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La présente invention concerne de nouveaux complexes tétracycline-méta- phosphate à solubilité élevée dans l'eau.
On sait qu'un certain nombre de phosphates, tels que le métaphosphate de sodium, ont un effet favorable sur le taux d'absorption des antibiotiques de la série de la tétracycline, administrés oralement, de sorte que l'on obtient des niveaux d'antibiotique plus élevés dans le sérum sanguin en une période de temps plus courte et qu'ils persistent pendant une période plus longue. Par exemple, un simple mélange à parties égales en poids de tétracycline et de métaphosphate de sodium donne, quand il est absorbé oralement , des niveaux de tétracycline dans le sang plus élevés et en un temps plus court qu'une quantité égale de tétracycli- ne absorbée seule. Ces niveaux plus élevés dans le sang de tétracycline sont main- tenus dans le flux sanguin pendant une plus langue période de temps.
La raison de ce phénomène n'est pas connue, mais on/pense qu'il peut être dû à l'action de sé- questration du métaphosphate sur certains métaux qui se trouvent normalement dans le système digestif et qui risqueraient d'interférer avec l'absorption de la tétra- cycline. On a également découvert que des complexes ou sels simples de tétracycli- ne et d'acide métaphosphorique qui se forment en milieu aqueux donnent également des niveaux de tétracycline dans le sang améliorés quand le produit est pris orale- ment, La raison de ces niveaux dans le sang amélioré n'est pas non plus connue.
Les mélanges tétracycline-métaphosphate de sodium, bien que bon marché et faciles à composer,ont l'inconvénient que leur emploi entraîne l'administration de sodium aux malades, et comme on le-sait, certaines personnes doivent éviter des quantités excessives de sodium. Les complexes tétracycline=--acide métaphosphori- que , préparés par simple réaction des deux composants en solution aqueuse ont une très basse solubilité dans l'eau, ce qui limite leur emploi dans un certain nombre d'applications importantes, Les nouveaux complexes tétracycline-métaphosphate se- lon l'invention ont une solubilité dans l'eau élevée ; on les prépare en faisant réagir un antibiotique du type tétracycline avec de l'acide métaphosphate fraîche- ment formé en conditions pratiquement anhydres.
Ce nouveau produit a toutes les propriétés thérapeutiques désirables des mélanges et complexes déjà connus, et, en plus, il est plus stable physiquement et plus soluble dans un certain nombre de solvants y compris l'eau que l'on utilise dans la composition des produits pharmaceutiques.
Alors que les complexes tétracycline-acide métaphosphorique sont pré- parés par simple mélange du chlorhydrate de tétracycline et de métaphosphate de sodium (hexa) en solution aqueuse sont thérapeutiquement efficaces, ils ont une solubilité dans l'eau inférieure à 10 mg par cc. Cette insolubilité dans l'eau est un inconvénient évident dans la préparation des compositions injectables et autres produits pharmaceutiquement désirables tels que' sirops, élixirs, gouttes pédiatriques, pulvérisations, infusions, et analogues. Au contraire de ce qui pré- cède les nouveaux composés d'addition (complexes ou sels) tétracycline-acide mé- taphosphorique de la présente invention peuvent avoir une solubilité de 55 à 1000mg ou plus par cc dans l'eau.
De plus, ces solutions sont physiquement et biologique- ment stables pendant de longues périodes de temps, conservant leur couleur limpide et 75% ou mieux de leur potentiel antibiotique pendant plus d'une semàineà tempé- rature ambiante, étant supérieures de ce point de vue au chlorhydrate de tétra- cycline. Ces nouveaux produits forment également des solutions physiquement sta- bles dans les liquides organiques tels que le propylène-glycol, le polyéthylène- glycol, l'huile d'arachide, l'huile de ricin et autres solvants souvent utilisés dans la préparation des produits pharmaceutiques. La manière exacte dont les nouveaux produits se forment, et la raison de leur solubilité très accrue par rap- port aux autres complexes tétracycline-acide métaphosphdrique ne sont pas connues.
L'aspect extérieur et le comportement physiologique semblent semblables. Les dif- férences remarquables de solubilité indiquent cependant une différence fondamenta- le de structure. Des études aux infra-rouges sur les produits de la présente invention, par comparaison avec les tétracyclines indiquent des différences dans les régions de 7,50 microns et 9,25 microns du spectre .infra-rouge, ce qui indique
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la possibilité d'existence de groupements 6-hydroxy et q.-diméthylaminoo La compa- raison des produits de la présente invention avec les complexes connus tétracy- cline-hexamétaphosphate métallique décrits dans le brevet des Etats-Unis d'Améri- que n 2.791.609 du 7 Mai 1957 révèlent 'des différences à 7,85 microns, ce qui indique un type différent de liaison du phosphate.
