BRPI0706725A2 - Composto de sais do mesmo , composição farmacêutica , e , uso de um composto - Google Patents

Abstract

COMPOSTO E SAIS DO MESMO, COMPOSIçãO FARMACêUTICA, E, USO DE UM COMPOSTO A invenção refere-se a derivados de piridina inéditos, à preparação dos mesmos e uso dos mesmos como compostos farmaceuticamente ativos. Referidos compostos atuam particularmente como agentes imunossupressivos.

Description

"COMPOSTO E SAIS DO MESMO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, E,USO DE UM COMPOSTO"

Campo da invenção

A presente invenção refere-se a agonistas de receptor deSIPl/EDGl de Fórmula (I) e a seu uso como ingredientes ativos napreparação de composições farmacêuticas. A invenção refere-se também aaspectos relacionados incluindo processos para a preparação dos compostos,composições farmacêuticas contendo um composto da Fórmula (I), e a seuuso como compostos que melhoram a função vascular, e como agentesimunomoduladores, quer sozinhos ou em combinação com outros compostosativos ou terapias.

Fundamentos da invenção

O sistema imune humano é projetado para defender o corpocontra microorganismos e substâncias estranhas que causam infecção oudoença. Mecanismos reguladores complexos asseguram que a resposta imuneseja objetivada contra a substância ou organismo invasor e não contra ohospedeiro. Em alguns casos, estes mecanismos de controle são desreguladose podem desenvolver-se respostas autoimunes. Uma conseqüência da respostainflamatória descontrolada é dano grave a órgão, célula, tecido ou junta. Como corrente tratamento, usualmente todo o sistema imunológico é suprimido, ea capacidade do corpo de reagir a infecções também é severamentecomprometida. Drogas típicas desta classe incluem azatioprina, clorambucila,ciclofosfamida, ciclosporina, ou metotrexato. Corticosteróides que reduzem ainflamação e suprimem a resposta imune podem causar efeitos secundáriosquando usados em tratamento de longo prazo. Drogas antiinflamatórias não-esteróides [NSAIDS, NonSteroidal Anti-Infammatory Drugs] podem reduzir ador e inflamação, contudo, elas apresentam efeitos secundários consideráveis.Tratamentos alternativos incluem agentes que ativam ou bloqueiam asinalização de citocinas.Compostos oralmente ativos com propriedadesimunomoduladoras, sem comprometimento de respostas imunológicas eapresentando efeitos secundários reduzidos, poderiam melhorarsignificativamente tratamentos correntes de doença inflamatóriadescontrolada.

No campo do transplante de órgãos, a resposta imune dohospedeiro precisa ser suprimida para prevenir a rejeição de órgãos.Recipientes de transplante de órgãos podem experimentar alguma rejeição,mesmo que estejam tomando drogas imunossupressivas. A rejeição ocorrecom maior freqüência nas primeiras poucas semanas após o transplante, mastambém podem ocorrer episódios de rejeição após meses ou mesmo anos dotransplante. Comumente usa-se combinações de até três ou quatro drogas paradar o máximo de proteção contra a rejeição, ao mesmo tempo que seminimiza efeitos secundários. Drogas convencionais correntes usadas paratratar a rejeição de órgãos transplantados interferem com vias intracelularesdistintas na ativação de células sangüíneas brancas de tipo T ou de tipo B.Exemplos de referidas drogas são ciclosporina, daclizumab, basiliximab,everolimus, ou FK506, que interferem com a liberação de citocinas ou com asinalização; azatioprina ou leflunomida, que inibem a síntese de nucleotídeos;ou 15-desoxispergualina, um inibidor da diferenciação de leucócitos.

Os efeitos benéficos de terapias imunossupressivas amplasreferem-se a seus efeitos; no entanto, a imunossupressão generalizada queestas drogas produzem diminui a defesa do sistema imunológico contrainfecção e malignidades. Adicionalmente, drogas imunossupressivasconvencionais são freqüentemente usadas em altas dosagens e podem causarou acelerar danos aos órgãos.

Descrição da invenção

A presente invenção proporciona compostos inéditos deFórmula (I) que são agonistas para o receptor acoplado a proteína GS1P1/EDG1 e apresentam efeito imunossupressivo de longa duração que éobtido reduzindo-se o número de linfócitos TeB circulantes e infiltrantes,sem afetar sua maturação, memória, ou expansão. A redução de linfócitos T/Bcirculantes, como um resultado do agonismo de S1P1/EDG1, possivelmenteem combinação com o melhoramento observado da função da camada decélulas endoteliais associada com ativação de S1P1/EDG1, torna referidoscompostos úteis para tratar doença inflamatória descontrolada e melhorar afuncionalidade vascular.

Os compostos da presente invenção podem ser usadossozinhos ou em combinação com drogas convencionais que inibem a ativaçãode células T, para proporcionar uma nova terapia imunossupressiva com umareduzida propensão para infecções quando comparado com terapiaimunossupressiva convencional. Adicionalmente, os compostos da presenteinvenção podem ser usados em combinação com dosagens reduzidas deterapias imunossupressivas tradicionais, para proporcionar, de um lado,atividade imunossupressiva efetiva, enquanto que, por outro lado, reduzemdano a órgãos terminais, associados com doses maiores de drogasimunossupressivas convencionais. A observação da função melhorada decélulas endoteliais associada com ativação de S1P1/EDG1 proporcionabenefícios adicionais de compostos para melhorar a função vascular.

A seqüência de nucleotídeos e a seqüência de aminoácidospara o receptor de S1P1/EDG1 humano são conhecidas na arte e encontram-se publicadas, p. ex., em: Hla, T., e Maciag, T. J. Biol Chem. 265 (1990),9308-9313; W091/15583 publicado em 17 de outubro de 1991; W099/46277publicado em 16 de setembro de 1999. A potência da eficácia dos compostosde Fórmula (I) é avaliada usando-se o ensaio de GTPyS para determinarvalores de EC5O e por meio de medição dos linfócitos circulantes no rato apósadministração oral, respectivamente (ver Exemplos).

De preferência, os termos gerais usados previamente e a seguirapresentam nesta descrição os significados a seguir, exceto se indicado deoutra forma:

Onde a forma plural é usada para compostos, sais,composições farmacêuticas, doenças e análogos, tal referência também devesignificar um composto simples, sal ou análogo.

Qualquer referência feita acima ou a seguir a um composto deFórmula (I) deve ser compreendida como referindo também a sais(particularmente sais farmaceuticamente aceitáveis) de um composto deFórmula (I), conforme apropriado e vantajoso.

Grupos formadores de sal são grupos ou radicais apresentandopropriedades básicas ou ácidas. Compostos apresentando pelo menos umgrupo básico ou pelo menos um radical básico, por exemplo, amino, umgrupo amino secundário que não forma uma ligação peptídica ou um radicalpiridila, podem formar sais de adição de ácido, por exemplo, com ácidosinorgânicos. Quando vários grupos básicos estão presentes, podem formar-sesais de adição de mono- ou poliácido.

Compostos apresentando grupos ácidos, como um grupocarbóxi ou um grupo hidróxi fenólico, podem formar sais metálicos o sais deamônio, como sais de metal alcalino ou sais de metal alcalino-terroso, porexemplo, sais de sódio, potássio, magnésio ou cálcio, ou sais de amônio comamônia ou aminas orgânicas vantajosas, como monoaminas terciárias, porexemplo, TEA ou tri-(2-hidroxietil)-amina, ou bases heterocíclicas, porexemplo TV-etil-piperidina ou TVjTV-dimetilpiperazina. Misturas de sais sãopossíveis.

Compostos apresentando grupos tanto ácidos como básicospodem formar sais internos.

Para os fins de isolamento ou purificação, e também no casode compostos que são usados adicionalmente como intermediários, também épossível usar sais farmaceuticamente inaceitáveis, p. ex. os picratos. Noentanto, apenas sais não-tóxicos farmaceuticamente aceitáveis podem serusados para fins terapêuticos, e, portanto, prefere-se referidos sais.

A expressão "sais farmaceuticamente aceitáveis" compreendesais com ácidos inorgânicos ou ácidos orgânicos, como ácido clorídrico, ácidobromídrico, ácido iodídrico, ácido sulfórico, sulfâmico, ácido fosfórico, ácidonítrico, ácido fosforoso, ácido nitroso, ácido cítrico, ácido fórmico, ácidoacético, ácido oxálico, ácido maleico, ácido láctico, ácido tartárico, ácidofumárico, ácido benzóico, ácido mandélico, ácido cinâmico, ácido pamóico,ácido esteárico, ácido glutâmico, ácido aspártico, ácido metanossulfônico,ácido etanodissulfônico, ácido p-toluenossulfônico, ácido salicílico, ácidosuccínico, TFA, e análogos, que podem ser não-tóxicos para organismosvivos, ou, no caso de o composto de Fórmula (I) ter natureza ácida, com umabase inorgânica, como uma base alcalina ou de metal alcalino-terroso, p. ex.hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, hidróxido de cálcio e análogos.Para outros exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis, pode-se referir a"Salt selection for basic drugs" [Seleção de sais para drogas básicas], Int. J.Pharm. (1986), 33,201-217.

Átomos de carbono assimétricos de um composto de Fórmula(I), se presentes, podem existir na configuração (R) ou (S). Substituintes emuma dupla ligação ou um anel podem estar presentes em forma eis- (= Z-) outrans (= E-). Portanto, os compostos de Fórmula (I) podem estar presentescomo misturas de isômeros ou, de preferência, como isômeros puros.Misturas podem ser separadas de uma maneira conhecida per se, p. ex., pormeio de cromatografia de coluna, cromatografia de camada fina,cromatografia líquida de alto desempenho, ou cristalização.

i) A invenção refere-se a compostos de piridina inéditos daFórmula (I),<formula>formula see original document page 7</formula>

Fórmula (I)

sendo que

A representa *-CO-CH=CH-, *-CO-CH2CH2-,

<formula>formula see original document page 7</formula>

sendo que os asteriscos indicam a ligação que está ligada aogrupo B de Fórmula (I);

<formula>formula see original document page 7</formula>

B representa

ou

R1 representa hidrogênio, metila, etila ou cloro;

R2 representa metila, etila, n-propila ou cloro;

R3 e R4 representam metila;

ou R3eR4 representam etila;

ou R3 e R4 em conjunto com o átomo de carbono a que estãoligados, formam um anel ciclopropila, ciclobutila ou ciclopentila;

R5 representa hidrogênio, metila, etila, propila, isopropila, outrifluorometila; e

R6 representa metila ou etila;

e seus sais.ii) Uma concretização particular da invenção refere-se aderivados de piridina de acordo com a concretização i), sendo que Arepresenta -CO-CH2-CH2-, sendo que o asterisco indica a ligação que estáligada ao grupo B de Fórmula (I).

iii) Outra concretização particular da invenção refere-se aderivados de piridina de acordo com a concretização i), sendo que Arepresenta -CO-CH=CH-, sendo que o asterisco indica a ligação que estáligada ao grupo B de Fórmula (I).

iv) Outra concretização particular da invenção refere-se aderivados de piridina de acordo com a concretização í), sendo que Arepresenta

sendo que os asteriscos indicam a ligação que está ligada aogrupo B de Fórmula (I).

v) Uma concretização preferida da invenção refere-se aderivados de piridina de acordo com a concretização i),sendo que A representa

vi) Uma concretização preferida da invenção refere-se aderivados de piridina de acordo com a concretização i),sendo que A representasendo que o asterisco indica a ligação que está ligada ao grupoB de Fórmula (I).

vii) Outra concretização preferida da invenção refere-se aderivados de piridina de acordo com qualquer uma das concretizações de i) a

vi), sendo que R1 e R2 representam um grupo metila.

viii) Outra concretização preferida da invenção refere-se aderivados de piridina de acordo com qualquer uma das concretizações de i) a

vi), sendo que R1 representa um grupo metila e R2 representa um grupo etila.

ix) Outra concretização particular da invenção refere-se aderivados de piridina de acordo com qualquer uma das concretizações de i) aviii), sendo que B representa

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e sendo que R3, R4 e R5 sao como definido para Formula (I) naconcretização i).

x) Outra concretização preferida da invenção refere-se aderivados de piridina de acordo com qualquer uma das concretizações de i) aviii), sendo que B representaou etila.

xi) Outra concretização particular da invenção refere-se aderivados de piridina de acordo com qualquer uma das concretizações de i) aviii), sendo que B representa

<formula>formula see original document page 10</formula>

e sendo que R6 é como definido para Fórmula (I) naconcretização i).

xii) Outra concretização preferida da invenção refere-se aderivados de piridina de acordo com qualquer uma das concretizações de i) aviii), sendo que B representa

<formula>formula see original document page 10</formula>

e sendo que R6 representa metila.

xiii) Uma concretização particularmente preferida da invençãorefere-se a derivados de piridina de acordo com a concretização i), sendo queA representa *-CO-CH=CH-, *-CO-CH2CH2-,

