VIROLOGIA: TEMAS 34-38

- José Antonio López (JAL). Edificio de Biológicas C-18. T. 91 497 2375

- Tutorías previa cita. Comunicación: http://www.uam.es/ja.lopez

Características generales de los virus.

El desarrollo de la Virología
 Literatura china del siglo X a.J.C.: Se describe una enfermedad similar a la
viruela.
 Desde el siglo XVIII se vacuna contra la viruela vacuna (Jenner).
 En 1884 Pasteur desarrolló un virus atenuado para la vacunación frente a la rabia.
 Los postulados de Koch fueron aplicados también a enfermedades virales:
- Se tiene que aislar el agente infeccioso
- Reproducir los síntomas en animales
- Aislar de esos animales el agente infeccioso…
 Finales del siglo XIX, Iwanowsky demostró que el virus del mosaico del tabaco
podía pasar a través de filtros cuyos poros retenían a las bacterias.
 1899. Beijerinck ya habla de “virus filtrable” transmisible de un hospedador a
otro.
 Comienzos de siglo: Rous demuestra la etiología vírica de un sarcoma de pollo.
 1915. Twort describe los primeros bacteriófagos.
 1952. Hershey y Chase observan que en los bacteriófagos, solo el ácido nucleico
de los virus penetran en la bacteria (cosa que no ocurre en virus animales).
 1956. Fraenkel-Conrat confirma que el ácido nucleico es el portador de la
información genética (virus mosaico del tabaco).
 Desde mediados de los 50 se desarrollan las vacunas contra la polio (Salk y Sabin)
 1957. Isaacs y Lindenman descubren el Interferón. Antiviral de amplio espectro.
 1970. Temin y Baltimore descubrieron la transcriptasa inversa del virus del
sarcoma de Rous.

Propiedades generales
¿Qué es un virus?
Al principio, el término VIRUS se utilizaba para asignar cualquier sustancia venenosa.
Poco a poco fue derivando a agentes de enfermedades infecciosas. Se amplió el
concepto a VIRUS FILTRABLES.
En 1999 se realizó el 7º Congreso de la ICTV (International Committee on Taxonomy
of Viruses, definiéndose nuevas familias, y la nomenclatura que ha ido evolucionando
hasta la actual con incluso Reinos, Órdenes, etc.
Es difícil establecer qué virus es distinto o similar a otro, pero aún así se define: Un
virus es un biosistema elemental que posee algunas de las propiedades de sistemas
vivientes (poseen genoma y capacidad de adaptación a cambios medioambientales).
Sin embargo, un virus no puede capturar y almacenar energía libre y no es
funcionalmente activo fuera de su célula huésped. Se puede decir que UN VIRUS NO
ES UN ORGANISMO VIVO, sino que toma prestada las características funcionales de
una célula (ICTV). Una especie viral no es lo mismo que un virus. Existe una alta
variabilidad genética de unos viriones a otros (CUASIESPECIES: conjunto de
secuencias génicas virales en torno a una secuencia consenso). Tras una infección por
un virus, al cabo de un tiempo lo que se tiene no es una única secuencia del virus
multiplicada por X veces, sino una “nube” de secuencias, con mutaciones puntuales
durante la replicación, que conforman la “cuasiespecie”.
Las categorías taxonómicas más comunes de los virus se componen de especie, género,
(subfamilia), familia y, desde hace unos años, órden.

Propiedades y tipos de genomas víricos

- Tamaño y forma variables: 0.02-0.3 micras (los virus gigantes, hasta 1 micra)
- RNA ó DNA como material genómico.
- Genoma de cadena simple (diferente polaridad), doble, circular o linear… Si es
RNA de cadena simple, puede ser Polaridad + (el genoma y el mRNA tienen la
misma secuencia) o Polaridad – (el genoma tiene la secuencia complementaria al
mRNA).
- Tamaño del genoma: desde 5000-200.000 pb.
- Estructura variada: con o sin envuelta lipídica, estructura proteica
denominada Cápsida.
- Nucleocápsida: Ácido nucleico más las proteínas que lo empaquetan.
- Algunos virus tienen tegumento, enzimas u otros tipos de proteínas específicos.
- Según disposición de las proteínas de la cápsida se puede hablar de simetría
Helicoidal (virus del mosaico del tabaco) o Icosaédrica (virus de la
poliomielitis). Además, existe un gran número de especies virales sin una
isometría definida, amorfos, o combinada (como algunos fagos)…

Ortografía
El nombre aparece en itálica y la primera letra en Mayúscula, siempre que nos
refiramos al virus como taxón y no como partícula. Por ejemplo: “Los Poliovirus
pertenecen a la familia Picornaviridae” (aquí hablamos del virus como taxón) vs “Para
purificar a los poliovirus hay que centrifugarlos a….” (aquí hablamos del virus como
una partícula física).
Diferencias entre los virus y los organismos celulares
- Los virus tienen un estado extracelular y otro intracelular (extracelularmente, el
virus se denomina VIRION y es inerte).
- Necesita INFECTAR una célula de forma específica, tomando de ésta la
maquinaria necesaria para su perpetuación.
- En cuanto a las diferencias entre una célula y un virus, algunas de las más
importantes pueden ser: Una célula tiene:
o Presencia de varios tipos de ácidos nucleicos.
 o Orgánulos y metabolismo autónomo.
o No necesidad de otro organismo para la replicación.
o Tamaño y complejidad.
o Envuelta lipídica obligada…
Métodos de preparación y análisis
Crecimiento
- Dependiendo del tipo de virus, la fuente de crecimiento y purificación puede
variar:
o Cultivos celulares.
o Tejidos animales.
o Embriones. (huevos de gallina, por ejemplo)
- El virus puede encontrarse mayoritariamente en el interior celular o
concentrarse extracelularmente.
Cuantificación
- Cuantificar partículas físicas: Métodos que evalúan la infección: Analizar
proteínas, DNA, RNA, etc.; Microscopio electrónico, test de hemaglutinación…
- Cuantificar partículas infectivas: Placa de Lisis (ufp). Hasta 1% del número
estimado de partículas físicas… Una placa de lisis es una partícula infectiva que
en un ensayo sobre células, ha generado una infección que se ha ido extendiendo
–en medio semisólido, como se hizo con los fagos en prácticas- hasta formar una
pequeña placa –calva- en el cultivo que puede cuantificarse. Al final, el título de
un virus, en un tubo, por ejemplo, es el número de ufp que tenemos por ml de
muestra. Otro concepto es la “Multiplicidad de Infección ó mdi”: en un cultivo
dado con X número de células, la mdi es el número de ufp que añadimos al
cultivo, de media, por célula…
- Al infectar, se utilizan los términos: mdi o LD50 (entre otros) para infectar
animales (dosis letal 50: número de virus que hace falta para infectar y tener
efectos visibles sobre el 50% de los animales de estudio)…

Ciclo infectivo de un virus

Procesos comunes durante la infección:
 Fijación (adsorción)
 Penetración
 Replicación (del ácido nucleico. Puede haber fase temprana, tardía…)
 Transcripción
 Traducción
 Empaquetamiento (del genoma. Suele ser simultáneo al ensamblaje)
 Liberación.
Si se analiza la progenie que se va produciendo durante la infección, se distinguen las
siguientes fases:
- Periodo de Latencia (El virus ha entrado y se ha liberado el material genético. Se
habla de ECLIPSE. El virus, en esta fase no sería infectivo para otras células).
 - Maduración: Poco a poco van produciéndose y rellenándose partículas virales.
- Liberación: Normalmente tras la lisis celular.
- Rendimiento: entre varias y varias miles de partículas por célula infectada.
Si fuerais un virus, que dependéis de una célula para sobrevivir, ¿Cuál sería vuestra
estrategia de infección?:
- Lisis (en algunos casos, depende de factores del hospedador: hormonas,
anticuerpos…).
- Persistencia (O todas las células producen poco virus o unas pocas producen y
mueren por la infección…).
- Latencia (desaparece el virus casi por complejo y subsiste en forma de
EPISOMA. Factores externos lo hacen reactivarse…).
Cuando hablamos de infecciones a animales, consideramos:
Infecciones agudas, crónicas, recurrentes…
Concepto que cada vez es más importante: APOPTOSIS inducida o inhibida por
el virus: Muerte celular programada. A veces, también nos encontramos con el
término de Piroptosis (algo similar a una apoptosis concreta inducida por
infecciones de patógenos intracelulares).

Criterios de clasificación de los virus

- Son criterios más o menos establecidos.
- Al principio, la división se hacía entre virus de bacterias, plantas, animales, pero
se conocen grupos taxonómicos con representantes en varios campos…
- Finalmente, la ICTV dividió a los virus en 3 órdenes, 73 familias, más de 287
géneros y de 2000 especies según: Tipo de ácido nucleico, número de cadenas y
presencia o ausencia de envuelta lipídica.
- Orden: acaba en virales (Caudovirales, Mononegavirales y Nidovirales),
Familia: acaba en viridae, subfamilia: virinae, y el género y especie en virus.
Otras de las características que se consideran para la taxonomía viral pueden ser:
Naturaleza del huésped (animal, etc…), tipo de ácido nucleico, simetría de la cápsida,
presencia o no de envuelta, diámetro de la nucleocápsida o del virión, simetría,
respuesta inmune que activa, localización intracelular de la replicación viral, tipo de
enfermedad que causa o modo de transmisión… PERO, BÁSICAMENTE, la
clasificación de las Familias se hace por el tipo del ácido nucleico, número de cadenas y
polaridad…
Viroides y priones
- VIROIDES, RNA circular, de cadena simple de unos 250-370 nucleótidos, que
se suelen localizar en el nucleolo de la célula infectada, en número entre 200 y
10.000 copias. Producen enfermedades en plantas tales como la patata y árboles
de cítricos.
- PRION (Proteinaceous infectious particle). El agente infeccioso es una proteína
de 33-35 kDa. Al parecer actúa produciendo un cambio conformacional de una
proteína precursora celular PrP. Además de la
encefalopatía espongiforme bovina, se encuentra el SCRAPIE en ovejas o
el Kuru o Síndrome de CREUTZFELDT-JAKOB en humanos.
- Virus dependientes de otros para producir una infección productiva.
Teorías sobre el origen y evolución de los virus
TRES hipótesis:
- Mediante una evolución retrógrada, algún virus complejo (vaccinia, herpes)
pudo ser originariamente una célula pequeña (procariota probablemente) que
parasitara otra de mayor complejidad y que, poco a poco, se fuera haciendo más
específica, perdiendo estructuras para garantizar su efectividad en el
crecimiento… El problema principal es que, de ser cierto esto, uno debería
esperar encontrar en la naturaleza formas intermedias entre ambos tipos de
organismos…
- Otra opción sería que los virus provienen del material genético celular que, de
alguna forma, lograra escapar del control celular para poder perpetuarse de
forma independiente. Esta teoría va apoyada en el hecho de que algunos virus,
como retrovirus, tienen secuencias muy similares a genes de organismos
superiores.
- Finalmente, otra opción sería una evolución independiente, desde el principio de
los tiempos, desde esa sopa primigenia hace más de 3000 millones de años, de
unos primigenios fragmentos de RNA que, seguramente, adquirieron la
capacidad de copiarse…
De todas formas, las diferencias existentes entre los diferentes tipos víricos hacen
pensar que hubo más de una forma posible en el origen de los virus. Aunque
lógicamente, muchas de las especies víricas actuales pueden provenir de especies
comunes anteriores.
Virus bacterianos
- El número de virus de los mares puede llegar a ser 10 veces superiores al de
bacterias.
- Estos virus podrían lisas bacterias y ayudarían a mantener el ecosistema.
- A los virus que infectan bacterias se les denominan BACTERIOFAGOS (fagos,
para abreviar).
Clasificación y tipos de bacteriófagos
- Las características más importantes que se consideran para la clasificación de los
fagos son la MORFOLOGÍA y el ÁCIDO NUCLEICO, aunque el rango de
huésped que infectan también influye.
- La mayoría de los fagos tienen DNA de doble cadena como material genético.
- Las diferentes familias de fagos se pueden agrupar en las siguientes categorías
morfológicas:
o Fagos icosaédricos sin cola.
o Virus con colas contráctiles (los más complejos).
o Virus con colas no contráctiles.
o Fagos filamentosos.
Fagos con RNA: estructura y ciclo biológico del fago MS2
- RNA que actúa como mensajero.
- Se sintetiza inmediatamente, tras la infección, la RNA replicasa.
- Se sintetiza formas intermedias +RNA (FORMA REPLICATIVA): Para que una
molécula de RNA+, por ejemplo, replique y pase a otra RNA+, antes tiene que
pasar por la forma complementaria, produciendo cadenas (-). Al final, se ven –al
microscopio electrónico, por ejemplo-, formas + y – unidas. Estas son las formas
replicativas o intermedios replicativos…
- De la forma –RNA se sintetiza nuevamente miles de copias +RNA.
- Unas copias +RNA actúan como mensajeros y otras vuelven al inicio del ciclo.
- Pueden infectar Enterobacterias.
- Son fagos muy sencillos con solo 3-4 genes.
MS2 es:
- Icosaédrico y pequeño tamaño (sin cola).
- Infecta E.coli. Una proteína (MADURACIÓN) colabora en la adsorción, y otros
3 genes codifican para la RNA replicasa, proteína de la CUBIERTA y la
proteína de LISIS.
- La proteína LISIS está codificada por un gen que solapa con el de la cubierta y
el de la replicasa (procedimiento común en virus pequeños).
- Sólo cuando se ha sintetizado la proteína de la cubierta, el RNA se “relaja” y se
hace accesible el sitio de inicio de la proteína de lisis (se evita la muerte
prematura de la célula).