Le produit de la présente inven- tion présente également un minimum à 9,25 microns tandis que les complexes tétracy- cline-hexamétaphosphate métallique du brevet des Etats-Unis d'Amérique précité ont un maximum en ce point du spectre infra-rouge.
Par le terme "une tétracycline" utilisé ici on désigne la tétracycli-
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ne elle-même, c'est-à-dire la 4-diméthylamïno-l,q.,4a,5;5a,f,1112 octahydro- 3 ,6,10,1 2,1 2a-pentahydroxy-6-méthyl-1,11-dioxo-2-naphtacénecarboxamiàe, aussi bien que la chlorotétracyline, la bromotétracycline et l'oxytétracycline et les autres tétracyclines à activité antibiotique ayant le noyau tétracycline en même
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temps que les groupements 4-diméthyamino. et 6-hydroxy,
Le procédé préféré de préparation des nouveaux produits de la présente invention consiste à former l'acide métaphosphorique et à le faire réagir avec une des tétracyclines en conditions pratiquement anhydres aussi promptement que possi- ble après que l'acide métaphosphorique ait pris naissance.
Un procédé préféré pour
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la formation de l'acide métaphosphoriqae frais consiste à placer du P205 dans un récipient de réaction et à le recouvrir par un liquide anhydre inerte tel que le chloroforme et à y ajouter une quantité équimoléculaire d'eau calculée pour réagir
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avec P205 pour former BJÏfl)3. On ajoute alors la tétracycline au HP03 fraîchement formé- de sorte que la réaction puisse se produire avant que le caractère essentiel de HPO3 ait pu changer par exemple par polymérisation ou par touautre réaction.
La quantité d'acide métaphosphorique disponible-pour réagir avec la tétracycline doit être d'au moins un équivalent par équivalent de tétracycline.
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.' cependant observé que des rapports moléculaires plus élevés en acide méta- phosphorique entraînent des produits ayantuMe solubilité plus élevée dans l'eau et, dans une variante préférée, on fait prendre naissance dans le mélange réac- tionnel à une quantité d'acide métaphosphorique suffisante pour constituer environ 2 équivalents de HPO3 pour chaque équivalent de l'antibiotique tétracycline. On peut former dans le mélange réactionnel, en vue delà réaction avec la tétracycline de plus grandes quantités, allant jusqu'à environ 4 équivalents d'acide métaphos-
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phobique. Quand-on utilise la tétracycline comme antibiotique, ces produits auraient la formule générale 22g24N208' (RP03)n dans laquelle n est un nombre petit de l'ordre de 1 à environ 4.
La formation de l'acide métaphosphorique destiné à réagir avec l'an- tibiotique tétracycline'doit se produire en conditions pratiquement anhydres pour éviter la formation d'autres produits et la réaction avec la tétracycline doit avoir lieu aussi promptement que possible. N'importe quel liquide organique non aqueux et non réaciif vis-à-vis de la tétracycline et de l'acide métaphosphorique convient comme milieu de réaction.
Parmi des solvants organiques particuliers que l'on peut utiliser dans cette réaction, on citera le dichloréthylène, le trichloré- thane, la diméthylformamide, l'acétate d'éthyle, le diméthylsulfoxyde, le tétra-
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hydrofurane, l'acétone , 1 éthylène-i..ycol (et les glycols supérieurs et les étheri de glycol), les alcools, (par exemple le méthanol et l'éthanol) et les mélanges d'alcools avec les autres solvantso
Comme on le verra dans les exemples particuliers qui suivent il est préférable, mais non nécessaire, que-les réactifs soient complètement dissous.
Par suite , quand le HPO3 est formé dans un solvant tel que le chloro- forme dans lequel les réactifs ne sont pas entièrement solubles, il est avantageux
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d'ajouter une certaine quantité d'un autre solvant tel que le méthanol, des0xte que les réactifs puissent se dissoudre complètemento
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On verra également par les exemples qui suivent que l'on peut ajouter la tétracycline à la solution contenant l'acide métaphosphorique, ou de préférence on peut ajouter la solution d'acide métaphosphorique lentement en agitant à une solution ou suspension de l'antibiotique tétracycline dans un liquide organique.
Il est préférable que la réaction se produise à température relative- ment basse pour éviter la formation de polymères de l'acide métaphosphorique'avant que celui-ci ait eu la possibilité de réagir avec la tétracycline. On considère comme préférable des températures d'environ 0 à 15 , ;mais on peut employer des températures plus élevées allant jusqu'à 35 en conditions soigneusement contrôlée On agite le mélange réactionnel au cours de la réaction pendant un temps qui peut varier considérablement en fonction d'un certain nombre de facteurs comprenant la température, le volume du mélange réactionnel et le type de récipient de réaction.