<formula>formula see original document page 10</formula>

ou

sendo que os asteriscos indicam a ligação que está ligada aogrupo B de Fórmula (I);

R1 representa metila, etila ou cloro;

R2 representa metila ou etila;

R3 e R4 representam metila;

ou

R3eR4 representam etila; e

R5eR6 representam metila ou etila.

xiv) Outra concretização particularmente preferida dainvenção refere-se a derivados de piridina de acordo com a concretização i),sendo que

A representa *-CO-CH=CH-, *-CO-CH2CH2-,

<formula>formula see original document page 11</formula>

sendo que o asterisco indica a ligação que está ligada ao grupoB de Fórmula (I);

R1 representa metila, etila ou cloro;

R2 representa metila ou etila;

R3 e R4 representam metila;

ou R3eR4 representam etila; e

R5 e R6 representam metila ou etila.

xv) Derivados de piridina de acordo com Fórmula (I)específicos muito preferidos são:

3-(2-etil-6-metil-piridin-4-il)-1 -((1 aS,5aR)-1,1,2-trimetil-l,la,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-propenona,

1-(3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-1-il)-3-(2-etil-6-metil-piridin-4-il)-propenona,

3 -(2-etil-6-metil-piridin-4-il)-1 -((1 aS,5aR)-1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-propan-1 -ona,

1 -(3 -etil-5,5 -dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo [c]tiofen-1 -il)-3 -(2-etil-6-metil-pirídin-4-il)-propan-1 -ona,

2-etil-6-metil-4-[5-((laS,5aR)-1,1,2-trimetil-1, la,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-[l,3,4]oxadiazol-2-il]-piridina,

2,6-dietil-4-[5-(( 1 aS,5aR)-1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)- [1,3,4] oxadiazol-2-il] -piridina,

2-cloro-6-metil-4-[5-(( 1 aS,5aR)-1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-[1,3,4] oxadiazol-2-il]-piridina,

2,6-dimetil-4-[5-((l aS,5aR)-1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-[l,3,4]oxadiazol-2-il]-piridina,

2-etil-4-[5-(3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-1 -il)- [ 1,3,4] oxadiazol-2-il] -6-metil-piridina,

4-[5-(5,5-dietil-3-metil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-l-il)-[l,3,4]oxadiazol-2-il]-2-etil-6-metil-piridina,

4-[5-(3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-l-il)-[1,3,4]oxadiazol-2-il]-2,6-dimetil-piridina,

2,6-dimetil-4-[5-(3,5,5-trietil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-1 -il)- [ 1,3,4] oxadiazol-2-il] -piridina, e

2-cloro-4-[5-(3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-l-il)-[l,3,4]oxadiazol-2-il]-6-metil-piridina;

e sais destes compostos.

xvi) Derivados de piridina de acordo com Fórmula (I)específicos adicionais muito preferidos são:

2-etil-6-metil-4-[5-(l, 1,2-trimetil-l, la,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-[ 1,2,4]oxadiazol-3-il]-piridina, e

2-etil-4-[5-(3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-1 -il)- [ 1,2,4] oxadiazol-3 -il] -6-metil-piridina;

e sais destes compostos.

Os compostos de Fórmula (I) e seus sais farmaceuticamenteaceitáveis podem ser usados como drogas, p. ex. em forma de composiçõesfarmacêuticas para administração enteral, parenteral ou tópica. Eles podemser administrados, por exemplo, peroralmente, p. ex., em forma de tabletes,tabletes revestidos, drágeas, cápsulas de gelatina duras e moles, soluções,emulsões ou suspensões, por via retal, p. ex., em forma de supositórios,parenteralmente, p. ex., em forma de soluções injetáveis ou soluções deinfusão, ou topicamente, p. ex., em forma de ungüentos, cremes ou óleos.

A produção das composições farmacêuticas pode ser efetuadade uma maneira que é familiar a qualquer pessoa versada na arte (ver, porexemplo, Mark Gibson, Editor, Pharmaceutical Preformulation andFormulation, IHS Health Group, Englewood, CO, E.U.A., 2001; Remington,The Science and Practice of Pharmacy, 20a edição, Philadelphia College ofPharmacy and Science) mediante combinação dos compostos de Fórmula (I)descritos ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis, opcionalmente emcombinação com outras substâncias terapeuticamente valiosas, numa formade administração galênica com materiais de veículo líquidos ou sólidos,inertes, não-tóxicos, farmaceuticamente aceitáveis, vantajosos, e, se desejado,com adjuvantes farmacêuticos usuais.

As composições farmacêuticas compreendendo um compostode Fórmula (I) são úteis para a prevenção e/ou tratamento de doenças oudistúrbios associados com um sistema imune ativado.

Referidas doenças ou distúrbios são selecionados do grupo queconsiste de rejeição de tecidos, células ou órgãos transplantados; doenças doenxerto-versus-hospedeiro ocasionadas por transplante; síndromesautoimunes incluindo artrite reumatóide; lúpus sistêmico eritematoso;síndrome anti-fosfolipídeos; tiroidite de Hashimoto; tiroidite linfocítica;esclerose múltipla; miastenia grave; diabetes de tipo I; uveíte; episclerite;esclerite; doença de Kawasaki, uveo-retinite; uveíte posterior; uveíteassociada com doença de Behcet; síndrome de uveomeningite;encefalomielite alérgica; vasculopatia de aloenxerto crônica; doenças auto-imunes pós-infecciosas incluindo febre reumática e glomerulonefrite pós-infecciosa; doenças inflamatórias e hiperproliferativas inflamatórias; psoríase;artrite psoriática; dermatite atópica; miopatia; miosite; osteomielite; dermatitede contato; dermatite eczematosa; dermatite seborréica; líquen plano; pênfigo;penfigóide bolhoso; epidermólise bulosa; urticária; angioedema; vasculite;eritema; eosinofilica cutânea; acne; escleroderma; alopecia aerada;ceratoconjuntivite; conjuntivite vernal; ceratite; ceratite herpética; distrofiaepitelial corneal; leucoma corneal; pênfigo ocular; úlcera de Mooren; ceratiteulcerativa; esclerite; ofitalmopatia de Graves; síndrome de Vogt-Koyanagi-Harada; sarcoidose; alergias a pólen; doença obstrutiva reversível das viasaéreas; asma bronquial; asma alérgica; asma intrínseca; asma extrínseca; asmadevida a poeira; asma crônica ou inveterada; asma tardia e hiper-responsividade das vias aéreas; bronquiolite; bronquite; endometriose;ouchitis; úlceras gástricas; doenças do intestino isquêmico; doenças dointestino inflamatório; enterocolite necrotizante; lesões intestinais associadascom queimaduras térmicas; doença celiac; proctite; gastroenteriteeosinofilica; mastocitose; doença de Crohn; colite ulcerativa; dano vascularcausado por doenças isquêmicas e trombose; aterosclerose; coração gordo;miocardite; infarto cardíaco; síndrome de aortite; caquexia devida a doençaviral; trombose vascular; enxaqueca; rinite; eczema; nefrite intersticial;nefropatia induzida com IgA; síndrome de Goodpasture; síndrome hemolítica-urêmica; nefropatia diabética; glomeruloesclerose; glomerulonefrite; nefritetubulointersticial; cistite intersticial; miosite múltipla; síndrome de Guillain-Barré; doença de Meniere; polineurite; neurite múltipla; mielite; mononeurite;radiculopatia; hipertireodismo; doença de Basedow; tirotoxicose; aplasia decélulas vermelhas puras; anemia aplástica; anemia hipoplástica; púrpuratrombocitopênica idiopática; anemia hemolítica autoimune; trombocitopeniaautoimune; agranulocitose; anemia perniciosa; anemia megaloblástica;aneritroplasia; osteoporose; pulmão fibróide; pnèumonia intersticialidiopática; dermatomiosite; leucoderma vulgar; ictiose vulgar; sensibilidadefotoalérgica; linfoma de células T cutâneo; poliarterite nodosa; coréia deHuntington; coréia de Sydenham; miocardose; miocardite; escleroderma;granuloma de Wegener; síndrome de Sjogren; adipose; fascite eosinofílica;lesões da gengiva, periodonto, osso alveolar, substância óssea dental; alopeciade padrão masculino ou alopecia senil; distrofia muscular; pioderma;síndrome de Sezary; hipofisite; insuficiência adrenal crônica; doença deAddison; lesão de isquemia-reperfusão de órgãos que ocorre na preservação;choque por endotoxina; colite pseudomembranosa; colite causada por drogaou radiação; insuficiência renal aguda isquêmica; insuficiência renal crônica;câncer de pulmão; malignidade de origem linfóide; leucemias linfocíticasaguda ou crônica; linfoma; enfisema pulmonar; catarata; siderose; retinitepigmentosa; degeneração macular senil; formação de escaras no vítreo;queimadura corneana por álcali; eritema dermatite; dermatite bolhosa;dermatite por cimento; gingivite; periodontite; sepsia; pancreatite; doença dasartérias periféricas; carcinogênese; tumores de câncer sólidos; metástase decarcinoma; hipobaropatia; hepatite autoimune; cirrose biliar primária;colangite esclerosante; ressecção parcial do fígado; necrose aguda do fígado;cirrose; cirrose alcoólica; falha hepática; falha hepática fulminante; falhahepática de início tardio; e falha do fígado "aguda a crônica".

Doenças ou distúrbios preferidos a serem tratados e/ouprevenidos com os compostos de Fórmula (I) são selecionados do grupo queconsiste de rejeição de órgãos transplantados, como rim, fígado, coração,pulmão, pâncreas, córnea, e pele; doenças do enxerto-versus-hospedeiroocasionadas por transplante de célula tronco; síndromes autoimunes incluindoartrite reumatóide, esclerose múltipla, doenças inflamatórias do intestino,como doença de Crohn e colite ulcerativa, psoríase, artrite psoriática,tireoidite, como tireoidite de Hashimoto, uveo-retinite; doenças atópicas,como rinite, conjuntivite, dermatite; asma; diabete de tipo I; doenças auto-imunes pós-infecciosas incluindo febre reumática e glomerulonefrite pós-infecciosa; cânceres sólidos e metástase de tumor.

Doenças ou distúrbios particularmente preferidos a seremtratados e/ou prevenidos com os compostos de Fórmula (I) são selecionadosdo grupo que consiste de rejeição de órgãos transplantados selecionadosdentre rim, fígado, coração e pulmão; doenças do enxerto-versus-hospedeiroocasionadas por transplante de célula tronco; síndromes autoimunesselecionadas dentre artrite reumatóide, esclerose múltipla, psoríase, artritepsoriática, doença de Crohn, e tireoidite de Hashimoto; e dermatite atópica.

A presente invenção também se refere a um método para aprevenção ou tratamento de uma doença ou distúrbio mencionado aqui,compreendendo administrar a um sujeito uma quantidade farmaceuticamenteativa de um composto de Fórmula (I).

Adicionalmente, compostos da Fórmula (I) também são úteis,em combinação com um ou vários agentes imunomoduladores, para aprevenção e/ou tratamento das doenças e distúrbios mencionados aqui. Deacordo com uma concretização preferida da invenção, referidos agentes sãoselecionados do grupo que consiste de imunossupressivos, corticosteróides,NSAID1S (agentes antiinflamatórios não-esteróides [non-steroidantiinflammatory agents]), drogas citotóxicas, inibidores de moléculas deadesão, citocinas, inibidores de citocinas, antagonistas de receptor decitocinas e receptores de citocinas recombinantes.

A presente invenção também se refere ao uso de um compostode Fórmula (I) para a preparação de uma composição farmacêutica,opcionalmente para uso em combinação com um ou vários agentesimunomoduladores, para a prevenção e/ou tratamento das doenças edistúrbios mencionados aqui.

A presente invenção também se refere a pró-drogas de umcomposto de Fórmula (I) que se convertem in vivo ao composto de Fórmula(I) como tal. Qualquer referência a um composto de Fórmula (I) écompreendida, portanto, como referindo também às pró-drogascorrespondentes do composto de Fórmula (I), conforme apropriado evantajoso.

Os compostos de Fórmula (I) podem ser fabricados por meiodos métodos dados abaixo, por meio dos métodos dados nos Exemplos ou pormeio de métodos análogos. Condições de reação ótimas podem variar deacordo com os reagentes ou solventes particulares usados, mas referidascondições podem ser determinadas por uma pessoa versada na arte com oemprego de procedimentos de otimização de rotina.

Compostos da Fórmula (I) da presente invenção podem serpreparados de acordo com a seqüência geral de reações delineadas abaixo.Apenas algumas poucas das possibilidades sintéticas que levam a compostosde Fórmula (I) são descritas. Alguns casos dos grupos genéricos AeBpoderiam ser incompatíveis com o conjunto ilustrado nos esquemas de 1 até 7e, portanto, exigirão o uso de grupos protetores (GP). Grupos protetoresapropriados são conhecidos por uma pessoa versada na arte e incluem, p. ex.,um grupo benzila ou a trialquilsilila para proteger um álcool, um cetal paraproteger um diol, etc. Estes grupos protetores podem ser empregados deacordo com metodologia convencional (p. ex., T. W. Greene, P. G. M. Wuts,Protective Groups in Organie Synthesis, 3a edição, Wiley New York, 1991; P.J. Kocienski, Protecting Groups, Thieme Stuttgart, 1994). Para os fins destadiscussão, presumir-se-á que referidos grupos protetores encontram-se emseus lugares, se necessário.

