gea act caa aac agt aaa tat cta gat gga gaa ate cta aat gga Ala Ala Thr Gln Asn Ser Lys Tyr Leu Asp Gly Glu Ile Leu Asn Gly 420 425 430

1008

1056

1104

1200

1248

1296

ata gga gea tcc tta cct ggt tat tgt act aca gga tgt tca cca aca 1344 Ile Gly Ala Ser Leu Pro Gly Tyr Cys Thr Thr Gly Cys Ser Pro Thr 435 440 445

gaa cca cct ttt agt tgt act tet acc gct aat ggc tat aaa gea age 1392 Glu Pro Pro Phe Ser Cys Thr Ser Thr Ala Asn Gly Tyr Lys Ala Ser 450 455 460

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gat tca gat aca aat aat gtt ate tta aaa gga att cct gea gaa aaa 1584 Asp Ser Asp Thr Asn Asn Val Ile Leu Lys Gly Ile Pro Ala Glu Lys 515 520 525

1440

1488

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545 550 555 560

acg gct acg aat tta aca gct act caa tat aga att aga ata cgt tat 1728

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gca aat cca aat tca aat act caa ate ggt gta cga att aca caa aat 1776 Ala Asn Pro Asn Ser Asn Thr Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr Gln Asn

580 585 590

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1824

atg aat aat act tta cca cta aat gta tat gta ata gga gaa aat gga 1872 Met Asn Asn Thr Leu Pro Leu Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu Asn Gly 610 615 620

aat tat aca ctt caa gat tta tat aat act act aat gtt tta tca aca 1920 Asn Tyr Thr Leu Gln Asp Leu Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu Ser Thr 625 630 635 640

gga gat att aca tta caa att aca gga gga gat caa aaa ata ttt att 1968 Gly Asp Ile Thr Leu Gln Ile Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile Phe Ile 645 650 655

gat cga ata gaa ttt gtt cct act atg cct gta cct ggt aat ta 2012

Asp Arg Ile Glu Phe Val Pro Thr Met Pro Val Pro Gly Asn 660 665 670

tag 2015

<210> SEQ ID NO: 23 <211> Comprimento: 670 <212> Tipo: PRT

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: AXMI-031(B-C)

<400> Seqüência: : 23 Met Ala Ile Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly 1 5 10 15 Asp Leu Lys Lys 20 Ala Trp Glu Glu Phe 25 Gln Lys Thr Gly Ser 30 Phe Ser Leu Thr Ala 35 Leu Gln Gln Gly Phe 40 Ser Ala Ser Gln Gly 45 Gly Thr Phe Asn Tyr 50 Leu Thr Leu Leu Gln 55 Ser Gly Ile Ser Leu 60 Ala Gly Ser Phe Val Pro Gly Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly 65 70 75 80 Trp Leu Trp Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile

85 90 95

Asn Leu Ile Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu

100 105 HO

Asp Ala Asp Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp

115 120 125

Ser Ser Asn Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp Ser Gly

130 135 140

Thr Val Asn Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp 145 150 155 160

Tyr Thr Asn Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp Ile Ala

165 170 175

Asn Asn Glu Asn His Ile Met Asn Gly Asn Phe Asp Val Ala Ala Ala

180 185 190

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195 200 205

Tyr Ile Lys Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp

210 215 220

Ala Gln Leu Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys Gln Asn 225 230 235 240

Met Arg Asn Ala Ile Leu Asn Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys Val Phe

245 250 255

Lys Asp Ser Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val

260 265 270

Asp Thr Tyr Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp

275 280 285

Ile Val Ala Ile Trp Pro Ser Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr Ser Gln

290 295 300

Thr Ala Leu Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln 305 310 315 320

Glu Glu Gly Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser

325 330 335

Phe Ser Tyr Gln His Ser Pro Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn Leu Ile

340 345 350

Ser Tyr Tyr Asn Asp Glu Leu Gln Asn Leu Glu Leu Gly Val Tyr Thr

355 360 365

Pro Pro Lys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr Gly Phe Val Leu

370 375 380

Asn Tyr Ala Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp Pro Glu 385 390 395 400

Ser Leu Gly Gly Leu Ser Thr Leu Ser Ala Pro Ile Gln Gln Val Asn

405 410 415

Ala Ala Thr Gln Asn Ser Lys Tyr Leu Asp Gly Glu Ile Leu Asn Gly

420 425 430

Ile Gly Ala Ser Leu Pro Gly Tyr Cys Thr Thr Gly Cys Ser Pro Thr

435 440 445

Glu Pro Pro Phe Ser Cys Thr Ser Thr Ala Asn Gly Tyr Lys Ala Ser

450 455 460

Cys Asn Pro Ser Asp Thr Asn Gln Lys Ile Asn Ala Leu Tyr Pro Phe 465 470 475 480

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Ser Leu Val Ser Tyr Asp Leu Asn Pro Lys Asn Val Phe Gly Glu Leu

500 505 510

Asp Ser Asp Thr Asn Asn Val Ile Leu Lys Gly Ile Pro Ala Glu Lys

515 520 525 Glv Tyr Phe Pro Asn Asn Ala Arg Pro Thr Val Val Lys Glu Trp Ile

530 535 540

Asn Gly Ala Ser Ala Val Pro Leu Asp Ser Gly Asn Thr Leu Phe Met 545 550 555 560

Thr Ala Thr Asn Leu Thr Ala Thr Gln Tyr Arg Ile Arg Ile Arg Tyr

565 570 575

Ala Asn Pro Asn Ser Asn Thr Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr Gln Asn

580 585 590

Gly Ser Leu Ile Ser Ser Ser Asn Leu Thr Leu Tyr Ser Thr Thr Asp

595 600 605

Met Asn Asn Thr Leu Pro Leu Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu Asn Gly

610 615 620

Asn Tyr Thr Leu Gln Asp Leu Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu Ser Thr 625 630 635 640

Gly Asp Ile Thr Leu Gln Ile Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile Phe Ile

645 650 655

Asp Arg Ile Glu Phe Val Pro Thr Met Pro Val Pro Gly Asn 660 665 670

<210> SEQ ID NO: 24 <211> Comprimento: 2174 <212> Tipo: DNA

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: axmi-031(B-D)

<221> Nome/Chave: CDS

<222> Localização: (1) ... (2171)

<400> Seqüência: 24

atg gca ata cca gta tct aat gtt aat tcg ttg act gat aca gtt gga 48 Met Ala Ile Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly 1 5 10 15

gat tta aaa aaa gca tgg gaa gaa ttt caa aaa act ggt tct ttt tca 9 6 Asp Leu Lys Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser 20 25 30

tta aca gct tta caa caa gga ttt tct gct tca caa gga gga aca ttc 144 Leu Thr Ala Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe 35 40 45

aat tat tta aca tta cta caa tca gga ata tca tta gct ggt tct ttt 192 Asn Tyr Leu Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe

50

55 60

gtt cct gga ggt act ttt gta gca cct att att aat atg gtt att ggt Val Pro Gly Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly

240

65

70 75

tgg tta tgg cca cat aaa aac aaa aat gcg gat aca gaa aat tta ata 288 Trp Leu Trp Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile 85 90 95 aat tta att gat tca gaa att caa aaa caa tta aac aaa gct tta tta Asn Leu Ile Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu 100 105 HO

gat gca gat aga aat gag tgg age tet tat tta gaa tet ata ttt gat Asp Ala Asp Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp 115 120 125

tet tca aat aac cta aat ggt gca att gta gat gca cag tgg tca ggc Ser Ser Asn Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp Ser Gly 130 135 140

act gta aat act aca aat aga aca cta aga aat cca aca gaa tca gat Thr Val Asn Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp 145 150 155 160

tat aca aat gtt gtt aca aat ttt att gca gcg gat ggt gac att gca Tyr Thr Asn Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp Ile Ala 165 170 175

aat aat gaa aat cac ata atg aat ggc aac ttt gac gta gct gca gca Asn Asn Glu Asn His Ile Met Asn Gly Asn Phe Asp Val Ala Ala Ala 180 185 190

cct tat ttt gtt ata gga gca aca gca cgt ttt gca gca atg caa tet Pro Tyr Phe Val Ile Gly Ala Thr Ala Arg Phe Ala Ala Met Gln Ser 195 200 205

tat att aaa ttt tgt aat gct tgg att gat aaa gtt gga ttg agt gac Tyr Ile Lys Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp 210 215 220

gca cag ctt act aca caa aag gct aat tta gat cgc acg aaa caa aat Ala Gln Leu Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys Gln Asn 225 230 235 240

atg cgt aat gca att ctt aac tat aca caa caa gtt atg aaa gtt ttt Met Arg Asn Ala Ile Leu Asn Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys Val Phe 245 250 255

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gat acc tat aat gta tat att aaa gga atg aca tta aat gtt tta gat Asp Thr Tyr Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp 275 280 285

att gta gca ata tgg cct tca tta tat cca gat gat tat act tca caa Ile Val Ala Ile Trp Pro Ser Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr Ser Gln 290 295 300

aca gcc tta gaa caa aca cgt gtc act ttt tca aat atg gtt ggc caa Thr Ala Leu Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln 305 310 315 320

336

384

432

480

528

576

624

672

720

768

816

864

912

960 gaa gaa ggt aca gat gga age cta aga att tac aat act ttt gat tet Glu Glu Gly Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser 325 330 335

ttt agt tat caa cat agt cca ata cct aat aat aat gtt aat tta att Phe Ser Tyr Gln His Ser Pro Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn Leu Ile 340 345 350

tet tat tat aat gat gaa tta caa aat cta gaa tta gga gta tat acc Ser Tyr Tyr Asn Asp Glu Leu Gln Asn Leu Glu Leu Gly Val Tyr Thr 355 360 365

aat tat gea aac agt aaa tat aaa tat ggt gat age aat gat cca gaa Asn Tyr Ala Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp Pro Glu 385 390 395 400

tet cta gga gga tta tet aca cta tet gea cct ata caa caa gtt aat Ser Leu Gly Gly Leu Ser Thr Leu Ser Ala Pro Ile Gln Gln Val Asn 405 410 415

gea gea act caa aac agt aaa tat cta gat gga gaa ate cta aat gga Ala Ala Thr Gln Asn Ser Lys Tyr Leu Asp Gly Glu Ile Leu Asn Gly 420 425 430

ata gga gea tcc tta cct ggt tat tgt act aca gga tgt tca cca aca Ile Gly Ala Ser Leu Pro Gly Tyr Cys Thr Thr Gly Cys Ser Pro Thr 435 440 445

gaa cca cct ttt agt tgt act tet acc gct aat ggc tat aaa gea age Glu Pro Pro Phe Ser Cys Thr Ser Thr Ala Asn Gly Tyr Lys Ala Ser 450 455 460

tgt aat cct tca gat aca aat caa aaa att aac gct tta tat cct ttt Cys Asn Pro Ser Asp Thr Asn Gln Lys Ile Asn Ala Leu Tyr Pro Phe 465 470 475 480

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1008

1056

1104

cct cct aaa aaa gga agt gga tac tet tat cct tat gga ttt gtt tta 1152 Pro Pro Lys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr Gly Phe Val Leu 370 375 380

1200

1248

1296

1344

1392

1440

1488

agt ctt gtt tca tat gat tta aat cct aaa aat gta ttt ggt gaa tta 1536 Ser Leu Val Ser Tyr Asp Leu Asn Pro Lys Asn Val Phe Gly Glu Leu 500 505 510

gat tca gat aca aat aat gtt ate tta aaa gga att cct gea gaa aaa Asp Ser Asp Thr Asn Asn Val Ile Leu Lys Gly Ile Pro Ala Glu Lys 515 520 525

gga tat ttt cct aat aat gcg cgt cct act gtt gta aaa gaa tgg att Gly Tyr Phe Pro Asn Asn Ala Arg Pro Thr Val Val Lys Glu Trp Ile 530 535 540

1584

1632 aat ggt gca agt gct gta cca ctt gat tca gga aat acc tta ttt atg 1680 Asn Gly Ala Ser Ala Val Pro Leu Asp Ser Gly Asn Thr Leu Phe Met 545 550 555 560

acg gct acg aat tta aca gct act caa tat aga att aga ata cgt tat Thr Ala Thr Asn Leu Thr Ala Thr Gln Tyr Arg Ile Arg Ile Arg Tyr 565 570 575

gca aat cca aat tca aat act caa ate ggt gta cga att aca caa aat Ala Asn Pro Asn Ser Asn Thr Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr Gln Asn 580 585 590

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atg aat aat act tta cca cta aat gta tat gta ata gga gaa aat gga Met Asn Asn Thr Leu Pro Leu Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu Asn Gly 610 615 620

aat tat aca ctt caa gat tta tat aat act act aat gtt tta tca aca 1920 Asn Tyr Thr Leu Gln Asp Leu Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu Ser Thr 625 630 635 640

1728

1776

1824

1872

gga gat att aca tta caa att aca gga gga gat caa aaa ata ttt att Gly Asp Ile Thr Leu Gln Ile Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile Phe Ile 645 650 655

gat cga ata gaa ttt gtt cct act atg cct gta cct ggt aat act aac Asp Arg Ile Glu Phe Val Pro Thr Met Pro Val Pro Gly Asn Thr Asn 660 665 670

aac aat aac ggt aat aat aac ggt aat aat aat ccc cca cac cac gtt Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn Pro Pro His His Val 675 680 685

tgt gca ata gct ggt aca caa caa tet tgt tet gga ccg ccc aaa ttt Cys Ala Ile Ala Gly Thr Gln Gln Ser Cys Ser Gly Pro Pro Lys Phe 690 695 700

gaa caa gta agt gat tta gaa aaa att aca aca caa gta tat atg tta Glu Gln Val Ser Asp Leu Glu Lys Ile Thr Thr Gln Val Tyr Met Leu 705 710 715 720

ttc aaa tet ta tag Phe Lys Ser

1968

2016

2064

2112

2160

2174

<210> SEQ ID NO: 25 <211> Comprimento: 723 <212> Tipo: PRT

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: AXMI-031(B-D) <400> Seqüência: 25 Met Ala Ile Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly 1 5 10 15 Asp Leu Lys Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser 20 25 30 Leu Thr Ala Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe 35 40 45 Asn Tyr Leu Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe 50 55 60 Val Pro Gly Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly 65 70 75 80 Trp Leu Trp Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile 85 90 95 Asn Leu Ile Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu 100 105 110 Asp Ala Asp Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp 115 120 125 Ser Ser Asn Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp Ser Gly 130 135 140 Thr Val Asn Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp 145 150 155 160 Tyr Thr Asn Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp Ile Ala 165 170 175 Asn Asn Glu Asn His Ile Met Asn Gly Asn Phe Asp Val Ala Ala Ala 180 185 190 Pro Tyr Phe Val Ile Gly Ala Thr Ala Arg Phe Ala Ala Met Gln Ser 195 200 205 Tyr Ile Lys Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp 210 215 220 Ala Gln Leu Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys Gln Asn 225 230 235 240 Met Arg Asn Ala Ile Leu Asn Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys Val Phe 245 250 255 Lys Asp Ser Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val 260 265 270 Asp Thr Tyr Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp 275 280 285 Ile Val Ala Ile Trp Pro Ser Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr Ser Gln 290 295 300 Thr Ala Leu Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln 305 310 315 320 Glu Glu Gly Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser 325 330 335 Phe Ser Tyr Gln His Ser Pro Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn Leu Ile 340 345 350 Ser Tyr Tyr Asn Asp Glu Leu Gln Asn Leu Glu Leu Gly Val Tyr Thr 355 360 365 Pro Pro Lys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr Gly Phe Val Leu 370 375 380 Asn Tyr Ala Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp Pro Glu 385 390 395 400 Ser Leu Gly Gly Leu Ser Thr Leu Ser Ala Pro Ile Gln Gln Val Asn 405 410 415 Ala Ala Thr Gln Asn Ser Lys Tyr Leu Asp Gly Glu Ile Leu Asn Gly 420 425 430 Ile Gly Ala Ser Leu Pro Gly Tyr Cys Thr Thr Gly Cys Ser Pro Thr 435 440 445 Glu Pro Pro Phe Ser Cys Thr Ser Thr Ala Asn Gly Tyr Lys Ala Ser

450 455 460

Cys Asn Pro Ser Asp Thr Asn Gln Lys Ile Asn Ala Leu Tyr Pro Phe 465 470 475 480

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485 490 495

Ser Leu Val Ser Tyr Asp Leu Asn Pro Lys Asn Val Phe Gly Glu Leu

500 505 510

Asp Ser Asp Thr Asn Asn Val Ile Leu Lys Gly Ile Pro Ala Glu Lys

515 520 525

Gly Tyr Phe Pro Asn Asn Ala Arg Pro Thr Val Val Lys Glu Trp Ile

530 535 540

Asn Gly Ala Ser Ala Val Pro Leu Asp Ser Gly Asn Thr Leu Phe Met 545 550 555 560

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565 570 575

Ala Asn Pro Asn Ser Asn Thr Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr Gln Asn

580 585 590

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595 600 605

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610 615 620

Asn Tyr Thr Leu Gln Asp Leu Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu Ser Thr 625 630 635 640

Gly Asp Ile Thr Leu Gln Ile Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile Phe Ile

645 650 655

Asp Arg Ile Glu Phe Val Pro Thr Met Pro Val Pro Gly Asn Thr Asn

660 665 670

Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn Pro Pro His His Val

675 680 685

Cys Ala Ile Ala Gly Thr Gln Gln Ser Cys Ser Gly Pro Pro Lys Phe

690 695 700

Glu Gln Val Ser Asp Leu Glu Lys Ile Thr Thr Gln Val Tyr Met Leu 705 710 715 720

Phe Lys Ser

<210> SEQ ID NO: 26 <211> Comprimento: 2226 <212> Tipo: DNA

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: synaxmi-031(A-D)

<221> Nome/Chave: CDS

<222> Localização: (1)...(2226)

<400> Seqüência: 26

atg cag ate ctt gat tgc aat ctc cag age cag cag aat ate cca tac

Met Gln Ile Leu Asp Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr 15 10 15

aat gtg ctt gct ate cct gtt age aat gtt aat age ctt acg gat acg Asn Val Leu Ala Ile Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr gtt ggc gat cta aag aag gca tgg gaa gag ttc cag aag acg ggc age 144

Val Gly Asp Leu Lys Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser 35 40 45

ttc tcc ctt acc gca ctc cag cag ggc ttc age gct tcc cag ggc ggg 192

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50 55 60

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tcc ggc acc gtg aat acg acc aat cgt acg ctt cgt aat cct acg gaa Ser Gly Thr Val Asn Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu 165 170 175

240

age ttc gtg cct ggc ggc acc ttc gtt gct cca ate ate aat atg gtg 2 88

Ser Phe Val Pro Gly Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val 85 90 95

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ctg ate aat ctg ate gat tca gaa ate cag aag cag ctg aat aag gct 3 84