Ces détails rentrent cependant dans le domaine du technicien et l'on ne rencontrer aucune difficulté à trouver les conditions de réaction optimum, quelles que soient les circonstances.
On peut recueillir le produit deréaction tétracycline-acide métaphos- phorique dans le mélange réactionnel d'un certain nombre de façons différentes, . comme il apparaîtra par les exemples. On peut recuillir le produit par simple évaporation du solvant de préférence sous pression réduite et à basse température ou bien on peut recueillir le produit par précipitation dans la solution organique par modification du système solvant, par exemple par addition d'un autre solvant organique qui produit un système dans -lequel le produit,-est moins solubleo Comme divers moyens de récupération du produit sont à la disposition du technicien et ne constituent pas une partie critique de l'nvention, on ne-s'étendra pas davanta- ge sur eux.
On peut utiliser le produit directement tel qu'on l'obtient dans le mélange réactionnel après évaporation du solvant et séchage, pour bbtenir une poudre que l'on peut introduire dans des capsules ou mettre sous forme de compri- més, de solutions, d'élixirs, de sirops, ou autres formes désirées pour un médi- cament. La quantité du complexe tétracycline-acide métaphosphorique à administrer au malade sera naturellement déterminée par le médecin traitant.
Bien que l'admi- nistration orale du complexe tétracycline-métaphosphate entraîne des niveaux de tétracycline dans le sang plus élevés en une période de temps plus courte, et que ces niveaux plus élevés dans le sang persistent sur une plus longue: période de temps, allant jusqu'à 24 heures, dans certains cas, en fait l'administration de l'antibiotique tétracycline doit être la même que quand on utilise le chlorhydrate de tétracycline ou autre forme térapeutique de tétracycline en tenant compte de la tétracycline réellement présente dans le médicament. Les mêmes considérations s'appliquent aux complexes d'acide métaphosphorique avec la tétracycline, la chlore tétracycline, l'oxytétracycline, la bromotétracycline, et les tétracyclines thé- rapeutiquement actives ayant des groupements 6-hydroxy et 4-diméthylamino.
Une- dose orale thérapeutique moyenne de l'un quelconque de ces produits tétracycline- métaphosphate contient normalement environ 250 mg de tétracycline, calculée en tant que telle et doit être administrée 4 fois par jour.
EXEMPLE 1.
Dans un ballon à fond rond de 500 cc, muni d'un agitateur, d'un conden- seur et d'un thermomètre, on place 7,1 g (0,05 mole) de P205 que l'on recouvre immédiatement par 100 cc de chloroforme. Au mélange, on ajoute en agitant 0,9 cc (0,05 mole) d'eau distillée. En quelques minutes, il apparait une couche inférieure huileuse que l'on suppose être de l'acide métaphosphorique fraîchement formé résultant de l'action sur le P205 d'une quantité équimoléculaire d'eau. A ce mélange on ajoute 100 cc de méthanol et en poursuivant l'agitation la couche inférieure huileuse disparaît dans le méthanol en formant une solution complète colorée en vert jaunâtre pâle.
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On ajoute au ballon 50 cc supplémentaires de méthanol puis 22,2 g (0,05 mole) de tétracycline sous forme neutre par portions et par intermittence avec 50 autres co de méthanol. On maintient une solution limpide pendant toute l'addition de la tétracycline. Après l'addition de toute la tétracycline, la solution a une couleur orange foncée et la température dars le ballon de réaction est de 35 .
Une heure après l'addition de la tétracycline on verse la solution réactionnelle limpide dans 1500'' cc de chloroforme. Un produit jaune se sépare et on le recueille sur un filtre en verre fritté grossier et on le sèche à l'airo Le complexe tétracycline-acide métaphosphorique pèse environ 10g, contient 7,34% de phosphore et a un essai biologique de 634 gramma par mg.
EXEMPLE 2.
'Bans un ballon à fond rond à trois tubulures muni d'un agitateur, d'un thermomètre et d'un condenseur à reflux, on place 7,2 g de P2O5 que l'on recouvre immédiatement par 100 cc de chloroforme. On y ajoute lentement en agitant 0,9 cc d'eau distillée. En quelques minutes, il se forme un petit précipité gommeux. On laisse reposer ce mélange environ 1 heure pour permettre à l'acide métaphosphorique d'avoir largement le temps de se formerOn ajoute ensuite 100 cc d'éthanol et quand on poursuit l'agitation la couche pâteuse inférieure se dissout lentement.