Fagos con DNA monocatenario. El fago M13 como herramienta en biología

molecular
Dentro de los fagos con ssDNA nos encontramos 2 familias: Inoviridae (fago
filamentoso M13, que infecta Enterobacterias ) y Microviridae (Enterofago X174).
M13:
  Simetría helicoidal. Tiene 6 nm de diámetro y 860 de longitud.
 Infectan a través de La Pili.
 Poseen DNA circular (+).
 Se forman ciertos loops por apareamientos de bases complementarias.
 El ciclo replicativo es complejo: mecanismo de CIRCULO RODANTE.
 En algunos casos puede integrarse en el genoma bacteriano.
 Hay solapamiento de genes
 Durante la replicación, se forman FORMAS REPLICATIVAS de dsDNA.
El DNA (-) producido puede utilizarse para sintetizar mRNA.
 Puede liberarse de la célula sin lisarla, produciendo fagos continuamente.
 Este fago ha sido muy utilizado en BIOLOGIA MOLECULAR. Permite la
secuenciación de genes por el método de Sanger. Además, hay sitio extra en
el fago para introducir DNA exógeno (se puede utilizar como vector de
expresión).
FAGO X174:
 Junto con MS13, es el virus ssDNA más conocido. También
infecta Enterobacterias.
 Simetría icosaédrica con proyecciones en algunos vértices.
 Tiene ssDNA (+). Fue el primer ser secuenciado totalmente por
FREDERICK SANGER en 1977.
 También tiene genes solapantes.
 La replicación se realiza también mediante CIRCULO RODANTE.
 En el proceso de replicación del círculo rodante, la proteína A produce
un nick en el extremo 3’ de la cadena (+), convirtiéndose en cebador
(primer) para iniciar la síntesis de nuevas cadenas lineales de ssDNA,
mediante rotación de la estructura.
 Al completar una vuelta, la proteína A vuelve a cortar y ligar los extremos.

Fagos con DNA de cadena doble. Ciclo lítico de infección: etapas

Es el grupo mayoritario de los bacteriófagos por número de familias, alrededor de 10
entre fagos que infectan Bacterias y Arqueobacterias (cada virus suele ser específico de
géneros concretos).
Vamos a centrarnos en el orden Caudovirales, con 3 familias de virus con “cola”: la
familia Myoviridae (fagos T-pares y Mu, entre otros. Cola larga y
contráctil), Siphoviridae (fago , como más destacado. Cola larga y NO-contráctil),
y Podoviridae (T7, 29, el fago que hizo famoso al CBM. Cola CORTA NO-
contráctil).
El 96 % de todos los bacteriófagos descritos están dentro de este grupo, con más de
4500 miembros en la actualidad.
 Características generales:
- Virión sin envuelta.
- Cápsida icosaédrica (CABEZA) proteica que contiene una molécula de dsDNA.
- Un tubo helicoidal para la adsorción e inyección del DNA dentro de la
célula huesped (COLA).
- Un CONECTOR que une ambos elementos.
- Las infecciones pueden ser VIRULENTAS (lisis celular) o ATEMPERADAS
(no hay lisis y el virus puede integrarse en el genoma celular o coexistir como
elemento extracromosómico).
Con virus de este tipo se averiguó que el DNA era el material genético (S. Luria y
D. Hershey, premio Nobel); la recombinación en virus; las enzimas de restricción;
funciones tempranas y tardías víricas, etc…
Los primeros virus estudiados dsDNA empezaron a numerarse desde T1-T7.

ENTEROBACTERIOFAGO T4:
 Cabeza de gran tamaño y una cola larga.
 Collar proteico y plataforma basal con fibras largas.
 El genoma grande (unos 170 kpb).
 Otra curiosidad es que el virus puede sintetizar para
algunos tRNA propios.
 El DNA tiene REPETICIONES TERMINALES DIRECTAS (entre 3000
y 6000 bp).
 El DNA es 650 veces más largo que la cabeza, por lo que el
empaquetamiento se realiza concienzudamente.
 El DNA de T4 es químicamente distinto del DNA celular, teniendo, en
lugar de citosina, la base 5-HYDROXYMETILCITOSINA, haciendo
prácticamente resistente a cualquier enzima de restricción bacteriano.
 Genéticamente, el DNA de T4 se representa como un círculo, aun cuando
el genoma es en sí lineal, debido al fenómeno denominado PERMUTACION
CIRCULAR:
- Desde un origen de replicación único, se forma un OJO de replicación, que
acabará formando la horquilla típica de replicación bidireccional.
- Hay un extremo que queda temporalmente libre (en la forma Y) donde está la
secuencia repetida. Esta secuencia puede asociarse con la cadena
complementaria del extremo opuesto, formándose un CONCATEMERO, tras
rellenarse los huecos con DNApol y DNA ligasa.
- El problema de T4, que no tienen otros virus T impares (T7, por ejemplo) es que
estos concatémeros serán cortados por una enzima que no corta sitios
específicos, sino que lo hace cuando la cabeza del virión está llena.
- Esto ocurre con algo más de un genoma, por lo que se originarán virus con
extremos repetidos.
Abcd.............AbcdAbcd..............AbcdAbcd................AbcdAbcd...........Abcd
Al cortarse el genoma (Abcd..........Abcd) por una enzima que no es específica de
nucleótido, se desplaza la secuencia, dando la sensación de una estructura
genéticamente circular:
Abcd............AbcdA Bcde.....................AbcdAb Cdef.................AbcdAbc etc. De
esta forma, si alguien secuencia X viriones verán que cada uno empieza y termina en un
nucleótido distinto, algo más propio de cuando secuencias un genoma circular donde,
dependiendo de por dónde empieces la secuenciación, tendrás una secuencia u otra…

La síntesis proteica se agrupa en 3 categorías: proteínas TEMPRANAS, MEDIAS y

TARDIAS. Esto es muy común en todos los virus a partir de cierto tamaño, tener
diferentes fases de transcripción. Se llamen como se llamen, las primeras fases
producen factores que ayudan a las fases siguientes. La última es siempre la fase de
generación de proteínas estructurales. En el caso de T4, las dos primeras están
involucradas en la síntesis y replicación del DNA, mientras que las tardías forman la
cabeza y la cola, así como enzimas involucradas en la liberación del virión.

ENTEROBACTERIOFAGO: Mu:
- Pertenece a la misma familia que T4, pero con peculiaridades importantes.
- El genoma contiene secuencias terminales del hospedador, debido a que puede
integrarse en cualquier sitio del cromosoma bacteriano.
- Tienen alrededor de 37 kb de secuencia específica del fago, flanqueado por 0.5-
3 kb de segmento covalentemente unido del huesped (50-150 bases a la
izquierda y entre 1-2 kbp a la derecha (de donde estuvo integrado…).
- Tras la infección de la enterobacteria el DNA circulariza y se puede producir
ciclo lítico ó lisogénico (ambos requieren integración del genoma).
- Para la integración se corta de forma “cohesiva” el DNA celular, con 5 bases
desplazadas, que, al integrarse el fago, se rellenarán, duplicándose en 5 bases el
DNA celular.
- El nombre de Mu se debe a que es un fago MUTADOR.
- Actúa como un elemento TRANSPOSÓNICO.
- El DNA viral integrado, se corta unas pocas bases a la derecha del genoma, que
empieza a llenar la cápsida, con material celular extra.
- La transcripción corre a cuenta de la RNApol celular y se separa
en tránscritos tempranos y tardíos. Tras el ensamblaje, se produce la lisis celular.

FAGO P1:
- También pertenece a la familia Myoviridae. Se parece morfológicamente a Mu,
pero más grande y con variantes de distintos tamaños de la cabeza.
- También sufre, como T4, permutación circular...
- Sin embargo, comparte características similares al fago , en que puede entrar
en lisogenia tras circularizarse, pero NO SE INTEGRA en el genoma bacteriano
(suele ser E.coli). Se replica junto a la bacteria y también codifica para un
represor.
- Está implicado en transducción: Puede encapsidar hasta un 2-2,5% del genoma
de la bacteria. Se emplea para clonar y expresar grandes cantidades de
ADN (hasta 80-90 Kb), formando los llamados PACs (P1
artificial chromosomes).
ENTEROFAGO :
- Es el virus ATENUADO más conocido. Pertenece a la familia Siphoviridae.
- El virus puede entrar en ciclo lítico o lisogénico. Lítico, como su nombre indica,
lisa la célula –es lo más frecuente- y lisogénico, el fago se integra en el genoma
bacteriano y no sigue su ciclo. Esto ocurre solo en 1:10.000 infecciones, de
media.
- Durante la lisogenia, el DNA viral se replica con el celular. Aquí, el fago se
denomina PROFAGO.
- En función de unos represores, el virus se puede mantener en lisogenia. En este
caso, la célula se hace INMUNE contra otra infección por el mismo tipo de fago.
- Mientras dura la lisogenia, procedimientos que dañen el DNA, como la luz UV,
pueden inactivar el profago y la célula será CURADA completamente.
- Es un virus icosaédrico con una cabeza de unos 64 nm de diámetro y una cola de
150 nm de longitud con simetría helicoidal.
- Dispone de una única fibra unida a la cola con 23 nm de longitud, terminal, y
varias fibras subterminales.
- El genoma es una molécula de dsDNA lineal, pero tiene extremos cohesivos, es
decir, en posición 5’ de cada extremo tiene unos 12 nucleótidos sin aparear.
- Al infectarse una bacteria, el DNA del fago se circulariza y empieza la expresión
del genoma.
- A ambos lados de una región reguladora con cI (proteína represora) se
encuentran los promotores PL y PR . PR puede codificar, además de otras
proteínas importantes para mantener el ciclo lisogénico, para la proteína que
hace activarse el ciclo lítico, Cro.
- El producto de cI (REPRESOR LAMBDA) inhibe la transcripción del resto de
las proteínas virales.
- Aunque cI está entre los promotores PL y PR, ninguno de estos transcribe cI, por
estar orientados de espaldas a él. PL transcribe hacia la izquierda de cI y PR
hacia la derecha.
- El promotor que produce mRNA de cI se llama PE y está a la derecha de PR, y
en dirección opuesta.
- Cuando PL y PR están bloqueados, no se sintetiza ni cII ni cIII, necesarios para
activar PE y sintetizar cI, por lo que el fago entra en ciclo lítico, a no ser que...
- …mantener la lisogenia, existe, además, otro promotor denominado
PM (mantenimiento), que está de cara a cI y en la misma dirección que PE pero
no se ve afectado por PR, por lo que no se suprime cuando el fago está en
lisogenia.
- Si por alguna razón se produjera “cro”, el “archienemigo” de cI y lograra unirse
al O –operador- que regula los promotores R y L, inhibiría la producción de cI y
el ciclo entraría en lisis. La bacteria será lisada.
- La inducción del ciclo lítico se realiza mediante agentes que dañen el DNA
bacteriano, como la luz UV. Se activa el mecanismo de reparación de la bacteria
denominado SOS. Una de las proteínas implicadas, la RecA, actúa
como proteasa degradando al represor, cI, del fago, dándole ventaja a “cro” para
iniciar el ciclo lítico.

