000182 = Steranios 20% concentre

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre
EN - Up-to-date version : 07-01-2008
 STERANIOS 20% Concentré
Cold sterilant for instrumentation and medical devices

STERANIOS 20% CONCENTRE is a glutaraldehyde solution with 20% of active

ingredient.

Indications Microbiological properties

Cold sterilization of surgical and medical instruments. STERANIOS 20% CONCENTRE is in compliance
Disinfection of endoscopic equipment and with AFNOR and European standards of
thermosensitive equipment. antimicrobial efficiency:
Product in compliance with 93/42/EEC directive. • BACTERICIDAL:
- NF EN 1040
Instructions for use - NF T 72-151 (Mycobacterium smegmatis)
- NF T 72-171 (spectrum 5 – in the presence of
Clean and rinse thoroughly medical devices before interfering substances : dirty conditions, clean
soaking in the STERANIOS 20% CONCENTRE conditions and in the presence of hard water)
bath. - NF T 72-190 (germ-carrier method)
STERANIOS 20% CONCENTRE has to be diluted - T 72-301
before use with a good microbiological quality water. - Active against Mycobacterium tuberculosis (T.B.)
Water softening is recommended in order to avoid
white deposits of limestone. • FUNGICIDAL:
Rinse and dry after use. - NF EN 1275
STERANIOS 20% CONCENTRE will be used - NF T 72-190 (germ-carrier method)
diluted at 5% or 10%, depending on contact time and - NF T 72-201
- T 72-301
Dilution Final concentration of Contact time
• VIRUCIDAL:
5%, i.e.
- NF T 72-180
10 minutes - Active against HIV-I and HBV
250 ml for 5 l 1%
1 hour for spores
500 ml for 10 l

10%, i.e.
• SPORICIDAL:
10 minutes - NF T 72-230/231
250 ml for 2.5 l 2%
1 hour for spores
500 ml for 5 l

Qualitative composition Precautions for use

20% glutaraldehyde concentrated solution, stabilized Please refer to safety data sheet and label.
Laboratoires ANIOS– 05a-0182GB

by a hydro-alcoholic complex. Preparation classified according to the European

Directive « Dangerous preparations » 1999/45/EC.

Physicochemical data Packaging

• Green liquid solution Box of 20 flasks, 250 ml each .......... ref.182.139
• Density at +20°C: ≈ 1.046
• pH of pure product at +20°C: ≈ 3.3
• Non corrosive against materials (free of oxidant)
• Non foaming product

Pavé du Moulin
59260 Lille-Hellemmes • France
Tel : + 33 3 20 67 67 67
Fax : + 33 3 20 67 67 68

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre
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Page 4
 Summary
___________________
Product brochure Page 7
Regulation and General Information brochure Page 9
Composition Page 11
Stability and storage conditions Page 13
Studies and expertises
- Microbiology Page 15
- Toxicology Page 157
Regulation Page 181
Protocols and brochures for use Page 185

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre
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Page 6
 STERANIOS 20%
CONCENTRE
INDICATIONS / INDICATIONS
STERANIOS 20% Concentré est recommandé pour la désinfection de
haut niveau de l’instrumentation médicale, chirurgicale et endoscopique.

STERANIOS 20% Concentré is recommended for the cold sterilization of surgical and
medical instruments, and for the disinfection of endoscopic equipment and thermo
sensitive equipment.

MODE D'EMPLOI / INSTRUCTIONS FOR USE

Nettoyer et rincer très soigneusement tout instrument avant trempage
dans STERANIOS 20% Concentré.
STERANIOS 20% Concentré doit être dilué avant emploi dans une eau
de bonne qualité microbiologique. Un adoucissement de l’eau est
recommandé pour éviter les dépôts blancs de calcaire.

Rincer et sécher après usage.

STERANIOS 20% Concentré sera employé aux dilutions de 5% ou 10%

selon le temps de contact et la concentration finale de glutaraldéhyde
souhaités.

Clean and rinse thoroughly medical devices before soaking in the STERANIOS 20%
Concentré bath.
STERANIOS 20% Concentré has to be diluted before use with good microbiological
quality water. Water softening is recommended in order to avoid white deposits of
limestone.

Rinse and dry after use.

STERANIOS 20% Concentré will be used diluted at 5% or 10%, depending on contact

time and required final glutaraldehyde concentration.

Révisé le 26/05/2008
Revised on 26/05/2008

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre
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Page 8
STERANIOS 20% Concentré
Informations réglementaires et générales
Regulations and general information

STERANIOS 20% Concentré est conçu, produit et contrôlé par les

Laboratoires ANIOS, certifiés par l'AFAQ sous le numéro
1995/3723, selon le référentiel d'Assurance Qualité ISO 9001.

STERANIOS 20% Concentré is conceived, produced and controlled by the

Laboratoires ANIOS, certified by the AFAQ Organism under the number 1995/3723
in accordance with the ISO 9001 Quality System.

STERANIOS 20% Concentré bénéficie du marquage CE 0459

relatif aux dispositifs médicaux, en conformité avec la Directive
93/42/CE, classe II a.

STERANIOS 20% Concentré has the EC mark 0459 relating to medical devices in
accordance with the 93/42/EC Directive, class II a.

STERANIOS 20% Concentré est étiqueté conformément à la

directive 99/45/CE et ses adaptations, relatives à la classification, à
l'emballage et à l'étiquetage des préparations dangereuses.

STERANIOS 20% Concentré is labelled in accordance with the Directive

99/45/EC and its adaptations, relating to the classification, packaging and labelling
of dangerous preparations.

STERANIOS 20% Concentré est référencé dans la liste positive

des désinfectants éditée par la Société Française d'Hygiène
Hospitalière depuis 1996.

STERANIOS 20% Concentré is referred since 1996 in the disinfectant positive list
issued by SFHH, French Association for Hospital Hygiene.
Révisé le 28/05/2007
Reviewed on 28/05/2007
182_FIRG

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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 STERANIOS 20% Concentré
Composition

Principes actifs antimicrobiens (% p/p indicatifs)

Antimicrobial active ingredients (indicative w/w %)
Glutaraldehyde (ou PENTANEDIAL 1,5) 20.0 %
Glutaraldehyde (or PENTANEDIAL 1,5)

Autres ingrédients
Other ingredients
Agent stabilisant
Stabilising agent

Colorants
Colouring agents

Excipients
Excipients

182_Révisé le 08/06/2007
182_Reviewed on 08/06/2007

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre
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 STERANIOS 20 %
CONCENTRE
Stabilité et conditions de conservation (1)
Stability and storage conditions (1)

Produit pur non dilué

- Stockage entre +5°C et +35°C.
- Stabilité :
- Flacon non ouvert : 3 ans à partir de la date de production indiquée sur
l’étiquette.
- Flacon ouvert : maintien de la durée de 3 ans à la condition de refermer
le conditionnement après usage.

Pure product not diluted :

- Storage between +5°C and +35°C.
- Stability:
- Non opened bottle: 3 years from the manufacturing date indicated on the label.
- Opened bottle: preserving of the 3 years in condition if closing the bottle after use.

Produit dilué
Dilution : 5% - 50 ml par litre d'eau ou 10% - 100 ml par litre d'eau
- Stabilité du bain d’immersion :
- 30 jours.
- 7 jours, selon la réglementation française
Remplacement du bain de STERANIOS 20 % Concentré en cas de
présence de souillures

Diluted product
Dilution: 5% - 50 ml per liter of water or 10% - 100mL per liter of water
- Stability of soaking bath
- 30 days.
- 7 days, according to the French regulation
Replacement of the bath of STERANIOS 20 % Concentré in the event of the presence of
stains

Révisé le 28/05/2007
Revised on 28/05/2007

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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 STERANIOS 20 %
CONCENTRE
Stabilité et conditions de conservation (2)
Stability and storage conditions (2)

Remarque
Le colorant vert menthe (E102 - E131) est sensible à la lumière.
En cas de surexposition, la solution diluée, ou le produit concentré peut
se décolorer sans entraîner une perte d'activité.

Note
The dye « Vert Menthe » (E102 – E131) is sensitive to the light.
In the event of over exposure, the diluted solution, or the concentrated product can be faded
without involving a loss of activity

Révisé le 28/05/2007
Revised on 28/05/2007

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Page 14
 Microbiology
___________________
Sum up of antimicrobial activity Page 17
Bactericidal activity according to the NF EN 1040 standard Page 19
Bactericidal activity according to the NF EN 13727 standard in 60 minutes Page 25
in clean conditions
Bactericidal activity according to the NF EN 13727 standard in 5 minutes Page 31
in clean conditions
Bactericidal activity according to the NF T 72-171 standard in dirty Page 37
conditions
Tuberculocidal activity according to the NF EN 14348 standard in 60 and 10 Page 45
minutes
Mycobactericidal activity according to the NF EN 14348 standard in clean Page 51
conditions
Tuberculocidal activity according to the prEN 14563 standard (carrier Page 57
test)
Activity against Mycobacterium tuberculosis Page 63
Fungicidal activity according to the NF EN 1275 standard Page 79
Yeasticidal activity according to the NF EN 13624 in dirty conditions and Page 85
60 minutes
Yeasticidal activity according to the NF EN 13624 standard in dirty Page 91
conditions and 5 minutes
Fungicidal activity according to the NF EN 13624 standard against Page 97
Aspergillus niger in dirty conditions
Virucidal activity according to the NF T 72-180 standard in 10 and 30 Page 103
minutes
Virucidal activity against HIV-1 virus in 5 minutes Page 113

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Page 15
Virucidal activity against Hepatite B virus in 5 and 15 minutes Page 123
Virucidal activity against BVDV, surrogate of Hepatitis C virus Page 127
Sporicidal activity according to the NF T 72-230 standard in 1 hour Page 139
Sporicidal activity according to the NF T 72 - 231 standard against Page 145
Clostridium sporogenes in 1 hour
Sporicidal activity according to the T 72-301 standard at 45°C against Page 151
Bacillus cereus

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Page 16
 STERANIOS 20% concentré
Tableau de synthèse des activités antimicrobiennes (1)
Sum up of antimicrobial activity (1)
Dose d’emploi : 5 %, soit solution de glutaraldéhyde à 1 %
Use concentration : 5 % or glutaraldehyde concentration at 1 %
Dose d’emploi : 10 %, soit solution de glutaraldéhyde à 2 %
Use concentration : 10 % or glutaraldehyde concentration at 2 %

Résultats
Results

Etudes Concentration Temps de Conditions

Studies active contact spécifiques
Active concentration Contact time Specific conditions
BACTERICIDIE Bactericidal activity

EN 1040 2% 5 min.
Conditions de
EN 13727 0,1 % 60 min.
propreté
0,5 % 5 min.
Clean conditions

NF T 72-171 Conditions de saleté

spectre 4 spectrum 4 0,5 % 5 min. Dirty conditions

MYCOBACTERICIDIE Mycobactericidal activity

EN 14348 :
Mycobacterium terrae 5% 10 min.
< 2,5 % 60 min.
Mycobacterium avium 10 % 60 min

pr EN 14563 : Mycobacterium terrae 5% 10 min. Test de surfaces

Carrier test

BACTEC TB 2,5 % 10 min.

5 log
Mycobacterium tuberculosis hominis 5% 5 min.

FONGICIDIE Fungicidal activity

EN 1275 5% 5 min.

NF EN 13624
Candida albicans 0,5 % 60 min.
2,5 % 5 min.
Aspergillus niger 5% 10 min.

Tableau de synthèse – STERANIOS 20% concentré - Page 1/2 - le 18.06.2007

Sum up – STERANIOS 20% - Page 1/2 – on 06.18.2007

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Page 17
 STERANIOS 20% concentré
Tableau de synthèse des activités antimicrobiennes (2)
Sum up of antimicrobial activity (2)

Résultats
Results
Etudes Concentration Temps de Conditions
Studies active contact spécifiques
Active concentration Contact time Specific conditions
VIRUCIDIE Virucidal activity

NF T 72-180 5% 10 min.
2,5 % 30 min.

HIV-1 Dosage de le reverse transcriptase

et étude du pouvoir infectieux résiduel 1% 5 min.
Analysis of the reverse transcriptase and study of the
remaining infectious potential

Hépatite B : technique adaptée selon 5% 15 min. 2 % albumine

Frösner et col. 10 % 5 min. 10% S.V.F.
method adapted and set up by Frösner and col. 2% albumin 10% F C S

BVDV : virus modèle de l’Hépatite C 5% 5 min.

Surrogate of Hepatitis C virus

SPORICIDIE Sporicidal activity

NF T 72-230 B. cereus, B. subtilis 5% 60 min.

NF T 72-231 Cl. Sporogenes 2,5 % 60 min.

T 72-301 à 45°C Conditions de

Bacillus cereus 5% 5 min. propreté
Clean conditions

NB : concentration active : 5 % = 1 % de glutaraldéhyde pur

Active concentration : 5 % = 1 % pure glutaraldehyde
concentration active : 10 % = 2 % de glutaraldéhyde pur
Active concentration : 10 % = 2 % pure glutaraldehyde

Tableau de synthèse – STERANIOS 20% concentré - Page 2/2 - le 18.06.2007

Sum up – STERANIOS 20% - Page 2/2 – on 06.18.2007

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Page 18
 Ü <ofra<

laboratoi res

AN l OS
Laboratoire de microbiologie
ESSAIS
ACCREDITATION
N°l-0139

Lille-Hellemmes, le 9 septembre 1997

Lille Hellemmes, on the 9thSeptember 1997

Rapport d'essai N° A 97 54 1040

Tesf report N° A 97 54 1040

Objet de la demande n° 9206

Study n°92O6 GB
Antiseptiques et désinfectants chimiques. Détermination de l'activité bactéricide
de base de STERANIOS 20%. Méthode d'essai et prescriptions (phase 1) selon
NFEN1040-(Avril1997).
Indice de classement T 72 152
Méthode par filtration sur membranes.

Antiseptics and chemical disinfectants. Determination of the basic

bactericidal activity of STERANIOS 2O%. Test method and prescriptions
(phase 1) according to NFEN 1040 - (April 1997).
Classification index T 72 152
Method by membrane filtration.

Responsables de l'étude: In charge oft

CP
Responsa icrobiologie Pharmacien Re; )nsable Microbiologie
Microbi
>
'onager Pharma r
obiology Manager

Ce document comporte 5 pages numérotées et aucune annexe.

This report is made of 5 numbered pages and O annexe.

Demande n" 9206 - Study N0 9206 gb - Page 1/5

Laboratoires ANIOS
Pavé du Moulin - 59260 Lille-Hellemmes
Tel +33 3 20 67 67 67 - Fax : +33 3 20 67 67 68
Siret Na 458 501 921 00043 - SA au capital de 232.800 €

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Page 19
Introduction :

L'essai a été réalisé selon la méthode d'essai décrite dans la norme européenne
EN 1040 « Antiseptiques et désinfectants chimiques - Activité bactéricide de
base».
Détermination de l'activité bactéricide dans les conditions de laboratoire définies
par la présente norme européenne.

The test was realised according to the test method described in the
European standard EN 1040 « Antiseptics and chemical disinfectants».

Determination of the bactericidal activity in the laboratory conditions defined

by the present European standard.

Identification de l'échantillon : Sample identification

Nom du produit
Name of the product : STERANIOS 20%

Numéro de lot
Batchnumber : W092 14

Fabricant
Manufacturer : LABORATOIRES ANIOS

Date de réception au laboratoire : Le 01 Juillet 1997

Receipt date at the laboratory : On tiœ Olsl July 1997

Conditions de stockage au laboratoire : T° ambiante et obscurité

Storage conditions at tlie laboratory : room temperature and darkness

Période d'essai : Du 04/07/97 au 08/09/97

Period of analysis. : From 97/07/04 to 97/09/08

Demande n° 9206 - Study N° 9206 gb - Page 2/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Page 20
Conditions expérimentales -.Experimental conditions

Température de l'essai
Test temperature : 20°C ± 1°C

Temps de contact
Contact time : 5 minutes + 10s

Diluant du produit lors des essais : eau distillée stérile

Diluent of the product used during the íesí '.Sterile distilled water

Souches testées (Strains tested) : Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442

Staphylococcus aureus ATCC 6538
Température d'incubation
incubation temperature : 37°C + 1°C

Gélose de dénombrement
Counting agar : Tryptone soja agar

Méthode par filtration sur membranes : Membrane Filtration method

Nature des membranes : MILLIPORE HAWG en ester de

cellulose, 0.45 u , stérile
Nature of the membranes : MILLIPORE HAWG made of
cellulose ester, 0.45ftm, sterile
Liquide de rinçage : eau distillée Tween 80 + eau distillée
Rinsing liquid : distilled water Tween 80 +
distilled water
Nombre des rinçages
Rinsing number : 3+1
Volume utilisé pour chaque rinçage
Volume used for each rinsing. : 100 ml
Neutralisant ajouté au milieu de dénombrement : Néant
Neutraliser agent added to the counting medium. : None
Demande n° 9206 - Study N° 9206 gb - Page 3/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Page 21
 Résultats : Results

O Essais de validation des conditions expérimentales : Validation tests

Vérification de la méthodologie et validation de la méthode par filtration pour la

concentration d'essai de 2% du produit STERANIOS 20% soumis à l'essai.
Checking of the method and validation of the method by filtration for the
2% test concentration of the product STERANIOS 20% to he. tested.

Nombre de cellules viables (UFC/ml)

Suspension Suspension Témoin de Essai de
filtration sur l'inactivation par
Souches test bactérienne d'essai bactérienne
membrane filtration sur
Bacterial test Bacterial membrane
Tested strains
suspension suspension Experimental
(N) (Nv) conditions Method
control validation
(Nx) (NY)

Pseudomonas aeruginosa 4.5 101 1.810" 1.7 1.910"

Staphylococcus aureus 1.710e 6.4 8.9 7.9

Pour les deux souches soumises à l'essai - For the both strains to be tested
N est compris entre 1,5 x 108 UFC/ml et 5 x 108 UFC/ml
is comprised between 1.5x10* CFU/ml and 5x10* CFU/ml
Nv est compris entre 6 x 102 UFC/m! et 3 x 103 UFC/ml
is comprised between 6 x 10* CFU/ml and 3x10* CFU/ml
NX est supérieur OU égal à 0,05 X Nv - ¿s higher or equal to 0.05 x Nv
NY est Supérieur OU égal à 0,05 X Nv- ¿s higher or equal to 0.05 x Nv
La neutralisation est validée avec (a méthode de filtration pour la concentration d'essai de 2% du produit
STERANIOS 20 % et pour les souches soumises à l'essai.
The neutralization is validated with theßltration method for the 2% test concentration of the product
STERANIOS 20% and the strains tested.