Au contenu du ballon, on ajoute en agitant 22,2 g de tétracycline sous forme neutre et 50 cc supplémentaires d'éthanol. On poursuit l'agitation-pendant environ 1 heure -1 1/2 heure pour assurer le développement du complexe tétracy- cline métaphosphate, On filtre ensuite le mélange réactionnel pour éliminer la matière jaune insoluble qui s'est forméeo On redélaye le gâteau filtré avec 2 por- tions de 200 cc d'isopropanol et, on refiltre et on sèche à l'air. Le produit , qui pèse 11,3 g a un point de fusion de 186-205 et un essai chimique de tétracy- oline de 690¯gamma par mgo Deux analyses .du phosphore donnent une moyenne de 8,30% de phosphore.
On obtient nn second jet de complexe tétracycline-phosphate pesant 4,5 g en ajoutant 200 autres cc isopropanol au filtrat. Ce produit a un essai biologique pour la tétracycline de 765 gamma par mg.
Par repos jusqu'au lendemain le filtrat laisse 'déposer un troisième jet du produit.
EXEMPLE 3.
On met en suspension 4 g de P205 dans 100 cc de chloroforme et on ajoute 0,5 g d'eau distillée à la suspension tout en agitant et en refroidissant à environ 5-10 dans l'appareillage des exemples précédentes. Après agitation pendant environ 1/2 heure pour permettre la formation de 1 acide métaphosphorique on ajoute 50 cc de méthanol au mélange. On maintient la température dans l'inter- valle d'environ 5-15 . La plus grande partie de l'acide métaphosphorique se dis- sout. A la solution agitée, on ajoute à environ 15-20 , 22,2 g de tétracycline sous forme neutre simultanément à 50 cc supplémentaire deméthanol, par petites portions. On ajoute ensuite l'ensemble du mélange pendant 1 heure, 1-1/2 heure à 20-25 . On filtre le mélange réactionnel et on délaye le gâteau filtré avec 2 portions de 250 ce d'isopropanol.
On ajoute alors le filtrat aux liqueurs de lavage à l'isoppopanol et on mélange avec encore 500 cc d'isopropanol. On filtre et on sèche lproduit jaune clairequi est le complexe tétracycline-métaphosphate. Le pro- duit contient 6,19% de phosphore et il a un essai biologique de 824 gamma par mg de chlorhydrate de tétracycline. L'analyse du phosphore indique un produit comprenant une mole de tétraycline et une mole d'acide métaphosphorique.
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EXEMPLE 4.
Pour réduire la formation d'huile pendant la période de réaction et les réactions secondaires de polymérisation qui se produisent à des degrés variables
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quand on forme le produit par le aprocessus décrit aux exemples précédents on ajoute le mélange acide métaphosphorique-chloroforme-méthanol à une suspension mé- thalonique de tétracycline sous forme neutre. Dans une telle préparation on ajoute lentement un mélange réactionnel comprenant 57,6 g de P205 et 7,2 ce d'eau dissous dans 6)00 cc de chloroforme et 500-600 cc de de méthanol à une solution de 300-400 cc de méthanol contenant en suspension 177,6 g de tétracycline sous forme neutre.
Oh agite l'ànsemble du mélange pendant une heure à une température inférieure à
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15 et éventuellewoenbon obtient une dissolution presque complète. On filtre le mélange réactionnel et on verse le filtrat dans 8 litres d'isopropanol. Il précipi- te un complexe t étracycline-métaphosphate coloré en jaune clair. On laisse vieillir la solution pendant environ 1 heure, on recueille le produit par filtration et en le sèche. A l'analyse on trouve qu'il contient 7,75% de phosphore et il a un essai biologique de 718 gamma par mg sous forme de chlorhydrate de tétracycline.
Cette variante particulière de l'invention peut être considérée comme meilleur mode de réalisation de celle-ci actuellement.
EXEMPLE 5.
On purifie de la façon suivante un échantillon du complexe tétracycli- ne-métaphosphate préparé conformément au processus des exemples précédents et ayant un essai biologique de 775 gamma par mg sous forme de chlorhydrate de tétracycline et 8,85% de phosphoreOn dissout 5 g du produit dans 25 cc de méthànol et on filtre la solution pour éliminer une petite quantité dematière insolubleA ce filtrat limpide on ajoute un mélange de 25 ce de méthanol anhydre et 75 cc d'iso-
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propanol. Il 4e ép0 un produit jaune que l'on recueille par filtration.
On le redélaye et on le lave au moyen de 25 cc d'isopropanol et on le sèche à l'air.
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La matière ainsi retraitée a un essai biologbque de 865 gamma par mg sous forme de chlorhydrate de tétracycline, elle contient 7,25% de phosphore et elle fond avec décomposition dans l'intervalle d'environ 165-200 0
EXEMPLE 6.
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Obi dissout un échantillon aitetétraoyoline- métaphosphate ayant un essai biologique de 718 gamma par mg de chlorhydrate de tétracycline dans 25 ce d'eau distillée. A cette solution on ajoute 10 volumes d'ispropanol, ce qui provoque la
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séparation du tétracycline-métaphosphate jaune. On filtre le produit et on le sè- che; à l'essai biologique on lui trouve une puissance de 823 gamma par mg sous forme de chlorhydrate de tétracycline.