Leu Ile Asn Leu Ile Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala

115 120 125

ctg ctg gat gct gat cgc aat gaa tgg age age tac ctc gag tcc ate Leu Leu Asp Ala Asp Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile 130 135 140

ttc gat age age aat aat ctg aat ggc gca ate gtt gat gct cag tgg 480 Phe Asp Ser Ser Asn Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp 145 150 155 160

432

528

tca gat tac acc aat gtg gtg acg aat ttc ate gca gca gat ggg gat 576 Ser Asp Tyr Thr Asn Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp 180 185 190

ate gct aat aat gaa aat cat ate atg aat ggg aat ttc gat gtg gca 624 Ile Ala Asn Asn Glu Asn His Ile Met Asn Gly Asn Phe Asp Val Ala 195 200 205

gca gct cca tac ttc gtt ate ggg gct acc gct aga ttc gca gct atg 672 Ala Ala Pro Tyr Phe Val Ile Gly Ala Thr Ala Arg Phe Ala Ala Met 210 215 220

cag tcc tac ate aag ttc tgc aat gca tgg ate gat aag gtt ggg ctg Gln Ser Tyr Ile Lys Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu 225 230 235 240

tca gat gct cag ctg acc acg cag aag gct aat ctg gat aga acg aag Ser Asp Ala Gln Leu Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys 245 250 255

720

768 cag aat atg cgt aat gct ate ctt aat tac acc cag cag gtt atg aag 816

Gln Asn Met Arg Asn Ala Ile Leu Asn Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys 260 265 270

gtt ttc aag gat tcc aag aat atg cca acg ate ggc acg aat aag ttc 864

Val Phe Lys Asp Ser Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe 275 280 285

age gtt gat acc tac aat gtt tac ate aag ggg atg acg ctt aat gtg 912

Ser Val Asp Thr Tyr Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn Val 290 295 300

ctt gat ate gtt gct ate tgg cca age ctg tac cca gat gat tac acg 960

Leu Asp Ile Val Ala Ile Trp Pro Ser Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr

305 310 315 320

tca cag acg gct ctg gaa cag acc cgc gtg acg ttc tcc aat atg gtg 1008

Ser Gln Thr Ala Leu Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val 325 330 335

ggg cag gaa gaa ggc acg gat ggc age ctc aga ate tac aat acc ttc 1056

Gly Gln Glu Glu Gly Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe 340 345 350

gat age ttc tcc tac cag cat age cct ate cct aat aat aat gtg aat 1104

Asp Ser Phe Ser Tyr Gln His Ser Pro Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn 355 360 365

ctc ate age tac tac aat gat gaa ctt cag aat ctg gaa ctc ggg gtt 1152

Leu Ile Ser Tyr Tyr Asn Asp Glu Leu Gln Asn Leu Glu Leu Gly Val 370 375 380

tac acc cca cca aag aag ggc tca ggc tac age tac cca tac ggg ttc 12 00

Tyr Thr Pro Pro Lys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr Gly Phe

385 390 395 400

gtg ctg aat tac gea aat age aag tac aag tac ggc gat tcc aat gat 1248

Val Leu Asn Tyr Ala Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp 405 410 415

cca gaa tcc ctc ggc ggg ctt tcc acc ctt age gct cca ate caa cag 1296

Pro Glu Ser Leu Gly Gly Leu Ser Thr Leu Ser Ala Pro Ile Gln Gln 420 425 430

gtt aat gct gct acc cag aat age aag tac ctt gat ggc gaa ate ctg 1344

Val Asn Ala Ala Thr Gln Asn Ser Lys Tyr Leu Asp Gly Glu Ile Leu 435 440 445

aat ggg ate ggc gea age ctg cct ggc tac tgc acg acc ggg tgc tca 1392

Asn Gly Ile Gly Ala Ser Leu Pro Gly Tyr Cys Thr Thr Gly Cys Ser 450 455 460

cct acc gaa cca cca ttc age tgc acg age acg gea aat ggg tac aag 1440

Pro Thr Glu Pro Pro Phe Ser Cys Thr Ser Thr Ala Asn Gly Tyr Lys

465 470 475 480 gca age tgc aat cca age gat acc aat cag aag ate aat gct etc tac 1488 Ala Ser Cys Asn Pro Ser Asp Thr Asn Gln Lys Ile Asn Ala Leu Tyr 485 490 495

cca ttc acg cag gca aat gtg aag ggg aat acc ggg aag ctg ggc gtt Pro Phe Thr Gln Ala Asn Val Lys Gly Asn Thr Gly Lys Leu Gly Val 500 505 510

ctc gca age ctt gtt age tac gat ctg aat cct aag aat gtt ttc ggg Leu Ala Ser Leu Val Ser Tyr Asp Leu Asn Pro Lys Asn Val Phe Gly 515 520 525

gaa ctc gat tca gat acc aat aat gtt ate ctt aag ggc ate cca gca Glu Leu Asp Ser Asp Thr Asn Asn Val Ile Leu Lys Gly Ile Pro Ala 530 535 540

gaa aag ggc tac ttc cca aat aat gca aga cca acc gtt gtg aag gaa Glu Lys Gly Tyr Phe Pro Asn Asn Ala Arg Pro Thr Val Val Lys Glu 545 550 555 560

tgg ate aat ggg gct tcc gca gtt cca ctt gat tcc ggc aat acc ctg Trp Ile Asn Gly Ala Ser Ala Val Pro Leu Asp Ser Gly Asn Thr Leu 565 570 575

ttc atg acg gct acg aac ctg acg gct acc cag tac aga ate cgc ate 1776 Phe Met Thr Ala Thr Asn Leu Thr Ala Thr Gln Tyr Arg Ile Arg Ile 580 585 590

1536

1584

1632

1680

1728

cgt tac gct aac cca aac tca aac acg cag ate ggc gtt aga ate acg Arg Tyr Ala Asn Pro Asn Ser Asn Thr Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr 595 600 605

cag aac ggg age ctc ate tcc tcc tcc aac ctc acg ctg tac tca acc Gln Asn Gly Ser Leu Ile Ser Ser Ser Asn Leu Thr Leu Tyr Ser Thr 610 615 620

acc gat atg aac aac acc ctg cca ctg aac gtt tac gtg ate ggg gaa Thr Asp Met Asn Asn Thr Leu Pro Leu Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu 625 630 635 640

aac ggg aac tac acc ctc cag gat ctc tac aac acg acg aac gtt ctg Asn Gly Asn Tyr Thr Leu Gln Asp Leu Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu 645 650 655

tcc acg ggc gat ate acc ctg cag ate acc ggc ggg gat cag aag ata Ser Thr Gly Asp Ile Thr Leu Gln Ile Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile 660 665 670

ttc ate gat cgc ate gag ttc gtg cct acg atg cca gtg cca ggc aac Phe Ile Asp Arg Ile Glu Phe Val Pro Thr Met Pro Val Pro Gly Asn 675 680 685

acc aac aac aac aac ggc aac aac aac ggc aac aac aac ccc ccc cat Thr Asn Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn Pro Pro His 690 695 700

1824

1872

1920

1968

2016

2064

2112 cat gtc tgc gct ata gct ggt act cag cag tct tgc tca ggt cct cct His Val Cys Ala Ile Ala Gly Thr Gln Gln Ser Cys Ser Gly Pro Pro 705 710 715 720

aag ttc gag cag gtt tct gat ctc gag aag ate acc acc cag gtc tac Lys Phe Glu Gln Val Ser Asp Leu Glu Lys Ile Thr Thr Gln Val Tyr 725 730 735

atg ctg ttc aag tcc taa Met Leu Phe Lys Ser * 740

2160

2208

2226

<210> SEQ ID NO: 27 <211> Comprimento: 741 <212> Tipo: PRT

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: SYNAXMI-031(A-D)

<400> Seqüência: 27

Met Gln Ile Leu Asp Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr 1 5 10 15 Asn Val Leu Ala 20 Ile Pro Val Ser Asn 25 Val Asn Ser Leu Thr 30 Asp Thr Val Gly Asp Leu Lys Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser 35 40 45 Phe Ser Leu Thr Ala Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly 50 55 60 Gly Thr Phe Asn Tyr Leu Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala 65 70 75 80 Ser Phe Val Pro Gly 85 Gly Thr Phe Val Ala 90 Pro Ile Ile Asn Met 95 Val Ile Gly Trp Leu Trp Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn 100 105 110 Leu Ile Asn Leu Ile Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala 115 120 125 Ile Leu Leu 130 Asp Ala Asp Arg Asn 135 Glu Trp Ser Ser Tyr 140 Leu Glu Ser Phe Asp Ser Ser Asn Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp 145 150 155 160 Ser Gly Thr Val Asn Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu 165 170 175 Ser Asp Tyr Thr Asn Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp 180 185 190 Ile Ala Asn 195 Asn Glu Asn His Ile 200 Met Asn Gly Asn Phe 205 Asp Val Ala Ala Ala 210 Pro Tyr Phe Val Ile 215 Gly Ala Thr Ala Arg 220 Phe Ala Ala Met Gln Ser Tyr Ile Lys Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu 225 230 235 240 Ser Asp Ala Gln Leu Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys 245 250 255 Gln Asn Met Arg 260 Asn Ala Ile Leu Asn 265 Tyr Thr Gln Gln Val 270 Met Lys Val Phe Lys Asp Ser Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe

Ser Val Asp Thr Tyr Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn Val

Leu Asp Ile Val Ala Ile Trp Pro Ser Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr

Ser Gln Thr Ala Leu Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val

Gly Gln Glu Glu Gly Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe

Asp Ser Phe Ser Tyr Gln His Ser Pro Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn

Leu Ile Ser Tyr Tyr Asn Asp Glu Leu Gln Asn Leu Glu Leu Gly Val

Tyr Thr Pro Pro Lys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr Gly Phe

Val Leu Asn Tyr Ala Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp

Pro Glu Ser Leu Gly Gly Leu Ser Thr Leu Ser Ala Pro Ile Gln Gln

Val Asn Ala Ala Thr Gln Asn Ser Lys Tyr Leu Asp Gly Glu Ile Leu

Asn Gly Ile Gly Ala Ser Leu Pro Gly Tyr Cys Thr Thr Gly Cys Ser

Pro Thr Glu Pro Pro Phe Ser Cys Thr Ser Thr Ala Asn Gly Tyr Lys

Ala Ser Cys Asn Pro Ser Asp Thr Asn Gln Lys Ile Asn Ala Leu Tyr

Pro Phe Thr Gln Ala Asn Val Lys Gly Asn Thr Gly Lys Leu Gly Val

Leu Ala Ser Leu Val Ser Tyr Asp Leu Asn Pro Lys Asn Val Phe Gly

Glu Leu Asp Ser Asp Thr Asn Asn Val Ile Leu Lys Gly Ile Pro Ala

Glu Lys Gly Tyr Phe Pro Asn Asn Ala Arg Pro Thr Val Val Lys Glu

Trp Ile Asn Gly Ala Ser Ala Val Pro Leu Asp Ser Gly Asn Thr Leu

Phe Met Thr Ala Thr Asn Leu Thr Ala Thr Gln Tyr Arg Ile Arg Ile

Arg Tyr Ala Asn Pro Asn Ser Asn Thr Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr

Gln Asn Gly Ser Leu Ile Ser Ser Ser Asn Leu Thr Leu Tyr Ser Thr

Thr Asp Met Asn Asn Thr Leu Pro Leu Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu

Asn Gly Asn Tyr Thr Leu Gln Asp Leu Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu

Ser Thr Gly Asp Ile Thr Leu Gln Ile Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile

Phe Ile Asp Arg Ile Glu Phe Val Pro Thr Met Pro Val Pro Gly Asn

Thr Asn Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn Pro Pro His

His Val Cys Ala Ile Ala Gly Thr Gln Gln Ser Cys Ser Gly Pro Pro Lys Phe Glu Gln Val Ser Asp Leu Glu Lys Ile Thr Thr Gln Val Tyr

725 730 735

Met Leu Phe Lys Ser 740

<210> SEQ ID NO: 28 <211> Comprimento: 2316 <212> Tipo: DNA

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: aposynaxmi-031(A-D)

<221> Nome/Chave: CDS

<222> Localização: (1) . . . (2316)

<400> Seqüência: 28

atg cag ate ctt ggg tac tcc age ttc gtt gct ate gct ctt ctt atg 48

Met Gln Ile Leu Gly Tyr Ser Ser Phe Val Ala Ile Ala Leu Leu Met 15 10 15

age gtg gtt gtt gtt tgc aat ggg ggc aag acg tcc acc tac gtg cgt 96 Ser Val Val Val Val Cys Asn Gly Gly Lys Thr Ser Thr Tyr Val Arg 20 25 30

aat ctg gat tgc aat ctc cag age cag cag aat ate cca tac aat gtg Asn Leu Asp Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr Asn Val 35 40 45

ctt gct ate cct gtt age aat gtt aat age ctt acg gat acg gtt ggc Leu Ala Ile Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly 50 55 60

gat cta aag aag gea tgg gaa gag ttc cag aag acg ggc age ttc tcc Asp Leu Lys Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser 65 70 75 80

ctt acc gea ctc cag cag ggc ttc age gct tcc cag ggc ggg acg ttc Leu Thr Ala Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe 85 90 95

aat tac ctc acc ctc ctc cag tcc ggg ate tcc ctg gct ggc age ttc Asn Tyr Leu Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe 100 105 HO

gtg cct ggc ggc acc ttc gtt gct cca ate ate aat atg gtg ate ggc 384 Val Pro Gly Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly 115 120 125

144

192

240

288

336

tgg ctc tgg cct cat aag aat aag aat gea gat acg gaa aat ctg ate Trp Leu Trp Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile 130 135 140

aat ctg ate gat tca gaa ate cag aag cag ctg aat aag gct ctg ctg Asn Leu Ile Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu 145 150 155 160

432

480 gat gct gat cgc aat gaa tgg age age tac ctc gag tcc ate ttc gat Asp Ala Asp Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp 165 170 175

age age aat aat ctg aat ggc gea ate gtt gat gct cag tgg tcc ggc Ser Ser Asn Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp Ser Gly 180 185 190

acc gtg aat acg acc aat cgt acg ctt cgt aat cct acg gaa tca gat Thr Val Asn Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp 195 200 205

tac acc aat gtg gtg acg aat ttc ate gea gea gat ggg gat ate gct Tyr Thr Asn Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp Ile Ala 210 215 220

aat aat gaa aat cat ate atg aat ggg aat ttc gat gtg gea gea gct Asn Asn Glu Asn His Ile Met Asn Gly Asn Phe Asp Val Ala Ala Ala 225 230 235 240

cca tac ttc gtt ate ggg gct acc gct aga ttc gea gct atg cag tcc Pro Tyr Phe Val Ile Gly Ala Thr Ala Arg Phe Ala Ala Met Gln Ser 245 250 255

tac ate aag ttc tgc aat gea tgg ate gat aag gtt ggg ctg tca gat Tyr Ile Lys Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp 260 265 270

gct cag ctg acc acg cag aag gct aat ctg gat aga acg aag cag aat Ala Gln Leu Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys Gln Asn 275 280 285

atg cgt aat gct ate ctt aat tac acc cag cag gtt atg aag gtt ttc Met Arg Asn Ala Ile Leu Asn Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys Val Phe 290 295 300

aag gat tcc aag aat atg cca acg ate ggc acg aat aag ttc age gtt Lys Asp Ser Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val 305 310 315 320

gat acc tac aat gtt tac ate aag ggg atg acg ctt aat gtg ctt gat Asp Thr Tyr Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp 325 330 335

ate gtt gct ate tgg cca age ctg tac cca gat gat tac acg tca cag Ile Val Ala Ile Trp Pro Ser Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr Ser Gln 340 345 350

acg gct ctg gaa cag acc cgc gtg acg ttc tcc aat atg gtg ggg cag Thr Ala Leu Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln 355 360 365

gaa gaa ggc acg gat ggc age ctc aga ate tac aat acc ttc gat age Glu Glu Gly Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser 370 375 380

528

576

624

672

720

768

816

864

912

960

1008

1056

1104

1152 ttc tcc Phe Ser 385

age tac Ser Tyr

cca cca Pro Pro

aat tac Asn Tyr

tcc ctc Ser Leu 450

gct gct Ala Ala 465

ate ggc Ile Gly

gaa cca Glu Pro

tgc aat Cys Asn

acg cag Thr Gln 530

age ctt Ser Leu 545

gat tca Asp Ser

ggc tac Gly Tyr

aat ggg Asn Gly

tac cag Tyr Gln

tac aat Tyr Asn

aag aag Lys Lys 420

gea aat Ala Asn 435

ggc ggg Gly Gly

acc cag Thr Gln

gea age Ala Ser

cca ttc Pro Phe 500

cca age Pro Ser 515

gea aat Ala Asn

gtt age Val Ser

gat acc Asp Thr

ttc cca Phe Pro 580

gct tcc Ala Ser 595

cat age His Ser 390

gat gaa Asp Glu 405

ggc tca Gly Ser

age aag Ser Lys

ctt tcc Leu Ser

aat age Asn Ser 470

ctg cct Leu Pro 485

age tgc Ser Cys

gat acc Asp Thr

gtg aag Val Lys

tac gat Tyr Asp 550

aat aat Asn Asn 565

aat aat Asn Asn

gea gtt Ala Val

cct ate Pro Ile

ctt cag Leu Gln

ggc tac Gly Tyr

tac aag Tyr Lys 440

acc ctt Thr Leu 455

aag tac Lys Tyr

ggc tac Gly Tyr

acg age Thr Ser

aat cag Asn Gln 520

ggg aat Gly Asn 535

ctg aat Leu Asn

gtt ate Val Ile

gea aga Ala Arg

cca ctt Pro Leu 600

cct aat Pro Asn

aat ctg Asn Leu 410

age tac Ser Tyr 425

tac ggc Tyr Gly

age gct Ser Ala

ctt gat Leu Asp

tgc acg Cys Thr 490

acg gea Thr Ala 505

aag ate Lys Ile

acc ggg Thr Gly

cct aag Pro Lys

ctt aag Leu Lys 570

cca acc Pro Thr 585

gat tcc Asp Ser

aat aat Asn Asn 395

gaa ctc Glu Leu

cca tac Pro Tyr

gat tcc Asp Ser

cca ate Pro Ile 460

ggc gaa Gly Glu 475

acc ggg Thr Gly

aat ggg Asn Gly

aat gct Asn Ala

aag ctg Lys Leu 540

aat gtt Asn Val 555

ggc ate Gly Ile

gtt gtg Val Val

ggc aat Gly Asn

gtg aat Val Asn

ggg gtt Gly Val

ggg ttc Gly Phe 430

aat gat Asn Asp 445

caa cag Gln Gln

ate ctg Ile Leu

tgc tca Cys Ser

tac aag Tyr Lys 510

ctc tac Leu Tyr 525

ggc gtt Gly Val

ttc ggg Phe Gly

cca gea Pro Ala

aag gaa Lys Glu 590

acc ctg Thr Leu 605

ctc ate Leu Ile 400

tac acc Tyr Thr 415

gtg ctg Val Leu

cca gaa Pro Glu

gtt aat Val Asn

aat ggg Asn Gly 480

cct acc Pro Thr 495

gea age Ala Ser

cca ttc Pro Phe

ctc gea Leu Ala

gaa ctc Glu Leu 560

gaa aag Glu Lys 575

tgg ate Trp Ile

ttc atg Phe Met

1200

1248

1296

1344

1392

1440

1488

1536

1584

1632

1680

1728

1776

1824 acg gct acg aac ctg acg gct acc cag tac aga ate cgc ate cgt tac 1872

Thr Ala Thr Asn Leu Thr Ala Thr Gln Tyr Arg Ile Arg Ile Arg Tyr

610 615 620

gct aac eea aae tca aac acg cag ate ggc gtt aga ate acg cag aac 192 0

Ala Asn Pro Asn Ser Asn Thr Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr Gln Asn 625 630 635 640

ggg age etc ate tcc tcc tcc aac ctc acg ctg tac tca acc acc gat 1968

Gly Ser Leu Ile Ser Ser Ser Asn Leu Thr Leu Tyr Ser Thr Thr Asp 645 650 655

atg aac aac acc ctg cca ctg aac gtt tac gtg ate ggg gaa aac ggg 2 016

Met Asn Asn Thr Leu Pro Leu Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu Asn Gly 660 665 670

aac tac acc ctc cag gat ctc tac aac acg acg aac gtt ctg tcc acg 2064

Asn Tyr Thr Leu Gln Asp Leu Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu Ser Thr

