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CON INTERPRETACIÓN DE
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ABBOTT DIAGNÓSTICOS
UNA DIVISIÓN DE ABBOTT LABORATORIES
ATLAS DE HEMATOLOGÍA
CON INTERPRETACIÓN DE
HISTOGRAMAS Y ESCATERGRAMAS
ATLAS DE HEMATOLOGÍA
CON INTERPRETACIÓN DE
HISTOGRAMAS Y ESCATERGRAMAS
Abbott Laboratories de México S.A. de C.V.
Marketing Editor: Q.F.B. Alfonso Ortega Seoane.
Gerencia General: Ing. Carlos García Monsreal.
Coordinador de la Producción: Q.F.B. Alfonso Ortega Seoane

Dinfor S.A. de C.V.

Popotla 96-7
Col. Tizapán
San Ángel, Deleg. Alvaro Obregón (01090)
México, D.F.
Director de la Publicación: José Manuel Almudí Catalán

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ISSNN*: 1666-7174
Año 1 - Edición 1
Edición, producción y realización gráfica
E.C. S.A.
Cerrito 1136 Piso 5 CE 1010
Buenos Aires, Argentina
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ÍNDICE

MÓDULO I

• PRÓLOGO n
• LAS CÉLULAS SANGUÍNEAS NORMALES Y LA HEMATOPOYESIS 13
• FÓRMULA O SERIE ROJA 17
Los eritrocitos 17
Las anemias 23
Frotis de sangre periférica: la serie roja 29
• FÓRMULA O SERIE BLANCA 34
Los granulocitos 34
Los linfocitos y plasmocitos 38
Las leucemias 42
Monocitos y macrófagos 46
Loslinfomas 50
Frotis de sangre periférica: la serie blanca 53
•FÓRMULA PLAQUETARIA 58
Las plaquetas 58
Frotis de sangre periférica: plaquetas 62
• BlOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO HEMATOLÓGICO 64

MÓDULO II

•INTERPRETACIÓN DE HISTOGRAMAS 67
2.1. Introducción 67
2.2. Tecnologías aplicadas a la generación de histogramas y escatergramas 67
2.3. Impedancia eléctrica para conteo de eritrocitos y plaquetas 68
2.4. Impedancia eléctrica aplicada al conteo y clasificación de células blancas
con reporte de la diferencial de 3 partes 72
2.5. Impedancia eléctrica enfocada por flujo para conteo de eritrocitos, plaquetas
y leucocitos 74
2.6. Tecnología MAPSS (multi-angle-polarized-scatter-separation) 76
• CONCLUSIONES 85
• GLOSARIO SOBRE LA TECNOLOGÍA CELL DYN 86
• BIBLIOGRAFÍA 93
MÓDULO
 LAS CÉLULAS SANGUÍNEAS NORMALES
Y LA HEMATOPOYESIS
La sangre del ser humano, como la de todos los mamí • Los granulocitos, caracterizados por sus granulos in-
feros, contiene una serie de células especializadas esen tracitoplasmáticos. Entre ellos se encuentran los neutró-
ciales para la supervivencia: los eritrocitos,  encargados filos, los basófilos y los eosinófilos.
del transporte de oxígeno a los tejidos; las plaquetas, que • Los linfocitos, subdivididos a su vez en células T y célu
intervienen en la coagulación y en la integridad tisular; las B. Las primeras con capacidad de destrucción
y los leucocitos,  que cumplen funciones de defensa del citotóxica (CD8) o presentadoras de antígenos (CD4),
huésped. mientras que las células B son las encargadas de sinteti
Los leucocitos incluyen a varios tipos de células con fun zar anticuerpos.
ciones diferentes entre sí: • Los monocitos, encargados de funciones de fagocitosis
tanto en circulación como en los tejidos.
Representación esquemática qu e muestra la composición normal de la sangre
La producción de estas células está a cargo de la médu
y la relación proporcional entre las distintas células que la conforman. la ósea, en donde se desarrollan a partir de células
pluripotenciales que van madurando y diferenciándose

Elementos formes Plasma

45% 55%

número por mm 4.8 - 5.4 millones

5000-10000 / /
250000 - 400000^
c •»
eritrocitos
Wr^  <^^B KTFP1
^^a ^L Í_J t^L -Ar"» _*JL. .^^ ^ Ir vr 7  mY*lJC m

60%-70% 20%-25% 3%-8%

2%-4%'
0.5%-1%'

Neutrófilos Linfocitos

4«ta»
13
 LAS CÉLULAS SANGUÍNEAS NORMALES Y LA HEMATOPOYESIS

lula osea
Hematopoyesis
10%-30% 40%-80% < 2%- 5%-20% ?%

Eriíropoyesis

hacia las diferentes líneas celulares. El nivel de las célu

Los precursores sanguíneos se organizan en la médula ósea formando colonias las maduras circulantes está controlado por múltiples
celulares. A partir de éstas, y guiadas por las citocinas y los factores de creci
miento específicos, se produce la diferenciación de cada una de las líneas
factores humorales y celulares y se ajusta rápidamente
celulares. de acuerdo con las necesidades del momento. Por ejem
plo, en la infección por una amplia variedad de microor
ganismos resulta en una casi inmediata liberación de
i Tamaño y color á  Tamaño y color ^ Estructura de ^ Maduración neutrófilos maduros por parte de la médula ósea, segui
del citoplasma | del núcleo | la cromatina | de un eritrocito da por un aumento en la producción de otros gra-
nulocitos y monocitos hasta que el agente infeccioso es
eliminado.
LA HEMATOPOYESIS
La hematopoyesis es el proceso mediante el cual se forman
las células de la sangre en la médula ósea, a partir de una
célula madre pluripotencial o stem cell. A partir de dicha
célula se originarán las diferentes series celulares: eritrocitos,
leucocitos y plaquetas.
Para que esto ocurra, han de tener lugar una serie de
fenómenos concatenados que se inician a nivel unicelular
con la autoduplicación, seguidos de diferenciación y ma
duración, culminando con la producción de las células
maduras que serán liberadas a la circulación.
Se considera la diferenciación  como la secuencia de he
chos genéticos que permiten a una célula sintetizar pro
ductos específicos, los que le confieren potencialidad para
determinada función. La maduración es la secuencia de
fenómenos bioquímicos y morfológicos iniciados por la
diferenciación y que confieren capacidad funcional a la
célula.
La stem cell es capaz de autoduplicarse, resultando en
células hijas que conservan la capacidad de la célula
madre de dar origen a nuevos linajes celulares. Las célu
las hijas son las "unidades formadoras de colonias" o colony
 forming unit  (CFU), las cuales ya tienen la información
genética que les permitirá definirse hacia una serie celu
La maduración celular en la hematopoyesis comprende un gran número de lar. Esta serie de estados secuenciales de la hematopoyesis,
transformaciones que marcan el proceso de diferenciación celular. Esta ilus
tración muestra algunos de los cambios más ostensibles de los precursores de pluripotencial a bipotencial o unipotencial, es irrever
sanguíneos durante su maduración. sible.

14
 LAS CÉLULAS SANGUÍNEAS NORMALES Y LA HEMATOPOYESIS

REGULACIÓN DE LA HEMATOPOYESIS De todos los factores de crecimiento hemolinfopoyéticos

En la hematopoyesis participan una serie de factores regu recono cidos, es quizá la IL-3 la más investigada hoy en
ladores y estimulantes entre los cuales están presentes día por la capacidad que posee de estimular múltiples
diversas interleucinas, factores de crecimiento y otras líneas celulares, así como la síntesis de inmunoglob ulinas
citocinas. (Igs). Es posible que la complejidad en el conocimiento
de la regulación de la hematopoyesis disminuya con el
La acción de las citocinas sobre las células hematopoyé- estudio de los receptores para las diferentes hemo-
ticas es muy amplia y compleja. La mayoría de ellas tiene linfopoyetinas. Se ha propuesto la existencia de una
influencia sobre determ inado linaje celular y en cierto es familia de receptores para diferentes factores de
tadio de maduración celular. crecimiento entre los que se encuentran la hormona
Las citocinas son glucoproteínas que actúan a muy bajas del crecimiento, prolactina, eritropoyetina (EPO),
concentraciones sobre receptores, lo cual produce deter trombopoyetina (TPO), factor estimulador de colonias
minadas señales que ordenan a la célula vivir, morir, de granulocitos (FEC-G), factor estimulador de colo
proliferarse, diferenciarse o ejercer cierta función. Se cal nias de granulocitos y monocitos (FEC- GM), y las
cula que el número de citocinas que actúan sobre la interleucina s IL-2, IL-3, IL-4 e IL-6.
hematopoyesis supera los 60, y su función en los precurso Los factores estimulantes de colonias son moléculas capa
res celulares de las diferentes series es generar señales par a ces de estimular el crecimiento y la maduración de deter
la supervivencia, proliferación o diferenciación celular minados linajes celulares de la médula ósea. Entre ellos se
hacia cierto linaje celular. Generalmente regulan más de identifican el GM-CSF (factor estimulante de la colonia
una línea celular y muestran efecto aditivo o sinérgico con granulocito-macrófago), el G-CSF (factor estimulante de
otros factores de crecimiento , moduland o la expresión de la colonia de granulocitos), el M-CSF (factor estimulan te
genes reguladores producto res de citocinas. de la colonia de macrófagos) y la interleucina-3 (factor
estimulante de múltiples colonias).

Esquema general de la hematopoyesis en el que se muestr a la participación de

Otros factores que regulan la hematopoyesis a nivel de
los distintos factores reguladores. ciertas líneas celulares son la eritropoyetina (regula la
eritropoyesis) y la trombopoyetina (regula la trombo-

célula madre

Eritrocito
Macrófago

Eosinófilo Neutrófilo

15
 LAS CÉLULAS SANGUÍNEAS NORMALES Y LA HEMATOPOYESIS

ACCIÓN DE LOS FACTORES DE CRECIMIENTO EN PROGENITORES

HEMATOPOYETICOS Y CÉLULAS SANGUÍNEAS

Células blanco Factore s hemolinfopoyéticos

UFC-B1. UFC-LM LK, IL-1, IL-3, IL-6, IL-12

UFC-GEMM LK, FEC-GM, IL-3, IL-4
UFC-L LK, IL-1
UFC-GM LK, FEC-G, FEC-GM, IL-4
UFB-E LK, EPO, IL-3, IL-9
UFC-E LK, EPO, IL-3, IL-4
UFC-M LK, FEC-M, IL-6
UFC-G LK, FEC-G, FEC-GM, FEC-M, IL-
UFB-Meg LK, IL-3, IL-6 TPO
UFC-Meg LK, IL-3, IL-4, IL-6 TPO
UFC-Bas LK, IL-11
UFC-LB LK, IL-2, IL-4, IL-7
UFC-LT LK, IL-2, IL-7
Proeritroblasto EPO
Linfoblasto B IL-2, IL-4
Linfoblasto T IL-2, IL-7
Monocito/macrófago FEC-G, FEC-M, IL-1, IL-7
Neutrófilo FEC-G, FEC-GM, IL-1, IL-18
Basófilo/mastocito LK, FEC-GM, IL-4, IL-11
Eosinófilo FEC-GM, IL-5
Linfocito B/C. Plasmática IL-2, IL-4, IL-5, IL-6
Linfocito T IL-2, IL-4, IL-7
Linfocito GG IL-2, IL-6, IL-10

aunque se considera que también existe producción de

UFC= unidad formadora de colonias. UFB = Unida d formadora de brotes. esta horm ona a nivel hepá tico y por parte de los macrófa-
BI = Blascos. LM= Linfoide-mieloide. GEMM= Granulocitos, monocitos, gos medulares. La acción de la eritropoyetina en la
megacariocitos. L= Linfoide. GM= Granulocitos, monocitos. E= Eritroide.
eritropoyesis ya se observa desde los primero s precursores
M= Monocitos. G= Granulocitos.  Meg=  Megacariocitos. Bas =  Basófilos.
 Eo= Eosinófilos. LB= Linfocitos B. LT= LinfocitosT. GG = Grande granular. eritroide s, es decir, a ni vel de BFU-E y CFU-E. Todos los
LK= Ligando c-kir. IL= Incerleucina. FE C= Factor estimulante de colonias. precursores de la serie roja poseen receptores específicos
 EPO=  Eritropoyetina. TPO= Trombopoyetina. para eritropoyetina.
La trombopoyeti na es conside rada el mayor regulador
poyesis). La eritropoyetina es sintetizada a nivel de las de la proliferación, diferenciación y producción de
células peritubulares intersticiales o tubulares del riñon, plaquetas.

16
 FÓRMULA O SERIE ROJA
LOS ERITROCITOS

Los eritrocitos son células altamente especializadas en el La eritropoyesis -que tiene lugar en la médula ósea— es el
transporte de oxígeno hacia los tejidos. El conjunto de célu proceso mediante el cual los progenitores eritroides progre
las de la serie roja, es decir, desde los progenitores hasta la san a través de diferentes estadios madurativos, transfor
célula madura, se conoce co n el nombre de entró n, un idad mándose en células cada vez más especializadas y madu
considerada un verdadero órgano en términos funcionales. ras, hasta alcanzar la circulación sanguínea.

Proeritroblasto

Se divide dentro de las 12 horas

posteriores a la estimulación

Eritroblasto basófilo

Requiere 20 horas
para su desarrollo

Comienzo de la sín tesis de hemoglo bina

Necesita 30 horas
para su maduración

Eritroblasto policromatófilo

Sobrevive Máximo nivel de síntesis de hemoglobina

48 horas

Eritroblasto ortocromático
Expulsión del núcleo

Permanece 1 o 2 días  — El 34% del volu men es hemo glo bina

en la circulación
antes de pasar
a la etapa siguiente • Circulación libre en el flujo san guín eo
Reticulocito

Vive alrededor de 120 días

Eritrocito

Representación esquemática del proceso de eritropoyesis.

 FÓRMULA O SERIE ROJA

PROGENITORES ERITROIDES
Nucléolo de gran tamaño E ISLA ERITROBLÁSTICA
• BFU-E. La célula madre que va a dar origen a la serie
roja es la BFU-E  (burstformingunit-erythroid),   derivada a
su vez de la célula pluripotencial o  stem cell,  la cual es
capaz, de acuerdo con el estímulo recibido, de diferen
Mitocondrias ciarse hacia granulocitos, eritroblastos, macrófagos o
megacariocitos.
• CFU-E. A medida que el proceso de maduración pro
gresa, se desarrolla la CFU-E (colony forming unit-
erythroid) , célula sumamente sensible a la acción de la
Polirribosomas eritropoyetina.
Tanto la BFU-E como la CFU-E se encuentran en míni
mas proporciones en la médula ósea respecto del resto de
los precursores eritroides. Observadas mediante mi
Representación de la BFU-CFU con sus principales características croscopía electrónica , estas células se caracterizan por un
morfológicas. gran nucléolo, abundantes polirribosomas y grandes
mitocondrias, similares en cierto mod o a los blastos.
•  Isla  eritroblástica. La unidad anatómica de la
eritropoyesis es la llamada isla eritroblástica, qu e consiste
en uno o dos macrófagos rodeados de células eritroides
Macrófago
en maduración . La adhesión entr e macrófagos y precur
sores eritroides ocurre en el estadio CFU-E de madura
ción celular y continúa durante toda la eritropoyesis.
Conforme continúa la maduración, los precursores van
abriéndose paso a través de los macrófagos y, llegado el
momento de la expulsión del núcleo, el eritroblasto se
contacta con una célula endotelial, pasa a través de un
poro en el citoplasma de ésta e ingresa a la circulació n. El
núcleo es expulsado antes de su salida de la médula ósea,
y es fagocitado y degradado por los macrófagos. En el de
sarrollo de la isla eritroblástica part icipa la fibronectina y
un sistema de reconocimiento célula-célula, en el cual
Células eritroides en maduración
intervienen hemaglutininas y sialoadhesinas de los pre
cursores eritroides que interactúan con receptores espe
cíficos en la superficie de los macrófagos, que a su vez
Isla eritroblástica: Macrófago rodeado de precursores eritroides en la médula poseen receptores para eritroblastos (EbR). La isla e-
ósea.
ritroblástica es una estructura de tal fragilidad que suele
romperse en el proceso de aspiración de médula ósea con
aguja, y sólo son visibles en muestras obtenidas con este
procedimiento cu ando existe un a actividad eritroblástica
acelerada como en las anemias hemolíticas y en la
Citoplasma azulado
eritroleucemia.

• Proe ritr oblasto s. Los proeritroblastos son las células que

madurativamente siguen a la CFU-E y se caracterizan por
ser voluminosas, de 20 a 25 micr ones de diáme tro, de for
ma redondeada irregular, ligeramente ovalada. El núcleo
ocupa cerca del 80% del volumen celular total, y conti ene
Nucléolos fina cromatina distribuida en pequeños acúmulos, ob
servándose uno o varios nucléolos bien definidos. Los
polirribosomas se distribuyen en grupos de 2 a 6 en el cito
Granulos con ferritina plasma celular, dando al proeritroblasto su aspecto basófilo
y fosfatasa acida intenso característico. A mayor aumento pueden obser
varse moléculas de ferritina dispersas en el citoplasma y
granulos en la zona del aparato de Golgi que tambi én con
tienen ferritina y fosfatasa acida, lo cual indica que serían
Proeritroblasto: Célula de 20-25 u.m de diámetro, con un gran núcleo inma
duro que ocupa la mayor parte de la superficie celular.
de naturaleza lisosomal. Otros granulos, diferentes a los

'.8
 FÓRMULA O SERIE ROJA

anteriores, contienen catalasa. En el citoplasma, además,

puede n distinguirse moléculas de hemo globina y partícu Citoplasma azul

las de glucógeno.
• Eritroblastos basófilos.   Los eritroblastos basófilos son Ausencia de nucléolos
menos voluminosos que sus predecesores, los proeri-
troblastos, y miden cerca de 16-18 micrones. El núcleo
ocupa las tres cuartas partes del área celular y se caracteri Cromatina con
acúmulos rosados
za por su heterocromatina violeta oscuro con acúmulos
rosados de eucromatina, unidos entre sí por bandas irregu
lares. El conjunto de estas estructuras le da al núcleo un Halo perinuclear
aspecto de rueda o reloj. El citoplasma es color azul inten
so, con un halo perinuclear más claro y otro rodeando el
aparato de Golgi. La basofilia citoplasmática corresponde Polirribosomas
a la presencia de polirribosomas. Suelen verse también
microtúbulos conectando dos eritroblastos en mitosis.
Aumento de la hemoglobina
•  Eritroblastos policromatófilos.   Luego de la segunda
división mito tica de las células de la serie roja, el citoplas
ma va tomando un color más rosado a medida que la he
moglobina diluye el conte nid o de los polirribosomas. Las Eritroblasto basófilo: Célula de 16 a 18 |im, con un gran núcleo caracterizado
células de este estadio madurativo, los   eritroblastos por presentar en su interior heterocromatina mezclada con eucromatina, uni
policromatófilos, miden entre 12 y 15 micrones y su núcleo das entre sí dando el aspecto de una rueda.
ocupa menos de la mitad del área celular. La heterocro
matina se observa bien definida y en acúmulos. Ya no se
cuarto del área celular y se dispone en una ubicación ex
observa nucléolo y el halo perinuclear aún está presente en
céntrica. El eritroblasto ortocromático posee una gran mo
esta fase madurativa. Dentro del citoplasma pueden ob
vilidad, probablemente necesaria para la posterior expul
servarse siderosomas y moléculas de ferritina dispersas.
El aparato de Golgi es más pequeño y puede contener sión del núcleo. La ultraestructura de esta célula evidencia
lisosomas. bordes irregulares, reflejando la motilidad, heterocromatina
en grandes acúmulos intranucleares y ribosomas dispersos
•  Eritroblastos ortocromáticos.   Luego de la división en el citoplasma. Las mitocondrias son menos voluminosas
mitótica final de la serie eritropoyética, la concentración y reducidas en número, así como la hemoglobina se en
de hemoglobina aumenta confiriéndole a la célula un as cuentra en toda la célula, inclusive en el núcleo.
pecto mucho menos basófilo que las anteriores, aunque
como aún se siguen observando monorribosomas, el aspec RETICULOCITOS
to es de colores mixtos, característico del eritroblasto Los reticulocitos surgen una vez que el eritroblasto orto-
ortoc romát ico. Esta célula, de 10 a 15 microne s, posee un cromático se ha desembaraz ado del núcl eo. El proceso de
núcleo pequeño sumamente denso que ocupa tan sólo un expulsión nuclear comienza mientras el eritroblasto aún

Aparato de Golgi más pequeño Citoplasma con tonos mixtos

Citoplasma con ton os rosados Núcleo con aspecto denso

Cromatina condensada Cromatina condensada

en acúmulos reducidos en grandes acúmulos

Ausencia de nucléolos
Ribosomas

Siderosomas
Aumento de la hemoglobina

Moléculas de ferritina
presentes en el citoplasma Mitocondrias muy voluminos as

Eritroblasto policromatófllo: Célula de 12 a 15 u.m, cuyo núcleo ocupa cerca Eritroblasto ortocromático: Célula más madura, con un pequeño núcleo en
de la mitad de la superficie celular. su interior.
 FÓRMULA O SERIE ROJA

forma parte de la isla eritroblástica, o bien, a medida que la comúnmente conocido como discocito, es decir, la forma
célula atraviesa la pared del seno medular. El núcleo, inca que adopta el eritrocito cuando no está sometido a estrés.
paz de atravesar este escollo, queda en la médula ósea y es El discocito puede transformarse reversiblemente por una
rápidamente fagocitado por los macrófagos de la isla. Aún serie de factores externos (principalmente pH y concen
se desconoce si el reticulocito así formado se mueve en tración de albúmina) en otras dos formas: el est omatocito,
forma activa o si se traslada siguiendo una diferencia de célula unicóncava con forma de copa, y el equinocito,
presiones. caracterizada por la presencia de varias proyecciones
espiculadas que surgen de la superficie celular. En la prác
El reticulocito aún posee mitocondri as, algunos ribosomas,
tica, estas tres formas pued en convivir entr e sí, lo cual in
el centríolo y resabios del aparato de Golgi, sin retículo
dicaría que en realidad representan distintos estados de
endoplásmico. A la microscopía electrónica se observan
equilibrio de la memb rana plasmática. A pH fisiológico y
como células de forma irregular, con varias organelas re en presencia de albuminemia norma l, los eritrocitos siem
manentes en su interior. pre aparecen de forma bicóncava. Cuando el pH se eleva
ERITROCITO MADURO o las concentraciones de albúmina descienden, o bien, en
presencia de otro tipo de factores, el hematíe comienza a
El eritrocito normal tiene el aspecto de un disco bicóncavo, proyectar espículas (eq uinocito). Por el contrario, cua ndo
con un diámetro promedio de 8 micrones, el cual disminu el pH es bajo o existe un exceso de albúmina plasm ática, se
ye discretamente con el envejecimiento celular. Su nota transforma de discocito a estomatocito. En ambos casos se
ble flexibilidad le permite u na deformabilidad que hace a trata de variaciones reversibles, que, una vez superada la
la célula capaz de atravesar capilares de hasta 2,8 micrones situación anormal, permiten que el eritrocito vuelva a su
de diámetro. Dicha deformabilidad tiene lugar gracias a forma original.
varios factores: la membrana plasmática eritrocitaria es
excesiva para la superficie celular, la viscosidad interna El eritrocito transcurre la mayor parte de su vida útil (100 a
(dependiente de la con centrac ión de hemoglobina) y el 120 días) en la microc irculació n capilar, en donde se cal
radio superficie-volumen de la célula. Un au men to en un cula que viaja una distancia de aproxim adamente 250 km
20% de la concentración de hemoglobina corpuscular en total. A medida que envejece, el glóbulo rojo va perdien
media (CHCM) resulta en un aumento de la viscosidad do progresivamente su membrana, aumenta en forma re
interna en aproximadamente un 600%, aunque aún le lativa la CHCM, y disminuye su deformabilidad, aun
permite deformarse y atravesar los capilares. Elevaciones que todos estos cambios no se observan morfológicamente.
superiores impiden esta necesaria flexibilidad. En la
circulación, la principal causa de disminución de la de El eritrocito se comporta como un osmómetr o, ya que de
formabilidad eritrocitaria es la membrana insuficiente, pende dire ctamente de la osmolaridad plasmática: cuan
hecho que ocurre en la esferocitosis, por ejemplo. do se lo ubica en una solución hipertónica, se encoge de tal
forma que las superficies internas de su parte central prác
El glóbulo rojo normal se tiñe de color rojo-amarronado ticamente se cont acta n entre sí. Del mismo modo, cu ando
con Wright y rosa con Giemsa. El terc io central de la célula se lo expone a un medio hipotónico, aumenta peligro
es de color algo más pálido que la periferia, lo cual refleja samente de volu men hasta incluso romperse si supera su
su forma bicóncava. Este aspecto circular, bicóncavo, es nivel de hemolisis (cerca de 10 nm o 100 A).

Citoplasma con bordes irregulares

Citoplasma con bordes lisos

Ausencia del núcleo

Coloración central
más clara

Mitocondrias

Ausencia de núcleo
y otras organelas
Fragmentos
del aparato de Golg

Hemoglobina disuelta
Ribosomas en el citoplasma

Reticulocito: Cé lula de forma irregular y care nte de núc leo en la que persisten Características morfológicas del eritrocito m aduro.
algunas organelas remanen tes.

20
 FÓRMULA O SERIE ROJA

PUEDEN EXISTIR EN SANGRE PERIFÉRICA DISTINTOS

TIPOS MORFOLÓGICOS DE ERITROCITOS.
ESTE APARTADO DESCRIBE ALGUNOS DE ELLOS.

1. Sideroblastos en anillo.   Células presentes en trastornos caracterizados por una anomalía en la madura
ción eritrocitaria que determina una eritropoyesis ineficaz e hiperferremia, como ocurre en las anemias
sideroblásticas (alcoholismo, intoxicación con plomo), en las anemias diseritropoyéticas o en ciertas
hemoglobinopatías. Morfológicamente, los sideroblastos pueden contener granulos de hierro dispuestos en
círculo alrededor del núcleo, tal es la razón por la cual también se los conoce como sideroblastos en anillo.
De manera característica se observa, bajo microscopía electrónica, depósitos de hierro dentro de las
mitocondrias, entre sus crestas.
2. Eritrocitos con cuerpos de Howell-Jolly.   Restos nucleares que permanecen en el interior de
reticulocitos. Por lo general es uno solo, de no más de 0,5 micrones de diámetro, a veces varios. Característi
camente se observan en pacientes esplenectomizados, en anemias hemolíticas, en anemia megaloblástica y
en estados de hipoesplenismo.
3. Reticulocitos con anillos de  Cabot.  Estructura anular que se observa en el interior de los reticulocitos
en pacientes con anemia megaloblástica, a veces también en los megloblastos intermedios de estos enfermos.
Se cree que representan material remanente de mitosis anormales.
4. Eritrocitos con cuerpos de Heinz.   Resultado de proteínas desnaturalizadas, sobre todo hemoglobina,
presentes en los eritrocitos de pacientes con talasemia, hemoglobinopatías o anemia drepanocítica. Suelen
adherirse al interior de la membrana celular, protruyendo dentro del citoplasma.
5. Eritrocitos normales.   Con forma de disco bicóncavo, ligeramente más pálido en el centro que en la
periferia.

