Asignatura

Lab. Bases Hist. Del organismo

Unidad I

Presentado por

Thaily Rosanna Montilla Rodríguez

100599094

Facilitadora

Violeta González Pantaleón

Sección

35
 2021-2

Universidad Autónoma de Santo Domingo

Facultad de ciencias de la salud
Cátedra de Histología
Cuestionario de técnicas histológicas y microscopía #1

Técnicas histológicas

1. ¿Qué es la histología?

La histología es la rama de la biología que estudia la composición, la

estructura y las características de los tejidos orgánicos de los seres
vivos.

2. ¿Qué es la técnica histológica?

Se denomina técnica histológica al conjunto de operaciones a que se

somete una materia organizada, a fin de que sea posible su estudio por
medio del microscopio, posibilitando la observación de estructuras no
visibles al ojo humano.

3. Mencione los pasos de la técnica histológica.

-Obtención de la muestra
-Fijación-Lavado, deshidratación y aclaramiento
-Inclusión
-Corte
-Tinción o Coloración
-Montaje
4. ¿En qué consiste la obtención de la muestra?

Obtener un espécimen de un animal anestesiado o después de la

muerte. En humanos es posible en cirugías al extirpar tejidos enfermos.

5. Mencione los diversos procedimientos que permiten obtener

muestras de tejidos y órganos.

-Biopsia: la muestra se obtiene de un individuo vivo.

-Necropsia: la muestra se obtiene de un cadáver.
-Biopsia incisional: se obtiene una sección de la lesión.
-Biopsia excisional: es extraída la lesión completa
6. ¿En qué consiste la fijación y cuáles son sus objetivos?

En conservar el protoplasma con el menor grado de alteración posible y

evita la autolisis por enzimas liberadas por el propio tejido.
-Detiene procesos celulares dinámicos
-Conserva intacta la estructura lo más posible
-Aumenta la afinidad por determinados colorantes
-Confiere cierta rigidez al tejido

7. ¿Cómo se clasifican los fijadores y cuales se encuentran en cada

grupo?

Los fijadores se clasifican en:

-Simples, en estos podemos encontrar la formalina (formaldehido),

alcohol, bicloruro de mercurio, bicromato de potasio, acido pícrico, ácido
acético, osmico, glutaraldehído (microscopia electrónica).

-Compuestos en estos encontramos:

Liquido de bouin
Ácido pícrico + ácido acético + Liquido Zenker
Formalina
Ácido pícrico + bicloruro de
mercurio + bicromato de potasio
8. ¿En qué consiste la deshidratación de la muestra y cual se utiliza?

Deshidratación: Luego de que la muestra ha sido fijada se debe eliminar

el fijador y deshidratar. Para esto se utiliza una serie gradual de
soluciones acuosas con una concentración de menor a mayor del agente
deshidratante, como por ejemplo alcohol etílico. La deshidratación
gradual se hace para evitar la deformación de la morfología del tejido,
debido a la rápida salida del agua.

9. ¿En qué consiste la aclaración de la muestra y cuales se utilizan?

Aclaramiento: Posterior a la deshidratación el tejido se debe sumergir en

un líquido que sea miscible tanto en el medio de inclusión como en el
medio de deshidratación. El líquido comúnmente utilizado es el xilol.
Esta etapa se llama aclaramiento debido a que el tejido se vuelve
transparente.
10. ¿En qué consiste la inclusión y cuales se utilizan?

Inclusión (embebimiento) Se coloca el tejido en medio de inclusión

(embebimiento) y luego se prepara el bloque dejando solidificar el medio
de inclusión para tener una masa homogénea firme que contiene el
tejido incluido.
Finalidad de la inclusión: Proporcionar un soporte rígido (bloque de
tejido) para facilitar el corte.
Se utilizan: Parafina, celoidina

11. ¿En qué consiste el corte de la muestra?

Se Secciona el bloque de parafina endurecida en el Microtomo en cortes

de 3-10 µm de espesor que pasa al portaobjetos con albúmina de huevo
en su superficie (para adhesión).

12. ¿Cuál es el instrumento utilizado para realizar los cortes y cuáles

son los tipos?

-Micrótomo para parafina: Se utiliza principalmente para material incluido

en parafina y se obtienen secciones de 5 a 20 µm de grosor. Estas
secciones se observan con el microscopio óptico.