EXEMPLE 7.
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On prépare un complexe chlorotétracycline-métaphosphate par un proces- sus semblable à celui décrit dans lesexemples précédentes, On fait réagir 7,2 g
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de P 0 avec Q,9 g d'eau sous 100 cc de chloroforme et on dissous à l'aide de 100cc de mettlÍ#.olo On ajoute lentement à l'acide métaphosphorique formé 23,9 g de chlorotétracycline base libre et on agite le mélange réactionnel pendant une heure tout en maintenant la température de la solution inférieure à environ 25 . On filtre le mélange réactionnel pour éliminer quelques particules insolubbles. Quand on verse le filtrat dans un grand volume d'isopropanol il précipite une
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poudre jaune (chloroté1racycline-métaphosphate)o On recueille celle-ci par filtra- tion et on la sèche.
Le produit contient 7,67% de phosphore et il a un essai biologique de 77,6% comparé au cMoi'hyabeo de chlorotétracycline.
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EXEMPLE 8.
On s'est efforcé de préparer le complexe tétracycline-métaphosphate des exemples précédents en solution aqueuse. On a dissous du chlorhydrate de tétra- cycline (4,8 g) dans 50 cc d'eau distillée. On prépare une seconde solution en dissolvant 1 g de métaphosphate de sodium dans 50 cc d'eau. A cette solution, on ajoute 1 cc d'acide chlorhydrique concentré pour abaisser le pH au-dessous de 1.
On ajoute alors la solution de tétracycline à la solution aqueuse contenant l'acide métaphosphorique. Les solutions mélangées ont un pH d'environ 1 et son limpideso Par addition d'une-quantité additionnelle de métaphosphate de sodium (lg dans 50cc d'eau distillée) le pH monte à 1,8-1,9 et un solide jaune se sépare. Après agita- tion pendant une période de 30 minutes on filtre le mélange réactionnel et on lave le produit par 2 portions de 25 cc d'isopropanol et on le sèche à l'airo Ce produit a un essai biologique de 709 gamma par mg sous forme de chlorhydrate de tétracy-l cline et une teneur en phosphore de 12,7%.
Ce produit est distinctement différent des produits des exemples pré- cédents en ce qu'il n'est soluble dans l'eau qu'à raison d'environ 2 à 3 mg par. ce, la solution ayant un pH d'environ 3,3. On prépare d'autres produits contenant moins de phosphore par le même procédé en utilisant de plus petites quantités de métaphosphate de sodium et tous ces produits ont une très basse solubilité dans l'eauo EXEMPLE 2.
On fait réagir de la tétracycline basd libre avec de l'acide ortho- phosphorique et on obtient des produits conformément au processus suivant : - on met en suspension de la tétracycline neutre (4,44 g - 0,01 mole) dans 100 cc de méthanol. A cette suspension on ajoute 0,7 ce d'acide orthophospho- rique à 85% (équivalent à environ 1,15 g - 0,01 mole H3PO4). Après agitation il se forme une solution complètement limpide. On ajoute alors un excès d'isopropanol (5 volumes- 500 cc) à la solution ce qui provoque la précipitation d'un "phospha- te" solide jauneo Après avoir permis au mélange de reposer pendant une heure on le filtre sur un entonnoir en verre fritté et on lave le précipité avec environ 25cc d'isoppopanol frais.
ON sèche le produit à l'air, puis dans un four sous vide sur P2O5 Le phosphate donne les résultats d'analyse suivants : essai biologique 747 gamma par mg sous forme de chlorhydrate de tétracycline (théorie 905 gamma par mg); phosphore 4,97% (théorie 5,8%); humidité 2,P4% Ce produit a une solubilité dans l'eau inférieure à 1 mg par ce.
EXEMPLE 10.
Cet exemple illustrât la préparation d'un complexe chlorotétracycline- métaphosphate dans lequel on fait réagir une partie molaire de chlorotétracycline avec 4 parties molaires d'acide métaphosphorique. On ajoute soigneusement 115,2 g de pentoxyde de phosphore et 14,4 cc d'eau distillée séparément à 600 cc de chloro- forme, le récipient de réaction étant maintenu dans un bain de glace. On agite la solution refroidie pendant 13 minutes puis on ajoute 600 cc de méthanol et on poursuit l'agitation jusqu'à ce que la couche inférieure pâteuse soit dissoute.