Demande n° 9206 - Study N° 9206 gb - Page 4/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Page 22
 © Essais d'activité bactéricide - Evaluation of bactericidal activity :

Nombre de cellules viables (UFC/ml) pour le mélange d'essai

(Na) pour les concentrations de : %(v/v)
Souches-test
Number of the viable cells (CFU/ml)for the test mixture
Tested strains
(Na) for the concentrations of: %(v/u)
0.5% 1% 2%

Pseudomonas aeruginosa <1.510 2 <1.510 2 <1.510 2

Staphylococcus aureus > 3.0 103 >3.010 3 <1.510 2

Réduction du nombre de cellules viables à la concentration d'essai.

Reduction of the number of viable cells at the test concentration
0.5% 1% 2%

Pseudomonas aeruginosa > 3.0 10s > 3.0 10s >3.010 5

Staphylococcus aureus <5.610 3 <5.610 3 >1.1 105

Conclusion :

Conformément à la norme NF EN 1040 (Avril 1997), STERANIOS 20% présente

une activité bactéricide en 5 minutes de contact à 20 °C pour les souches
référencées de Pseudomonas aeruginosa ATCC 15.442 et Staphylococcus
aureus ATCC 6538,

In compliance with the European standard NF EN 1040 (April 1997 )

STERANIOS 2O% presents a bactericidal in a 5 minute contact time at 20
°C for the referenced strains of Pseudomonas aeruginosa ATCC 15.442
and Staphylococcus aureus ATCC 6538.

Demande n° 9206 - Study N° 9206 gb - Page 5/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Page 23
Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre
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Page 24
 Laboratoire de Microbiologie

Lille-Hellemmes, le 5 Août 2005

Lille Hellemmes, on thé 5th august 2005

Objet de la demande nc 18914

Study n° 18914 GB

Désinfectants chimiques. Essai quantitatif de suspension pour l'évaluation de

l'activité bactéricide de STERANIOS 20%. Méthode d'essai et prescriptions
(phase 2 - étape 1) N F EN 13727 (Juillet 2004) . Application aux désinfectants
chimiques pour les instruments médicaux utilisés en médecine .
Méthode par filtration.

Chemical disinfectants. Quantitative suspension test for the evaluation of the

bactericidal activity of STERANIOS 20%.. Test method and prescriptions
(phase 2 - step 1) according to NF EN 13727 (July 2004). Application to
chemical disinfectants for instruments used in the medical area.
Method by filtration.

Responsables de l'étude: In charge of the study :

F.
Responsable La tai|^'de Microbiologie Pharmacien R able Microbiologie
biology ry Mariager Pharmaci biology Manager

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study n°- 18914 GB - Demande n° 18914 Page 1/5

Laboratoires ANIOS
Pavé du Moulin - 59260 Lille-Hellemmes
Tél. +33 3 20 67 67 67 - Fax : +33 3 20 67 67 68
Siret N° 458 501 921 00043 - SA au capital de 232.800 €

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Page 25
Introduction : Introduction

L'essai a été réalisé selon la méthode d'essai décrite la norme européenne EN

13727 « Désinfectants chimiques et antiseptiques- Essai quantitatif de
suspension pour l'évaluation de l'activité bactéricide des désinfectants chimiques
pour les instruments utilisés en médecine (phase 2 /Etape 1) ».
Détermination de l'activité bactéricide dans les conditions de laboratoire définies
par la présente norme européenne.

The test was realised according to the test method described in the European
standard EN 13727 « Chemical disinfectants and antiseptics- Quantitative
suspension test for the evaluation of bactericidal activity of chemical
disinfectants for instruments used in the medical area (phase 2 /Etape 1) ».
Determination of the bactericidal activity in the laboratory conditions defined
in the present European standard.

Identification de l'échantillon : Sample identification

Nom du produit
Name of the product : STERANIOS 20%

Numéro de lot
Batch number : G 043-17

Fabricant
Manufacturer : LABORATOIRES AN IOS

Date de réception au laboratoire : Le 27/04/05

Receipt date at the laboratory : On the 05/04/27

Conditions de stockage au laboratoire : T° ambiante et obscurité

Storage conditions at the laboratory : room temperature and darkness

Période d'essai : Du 19/07/05 au 05/08/05

Period of analysis : From 05/07/19 to 05/08/05

study n°- 18914 GB - Demande n° 18914 Page 2/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Page 26
Conditions expérimentales -.Experimental conditions
Température de l'essai
Test temperature : 20°C±1°C
Temps de contact
Contact time : 60 minutes ± 10s
Diluant du produit lors des essais : eau dure à 30°franeáis
Diluent of the product used during the test '.hard water
Apparence du produit et de ses dilutions : préparation physiquement
homogène et stable pendant l'essai
Appearence product dilutions : Preparation physically
homogeneous and stable during test

Souches testées (Strains tested) : Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442

Staphylococcus aureus ATCC 6538
Enterococcus hirae ATCC 10541
Substance ¡nterférente : Albumine bovine à 0.3 g/l.
Interfering substance : 0.3 g/l BSA

Stabilité du mélange produit et substances interférentes: absence de précipité pendant

l'essai
Stability of the mixturef product and interfering substance) : precipitate absent
throughout the test

Méthode par filtration: Filtration method

Nature des membranes : MILLIPORE HAWG en ester de

cellulose, 0.45 u , stérile
Nature of the membranes : MILLIPORE HAWG made of
cellulose ester, OASßm, sterile
Liquide de rinçage : eau distillée Tween 80 + eau distillée
Rinsing liquid : distilled water Tween 80 +
distilled water
Nombre des rinçages
Rinsing number : 3+1
Volume utilisé pour chaque rinçage
Volume used for each rinsing : 100 ml
Neutralisant ajouté au milieu de dénombrement : Néant
Neutralizer agent added to the counting medium : None

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Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Page 27
 Résultats : Results

O Essais de validation des conditions expérimentales : Validation tests

Vérification de la méthodologie et validation de la méthode par filtration pour la
concentration d'essai de 0,5 % du produit STERANIOS 20% soumis à l'essai.

Checking of the method and validation of the method by filtration for the
O,5 % test concentration of the product STERANIOS 20% to be tested.

Nombre de cellules viables (UFC/ml)

Suspension Suspension Validation Suspension Validation des Témoin de Essai de
filtration sur
Souches test d'essai d'essai/10 suspension de validation conditions l'inactivation
membrane
bactérienne /10 expérimentale par filtration
Tested strains Validation Expérimenta sur
Bacterial test Bacterial test Validation l conditions membrane
suspension suspension bacterial
bacterial Experimental control
suspension conditions Method
suspension validation
/10
N N» B
NVO

Pseudomonas aeruginosa 2,1 108 2,1 107 8,9 102 8,9 101 9,9 101 1,1 102 1,0 102

Enterococcus hirae 1.9 108 1.9107 3,910 2 3,9101 5,8101 6,3101 6,2101

Staphylococcus aureus 2,810a 2,8107 8,9102 8,9 101 1,1 102 1.3 10Z 1,4102

Pour les souches soumises à l'essai - For the strains to be tested

N est compris entre 1,5 x 108 UFC/ml et 5 x 108 UFC/ml
is comprised between 1.5xlO 8 CPU/ml and 5 x 108 CPU/ml
NO est compris entre 1,5 x 107 UFC/ml et 5 x 107 UFC/ml
is comprised between 1.5 x 107 CPU/ml and 5 x 107 CPU/ml
NV est compris entre 3 x 102 UFC/ml et 1.6 x 103 UFC/ml
is comprised between 3 x 102 CPU/ml and 1.6 x 103 CPU/ml
NVO est compris entre 3 x 101 UFC/ml et 1.6 x 102 UFC/ml
is comprised between 3 x 101 CPU/ml and 1.6 x 102 CPU/ml
A, B, C est supérieur ou égal à 0.5 x NVo
is higher or equal to 0.05 x Nv
La neutralisation est validée avec la méthode par filtration pour la concentration d'essai de 0,5% du produit
STERANIOS 20% et pour les souches soumises à l'essai.
The neutralization is validated with the filtration method for the 0.5% test concentration of the product
STERANIOS 20% and the strains tested.

study n°-18914 GB - Demande n° 18914 Page 4/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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 Essais d'activité bactéricide - Evaluation of bactericidal activity :

Nombre de cellules viables (UFC/ml) pour le mélange

Souches test
d'essai (Na) pour les concentrations de : %(v/v)
Tested strains Number of the viable cells (CPU/ml) for the test mixture
(No) for the concentrations of : %(v/v)
0,01 0,1 0,5

Pseudomonas aeruginosa >3,310 3 <1,410 2 < 1.4102

Enterococcus hirae > 3,310s <1,410 2 <1,4102

Staphylococcus aureus >3,310 3 <1,410 2 <1,410 2

Réduction du nombre de cellules viables à la concentration d'essai.

R = Log NO - Log Na
Reduction of the number of viable cells at the test concentration
R = Log No - Log Na
0,01 0,1 0,5

Pseudomonas aeruginosa < 3,8 log > 5,1 loa > 5,1 log

Enterococcus hirae < 3,8 log > 5,1 loa > 5,1 log

Staphylococcus aureus < 4,0 log > 5,1 loa > 5,1 log

Conclusion :

Conformément à la norme NF EN 13727 (juillet 2004) STERANIOS 20% lorsqu 'il

est dilué à 0.1 % (v/v) dans de l'eau dure, présente une activité bactéricide en 60
minutes de contact à 20 °C en conditions de propreté vis-à-vis des souches de
référence : Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Enterococcus
hirae

In compliance with the European standard NF EN 13727 (July

2004),STERANIOS 2,0% diluted at 0.1 % (v/v) in hard water, presents a
bactericidal activity in a 6O minutes contact time at 20 °C in clean
conditions against the referenced strains of: Pseudomonas aeruginosa,
Staphylococcus aureus, Enterococcus hirae.

síudty n°- 18914 GB - Demande n° 18914 Page 5/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre
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Page 30
 Laboratoire de Microbiologie

Lille-Hellemmes, le 5 Août 2005

Lille Hellemmes, on thé 5th august 2005

Objet de la demande nc 18913

Study n°18913 GB

Désinfectants chimiques. Essai quantitatif de suspension pour l'évaluation de

l'activité bactéricide de STERANIOS 20%. Méthode d'essai et prescriptions
(phase 2 - étape 1) NF EN 13727 (Juillet 2004) . Application aux désinfectants
chimiques pour les instruments médicaux utilisés en médecine .
Méthode par filtration.

Chemical disinfectants. Quantitative suspension test for the evaluation of the

bactericidal activity of STERANIOS 20%. Test method and prescriptions
(phase 2 - step 1) according to NF EN 13727 (July 2004). Application to
chemical disinfectants for instruments used in the medical area.
Method by filtration .

Responsables de l'étude: In charge of the study :

C.Pluc
Responsable Labö e Microbiologie Pharmacien nsable Microbiologie
Microbiology Manager Pharmaci biology Manager

Ce document comporte 5 pages numérotées et aucune annexe.

This report is made of 5 numbered pages and 0 annexe.

study n°- 18913GB - Demande n° 18913 Page 1/5

Laboratoires ANIOS
Pavé du Moulin - 59260 Lille-Hellemmes
Tél. +33 3 20 67 67 67 - Fax : +33 3 20 67 67 68
Siret N° 458 501 921 00043 - SA au capital de 232.800 €

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Page 31
Introduction : Introduction

L'essai a été réalisé selon la méthode d'essai décrite la norme européenne EN

13727 « Désinfectants chimiques et antiseptiques- Essai quantitatif de
suspension pour l'évaluation de l'activité bactéricide des désinfectants chimiques
pour les instruments utilisés en médecine (phase 2 /Etape 1) ».
Détermination de l'activité bactéricide dans les conditions de laboratoire définies
par la présente norme européenne.

The test was realised according to the test method described in the European
standard EN 13727 « Chemical disinfectants and antiseptics- Quantitative
suspension test for the evaluation of bactericidal activity of chemical
disinfectants for instruments used in the medical area (phase 2 /Etape 1) ».
Determination of the bactericidal activity in the laboratory conditions defined
in the present European standard.

identification de l'échantillon : Sample identification

Nom du produit
Name of the product : STERANIOS 20%

Numéro de lot
Batch number : G 043-17

Fabricant
Manufacturer : LABORATOIRES ANIOS

Date de réception au laboratoire : Le 27/04/05

Receipt date at the laboratory : On the 05/04/27

Conditions de stockage au laboratoire : T° ambiante et obscurité

Storage conditions at the laboratory : room temperature and darkness

Période d'essai : Du 19/07/05 au 05/08/05

Period of analysis : From 05/07/19 to 05/08/05

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Conditions expérimentales '.Experimental conditions
Température de l'essai
Test temperature : 20°C ± 1°C
Temps de contact
Contact time : 5 minutes ± 10s
Diluant du produit lors des essais : eau dure à 30°français
Diluent of the product used during the test '.hard water
Apparence du produit et de ses dilutions : préparation physiquement
homogène et stable pendant l'essai
Appearence product dilutions : Preparation physically
homogeneous and stable during test

Souches testées (Strains tested) : Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442

Staphylococcus aureus ATCC 6538
Enterococcus hirae ATCC 10541
Substance interférente : Albumine bovine à 0.3 g/l.
Interfering substance : 0.3 g/l BSA

Stabilité du mélange produit et substances interférantes: absence de précipité pendant

l'essai
Stability of the mixturef product and interfering substance) : precipitate absent
throughout the test

Méthode par filtration: Filtration method

Nature des membranes : MILLIPORE HAWG en ester de

cellulose, 0.45 u , stérile
Nature of the membranes : MILLIPORE HAWG made of
cellulose ester, 0.45/um, sterile
Liquide de rinçage : eau distillée Tween 80 + eau distillée
Rinsing liquid : distilled water Tween 80 +
distilled water
Nombre des rinçages
Rinsing number : 3+1
Volume utilisé pour chaque rinçage
Volume used for each rinsing : 100 ml
Neutralisant ajouté au milieu de dénombrement : Néant
Neutraliser agent added to the counting medium : None

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Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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 Résultats : Results

O Essais de validation des conditions expérimentales : Validation tests

Vérification de la méthodologie et validation de la méthode par filtration pour la
concentration d'essai de 1 % du produit STERANIOS 20% soumis à l'essai.

Checking of the method and validation of the method by flltration for the
1% test concentration of the product STERANIOS 2O% to be tested.
Nombre de cellules viables (UFC/ml)
Suspension Suspension Validation Suspension Validation des Témoin de Essai de
filtration sur
Souches test d'essai d'essai/10 suspension de validation conditions l'inactivation
membrane
bactérienne /10 expérimentale par filtration
Tested strains Validation Expérimenta sur
Bacterial test Bacterial test Validation l conditions membrane
suspension suspension bacterial
bacterial Experimental control
suspension conditions Method
suspension validation
/10
N No NV B
NVO

Pseudomonas aeruginosa 2,1 108 2,1 107 8,9 102 8,9 101 9,9 101 1,1 1,0 102

Enterococcus hirae 1.9 108 1.9 107 3,9 102 3,9 101 5,8 101 6,3 101 6,2 101

Staphylococcus aureus 2,8 108 2,8 107 8,9 102 8,9 101 1,1 102 1.3 1(T 1,4 102

Pour les souches soumises à l'essai - For the strains to be tested

N est compris entre 1,5 x 108 UFC/ml et 5 x 108 UFC/ml
is comprised between 1.5x 108 CFU/ml and Sx 108 CFU/ml
NO est compris entre 1,5 x 107 UFC/ml et 5 x 107 UFC/ml
is comprised between 1.5 xlO 7 CFU/ml and 5x 107 CFU/ml
NV est compris entre 3 x 102 UFC/ml et 1.6 x 103 UFC/ml
is comprised between 3 x 102 CFU/ml and 1.6x103 CFU/ml
NVO est compris entre 3 x 101 UFC/ml et 1.6 x 102 UFC/ml
is comprised between 3 x W1 CFU/ml and 1.6x102 CFU/ml
A, B, C est supérieur ou égal à 0.5 x NVo
is higher or equal to 0.05 x Nv
La neutralisation est validée avec la méthode par filtration pour la concentration d'essai de 1% du produit
STERANIOS 20% et pour les souches soumises à l'essai.
The neutralization is validated with the filtration method for the 1% test concentration of the product
STERANIOS 20% and the strains tested.

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Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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 © Essais d'activité bactéricide - Evaluation of bactericidal activity :

Nombre de cellules viables (UFC/ml) pour le mélange

d'essai (Na) pour les concentrations de : %(v/v)
Souches test
Tested strains Number of the viable cells (CFU/ml)for the test mixture
(Na) for the concentrations of : %(v/v)
0,02 0,05 0,2 0,5

Pseudomonas aeruginosa > 3,31 03 <1,410 2 <1,410 2

Enterococcus hirae > 3,310s > 3,310 s <1,410 2

Staphylococcus aureus > 3,3 10s 1,9 102 <1,410 2

Réduction du nombre de cellules viables à la concentration d'essai.

R = Log NO - Log Na
Reduction of the number of viable cells at the test concentration
R = Log No - Log Na
0,02 0,05 0,2 0,5

Pseudomonas aeruginosa < 3,8 log > 5,1 loq >5,1 log

Enterococcus hirae < 3,8 log < 3,8 log > 5,1 loq

Staphylococcus aureus < 4,0 log 5,1 log > 5,3 loq

Conclusion :

Conformément à la norme NF EN 13727 (juillet 2004) STERANIOS 20% lorsqu 'il

est dilué à 0.5 % (v/v) dans de l'eau dure, présente une activité bactéricide en 5
minutes de contact à 20 °C en conditions de propreté vis-à-vis des souches de
référence : Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Enterococcus
hirae

In compliance with the European standard NF EN 13727 (July

2004),STERANIOS 20% diluted at O.5% (v/v) in hard water , presents a
bactericidal activity in a 5 minutes contact time at 20 °C in clean conditions
against the referenced strains of: Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus
aureus, Enterococcus hirae.