-Micrótomo manual: Es un dispositivo muy sencillo que consta de un

soporte para sujetar la muestra. Los cortes se realizan a mano con una
cuchilla. Este micrótomo se usa prácticamente sólo para tejidos
vegetales, los cuales son duros gracias a las paredes vegetales. Hace
cortes gruesos, 100 µm o más, observables con el microscopio óptico.

-Vibratomo: Corta material no incluido, aunque sí fijado o duro, en

secciones que pueden ir desde 30 hasta centenares de µm de grosor.
Estas secciones se observan con el microscopio óptico.
Micrótomo de congelación: Con él se consiguen secciones de 30 a unas
100 µm de grosor a partir de material congelado y se observan con el
microscopio óptico.

-Criostato: Consigue secciones a partir de material congelado y se

obtienen grosores de 10 a 40 µm, para observar con el microscopio
óptico.

-Ultra micrótomo: Con él se corta material incluido en resinas y se

obtienen secciones habitualmente de una poca decena de nanómetros
de grosor, pero también entre 0,5 y 1 µm. Las secciones de 0,5 µm o
 más se observan con el microscopio óptico, mientras que las de un
grosor de decenas de nanómetros van destinadas a ser observadas con
el microscopio electrónico de transmisión.

-Ultracriotomo: Su uso no está muy extendido, pero se suele emplear

cuando se necesitan secciones del orden de nanómetros de material
que no se deben incluir. Estas secciones van destinadas a su
observación con el microscopio electrónico de transmisión.

13. ¿En qué consiste el montaje y cual se utiliza?

-Se quita el exceso de colorante lavando con agua o alcohol (según

solvente del colorante)
-Se deshidrata (alcohol en concentraciones crecientes)
-Se aclara: pasar el corte por una solución con el aclarador.
-Se coloca una gota de medio de montaje, esta posee índice de
refracción igual al vidrio
Medio de montaje: Bálsamo de Canadá
-Se coloca un cubreobjetos encima de la preparación, se deja secar.
Estando el corte listo para su observación microscópica y su
almacenamiento

14. ¿Qué es un colorante?

Son sustancias químicas orgánicas complejas utilizadas para colorear

componentes celulares o extracelulares del corte. Se pueden considerar
como “Sales neutras con radicales tanto ácidos como básicos”

15. ¿Cuál es la combinación de colorantes más utilizada en histología?

Los colorantes de uso general son sales neutras que tienen radicales
tanto ácidos como básicos. Por sus radicales (que donan):

-Ácidos cuando la propiedad de tinción está en el radical ácido

(acidófilas). Los colorantes ácidos tienen carga negativa. Coloración
Rojo-rosado

-Básicos cuando la propiedad de tinción está en el radical básico

(basófilas). Los colorantes básicos tienen carga positiva. Coloración
Azul-violeta
16. ¿Cómo se clasifican los colorantes?

Colorantes ácidos para teñir citoplasma:

-Eosina
-Ácido pícrico
-Ácidos azoicos
-Cromotropo
-Ácidos diazoicos
-Azul de trípano
-Rojo de tripano

Colorantes básicos para teñir núcleo y algunas organelas

-Hematoxilina
-Hematoxilina férrica
-Colorantes de anilina
-Azure A
-Azul de toluidina
-Azul de metileno
-Azul brillante de cresilo
-Rojo neutro
-Verde de Janus

17. ¿Qué son los colorantes ácidos, básicos y neutros?

-Colorantes ácidos: Tienen especial afinidad por las estructuras básicas

de las células, como por ejemplo la hemoglobina. Algunos ejemplos son
la eosina y el ácido pícrico.

-Colorantes básicos: Tienen especial afinidad por las estructuras ácidas

de las células, como por ejemplo los ácidos nucleicos. Algunos ejemplos
son el azul de metileno, el azul de toluidina o la hematoxilina.

-Colorantes neutros: Están compuestos por sales de un ácido y de una

base coloreados. Tiñen el núcleo de un color y el citoplasma de otro. Un
ejemplo es el eosinato de azul de metileno.

18. Mencione 5 ejemplos de colorantes ácidos y básicos.

Ácidos
-Eosina Básicos
-Ácido pícrico
-Hematoxilina
-Ácidos azoicos
-Cromotropo -Hematoxilina férrica
-Colorantes de anilina
-Azure A -Azul de toluidina
 -Ácidos diazoicos
19. ¿Qué es la coloración intravital y cuales soluciones se utilizan?