ENTEROBACTERIOFAGO T7:
- Familia Podoviridae. Bastantes analogías en cuanto a replicación y regulación
con T4, pero bastante más pequeño y simple.
- El mapa genético es lineal y con redundancias (repeticiones) terminales.
- Mediante repeticiones terminales se acaban formando concatémeros similares a
los de T4, pero en el caso de T7 el corte posterior de los concatémeros es
específico, por lo que no hay Permutación Circular...
- Estos fagos no entran en lisogenia, son muy virulentos y pueden infectar
bacterias gram-negativas entéricas o relacionadas.
- Dentro de la familia Podoviridae también se encuentra el fago 29, parecido a
T7. Cabeza alargada, cola y un curioso collar doble con apéndices.
Virus animales
GENERALIDADES Y CLASIFICACIÓN:
 En general, la multiplicación de los virus animales coincide con la de los
bacteriófagos: adsorción, penetración, descapsidación, replicación, transcripción,
traducción, ensamblaje de las cápsidas y liberación de virus. Como norma general,
con sus excepciones, los virus DNA replican en el núcleo celular y los RNA en el
citoplasma.
 Como ocurre con fagos, los virus pueden actuar agresivamente contra las células
que infecta (inhibición de síntesis de RNA, DNA y proteínas celulares y lisis) o bien
convivir con éstas.
 Aunque no es la norma, algunas infecciones por virus animales pueden tener un
desarrollo muy lento.
 Algunos virus están estrechamente relacionados con procesos oncogénicos.
 La mayoría de los virus estudiados pueden modificar la muerte celular
programada.
 Existen agentes infecciosos más sencillos que los virus, aunque, curiosamente, sus
mecanismos de acción pueden ser más desconocidos: PRIONES.
 La CLASIFICACIÓN MODERNA: Tipo de ácido nucleico, número de cadenas,
tamaño, presencia o no de membrana lipídica...

METODOS DE DETECCIÓN, CRECIMIENTO Y CUANTIFICACIÓN:

 Los métodos de detección se pueden utilizar en diagnóstico y pueden ser de dos
tipos: MÉTODOS DIRECTOS O SEROLÓGICOS (mediante uso o detección de
anticuerpos). Algo que los test rápidos contra el coronavirus están demostrando: test
que detectan antígenos –proteínas del virus- y otros que detectan anticuerpos del
paciente.
 Detección Directa:
 INMUNODETECCIÓN: Inmunofluorescencia (directa o indirecta),
inmunoprecipitación, inmunoblotting…
 INMUNOENSAYOS ENZIMÁTICOS: ELISA; RIA…
 OTROS ENSAYOS DIRECTOS: PCR; Microscopía electrónica...
 Ensayos Serológicos: La detección de anticuerpos frente al virus puede darnos
información de:
 Estado de la infección con virus que no pueden ser cultivados (ej: HCV)
 Estado del sistema inmune frente a la infección.
 Epidemiología.

Crecimiento y Purificación:
- Principalmente existen 3 métodos para crecer y purificar virus (como ya se
estudió en un tema anterior):
  Cultivos celulares (el más común): Sobre líneas celulares transformadas.
 Inoculación en animales (muy costoso y como último recurso)
 Cultivos sobre embriones (normalmente en huevos, como con el virus de
la gripe).
MULTIPLICACIÓN. ETAPAS:
Adsorción:
- Suele existir una (o varias) proteínas receptoras del huésped que interaccionan
con proteínas específicas del virión. (Un científico dijo una vez: “A más dinero
invertido en investigación, más receptores”).
- En muchos casos, bloqueando esta interacción (mediante anticuerpos), se inhibe
la infección.
- Algunos virus tienen especificidad por un (o pocos) tipo concreto de células
(rhinovirus, poliovirus…)
- Otros son menos específicos (sarampión…).
- Los receptores celulares para virus suelen agruparse en tipos de moléculas
concretos, siendo la SUPERFAMILIA DE LAS INMUNOGLOBULINAS, la
más numerosa: CD4 para HIV; ICAM para rhinovirus; HveB para HSV…
- En algunos casos, el virus es capaz de entrar en la célula por otras vías
alternativas: por fagocitosis inespecífica, ayudado por anticuerpos, mecanismos
de Caballo de Troya…
Penetración y descapsidación:
- Se produce poco tiempo después de la adsorción.
- Se elimina la cápsida y se libera el ácido nucleico.
- El procedimiento final puede variar con el tipo viral (algunas veces depende
de pH.)
- Los virus con envuelta penetran de forma distinta a los desnudos.
o Con virus desnudos se puede producir un
cambio conformacional durante la adsorción.
o En algunos casos, se produce una inclusión del virión en
un endosoma más un lisosoma.
o En virus con envuelta, es normal que ésta se fusione con la membrana
celular.
- El proceso se puede dar desde en poco minutos hasta en varias horas.
Replicación y transcripción:
- Virus DNA:
 Muchos virus inhiben la síntesis de macromoléculas celular para quedarse con
toda la maquinaria de transcripción y traducción para su ciclo viral. El proceso
de inhibición de la síntesis de proteínas celular por el virus se denomina SHUT-
OFF.
 Sin embargo, algunos virus pueden, incluso, estimular la síntesis de DNA
celular, llegando, incluso, a favorecer la transformación celular…
 Con pocas excepciones, como los poxvirus (vacuna, viruela. Los virus más
complejos que existen… o “existieron”), la replicación se suele producir en el
núcleo celular.
- Virus con RNA:
 Estos virus tienen estrategias replicativas más variadas que los virus DNA.
 El mecanismo suele variar según si hablamos de virus de ssRNA (+), (-),
ó dsRNA.
 Algunos virus traducen un único polipéptido que luego cortan con enzimas
específicas a las diferentes unidades proteicas maduras finales.
 Otros disponen de RNA polimerasas (transcriptasa) que transcriben un RNA
(-) a (+) para que éste pueda ejercer de mRNA.
 Los retrovirus disponen de una enzima única denominada TRANSCRIPTASA
INVERSA (o retrotranscriptasa) que pasa RNA (+) a DNA.
 El ciclo viral suele darse en el citoplasma (la gripe sería una excepción) y la
replicación se produce por una REPLICASA viral.
Traducción y ensamblaje de las cápsidas virales
- En los virus más simples, la síntesis de proteínas se suele dar en una sola fase, y
suele ir paralela a la transcripción.
- Si el virus es ssRNA (+), el genoma del “input” puede actuar directamente de
mensajero, pudiendo sintetizar enzimas virales necesarias para el resto del ciclo
viral.
- En virus más complejos, la síntesis de proteínas se puede dar en diferentes fases
(Inmediatamente temprana, Temprana, Tardía).
- Las primeras fases producen proteínas implicadas en la replicación viral y su
regulación, normalmente, mientras que las proteínas tardías suelen constituir los
componentes estructurales del virus (cápsida y glicoproteínas de la envuelta, si
la hubiera).
- Normalmente, el ensamblaje se produce de manera espontánea al sintetizarse las
proteínas estructurales.
- Tras sintetizarse la PROCÁPSIDA (cápsida vacía), lo siguiente que suele ocurrir
es que ésta se llena con el genoma viral.
- El sitio celular donde se produce LA MORFOGÉNESIS (formación de nuevas
partículas virales) varía de unos virus a otros: Los virus RNA suelen hacerlo en
el citoplasma, en factorías específicas, muchas veces asociadas a membranas
(ej: poliovirus). Entre los virus DNA hay más variabilidad en este aspecto (HSV
en el núcleo, poxvirus en el citoplasma.
Liberación de los viriones
- También depende según si el tipo viral: RNA, DNA, desnudo o con envuelta…
- Por término general, los virus desnudos suelen lisar la célula al producir la
progenie, mientras que los virus con envuelta pueden liberarse durante cierto
tiempo manteniendo a la célula viable.
- En algunos casos donde el virus con envuelta posee glicoproteínas virales, éstas
se pueden unir a membranas celulares y cuando el virus “roba” esta membrana,
se lleva en ella dichas proteínas. Estas membranas celulares NO tienen por qué
ser la citoplasmática (también Golgi o transgolgi, por ejemplo).