6. Microcitos.   Glóbulos rojos pequeños característicos de la anemia ferropénica. Generalmente son

hipocrómicos (por menor hemoglobina) o de tinción irregular (poiquilocromía).

Eritrocitos con cuerpos de Howell-Jolly Reticulocitos con anillos de Cabot

Microcitos Eliptocitos u ovalocitos

21
 FÓRMUIA o SERIE ROJA

7. Equinocitos. Eritrocitos espiculados que se observan en la insuficiencia renal crónica, en hepatopatías,

en estados de hipopotasemia postransfusión de sangre envejecida, en úlcera péptica sangrante y en cáncer
de estómago.
8. Eritrocitos crenados. Estado último del equinocito, en el cual las proyecciones son pequeños montícu
los dispersos sobre la superficie eritrocitaria. También llamados equinocitos tipo IV
9. Estomatocitos. Eritrocitos en forma de "bowl" o de copa, con una única concavidad, observables en
esferocitosis hereditaria, alcoholismo, cirrosis hepática y otras hepatopatías.
10. Acantocitos. Eritrocitos de forma irregular, con 2 a 10 espículas de largo y diámetro variables. Suelen
observarse en la abetalipoproteinemia, en la hepatopatía alcohólica, posesplenectomía y en trastornos
malabsortivos.
11. Esferocitos. Eritrocitos adelgazados, con reducida concavidad central y denso contenido de hemoglo
bina en su interior. Presentes en la esferocitosis hereditaria, en la anemia hemolítica autoinmune, en estados
hemolíticos en general y en postransfusión de sangre.
12. Esquizocitos. Eritrocitos fragmentados, frecuentemente con aspecto de mitad de disco, de forma irre
gular. Suelen verse en estados de hemolisis microangiopática (síndrome urémico hemolítico, vasculitis, re
chazo a trasplante renal, glomerulonefritis, coagulación intravascular diseminada, etc.), carcinomatosis,
hemolisis por prótesis valvulares, quemados severos, hemoglobinurias.
13. Drepanocitos o células falciformes. Eritrocitos con hemoglobina S que adquieren formas variables,
espiculadas, bipolares, etc. Son característicos de la anemia drepanocítica.
14. Eliptocitos u ovalocitos. Eritrocitos ovalados elipsoides con polarización de la hemoglobina, que se
observan en la eliptocitosis hereditaria, en la talasemia, en las anemias ferropénicas y en las anemias
megaloblásticas.
15. Codocitos. Eritrocitos con forma de campana que se observan con imágenes similares a un tiro al blan
co en los extendidos. Se observan en las hepatopatías crónicas, en las hemoglobinopatías (S, C), en la
talasemia, en las anemias ferropénicas, posesplenectomía, etcétera.
16. Dacriocitos. Glóbulos rojos de forma similar a una lágrima que se observan en las mielofibrosis con
metaplasma mieloide y en las talasemias.
17. Leptocitos. Eritrocitos adelgazados con hemoglobina en uno de sus extremos. Pueden verse en las
talasemias y en las hepatopatías crónicas obstructivas.
18. Queratocitos. Eritrocitos en forma de media luna que suelen observarse en coagulación intravascular
diseminada o en hemolisis por prótesis vasculares.

Equinocitos Eritrocitos crenados

Estomatocitos Esferocitos

22
 FÓRMULA O SERIE ROJA

LAS ANEMIAS

Se enti ende por anemia a la disminución de la concentra  ANEMIA FERROPÉNICA

ción de la hemoglobina (Hb) por debajo del límite inferior El aporte insuficiente de hierro a los precursores eritroides
para la edad, sexo y condición fisiológica. En términos fi condic iona el desarrollo de este tipo de ane mia.
siológicos, dado que la función de la hemoglobina es el
transporte de oxígeno, puede decirse que una ane mia es la En condiciones normales, el contenido total de hierro del
reducción de la capacidad de transporte de oxígeno de la organismo en personas adultas sanas es de 2 gramos en las
sangre. mujeres y de hasta 6 gramos en los homb res, y se distribu
ye en dos comparti mien tos básicos: el funcional y el de
CLASIFICACIÓN DE LAS ANEMIAS almace namient o. El compa rtimient o funcional es el que
Existen múltiples clasificaciones propuestas para las ane incluye al hierro encargado de transportar oxígeno (in
mias, dentro de las cuales las más utilizadas son la fisio- cluido en la hemoglobina) y al que forma parte de otras
patogénica y la morfológica. proteínas (mioglobina) y enzimas (catalasa, citocromos).
La mayoría del hierro funcional (80%) se encue ntr a en la
La clasificación fisiopatogénica  distingue a las anemias, de hemoglobina.
acuerdo con su mecanismo de producción, en aquellas por
disminución en la producción de eritrocitos, ent re las cua El compartimiento de almace namiento de hierro está re
les están las ferropénicas, las aplásicas, etc., y en anemias present ado por la hemosiderina y la ferritina, y contiene
por aum ent o de la pérdida de eritrocitos, c omo es el caso cerca del 15-20% del hierro corporal to tal. Si los depósitos
de las hemolíticas y las secundarias a hemorragias. de hierro son normales, sólo existen trazas de hemo
siderina en el organismo, especialmente en las células
La clasificación morfológica  se basa en el aspecto que los reticuloen doteliales de la médula ósea, bazo e hígado. En
glóbulos rojos presentan en el frotis de sangre periférica en situaciones de sobrecarga férrica, el hier ro se almac ena
las distintas anemias. De esta forma se distinguen: las ane
mias microcíticas hipocrómicas, como la ferropénica, las
macrocíticas como la anemia megaloblástica, las normo- Frotis de sangre periférica en la anemia ferropénica. Eritrocitos pequeños
cíticas normocrómicas como las anemias de los trastornos (microcitosis) y pálidos (hipocromía), con leucocitos y plaquetas normales.
crónicos, etcétera.

Eritrocitos hipocromos

Microcitos

Eritrocitos con leves

prolongaciones
poiquilocfticas

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 FÓRMULA O SERIE ROJA

en las células en forma de hem osideri na, como en el caso (3) requerimientos excesivos, o (4) pérdida crónica de
de la hemosiderosis. sangre.
La mayor parte del hierro almacenado está bajo la forma El bajo aporte dietético de hierro es la causa más común de
de ferritina, un complejo proteína-hierro que está presente anemia ferropénica en los niños, quiene s, adem ás, presen
en todos los tejidos, aunque principalmente en hígado, tan un aumento de los requerimientos de dicho mineral
bazo, médula ósea y músculo esquelético. En condi ciones debido al ritmo acelerado de crecimiento. En los adultos,
normales, sólo circula una muy pequeña proporción de por el contrario, el aporte promedio de hierro de la dieta
ferritina en plasma; se estima que por cada microgramo occide ntal supera las necesidades diarias, y esta no es una
por litro de ferritina plasmática existen 8 mg de hierr o al causa de anemia.
macenado. Como la ferritina plasmática procede directa La absorción intestinal disminuida de hierro ocurre en el
mente de los sitios de almacenamiento titulares, su medi contexto de síndromes de malabsorción, en los cuales exis
ción es un buen indicador del estado de las reservas de te una disminución de la absorción generalizada.
hierro del organismo. Hay tres situaciones puntuales en las
que no puede utilizarse la ferritina plasmática como medi En situaciones de requerimiento excesivo, como en el
da de las reservas de hierro: en las hepat opatía s, en enfer embarazo y en la lactancia, el aporte di etético de hierro no
medades inflamatorias, y en ciertos tumores. En estas cir alcanza a cubrir las necesidades del organismo y puede
cunstancias, los niveles de ferritina pueden ser inusualmente desarrollarse una anemia.
elevados a pesar de contar con reservas normales de hi erro. La pérdida crónica de sangre es la causa más común de
anemia ferropénica en los adultos y es lo primero que debe
En el plasma, el hierro es transportado por una proteína
descartarse. El origen de la pérdida puede ser gastro
llamada transferrina, que es una p-globulina sintetizada
intestinal (úlceras, gastritis, cáncer de colon) o ginecológico
por el hígado cuya misión es ceder hierro a los receptores
celulares de los precursores eritroides de la médula ósea. (metrorragias, neoplasias). Al iniciarse la pérdida crónica
En un adulto normal, cerca del 33% de la transferrina se
encuentra saturada por hierro. Médula ósea en las anemias megaloblásticas. Hipercelularidad marcada que
se extiende a zonas habitualmente de médula grasa. Aumento de la
El ritmo y la absorción intestinales de hierro dependen del eritropoyesis en grado tal que los elementos eritroides igualan o superan a los
conten ido total de hierro del organismo y de la actividad mieloides. Nidos de megaloblastos con disociación núcleo-citoplasmática:
eritropoyética. Cuando la demanda aume nta, la absorción citoplasma abundante con núcleo inmaduro (no picnótico). También se
observan grandes polimorfonucleares maduros con hipersegmentación nu
de hierro también lo hace, y viceversa. El balance negativo clear. Los megacariocitos pueden presentar cambios similares o ser relativa
de hierro puede ocurrir, ento nces, por varios motivos: (1) mente normales.
bajo aporte dietético, (2) absorción intestinal disminuida,
Neutrófilo
hipersegmentado

Hipercelularidad

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 FÓRMULA O SERIE ROJA

de sangre, las reservas en forma de ferritina o hemosiderina la anemia es imp ortan te, aparecen en circulación glóbulos
son suficientes para mante ner niveles normales de he mo rojos nucleados. Los neutrófilos también son de mayor volu
globina, así como de ferremia y saturación de transferrina. men (macropolimorfonucleares) y están hipersegmenta-
La depleción progresiva de estas reservas puede acabar por dos, es decir, tie nen más de seis lobulillos nucleare s.
disminuir los niveles de hierro sérico y de saturación de La deficiencia de vitamina B,, o de folato tiene lugar en
transferrina, que todavía no producen anomalías del ent rón. dietas insuficientes, en síndromes de malabsorción o en
Hasta este grado de pérdida de sangre aumenta la activi situaciones de aumen to de los requerimien tos. La dieta de
dad eritropoyética en la médula ósea y la expansión del un adulto norm al excede las necesidades diarias de ambos
entrón, pero van desapareciendo progresivamente los compuestos, por lo cual, cua ndo una anemia megaloblástica
sideroblastos de la médula. Por lo tanto, la anemia aparece es el resultado de un aporte insuficiente de la dieta, esto
cuando se deplecion an todos los depósitos, y se acompaña ocurre en situaciones particulares, como en vegetarianos
de niveles bajos de ferremia y satura ción de transferrina, estrictos, en alcohólicos crónicos o en estados de
así como de disminución de la ferritina sérica. malnutrici ón generalizada. Por el contrario, los síndromes
El diagnóstico de anemia ferropénica se basa en el lab ora de malabsorción son la causa más común de este tipo de
torio: la hemogl obina y el hematócrit o están disminuidos, anemias. En el caso de la vitamina B12, la anemia perni
habitualmente en grado moderado, y se asocian con ciosa es un tipo de anemia megaloblástica en la que
microcitosis, hipocromía y cierto grado de poiquilocitosis. clínicamente existe un m arcado compromiso neurológico.
El hierro sérico, la ferritina y los niveles de saturaci ón de la El origen de esta anemia es la disminución de la absorción
de dicha vitam ina debido a una gastritis atrófica que con
transferrina están descendidos. Los leucocitos y las
diciona la casi total ausencia de células parietales, con la
plaquetas son normales en número y morfología.
consecu ente ausencia de factor intrínseco, el cual se une a
ANEMIA MEGALOBLÁSTICA B, 2 en el estómago par a evitar su destrucci ón por el ácido
clorhídrico.
La anemia megaloblástica es la consecuencia de un déficit
de vitamina B , o de ácido fólico. Ambos com puestos ac Algunos fármacos, como la difenilhidantoína y los
túan como coenzimas en la síntesis de ADN, sin compro anticonceptivos orales, dificultan la absorción de folato y,
meter a la síntesis de ARN ni de proteínas. Cua ndo existe con el tiempo, pueden favorecer el desarrollo de una ane
una deficiencia de vitamina B[2   o ácido fólico, hay un mia megaloblástica.
agrandamiento citoplasmático sin la correspondiente sín En situaciones especiales, como el embarazo y la lactancia,
tesis de ADN, lo cual trae como consecuencia una existe un déficit relativo de ácido fólico debido a un aumen
eritropoyesis ineficaz y el desarrollo de megaeritrocitos anor to de los requerimientos, aunqu e esto difícilmente lleve a
males con tende ncia a la hemolisis. una anemia megaloblástica si no se unen otros factores.
Como su nomb re lo indica, en la anemia megaloblástica los
precursores eritroides y los eritrocitos son anormalmente ANEMIAS HEMOLÍTICAS
grandes. En la médula ósea, los megaloblastos tienen un Las anemias hemolíticas se caracterizan por la disminu
citoplasma muy abunda nte, inten sament e basófilo, y un ción de la vida media del eritrocito debido a su destruc
núcleo desproporcionadamente pequeño. El desarrollo de ción prematura intravascular o extravascular (en el siste
un núcleo picnótico denso que ocurre en la secuencia ma reticuloendotelial). Esto trae como consecuencia un
normal de la eritropoyesis está retrasad o o no se produce, aumento de la actividad eritropoyética medular en un
creando un manifiesto asincronismo, es decir, una disocia intento por compensar la pérdida de hematíes y la acumu
ción núcleo-citoplasmática evidente . Los precursores de lación de productos del catabolismo de la hemoglobina
los granulocitos también muestran asincronía núcleo- (bilirrubina indirecta y urobilina).
citoplasmática originando metamielocitos gigantes y caya Las anemias hemolíticas se dividen en dos grandes grupos:
dos con hipersegmentación nuclear. Los megacariocitos anemias intrínsecas o corpusculares,  cuando el defecto radi
también pueden ser más voluminosos, con núcleos ca en el propio eritroc ito y lo hace más frágil y destructible;
multilobulados, aunque a veces son de aspecto relativa y anemias extrínsecas o extracorpusculares  cuand o existe una
mente normal. Acompañando a estos cambios se observa agresión externa que destruye al glóbulo rojo, dentro de los
una marcada hipercelularidad medular relacionada sobre vasos sanguíneos. La mayoría de las anemias corpuscul ares
todo con aumento del número de eritroblastos anormales son hereditarias, mien tras que las extracorpusculares sue
(megaloblastos) que frecuentemente se ubican en "nidos". len ser adquiridas.
Gran parte de la médula, normalmente grasa, puede estar La médula ósea en las anemias hemolíticas evidencia
convertida en médula roja. La proporció n mieloeritroide,
una marcada actividad eritropoyética, lo cual se mani
habitualmente de 3:1, puede transformarse en 1:1.
fiesta como un aumento de la relación eritroide/mieloide.
La sangre periférica muestra glóbulos rojos de volumen y A veces se observa incluso hematopoyesis extra medu-
forma variables (anisocitosis), pero siempre normocrómicos. lar. En la sangre periférica se observa un aumento nota
La mayor parte de ellos son macrocíticos, con volúme nes ble de los reticulocitos. Esta hiperactividad medular es
corpusculares medios de más de 100 jo3. De manera carac ineficaz en casos de hemolisis muy rápidas o en estados
terística, el número de reticulocitos es bajo y, a veces, cu ando de depresión previa.

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 FÓRMULA O SERIE ROJA

oxidativo eritrocitario. Es un a enfermedad más prevalente fármacos pueden provocar hemolisis por mecanismos
en individuos de raza negra y se transmite ligado al X. Los inmunológicos, como la alfametildopa, el ácido mefe-
síntomas se observan en homocigotos. námico, sulfonamidas, fenotiacinas, entre otros.
La anemia drepanocítica o anemia de células falciformes En la anemia hemolítica microangiopá tica, los eritrocitos
surge a partir de la síntesis anóma la de la hemoglobi na en se fragmentan al atravesar trombos en la microcirculacíón
la cual hay una sustitución del aminoácido valina por (coagulación intravascular diseminada, síndrome urémico
glutamato en la cadena beta. La hemoglobina resultante, hemolítico) o prótesis valvulares cardíacas, es decir, por
llamada hemoglobina S, al desoxigenarse se polimeriza, una agresión mecánica.
distorsionando a los hematíes, los cuales adoptan una mor
fología falciforme o en hoja de acebo. Esto trae dos conse TALASEMIAS
cuencias clínicas en los homocigotos: anemia hemolítica Comprenden un grupo heterogéneo de enfermedades
crónica y obstrucción de los pequeñ os vasos que ocasiona hereditarias cuyo denomina dor comú n es un defecto en la
lesión isquémica tisular. síntesis de una o más cadenas de globina de la hemoglo
Las anemias hemolíticas autoinmunes suelen observarse bina. De ac uerdo con el tipo de cadena que no se sintetiza,
en distintas enfermedades, como el lupus y algunas las talasemias se identifican como talasemia alfa, beta,
neoplasias. El frotis suele mostrar "pilas de monedas", gamma o delta. Las dos primeras son las más comunes, la
anisocitosis y poiquilocitosis significativas, con numero alfa en las poblaciones que rod ean al Mar Medi terráneo y
sos microesferocitos y reticulocitos en gran cantidad, in la beta en los asiáticos.
cluso eritrocitos nucleados. La prueba de Coombs directa La mayoría de las talasemias se heredan en forma auto-
evidencia IgG o IgG más complemento. Cuando los sómica dominante, existiendo la posibilidad de estados
anticuerpos que rea ccionan co ntra el eritrocito son crio- homocigotos y heterocig otos. El desequilibrio en la sínte
aglutininas se puede estar en presencia de infecciones sis de cadenas de globina obedece a un defecto en el
por   Micoplasmapneumoniae,   mononucleosis infecciosa, RNAm tanto cuantitativo como cualitativo.
linfomas u otros trastornos linfoproliferativos. Varios Dentro de la beta talasemia, la más frecuente en nuestro
medio, se distinguen tres varia ntes clínicas:
Frotis de sangre periférica de un paciente con talasemia beta mayor. Se obser
van eritrocitos en diana, hipocrómicos y microcíticos. • Talasemia mayor o anemia de Cooley: en los homocigotos,
es la forma más grave y comienza a manifestarse desde la

Eritrocitos hipocrómicos
 FÓRMULA O SERIE ROJA

CLASIFICACIÓN DE LAS ANEMIAS HEMOLÍTICAS

INTRÍNSECAS O CORPUSCULARES EXTRÍNSECAS O EXTRACORPUSCULARES

Alteración del propio eritrocito Agresión externa sobre el eritrocito

Alteraciones de la membrana Inmunológicas

• Esferocitosis hereditaria • Isohemaglutininas
• Eliptocitosis congénita • Autoanticuerpos
• Piropoiquilocitosis congénita • Por fármacos

Enzimopatías Lesión mecánica

• Déficit de piruvatoquinasa • Anemia hemolítica microangiopática
• Déficit de glucosa 6 fosfato deshidrogenasa
Otras
Hemoglobinopatías • Hemoglobinuria paroxística nocturna
• Talasemias • Por tóxicos (arsénico, cobre, veneno de
• Drepanocitosis o anemia de células falciformes serpientes, arañas, semillas de ricino, hongos, etc.
• Hemoglobinas inestables • Anomalías metabólicas
• Hemoglobinas con alta afinidad al oxígeno (hipofosfatemia, hepatopatías)
• Metahemoglobinemias • Por parásitos eritrocitarios (paludismo,
babesiosis, bartonelosis)

lactancia con anemia severa, ictericia y hepatoesple- • Talasemia intermedia: en los heterocig otos beta0 (ausen
nomegalia. Las alteraciones de los huesos planos llevan a cia de síntesis de caden as beta). El cuad ro es similar al de
deformidades craneofaciales y la hipoxia crónica deter mi la talasemia mayor, aunque de menor intensidad.
na alteraciones cardíacas, endocrinas e inmunológicas. La • Talasemia menor o rasgo talasémico: en los heterocigotos
anemia es hipocrómica microcítica, con eritrocitos en dia de beta + (producción disminuida de cadenas beta). Estas
na y reticulocitosis. El hierro está aume nta do en plasma y personas no suelen tener manifestaciones clínicas o, a lo
en los depósitos. Existe un incremento de hemoglobina sumo, un a discreta anemia hipocrómica microcítica con
fetal mayor al 60%. hierro normal y elevación de la hemoglobina A2.

FROTIS DE SANGRE PERIFÉRICA: LA SERIE ROJA

El análisis de los extendidos de sangre puede entregar una llada de muestras de sangre amplía y completa la infor
variada gama de información. Las alteraciones en la cantidad, mación obtenida en el recuento automatizado; de he
 forma y aspecto tintóreo de los glóbulos rojos constituyen uno cho, existen varias enfermedades que exhiben un valor
de los principales elementos para el diagnóstico de condiciones normal en el número de las diversas especies celulares
 patológicas en hematología. aunque su morfología sea patológica. Entonces, la ob
servación morfológica adquiere vital importancia a la
ANÁLISIS MORFOLÓGICO hora de localizar y evaluar el origen de alteraciones
DE SANGRE PERIFÉRICA hematológicas que no son detectadas en un recuento
El análisis de rutina de una muestra de sangre incluye la automa tizado, p uesto que no sólo se estudia la forma de
los glóbulos rojos, leucocitos y plaque tas, sino que ade
determinación de valores físico-químicos, el recuento de
más puede ponerse en evidencia la presencia de enfer
células y la observación microscópica de los elementos par
medades parasitarias como malaria, paludismo o
ticulados. Los analizadores automáticos hematológicos
microfilariasis y, ocasionalmente, bacteriemia.
permi ten obten er de manera rápida y precisa el recuento
de los distintos tipos celulares presentes en una muestra Existen dos técnicas que comúnmente se utilizan para vi
de sangre y sugieren un diagnóstico sobre la base de los sualizar muestras de sangre periférica; la prim era involucra
valores encontrad os. La observación microscópica deta la observación de sangre fresca y la segunda conlleva la

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 FÓRMULA O SERIE ROJA

Fig. 1

Cabeza

Fig-2
Zona de
neutrófilos y
Zona de linfocitos Trayectorias de elección monocitos

preparación de extendidos de sangre en una capa delgada

(frotis) que se fijan y tiñen. El montaje de sangre fresca se Técnica de realización de un frotis sanguíneo y su le ctura.
realiza colocando una gota de sangre no más grande que
la cabeza de un alfiler en el centro de un cubreobjetos;
sobre ésta se coloca otro cubreobjetos, sin ejercer presión, PREPARACIÓN DE EXTENDIDOS
sellándose los bordes con parafina o vaselina. Si fuera ne DE SANGRE (FROTIS)
cesario, se puede diluir la gota con buffer salino isotónico y, La realización de extendidos de sangre periférica requiere
en algunos casos, fijar con glutaraldehído equilibrado para atención en la preparación del frotis, tinción y familiaridad
su examen posterior. El preparado se coloca sobre un con la apariencia morfológica de formas patológicas y nor
portaobjetos para facilitar su manejo y se examina en un males de las células. La muestra proviene, por lo general,
microscopio óptico o de contraste de fase. Se utiliza para de de sangre anticoagulada remanente del análisis realizado
terminar la presencia de parásitos dentro de los eritrocitos y en el analizador automático hematológico, aunque se pue
permite sospechar la presencia de otros organismos como den producir distorsiones en la apariencia y en la tinción
espiroquetas y tripanosomas por las corrientes y perturba debidas al anticoagulante. La morfología y tinción óptima
ciones que se generan en estos extendidos húmedos. Otras se obtienen a partir de sangre no coagulada, pudiendo ésta
patologías que se pueden visualizar son eritrocitos con provenir de una pequeña herida realizada en un dedo. Cuan
morfología falciforme y esferocitos. En los preparados hú do se preparan extendidos sobre cubre o portaobjetos,
medos frescos los leucocitos conservan su movilidad, y debe asegurarse que éstos estén libres de grasa y polvo. Se
puede estudiarse su actividad y capacidad fagocítica. los limpia con detergente y agua, luego se enjuagan con
La coloración supravital de estos preparados, en donde las agua caliente, agua destilada o alcohol al 95%, se dejan
células se encuentran libres y móviles, es una modificación secar y antes de usarlos se limpian con papel de filtro o de
de esta técnica que evita la formación de los "artefactos" arroz. Para preparar la muestra sobre cubreobjetos se utili
producidos en la preparación de extendidos. Sin embargo, zan dos: sobre uno de ellos se coloca una pequeña gota, de
una desventaja de esta coloración es que los preparados no sólo 2 a 3 mm de diámetro, se sitúa al otro sobre la muestra
son permanentes. Los colorantes más comunes utilizados y se lo rota con movimiento firme y rápido 45 grados con
son: azul de metileno o azul de cresilo brillante, también respecto al primero. Inmediatamente se separan, y se deja
llamados "colorantes vitales". Esta tinción permite detec secar la muestra al aire; luego se ubican sobre un
tar la presencia de reticulocitos, hematíes jóvenes que con portaobjetos para facilitar su manejo (figural). Si se ha
tienen restos de ARN ribosomal, generando imágenes hecho en forma apropiada, con este procedimiento se ob
granulo-filamentosas en el interior de las células, que son tienen dos cubreobjetos con distribución uniforme de la
visibles al microscopio óptico. El recuento de reticulocitos muestra, sin agujeros ni áreas gruesas, listo para la tinción
en sangre periférica se emplea en la evaluación del grado histoquímica.
de actividad eritropoyética de la médula ósea y su respues Los extendidos preparados en portaobjetos permiten la ma
ta frente a un caso de anemia. Este valor, junto con el nipulación más fácil de la muestra de sangre. Una desven
índice de producción de glóbulos rojos, permite distinguir taja de este método es que la muestra puede distribuirse en
entre anemias con elevación compensada de la eritropoyesis forma irregular si no se ha adquirido suficiente práctica.
y aquellas con eritropoyesis ineficiente. Para su preparación deben limpiarse los portaobjetos como