675 680 685

ggc gat ate acc ctg cag ate acc ggc ggg gat cag aag ata ttc ate 2112

Gly Asp Ile Thr Leu Gln Ile Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile Phe Ile

690 695 700

gat cgc ate gag ttc gtg cct acg atg cca gtg cca ggc aac acc aac 2160

Asp Arg Ile Glu Phe Val Pro Thr Met Pro Val Pro Gly Asn Thr Asn 705 710 715 720

aac aac aac ggc aac aac aac ggc aac aac aac ccc ccc cat cat gtc 2 2 08

Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn Pro Pro His His Val 725 730 735

tgc gct ata gct ggt act cag cag tet tgc tca ggt cct cct aag ttc 2256

Cys Ala Ile Ala Gly Thr Gln Gln Ser Cys Ser Gly Pro Pro Lys Phe 740 745 750

gag cag gtt tet gat ctc gag aag ate acc acc cag gtc tac atg ctg 2304

Glu Gln Val Ser Asp Leu Glu Lys Ile Thr Thr Gln Val Tyr Met Leu

755 760 765

ttc aag tcc taa 2316

Phe Lys Ser * 770

<210> SEQ ID NO: 29 <211> Comprimento: 771 <212> Tipo: PRT

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: APOSYNAXMI-031(A-D)

<400> Seqüência: 29

Met Gln Ile Leu Gly Tyr Ser Ser Phe Val Ala Ile Ala Leu Leu Met 15 10 15 Ser Val Val Val Val 20

Asn Leu Asp Cys Asn 35

Leu Ala Ile Pro Val 50

Asp Leu Lys Lys Ala 65

Leu Thr Ala Leu Gln 85

Asn Tyr Leu Thr Leu 100

Val Pro Gly Gly Thr 115

Trp Leu Trp Pro His 130

Asn Leu Ile Asp Ser 145

Asp Ala Asp Arg Asn 165

Ser Ser Asn Asn Leu 180

Thr Val Asn Thr Thr 195

Tyr Thr Asn Val Val 210

Asn Asn Glu Asn His 225

Pro Tyr Phe Val Ile 245

Tyr Ile Lys Phe Cys 260

Ala Gln Leu Thr Thr 275

Met Arg Asn Ala Ile 290

Lys Asp Ser Lys Asn 305

Asp Thr Tyr Asn Val 325

Ile Val Ala Ile Trp 340

Thr Ala Leu Glu Gln 355

Glu Glu Gly Thr Asp 370

Phe Ser Tyr Gln His 385

Ser Tyr Tyr Asn Asp 405

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Asn Tyr Ala Asn Ser 435

Ser Leu Gly Gly Leu 450

Cys Asn Gly Gly Lys Thr 25

Leu Gln Ser Gln Gln Asn 40

Ser Asn Val Asn Ser Leu 55

Trp Glu Glu Phe Gln Lys 70 75

Gln Gly Phe Ser Ala Ser 90

Leu Gln Ser Gly Ile Ser 105

Phe Val Ala Pro Ile Ile 120

Lys Asn Lys Asn Ala Asp 135

Glu Ile Gln Lys Gln Leu 150 155

Glu Trp Ser Ser Tyr Leu 170

Asn Gly Ala Ile Val Asp 185

Asn Arg Thr Leu Arg Asn 200

Thr Asn Phe Ile Ala Ala 215

Ile Met Asn Gly Asn Phe 230 235

Gly Ala Thr Ala Arg Phe 250

Asn Ala Trp Ile Asp Lys 265

Gln Lys Ala Asn Leu Asp 280

Leu Asn Tyr Thr Gln Gln 295

Met Pro Thr Ile Gly Thr 310 315

Tyr Ile Lys Gly Met Thr 330

Pro Ser Leu Tyr Pro Asp 345

Thr Arg Val Thr Phe Ser 360

Gly Ser Leu Arg Ile Tyr 375

Ser Pro Ile Pro Asn Asn 390 395

Glu Leu Gln Asn Leu Glu 410

Ser Gly Tyr Ser Tyr Pro 425

Lys Tyr Lys Tyr Gly Asp 440

Ser Thr Leu Ser Ala Pro 455

Ser Thr Tyr Val Arg 30

Ile Pro Tyr Asn Val 45

Thr Asp Thr Val Gly 60

Thr Gly Ser Phe Ser 80

Gln Gly Gly Thr Phe 95

Leu Ala Gly Ser Phe 110

Asn Met Val Ile Gly 125

Thr Glu Asn Leu Ile 140

Asn Lys Ala Leu Leu 160

Glu Ser Ile Phe Asp 175

Ala Gln Trp Ser Gly 190

Pro Thr Glu Ser Asp 205

Asp Gly Asp Ile Ala 220

Asp Val Ala Ala Ala 240

Ala Ala Met Gln Ser 255

Val Gly Leu Ser Asp 270

Arg Thr Lys Gln Asn 285

Val Met Lys Val Phe 300

Asn Lys Phe Ser Val 320

Leu Asn Val Leu Asp 335

Asp Tyr Thr Ser Gln 350

Asn Met Val Gly Gln 365

Asn Thr Phe Asp Ser 380

Asn Val Asn Leu Ile 400

Leu Gly Val Tyr Thr 415

Tyr Gly Phe Val Leu 430

Ser Asn Asp Pro Glu 445

Ile Gln Gln Val Asn 460 Ala Ala Thr Gln Asn Ser Lys Tyr Leu Asp Gly Glu Ile Leu Asn Gly 465 470 475 480 Ile Gly Ala Ser Leu 485 Pro Gly Tyr Cys Thr 490 Thr Gly Cys Ser Pro 495 Thr Glu Pro Pro Phe 500 Ser Cys Thr Ser Thr 505 Ala Asn Gly Tyr Lys 510 Ala Ser Cys Asn Pro 515 Ser Asp Thr Asn Gln 520 Lys Ile Asn Ala Leu 525 Tyr Pro Phe Thr Gln 530 Ala Asn Val Lys Gly 535 Asn Thr Gly Lys Leu 540 Gly Val Leu Ala Ser Leu Val Ser Tyr Asp Leu Asn Pro Lys Asn Val Phe Gly Glu Leu 545 550 555 560 Asp Ser Asp Thr Asn 565 Asn Val Ile Leu Lys 570 Gly Ile Pro Ala Glu 575 Lys Gly Tyr Phe Pro Asn Asn Ala Arg Pro Thr Val Val Lys Glu Trp Ile 580 585 590 Asn Gly Ala 595 Ser Ala Val Pro Leu 600 Asp Ser Gly Asn Thr 605 Leu Phe Met Thr Ala 610 Thr Asn Leu Thr Ala 615 Thr Gln Tyr Arg Ile 620 Arg Ile Arg Tyr Ala Asn Pro Asn Ser Asn Thr Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr Gln Asn 625 630 635 640 Gly Ser Leu Ile Ser Ser Ser Asn Leu Thr Leu Tyr Ser Thr Thr Asp 645 650 655 Met Asn Asn Thr 660 Leu Pro Leu Asn Val 665 Tyr Val Ile Gly Glu 670 Asn Gly Asn Tyr Thr 675 Leu Gln Asp Leu Tyr 680 Asn Thr Thr Asn Val 685 Leu Ser Thr Gly Asp Ile Thr Leu Gln Ile Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile Phe Ile 690 695 700 Asp Arg Ile Glu Phe Val Pro Thr Met Pro Val Pro Gly Asn Thr Asn 705 710 715 720 Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn Pro Pro His His Val 725 730 735 Cys Ala Ile Ala Gly Thr Gln Gln Ser Cys Ser Gly Pro Pro Lys Phe 740 745 750 Glu Gln Val Ser Asp Leu Glu Lys Ile Thr Thr Gln Val Tyr Met Leu

755 760 765

Phe Lys Ser 770

<210> SEQ ID NO: 30 <211> Comprimento: 23 07 <212> Tipo: DNA

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: aposyn2axmi-031 (A-D)

<221> Nome/Chave: CDS

<222> Localização: (1)...(2307)

<400> Seqüência: 30

atg ggc tac age age ttc gtc gcc ate gcg ctg ctg atg age gtg gtg

Met Gly Tyr Ser Ser Phe Val Ala Ile Ala Leu Leu Met Ser Val Val 15 10 15 gtg gtg tgc Val Val Cys

tgc aac ctc Cys Asn Leu 35

ccc gtc tca Pro Val Ser 50

aag gca tgg Lys Ala Trp 65

ctg caa caa Leu Gln Gln

acc ttg ctg Thr Leu Leu

ggc acc ttc Gly Thr Phe 115

ccg cac aag Pro His Lys 130

gat tca gag Asp Ser Glu 145

aga aat gaa Arg Asn Glu

aac ctc aac Asn Leu Asn

acc acc aac Thr Thr Asn 195

gtg gtg acc Val Val Thr 210

aac cac ate Asn His Ile 225

aac ggc ggc aag Asn Gly Gly Lys 20

cag age cag cag Gln Ser Gln Gln

aat gtc aac age Asn Val Asn Ser 55

gag gag ttc cag Glu Glu Phe Gln 70

ggc ttc tca gca Gly Phe Ser Ala 85

caa age ggc ate Gln Ser Gly Ile 100

gtg gcg ccc ate Val Ala Pro Ile

aac aag aat gct Asn Lys Asn Ala 135

ate cag aag cag Ile Gln Lys Gln 150

tgg age age tac Trp Ser Ser Tyr 165

ggc gcc ate gtg Gly Ala Ile Val 180

agg acg ctg agg Arg Thr Leu Arg

aac ttc att gct Asn Phe Ile Ala 215

atg aat gga aat Met Asn Gly Asn 230

aca age acc Thr Ser Thr 25

aac ate ccc Asn Ile Pro 40

ttg aca gat Leu Thr Asp

aag acc ggc Lys Thr Gly

age caa gga Ser Gln Gly 90

age ttg gcc Ser Leu Ala 105

ate aac atg Ile Asn Met 120

gac aca gaa Asp Thr Glu

ctc aac aag Leu Asn Lys

ctg gag age Leu Glu Ser 170

gat gct caa Asp Ala Gln 185

aat cca aca Asn Pro Thr 200

gct gat gga Ala Asp Gly

ttt gat gtt Phe Asp Val

tat gtg agg aac Tyr Val Arg Asn 30

tac aat gtg ctg Tyr Asn Val Leu 45

act gtt ggt gat Thr Val Gly Asp 60

age ttc age ttg Ser Phe Ser Leu 75

ggc acc ttc aac Gly Thr Phe Asn

ggc age ttc gtg Gly Ser Phe Val 110

gtg att gga tgg Val Ile Gly Trp 125

aat ttg ate aac Asn Leu Ile Asn 140

gcg ctg ctg gat Ala Leu Leu Asp 155

ate ttt gat tca Ile Phe Asp Ser

tgg tca ggc acc Trp Ser Gly Thr 190

gaa agt gac tac Glu Ser Asp Tyr 205

gac ate gcc aac Asp Ile Ala Asn 220

gct gct gct cca Ala Ala Ala Pro 235

ctg gac 9 6 Leu Asp

gcc ate 144 Ala Ile

ttg aag 192 Leu Lys

acg gcg 240 Thr Ala 80

tac ctc 288 Tyr Leu 95

ccc ggc 33 6 Pro Gly

ctg tgg 384 Leu Trp

ctc att 432 Leu Ile

gct gac 480 Ala Asp 160

age aac 528 Ser Asn 175

gtc aac 576 Val Asn

acc aat 624 Thr Asn

aat gag 672 Asn Glu

tat ttt 720 Tyr Phe 240 gtg att gga gca aca gca aga ttt gct gcc atg caa tca tac ate aag 768 Val Ile Gly Ala Thr Ala Arg Phe Ala Ala Met Gln Ser Tyr Ile Lys 245 250 255

ttc tgc aat gca tgg ate gac aag gtg ggc etc tet gat gct cag etc Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp Ala Gln Leu 260 265 270

acc acc cag aag gcc aac ctg gac agg acc aag cag aac atg agg aat Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys Gln Asn Met Arg Asn 275 280 285

gcc ate ttg aat tac acc cag cag gtg atg aag gtg ttc aag gac age Ala Ile Leu Asn Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys Val Phe Lys Asp Ser 290 295 300

aag aac atg cca acc ate ggc acc aac aag ttc tca gtg gac acc tac Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val Asp Thr Tyr 305 310 315 320

aat gtc tac ate aag ggc atg acg ctc aat gtg ctg gac ate gtc gcc Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp Ile Val Ala 325 330 335

ate tgg cca age ctc tac cct gat gac tac acc tca cag acg gcg ctg Ile Trp Pro Ser Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr Ser Gln Thr Ala Leu 340 345 350

gag caa aca agg gtg acc ttc age aac atg gtg ggc caa gaa gaa gga 1104 Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln Glu Glu Gly 355 360 365

act gat ggc age ttg agg ate tac aac acc ttc gac age ttc age tac 1152 Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser Phe Ser Tyr 370 375 380

cag cat tet ccc ate ccc aac aac aat gtc aac ctc ate age tac tac Gln His Ser Pro Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn Leu Ile Ser Tyr Tyr 385 390 395 400

aat gat gag ctg caa aat ttg gag cta gga gtc tac acg ccg cca aag Asn Asp Glu Leu Gln Asn Leu Glu Leu Gly Val Tyr Thr Pro Pro Lys 405 410 415

aaa gga agt gga tat tet tat cct tat ggc ttc gtg ctc aac tac gcc Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr Gly Phe Val Leu Asn Tyr Ala 420 425 430

816

864

912

960

1008

1056

1200

1248

1296

aac age aag tac aag tat gga gat tca aat gat cca gaa age ctc ggc 1344 Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp Pro Glu Ser Leu Gly 435 440 445

ggc ctc tcc acc ttg tcg gcg ccc ate cag cag gtg aac gcc gcc acc Gly Leu Ser Thr Leu Ser Ala Pro Ile Gln Gln Val Asn Ala Ala Thr 450 455 460

1392 cag aac age aag tac ctt gat gga gag ate etc aat ggc att gga gct 1440 Gln Asn Ser Lys Tyr Leu Asp Gly Glu Ile Leu Asn Gly Ile Gly Ala 465 470 475 480

tet ctt cct ggc tac tgc acc acc ggc tgc tcg ccg acg gag ccg ccc 1488 Ser Leu Pro Gly Tyr Cys Thr Thr Gly Cys Ser Pro Thr Glu Pro Pro 485 490 495

ttc age tgc acc tca aca gea aat ggc tac aag gea age tgc aac ccc 153 6 Phe Ser Cys Thr Ser Thr Ala Asn Gly Tyr Lys Ala Ser Cys Asn Pro 500 505 510

tcc gac acc aac cag aag ate aac gcg etc tac ccc ttc acc caa gct 1584 Ser Asp Thr Asn Gln Lys Ile Asn Ala Leu Tyr Pro Phe Thr Gln Ala 515 520 525

aat gtg aag ggc aac acc ggc aag ctc ggc gtg ctg gcc age ttg gtg 1632 Asn Val Lys Gly Asn Thr Gly Lys Leu Gly Val Leu Ala Ser Leu Val 530 535 540

age tac gac ctc aac ccc aag aat gtt ttt gga gag ctg gac age gac 1680 Ser Tyr Asp Leu Asn Pro Lys Asn Val Phe Gly Glu Leu Asp Ser Asp 545 550 555 560

acc aac aat gtc ate cta aag ggc ate ccg gcg gag aag ggc tac ttc 1728 Thr Asn Asn Val Ile Leu Lys Gly Ile Pro Ala Glu Lys Gly Tyr Phe 565 570 575

ccc aac aat gea agg ccg acg gtg gtg aag gag tgg ate aat gga gct 177 6 Pro Asn Asn Ala Arg Pro Thr Val Val Lys Glu Trp Ile Asn Gly Ala 580 585 590

tcg gcg gtg cct ctt gat tca ggc aac acc ttg ttc atg aca gea aca 1824 Ser Ala Val Pro Leu Asp Ser Gly Asn Thr Leu Phe Met Thr Ala Thr 595 600 605

aat ttg acg gcg acg cag tac agg ate agg ate aga tat gcc aac ccc 1872 Asn Leu Thr Ala Thr Gln Tyr Arg Ile Arg Ile Arg Tyr Ala Asn Pro 610 615 620

aac age aac acc cag ate ggc gtg agg ate acc caa aat gga age ctc 1920 Asn Ser Asn Thr Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr Gln Asn Gly Ser Leu 625 630 635 640

ate age age age aac ctc acc ctc tac tca aca act gac atg aac aac 1968 Ile Ser Ser Ser Asn Leu Thr Leu Tyr Ser Thr Thr Asp Met Asn Asn 645 650 655

acc ttg ccg ctc aat gtt tat gtg att gga gaa aat ggc aac tac acc 2016 Thr Leu Pro Leu Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu Asn Gly Asn Tyr Thr 660 665 670

ttg caa gat ctc tac aac acc acc aac gtg ctg age acc ggc gac ate 2064 Leu Gln Asp Leu Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu Ser Thr Gly Asp Ile 675 680 685 acc cta cag ate act gga gga gat cag aag ate ttc ate gac agg att 2112 Thr Leu Gln Ile Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile Phe Ile Asp Arg Ile 690 695 700

gaa ttt gtt cca aca atg cca gtt cct ggc aac acc aac aac aac aat 2160 Glu Phe Val Pro Thr Met Pro Val Pro Gly Asn Thr Asn Asn Asn Asn 705 710 715 720

ggc aac aac aat ggc aac aac aac ccg ccg cac cat gtt tgt gcc ata Gly Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn Pro Pro His His Val Cys Ala Ile 725 730 735

tca gat ctg gag aag ate acc acc caa gtc tac atg ctc ttc aag age Ser Asp Leu Glu Lys Ile Thr Thr Gln Val Tyr Met Leu Phe Lys Ser 755 760 765