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Page 36
CENTRAL PHARMACY
FOR PARIS HOSPITALS
Head office
7, rue du Fer-à-Moulin BP 09
75221 PARIS Cedex 05
Switchboard: +33 (0)1 43 37 11 00
Fax: +33 (0)1 43 37 95 97
Telex: 204 203 F PHARMAP

BIOLOGICAL CONTROL LABORATORY

Secretariat:
Extension: 308

Laboratory:
Extension: 251

Jacques Christian DARBORD

Professor of Microbiology
Hospital Pharmacist

Paris, 13th February 1993

Ref : JCD/VLJ/92004

SUBJECT OF REQUEST:

Study of the sporicidal activity of "STERANIOS 20% Concentré", in

presence of interfering substances (Soiling) according to standard
AFNOR NF T 72171 (November 1988)

HEADS OF RESEARCH

V. LE JUEZ Professor J.C. DARBORD

Technical Manager Bacteriology Laboratory

This report includes 4 numbered pages.

Industrial Unit:
13, rue Lavoisier
92023 NANTERRE Cedex
Switchboard: +33 (0)1 47 29 13 13
Fax: +33 (0)1 47 25 36 02
Telex: 613 252 F SOLU AP

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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 -2-

JCD/VLJ/92004 of 13th February 1993

PRINCIPLE

The test was conducted in compliance with the protocol described in French standard NF T
72171: Water-miscible antiseptics and disinfectants used in liquid state.
Determination of bactericidal activity in presence of interfering substances, (spectrum 4).
Membrane filtering method.

SAMPLE IDENTIFICATION

Name of product: STERANIOS 20% Concentré

Manufacturer: Laboratoire ANIOS
Date of reception at laboratory: 04/01/92
Storage conditions at laboratory: ambient temperature and darkness
Analysis period: February 1992

TEST CONDITIONS

Test temperature: 20°C

Contact time: 5 minutes

Product diluent:

recommended by manufacturer: distilled water

used during tests: distilled water

Neutralisation: 300 ml distilled water, to which 1 % tween 80 and 100 ml water was added

membranes: Millipore 0.45 µm HA Type

Neutralising agent added mid-count: none

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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 -3-

JCD/VLJ/92004 of 13th February 1993

PRELIMINARY TEST

Product concentration levels Strains, original collection and number in

tested in % (V/V) collection
N N' n'
Pseudomonas aeruginosa
2.5% 157 175 173
CIP A 22
Escherichia coli
2.5% 222 225 180
CIP 54 127
Staphylococcus aureus
2.5% 264 245 174
CIP 53154
Enterococcus hirae
2.5% 196 184 178
CIP 5 855

Key:
N: inoculum test; N': filtering reference; n': filtering test.

ACTUAL TEST

X
Concentration in % (v/v) in contact with bacteria
Strains N N' n'
0.25 0.5 1 2 2.5 min pH max pH
Pseudomonas aeruginosa
157 175 173 0 0 0 0 0 6.4 7
CIP A 22
Escherichia coli
222 225 180 70 19 1 0 0 6.4 7
CIP 54 127
Staphylococcus aureus
264 245 174 5 0 0 0 0 6.4 7
CIP 53154
Enterococcus hirae
196 184 178 + 15 0.5 0 0 6.4 7
CIP 5 855

Key : N' ≥ 0.5 N

n' ≥ 0.5 N'
X ≤ N'

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 -4-

JCD/VLJ/92004 of 13th February 1993

CONCLUSION
The "STERANIOS 20% Concentré" product has bactericidal activity, spectrum 4, in presence
of interfering substances (Albumin 1%, hard water at 30°F) according to standard AFNOR
NF T 72171 when diluted at 5% (v/v).

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 ASSISTANCE f¿* HÔPITAUX
PUBLIQUE^gr DE P A R I S
PHARMACffi CENTRALE DES HÔPITAUX DE PARIS

PHARMACIE CENTRALE
DES HÔPITAUX DE PARIS
Siège Social
7, rue du Fer-à-Moulin BP 09
75221 PARIS Cedex 05
Standard: 33 (1)43 37 11 00
Télécopie: 33 (1)43379597
Télex : 204 203 F PHARMAP

LABORATOIRE DES CONTRÔLES

BIOLOGIQUES Paris, le 13 Février 1992
Secrétariat :
Poste : 308
Laboratoire :
Poste : 251 Réf : JCD/VLJ/92004
Jacques Christian DARBORD
Professeur de Microbiologie
Pharmacien des Hôpitaux
OBJET DE LA DEMANDE

Etude de l'activité bactéricide de STERANIOS 20 %

Concentré en présence de substances interférentes

(conditions de Saleté) selon la norme AFNOR NF T 72171

(novembre 88).

RESPONSABLES DE L'ETUDE

V. LE JUEZ Professeur U.C. DARBORD

Responsable technique Bactériologie

Ce rapport est composé de 4 pages numérotées

Unité Industrielle :
13. rue Lavoisier
92023 NANTERRE Cedex
Standard: 33 (1)4729 13 13
Télécopie: 33 (1)47 25 36 02
Télex:613252FSOLUAP

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 JCD/VLJ/92004 du 13 Février 1992

PRINCIPE

L'essai a été réalisé selon le protocole décrit dans la norme française homologuée
NF T 72171 : Antiseptiques et désinfectants utilisés à l'état liquide, miscibles à l'eau.

Détermination de l'activité bactéricide en présence de substances interférentes,

(spectre 4).

Méthode par filtration sur membrane.

IDENTIFICATION DE L'ECHANTILLON

Nom du produit : STERANIOS 20 % Concentré

Fabricant : Laboratoire ANIOS

Date de réception au laboratoire : 04/01/92

Conditions de stockage au laboratoire : température ambiante et obscurité

Période d'analyse : Février 1992

CONDITIONS OPERATOIRES

Température d'essai : 20°C

Temps de contact : 5 minutes

Substances interférentes : Albumine 1 % - eau dure 30°F

Diluant du produit :

recommandé par le fabricant : eau distillée

utilisé lors des essais : eau distillée

Neutralisation : 300 ml d'eau distillée additionnée de 1 % de tween 80 et 100 ml d'eau

distillée.

membranes : Millipore 0,45 ^irn Type HA

Neutralisant ajouté au milieu de dénombrement : néant

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 JCD/VLJ/92004 du 13 Février 1992

ESSAI PRELIMINAIRE

Concentrations essayées Souches, collection d'origine N N' n1

du produit en % (VA/) et numéro dans la collection
2,5% Pseudomonas aeruginosa 157 175 173

CIPA 22
2,5 % Escherichia coli 222 225 180

CIP 54 127
2,5 % Staphylococcus aureus 264 245 174

CIP 53154
2,5 % Enterococcus hirae 196 184 178

CIP 5 855

Interprétation :

N : contrôle inoculum ; N' : témoin filtration ; n' : essai filtration.

ESSAI PROPREMENT DIT

X
1
Souches N N n' concentration en % (v/v) au
contact avec les bactéries

0,25 0 , 5 1 2 2,5 pH min pH max

Pseudomonas aeruginosa 157 175 173 0 0 0 0 0 .6,4 7

CIP A 22
Escherichia coli 222 225 180 70 19 1 0 0 6,4 7

CIP 54 127
Staphylococcus aureus 264 245 174 5. 0 0 0 0 6,4 7

CIP 53154
Enterococcus hirae 196 184 178 + la 0,5 0 0 6,4 7

CIP 5855

Interprétation : N'> 0,5 N

n' > 0,5 N1

>
X<N'

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Page 43
 JCD/VLJ/92004 du 13 Février 1992
CONCLUSION

Le produit STERANIOS à 20 % Concentré présente une activité bactéricide, spectre

4, en présence de substances ¡nterférentes (Albumine 1%, eau dure 30°F), selon la
norme AFNOR NF T 72171 à la concentration 0,5 % (v/v).

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 44
 Laboratoire de Microbiologie

Lille-Hellemmes, le 20 mars 2006

Lille Hellemmes, on the 20th march 2006

Objet de la demande n°20052

Study n°2OOS2 GB

Antiseptiques et désinfectants chimiques. Essai quantitatif de suspension pour

l'évaluation de l'activité mycobactéricide de STERANIOS 20% . Méthode d'essai
et prescriptions (phase 2 - étape 1) selon une adaptation de la norme NF EN
14348 (juin 2005) . Application aux désinfectants chimiques utilisée en médecine
y compris les désinfectants pour instruments
Méthode par dilution neutralisation.
Antiseptics and chemical disinfectants. Quantitative suspension test for thé
evaluation of mycobactericidal activity of STERANIOS 20%. Test method and
requirements (phase 2 -step I) according to an adaptation of the standard
NF EN 14348 ( june 2005). Application to chemical disinfectants in the
medical area including instruments disinfectants.
Method by dilution neutralization.

Responsables de l'étude:

FyDurarfd
Responsable icrobiologie Pharmacien Responsable Microbiologie
SrV^
Microbiol Manager Pharmacist,microbiology Manager

Ce document comporte 5 pages numérotées et aucune annexe.

This report is made of 5 numbered pages and 0 annexe.
study n°- 20052 GB - Demande n° 20052 Page 1/5

Laboratoires ANIOS
Pavé du Moulin - 59260 Lille-Hellemmes
Tél. +33 3 20 67 67 67 - Fax : +33 3 20 67 67 68
Siret N° 458 501 921 00043 - SA au capital de 232.800 €

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 45
Introduction : Introduction

L'essai a été réalisé selon la méthodologie d'essai décrite dans la norme européenne EN
14348 «Antiseptiques et désinfectants chimiques ».Essai quantitatif de suspension
pour l'évaluation de l'activité mycobactéricide des désinfectants chimiques utilisés en
médecine y compris la désinfection des instruments .Phase 2 - Etape 1.
Détermination de l'activitén tuberculocide dans les conditions de laboratoire définies par
la présente norme européenne.

The test was realised according to the test method described in the European
standard NF EN 14348 « Chemical disinfectants and antiseptics-Quantitative
suspension test for the evaluation of mycobactericidal activity of chemical
disinfectant in the medical area including instrument disinfectants ». Phase 2
- Etape 1
Determination of the tuberculocidal activity in laboratory conditions defined
by the present European standard.

identification de l'échantillon : Sample identification

Nom du produit
Name of the product : STERANIOS 20%

Numéro de lot
Batch number : G 053-17

Fabricant
Manufacturer : LABORATOIRES ANIOS

Date de réception au laboratoire : Le 09/11/05

Receipt date at the laboratory : On the 05/11/09

Conditions de stockage au laboratoire : T° ambiante et obscurité

Storage conditions at the laboratory : room temperature and darkness

Période d'essai : Du 10/02/06 au 20/03/06

Period of analysis : From 06/02/10 to 06/03/20

study n°- 20052 GB - Demande n° 20052 Page 2/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 46
Conditions expérimentales -.Expérimental conditions

Température de l'essai
Test température : 20°C ± 1°C
Temps de contact
Contact time : 10 et 60 minutes! 10s
Diluant du produit lors des essais : eau dure
Diluent of the product used during the test : hard water
Apparence du produit et de ses dilutions : préparation physiquement homogène
et stable pendant l'essai
Appearence product dilutions : Preparation physically
homogeneous and stable during test
Souche testée (Strain tested) : Mycobacterium terrae ATCC1S755
Substance ¡nterferente : Albumine bovine à 0.3 g/l.
Interfering substance : 0.3 g/l BSA

Stabilité du mélange produit et substances interférentes: absence de précipité pendant l'essai

Stability of the mixturef product and interfering substance) : precipitate absent
throughout the test
Méthode parfiltration:Filtration method

Nature des membranes : MILLIPORE HAWG en ester de

cellulose, 0.45 u , stérile
Nature of the membranes : MILLIPORE HAWG made of
cellulose ester, OAS/jm, sterile
Liquide de rinçage : eau distillée Tween 80 + eau distillée
Rinsing liquid : distilled water Tween 80 +
distilled water
Nombre des rinçages
Rinsing number : 3+1
Volume utilisé pour chaque rinçage
Volume used for each rinsing : 100 ml
Neutralisant ajouté au milieu de dénombrement.... : Néant
Neutralizer agent added to the counting medium : None

study n°- 20052 GB - Demande n° 20052 Page 3/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Page 47
 Résultats : Results
O Essais de validation des conditions expérimentales : Validation tests

Vérification de la méthodologie et validation de la méthode par dilution

neutralisation pour la concentration d'essai de 10% du produit STERANIOS 20%
soumis à l'essai.

Checking of the method and validation of the method by dilution

neutralization for the 1O % test concentration of the product STERANIOS
2O% to be tested.

Nombre de cellules viables (UFC/ml)

Suspension Suspension d'essai Suspension de Validation des Non toxicité Validation de la

Souche test d'essai /10 validation conditions du méthode
Bacterial test expérimentales neutralisant
Tested strain
suspension Validation
Bacterial test /10 Experimental NeutraUzer
suspension Method
suspension conditions toxidty
control validation
control

B
N

Mycobacterium terrae 1.510 9 1.5 108 8.2 101 7.6101 8.1 101 7.5101

Pour la souche soumise à l'essai - For the strain to be tested

N est compris entre 1,5 x 109 UFC/ml et 5 x 109 UFC/ml
is comprised between 1.5 x 109 CFU/ml and 5 x 109 CFU/ml
Nvo est compris entre 3 x 101 UFC/ml et 1,6 x 102 UFC/ml
is comprised between 3 x 10¡ CFU/ml and 1.6x 1(P CFU/ml
A,B,C sont supérieurs ou égaux à 0,5 x Nvo
is higher or equal to 0.05 x Nv
NO est supérieur ou égal à 1,4 107 UFC/ml -7,15 D N0 D (log N- 1,3) Log N0 = 8.20
is equal or greater 1.4 107 CFU/ ml - 7.15 <No<(logN- 1.3)
La neutralisation est validée avec la méthode de filtration pour la concentration d'essai de 10 % du produit STERANIOS
20% et pour la souche soumise à l'essai.
The neutralization is validated with the filtration method for the 1O % test concentration of the product
STERANIOS 2O% and the strain tested

study n°- 20052 GB - Demande n° 20052 Page 4/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 48
 © Essais d'activité tuberculocide - Evaluation of tuberculoddal activitu :

60 minutes
Nombre de cellules viables (UFC/ml) pour le mélange d'essai
Souche-test (Na) pour les concentrations de : %(v/v)
Tested strain Number of the viable cells (CFU/ml)for the test mixture
(Na) for the concentrations of: %(v/v)
2.5 5.0 10

Mycobacterium terras <1.410 2 < 1.4 102 < 1.4102

Réduction du nombre de cellules viables à la concentration d'essai. R = Log N0 - Log Na
Reduction of the number of viable cells at the test concentration
R = Log No - Log Na
2.5 5.0 10

Mycobacterium terrae >6.1 loa >6.1 log >6.1 log

10 minutes
Nombre de cellules viables (UFC/ml) pour le mélange d'essai
Souche-test (Na) pour les concentrations de : %(v/v)
Tested strain Number of the viable cells (CFU/ml)for the test mixture
(Na) for the concentrations of : %(v/v)
2.5 5.0 10

Mycobacterium terrae >3.3 104 4.0 102 < 1.4 102

Réduction du nombre de cellules viables à la concentration d'essai. R = Log N0 - Log Na
Reduction of the number of viable cells at the test concentration
R = Log No - Log Na
2.5 5.0 10

Mycobacterium terrae < 3.7 log 5.6 log >6.1 log

Conclusion :
Conformément à la norme NF EN 14348 ( juin 2005), STERANIOS 20% dilué (v/v) dans
de l'eau dure à une concentration G 2.5% , présente une activité tuberculocide en 60
minutes de contact à 20 °C et dilué à 5% présente une activité tuberculocide en 10
minutes de contact à 20 °C en condition de propreté vis-à-vis de la souche de référence
: Mycobacterium terrae ATCC 15755
In compliance with the European standard NF EN 14348 ( juin 2005),
STERANIOS 2O% diluted at concentration £ 2.5% (v/v) in hard water ,
presents a tuberculocidal activity in a 6O minute contact time at 20 °C and
diluted at 5% presents a tuberculocidal activity in 10 minute in clean
condition, against the referenced strain of: Mycobacterium terrae ATCC
15755.

study n°- 20052 GB - Demande n° 20052 Page 5/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 49
Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre
EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 50
 Laboratoire de Microbiologie

Lille-Hellemmes, le 07 février 2006

Lille Hellemmes, on thé ^february 2006

Objet de la demande n°19797

Study n°19797GB

Antiseptiques et désinfectants chimiques. Essai quantitatif de suspension pour

l'évaluation de l'activité mycobactéricide de STERANIOS 20% . Méthode d'essai
et prescriptions (phase 2 - étape 1) selon la norme N F EN 14348 (juin 2005) .
Application aux désinfectants chimiques utilisée en médecine y compris les
désinfectants pour instruments
Méthode par dilution neutralisation.
Antiseptics and chemical disinfectants. Quantitative suspension test for thé
evaluation of mycobactericidal activity of STERANIOS 2O%. Test method
and requirements (phase 2 -step I) according to the standard NF EN 14348
( june 2005). Application to chemical disinfectants in the medical area
including instruments disinfectants.
Method by dilution neutralization.