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 FÓRMULA O SERIE ROJA

fue descrito anteriormente. Se coloca una gota de sangre Los leucocitos son las únicas células nucleadas presentes
en uno de los extremos del portaobjetos y, con el bor de de en sangre periférica; se pueden diferenciar: eosinófilos,
otro, colocado a 45 grados con respecto al primero, toc ar la basófilos, neutrófilos, monocitos y linfocitos. En linfocitos y
gota y esperar a que la sangre se distribuya por capilari- monocitos el citoplasma aparece de color azulado o gris; se
dad. Se desliza la muestra hacia adelante, con un movi pueden observar granulaciones que en los neutrófilos a-
miento moderadamente rápido pero constante, en senti parecen de colores pardos, en los eosinófilos anaranjadas
do longitudinal, hasta que la gota quede bien extendida. y en los basófilos de color azul oscuro. Co n este au men to
Se deja secar al aire y se colorea. (100 x) se realiza el recuento leucocitario. Las plaquetas
presentan una porción periférica azulada y granulos cen
TÉCNICAS DE COLORACIÓN DE trales rojos. La apreciación de detalles morfológicos de las
EXTENDIDOS DE SANGRE células de la sangre se realiza con objetivo de inme rsión en
La tinción de May-Grünwald-Giemsa y la de Wright son aceite (100 x); con éste se observan detalles de los hematíes
las coloraciones utilizadas con más frecuencia para los ex de forma, tamaño y coloración, se realiza el recuento de los
tendidos de sangre, y ambas son modificaciones del mé diferentes tipos de leucocitos (recuento diferencial
todo original de Romanowsky. La tintura básica contiene leucocitario) y se estima el tamaño, forma y número de
azul de metileno y eosina. En la tinción de Wright se utiliza plaquetas.
bicarbonato de sodio y en la de May-Grünwald-Giemsa
EVALUACIÓN DE LOS ELEMENTOS DE LA SERIE
bicromato ácido, para convertir el azul de metileno en azur
de metileno. Esta conversión no es completa y tiende a con ROJA: ASPECTO NORMAL
tinuar dentro de la botella de preparación, por lo que el co El frotis de sangre normal puede entregar importante in
lorante se modifica al pasar el tiempo, debiendo estable formación sobre las alteraciones cualitativas de las células
cerse las condiciones de ti nción para cada tanda nu eva de de la serie roja; sin embargo, obtener datos de va riaciones
colorante que se prepare. El pH óptimo de la solución debe cuantitativas resulta más complicado.
encontrarse en el rango de 6,5 a 6,8 y los colorantes se La evaluación debe realizarse en base a criterios de for
disuelven en alcohol metílico. Si las células aparecen ex ma, de tinción, de dimensi ón y de presencia de inclusio
cesivamente azules puede que el colorante haya sido pre nes. Com o la distribución de los glóbulos rojos en la pelí
parado mucho tiempo atrás, que esté demasiado alcalino, cula de sangre obtenida al formar el extendido resulta
mal preparado o que los extendidos sean muy gruesos. Este irregular, para determinar la morfología real de las células
tipo de tinción también se denomina panóptica, ya que se en la muest ra debe localizarse un área de l frotis en la que
colorean ta nto los elementos básicos como los ácidos que exista una mínima distanci a intercelula r sin que se obser
se encuentran en el extendido. El azul de metileno es un ve superposición. En otras áreas del extendido pueden
componente básic.o que tiñe estructuras acídicas de la encontrarse células superpuestas o muy separadas, y en
célula impartiéndoles una coloración azul-violácea; la ambos casos es más probable la visualización de "artefac
eosina y el azur de metileno son compuestos ácidos que tos" que constituyen alteraciones artificiales en las célu
tiñen estructuras alcalinas, otorgándoles coloración rojo- las que no se encuentran en la muestra original o conser
anaranjada y rojo-violácea, respectivamente. vada en condiciones fisiológicas y que, por lo ta nto , care
Las muestras, una vez teñidas, se pueden observar al mi cen de valor diagnóstico. Por ejemplo, en algunas áreas
croscopio óptico inicialmente con objetivos de poco au de un extendido normal donde el espesor de la película
mento (40 x) para tener una idea global del aspecto del de sangre sea muy elevado, es posible que las células rojas
frotis. En las extensiones de sangre sobre portaobjetos se aparezcan pegoteadas ent re sí, dand o un aspecto de pila
diferencian tres zonas: cabeza, cuerpo y cola (figura 2). La de monedas que recibe el nombre de "rouleaux", el que
cabeza es la línea en la cual se apoyó un portaobjetos sobre no debe observarse en el área de visualización óptima. La
el otro antes de hacer la extensión, el cuerpo co rresponde persistencia del fenómeno en el área de observación ideal
a la región intermedia del frotis y la cola es la porción final, sugiere una condición patológica en la que una abun
en la que la extensión es delgada y algo deshilachada. La dante cantidad de paraproteínas recubre las células rojas,
distribución de las células en estas tres zonas no es uni favoreciendo la atracción in tercelular en lugar de la usual
forme. En forma general, puede decirse que las células repulsión electrostática qu e debería prevalecer entre di
de mayor tamaño se sitúan en los bordes y en la cola chas células.
(neutrófilos, monocitos, eosinófilos, etc.), mientras en el El aspecto de los hematíes en un frotis de sangre normal
cuerpo se encuentra una mayor proporción de células debe ser homogéneo en tamaño, forma y coloración. El
menores (linfocitos, micromieloblastos, etc.) en distribu diámetro promedio, que puede objetivarse con un
ción regular. En la cola las células adoptan un a disposición micrómetro ocular o por comparación con el núcl eo de un
en cordones y a menudo se presentan deformadas, des linfocito pequeño (que usualmente presenta un tamaño
truidas o difíciles de reconocer. U na forma bastante acon difícilmente alterable), debe encontrarse en el rango de
sejada de recorrer el preparado es en zigzag por los bordes. 7,2 a 7,9 micrómetros. La forma normal de las células
Los hematíes son los elementos más abundantes y apare eritroides es redondeada, presentando una zona central
cen de color rosa pálido, con una zona central más clara. clara con un reborde exterior rojo-anaranjado.

31
 FÓRMULA O SERIE ROJA

GLÓBULOS ROJOS DE TIPO PATOLÓGICO PRESENTES EN EXTENDIDOS

DE SANGRE PERIFÉRICA

El aspecto microscópico de los glóbulos rojos puede ser variado. Ca da alteración de la forma, núm ero y coloració n
se relaciona de manera directa o indirecta con una condición patológica subyacente.

Denom inació n Descripción Cambio subyacente Enfermedad asociada

Anillos de Cabot Inclusiones circulares Material nuclear Postesplenectomía,

azuladas, delgadas, remanente anemia hemolítica, anemia
puntiformes megaloblástica
Célula "DIANA" Cúmulo central de Aumento re dundante Enfermedades hepáticas,
(dianocito o codocito) hemoglobina. de la membrana celular postesplenectomía,
Reborde exterior más claro talasemia, enfermedad
deHbC
Cuerpos de Howell-Jolly Inclusiones basofílicas densas, ADN nuclear remanente Postesplenectomía,
usualmente pequeñas y únicas anemia hemolítica,
anemia megaloblástica
Drepanocitos Células en forma de hoz, Agregados de hemoglobina S Anem ia drepano cítica
con deformación bipolar
espicular en ambos extremos
Cuerpos de Pappenheimer Granu los basofílicos, Remanen tes mitocondriales Anemi a sideroblástica.
densos y pequeños o siderosoma conte niend o Postesplenectomía
hierro
Esferocitos Célula esférica con Decremento de Esferocitosis hereditaria.
apariencia densa. la redundancia de Anemia inmunohemolítica
Zona central clara ausente. la membrana celular
Usualmente de diámetro
menor a lo normal

Glóbulo rojo hipocrómico Zona central con palidez Disminución de la Anemia con déficit de hierro,
prominente síntesis de hemoglobina talasemia, anemia sideroblástica
Macrocitos Glóbulos rojos de tamaño Células rojas jóven es. Au me nt o de la eritropoyesis.
mayor a lo normal (> 9/¿m) Maduración celular anormal Macrocitos ovalados presentes
en anemia megaloblástica.
Macrocitos redondos
en enfermedades hepáticas
Microcitos Glóbulos rojos menores Ver glóbulo rojo hipocrómico
que lo normal (<7/U.m)
Ovaloci tos (eliptocitos) Hema tíes con forma elíptica Proteínas del Eliptocitosis hereditaria
citoesqueleto anormales
Policromasia Citoplasma grisáceo-azulado, Presencia de Reticulocitosis, liberación
frecuente en macrocitos compone ntes ribosómicos celular prematura de
la médula ósea
Punteado basofílico Inclusiones Residuos de ARN Granulación gruesa: neuropatía
basofílicas punteadas y ribosomas por intoxicación con plomo o
talasemia. Granulación fina:
anemias varias
Rouleaux Hematíes dispuestos Aglutinación de hematíes Paraproteinemia
como pilas de monedas debido a paraproteínas
Estomatocitos Células con aspecto Alterac ión de la Estomatocitosis hereditaria.
de labios o caliciformes permeabilidad de Anemia hemolítica autoinmune
la membra na celular
a los cationes

32
 FÓRMULA O SERIE ROJA

Denominación Descripción Cambio subyacente Enfermedad asoci ada

Equinocitos Hematíes cubiertos Posible alteración Se observan en uremia, úlcera

con espículas cortas de los lípidos de membrana sangrante y c arcinoma gástrico.
y con cent ro pálido En la mayor parte de los casos
conservado se trata de "artefactos"

Esquistocitos Células deformadas, Daño físico al glóbulo rojo Anemia hemolítica

exhiben 2 o 3 extremos al circular por capilares con (patología microvascular).
puntiagudos deposición de hebras Púrpura trombocitopénica.
de fibrina, disrupción Coagulación intravascular
debida a paso por válvula diseminada.
cardíaca implantada Quemaduras severas.
Reemplazo de válvulas cardíacas

Leptocito Glóbulo rojo hipocrómico No determinado Talasemias.

aplanado Enfermedad hepática
obstructiva

Células mordidas Tendencia a la forma Cuerpos de Heinz Deficiencia de G6PD.

(degmactitos) semicircular de los eritrocitos punteados esplénicos Hemolisis oxid ante
inducida por drogas

Dacriocito Eritrocito con forma Mielofibrosis

de gota o lágrima

Acantocitos Glóbulos rojos de cendro Cambios en la estructura Postesplenectomía.

denso, con proyecciones fosfolipídica de Abetalipoproteinemia.
citoplasmáticas irregulares la membrana Enfermedad hepática
en tam año y distribución celular eritrocitaria
(espolones)

ANORMALIDADES DE LOS GLÓBULOS ROJOS de hipocrómic as, produc iéndose un realce de la zona páli
La alteración en el diámetro de las células rojas se denomi da central y un angostamiento del reborde eritrocítico.
na anisocitosis, pudi endo enco ntrars e células de más de 9 Como ejemplo de una distribución anorma l de hemoglobi
micrones con un con tenid o normal de hemoglobina, que na puede mencionars e a las células "DIA NA" que mues
se llaman macroc itos, y células de menos de 6 micrones o tran un acumulo central coloreado de esta proteína, ro
microcitos. Los eritrocitos menos maduros son células de deado por un anillo o reborde más pálido, y se asocian con
tamaño macrocítico pero que presentan una coloración enfermedades hepáticas, posesple nectomía, talasemias y
más azulada de la hemoglobina (policromatofilia) e in clu enfermedad de HbC (hemoglobina C). En otros casos, la
so pueden mostrar un punteado basofílico dentro de la hemoglobina a lterada puede formar aglutinacio nes llama
célula debido a residuos de ARN y riboso mas. das "cuerpos de Heinz", que apare cen pegados a la mem
brana plasmática y son sólo visibles con la coloración
Los macrocitos pued en observarse cuan do se registra un supravital. También los glóbulos rojos pued en presentar in
aumento en la eritropoyesis, y en el caso de la anemia clusiones como remanentes de material nuclear (cuerpos
megaloblástica estos macrocitos prese ntan forma oval, a de Howell-Jolly), remanentes de mitocondrias (cuerpos
diferencia de las enfermedades hepáticas donde sólo se de Pappenheimer) o parásitos (malaria).
evidencia cambio en el tamañ o de la célula.
La variación en la forma de los glóbulos rojos se denomina REFERENCIAS
poiquilocitosis, y debe ser considerada alterada cualquier Wintrobe's Clinical Hematology, 1999. Vol. 1. 10 th. Edition. Lee, G. R.,
célula que no presente forma redondeada, bordes lisos y Foerster,J., Lukens,J., Paraskevas, E, GreerJ. E, Rodgers G. M. Williams &.
Wilkins Eds., West Camden St-, Baltimore, Maryland.
un área central clara.
Hematología Clínica, 1979. Vol. 1. Wintrobe M. M., Lee, G. R., Bithell, X C.,
La coloración del glóbulo rojo se relaciona con el conte ni Boggs, D. R., Athes, J. W., Foerster, J. Editorial Intermédica, Bs. As.
do y distribución de hemoglobina. Células con men or can Diagnóstico Hematológico. Laboratorio y Clínica, 1972. Tomo 1. Ciscar, F. y
tidad de hemoglobin a se tiñen menos y reciben el nombre Farreras. De. Jims, Barcelona.

33
 FÓRMULA O SERIE BLANCA
LOS GRANULOCITOS

En la hematopoyesis, las células destinadas a formar la tituye el precursor más precoz de esta serie visible al mi
serie granulocítica, es decir, neutrófilos, eosinófilos y croscopio óptico, en promielocito, el cual es rico en granu
basóñlos, sintetizan proteínas y las almacenan en granulos los azurófilos.
citoplasmáticos que le dan el aspecto característico . Estos Posteriormente al promielocito aparecerán granulos espe
granulos, primarios o azurófilos, definen la conversión del cíficos que definirán la progresión hacia mielocitos de
mieloblasto, una célula virtualmente agranular que cons tipo neutrófilos, eosinófilos o basófilos. Una vez determi-
Mieloblasto

Al pasar de un estadio a otro

se producen cerca de 5 divisiones

-Comienzo de la formación
de los granulos primarios

Sránulos azurófilos
Peroxidasa-positivos
Enzimas lisosomales Las células no se dividen más
lisozima
elastasa -Se forman.los granulos
proteinasa 3 secundarios
o.-1 antitripsina
Factores bactericidas
o proteínas catiónicas
defensinas
factores bactericidas
azurófilos-derivados
proteína bactericida
incrementadora
de permeabilidad
Sránulos secundarios
^eroxidasa-neqativos
Mielocito •Se inicia
lactoferrina la diferenciación
lisozima de los granulos
proteína ligadora
deB„
otras proteínas
Pasan de los capilares
rápidamente a los tejidos

Se almacenan durante 5 días •* Diferenciación

antes de pasar a la circulación- Meta mielocito celular final

Neutrófilo segmentado Basófilo

Esquema general de la granulopoyesis.

34
 FÓRMULA O SERIE BLANCA

nado el camino a seguir, las células siguientes ya no se

dividen, son amitóticas, y se caracterizan por present ar Citoplasma
con escasos granulos
un núcleo segme ntado y por su capacidad de motilidad,
fagocitosis y destrucción microbiana. Los granulocitos
maduros también desarrollan estructuras citoplasmáticas Núcleo voluminoso
y ovalado
y de superficie que les permiten adherirse y atravesar la
pared de vénulas. De esta manera, luego de alcanzar la
circulación desde la médula ósea, se dirigen rápidamen Pueden observarse
múltiples n úcleos
te hacia los tejidos en donde cumplirán funciones de
defensa, para lo cual fueron destinados.
Cromatina delicada
Los neutrófilos repre sentan una variedad de granul ocitos y bien definida
especializados en la fagocitosis y destrucción de microor
ganismos. Los eosinófilos y los basófilos participan fun
dament alment e de respuestas alérgicas e inflamatorias. Prolongaciones
citoplasmáticas

NEUTRÓFILOS
Los neutrófilos constituyen la variedad predominante de Mieloblasto. Célula de gran núcleo ovalado, múltiples nucléolos y con un
citoplasma caren te de granulos o con muy escasos granulos azurófilos.
granulocit os, cerca del 90% . El sistema de neutropoyesi s
tiene una alta velocidad de producción celular y está fina
mente regulado de modo tal de incrementar la produc
ción en respuesta a estímulos inflamatorios.
Citoplasma azul
Una vez que el mieloblasto define su camino hacia la pro
ducción de neutrófilos, la secuencia normal de madura
ción celular en la médula ósea es la siguiente: mieloblasto Halo perinuclear
—> p romielocito —»mielocito -> metamielocito —»neutrófilo
en cayado —> neutrófilo segmentad o.
Nucléolos
Entre el mieloblasto y el mielocito se suceden cerca de
cinco divisiones celulares. Luego del estadio de mielocito,
las células ya no se dividen más y ocupan un comparti
Microperoxisomas
miento medular.
Los neutrófilos maduros son almacenados en la médula
ant es de ser liberados a la circulación durant e cinco días. Granulos primarios
o azurófilos
Una vez en la sangre su permanencia en ella es fugaz
-cer ca de seis horas prome dio-y a que pasan rápidamente
hacia los tejidos en donde ejercen sus funciones durante
uno o dos días antes de su muert e. Promielocito. Es la primera célula que presenta granul os primarios azurófilos,
peroxidasa-positivos.
Granulos citoplasmáticos.  A medida que los precursores
del neutrófilo van madurando, van sintetizando las dis
tintas proteínas que integrarán los característicos granu Citoplasma azu
los citoplasmáticos. Mie ntras que el mieloblasto es una
célula prácticamente agranular, el siguiente estadio, el flicroperoxisoma
promielo cito, ya posee grandes granulos peroxidasa-posi-
tivos, los granulos primarios o azurófilos. Los mielocitos
Halo perinuclear
agregan los granulos secundarios, peroxidasa-negativos,
que coexistirán con los primarios en los siguientes esta
Granulos primarios
dios evolutivos. Los neutrófilos maduros poseen ambos o azurófilos
tipos de granulos, aunque los secundarios son casi el do
ble de los primarios. Los granulos azurófilos (primarios, Núcleo aplanado
peroxidasa-positivos) son voluminosos, de aproximada sobre un lado
me nt e 500 nm, visibles al microscopio óptico, mientras
qu e los secundarios (específicos o peroxidasa-negativos) Isla de granulos ro jizos
son pequeños (200 nm) y no suelen verse a la microscopia
óptica sino como un puntillado rosado citoplasmático ca Granulos secundarios
racterístico de estas células a partir del estadio de visibles como un puntillado rosado
mielocito.
Mielocito. De forma característica, es la primera célula que presenta, además
Ade más de mieloperoxidasa, los granulos primarios contie de granulos primarios, granu los secund arios específicos, ya sea de neutrófilos,
nen numerosas enzimas lisosomales (lisozima, elastasa, eosinófilos o basófilos.

35
 FÓRMULA O SERIE BLANCA

neutrófilos maduros. Estas organelas son pequeñas vesícu

las que contienen catalasa y su exacta función aún no ha
Citoplasma más ro sado sido identificada.
Existen una serie de marcadores de superficie de los
neutrófilos y sus precursores medulares, tales como
Granulos primarios
carbohidratos, glucoproteínas, glucolípidos y antígenos
HLA que van variando a lo largo de la maduración celu
lar. De hecho, la densidad de moléculas HLA-A, -B y -C
Microperoxisoma
de membrana va disminuyendo a medida que progresa
la evolución hacia neutrófilos maduros. El desarrollo de
las capacidades de reconocimiento y quimiotaxis es pa
Granulos s ecundarios
ralelo a la adquisición de ciertos receptores de mem
bra na, tal es el caso de los receptores de Fe, los cuales no
Núcleo ligeramente hendido existen o son muy escasos en los progenitores anteriores
al mielocito, mientras que prácticamente todos los
neutrófilos maduros poseen este tipo de receptores. Asi
mismo, los neutrófilos maduros poseen recepto res para el
complemento C3, denominados CRI y CR3. Del mismo
Metamielocito. Muestra una avanzada invaginación de una de las caras de modo, ICAM-1, miembro de la superfamilia de las
núcleo mostrando un aspecto "arriñonado". inmunoglobulinas, es detectado en mieloblastos y
promielocitos, pero no en los siguientes estadios de madu
ración mieloide. Uno de los miembros de la familia de
prote inasa3, a -1 antitripsina) y factores bactericidas antes selectinas, la L-selectina, puede ser identificada ya en la
conocidos como proteínas catiónicas (defensinas, factores CFU-GM y hasta momentos antes de la liberación del
bactericidas azurófilo-derivados, proteína bactericida neutrófilo hacia la circulación.
incrementadora de permeabilidad).
Los granulos secundarios contienen lactoferrina, lisozima,
proteína ligadora de B 12 y otras proteínas. Algunos aut ores
subclasifican a estos granulos de acuerdo con su contenido
de lactoferrina y gelatinasa: cerca del 16% contiene sólo Citoplasma rosado
lactoferrina, un 24% contiene sólo gelatinasa, y un 60%
aloja ambas enzimas.
Otras estructuras celulares.  Los microperoxisomas están pre Granulos primarios
sentes desde el estadio promielocítico y persisten hasta los

Granulos secundarios

Citoplasma rosado Núcleo lobulado

Unión filamentosa
Granulos primarios

Neutrófilo segmentado. Con su núcleo polilobulado característico y su cito

Granulos secundarios plasma en el que se observan los granulos.

EOSINÓFILOS
Núcleo con forma de herradura
Los eosinófilos también cumplen funciones de defensa,
aunque su actividad bactericida es mucho men or que la
de los neutrófilos. En sus granulos almacenan proteínas
con funciones citotóxicas para parásitos, por lo cual se
Neutrófilo en cayado. Es un estadio intermedio entre la forma precedente y el
neutrófilo segmentado. Básicamente se observa una proñmdización de las considera que tienen cierta acción de defensa contra este
invaginaciones nucleares. tipo de organismos. Asimismo, los eosinófilos están impli-

36
 FÓRMULA O SERIE BLANCA

cados en las respuestas inflamatorias relacionadas con BASÓFILOS

fenómenos alérgicos. Los basófilos constituyen una muy pequeña proporción de
Los eosinófilos siguen una línea celular madurativa si los leucocitos circulantes, ya que tienden a ubicarse en los
milar a los neutrófiios: mieloblasto eosinófilo —¥ tejidos en donde existe inflamación relacionada con hi-
promielocito —> mielocito —> eosinófilo maduro. Desde persensibilidad a proteínas, alergia de contacto o rechazo
el estadio de promielocito, las células contienen granulos injerto contra huésped.
acidófilos característicos. El núcleo del eosinófilo ma Si bien son de linajes celulares diferentes, comparten mu
duro es bilobulado. chas características con los mastocitos o células cebadas.
Ambas células poseen granulos metacromáticos, aunque a
la microscopía electrónica puede verse que no son iguales.
Estas células son capaces de fagocitar eritrocitos, aunque
su actividad fagocitaria es considerablemente menor que
Citoplasma rosado la de los otros granulocitos y carecen de enzimas
bactericidas o lisosomales.

Granulos esféricos
con tintes rojos

Citoplasma rosado claro

Núcleo bilobulado

Granulos oscuros
Distribución regular y voluminosos
de los granulos

Núcleo conforma
de haba o lobulado

Distribución
desordenada
Eosinófilo. El núcleo es típicamente bilobulado. Sus granulos acidófilos con de los granulos
tienen peroxidasa.

Los granulos del eosinófilo y sus precursores mieloides con

tienen abundante peroxidasa y enzimas lisosomales. La Basófilo. Son células de núcleo relativamente grande y granulos citoplas-
peroxidasa de estas células es genéticamente diferente a la máticos peroxidasa-positivos.
de los neutrófiios, y no tiene la actividad bactericida de la
de dichas células. También alojan en sus granulos catalasa,
dos enzimas de la [3-oxidación lipídica (enoil-CoA hidratasa ALTERACIONES MORFOLÓGICAS
y cetoacil-CoA tiolasa) y una flavoproteína, la acil-CoA DE LOS GRANULOCITOS
oxidasa.
En pacientes con sepsis o procesos inflamatorios graves,
Los granulos también contienen las características proteí además de leucocitosis, pueden observarse alteraciones
nas básicas del eosinófilo: proteína básica mayor, proteína morfológicas de los neutrófiios, como granulaciones tóxi
catiónica eosinofQica, y neurotoxina derivada del eosinófilo. cas, cuerpos de Dohle y vacuolas citoplasmáticas. Las
Más de la mitad de las proteínas de los granulos son proteí granulaciones tóxicas son más oscuras y groseras que las de
nas básicas mayores, de actividad citotóxica para parásitos los neutrófiios normales y se considera que corresponden a
y que también inducen la liberación de histamina por par granulos azurófilos primarios alterados. Los cuerpos de
te de basófilos y mastocitos. Las otras dos proteínas básicas Dohle son pequeñas zonas de retículo endoplásmico dila
pueden provocar la formación de poros transmembrana y tado, de aspecto similar a lagos citoplasmáticos de color
se cree que participarían en daño tisular. azul celeste.
Los eosinófilos también contienen proteoglicanos, Otras veces aparecen en sangre periférica muchos
interleucina-6, factor de necrosis tumoral-oc, factor trans granulocitos inmaduros, especialmente en los procesos
formador del crecimiento-a, y factor estimulante de colo inflamatorios, que llegan a confundirse con el cuadro
nias de granulocitos y macrófagos. de leucemia mieloide, hecho conocido como reacción
Los cristales de Charcot-Leyden son proteínas de activi leucemoide. Muchas veces se requieren mayores estu
dad fosfolipasa presentes en fluidos inflamatorios en don dios para distinguir entre leucocitosis reactiva y
de hay eosinófilos. neoplásica.

37
 FÓRMULA O SERIE BLANCA

L O S L IN F O C I T O S Y P L A S M O C I TO S
No existen características Los distintos elementos celulares
morfológicas destacables se reconocen por medio
para identificar las etapas de la identificación de
de diferenciación celular antígenos con anticuerpos
monoclonales.

La diferenciación
concluye en el timo

La diferenciación
continúa en
la médula ósea

Linfoblasto Prolinfocito

Cuando son activadas, proliferan y se diferencian

en: células T colaboradoras,
células T citotóxicas o asesinas,
células T supresoras y
células T de memoria

Linfocito T
Plasmocito
Antígen os de superficie de linfocitos y plasmocitos
Linfocito B
Linfoc'rtos B Plasmocitos

CD20 Moléculas de clase II del MHC CD28 *••" En re spues ta a

ciertos antígenos,
CD79a   HLA-DR se transforman
en plasmocitos
que producen
CD79b  DP PCA-1
anticuerpos

CD19  DQ

Esquema que muestra el proceso de linfopoyesis.