Efectos de la infección sobre la célula

Existen diferentes tipos de infecciones según el daño causado a la célula:
 INFECCIONES CITOCIDAS: Producen la muerte celular, con o sin lisis. Este
tipo de infecciones suelen producir una serie de modificaciones celulares micro
y macroscópicos denominados EFECTO CITOPÁTICO:
 La célula pierde el anclaje al sustrato (si son adherentes…). Se redondea.
 Aumenta la formación de membranas, de vesículas citoplasmáticas.
 Se pierde la impermeabilidad de la membrana plasmática.
Se inhibe la síntesis de macromoléculas. En muchos casos, se produce la muerte
por APOPTOSIS (suicidio activo), que es muy distinta de la necrosis (muerte
pasiva).
 INFECCIONES NO CITOCIDAS: Aunque se puede producir la lisis de
algunas células infectadas, se habla de infecciones no citocidas cuando el
conjunto del cultivo (u organismo diana) sobrevive con la infección:
 Infecciones persistentes (en cultivos celulares) o crónicas (en
organismos): suelen ser más lentas que las infecciones agudas (líticas)
y, aunque se producen partículas virales, el cultivo celular se mantiene
(HBV, HCV…).
 Infecciones latentes: La más estudiada es la de HSV-1, en neuronas. El
virus desaparece del cultivo, aunque se mantiene en el interior de la célula,
integrado o no en el genoma celular. Así puede estar años, hasta que alguna
causa externa lo reactiva.
 Infecciones activadoras de crecimiento celular: Es el caso de aquellos
virus que se han visto implicados en procesos oncogénicos (EBV, papilomas,
aunque solo unos grupos…). No solo no bloquean el crecimiento celular,
sino que pueden activarlo hasta que éste pierde el control, llegando a
producir tumores.
 Infecciones lentas: Algunos virus (HIV) producen infecciones con
desarrollo muy lento, apareciendo los síntomas años después de la infección.
Algunos de estos virus también pueden integrarse en el genoma celular. En
este grupo se encontrarían también los PRIONES.
Virus animales II
Como ya se ha comentado anteriormente, un libro actualizado de taxonomía vírica es:
Virus Taxonomy (Van Regenmortel et al. Academic Press.).
Criterios taxonómicos:
1. Naturaleza del genoma viral.
2. Tipo de cadena (ss ó ds) del genoma viral.
3. Posesión o no de Transcriptasa inversa.
4. Polaridad del genoma (+, -).
Nosotros vamos a dividir los grupos según posesión o no de membrana lipídica y sólo
comentaremos aspectos de algunos grupos.
VIRUS DNA:
VIRUS DNA SIN ENVUELTA LIPÍDICA:
Parvoviridae:
- Son virus muy sencillos y entre 18-26 nm de diámetro.
- Tienen 3 géneros principales: Parvovirus (ej: MVM), Dependovirus (AAV) y
Densovirus (virus de artrópodos).
- Simetría icosaédrica con 3 proteínas estructurales VP1, VP2 y VP3 (no
siempre).
- Genoma lineal y preferentemente encapsidan ssDNA (-).
- El genoma tiene secuencias palindrómicas (abb'cc'a'd) en los extremos que le
permiten adoptar una estructura con bucles terminales imprescindibles para la
replicación.
- La entrada se realiza a través de receptores específicos (el del B19 está muy
caracterizado) y la replicación se realiza en el núcleo y requiere fase S del ciclo
celular.
- El hecho de replicar en células en división, PERO NO INDUCIRLA, es crucial
para posibles tratamientos contra el cáncer.
- Los AAV son virus que requieren una coinfección con otro virus
(Adenovirus o Herpesvirus, de ahí AAV: Virus Asociado a Adeno) para su
replicación (proteínas tempranas de los "virus auxiliares" transactivan a los
AAV).
- Suelen producir en humanos infecciones asintomáticas y sólo a B19 produce la
infección de los eritrocitos del cordón umbilical produciendo cierto tipo de
anemia fetal.
Papillomaviridae
- Viriones de 55 nm de diámetro. Icosaédricos.
- Son altamente específicos de huésped y tejido.
- La infección parece que se produce por microlesiones en las células de la capa
basal de la piel. Para el contagio hace falta contacto estrecho…No replica
eficientemente en cultivos celulares.
- El nombre deriva del latín: papilla (pústula) y sufijo griego "oma" (tumor).
- Está implicado en la producción de las típicas verrugas virales (tumores
benignos), y algunos tipos de HPV (16 y 18) en la producción de tumores:
Carcinoma de cuello de útero (línea celular HeLa deriva de uno de ellos…).
 - El virus puede expandirse desde la superficie de las verrugas. En
individuos inmunosuprimidos es frecuente.
- Está muy extendido a lo largo de todo el mundo.
- En pocos casos, el DNA puede integrarse en el genoma celular.
- Parte de su poder de malignificación se debe a la unión de las proteínas virales
E6 y E7 a las proteínas celulares antioncogénicas p53 y Rb, respectivamente.
Esto es algo importante y general en virus oncogénicos: tienen varias
proteínas para bloquear tanto a las proteínas antioncogénicas reguladoras
del ciclo celular, como otras que activan el ciclo celular, produciendo el
tumor…
- Tras unirse a un receptor específico, el virus se descapsida y el DNA se
transporta hasta el núcleo.
- El virus tiene una molécula dsDNA circular.
- Existe una fase de transcripción temprana y tardía.
- Los viriones se liberan por lisis de la célula infectada.
- En 2008, el Nobel en Fisiología y Medicina ha sido compartido
por Harald zur Hausen, Luc Montagnier y Françoise Barré-Sinoussi, por
encontrar la relación entre el HPV y el cáncer cervical en humanas y el
descubrimiento del VIH, respectivamente. Más información:
http://weblogs.madrimasd.org/biocienciatecnologia/archive/2008/10/09/103109.aspx
http://nobelprize.org/nobel_prizes/medicine/laureates/2008/
- Zur Hausen, del Centro Alemán de Investigaciones Oncológicas, en Heidelberg,
observó en los años 70 que algunos tipos de HPV (16 y 18) estaban implicados en
uno de los tipos de tumores más importantes en mujeres, el carcinoma de cuello de
útero, vaginal, etc. Gracias a esto, actualmente hay una vacuna efectiva frente a
estos tipos de tumores desarrollada por Ian Fraser y Jian Zhou.
Polyomaviridae
- Pequeño, icosaédrico, con dsDNA.
- Son parecidos a los papilomavirus. De hecho, antes estaban englobadas las dos
familias como Papovaviridae.
- Están muy extendidos por todo el mundo. En humanos puede producir trastornos
en el tracto urinario, y el poliomavirus denominado JCPyV puede producir
una desmielinización fatal del Sistema Nervioso Central.
- Uno de estos virus, SV40, fue el primer virus purificado de un tumor en monos.
Nuevamente, este fenómeno parece estar relacionado con la capacidad del virus
de bloquear la función de las proteínas p53 y Rb…
- La transcripción incluye un evento temprano y otro tardío. Como siempre, las
proteínas tempranas están implicadas en regulación de la replicación viral y las
tardías suelen ser estructurales.
- Dos de estas proteínas reguladoras NO ESTRUCTURALES, se denominan
Antígeno “T” y Antígeno “t” (la inicial viene de su implicación de la producción
de tumores). El Antígeno T está muy caracterizado, reconoce el origen de
replicación del DNA y se une a la DNA polimerasa celular.
- En algunos tipos celulares, el DNA del virus puede integrarse en el genoma
celular y, normalmente, solo el Ag T se sintetiza, conduciendo a la célula a su
transformación (malignificación).
Adenoviridae
 - Viriones entre 70-90 nm de diámetro. Simetría icosaédrica con FIBRAS que
emergen desde la superficie del virus y están glicosiladas, dándole un aspecto
muy característico.
- Los Adenovirus causan generalmente infecciones respiratorias suaves en
humanos, sin mayores complicaciones. Después de los rotavirus, también
suponen la mayor causa de diarrea vírica infantil. Suelen ser específicos de
especies.
- Sin embargo, algunos virus pueden causar tumores en recién nacidos.
- Existen más de 40 tipos distintos de adenovirus en humanos.
- Su nombre deriva del latín: adeno (glándula). Se aisló por primera vez de
amígdalas y glándulas adenoides en humanos.
- Se puede transmitir a través de la tos, heces, ojos…
- Una peculiaridad, que comparte con los papilomas y otros virus, que luego
veremos, es la regulación de la apoptosis celular.
- El genoma consta de una molécula lineal de dsDNA.
- La RNA polimerasa celular va a transcribir genes tempranos (E1A, E1B, D2, D3
y E4), intermedios y tardíos (L). Los mRNA son modificados y por mecanismos
complicados de splicing se forman diferentes mRNA maduros.
- La transcripción se hace desde las dos cadenas del DNA viral.
- El virus acaba produciendo inhibición de la síntesis de macromoléculas celulares
o shut-off mediado por una proteína temprana.

VIRUS DNA CON ENVUELTA LIPÍDICA:

Herpesviridae:
- El nombre de esta familia viral viene del griego “Herpein” (algo así como
deslizarse, aludiendo a su capacidad de pasar de infección crónica a latente y de
aquí a recurrente).
- Esta familia está ampliamente distribuida en la naturaleza. Prácticamente, todas
las especies animales han adaptado algún virus de esta familia.
- De los más de 100 tipos diferentes de herpesvirus, 8 se han encontrado en
humanos: HSV-1 y 2; Varicela; Epstein-Barr; Citomegalovirus, HHV6, 7 y 8.
- Son virus dsDNA. Con un tamaño que va de los 150-300 nm, (incluyendo la
envuelta lipídica) y de unos 120-160 nm de diámetro de cápsida, icosaédrica.
Tiene un material amorfo que rodea la cápsida denominado Tegumento y una
Envuelta lipídica con glicoproteínas virales en la superficie (más de 10
diferentes).
- El DNA tiene un tamaño aproximado entre 120 y 230 kbp.
- Todos los herpesvirus codifican para un gran número de enzimas implicadas en
el metabolismo de los ácidos nucleicos
(timidina quinasa, sintetasa, dUTPasa, ribonucleotido reductasa), síntesis del
DNA (DNA polimerasa, helicasa, primasa) y procesamiento de proteínas
( proteina quinasa, etc.).
- La síntesis del DNA y el ensamblaje de la cápsida ocurre en el núcleo.
- Estos virus son capaces, tras una infección aguda, de producir latencia en el
huésped infectado, durante la cual, solo un muy pequeño número
de tránscritos virales son producidos.
- El Comité Internacional de Taxonomía de Virus (ICTV) ha clasificado a
los herpesvirus en 3 subfamilias, basándose en sus propiedades biológicas:
 Alfaherpesvirinae (HSV-1, 2, VZV o HHV-3): Tienen un rango variable de
posibles huéspedes, ciclo reproductivo relativamente corto, crecimiento fácil en
cultivo, eficiente destrucción celular y alta capacidad para establecer latencia
principalmente en ganglios sensoriales.
Betaherpesvirinae (CMV o HHV-5, HHV-6, HHV-7): Tienen un rango de huésped
muy estrecho. El ciclo reproductivo es lento y crecen muy lentamente en cultivos. La
célula infectada puede aumentar mucho de tamaño (citomegalia). El virus puede
permanecer en latencia en glándulas secretoras, células linfoides, riñón y otros tejidos.
El CMV humano puede producir graves daños a los recién nacidos –sordera, trastornos
cognitivos…).
Gammaherpesvirinae (EBV o HHV-4, HHV-8 o KSHV): Existen virus específicos
de linfocitos T y B. Se suele inducir la fase de latencia. Están implicados en dos tipos
de tumores: Linfoma de Burkitt y carcinoma nasofaríngeo (EBV) o en el Sarcoma de
Kaposi, típico de la fase clínica del SIDA (KSHV).

HSV fue el primero de los herpesvirus humanos en ser descubierto y estudiado. El

genoma consta aproximadamente de 150 kbp organizado en dos componentes: L
(long) y S (short). Cada uno de ellos consta de secuencias únicas (UL y US), no
repetidas, flanqueadas por repeticiones invertidas. El virus entra en la célula en dos
fases: Unión a unas moléculas específicas y fusión con la membrana lipídica celular.
Una vez en la célula, la cápsida atraviesa los poros nucleares y libera el DNA.
Dentro de la célula infectada, la RNA polimerasa celular tipo II puede producir
hasta 50 tipos diferentes de mRNA que están organizados en 3 bloques:
Inmediatamente tempranos (IE: regulación, replicación, transcripción), tempranos
(E: transcripción de los genes tardíos) y tardíos (L: estructurales). El DNA
viral circulariza y la replicación se lleva a cabo mediante el proceso del círculo
rodante. Con este mecanismo de replicación, se forman grandes concatémeros, los
cuales son cortados para la encapsidación. El ensamblaje se produce en el núcleo. Al
empaquetar el DNA, éste sufre un proceso por el cual vuelve a ser lineal.
La cápsida con el DNA se une a la membrana interna nuclear y antes de pasar al
espacio perinuclear, el virion adquiere la envuelta para luego perderla en la
membrana externa nuclear. Se supone que de aquí el virus pasa al
retículo endoplásmico, adquiriendo, de nuevo, la membrana. La infección primaria
ocurre a través de alguna pequeña herida en el epitelio nasal o bucal, a través de los
ojos o de los genitales. De la infección primaria, el virus puede acabar penetrando en
las terminales nerviosas sensoriales periféricas para establecer una infección latente
donde la expresión proteica viral desaparece. Aunque no está del todo claro el
proceso que induce la reactivación viral, se sabe que el estrés, UV, hormonas,
traumatismos físicos o emocionales pueden provocar esta reactivación vírica. Por su
distribución universal, la mayoría de los niños entre 1-2 años han sido ya infectados.
En neurona puede permanecer, en latencia, durante mucho tiempo, produciendo, de
vez en cuando, episodios de recurrencia (las heridas en el labio o nariz…).
Otros Herpesvirus importantes:
- Varicella: más del 90% de los niños menores de 5 años. Se adquiere
por vía respiratoria o conjuntiva.
 - Zoster: se debe a la reactivación del virus anterior y produce daños
dermatológicos considerables, con complicaciones cuando están afectados
los nervios craneales, llegando a producir ceguera.
- Citomegalovirus (CMV): Contiene el genoma mayor de la familia: unos
240 kbp. Prácticamente toda la población mundial es seropositiva para este
virus, cuya infección es casi siempre asintomática, menos durante el parto
para los neonatos. Solo en inmunosuprimidos o mujeres embarazadas –y sus
hijos- pueden producirse síntomas importantes.
- Epstein-Barr (EBV): Implicado en los tumores vistos anteriormente.
- HHV-8: Implicado en el Sarcoma de Kaposi, que aparece principalmente
en pacientes con SIDA.