Responsables de l'étude:

C.PIucbart F. Dufaiid
Respon "Labjafatojérde-Mcrobiologie Pharmacien Responsable Microbiologie
Microbio itçry Manager Pharmacist Jmcriomology Manager

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Laboratoires ANIOS
Pavé du Moulin • 59260 Lille-Hellemmes
Tél. +33 3 20 67 67 67 - Fax : +33 3 20 67 67 68
Siret N° 458 501 921 00043 - SA au capital de 232.800 €

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 51
Introduction : Introduction

L'essai a été réalisé selon la méthodologie d'essai décrite dans la norme

européenne EN 14348 «Antiseptiques et désinfectants chimiques ».Essai
quantitatif de suspension pour l'évaluation de l'activité mycobactéricide des
désinfectants chimiques utilisés en médecine y compris la désinfection des
instruments Phase 2 - Etape 1.
Détermination de l'activité mycobactéricide dans les conditions de laboratoire
définies par la présente norme européenne.

The test was realised according to the test method described in the European
standard NF EN 14348 « Chemical disinfectants and antiseptics-Quantitative
suspension test for the evaluation of mycobactericidal activity of chemical
disinfectant in the medical area including instrument disinfectants ». Phase 2
- Etape 1
Determination of the mycobactericidal activity in laboratory conditions
defined by the present European standard.

identification de l'échantillon : Sample identification

Nom du produit
Name of the product : STERANIOS 20%

Numéro de lot
Batch number : G 053-17

Fabricant
Manufacturer : LABORATOIRES ANIOS

Date de réception au laboratoire : Le 20/06/05

Receipt date at the laboratory : On the 05/06/20

Conditions de stockage au laboratoire : T° ambiante et obscurité

Storage conditions at the laboratory : room temperature and darkness

Période d'essai : Du 08/11/05 au 04/01/06

Period of analysis : From 05/11/08 to 06/01/04

study n°- 19797 GB - Demande n° 19797 Page 2/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 52
Conditions expérimentales -.Experimental conditions

Température de l'essai
Test temperature : 20°C + 1°C
Temps de contact
Contact time : 60 minutes ± 10s
Diluant du produit lors des essais : eau dure
Diluent of the product used during the test : hard water
Apparence du produit et de ses dilutions : préparation physiquement
homogène et stable pendant l'essai
Appearence product dilutions : Preparation physically
homogeneous and stable during test

Souche testée (Strain tested) : Mycobacteríum avium ATCC 15769

Substance interférante : Albumine bovine à 0.3 g/l.
Interfering substance : 0.3 g/l BSA

Stabilité du mélange produit et substances interférentes: absence de précipité pendant

l'essai
Stability of the mixturef product and interfering substance) : precipitate absent
throughout the test
Méthode par dilution neutralisation: Dilution neutralization method
Nature du neutralisant utilisé : Lécithine 0.3% Tween 80 3%
Thiosulfate Na 0.5 % L Histidine
0.1% Saponine 3% Peptone 0.1%
NaCI 0.85%
Nature of the neutralizer agent used : Lécithine 0.3% Tween 80 3%
Thiosulfate Na 0.5 % L Histidine
0.1% Saponine 3% Peptone 0.1%
NaCI 0.85%

Neutralisant ajouté au milieu de dénombrement : 10%

Neutralizer agent added to the counting medium : 10%

study n°- 19797 GB - Demande n° 19797 Page 3/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 53
 Résultats : Results
O Essais de validation des conditions expérimentales : Validation tests

Vérification de la méthodologie et validation de la méthode par dilution

neutralisation pour la concentration d'essai de 10% du produit STERANIOS
20% soumis à l'essai.
Checking of the method and validation of the method by dilution
neutralization for the 10 % test concentration of the product STERANIOS
2O% to be tested.

Nombre de cellules viables (UFC/ml)

Suspension Suspension Suspension de Validation des Non toxicité Validation de la

Souche test d'essai d'essai validation conditions du méthode
710 expérimentale neutralisant
Tested strain Validation
Bacterial test Bacterial test Neutralizer
suspension Suspension Method
suspension toxicity
/10 Experimental validation
conditions control
control
B
N

Mycobacterium avium 2.2 109 2.2 108 1.3102 1.4 102 1.4102 1.3 102

Pour la souche soumise à l'essai - For the strain to be tested

N est compris entre 1,5 x 109 UFC/ml et 5 x 109 UFC/ml
is comprised between 1.5 x 109 CPU/ml and 5 x 109 CPU/ml
NVO est compris entre 3 x 101 UFC/ml et 1,6 x 102 UFC/ml
is comprised between 3 x 101 CPU/ml and 1.6 xlO 2 CPU/ml

A,B,C sont supérieurs ou égaux à 0,5 x Nvo

is higher or equal to 0.05 x Nv
No est supérieur ou égal à 1,4 107 UFC /ml - 7,15 < N0 ¿ (log N - 1,3)
is equal or greater 1.4 107 CPU/ ml - 7.15 <No <flogN- 1.3)
La neutralisation est validée avec la méthode de dilution neutralisation pour la concentration d'essai de 10 % du
produit STERANIOS 20% et pour la souche soumise à l'essai.
The neutralization is validated with the dilution neutralization method for the 1O % test concentration of
the product STERANIOS 2O% and the strain tested

study n°- 19797 GB - Demande n° 19797 Page 4/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 54
 Essais d'activité mycobactéricide - Evaluation of mucobactericidal activity :

Nombre de cellules viables (UFC/ml) pour le mélange d'essai

(Na) pour les concentrations de : %(v/v)
Souche-test
Tested strain Number of the viable cells (CPU/nil) for the test mixture
(No) for the concentrations of: %(v/v)
2.5 5 10
Mycobacterium avium 3.3 106 1.6 106 <1.410 2

Réduction du nombre de cellules viables à la concentration d'essai. R = Log N0 - Log Na

Reduction of the number of viable cells at the test concentration
R = Log No - Log Na
2.5 5 10
Mycobacterium avium 1.8 log 2.1 log >6.2 log

Conclusion :

Conformément à la norme NF EN 14348 (juin 2005), STERANIOS 20% dilué (v/v)

dans de l'eau dure à la concentration de 10%, présente une activité
mycobactéricide en 60 minutes de contact à 20 °C en condition de propreté vis-à-
vis de la souche de référence : Mycobacterium avium.

In compliance with the European standard NF EN 14348 ( juin 2005),

STERANIOS 2O% diluted at 1O% (v/v) in hard water , presents a
mycobactericidal activity in a 6O minute contact time at 20 °C in clean
condition against the referenced strain of: Mycobacterium avium.

study n°- 19797 GB - Demande n° 19797 Page 5/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 55
Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre
EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 56
 Laboratoire de Microbiologie

Lille-Hellemmes, le 10 février 2006

Lille Hellemmes, on the 10th febmary 2005

Objet de la demande n°19798

Study n°19798 GB

Antiseptiques et désinfectants chimiques. Essai quantitatif de surface pour

l'évaluation de l'activité tuberculocide de STERANIOS 20% . Méthode d'essai et
prescriptions (phase 2 - étape 2) selon le projet de norme pr EN 14563 (mai
2005). Application aux désinfectants chimiques pour l'instrumentation utilisée en
médecine humaine.
Méthode par dilution neutralisation.
Antiseptics and chemical disinfectants. Quantitative carrier test for thé
evaluation of tuberculocidal activity of STERANIOS 2O%. Test method and
requirements (phase 2 -step 2) according to the pr EN 14563 (may 2005).
Quantitative carrier test for the evaluation of tuberculocidal activity of
chemical disinfectants used for instruments in the medical area.
Method by dilution neutralization.

Responsables de l'étude:

F. Qdraifd
Respori; Microbiologie Pharmacien Restónsable Microbiologie
Microbiology ry Manager Pharmacis^Microbiology Manager

Ce document comporte 5 pages numérotées et aucune annexe.

This report is made of 5 numbered pages and 0 annexe.

study n°- 19798 GB - Demande n° 19798 Page 1/5

Laboratoires ANIOS
Pavé du Moulin - 59260 Lille-Hellemmes
Tél. +33 3 20 67 67 67 - Fax : +33 3 20 67 67 68
Siret N° 458 501 921 00043 - SA au capital de 232.800 €

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 57
Introduction : Introduction

L'essai a été réalisé selon la méthodologie d'essai décrite dans le projet de la

norme européenne EN 14563 « Antiseptiques et désinfectants chimiques ».Essai
quantitatif de surface pour l'évaluation de l'activité mycobactéricide ou
tuberculocide des désinfectants chimiques utilisés pour les instruments en
médecine Phase 2 - Etape 2.
Détermination de l'activité mycobactéricide dans les conditions de laboratoire
définies par la présente norme européenne.

The test was realised according to the test method described in the project of
the European standard EN 14563 "Chemical disinfectants and antiseptics-
Quantitative carrier test for the evaluation of mycobactericidal or
tuberculocidal activity of chemical disinfectants used for instruments in the
medical area - Phase 2 Step 2 " .
Determination of the mycobactericidal activity in laboratory conditions
defined by the present European standard.

Identification de l'échantillon : Sample identification

Nom du produit
Name of the product : STERANIOS 20%

Numéro de lot
Batch number : G 053-17

Fabricant
Manufacturer : LABORATOIRES ANIOS

Date de réception au laboratoire : Le 20/06/05

Receipt date at the laboratory : On the 05/06/20

Conditions de stockage au laboratoire : T° ambiante et obscurité

Storage conditions at the laboratory : room temperature and darkness

Période d'essai : Du 22/07/05 au 12/08/05

Period of analysis : From 05/07/22 to 05/08/12

study n°- 19798 GB - Demande n° 19798 Page 2/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 58
Conditions expérimentales -.Expérimental conditions

Température de l'essai
Test température : 20°C ± 1°C
Temps de contact
Contact time : 10 minutes ± 10s
Diluant du produit lors des essais : eau dure
Diluent of the product used during the test : hard water
Apparence du produit et de ses dilutions : préparation physiquement
homogène et stable pendant l'essai
Appearence product dilutions : Preparation physically
homogeneous and stable during test

Souche testée (Strain tested) : Mycobacteríum terrae ATCC15755

Substance interférante : Albumine bovine à 0.3 g/l.

Interfering substance : 0.3 g/l BSA
Stabilité du mélange produit et substances interférentes: absence de précipité pendant
l'essai
Stability of the mixturef product and interfering substance) : precipitate absent
throughout the test
Méthode par dilution neutralisation: Dilution neutralization method
Nature du neutralisant utilisé : Lécithine 0.6% Tween 80 6%
Thiosulfate Na 1 % L Histidine 0.2%
Peptone 0.2% NaC11.7% Phosphate
disodique 1.8% Phosphate
monopotassique 0.3%
Nature of the neutralizer agent used : Lécithine 0.6% Tween 80 6%
Thiosulfate Na 1 % L Histidine
0.2% Peptone 0.2% NaCl 1.7%
Phosphate disodic 1.8%
Phosphate monopotassic 0.3%

Neutralisant ajouté au milieu de dénombrement : Néant

Neutralizer agent added to the counting medium : None

study n°- 19798 GB - Demande n° 19798 Page 3/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 59
 Résultats : Results

O Essais de validation des conditions expérimentales : Validation tests

Vérification de la méthodologie et validation de la méthode par dilution

neutralisation pour la concentration d'essai de 5% du produit STERANIOS 20%
soumis à l'essai.

Checking of the method and validation of the method by dilution

neutralization for the 5 % test concentration of the product STERANIOS
2O% to be tested.

Nombre de cellules viables (UFC/ml)

Suspension Suspension de Validation des Non toxicité Validation de la Témoin eau
Souche test d'essai validation conditions du méthode
/10 expérimentales neutralisant
Tested strain
Validation Water control
Bacterial test Experimental Neutralizer
bacterial Method
suspension conditions control toxicity
suspension validation
control
/10

N NVO B NW

Mycobacterium terrae 1.9 109 6.8 101 6.8 101 6.0 101 6.6 101 1.6107

Pour la souche soumise à l'essai - For the strain to be tested

N est compris entre 1,5 x 109 UFC/ml et 5 x 109 UFC/ml
is comprised between 1.5 x 109 CFU/ml and 5xl0 9 CFU/ml
NVO est compris entre 3 x 101 UFC/ml et 1,6 x 102 UFC/ml
is comprised between 3 x 101 CFU/ml and 1.6x102 CFU/ml
A,B,C sont supérieurs ou égaux à 0,5 x Nvo
is higher or equal to 0.05 x Nv
Nw est supérieur ou égal à 1,4 107 U F C / m l - 7,15 < Nw< (log N - 1,3)
is equal or greater 1.4 107 CPU / ml- 7.15 <Nw < (logN - 1.3)
La neutralisation est validée avec la méthode de dilution neutralisation pour la concentration d'essai de 5 % du
produit STERANIOS 20% et pour la souche soumise à l'essai.
The neutralization is validated with the dilution neutralization method for the S % test concentration of the
product STERANIOS 2O% and the strain tested

study n°- 19798 GB - Demande n° 19798 Page 4/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 60
 © Essais d'activité tuberculocide - Evaluation of tuberculocidal activitu :

Nombre de cellules viables (UFC/ml) pour le mélange d'essai

(Na) pour les concentrations de : %(v/v)
Souche-test
Number of the viable cells (CFU/ml)for the test mixture
Tested strain (Na) for the concentrations of : %(v/v)
1 2.5 5

Mycobacterium terrae 3.0 106 2.7 105 1.9102

Réduction du nombre de cellules viables à la concentration d'essai. R = Log Nw - Log Na

Reduction of the number of viable cells at the test concentration
R = Log Nw - Log Na
1 2.5 5

Mycobacterium terrae 0.7 log 1.8 log 4.9 log

Conclusion :

Conformément à la norme prEN 14563 (mai 2005), STERANIOS 20% dilué (v/v)
dans de l'eau dure, présente une activité tuberculocide en 10 minutes de contact
à 20 °C à la concentration de 5% en condition de propreté pour la désinfection
des instruments vis-à-vis de la souche de référence : Mycobacterium terrae .

In compliance with the European standard prEN 14563 (may 2005),

STERANIOS 2O% diluted (v/v) in hard water , presents a tuberculocidal
activity in a 1O minute contact time at 20 °C at 5% in clean condition
according to the requirements for an instrument disinfection against the
referenced strains of: Mycobacterium terrae..

study n°- 19798 GB - Demande n° 19798 Page 5/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Hospital Hygiene Department
Direct line: 20 87 78 22

INSTITUT PASTEUR DE LILLE

STATE-APPROVED PUBLIC UTILITY FOUNDATION

Bactericidal activity on Mycobacterium tuberculosis hominis:

STERANIOS 20 % CONCENTRE
Bactec TB Technique
Equipment:
pH: 3.08
Bactec 460 (Becton Dickinson)
Liquid culture medium: 7H12 Middlebrook Medium
Mycobacterium tuberculosis hominis (strain from a patient).

Principle:
The Bactec TB medium (12B) is a an enriched basal Middlebrook 7H9 medium. The
mycobacterium use a 14C-labeled fatty acid present in the medium and release 14C02 into the
atmosphere.

When mycobacterial growth occurs in the 12B flasks, the Bactec 460 measures the rate of
radioactivity (due to the 14C02 released) and translates it into numerical format on a scale of 0
to 999.

These values are designated a Growth Index (GI). The GI increases proportionally to the
number of bacteria.

After action of the disinfectant with the Mycobacterium tuberculosis suspension, the
remaining Mycobacteria are counted by injecting each diluted germ suspension into one or
two 12B flasks. An increase in the GI corresponds to the presence of Mycobacteria.

This technique is simple. It minimises risks for the operator and the risk of contaminating
culture medium is virtually nil.

Methods:

1) Inoculum count

Preparation of a suspension with 100 mg /ml sterile distilled water using a pure culture of
Mycobacterium tuberculosis on Coletsos medium.

Dilute this "starter" solution in multiples of 10, up to 10-9.

This document includes 8 pages

1, rue du Professeur Calmette - B.P. 245 - F 59019 Lille Cedex

Tel. 20.87.78.00 – Fax 20.87.79.06 - SIRET 783 696834 00010

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 - 2 -
2) Preparation of different concentrations

used at 2.5 %, 5 % and 10 %.

Prepare solutions at twice the concentration level, i.e. 5 %, 10 %, 20 %

3) Contact for 5, 10, 15 minutes of:

- 200 µl of STERANIOS 20 % CONCENTRE solution at 20 % with 200 µl

Mycobacterium tuberculosis suspension.

- 200 µl of STERANIOS 20 % CONCENTRE solution at 10 % with 200 µl

Mycobacterium tuberculosis suspension.

- 200 µl of STERANIOS 20 % CONCENTRE solution at 5 % with 200 µl

Mycobacterium tuberculosis suspension.

4) washing and centrifugation

At the end of the contact time, add 35 ml sterile distilled water, shake and centrifuge 30
minutes at 3,000 T/ minute.

5) Culturing

After centrifugation, remove the supernatant. Rework the centrifugation pellet with 2 ml
sterile distilled water (dilution at 1/10).

- make up decimal dilutions up to 10-4, with a final dilution at 10-5

- inject 100 µl of each dilution into the 12B medium

- incubate at 37° for 21 days, recording the Bactec TB’s GI reading regularly.

6) Interpretation reading

The tables show results in GI.