2208

gct gga act caa caa age tgc tet ggg ccg cca aaa ttt gag caa gtt 2256 Ala Gly Thr Gln Gln Ser Cys Ser Gly Pro Pro Lys Phe Glu Gln Val 740 745 750

taa

2304

2307

<210> SEQ ID NO: 31 <211> Comprimento: 7 68 <212> Tipo: PRT

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: APQSYN2AXMI-031 (A-D)

<400> Seqüência: 31

Met Gly Tyr Ser Ser Phe Val Ala Ile Ala Leu Leu Met Ser Val Val

15 10 15

Val Val Cys Asn Gly Gly Lys Thr Ser Thr Tyr Val Arg Asn Leu Asp

20 25 30

Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr Asn Val Leu Ala Ile

35 40 45

Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly Asp Leu Lys

50 55 60

Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser Leu Thr Ala 65 70 75 80

Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe Asn Tyr Leu

85 90 95

Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe Val Pro Gly

100 105 HO

Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly Trp Leu Trp

115 120 125

Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile Asn Leu Ile

130 135 140

Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu Asp Ala Asp 145 150 155 160

Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp Ser Ser Asn 165 170 175 Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp Ser Gly Thr Val Asn 180 185 190 Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp Tyr Thr Asn 195 200 205 Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp Ile Ala Asn Asn Glu 210 215 220 Asn His Ile Met Asn Gly Asn Phe Asp Val Ala Ala Ala Pro Tyr Phe 225 230 235 240 Val Ile Gly Ala Thr Ala Arg Phe Ala Ala Met Gln Ser Tyr Ile Lys 245 250 255 Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp Ala Gln Leu 260 265 270 Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys Gln Asn Met Arg Asn 275 280 285 Ala Ile Leu Asn Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys Val Phe Lys Asp Ser 290 295 300 Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val Asp Thr Tyr 305 310 315 320 Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp Ile Val Ala 325 330 335 Ile Trp Pro Ser Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr Ser Gln Thr Ala Leu 340 345 350 Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln Glu Glu Gly 355 360 365 Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser Phe Ser Tyr 370 375 380 Gln His Ser Pro Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn Leu Ile Ser Tyr Tyr 385 390 395 400 Asn Asp Glu Leu Gln Asn Leu Glu Leu Gly Val Tyr Thr Pro Pro Lys 405 410 415 Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr Gly Phe Val Leu Asn Tyr Ala 420 425 430 Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp Pro Glu Ser Leu Gly 435 440 445 Gly Leu Ser Thr Leu Ser Ala Pro Ile Gln Gln Val Asn Ala Ala Thr 450 455 460 Gln Asn Ser Lys Tyr Leu Asp Gly Glu Ile Leu Asn Gly Ile Gly Ala 465 470 475 480 Ser Leu Pro Gly Tyr Cys Thr Thr Gly Cys Ser Pro Thr Glu Pro Pro 485 490 495 Phe Ser Cys Thr Ser Thr Ala Asn Gly Tyr Lys Ala Ser Cys Asn Pro 500 505 510 Ser Asp Thr Asn Gln Lys Ile Asn Ala Leu Tyr Pro Phe Thr Gln Ala 515 520 525 Asn Val Lys Gly Asn Thr Gly Lys Leu Gly Val Leu Ala Ser Leu Val 530 535 540 Ser Tyr Asp Leu Asn Pro Lys Asn Val Phe Gly Glu Leu Asp Ser Asp 545 550 555 560 Thr Asn Asn Val Ile Leu Lys Gly Ile Pro Ala Glu Lys Gly Tyr Phe 565 570 575 Pro Asn Asn Ala Arg Pro Thr Val Val Lys Glu Trp Ile Asn Gly Ala 580 585 590 Ser Ala Val Pro Leu Asp Ser Gly Asn Thr Leu Phe Met Thr Ala Thr 595 600 605 Asn Leu Thr Ala Thr Gln Tyr Arg Ile Arg Ile Arg Tyr Ala Asn Pro 610 615 620 Asn Ser Asn Thr Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr Gln Asn Gly Ser Leu 625 630 635 640

Ile Ser Ser Ser Asn Leu Thr Leu Tyr Ser Thr Thr Asp Met Asn Asn

645 650 655

Thr Leu Pro Leu Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu Asn Gly Asn Tyr Thr

660 665 670

Leu Gln Asp Leu Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu Ser Thr Gly Asp Ile

675 680 685

Thr Leu Gln Ile Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile Phe Ile Asp Arg Ile

690 695 700

Glu Phe Val Pro Thr Met Pro Val Pro Gly Asn Thr Asn Asn Asn Asn 705 710 715 720

Gly Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn Pro Pro His His Val Cys Ala Ile

725 730 735

Ala Gly Thr Gln Gln Ser Cys Ser Gly Pro Pro Lys Phe Glu Gln Val

740 745 750

Ser Asp Leu Glu Lys Ile Thr Thr Gln Val Tyr Met Leu Phe Lys Ser 755 760 765

<210> SEQ ID NO: 32 <211> Comprimento: 3 57 0 <212> Tipo: DNA

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: synaxmi-031(fl)-ER

<221> Nome/Chave: CDS

<222> Localização: (1)...(3570)

<400> Seqüência: 32

atg gat tgc aat ctc cag age cag cag aat ate cca tac aat gtg ctt 48 Met Asp Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr Asn Val Leu 15 10 15

gct ate CCt gtt age aat gtt aat age ctt acg gat acg gtt ggc gat 96 Ala Ile Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly Asp 20 25 30

cta aag aag gea tgg gaa gag ttc cag aag acg ggc age ttc tcc ctt 144 Leu Lys Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser Leu 35 40 45

acc gea ctc cag cag ggc ttc age gct tcc cag ggc ggg acg ttc aat 192 Thr Ala Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe Asn 50 55 60

tac ctc acc ctc ctc cag tcc ggg ate tcc ctg gct ggc age ttc gtg 240 Tyr Leu Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe Val 65 70 75 80

cct ggc ggc acc ttc gtt gct cca ate ate aat atg gtg ate ggc tgg Pro Gly Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly Trp 85 90 95

288 ctc tgg cct cat aag aat aag aat gca gat acg gaa aat ctg ate aat 336 Leu Trp Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile Asn

100 105 110

ctg ate gat tca gaa ate cag aag cag ctg aat aag gct ctg ctg gat 384 Leu Ile Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu Asp 115 120 125

gct gat cgc aat gaa tgg age age tac ctc gag tcc ate ttc gat age 432 Ala Asp Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp Ser 130 135 140

age aat aat ctg aat ggc gca ate gtt gat gct cag tgg tcc ggc acc 480 Ser Asn Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp Ser Gly Thr 145 150 155 160

gtg aat acg acc aat cgt acg ctt cgt aat cct acg gaa tca gat tac 528 Val Asn Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp Tyr 165 170 175

acc aat gtg gtg acg aat ttc ate gca gca gat ggg gat ate gct aat 57 6 Thr Asn Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp Ile Ala Asn

180 185 190

aat gaa aat cat ate atg aat ggg aat ttc gat gtg gca gca gct cca 624

Asn Glu Asn His Ile Met Asn Gly Asn Phe Asp Val Ala Ala Ala Pro 195 200 205

tac ttc gtt ate ggg gct acc gct aga ttc gca gct atg cag tcc tac 672

Tyr Phe Val Ile Gly Ala Thr Ala Arg Phe Ala Ala Met Gln Ser Tyr 210 215 220

ate aag ttc tgc aat gca tgg ate gat aag gtt ggg ctg tca gat gct 720

Ile Lys Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp Ala 225 230 235 240

cag ctg acc acg cag aag gct aat ctg gat aga acg aag cag aat atg 768

Gln Leu Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys Gln Asn Met 245 250 255

cgt aat gct ate ctt aat tac acc cag cag gtt atg aag gtt ttc aag 816

Arg Asn Ala Ile Leu Asn Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys Val Phe Lys

260 265 270

gat tcc aag aat atg cca acg ate ggc acg aat aag ttc age gtt gat 8 64

Asp Ser Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val Asp 275 280 285

acc tac aat gtt tac ate aag ggg atg acg ctt aat gtg ctt gat ate 912

Thr Tyr Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp Ile 290 295 300

gtt gct ate tgg cca age ctg tac cca gat gat tac acg tca cag acg 960

Val Ala Ile Trp Pro Ser Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr Ser Gln Thr 305 310 315 320 gct ctg gaa cag acc cgc gtg acg ttc tcc aat atg gtg ggg cag gaa 1008

Ala Leu Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln Glu 325 330 335

gaa ggc acg gat ggc age ctc aga ate tac aat acc ttc gat age ttc 1056

Glu Gly Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser Phe 340 345 350

tcc tac cag cat age cct ate cct aat aat aat gtg aat ctc ate age 1104

Ser Tyr Gln His Ser Pro Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn Leu Ile Ser 355 360 365

tac tac aat gat gaa ctt cag aat ctg gaa ctc ggg gtt tac acc cca 1152

Tyr Tyr Asn Asp Glu Leu Gln Asn Leu Glu Leu Gly Val Tyr Thr Pro

370 375 380

cca aag aag ggc tca ggc tac age tac cca tac ggg ttc gtg ctg aat 1200

Pro Lys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr Gly Phe Val Leu Asn

385 390 395 400

tac gea aat age aag tac aag tac ggc gat tcc aat gat cca gaa tcc 1248

Tyr Ala Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp Pro Glu Ser 405 410 415

ctc ggc ggg ctt tcc acc ctt age gct cca ate caa cag gtt aat gct 1296

Leu Gly Gly Leu Ser Thr Leu Ser Ala Pro Ile Gln Gln Val Asn Ala 420 425 430

gct acc cag aat age aag tac ctt gat ggc gaa ate ctg aat ggg ate 1344

Ala Thr Gln Asn Ser Lys Tyr Leu Asp Gly Glu Ile Leu Asn Gly Ile 435 440 445

ggc gea age ctg cct ggc tac tgc acg acc ggg tgc tca cct acc gaa 1392

Gly Ala Ser Leu Pro Gly Tyr Cys Thr Thr Gly Cys Ser Pro Thr Glu

450 455 460

cca cca ttc age tgc acg age acg gea aat ggg tac aag gea age tgc 1440

Pro Pro Phe Ser Cys Thr Ser Thr Ala Asn Gly Tyr Lys Ala Ser Cys

465 470 475 480

aat cca age gat acc aat cag aag ate aat gct ctc tac cca ttc acg 1488

Asn Pro Ser Asp Thr Asn Gln Lys Ile Asn Ala Leu Tyr Pro Phe Thr 485 490 495

cag gea aat gtg aag ggg aat acc ggg aag ctg ggc gtt ctc gea age 1536

Gln Ala Asn Val Lys Gly Asn Thr Gly Lys Leu Gly Val Leu Ala Ser 500 505 510

ctt gtt age tac gat ctg aat cct aag aat gtt ttc ggg gaa ctc gat 1584

Leu Val Ser Tyr Asp Leu Asn Pro Lys Asn Val Phe Gly Glu Leu Asp 515 520 525

tca gat acc aat aat gtt ate ctt aag ggc ate cca gea gaa aag ggc 1632

Ser Asp Thr Asn Asn Val Ile Leu Lys Gly Ile Pro Ala Glu Lys Gly

530 535 540 tac ttc cca aat aat gca aga cca acc gtt gtg aag gaa tgg ate aat 1680 Tyr Phe Pro Asn Asn Ala Arg Pro Thr Val Val Lys Glu Trp Ile Asn 545 550 555 560

ggg gct tcc gca gtt cca ctt gat tcc ggc aat acc ctg ttc atg acg 1728 Gly Ala Ser Ala Val Pro Leu Asp Ser Gly Asn Thr Leu Phe Met Thr 565 570 575

gct acg aac ctg acg gct acc cag tac aga ate cgc ate cgt tac gct 1776 Ala Thr Asn Leu Thr Ala Thr Gln Tyr Arg Ile Arg Ile Arg Tyr Ala 580 585 590

aac cca aac tca aac acg cag ate ggc gtt aga ate acg cag aac ggg 1824 Asn Pro Asn Ser Asn Thr Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr Gln Asn Gly 595 600 605

age etc ate tcc tcc tcc aac ctc acg ctg tac tca acc acc gat atg 1872 Ser Leu Ile Ser Ser Ser Asn Leu Thr Leu Tyr Ser Thr Thr Asp Met 610 615 620

aac aac acc ctg cca ctg aac gtt tac gtg ate ggg gaa aac ggg aac 192 0 Asn Asn Thr Leu Pro Leu Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu Asn Gly Asn 625 630 635 640

tac acc ctc cag gat ctc tac aac acg acg aac gtt ctg tcc acg ggc 1968 Tyr Thr Leu Gln Asp Leu Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu Ser Thr Gly 645 650 655

gat ate acc ctg cag ate acc ggc ggg gat cag aag ata ttc ate gat 2016 Asp Ile Thr Leu Gln Ile Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile Phe Ile Asp 660 665 670

cgc ate gag ttc gtg cct acg atg cca gtg cca ggc aac acc aac aac 2 064 Arg Ile Glu Phe Val Pro Thr Met Pro Val Pro Gly Asn Thr Asn Asn 675 680 685

aac aac ggg aac aac aac ggc aac aac aac cct cct cat cat gtt tgc 2112 Asn Asn Gly Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn Pro Pro His His Val Cys 690 695 700

gct ate gca ggc acc cag cag tcc tgc tcc ggc cca cca aag ttc gag 2160 Ala Ile Ala Gly Thr Gln Gln Ser Cys Ser Gly Pro Pro Lys Phe Glu 705 710 715 720

cag gtg tcc gat tta gaa aag ata acc acg cag gtt tac atg ctc ttc 2208 Gln Val Ser Asp Leu Glu Lys Ile Thr Thr Gln Val Tyr Met Leu Phe 725 730 735

aag tcc tcc cca tac gaa gaa ctt gct ctt gaa gtt age age tac cag 2256 Lys Ser Ser Pro Tyr Glu Glu Leu Ala Leu Glu Val Ser Ser Tyr Gln 740 745 750

ate age cag gtt gca ctg aag gtt atg gct ctc age gat gaa cta ttc 2304 Ile Ser Gln Val Ala Leu Lys Val Met Ala Leu Ser Asp Glu Leu Phe 755 760 765 tgc gaa gaa aag aac gtg ctg aga aag ctc gtg aac aag gca aag cag 2 3 52 Cys Glu Glu Lys Asn Val Leu Arg Lys Leu Val Asn Lys Ala Lys Gln

ctt ctc gaa gca age aac ctt ctc gtt ggg ggg aac ttc gag acg act 2400 Leu Leu Glu Ala Ser Asn Leu Leu Val Gly Gly Asn Phe Glu Thr Thr

cag aac tgg gtg ctc ggc acg aac gct tac ate aac tat gat tca ttc 2448 Gln Asn Trp Val Leu Gly Thr Asn Ala Tyr Ile Asn Tyr Asp Ser Phe

ctg ttc aac ggg aac tac ctg age ctc cag cca gca tcc ggc ttc ttc 2496 Leu Phe Asn Gly Asn Tyr Leu Ser Leu Gln Pro Ala Ser Gly Phe Phe

acg age tac gct tac cag aag ate gat gaa tcc acg ctt aag cct tac 2 544 Thr Ser Tyr Ala Tyr Gln Lys Ile Asp Glu Ser Thr Leu Lys Pro Tyr

acg cgc tac aag gtg tcc ggg ttc ate ggg cag tca aac cag gtt gaa 2592 Thr Arg Tyr Lys Val Ser Gly Phe Ile Gly Gln Ser Asn Gln Val Glu

ctg ate ate age cgc tac ggg aag gaa ate gat aag ate ctt aac gtg 2640 Leu Ile Ile Ser Arg Tyr Gly Lys Glu Ile Asp Lys Ile Leu Asn Val

cca tac gca ggg cca ctc cca ate acc gca gat gca age ate acc tgc 2688 Pro Tyr Ala Gly Pro Leu Pro Ile Thr Ala Asp Ala Ser Ile Thr Cys

tgc gct cca gaa ata ggg cag tgc gat ggg gaa cag tca gat tcc cat 2736 Cys Ala Pro Glu Ile Gly Gln Cys Asp Gly Glu Gln Ser Asp Ser His

ttc ttc aac tac age ate gat gtt ggc gca ctc cat cca gaa ctt aac 2784 Phe Phe Asn Tyr Ser Ile Asp Val Gly Ala Leu His Pro Glu Leu Asn

cca ggg ate gaa ate ggg ctg aag ate gtt cag age aac ggc tac ate 2832 Pro Gly Ile Glu Ile Gly Leu Lys Ile Val Gln Ser Asn Gly Tyr Ile

acc ate tcc aac ctt gaa ate ate gaa gaa aga cca tta acg gaa atg 2880 Thr Ile Ser Asn Leu Glu Ile Ile Glu Glu Arg Pro Leu Thr Glu Met

gaa att caa gca gtg aac cgc aag aac cag aag tgg gaa cgc gaa aag 2928 Glu Ile Gln Ala Val Asn Arg Lys Asn Gln Lys Trp Glu Arg Glu Lys

ctg ctt gaa tgc gca tcc ate tcc gaa ctc ctc cag cct ate ate aac 2976 Leu Leu Glu Cys Ala Ser Ile Ser Glu Leu Leu Gln Pro Ile Ile Asn cag ata gat age ctc ttc aag gat ggc aac tgg tac aac gat ate cta Gln Ile Asp Ser Leu Phe Lys Asp Gly Asn Trp Tyr Asn Asp Ile Leu 995 1000 1005

3024

cca cat gtt acc tac cag gat ctt aag aac ate ate ate cca gaa ctt Pro His Val Thr Tyr Gln Asp Leu Lys Asn Ile Ile Ile Pro Glu Leu 1010 1015 1020

3072

cct aag ctc aag cat tgg ttc ate gaa aac ctg cct ggg gaa tac cat Pro Lys Leu Lys His Trp Phe Ile Glu Asn Leu Pro Gly Glu Tyr His 1025 1030 1035 1040

3120

gaa ate gaa cag aag atg aag gaa gea tta aag tac gea ttc act cag Glu Ile Glu Gln Lys Met Lys Glu Ala Leu Lys Tyr Ala Phe Thr Gln 1045 1050 1055