No caso em que A representa -CO-CH=CH-, os compostos deFórmula (I) podem ser preparados reagindo-se um composto de Estrutura 2com um composto de Estrutura 3 na presença de uma base, como KOtBu,NaOMe, NaOEt, NaOH, KOH, NaHMDS, LDA ou LiHMDS como mostradono esquema 1 abaixo. Compostos de Fórmula (I) em que A representa -CO-CH2-CH2- podem ser preparados reagindo-se um composto de Fórmula (I) emque A representa -CO-CH=CH- com hidrogênio na presença de umcatalisador, como Pd/C, Pt/C, PtO2, etc. em um solvente, como EtOH, MeOH,THF, etc. E possível preparar um composto de Estrutura 2 por meio detratamento de um composto de Estrutura 1 com MeLi em um solvente, comoEt2O, THF, dioxano, a temperaturas entre -20 e 50°C.

<formula>formula see original document page 18</formula>

Esquema 1: Síntese de compostos de Fórmula (I), sendo que A representa-CO-CH=CH- ou -CO-CH2-CH2-

Compostos de Fórmula (I) que representam um derivado de([l,3,4]oxadiazol-2-il)-piridina são preparados reagindo-se um composto deEstrutura 4 em um solvente, como THF, dioxano, xileno, tolueno, benzeno,piridina, DMF, diclorometano, etc. à temperatura ambiente, temperaturaselevadas ou usando irradiação de microondas na presença ou ausência deauxiliares, como ácidos (p. ex., TFA, ácido acético, HCl, etc.), bases (p. ex.,NaH, NaOAc, Na2CO3, K2CO3, DBU, TEA, etc.), sais de tetraalquilamônio,ou agentes removedores de água (p. ex., reagente de Burgess, SOCl2, POCl3,PCl5, P4O10, peneiras moleculares, BF3 etc.) (Lit: p. ex., C.T. Brain, J.M. Paul,Y Loong, P.J. Oakley, Tetrahedron Lett. 40 (1999) 3275-3278; F. Bentiss, M.Lagrenée, D. Barbry, Synthetic Comm. 31 (2001) 935-938; V.K. Tandon, R.B.Chhor, Synthetic Comm. 31 (2001) 1727-1732) como mostrado no esquema 2abaixo. Compostos de Estrutura 4 podem ser preparados reagindo-se umcomposto de Estrutura 1 com um composto de Estrutura 5 em um solvente,como DMF, THF, DCM etc. na presença ou ausência de um ou mais agentede acoplamento, como TBTU, DCC, EDC/HOBt, HBTU, CDI, PyBOP etc. ena presença ou ausência de uma base, como TEA, DIPEA, NaH, K2CO3, etc.(Lit: p. ex., A. Hamze, J.F. Hernandez, P. Fulcrand, J. Martinez, J. Org.Chem. 68 (2003) 7316-7321). Alternativamente, compostos de Estrutura 4podem ser preparados reagindo-se um composto de Estrutura 6 com umcomposto de Estrutura 7 usando-se os métodos descritos acima.

<formula>formula see original document page 19</formula>

Esquema 2: Síntese de compostos de Fórmula (I) que representam umderivado de ([l,3,4]oxadiazol-2-il)-piridina

Compostos de Fórmula (I) que representam um derivado de([l,2,4]oxadiazolil)-piridina são preparados como mostrado no esquema 3 pormeio de reação de um composto de Estrutura 8 ou Estrutura 9,respectivamente, em um solvente, como xileno, tolueno, benzeno, piridina,DMF, DCM etc. à temperatura ambiente, temperaturas elevadas ou usando-seirradiação de microondas na presença ou ausência de auxiliares, como ácidos(p. ex., TFA, ácido acético, HCl, etc.), bases (p. ex., NaH, NaOAc, Na2CO3,K2CO3, TEA, etc.), sais de tetraalquilamônio ou agentes removedores de água(p. ex., cloreto de oxalila, um anidrido de ácido carboxílico, POCl3, PCl5,P4O10, peneiras moleculares, etc.) (Lit: p. ex., A. R. Gangloff, J. Litvak, E. J.Shelton, D. Sperandio, V. R. Wang, K. D. Rice, Tetrahedron Lett. 42 (2001),1441-1443; T. Suzuki, K. Iwaoka, N. Imanishi, Y. Nagakura, K. Miyta, H.Nakahara, M. Ohta, T. Mase, Chem. Pharm. Bull 47 (1999), 120-122; R. F.Poulain, A. L. Tartar, B. P. Déprez, Tetrahedron Lett. 42 (2001), 1495-1498;R. M. Srivastava, F. J. S. Oliveira, D. S. Machado, R. M. Souto-Maior,Synthetic Commun. 29 (1999), 1437-1450; E. O. John, J. M. Shreeve,Inorganic Chemistry 27 (1988), 3100-3104; B. Kaboudin, K. Navaee,Heterocycles 60 (2003), 2287-2292). Compostos de Estrutura 8 podem serpreparados reagindo um composto de Estrutura 1 com um composto deEstrutura 10 usando agente de acoplamento, como TBTU, como descritoantes. Compostos de Estrutura 9 podem ser preparados reagindo um compostode Estrutura 11 com um composto de Estrutura 7 usando agente deacoplamento, como TBTU como descrito acima.

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Esquema 3: Síntese de compostos de Fórmula (I) que representam umderivado de ([l,2,4]oxadiazolil)-piridinaIntermediários de tiofeno usados nos esquemas de 1 a 3 acimasão sintetizados como mostrado no esquema 4 abaixo. Compostos deEstrutura 6 são preparados a partir de ácidos tiofeno ácidos carboxílicos deEstrutura 1 por meio de tratamento com um Agente ativador de ácido, comoEDC/HOBt, TBTU, SOCl2 ou análogos, e hidrazina. Assume-se que hidrazinapode ser protegida em formar de t-butil éster do ácido hidrazina-carboxílicoou benzil éster do ácido hidrazinacarboxílico, sendo que o grupo protetor éremovido por meio de métodos bem conhecidos na arte, em uma segundaetapa. Compostos de Estrutura 11 podem ser preparados reagindocianotiofenos de Estrutura 12 com hidroxilamina ou um de seus sais em umsolvente, como MeOH, EtOH, piridina, etc. na presença ou ausência de umabase, como Na2CO3, K2CO3, TEA, etc. (Lit: p. ex., T. Suzuki, K. Iwaoka, N.Imanishi, Y. Nagakura, K. Miyta, H. Nakahara, M. Ohta, T. Mase, Chem.Pharm. Bull Al (1999), 120-122; J. Cui, D. Crich, D. Wink, M. Lam, A. L.Rheingold, D. A. Case, W. T. Fu, Y. Zhou, M. Rao, A. J. Olson, M. E.Johnson, Bioorg. Med. Chem. 11 (2003), 3379-3392; R. Miller, F. Lang, Z. J.Song, D. Zewge, WO 2004/035538 (Merck & Co., Inc., USA); B. Kaboudin,K. Navaee, Heterocycles 60 (2003), 2287-2292). Cianotiofenos de Estrutura12 podem ser preparados em uma seqüência de três etapas a partir de ácidostiofeno ácidos carboxílicos de Estrutura 1. Na primeira etapa, amidas de ácidotiofeno ácidos carboxílicos podem ser obtidas por meio de tratamento deácidos tiofeno carboxílicos de Estrutura 1 com um agente ativador de ácido,como EDC/HOBt, TBTU, SOCl2 ou análogos, e seguido de tratamento comamônia. Cianotiofenos de Estrutura 12 podem ser preparados a partir deamidas de ácido tiofeno carboxílico por meio de desidrogenação usandoagentes, como anidrido de TFA e piridina em um solvente, como DCM.

<formula>formula see original document page 21</formula>

Esquema 4: Síntese de intermediários de tiofeno

Ácidos tiofeno carboxílicos de Estrutura 1 são sintetizadoscomo mostrado no esquema 5 abaixo. O composto de Estrutura 1 pode serpreparado reagindo um composto de Estrutura 13 com uma base aquosa,como NaOH aq., LiOH, KOH aq., etc. ou um ácido, como HCl aq., TFA, etc.em um solvente, como água, EtOH, MeOH, THF, etc. ou misturas dosmesmos.

Os compostos de Estrutura 13 são preparados tratando-se umcomposto de Estrutura 14 ou um composto de Estrutura 15 com uma basenão-aquosa, como NaOMe, NaOEt, KOtBu, DBU, etc. em um solvente, comoMeOH, EtOH, THF, DMF, etc. ou misturas dos mesmos à temperaturaambiente ou, de preferência, a temperaturas elevadas. Os compostos deEstrutura 14 são preparados tratando um composto de Estrutura 16 com uméster de ácido 2-mercaptoacético na presença de a base tal como a NaH5NaOEt, NaOMe, KOtBu, etc. in THF, dioxano, DMF, EtOH, MeOH, etc. oumisturas dos mesmos. De forma análoga, os compostos de Estrutura 15 sãopreparados tratando um composto de Estrutura 19 com um éster de ácido 2-mercaptoacético como descrito antes. Adicionalmente, os compostos deEstrutura 1 também podem ser preparados em um procedimento de três etapase um só vaso, partindo de um composto de Estrutura 16 ou um composto deestrutura 19 de acordo com a seqüência de reação acima. Nitrilas de Estrutura12 podem ser preparados por meio de métodos análogos a partir de umcomposto de Estrutura 16 ou um composto de Estrutura 19 substituindo oéster de ácido 2-mercaptoacético por 2-mercaptoacetonitrila preparado in situa partir de S-acetilmercaptoacetonitrila (Lit: p. ex., W.-Y. Ren, K.V.B. Rao,R.S.Klein, J. Heterocyclic Chem. 23 (1986), 1757-1763).

<formula>formula see original document page 22</formula>

Esquema 5: Síntese de compostos de Estrutura 1

Os compostos de Estrutura 16 são preparados reagindo umcomposto de Estrutura 17 com um agente clorador, como cloreto de oxalila,em um solvente, como DCM, CHCl3, THF, etc. (Lit. p. ex., R. E. Mewshaw,Richard E. Tetrahedron Lett. 30 (1989), 3753-3756; F. A. Lakhvich, T. S.Khlebnikova, A. A. Akhrem, Zhurnal Organicheskoi Khimii 25 (1989), 2541-2549). Os compostos de Estrutura 17 podem ser preparados acilando-se umcomposto de Estrutura 18 com um agente acilador apropriado, como formiatode etila ou metila, acetato de metila ou etila, proprionato de metila ou etila,cloroformiato, cloreto de acetila, etc. na presença de uma base, como KOtBu,NaOMe, NaH, LDA, etc. em um solvente, como THF, tolueno, EtOH etc. atemperaturas entre 0 e 60°C. (Lit. p. ex., Ch. Kashima, S. Shibata, H.Yokoyama, T. Nishio, Journal of Heterocyclic Chemistry 40 (2003), 773-782;I. Yavari, Issa, M. Bayat, Tetrahedron 59 (2003), 2001-2005; J. P.Konopelski, J. Lin, P. J. Wenzel, H. Deng, G. I. Elliott, B. S. Gerstenberger,Organie Letters 4 (2002) 4121-4124; C. Wiles, P. Watts, S. J. Haswell, E.Pombo-Villar, Tetrahedron Letters 43 (2002), 2945-2948; R. Faure, A.Frideling, J.-P. Galy, I. Alkorta, J. Elguero, Heterocyeles 57 (2002) 307-316;via imina: M. Hammadi, D. Villemin, Synthetie Communications 26 (1996)2901-2904). Os compostos de Estrutura 18 ou são comercialmente obteníveisou são preparados de acordo com procedimentos conhecidos por uma pessoaversada na arte (Lit. p. ex., M. E. Flaugh, T. A. Crowell, D. S. Farlow,Journal of Organie Chemistry 45 (1980) 5399-5400; A. M. Badger, M. J.Dimartino, C. K. Mirabelli, E. N. Cheeseman, J. W. Dorman, D. H. Picker, D.A. Schwartz, Eur. Pat. Appl. EP 310321 A2 (1989); N. R. Natale, R. O.Hutchins, Organie Preparations and Proeedures International 9 (1977), 103-108; L. M. Rice, B. S. Sheth, J. W. Wheeler, Journal of HeterocyclieChemistry 10 (1973) 731-735).