Los linfocitos constituye n un grupo heterogén eo de célu

las que desarrollan un papel fundamental en el sistema
inmune y que pueden distinguirse fácilmente de otros
leucocitos por su morfología característica. Existen tres Citoplasma azul
sin granulos
clases de linfocitos: linfocitos T, linfocitos B y células  na
tural killer  (NK). Los linfocitos B, a su vez, son capaces de Núcleo morado
diferenciarse a plasmocitos para secretar inmunoglo-
bulinas.
LlNFOPOYESIS
Los linfocitos, de la misma manera que el resto de los
leucocitos, derivan de la  stem cell  medular. Se acepta que
los linfocitos T, B y NK surgen a partir de un precursor en
común, a unqu e aún se desconoce si se trata de un precur Prolinfocito
sor exclusivo de los linfocitos o si es compartido con otra de
las series celulares. A diferencia de la serie mieloide, en la Los linfoblastos son células esféricas de núcleo grande y nucléolos prominen
diferenciación de los precursores de los linfocitos no exis tes, a medida que se produce la maduración, la cromatina se compacta estre
chamente.
ten etapas morfológicas características que p ueda n ser re
conocidas com o tales. Por lo tant o, sólo se distinguen los
diferentes elementos celulares mediante la identificación NK: células pro-B, células pro-Ty células pro-NK. A partir
de antígenos específicos utilizando anticuerpos mono de allí, la diferenciación en linfocitos B y en NK continua
clonales. De esta manera se distinguen tres precursores rá en la médula ósea, mientras que la correspondiente a los
compromet idos c on la diferenciación en linfocitos B, T o linfocitos T prosigue en el timo.

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 FÓRMULA O SERIE BLANCA

MORFOLOGÍA DEL LINFOCITO que contiene la cromatina intranucleolar. Las organelas

Los linfocitos, bajo microscopia óptica, son células de 6 a citoplasmáticas coexisten con microtúbulos y microfila'
15 mcm de diám etro qu e circu lan en sangre periférica en mentos adyacentes a la membrana celular.
un número variable, de alrededor de 2.5 a 4.0 X IOVLU, lo La activación linfocitaria se asocia con ciertos cambios mor
cual suele representar cerca del 35% del total de los fológicos y bioquímicos. Los cambios ya son evidentes lue
leucocitos. go de transcurridas 4 horas de la exposición a mitógenos
(agentes que estimulan la mitosis linfocitaria: productos
El linfocito característico presenta un núcleo con forma
bacterianos, por ejemplo). El nucléolo aumenta de tama ño
arriñonada ovoide que se tiñe de rosa con Giemsa o Wright
y también los granulos de la zona granular del núcleo. Esto
debido a la cromatina nuclear densamente almacenada.
conti núa en un incremen to de la zona fibrilar y un aumen
El núcleo ocupa cerca del 90% de la superficie celular. La
to de la cromatina , la cual se torna más electrod ensa. Pos
basofilia citoplasmática está relacionada con el contenido
teriormente, el citoplasma aumenta su volumen, los
de ARN. En los linfocitos de mayor volumen pueden ob
ribosomas y lisosomas son más numerosos y el complejo de
servarse una serie de granulos rosados, cerca de 5 a 15 por
Golgi está más desarrollado. Todos los cambios culm inarán
célula, y ocasionalmente también vacuolas de contenido
en la transformación del linfocito en linfoblasto activado,
claro.
en plasmocito o en célula T citotóxica.
En un adult o sano, cer ca del 3% de los linfocitos son lin
focitos granulares grandes, que constituyen una pobla EL PLASMOCITO
ción mixta de células NK y algunos linfocitos T CD8 . Los linfocitos B activados por un antígeno y por un linfoci
Bajo microscopio electrónico, en el núcleo se distinguen to T helper  (C D4 +) se transforman en plasmocitos y, de
tres áreas dispuestas concéntri cament e: u na región cen esta forma, son capaces de sintetizar y liberar inmu-
tral agranular, una media fibrilar y una externa granular noglobulinas. Para que esto ocurra tienen lugar una serie

Citoplasma con bordes lisos Citoplasma liso y azulado

Vacuolas claras
Granulos azurófilos
(teñidos de rojo)
Pequeños
granulos rosados

Pequeños glóbulos
incoloros

Núcleo arriñon ado

Halo perinuclear

Citoplasma
con prolongaciones
agudas Núcleo hendido

Surco nuclear

Núcleo típico

Distintos linfocitos 3 Linfocito grande [ (j Linfocito con citoplasma deshilacliado

I b [ Linf ocito de tamaño mediano I 6 I Linfocito grande con núcleo hendido

y prolongaciones agudas
|_CJ Pequeño linfo cito maduro

Aspecco de los linfocitos en sangre periférica.

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 FÓRMULA O SERIE BLANCA

Citoplasma con borde irregular Citopla$ma con borde deshilachado

Cuerpos de Russe

Núcleo
excéntrico

Cromatina gruesa
y conglomerada
Cuerpos
de Russel

Secreciones

Citoplasma con borde liso

Citoplasma reticulado

presan tres moléculas de clase II del complejo mayor de

Morfología de un plasmocito. histocompatibilidad (MHC): HLA-DR, DPy DQ.
de divisiones mitóticas durante la diferenciación celular, La mayoría de los antígenos de las células B no son expre
desde el linfocito en reposo hasta el plasmocito. sados por el plasmocito maduro, incluyendo los HLA, sino
que expresan CD28 y PCA-1 (cuya función es probable
El citoplasma del plasmocito es característicamente basófi- mente de proteincinasa).
lo y su núcleo es excéntrico, adyacente a una amplia zona
paranuclear correspondiente al aparato de Golgi. El diá ALTERACIONES DE LINFOCITOS Y PLASMOCITOS
metro celular es de aproximadamente 9 a 20 mcm (prome
dio 14 mcm). La cromatina nuclear adopta una disposi Los trastornos que comprometen a estas células pueden
ción tal que asemeja una "rueda de carro". dividirse en tres grandes grupos:
• Primarios:  debido a defectos intrínsecos de los linfoci
ANTÍGENOS DE SUPERFICIE DE LINFOCITOS tos que resultan en alteraciones funcionales de la in
Y PLASMOCITOS munidad humoral, celular o ambas.
Los linfocitos expresan una serie de antígenos de membra -Células B: agammaglobulinemia de Bruton, síndro
na que permite distinguir a los distintos tipos celulares en me de Bloom, síndrome de Wiscott-Aldrich,
tre sí. De esta manera, mediante el uso de anticuerpos disgammaglobulinemias, hiperinmunoglobulinemias,
monoclonales, se identifican los clusters of differentiation etcétera.
(CD). -Células T:  síndrome de Di George (aplasia de timo),
• Linfocitos B: Los antígenos que expresan los precursores de síndrome de Nezelof (displasia tímica), síndrome de
estas células, las células maduras y las activadas (plasmocitos) Wiscott-Aldrich.
en su gran mayoría no son exclusivos de esta serie celular.
-Células  B ;y T ataxia-telangiectasia, síndrome de
Solamente los antígenos CD20, CD79ay CD79b son pro
pios de las células B. Tanto el CD79a como el CD79b se inmunodeficiencia combinada, etcétera.
asocian con la Ig de superficie para facilitar su expresión. El • Adquiridos:   resultan de factores extrínsecos a los
CD19 es casi exclusivo del linfocito B, aunque puede ser linfocitos y también traen como consecuencia altera
expresado débilmente también por las células dendríticas ciones inmunitarias. Suelen ocurrir en determinadas
foliculares. El CD19 puede encontrarse en todos los estadios infecciones, en enfermedades sistémicas o por la admi
madurativos de las células B, incluyendo los precursores nistración de ciertos fármacos:
medulares. Además de los antígenos CD, las células B ex -Síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA).
 FÓRMULA O SERIE BLANCA

Depresiones periféricas
producidas por eritrocitos
adyacentes

• Neoplasias o preneoplasias: leucemias, linfomas, mieloma

Linfocitos atípicos, comúnmente visibles en sangre periférica en el contexto múltiple.
de infecciones virales como mononucleosis, coxoplasmosis ocitomegalovirus.
El mieloma múltiple es una neoplasia de células plas
máticas caracterizada por la afectación del esqueleto,
-Linfocitosis o plasmocitosis reactivas: coqueluche, aunque también puede haber compromiso de ganglios
mononucleosis infecciosa, citomegalovirus, toxo' linfáticos y de lugares extraganglionares como la piel.
plasmosis, otras infecciones virales. Puede haber predominio relativo de plasmocitos nor
-Disfunción de células T asociada a enfermedades males o de otras variedades citológicas tales como
sistémicas: lepra, lupus, artritis reumatoidea, sarcoidosis, plasmoblastos, que tienen cromatina nuclear menos
etcétera. densa y un solo nucléolo bien definido.

Citoplasma con borde difuso

Células plasmáticas que proliferan en el mieloma múltiple.

41
 FÓRMULA O SERIE BLANCA

LAS LEUCEMIAS

La leucemia es una expansión clonal en una etapa de

la hematopoyesis linfoide o mieloide, lo cual se ex
presa en una detención de la diferenciación celular,
con proliferación y crecimiento descontrolado de las
células hematopoyéticas. La proliferación se origina
en la médula ósea y de allí se disemina a sangre
periférica, bazo, ganglios y el resto de los tejidos.

LEUCEMIAS AGUDAS
Las leucemias agudas se caracterizan por su evolución
relativamente rápida y por la proliferación de células
muy indiferenciadas (blastos). Representan la neopla-
sia maligna más frecuente en la infancia, aunque pue
de observarse a cualquier edad.
La etiología se desconoce, aunque se considera que es Leucemia aguda linfoblástica - L1
tas leucemias son el resultado de la interacción entre
factores genéticos, ambientales e inmunológicos. Hay
ciertos factores clásica mente asociados al desarrollo de
la leucemia, como la exposición a radiaciones ioniz antes,
algunos químicos (benceno, pesticidas) o agentes
alquilantes. Del mismo modo, ciertas condiciones
genéticas constituyen una predisposición a la leucemia
aguda, como la trisomía 21, la anemia de Fanconi, el
síndrome de Bloom, la agammaglobulinemia congéni-
ta, etc. Sin embargo, la mayoría de los afectados son
previamente sanos.
La clasificación de las leucemias agudas se basa en la
morfología de la médula ósea, y en las características
inmunológicas y citogenéticas de las células malignas.
Las leucemias pueden ser linfoblásticas o mieloblás- Muchas células gran des
y heterogéneas
ticas, de acuerdo con el progenitor medular compro
metido en el desarrollo maligno. Dentro de las Leucemia aguda linfoblástica - L2
leucemias agudas linfoblásticas (LLA) se distinguen,
a su vez, tres tipos (Ll a L3) y dentro de las leucemias
mieloblásticas agudas (LMA), 8 tipos diferentes (MO
a M7). En conjunto comprenden los 11 tipos de LA
que en la actualidad reconoce el grupo cooperativo
franco-americano-británico (FAB). Esta clasificación
morfológica de las LA es la única que se considera en
la actualidad.
Desde el punto de vista inmunológico, las LLA pue
den clasificarse en B tem prana s, co mune s, pre-B, B o
T, con características antigénicas propias. Algunas
leucemias agudas mieloblásticas como la MO o la M7
sólo pueden identificarse con precisión por medio de
inmunorreactivos o por microscopia electrónica. En
muchos de los casos de LA se encuentran alteracio
nes cromosómicas; se sabe que en más del 50% de las
LMA ocurre así. El tratamiento de una LMA es más
exitoso en sujetos que no presentan alteraciones Leucemia aguda linfoblástica - L3
cromosómicas, e incluso se ha definido una clasifica
ción de LMA por riesgos a partir de los trastornos
genéticos, que permite predecir la posibilidad de lo- Leucemias linfoblásticas, estadios L1-L3.

42
 FÓRMULA O SERIE BLANCA

Citoplasma escaso
Moderados

Núcleo
redondo

Leucemia aguda mieloblás tica - M1 Leucemia aguda mieloblás tica - M2

Núcleo redondo Granulos azurófilos Cromatina densa

prominentes y con tintes ro jizos

Granulos
nucleares
oscuros

Citoplasma con zonas §

poco'definidas

Leucemia aguda mieloblás tica - M3 pro mielocítica Leucemia aguda mieloblástica - M4 mielomonocítica

Fragmentos citoplasmáticos Citoplasma abundante

semejantes a plaquetas
Leucemia aguda mielobl ástica - M5 mono cítica Leucemia aguda mieloblástica - M6 eritroleucemia

Leucemias agudas mieloblásticas, estadios M1-M6.

grar remisión completa del padecimiento, duración biología molecular permite el diagnóstico preciso de
de la misma y supervivencia. Las translocaciones estas entidades y, adicionalmente, controlar la respues
cromosómicas t (15; 17) y t (8:21), y las inv-16 son ta al tratamiento.
alteraciones cromosómicas que ocurren respectiva La expansión clonal de blastos en la médula ósea des
mente en LMA-M3, LMA-M2 y LMA-M4, y su iden plaza al resto de las series celulares, las cuales sufren
tificación por medio de cariotipo o de métodos de una disminución crítica de sus componentes. Esto es

43
 FÓRMULA O SERIE BLANCA

el principal determinante del cuadro clínico de las LEUCEMIAS CRÓNICAS

leucemias agudas: los pacientes pueden presentarse A diferencia de las leucemias agudas, las leucemias
con síndromes hemorrágicos (por disminución de las crónicas se caracterizan por su curso indolente, su
plaquetas), con síndrome anémico (por disminución larga evolución y por la ausencia de células muy
de los eritrocitos) o con infecciones particularmente indiferenciadas.
severas (por neutropenia). En los niños también se
observan otros síntomas con cierta frecuencia, como
el dolor óseo por expansión de la médula.
Los datos del laboratorio a menudo muestran una
amplia gama de anormalidades, aunque son comunes
la anemia, la leucopenia y la trombocitopenia. El re
cuento leucocitario puede variar de 100 a más de
1.000.000 por mm3 . Gen eralme nte se observan blastos
en sangre periférica.
El diagnóstico definitivo de leucemia se realiza me
diante la observación de la médula ósea, en donde se
evidencia una celularidad normal o aumentada, aun
que también puede ser hipocelular. Los blastos suelen
ocupa r entre el 80% y el 100% de la médul a, pero para
dar un diagnóstico de leucemia deben superar el 25%.
Morfológicamente son células inmaduras, con
cromatina nuclear difusa, con uno o más nucléolos y
citoplasma basófilo con o sin granulos. En una médu
la ósea normal pueden observarse hasta un 5% de
células inmaduras.
Si bien con la tinción de May-Grünwald-Giemsa o
Wright, en el 95% de los casos es posible diagnosticar si
la leucemia es linfoblástica o mieloblástica, siempre
deben realizarse estudios citoquímicos, inmunológicos
y citogenéticos que permiten una clasificación más
detallada del tipo de leucemia, lo que es fundamental
Leucemia granulocítica.
para realizar un tratamiento adecuado.

• La leucemia mieloide crónica (LMC) es una proli

feración neoplásica predominantemente de la serie
granulocítica; sin embargo se observan alteraciones
en la serie roja y en las plaque tas, lo cual i ndica q ue el
origen de la entidad parte de la  stem cell.  Esta enfer
medad se ha relacionado con una anormalidad
cromosómica (translocación del cromosoma 22 al 9);
t (9q+; 22q-) que se denomina cromosoma Philadelfia
(Phl), la cual se observa en más del 90% de los pacien
tes; el origen de esta leucemia no se conoce. En muchas
ocasiones el diagnóstico se efectúa cuando el paciente
se encuentra asintomático, al observar en un estudio
rutinario una marc ada leucocitosis. Los síntomas al mo
mento del diagnóstico suelen ser vagos: fatiga, pérdida
de peso, plenitud abdominal y en ocasiones sangrado o
dolor de abdomen, son los datos más comunes. En la
exploraci ón física se observa esplenome galia en el 9 5%
de los enfermos y hepatomegalia aproximadamente en
la mitad; es común enc ontra r adenomegalia moderada.
La púrpura o fiebre se reconoce en menos de una cuarta
parte de los pacientes.
7" ^-Citoplasma
monocito
con' granulos • La leucemia linfocítica crónica (LLC) se caracteriza
por la proliferación y la acumulación de linfocitos de
Leucemia monocítica. aspecto relativamente maduro o normal en el 90% de

44
 FÓRMULA O SERIE BLANCA

CLASIFICACIÓN MORFOLÓGICA DE
LAS LEUCEMIAS AGUDAS ( F A B )

LEUCEMIAS LINFOBLÁSTICAS AGUDAS

Ll: linfoblástica "típica"

L2: linfoblástica "atípica"
L3: parecida al linfoma de Burkitt

LEUCEMIAS MIELOBLÁSTICAS AGUDAS

MO: mieloblástica diferenciada mínimamente

MI: mieloblástica inmadura
M2: mieloblástica madura
M3: promielocítica
M4: mielomonoblástica
M5: monoblástica
M6: eritroleucemia
M7: megacarioblástica
Leucemia linfocítica.

CARACTERÍSTICAS ANTIGÉNICAS DE LAS LLA

TIPO DE LLA CD19 CD10 CD2 Clg Slg TdT

Pro-B (pre-pre B) +
Común + +
Pre-B + +
T +/- +
LLA = leucemia linfoblástica aguda; Clg = inmunoglobulina de citoplasma; Slg = inmunoglobulinas de superficie;
TdT = desoxinucleotidiltransferasa terminal.

CARACTERÍSTICAS ANTIGÉNICAS DE LAS LEUCEMIAS MIELOBLÁSTICAS AGUDAS

TI PO DE LM A CD33 CD13 CD14 GLICOFORINA CD41

MO
Ml/2/3 +
M4/5 +
M6 +
M7

los casos, linfocitos de tipo B, que son defectuosos desde • La leucemia de células vellosas es una enfermedad
el punto de vista inmunitario. El diagnóstico depende linfoproliferativa que se origina en los linfocitos B. Las cé'
del hallazgo de linfocitosis absoluta persistente en la lulas leucémicas son de tamaño intermedio o grande (10-
sangre con un incremento en el porcentaje (> 50%) de 18 mcm) que se caracterizan por tener prolongaciones en
pequeños linfocitos con núcleos redondos en la médula el citoplasma, a manera de "pelos"; además, poseen
ósea. fosfatasa acida positiva.

45
 FÓRMULA O SERIE BLANCA

MO NO CITO S Y MACRÓFAGOS

Los monocitos comprenden un grupo de leucocitos espe SISTEMA FAGOCÍTICO MONONUCLEAR

cializados en la fagocitosis que también se desarrollan en la Comprende al conjunto de células que forman los pre
médula ósea a partir de elementos celulares precursores. cursores mieloides de los monocitos, los monocitos ma
Una vez en la circulación, los monocitos rápidamente se
duros circulantes, y los macrófagos libres y fijos en los
dirigen hacia diversos tejidos y, una vez en ellos, se trans
tejidos.
forman en macrófagos, cuya función es la fagocitosis y
digestión de elementos extraños, incluyendo micro Las funciones de este sistema incluyen: fagocitosis y di
organismos. gestión de microorganismos, detritus celulares y otras par
tículas; secreción de mediadores químicos de la inflama
ción; interacción con antígenos y linfocitos en la genera
Esquema que muestra el proceso de monopoyesis. ción de la respuesta inmu ne (como células presentad oras
de antígenos); citotoxicidad de ciertos tipos de células

Los estadios tempranos

son de difícil identificación

Para la identificación de
las células maduras
se observa la estructura
nuclear y las propiedades
del citoplasma

Se desarrollan
en la médula ósea
Monoblasto

Funciones del sistema

fagocítico mononuclear
De la circulación
Fagocitosis pasan rápidamente Monocito
a los tejidos
Digestión
de microorganismos
de detritus celulares
otras partículas
Secreción de mediadores
químicos de la inflamación
La diferenciación
Interacción con antígenos concluye con:
y linfocitos (como células
presentadoras de antigenos)
Macrófagos
Citotoxicidad de ciertos libres
tipos de células tumorales
Otras funciones dependiendo y macrófagos
del tejido en donde se fijos del tejido
encuentre el macrófago tisular Macrófago
 FÓRMULA O SERIE BLANCA

tumorales; otras funciones dependiendo del tejido en Monoblasto

donde esté ubicado el macrófago tisular.
Citoplasma sin granulos
PRECURSORES MEDULARES DEL MONOCITO
En la médula ósea, la unidad formadora de colonias de Nucléolos
monocitos y granulocitos (CFU-GM) puede diferenciarse
hacia la serie granulocítica, o bien, hacia el desarrollo de
Cromatina delicada
monocitos . En este último caso, la maduración continúa
en la unidad formadora de colonias de monocitos (CFU-
M), la que, a su vez, se diferencia sucesivamente en mo-
noblasto, promonoci to y monocito maduro.
Ei monobla sto es una célula que se encue ntra en un nú
mero reducido en la médula ósea, indistinguible del mie
loblasto a la microscopía óptica. Observando esta célula Pequeños granulos

con microscopio electrónico, evidencia un núcleo que

Núcleo hendido y plegado
cont iene u na fina croma tina y nucléolos en su interior.
En estudios llevados a cabo en animales, un pequ eño por Nucléolos
centaje de las células de la médula ósea son promonocitos,
considerados células intermedias entre monoblastos y
monocitos. Estudios citoquímicos han identificado pro
monocitos ta mbién en la médula ósea human a normal. Se El monoblasto es una célula de núcleo grande con uno o dos nucléolos. El
trata de células con un núcleo de forma irregular, citoplasma es escaso y son poco distinguibles del mieloblasto. El promonocito
indentado, del cual parten delgados filamentos hacia el contien e en su citoplasma un nú mero variable de granulo s azurófilos.
interior del citoplasma, aspecto que las distingue de los
progranulocitos. El aparato secretor de los promonocitos
contiene peroxidasa, tanto en el retículo endoplásmico El monocito se encuen tra en médula ósea y en sangre, siendo de menor ta maño
como en el aparato de Golgi y en los granulos. Los que el prom onocito. En su núcleo son indistinguibles los nucléolos.
promonocitos se dividen rápidamente y originan el

Citoplasma con tintes gris-azulados Núcleo con forma

de herradura

Microvellosidades
citoplasmáticas Circunvoluciones
cerebroides del núcleo

Citoplasma azul grisáceo

Nucléolos

Granulos
Núcleo lobulado
Cromatina en acúmulos

Granulaciones

Surcos nucleares
Citoplasma con aspecto
de vidrio esmerilado

Granulaciones
finas

Vacuolas

47
 FÓRMULA O SERIE BLANCA

monocito maduro, que es una célula más pequeña, más can en los sinusoides del hígado y también fagocitan
activa funcionalmente y que ha perdido su capacidad de eritrocitos y otros elementos celulares, constituyendo im
mitosis. portantes sitios de almacenamiento de hierro. Los ma
crófagos de los alvéolos pulmonares, de la lámina propia
LOS MONOCITOS del tracto gastrointestinal, y de los líquidos pleural y
El monocito maduro es una célula.móvil de aproximada peritoneal reflejan en su morfología su función específica
mente 12 a 15 mcm de diámetro, cuyo núcleo ocupa cerca de fagocitosis de microorganismos, células y detritus de
de la mitad del área celular, generalmente está ubicado en acuerdo con su localización tisular.
una posición excén trica y de forma irregular, descrita por
La mayoría de los macrófagos tienen un diámetro de en
lo común como célula "en herradura". En el interior del
tre 25 y 50 m cm, co n un núcleo excént rico fusiforme que
núcleo puede distinguirse una característica red de
cromatina que forma acúmulos ubicados periféricamente. conti ene u no o dos nucléolos en su interior y una fina cro
Al microscopio electrónico se distinguen uno o dos nucléolos matina que tiende a formar acúmulos en forma similar a
pequeños rodeados de cromatina. lo observado en los monocitos. El citopl asma evidencia
gran cantidad de granulos y vacuolas claras cercanas a la
El citoplasma contiene un número variable de granulos y periferia, lo cual evidencia la activa pinocítosis celular.
vacuolas. A la microscopía electrónica pueden observar Numerosos y prominentes microtúbulos y microfilamen-
se numerosas mitocondrias pequeñas y elongadas, un tos citoplasmáticos permit en el movimie nto celular. De
complejo de Golgi bien desarrollado y una can tidad va hecho, los macrófagos activados se distinguen por sus
riable de ribosomas y polirribosomas. Lo que distingue al notables pseudópodos.
monocito es la gran cantidad citoplasmática de micro-
túbulos y microfibrillas, generalmente dispuestas alrede La principal característica morfológica de los macró
dor del núcleo. Los granulos citoplasmáticos son similares fagos, indep end ient eme nte del sitio en el cual se locali
a los observados en los granulocitos, densos, homog éneos cen, es la presencia de lisosomas que con frecuencia se
y que contienen fosfatasa acida y arilsulfatasa, por lo observan fusionándose con fagosomas para formar
tanto, son lisosomas primarios. Luego de la endocitosis, lisosomas secundarios. Dentro de estos últimos pueden
los lisosomas se fusionan al fagosoma, formando los verse materia l de digestión de células, bacter ias y otros
lisosomas secundarios. detritus.
La superficie celular presenta gran cantidad de micro-
vellosidades. En la circulación, los monocitos representa n
entre un 4% y un 8% de los leucocitos sanguíneos, perma
neciendo en ella cerca de 32 horas promedio. Tienden a
adherirse a las paredes vasculares y responden a estímulos
quimiotácticos efectuando movimientos de diapédesis ac
tiva entre las células endoteliales hasta alcanzar los tejidos,
en cuyo interior maduran a macrófagos; adquieren un
mayor volumen celular e incrementan su capacidad fa-
gocitaria mediante un aumento en el número de las enzi
mas hidrolíticas en el interior de los lisosomas (fosfatasas,
estearasas, (3-glucuronidasas, lisozima, arilsulfatasas, etc.) .
Los monocitos con tinua mente emigran desde la circula
ción hacia los tejidos periféricos.