3168

ctc gat gaa aag aac ctg ate cat aac ggc cat ttc acc acc aac ctc Leu Asp Glu Lys Asn Leu Ile His Asn Gly His Phe Thr Thr Asn Leu 1060 1065 1070

3216

ate gat tgg cag gtg gaa ggc gat gct cag atg aag gtg ctt gaa aac Ile Asp Trp Gln Val Glu Gly Asp Ala Gln Met Lys Val Leu Glu Asn 1075 1080 1085

3264

gat gea ctc gct ctc cag cta ttc aac tgg gat gct tcc gea tcc cag Asp Ala Leu Ala Leu Gln Leu Phe Asn Trp Asp Ala Ser Ala Ser Gln 1090 1095 1100

3312

age ate aac ate cta gag ttc gat gaa gat aag gct tac aag ctg cgt Ser Ile Asn Ile Leu Glu Phe Asp Glu Asp Lys Ala Tyr Lys Leu Arg 1105 1110 1115 1120

3360

gtg tac gea cag ggc tcc ggg acg ate cag ttc ggc aac tgc gaa gat Val Tyr Ala Gln Gly Ser Gly Thr Ile Gln Phe Gly Asn Cys Glu Asp 1125 1130 1135

3408

gaa gct ate cag ttc aac acc aac tca ttc ate tac cag gaa aag ata Glu Ala Ile Gln Phe Asn Thr Asn Ser Phe Ile Tyr Gln Glu Lys Ile 1140 1145 1150

3456

gtg tac ttc gat acg cca tcc gtt aac ctt cat ate cag age gaa ggc Val Tyr Phe Asp Thr Pro Ser Val Asn Leu His Ile Gln Ser Glu Gly 1155 1160 1165

3504

tcc gag ttc ate gtg age age ate gat ctc ate gaa ctc age gat gat Ser Glu Phe Ile Val Ser Ser Ile Asp Leu Ile Glu Leu Ser Asp Asp 1170 1175 1180

3552

cag aag gat gaa ctg taa Gln Lys Asp Glu Leu * 1185

3570

<210> SEQ ID NO: 33 <211> Comprimento: 1189

<212> Tipo: PRT

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: SYNAXMI-031(FL)-ER

<400> Seqüência: 33

Met Asp Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr Asn Val Leu 1 5 10 15 Ala Ile Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly Asp 20 25 30 Leu Lys Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser Leu 35 40 45 Thr Ala Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe Asn 50 55 60 Tyr Leu Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe Val 65 70 75 80 Pro Gly Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly Trp 85 90 95 Leu Trp Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile Asn 100 105 110 Leu Ile Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu Asp 115 120 125 Ala Asp Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp Ser 130 135 140 Ser Asn Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp Ser Gly Thr 145 150 155 160 Val Asn Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp Tyr 165 170 175 Thr Asn Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp Ile Ala Asn 180 185 190 Asn Glu Asn His Ile Met Asn Gly Asn Phe Asp Val Ala Ala Ala Pro 195 200 205 Tyr Phe Val Ile Gly Ala Thr Ala Arg Phe Ala Ala Met Gln Ser Tyr 210 215 220 Ile Lys Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp Ala 225 230 235 240 Gln Leu Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys Gln Asn Met 245 250 255 Arg Asn Ala Ile Leu Asn Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys Val Phe Lys 260 265 270 Asp Ser Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val Asp 275 280 285 Thr Tyr Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp Ile 290 295 300 Val Ala Ile Trp Pro Ser Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr Ser Gln Thr 305 310 315 320 Ala Leu Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln Glu 325 330 335 Glu Gly Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser Phe 340 345 350 Ser Tyr Gln His Ser Pro Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn Leu Ile Ser 355 360 365 Tyr Tyr Asn Asp Glu Leu Gln Asn Leu Glu Leu Gly Val Tyr Thr Pro 370 375 380 Pro Lys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr Gly Phe Val Leu Asn 385 390 395 400 Tyr Ala Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp Pro Glu Ser

405 410 415 Leu Gly Gly Leu Ser Thr Leu Ser Ala Pro Ile Gln Gln Val Asn Ala

420 425 430

Ala Thr Gln Asn Ser Lys Tyr Leu Asp Gly Glu Ile Leu Asn Gly Ile

435 440 445

Gly Ala Ser Leu Pro Gly Tyr Cys Thr Thr Gly Cys Ser Pro Thr Glu

450 455 460

Pro Pro Phe Ser Cys Thr Ser Thr Ala Asn Gly Tyr Lys Ala Ser Cys 465 470 475 480

Asn Pro Ser Asp Thr Asn Gln Lys Ile Asn Ala Leu Tyr Pro Phe Thr

485 490 495

Gln Ala Asn Val Lys Gly Asn Thr Gly Lys Leu Gly Val Leu Ala Ser

500 505 510

Leu Val Ser Tyr Asp Leu Asn Pro Lys Asn Val Phe Gly Glu Leu Asp

515 520 525

Ser Asp Thr Asn Asn Val Ile Leu Lys Gly Ile Pro Ala Glu Lys Gly

530 535 540

Tyr Phe Pro Asn Asn Ala Arg Pro Thr Val Val Lys Glu Trp Ile Asn 545 550 555 560

Gly Ala Ser Ala Val Pro Leu Asp Ser Gly Asn Thr Leu Phe Met Thr

565 570 575

Ala Thr Asn Leu Thr Ala Thr Gln Tyr Arg Ile Arg Ile Arg Tyr Ala

580 585 590

Asn Pro Asn Ser Asn Thr Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr Gln Asn Gly

595 600 605

Ser Leu Ile Ser Ser Ser Asn Leu Thr Leu Tyr Ser Thr Thr Asp Met

610 615 620

Asn Asn Thr Leu Pro Leu Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu Asn Gly Asn 625 630 635 640

Tyr Thr Leu Gln Asp Leu Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu Ser Thr Gly

645 650 655

Asp Ile Thr Leu Gln Ile Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile Phe Ile Asp

660 665 670

Arg Ile Glu Phe Val Pro Thr Met Pro Val Pro Gly Asn Thr Asn Asn

675 680 685

Asn Asn Gly Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn Pro Pro His His Val Cys

690 695 700

Ala Ile Ala Gly Thr Gln Gln Ser Cys Ser Gly Pro Pro Lys Phe Glu 705 710 715 720

Gln Val Ser Asp Leu Glu Lys Ile Thr Thr Gln Val Tyr Met Leu Phe

725 730 735

Lys Ser Ser Pro Tyr Glu Glu Leu Ala Leu Glu Val Ser Ser Tyr Gln

740 745 750

Ile Ser Gln Val Ala Leu Lys Val Met Ala Leu Ser Asp Glu Leu Phe

755 760 765

Cys Glu Glu Lys Asn Val Leu Arg Lys Leu Val Asn Lys Ala Lys Gln

770 775 780

Leu Leu Glu Ala Ser Asn Leu Leu Val Gly Gly Asn Phe Glu Thr Thr 785 790 795 800

Gln Asn Trp Val Leu Gly Thr Asn Ala Tyr Ile Asn Tyr Asp Ser Phe

805 810 815

Leu Phe Asn Gly Asn Tyr Leu Ser Leu Gln Pro Ala Ser Gly Phe Phe

820 825 830

Thr Ser Tyr Ala Tyr Gln Lys Ile Asp Glu Ser Thr Leu Lys Pro Tyr

835 840 845

Thr Arg Tyr Lys Val Ser Gly Phe Ile Gly Gln Ser Asn Gln Val Glu 850 855 860 Leu Ile Ile Ser Arg Tyr Gly Lys Glu Ile Asp Lys Ile Leu Asn Val 865 870 875 880 Pro Tyr Ala Gly Pro Leu Pro Ile Thr Ala Asp Ala Ser Ile Thr Cys 885 890 895 Cys Ala Pro Glu Ile Gly Gln Cys Asp Gly Glu Gln Ser Asp Ser His 900 905 910 Phe Phe Asn Tyr Ser Ile Asp Val Gly Ala Leu His Pro Glu Leu Asn 915 920 925 Pro Gly Ile Glu Ile Gly Leu Lys Ile Val Gln Ser Asn Gly Tyr Ile 930 935 940 Thr Ile Ser Asn Leu Glu Ile Ile Glu Glu Arg Pro Leu Thr Glu Met 945 950 955 960 Glu Ile Gln Ala Val Asn Arg Lys Asn Gln Lys Trp Glu Arg Glu Lys 965 970 975 Leu Leu Glu Cys Ala Ser Ile Ser Glu Leu Leu Gln Pro Ile Ile Asn 980 985 990 Gln Ile Asp Ser Leu Phe Lys Asp Gly Asn Trp Tyr Asn Asp Ile Leu 995 1000 1005 Pro His Val Thr Tyr Gln Asp Leu Lys Asn Ile Ile Ile Pro Glu Leu 1010 1015 1020 Pro Lys Leu Lys His Trp Phe Ile Glu Asn Leu Pro Gly Glu Tyr His 1025 1030 1035 1040 Glu Ile Glu Gln Lys Met Lys Glu Ala Leu Lys Tyr Ala Phe Thr Gln 1045 1050 1055 Leu Asp Glu Lys Asn Leu Ile His Asn Gly His Phe Thr Thr Asn Leu 1060 1065 1070 Ile Asp Trp Gln Val Glu Gly Asp Ala Gln Met Lys Val Leu Glu Asn 1075 1080 1085 Asp Ala Leu Ala Leu Gln Leu Phe Asn Trp Asp Ala Ser Ala Ser Gln 1090 1095 1100 Ser Ile Asn Ile Leu Glu Phe Asp Glu Asp Lys Ala Tyr Lys Leu Arg 1105 1110 1115 1120 Val Tyr Ala Gln Gly Ser Gly Thr Ile Gln Phe Gly Asn Cys Glu Asp 1125 1130 1135 Glu Ala Ile Gln Phe Asn Thr Asn Ser Phe Ile Tyr Gln Glu Lys Ile 1140 1145 1150 Val Tyr Phe Asp Thr Pro Ser Val Asn Leu His Ile Gln Ser Glu Gly

1155 1160 1165

Ser Glu Phe Ile Val Ser Ser Ile Asp Leu Ile Glu Leu Ser Asp Asp

1170 1175 1180

Gln Lys Asp Glu Leu 1185

<210> SEQ ID NO: 34

<211> Comprimento: 3669 <212> Tipo: DNA <213> Organismo: Desconhecido

<220> Características:

<223> Outras Informações: Isolado de amostra de solo (AXMI-049)

<221> Nome/Chave: CDS

<222> Localização: (1) ... (3669) <400> Seqüência: 34

atg gat gac atg aca aat tta tcc gat gta tat tca ccc gta cct tcc 48

Met Asp Asp Met Thr Asn Leu Ser Asp Val Tyr Ser Pro Val Pro Ser 1 5 10 15

aat gta tta gca gct cca ctt att ctt gaa gaa aca aag aaa aaa aca 96 Asn Val Leu Ala Ala Pro Leu Ile Leu Glu Glu Thr Lys Lys Lys Thr 20 25 30

ccg gct gaa caa gca aaa gaa gat tta gaa aag gca ttg aga aca gga 144 Pro Ala Glu Gln Ala Lys Glu Asp Leu Glu Lys Ala Leu Arg Thr Gly 35 40 45

aag ttt tcc gat gca att gca caa att tta aat gat gtt ctt att aac 192 Lys Phe Ser Asp Ala Ile Ala Gln Ile Leu Asn Asp Val Leu Ile Asn 50 55 60

caa aag ttc age tat caa aca gcg gtt aca gtt tcc tta tet ttg gct 240 Gln Lys Phe Ser Tyr Gln Thr Ala Val Thr Val Ser Leu Ser Leu Ala 65 70 75 80

agt ata gtt ctt cca gaa ata ggt ttt ttt gcc ccc ttt gtt ggt tta 288 Ser Ile Val Leu Pro Glu Ile Gly Phe Phe Ala Pro Phe Val Gly Leu 85 90 95

ttt ttt tet gct tta aat aaa tet caa aat ata cct acg act tca gat 336 Phe Phe Ser Ala Leu Asn Lys Ser Gln Asn Ile Pro Thr Thr Ser Asp 100 105 110

att ttt gaa gcg atg aaa cca gct att caa aca atg att gat cgt agt 384 Ile Phe Glu Ala Met Lys Pro Ala Ile Gln Thr Met Ile Asp Arg Ser 115 120 125

tta aca gat gct gaa aac aag gag atg gat gat cag gcg cac aac cta 432 Leu Thr Asp Ala Glu Asn Lys Glu Met Asp Asp Gln Ala His Asn Leu 130 135 140

ttt acg cga tta caa act tat caa gag caa ata gat ctc tat aaa cat 480 Phe Thr Arg Leu Gln Thr Tyr Gln Glu Gln Ile Asp Leu Tyr Lys His 145 150 155 160

att tta gat gca aaa caa aaa cca act ctt aac gat ata gga gat ctt 52 8 Ile Leu Asp Ala Lys Gln Lys Pro Thr Leu Asn Asp Ile Gly Asp Leu 165 170 175

cac act tcg ate gac gaa act ctc aga aca tta gat tcc aat tta gca 576 His Thr Ser Ile Asp Glu Thr Leu Arg Thr Leu Asp Ser Asn Leu Ala 180 185 190

ttt ttc caa aca gaa ggc tat caa gat ctc ggg tta cca tat tac aca 624 Phe Phe Gln Thr Glu Gly Tyr Gln Asp Leu Gly Leu Pro Tyr Tyr Thr 195 200 205

att ttt gcc aca caa tat ttg tta ate ctt tca gat aaa att aaa act 672 Ile Phe Ala Thr Gln Tyr Leu Leu Ile Leu Ser Asp Lys Ile Lys Thr 210 215 220 ggt ate aca tgg gga tat aat cct att aac att cca gat ttt caa aac 720 Gly Ile Thr Trp Gly Tyr Asn Pro Ile Asn Ile Pro Asp Phe Gln Asn 225 230 235 240

caa ttt aat aat aga ata ctt tta ttt aca aaa tac att agt ggt caa 768 Gln Phe Asn Asn Arg Ile Leu Leu Phe Thr Lys Tyr Ile Ser Gly Gln 245 250 255

ctt aag aaa atg tat gac aac ggt gta cat cca gea ctt tta tat caa 816 Leu Lys Lys Met Tyr Asp Asn Gly Val His Pro Ala Leu Leu Tyr Gln 260 265 270

aac tgt ate caa ttt gtt gct tta tgg cct act ttt tet ccc gea gat 864 Asn Cys Ile Gln Phe Val Ala Leu Trp Pro Thr Phe Ser Pro Ala Asp 275 280 285

tat aac ctt agt aac age aca gat tta gaa caa aca ata agt ttt aag 912 Tyr Asn Leu Ser Asn Ser Thr Asp Leu Glu Gln Thr Ile Ser Phe Lys 290 295 300

agt ttc ate tcc tat aag agt tta aat gat tat aat tat gea ctt cct 960 Ser Phe Ile Ser Tyr Lys Ser Leu Asn Asp Tyr Asn Tyr Ala Leu Pro 305 310 315 320

gaa att aat aca tgg aca aat ttt gaa atg aca aaa tca ctt gat ttt 1008 Glu Ile Asn Thr Trp Thr Asn Phe Glu Met Thr Lys Ser Leu Asp Phe 325 330 335

aac aac tgt aga tcc atg gat aat tat ggt ate gcg ggt gac ctt cgt 1056 Asn Asn Cys Arg Ser Met Asp Asn Tyr Gly Ile Ala Gly Asp Leu Arg 340 345 350

ata aca aat cat aaa aat gaa ate cat gaa ata tet gct cct tcg gta 1104 Ile Thr Asn His Lys Asn Glu Ile His Glu Ile Ser Ala Pro Ser Val 355 360 365

ctc tac atg aca tca aat cag tgt aac tca aga ctt gtt ttt cca ttc 1152 Leu Tyr Met Thr Ser Asn Gln Cys Asn Ser Arg Leu Val Phe Pro Phe 370 375 380

gat gat cct att gtt aaa ttc gaa gga aca agt agt gtt ttc ata ggg 1200 Asp Asp Pro Ile Val Lys Phe Glu Gly Thr Ser Ser Val Phe Ile Gly 385 390 395 400

aca cct gga tta cct caa ttt tat aca aat ttt cag ttg act tet ggt 1248 Thr Pro Gly Leu Pro Gln Phe Tyr Thr Asn Phe Gln Leu Thr Ser Gly 405 410 415

aaa agt tta ata ttc cct cct cct tca gga gtt aat caa caa ggt ttc 1296 Lys Ser Leu Ile Phe Pro Pro Pro Ser Gly Val Asn Gln Gln Gly Phe 420 425 430

aca caa aat tat tcg gta ate cct cat cct gga ttt aaa ata gea ggt 1344 Thr Gln Asn Tyr Ser Val Ile Pro His Pro Gly Phe Lys Ile Ala Gly 435 440 445 att aca aat atg tca tat tta cct act cat cac gat agt aat gcg cgg 1392