On.ajoute lentement une moitié de la solution phosphorylée à 95,6 g de chloro- tétracycline neutre en suspension dans 300 cc de méthanoll. Après environ 15 minu- tes d'agitation, la solution devient limpideo On retire le bain de glace, puis on agite la solution pendant environ une heure. Après que le mélange réactionnel se soit rechauffé à la température ambiante, on le filtre et on verse le filtrat ainsi obtenu dans 4000 cc d'isopropanol, puis on le place dans une pièce fraîche jus- qu'au lendemain. Le produit est filtré, lavé avec 100 ce d'isopropanol, séché à l'air et finalement séché dans un four à vide sur pentachlorure de phosphore.
On obtient un rendement de 101,9 g de chlorotétracycline-métaphosphate.
Ce produit a un essai biologique de 783 gamma par mg par rapport au chlorhydrate de tétracycline, 6,8% en poids de phosphore et une solubilité dans l'eau d'environ
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EXEMPLE 11.
On prépare un complexe chlorotétracycline-métaphosphate par un proces- sus semblable à celui de l'exemple 10 sauf que l'on fait réagir 3 équivalents mo- laires d'acide métaphosphorique avec un équivalent molaire de chlorotétracycline.
Le produit a un essai biologique de 755 gamma par mg calculé en chlorhydrate de chlorotétracycline ,une teneur en phosphore de 8,12 % et une solubilité dans l'eau d'environ 1,67 g/cc.
EXEMPLE 12.
On prépare un complexe tétracycline-métaphosphate en utilisant 4 par- ties molaires d'acide métaphosphorique fraîchement préparé et un équivalent de tétracycline. A 88,6 g de tétracycline neutre, mise en suspension dans 300 cc de méthanol, on ajoute la moitié de l'agent phosphorylant de l'exemple 10 qui avait été dzviséo On refrodit le récipient de réaction dans un bain de glace. Le mélange réactionnel devient limpide en quelques minutes et après environ 20 minutes d'agita tion on retire le bain de glace et on poursuit l'agitation pendant une heure jus- qu'à ce que la solution se soit réchauffée à la température ambiante. On filtre alors la solution et on y ajoute 4 litres d'isopropanol, ce qui provoque la préci- pitation du complexe tétracycline-métaphosphate.
Après refroidissement du mélange jusqu'au lendemain à 0,5 , on le filtre, on lave le produit avec 100éo d'isopro- panol et on le sèche, A l'analyse, on trouve qu'il contient 7,16 de phosphore et il a une solubilité dans l'eau comprise entre 600 et 1000 mg par cc.
EXEMPLE 13.
On prépare un complexe tétracycline-métaphosphate par réaction d'une partie molaire de tétracycline avec 3 parties molaires d'acide métaphosphorique frâîchement formé comme dans l'exemple précédent. Ce produit qui contient 8,6% de phosphore a une solubilité dans l'eau comprise entre 1 et 1,67 mg/cc.
EXEMPLE 14.
On met en suspension 3,6 g de pentoxyde de phosphore dans 50 cc de chloroforme et on ajoute lentement en agitant 0,45 g d'eau distillée au mélange à une température comprise entre 5 et 10 .On ajoute alors 50 cc demméthanl et on poursuit l'agitation jusqu'à ce qu'on obtienne une solution limpide. On laisse ce mélange se réchauffer jusqu'à température ambiante tandis qu'on ajoute lente- ment 11,5 g d'oxytétrâcycline neutre. L'oxytétracycline se dissout lentement dans l'agent phosphorylant et à mesure que le mélange prend la température ambiante il se forme une solution limpide On filtre alors cette solution pour éliminer une petite quantité de matière insoluble et on traite le filtrat par 500cc d'iso- propanol, ce qui précipite le produit complexe tétracycline-métaphosphate.
Après vieillissement pendant 2 heures, on recueille le précipité par filtration, on le lave avec 200cc disopropanol puis on de sèche à l'air. On obtient un produit ayant un essai moyen de 791 gamma/mg calculé en chlorhydrate d'oxytétracycline et qui a une analyse de 5,73 de phosphore et une solubilité dans l'eau de l'ordre de 600 à 1000 mg/cc.
EXEMPLE 15.
On prépare un complexe oxytétracycline-métaphosphate d'une manière sembla be à celle de l'exemple précédent en utilisant une partie molaire d'oxytétra- cycline et une partie molaire d'acide métaphosphorique fraîchement préparé. Ce produit a un essai biologique de 820 gamma/mg calculé en chlorhydrate d'oxytétra- cycline et contient 4,79% de phosphore. Il a une solubilité comprise entre 600 et
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EXEMPLE 16.
On démontre l'efficacité du nouveau complexe métaphosphaté de la pré- sente invention pour donner des niveaux initiaux de tétracycline dans le. sérum sanguin élevés et persistant sur une longue période de temps dans une série de tests dans lesquels on administre à des rats par voie orale un produit tétracy- cline-métaphosphate préparé en traitant une mole de tétracycline neutre par 2 moles de @ fraîchement formé comme décrit à l'exemple 4.