LOS MACRÓFAGOS
Los macrófagos son monocitos diferenciados en el interior
de diferentes tejidos y se distinguen de sus predecesores
por presentar un mayor volumen celular, un aumento en el
núme ro de granulos citoplasmáticos, un a mayor heteroge
neidad de la forma celular y un incremento en el número
El monocito al ingresar a los tejidos se transforma en macrófago, célula con
de vacuolas claras intracitoplasmáticas. La forma del gran capacidad fagocítíca y con una vida media de hasta 70 días.
macrófago y ciertas características morfológicas y funcio
nales dependerán del tipo de tejido en el cual reside. Los
macrófagos del bazo tienen como función el secuestro y la
destrucción de eritrocitos anormales o envejecidos, por lo RECEPTORES Y ANTÍGENOS DE SUPERFICIE DE
cual evidencian agregados intracitoplasmáticos de ferri- MONOCITOS Y MACRÓFAGOS
tina. Los macrófagos de la médula ósea forman parte de las Los monocitos y los macrófagos tienen diversos receptores
islas eritroblásticas y también ejercen funciones de en la superficie celular que representan marcadores de
eritrofagocitosis, alma cenamiento y transferencia de hie origen, migración y función: para la porción Fe de las
rro. Los macrófagos hepáticos (células de Kupffer) se ubi inmunoglobulinas, para diversos componentes del comple-

48
 FÓRMULA O SERIE BLANCA

DISTRIBUCIÓN DEL
SISTEMA FAGOCÍTICO MONONUCLEAR

Médula ósea Monoblastos

Promonocitos
Monocitos
Macrófagos de las islas eritroblásticas

• Sangre periférica Mono cito s

Cavidades corporales Líquido peritoneal

Líquido pleural

Focos de inflamación Células epitelioides

Macrófagos exudados
Células gigantes multinucleadas

Tejidos Hígado (células de Kupffer)

Pulmón (macrófagos alveolares)
Tejido conectivo (histiocitos)
Bazo (células de la pulpa roja)
Ganglios linfáticos
Timo
Hueso (osteoclastos)
Tejido sinovial (células tipo A)
Tracto gastrointestinal
Tracto genitourinario
Glándulas endocrinas
Sistema nervioso central (microglía)
Piel (células dendríticas)

mentó, para varias citocinas, para péptidos y pequeñas compatibilidad (MHC): HLA-DR, -DPy-DQ. Existe
moléculas (serotonina, histamina, sustancia R endorfinas, una amplia variabilidad en la expresión de HLA de
encefalinas), para distintas hormonas (insulina, gluco- acuerdo con el tejido en el cual se encuentre el
corticoides, angio tensina), para transferrinay lactoferrina, macrófago: mientras que los ubicados en el bazo contie
para lipoproteínas, para coagulantes y anticoagulantes nen un alto porcentaje de células HLA-DR positivas
(fibrinógeno, fibrina, al-antitrombina, heparina), para (50%), los macrófagos peritoneales tienen un número
fibronecti na, para laminina , para agonistas colinérgicos y relativamente bajo (10% a 20%). Diversas linfoquinas,
adrenérgicos, etc. Todo esto demuestra la importantísima especialmente el interferón-y, son capaces de inducir a
inte racc ión que ejercen estas células y sus numerosas fun los macrófagos a expresar altos niveles de antí genos del
ciones. MHC de clase II, mientras que la prostaglandina E, la
De la misma manera, monocitos y macrófagos contie alfa-fetoproteína y los glucocorticoides producen una
nen una serie de antígenos de superficie que los carac regulación descendente de la expresión de HLA-DR
terizan y distinguen algunas de sus funciones. Tal es el en estas células.
caso de la función como células presentadoras de Otros antígenos de superficie presentes en los macrófagos
antígenos, para lo cual exhiben en la superficie celular y monocitos son los receptores para CD1 1, C D14, CD68
moléculas de clase II del complejo mayor de histo- y CD4.

49
 FÓRMULA O SERIE BLANCA

CLASIFICACIÓN ANTIGUA DE LOS LINFOMAS

WORKING FORMULATION
1982

BAJO GRADO
A Linfoma Unfocítico peq ueño con diferenciación plasmoc itoide o sin ella.
B Linfoma folicular de células hendidas pequeñas.
C Linfoma folicular mixto, de células hendidas pequeñas y células grandes.

GRADO INTERMEDIO
D Linfoma folicular de grandes células.
E Linfoma difuso de células peque ñas he ndidas.
F Linfoma difuso mixto, células pe queñas hend idas y células grandes.
G Linfoma difuso de célula s grandes.

ALTO GRADO
H Linfoma inmunoblástico de células grandes.
I Linfoma linfoblástico.
J Linfoma de células pequeñas no hendidas.

OTROS
K Células vellosas, linfoma cután eo de células T, neoplasia histiocítica, neoplasia plasmocítica, e tc.

CLASIFICACIÓN ACTUAL DE LOS LINFOMAS Y SU CORRESPONDENCIA

CON LA CLASIFICACIÓN ANTERIOR
REAL
1994 (modificado en 1999)

NEOPLASIAS DE CÉLULAS B NEOPLASIAS DE CÉLULAS T

PRECURSORES PRECURSORES
- Leucemia/linfoma linfoblástico de precursores B (I) - Leucemia/linfoma linfoblástico de precursores T (I)

CÉLULAS B MADURAS CÉLULAS T MADURAS Y CÉLULAS NK

- Leucemia linfocítica crónicaAinfoma Unfocítico - Leucemia prolinfocítica de células T (A)
de células pequeñas (A) - Leucemia de linfocitos grandes granulosos (A)
- Linfoma linfoplasmocitario (A) - Leucemia agresiva de células NK (K)
- Linfoma prolinfocítico (A) - Linfoma de células T/NK nasal y tipo nasal
- Linfoma de células del manto (B, E) (linfoma angiocéntr ico (E, F)
- Linfoma folicular (B, C, D) - Micosis fungoides (A, E, K)
- Linfoma folicular cut áne o (B, C, D) - Síndrome de Sezary (A)
- Linfoma de la zona marginal (B, C, E, F) - Linfoma angioinmun oblástic o de células T (F, H)
- Leucemia de células vellosas (K) - Linfoma de células T periféricas no especificado (E, F, G,H)
- Plasmocitoma/mieloma de células plasmáticas (K) - Linfoma/leucemia de células T del adulto (K)
- Linfoma difuso de células B grandes (G, H) - Linfoma anaplásico de grandes células (H)
- Linfoma de Burkitt 0) - Trastornos linfoproliferativos cutáneos de células T CD30
- Linfoma de células plasmáticas (K) primariamente cutáneos (H)
- Linfoma intestinal de células T (F, H)

52
 FÓRMULA O SERIE BLANCA

FROTIS DE SANGRE PERIFÉRICA: LA SERIE BLANCA

 La variada gama de células que contienen los extendidos de das. Los macrófagos, tienen vida media más larga que los
sangre periférica debe su riqueza en mayor proporción a los neutrófilos, y son responsables de la remoción de células
integrantes de la serie blanca o leucocitos, cuya vital partici dañadas y tejidos senescentes o muertos. Existen dos clases
 pación en funciones relacionadas con la respuesta inmune principales de linfocitos: los linfocitos B, que deben su nom
específica e inespecífica es frecuentemente reflejada en las bre a que se desarrollan en la médula ósea (de la denom i
alteraciones cuali-cuantitativas que se ponen de manifiesto nación inglesa   bone marrow)  y son los encargados de la
en la sangre de pacientes afectados por patologías infec- produc ción de anticue rpos, y los linfocitos T, que se nom
tocontagiosas. bran así porque compl etan su desarrollo en el timo, y que
son los responsables de la inmunid ad celular, o que incluye
La sangre contiene varios tipos de células con diferentes actividades de modulación de la respuesta inmune de otros
funciones y éstas varían desde el trans porte de oxígeno a la glóbulos blancos y hasta la capacidad de destruir células
producción de ant icuerpos. Algunas de estas células reali infectadas por diversos patógenos.
zan sus funciones en el sistema circul atorio mient ras que
otras utilizan la sangre como medio de t ransport e para al LAS TINCIONES HISTOLÓGICAS REVELAN
canzar otros tejidos. Sin embargo, todas ellas comparten DIFERENCIAS BIOQUÍMICAS Y MORFOLÓGICAS
características en común como ser su vida media limitada
y su renovaci ón en forma contin ua a lo largo del ciclo de La observación de los estadios de diferenciación celular
vida del ser humano. N otabl ement e, todas provienen de requiere la obtención de material mediante punción
un mismo tipo de célula germinal   (stem cell)   que se en aspirativa, que en el adulto se puede practicar en el
cuentra en la médula ósea. Estas células germinales son est ernó n o en la cresta ilíaca posterior. Luego de la ob 
totipotentes, pudiendo dar origen a todos los tipos de célu tención de este material se realiza el extendido de los
las del tejido sanguíneo y también a otros tipos de células, grumos medulares, que una vez teñido puede visua
como los osteoclastos, que forman parte del tejido conectivo. lizarse con microscopía óptica. Las tinciones histológicas
Dentro de las células que forman el tejido sanguíneo en permitieron grandes avances en la ubicación de estas
contr amos a los glóbulos rojos que trans port an oxígeno y clases celulares y en la caracterización de distintos tipos
dióxido de carbono, plaquetas que intervienen en la coa de leucemias, enfermedad maligna que puede incluir a
gulación sanguínea y leucocitos o glóbulos blancos que las células madre o pre cursoras y a su linaje posterior. La
combaten infecciones y en algunos casos digieren dese coloración de Wright o la de May-Grünwald-Giemsa
chos celulares actuando como recolectores/reprocesadores son utilizadas tanto para médula ósea como para sangre
de residuos. Los leucocitos tienen también la habilidad de periférica y permiten revelar los distintos estadios de
atravesar los capilares sanguíneos y migrar hacia los tejidos diferenciación celular. Estas tinciones tambié n se deno 
donde son requeridos. minan panópticas, ya que colorean tanto los elementos
básicos como los ácidos que se encuentran en el ex
Los glóbulos blancos pueden ser clasificados den tro de tres tendido. Los componentes que forman esta coloración
categorías en base a su morfología revelada por tin ciones son tres: azul de metileno, azur de metileno y eosina. El
histoquímicas y resuelta por microscopía óptica: granu- azul de metileno es un componente básico que tiñe es
locitos, monocitos y linfocitos. Los granulocitos contienen tructuras acídicas de la célula impartiéndoles una colo
numerosos lisosomas y vesículas secretorias y las tinciones ración azul-violácea; la eosina y el azur de metileno son
permiten visualizar diferencias entre ellos en cuanto a compuestos ácidos que tiñen estructuras alcalinas, otor
bioquímica y función, forman parte de este grupo gándoles coloración rojo-anaranjada y rojo-violácea
neutrófilos, basófilos y eosinófilos. Los neutrófilos, o ta m respectivamente. La tinción para la detección de
bién llamados polimorfomonucleares debido a que su nú peroxidasas imparte una coloración marrón-rojiza a las
cleo presen ta varios lóbulos, son los más abund antes y su células con granulos peroxidasa positivos y permite la
función es fagocítar microorganismos, comúnmente bac clasificación morfológica de leucemias mielocíticas agu
terias . Los basófilos secretan hi stamin a y median respues das. La coloración esterasa inespecífica, permite la dife
tas inflamatorias y los eosinófilos colaboran en la destruc renciación primaria entre leucemias mielomonocíticas
ción de parásitos y modulan respuestas alérgicas infla y monocítícas de otras leucemias mielocíticas, otorga
matorias. Los monocitos, una vez que dejan el torrente una coloración marrón-anaranjada en caso de ser positi
sanguín eo, d an origen a células llamadas macrófagos, cé va la reacción. La reacción de PAS (Periodic-Acid-
lulas fagocíticas por excelencia, capaces de ingerir bacte Schiff), perm ite la det ección de polisacáridos y de muc o-
rias y protozoos. Los macrófagos, junto con los neutrófilos, polisacáridos intracelulare s. La serie granulocítica, PAS
albergan gran número de lisosomas especializados cuyo positiva, se revela en color borgoña y va increme ntánd ose
contenido es capaz de generar moléculas altamente en el linaje celular hasta llegar a un máximo en los
reactivas (radicales libres), como el anión superóxido (O, -), neutrófilos. Esta coloración se utiliza en el diagnóstico
el hipoclorito, y que a la vez posee hidrolasas concentra del síndrome mielodisplásico y de eritroleu cemias.

53
 FÓRMULA O SERIE BLANCA

ORIGEN Y LINAJE DE LA SERIE GRANULOCÍTICA

La generación de células que forman el tejido sanguíneo
es también llamada hematopoyesis y ocurre en la médula
ósea. A partir de una célula madre, pasando por diversos
estadios de diferenciación, pueden originarse plaquetas,
eritrocitos y glóbulos blancos. Con respecto a los linfocitos,
existen aún hoy en día controversias acerca de si derivan Metamielocito
de la misma célula que da origen al resto de las células del Mielocito
tejido hematopoyético o si derivan de una célula madre
linfoide, sin guardar relación con los otros tipos celulares.
Por esta causa se suele dividir a la hematopoyesis en
posterior de maduración, es una célula redondeada de
linfopoyesis o producción de linfocitos y mielopoyesis, cua n
tamaño ent re 15 y 20/xm. El núcleo es de redondo a oval y
do se refiere a la generaci ón del resto de las células.
puede presentar una indentación en la cara que mira ha
La secuencia celular que se origina para la serie cia el citoplasma, los nucléolos no son más visibles y la
granulocítica a partir de la célula madre deriva en el cromatina se condensa formando cúmulos. Esta célula es
mielocito, a partir de donde ya divergen las tres líneas la última co n capacidad mitótica de la serie. El citoplasma
celulares (basófilos, eosinófilos y neutrófilos). Las células pierde su coloración basófila y se present a con gran cant i
de la granulopoyesis comprenden de un 60 a un 65% de las dad de granulos primarios, los que se irán reemplazando en
células presentes en la médula ósea. Los cambios forma progresiva aunque no en su totalidad por granula
morfológicos que ocurren en este tipo de células incluyen ción secundaria específica, coexistiendo ambas formas en
la reducción de la relación núcleo-citoplasma, desapari todos los elemen tos de la serie. Los granulos secun darios
ción de nucléolos y de la basofilia citoplasmática, aparición son de menor tamaño y menos densos que los primarios;
de la granulación primaria azurófila a partir del promielocito son mieloperoxidasa negativos y cont ienen mayor propor
y aparición de la granulación secundaria específica ción de lisozima. A partir de esta célula se generan las tres
(neutrófila, eosinófila o basófila) a partir del mielocito. El líneas de células granulocíticas: neutrófilos, basófilos y
mieloblasto  es una célula cuyo tamaño oscila entre los 15 eosinófilos. El metamielocito  tiene un tamaño entre 10 y
y 20 /xm de forma redondeada u oval. El núcleo  es de 15 /xm, la forma del núcleo es reniforme y tiene varios
forma redondea da y de gran ta maño con respecto al volu cúmulos cromáticos. Esta célula ha perdido su capacidad
men celular y está provisto de cromatina reticulada con mitótica y sólo es capaz de diferenciarse. Al progresar la
presencia de dos o tres nucléolos bien visibles. El citoplas maduración de esta célula hacia neutrófilo el núcleo se
ma basófilo (azul oscuro) es escaso y está desprovisto de angosta aún más, da ndo origen a las bandas, característica
granulación y vacuolas.  El promielocito  es la célula de de estas células. La mayoría de los neutrófilos en banda
mayor tamaño presente en un a granulopoyesis normal, su se localizan en la médula ósea, pasando de un 2 a un 5% a
tamaño puede encontrarse entre los 16 y 25 /xm. Su forma sangre periférica aunqu e estos porcentajes se pue den mo
es redondeada u oval y el núcleo todavía presenta algún dificar en procesos infecciosos.

Mieloblasto

nucléolo visible al microscopio óptico. El citoplasma es

basófilo y cont iene granulos que se dispone n en la cerca
nía del núcleo dejando una zona más clara, agranular. La Neutrófilo segmentado
granulación citoplasmática toma coloración rojo-violácea
con las tinciones panópticas y su contenido de mielo
peroxidasa es el mejor marcador enzimático de este tipo de Los eosinófilos y los basófilos pasan por los mismos estadios
granulación primaria, responsable de reacción positiva con de maduración que los neutrófilos hasta llegar a mielocito.
la tinción de negro Sudán. En la granulación primaria Es a  partir de esta célula donde divergen las tres líneas
también se puede detectar la presencia de beta- granulocíticas debido al reemplazo parcial y diferencial de
galactosidasa, beta-glucuronidasa, esterasay N-acetil -beta la granulación primaria por la granulación secundaria es
glucosaminidasa, entre otra s. El mielocito  es un estadio pecífica en cada una de ellas. Los  eosinófilos inmaduros

54
 FÓRMULA O SERIE BLANCA

colaboradores, T citotóxicos y T de hipersensibilidad retar

dada, sólo distinguibles por marcadores inmunológicos de
membrana. Los linfocitos T de memoria pueden encon
trarse en los órganos linfoides periféricos.
LA SERIE BLANCA EN SANGRE PERIFÉRICA
Las diferentes formas celulares maduras provenientes de
Eosinófilo Basófilo
la serie granulocítica, linfocítica y monocítica, son libera
das al torrente sanguíneo donde pueden ser detectadas
mediante la preparación de extendidos de sangre periférica
(frotis). Las coloraciones más frecuentemente utilizadas
tienen el núcleo de forma redondeada a oval. Con la son las de May-Grünwald-Giemsa y la de Wright, existien
tinción de Wright o la de May-Grünwald-Giemsa se obser do otras coloraciones que comple mentan la información
va que la granulación está uniformemente distribuida por obtenida para células con morfologías similares. Las células
la célula y a medida que madura, cambia su coloración de blancas son fácilmente reconocibles ya que son las únicas
azulada a marrón-anaranjada y finalmente a naranja. Esta nucleadas presentes en sangre periférica.
tinción también permite visualizar la granulación de los
basófilos inmaduros de color azul intenso a violeta, dis Los neutrófilos segmentados son el último estadio
tribuida en forma irregular, ocult ando parci almente al nú madurativo de las células neutrófilas. Const ituye n de un 7
cleo, el cual aún no se visualiza en forma lobada. a un 25% de las células nucleadas presentes en médula
ósea y es bajo esta forma que alcanzan sangre periférica.
SERIE MONOCÍTICA Y LINFOCÍTICA Son redondeadas de tamaño entre 12 y 14/xm, su núcleo
La forma más joven presente en médula ósea de la serie es único y se encuen tra segmentado en 2 a 5 lóbulos uni
monocítica es el monoblasto, diferenciable del mielocito dos por puentes cromatínicos delgados. El citoplasma tiene
por su actividad esterasa inespecífica positiva. Los numerosas granulaciones secundarias que aparecen de
pr om on oc it os son células de 15 a 20 /xm y una elevada color pardo y en menor número granulaciones primarias
relación núcleo-citopla sma. El núcl eo de bordes irregula color azul oscuro visibles con las coloraciones panópticas.
res, con pliegues e indentaciones , presenta la crom atina Citoquímicamente son positivos a peroxidasa y a PAS y
más condensada que el monoblasto y son reconocibles negativos a esterasa no específica. El conteo normal de
uno o dos nucléolos. El citoplasma es intensamente neutrófilos oscila entre 1,6 a 7,4 10 3 /(ll. Sus pre cursor es
basófilo debido a la presencia de polirribosomas. Esta cé inmediatos son los neutrófilos en cayado, que se caracteri
lula en su paso a sangre periférica se transforma en zan por tener el núcleo menos segmentado y también se los
monocito y luego en macrófago al abandonar el torrente puede encontrar en extendidos de sangre periférica nor
sanguíneo, de esta forma las células de la serie monocítica mal, aunque su abundancia se relaciona con infecciones
tienen diferente función, localización y aspecto severas.
morfológico según sea el estadio de diferenciación en el Los eosinófilos tienen forma redondeada con tamaño
que se encuentren. aproximado de   16/ira, el núcleo generalmente se presenta
con dos lóbulos y la granulac ión secundaria nun ca se dis
Los linfocitos B y T provienen de un ancestr o comú n, una
pone por encima del núcleo y es de color naranja a marr ón-
célula germinal totip otent e presente en médula ósea en el anaranjado con las coloraciones panópticas. Son rara men
adulto y en el hígado fetal. Las formas linfocitarias madu te enc ontrado s en extendidos de sangre no patológica y su
ras son morfológicamente indistinguibles entre sí con
conteo es de 0,02 a 0,4 lOVjJ.1. Son peroxidasa y PAS posi
microscopía óptica. Los estadios de maduración de los
tivos y negativos a esterasa no específica.
linfocitos B en la médula ósea son: linfocito pre-pre B,
linfocito pre B, linfocito B inmadu ro y linfocito B maduro. El tamañ o de los basófilos se encuen tra ent re 10 y 13 /xm.
Los linfocitos B maduros sal en de la médula ósea y se diri El núcleo tiene generalmente 2 o 3 lóbulos unidos por puen
gen a los órganos linfáticos periféricos, ubicándose en los tes cromatínicos, difícilmente visibles con microscopía óp
folículos linfoides. Aquí, proliferan bajo un estímulo tica debido a la granulación densa que cubre a éste. La
antigénico adecuado formando poblaciones linfoides de granulación secundaria basofílica suele tener forma
acuerdo al antígeno que estimuló su proliferación. Estas poligonal y aparece de color azul oscuro con las tincio nes
células pueden dejar los folículos linfoides y situarse en los habituales. El contenido de estos granulos es rico en
cordones medulares convirtiéndose en células secretoras mucopolisacáridos ácidos sulfatados, glucógeno y
de inmunoglobu linas o bien regresar al estado quiescente peroxidasa, por lo que dan positiva la reacción de PAS y
de linfocito B de memoria. Los linfocitos T generados en peroxidasa.
médula ósea se liberan al torrent e sanguíneo en un estadio Los monocitos pueden tener un diámetro de 15 a 30 /xm
llamado protimocito, éste al llegar al epitelio tímico y bajo siendo las células de mayor tamaño presentes en sangre
acción hormonal se transforma en timocito inmaduro, periférica, su morfología es irregular, adquiriendo hasta
timocito cortical tardío y timocito medular. En sangre formas cuadrang ulares y ovales. El núcleo es voluminoso,
periférica se pueden encontrar linfocitos T supresores, T no tiene nucléolos y adopta formas en herra dura, no lobu-

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 FÓRMULA O SERIE BLANCA

LEUCOCITOS EN SANGRE PERIFÉRICA

Tipo de Valores normales Tamaño Alteraciones Causa probable

leucocito en sangre celular
Neutrófilo s 1,6-7,4 ÍO 3 /^! 12-14/um Neutrofilia Estrés, infecciones agudas
o inflamación. Si se presenta
con neutrófilos inmaduros
(cayados) indica infecciones
severas, agudas o crónicas
Neutropenia Medicamentos antiinflamatorios
no esteroideos. Parvovirus, fiebre
tifoidea, malaria. Enfermedades
autoinmunes

Granulaciones tóxicas Infecciones bacterianas

Hipersegme ntación nuclear Probable anemia megaloblástica

Eosinófilos 0,02-0 ,4 lOV/xl 16/xm Eosinofilia Alergia o presencia de parásitos

Enfermedades neoplásicas o leucemia
mielocítica aguda
Eosinopenia Infecciones agudas o estrés

Basófilos 0-0,15 10V/A1 10-14 Atm Basofilia Frecuente en leucemia mielocítica

crónica con conteo alto de
leucocitos o en síndromes
mieloproliferativos
Granulaciones tóxicas Infecciones bacterianas

Mono cito s 0,2-1 lOV/tl 15-20/xm Monocitosi s Infecciones crónicas (tuberculosis,

fiebre tifoidea). Inflamaciones
crónicas. Leucemia mielomonocítica
aguda o crónica
Monoc itope nia Aplasia de médula ósea. Leucemia
con cé lulas vellosas

Linfocitos 1-3,5 lOV/xl 9-20 /¿m Linfocitosis Infecciones (por ej. pertusis,
mononucleosis). Síndromes
linfoproliferativos. Estrés.
Inflamaciones crónicas
Linfopenia Infecciones. Radioterapia.
Enfermedades sistémicas.
Terapias inmunosupresoras

56
 FÓRMULA O SERIE BLANCA

lado o doblado, la cromatina aparece en hebras finas, ca que preparado sea movido formando una figura de diente
racterísticas de estas células. El citoplasma aparece en co de sierra, de arriba hacia abajo, de izquierda a derecha, de
lor azulado grisáceo y puede tener alguna vacuola . Se di abajo hacia arriba, de izquierda a derecha, y volver a co
ferencia de las células de la serie granulocítica por ser menzar el recorrido, hasta totalizar un recuento total de
esterasa inespecífica positiva y dar reacción débil para por lo menos 100 leucocitos.
peroxidasa y PAS. Los valores normales encontrados en Es ideal realizar el recuento en dos extendidos realizados
sangre van de 0,2 a 1,0 lOVfXl. Los macrófagos son el último con la misma muestra para promediar los resultados. Los
estadio de maduración de los monocitos y son difícilmente porcentajes que se obtienen por este método pueden ser
localizables en sangre periférica. transformados en valores absolutos al c ombinar con el re
Los linfocitos son las células más pequeñas de la serie cuento total de leucocitos.
blanca, su tamaño es variable debido a que la expansión Es importante destacar que la precisión del recuento para
del citoplasma varía en función de su actividad y oscila las células sanguíneas menos predominantes es baja al con
entre 9 y 20 ¡xm. En sangre periférica los linfocitos de me tar sólo un total de 100 leucocitos. Por ejemplo, si el valor
nor tamaño son los más abundantes. Son las células más real de eosinófilos en sangre fuera de 5%, es de esperar que
numerosas, después de los neutrófilos, en extendidos de en el recue nto diferencial de un mismo extend ido se halle
sangre normal de adultos con valores que van de 1,0 a 3,5 un valor que oscile entre 2 y 11%. Este rango puede ser
103 /(xl. El núcleo es re dondo u oval, sin lóbulos a diferencia reducido aumentando el número total de células
de los monocitos, intensamente teñido. El citoplasma es de recontadas, sin embargo, esto carece de valor en la evalua
color azulado a gris. Al igual que los monocitos son esterasa ción manual de un ext endido, y si se requiere mayor preci
inespecífica positivos, presentan coloración débil para PAS, sión debería utilizarse un método automatizado, donde el
y son peroxidasa negativos. número de células contadas puede llegar a 10.000 con
facilidad.
RECUENTO DIFERENCIAL LEUCOCITARIO
La clasificación manual de los leucocitos utilizando la co REFERENCIAS:
loración de Wright permite dete rminar la relación porcen Win tro be' s Clinical Hematology , 1999. Vol. 1. 10 th. Edition. Lee G. R.,
tual entre las diversas especies leucocitarias. Para ello se Foerster J., Lukens J., Paraskevas E, Creer J. R, Rodgers G. M. Williams &. Wilkins
Eds, West Camden St., Baltimore, Maryland.
debe trabajar en el área central del extendido y realizar
Diagnóstico Hematológico. Laboratori oy Clínica, 1972. Tomo I. Ciscar, F. y
una observación sistemática del mismo movien do la región Farreras. De. Jims, Barcelona.
visualizada asegurando la no repetición del recuento (evi Hematología Clínica, 1979. Vol. 1. Wintrobe M. M., Lee G. R., Bithell T. C,
tar el solapamiento de las áreas revisadas). Se reco mienda Boggs D. R., Athes J. W, Foerster J. Editorial Interm édica, Bs. As.