Ile Thr Asn Met Ser Tyr Leu Pro Thr His His Asp Ser Asn Ala Arg 450 455 460

aca caa ata gaa cat ate caa gtt cct gaa aaa ate ttt cca gaa aat 1440

Thr Gln Ile Glu His Ile Gln Val Pro Glu Lys Ile Phe Pro Glu Asn

465 470 475 480

att ate ggg gtt cca gat cca gat aat aac aat cta ate cca ate aaa 1488

Ile Ile Gly Val Pro Asp Pro Asp Asn Asn Asn Leu Ile Pro Ile Lys 485 490 495

ggt att ccc gea gaa aaa gga tat ggt gac tca att gea tat gtg tca 1536

Gly Ile Pro Ala Glu Lys Gly Tyr Gly Asp Ser Ile Ala Tyr Val Ser 500 505 510

gaa ccg gta aat ggt gcg agt gea gtt aaa ctt act tca aat caa att 1584 Glu Pro Val Asn Gly Ala Ser Ala Val Lys Leu Thr Ser Asn Gln Ile 515 520 525

etc caa atg gaa att aca aat gta aca act caa aaa tat caa gtt cgc 1632

Leu Gln Met Glu Ile Thr Asn Val Thr Thr Gln Lys Tyr Gln Val Arg 530 535 540

ata cgt tat gct aca gct gga gat aca gag gct aat ata agg ttc cat 1680

Ile Arg Tyr Ala Thr Ala Gly Asp Thr Glu Ala Asn Ile Arg Phe His

545 550 555 560

att att gat cca aat gaa aat aat tta ata aat ggg cct aat cat ttc 1728

Ile Ile Asp Pro Asn Glu Asn Asn Leu Ile Asn Gly Pro Asn His Phe 565 570 575

aca gct gta tet aat act caa acg tet gtc caa ggt gaa aat gga aaa 1776

Thr Ala Val Ser Asn Thr Gln Thr Ser Val Gln Gly Glu Asn Gly Lys 580 585 590

tat gta cta aac aca ctt gta aat tca ata ata tta cca tca gga aaa 1824

Tyr Val Leu Asn Thr Leu Val Asn Ser Ile Ile Leu Pro Ser Gly Lys 595 600 605

caa aag gtc ttt att caa aac act ggt tet caa gat ctc ttt tta gac 1872

Gln Lys Val Phe Ile Gln Asn Thr Gly Ser Gln Asp Leu Phe Leu Asp 610 615 620

cgt att gaa ttt att cca tta caa cta gaa ctt cct ttc act tca aaa 1920

Arg Ile Glu Phe Ile Pro Leu Gln Leu Glu Leu Pro Phe Thr Ser Lys

625 630 635 640

tta cct gaa act act aca caa cca aat aca aca aaa aca att tgg tca 1968

Leu Pro Glu Thr Thr Thr Gln Pro Asn Thr Thr Lys Thr Ile Trp Ser 645 650 655

ggt caa aaa cct gct aat aca ctt tet ctt caa ggt aca gtt tat aat 2016

Gly Gln Lys Pro Ala Asn Thr Leu Ser Leu Gln Gly Thr Val Tyr Asn 660 665 670 gat gct tct ate gaa tta caa ctt tat atg aac gat aac tta gtc caa 2064 Asp Ala Ser Ile Glu Leu Gln Leu Tyr Met Asn Asp Asn Leu Val Gln 675 680 685

aaa ate cct gea caa ggt cct ggt cct agt ttt gac tgt gac gac caa 2112 Lys Ile Pro Ala Gln Gly Pro Gly Pro Ser Phe Asp Cys Asp Asp Gln 690 695 700

tct aaa cct att aat caa cca aat ata aaa act gaa gaa ttt aac aaa 2160 Ser Lys Pro Ile Asn Gln Pro Asn Ile Lys Thr Glu Glu Phe Asn Lys 705 710 715 720

ctt gtc tta aaa gaa tta agt agt acc tat tcg tat tgt atg gga gga 2208 Leu Val Leu Lys Glu Leu Ser Ser Thr Tyr Ser Tyr Cys Met Gly Gly 725 730 735

gct ttt gaa aac act tac caa att gat att aca ata gac age aaa tcc 2256 Ala Phe Glu Asn Thr Tyr Gln Ile Asp Ile Thr Ile Asp Ser Lys Ser 740 745 750

caa tct ttt act act cca gaa gat tta gaa aaa ate aca aac caa gtc 2304 Gln Ser Phe Thr Thr Pro Glu Asp Leu Glu Lys Ile Thr Asn Gln Val 755 760 765

aac cag tta ttt act tcc tca tcc caa aca aaa ttg gtt caa acc gta 2352 Asn Gln Leu Phe Thr Ser Ser Ser Gln Thr Lys Leu Val Gln Thr Val 770 775 780

acg gat tat gga att gat caa atg gta atg aaa gta gat gcg tta tca 2400 Thr Asp Tyr Gly Ile Asp Gln Met Val Met Lys Val Asp Ala Leu Ser 785 790 795 800

gac gat gta ttt ggt gtc gag aaa aaa gea tta cgt aaa ctt gtc aat 2448 Asp Asp Val Phe Gly Val Glu Lys Lys Ala Leu Arg Lys Leu Val Asn 805 810 815

cag gcc aaa caa tta agt aaa gta cga aat gta ctg gtc ggt gga aac 2496 Gln Ala Lys Gln Leu Ser Lys Val Arg Asn Val Leu Val Gly Gly Asn 820 825 830

ttt gaa aaa ggt cat aaa tgg gta cta ggt cgt aaa gcg aca acg gta 2 544 Phe Glu Lys Gly His Lys Trp Val Leu Gly Arg Lys Ala Thr Thr Val 835 840 845

gcg gat cat gat tta ttc aaa ggg gat cat tta tta tta cca cca cca 2592 Ala Asp His Asp Leu Phe Lys Gly Asp His Leu Leu Leu Pro Pro Pro 850 855 860

acc ctg tat cca tcg tat gcg tat caa aaa ate gat gaa tct aaa tta 2640 Thr Leu Tyr Pro Ser Tyr Ala Tyr Gln Lys Ile Asp Glu Ser Lys Leu 865 870 875 880

aaa tcc aat aca cgc tat acg gtt tcc ggt ttt gtt gcg caa agt gaa 2 688 Lys Ser Asn Thr Arg Tyr Thr Val Ser Gly Phe Val Ala Gln Ser Glu 885 890 895 cat tta gaa gtt gtt gtt tct cgc tat ggg aaa gaa gta aat acc ctg 273 6

His Leu Glu Val Val Val Ser Arg Tyr Gly Lys Glu Val Asn Thr Leu 900 905 910

tta cat gtc cct tat gaa gaa gca tta ccg att tct tcc gat gag cgt 2784

Leu His Val Pro Tyr Glu Glu Ala Leu Pro Ile Ser Ser Asp Glu Arg

915 920 925

cca aat tgc tgt aaa cca gct gct tgt cag tgt cca tct tgc aat ggt 2832

Pro Asn Cys Cys Lys Pro Ala Ala Cys Gln Cys Pro Ser Cys Asn Gly

930 935 940

gat gca cca gac tcc cat ttc ttt age tat agt ate gat gtt ggt tcc 2880

Asp Ala Pro Asp Ser His Phe Phe Ser Tyr Ser Ile Asp Val Gly Ser 945 950 955 960

tta caa gca gat gta aat tta gga att gag ttt ggt ctt cgt att gtg 2928

Leu Gln Ala Asp Val Asn Leu Gly Ile Glu Phe Gly Leu Arg Ile Val 965 970 975

aaa tcc aac gga ttt gca aaa ate agt aac cta gaa ate aaa gaa gac 2 97 6

Lys Ser Asn Gly Phe Ala Lys Ile Ser Asn Leu Glu Ile Lys Glu Asp 980 985 990

cgt cca tta aca gaa aaa gaa att aag aaa ata caa cgc aaa gaa caa 3024

Arg Pro Leu Thr Glu Lys Glu Ile Lys Lys Ile Gln Arg Lys Glu Gln

995 1000 1005

aag tgg aaa aaa gca ttt gac aaa gaa cag gca gag tta acg gca aca 3 072

Lys Trp Lys Lys Ala Phe Asp Lys Glu Gln Ala Glu Leu Thr Ala Thr

1010 1015 1020

ctc caa cca acc ctg aac caa ate aat gcc tta tat caa aat gaa gat 3120

Leu Gln Pro Thr Leu Asn Gln Ile Asn Ala Leu Tyr Gln Asn Glu Asp 1025 1030 1035 1040

tgg aac ggt tcg att cac cct cat gta acg tat caa cat cta tcc gat 3168

Trp Asn Gly Ser Ile His Pro His Val Thr Tyr Gln His Leu Ser Asp 1045 1050 1055

gtt gtc gta cca gca tta cca aaa caa aga cat tgg ttt atg gaa gat 3216

Val Val Val Pro Ala Leu Pro Lys Gln Arg His Trp Phe Met Glu Asp 1060 1065 1070

cga caa ggt gaa cat tac aat gta aca caa caa ttc caa caa gca tta 3264

Arg Gln Gly Glu His Tyr Asn Val Thr Gln Gln Phe Gln Gln Ala Leu

1075 1080 1085

gat cgt gct ttc caa caa ate gaa gaa caa aac tta att cac aat ggt 3312

Asp Arg Ala Phe Gln Gln Ile Glu Glu Gln Asn Leu Ile His Asn Gly

1090 1095 1100

age ttt gcg aat gga ttg aca gat tgg act gtc aca ggg gat gca cat 3360

Ser Phe Ala Asn Gly Leu Thr Asp Trp Thr Val Thr Gly Asp Ala His 1105 1110 1115 1120 gtt act ate cag gat gat gat caa gta tta gaa cta tet cat tgg gat 3408 Val Thr Ile Gln Asp Asp Asp Gln Val Leu Glu Leu Ser His Trp Asp 1125 1130 1135

gea agt gtc tet caa acg att gaa att att gat ttt gaa gaa gaa aaa 3456 Ala Ser Val Ser Gln Thr Ile Glu Ile Ile Asp Phe Glu Glu Glu Lys 1140 1145 1150

gaa tac aaa ctt cgt gta cgt gga aaa ggt aaa gga acg gta acc gtt 3 504 Glu Tyr Lys Leu Arg Val Arg Gly Lys Gly Lys Gly Thr Val Thr Val 1155 1160 1165

caa cat gga gaa gaa gag tta gaa aca atg aca ttt aat gea acg agt 3552 Gln His Gly Glu Glu Glu Leu Glu Thr Met Thr Phe Asn Ala Thr Ser 1170 1175 1180

ttt aca acg caa gaa caa acc ttc tat ttc gaa gga aat aca gtg gat 3600 Phe Thr Thr Gln Glu Gln Thr Phe Tyr Phe Glu Gly Asn Thr Val Asp 1185 1190 1195 1200

ata cac gtt caa tca gag aat aat aca ttc ctg gta gac agt gta gaa 3 648 Ile His Val Gln Ser Glu Asn Asn Thr Phe Leu Val Asp Ser Val Glu 1205 1210 1215

ctc att gaa att ata gaa aag 3 669

Leu Ile Glu Ile Ile Glu Lys 1220

<210> SEQ ID NO: 35 <211> Comprimento: 1223 <212> Tipo: PRT <213> Organismo: Desconhecido

<220> Características:

<223> Outras Informações: Isolado de amostra de solo (AXMI-049) <400> Seqüência: 35

Met Asp Asp Met Thr Asn Leu Ser Asp Val Tyr Ser Pro Val Pro Ser

15 10 15

Asn Val Leu Ala Ala Pro Leu Ile Leu Glu Glu Thr Lys Lys Lys Thr

20 25 30

Pro Ala Glu Gln Ala Lys Glu Asp Leu Glu Lys Ala Leu Arg Thr Gly

35 40 45

Lys Phe Ser Asp Ala Ile Ala Gln Ile Leu Asn Asp Val Leu Ile Asn

50 55 60

Gln Lys Phe Ser Tyr Gln Thr Ala Val Thr Val Ser Leu Ser Leu Ala 65 70 75 80

Ser Ile Val Leu Pro Glu Ile Gly Phe Phe Ala Pro Phe Val Gly Leu

85 90 95

Phe Phe Ser Ala Leu Asn Lys Ser Gln Asn Ile Pro Thr Thr Ser Asp

100 105 110

Ile Phe Glu Ala Met Lys Pro Ala Ile Gln Thr Met Ile Asp Arg Ser

115 120 125

Leu Thr Asp Ala Glu Asn Lys Glu Met Asp Asp Gln Ala His Asn Leu 130 135 140 Phe Thr Arg Leu 145

Ile Leu Asp Ala

His Thr Ser Ile 180

Phe Phe Gln Thr 195

Ile Phe Ala Thr 210

Gly Ile Thr Trp 225

Gln Phe Asn Asn

Leu Lys Lys Met 260

Asn Cys Ile Gln 275

Tyr Asn Leu Ser 290

Ser Phe Ile Ser 305

Glu Ile Asn Thr

Asn Asn Cys Arg 340

Ile Thr Asn His 355

Leu Tyr Met Thr 370

Asp Asp Pro Ile 385

Thr Pro Gly Leu

Lys Ser Leu Ile 420

Thr Gln Asn Tyr 435

Ile Thr Asn Met 450

Thr Gln Ile Glu 465

Ile Ile Gly Val

Gly Ile Pro Ala 500

Glu Pro Val Asn 515

Leu Gln Met Glu 530

Ile Arg Tyr Ala 545

Ile Ile Asp Pro

Thr Ala Val Ser 580

Gln Thr Tyr Gln 150

Lys Gln Lys Pro 165

Asp Glu Thr Leu

Glu Gly Tyr Gln 200

Gln Tyr Leu Leu 215

Gly Tyr Asn Pro 230

Arg Ile Leu Leu 245

Tyr Asp Asn Gly

Phe Val Ala Leu 280

Asn Ser Thr Asp 295

Tyr Lys Ser Leu 310

Trp Thr Asn Phe 325

Ser Met Asp Asn

Lys Asn Glu Ile 360

Ser Asn Gln Cys 375

Val Lys Phe Glu 390

Pro Gln Phe Tyr 405

Phe Pro Pro Pro

Ser Val Ile Pro 440

Ser Tyr Leu Pro 455

His Ile Gln Val 470

Pro Asp Pro Asp 485

Glu Lys Gly Tyr

Gly Ala Ser Ala 520

Ile Thr Asn Val 535

Thr Ala Gly Asp 550

Asn Glu Asn Asn 565

Asn Thr Gln Thr

Glu Gln Ile Asp 155

Thr Leu Asn Asp 170

Arg Thr Leu Asp 185

Asp Leu Gly Leu

Ile Leu Ser Asp 220

Ile Asn Ile Pro 235

Phe Thr Lys Tyr 250

Val His Pro Ala 265

Trp Pro Thr Phe

Leu Glu Gln Thr 300

Asn Asp Tyr Asn 315

Glu Met Thr Lys 330

Tyr Gly Ile Ala 345

His Glu Ile Ser

Asn Ser Arg Leu 380

Gly Thr Ser Ser 395

Thr Asn Phe Gln 410

Ser Gly Val Asn 425

His Pro Gly Phe

Thr His His Asp 460

Pro Glu Lys Ile 475

Asn Asn Asn Leu 490

Gly Asp Ser Ile 505

Val Lys Leu Thr

Thr Thr Gln Lys 540

Thr Glu Ala Asn 555

Leu Ile Asn Gly 570

Ser Val Gln Gly 585

Leu Tyr Lys His 160 Ile Gly Asp Leu 175 Ser Asn Leu Ala 190 Pro Tyr Tyr Thr 205 Lys Ile Lys Thr Asp Phe Gln Asn 240 Ile Ser Gly Gln 255 Leu Leu Tyr Gln 270 Ser Pro Ala Asp 285 Ile Ser Phe Lys Tyr Ala Leu Pro 320 Ser Leu Asp Phe 335 Gly Asp Leu Arg 350 Ala Pro Ser Val 365 Val Phe Pro Phe Val Phe Ile Gly 400 Leu Thr Ser Gly 415 Gln Gln Gly Phe 430 Lys Ile Ala Gly 445 Ser Asn Ala Arg Phe Pro Glu Asn 480 Ile Pro Ile Lys 495 Ala Tyr Val Ser 510 Ser Asn Gln Ile 525 Tyr Gln Val Arg Ile Arg Phe His 560 Pro Asn His Phe 575 Glu Asn Gly Lys 590 Tyr Val Leu Asn Thr Leu Val Asn Ser Ile Ile Leu Pro Ser Gly Lys

595 600 605

Gln Lys Val Phe Ile Gln Asn Thr Gly Ser Gln Asp Leu Phe Leu Asp

610 615 620

Arg Ile Glu Phe Ile Pro Leu Gln Leu Glu Leu Pro Phe Thr Ser Lys 625 630 635 640

Leu Pro Glu Thr Thr Thr Gln Pro Asn Thr Thr Lys Thr Ile Trp Ser

645 650 655

Gly Gln Lys Pro Ala Asn Thr Leu Ser Leu Gln Gly Thr Val Tyr Asn

660 665 670

Asp Ala Ser Ile Glu Leu Gln Leu Tyr Met Asn Asp Asn Leu Val Gln

675 680 685

Lys Ile Pro Ala Gln Gly Pro Gly Pro Ser Phe Asp Cys Asp Asp Gln

690 695 700

Ser Lys Pro Ile Asn Gln Pro Asn Ile Lys Thr Glu Glu Phe Asn Lys 705 710 715 720

Leu Val Leu Lys Glu Leu Ser Ser Thr Tyr Ser Tyr Cys Met Gly Gly

725 730 735

Ala Phe Glu Asn Thr Tyr Gln Ile Asp Ile Thr Ile Asp Ser Lys Ser

740 745 750

Gln Ser Phe Thr Thr Pro Glu Asp Leu Glu Lys Ile Thr Asn Gln Val

755 760 765

Asn Gln Leu Phe Thr Ser Ser Ser Gln Thr Lys Leu Val Gln Thr Val

770 775 780

Thr Asp Tyr Gly Ile Asp Gln Met Val Met Lys Val Asp Ala Leu Ser 785 790 795 800

Asp Asp Val Phe Gly Val Glu Lys Lys Ala Leu Arg Lys Leu Val Asn

805 810 815

Gln Ala Lys Gln Leu Ser Lys Val Arg Asn Val Leu Val Gly Gly Asn

820 825 830

Phe Glu Lys Gly His Lys Trp Val Leu Gly Arg Lys Ala Thr Thr Val

835 840 845

Ala Asp His Asp Leu Phe Lys Gly Asp His Leu Leu Leu Pro Pro Pro

850 855 860

Thr Leu Tyr Pro Ser Tyr Ala Tyr Gln Lys Ile Asp Glu Ser Lys Leu 865 870 875 880

Lys Ser Asn Thr Arg Tyr Thr Val Ser Gly Phe Val Ala Gln Ser Glu

885 890 895

His Leu Glu Val Val Val Ser Arg Tyr Gly Lys Glu Val Asn Thr Leu

900 905 910

Leu His Val Pro Tyr Glu Glu Ala Leu Pro Ile Ser Ser Asp Glu Arg

915 920 925

Pro Asn Cys Cys Lys Pro Ala Ala Cys Gln Cys Pro Ser Cys Asn Gly

930 935 940

Asp Ala Pro Asp Ser His Phe Phe Ser Tyr Ser Ile Asp Val Gly Ser 945 950 955 960

Leu Gln Ala Asp Val Asn Leu Gly Ile Glu Phe Gly Leu Arg Ile Val

965 970 975

Lys Ser Asn Gly Phe Ala Lys Ile Ser Asn Leu Glu Ile Lys Glu Asp

980 985 990

Arg Pro Leu Thr Glu Lys Glu Ile Lys Lys Ile Gln Arg Lys Glu Gln

995 1000 1005

Lys Trp Lys Lys Ala Phe Asp Lys Glu Gln Ala Glu Leu Thr Ala Thr

1010 1015 1020

Leu Gln Pro Thr Leu Asn Gln Ile Asn Ala Leu Tyr Gln Asn Glu Asp 1025 1030 1035 1040 Trp Asn Gly Ser Ile His Pro His Val Thr Tyr Gln His Leu Ser Asp

1045 1050 1055

Val Val Val Pro Ala Leu Pro Lys Gln Arg His Trp Phe Met Glu Asp

1060 1065 1070

Arg Gln Gly Glu His Tyr Asn Val Thr Gln Gln Phe Gln Gln Ala Leu

1075 1080 1085

Asp Arg Ala Phe Gln Gln Ile Glu Glu Gln Asn Leu Ile His Asn Gly

1090 1095 1100

Ser Phe Ala Asn Gly Leu Thr Asp Trp Thr Val Thr Gly Asp Ala His 1105 1110 1115 1120