Os compostos de Estrutura 19 podem ser preparados partindode (+)-3-careno de acordo com os procedimentos dados na literatura (W.Cocker, D. H. Grayson, Tetrahedron Lett. 51 (1969), 4451-4452; S.Lochynski, B. Jarosz, M. Walkowicz, K. Piatkowski, J. Prakt. Chem.(Leipzig) 330 (1988), 284-288; M. Walkowicz, H. Kuczynsky, C. Walkowicz,Roczniki Chemii Ann. Soe. Chim. Polonorum 41 (1967), 927-937; H.Kuczynski, M. Walkowicz, C. Walkowicz, K. Nowak, I. Z. Siemion, RoeznikiChemiiAnn. Soe. Chim. Polonorum, 38 (1964), 1625-1633; A.V. Pol, V. G.Naik, H. R. Sonawane, Ind. J. Chem. Seet. B, 19 (1980) 603-604; S. A.Popov, A. Yu. Denisov, Yu. V. Gatilov, I. Yu. Bagryanskaya e A. V.Tkachev, Tetrahedron Asymmetry 5 (1994), 479-489; S. A. Popov, A. V.Tkachev, Synthetie Commun. 31 (2001), 233-243).

Os compostos de Estrutura 1 podem ser preparados partindodo (1S, 5R)-estereoisômero puro de Estrutura 19 ((lS,5R)-isômero de 2-[l-cloro-etilideno]-6,6-dimetil-biciclo[3,l,0]hexan-3-ona) que pode serpreparado partindo de (+)-3-careno comercialmente obtenível de acordo comos procedimentos dados na literatura (p. ex., S. A. Popov, A. Yu. Denisov,Yu. V. Gatilov, I. Yu. Bagryanskaya e A. V. Tkachev, TetrahedronAsymmetry 5 (1994), 479-489; S. A. Popov, A. V. Tkachev, SyntheticCommun. 31 (2001), 233-243).

<formula>formula see original document page 24</formula>

em que R5 = H em que

R5 = metila, etila, propila, isopropila

Esquema 6: Síntese de compostos de Estrutura 1, sendo que R5 representa umgrupo metila, etila, propila, ou um grupo isopropila

Os compostos de Estrutura 1 em que R5 representa um grupometila, etila, propila, ou um grupo isopropila também podem ser preparadosde acordo com o Esquema 6 a partir de um composto de Estrutura 1, sendoque R5 representa hidrogênio reagindo-se o composto referido por último comum excesso de uma base forte, como n-BuLi, t-BuLi, LDA em um solvente,como THF, Et2O5 etc., seguido de um agente alquilador apropriado (p. ex.,iodeto de metil-, etil-, propila, Lit. p. ex., W.-D. Liu, C.-C. Chi, I.-F. Pai, A.-T. Wu, W.-S. Chung, Journal of Organic Chemistry, 67 (2002) 9267-9275;D. W. Knight, A. P. Nott, Tetrahedron Letters 21 (1980) 5051-5054; R. Raap,Canadian Journal of Chemistry 49 (1971) 2155-2157).

Intermediários de piridina usados nos esquemas de 1 a 3 acimasão sintetizados como mostrado no esquema 7 abaixo. Ácidos isonicotínicosde Estrutura 7 são comercialmente obteníveis ou são preparados por meio demétodos bem conhecidos na arte. Ácidos de Estrutura 7 podem ser reduzidosa piridina-4-carbaldeídos de Estrutura 3 por meio de métodos bem conhecidosna arte, como reagir o ácido com agentes redutores, como DIBA1H, a baixatemperatura em solvente apróticos, como DCM ou THF. Alternativamente,piridina-4-carbaldeídos de Estrutura 3 podem ser obtidos em uma seqüênciade duas etapas por meio de redução de ácidos de Estrutura 7 a 4-hidroximetil-piridinas com reagentes bem conhecidos, como BH3 em THF ou LiAlH4 emsolventes apróticos, como DCM ou THF. 4-Hidroximetil-piridinas podem seroxidados a piridina-4-carbaldeídos de Estrutura 3 por meio de métodos bemconhecidos na arte, como tratamento com MnO2 em solventes, como DCM ouCHCl3, oxidação de Swern ou oxidação de Dess-Martin.

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Esquema 7: Síntese de intermediários de piridinaHidrazidas de ácido isonicotínico de Estrutura 5 saopreparadas a partir de ácidos isonicotínicos de Estrutura 3 por meio detratamento com hidrazina por meio de métodos análogos como descrito noesquema 4 anteriormente. Assume-se que a hidrazina pode ser protegida emformar de t-butil éster do ácido hidrazina-carboxílico ou benzil éster do ácidohidrazina-carboxílico, sendo que o grupo protetor é removido por meio demétodos bem conhecidos na arte em uma segunda etapa. Hidroxiamidinas deEstrutura 9 podem ser preparadas reagindo-se isonicotinonitrilas de Estrutura20 com hidroxilamina ou um de seus sais por meio de métodos análogoscomo descrito no esquema 4 previamente. Isonicotinonitrilas de Estrutura 20são comercialmente obteníveis ou bem conhecidos na arte. Eles podem serpreparados por meio de métodos bem conhecidos na arte, comodesidrogenação de amidas de ácido isonicotínico usando-se agentes, comoanidrido de TFA e piridina em um solvente, como DCM. Amidas de ácidoisonicotínico podem ser obtidas por meio de tratamento de ácidosisonicotínicos de Estrutura 7 com um agente ativador de ácido, comoEDC/HOBt, TBTU, SOCl2 ou análogos, seguido de tratamento com amônia.

Exemplos

Os exemplos a seguir ilustram a invenção, mas de formaalguma devem limitar o escopo da mesma.

Todas as temperaturas são indicadas em °C. Compostos sãocaracterizados por RMN 1H (300 MHz) ou RMN 13C (75 MHz) (VarianOxford; desvios químicos são dados em ppm relativamente ao solvente usado;multiplicidades: s = singleto, d = dubleto, t = tripleto; p = pentupleto, hex =hexeto, hept = hepteto, m = multipleto, br = largo, constante de acoplamentosão dadas em Hz); por LC-MS (Finnigan Navigator com bomba binária HP1100 Binary Pump e DAD, coluna: 4,6x50 mm, Zorbax SB-AQ, 5 \im, 120 Â,gradiente: de 5 a 95 % de acetonitrila em água, 1 min, com 0,04 % de TFA,fluxo: 4,5 ml/min), tR é dado em min; por TLC (placas de TLC da Merck,sílica-gel 60 F254); ou por ponto de fusão. Compostos são purificados pormeio de HPLC preparativa (coluna: X-terra RP18, 50x19 mm, 5 jim,gradiente: de 10 a 95 % de acetonitrila em água contendo 0,5 % de ácidofórmico) ou por HPLC (bomba Labomatic MD-80-100, detector LinearUVIS-201, coluna: 350x18 mm, Labogel-RP-18-5s-100, gradiente: 10 % de

metanol em água a 100 % metanol). Abreviaturas (como usada aqui): abs. absoluto aq. aquoso atm atmosférica Pf ponto de fusão BSA albumina de soro bovino BuLi butil lítio Reagente de Burgess Hidróxido de (metoxicarbonilsulfamoil trietilamônio CC cromatografia de coluna CDI 1,1 '-carbonildiimidazol CHO ovário de hâmster chinês d dia(s) DBU l,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno DCC dicicloexil carbodiimida DCM diclorometano DIBAlH Hidrato de diisobutilalumínio DIPEA diisopropil-etilamina DMF dimetilformamida DMSO sulfóxido de dimetila EA acetato de etila EDC N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etil-carbodiimida eq. equivalente(s) Et etilaEt2O éter de dietila

EtOH etanol

FC cromatografia de flash

Fe(acac)3 acetilacetonato de ferro(III)

GDP difosfato de guanosina

GTP trifosfato de guanosina

h hora(s)

HBTU hexafluorofosfato de 2-(lH-benzotriazol-l-il)-1,2,3,3 -tetrametilurônio

HEPES ácido N-(2-hidroxiethil)-piperazina-N'-2-etanossulfônico

HOBt 1-hidroxibenzotriazol

HPLC cromatografia líquida de alto desempenho

HV condições de alto vácuo

KOtBu t-butóxido de potássio

LC-MS cromatografia líquida - espectrometria demassa

LDA diisopropilamida de lítio

LiHMDS hexametildisilazida de lítio

Me metila

MeLi metil lítio

MeOH metanol

min minuto(s)

MPLC cromatografia líquida de média pressão

NaHMDS hexametildissilazida de sódio

NaOAc acetato de sódio

NaOEt etanolato de sódio

NaOMe metanolato de sódio

NMP N-metil-2-pirrolidonaPdJC paládio sobre carvão ativado

Pt/C platina sobre carvão ativado

PyBOP benzotriazol-1 -il-óxi-tris-pirolidino-fosfônio-hexafluoro-fosfato

RP fase invertida

ta temperatura ambiente

sat. saturado

SlP 1-fosfato de esfingosina

TBTU tetrafluoroborato de 2-( 1 H-benzotriazol-1 -il)-1,2,3,3-tetrametilurônio

TEA trietilamina

TFA ácido trifluoroacético

THF tetraidrofurano

TLC cromatografia de camada fina

tR tempo de retenção

UV ultra violeta

Preparação de intermediários

Exemplo A

Acido_(1 aS,5aR)-1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa|a]pentaleno-4-carboxílico

a) NaH (7,0 g, dispersão a 60 % em óleo mineral, 175 mmol) élavado com pentano (100 ml) antes de ser suspenso em THF (400 ml). Asuspensão é resfriada a O0C e adicionou-se uma solução de 2-mercaptoacetatode etila (12,62 g, 105 mmol) em THF (50 ml) ao longo de um período de 20min. A temperatura da reação é mantida a de 5 a 10°C. Uma vez completada aadição, o resfriamento é removido e mantém-se a agitação durante 30 min.Adiciona-se uma solução de (1S, 5R)-2-(l-cloro-(E)-etilideno)-6,6-dimetil-biciclo[3,l,0]hexan-3-ona (S. A. Popov, A. Yu. Denisov, Yu. V. Gatilov, I.Yu. Bagryanskaya e A. V. Tkachev, Tetrahedron Asymmetry 5 (1994), 479-489; S. A. Popov, A. V. Tkachev; Synthetic Commun. 31 (2001), 233-243)(12,93 g, 70 mmol) em THF (50 ml) à suspensão e a mistura resultante éagitada durante 1,5 h à temperatura ambiente. A mistura é filtrada, o filtrado éconcentrado a cerca de 100 ml, diluído com 1 M de NaOH aq. (100 ml) eextraído duas vezes com DCM (150 ml). Os extratos são secados sobreNa2SO4 e evaporados dando uma mistura bruta de E/Z mistura de etil éster doácido {1 -[(1 S,5R)-6,6-dimetil-3-oxo-biciclo[3,1,O]hexilideno]-etilsulfanil} -acético (18,2 g) como um óleo castanho. LC-MS: tR = 1,00 min, [M+l]+ =269,13. RMN 1H (CDCl3): 5 4,22 (q, J = 7,0 Hz, 2H ambos isômeros), 3,67(d, J = 15,8 Hz, IH isômero principal), 3,63 (d, J = 15,8 Hz, IH isômeromenor), 3,58 (d, J = 15,8 Hz, IH isômero principal), 3,54 (d, J = 15,8 Hz, 1H,isômero menor), 2,67 (dd, J = 6.4, 19,4 Hz, 1 H isômero menor), 2,60 (dd, J =7,0, 19,4 Hz, IH isômero principal), 2,58 (s, 3H isômero menor), 2,52 (s, 3Hisômero principal), 2,36-2,32 (m, IH isômero principal), 2,30-2,26 (m, IHisômero principal, IH isômero menor), 2,18 (d, J = 7,0 Hz, 1 H isômeromenor), 2,00 (d, J = 7,0 Hz, 1 H isômero principal), 1,95 (d, J = 7,6 Hz, IHisômero menor), 1,30 (t, J = 7,0 Hz, 3H isômero principal), 1,28 (t, J = 7,0Hz, 3H isômero menor), 1,18 (s, 3H isômero principal), 1,15 (s, 3H isômeromenor), 0,89 (s, 3H isômero menor), 0,85 (s, 3H isômero principal).

b) Uma solução de Na (1,70 g, 74,8 mmol) em EtOH abs. (75ml) é aquecida a 60°C antes de ser tratada com uma com uma solução de etiléster do ácido {l-[(lS,5R)-6,6-dimetil-3-oxo-biciclo[3,l,0]hex-(2Z)-ilideno]-etilsulfanil}-acético bruto (18,2 g, 68,0 mmol) em EtOH abs. (200 ml). Amistura é agitada a 75°C durante 20 min, depois resfriada à temperaturaambiente, diluída com 0,5 M de NaOH aq. (500 ml) e extraída com DCM(450 + 200 ml). Os extratos combinados são secados sobre Na2SO4, filtrados eo solvente é removido in vácuo. Isto dá etil éster do ácido (laS,5aR)-l,l,2-trimetil-l,la,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentaleno-4-carboxílico bruto(10,5 g) como um óleo amarelo com 87 % de pureza (LC-MS, UV 280 nm).LC-MS: tR = 1,11 min, [M+l]+ = 251,14; RMN 1H (CDCl3): 5 4,26 (q, J = 7,0Hz, 2H), 2,95 (dp, Jd = 18,8 Hz, Jp = 3,5 Hz, 1H), 2,79 (d, J = 19,3, 1H), 2,37(s, 3H), 1,89-1,84 (m, 2H), 1,34 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 1,12 (s, 3H), 0,72 (s, 3H).

c) A uma solução de etil éster do ácido (laS,5aR)-l,l,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentaleno-4-carboxílico bruto(10,3 g, 41,2 mmol) em EtOH (200 ml) adicionou-se uma solução de LiOHaq. 2N (300 ml). A mistura resultante é agitada a 70°C durante 1 h, resfriada àtemperatura ambiente e diluída com água (250 ml). A solução aq. é extraídatrês vezes com DCM (125 ml) antes de ser acidificada a pH 3 com adição deácido cítrico. A solução acidificada é extraída duas vezes com DCM (2x250ml). Estes segundos extratos são combinados, secados sobre Na2SO^ filtradose evaporados dando ácido (laS,5aR)-l,l,2-trimetil-l,la,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentaleno-4-carboxílico (7,0 g) como um sólido amarelo. LC-MS: tR = 0,95 min, [M+l]+ = 223,00. RMN 1H (CDCl3): 5 3,04-2,92 (m, 1H),2,83 (d, J = 19,3 Hz, 1H), 2,39 (s, 3H), 1,91-1,87 (m, 2H), 1,13 (s, 3H), 0,73(s, 3H).