57
 FÓRMULA PLAQUETARIA

tienen en promedio una poliploidía de 16N. Todo el ADN

se ubica en un gran núcleo multilobulado en donde cada
uno de estos lóbulos nucleares representa un volumen
diploide de ADN (2N). E n general, existe una relación
entre el aumento de la poliploidía y el volumen del
megacariocito.
En algún moment o de la maduración del megacariocito se
detiene la mitosis y tiene lugar un proceso de endomitosis,
mediante el cual se replica el ADN sin división nuclear ni
celular. Morfológicamente, la endomitosis se refleja a tra
vés de la disolución de la membrana nuclear y la forma
ción de un huso mitótico multipolar. En término s estrictos,
en realidad el megacariocito inicia todos los procesos pro
pios de la mitosis: profase, prometafase, metafase y llega
incluso a la anafase A, aunque no progresa hacia la anafase
B, telofase ni hacia la citoquinesis. De esta manera, la
célula deviene en la poliploidía característica.
Bajo microscopía óptica pueden distinguirse diversos esta
dios madurativos en el megacariocito, qu e van del I al IV:
- Estadio I (megacarioblasto): célula de aproximadam ente
15-20 mcm, de núcleo lobulado y citoplasma basófilo.
- Estadio II (megacariocito basófilo): ya supera los 20 mcm
y presenta un núcleo en herradura, citoplasma basófilo y
granulos azurófilos alrededor del centrosoma.
- Estadio III (megacariocito granular): célula de 25-50 mcm
con un gran núcleo multilobulad o, citoplasma acidófilo y
numerosos granulos azurófilos.
Megacariocitos patológicos -Trombo citosis esencial
- Estadio IV (megacariocito maduro): célula cercana a los
50 mcm de núcleo picnótico, en cuyo citoplasma se obser •
va n grupos de 10 a 12 granulos azurófilos. Alteración de los megacariocitos. Leucemia aguda megacariocítica (M7) y
trombocitosis esencial.
Cada megacariocito produce cerca de 1.000 a 3.000
plaquetas, y se estima que aproximadamente   35.000 a
^5.000 plaquetas por microlitro de sangre son producidas hasta el megacariocito. De hecho, todas estas células ex
por día. En determinada s circuns tancias en las cuales au presan en su superficie el receptor de trombopoyetina
menta la demanda de plaquetas, la producción diaria pue (c-Mpl).
de aumentar hasta 6 veces. Aún se desconoce el proceso
MORFOLOGÍA DE LAS PLAQUETAS
exacto mediante el cual el megacariocito "libera" plaquetas
a la circulación, y se han propues to varias hipótesis. Una de Las plaq uetas no son más que pequeñ os fragmentos celu
ellas afirma que el citoplasma del megacariocito se divide lares, por lo tanto , carecen de núcleo. Su diám etro prome
en "territorios", cada un o de los cuales formará una plaqueta dio varía de 1,5 a 3 mcm, cerca de un tercio a un cuarto del
mediante la simple fractura citoplasmática. Al atravesar tamaño de un eritrocito. Existe una considerable variabili
los sinusoides medulares, el núcleo quedaría retenid o y se dad en el tamañ o de las plaquetas entr e diferentes indivi
liberarían fragmentos anucleados. El modelo proplaquetario duos y en una misma persona, de modo tal que no es raro
es el que postula que las plaquetas son el resultado de la encontrar en la misma muestra de sangre plaquetas del
proyección de pseudopodos del megacariocito dentro de doble del tamaño que otras.
los sinusoides medulares, de los cuales se desprenderían A la microscopía electrónica, las plaquetas presentan un
proplaquetas a la circulación, es decir, fragmentos del cito glicocálix de 14 a 20 nm formado por glicoproteínas,
plasma de los megacariocitos de mayor volumen que las glicolípidos, mucopolisacáridos y proteínas plasmáticas
plaquetas normales, las cuales se formarían por una nueva adsorbidas. La superficie plaquetaria presenta una serie de
fragmentaci ón ya en el interior de los sinusoides. indentac iones que forman un sistema canalicular hacia el
Si bien varios factores son capaces de ejercer efectos so interior de la plaqueta.
bre el desarrollo y la maduración de los precursores En su interior se distinguen varios tipos de granulos que
plaquet arios medulares, el únic o con relevancia fisiológi alcanzan el exterior fusionándose a la membrana plasmática
ca es la trombopoyetina. Esta glucoproteína sintetizada o a cualquier porción del sistema canalicular. Existen cua
en el hígado influye sobre todos y cada uno de los pasos tro diferentes tipos de granulos plaquetarios: granulos a,
madurativos medulares, desde la meg-BFC y la meg-CFC, cuerpos densos, lisosomas y microperoxisomas.

60
 FÓRMULA PLAQUETARIA

Los granulos a son los más abundantes, cerca de 50 a 80 endotelial, VEGF, etc.), inhibidores de la fibrinólisis,
por cada plaqueta, y tienen un diámetro promedio de 200 inmunoglobulinas y otras.
nm. En su interior pueden distinguirse diferentes electro- Los cuerpos densos están presentes en núm ero de 3 a 8 en
densidades que corresponden a las diversas proteínas que cada plaqueta. Estos granulos electrodenso s de aproxima
contienen. De hecho, virtualmente todas las proteínas damente 20-30 nm de diámetro contienen calcio,
plasmáticas pued en estar en el interior de estos granulos. serotonina, AD P y ATP La liberación del conten ido de los
Las proteínas plaquetarias específicas constituyen u na se cuerpos densos por parte de las plaquetas activadas ejerce
rie de quemoquinas e incluyen al factor plaquetario 4 y a un efecto de retroalimentación positiva sobre la agrega
la familia de las (3-tromboglobulinas. Otras proteínas pre ción plaquetaria, ya que el ADP es un potente agonista
sentes en los granulos a son: fibrinógeno, factor de Von plaquetario y la seroto nina algo más débil.
Willebrand, fibronectina, trombospondina, factores de la En el interior plaquetario también pueden observarse
coagulación (factor V, proteína S, factor XI), factores de microtúbulos y microfilamentos que le otorgan motilidad a
crecimiento (PDGF, TGF-J3, factor de crecimiento la plaqueta, y un número variable de mitocondrias.

Citoplasma granuloso
Prolongaciones citoplasmáticas
con vesículas visiblemente
demarcadas
Vacuolas
periféricas
Trombocitos diferenciados

Trombocitos libres
Múltiples
núcleos

. <. Citoplasma azul pálido

Granulos
azurófilos i

• * •"
Prolongaciones

Pequeños
granulos
azules

Megacariocito maduro

Megacariocito maduro y liberación de plaquetas.

Trom bocitos patológicos - Mielofibrosis le ucémica

Trombocitos patológicos.

61
 FÓRMULA PLAQUETARIA

F R O T I S D E S A N G R E P E R IF É R IC A : P L A Q U E T A S

Las plaquetas son los elementos particulados más peque presenta granulaciones rojo-violáceas (azurófilas) y su ta
ños de la sangre, carecen de núcleo y su vida media es mañ o es mayor al anterior. Generalmen te, se ubic an en la
muy corta, sin embargo, su indispensable participación en cercanía de los capilares sanguíneos y extienden prolonga
el mantenimiento de la hemostasia demuestra que para ciones citoplasmáticas penetr ando en el lum en de aqué
ser importante no es necesario contar con un gran tam año. llos. De esta manera se generan las PLAQUETAS, por
desprendimiento de pequeñas porciones de las prolonga
GENERACIÓN DE LA SERIE PLAQUETARIA
Los progenitores de las plaquetas, derivados de las células
germinales de la médula ósea, realizan su proceso de creci-
miento y diferenciación pasando por estadios reconocibles
en la visualización con microscopía óptica de extendidos
medulares. El promegacarioblasto, primera célula pre
cursora distinguible, presenta un solo núcleo, de aspecto
pseudo linfoide y para su identificación es necesaria la
reacción de reconocimiento con marcadores moleculares
o enzimáticos específicos. El megac ariob lasto, el siguien

ciones megacariocíticas dent ro del lume n de los capilares

sanguíneos presentes en la médula ósea, de donde acce
den al torrente sanguíneo.
PLAQUETAS: ASPECTO NORMAL
Las tinciones más ampliamente difundidas para visualizar
extendidos de sangre periférica o de médula ósea son las
de Wright y la de May-Grünwald-Giemsa, ambas están
compuestas por azul de metileno, eosina y azur de metileno.
El azul de metileno es un compo nente alcalino que impar
te precursor, tiene un tamaño de entre 6 y 24 ¿¿m, el cito te una coloración azul-violácea a los componentes ácidos
plasma se colorea de azul oscuro, sin granulos y es frecuen celulares; la eosina otorga coloración rojo-anaran jada y el
te la presencia de prolongaciones pseudopódicas. El nú azur de metileno rojo-violácea, siendo ambos componen
cleo es único, de forma elíptica o con dos lóbulos y de gran tes ácidos que por lo tanto colorean estructuras básicas.
tamaño, la cromatina es laxa y se distinguen varios nucléolos. Estas coloraciones reciben el nombre de "panópticas", ya
Por granulogénesis citoplasmática se transforma en que colorean tanto los componentes ácidos como básicos
prom egac arioc ito, cuyo ta maño oscila entre los 30 y 50 de la célula. Ot ras tinciones útiles en la visualización pla
 jum y presenta numerosas prolongaciones citoplasmáticas; quetaria en extendidos de sangre son las reacciones del
el núcleo posee varios lóbulos, la cromatina es más com ácido peryódico de Schiff (PAS) que revela los granulos
pacta que en los anteriores estadios y no se distinguen de glucógeno otorgándoles coloración borgoña y la reac
nucléolos. El citoplasma aparece en mayor proporción co ción esterasa no específica que produce una coloración
lor azul oscuro con regiones limitadas de coloración rojo que varía entre naranja y marrón.
violácea.
Las plaquetas son los elementos de sangre periférica de
Los megacariocitos, el siguiente eslabón, constituyen del menor tamaño, pueden variar entre 1 y 4 /xm y están
0,1 al 0,5% de las células nucleadas medulares. Su tamaño desprovistas de núcleo , por lo que no son células verdad e
puede llegar a 100 /xm, y su núcleo es multilobulado y ras, sino fragmentos citoplasmáticos provenientes de
POLIP LOIDE (hasta 16n). Es posible distinguir dos tipos megacariocitos. Son visibles en los extendidos de sangre
de megacariocitos. En el megacariocito granular el cito periférica coloreados con las tinciones antes men cionad as
plasma es de coloración rosada y presenta gran núm ero de (Wright o May-Grünwald-Giemsa) en general con forma
granulos de color azul oscuro, su tamaño puede llegar a los discoide, pero ésta se modifica con facilidad debido a la
55 {¿m. El megacariocito maduro, liberador de plaquetas, manipulación que lleva el proceso de extendido, pudien-

62
 FÓRMULA PIAQUETARIA

do aparecer con forma redondeada y emitie ndo prolonga es inferior a 130 103 /}Xl, por debajo de 20 103 /|il se produce
ciones delgadas. Al microscopio óptico pu eden distinguir sangrado espontá neo. Las causas de este desorden pueden
se dos zonas: una central llamada cromómero, con fina deberse a: disminución de la producción o de la vida me
granulación rojo-purpúrea donde se agrupan las organelas, dia de estos elementos, atrapamiento (como en varios ca
y una externa llamada hialómero, en general incolora o sos de esplecnomegalia) o después de transfusiones de san
ligeramente azulada. gre. Pseudo trombocitopenia se produce en algunos ca
Los valores normales de plaquetas estimados a partir del ex sos en donde la sangre del paciente se aglutina a pesar de
tendido de sangre se enc uen tra n entre 130 a 360 x lOVjLll, estar anticoagulada con EDTA . En esta situación se pro
mientras que en el caso de contadores automáticos duce un falso recuento por debajo de los valores normales
hematológicos o recuento en cámara los valores obte en los analizadores automáticos y debe determinarse el
nidos son mayores por características propias de estos mé núme ro real de plaquetas a partir del extendido de sangre.
todos. Si el extendido se preparó a partir de sangre no Una manera de evitar la agregación es utilizar otro
anticoagulad a, las plaquetas se agregan dando la impre anticoagulante o realizar el recuento a partir de sangre
sión de un recu ento por debajo de los valores normales. capilar.
En el microscopio óptico, con objetivos de bajo aumento Existen alteraciones de tamañ o de las plaquetas, cuan do
(10 X o 40 X) se comp rueba la color ación y distribución se encuentran elementos de este origen con diámetro
adecuada de estos elementos sobre el extendido. Luego mayor de 5 ¡j,m. Estas son llamadas plaquetas gigantes,
con objetivo de inmersión (100 X) se estima el númer o de tienen forma redondeada, poseen una fina granulación de
plaquetas en varios campos sucesivos debiéndose encon color azul a violeta en su interior y los bordes no se visualizan
trar de 5 a 15 plaquet as por campo o 1 plaquet a cada 10 a en forma definida. Normalmente no son detectadas por
20 glóbulos rojos. Las alteraciones de recuento por debajo
los analizadores automáticos, dando lugar a una reduc
de este rango son llamadas trombocitopenias y por enci
ción en el recuento con respecto a los valores normales. La
ma trombocitosis.
presencia de estas formas se debe usualmente al incre
mento de cariocitopoyesis a partir de los megacariocitos
ANOMALÍAS PLAQUETARIAS medulares y puede ocurrir debido al aumen to del consu
La alteración en núm ero de plaquet as por encima de los mo de plaquetas en enfermedades como la trombocitopenia
valores normales se denomina trombocitosis. En estos casos inmunitaria o por el increm ento de la producción a nivel
es poco común que los valores excedan los 1000 103 /j-ll, si medular en la trombocitemia esencial. También se encu en
no se encue ntran presentes otros factores de riesgo es rara tran junto con neutrófilos con granulación basofílica en
pacientes con anomal ía de May-Hegglin y en el síndrome
de Bernard-Soulier. Cuando nos encontramos con
plaquetas que difieren en tamaño nos encontramos frente
a una modificación cualitativa y debe consid erarse altera
do cualquier elem ento cuyo diámetro exceda los 4 /xm, las
causas se deben al incremento de la generación a nivel
médula ósea y esta modificación puede deberse al mismo
origen de los casos comentados para las plaquetas gigantes.
En extendidos de sangre es posible encontrar remanentes
de megacariocitos, éstos se distinguen por su forma re
dondeada, granulación gruesa de color violeta a azul oscu
ro debido a la presencia de cromatina, pero carentes de
Trombocitos
núcleo y citoplasma residual escaso con las tinciones
panópticas habituales.

la derivación hacia una trombosis. Valores aún más altos REFERENCIAS:

que los mencionados anteriormente (por encima de 3000 Wintrobe's Clinical Hematology , 1999. Vol. 1. 10 th. Edition. Lee G. R.,
FoersterJ., LukensJ., Paraskevas E, Cre er J. E, RodgersG. M. Williams & Wilkins
lQVpl) se pueden encontrar en desórdenes de tipo Eds, West Camden St., Baltimore, Maryland.
mieloproliferativo, con a umento s persistentes del núme ro Diagnóstico Hematológico. Laboratorio y Clínica, 1972. Tomo 1. Ciscar F. y
de plaquetas, y pueden estar asociados con complicacio Farreras. De. Jims, Barcelona.
nes trombóticas y/o sangrado. La trom bocit open ia se en Hematología Clínica, 1979. Vol. 1. Wintrobe M. M., Lee G. R., Bithell T. C,
cuentra presente en casos donde el recuento de plaquetas Boggs D. R-, Athes J. W, FoersterJ. Editorial Interm édica, Bs. As.

63
 BlOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO
HEMATOLÓGICO

El laboratorio supone para el operador una serie de riesgos ridas) en la piel que muchas veces pueden no ser evi
que pueden reducirse con la adopción de medidas de pre dentes. El uso de guantes puede reducir este riesgo, así
vención simples y eficaces. como también el empleo de anteojos y cubrebocas, pues
Los riesgos pueden ser t anto de naturaleza química c omo to que aerosoles o salpicaduras constituyen otra forma
biológica, y es importante en primer lugar enumerarlos par a de tom ar contact o con fluidos biológicos potencialme n-
entender cómo protegerse. te peligrosos.
La sangre como tal y su manejo debe imponer respeto, En el manejo de guantes es importante recordar que si
puesto que en una muestra pueden hallarse cantidades éstos toman con tacto con sangre pueden resultar la fuente
suficientes de agentes patógenos como para resultar fuente de contaminación de otras superficies, por lo que su re
de u na infección; la vía de ingreso más co mún para estos cambio oportuno también debe ser considerado a la hora
patógenos son pequeñas soluciones de continuidad (he de establecer las recomendaciones de uso.

64
MÓDULO

65
66
 INTERPRETACIÓN DE HISTOGRAMAS

2.1 INTRODUCCIÓN
La interpretación de histogramas y escatergramas es un su utilidad como criterio importante de decisión para, al
tema que se vuelve cada vez más importante en el argot de efectuar la valoración del resultado de una citometría
la hematología actual, debido principalmente a la hemática, poder utilizarlos como apoyo al decidir qué mues
proliferación de instrumentos automatizados que cada tras requieren una valoración microscópica más a fondo
vez más participan de manera rutinaria y eficientemente para emitir un resultado con validez diagnóstica completa.
en las áreas de Hematología de un creciente número de Con el presente módulo pretendemos dar a conocer
laboratorios a nivel mundial. cómo se lleva a cabo el proceso de generaci ón de histo
No obstante, aún es frecuente encontrar, sobre todo en los gramas y escatergramas en los diferentes instrumentos
laboratorios clínicos pequeños , que existe cierto grado de Cell Dyn, efectuando una revisión de las diferentes
desconocimiento t anto de las ventajas como del alcance y tecnologías utilizadas para obtenerlos, así como expo
limitaciones diagnósticas que pueden alcanzar, así como ner qué información útil se puede extraer de ellos.

2.2 TECNOLOGÍAS APLICADAS A LA GENERACIÓN DE

HISTOGRAMAS Y ESCATERGRAMAS
Actualmente existen en el mercado diferentes asocia • Deter minac ión de hemog lobina med iante
ciones de tecnología, aplicadas en diversos instrumentos cianometahemoglobina.
hematológicos con diferentes grados de automatización. • Fórmula blanca con diferencial de 5 partes por tec
En esta publicación nos referiremos a las tecnologías que nología MAPSS.
son aplicadas en los instrumentos de hematología Cell
Dyn. Para ello realizaremos una breve enume ració n de INSTRUMENTO CELL DYN 3200
las tecnologías presentes en cada modelo de nuestros ins • Determinación óptica automatizada de la cuenta y
trume ntos de hematología, y a continuación se hará una parámetros eritrocitarios.
descripción de los fundamentos, alcances y limitaciones
• Determinación óptica automatizada de la cuenta y
de las principales de ellas.
parámetros plaquetarios.
INSTRUMENTO CELL DYN 1200 • Fórmula blanca con diferencial de 5 partes por tec
nología MAPSS (WOC).
• Impedancia enfocada por flujo hidrodinámico para
con teo y clasificación de eritrocitos y plaquet as. • Conteo óptico de núcleos (NOC).
• Im pedancia enfocada por flujo para cont eo y obten • Determ inación de hemoglobina libre de cianuro .
ción de leucocitos con diferencial de 3 partes. • Determinaci ón óptica de reticulocitos.
• Determinación de hemoglobina con metodología li INSTRUMENTOS CELL DYN 3500 Y  3700
bre de cianuro.
• Impedan cia eléctrica para conte o y clasificación de
INSTRUMENTOS CELL DYN 1400,1600 Y  1700 eritrocitos y plaquetas.
• Impeda ncia eléctrica para conte o y clasificación de • Impedancia eléctrica para conteo de leucocitos
eritrocitos y plaquetas. (WIC).
• Impedancia eléctrica para conteo y clasificación de • Fórmula blanca con diferencial de 5 partes por tecn o
leucocitos con diferencial de 3 partes. logía MAPSS (WOC).
• Det erm ina ció n de hemog lobi na medi ante • Determinac ión de hemoglobina libre de cianuro .
cianometahemoglobina. • Determ inación óptica de reticulocitos.
INSTRUMENTO CELL DYN 3000 INSTRUMENTO CELL DYN 4000
• Imp edanci a eléctrica para conteo y clasificación de • Impedancia enfocada por flujo hidrodinámico para
eritrocitos y plaquetas. cont eo y clasificación de eritrocitos y pl aquetas.

67
 INTERPRETACIÓN DE HISTOGRAMAS

• Determinac ión óptica automatizada de la cuenta y • Determinación de hemoglobina libre de cianuro.

parámetros eritrocitarios. • Determinación óptica de reticulocitos en línea.
• Determinac ión óptica automatizada de la cuent a y
parámetros plaquetarios. Una vez revisadas las tecnologías aplicadas en cada uno
• Determ inación inmunológica de plaquetas (CD-61). de nuestros ins trumen tos Cell Dyn realizaremos la revi
• Fórmula blanca con diferencial de 5 partes por tec sión de cada una de las tecnologías en ellos incluidas.
nología MAPSS (WOC). Sólo se revisará una vez cada una de ellas, no obstante el
• Cuantificació n fluorométrica de subpoblaciones fundamento es el mismo en todos los instrumentos en
HnfocitariasCD4/CD8. que es aplicada.

2.3 IMPEDANCIA ELÉCTRICA PARA CONTEO DE

ERITROCITOS Y PLAQUETAS
La generación de estos histogramas se basa en el princi Células grandes
pio de la impedancia eléctrica que, aplicada al conteo
celular nos dice:
"Cuando una célula pasa a través de una apertura por la
cual fluye una corriente eléctrica continua y constante,
en un medio electrolítico que puede o no ser isotónico,
generará una variación en la velocidad de flujo de esta
corriente eléctrica (impedancia) que será directamente
proporcional al volumen celular e inversamente propor
cional al diámetro de la apertura". (Figura 1)
Basándonos en este principio y considerando que el vol
taje aplicado es constante y el diámetro de la apertura es
fijo, y mide 40/x para la cuantificación de eritrocitos y
plaquetas en nuestros instrume ntos Cell Dyn, podemos
considerar que la amplitud de la variación de la impe
dancia eléctrica será únicamente función del volumen
celular detectado.
Durante la fase de conteo con esta metodología de impe
dancia cada partícula o célula que pase a través de la
apertura generará un impulso eléctrico. La amplitud de
este impulso eléctrico corresponderá de manera propor
cional al tamañ o de la partícula (volumen celular).
Cada impulso proveniente de eritrocitos y plaquetas es
ordenado en base a su amplitud y colocado en un
histograma con 256 canales o diferentes tamaños de im
pulso.
La fase de conteo en esta tecnología se halla delimitada
por las señales de inicio y finalización de conteo gene
radas por el "Tubo de medición volumétrica". Cabe se
ñalar que el método de conteo volumétrico es el reco
mendado por la asociación internacional para la
estandarización en hematología (ICSH) y los tubos de
medición volumétrica son la aplicación tecnológica que
nos asegura el apego a esta metodología. (Ver figura 2)
Los datos acumulados en cada canal son normalizados
con finalidad de facilitar la impresión y visualización en
el eje Y. Los datos de amplit ud del impulso eléctrico son
referenciados al volumen celular en femtolitros y colo
cados en el eje X. Es impor tan te toma r en considera - Fig.l

68
 INTERPRETACIÓN DE HISTOGRAMAS

Detector ción que, debido a que se trata de datos normalizados,

de inicio
(inicio del el histograma NO va a reflejar directamente la cuenta
recuento)
Menisco celular y SÍ la distribución volumétrica de los eritrocitos
y plaquetas. Con esto, lo que deseamos explicar es que
un histograma de dos muestras con diferente número
de eritrocitos pero con la misma distribución volumé
trica pueden parecer idénticos. Otro detalle importante
Tiempo de es que el histograma de eritrocitos tiene una mínima
recuento
desviación hacia la izquierda, en cambio el histograma
/O- de plaquetas presenta una marcada desviación hacia la
izquierda. (Figura 2).
Detector de
parada Los impulsos eléctricos son clasificados por su amplitud
(fin del recuento) en plaquetas y eritrocit os y, colocados en sus histogramas
Fig. 2. Diagrama del tubo de medición volumétrica. correspondientes, cada canal o incremento de tama ño es
de 1 fl para el histograma de eritrocitos y de 0.137 fl en el
caso del histograma de plaquetas. Cada histograma tie
ne capacidad de visualizar 256 canales. Normalmente el
instrumento analiza la información y coloca el punto de
corte entre plaquetas y eritrocitos en la mejor posición
para separar adecuadamente ambas poblaciones. Gene
ralmente el límite inferior para las plaquetas es colocado
ent re los canales 1 y 3 fl para separar entr e plaquet as y
ruido electr ónico y entr e 15 y 35 fl para discriminar ent re
plaquetas y eritrocitos.
Cabe señalar que en el histograma de eritrocitos y
i i plaquet as es el únic o histograma en don de se puede apre
ciar la distribución volumétrica real entre todos los tipos
celulares presentes en la muestra incluyendo en algunas
Transductor. Tubo de medición volumétrica. patologías la visualización aun de linfocitos.

GENERACIÓN DE b IS roGRAM
10
(fí 9
o 8
 _J
- > 7
   P 6
   E
   D 5
O 4
UJ 3

Z) 2
1
PULSOS CR 84 85 86 87 88 89 90 9192 93
FEMTOLITROS (fl)

h-
DISTRIBUCIÓN DEL TAMAÑO
DE CÉLULAS ROJAS

100 200 0 50 100 150 200

TAMAÑO TAMAÑO

Fig. 3. Diagrama de generación del histograma de RBC.

 INTERPRETACIÓN DE HISTOGRAMAS

La dilución de eritrocitos contiene los tres tipos celulares. Por ello, el histograma de serie roja puede ser utilizado
para mostrar gráficamente las relaciones entre cada tipo celular.

PLA QU ETA S, localizadas en la región izquierda lejana.

MICROCITOS Y FRAGMENTOS C ELULA RES, localiz ados a la

izquierda de la población celular normal.

ERITROCITOS NORMALES Y RETICULOCITOS,

localizados entre la población normal y la macro citica.

MAC ROC ITO S, localizados a la derecha de la población celular

normal-por encima de los 150 (1.

RBC

 / LIN FOC ITO S, localizados en la región

 / comprendida entre 190 y 220 fl .

AGREGADOS CELULARES, localizados en la

región comprendida entre 150 y 180 fl.