Poxviridae
- Los virus pertenecientes a la familia Poxviridae son los de mayor tamaño de los
virus animales.
- Su morfología es compleja (no simetría icosaédrica). Al microscopio electrónico
aparecen con forma enladrillada. También pueden ser ovoides.
- Tienen desde 220-450 nm por 140-260 nm de tamaño, con envuelta externa.
El core (“núcleo”) puede ser bicóncavo o cilíndrico con dsDNA y otras proteínas
unidas a él, y uno o dos cuerpos laterales de función desconocida.
- El genoma consiste en una molécula de dsDNA covalentemente “cerrada” (NO
CIRCULAR) de entre 130-375 kpb, y que codifica para 150-300 proteínas
(según la especie). Existen repeticiones en tandem y repeticiones terminales
invertidas
- La densidad de genes es muy alta, hay poca zona no codificante. No se han
visto intrones, Ambas cadenas son transcribibles.
- Tanto la replicación como el ensamblaje se llevan a cabo en el
citoplasma (tienen la maquinaria necesaria), en "factorías virales" y el virión
puede liberarse paulatinamente (virus con envuelta) o puede destruir la célula
(virus sin envuelta).
- Los virus de esta familia pueden infectar tanto vertebrados como invertebrados.
Existen patógenos humanos dentro de la mayoría de los géneros.
- El virus más conocido de esta familia es el de la viruela humana, la cual fue
erradicada totalmente de la población mundial mediante un programa de
vacunación que llevó a cabo la OMS.
- Actualmente, esta familia y, en especial, el Virus de la Vacuna (Vaccinia) es
una herramienta importante en biología molecular pues se puede utilizar (una
forma atenuada del mismo) como vector para la expresión de cualquier tipo de
gen, elaborando virus recombinantes.
- Nuevamente nos encontramos con genes tempranos, intermedios y tardíos.
- Aunque el virus puede salir de la célula en forma de EEV (virus externo con
envuelta) y propagar la infección, la mayoría de la progenie viral permanece en
el interior en forma IMV (virus maduro intracelular) y es infeccioso en caso de
lisis celular.
- Hasta un total de 9 tipos diferentes de poxvirus pueden causar enfermedad en
humanos. El de la viruela fue el más peligroso hasta su erradicación en octubre
de 1977. Se conocen sus efectos desde hace 2000 años.
- La vía principal de transmisión de la mayoría de los ortopoxvirus es la
inhalación del virus liberado en aerosoles.
- Hacia el siglo XI ya se realizaron las primeras "vacunaciones caseras", mediante
las costras de los enfermos. Esto producía un alto número de nuevos casos, pero
la enfermedad era menor que la padecida tras una infección normal. En
1796, Edward Jenner trabajó con "Cowpox" para producir la primera vacuna
eficaz contra la viruela. La probó en el niño James Phipps al que le inoculó el
virus 6 semanas después de la vacuna.
Real Expedición Filantrópica de la Vacuna (simplemente anecdótico): El
médico Edward Jenner trató con pústulas de heridas producidas con Cowpox, el 14
de mayo de 1796, al niño de 8 años James Phipps. Poco después lo sometió al
proceso de variolización, inoculándole en la piel el virus de la viruela. El niño
sobrevivió sin problemas debido a dicho proceso que pasó a denominarse
vacunación... aunque dicho término ya lo había pronunciado tiempo atrás alguna que
otra vaquera, pues circulaba la correcta creencia que el manejo de las vacas podría
proteger contra la viruela... Aunque parece bastante “temerario” introducir a una
persona el virus de la viruela, ya lo utilizaban los turcos para vacunar. Al parecer, el
hecho de introducir el virus por una vía que no es la suya... puede proteger sin
producir la enfermedad más agresiva...
La Vacuna de la viruela llegó a España hacia 1800. En Europa morían anualmente
más de medio millón de personas por este virus... Las distintas expediciones
españolas llevaron dicha enfermedad hasta las poblaciones nativas del continente
americano. En 1519, oficiales de la Española (República Dominicana) informaron
de que la epidemia había matado a la mayor parte de los indios de la isla... De
hecho, se piensa que el virus de la viruela llegó a exterminar a la mayoría de los
incas y aztecas...
La Corona Española aprobó un proyecto para introducir la vacuna contra la viruela
en las Indias. En 2003 se cumplieron los 200 años desde la llamada REAL
EXPEDICIÓN FILANTRÓPICA DE LA VACUNA a cargo de los doctores
FRANCISCO XAVIER DE BALMIS y JOSÉ SALVANY:
- Conmovido por las noticias de las Indias Españolas, y porque su propia hija
María Luisa padeció la viruela, Carlos IV mandó al Consejo de Indias estudiar
un proyecto para organizar una expedición con el objetivo de introducir la
vacuna en aquellos territorios. El proyecto se aprobó en la primavera del 1803.
Se eligió a Francisco Xavier de Balmis como director de expedición y a José
Salvany como subdirector…
- Aparte de otros ayudantes y enfermeras, se necesitaron 22 niños que llevaban la
vacuna en su cuerpo, es decir, estaban infectados y de ellos se extraía el material
para la vacunación. La mejor forma de llevar el material, en aquella época donde
no existían neveras, era necesariamente en el interior de infectados...
- Cuando la expedición llegó a Puerto Rico, en el 1804, las autoridades locales ya
habían conseguido la vacuna a través de la colonia danesa de Saint Thomas. Esta
vacuna se estaba transportando dentro de cristales sellados con cera...
- Sin embargo, este sistema no funcionaba bien en países cálidos. El virus se
“inactivaba”. Para estos casos, era imprescindible pasar la vacuna directamente
de un brazo humano a otro humano...
- La Real Expedición Filantrópica de la Vacuna zarpó del puerto de la Coruña el
30 de noviembre de 1803 en la corbeta María Pita. Tras pasar por Canarias, se
 cruza el Atlántico, llegando a Puerto Rico. Desde aquí se sigue hacia Venezuela.
Aquí se separa la expedición en 2 ramas:
o Una, con Balmis, sale rumbo a Cuba, Mérida, Yucatán, México y
Filipinas, Macao y Cantón, regresando a España en 1806.
o La otra, con Salvany, se dirige por toda sudamérica, visitando durante 7
años Venezuela, Panamá, Colombia, Ecuador, Perú, Chile y Bolivia.
Durante este viaje, moriría el propio Salvany con 34 añitos, cerca del
lago Titicaca, el 21 de julio de 1810, regresando poco después la
expedición a España.
Curiosidades sobre el Virus de la Viruela:
- En 1977 se detectó el último caso de viruela en el mundo, en un joven somalí.
Unos años más tarde, la OMS le dio una medalla para conmemorar el final de la
viruela en la tierra...
- En España se dio por erradicada en 1955.
- En 1979 dejaron de vacunarse a los niños contra la viruela...
- Sin embargo, el virus sigue existiendo...
- En un laboratorio de Atlanta (EEUU) y en otro en la antigua URSS siguen
teniendo viales congelados de viruela... para su estudio...
- Se ha pensado muchas veces destruirlos, pero finalmente se ha evitado
argumentándose que el estudio de esos virus podría ser muy útil en caso de...
una reaparición de la epidemia... por la causa que fuere...
- Y una de las causas que podrían hacer reaparecer al virus es el
BIOTERRORISMO...

Asfarviridae
- El virus tipo de esta familia es el Virus de la Peste Porcina Africana (VPPA
= African swine fever virus: ASFV).
- Están formados por un “core” de 70-100 nm de diámetro, rodeado de una
membrana lipídica y por fuera una cápsida icosaédrica de 170-190 nm. Toda la
estructura está rodeada de una envuelta externa dando un total de 175-215 nm al
virión.
- El genoma consiste en una molécula lineal, covalentemente cerrada (como
los poxvirus) de dsDNA.
- Tienen proteínas que regulan la apoptosis.
- La replicación y transcripción (temprana, intermedia y tardía) es parecida a
los poxvirus y también se lleva a cabo preferentemente fuera del núcleo, en
factorías perinucleares. El DNA se lee en ambas direcciones.
- El virus replica principalmente en macrófagos porcinos.
- La infección del cerdo doméstico por este virus supuso un problema enorme
para la ganadería española (fue endémico en la península ibérica desde 1960-
1995). Actualmente está controlado en España, pero no así en Europa donde
ahora, curiosamente, el virus ha reaparecido en países como Bélgica y amenaza
nuestras fronteras. Hay varias vías de transmisión que van desde las picaduras de
garrapatas (que actúan de reservorio), hasta la ingestión de material
contaminado.

Hepadnaviridae
 - Son virus esféricos (algunas veces polimórficos) de 40-48 nm de diámetros.
Tienen una nucleocápsida icosaédrica (core) con una proteína mayoritaria y el
DNA viral, la polimerasa viral y algunas proteínas celulares. Alrededor está la
envuelta formada por proteínas HBsAg del virus y lípidos del
Retículo Endoplásmico y Golgi.
- El virus más conocido de este grupo es el de la Hepatitis B (HBV).
- Como se produce un exceso de proteínas de superficie (la envuelta), se pueden
formar y circular por sangre filamentos y partículas esféricas de entre 17-22 nm.
- El genoma consiste en una molécula de DNA circular, entre 3-3.3 kb, que
parcialmente es ssDNA y no está, el círculo, covalentemente cerrado.
- En general, la estrategia replicativa de estos virus es muy compleja e implica, en
algunos casos a la enzima TRANSCRIPTASA INVERSA: Parte del DNA se
replica en el núcleo y otra parte se transcribe a RNA y, este, en el citoplasma
pasa a DNA por la transcriptasa inversa y finalmente es encapsidado.
- Aunque puede infectar otros órganos, es el hígado la diana principal. La
infección no suele destruir la célula, aunque se piensa que el daño hepático
puede ser debido a la respuesta inmune. Después de una infección aguda, se
puede pasar a una infección crónica con producción continua de virus. En
ocasiones, esta cronicidad acaba en cirrosis y, de aquí, un buen número
desarrollará cáncer hepático.
- Actualmente, la incidencia de hepatitis B está descendiendo debido a la
efectividad de la vacuna contra el virus.