Exemplo B

Acido 5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo|"cltiofeno-l-carboxílico

a) A uma solução de 4,4-dimetil-cicloex-2-enona (50 g, 403mmol) em EA (230 ml), adiciona-se uma suspensão de Pd/C (2,5 g, 10 % dePd) em EA. A suspensão é agitada à temperatura ambiente durante 2 h sob 1bar de H2. O catalisador é removido por filtração e o solvente do filtrado écuidadosamente evaporado dando 4,4-dimetil-cicloexanona (50 g) como umóleo incolor que se cristaliza lentamente; RMN 1H (CDCl3): 8 2,34 (t, J = 6,4Hz, 4H), 1,66 (t, J = 6,4 Hz, 4H), 1,09 (s, 6H).

b) A uma solução gelada de KOtBu (24,5 g, 109 mmol,solução a 50 % em t-butanol) em THF (700 ml), adiciona-se lentamenteformiato de etila (120 ml, 123 mmol). A mistura é agitada à temperaturaambiente durante 30 min antes de se adicionar uma solução de 4,4-dimetil-cicloexanona (50 g, 396 mmol) em formiato de etila (50 ml) e adiciona-seTHF (70 ml) ao longo de um período de 20 min. Uma vez completada aadição, continua-se agitando a de 15 a 20°C durante 30 min. A suspensãolaranja é despejada em solução de ácido cítrico aq. a 10 % (200 ml) esalmoura (200 ml) e extraída com EA (2x200 ml). Os extratos orgânicos sãolavados com NaOH aq. 0,2 N e salmoura, secados sobre Na2S04 e evaporadosà secura dando 5,5-dimetil-2-oxo-cicloexanecarbaldeído (52 g) como um óleoamarelo; LC-MS: tR = 0,89 min, [M+1+CH3CN]+ = 196,15.

c) A uma solução de 5,5-dimetil-2-oxo-cicloexanocarbaldeído(51 g, 331 mmol) em clorofórmio (250 ml), adiciona-se rapidamente cloretode oxalila (40 ml, 465 mmol). Após agitação durante de 3 a 4 min [em] gelo,segue-se adição de NaOH aq. 2 N (100 ml). A fase orgânica é separada e afase aquosa é extraída uma vez mais com clorofórmio. Os extratos orgânicoscombinados são lavados com água e secados sobre Na2SO^ O solvente éremovido in vácuo dando 2-clorometileno-4,4-dimetil-cicloexanona (50 g)como um óleo castanho; LC-MS: tR = 0,96 min.

d) A uma parte (300 ml) de uma solução recentementepreparada de sódio (21 g, 875 mmol) em EtOH (500 ml), adiciona-se etil ésterdo ácido mercaptoacético (50 ml). A solução resultante é adicionada ao longode um período de 10 min a uma solução de 2-clorometileno-4,4-dimetil-cicloexanona (50 g, 290 mmol) em THF (170 ml). A mistura apresentaexotermia (50°C). Uma vez completada a adição, a parte remanescente dasolução recentemente preparada de sódio em EtOH (200 ml) é adicionada àmistura de reação. A mistura é agitada à temperatura ambiente durante 15 minantes de se adicionar solução de LiOH aq. IN (300 ml), a solução é refluxadadurante 3 h, então agitada à temperatura ambiente durante 16 h. O THF eEtOH são removidos sob pressão reduzida e a solução escura restante éextraída com heptano/EA 3:1 (2x200 ml). A fase aquosa é acidificada pormeio de adição de ácido cítrico (30 g) e HCl 2 N aq. (200 ml) e, então,extraída três vezes com EA. Os extratos orgânicos combinados são lavadostrês vezes com solução aq. sat. de NaHCO3, secada sobre Na2S04 eevaporada. O óleo castanho escuro resultante é dissolvido em acetonitrila a60°C e cristalizado a 5°C. Os cristais são recolhidos, lavados com acetonitrilae secados dando ácido 5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofeno-l-carboxílico (31 g) como um pó ligeiramente cinza; LC-MS: tR = 0,95 min,[M+1+CH3CN]+ = 252,18; RMN 1H (CDCl3): ô 7,15 (s, 1H), 3,05 (t, J = 7,0Hz, 2H), 2,47 (s, 2H), 1,58 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 0,97 (s, 6H).

Exemplo C

Acido 3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofeno-l-carboxílico

A uma solução resfriada (-78°C) de ácido 5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofeno-l-carboxílico (960 mg, 4,57 mmol) em THF (19ml), adiciona-se t-BuLi (8 ml, solução 1,5 M em pentano). A mistura éagitada a -78°C durante 10 min antes de se adicionar iodeto de etila (3,80 g,24,37 mmol). A mistura de reação é agitada a -78°C durante 3 h. Adiciona-seágua/MeOH a 1:1 (8 ml) seguido de solução de ácido cítrico aq. a 10 % e amistura é extraída com EA. Os extratos orgânicos combinados são lavadoscom salmoura, secados sobre Na2SO4 e evaporados. O sólido remanescente ésuspenso em acetonitrila (6 ml), aquecido a 60°C, resfriado à temperaturaambiente, filtrado e secado dando ácido 3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofeno-l-carboxílico (640 mg) como um sólido ligeiramente bege;LC-MS: tR = 1,01 min, [M+l+CH3CN] = 280,10.

Exemplo D

Acido 5,5-dietil-4,5,6,7-tetraidro-benzorcltiofeno-1 -carboxílico

a) Uma mistura de 2-etilbutiraldeído (12,3 ml, 100 mmol),metilvinilcetona (5,6 ml, 67,3 mmol) e H2SO4 (0,07 ml) é agitada a 40°C deum dia para o outro. Adiciona-se outra porção de metilvinilcetona (5,6 ml,67,3 mmol) e H2SO4 e continua-se agitando a 40°C durante 2 d. A soluçãoamarela é diluída com clorofórmio e o solvente é removido novamente sobpressão reduzida. O produto bruto é purificado por meio de destilação a vácuodando 4,4-dietil-cicloex-2-enona (10,7 g) como um óleo incolor; Ponto deebuliçãoii mbar = 88°C; RMN 1H (CDCl3): δ 6,71 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,92 (d,J = 10,5 Hz, 1H), 2,42 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 1,84 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 1,57-1,40(m, 4H), 0,87 (t, J = 7,6 Hz, 6H).

b) Uma solução de 4,4-dietil-cicloex-2-enona (10,7 g, 70,5mmol) em EA (400 ml) é tratada com Pd/C (1,0 g, 10 % de Pd). A suspensãoé agitada à temperatura ambiente durante 24 h sob 1 bar de H2. A mistura éfiltrada, e o filtrado é evaporada dando 4,4-dietil-cicloexanona (11,7 g) como

um sólido incolor; RMN 1H (CD3OD): 5 2,32 (t, J = 7,0 Hz, 4H), 1,66 (t, J =7,0 Hz, 4H), 1,48 (q, J = 7,6 Hz, 4H), 0,88 (t, J = 7,6 Hz, 6H).

c) A uma suspensão de KOtBu (9,19 g, 81,9 mmol) em THF(250 ml), adiciona-se lentamente formiato de etila (24,8 ml, 260 mmol). Àmistura ligeiramente turva adiciona-se solução de 4,4-dietil-cicloexanona(11,5 g, 74,4 mmol) em formiato de etila (14 ml, 150 mmol). A misturaapresentando exotermia é resfriada com um banho de gelo. A suspensão decor vermelho escuro a castanha é agitada à temperatura ambiente durante 18 hantes de se adicionar ácido cítrico aq. a 10 %. A mistura é extraída com DCMe o solvente orgânico é secado sobre Na2SO4 e evaporado. O óleo castanho édissolvido em clorofórmio (150 ml) e tratado com cloreto de oxalila (11,3 g,89,1 mmol). Uma vez cessada a evolução de gás, a mistura é agitada durante1 h à temperatura ambiente. A solução escura é lavada com NaOH aq. 2 N,secada sobre Na2SO4 e evaporada deixando um óleo preto (11,2 g). Umasolução deste óleo em THF (60 ml) é adicionada a uma solução fria (3°C) deNaOEt (11,4 g, 167 mmol) e etil éster do ácido mercaptoacético (10,0 g, 83,6mmol) em EtOH (300 ml). A mistura de reação é agitada à temperaturaambiente durante 2 h antes de se adicionar outra porção de NaOEt (5,69 g,83,6 mmol). Continua-se agitando à temperatura ambiente durante 16 h e a60°C durante 2 h. A mistura é diluída com HCl 2 N aq. e é extraída duasvezes com DCM. Os extratos orgânicos combinados são secados sobreNa2SO,*, filtrados e o solvente é removido in vácuo dando etil éster do ácido5,5-dietil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofeno-l-carboxílico bruto (14,2 g) comoum óleo castanho; LC-MS: tR = 1,16 min.

d) Uma solução de etil éster do ácido 5,5-dietil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofeno-l-carboxílico (14,2 g, 53,38 mmol) em EtOH (250ml) e LiOH aq. 2 N (250 ml) é agitada a 650C durante 18 h. A mistura édiluída com NaOH aq. IN e extraída com Et2O. A fase aquosa é acidificada apH 2 com HCl 2 N aq. e extraída com DCM. Os extratos de DCMcombinados são secados sobre Na2SO^ filtrados, e o solvente é removido invácuo. O produto bruto (11,3 g) é purificado por meio de MPLC em RP-Cigsílica-gel dando ácido 5,5-dietil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofeno-l-carboxílico (2,93 g) como um óleo castanho; LC-MS: tR = 1,01 min,[M+l+CH3CN] = 280,19; RMN 1H (CDCl3): 5 7,12 (s, 1H), 2,99 (t, J = 7,0Hz, 2H), 2,46 (s, 2H), 1,59 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 1,40-1,20 (m, 4H), 0,84-0,74(m, 6H).

Exemplo E

Ácido 5,5-dietil-3-metil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[cltiofeno-l-carboxílicoAcido 5,5-dietil-3-metil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofeno-1 -carboxílico é preparado de ácido 5,5-dietil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofeno-1-carboxílico por meio de tratamento com t-BuLi seguido de iodeto de metilade forma análoga ao Exemplo C; LC-MS: tR = 1,03 min, [M+1+CH3CN] =294,27.

Exemplo F

Ácido 3,5,5-trietil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofeno-1 -carboxílicoÁcido 3,5,5-trietil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofeno-l-carboxílico é preparado a partir de ácido 5,5-dietil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofeno-l-carboxílico por meio de tratamento com t-BuLi seguido deiodeto de etila de forma análoga ao Exemplo C; LC-MS: tR = 1,07 min,[M+1+CH3CN] = 308,14.

Exemplo G

(1 aS,5aR> 1-(1,1,2-Trimetil-1.1 a.5,5a-tetraidro-3-tia-cicloproparalpentalen-4-il)-etanona

A uma solução de ácido (laS,5aR)-l,l,2-trimetil-l,la,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentaleno-4-carboxílico (220 mg, 1,00 mmol) emEt2O (10 ml) adiciona-se uma solução de MeLi (1,6 M, 1,4 ml, 2,10 mmol)em Et2O em tal ritmo que a mistura de reação venha a entrar em refluxosuave. Uma vez completada a adição, continua-se agitando à temperaturaambiente durante 30 min. A reação é resfriada bruscamente por meio deadição de NH4Cl aq. sat. (3 ml). A camada orgânica é separada, secada sobreNa2SO4 e o solvente é evaporado dando (1 aS,5aR)-1 -(1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-etanona (165 mg) como um óleoamarelo claro; LC-MS: tR = 1,03 min, [M+l]+ = 221,20; RMN 1H (CDCl3): 53,00 (ddd, J = 1,8, 4,7, 18,8 Hz, 1H), 2,80 (d, J = 18,8 Hz, 1H), 2,38 (s, 6H),1,93-1,90 (m, 2H), 1,14 (s, 3H), 0,74 (s, 3H).