Fig.4

Entre los parámet ros de la formula roja que se deri van de • PLTR  .' Este alerta es desplegado cuando el conteo
este histograma de eritrocitos se encuentran: plaquetario es inferior a 120  k/[Á y además el resultado
• El volumen corpuscular medio (MCV) que se obtiene del conteo inicial y del segundo conteo difieren entre sí
por medición directa del promedio aritmétic o del volu en un valor superior a los límites esperados, en cuyo
men de todos los eritrocitos incluidos en el muestreo. caso es necesario reanalizar la muestra y si el alerta
persiste realizar el conteo plaquetario en cámara de
• El ancho de distribución eritrocítica (RDW) es una me Newbauer.
dida matemática de la amplitud del histograma. Lo que a
nivel clínico significa un mayor o menor grado de • LR I .- Interferencia en la región baja por sus siglas en
"anisocitosis" en los eritrocitos de la muestra. inglés. Este alerta es mostra do a la derecha del resu ltado
del VPM cuando el histograma de plaquetas no tiene
Adicionalmente a estos parámetros derivados del una distribución normal o si el histograma no inicia en la
histograma es importante tomar en consideración que base del mismo en la zona limítrofe al límite inferior de 1-
los "alertas" relacionados a los resultados en muchos 3 fl del histograma. Entr e las causas biológicas que pue
casos son derivados del análisis de los datos contenidos den generar este alerta se encuentran: presencia de:
en los histogramas. Entr e estos alertas tenemos : microplaquetas, fragmentos celulares, crioglobulinas,
•  RBC MORPH.-   Este alerta aparece en los instru inclusiones eritrocitarias, hemolisis, etc. Este alerta tam
mento s Cell Dyn 3000, 3 500 y 3700, y es mostr ado a la bién puede ser generado por causas ajenas a la muestra
derec ha del resultad o del MCV, indica que uno o más de como podría ser la utilización de un reactivo contamina
los siguientes criterios se encuentran fuera de especi do o colocado erróneamente en el instrumento (como
ficaciones: podría ser la utilización por error del operador de un
• (MCV) <8 0 fl  o   (MCV) >   100 fl recipiente con desechos del instrumento en lugar de un
reactivo nuevo) , la presenc ia de ruido electróni co por
• (MCH) <2 5 pg o  (MCH) >34 pg carencia de una adecuada toma de tierra física en la línea
• (MCHC) <2 9  g/dl o  (MCHC) >37 g/dl eléctrica en que se está conectando el instrumento.
• (RDW) >  18.5% • U R I .- Interferencia en la región alta por sus siglas en
Sin embargo es sumamente importante que el personal inglés. Este alerta es mostra do a la derech a del VPM como
de laboratorio revise el frotis ante la presencia del alerta resultado de la presencia de impulsos eléctricos
con la finalidad de cuantificar las anomalías de serie roja anormalmente elevados en la zona del punto de corte
que pudieran estar presentes. superior del histograma de plaquetas (15-35 fl). La prin-

70
 INTERPRETACIÓN DE HISTOGRAMAS

ALARMA LRI EN EL HISTOGRAMA DE PLAQUETAS

PLT: 94K/|jl

PLT

La alarma LRI aparece acompañando a la cifra de plaquetas para indicar interferencias en la región baja (LRI); se debe
a la acumulación de datos en la zona de 2-3 fl. Se activa por una o varias de las siguientes causas:

Microplaquetas Inclusiones eritrocitarias

Fragmentos celulares Hemolisis
Crioglobulinas Residuos en el orificio del transductor

cipal causa de la aparición de este alerta es la presencia resultado es imprescindible la verificación del conteo
de eritrocitos microcíticos que invaden el área corres plaquet ario por otros métodos.
pondie nte al histograma de plaquetas, aunque ent re otras Es sumamente important e, al presentarse un alerta en el
causas tenemos la presencia de: macroplaquetas, agrega resultado de las plaquetas, valorar la causa que lo está
dos plaquetarios, fragmentos de eritrocitos, eritrocitos en generando y de considerarlo necesario es muy conve
fermos, y satelitosis plaquet aria. nie nte el reanálisis de la muestras ; en caso de persistir el
• LURI.- Este alerta es el resultado de la combinación alerta proceder al conteo plaquetario en cámara de
de los 2 tipos de alertas anteriores (LRI y URI) y como Newbauer.

ALARMA URI EN EL HISTOGRAMA DE PLAQUETAS

PLT: 296k/ul

PLT

La alarma URI aparece acompañando a la cifra de plaquetas para indicar interferencias en la región alta (URI); se debe
a la acumulación de plaquetas y eritrocitos entre los 20 y 40 fl. Esta alarma se activa por una o varias de las siguientes causas:

Macroplaquetas Eritrocitos fragmentados

Eritrocitos microcíticos Satelitosis plaquetaria
Agregados plaquetarios

71
 INTERPRETACIÓN DE HISTOGRAMAS

2.4 IMPEDANCIA ELÉCTRICA

APLICADA AL CONTEO Y CLASIFICACIÓN
DE CÉLULAS BLANCAS CON REPORTE
DE LA DIFERENCIAL DE 3 PARTES

La medición del volumen de las células blancas median la ventaja adicional de liberar la hemoglobina para su
te impedancia es posible gracias a la acción del reactivo posterior medición colorimétrica. En lo referente a las
Usante, el cual no realiza una lisis indiscriminada de las células blancas, el Usante va a oc asionar la salida de agua
membranas celulares puesto que sólo va a ocasionar la del citoplasma ocasionando que la memb rana se adhiera
lisis de las membranas eritrocitarias selectivamente con al núcl eo de la célula. Esta salida del agua citoplasmática
ocasiona que la distribución del tamaño celular no sea
igual a la percepción microscópica del tamaño celular,
Tamaño relativo de los leucocitos que comúnmente tenemos. (Ver figura 5).
Al microscopio Luego de la acción del hemolizante Una vez que se modificó por acción del Usante el tama
ño de las células blanca s, éstas pa san a travé s del orifi
Linfocito cio de apertura de 7(V generando impulsos eléctricos
de igual manera como ocurre durante el conteo de
eritrocitos y plaquetas, sólo que en este caso la variabi
lidad entre el ta mañ o de los impulsos eléctricos entre sí
es muy alta y en general hay 3 tipos de células en las
que los tamaños de impulso generados por las células
modificadas por el Usante se sobreponen. Éstas son:
--ryo monocitos, eosinófilos y basófilos. De ahí que actual
men te la tecnología de impedancia (sin combinarla con
alguna otra tecnología) esté limitada a reportar como
máximo una diferencial de 3 partes (para que tenga
* * correlación con la realidad).
Monocito Tal como se puede apreciar en la figura 6, al graficar en
un histograma de 256 diferentes canales los impulsos
eléctricos generados por leucocitos mediante impedan
cia se obtienen 3 poblaciones: linfocitos, región media
(monocitos, eosinófilos y basófilos) y granulocitos
(neutrófilos).
Adicionalmente las plaquetas no van a generar interfe
rencia en muestras normales debido a que por su peque
ño tamaño y por la acción del Usante sobre ellas, el im
.filo pulso eléctrico que generan se encuentra a la izquierda
de 35 fl, que es el pun to en que comienza el histograma
de serie blanca.

Neutrófilo

150 200 250

Fig.5 Fig.

72
 INTERPRETACIÓN DE HISTOGRAMAS

Existen diferentes regiones o puntos de control dentro GRAN R4 o RM .- Se activa cuando existe un núme
de las 3 poblaciones de células blancas incluidas en el ro elevado de células a la izquierda de los 350 fl y está
histograma de tal manera que cuando no se cumplen los relacionada con granulocitosis o neutropeni a princi
criterios de nor malidad de este histograma se muest ran palmente.
6 diferentes alarmas R o Regionales ( RO, Rl, R2, R3,
La parte más importante de estos alertas R o regionales
R4, y RM), estos alertas se muestran a la derecha del
está en que los instrumentos nos están indicando que no
resultado de la población presuntamente afectada por
la misma." basta con el reporte directo de la muestra, sino que inva
riablemente ante la presencia de un alerta R se debe
Región LIM (35 a 98 fl). Las células localizadas en esta realizar la observación microscópica de la muestra para la
área son en su mayoría linfocitos aunque también pue cuantificación de la diferencial antes de reportar el re
den encontrarse eritrocitos nucleados, macroplaquetas, sultado final.
agregados plaquetarios, eritrocitos con Usado incomple
to, linfocitos aripicos o blastos. EFECTOS QUE PUEDEN INFLUENCIAR
LIM RO o RM .- Esta alarma se despliega cuando el LA OBTENCIÓN DE RESULTADOS MEDIANTE
número de células que aparecen a la izquierda de IMPEDANCIA
los 30 fl supera los criterios considerad os como no rma Volumen del reactivo hemolizante. Cualquier varia
les. Y puede ser originada por: agregados plaque ción en el tipo, volumen o concentración del reactivo
tarios, macroplaquetas, eritroblastos, eritrocitos re hemolizante utilizado, así como el aumento en el tiempo
sistentes al Usado y crioglob ulinas. de lisis, puede afectar los resultados del diferencial
LIM Rl o RM.- Esta alarma se activa cuando existen volumétrico de 3 p artes. Los instrumentos Cell Dyn 1400,
células a la izquierda o a la derecha y/o a la derecha 1600 y 1700 a dicio nan 1.2 mi de Usante a cada mu estra,
de los 35 fl en un número superior a los criterios de el tiempo de este proceso está optimizado para asegurar
normalidad; se puede deber a la presencia de una adición lenta del mismo. Cua ndo los resultados a lo
crioglobulinas, linfocitosis o linfopenia. largo de una rutina de trabajo muestran una frecuencia
de alertas "R" superior a la habitual se debe verificar la
LIM R2 o RM .- Se activa cuando las células a la
calibración del volumen adicionado de hemolizant e.
izquierda de los 98 fl exceden los criterios normales y
puede deberse a la presencia de: linfocitos atípicos, Influencia del EDTA tras la obtención de la
linfocitosis, linfopenia,basofilia (mayor al5%), blastos muestra.  Los resultados no muestran diferencias signi
o células plasmáticas. ficativas entre la utilización del EDTA (K3 líquido) o
(Na2 Polvo), analizadas entre 25 minutos y 4 horas de
Región MID (98 a 135 fl). Las células localizadas en esta
haber sido obten idas. Sin embargo, los datos evaluados
área son generalmente eosinófilos, basófilos y monocitos.
muestran que la acción hemolítica en algunas muestras
Aunque también pueden localizarse agranulocitos,
puede estar afectada por el tiempo de exposición al
blastos, y plasmocitos.
ED TA líquido, la acció n hemolít ica se realiza dire cta
MID R2 o RM .- Esta alarma se activa cuando existe mente sobre la membrana celular, de forma que cual
un número elevado de células a la derecha de los 98 quier modificación de la misma influye sobre los resul
fl y puede generarse debido a: basofilia (> 5% ), blastos, tados. (Ver figura 7) •
eosinofilia, células plasmáticas.
El EDTA "puede" generar cambios transitorios en un
MID R3 o RM .- Se activa cuando el número de periodo que oscila entre los 5 y 25 minutos tras la obten
células que se localizan a la derecha de los 135 fl es ción de la muestr a. El cambio consiste gener almen te en
más elevado que el criterio de normalidad. Este aler una compresión más rápida de la membrana por acción
ta se puede generar por: presencia de neutrófilos del Usante (histograma desplazado hacia la izquierda)
en banda (>10%), blastos, células plasmáticas, con la falsa activación de alertas "R" pero generalmente
eosinofilia (>10%), basofilia, agregados plaque sin alteración del resultado numérico de la diferencial
tarios. volum étrica . Sin embarg o, los resultad os obte nido s tras
Región GR AN (135 a 345 fl). Las células localizadas en 25 mi nutos de espera desde la obte nción de la muestra,
esta región son generalmente granulocitos neutrófilos; ya no muestran este fenómeno transitorio y tienen una
sin embargo, en aproximad amente un 20% de las mues buena correlación con los frotis teñidos.
tras, algunos eosinófilos pueden localizarse en esta re Influencia de la temperatura de la   muestra. La
gión. temperatura de la muestra puede cambiar también el
GRAN R3 o RM .- Este alerta se activa cuando las efecto de la acción lítica sobre la membrana celular. Las
células que se ubican a la der echa de los 135 fl exce muestras refrigeradas que se utilizan antes de ser
den los criterios de normalidad, y puede generarse atemperadas muestran a menudo histogramas compri
como resultado de: presencia de eosinofilia (> 10%), midos hacia la izquierda en donde la región GRAN
granulocitos inmaduros, granulocitos en banda o ca invade parcialmente la región MID y LIM, activando
yados (> 10%), granulocitosis, neutropenia. un o o más alertas y con la posibilidad de afectar pote n-

73
 INTERPRETACIÓN DE HISTOGRAMAS

2.6 TECNOLOGÍA MAPSS (MULTLANGLE-POLARIZED-

SCATTER-SEPARATION)
CONCEPTOS CLAVE: El cuadro muestra cuáles son los cuatro detectores utili
• Los analizadores Cell Dyn de la serie 3000 emplean zados por el instrumento para captar las características
tanto la citometría de flujo como la impedancia eléc de cada célula individual presente en la alícuota de la
trica para generar los resultados de las células blan muestra analizada. En la siguiente figura se observa una
cas, sin embargo, sólo los datos provenientes del ilustración que representa una célula desviando la luz
hacia los cuatro detectores ópticos.
conteo óptico (WOC) se utilizan para la generación
del conteo diferencial.
• El patrón de desviación de la luz láser es utilizado 90°D 90°
para clasificar las células blancas basándose en su ta
maño, complejidad, lobularidad y granularidad, in
formación con la cual se genera la diferencial de cin
co partes.
L
• Tanto el conteo óptico de células blancas (WOC) w
 jo
como el conteo por impedancia (WIC) ocurren simul
táneamente y por lo general son prácticamente igua
les; si resultaran diferentes, es común que se deba a
•H, .
—
" " " É 0=
interferencias en cualquiera de los dos sistemas ya JHft v
sea WIC o WOC. El conocimiento de estos criterios 7°
de decisión utilizados por el instrumento permitirán
^ —
al profesional de la salud tomar la mejor determinación
en lo referente al resultado que deberá ser reportado.
Los dos componentes principales del conteo de la fór •
mula blanca celular son la cuenta de células blancas y Señales de los cuatro cipos de dispersión.
su clasificación, para obtener el conteo diferencial de
las subpoblaciones de las que consta la fórmula blanca.
Los instrumentos Cell Dyn de la serie 3000 utilizan tanto Las células son esferizadas por el reactivo envolvente a
la impedancia eléctrica descrita en el capítulo anterior fin de garantizar que el patrón de desviación de la luz
como la citometría de flujo. En este capítulo se descri sea homogéneo y no tenga variaciones debidas a la
ben los fundamentos de la citometría de flujo, y cómo la orientación con que la célula pasa a través del haz de
combinación de las ventajas y limitaciones de cada una luz láser.
de las dos técnicas posibilita a los instrumentos Cell Dyn Los componentes del sistema óptico incluidos en la figu
dar un resultado de WBC con los estándares más altos ra anterior son los siguientes:
de calidad.
-• Láser. Generado con helio-neón con X  632.8 nm
CITOMETRÍA DE FLUJO con intensidad de luz de 5 miliwatts y 80 [i de diáme
Para el desarrollo de esta técnica, una dilución que con tro con polaridad vertical.
tiene las células esferizadas es hidrodinámicamente en •  Espejos.  Se utilizan dos espejos para enfocar el
focada para pasar a través de un rayo láser perpendicu haz de luz sobre la celda de flujo; el polvo acumulado
lar a la columna de células, a velocidad controlada. El sobre ellos puede incrementar la dispersión de las
rayo láser sufrirá una desviación de la luz en todas direc poblaciones celulares e incrementar el número de
ciones al incidir sobre cada una de las células. Esta luz alertas relacionados con los resultados. Estos espejos
desviada es colectada por cuatro diferentes detectores se deben limpiar con aire comprimido sólo por el per
acomodados para detectar la luz desviada en cuatro dife sonal de servicio técnico y después, en caso de ser
rentes ángulos. Éstos son: necesario, se podrán limpiar con papel grado óptico.

Detector 0o 10° 90° 90° Despolarizado

Característica celular Tamaño Complejidad Lobularidad Granularidad

relacionada celular celular nuclear de eosinófilos

Tip o y dirección de la luz Luz desviada Luz desviada Luz desviada de 70° Luz desvia da 90°
colectada por cada detector de 1° a 3 o de 7° a 10° a 110° con polaridad vertical despolarizada

76
 INTERPRETACIÓN DE HISTOGRAMAS

Espejo ^^
Láser de helio-neón (632,8 nm) con po larización v ertical

Fotomultiplicador de
dispersión de la luz
despolarizada a 90° ( PMT J
canal 4

Forma de
láser despol. escáter
90°escáter
Polarizador horizontal

Fotomultiplicador
de dispersión de
la luz a 90°
canal 3

Lente cilindrica
Fotodiodo
detector de
dispersión
de la luz a 10"

Espejo

Reactivo envolvente

Flujo de células

Celda de flujo
leucocitario

Diagrama del sistema óptico de los instrumentos Cell Dyn de la serie 3000.

Evitar que se acumule polvo en estos lentes es com sea seleccionada sólo la región de más intensidad,
promiso del usuario del instrumento, quien deberá valga la redundancia, antes de ser enfocada en la
realizar quincenalmente la limpieza de los filtros de celda de flujo.
aire ubicados en la parte posterior del instrumento. • Celda de flujo. Es el sitio utilizado para enfocar
• Lentes cilindricos. Tienen la función de cambiar hidrodinámicamente una columna de células a tra
la forma del haz láser, de cilindrica a oval, y también vés del haz de luz láser, al tiempo que permite la ade
la función de «comprimir» la luz a fin de reducir su cuada dispersión de la luz, carente de reflejos, para
diámetro y a la vez, intensificarla. poder colectar con exactitud la luz desviada por cada
• Ranura de 125 ¡x.  Es el último paso en el acon una de las células.
dicionamiento del láser para garantizar que su for • Barra de oscuración. Esta barra previene que el
ma sea cuadrada, homogénea en intensidad y que haz del láser incida directamente en el detector ópti-

77
 INTERPRETACIÓN DE HISTOGRAMAS

b. Escatergrama b. Escatergrama

.¿afitih
^Jfcjlni

Complejidad 10° Complejidad 10°

El instrumento Cell Dyn aplica un algoritmo de varios PASO 3: SEPARACIÓN DE LAS CÉLULAS
pasos para lograr la clasificación de las células blancas en POLINUCLEARES EN NEUTRÓFILOS Y
una diferencial de cinco partes con alertas poblacionales. EOSINÓFILOS
En el primer paso, ilustrado arriba, se colectan los valores
de intensidad para cada una de las 10,000 células inclui
das en la diferencial y se almacenan en una tabla como la a. Análisis de datos en Modo de lista
que se muestra en la figura anterior.
TAMAÑO COMPLEJIDAD LOBULARIDAD GRANULARIDAD CLASIFICACIÓN
En la gráfica generada, corresponde considerar pares
Cél. 0° 10° 90° 90c Despolarizado 1° 2°
de coordenadas cartesianas a los valores que provie
nen de dos detectores. Diferente es en este caso la I 165 162 116 32
2 60 64 15 6 Mono
gráfica, mejor llamada «escatergrama», que represen 3 140 79 21 9 Mono
ta el tamaño celular contra la complejidad celular de 4 148 182 104 118 Eos
5 90 110 28 8 Mono
cada una de las 10,000 células, y en donde cada punto 6 36 37 8 4 Mono
representa a una célula.
PASO 2: SEPARACIÓN DE MONONUCLEARES Y
POLINUCLEARES
Utilizando el escatergrama generado con los datos de
lobularidad contra complejidad se observa la aparición
de dos poblaciones, una de ellas con mayor complejidad
celular y mayor lobularidad, que corresponde a las célu
las polinucleares (amarillo) y una población de células
poco complejas estructuralmente y con bajo índice de
lobularidad, que son las mononucleares (azul).

a. Análisis de datos en Modo de lista

TAMAÑO COMPLEJIDAD LOBUIARDAD GRANULARIDAD CLASIFICACIÓN

Cél. 10° 90° 90° Despolarizado 1°

165 162 116 32

64 15 6 Mono
140 79 21 9 Mono
182 104 118
110 28 8 Mono
37 8 4 Mono
Lobularidad 90°
 INTERPRETACIÓN DE HISTOGRAMAS

En este tercer paso se considera sólo a las células que en - Monocitos en color púrpura.
la primera clasificación resultaron ser polinucleares y se - Basófilos en color negro (en impresión, y blanco en el
colocan en el escatergrama: Granularidad vs. Lobularidad, monitor del instrumento).
de tal manera que se observan dos poblaciones: una
igualmente dispersa en el eje de lobularidad pero una de Los puntos sobre las líneas continuas representan a las
ellas, los eosinófilos, presenta altos valores en el eje células incluidas en el conteo celular de WBC total; los
granularidad. puntos debajo de las mismas líneas continuas represen
tan a eventos celulares que no provienen de WBC.
Por medio de esta gráfica podemos separar los neutrófilos
Las líneas punteadas representan la mejor separación
(amarillo) de los eosinófilos (verde); la línea diagonal
entre las poblaciones de células blancas. N ueva ment e
represen ta la mejor separación entr e las dos poblaciones.
los colores representan a cada una de las poblaciones
Se puede observar que en la tabla se van acumulando celulares.
cada una de las clasificaciones celulares realizadas.
PASO 5: COMBINACIÓN DE TODAS LAS
PASO 4: SEPARACIÓN DE MONONUCLEARES EN
CLASIFICACIONES
LINFOCITOS, MONOCITOS, BASÓFILOS Y
NWBC a. Análisis de dat os en Modo de lista
TA VI W COMPLtjIDAD LOBULARIDAD GRANULARIDAD CLASIFK AaÓN
a. Análisis de datos en Modo de lista
Cél. 0° 10° 90° 90° Despolarizado  jo 2° 3°
T A M A Ñ O C O M P LE JI D A D L O B U LA R I DA D G R A N U L A R ID A D C L A S I F IC A C I Ó N
1 165 162 116 32 Neut -
Poly
Cél. 0° 10° 90° 90° Despolarizadc 1° 2° 2 60 64 15 6 Mono -  Lymph
3 140 79 21 9 Mono  - Mono
1 165 162 116 32 Poly 4 148 182 104 118 Poly Eos
2 60 64 15 6 Mono Limp 5 90 110 28 8 Mono - Baso
3 140 79 21 9 Mono Mono 6 36 37 8 4 Mono Noise/NRBC
4 148 182 104 lis Poly
5 90 110 28 8 Mono Baso
6 36 37 8 4 Mono Noise
 /N RB C b. Escatergrama

b. Escatergrama

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Complejidad 10°

Complejidad 10°
Una vez realizadas todas las clasificaciones, no importa
cuál escatergrama veamos en todos ellos, se puede apr e
ciar -por la distribución de colores- dónde se enc uent ra
En el paso 4 se considera en el escatergrama Tamaño
cada población, sin embargo el escatergrama que nos da
contra Complejidad, teniendo en cuenta únicamente a
mayor información es el generado por el Tamaño y la
las células que en la primera clasificación fueron toma
Complejidad. Cabe señalar que una célula será clasifica
das como mononucleares. En muestras normales apare
da en cualquier escatergrama dentro de la misma pobla
cen cuatro poblaciones bien diferenciadas:
ción celular independientemente de la posición que ocu
- NWBC/NRBC en color rojo (células no blancas o pe. Es por ello que se permi te la sobreposición de células
eritroblastos). diferentes en algunas posiciones comunes dentro del
- Linfocitos en color azul. escatergrama, no quedando células sin identificar.
 INTERPRETACIÓN DE HISTOGRAMAS

La siguiente serie de 3 imágenes ilustra, tal como se ve n en

el monitor del instrumento, los 4 pasos principales en la
obten ción de la diferencial y adicionalm ente éstos son los
principales escatergramas de la serie blanca.

Complejidad -10°
•
Identificación como mononucleares y polimorfonucleares.
La última imagen de la serie anterior es el principal
escaterg rama de la serie bla nca . En base a ella se gene
ran los principales alertas relacionados co n la presencia
de poblaciones anormales en la diferencial, como son:
bandas, granulocitos inmaduros , blastos, var lymph, etc.
como se verá más adelante.
Existen en el instrumento Cell Dyn 3500 y 3700, dos
tipos generales de alertas relacionados con los resulta
dos: los alertas de presencia de posibles interfer encias
en la obtención de los resultados y alertas relacionados
con la presencia de poblaciones celulares normalmente
no encontradas en muestras normales.
Como ejemplos de alertas de posibles interferencias te
nemos:
• Los instrumentos Cell Dyn 3500 y 3700 realizan de
Lobularidad -90° manera rutinaria 2 conteos de células blancas. Conteo
A
de células blancas por impedancia   (WIC)  y conteo
Identificación como neutrófilos y eosinófilos.
óptico de células blancas (WOC), normalmente
ambas cuen tas son muy similares de tal manera qu e
cuando ambos conteos se encuen tran de ntro de las
especificaciones, el resultado reportado rutinariamente
es el WOC. Sin embargo, si la diferencia entr e ambos
excede los criterios establecidos, se repo rtará el resul
tado de W B C seguido de   (WIC)  o (WOC) para in
dicar cuál es el result ado que fue repor tado . Un ter
cer tipo de alerta depende de estos resultados  KWOC
que se observa cua ndo el nú mero de cont eos por se
gundo en la cuenta  W O C decrece durante el perio
do de conte o, y en tal caso el instrume nto indica que
se aplicó la correc ción conoc ida como   "WOC
Cinético" para informar la corrección realizada en el
instrumento para el valor reportado de WOC repor
tado como WBC.
Complejidad -10°
Como ejemplos de alertas de la presencia de poblacio
Identificación de los mononuclear es. nes anormales en la muestra tenemos:

82
 INTERPRETACIÓN DE HISTOGRAMAS

• VAR LYM. Este alerta es desplegado cuando en el SUSPECT

escatergrama Tamaño contra Complejidad (0o-10°) WBC 11.7 K/uL
4.77 40.6 %N
(WOC)
el coeficiente de variación de la población de linfocitos LYM 4.51 38.4 %L
MONO 1.42 12.1 %M NRBC
excede los criterios de normalidad o cuando esta po EOS .993 8.46 %E
blación se encuentra desplazada de su ubicación nor BASO .056 .474 %B DFLT(NLMEB)

mal dentro del escatergrama. El recuadro en la si 2.67 M/uL

RBC
guiente ilustración nos muestra la posición en que HGB 8.30 g/dL
debe caer la población de linfocitos para generar este HCT
MCV
23.2
86.9 fL % RBC MORPH
alerta, notar también en la figura la ubicación respec MCH
MCHC
31.1 pg
35.7 g/dL
Complejidad
to a los resultados en donde será ubicado el alerta. RDW 22-2
%

SUSPECT
WBC 22.2 K/uL (WIC) Alerta DFLT(LMB)
2.91 13.1 %N BAND
LYM 18.7 83.9 %L VAR LYM
MONO .143 .643 %M FWBC
EOS .118 .530 %E
BASO 326 1.78 %B
Sospecha de variantes
de linfocitos Linfocitos no rmales
Complejidad

• NRBC. Hay 2 tipos de alerta adicionales de este

tipo NRBC, o NW BC alertas que son desplegados
cuando una excesiva proporción del conteo WOC • Alerta IG. Este alerta se visualiza cuando el ins
cae por debajo del punto de corte ubicado debajo de trumento detecta la presencia de granulocitos
la población de linfocitos, tal como se muestra en la inmaduros; se visualizará cuando más del 3% de
siguiente ilustración. las células del conteo WOC es detectado en
esta región del escatergrama 0 o-10°. Ver figura
siguiente.
SUSPECT
WBC 13.9 K/uL WBC
4.64 33.3 %N
LYM 6J8 48.0 %L VAR LYM
MONO 1.54 11.0 %M NRBC/RRBC
EOS 10 7.27 %E
BASO .046 .328 %B DFLT(NLMEB)
Sospecha de
granulocitos inmaduros
Sospecha de
eritroblastos NRBC
Complejidad
Complejidad

SUSPECT
• Alerta DFLT(NLMEB). Este alerta aparece cuan WBC 7.80 K/uL
3.39 43.4 %N IG/BAND
do, debido a la ubicación de las poblaciones en el LYM .960 12.3 %L BLAST O)
escatergrama 0o-10° o en el de 90°-90°DER el instru MONO 2 39 307 %M 01
EOS .076 .980 %E T3.
mento no logra ubicar la mejor separación entre am BASO ,982 1Z6 %B O

bas al menos 2 poblaciones celulares. En caso de exis

tir esta condición (escatergrama a color siguiente), el
instrumento elige la ubicación de los puntos de corte
^¡jáÉpSSB
Odeg
to*
entre poblaciones preprogramados basándose en la ubi
cación de estos puntos de corte en muestras norma
les. Las letras incluidas dentro del paréntesis indican • Alerta Bands. Este alerta es desplegado cuando
la inicial del nombre de las poblaciones entre las cua más del 12.5% del total de la cuenta WOC cae
les el instrumento aplicó el punto de corte prede dentro de la región del escatergrama signado a esta
terminado (Neutrófilos, Linfocitos, Monocitos, población. Un detalle importante a considerar es que
Eosinófilos, Basófilos). Como se puede apreciar en el que este alerta esté indicado NO significa que el
las siguientes gráficas: % de células incluidas en esta población correspon-
 INTERPRETACIÓN DE HISTOGRAMAS

da al % de bandas en la muestra. Si por ejemplo se

Monoblasto
procesa una muestra con más de 8 a 12 horas de
haber sido obtenida, es muy probable que debido al
deterioro de las células en esta muestra la población
de neutrófilos se halle más dispersa y esta dispersión
sea suficiente para disparar el alerta aun cuando la
muestra no presente bandas.