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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 -3-
Mycobacterium tuberculosis suspension count

D1 D4 D5 D6 D7 D8 D11 D12 D14 D15 D18 D20 D21

Pure 999 999
-1 206 999
-2 9 459 999
-3 3 30 68 202 589 999 999
-4 3 3 3 13 51 155 999
-5 3 2 2 2 2 9 209 321 999
-6 3 1 2 0 2 29 43 216 310 999
-7 3 2 5 0 1 0 1 1 8 11 60 561 999
-8 3 1 2 0 0 1 1 1 2 0 1 0 0
-9 2 2 1 0 0 0 1 2 1 0 1 0 2

Values in these tables correspond to the growth index

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 -4-

STERANIOS 20 % CONCENTRE - 2.5 % - 5 minutes pH 6.81

D1 D4 D5 D6 D7 D8 D11 D12 D14 D15 D18 D20 D21
-1 0 4 8 22 71 203 999
-2 0 1 2 2 8 25 647 647 999
-3 0 5 1 1 1 4 48 83 516 701 999
-4 0 1 0 1 0 1 9 11 64 102 999
-5 0 1 2 2 1 0 1 0 0 0 0 3 0

STERANIOS 20 % CONCENTRE - 2.5 % -10 minutes pH 6.81

D1 D4 D5 D6 D7 D8 D11 D12 D14 D15 D18 D20 D21
-1 0 1 1 2 0 0 2 5 38 65 831 999
-2 0 0 3 3 0 1 0 0 1 1 6 33 153
-3 0 1 2 0 0 1 0 3 3 0 2 0 1
-4 0 0 1 0 3 0 2 1 0 1 3 0 1
-5 0 1 0 0 2 0 1 0 0 0 1 2 0

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 - 5–

STERANIOS 20 % CONCENTRE - 2.5 % -15 minutes pH 6.81

D1 D4 D5 D6 D7 D8 D11 D12 D14 D15 D18 D20 D21
-1 0 0 0 0 2 1 2 1 4 3 45 301 999
-2 0 0 2 0 1 0 1 1 0 1 1 0 0
-3 0 2 0 0 1 1 0 0 2 0 1 0 1
-4 0 2 1 0 0 1 1 0 0 1 0 0 1
-5 0 1 0 0 0 0 0 1 1 0 1 0 2

STERANIOS 20 % CONCENTRE - 5 % - 5 minutes pH6.9

D1 D4 D5 D6 D7 D8 D11 D12 D14 D15 D18 D20 D21
-1 0 1 0 3 0 3 1 1 9 19 194 999
-2 0 2 0 0 1 0 1 3 1 4 33 112 802
-3 0 0 2 0 3 0 1 1 2 0 0 0 0
-4 0 3 2 1 2 1 1 1 4 0 1 1 1
-5 0 0 1 2 1 0 0 0 3 0 1 0 0

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 -6-

STERANIOS 20 % CONCENTRE - 5 % -10 minutes pH6.9

D1 D4 D5 D6 D7 D8 D11 D12 D14 D15 D18 D20 D21
-1 0 1 0 3 0 0 0 0 0 0 1 2 18
-2 0 1 2 0 2 0 1 1 1 0 1 1 1
-3 0 1 1 0 1 1 2 1 0 1 0 2 1
-4 0 2 4 1 0 0 0 0 0 2 0 0 0
-5 0 2 1 1 0 0 3 1 0 0 1 0 1

STERANIOS 20 % CONCENTRE - 5 % -15 minutes pH6.9

D1 D4 D5 D6 D7 D8 D11 D12 D14 D15 D18 D20 D21
-1 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 4 0
-2 0 3 2 0 1 0 0 0 0 2 0 0 1
-3 0 3 2 0 1 2 1 0 0 0 0 0 0
-4 0 0 2 0 0 4 0 0 0 2 3 2 2
-5 0 1 0 1 1 0 2 0 1 2 1 0 0

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 -7-

STERANIOS 20 % CONCENTRE -10 % - 5 minutes pH 6.55

D1 D4 D5 D6 D7 D8 D11 D12 D14 D15 D18 D20 D21
-1 0 0 1 1 0 1 2 3 32 70 978 999
-2 0 2 2 1 0 0 2 1 10 19 218 999
-3 0 1 0 6 1 0 0 0 1 2 0 0 0
-4 0 2 0 0 0 0 1 0 0 0 2 1 1
-5 0 2 0 0 0 1 2 0 2 0 1 0 0

STERANIOS 20 % CONCENTRE -10 % -10 minutes pH 6.55

D1 D4 D5 D6 D7 D8 D11 D12 D14 D15 D18 D20 D21
-1 0 2 0 0 3 0 1 1 0 0 1 0 0
-2 0 1 0 0 3 0 2 1 1 2 1 2 1
-3 0 1 1 0 2 0 1 0 1 0 0 1 2
-4 0 1 2 4 2 0 0 0 1 0 0 2 0
-5 0 1 1 0 1 3 4 0 3 0 0 1 1

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 -8-

STERANIOS 20 % CONCENTRE -10 % -15 minutes pH 6.55

D1 D4 D5 D6 D7 D8 D11 D12 D14 D15 D18 D20 D21
-1 0 2 0 0 0 0 0 2 0 4 0 2 1
-2 0 1 2 0 0 0 1 0 1 0 0 1 0
-3 0 1 0 0 0 0 7 1 0 0 0 0 1
-4 0 0 1 0 0 0 1 0 3 0 0 1 2
-5 0 1 2 1 0 0 0 0 0 1 0 1 0

Conclusion:

STERANIOS 20 % CONCENTRE at 2.5 % reduces the population of Mycobacterium

tuberculosis by 105 in 10 minutes.

STERANIOS 20 % CONCENTRE at 5 % and at 10 % reduces the population of

Mycobacterium tuberculosis by 105 in 5 minutes.

Lille, 5th April 1993

Technical Manager Head of Department
Guy DELCRODC Doctor C. KREMBEL

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 Service Hygiène Hospitalière
Tél. ligne directe : 20 87 78 22

INSTITUT PASTEUR DE LILLE

FONDATION RECONNUE D'UTILITÉ PUBLIQUE

Pouvoir bactéricide vis-à-vis de Mycobacterium tuberculosis hominis :

STERANIOS 20 % CONCENTRE
Technique Bactec TB

Matériel
pH : 3,08
Bactec 460 (Becton Dickinson)
Milieu de culture liquide : Milieu Middelbrook 7H12
Mycobacterium tuberculosis hominis (souche provenant d'un malade).

Principe

Le milieu Bactec TB (12B) est un milieu de base Middelbrook 7H9 enrichi. Les mycobactéries utili-
sent un acide gras marqué au 14C présent dans le milieu et libèrent du 14CÛ2 dans l'atmosphère.
S'il y a croissance de mycobactéries dans les flacons de 12B, le Bactec 460 mesure le taux de radio-
activité (due au 14CÛ2 dégagé) et le traduit sous forme numérique sur une échelle allant du 0 à 999.
Ces valeurs sont désignées index de croissance (Grouwth indice = GI). L'augmentation du GI est pro-
portionnelle au nombre de bactéries.
Après action du désinfectant avec la suspension de Mycobacterium tuberculosis on numere les My-
cobactéries restantes en injectant chaque dilution de suspension de germes dans un ou deux flacons
12B. L'élévation du GI correspond à la présence de Mycobactéries.
La technique est simple, diminue le risque pour le manipulateur, et le risque de contamination des
milieux de culture est quasi nulle.

Méthodes :

1) Numération de l'inoculum
Préparation d'une suspension à 100 mg /ml en eau distillée stérile à partir d'une culture pure de
Mycobacterium tuberculosis sur Coletsos.
A partir de cette solution "mère", effectuer des dilutions de 10 en 10 jusqu'à 10"^.

Ce document comporte 8 pages

1, rue du Professeur Calmette - B.P. 245 - F 59019 Lille Cedex

Tél. 20.87.78.00 - Télécopie 20.87.79.06 - SIRET 783 696834 00010

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 -2-
2) Préparation des différentes concentrations
est utilisé à 2,5 %, 5 % et 10 %.
Préparer des solutions deux fois plus concentrées soit 5 %, 10 %, 20 %
3) Mise en contact pendant 5. 10. 15 minutes de :
- 200 ^1 de solution de STERANIOS 20 % CONCENTRE à 20 % avec 200 ^il de suspension de
Mycobacterium tuberculosis.
- 200 ni de solution de STERANIOS 20 % CONCENTRE à 10 % avec 200 ¿il de suspension de
Mycobacterium tuberculosis.
- 200 jil de solution de STERANIOS 20 % CONCENTRE à 5 % avec 200 ni de suspension de
Mycobacterium tuberculosis.
4") lavage et centrifugation
A la fin du temps de contact, ajouter 35 ml d'eau distillée stérile, agiter et centrifugé 30 minutes
à 3000 T/ minute.
5) Ensemencement
Après centrifugation, éliminer le surnageant. Reprendre le culot avec 2 ml d'eau distillée stérile
(dilution à 1/10).
- effectuer des dilutions décimales jusqu'à 10"^ soit une dilution finale à 10-5
- injecter 100 |il de chaque dilution dans le milieu 12B
- incuber à 37° pendant 21 jours, lire régulièrement le GI sur le lecteur Bactec TB
6) Lecture interprétation
Les résultats en GI figurent sur les tableaux.

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 Numération de la suspension de Mycobacterium tuberculosis -3-

Jl J4 J5 J6 J7 J8 111 J12 J14 J15 J18 J20 J21

Pur 999 999

-1 206 999

-2 9 459 999

-3 3 30 68 202 589 999 999

-4 3 3 3 13 51 155 999

-5 3 2 2 2 2 9 209 321 999

-6 3 1 2 0 2 29 43 216 310 999

-7 3 2 5 0 1 0 1 1 8 11 60 561 999

-8 3 1 2 0 0 1 1 1 2 0 1 0 0

-9 2 2 1 0 0 0 1 2 1 0 1 0 2

Les valeurs des tableaux correspondent à l'index de croissance

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STERANIOS 20 % CONCENTRE - 2.5 % - 5 minutes

pH 6.81

Jl J4 J5 J6 J7 J8 111 J12 J14 J15 J18 J20 J21

-1 0 4 8 22 71 203 999

-2 0 1 2 2 8 25 647 647 999

-3 0 5 1 1 1 4 48 83 516 701 999

-4 0 1 0 1 0 1 9 11 64 102 999

-5 0 1 2 2 1 0 1 0 0 0 0 3 0

STERANIOS 20 % CONCENTRE - 2.5 % -10 minutes

pH 6.81

Jl J4 J5 J6 J7 J8 Jll J12 J14 J15 J18 J20 J21

-1 0 1 1 2 0 0 2 5 38 65 831 999

.2 0 0 3 3 0 1 0 0 1 1 6 33 153

-3 0 1 2 0 0 1 0 3 3 0 2 0 1

-4 0 0 1 0 3 0 2 1 0 1 3 0 1

-5 0 1 0 0 2 0 1 0 0 0 1 2 0

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 -5-
STERANIOS 20 % CONCENTRE - 2.5 % -15 minutes
pH 6.81

Jl J4 J5 J6 J7 J8 111 J12 J14 J15 J18 J20 J21

-1 0 0 0 0 2 1 2 1 4 3 45 301 999

-2 0 0 2 0 1 0 1 1 0 1 1 0 0

-3 0 2 0 0 1 1 0 0 2 0 1 0 1

-4 0 2 1 0 0 1 1 0 0 1 0 0 1

-5 0 1 0 0 0 0 0 1 1 0 1 0 2

STERANIOS 20 % CONCENTRE - 5 % - 5 minutes

DH6.9

Jl J4 J5 J6 J7 J8 Ill J12 J14 J15 J18 J20 J21

-1 0 1 0 3 0 3 1 1 9 19 194 999

.2 0 2 0 0 1 0 1 3 1 4 33 112 802

-3 0 0 2 0 3 0 1 1 2 0 0 0 0

-4 0 3 2 1 2 1 1 1 4 0 1 1 1

-5 0 0 1 2 1 0 0 0 3 0 1 0 0

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 -6-
STERANIOS 20 % CONCENTRE - 5 % -10 minutes
DH6.9

Jl J4 J5 J6 J7 J8 111 J12 J14 J15 J18 J20 J21

-1 0 1 0 3 0 0 0 0 0 0 1 2 18

-2 0 1 2 0 2 0 1 1 1 0 1 1 1

-3 0 1 1 0 1 1 2 1 0 1 0 2 1

-4 0 2 4 1 0 0 0 0 0 2 0 0 0

-5 0 2 1 1 0 0 3 1 0 0 1 0 1

STERANIOS 20 % CONCENTRE - 5 % -15 minutes

DH6.9

Jl J4 J5 J6 J7 J8 111 J12 J14 J15 J18 J20 J21

-1 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 4 0

-2 0 3 2 0 1 0 0 0 0 2 0 0 1

-3 0 3 2 0 1 2 1 0 0 0 0 0 0

-4 0 0 2 0 0 4 0 0 0 2 3 2 2

-5 0 1 0 1 1 0 2 0 1 2 1 0 0

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STERANIOS 20 % CONCENTRE -10 % - 5 minutes
pH 6.55

Jl J4 J5 J6 J7 J8 Jll J12 J14 J15 J18 J20 J21

-1 0 0 1 1 0 1 2 3 32 70 978 999

-2 0 2 2 1 0 0 2 1 10 19 218 999

-3 0 1 0 6 1 0 0 0 1 2 0 0 0

-4 0 2 0 0 0 0 1 0 0 0 2 1 1

-5 0 2 0 0 0 1 2 0 2 0 1 0 0

STERANIOS 20 % CONCENTRE -10 % -10 minutes

pH 6.55

Jl J4 J5 J6 J7 J8 111 J12 J14 J15 J18 J20 J21

-1 0 2 0 0 3 0 1 1 0 0 1 0 0

-2 0 1 0 0 3 0 2 1 1 2 1 2 1

-3 0 1 1 0 2 0 1 0 1 0 0 1 2

-4 0 1 2 4 2 0 0 0 1 0 0 2 0

-5 0 1 1 0 1 3 4 0 3 0 0 1 1

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 -8-
STERANIOS 20 % CONCENTRE -10 % -15 minutes
pH 6.55

Jl J4 J5 J6 J7 J8 Jll J12 J14 J15 J18 J20 J21

-1 0 2 0 0 0 0 0 2 0 4 0 2 1

-2 0 1 2 0 0 0 1 0 1 0 0 1 0

-3 0 1 0 0 0 0 7 1 0 0 0 0 1

-4 0 0 1 0 0 0 1 0 3 0 0 1 2

-5 0 1 2 1 0 0 0 0 0 1 0 1 0

Conclusion :
STERANIOS 20 % CONCENTRE à 2,5 % réduit en 10 minutes la population de Mycobacte-
rium tuberculosis de 10^.
STERANIOS 20 % CONCENTRE à 5 % et à 10 % réduit en 5 minutes la population de Myco-
bacterium tuberculosis de

Lille, le 5 avril 1993

Responsable Technique Chef de Service
Guy DELCRODC Docteur C. KREMBEL

/(JZM*

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 Laboratoire de Microbiologie

Lille-Hellemmes, le 02 Janvier 2002

Lille Hellemmes, on the 2nd January 2002

Objet de la demande n° 14378

Study n° 14378 GB

Antiseptiques et désinfectants chimiques. Détermination de l'activité fongicide de

base de STERANIOS 20%. Méthode d'essai et prescriptions (phase 1) selon NF
EN 1275-(Juin 1997).
Indice de classement T 72 202
Méthode par filtration sur membranes.

Antiseptics and chemical disinfectants. Determination of the basic fungicidaï

activity of STERAMOS 20%. Test method and prescriptions (phase 1)
according to NF EN 1275 - (June 1997).
Classification index T 72 202
Method by membrane filtration.

Responsables de ¡'étude: In charge of the study :

Respons Microbiologie Pharmacien R sable Microbiologie

Micro ry Manager Pharma obiology Manager

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study n°- 14378GB- Demande n° 14378 Page 1/5

Laboratoires ANIOS
Pavé du Moulin - 59260 Lille-Hellemmes
Tél. +33 3 20 67 67 67 - Fax : +33 3 20 67 67 68
Siret N" 458 501 921 00043 - SA au capital de 232.800 €

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 79
Introduction :

L'essai a été réalisé selon la méthode d'essai décrite dans la norme européenne
EN 1275 « Antiseptiques et désinfectants chimiques - Activité fongicide de base».
Détermination de l'activité fongicide dans les conditions de laboratoire définies
par la présente norme européenne.

The test was realised according to the test method described in the
European standard EN 1275 « Antiseptics and chemical disinfectants».

Determination of the fungicidal activity in the laboratory conditions defined

by the present European standard.

Identification de l'échantillon : Sample identification

Nom du produit
Name of the product : STERANIOS 20%

Numéro de lot
Batch number : B 011-06

Fabricant
Manufacturer : LABORATOIRES ANIOS

Date de réception au laboratoire : Avril 2001

Receipt date at the laboratory : April 2001

Conditions de stockage au laboratoire : T° ambiante et obscurité

Storage conditions at the laboratory : room temperature and darkness

Période d'essai : Du 17/12/01 au 30/12/01

Period of analysis : From 01/12/17 to 01/12/30

study n°- 14378GB- Demande n° 14378 Page 2/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 80
Conditions expérimentales -.Experimental conditions

Température de l'essai
Test température : 20°C±1°C

Temps de contact
Contact time : 5 minutes 110s

Diluant du produit lors des essais : Eau distillée

Diluent of the product used during the test '.Distilled water

Souches testées (Strains tested) : Candida albicans ATCC 10231

Aspergillus nigerATCC 16404

Température d'incubation
Incubation temperature : 30°C + 1°C

Gélose de dénombrement : Gélose à l'extrait de malt

Counting agar : Agarwith malt extract

Méthode parfiltrationsur membrane : Membrane Filtration method

Nature des membranes : MILLIPORE HAWG en ester de

cellulose, 0.45 p , stérile
Nature of thé membranes ; MILLIPORE HAWG made of
cellulose ester, 0.45/im, stérile
Liquide de rinçage : eau distillée Tween 80 + eau distillée
Rinsing liquid : distilled water Tween 80 +
distilled water
Nombre des rinçages
Rinsing number : 3+1
Volume utilisé pour chaque rinçage
Volume used for each rinsing. : 100ml
Neutralisant ajouté au milieu de dénombrement : Néant
Neutraliser agent added to the counting medium : None
study n°- 14378GB- Demande n° 14378 Page 3/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 81
 Résultats : Results

O Essais de validation des conditions expérimentales : Validation tests

Vérification de la méthodologie et validation de la méthode par filtration pour la

concentration d'essai de 10% du produit STERANIOS 20% soumis à l'essai.
Checking of the method and validation of the method by filtration for the
10% test concentration of the product STERANIOS 20% to be tested.