Val Thr Ile Gln Asp Asp Asp Gln Val Leu Glu Leu Ser His Trp Asp

1125 1130 1135

Ala Ser Val Ser Gln Thr Ile Glu Ile Ile Asp Phe Glu Glu Glu Lys

1140 1145 1150

Glu Tyr Lys Leu Arg Val Arg Gly Lys Gly Lys Gly Thr Val Thr Val

1155 1160 1165

Gln His Gly Glu Glu Glu Leu Glu Thr Met Thr Phe Asn Ala Thr Ser

1170 1175 1180

Phe Thr Thr Gln Glu Gln Thr Phe Tyr Phe Glu Gly Asn Thr Val Asp 1185 1190 1195 1200

Ile His Val Gln Ser Glu Asn Asn Thr Phe Leu Val Asp Ser Val Glu

1205 1210 1215

Leu Ile Glu Ile Ile Glu Lys 1220

<210> SEQ ID NO: 36 <211> Comprimento: 4 <212> Tipo: PRT

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: Peptídeo sinal

<400> Seqüência: 36 Lys Asp Glu Leu 1

<210> SEQ ID NO: 37 <211> Comprimento: 3657 <212> Tipo: DNA

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: aposynaxmi-031(f1)

<221> Nome/Chave: CDS

<222> Localização: (1) . ..(3657)

<400> Seqüência: 37

atg cag ate ctt ggg tac tcc age ttc gtt gct ate gct ctt ctt atg Met Gln Ile Leu Gly Tyr Ser Ser Phe Val Ala Ile Ala Leu Leu Met 1 5 10 15 age gtg gtt gtt gtt tgc aat ggg ggc aag acg tcc acc tac gtg cgt 96 Ser Val Val Val Val Cys Asn Gly Gly Lys Thr Ser Thr Tyr Val Arg 20 25 30

aat ctg gat tgc aat ctc cag age cag cag aat ate cca tac aat gtg 144 Asn Leu Asp Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr Asn Val 35 40 45

ctt gct ate cct gtt age aat gtt aat age ctt acg gat acg gtt ggc 192 Leu Ala Ile Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly 50 55 60

gat cta aag aag gea tgg gaa gag ttc cag aag acg ggc age ttc tcc 240 Asp Leu Lys Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser 65 70 75 80

ctt acc gea ctc cag cag ggc ttc age gct tcc cag ggc ggg acg ttc 2 88 Leu Thr Ala Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe 85 90 95

aat tac ctc acc ctc ctc cag tcc ggg ate tcc ctg gct ggc age ttc 336 Asn Tyr Leu Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe 100 105 110

gtg cct ggc ggc acc ttc gtt gct cca ate ate aat atg gtg ate ggc 3 84 Val Pro Gly Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly 115 120 125

tgg ctc tgg cct cat aag aat aag aat gea gat acg gaa aat ctg ate 432 Trp Leu Trp Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile 130 135 140

aat ctg ate gat tca gaa ate cag aag cag ctg aat aag gct ctg ctg 480 Asn Leu Ile Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu 145 150 155 160

gat gct gat cgc aat gaa tgg age age tac ctc gag tcc ate ttc gat 528 Asp Ala Asp Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp 165 170 175

age age aat aat ctg aat ggc gea ate gtt gat gct cag tgg tcc ggc 576 Ser Ser Asn Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp Ser Gly 180 185 190

acc gtg aat acg acc aat cgt acg ctt cgt aat cct acg gaa tca gat 624 Thr Val Asn Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp 195 200 205

tac acc aat gtg gtg acg aat ttc ate gea gea gat ggg gat ate gct 672 Tyr Thr Asn Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp Ile Ala 210 215 220

aat aat gaa aat cat ate atg aat ggg aat ttc gat gtg gea gea gct 720 Asn Asn Glu Asn His Ile Met Asn Gly Asn Phe Asp Val Ala Ala Ala 225 230 235 240 cca tac ttc gtt ate ggg gct acc gct aga ttc gea gct atg cag tcc 768

Pro Tyr Phe Val Ile Gly Ala Thr Ala Arg Phe Ala Ala Met Gln Ser 245 250 255

tac ate aag ttc tgc aat gea tgg ate gat aag gtt ggg ctg tca gat 816

Tyr Ile Lys Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp 260 265 270

gct cag ctg acc acg cag aag gct aat ctg gat aga acg aag cag aat 864

Ala Gln Leu Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys Gln Asn 275 280 285

atg cgt aat gct ate ctt aat tac acc cag cag gtt atg aag gtt ttc 912

Met Arg Asn Ala Ile Leu Asn Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys Val Phe 290 295 300

aag gat tcc aag aat atg cca acg ate gge acg aat aag ttc age gtt 960 Lys Asp Ser Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val

305 310 315 320

gat acc tac aat gtt tac ate aag ggg atg acg ctt aat gtg ctt gat 1008

Asp Thr Tyr Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp 325 330 335

ate gtt gct ate tgg cca age ctg tac cca gat gat tac acg tca cag 1056

Ile Val Ala Ile Trp Pro Ser Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr Ser Gln 340 345 350

acg gct ctg gaa cag acc cgc gtg acg ttc tcc aat atg gtg ggg cag 1104 Thr Ala Leu Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln 355 360 365

gaa gaa gge acg gat ggc age etc aga ate tac aat acc ttc gat age 1152

Glu Glu Gly Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser 370 375 380

ttc tcc tac cag cat age cct ate cct aat aat aat gtg aat ctc ate 1200

Phe Ser Tyr Gln His Ser Pro Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn Leu Ile

385 390 395 400

age tac tac aat gat gaa ctt cag aat ctg gaa ctc ggg gtt tac acc 1248

Ser Tyr Tyr Asn Asp Glu Leu Gln Asn Leu Glu Leu Gly Val Tyr Thr 405 410 415

cca cca aag aag ggc tca ggc tac age tac cca tac ggg ttc gtg ctg 1296 Pro Pro Lys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr Gly Phe Val Leu 420 425 430

aat tac gea aat age aag tac aag tac ggc gat tcc aat gat cca gaa 1344

Asn Tyr Ala Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp Pro Glu 435 440 445

tcc ctc ggc ggg ctt tcc acc ctt age gct cca ate caa cag gtt aat 1392

Ser Leu Gly Gly Leu Ser Thr Leu Ser Ala Pro Ile Gln Gln Val Asn 450 455 460 tgc aat cca age gat acc aat cag aag ate aat gct etc tac cca ttc Cys Asn Pro Ser Asp Thr Asn Gln Lys Ile Asn Ala Leu Tyr Pro Phe 515 520 525

age ctt gtt age tac gat ctg aat cct aag aat gtt ttc ggg gaa etc Ser Leu Val Ser Tyr Asp Leu Asn Pro Lys Asn Val Phe Gly Glu Leu

550 555 560

545

gct gct acc cag aat age aag tac ctt gat ggc gaa ate ctg aat ggg 1440

Ala Ala Thr Gln Asn Ser Lys Tyr Leu Asp Gly Glu Ile Leu Asn Gly

465 470 475 480

ate ggc gea age ctg cct ggc tac tgc acg acc ggg tgc tca cct acc 1488

Ile Gly Ala Ser Leu Pro Gly Tyr Cys Thr Thr Gly Cys Ser Pro Thr 485 490 495

gaa cca cca ttc age tgc acg age acg gea aat ggg tac aag gea age 153 6 Glu Pro Pro Phe Ser Cys Thr Ser Thr Ala Asn Gly Tyr Lys Ala Ser 500 505 510

1584

acg cag gea aat gtg aag ggg aat acc ggg aag ctg ggc gtt etc gea 1632 Thr Gln Ala Asn Val Lys Gly Asn Thr Gly Lys Leu Gly Val Leu Ala 530 535 540

1680

1728

gat tca gat acc aat aat gtt ate ctt aag ggc ate cca gea gaa aag

Asp Ser Asp Thr Asn Asn Val Ile Leu Lys Gly Ile Pro Ala Glu Lys

565 570 575

ggc tac ttc cca aat aat gea aga cca acc gtt gtg aag gaa tgg ate 177 6 Gly Tyr Phe Pro Asn Asn Ala Arg Pro Thr Val Val Lys Glu Trp Ile 580 585 590

aat ggg gct tcc gea gtt cca ctt gat tcc ggc aat acc ctg ttc atg Asn Gly Ala Ser Ala Val Pro Leu Asp Ser Gly Asn Thr Leu Phe Met 595 600 605

acg gct acg aac ctg acg gct acc cag tac aga ate cgc ate cgt tac Thr Ala Thr Asn Leu Thr Ala Thr Gln Tyr Arg Ile Arg Ile Arg Tyr 610 615 620

gct aac cca aac tca aac acg cag ate ggc gtt aga ate acg cag aac Ala Asn Pro Asn Ser Asn Thr Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr Gln Asn 625 630 635 640

ggg age etc ate tcc tcc tcc aac ctc acg ctg tac tca acc acc gat Gly Ser Leu Ile Ser Ser Ser Asn Leu Thr Leu Tyr Ser Thr Thr Asp 645 650 655

atg aac aac acc ctg cca ctg aac gtt tac gtg ate ggg gaa aac ggg Met Asn Asn Thr Leu Pro Leu Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu Asn Gly 660 665 670

1824

1872

1920

1968

2016

aac tac acc ctc cag gat ctc tac aac acg acg aac gtt ctg tcc acg 2064 Asn Tyr Thr Leu Gln Asp Leu Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu Ser Thr 675 680 685 ggc gat Gly Asp 690

gat cgc Asp Arg 705

aac aac Asn Asn

tgc gct Cys Ala

gag cag Glu Gln

ttc aag Phe Lys 770

cag ate Gln Ile 785

ttc tgc Phe Cys

cag ctt Gln Leu

act cag Thr Gln

ttc ctg Phe Leu 850

ttc acg Phe Thr 865

tac acg Tyr Thr

gaa ctg Glu Leu

ate acc Ile Thr

ate gag Ile Glu

aac ggg Asn Gly

ate gea Ile Ala 740

gtg tcc Val Ser 755

tcc tcc Ser Ser

age cag Ser Gln

gaa gaa Glu Glu

ctc gaa Leu Glu 820

aac tgg Asn Trp 835

ttc aac Phe Asn

age tac Ser Tyr

cgc tac Arg Tyr

ate ate Ile Ile 900

ctg cag Leu Gln

ttc gtg Phe Val 710

aac aac Asn Asn 725

ggc acc Gly Thr

gat tta Asp Leu

cca tac Pro Tyr

gtt gea Val Ala 790

aag aac Lys Asn 805

gea age Ala Ser

gtg ctc Val Leu

ggg aac Gly Asn

gct tac Ala Tyr 870

aag gtg Lys Val 885

age cgc Ser Arg

ate acc Ile Thr 695

cct acg Pro Thr

aac ggc Asn Gly

cag cag Gln Gln

gaa aag Glu Lys 760

gaa gaa Glu Glu 775

ctg aag Leu Lys

gtg ctg Val Leu

aac ctt Asn Leu

ggc acg Gly Thr 840

tac ctg Tyr Leu 855

cag aag Gln Lys

tcc ggg Ser Gly

tac ggg Tyr Gly

ggc ggg Gly Gly

atg cca Met Pro

aac aac Asn Asn 730

tcc tgc Ser Cys 745

ata acc Ile Thr

ctt gct Leu Ala

gtt atg Val Met

aga aag Arg Lys 810

ctc gtt Leu Val 825

aac gct Asn Ala

age ctc Ser Leu

ate gat Ile Asp

ttc ate Phe Ile 890

aag gaa Lys Glu 905

gat cag Asp Gln 700

gtg cca Val Pro 715

aac cct Asn Pro

tcc ggc Ser Gly

acg cag Thr Gln

ctt gaa Leu Glu 780

gct ctc Ala Leu 795

ctc gtg Leu Val

ggg ggg Gly Gly

tac ate Tyr Ile

cag cca Gln Pro 860

gaa tcc Glu Ser 875

ggg cag Gly Gln

ate gat Ile Asp

aag ata Lys Ile

ggc aac Gly Asn

cct cat Pro His

cca cca Pro Pro 750

gtt tac Val Tyr 765

gtt age Val Ser

age gat Ser Asp

aac aag Asn Lys

aac ttc Asn Phe 830

aac tat Asn Tyr 845

gea tcc Ala Ser

acg ctt Thr Leu

tca aac Ser Asn

aag ate Lys Ile 910

ttc ate Phe Ile

acc aac Thr Asn 720

cat gtt His Val 735

aag ttc Lys Phe

atg ctc Met Leu

age tac Ser Tyr

gaa cta Glu Leu 800

gea aag Ala Lys 815

gag acg Glu Thr

gat tca Asp Ser

ggc ttc Gly Phe

aag cct Lys Pro 880

cag gtt Gln Val 895

ctt aac Leu Asn

2112

2160

2208

2256

2304

2352

2400

2448

2496

2544

2592

2640

2688

2736 gtg cca tac gca ggg cca ctc cca ate acc gea gat gea age ate acc Val Pro Tyr Ala Gly Pro Leu Pro Ile Thr Ala Asp Ala Ser Ile Thr 915 920 925

2784

tgc tgc gct cca gaa ata ggg cag tgc gat ggg gaa cag tca gat tcc Cys Cys Ala Pro Glu Ile Gly Gln Cys Asp Gly Glu Gln Ser Asp Ser 930 935 940

2832

cat ttc ttc aac tac age ate gat gtt ggc gca ctc cat cca gaa ctt His Phe Phe Asn Tyr Ser Ile Asp Val Gly Ala Leu His Pro Glu Leu 945 950 955 960

2880

aac cca ggg ate gaa ate ggg ctg aag ate gtt cag age aac ggc tac Asn Pro Gly Ile Glu Ile Gly Leu Lys Ile Val Gln Ser Asn Gly Tyr 965 970 975

2928

ate acc ate tcc aac ctt gaa ate ate gaa gaa aga cca tta acg gaa Ile Thr Ile Ser Asn Leu Glu Ile Ile Glu Glu Arg Pro Leu Thr Glu 980 985 990

2976

atg gaa att caa gca gtg aac cgc aag aac cag aag tgg gaa cgc gaa Met Glu Ile Gln Ala Val Asn Arg Lys Asn Gln Lys Trp Glu Arg Glu 995 1000 1005

3024

aag ctg ctt gaa tgc gca tcc ate tcc gaa ctc ctc cag cct ate ate Lys Leu Leu Glu Cys Ala Ser Ile Ser Glu Leu Leu Gln Pro Ile Ile 1010 1015 1020

3072

aac cag ata gat age ctc ttc aag gat ggc aac tgg tac aac gat ate Asn Gln Ile Asp Ser Leu Phe Lys Asp Gly Asn Trp Tyr Asn Asp Ile 1025 1030 1035 1040

3120

cta cca cat gtt acc tac cag gat ctt aag aac ate ate ate cca gaa Leu Pro His Val Thr Tyr Gln Asp Leu Lys Asn Ile Ile Ile Pro Glu 1045 1050 1055

3168

ctt cct aag ctc aag cat tgg ttc ate gaa aac ctg cct ggg gaa tac Leu Pro Lys Leu Lys His Trp Phe Ile Glu Asn Leu Pro Gly Glu Tyr 1060 1065 1070

3216

cat gaa ate gaa cag aag atg aag gaa gca tta aag tac gca ttc act His Glu Ile Glu Gln Lys Met Lys Glu Ala Leu Lys Tyr Ala Phe Thr 1075 1080 1085

3264

cag ctc gat gaa aag aac ctg ate cat aac ggc cat ttc acc acc aac Gln Leu Asp Glu Lys Asn Leu Ile His Asn Gly His Phe Thr Thr Asn 1090 1095 1100

3312

ctc ate gat tgg cag gtg gaa ggc gat gct cag atg aag gtg ctt gaa Leu Ile Asp Trp Gln Val Glu Gly Asp Ala Gln Met Lys Val Leu Glu 1105 1110 1115 1120

3360

aac gat gca ctc gct ctc cag cta ttc aac tgg gat gct tcc gca tcc Asn Asp Ala Leu Ala Leu Gln Leu Phe Asn Trp Asp Ala Ser Ala Ser 1125 1130 1135

3408 cag age ate aac ate cta gag ttc gat gaa gat aag gct tac aag ctg 3456 Gln Ser Ile Asn Ile Leu Glu Phe Asp Glu Asp Lys Ala Tyr Lys Leu 1140 1145 1150

cgt gtg tac gea cag ggc tcc ggg acg ate cag ttc ggc aac tgc gaa 3 504 Arg Val Tyr Ala Gln Gly Ser Gly Thr Ile Gln Phe Gly Asn Cys Glu 1155 1160 1165

gat gaa gct ate cag ttc aac acc aac tca ttc ate tac cag gaa aag 3552 Asp Glu Ala Ile Gln Phe Asn Thr Asn Ser Phe Ile Tyr Gln Glu Lys 1170 1175 1180

ata gtg tac ttc gat acg cca tcc gtt aac ctt cat ate cag age gaa 3600 Ile Val Tyr Phe Asp Thr Pro Ser Val Asn Leu His Ile Gln Ser Glu 1185 1190 1195 1200

ggc tcc gag ttc ate gtg age age ate gat etc ate gaa ctc age gat 3648 Gly Ser Glu Phe Ile Val Ser Ser Ile Asp Leu Ile Glu Leu Ser Asp 1205 1210 1215

gat cag tag 3657

Asp Gln *

<210> SEQ ID NO: 38 <211> Comprimento: 1218 <212> Tipo: PRT

<213> Organismo: Seqüência Artificial <220> Características:

<223> Outras Informações: APOSYNAXMI-031(FL) <400> Seqüência: 38

Met Gln Ile Leu Gly Tyr Ser Ser Phe Val Ala Ile Ala Leu Leu Met

15 10 15

Ser Val Val Val Val Cys Asn Gly Gly Lys Thr Ser Thr Tyr Val Arg

20 25 30

Asn Leu Asp Cys Asn Leu Gln Ser Gln Gln Asn Ile Pro Tyr Asn Val

35 40 45

Leu Ala Ile Pro Val Ser Asn Val Asn Ser Leu Thr Asp Thr Val Gly

50 55 60

Asp Leu Lys Lys Ala Trp Glu Glu Phe Gln Lys Thr Gly Ser Phe Ser 65 70 75 80

Leu Thr Ala Leu Gln Gln Gly Phe Ser Ala Ser Gln Gly Gly Thr Phe

85 90 95

Asn Tyr Leu Thr Leu Leu Gln Ser Gly Ile Ser Leu Ala Gly Ser Phe

100 105 110

Val Pro Gly Gly Thr Phe Val Ala Pro Ile Ile Asn Met Val Ile Gly

115 120 125

Trp Leu Trp Pro His Lys Asn Lys Asn Ala Asp Thr Glu Asn Leu Ile

130 135 140

Asn Leu Ile Asp Ser Glu Ile Gln Lys Gln Leu Asn Lys Ala Leu Leu 145 150 155 160

Asp Ala Asp Arg Asn Glu Trp Ser Ser Tyr Leu Glu Ser Ile Phe Asp 165 170 175 Ser Ser Asn Asn Leu Asn Gly Ala Ile Val Asp Ala Gln Trp Ser Gly