Linfoblasto

SUSPECT
WBC 19.5 K/uL
16.8 86.0 %N BAND
LYM .833 4.27 %L VAR LYM
MONO 1.67 8.55 %M
EOS .023 .120 %h
BASO .202 1.03 %B

Complejidad

Eritroblasto
policromatófilo
• Alerta BLAST.   Es desplegado cuando en el
escatergrama 90°-0° la población incluida en el área Es sumamente importante considerar la posición rela
correspondiente a este alerta excede el 3% del con teo tiva de cada población en éstos. Cuando a falta de
WOC, también es desplegado si el conteo porcen mante nimi ento de rutina se va acumula ndo polvo en
tual de linfocitos excede el 20% del conteo WBC o el interior del sistema óptico, la cantidad de luz que
también si la dispersión de la población de monocitos llega a los detectores se verá gradualmente mermada.
es mayor de lo esperado en el escatergrama 0 o - 10° Como consecuencia de esta condición gradual, pero
como se observa en las siguientes imágene s. anormal, todas las poblaciones de los escatergramas se
acercarán al origen de la gráfica, generándose con
mayor frecuencia alertas inexistentes en el frotis. Esta
condición se corrige usualmente sólo con una limpieza
de rutina anual al sistema óptico del instrumento, y
SUSPECT sólo después de realizar esta limpieza se podrá deter
10.1 K/uL minar si el instrumento requiere algún ajuste adicio
5.96
LYM .473
59.2
4.69
%N
%L VLYM/BLAST
nal (ajuste de ganancias).
MONO 3.25 32.3 %M
EOS .012 .123 %E Los instru mentos Cell Dyn de la serie 3500/3700 tienen
BASO .375 3.73 %B también la capacidad de repor tar histogramas de la cla
sificación poblacional de la serie blanca basados en los
Sospecha de blastos escatergramas generados y en el conte o por impedancia
de células blancas. Sin embargo, cabe señalar que debi
Complejidad
do a la mayor concentración del reactivo hemolizante
de los instrumentos Cell Dyn serie 3000, este histograma
del conteo WIC es unimodal, pues no está diseñado
para  utilizarse para el conteo diferencial mediante
Sospecha de blastos impedancia.

Complejidad

• La siguiente imagen nos muestra la ubicación relativa

de cada población celular en el escatergrama principal A) Histograma MONOnuclear-POLInuclear, B) Histograma NWBC-LYM-
del instrumento. MONO, C) Histograma WIC.
 CONCLUSIONES
La utilización de la tecnología representa un apoyo mientos y criterio para la mejor interpretación de los
significativo para el personal de la salud en el área de resultados.
hematología. Sin embargo hasta el día de hoy ningún La presente recopilación tiene la finalidad de apoyar
analizador hematológico automatizado tiene la capa al profesional de la salud en el laboratorio clínico a
cidad de eliminar por completo la necesidad de obser conocer las bases teóricas principales de la
var al microscopio un frotis sanguíneo. Ni aun el mejor hematología, así como la metodología para elaborar e
de los analizadores puede suplir al ojo de un h ematólogo interpretar adecuadamente un frotis sanguíneo. Todo
para la interp retaci ón de un resultado. Sin embargo los esto sin dejar de lado que ahora contamos con el apo
analizadores son la herram ienta ideal para que el perso yo de los instrumentos automatizados hematológicos,
nal del laboratorio pueda destinar el valioso tiempo de cuáles son los alcances de cada una de sus tecnolo
sus profesionales en hematología, para dedicar la mayor gías principales (en el caso de los instrumentos Cell
part e de él, a la observación minucio sa de las muestra s Dyn) y cuál es la acción que debe seguir el profesio
patológicas, dejándole a los instrumentos el trabajo de nal de la salud ante cada mensaje de alerta específi
rutina y el apoyo con alertas específicos que le indican co relacionado a los resultados de cada muestra que
cuáles son las muestras que requieren de sus conoci los presente.

85
 GLOSARIO SOBRE LA TECNOLOGÍA
CELL DYN
Apertura. Orificio con un diámetro y longitud conoci proceder a su análisis y emite los resultados una
dos que ofrece una resistencia fija y conocida a la vez finalizado éste.
corriente eléctrica cuando se sumerge en un me Basófilo. Granulocito que suele estar presente en con
dio conductor concreto. Actúa como zona de sen centrac iones ínfimas en la circulación. Intervi ene en
sibilización para mediciones de la impedancia. la alergia, la inflamación y la liberación de histamina.
Aglutinación. Efecto por el que las células o partículas Blasto. Es un precursor inmaduro en la estirpe de las
se adhieren o aglomeran. células sanguíneas. Normalmente, esta célula está
Aglutinina. Anticuerpo presente en el plasma o una presente en la médula ósea, pero no en la sangre
suspensión que reacciona con el aglutinó geno pro circulante.
duci endo una aglut inaci ón o agregación. Calibración. Determinación del factor de conversión
Agregación. Véase Aglutinación. de la desviación de un procedimiento analítico en
Alarma. Mensaje visualizado en la pantalla que advier condiciones conocidas, con objeto de obtener me
te al operador de un problema o del estado anor diciones exactas. La exactitud en el intervalo de
mal del sistema. operación se establece a través de los correspon
dientes métodos de referencia, materiales de refe
Alarma. Símbolo escrito o visualizado en la pantalla
rencia y/o calibradores (ICSH).
para atraer la atención. El ordenado r asigna deter
minadas alarmas que alertan al operador sobre las Calibración automática. Opción de los sistemas CELL-
anomalías detectadas en los datos durante su aná DYN que guía al operador a través del proceso de
lisis o sobre determinadas situaciones del analiza calibración y calcula automáticamente el factor
dor que ocurren durante el procesado de la mues de calibración de cada parámetro.
tra. En general, requiere la toma de medidas (revi Calibr ador. Material de características conocidas que se
sión/corrección) por parte del operador. utiliza, en combinación con el procedimiento de ca
Ala rma de par áme tro . Indic ador visual o impreso que libración, para ajustar la medición. Este material debe
señaliza la presencia o sospecha de una sustancia o corresponderse con una preparación o material de
condición que puede alterar la exactitud de la me referencia nacional o internacional (ICSH).
dición del parámetro. Carboxih emoglobi na. Uni ón relativamente estable en
Alarma de presencia de poblaciones anormales. tre el monóxido de carbono y la hemoglobina; su
Indicador visual o impreso que señaliza la pre formación impide el intercambio normal del
sencia de anomalías eritrocitarias, del tipo de la dióxido de carbono y del oxígeno du rant e la circu
anisocitosis, o leucocitarias, como por ejemplo cé lación normal de la sangre. Sus niveles se elevan
lulas en banda, granulocitos inmaduros, blastos o en los estados de asfixia, incluida la muerte.
linfocitos modificados. CB C. Acrón imo de hemograma completo, que incluye
Alarma por dispersión. Indicador visual o impreso que al menos: WBC, RBC, HGB, HCT, MCV, MCH,
señaliza la presencia de los datos de con centr acio MCHC y PLT.
nes celulares y/o valores fuera del intervalo elegi Célula en banda. Estado de maduración del granulocito
do por el operador. antes de su segmentación. En general, su númer o
Algoritmo. Procedimiento para resolver un problema es muy reducido en la circulación, pero cuando
paso a paso; gen eralme nte se encue ntr a codifica aumenta indica una "desviación a la izquierda".
do en el software del ordenador. Coagulación. Proceso mediante el cual la sangre se
Anisocitosis. Variación en el tamaño de los eritrocitos. espesa formando una masa adherente y viscosa,
que tiene la finalidad de obstruir una ruptura en
Anticoagulante. Sustancia que impide o bloquea los
algún vaso sanguíneo.
mecanismos normales de coagulación de la sangre.
Coeficiente de correlación. Grado de relación entre
Arrastre. Interferencia significativa de la muestra previa
dos variables, que se represen ta como un valor en
en los resultados obtenidos con la muestra actual.
una escala de -1,0 a 1,0, siendo este último valor
Aut oagl utin ació n. Aglomeración inespecífica de las cé indicativo de una correlación positiva perfecta y el
lulas debida a factores físicos/químicos. primero, de una correlación negativa perfecta. El
Autoanalizador de hematología. Instrumento que ad valor 0,0 indica que no existe ninguna correlación
mite directamente muestras de sangre total para entr e las variables.

86
 GLOSARIO SOBRE LA TECNOLOGÍA CELL DYN

Coeficiente de variación (cv). Parámetro estadístico Desviación Estándar. Medida de la dispersión de un

que se utiliza para describir la heterogeneidad de grupo de valores alrededor de la media. Raíz cua
la poblaciones. Expresión de la desviación típica dra da de la varia ncia, expre sada en las mismas
como porcentaje de la media. unidades que la propia medición.
Coincidencia de pasaje. Paso simultáneo de dos o más Distribución de Gauss. Término estadístico que des
células a través de la apertura. cribe la distribución dentro de una población; dis
Control (material de control, material de control tribución simétrica c on un solo pico.
de calidad). Sustancia utilizada diariamente en EDTA. Acrónimo de acetato de tetraetilendiamina.
la práctica rutinaria para verificar el funcio Anticoagulante que fija el calcio. Es el anticoa
namiento de un proceso o instrumento analítico. gulante más utilizado en hematología, porque
Este material debe reunir propiedades similares y preseva la morfología celular en un estado muy
analizarse del mismo modo que las muestras del parecid o al del ser vivo. Pu ede suministrarse como
paciente. Al material de control se puede o no líquido (K 5 o K,) o en polvo (Na,).
asignar un valor predeterminado (ICSH,
Eosinofilia. Aumento en la concentración absoluta de
NCCLS).
eosinófilos circulantes.
Control de calidad (externo). Sistema de compara Eosinófilo. Granulocito maduro presente en concen
ción retrospectiva y objetiva de los resultados obte traciones reducidas en la sangre circulante. Inter
nidos por diferentes laboratorios organizado por u na viene en las reacciones de defensa del huésped
compañía ajena. El objetivo principal consiste en frente a ciertos parásitos, en los procesos de alergia,
establecer las bases para comparar los diferentes en la inflamación y en la fagocitosis.
laboratorios e ins trum ent os (si ello es posible) fren
Eritrocito. Disco pequeño, bicóncavo y circular, de
te a un patrón de referencia, si se dispone de él
aproximadamente 7,5 u.m de diámetro, carente de
(ICSH).
núcleos. Los eritrocitos son células maduras pre
Control de calidad (interno). Conjunto de normas sentes en la sangre circulante en cantidades ma
elaboradas por el personal del laboratorio para la yores que otras células (4-5 a 5 millones de
evaluación continuada de la fiabilidad del trabajo eritrocitos o hematíes por microlitro de sangre to
que en él se desarrolla. Estos procedim ientos indi tal, por término medio).
can si los resultados de las pruebas son suficiente
mente fiables para los clínicos que las solicitan. Es Eritrocito nucleado (eritoblasto, NRBC,   ñor-
tas normas deb en incluir valoraciones del material moblasto). Célula nucleada de la médula ósea
de control y un análisis estadístico de los datos del que da origen al eritrocito y no se halla presente en
paciente (ICSH). condiciones normales en la circulación.
Corpúsculo. Eritrocito o leucocito vivo no agregado en Error aleatorio. Variación sin un patrón característico
los tejidos contiguos. entre los datos sucesivos de un análisis. A menudo,
se admite que sigue una distribución normal
Corrección de la coincidencia. Análisis estadístico (gaussiana) alrededor de la media.
que ajusta la pérdida de coincidencia del recuen
to. En los sistemas CELL-DYN un circuito analógico Error sistemático.Variación direccional o con un pa
aplica la corrección de forma automática. trón fijo entre los valores obtenidos y los valores
esperados.
Crioaglutinina. Sustancia de la sangre que agrega los
eritrocitos compatibles e incompatibles a baja tem Especificidad clínica. Capacidad del análisis para re
peratura. También se denomin a criohemaglutinina. conocer a los sujetos que no padecen la enferme
dad sospechada. Capacidad del método para obte
Criofibrinógeno, crioglobulina. Cualquiera de las ner resultados negativos en relación con un méto
proteínas que se asemejan a las gammaglobulinas, do de referencia. Porcentaje o proporción de pa
cristalizan en frío y se disuelven de nuevo con el cientes que no sufren dicho t rasto rno clínico y pre
calor. sentan valores que no exceden el límite de deci
Datos de configuración. Criterios elegidos por el ope sión (NCCLS).
rador o datos para ajustar la operación del analiza Especificidad del análisis. Ausencia de interferencias
dor y los formatos de salida de los datos. en la medición. Capacidad de un método analíti
Desv iaci ón. Cambio brusco en los resultados. co para determinar únicamente el componente
Desviación. Factor sistemático que determina inexac que se desea medir (NCCLS).
titud. Medición de la inexactitud o error sistemáti Estabilidad. Capacidad de una muestra, reactivo o con
co en determinadas condiciones del análisis. trol de mantene r constante la concentra ción de la
Desviación. Variación o cambio en el tiempo del sis muestra a analizar. A veces, también refleja la ca
tema que influye significativamente en su fun pacidad del sistema analítico para evitar la des
cionamiento. viación.

87
 GLOSARIO
GLOSARI O SOB
SOBRE LA TECNOLOGÍA CELL
CELL DYN

Exactitud. Medición de la concordancia entre el valor Granulocitosis. Aumento en la concentración absolu

estimado (resultado generado por el método) y el ta de granulocitos en la sangre circulante.
valor real. La exact itud no posee un valor numér i HCT. Código para identificar el resultado del valor
co, sino que se mide como la cantidad (o el grado) hematocrito en forma de porcentaje de volumen o
de inexactitud (ICSH). Grado de concordancia de cociente.
entre el valor medido y el valor esperado de una
Hematocrito. Relación entre el volumen de los
muestra.
eritrocitos y el de la sangre total, que se expresa
Factor de calibración. Factor multiplicador obtenido como porcentaje (% de vol).
durante la calibración que se puede aplicar para
Hemoglobina. Proteína intraeritrocitaria, con hierro, que
obtener los resultados exactos a partir de los datos
transporta el oxígeno. Tetrámero con cuatro cade
preliminares.
nas de globulina, cada una con u n residuo hem.
Fallo. Implica un error o estado que no cumple los cri
Hemolisis. Alteración o destrucción de una célula.
terios de aceptación internos. Se activan los
indicadores que alertan al operador del fallo. Hemolisis. Destrucción de los eritrocitos con libera
ción de hemoglobina.
Fecha de caducidad. Fecha asignada por el fabrican
te, despué s de la cual no debe utilizarse el produc Heparina. Anticoagulante que se une y potencia los
to. La fecha de caducidad de los reactivos, contro efectos de la antitrombina III, sustancia que impi
les y calibradores se fija durante el proceso de fa de que la sangre se coagule. No se recomienda su
bricación. uso en las muestras destinadas a los analizadores
de hematología.
Fem tol itr o (fl). Unidad de medida que expresa el vo
lumen de las células sanguíneas. Un femtolitro es HGB. Código para identificar el resultado de la hemo
una millonésima de un litro. globina, que se expresa en unidades de masa
(# g/dl, # g/1) o moles (# mmol/1) por unidad de
Fiabilidad. Magnitud con la que un experimento, en
volumen de la sangre total. En los sistemas CELL-
sayo o procedimiento de medida produce los mis
DYN, el operador puede elegir la unidad de medi
mos resultados después de repetir la medic ión.
ción a voluntad.
Fibrina. Producto final de la coagulación, que deriva
de la proteína plasmática fibrinógeno por efecto de Hiperbilirrubinemia. Aumento anormal de la
la trombina. bilirrubina en la sangre circulante, que cuando al
canza un determinado umbral provoca la apari
Fibrinógeno. Una de las proteínas más importantes del ción de ictericia.
plasma, sustrato de la trombina a partir del que se
forma la fibrina; factor I de la coagulación. Hiperglucemia. Concentración anormalmente eleva
da de la glucosa en la sangre circulante, referida
Fichero de la media móvil. Almacén de datos que de modo especial a los niveles en ayunas.
admite y archiva automáticamente las medias del
lote en cada tiempo, que se calculan para su revi Hipocrómico (hipocromía, hipocromasia). Dismi
sión por el operador en forma de un registro abre nuci ón del
del cont enid o de hemoglobina de loslos hema 
viado o de la representación de Levey-Jennings tíes. MCH y pigmento reducidos en el frotis de
(análisis de la tendencia). sangre teñido.
Fichero QC. Almacén que archiva automáticamente Histograma. Representación gráfica de la frecuencia
los datos cada vez que se procesa un control, para con que se distribuyen las células sanguíneas me
su revisión posterior y representación en forma abre didas. El volu men se r epresenta en el eje de abscisas,
abscisas,
viada o en la gráfica de Levey-Jennings. La media, mientras que la concentración celular relativa se
DE y CV, se actualizan en forma automática cada mide en el eje de coordenadas.
vez que reciben los datos. ICSH. Acrónimo del Comité Internacional de Norma
Ganancia. Grado de intensificación generado en el am lización en Hematología.
plificador, que se expresa por el cociente entre las ID de muestra. Código alfanumérico que identifica
alarmas de salida y las de entrada. una muestra concreta. Se puede introducir de for
Glóbulo rojo, hematíe. Véase Eritrocito. ma automática o activando la opción de incremento
GRAN. Código para identificar el resultado del recuento automático. También se puede introducir de for
absoluto de granulocitos por unidad de volumen ma manual antes de procesar la muestra.
de sangre total: # x 10 9 /1 o x 10Y|lL ID del operador. Código alfanumérico que identifica
Granulocito. Leucocito maduro que contiene granu al operador actual del sistema.
los citoplásmicos llamativos; se distinguen como Impedancia (resistividad eléctrica), método. Pro
neutrófilos, eosinófilos, basófilos por sus afinidades ceso que detecta y mide el tamaño de las células
tintoriales. Los granulocitos poseen núcleos irregu no conductoras suspendidas en un medio conduc
lares. tor a medida que son aspiradas y pasan por la aber-

88
 GLOSARIO SOBRE LA TECNOLOGÍA CELL DYN

tura (zona de detección). Cada célula desplaza su Jeringa.  Dispositivo que se compone de un cilindro hue
propio volumen de líquido conductor y crea así co, conectado a un émbolo, y sirve para inyectar o
una resistencia al flujo que resulta directamente administrar un volumen preciso de la muestra di
proporcional al volumen celular. Las propiedades luida.
físicas detectadas en las células se transforman en Leucocito. Célula de la sangre circulante, que se en
alarmas eléctricas equivalentes. cuentra presente en concentraciones de 7 a 12 Lil
Imprecisión. Variación en los resultados de un con de sangre total. Inicialmente, se diferencian por
 ju nt o d e repl
re plic
icad
ados
os o medi
me dici
cion
ones
es du plic
pl icad
adas
as,, qu e sus propiedades nucleares como leucocitos polinu
se expresa como la desviación típica o el coeficien cleares o mononucleares. A su vez, se pueden cla
te de variación. Véase también Precisión. sificar según la presencia de granulos en el cito
In vitro.  Término con el que se hace referencia a prue
plasma como granulocitos, linfocitos y monocitos.
Los leucocitos defienden a los tejidos de la inva
bas diagnósticas que analizan una muestra de un
sión de los
los microorgan ismos ext raños y de las sus
tubo de ensayo o de otro medi o con tro lad o (lite
tancias químicas.
ralmente, en el vidrio).
In  vivo. Dentro del ser vivo. Limpieza automática. Opción de los sistemas CELL-
DYN para limpiar automáticamente el sistema de
índice de dilución.   Factor con el que se diluye una
flujo del analizador y la cánula de muestra sin in
muestra antes de su medición. Los índices de dilu
tervención del usuario.
ción pueden variar hasta obtener una concentra
ción susceptible de ser medida. Linealidad.  Capacidad de análisis para obtener medi
ciones proporcionales a un analito medido en un
índice de la desviación típica (IDE).   Medida del
intervalo conocido de concent ración o cuenta ce
error sistemático y aleatorio, que indica cuánt as
lular [NCCLS].
desviaciones típicas se aleja un número determi
nado de la media. Se usa en los programas de con Linfocito. Pequeño leucocito mononuclear maduro,
trol de calidad externos para relacionar el funcio presente en concentración relativamente elevada
namiento de un laboratorio con el de los demás (20-50%). Posee un núcleo redondo o ligeramente
laboratorios participante s. El IDE perfecto es es 0, per o indentado y no contiene granulos visibles   en su
en cualquier caso, debe ser siempre inferior a 1,0. citoplasma.
Linfocitosis.  Au men to de la concentració n de linfo
linfocito
citoss
índices eritrocitarios. Conjunto calculado de valores
de las propiedades eritrocitarias: volumen en la sangre circulante.
corpuscular medio (MCV), hemoglobina cor Linfopenia (linfopénico). Disminución del recuento
puscular media ( MCH) y concentraci ón de la he absoluto de linfocitos en la sangre circulante.
moglobina corpuscular media (MCHC). Lipemia.  Estado en el que se observa una concentra
Inexactitud.   Diferencia numérica entre la media de ción de lípidos en la sangre mayor de la normal; el
un conjunto de mediciones repetidas de la misma plasma tiene un aspecto lechoso. Este estado pue
muestra y el valor esperado. La diferencia (positiva de interferir la lectura óptica de los valores hema-
o negativa) se puede expresar en las unidades de tológicos principalmente de hemoglobina.
la cantidad medida o como porcentaje del valor LIS. Acrónimo de sistema de información del labora
esperado (ICSH). torio.
Intervalo. Medida de la dispersión de los valores. Dife Lisis. Proceso de alteración o destrucción de las células.
rencia entre el valor
valor máximo y mínimo de un con LRI.   Acrónimo de la interferencia de la región inferior.
 jun
 j un to de medi
me di cion
ci ones
es.. Indicador visual o impreso de detección de una
Intervalo de referencia. Intervalo normal establecido anomalía en la región inferior de tamaño de las
en el laboratorio. Las variables locales,
locales, como el mé plaquetas, que exige revisión microscópica de la
todo de ensayo, la región geográfica, las sustancias muestra.
de interferencia, la edad y el sexo ocasion an míni LYM.   Código para identificar el recuento absoluto de
mas variaciones en los intervalos de referencia que linfocitos por unidad de volumen de sangre total:
se obtienen en cada laboratorio. #x 1071o #xl0 3 / A d
El intervalo normal se determina examinando Macrocitosis.  Incremento generalizado del número de
muestras recogidas en un número de 100 a 300 eritrocitos de gran tamaño en la circulación. Se
sujetos sanos y calculando después la media 2DE. asocia a estados de deficiencia de la vitamina B ]2  y
Los resultados del análisis del 95% de la población del folato, y también a ciertos tratamientos.
normal se hallarán comprendidos dentro de este MCH (hemoglobina corpuscular media) . Acrónimo
intervalo. Se sugiere que cada laboratorio establezca de hemoglobina corpuscular media. Símbolo con
sus propios intervalos de referencia. el que se expresa el resultado de la hemoglobina
corpuscular media, que es el contenido medio de

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 GLOSARIO SOBRE LA TECNOLOGÍA CELL DYN

Sustancias/estados de interferencia (resultados erró Verificación. Protocolo o procedimiento seguido para exa
neos).  C ompo nent e del sistema
sistema que altera la exac minar el funcionamiento de un sistema
sistema o compone n
titud en la medición de un parámetro. te del mismo y asegurar que cumple todas las especi
Tendencia.  Situación en la que un resultado se desplaza ficaciones estipuladas.
en la misma dirección dur ant e varios ciclos
ciclos de proce Volumen globular (hematocrito).  Med ida de la relación
sado consecutivos. entre el vol umen ocupad o por los
los eritrocitos y la san
san
Trombocito o plaqueta. Fragmentos citoplásmicos circu gre total.
lantes de los megacariocitos, presentes en concen VPM. Acrónimo de volumen plaquetario medio. Código
traciones moderadas en la sangre (media: aprox. que representa el volumen plaquetario medio (en
25O.00O/jU,l de sangre total). No contiene núcleos, pero femtolitros). VPM varía de forma
forma inversament e pro
sí algunos granulos. porcional al PDW.
Unidad de medida.  Cantidad determinada que se adop WBC. Acrónimo de leucocito. Su concentración se mide
ta como patrón de medición. Se acompaña de un por unidad de volumen de sangre total: # x 10 9 /1 o #
resultado numérico de la cantidad o propiedad me 10V/xl.
dida. X-B (programa de media móvil).  Código del programa
UR L Acrónim
 A crónim o de interferencia de la región superior.
superior. In de medidas móviles diseñado por el Dr. Bull. Progra
dicador visual o impreso de una anomalía detectada ma estadístico que controla el funcionamiento del
en la región superior de tamaño de las plaquetas, que sistema a medida que se procesan las muestras. Todo
exige revisión. Esta alarma de la interferencia obede resultado de cada parámetro examinado, como MCV,
ce, por regla general, a la presencia de grandes MCH y MCHC, que cumpla los criterios admitidos,
plaquetas o de pequeños eritrocitos en la muest ra. es incluido
incluido autom áticam ente en el lote actual.

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