PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATÓLICA MADRE Y MAESTRA
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BÁSICAS
LABORATORIO DE BIO-231
Estos son los medios de cultivos previos a la
realización de los experimentos:
De izquierda a derecha: caldo de cultivo, agar
inclinado, agar profundo.
Indique sobre las siguientes imágenes:
a) Crecimiento como (+) o (-)
b) Presencia de pigmentación naranja o roja
(+) o (-)
1- Serratia marcescens en agar inclinado:
1
(-)(+)
2- Serratia marcescens en agar profundo:
(-)(+)
3- M. luteus en caldo de cultivo
2
(+)(-)
4- Explique por qué́ los siguientes pasos son esenciales durante el subcultivo.
a) Flamear el instrumento de inoculación antes y después de cada inoculación
Para esterilizarlo, evitando contaminación.
b) Sostener las tapas de los tubos en la mano
Porque no se debe dejar en la mesa donde es probable contaminarse.
c) Enfriar el instrumento de inoculación antes de obtener el inóculo.
Porque si no puede modificar los microorganismos, lo más probable, destruirlos por las
altas temperaturas.
d) Flamear el cuello de los tubos inmediatamente después de destaparlos y antes de volver a
taparlos
Se flamea al destaparse y antes de volver a taparlos para evitar que entre cualquier otro
factor que pueda contaminarlo.
5) Describa los propósitos del procedimiento para crear un subcultivo
Debido a que los microorganismos no se pueden mantener en un cultivo por un periodo
indeterminado. Se utiliza un subcultivo para crear un nuevo cultivo que tenga una menor
densidad de células que el primero. Al no tener metabolitos tóxicos y tener nutrientes
frescos así mismo permite que las células crezcan en un ambiente fresco de manera
continua y se multipliquen, evitando la muerte celular.
6) Explique por qué́ se usa una aguja recta de inoculación para inocular el tubo de agar profundo.
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Porque de lo contrario puede haber una interpretación de una motilidad positiva. Esto sucede
cuando las bacterias crecen hacia los lados del inóculo. Por la misma razón se utiliza la
aguja recta porque con un asa con anillo puede dar como resultado un falso positivo.
Entonces por esto se debe de cuidar que la punción sea única, y que al momento de retirarse,
se haga de la misma forma y en la misma dirección en que entró la aguja en un principio.
7) Observando su cultivo en el tubo de agar inclinado, usted sospecha que el cultivo está
contaminado. Bosqueje el método que utilizaría para verificar si su sospecha es justificada.
Para yo hacer un cultivo en un medio, tiene que estar estéril, ya que, se debe llevar un proceso de
esterilización porque el cultivo debe estar puro. Entonces como identifico que está contaminado,
cuando se puede ver otro microorganismo creciendo que nos contamine el cultivo y nos daña el
experimento.
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Esta es una placa Petri con caldo nutritivo. Sobre las siguientes imágenes diga: forma, elevación,
pigmentación y tamaño.
8- Serratia marcescens
circular, elevado, rojo, relativamente grande.
9- E. coli
circular, elevado, sin pigmentación, diminuto.
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10- M. luteus
circular, amarillo, no elevado, pequeño.
11) ¿Puede prepararse un cultivo puro a partir de un cultivo mixto en caldo o en agar inclinado?
Explique
Sí, con técnicas de aislamiento.
12) ¿Por qué se utiliza un asa para aislar colonias individuales de una placa sembrada por estrías?
Por su diseño, está hecha de un modo para que se deslice suavemente sobre el agar,
sin causarle daño, dando como resultado un buen estriamiento.
13) ¿Cómo puede determinar si la colonia que se eligió para aislar es cultivo puro?
Al repetir el proceso de aislar las colonias, se va a considerar cultivo puro si todas tienen
las mismas características (forma, color...).