Nombre de cellules viables (UFC/ml)

Suspension fongique Suspension Témoin de toxicité Essai de dilution-
d'essai fongique du neutralisant neutralisation
Souches test Dilution
Fungal test Fungal suspension Neutratizer neutralization
Tested strains suspension (Nv) toxicity control control
(N) <Nx) (NY)

Candida albicans 1.9 107 8.6 irr 1.0 10; 1.310-

Aspergi/fus niger 1,5 107 1.410- 1.4 10- 1.410-

Pour les deux souches soumises à l'essai - For the both strains to be tested
N est compris entre 1,5 x 107 UFC/ml et 5 x 107 UFC/ml
is comprised between 1.5x10' CFU/mï and 5x10' CFU/ml
NV est compris entre 6 x 102 UFC/ml et 3 x 103 UFC/ml
is comprised between 6x10* CFU/ml and 3x10* CFU/ml

NX est Supérieur OU égal à 0,05 X Nv - is higher or equal to 0.05 x Nv

NY est supérieur OU égal à 0,05 X Nv- ¿s higher or equal to 0.05 x Nv

La neutralisation est validée avec le neutralisant testé pour la concentration d'essai de 10% du produit
STERANIOS 20% et pour les deux souches soumises à l'essai.
The neutralization is validated with the dilution neutralization method for the 10% test
concentration of the product STERANIOS 2O% and the strains tested.

study n°~ 14378GB- Demande n° 14378 Page 4/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 82
© Essais d'activité fongicide - Evaluation offunuicidal activity :

Nombre de cellules viables (UFC/ml) pour le mélange d'essai

(Na) pour les concentrations de : %(v/v)
Souches-test
Number of the viable cells (CFU/m1)for the test mixture
Tested strains
(Na) for the concentrations of : %(v/v)
2.5 5 10

Candida albicans <1.510 2 <1.510 2 <1.5102

Aspergillus niger >1.510 3 1.0 101 >1.010 4

Réduction du nombre de cellules viables à la concentration d'essai.

Reduction of the number of viable cells at the test concentration
2.5 5 10

Candida albicans >1.310 4 >1.310 4 > 1.3 10*

Aspergillus niger <1.0103 1.510s >1.010 4

Conclusion :

Conformément à la norme NF EN 1275 (Juin 1997), STERANIOS 20% présente

une activité fongicide à la concentration de 5% en 5 minutes de contact à 20 °C
pour les souches référencées de Candida albicans ATCC 10231, Aspergillus
niger ATCC 16404.

In compliance with the European standard NF RN 1275 (June 1997)

STERANIOS 20% presents o fungicidal activity at 5% in a 5 minute
contact time at 20 °Cfor the referenced strains of Candida albicans ATCC
1O231, AspergiUus niger ATCC 16404.

study n*- 14378GB- Demande n° 14378 Page 5/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 83
Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre
EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 84
 Laboratoire de Microbiologie
Laboratoire
cofruc
accrédité
par le comité
français
d'accréditation
sous le N° 1-O139
ESSAIS
Lille-Hellemmes, le 26 avril 2006
Lille Hellemmes, on the 26th april 2006

Rapport d'essai n°A 06 20 13624

Test report n°A 06 20 13624

Objet de la demande n° 20223

Study n° 2O223 GB

Désinfectants chimiques. Essai quantitatif de suspension pour l'évaluation de

l'activité levuricide de STERANIOS 20% . Méthode d'essai et prescriptions (phase
2 - étape 1) NF EN 13624 (Avril 2004) .Application aux désinfectants chimiques
pour les instruments médicaux utilisés en médecine .
Méthode par filtration.

Chemical disinfectants. Quantitative suspension test for the evaluation of

the yeasticidal activity of STERANIOS 2O% . Test method and prescriptions
(phase 2 - step 1) according to NF EN 13624 (April 2004). Application to
chemical disinfectants for instruments used in the medical area.
Method by filtration.

Responsables de l'étude: In charge of the study :

Responsable La de Microbiologie Pharmacien nsable Microbiologie

Microbiol ry Manager Pha 'ûrobiology Manager

Ce document comporte 5 pages numérotées et aucune annexe.

This report is made of 5 numbered pages and 0 annexe.
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L a b o r a t o i r e s ANIOS
Pavé du Moulin - 59260 Lille-Hellemmes
Tél. +33 3 20 67 67 67 - Fax : +33 3 20 67 67 68
Siret N° 458 501 921 00043 - SA au capital de 232.800 €

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 85
Introduction : Introduction

L'essai a été réalisé selon la méthode d'essai décrite la norme européenne EN

13624 « Désinfectants chimiques et antiseptiques- Essai quantitatif de
suspension pour l'évaluation de l'activité fongicide des désinfectants chimiques
pour les instruments utilisés en médecine (phase 2 /Etape 1) ».
Détermination de l'activité fongicide dans les conditions de laboratoire définies par
la présente norme européenne.

The test was realised according to the test method described in the European
standard EN 13624 « Chemical disinfectants and antiseptics- Quantitative
suspension test for the evaluation of fungicidal activity of chemical
disinfectants for instruments used in the medical area».
Determination of the fungicidal activity in the laboratory conditions defined in
the present European standard.

Identification de l'échantillon : Sample identification

Nom du produit
Name of the product : STERANIOS 20%

Numéro de lot
Batch number : G 053-17

Fabricant
Manufacturer : LABORATOIRES ANIOS

Date de réception au laboratoire : Le 21/03/06

Receipt date at the laboratory : On the 06/03/21

Conditions de stockage au laboratoire : T° ambiante et obscurité

Storage conditions at the laboratory : room temperature and darkness

Période d'essai : Du 07/04/06 au 10/04/06

Period of analysis : From 06/04/0 7 to 06/04/10

study n°- 20223 GB - Demande n° 20223 Page 2/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 86
Conditions expérimentales -.Experimental conditions

Température de l'essai
Test temperature : 20°C ± 1°C
Temps de contact
Contact time : 60 minutes ± 10s
Diluant du produit lors des essais : eau dure
Diluent of the product used during the test : hard water
Apparence du produit et de ses dilutions : préparation physiquement
homogène et stable pendant l'essai
Appearence product dilutions : Preparation physically
homogeneous and stable during test

Souche testée (Strain tested) : Candida albicans ATCC 10231

Substance interferente : Albumine bovine à 0.3 g/l.

Interfering substance : 0.3 g/l BSA

Stabilité du mélange produit et substances interférentes: absence de précipité pendant

l'essai
Stability of the mixturef product and interfering substance) : precipitate absent
throughout the test

Méthode par filtration: Filtration method

Nature des membranes : MILLIPORE HAWG en ester de

cellulose, 0.45 u , stérile
Nature of the membranes : MILLIPORE HAWG made of
cellulose ester, OASfim, sterile
Liquide de rinçage : eau distillée Tween 80 + eau distillée
Rinsing liquid : distilled water Tween 80 +
distilled water
Nombre des rinçages
Rinsing number : 3+1
Volume utilisé pour chaque rinçage
Volume used for each rinsing : 100 ml
Neutralisant ajouté au milieu de dénombrement : Néant
Neutralizer agent added to the counting medium : None

study n°- 20223 GB - Demande n° 20223 Page 3/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 87
 Résultats : Results

O Essais de validation des conditions expérimentales : Validation tests

Vérification de la méthodologie et validation de la méthode par filtration pour la
concentration d'essai de 2.5% du produit STERANIOS 20%. soumis à l'essai.
Checking of the method and validation of the method by filtration for the
2.5% test concentration of the product STERANIOS 2O% to be tested.

Nombre de cellules viables (UFC/ml)

Suspension Suspension Validation Suspension Validation des Témoin de Essai de
filtration sur
Souche test d'essai d'essai/10 suspension de validation conditions lïnactivation
membrane
fongique 710 expérimentales par filtration
Tested strain Validation Experimental sur membrane
Fungal test Fungal test Validation Experimental conditions
Fungal Method
suspension suspension conditions control
Fungal
suspension validation
suspension
/10
N No NV B
NVO

Candida albicans 1.7 107 1.710e 4.8 4.8 101 6.3 101 6.5 101 6.9 101

Pour la souche soumise à l'essai - For the strain to be tested

N est compris entre 1,5 x 108 UFC/ml et 5 x 108 UFC/ml
is comprised between 1.5x10* CPU/ml and 5 x 108 CPU/ml
No est compris entre 1,5 x 107 UFC/ml et 5 x 107 UFC/ml
zs comprised between 1.5 x 107 CFU/ml and 5x 107 CPU/ml
My est compris entre 4.5 x 102 UFC/ml et 1.8 x 103 UFC/ml
is comprised between 4.5 x 102 CFU/ml and 1.8 xlO 3 CFU/ml
NVO est compris entre 4.5 x 101 UFC/ml et 1.8 x 102 UFC/ml
is comprised between 4.5x10' CFU/ml and l.SxlO 2 CFU/ml
A, B, C est supérieur ou égal à 0.5 x NVo
is higher or equal to 0.05 x Nv
La neutralisation est validée avec la méthode par filtration pour la concentration d'essai de 2.5% du produit
STERANIOS 2O% et pour la souche soumise à l'essai.
The neutralization is validated with the filtration method for the 2.5% test concentration of the product
STERANIOS 2O% and the strain tested.

study n°- 20223 GB - Demande n° 20223 Page 4/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 88
 Essais d'activité ¡evuricide - Evaluation of yeasticidal activity :

Nombre de cellules viables (UFC/ml) pour le mélange

d'essai (Na) pour les concentrations de : %(v/v)
Souche test
Tested strain Number of the viable cells (CFU/ml)for the test mixture
(No.) for the concentrations of: %(v/v]
0.02 0.5 1.0

Candida albicans >1.6510 3 1.4102 <1.410 2

Réduction du nombre de cellules viables à la concentration d'essai.
R = Log No - Log Na
Reduction of the number of viable cells at the test concentration
R = Log No - Log Na
0.02 0.5 1.0

Candida albicans 3 log >4.1 log >4.1 log

Conclusion :

Conformément à la norme NF EN 13624 (avril 2004) STERANIOS 20% lorsqu 'il

est dilué à 0.5 % (v/v) dans de l'eau dure, présente une activité levuricide en
60 minutes de contact à 20 °C en conditions de saleté vis-à-vis de la souche de
référence : Candida albicans ATCC 10231.

In compliance with the European standard NF EN 13624 (april 20O4),

STERANIOS 20% diluted at 0.5 % (v/v) in hard water , presents a
yeasticidal activity in a 6O minute contact time at 20 °C in dirty conditions
against the referenced strain of: Candida albicans ATCC 1O231.

study n°- 20223 GB - Demande n° 20223 Page 5/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 89
Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre
EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 90
 Laboratoire de Microbiologie (ofrac
Laboratoire
accrédité
par le comité
français
d'accréditation
sous le N 1-0139

Lille-Hellemmes, le 26 avril 2006 ESSAIS

Lille Hellemmes, on the 26th april 2006

Rapport d'essai n°A 06 19 13624

Test report n°A 06 19 13624

Objet de la demande n°20222

Study n 2O222 GB

Désinfectants chimiques. Essai quantitatif de suspension pour l'évaluation de

l'activité levuricide de STERANIOS 20% . Méthode d'essai et prescriptions (phase
2 - étape 1) NF EN 13624 (Avril 2004) .Application aux désinfectants chimiques
pour les instruments médicaux utilisés en médecine .
Méthode par filtration.

Chemical disinfectants. Quantitative suspension test for the evaluation of

the yeasticidal activity of STERANIOS 2O% . Test method and prescriptions
(phase 2 - step 1) according to NF EN 13624 (April 2004). Application to
chemical disinfectants for instruments used in the medical area.
Method by filtration.

Responsables de l'étude: In charge of the study :

F. D
Responsable LappratBrne de Microbiologie Pharmacien Responsable Microbiologie
MicrobiologyLabc^aory Manager Pharmacist Microbiology Manager

Ce document comporte 5 pages numérotées et aucune annexe.

This report is made of 5 numbered pages and 0 annexe.

study n°- 20222 GB - Demande n" 20222 Page 1/5

L a b o r a t o i r e s ANIOS
Pavé du M o u l i n - 59260 Lille-Hellemmes
Tél. +33 3 20 67 67 67 - Fax : +33 3 20 67 67 68
Siret N° 458 SOI 921 00043 - SA au capital de 232.800 €

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 91
Introduction : Introduction

L'essai a été réalisé selon la méthode d'essai décrite la norme européenne EN

13624 « Désinfectants chimiques et antiseptiques- Essai quantitatif de
suspension pour l'évaluation de l'activité fongicide des désinfectants chimiques
pour les instruments utilisés en médecine (phase 2 /Etape 1 ) » .
Détermination de l'activité fongicide dans les conditions de laboratoire définies par
la présente norme européenne.

The test was realised according to the test method described in the European
standard EN 13624 « Chemical disinfectants and antiseptics- Quantitative
suspension test for the evaluation of fungicidal activity of chemical
disinfectants for instruments used in the medical area».
Determination of the fungicidal activity in the laboratory conditions defined in
the present European standard.

Identification de l'échantillon : Sample identification

Nom du produit
Name of the product : STERANIOS 20%

Numéro de lot
Batch number : G 053-17

Fabricant
Manufacturer : LABORATOIRES ANIOS

Date de réception au laboratoire : Le 21/03/06

Receipt date at the laboratory : On the 06/03/21

Conditions de stockage au laboratoire : T° ambiante et obscurité

Storage conditions at the laboratory : room temperature and darkness

Période d'essai : Du 07/04/06 au 10/04/06

Period of analysis : From 06/04/07 to 06/04/10

study n°- 20222 GB - Demande n° 20222 Page 2/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 92
Conditions expérimentales '.Expérimental conditions

Température de l'essai
Test température .......................................... : 20°C ± 1°C
Temps de contact
Contact tinte .................................................. : 5 minutes ± 10s
Diluant du produit lors des essais .................. : eau dure
Diluent of the product used during the test : hard water
Apparence du produit et de ses dilutions ...... : préparation physiquement
homogène et stable pendant l'essai
Appearence product dilutions...................: Preparation physically
homogeneous and stable during test

Souche testée (Strain tested) ...................... : Candida albicans A TCC 10231

Substance interférente ..................................... : Albumine bovine à 0.3 g/l.

Interfering substance.....................................: 0.3 g/l BSA
Stabilité du mélange produit et substances interférentes: absence de précipité pendant
l'essai
Stability of the mixture( product and interfering substance) : precipitate absent
throughout the test

Méthode par filtration: Filtration method

Nature des membranes ...................................... : MILLIPORE HAWG en ester de

cellulose, 0.45 u , stérile
Nature of the membranes ............................. : MILLIPORE HAWG made of
cellulose ester, 0.45/im, sterile
Liquide de rinçage .............................................. : eau distillée Tween 80 + eau distillée
Rinsing liquid .................................................... : distilled water Tween 80 +
distilled water
Nombre des rinçages
Rinsing number ................................................ : 3+1
Volume utilisé pour chaque rinçage
Volume used for each rinsing .......................... : 100 ml
Neutralisant ajouté au milieu de dénombrement : Néant
Neutraliser agent added to the counting medium : None

study n°- 20222 GB - Demande n° 20222 Page 3/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 93
 Résultats : Results
O Essais de validation des conditions expérimentales : Validation tests

Vérification de la méthodologie et validation de la méthode par filtration pour la

concentration d'essai de 2.5% du produit STERANIOS 20%. soumis à l'essai.
Checking of the method and validation of the method by filtration for the
2.5% test concentration of the product STERANIOS 20% to be tested.

Nombre de cellules viables (UFC/ml)

Suspension Suspension Validation Suspension Validation des Témoin de Essai de

filtration sur
Souche test d'essai d'essai 710 suspension de validation conditions l'inactivation
membrane
fongique 710 expérimentales par filtration
Tested strain Validation sur membrane
Fungal test Fungal test Validation Experimental conditions
Fungal Method
suspension suspension conditions control
Fungal
suspension validation
suspension
110
N No
NVO B

Candida albicans 1.7107 1.710',6 4.8 102 4.8 101 6.4 101 6.5 101 6.9 101

Pour la souche soumise à l'essai - For the strain to be tested

N est compris entre 1,5 x 108 UFC/ml et 5 x 108 UFC/ml
is comprised between 1.5xlO8 CFU/rrû and 5 x 108 CFU/ml
No est compris entre 1,5 x 107 UFC/ml et 5 x 107 UFC/ml
is comprised between 1.5 x 107 CFU/ml and 5 x l O7 CFU/ml
NV est compris entre 4.5 x 102 UFC/ml et 1.8 x 103 UFC/ml
is comprised between 4.5 x 102 CFU/ml and 1.8 x 103 CFU/ml
NVO est compris entre 4.5 x 101 UFC/ml et 1.8 x 102 UFC/ml
is comprised between 4.5 x 101 CFU/ml and 1.8 x 102 CFU/ml
A, B, C est supérieur ou égal à 0.5 x NVO
is higher or equal to 0.05 x Nv
La neutralisation est validée avec la méthode par filtration pour la concentration d'essai de 2.5% du produit
STERANIOS 2O% et pour la souche soumise à l'essai.
The neutralization is validated with the filtration method for the 2.5% test concentration of the product
STERANIOS 2O% and the strain tested.

study n°- 20222 GB - Demande n° 20222 Page 4/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 94
 Essais d'activité levuricide - Evaluation of yeasticidal activity :

Nombre de cellules viables (UFC/ml) pour le mélange

d'essai (Na) pour les concentrations de : %(v/v)
Souche test
Tested strain Number of the viable cells (CPU/ml) for the test mixture
(No) for the concentrations of: %(v/v)
0.1 0.5 2.5

Candida albicans >1.6510 3 >1.6510 3 <1.410 2

Réduction du nombre de cellules viables à la concentration d'essai.

R = Log NO - Log Na
Reduction of the number of viable cells at the test concentration
R = Log No - Log Na
0.1 0.5 2.5

Candida albicans 3 log Slog >4.1 log

Conclusion :

Conformément à la norme NF EN 13624 (avril 2004) STERANIOS 20% lorsqu 'il

est dilué à 2.5 % (v/v) dans de l'eau dure, présente une activité levuricide en
5 minutes de contact à 20 °C en conditions de saleté vis-à-vis de la souche de
référence : Candida albicans ATCC 10231.