VIRUS RNA:
VIRUS RNA SIN ENVUELTA LIPÍDICA
Virus ssRNA (+)
Picornaviridae
- El virus de la polio, dentro de poco se convertirá en el 2º virus erradicado por el
hombre (el primero fue la viruela).
- Grupos importantes divididos en diferentes géneros son:
o Enterovirus (el virus de la polio, Coxsackievirus que produce
miocarditis)
o Rhinovirus (el catarro común)
o Hepatovirus (Hepatitis A)
o Aphthovirus (El virus de la fiebre aftosa (el primer virus animal
descubierto).
- El nombre viene del griego (pico = pequeño).
- El virus consiste en una cápsida icosaédrica de alrededor de 22-30 nm, desnuda,
rodeando a la molécula de ssRNA (+) entre 7-8.5 kb..
- El virus, para su entrada en la célula, se une a un receptor específico que suele
pertenecer a la superfamilia de las inmunoglobulinas.
- El genoma tiene un único ORF. En el extremo 5' no tiene la estructura típica de
los mRNA (cap), sino que tiene una proteína propia, VPg unida covalentemente.
- En los dos extremos tiene una región NO CODIFICANTE, importante para la
estructura 2ª del RNA y, por tanto, su función. Por ejemplo, el extremo 5' tiene
una estructura muy característica importante para replicación y PARA
 RECONOCIMIENTO POR PARTE DEL RIBOSOMA (IRES
= Internal Ribosome Entry Site).
- Gracias al IRES, los picornavirus pueden prescindir del CAP. Es más, suelen
inhibir el reconocimiento de este extremo 5' inhibiendo, por tanto, la práctica
totalidad de la síntesis de proteínas celulares (Shut-off).
- El RNA de entrada ya actúa como mensajero. Se trata de un RNA
MONOCISTRÓNICO, es decir, codifica para una sola POLIPROTEINA que,
mediante una proteasa codificada por el propio virus, se va cortando dando las
diferentes proteínas y enzimas virales. Hay 3 regiones según función: P1
(estructura) P2 y P3, replicación, regulación y ensamblaje. Todo esto ocurre en
el citoplasma, como casi todos los virus RNA.
- La replicación del RNA viral empieza poco después de la infección, con
una replicasa viral (RNA polimerasa dependiente de RNA). Se forman cadenas
RNA (-) que, a su vez, servirá para sintetizar nuevas cadenas (+). Estas nuevas
(+), pueden repetir el ciclo, actuar como mensajeros o encapsidarse. Por cada
cadena (-) se hacen unas 1000 (+).
- Casi todo los picornavirus son específicos de especie. Las vías de transmisión de
estos virus son varias: fecal-oral, aérea, etc. Normalmente, la infección es
LITICA, aunque procesos de inducción de APOPTOSIS han sido estudiados.
- Aunque la OMS estimaba que para el año 2000 el virus de la polio iba a estar
erradicado… todavía se está en el proceso. Nigeria, Pakistán, entre otros siguen
sufriendo de poliomielitis...
- La infección primaria del virus de la polio se desarrolla en el tracto
gastrointestinal (género Enterovirus) y, la infección suele ser asintomática, pero
de aquí puede pasar al SNC ocasionando infecciones severas que pueden
conducir a la parálisis y muerte.
- El virus de la fiebre Aftosa infecta animales con pezuñas, principalmente. Se han
descrito hasta 70 especies animales susceptibles. Produce unas vesículas
denominadas "Aftas" en patas y boca, infección de las vías respiratorias y,
muchas veces, miocarditis fatal. Es un virus que requiere niveles de seguridad
tipo 3 (de los 4 tipos existentes).
- El virus de la hepatitis A infecta células epiteliales, intestino delgado y
hepatocitos. Es un virus que se transmite via fecal-oral (contaminaciones de
aguas) y produce una hepatitis aguda. No es responsable de los daños crónicos
vistos con el virus de la hepatitis B ó C.
Concepto de Cuasiespecie: Está descrita principalmente en virus RNA, pues
son los que más mutaciones durante la replicación experimentan. Fallos en
la replicasa suele producir variantes virales con genomas ligeramente distintos. Muchos
de estos genomas acaban con adaptarse al medio o, dicho con propiedad, muchos de
estos virus obtienen ventajas evolutivas de las pequeñas mutaciones que se pueden
producir. Al final, lo que se considera SECUENCIA CONSENSO de un virus, ni
siquiera existe, pues no hay ningún virus que posea exactamente esa secuencia, sino que
representa la secuencia más repetida teniendo en cuenta base a base. Este hecho hace
muy difícil la elaboración de vacunas, pues siempre, el virus, encontrará una vía de
escape. El Investigador Esteban Domingo (CBM) es una de los máximos responsables
en el mundo de este concepto, desarrollado con el virus de la fiebre aftosa.

VIRUS dsRNA SIN ENVUELTA

Reoviridae
 - Aunque tienen simetría icosaédrica, pueden aparecer con forma casi esférica.
Con un diámetro entre 60-80 nm, está compuesto por UNAS CAPSIDAS
formada por proteínas dispuestas en varias capas CONCÉNTRICAS.
- Algunos reovirus pueden causar problemas respiratorios y, otros, fuertes
diarreas, sobre todo entre los 6 y 24 meses de edad, como es el caso de los
ROTAVIRUS.
- Las vías de transmisión van desde las oro-fecales hasta mediante artrópodos
como vectores.
- El virión contiene 10-12 segmentos de dsRNA lineal de alrededor de 25 kpb. La
cadena positiva contiene 5' cap.
- La replicación del dsRNA (en el citoplasma) es algo más complicada que la
de dsDNA. Una cadena de RNA actúa como molde y, a su vez, la sintetizada
sirve para una segunda cadena (existe una ssRNA polimerasa dependiente
de dsRNA o transcriptasa).
- La transcripción, obviamente, se produce a través de la cadena RNA (-).
- En factorías virales, intracelulares (viroplasma), se encapsida la cadena RNA (+)
y de ésta se sintetiza la (-) antes de completar la cápsida.
La Enfermedad de la Lengua Azul: La aparición de diversos focos de lengua
azul en Europa ha causado una cierta preocupación ante el temor de que la enfermedad
pueda afectar a la salud de los consumidores. La lengua azul es una enfermedad
infecciosa no contagiosa, de etiología viral que afecta a los ovinos, caprinos, bovinos y
a algunos rumiantes silvestres. Es transmitida principalmente por picaduras de insectos
y no afecta a humanos. La enfermedad se caracteriza por producir procesos febriles con
inflamación catarral, así como también degeneración muscular, entre otros síntomas...
El agente causal de la lengua azul pertenece a la familia Reoviridae, del género
Orbivirus, al que también pertenecen el virus de la enfermedad epizoótica hemorrágica
de los venados y el virus Ibaraki. Los orbivirus tienen un genoma formado por diez
segmentos de ARN de doble cadena para los que, hasta la fecha, se han identificado en
el mundo 24 serotipos relacionados con la enfermedad. La lengua azul no es una
zoonosis, por lo que no se transmite a humanos. Esto implica que los productos
elaborados con animales que posean el virus no tendrán ninguna repercusión para los
consumidores, siendo entonces un problema de sanidad animal. La mortalidad media se
sitúa en torno al 10%. El nombre de “lengua azul” viene de uno de los síntomas: en la
mucosa bucal se observan úlceras y erosiones. En la superficie de la lengua las úlceras
se cubren de tejido necrótico color grisáceo. En esta fase la lengua se vuelve de color
azul.

VIRUS RNA CON ENVUENTA LIPÍDICA

Virus ssRNA (+)
Togaviridae
- Uno de los virus más conocidos de este grupo es el de la RUBEOLA.
Contra este virus nos vacunan de pequeños: La famosa vacuna triple
vírica: Rubeóla, Paperas y Sarampión (de los que ya hablaremos).
- Viriones de 70 nm de diámetro, de cápsida icosaédrica y una envuelta lipídica.
- Genoma lineal, ssRNA (+) que sirve como mRNA.
- Durante la replicación se forma un RNA (-) y éste, a su vez, puede ser utilizado
como molde para producir un RNA (+).
 - La envuelta lipídica se origina del Golgi.
- Estos virus –NO la Rubeola- pueden transmitirse entre vertebrados a través de
mosquitos y otros artrópodos hematófagos. SON ARBOVIRUS (virus
transmitidos por artrópodos), como el virus Chikunguña, que podría llegar a
España por tener, nosotros, al mosquito tigre, vector.
- La infección suele ser citolítica, aunque en algunos casos se puede desarrollar
persistencia.
- Existen 2 géneros:
o Alphavirus (Virus del bosque de Semliki; Sindbis o el Chikunguña)
o Rubivirus (Rubéola).

Flaviviridae
- En esta familia se encuentran virus como Hepatitis C (género Hepacivirus), el
virus de la fiebre amarilla, el virus Dengue o el Zika (género Flavivirus).
- Parecido a los togavirus (antes estaban unidos ambos
taxones), cápsida icosaédrica y envuelta.
- RNA (+). Tienen un único ORF que formará una poliproteína que tendrá que
ser, posteriormente, procesada.
- En el caso de los Flavivirus, el rango de huésped es muy amplio y la transmisión
suele ser debida a artrópodos, principalmente mosquitos y garrapatas. La
distribución suele ser por zonas tropicales y subtropicales.
- El virus de la Hepatitis C es uno de los últimos caracterizados de esta familia
(transmisión por sangre). Más del 2% de la población mundial puede ser
portador (sin saberlo) o padecer algún tipo de cronicidad. Tras una infección
aguda, más del 60% cronifican y, de aquí, hasta un 20% pueden desarrollar
cirrosis o, incluso, hepatocarcinoma. El tratamiento actual con antivirales de
última generación llega a ser de más del 99% de efectividad.

Coronaviridae
- Los coronavirus se descubrieron en pollos en 1937. Partículas irregulares, de
unos 60-220nm de diámetro, envuelta externa y proyecciones que forman una
corona...
- El genoma es RNA (+), de 27-30 kb (el mayor entre los virus RNA).
- Pueden infectar mamíferos y aves y puede producir Síndromes respiratorios o
neurológicos...
- Normalmente, las infecciones son autolimitadas aunque, como ya sabemos,
puede causar graves y trágicas pandemias como la que comenzó en diciembre
del 2019 y que se extendió rápidamente por todo el mundo suponiendo una de
las crisis económica, sanitaria y humanitaria más profunda desde el final de la 2ª
Guerra Mundial.
- SARS: Síndrome Respiratorio Agudo Severo. Produce neumonía con fiebre, tos
seca, disnea (respiración entrecortada), dolor de cabeza... Puede llegar a causar
muerte como un daño grave alveolar. La epidemia surgió a finales de 2002 y
principios de 2003 en la provincia de Guangdong, en China y llegó a causar
cerca de los 1000 muertos. Curiosamente, este virus crece bien en Vero (células
de mono) y produce un fuerte efecto citopático. Se transmite a través de la tos y
el estornudo, aunque también a través de objetos contaminados. Suele ser “fatal”
 en un 4-10% de los casos, según la OMS. A finales de 2003 se dio por finalizada
la epidemia.
- MERS: Síndrome Respiratorio de Oriente Medio. Surgió en 2012 en la zona de
Arabia. Tiene al camello como mamífero reservorio y se transmite poco entre
humanos. Tiene una alta mortalidad de más del 30%.
- SARS-CoV-2: Pandemia mundial de un “betacoronavirus” similar al SARS,
pero con mayor capacidad de transmisión, menos virulencia y una mortalidad no
definida de entre el 1 y el 4%. El 80% de los infectados pasa la infección
asintomática o con pocos síntomas, mientras que en las personas mayores de
80% o vulnerables puede llegar a causar neumonía bilateral que, muchas veces –
hasta un 15%- acaba en muerte.