180 185 190

Thr Val Asn Thr Thr Asn Arg Thr Leu Arg Asn Pro Thr Glu Ser Asp

195 200 205

Tyr Thr Asn Val Val Thr Asn Phe Ile Ala Ala Asp Gly Asp Ile Ala

210 215 220

Asn Asn Glu Asn His Ile Met Asn Gly Asn Phe Asp Val Ala Ala Ala 225 230 235 240

Pro Tyr Phe Val Ile Gly Ala Thr Ala Arg Phe Ala Ala Met Gln Ser

245 250 255

Tyr Ile Lys Phe Cys Asn Ala Trp Ile Asp Lys Val Gly Leu Ser Asp

260 265 270

Ala Gln Leu Thr Thr Gln Lys Ala Asn Leu Asp Arg Thr Lys Gln Asn

275 280 285

Met Arg Asn Ala Ile Leu Asn Tyr Thr Gln Gln Val Met Lys Val Phe

290 295 300

Lys Asp Ser Lys Asn Met Pro Thr Ile Gly Thr Asn Lys Phe Ser Val 305 310 315 320

Asp Thr Tyr Asn Val Tyr Ile Lys Gly Met Thr Leu Asn Val Leu Asp

325 330 335

Ile Val Ala Ile Trp Pro Ser Leu Tyr Pro Asp Asp Tyr Thr Ser Gln

340 345 350

Thr Ala Leu Glu Gln Thr Arg Val Thr Phe Ser Asn Met Val Gly Gln

355 360 365

Glu Glu Gly Thr Asp Gly Ser Leu Arg Ile Tyr Asn Thr Phe Asp Ser

370 375 380

Phe Ser Tyr Gln His Ser Pro Ile Pro Asn Asn Asn Val Asn Leu Ile 385 390 395 400

Ser Tyr Tyr Asn Asp Glu Leu Gln Asn Leu Glu Leu Gly Val Tyr Thr

405 410 415

Pro Pro Lys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr Gly Phe Val Leu

420 425 430

Asn Tyr Ala Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Gly Asp Ser Asn Asp Pro Glu

435 440 445

Ser Leu Gly Gly Leu Ser Thr Leu Ser Ala Pro Ile Gln Gln Val Asn

450 455 460

Ala Ala Thr Gln Asn Ser Lys Tyr Leu Asp Gly Glu Ile Leu Asn Gly 465 470 475 480

Ile Gly Ala Ser Leu Pro Gly Tyr Cys Thr Thr Gly Cys Ser Pro Thr

485 490 495

Glu Pro Pro Phe Ser Cys Thr Ser Thr Ala Asn Gly Tyr Lys Ala Ser

500 505 510

Cys Asn Pro Ser Asp Thr Asn Gln Lys Ile Asn Ala Leu Tyr Pro Phe

515 520 525

Thr Gln Ala Asn Val Lys Gly Asn Thr Gly Lys Leu Gly Val Leu Ala

530 535 540

Ser Leu Val Ser Tyr Asp Leu Asn Pro Lys Asn Val Phe Gly Glu Leu 545 550 555 560

Asp Ser Asp Thr Asn Asn Val Ile Leu Lys Gly Ile Pro Ala Glu Lys

565 570 575

Gly Tyr Phe Pro Asn Asn Ala Arg Pro Thr Val Val Lys Glu Trp Ile

580 585 590

Asn Gly Ala Ser Ala Val Pro Leu Asp Ser Gly Asn Thr Leu Phe Met

595 600 605

Thr Ala Thr Asn Leu Thr Ala Thr Gln Tyr Arg Ile Arg Ile Arg Tyr 610 615 620 Ala Asn Pro Asn Ser Asn Thr Gln Ile Gly Val Arg Ile Thr Gln Asn 625 630 635 640 Gly Ser Leu Ile Ser Ser Ser Asn Leu Thr Leu Tyr Ser Thr Thr Asp 645 650 655 Met Asn Asn Thr Leu Pro Leu Asn Val Tyr Val Ile Gly Glu Asn Gly 660 665 670 Asn Tyr Thr Leu Gln Asp Leu Tyr Asn Thr Thr Asn Val Leu Ser Thr 675 680 685 Gly Asp Ile Thr Leu Gln Ile Thr Gly Gly Asp Gln Lys Ile Phe Ile 690 695 700 Asp Arg Ile Glu Phe Val Pro Thr Met Pro Val Pro Gly Asn Thr Asn 705 710 715 720 Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn Gly Asn Asn Asn Pro Pro His His Val 725 730 735 Cys Ala Ile Ala Gly Thr Gln Gln Ser Cys Ser Gly Pro Pro Lys Phe 740 745 750 Glu Gln Val Ser Asp Leu Glu Lys Ile Thr Thr Gln Val Tyr Met Leu 755 760 765 Phe Lys Ser Ser Pro Tyr Glu Glu Leu Ala Leu Glu Val Ser Ser Tyr 770 775 780 Gln Ile Ser Gln Val Ala Leu Lys Val Met Ala Leu Ser Asp Glu Leu 785 790 795 800 Phe Cys Glu Glu Lys Asn Val Leu Arg Lys Leu Val Asn Lys Ala Lys 805 810 815 Gln Leu Leu Glu Ala Ser Asn Leu Leu Val Gly Gly Asn Phe Glu Thr 820 825 830 Thr Gln Asn Trp Val Leu Gly Thr Asn Ala Tyr Ile Asn Tyr Asp Ser 835 840 845 Phe Leu Phe Asn Gly Asn Tyr Leu Ser Leu Gln Pro Ala Ser Gly Phe 850 855 860 Phe Thr Ser Tyr Ala Tyr Gln Lys Ile Asp Glu Ser Thr Leu Lys Pro 865 870 875 880 Tyr Thr Arg Tyr Lys Val Ser Gly Phe Ile Gly Gln Ser Asn Gln Val 885 890 895 Glu Leu Ile Ile Ser Arg Tyr Gly Lys Glu Ile Asp Lys Ile Leu Asn 900 905 910 Val Pro Tyr Ala Gly Pro Leu Pro Ile Thr Ala Asp Ala Ser Ile Thr 915 920 925 Cys Cys Ala Pro Glu Ile Gly Gln Cys Asp Gly Glu Gln Ser Asp Ser 930 935 940 His Phe Phe Asn Tyr Ser Ile Asp Val Gly Ala Leu His Pro Glu Leu 945 950 955 960 Asn Pro Gly Ile Glu Ile Gly Leu Lys Ile Val Gln Ser Asn Gly Tyr 965 970 975 Ile Thr Ile Ser Asn Leu Glu Ile Ile Glu Glu Arg Pro Leu Thr Glu 980 985 990 Met Glu Ile Gln Ala Val Asn Arg Lys Asn Gln Lys Trp Glu Arg Glu 995 1000 1005 Lys Leu Leu Glu Cys Ala Ser Ile Ser Glu Leu Leu Gln Pro Ile Ile 1010 1015 1020 Asn Gln Ile Asp Ser Leu Phe Lys Asp Gly Asn Trp Tyr Asn Asp Ile 1025 1030 1035 1040 Leu Pro His Val Thr Tyr Gln Asp Leu Lys Asn Ile Ile Ile Pro Glu 1045 1050 1055 Leu Pro Lys Leu Lys His Trp Phe Ile Glu Asn Leu Pro Gly Glu Tyr 1060 1065 1070 His Glu Ile Glu Gln Lys Met Lys Glu Ala Leu Lys Tyr Ala Phe Thr

1075 1080 1085

Gln Leu Asp Glu Lys Asn Leu Ile His Asn Gly His Phe Thr Thr Asn

1090 1095 1100

Leu Ile Asp Trp Gln Val Glu Gly Asp Ala Gln Met Lys Val Leu Glu 1105 1110 1115 1120

Asn Asp Ala Leu Ala Leu Gln Leu Phe Asn Trp Asp Ala Ser Ala Ser

1125 1130 1135

Gln Ser Ile Asn Ile Leu Glu Phe Asp Glu Asp Lys Ala Tyr Lys Leu

1140 1145 1150

Arg Val Tyr Ala Gln Gly Ser Gly Thr Ile Gln Phe Gly Asn Cys Glu

1155 1160 1165

Asp Glu Ala Ile Gln Phe Asn Thr Asn Ser Phe Ile Tyr Gln Glu Lys

1170 1175 1180

Ile Val Tyr Phe Asp Thr Pro Ser Val Asn Leu His Ile Gln Ser Glu 1185 1190 1195 1200

Gly Ser Glu Phe Ile Val Ser Ser Ile Asp Leu Ile Glu Leu Ser Asp 1205 1210 1215

Asp Gln

Claims (31)

1. Molécula de ácido nucléico isolada caracterizada por compreender uma seqüência de nucleotídeos selecionada do grupo que consiste em: a) seqüência de nucleotídeos das SEQ ID N0:1, 3, 5,7, 9, 11, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34 ou 37, ou um complemento destas; b) seqüência de nucleotídeos tendo pelo menos 90% de identidade de seqüência com a seqüência de nucleotídeos de SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26,28, 30, 32, 34 ou 37, ou um complemento destas; c) seqüência de nucleotídeos que codifica um polipeptídeo compreendendo a seqüência de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27,29, 31, 33, 35 ou 38; d) seqüência de nucleotídeos que codifica um polipeptídeo compreendendo uma seqüência de aminoácidos tendo pelo menos 90% de identidade de seqüência com a seqüência de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12,15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35 ou 38; e, e) seqüência de nucleotídeos da endotoxina delta do inserto de DNA do plasmídeo depositado com Nos. de Acesso B-30935, B-30936, B-30937 ou B-50046, ou um complemento destas.

2. Molécula de ácido nucléico isolada de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a seqüência de nucleotídeos citada é uma seqüência sintética que foi projetada para expressão em uma planta.

3. Vetor caracterizado por compreender a molécula de ácido nucléico de acordo com a reivindicação 1.

4. Vetor de acordo com a reivindicação 3, caracterizado por compreender adicionalmente uma molécula de ácido nucléico codificando um polipeptídeo heterólogo.

5. Célula hospedeira caracterizada por conter o vetor de acordo com a reivindicação 3.

6. Célula hospedeira de acordo com a reivindicação 5, caracterizada por ser uma célula hospedeira bacteriana.

7. Célula hospedeira de acordo com a reivindicação 5, caracterizada por ser uma célula vegetal.

8. Planta transgênica caracterizada por compreender a célula hospedeira de acordo com a reivindicação 7.

9. Planta transgênica de acordo com a reivindicação 8, caracterizada pelo fato de que a planta citada é selecionada do grupo que consiste em milho, sorgo, trigo, repolho, girassol, tomate, crucíferas, pimentas, batata, algodão, arroz, soja, beterraba, cana-de-açúcar, tabaco, cevada e colza.

10. Semente transgênica caracterizada por compreender a molécula de ácido nucléico de acordo com a reivindicação 1.

11. Polipeptídeo isolado com atividade pesticida caracterizado por ser selecionado do grupo que consiste em: a) polipeptídeo compreendendo a seqüência de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 15, 17, 19,21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35 ou 38; b) polipeptídeo compreendendo uma seqüência de aminoácidos tendo pelo menos 90% de identidade de seqüência com a seqüência de aminoácidos de SEQ ID NO:2, 4, 6, 8, 10,12. 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35 ou 38; c) polipeptídeo que é codificado por uma seqüência de nucleotídeos de SEQ ID NO:l, 3, 5, 7, 9, 11, 14, 16, 18,20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34 ou 37; d) polipeptídeo que é codificado por uma seqüência de nucleotídeos que é pelo menos 90% idêntica à seqüência de nucleotídeos de SEQ ID NO:l, 3, 5, 7, 9, 11, 14, 16, 18,20 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34 ou 37; e, e) polipeptídeo codificado pela seqüência de nucleotídeos da endotoxina delta do inserto de DNA do plasmídeo depositado com Nos. de Acesso B-30935, B-30936, B-30937 ou B-50046.

12. Polipeptídeo de acordo com a reivindicação 11, caracterizado por compreender adicionalmente seqüências de aminoácido heterólogas.

13. Anticorpo caracterizado por se ligar seletivamente ao polipeptídeo de acordo com a reivindicação 11.

14. Composição caracterizada por compreender o polipeptídeo de acordo com a reivindicação 11.

15. Composição de acordo com a reivindicação 14, caracterizada por ser selecionada do grupo que consiste em um pó, poeira, pellet, grânulo, spray, emulsão, colóide e solução.

16. Composição de acordo com a reivindicação 14, caracterizada por ser preparada por dessecação, Iiofilização, homogeneização, extração, filtração, centrifugação, sedimentação ou concentração de uma cultura de células de Bacillus thuringiensis.

17. Composição de acordo com a reivindicação 14, caracterizada por compreender de cerca de 1% a cerca de 99% em peso do polipeptídeo citado.

18. Método para controle de população de pragas de lepidópteros ou coleópteros caracterizado por compreender pôr em contato a população citada com uma quantidade que tenha efeito de pesticida do polipeptídeo de acordo com a reivindicação 11.

19. Método para exterminar uma praga de lepidópteros ou coleópteros caracterizado por compreender pôr em contato a praga citada com, ou alimentar a praga citada com, uma quantidade que tenha efeito de pesticida do polipeptideo de acordo com a reivindicação 11.

20. Método para produzir um polipeptideo com atividade pesticida caracterizado por compreender cultivar a célula hospedeira de acordo com a reivindicação 4 sob condições nas quais a molécula de ácido nucléico codificando o polipeptideo é expressa.

21. Planta caracterizada por ter incorporado de maneira estável no seu genoma uma construção de DNA compreendendo uma seqüência de nucleotídeos que codifica uma proteína tendo atividade pesticida, em que a seqüência de nucleotídeo citada é selecionada do grupo que consiste em: a) seqüência de nucleotídeos das SEQ ID NO:l, 3, 5,7, 9, 11, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34 ou 37; b) seqüência de nucleotídeos tendo pelo menos 90% de identidade de seqüência com a seqüência de nucleotídeos de SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26,28, 30, 32, 34 ou 37; c) seqüência de nucleotídeos que codifica um polipeptideo compreendendo a seqüência de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35 ou 38; d) seqüência de nucleotídeos que codifica um polipeptideo tendo pelo menos 90% de identidade de seqüência de aminoácidos com a seqüência de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27,29, 31, 33, 35 ou 38; e, e) seqüência de nucleotídeos da endotoxina delta do inserto de DNA do plasmídeo depositado com Nos. de Acesso B-30935, B-30936, B-30937, B-50046, ou um complemento destas; em que a seqüência de nucleotídeos citada está operacionalmente ligada a um promotor que dirige a expressão de uma seqüência codificante em uma célula vegetal.

22. Planta de acordo com a reivindicação 21, caracterizada por ser uma célula vegetal.

23. Método para proteger uma planta de uma praga caracterizado por introduzir na planta citada ou célula desta pelo menos um vetor de expressão compreendendo uma seqüência de nucleotídeos que codifique um polipeptídeo pesticida, em que a seqüência de nucleotídeos é selecionada do grupo que consiste em: a) seqüência de nucleotídeos das SEQ ID NO:l, 3, 5, .7, 9, 11, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34 ou 37; b) seqüência de nucleotídeos tendo pelo menos 90% de identidade de seqüência com a seqüência de nucleotídeos de SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, .28, 30, 32, 34 ou 37; c) seqüência de nucleotídeos que codifica um polipeptídeo compreendendo a seqüência de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, .29, 31, 33, 35 ou 38; d) seqüência de nucleotídeos que codifica um polipeptídeo tendo pelo menos 90% de identidade de seqüência com a seqüência de aminoácidos de SEQ ID NO:2, 4,6, 8, 10, 12, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35 ou 38; e, e) seqüência de nucleotídeos da endotoxina delta do inserto de DNA do plasmídeo depositado com Nos. de Acesso B-30935, B-30936, B-30937 ou B-50046, ou um complemento destas.

24. Método de acordo com a reivindicação 23, caracterizado pelo fato de que a planta citada produz um polipeptídeo pesticida tendo atividade pesticida contra uma praga de lepidópteros ou coleópteros.

25. Método para proteger uma planta de uma praga de nematóides caracterizado por compreender: a) introduzir na planta citada ou célula desta pelo menos um vetor de expressão compreendendo uma seqüência de nucleotídeos que codifique um polipeptídeo pesticida, em que o polipeptídeo pesticida citado possui um tamanho molecular maior que 22 kDa; e, b) cultivar a planta citada em um campo contendo nematóides de cisto.

26. Método de acordo com a reivindicação 25, caracterizado pelo fato de que o nematóide de cisto citado é Heterodera sp.

27. Método de acordo com a reivindicação 26, caracterizado pelo fato de que o nematóide de cisto citado é Heterodera schactii.

28. Método de acordo com a reivindicação 25, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo pesticida citado é maior que cerca de 4OkDa.

29. Método de acordo com a reivindicação 28, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo pesticida citado é maior que cerca de 7OkDa.

30. Método de acordo com a reivindicação 29, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo citado é selecionado do grupo que consiste em: a) polipeptídeo compreendendo a seqüência de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 15, 17, 19,21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35 ou 38; b) polipeptídeo compreendendo uma seqüência de aminoácidos tendo pelo menos 90% de identidade de seqüência com a seqüência de aminoácidos de SEQ ID NO:2, 4, 6, 8, 10,12, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35 ou 38; c) polipeptídeo que é codificado por uma seqüência de nucleotídeos de SEQ ID NO:l, 3, 5, 7, 9, 11, 14, 16, 18,20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34 ou 37; d) polipeptídeo que é codificado por uma seqüência de nucleotídeos que é pelo menos 90% idêntica à seqüência de nucleotídeos de SEQ ID NO:l, 3, 5, 7, 9, 11, 14, 16, 18,20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34 ou 37; e, e) polipeptídeo codificado pela seqüência de nucleotideos da endotoxina delta do inserto de DNA do plasmídeo depositado com Nos. de Acesso B-3 093 5, B-3 093 6, B-30937 ou B-50046, ou um complemento destas.

31. Método de acordo com a reivindicação 25, caracterizado pelo fato de que a planta citada possui uma produção aumentada comparada a uma planta que não expressa a seqüência de nucleotideos codificando uma proteína pesticida.