Exemplo H

1 -(3-Etil-5,5-dimetil-4.5,6J-tetraidro-benzorcltiofen-1 -iO-etanona

A uma solução de ácido 3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofeno-l-carboxílico (2,10 g, 8,81 mmol) em Et2O (100 ml),adiciona-se uma solução de metil-lítio (11 ml, solução 1,6 M em Et2O), àtemperatura ambiente. A solução amarela clara é agitada à temperaturaambiente durante 15 min antes de se adicionar outra porção de metil-lítio (2ml). Prossegue-se agitando durante 15 min, adiciona-se mais uma porção demetil-lítio (1 ml), e a mistura é novamente agitada durante 15 min àtemperatura ambiente. A reação é resfriada bruscamente com água. A camadaorgânica é separada, lavada mais uma vez com água, secada sobre MgSO4 eevaporada. O produto bruto é purificado por meio de CC em sílica-geleluindo-se com heptano:EA a 7:3 dando l-(3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-1 -il)-etanona (1,65 g) como um sólido amarelo claro;LC-MS: tR = 1,00 min, [M+l] = 237,15; RMN 1H (CDCl3): 5 3,03 (t, J = 7,0Hz, 2H), 2,73 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 2,47 (s, 3H), 2,31 (s, 2H), 1,55 (t, J = 7,0Hz, 2H), 1,28 (t, J = 7,6 Hz, 3H), 0,97 (s, 6H).

Exemplo I

Hidrazida_de_ácido_1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5 a-tetraidro-3 -tia-ciclopropa[a]pentaleno-4-carboxílico

a) A uma solução de ácido (laS,5aR)-1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentaleno-4-carboxílico (2,2 g, 9,9 mmol), benziléster do ácido hidrazina-carboxílico (3,38 g, 20,4 mmol) e DIPEA (2 ml) emDCM (50 ml) adiciona-se TBTU (3,2 g, 10 mmol). A mistura é agitada àtemperatura ambiente durante 20 h. A mistura é diluída com Et2O (200 ml) eextraída com IM de NaOH aq. (3 x 50 ml) e IM de HCl aq. (2 x 50 ml). Afase orgânica é secada (Na2SO4), filtrada e evaporada dando benzil éster deácido N'-(l, 1,2-trimetil-1,1 a,5,5 a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentaleno-4-carbonil)-hidrazina-carboxílico; LC-MS: tR = 1,01 min, [M+l]+ = 371,25.

b) O resíduo é dissolvido em MeOH (100 ml) e adiciona-se 10% de Pd-C (600 mg). A mistura é hidrogenada a pressão atmosférica (balãode H2) durante 6 d. A mistura é filtrada e evaporada, o resíduo recolhido emHCl aq. IM (100 ml) e extraído com Et2O (2 x 30 ml). A fase aquosa ébasificada (KOH aq. a 33 %) e extraída com EA (5 x 50 ml). Os extratosorgânicos são secados (Na2SO4), filtrados, evaporados e secados dandohidrazida de ácido 1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5 a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentaleno-4-carboxílico como uma espuma amarela-castanhaclara; LC-MS: tR = 0,76 min, [M+l]+ = 237,20; RMN 1H (CD3OD): S 2,93(dd, J = 18,5, 5,9 Hz, 1 H), 2,80 (s, 2 H), 2,77 (d, J = 18,2 Hz, 1H), 2,33 (s, 3H), 1,86-1,92 (m, 2 H), 1,10 (s, 3 H), 0,70 (s, 3 H).

Exemplo J

Acido 2-etil-6-metil-isonicotínicoa) N,N-dimetilformamida-di-í-butil-acetal (19 ml, 80 mmol) éadicionado durante 40 min a uma suspensão quente (65°C, temperatura dofrasco) de ácido 2-cloro-6-metil-isonicotínico (3,40 g, 19,8 mmol) em toluenoseco (100 ml). A solução laranja transparente é agitada a 80°C durante 48 h,resfriada à temperatura ambiente e diluída com tolueno (100 ml). A solução élavada com água (2 x 40 ml), NaHCO3 aq. sat. (3 x 30 ml) e NaCl aq. sat. (25ml), secada (Na2SC^)5 filtrada e evaporada. O resíduo é purificado por meiode FC (SiO2, DCM-MeOH) dando t-butil éster do ácido 2-cloro-6-metil-isonicotínico.

b) Uma solução de brometo de etilmagnésio (recentementepreparada de brometo de etila (392 mg, 3,6 mmol) e magnésio (83 mg, 3,4mmol)) em Et2O (10 ml) é adicionada a uma solução resfriada (-40°C) eagitada mecanicamente de t-butil éster do ácido 2-cloro-6-metil-isonicotínico(0,76 g, 3,34 mmol), Fe(acac)3 (21,2 mg, 0,06 mmol) e NMP (0,6 ml) emTHF (60 ml). A mistura é aquecida à temperatura ambiente durante 0,5 h,diluída com Et2O (150 ml) e resfriada bruscamente com KHSO4 aq. (1 M, 40ml). As fases são separadas e a fase aquosa é extraída com Et2O (2 x 50 ml).

Os extratos orgânicos combinados são secados (MgSO^, filtrados eevaporados. O resíduo é purificado por meio de MPLC de fase invertidadando t-butil éster do ácido 2-etil-6-metil-isonicotínico; LC-MS: tR = 0,67min, [M+l]+ = 222,19; RMN 1H (CDCl3): 5 7,44 (s, 2 H), 2,83 (q, J= 7,6 Hz,2 H), 2,58 (s, 3 H), 1,59 (s, 9 H), 1,30 (t, J= 7,6 Hz, 3 H).

c) Uma solução de t-butil éster do ácido 2-etil-6-metil-isonicotínico em DCM (10 ml) é tratada com TFA (10 ml) e a mistura éagitada à temperatura ambiente durante 0,5 h. A mistura é evaporada e oresíduo secado sob HV dando ácido 2-etil-6-metil-isonicotínico; LC-MS: tR =0,28 min, [M+l]+ = 166,25.

Exemplo K

Acido 2,6-dietil-isonicotínicoAcido 2,6-dietil-isonicotínico é sintetizado a partir de ácido2,6-dieloro-isonicotínieo e brometo de etilmagnésio (2 eq.) de acordo com oExemplo J; LC-MS: tR = 0,42 min, [M+l]+ = 180,11.

Exemplo L

2-Etil-6-metil-piridina-4-carbaldeído

a) Uma suspensão de ácido 2-etil-6-metil-isonicotínico (2,73 g,16,5 mmol) em THF (30 ml) é tratada com borano em THF (1M, 33,1 ml) àtemperatura ambiente durante 15 h. A mistura é resfriada bruscamente comNa2CO3 aq. sat. (100 ml) e extraída com CHCl3 (5 x 50 ml). Os extratosorgânicos são secados (Na2SO4), filtrados e evaporados (50 mbar, 45°C)dando (2-etil-6-metil-piridin-4-il)-metanol bruto (2,18 g); LC-MS: tR = 0,80min, [M+l]+ = 205,32.

b) Adiciona-se uma solução de (2-etil-6-metil-piridin-4-il)-metanol bruto (453,6 mg, 3 mmol) em DCM (30 ml) e MnO2 (2,6 g, 30mmol). A mistura é agitada à temperatura ambiente durante 15 h, filtrada eevaporada (130 mbar, 45°C) dando 2-etil-6-metil-piridina-4-carbaldeído bruto(0,48 g); RMN 1H (CDCl3): 5 10,02 (s, 1 H), 7,37 (s, 2 H), 2,89 (q,J = 7,6Hz, 2 H), 2,64 (s, 3 H), 1,33 (t, J= 7,6 Hz, 3 H).

Exemplo M

Hidrazida de ácido 2-etil-6-metil-isonicotínico

a) A uma solução de ácido 2-etil-6-metil-isonicotínico (0,53 g,3,2 mmol), t-butil éster do ácido hidrazina carboxílico (0,43 g, 3,2 mmol) eDIPEA (0,85 ml) em DMF (10 ml) adiciona-se TBTU (1,23 g, 3,8 mmol). Amistura é agitada à temperatura ambiente durante 3 h. A mistura é diluída comNaOH aq. IM (50 ml) e extraída com Et2O-EA (1:1, 3 x 50 ml). Os extratosorgânicos são secados (Na2SO4), filtrados e evaporados dando t-butil éster doácido N-(2-etil-6-metil-piridina-4-carbonil)-hidrazina-carboxílico bruto.

b) Uma solução de t-butil éster do ácido N'-(2-etil-6-metil-piridina-4-carbonil)-hidrazina-carboxílico bruto em dioxano (10 ml) é tratadacom HCl 4M em dioxano (4 ml) durante 6 h. A mistura é evaporada, oresíduo recolhido em MeOH e o cloridrato de hidrazida de ácido 2-etil-6-metil-isonicotínico é precipitada de Et2O como espuma branca; RMN 1H(CD3OD): 8 8,16 (s, 1 H), 8,14 (s, 1 H), 3,15 (q,J = 7,6 Hz, 2 H), 2,87 (s, 3H), 1,46 (t, J= 7,6 Hz, 3 H).

Exemplo N

2-Etil-N-hidróxi-6-metil-isonicotinamidina

a) A uma solução de cloridrato de ácido 2-etil-6-metil-isonicotínico (1,85 g, 9,18 mmol, Exemplo J) em DMF (90 ml), adiciona-seDIPEA (6,3 ml, 4,75 g, 36,7 mmol)). A mistura é resfriada a O0C antes de seadicionar PyBOP (5,25 g, 10,1 mmol). Continua-se agitando a O0C durante 15min, depois adiciona-se NH3 (64 ml de uma solução 0,5 M em dioxano).

Continua-se agitando durante 2 h à temperatura ambiente antes que o solventeseja evaporado sob pressão reduzida. O resíduo é dissolvido em DCM (80 ml)e adiciona-se piridina (4,5 ml, 4,39 g, 55,5 mmol) seguido de anidrido de TFA(6,32 ml, 9,39 g, 44,7 mmol), a 0°C. A mistura é agitada à temperaturaambiente durante 2 h, antes de ser diluída com DCM, lavada com Na2CO3 aq.sat. A fase orgânica é secada sobre MgSO4, filtrada e evaporada. O produtobruto é purificado por meio de CC em sílica-gel eluindo-se com heptano:EA a4:1 dando 2-etil-6-metil-isonicotinonitrila (0,675 g) como um óleo amarelo;RMN 1H (CDCl3): 5 1,33 (t, J= 7,5 Hz, 3 H), 2,61 (s, 3 H), 2,86 (q, J= 7,5Hz, 2 H), 7,21 (s, 2 H).

b) A 0°C, adiciona-se cuidadosamente KOtBu (1,81 g, 16,2mmol) a metanol (25 ml). Adiciona-se então cloreto de hidroxilamina (963mg, 13,9 mmol) a esta solução. A suspensão é agitada durante 30 min antesde se adicionar 2-etil-6-metil-isonicotinonitrila (675 mg, 4,62 mmol). Amistura é refluxada durante 1 h, o solvente é evaporado. O resíduo édissolvido em água, extraído três vezes com EA. Os extratos orgânicos sãosecados sobre MgSO4, filtrados, evaporados e secados sob HV dando 2-etil-N-hidróxi-6-metil-isonicotinamidina (897 mg) como um pó branco, LC-MS:tR = 0,31 min, [M+l]+ = 180,32.

Preparação de produtos acabados

Exemplo 1

3-( 2-Etil-6-metil-piridin-4-il)-1-C (1 aS,5aRV1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-cicloproparalpentalen-4-il)-propenona

Uma solução de NaHMDS (2M em THF, 1,5 ml) é diluídacom THF (25 ml) e resfriada a -78°C. Uma solução de (laS,5aR)-l-(l,l,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-etanona (328,3mg, 1,5 mmol) em THF (2 ml) é adiciona-se lentamente e a mistura é agitadadurante 0,5 h. Uma solução de 2-etil-6-metil-piridina-4-carbaldeído (444,6mg, 3 mmol) em THF (1 ml) é adicionada lentamente. A mistura é agitadadurante 1 h a -78°C, depois aquecida a -30°C e agitada durante 1 h. A misturaé resfriado a -78°C e resfriada bruscamente com NaH2PO4 aq. IM (10 ml). Amistura é diluída com DCM (150 ml) e água (100 ml) e basificada com NaOHaq. 1M. As fases são separadas, a fase orgânica secada (Na2SO4), filtrada eevaporada. O resíduo é purificado por meio de MPLC (SiO2, EA-hexano)dando 3-(2-etil-6-metil-piridin-4-il)-1 -(1 aS,5aR)-( 1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-propenona (48 mg) como um óleoincolor; LC-MS: tR = 0,89 min, [M+l]+ = 352,36.