Virus ssRNA (-)

Orden Mononegavirales
- Dentro del Orden Mononegavirales vamos a estudiar 3 de las 4 familias
existentes: (Filoviridae, Paramyxoviridae, Rhabdoviridae).
- Todas estas familias tienen ssRNA (-), lineal. Entre 8-9-19 kb.
- Estas familias están relacionadas filogenéticamente y también en muchos de sus
aspectos del ciclo viral.
- Los viriones son estructuras alargadas, pseudoesféricas o en forma de U, con
envuelta y proyecciones proteicas.
- Generalmente, los genes NO SOLAPAN, y la síntesis de mRNA se hace de
forma secuencial.
- El ciclo viral se desarrolla en el citoplasma.
- Filoviridae:
- Los viriones tienen forma baciliforme o filamentosa que puede llegar a tener
hasta 600-800 nm de longitud y unos 80 nm de diámetro.
- La envuelta proviene de la membrana plasmática celular y tiene proyecciones
(proteína GP) de unos 10 nm de longitud. La nucleocápsida central es helicoidal.
- Dentro de esta familia, se encuentran los virus más temidos por el hombre
moderno (Ebola, Marburg). El reservorio natural todavía se desconoce, aunque
en una investigación reciente se han definido varias especies de murciélagos
africanos como reservorios...
- El virus Marburg se aisló en esa ciudad alemana en 1967 por contacto con
monos contaminados importados desde Uganda. También República
Democrática del Congo (Zaire) y Zimbabwe son zonas endémicas para estos
virus.
- La mortalidad tras la infección va desde el 50-90% de los casos. Los síntomas
clínicos van desde fiebres altas, hemorragias fuertes, dolores abdominales y
deshidratación extrema.
- Paramyxoviridae:
- Viriones de unos 150 nm de diámetro, más o menos esféricos, aunque puede
variar mucho la forma.
- Entre los virus de esta familia más conocidos se encuentran: Sarampión,
Paperas, Sendai, virus de la enfermedad de Newcastle o el virus
respiratorio sincitial.
 - Casi todos los miembros de esta familia infectan mamíferos y aves.
Normalmente la infección es lítica. Tampoco se conocen vectores.
- La infección suele empezar en el tracto respiratorio y se pueden extender hasta
el sistema linfoide y endotelial.
- El sarampión, que ya estaba próximo a erradicarse, por la aparición de grupos
sociales contrarios a la vacunación ha vuelto a reemerger con fuerza
multiplicándose hasta por 100 la aparición de nuevos casos en Europa y EE.UU.
- Rhabdoviridae:
- Caben destacar dos especies: El virus de la rabia y El virus de la estomatitis
vesicular.
- Los viriones tienen forma de U con unos 100-430 nm de longitud por 45-100 de
diámetro.
- Tienen un rango de infección muy amplio: vertebrados, invertebrados, plantas…
- La transmisión se puede producir por fluidos corporales en aerosoles, por
contacto, mordedura o como infección venérea.

Orthomyxoviridae (NO pertenece ya al orden Mononegavirales)

- El virus de la Gripe es el más conocido. Son virus esféricos (con excepciones
que son filamentosos), 80-120 nm. Con envuelta lipídica con glicoproteínas y
proteínas no glicosiladas virales produciendo proyecciones desde la superficie.
La nucleocápsida está segmentada y tiene simetría helicoidal.
- Constituido por un núcleo formado por una nucleocápsida viral segmentada, el
virus de la gripe está recubierto de una membrana lipídica “robada” de la
membrana plasmática de la célula que infecta.
- En esta membrana lipídica, el virus insertará sus dos glicoproteínas más
populares, la Hemaglutinina (HA) y la Neuraminidasa (NA), implicadas en la
unión del virus a su receptor celular e inicio del ciclo viral.
- Rodeando la nucleocápsida se encuentra la proteína de la Matriz (M).
- El genoma también está fragmentado, en varios segmentos de ssRNA (-) (8 en el
caso de Gripe). Cada segmento puede codificar para proteínas diferentes.
- Dependiendo del género (gripe A, B o C), el virión contiene diferente número de
segmentos genómicos constituido por RNA lineal de polaridad negativa.
- Esta característica, junto con la alta tasa de mutación durante la replicación del
virus, está implicada en los posibles cambios de tropismo del virus y en la
aparición de virus tremendamente patógeno.
- Si durante la infección de un mismo organismo coinciden dos viriones distintos,
pero del mismo género, éstos podrían intercambiarse segmentos de RNA,
originando partículas víricas distintas a las que infectaron inicialmente la célula.
- Además, las proteínas HA y NA son antigénicamente muy variables,
conociéndose varios subtipos para HA y para NA, de forma que se debe hablar
del virus de la gripe por subtipos HxNy (H1N1, H3N2, H5N1, etc.).
- La entrada del virus a la célula se hace a través de la HA.
- La transcripción se realiza EN EL NÚCLEO CELULAR. Existen genes
solapantes y procesamientos con splicing.
- Estos virus producen enfermedades respiratorias y se ha descrito transmisión
entre diferentes especies. Se pueden transmitir por aerosoles y a través del agua.
 - En la panepidemia de gripe del año 1918 (gripe española) murieron entre 20-40
millones de personas en todo el mundo. Los americanos (y no los españoles) que
vinieron a Europa a luchar en la primera Gran Guerra la trajeron consigo...
- A lo largo del siglo XX, las infecciones a humanos más frecuente con el virus de
la gripe A se han debido a los serotipos H1N1, H2N2 y H3N2.
- No obstante, como desgraciadamente hemos podido comprobar, virus que
infectan básicamente aves como el H5N1 o H9N2 pueden saltar e infectar
humanos llegando a producir su muerte. Normalmente, cuando estos saltos
ocurren, el virus ve impedida su expansión directa entre humanos.
- La gripe A es, con diferencia, la más virulenta, la que produce los síntomas más
graves y la de mayor variabilidad antigénica. Asimismo, la gripe A ha sido la
causante de las mayores pandemias sufridas en la historia de la humanidad.
- Mutaciones durante la replicación pueden ampliar el espectro de acción del virus
a todo el cuerpo, incluyendo el corazón y el cerebro. Esto es lo que, al parecer,
ocurrió en la epidemia de gripe registrada en Hong Kong en 1977, primer caso
documentado de salto del virus de pollo a humano, donde de 18 personas
infectadas murieron 6.
- Si el virus aviar H5N1 y el humano H3N2 coincidieran en el mismo huésped,
podría originarse un nuevo virión con la mortalidad extrema del virus de pollo y
la capacidad de transmisión entre humanos.
Retrovirus. Virus RNA con envuelta y RT
Retroviridae
- Los retrovirus constituyen los agentes patógenos más importantes de las últimas
décadas (al menos antes de la emergencia del coronavirus de 2020).
- Agrupa virus de distinta naturaleza: virus capaces de producir cáncer,
enfermedades autoinmunes, inmunodeficiencias (VIH causa el SIDA, que afecta
a millones de personas)
- Es una familia que ha sido profundamente reestructurada en cuanto a los
distintos grupos se refiere, agrupándose como: Alpha (Sarcoma de Rous), Beta,
Gamma, Delta y Epsilonretrovirus, Lentivirus (HIV-1), Spumavirus.
- Es una familia muy especial por su mecanismo de replicación, y de ahí su
nombre: Retro (mecanismo "inverso" de síntesis nucleica…), mediante la
enzima Transcriptasa en reverso (o inversa). Puede integrarse en el genoma
celular y permanecer durante muchísimo tiempo inactivo. Está implicado en la
producción de tumores y, entre sus virus más conocidos, se encuentra el HIV.
- Fueron los primeros virus implicados en cáncer.
- Son virus muy importantes para biología molecular (la enzima transcriptasa en
reverso se utiliza en clonación y caracterización de genes) y clínica, ya que, al
integrarse en el genoma, se puede utilizar para integrar genes con fines
terapéuticos: terapia génica.
- Viriones esféricos, 80-100 nm de diámetro, con envuelta lipídica con
glicoproteínas víricas específicas e importantes para la infección (gen env).
- Cápsida esférica o cónica y formada por 3 subunidades proteicas codificadas por
el gen gag (MA, CA y NC).
- Dentro se encuentran las enzimas virales necesarias para el proceso de
replicación viral: proteasa (gen pro) y la transcriptasa inversa e integrasa,
codificadas por el gen pol. El virión contiene, además, tRNA propios.
- El genoma consiste en 2 moléculas idénticas lineales de ssRNA (+) entre 7-11
kb. Estos RNA podrían actuar directamente como mensajeros (5'cap y 3'
poliadenilados), PERO NO LO HACEN.
- En los extremos del genoma se localizan las regiones LTR (long terminal
repeats) que juegan un papel primordial durante el proceso de retrotranscripción.
Ciclo viral:
- Aunque con diferencias entre géneros, todos los retrovirus tienen las siguientes
regiones en su genoma: gag, proteínas estructurales internas; pro (proteasa); pol,
transcriptasa inversa e integrasa; env, proteínas de la envuelta. Algunos virus,
como el Sarcoma de Rous, tienen un cuarto gen, src, implicado en la
transformación celular y cáncer.
- La entrada de los virus se realiza mediante reconocimiento específico de un
receptor celular (CD4 en el caso de HIV), seguida de fusión de las membranas.
- La replicación se realiza en los siguientes pasos:
- Retrotranscriptasa (transcriptasa inversa): transcribe una de las 2 copias del
RNA en un cDNA que, a continuación, pasa a dsDNA, todo esto utilizando un
tRNA que puede llevar el virión como cebador (primer).
- Este dsDNA va al núcleo y ahí puede integrarse al azar en el genoma celular
formando un provirus.
- El provirus puede ser transcrito por la RNA pol II celular en mRNA viral. En la
traducción se pueden formar poliproteínas que, posteriormente, serán cortadas.
- Mediante un mecanismo de splicing y manteniendo el mismo extremo 5', se
forman las proteínas de la envuelta de env.
- Encapsidación del RNA en las nucleocápsidas, en el citoplasma.
- Durante la salida, toman la envuelta con las glicoproteínas virales de la
membrana plasmática celular.
- La transcriptasa inversa muestra 3 actividades: Sintetiza DNA a partir de
RNA; Sintetiza DNA con DNA como molde y degrada (nucleasa) el RNA una
vez formado el híbrido RNA:DNA.
- Los Retrovirus están asociados con una gran cantidad de enfermedades:
Leucemias, linfomas, sarcomas, carcinomas, inmunodeficiencia, enfermedades
autoinmunes, neuropatologías.
- El gen implicado en inducir tumores se denomina Oncogén, y produce una
proteína que rompe el estrecho control de la división celular. Una célula normal
contiene secuencias parecidas a estos oncogenes y se denominan
Protooncogenes, normalmente implicadas en el control del crecimiento celular.
- La transmisión puede ser por varias rutas: sanguínea, saliva, sexual y puede
pasar de madre al feto.
VIH: Sin duda, el retrovirus más conocido es el HIV (VIH en
español), causante del SIDA. Este virus infecta linfocitos T (principalmente)
que juegan un papel crucial en la respuesta inmune, por lo que la defensa
inmunológica se rompe y se producen multitud de infecciones oportunistas
causantes de la enfermedad: Candidiasis, Tuberculosis, Linfoma de Burkitt
(EBV), Sarcoma de Kaposi (HHV-8)… Las terapias actuales se centran en
varios frentes: la proteasa viral, el ligando viral a la célula y con análogos de
nucleótidos (AZT: Azidotimidina fue el primero). Fenómenos de apoptosis han
sido involucrados en el descenso de la población de linfocitos CD4+. El SIDA
puede ser causado por 2 virus: VIH-1 y VIH-2. El 2 se halla menos extendido en
 el mundo y causa SIDA con muy baja frecuencia en el sujeto infectado. A partir
de ahora... nos referiremos al VIH-1:
Morfología y composición del virión:
- El virión tiene un núcleo con forma cónica. La envuelta lipídica deriva de la
membrana de la célula hospedadora.
- La glicoproteína expuesta en la superficie (SU, gp120) está anclada a través de
la proteína transmembrana (TM, gp41).
- Por debajo de la envuelta se encuentra unas 2000 copias de la proteína de la
matriz (MA, p17).
- En el interior se encuentra la cápsida cónica (2000 copias de CA, p24), que
encierra dos copias del genoma viral estabilizado por 2000 copias de la proteína
de nucleocápsida (NC, p7), además de encontrarse varias copias de la proteasa
(PR), retrotranscriptasa (RT) e integrasa (IN).
- El genoma de VIH es complejo. Además de los genes típicos (gag-pro, pol, env),
existen otros reguladores (tat, rev, nef, vif, vpr, vpu).
- Epidemiología:
o El paso a la especie humana se dio desde el chimpancé Pan troglodytes
troglodytes, que pueden estar infectados con un virus con alta homología
con el VIH: SIV.
o Al parecer, el salto se dio no hace mucho, entre 50-70 años, aunque
también se habla de más de un siglo...
o En el año 2000, la OMS estima que 40 millones de personas tienen
SIDA, aunque el número de sujetos infectados podría acercarse a 200
millones, con especial incidencia en el África subsahariana.
o En los países más industrializados, la epidemia se mantiene estable,
aumentando en Asia y en Europa del Este.
- Prevención y tratamiento:
o Las medidas de prevención son muy conocidas: control de transfusiones
y hemoderivados, evitar intercambio de jeringuillas y métodos barrera en
las relaciones sexuales. Con cesárea programada y tratamiento
farmacológico disminuye el riesgo de contagio vertical de madres a
neonato.
o Vacunación: Es un desafío debido a la tasa de mutación del virus y a su
capacidad de permanecer latente y oculto en células del linaje mieloide.
Se están haciendo nuevos abordajes con diferentes proteínas virales, pero
todavía estamos a años de un tratamiento preventivo altamente eficaz.
o Hacia 1981, Barré-Sinoussi y Montagnier, del Instituo Pasteur de París
caracterizaron cultivos aislados de nódulos linfáticos de pacientes con
una extraña inmunodeficiencia. En 1984 ya tenían aislados varias
muestras del retrovirus, que pasó por varios nombres hasta terminar
como VIH. En 2008, el Nobel en Fisiología y Medicina fue compartido
por Harald zur Hausen, Luc Montagnier y Françoise Barré-Sinoussi, por
encontrar la relación entre el HPV y el cáncer cervical en humanas y el
descubrimiento del VIH, respectivamente.