On fait une comparai- son entre la base libre tétracycline, le chlorhydrate de tétracycline et une tétracycline du commerce sous forme d'un mélange encapsulé composé essentiellement de 59% en poids de chlorhydrate de tétracycline, 39% de phosphate de calcium dibasi- que anhydre et environ 1% en poids de stéarate de magnésium et autant de vaseline liquide incorporés comme lubrifiants. On divise des rats adultes sains normaux en groupes de six. 'On administre à chaque rat l'équivalent de 50 mg par kg de corps de tétracycline, calculée en base libre.
On prélève des échantillons de sang de chaque rat après des périodes de 1,4,7 et 24 heures et on détermine la concen- tration de la tétracycline dans le sérum en gamma/ce, évaluée en chlorhydrate de tétracycline. Les résultats sont indiqués au tableau suivant :
TABLEAU I
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<tb> ombre <SEP> Poids <SEP> moyen <SEP> Préparation <SEP> Concentration <SEP> de <SEP> la <SEP> tétracycline
<tb>
<tb>
<tb> rats <SEP> 'grammes <SEP> administrée <SEP> dans <SEP> le <SEP> sérum <SEP> #/cc
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<tb> 1 <SEP> h. <SEP> 4 <SEP> h. <SEP> 7 <SEP> h. <SEP> 24 <SEP> h.
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@ <SEP> 381 <SEP> Métaphosphate <SEP> de <SEP> 2,9 <SEP> 2,3 <SEP> 1,0 <SEP> 0,16
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<tb> 6 <SEP> tétracycline
<tb>
<tb>
<tb> @ <SEP> Prép. <SEP> anhydre
<tb>
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<tb>
<tb> 6 <SEP> 357 <SEP> Mélange <SEP> tétracy- <SEP> 0,8 <SEP> 0,6 <SEP> 0,3 <SEP> 0,006
<tb>
<tb>
<tb> @ <SEP> cline-HC1 <SEP> capsul鯯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯
<tb>
<tb>
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<tb>
<tb>
<tb> 6 <SEP> 399 <SEP> Tétracycline- <SEP> 2,8 <SEP> 1,5 <SEP> 0,8 <SEP> 0,11
<tb>
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<tb> @ <SEP> HC1
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<tb> 6 <SEP> 313 <SEP> Tétracycline, <SEP> 1,8 <SEP> 1,1 <SEP> 0,6 <SEP> 0,08
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Comme on le voit,
le complexe tétracycline-métaphosphate de la présen- te invention donne des niveaux initiaux dans le sang plus élevés et ces niveaux plus élevés persistent sur une plus longue période de temps. On compare également le produit de la présente invention, préparé par réaction de HPO3 avec de la tétracycline en conditions anhydres avec un complexe qu'on trouve dans le commer- ce, formé par réaction de chlorhydrate de tétracycline avec du métaphosphate de sodium en milieu aqueux, ainsi qu'avec un produit consistant en un mélange de base libre tétracycline et de métaphosphate de sodium dans le rapport 250 : en poids.
On trouve que ces trois produits donnent le même niveau initial élevé et- persstent longtemps dans le sang dans la limite de l'erreur expérimentale
Les exemples suivants @ diverses formules contenant les nouveaux pro- duits de la présente invention sous des formes les rendant adaptés à des usages spéciaux.
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EXEMPLE 17.
On prépare un onguent pharmaceutique en fondant ensemble, à 65 , 10 kg de graisse de laine USP et 83,7 gd de vaseline blanche USP. On y ajoute 4,27 kg du complexe tétracycline-acide métaphosphorique (contenant un équivalent de 775 microgrammes par mg en chlorhydrate de tétracyline) préparé par le procédé de l'exemple 4 avec 2,4 kg d.e parahydroxybenzoate de méthyle et 0,6 kg de para- hydroxybenzoate de propyle et on fait passer la suspension à travers un broyeur o Premier réglé à 125 microns.
On pompe le mélange final dans un réservoir de stocka- ge puis on en remplit l'êtuveo Chaque gramme de l'onguent contient un équivalent de 30 mg de l'antibiotique, calculé en chlorhydrate de tétracycline.
EXEMPLE 18.
On prépare de la façon suivante des capsules de gélatine contenant le produit antibiotique de la présente invention. On mélange 339 kg du complexe tétra- cycline-acide métaphosphorique (contenant un équivalent de 775 microgrammes par mg sous forme de chlorhydrate de tétracycline à) préparé par le procoédé de l'exemple 4 avec 170 kg de phosphate de calcium dibasique anhydre dans un mélangeur Day F pendant 30 minutes 0 On place une portion de 20 kg de ce;mélange dans un mé- langeur Stokes B et on ajoute 4,4 kg de vaseline liquide légère et on les mélange au mélange pulvérisé.