In compliance with the European standard NF EN 13624 (april 2004),

STERANIOS 2O% diluted at 2.5 % (v/v) in hard water , presents a
yeasticidal activity in a 5 minute contact time at 20 °C in dirty conditions
against the referenced strain of: Candida albicans ATCC 10231.

study n°- 20222 GB - Demande n° 20222 Page 5/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 95
Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre
EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 96
 Laboratoire de Microbiologie

Lille-Hellemmes, le 28 avril 2006

Lille Hellemmes, on the 28th april 2006

Objet de la demande n° 20233

Study n° 20233 GB

Désinfectants chimiques. Essai quantitatif de suspension pour l'évaluation de

l'activité fongicide de STERANIOS 20% . Méthode d'essai et prescriptions (phase
2 - étape 1) NF EN 13624 (Avril 2004) .Application aux désinfectants chimiques
pour les instruments médicaux utilisés en médecine .
Méthode par filtration.
Essai partiel

Chemical disinfectants. Quantitative suspension test for the evaluation of the

fungicidal activity of STERANIOS 2O% . Test method and prescriptions
(phase 2 - step 1) according to NF EN 13624 (April 2004). Application to
chemical disinfectants for instruments used in the medical area.
Method by filtration.
Partial test

Responsables de l'étude: In charge of the study

F. raí
Responsable e Microbiologie Pharmacien Res sable Microbiologie
Microbi Manager Pharmacis; iology Manager

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Laboratoires ANIOS
Pavé du Moulin - 59260 Lille-Hellemmes
Tél. +33 3 20 67 67 67 - Fax : +33 3 20 67 67 68
Siret N° 458 501 921 00043 - SA au capital de 232.800 €

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Introduction : Introduction

L'essai a été réalisé selon la méthode d'essai décrite la norme européenne EN

13624 « Désinfectants chimiques et antiseptiques- Essai quantitatif de
suspension pour l'évaluation de l'activité fongicide des désinfectants chimiques
pour les instruments utilisés en médecine (phase 2 /Etape 1 ) » .
Détermination de l'activité fongicide dans les conditions de laboratoire définies par
la présente norme européenne.

The test was realised according to the test method described in the European
standard EN 13624 « Chemical disinfectants and antiseptics- Quantitative
suspension test for the evaluation of fungicidal activity of chemical
disinfectants for instruments used in the medical area».
Determination of the fungicidal activity in the laboratory conditions defined in
the present European standard.

Identification de l'échantillon : Sample identification

Nom du produit
Name of the product : STERANIOS 20%

Numéro de lot
Batch number : G 053-17

Fabricant
Manufacturer : LABORATOIRES ANIOS

Date de réception au laboratoire : Le 21/03/06

Receipt date at the laboratory : On the 06/03/21

Conditions de stockage au laboratoire : T° ambiante et obscurité

Storage conditions at the laboratory : room temperature and darkness

Période d'essai : Du 26/04/06 au 02/05/06

Period of analysis : From 06/04/26 to 06/05/02

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Conditions expérimentales -.Expérimental conditions

Température de l'essai
Test température : 20°C ± 1°C
Temps de contact
Contact time : 10 minutes ± 10s
Diluant du produit lors des essais : eau dure
Diluent of the product used during the test : hard water
Apparence du produit et de ses dilutions : préparation physiquement
homogène et stable pendant l'essai
Appearence product dilutions : Preparation physically
homogeneous and stable during test

Souche testée (Strain tested) : Aspergillus niger A TCC 16404

Substance interférante : Albumine bovine à 0.3 g/l.

Interfering substance : 0.3 g/l BSA

Stabilité du mélange produit et substances interférentes: absence de précipité pendant

l'essai
Stability of the mixture(product and interfering substance) : precipitate absent
throughout the test

Méthode par filtration: Filtration method

Nature des membranes : MILLIPORE HAWG en ester de

cellulose, 0.45 u , stérile
Nature of the membranes : MILLIPORE HAWG made of
cellulose ester, OASjum, sterile
Liquide de rinçage : eau distillée Tween 80 + eau distillée
Rinsing liquid : distilled water Tween 80 +
distilled water
Nombre des rinçages
Rinsing number :3+1
Volume utilisé pour chaque rinçage
Volume used for each rinsing : 100 ml
Neutralisant ajouté au milieu de dénombrement : Néant
Neutralizer agent added to the counting medium : None

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 Résultats : Results

O Essais de validation des conditions expérimentales : Validation tests

Vérification de la méthodologie et validation de la méthode par filtration pour la
concentration d'essai de 10 % du produit STERANIOS 20%. soumis à l'essai.
Checking of the method and validation of the method by filtration for the
1O% test concentration of the product STERANIOS 2O% to be tested.

Nombre de cellules viables (UFC/ml)

Suspension Suspension Validation Suspension Validation des Témoin de Essai de
suspension de validation filtration sur
Souche test d'essai d'essai/10 conditions l'inactivation
membrane
fongique 710 expérimentale par filtration
Tested strain s Experimenta sur
Validation
Fungal test Fungal test Validation I conditions membrane
suspension suspension Fungal
Fungal Experimental control
suspension conditions Method
suspension validation
/10
N N0 Nv B
NVO

Aspergillus niger 1.6 107 1.6106 4.710 2 4.7 101 3.1 101 3.1 101 3.0 101

Pour la souche soumise à l'essai - For the strain to be tested

N est compris entre 1,5 x 108 UFC/ml et 5 x 108 UFC/ml
is comprised between 1.5x108 CPU/ml and 5 x 108 CPU/ml
NO est compris entre 1,5 x 107 UFC/ml et 5 x 107 UFC/ml
is comprised between l.SxlO 7 CPU/ml and Sx 107 CPU/ml
NV est compris entre 3 x 102 UFC/ml et 1.6 x 103 UFC/ml
is comprised between 3 x 102 CPU/ml and 1.6 xlO 3 CPU/ml
NVO est compris entre 3 x 101 UFC/ml et 1.6 x 102 UFC/ml
is comprised between 3 x 101 CPU/ml and 1.6 xlO 2 CPU/ml
A, B, C est supérieur ou égal à 0.5 x NVo
is higher or equal to 0.05 x Nv
La neutralisation est validée avec la méthode par filtration pour la concentration d'essai de 10% du produit
STERANIOS 2O% et pour la souche soumise à l'essai.
The neutralization is validated with the filtration method for the 10% test concentration of the product
STERANIOS 2O% and the strain tested.

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 Essais d'activité fongicide - Evaluation of funciicidal activity :

Nombre de cellules viables (UFC/ml) pour le mélange

d'essai (Na) pour les concentrations de : %(v/v)
Souche test
Tested strain Number of the viable cells (CPU/ml) for the test mixture
(Na)for the concentrations of: %(v/v)
2.5 10

Aspergillus nicer 2.4 10' < 1.4102

Réduction du nombre de cellules viables à la concentration d'essai.

R = Log NO - Log Na
Reduction of the number of viable cells at the test concentration
R = Log No - Log Na
2.5 10

Aspergillus niger 3.8 log >4.1 log > 4.1 log

Conclusion :

Conformément à la norme NF EN 13624 (avril 2004) STERANIOS 20% lorsqu 'il

est dilué à 5% (v/v) dans de l'eau dure, présente une activité fongicide en
10 minutes de contact à 20 °C en conditions de saleté vis-à-vis de la souche de
référence : Aspergillus niger ATCC 16404.

In compliance with the European standard NF EN 13624 (april 2004),

STERANIOS 2O% diluted at 5 % (v/v) in hard water, presents afungicidal
activity in a 1O minute contact time at 20 °C in dirty conditions against the
referenced strain of: Aspergillus niger ATCC 164O4.

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 Final report submitted to

Laboratoires ANIOS
Pavé du Moulin
F-59260 Lille-Hellemmes
(http://www.anios.com)

Evaluation of the
effectiveness of

STERANIOS 20%

against
Bovine Viral Diarrhea Virus
(Surrogate of Hepatitis C Virus)

Test method according to guideline of BGA and DW

Dr. Jochen Steinmann

MikroLab GmbH
Norderoog 2
D-28259 Bremen

phone: +49 (0) 421-27819102

fax: +49(0)421-2760283
E-mail: Mikrolab.GmbH@t-online.de
http://www.mikrolab-gmbh.de

2005-10-19

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Virucidal efficacy (BVDV) of STERANIOS 20% page 2 of?

1. Introduction
Examinations of virucidal activity of chemical disinfectants against hepatitis C virus (HCV)
are not possible, since there are no in vitro tests available. Therefore, bovine viral diarrhea
virus (BVDV) serves as a model virus, because this pestivirus also belongs to the family
Flaviviridae and has some properties similar to HCV (1,2). BVDV is a small ssRNA virus
with a nonsegmented positive strand and has before often used in blood product industry as a
surrogate of HCV.
This study was carried out in accordance with the guideline on testing chemical disinfectants
for effectiveness against viruses published by the Federal Office of Health (Bundesgesund-
heitsamt, BGA, now Robert Koch-Institute, Berlin, Germany) and the German Association for
the Control of Viruses Diseases (Deutsche Vereinigung zur Bekämpfung der Viruskrank-
heiten e.V., DVV) (3,4).

2. Identification of test laboratory

MikroLab GmbH, Norderoog 2, D-28259 Bremen

3. Identification of sample

name of the product STERANIOS 20%

manufacturer Laboratoires ANIOS
lot no. G11816
application instrument disinfection
appearance and smell of product clear, green solution, product specific
pH-value 5.0%: 6.78 (20°C)
expiry date 04/2008
date of receipt at laboratory 2005-07-22
conditions of storage room temperature in the dark (area with
limited access)
active substance(s) and 20% glutaraldehyde
concentration(s)

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Virucidal efficacy (BVDV) of STERANIOS 20% page 3 of 7

4. Experimental conditions

period of analysis 2005-08-16 - 2005-10-19

test temperature 20°C±1°C
concentration of test product 5.0%
contact times 5, 15, 30 and 60 minutes
interfering substances 2.0% solution of bovine serum albumin
(BSA);
fetal calf serum (PCS)
diluent of product Aqua bidest.
procedure to stop action of disinfectant gel filtration
test virus BVDV strain NADL

5. Material and methods

5.1 Preparation of virus suspension

BVDV strain NADL (VR-534) was obtained from Dr. Stephanie Bendtfeld, Institute of
Virology at the School of Veterinary Medicine Hannover (Tierärztliche Hochschule, D-30559
Hannover). Before inactivation assays, the virus had been passaged 5 times in KOP-R
(primary cells from bovine oropharyngeal tissue) and once in primary bovine kidney cells.
KOP-R cells originated from the Bundesforschungsanstalt für Viruskrankheiten der Tiere, isle
of Riems (Dr. R. Riebe, catalog No. RIE 244).
For preparation of virus suspension, KOP-R cells, which were cultivated with Eagle's
Minimum Essential Medium (EMEM; Cambrex Bio Science Venders s.p.r.l., B-4800 Verviers,
Belgium) supplemented with 1-glutamine, sodium pyruvate and 10% or 2% fetal calf serum
(PCS, Biochrom AG, D-12247 Berlin, Germany; antibodies against BVDV not detectable),
were infected with BVDV. After cells showed a constant cytopathic effect, they were
subjected to a rapid freeze/thawing procedure. This was followed by low-speed centrifugation
(10 min and 1000 x g) in order to sediment cell debris. After aliquotation, test virus
suspension was stored at -80°C.

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Virucidal efficacy (BVDV) of STERANIOS 20% page 4 of 7

5.2 Inactivation tests

Tests were carried out in accordance to the BGA and DVV guideline. Eight parts by volume
of the disinfectant (1.25 x of the desired concentration) were mixed with one part by volume
of virus suspension and one part by volume of double distilled water. In tests with interfering
substances, instead of double distilled water, one part by volume of a 2.0% solution of bovine
serum albumin (BSA, Sigma-Aldrich Chemie GmbH, D-82018 Taufkirchen) or one part by
volume of fetal calf serum was added.
Inactivation tests were carried out in sealed test tubes (Sarstedt AG & Co., D-51588
Nümbrecht, Germany) in a water bath at 20°C + 1°C. Aliquots were removed after appropriate
exposure times, and residual infectivity was determined. A control was one part by volume of
virus suspension, four parts by volume of PBS and five parts by volume of 1.4%
formaldehyde. The concentration of formaldehyde was determined by the
hydroxylammoniumchloride method.
To reduce cytotoxicity, immediately at the end of the exposure time the mixture was added to
a MicroSpin™ S-400 HR column (see 5.5 elimination of cytotoxicity) and centrifuged.
In addition, in accordance with the guideline, virus controls were carried out.

5.3 Determination of infectivity

Infectivity was determined by end point dilution titration in a micro-procedure. For this,
samples were diluted with ice-cold EMEM and 100 uL of each dilution were placed in 8 wells
of a sterile polystyrene flat bottomed plate (Nunc A/S, DK-4000 Roskilde, Denmark). 100 uL
of a freshly trypsinized KOP-R cell culture (passage 28th-35 th) were added. The suspension
was adjusted to reach approximately 10-15 x 103 cells per well. Incubation was at 37°C in a
CCh-atmosphere (5.0% CC^ - content). Finally, cultures were observed for cytopathic effects
for five days of inoculation. The infective dose (TCIDso) was calculated according to the
method of Spearman (5) and Kärber (6).

5.4 Determination of cytotoxicity

For determination of cytotoxicity of the disinfectant, two parts by volume of PBS were mixed
with eight parts by volume of the disinfectant, diluted with ice-cold EMEM and inoculated
into cell culture. Values are given as logioCD5o/mL (in analogy to TCIDso/mL). These tests

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were also performed with the interfering substances and with MicroSpin™ S-400 HR
columns.

5.5 Elimination of cytotoxicity

Since the cytotoxicity did not allow following the reduction of residual infectivity titre over
the range of four logio steps, ready to use MicroSpin™ S-400 HR columns (Amersham
Biosciences Europe GmbH, D-79021 Freiburg, Germany) were used according to the
instructions of the manufacturer with addition of a 0.5 % BSA solution before loading.

5.6 Calculation of the virucidal activity

The virucidal activity of the test disinfectant was evaluated by calculating the decrease in titre
in comparison with the control titration without disinfectant. The difference is given as
reduction factor (RF).

6. Results

In parallel with the inactivation tests, cytotoxicity of STERANIOS 20% and 0.7%
formaldehyde was measured. The formaldehyde solution was toxic for the KOP-R cells in the
1:1000 dilutions. This corresponds to a logioCDso/mL of 4.50 (Table 1).
Examinations also showed that without treatment the instrument disinfectant STERANIOS
20% (5.0%) had a logioCD50/mL of 4.50 (cytotoxicity in thel:1000 dilution), whereas no
cytotoxic effect after treatment with the columns was measured resulting in a logioCDso/mL of
< 1.50 (Table 1).
These tests to measure cytotoxicity are imperative, because in this way the lower detection
threshold for non-inactivated BVDV is determined.
Virus titres without treatment with MicroSpin™ S-400 HR columns were 5.50 (assay without
protein load), 5.88 (assay with BSA) and 6.13 logioTCID50/mL (assay with PCS) (data not
shown in table).

Results of inactivation tests are found in table 2. Formaldehyde (0.7%) reduced the BVDV
titre after 5 minutes by 0.00 logio steps. After 15, 30 and 60 minutes RF's were > 1.00 (Table
2).
The instrument disinfectant STERANIOS 20% was examined as 5.0% solution. Exposure
times were 5, 15, 30 and 60 minutes.

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Testing STERANIOS 20% as 5.0% solution, an efficacy was measured after an exposure time
of five minutes (Table 2). At this time, no BVDV was detectable any longer. The RFs were >
4.00 (assay without soil load), > 4.38 (assay with BSA) and > 4.13 (assay with PCS). This
corresponds in all cases to an inactivation of > 99.99%. According to the guideline of
BGA/DVV, a disinfectant or a disinfectant solution at a particular concentration is having
virus-inactivating efficacy if within the recommended exposure period the titre is reduced at
least by four logio.
Due to the lack of virological guidelines simulating practical conditions (phase2, step2) the
data of this quantitative suspension test lead to the recommendation to use the instrument
disinfectant STERANIOS 20% for inactivation of BVDV (surrogate of hepatitis C virus) as
follows:

5.0% 5 min

Dr. J. Steinmann

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Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre
EN - Up-to-date version : 07-01-2008
Page 138
CENTRAL PHARMACY
FOR PARIS HOSPITALS
Head office
7, rue du Fer-à-Moulin BP 09
75221 PARIS Cedex 05
Switchboard: +33 (0)1 43 37 11 00
Fax: +33 (0)1 43 37 95 97
Telex: 204 203 F PHARMAP

BIOLOGICAL CONTROL LABORATORY

Secretariat:
Extension: 308

Laboratory:
Extension: 251

Jacques Christian DARBORD

Professor of Microbiology
Hospital Pharmacist

Paris, 16th February 1993

Ref : JCD/VLJ/93007

SUBJECT OF REQUEST:

Study of the sporicidal activity of "STERANIOS 20% Concentré",

formula n° 0359102, according to standard AFNOR NF T 72230
(August 1988)

HEAD OF RESEARCH

Professor J.C. DARBORD

Bacteriology Laboratory

This report includes 3 numbered pages.

Industrial Unit:
13, rue Lavoisier
92023 NANTERRE Cedex
Switchboard: +33 (0)1 47 29 13 13
Fax: +33 (0)1 47 25 36 02
Telex: 613 252 F SOLU AP

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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 -2-

JCD/VLJ/93007 of 16th February 1993

PRINCIPLE

The test was conducted in compliance with the protocol described in the approved French
standard NF T 72230: Water-miscible and neutralizable antiseptics and disinfectants used in
liquid state.
Determination of sporicidal activity. dilution-neutralisation method.