EJEMPLO DE ENFERMEDADES CAUSADAS POR VIRUS

Son varios centenares los virus descritos que pueden causar algún tipo de patología en
humanos. Aunque ya hemos comentado algunas de estas enfermedades causadas por
virus, podemos agruparlas por mecanismo de transmisión:
- Aire: Se propulsa a través del estornudo, al hablar o toser… :
o Varicella y Herpes Zóster. Enfermedad de piel, muy contagiosa y afecta
a niños entre 2 y 7 años como varicela, mientras que el zoster puede
aparecer muchos años más tarde como reactivación.
o Gripe. Afecta a las vías respiratorias. Según los antígenos H y N, se
clasifican en grupos A, B y C. El grupo A sufre mucha variación
antigénica, por lo que se dificulta la lucha contra él. Entra por inhalación
y acaba adherido al epitelio del aparato respiratorio. Causa escalofríos,
fiebre, malestar, dolores generalizados… Como ocurre con muchos
virus, solo se pueden tratar los síntomas.
o Sarampión. Enfermedad cutánea muy contagiosa. Penetra por el aparato
respiratorio o la conjuntiva ocular. Hacia el décimo día empiezan los
síntomas: tos, fiebre, conjuntivitis, cefalea, para terminar varios días
después con erupción cutánea. Aunque ya existe una vacuna (dentro de la
triple vírica), se estima que cada año muere más de 1 millón de personas
en todo el mundo.
o Parotiditis (paperas). Se produce, principalmente, en niños en edad
escolar. Se transmite por la saliva y gotitas respiratorias al árbol
respiratorio. Produce dolor durante la palpación de las glándulas
salivares (parótidas) tras 2-3 semanas de infección, así como tumefacción
(inflamación de las glándulas).
o Virus Sincitial Respiratorio (Paramyxo.). Una de las causas más grave de
infección respiratoria en niños pequeños. En lactantes, puede llegar a
producir bronquitis y neumonía.
o Rubéola. (Togaviridae). También se denominó “sarampión alemán”.
Infección cutánea moderadamente contagiosa, que se da en niños de 5-9
años. Se disemina en gotitas que se desprenden a partir de las secreciones
respiratorias de los individuos infectados. Produce exantema de pequeñas
manchas rojas y fiebre ligera que dura varios días. Durante el embarazo
puede ser fatal para el feto.
o Coronavirus. Se transmite en “aerosoles” de mayor tamaño –más de 5
micras- y a menos de 2 metros puede transmitirse de una persona a otra.
A partir de ahí, el virus puede caer y contaminar objetos que si son
tocados y luego nos llevamos las manos a la cara, boca, nariz, ojos,
podemos infectarnos.
- Por artrópodos: mediante chupadores de sangre. El virus puede replicar en el
insecto sin producir enfermedad:
o Fiebre amarilla. Fue la primera enfermedad humana en la que se
encontró una causa viral y en la que se confirmó que un mosquito la
propagaba. Es endémica de zonas tropicales. Produce ictericia (de ahí el
nombre) por depósitos biliares en la piel y mucosas al sufrir daño
hepático. Produce fiebre, escalofríos, dolor de espalda, náuseas y
vómitos, hasta poder llegar a dañar hígado, riñones, bazo y corazón.
o Dengue, Zika, Chikunguña, Crimea-Congo…
- Contacto directo:
o SIDA. Se considera como la primera gran pandemia de la segunda mitad
del siglo XX. Se estima que más de 40 millones de personas están
infectadas en todo el mundo. Se contagia por exposición directa de una
persona a líquidos corporales (sangre, semen, secreciones vaginales),
por contagio sexual o de forma perinatal desde una madre infectada a su
hijo. Se considera una persona con SIDA por debajo de 200 células
CD4+/ml. A partir de este momento, comienza la infección de agentes
oportunistas. El VIH puede infectar macrófagos y, dentro de ellos, llegar
hasta el Sistema Nervioso Central, donde produce cefaleas, fiebre,
reflejos anormales, ataxia y puede llegar a la demencia. Finalmente, la
infección por VIH está relacionada con la aparición de varios tipos
diferentes de tumores: Sarcoma de Kaposi, carcinomas de boca y recto,
linfomas B…
o Herpes labial. Se transmite por contacto directo de las superficies del
tejido epitelial con el virus. Hay destrucción tisular local hasta que el
virus desaparece para entrar en latencia. Durante la reactivación, vuelven
a la zona primaria de infección e, incluso, pueden diseminarse por la
cara. En ojos, pueden producir queratitis herpética (inflamación de la
córnea), que puede ser una causa importante de ceguera. Se supone que
hasta un 80-90% de la población mundial adulta está infectada con HSV-
1.
o Resfriado común. Es una de las infecciones que con más frecuencia
experimentan los humanos de todas las edades. Más del 50% de los casos
se produce por rinovirus, que tiene más de 115 serotipos diferentes, por
lo que resulta tan difícil la vacunación. Las fuentes de contagio pueden
ser: Secreciones nasales, transmisión aérea, o a través del contacto con
las manos. Sin embargo, al parecer los estornudos explosivos
propagan poco el virus. Algunos coronavirus producen también estos
síntomas.
o Rabia. Existen varias cepas diferentes. Es, fundamentalmente, una
enfermedad animal y se transmite por mordedura, arañazos, heridas
abiertas, etc. El virus pasa del músculo al SNC y mediante
transporte axonal retrógrado puede alcanzar la médula espinal
produciendo dolor en el lugar de la herida. Puede diseminarse por todo el
cuerpo, incluyendo las glándulas salivares. En las neuronas cerebrales
produce la aparición de unas masas de virus visibles al microscopio
óptico denominadas Cuerpos de Negri. Al final, los síntomas van desde
ansiedad, irritabilidad, depresión, fatiga hasta parálisis y muerte.
Curiosamente, en ocasiones se desarrolla algo parecido a la hidrofobia
(la visión del agua produce espasmos, ya que la deglución de líquidos es
muy dolorosa…).
o Hepatitis virales. La pueden desencadenar diferentes virus. El HAV
raramente cronifica, mientras que el B y el C producen persistencia en
más del 60% de los casos. El contagio puede producirse vía fecal-oral
(como el A y el E), por fluidos corporales (B), o básicamente a través de
la sangre (C). Las infecciones agudas del B y C suelen ser asintomáticas,
mientras que la A produce destrucción hepática con ictericia por
acumulación de bilirrubina (producto de degradación de la hemoglobina)
en piel y otros tejidos. Como ya se ha comentado, la cronificación puede
conducir a cirrosis y hepatocarcinoma. Otros virus que producen
 hepatitis son: HDV (hepatitis D) que depende del B y está próximo a
los viroides en estructura.
- Por alimentos y agua:
o HAV y HEV. Ya se ha mencionado en el punto anterior. Se pueden
transmitir, además de por vía fecal-oral de alimentos, a través de bebida
o moluscos que viven en agua contaminada. HEV está actualmente
clasificado dentro de la familia Caliciviridae (ssRNA). Normalmente, las
infecciones son autolimitantes y benignas, pero en ocasiones se produce
un fracaso hepático fulminante.
o Poliomielitis. Puede permanecer infeccioso durante mucho tiempo en
alimentos y agua contaminada. La infección primaria se da en la garganta
e intestino delgado. Generalmente es asintomático, pero puede penetrar
en la sangre y de ahí al SNC causando poliomielitis paralítica. Va a
considerarse erradicado dentro de poco.

Algunas preguntas para una autoevaluación (completamente individual. Las respuestas

deberás buscarla en los apuntes y/o libros de texto o páginas web oficiales sobre virus):
1. Por término general, ¿dónde suelen replicar los virus con ARN y ADN?
2. En un virus “ideal”, ¿cuáles son sus fases de infección, comenzando por la
adsorción?
3. ¿Todos los virus de ADN son mayores que todos los virus de ARN?
4. Un virus con ARN(+) que tenga como genoma UAG GAA UUG, ¿cómo será su
ARNm?
5. ¿Cuáles son los criterios principales para la clasificación de los virus?
6. ¿Cuántas hipótesis sobre el origen de los virus existen?
7. ¿Qué tiene una célula que no puede tener un virus? ¿Y al revés?
8. ¿Sabrías comentar algún fago que entre en lisogenia?
9. ¿Cómo se regula la expresión del represor cI del fago lambda?
10. ¿Qué es la Permutación Circular?
11. ¿Qué son los concatémeros?
12. ¿Conoces alguna característica diferencial del fago T4?
13. Fago MS2: una molécula de ARNm ¿qué posibles destinos puede tener (son 3)?
14. ¿Qué hace tan especial al genoma del virus de la poliomielitis como para poder
traducirse cuando el resto de los mensajeros celulares no lo pueden hacer?
15. ¿Podrías citar, al menos, a 3 picornavirus?
16. ¿Puedes citarme un virus con dsRNA?
17. ¿Cómo consigue un virus oncogénico producir un tumor?
18. Necesitando como necesita, los parvovirus, que la célula esté en división para
infectar, ¿qué les hace tan especiales para posibles tratamientos contra algunos
tipos de tumores?
19. ¿Podrías citarme 4 tipos de herpes que infecten a humanos?
20. Tras una infección aguda, ¿Qué caracteriza a la mayoría de los herpesvirus?
21. ¿Podrías citarme una excepción de virus ARN que replique en el núcleo y virus
ADN que lo haga en el citoplasma?
22. Además de los retrovirus, ¿qué otra familia vírica tiene la Retrotranscriptasa?
23. ¿Por qué es tan altamente variable el virus de la gripe?
24. ¿Puedes citarme un virus que haya sido erradicado por el hombre? ¿Puedes
citarme otro?
25. ¿Qué funciones tiene la Retrotranscriptasa del VIH?
26. ¿Puedes citarme 3 coronavirus?
27. ¿Alguna diferencia entre el SARS-CoV-1 y el 2?
28. ¿Algún virus que se transmita especialmente por aire, contacto, mosquito o
agua?
29. ¿Qué es un Arbovirus?
30. ¿Puedes citarme 3 arbovirus mencionando las familias a las que pertenecen?