On mélange ce mélange avec une seconde portion de 20 kg du mélange pulvérisé et on le fait passer à travers une machine de réduction en particules Fitzpatrick en utilisant un tamis N 2 et 5000 tours/minute. On mélange 4,4 kg de stéarate de magnésium pulvérisé avec une Portion:de 5 kg du mélange de poudre et on tamise à travers la machine Fitzpatrick comme ci-dessuso On retour ne alors les 40 kg de mélange de matière avec la vaseline au mélangeur Day F et on mélange pendant 15 minutes, après quoi on ajoute la portion de 5 kg contenant le stéarate de magnésium et on malaxe à nouveau le mélange pendant 15 minutes.
On essaie alors la poudre et on en remplit des capsules de gélatine contenant 50, 100 et 250 mg de l'activité antibiotique calculée en chlorhydrate de tétracycline EXEMPLE 190
On prépare de la matière suivante une préparation liquide convenant à l'administration orale., On mélange 0,029 kg de parfum à la cerise imitation, 0,118 kg de colorant rouge F.D. et C.
et 0,059 kg d'algine de 140 mailles (tamis améri- cain) à haute viscosité avec 25 kg de sucrose et on les mélange dans un tambour pendant une demi-heure. On tamise le mélange à travers une machine de réduction en particules Fitzpatrick en utilisant un tamis 00 à 5000 tours/mine On met la matière tamisée dans un mélangeur Day et on ajoute 5,38 kg du complexe tétracycli- ne-acide métaphosphorique (contenant un équivalent de 775 microgrammes par mg en chlorhydrate de tétracycline) préparé par le procédé de l'exemple 4, et on mélan- ge.les matières pendant 20 minutes.
On fait ensuite passer le mélange dans une machine Fitzpatrick en utilisant un tanins 00 à 5000 tours/minutes, puis on le re- tourne au mélangeur d'air et on le mélange pendant 10 autres minutes. On remplit alors des bouteilles de la poudreoPour l'emploi , on ajoute à chaque bouteille suffisamment d'eau pour que 28 g environ de la préparation liquide contiennent environ 11,5 g du mélange. Chaque cuillerée (5cc) de la préparation contient une quantité d'activité tétracycline équivalente à 250 mg de chlorhydrate de tétra- cyclineo EXEMPLE 20.
On prépare une poudre antibiotique soluble convenant aux applications vétérinaires en mélangeant préalablement 3,9 kg de "TWEEN 80" avec 70 kg de sucre p pulvérisé dans un mélangeur Stokes C pendant 20 minutes.On tamise le prémélange dans une machine Fitzpatrick avec un tamis N 2, à 5000 tours/minute. On met
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ensuite 90 kg d'acide citrique anhydre pulvérisé à travers un tamis manuel: ?12.
On place l'acide citrique, 43,3 kg du complexe tétracycline-acide métaphosphorique (contenant un équivalent de 765 microgrammes par mg en chlorhydrate de tétracycli- ne) préparé par le procédé de l'exemple 4, le prémélange TWEEN-sucre et 346,7 kg de sucre pulvérisé dans un mélangeur Day F et on mélange pendant 45 minutes.
On retire la poudre du mélangeur à travers un tamis à main N 12 et on l'emballe dans des récipients convenant à l'envoi à l'usager.
EXEMPLE 21.
On peut préparer de la façon suivante un produit antibiotique tétra- cycline convenant à l'injection intramusculaire :
On mélange 141 mg de complexe tétracycline-métaphosphate (contenant un équivalent de 710 microgrammes/mg en chlorhydrate de tétracycline) préparé par le procédé de l'exemple 4 avec 250 mg d'acide ascorbique et 40 mg de chlorhydrate de procaïne. On place alors la poudre mélangée dans des plateaux dans une chambre où on la stérilise en l'exposant à de l'oxyde d'éthylène. On tamise aseptiquement la poudre stérile dans une machine Fitzpatrick modèle J en utilisant un tams de 60 mailles à 5000 tours/minute. On mélange ensuite la poudre stérile tamisée avec 100 mg de chlorure de magnésium hexahydraté stérile tamisé et le mélange est prêt au remplissage stérile dans des fioles convenables que l'on scelle en- suite.
Le contenu de la fiole se dissout dans l'eau au moment nécessaire.
On peut préparer des produits semblables à ceux des exemples 17 à 21 en remplaçant par le complexe chlorotétracycline-métaphosphate ou le complexe oxytétracycline-métaphosphate, préparés en conditions anhydres comme décrit dans les exemples précédents ,le produit tétracycline, sur une base égale en poids.
- REVENDICATIONS.
1.- Un nouveau complexe tétracycline-métaphosphate ayant une solu- bilité élevée dans l'eau.