Es la administración de colorantes vitales a través de las vías digestiva o

intratraqueal; mediante inyecciones sanguíneas, linfáticas, subcutánea,
o intraperitoneal. Las soluciones de uso más frecuente son: tinta china,
carmín de litio, azul tripán (partículas colorantes que demuestran la
capacidad fagocítica).

20. ¿Qué es la coloración supravital y cuales soluciones se utilizan?

Coloración supravital, En este procedimiento se emplean colorantes que

se aplican a células o tejidos provenientes de organismos vivos. Se
demuestran: mitocondrias con el verde de Jano, los gránulos de las
células cebadas con el rojo neutro, la sustancia granulo filamentosa de
los reticulocitos con el azul brillante de cresyl, ramificaciones nerviosas
con el azul de metileno; o el ADN y el ARN de las células con naranja de
acridina (empleando el microscopio de fluorescencia).

21. ¿Qué es la coloración ortocromática?

Es la acción de tinción que ejerce un colorante al colorear una

determinada estructura con su propio color. La gran mayoría de los
colorantes producen coloración ortocromática.

22. ¿Qué es la coloración metacromática?

La coloración metacromática es aquella que confiere al tejido un color

diferente al del colorante utilizado. Por ejemplo, al colorear gránulos de
las células cebadas de color rojo.

23. Mencionen 10 colorantes específicos y que estructura tiñen.

-Azul brillante de Coomassie

-Azul de metileno
-Azul Nilo
-Bismarck Brown
-Bromuro de etidio
-Carmín
-Cristal violeta
-DAPI
-Eosina
-Fucsina ácida
 24. ¿Qué es la histoquímica?

Campo de la investigación cuyo objetivo es la localización de

compuestos químicos ya conocidos en regiones específicas o
componentes celulares por análisis bioquímico, que producen sustancias
coloreadas insoluble. Gracias a las propiedades químicas o físicas
inherentes del tejido.

25. ¿Qué es la inmunocitoquimica?

Rama de la citoquímica que se ocupa de la localización microscópica de

las proteínas presentes en los tejidos o células, tomando como base una
reacción de antígeno anticuerpo.

26. ¿Qué son los artefactos y mencione cada uno de los tipos?

Un artefacto se define como cualquier alteración indeseada introducida

en una muestra de tejido debido a las técnicas de procesamiento que se
realizan para su observación. Pueden ser espacios sin tejido, roturas,
pliegues, colores anormales, precipitados, burbujas de aire, etcétera.

Debido a la manipulación del tejido durante la técnica histología no todos

los cortes son perfectos. Una mala manipulación durante la preparación
puede llevar a alteraciones que se llaman artefactos. Las cuales le
quitaran calidad al corte dificultando su interpretación.

-Encogimientos
-Precipitados
-Pliegues y arrugas
-Defectos de cuchilla
-Manejo poco cuidadoso
-Degeneración post-morte

Microscopía

27. Dibujar microscopio óptico, sus partes y explicar su función.

28. ¿Qué es la microscopía?

La microscopía es el conjunto de técnicas y métodos destinados a hacer

visible los objetos de estudio que por su pequeñez están fuera del rango
de resolución del ojo normal.
29. ¿Qué es el microscopio?

El microscopio es una herramienta que permite observar objetos que

son demasiado pequeños para ser observados a simple vista. El tipo
más común y el primero que fue inventado es el microscopio óptico.

30. ¿Qué es el microscopio óptico y mencione 4 ejemplos?

Un microscopio óptico es un microscopio basado en lentes ópticas.

También se le conoce como microscopio de luz (que utiliza luz o
fotones) o microscopio de campo claro. Este uso de una única lente
convexa se conoce como microscopio simple, en el que se incluye la
lupa, entre otros aparatos ópticos.

-Microscopio óptico de campo brillante o campo luminoso.

-Microscopio de campo oscuro.
- Microscopio de contraste de fase.
-Microscopio de luz polarizada.

31. ¿Qué es el microscopio electrónico y mencione 4 ejemplos?

Un microscopio electrónico usa electrones en lugar de fotones o luz

visible para formar imágenes de objetos diminutos. Los microscopios
electrónicos permiten alcanzar amplificaciones mayores. Hay dos tipos
básicos de microscopios electrónicos: el microscopio electrónico de
transmisión (Transmission Electron Microscope, TEM) y el microscopio
electrónico de barrido (Scanning Electron Microscope, SEM).
Microscopio electrónico de transmisión (MET): permite la observación de
muestra en cortes ultrafinos