Adicionalmente, obtém-se 3-(2-etil-6-metil-piridin-4-il)-3-hidróxi-l-(laS,5aR)-(l, 1,2-trimetil-l, la,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-propan-l-ona (165 mg). Este material é tratado com cloreto demetanossulfonila (1 eq.) e TEA (2 eq.) em DCM (13 ml) a 0°C. A mistura édiluída com DCM (50 ml) e lavada com Na2CO3 aq. sat. (30 ml). A faseorgânica é secada (Na2SO4), filtrada e evaporada. O resíduo é purificado pormeio de MPLC (SiO2, gradiente de hexano-EA) dando 3-(2-etil-6-metil-piridin-4-il)-1 -((1 aS,5aR)-l, 1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-propenona (71 mg); LC-MS: tR = 0,89 min, [M+l]+ = 352,36.Exemplo 2

l-(3-Etil-5,5-dimetil-4,5,6,74etraidro-benzo[cltiofen-l-il)-3-(2-etil-6-metil-piridin-4-il)-propenona

l-(3-Etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-l-il)-3-(2-etil-6-metil-piridin-4-il)-propenona é preparado a partir de l-(3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-1 -il)-etanona e 2-etil-6-metil-piridina-4-carbaldeído de forma análoga ao Exemplo 1; LC-MS: tR = 0,95 min, [M+l]= 368,33.

Exemplo 3

3 -(2-Etil-6-metil-piridin-4-il V1 -(Y1 aS,5aR> 1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a1pentalen-4-il)-propan-1 -ona

Uma mistura de 3-(2-etil-6-metil-piridin-4-il)-l-(laS,5aR)-(1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-propenona(154 mg, 0,44 mmol) e 10 % de Pd em carvão (20 mg) em MeOH (30 ml) éhidrogenada à temperatura ambiente a 3 bar. A mistura é evaporada e oresíduo purificado por meio de TLC (S1O2, EA) dando 3-(2-etil-6-metil-piridin-4-il)-1 -((1 aS,5aR)-1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5 a-tetraidro-3 -tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-propan-l-ona (16 mg) como óleo incolor; LC-MS: tR = 0,86min, [M+l] = 354,32.

Exemplo 4

l-(3-Etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-l-il)-3-(2-etil-6-metil-piridin-4-il)-propan-1 -ona

l-(3-Etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-l-il)-3-(2-etil-6-metil-piridin-4-il)-propan-l-ona é preparada a partir de l-(3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-1 -il)-3-(2-etil-6-metil-piridin-4-il)-propenona de forma análoga ao Exemplo 3; LC-MS: tR = 0,90 min, [M+l] =370,38; RMN 1H (CD3OD): δ 6,97 (s, 2 H), 3,12 (t, J= 7,3 Hz, 2 H), 2,98 (t, J= 6,7 Hz, 2H), 2,96 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,74 (q, J= 7,3 Hz, 2H), 2,70 (q, J =7,6 Hz, 2H), 2,33 (s, 2 H), 2,44 (s, 3 H), 1,54 (t, J= 6,7 Hz, 2 H), 1,25 (t, J =7,6 Hz5 3 Η), 1,22 (t, J= 7,6 Hz, 3Η), 0,96 (s, 6 Η).

Exemplo 5

2-Etil-6-metil-4-f5-( (1 aS,5aR)-1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-cicloproparalpentalen-4-ilVri,3,41oxadiazol-2-ill-piridina

a) A uma mistura de ácido 2-etil-6-metil-isonicotínico (87,9mg, 0,53 mmol), hidrazida de ácido 1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentaleno-4-carboxílico (141,8 mg, 0,6 mmol), HOBt (100 mg,0,74 mmol) e TEA (0,42 ml) em DCM (5 ml) é adicionada a 0°C com EDC(200 mg, 0,78 mmol). A mistura é agitada durante 15 h sendo que duranteeste período é aquecida de O0C à temperatura ambiente. A mistura é resfriadabruscamente com EA (50 ml) e lavada com NaOH aq. IM (2 χ 10 ml). A faseorgânica é secada (Na2SO4), filtrada e evaporada dando 2-etil-6-metil-isonicotínico ACID N'-(l,l,2-trimetil-l,la,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentaleno-4-carbonil)-hidrazida bruta (350 mg); LC-MS: tR =0,80 min, [M+l] = 384,34.

b) Uma mistura de 2-etil-6-metil-isonicotínico ACID N1-(1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentaleno-4-carbonil)-hidrazida bruta (350 mg, ca. 0,5 mmol) e Reagente de Burgess (385 mg, 1,62mmol) em THF (5 ml) é aquecida a IlO0C durante 3 min em um forno demicroondas. A mistura é diluída com EA (10 ml) e extraída com Na2CO3 aq.sat. (2x5 ml). A fase orgânica é secada (Na2SO4), filtrada e evaporada dandoproduto bruto (50,9 mg) que é purificado por meio de HPLC dando 2-etil-6-metil-4-[5-((laS,5aR)-1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-[l,3,4]oxadiazol-2-il]-piridina (16 mg) como um pó amareloclaro; LC-MS: tR = 0,91 min, [M+l] = 366,21.

Exemplo 6

2,6-Dietil-4-r5-( (laS,5aRV 1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ntalen-4-il V Γ 1,3,41 oxadiazol-2-ill -piridina

2,6-Dietil-4-[5-(( 1 aS,5aR)-1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-[l,3,4]oxadiazol-2-il]-pirídina é sintetizado apartir de hidrazida de ácido 1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentaleno-4-carboxílico e ácido 2,6-dietil-isonicotínico de formaanáloga ao Exemplo 5; LC-MS: tR = 0,96 min, [M+l] = 380,34.

Exemplo 7

2-cloro-6-metil-4- Γ5-((1 aS,5aRVl. 1.2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a1pentalen-4-il)-n3,41oxadiazol-2-il1-piridina

2-cloro-6-metil-4-[5-(( 1 aS,5aR)-1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-[l,3,4]oxadiazol-2-il]-piridina ésintetizado a partir de hidrazida de ácido 1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentaleno-4-carboxílico e de ácido 2-cloro-6-metil-isonicotínico de forma análoga ao Exemplo 5; LC-MS: tR = 1,17 min, [M+l]= 374,22.

Exemplo 8

2,6-Dimetil-4- Γ5 -C (1 aS,5aR)-1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropara1pentalen-4-ilVrL3,4]oxadiazol-2-ill-piridina

A uma solução de 2-cloro-6-metil-4-[5-((laS,5aR)-1,1,2-trimetil-1,1 a, 5,5 a-tetraidro-3 -tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)- [ 1,3,4] oxadiazol-2-il]-piridina (62,9 mg, 0,17 mmol), Fe(acac)3 (6 mg) e NMP (20 mg) emTHF (5 ml) é adicionada uma solução de iodeto de metilmagnésio em THF(3M, 0,51 mmol) e a mistura é agitada à temperatura ambiente durante 15 h.

A mistura é resinada bruscamente com água (30 ml) e extraída com Et2O (2 χ50 ml). Os extratos orgânicos são secados (MgSO4), filtrados e evaporados. Oresíduo é purificado por meio de TLC (SiO2, EA-hexano) dando 2,6-dimetil-4-[5-((l aS,5aR)-1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5 a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-[1,3,4]oxadiazol-2-il]-piridina (28 mg); LC-MS: tR = 0,88 min, [M+l] =352,54.

Exemplo 9

2-Etil-4-r5-(3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzorc1tiofen-l-ilV[1,3,4] oxadiazol-2-ill -6-metil-piridina

a) A uma solução de ácido 3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofeno-l-carboxílico (114 mg, 0,48 mmol), cloridrato e hidrazida deácido 2-etil-6-metil-isonicotínico (120,5 mg, 0,48 mmol) e DIPEA (0,49 ml)em DMF (8 ml) adiciona-se TBTU (190 mg, 0,59 mmol). A mistura é agitadaà temperatura ambiente durante 15 h. A mistura é diluída com Et2O (50 ml) eextraída com NaOH aq. IM (2 χ 20 ml). Os extratos aq. são lavados com EA(2 χ 20 ml) e as fases orgânicas são secadas (MgSO4), filtradas e evaporadasdando N'-(2-etil-6-metil-piridina-4-carbonil)-hidrazida de ácido 3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofeno-l-carboxílico bruta; LC-MS: tR =0,83 min, [M+l] = 400,31.

b) Uma mistura de N'-(2-etil-6-metil-piridina-4-carbonil)-hidrazida de ácido 3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofeno-l-carboxílico bruta (289 mg, ca. 0,48 mmol) e Reagente de Burgess (367 mg,1,6 mmol) em THF (5 ml) é aquecida a 110°C durante 3 min em um forno demicroondas. A mistura é diluída com EA (50 ml) e extraída com NaOH aq.IM (2 χ 10 ml). A fase orgânica é secada (MgSO4), filtrada e evaporada. Oresíduo é purificado por meio de HPLC dando 2-etil-4-[5-(3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-l-il)-[l,3,4]oxadiazol-2-il]-6-metil-piridina(53 mg); LC-MS: tR = 0,96 min, [M+l] = 382,26.

Exemplo 10

4-[5-(5,5-Dietil-3-metil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-l-ilV[l,3,4]oxadiazol-2-il]-2-etil-6-metil-piridina

4- [5 -(5,5 -Dietil-3 -metil-4,5,6,7-tetraidro-benzo [c]tiofen-1 -il)-[l,3,4]oxadiazol-2-il]-2-etil-6-metil-piridina é sintetizado a partir de ácido5,5-dietil-3-metil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofeno- 1-carboxílico e cloridratode hidrazida de ácido 2-etil-6-metil-isonicotínico de forma análoga aoExemplo 9; LC-MS: tR = 0,98 min, [M+l] = 396,39.

Exemplo 114-r5-(3-Etil-5.5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzorc1tiofen-l-ilVri,3,41oxadiazol-2-ill-2,6-dimetil-piridina

4-[5-(3-Etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-l-il)-[l,3,4]oxadiazol-2-il]-2,6-dimetil-piridina é sintetizado a partir de ácido 3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofeno-l-carboxílico e cloridrato dehidrazida de ácido 2,6-dimetil-isonicotínico de forma análoga ao Exemplo 9;LC-MS: tR = 0,93 min, [M+l] = 368,44; RMN 1H (CD3OD): δ 7,66 (s, 2 H),3,09 (t, J= 6,7 Hz, 2 H), 2,80 (q, J= 7,6 Hz, 2 H), 2,60 (s, 6 H), 2,39 (s, 2 H),1,67 (t, J= 6,7 Hz, 2 H), 1,29 (t, J= 7,6 Hz, 3 H), 1,03 (s, 6 H).

Exemplo 12

2,6-Dimetil-4-r5-(3<5,5-trietil-4,5,6,7-tetraidro-benzorcltiofen-l-ilVΓ1,3,41oxadiazol-2-il1-piridina

2,6-Dimetil-4-[5-(3,5,5-trietil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-1-il)-[l,3,4]oxadiazol-2-il]-piridina é sintetizado a partir de ácido 3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofeno-l-carboxílico e cloridrato dehidrazida de ácido 2,6-dimetil-isonicotínico de forma análoga ao Exemplo 9;LC-MS: tR = 0,99 min, [M+l] = 396,28.

Exemplo 13

2-cloro-4-r5-('3-etil-5.5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzorc l_tiofen-l-il>Γ1,3,4]oxadiazol-2-il]-6-metil-piridina

2-Cloro-4- [5 -(3 -etil-5,5 -dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo [c]tiofen-l-il)-[l,3,4]oxadiazol-2-il]-6-metil-piridina é sintetizada a partir deácido 3,5,5-trietil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofeno-l-carboxílico e hidrazidade ácido 2-cloro-6-metil-isonicotínico de forma análoga ao Exemplo 9; LC-MS: tR = 1,22 min, [M+l] = 388,25.

Exemplo 14

2-Etil-6-metil-4-[5-( 1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a1pentalen-4-il)-[l,2,41oxadiazol-3-il]-pirídina

a) A uma solução de ácido (laS,5aR)-l,l,2-trimetil-l,la,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentaleno-4-carboxílico (64 mg, 289 μπιοί) eDIPEA (112 mg, 868 μπιοί) em DMF (3 ml) adiciona-se TBTU (98 mg, 306μπιοί) a O0C. A mistura é agitada durante 15 min a 0°C antes de se adicionar2-etil-N-hidróxi-6-metil-isonicotinamidina (55 mg, 306 μπιοί). Continua-seagitando durante lha 0°C. A reação é resfriada bruscamente com água (2ml), a mistura é diluída em EA, e então lavada com solução aq. sat. deNaHC03 seguido de água. O extrato orgânico é secado sobre MgSO4,filtrado, e evaporado. O produto bruto é purificado por meio de TLC prep.com heptano:EA a 3:2 dando o éster de hidroxiamidina correspondente (62mg) como um óleo amarelo; LC-MS: tR = 0,86 min, [M+l] = 384,10.

b) O material acima (62 mg, 162 μπιοί) é dissolvido emdioxano (2 ml) e a solução é agitada a 90°C durante 48 h. O solvente éevaporado e o produto bruto é purificado em placas de TLC prep. comheptano:EA a 1:1 dando 2-etil-6-metil-4-[5-(l,l,2-trimetil-l,la,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-[l,2,4]oxadiazol-3-il]-piridina (36 mg) comoum óleo incolor; LC-MS: tR = 0,96 min, [M+l] = 366,11; RMN 1H (CDCl3):δ 0,78 (s, 3 H), 1,17 (s, 3 H), 1,36 (t, J = 7,8 Hz, 3 H), 1,94-2,03 (m, 2 H),2,46 (s, 3 H), 2,64 (s, 3 H), 2,90 (q,J = 7,5 Hz, 2 H), 2,97 (d, J = 19,1 Hz,1H), 3,13 (dd, J= 19,1, 6,5 Hz, 1 H), 7,67 (s, 2 H).

Exemplo 15

2-Etil-4-r5-(3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[cltiofen-l-il')-Γ1,2,4] oxadiazol-3 -il] -6-metil-piridina

2-Etil-4-[5-(3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-l-il)-[l,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-piridina é preparado de forma análoga ao

Exemplo 14 partindo de ácido 5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofeno-l-carboxílico e 2-etil-N-hidróxi-6-metil-isonicotinamidina; LC-MS: tR = 1,01min, [M+l] = 382,15; RMN 1H (CDCl3): δ 1,04 (s, 6 H), 1,34 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,38 (t, J = 7,5 Hz, 3 H), 1,67 (t, J= 6,5 Hz, 2 H), 2,38 (s, 2 H), 2,65 (s, 3H), 2,81 (q, J= 7,5 Hz, 2 H), 2,91 (q, J= 7,5 Hz, 2 H), 3,17 (t, J= 6,5 Hz, 2Η), 7,70 (s, 2 Η).

Exemplo 16: Ensaio de GTPyS para determinar valores de ECsn

Ensaios de ligação de GTPyS são realizados em placas demicrotitulação de 96 poços (Nunc, 442587) em um volume final de 200 μΐ,usando-se preparações em membrana de células CHO expressando receptorde SlPl humano recombinante. Condições de ensaio são: 20 mM de Hepes(Fluka, 54461), 100 mM de NaCl (Fluka, 71378), 5 mM de MgCl2 (Fluka,63064), 0,1 % de BSA (Calbiochem, 126609), 1 μΜ de GDP (Sigma, G-7127), 2,5 % de DMSO (Fluka, 41644), 50 pM de 35S-GTPyS (AmershamBiosciences, SJl320). O pH é de 7,4. Compostos de teste são dissolvidos ediluídos em 100 % de DMSO e pré-incubados à temperatura ambiente durante30 min em 150 μΐ do tamponador de ensaio indicado acima, na ausência dejjS-GTPyS. Após adição de 50 μΐ de jjS-GTPyS, o ensaio é incubado durante1 h à temperatura ambiente. O ensaio é terminada por meio de transferênciada mistura de reação para uma placa Multiscreen (Millipore, MAHFC1H60)usando-se um colheitador de células da Packard Biosciences, e as placas sãolavadas com 10 mM de Na2HPO4ZNaH2PO4 resfriado com gelo (70 %/30 %),secadas, fechadas hermeticamente no fundo e, após adição de 25 μΐ deMicroScint20 (Packard Biosciences, número de ref. 6013621), fechadashermeticamente no topo. O 35S-GTPyS ligado à membrana é medido com umTopCount da Packard Biosciences.

EC50 é a concentração de agonista que induz 50 % da ligaçãoespecífica máxima de 35S-GTPyS. A ligação específica é determinadasubtraindo-se ligação não-específica da ligação máxima. Ligação máxima é aquantidade de cpm ligada à placa Multiscreen na presença de 10 μΜ de SIP.Ligação não-específica é a quantidade de ligação na ausência de um agonistano ensaio. Tabela 1 mostra o valor de EC50 dos mesmos compostos dapresente invenção. Os valores de EC50 foram determinados de acordo com ométodo descrito acima:Tabela 1:

<table>table see original document page 49</column></row><table>

Exemplo 17: Avaliação da eficácia in vivo

A eficácia dos compostos de Fórmula (I) é avaliada medindo-se os linfócitos circulantes após administração oral de 3 a 30 mg/kg de umcomposto de Fórmula (I) a ratos Wistar machos normotensivos. Os animaissão alojados em condições de clima controlado, com um ciclo de Iuz-escuridão de 12 horas, e têm acesso livre a ração normal de rato e a águapotável. Sangue é coletado antes e após 3, 6 e 24 h da administração de droga.Sangue integral é submetido a hematologia usando-se o sistema AdviaHematology sistema (Bayer Diagnostics, Zürich, Suíça).

Todos os dados são apresentados com o média ± SEM.Análises estatísticas são realizadas por meio de análise de variância(ANOVA) usando-se o programa Statistica (StatSoft) e o procedimento deStudent-Newman-Keuls para comparações múltiplas. A hipótese nula érejeitada quando ρ < 0,05.

Como um exemplo, a Tabela 2 mostra o efeitosobre a contagem de linfócitos 6 h após administração oral de 10 mg/kgde um composto da presente invenção a ratos Wistar machosnormotensivos em comparação com um grupo de animais tratados apenascom veículo.

Tabela 2:

<table>table see original document page 49</column></row><table>

Claims (19)

1. Composto e sais do mesmo, caracterizado pelo fato de que éde Fórmula (I), <formula>formula see original document page 50</formula> sendo queA representa *-CO-CH=CH-, *-CO-CH2CH2-, <formula>formula see original document page 50</formula> sendo que os asteriscos indicam a ligação que está ligada aogrupo B de Fórmula (I);B representa <formula>formula see original document page 50</formula> R1 representa hidrogênio, metila, etila ou cloro;R representa metila, etila, n-propila ou cloro;R3eR4representam metila;ou R3 e R4 representam etila;ouR3eR4 em conjunto com o átomo de carbono a que estãoligados, formam um anel ciclopropila, ciclobutila ou ciclopentila;R5 representa hidrogênio, metila, etila, propila, isopropila, outrifluorometila; eR6 representa metila ou etila.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizadopelo fato de que A representa *-CO-CH2-CH2-, sendo que o asterisco indica aligação que está ligada ao grupo B de Fórmula (I), ou um sal de um compostodo tipo referido.

3. Composto acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelofato de que A representa *-CO-CH=CH-, sendo que o asterisco indica aligação que está ligada ao grupo B de Fórmula (I), ou um sal de referidocomposto.

4. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizadopelo fato de que A representa <formula>formula see original document page 51</formula> sendo que o asteriscos indicam a ligação que está ligada aogrupo B de Fórmula (I),ou um sal de um composto do tipo referido.

5. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizadopelo fato de que A representa <formula>formula see original document page 51</formula> ou um sal de um composto do tipo referido.

6. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizadopelo fato de que A representa<formula>formula see original document page 52</formula>sendo que o asterisco indica a ligação que está ligada ao grupoB de Fórmula (I),ou um sal de um composto do tipo referido.

7. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesde 1 a 6, caracterizado pelo fato de que R e R representam um grupo metila,ou um sal de um composto do tipo referido.

8. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesde 1 a 6, caracterizado pelo fato de que R representa um grupo metila e Rrepresenta um grupo etila, ou um sal de um composto do tipo referido.

9. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesde 1 a 8, caracterizado pelo fato de que B representae sendo que R , R4 e R3 são como definido para Fórmula (I) nareivindicação 1; ou um sal de um composto do tipo referido.

10. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesde 1 a 8, caracterizado pelo fato de que B representae sendo que R e R representam metila e R representa metilaou etila; ou um sal de um composto do tipo referido.

11. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesde 1 a 8, caracterizado pelo fato de que B representa<formula>formula see original document page 53</formula>e sendo que R6 é como definido para Fórmula (I) nareivindicação 1; ou um sal de um composto do tipo referido.

12. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizadopelo fato de queA representa *-CO-CH=CH-, *-CO-CH2CH2-,<formula>formula see original document page 53</formula>sendo que os asteriscos indicam a ligação que está ligada aogrupo B de Fórmula (I);R1 representa metila, etila ou cloro;R2 representa metila ou etila;R3 e R4 representam metila; ouR3 e R4 representam etila; eR5 e R6 representam metila ou etila; ou um sal de um compostodo tipo referido.

13. Composto de acordo com a reivindicação 1 caracterizadopelo fato de que é selecionado do grupo que consiste de:-3 -(2-etil-6-metil-piridin-4-il)-1 -((1 aS,5 aR)-1,1,2-trimetil--l,la,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-propenona,-1 -(3 -etil-5,5 -dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo [c] tiofen-1 -il)-3 -(2-etil-6-metil-piridin-4-il)-propenona,-3-(2-etil-6-metil-piridin-4-il)-1 -((laS,5aR)-1,1,2-trimetil--1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-propan-1 -ona,-1-(3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-l-il)-3-(2-etil-6-metil-piridin-4-il)-propan-1 -ona,-2-etil-6-metil-4-[5-((laS,5aR)-1,1,2-trimetil-1, la,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-[l,3,4]oxadiazol-2-il]-piridina,-2,6-dietil-4-[5-(( 1 aS,5aR)-1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-[l,3,4]oxadiazol-2-il]-piridina,-2-cloro-6-metil-4-[5-(( 1 aS,5aR)-1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-[l,3,4]oxadiazol-2-il]-piridina,-2,6-dimetil-4-[5-((laS,5aR)-1,1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro--3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-[l ,3,4]oxadiazol-2-il]-piridina,-2-etil-4-[5-(3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-l-il)-[l,3,4]oxadiazol-2-il]-6-metil-piridina,-4-[5-(5,5-dietil-3-metil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-l-il)-[l,3,4]oxadiazol-2-il]-2-etil-6-metil-piridina,-4-[5-(3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-l-il)-[l,3,4]oxadiazol-2-il]-2,6-dimetil-piridina,-2,6-dimetil-4-[5-(3,5,5-trietil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen--1 -il)- [1,3,4] oxadiazol-2-il] -piridina, e-2-cloro-4-[5-(3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen-l-il)-[l,3,4]oxadiazol-2-il]-6-metil-piridina;e sais destes compostos.

14. Composto de acordo com a reivindicação 1 caracterizadopelo fato de que é selecionado do grupo que consiste de:-2-etil-6-metil-4-[5-(l, 1,2-trimetil-1,1 a,5,5a-tetraidro-3-tia-ciclopropa[a]pentalen-4-il)-[ 1,2,4]oxadiazol-3-il]-piridina, e-2-etil-4-[5-(3-etil-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetraidro-benzo[c]tiofen--1 -il)- [1,2,4] oxadiazol-3 -il] -6-metil-piridina;e sais destes compostos.

15. Composição farmacêutica caracterizada pelo fato de quecompreende um composto como definido em qualquer uma dasreivindicações de 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, eum veículo farmaceuticamente aceitável.

16. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesde 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou umacomposição farmacêutica de acordo com a reivindicação 15, caracterizado(a)pelo fato de que é para uso como um medicamento.

17. Uso de um composto como definido em qualquer uma dasreivindicações de 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,caracterizado pelo fato de que é para a preparação de uma composiçãofarmacêutica para a prevenção e/ou tratamento de doenças ou distúrbiosassociados com um sistema imune ativado.

18. Uso de acordo com a reivindicação 17 caracterizado pelofato de que é para a prevenção ou tratamento de doenças ou distúrbiosselecionados do grupo que consiste de rejeição de órgãos transplantadosselecionados dentre rim, fígado, coração e pulmão; doenças do enxerto-versus-hospedeiro ocasionadas por transplante de célula tronco; síndromesautoimunes selecionadas dentre artrite reumatóide, esclerose múltipla,psoríase, artrite psoriática, doença de Crohn, e tiroidite de Hashimoto; edermatite atópica.

19. Uso de um composto como definido em qualquer uma dasreivindicações de 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,caracterizado pelo fato de que é para a preparação de uma composiçãofarmacêutica para uso em combinação com um ou vários agentes selecionadosdo grupo que consiste de imunossupressivos, corticosteróides, NSAID's,drogas citotóxicas, inibidores de moléculas de adesão, citocinas, inibidores decitocinas, antagonistas de receptor de citocinas e receptores de citocinasrecombinantes, para a prevenção ou tratamento de doenças ou distúrbiosassociados com um sistema imune ativado.