SAMPLE IDENTIFICATION

Name of product: STERANIOS 20% Concentré

Manufacturer: Laboratoire ANIOS
Date of reception at laboratory: 06/01/93
Storage conditions at laboratory: ambient temperature and darkness
Analysis period: January to February 1993

TEST CONDITIONS

Test temperature: 20°C

Contact time: 1-2-3 hours

Product diluent:

recommended by manufacturer: distilled water

used during tests: distilled water

Neutralising agent:

composition: Lecithin Polysorbate 80 (Tween)

concentration: 0.3% (m/v) 5% (v/v)

Neutralising agent added mid-count: none

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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 -3–

JCD/VLJ/93007 of 16th February 1993

Contact time with spores, concentration in % (V/V)

1 Hour 2 Hours 3 Hours
N N' n' Reduction of 2.5% 5% 10% 2.5% 5% 10% 2.5% 5% 10%
Bacillus subtilis var niger
198 182 174 5 log + 7 0 8 2 0 10 0 0
CIP 7718
Bacillus cereus
92 110 140 5 log + 0 0 0 0 0 0 0 0
CIP 7803

CONCLUSION
The "STERANIOS 20% Concentré" product has sporicidal activity according to standard
AFNOR NF T 72230 with a 5-log reduction in 1 hour when diluted at 5% (v/v).

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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 ASSISTANCE HÔPITAUXi
PUBLIQUE DE PARIS
PHARMACIE CENTRALE DES HOPITAUX DE PARIS

PHARMACIE CENTRALE
DES HÔPITAUX DE PARIS
Siège Social
7, rue du Fer-à-Moulin BP 09
75221 PARIS Cedex 05
Standard : 33 (1) 43 37 1100
Télécopie: 33 (1)43 37 95 97 Paris, le 16 Février 1993
Télex : 204 203 F PHARMAP

LABORATOIRE DES CONTRÔLES

BIOLOGIQUES
Secrétariat :
Poste : 308 Réf : JCD/VLJ/93007
Laboratoire :
Poste : 251
Jacques Christian DARBORD
Professeur de Microbiologie OBJET DE LA DEMANDE
Pharmacien des Hôpitaux

Etude de l'activité sporicide du STERANIOS 20 %

Concentré, formule n 0359102 selon la norme

AFNOR NF T 72230 (Août 88)

RESPONSABLE DE L'ETUDE

Professeur J.C. DARBORD

Laboratoire de Bactériologie

ort est composé de 3 pages numérotées

Unite Industrielle :
13, rue Lavoisier
92023 NANTERRE Cedex
Standard : 33 (1) 47 29 13 13
Télécopie : 33 (1) 47 25 36 02
Télex:613252FSOLUAP

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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 JCD/VLJ/93007 du 16 Février 1993

PRINCIPE

L'essai a été réalisé selon le protocole décrit dans la norme française homologuée

NF T 72230 : Antiseptiques et désinfectants utilisés à l'état liquide, miscibles à l'eau

et neutralisâmes.

Détermination de l'activité sporicide. Méthode par dilution-neutralisation.

IDENTIFICATION DE L'ECHANTILLON

Nom du produit : STERANIOS 20 % Concentré

Fabricant : Laboratoire ANIOS

Date de réception au laboratoire : 06/01/93

Conditions de stockage au laboratoire : température ambiante et obscurité

Période d'analyse : Janvier à Février 1993

CONDITIONS OPERATOIRES

Température d'essai : 20°C

Temps de contact : 1-2-3 heures

Diluant du produit :

recommandé par le fabricant : eau distillée

utilisé lors des essais : eau distillée

Neutralisant :

composition : Lécithine Polysorbate 80 (Tween)

concentration : 0,3 % (m/v) 5 % (v/v)

Neutralisant ajouté au milieu de dénombrement : néant

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Page 144
 Laboratoire de Microbiologie

Lille-Hellemmes, le 12 Mars 1993

Lille Hellemmes, on the 12th march 1993

Objet de la demande n°4122

Study n°4122 gb

Détermination de l'activité sporicide de STERANIOS 20% vis à vis des spores de

Clostridium sporogenes selon la norme NF T 72-231 (août 88).

Détermination of the sporicidal activity of STERANIOS 2O% against spores

of Clostridium sporogenes according to the standard NF T 72-231 ( august
88).

Responsables de l'étude: In charge of the study :

F. nd
Microbiologie Pharmacien sable Microbiologie
Manager Pharmaà obiology Manager

Ce document comporte 5 pages numérotées et aucune annexe.

This report is made of 5 numbered pages and 0 annexe.

study n°- 4122 GB Demande n" 4122 - Page 1/5

Laboratoires ANIOS
Pavé du M o u l i n - 59260 Lille-Hellemmes
sEQNets
Tél. +33 3 20 67 67 67 - Fax : +33 3 20 67 67 68
Siret N° 458 501 921 00043 - SA au capital de 232.800 €

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Page 145
Principe : Principle :
L'essai a été réalisé selon le protocole fixé par la norme française NF T 72-231
"ANTISEPTIQUES et DESINFECTANTS UTILISES A L'ETAT LIQUIDE,
MISCIBLES A L'EAU".
Détermination de I1 activité sporicide ( capacité d'un produit à réduire de 5 log le
nombre de spores bactériennes vivantes en 1 heure de contact à 20°C ).
Méthode par filtration sur membranes.

The test is performed according to the protocol determined by the standard

NF T 72-231 "ANTISEPTICS and DISINFECTANTS USED WHEN LIQUID,
MISCIBLE TO WATER".
Determination of the sporicidal activity (capacity of a product to reduce by 5
Log the number of living spores in a 1 hour contact time at 20°C).
Membrane filtration method.

Identification de l'échantillon : Sample identification

Nom du produit
Name of the product : STERANIOS20%

Numéro de formule
Batch formula : 03591 02

Fabricant
Manufacturer : LABORATOIRES ANIOS

Date de réception au laboratoire : Le 01703/93

Receipt date at the laboratory : On 93/03/01

Conditions de stockage au laboratoire : T° ambiante et obscurité

Storage conditions at the laboratory : room temperature and darkness

Période d'essai : Du 02/03/93 au 11/03/93

Period of analysis : From 93/03/02 to 93/03/11

study n°- 4122 GB Demande n° 4122 - Page 2/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Page 146
Conditions expérimentales '.Expérimental conditions

Température de l'essai
Test température : 20°C±1°C

Temps de contact
Contacttime : 60 minutes ± 10s

Diluant du produit lors des essais : eau de ville stérile

(Diluent of the product used for the test)...'. Sterile tap water

Souche testée (Strain tested) : Clostrídium sporogenes CIP 7939

Nature des membranes : MILLIPORE HAWG en ester de

cellulose, 0.45 u , stérile
Nature ofttie membranes : MILLIPORE HAWG made of
cellulose ester, 0.45/im, sterile
Liquide de rinçage : eau distillée Tween 80 + eau distillée
Rinsing liquid. : distilled water Tween 80 +
distilled water
Nombre des rinçages
Rinsing number : 3+1
Volume utilisé pour chaque rinçage
Volume used for each rinsing : 100 ml
Neutralisant ajouté au milieu de dénombrement : Néant
Neutraïizer agent added to the counting medium : None

study ne- 4122 GB Demande n° 4122 - Page 3/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Page 147
Résultats : Results

Essai préliminaire : Preliminary test

II permet la validation des conditions expérimentales de l'essai proprement dit.

The pretest, leading to the choice of the most suitable neutralizing agent for
the application of this standard, shall be carried out before the main test.

c% SOUCHE - STRAIN N N1 nf
(v/v) collection d'origine et numéro
Original collection and number
10 Clostridium sporogenes CIP 7 939 188 199 211

C = Concentration essayée du produit - Product concentrations tested.

N = Dénombrement des micro-organismes par inclusion en gélose.
Counting of micro-organisms by inclusion in agar.
N' = Dénombrement des micro-organismes sur membranes n'ayant pas été en contact avec le
produit.
Counting of micro-organisms on membrane without any contact with the product.
n' = Dénombrement des micro-organismes sur membranes ayant été en contact avec le produit.
Counting of micro-organisms on membrane after contact with the product.

Interprétation : Interpretation

N' ,n'et N sont équivalents .

Les conditions expérimentales adoptées pour la souche sont applicables lors de

l'essai proprement dit.
The expérimental conditions adopted for the tested strain are usable during
ttie actual test.

studyn°-4122GB Demande n° 4122 - Page 4/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Page 148
 Essai proprement dit : Actual test
Mise en contact des suspensions de spores bactériennes pendant 60 minutes à 20 °C
avec le produit à différentes concentrations (x) et ïe milieu de suspension, filtration sur
membranes, rinçage, dénombrement des micro-organismes survivants.
L'essai préliminaire et l'essai proprement dit sont réalisés simultanément.
The spores suspensions are put into contact during 60 minutes at 20°C with the
product at different concentrations (x) and the suspension medium, filtration
through membranes, rinsing, counting of surviving micro-organisms.
The preliminary test and the actual test are simultaneously realised.

X
SOUCHE - STRAIN N* X % (V/V) pH
1 2.5 5 7.5 10 xMin xMax

ClostridJum sporogenes CIP 7939 199 + 29.5 0 0 0 7.33 7.67

N' = Déterminé lors de l'essai préliminaire. Determined during the preliminary test
x = Concentration en % du produit en contact avec les micro-organismes.
Product concentration in contact with micro-organisms.
X = Dénombrement des micro-organismes survivants après contact avec le produit.
Counting of surviving micro-organisms after contact with the product
+ = Non numerable (+ de 150 colonies). Non countable (more than ISO colonies).

Interprétation :

Sont sporicides les concentrations pour lesquelles X < N'.

The sporicidal concentrations are those for which X < N'.

Conclusion : Conclusion :
STERANIOS 20% présente une activité sporicide après 60 minutes de contact à
20°C, vis-à-vis de Clostridium sporogenes selon la norme NF T 72-231.

STERANIOS 2O% présents a sporicîdaî activity after a 60 minute contact

time at 20°C, against Clostridium sporogenes, according to the standard
NF T 72-231.

study n°-4122 GB Demande nû 4122 - Page 5/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre
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Page 150
 Laboratoire de Microbiologie

Lille-Hellemmes, le 14 mai 1998

Lille Hellemmes, on the 14th may 1998

Objet de la demande n°10236

Study n° 10236 gb

Détermination de l'efficacité de STERANIOS 20% vis à vis de des spores de

Bacillus cereus, dans les conditions pratiques d'emploi. Essai de suspension
selon la norme expérimentale T 72-301 (novembre 89).

Détermination of the sporicidal activity of STERANIOS 20% against spores

of Bacillus cereus in the practical conditions of use. Suspension test
according to the experimental standard T 72-301 (November 89).

Responsables de l'étude: In charge of the study :

m rai
ResDofisable Microbiologie Pharmacien R™6nsable Microbiologie
Miaroogy Manager Fharm&tííst Microbiology Manager

Ce-dócument comporte 5 pages numérotées et aucune annexe,

This report is made of 5 numbered pages and 5 annexe.

Demande n° 10236 - Study N° 10236 gb - Page 1/5

Laboratoires ANIOS
Pavé du M o u l i n - 59260 Lille-Hellemmes
Tél. +33 3 20 67 67 67 - Fax : +33 3 20 67 67 68
Siret N° 458 501 921 00043 - SA au capital de 232.800 €

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Page 151
Principe : Principle :

L'essai a été réalisé selon le protocole fixé par la norme française expérimentale
T 72-301 "ANTISEPTIQUES et DESINFECTANTS UTILISES A L'ETAT LIQUIDE,
MISCIBLES A L'EAU".
Détermination de l'efficacité du produit sur divers micro-organismes dans les
conditions pratiques d'emploi.
Méthode par filtration sur membranes.

The test is performed according to the protocol determined by the French

experimental standard T 72-301 "ANTISEPTICS and DISINFECTANTS USED
WHEN LIQUID, MISCIBLE TO WATER".
Determination of the effectiveness of the product against several micro-
organisms in the practical conditions of use.
Membrane filtration method.

Identification de l'échantillon : Sample identification

Nom du produit
Name of the product : STERANIOS 20%

Fabricant
Manufacturer : LABORATOIRES ANIOS

Date de réception au laboratoire : Le 05/12/1997

Receipt date at the laboratory : On 97/12/05

Conditions de stockage au laboratoire : T° ambiante et obscurité

Storage conditions at tlie laboratory : room temperature and darkness

Période d'essai : Du 11/12/97 au 24/04/98

Period of analysis. : From 97/12/11 to 98/04/24

Demande n° 10236 - Study N° 10236 gb - Page 2/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Conditions expérimentales -.Experimental conditions

Température de l'essai
Test temperature : 20°C ± 1°C

Temps de contact
Contact time : 5 minutes et 15 minutest 10s

Diluant du produit lors des essais : eau distillée

(Diluent of the product used for the test).... : Distilled water

Souche testée (Strain tested) : Bacillus cereus CIP 7803

Milieu de suspension : Albumine 0.3% - eau dure 30°f

Suspension medium : Albumin 0.3% - Hard water 30°f

Stabilité en présence du produit : Absence de précipité pendant l'essai

Stability in the presence of the product.... : No precipitate during the test

Nature des membranes : MILLIPORE HAWG en ester de

cellulose, 0.45 u , stérile
Nature of the membranes : MILLIPORE HAWG made of
cellulose ester, OASpm, sterile
Liquide de rinçage : eau distillée Tween 80 + eau distillée
Rinsing liquid : distilled water Tween SO +
distilled water
Nombre des rinçages
Rinsing number : 3+1
Volume utilisé pour chaque rinçage
Volume used for each rinsing. : 100 ml
Neutralisant ajouté au milieu de dénombrement : Néant
Neutraliser agent added to the counting medium : None

Demande n° 10236 - Study N° 10236 gb - Page 3/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Résultats : Results

Essai préliminaire : Preliminary test

II permet fa validation des conditions expérimentales de l'essai proprement dit

The pretest, leading to the choice of the most suitable neutralizing agent for
the application of this standard, shall be carried out before the main test.

c% SOUCHE - STRAIN N N1 n n1
(v/v) collection d'origine et numéro
Original collection and number

5 Bacillus cereus CIP 7803 172 138 124 128

C = Concentration essayée du produit - Product concentrations tested.

N = Dénombrement des micro-organismes par inclusion en gélose.
Counting of micro-organisms by inclusion in agar.
N1 = Dénombrement des micro-organismes sur membranes n'ayant pas été en contact avec le
produit.
Counting of micro-organisms on membrane without any contact with the product,
n = Dénombrement des micro-organismes sur membranes ayant été en contact avec le produit.
Counting of micro-organisms on membrane after contact uñth the product.
n' = Contrôle des conditions expérimentales.
Control of the experimental conditions

Interprétation : Interpretation
n, n', N1 et N sont équivalents (n1 > 0.5 N'), n, ri, N' arid N are equivalent (n1 >
0.5 N').

Les conditions expérimentales adoptées pour la souche testée sont applicables

lors de l'essai proprement dit.
The expérimental conditions adopted for the tested strain are usable during
the actual test.

Demande n° 10236 - Study N° 10236 yb - Page 4/5

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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 Essai proprement dit : Actual test
Mise en contact des suspensions bactériennes pendant 5 et 15 minutes à 20 "C avec le
produit à différentes concentrations (x) et le milieu de suspension, filtration sur
membranes, rinçage, dénombrement des micro-organismes survivants.
L'essai préliminaire et l'essai proprement dit sont réalisés simultanément.

The bacterial suspensions are put into contact during 5 and 15 minutes at 20°C
with the product at different concentrations (x) and the suspension medium,
filtration through membranes, rinsing, counting of surviving micro-organisms.
The preliminary test and the actual test are simultaneously realised.
Temps de X
SOUCHE - STRAIN Nf contact X % (V/V) pH
contact 1 2.5 5 xMin xMax
time

138 5 minutes + 212 0

Bacillus cereus CIP 7203 6.92 6.17
138 15 minutes 198 3 0

N1 = Déterminé lors de l'essai préliminaire. Determined during the preliminary test

x = Concentration en % du produit en contact avec les micro-organismes.
Product concentration in contact, ivith micro-organisms.
X = Dénombrement des micro-organismes survivants après contact avec le produit.
Counting of surviving micro-organisms after contact with trie product
+ = Non numerable (+ de 150 colonies). Non countable, (more than 150 colonies).

Interprétation :
Sont sporicJdes, les concentrations pour lesquelles X < N'.
The sporicidal concentrations are those for which X <N'.

Conclusion : Conclusion :

STERANIOS 20% présente une activité sporicide sur les spores de Bacillus
cereus testées après 5 et 15 minutes de contact à 45°C, à la concentration de
5%, selon la norme T 72-301, dans un milieu de suspension composé d'albumine
0.3% et d'eau dure 30°f.

STERANIOS 2O% presents a sporicidal activity against the tested spores of

Bacillus cereus after a 5 and 15 minute contact time at 45 °C, at f/ie 5 %
concentration, according to the standard T 72-301, in a suspension medium
made of 0.3% albunún and hard water 3O°f.

Demande n" 10236 - Study N" 10236 gb - Page 5/5

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 Toxicology
___________________
Determination of primary cutaneous index of diluted product Page 159
Determination of ocular irritation index of diluted product Page 169

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 COMPANY : LABORATOIRES ANIOS
Pavé du Moulin

59260 LILLE-HELLEMMES

ASSESSMENT OF PRIMARY CUTANEOUS IRRITATION

IN RABBIT

INDEX OF CUTANEOUS IRRITATION

STERANIOS 20 % CONCENTRE

REPORT : 1C 93-313

GAZINET, MAY 1993

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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I
t 93.313

I CONTENTS
I
Pages

I SUMMARY OF THE STUDY

1
1. INTRODUCTION

I
2. AUTHENTICATION OF THE STUDY
I
I 3. EXPERIMENTAL PROTOCOL 6
3.1. ANIMALS USED - HOUSING AND FEEDING 6
I 3.2. TEST CONDITIONS 7
3.3. MACROSCOPIC EXAMINATIONS AND EVALUATION OF THE PRIMARY
I CUTANEOUS IRRITATION 8
3.4. DETERMINATION OF THE PRIMARY CUTANEOUS IRRITATION INDEX 8
I
4. RESULTS - CONCLUSION 9
I 4.1. RESULTS 9
I 4.2. CONCLUSION 9

I
I
I
I
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Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre
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SUMMARY OF TI STUDY

The product STERANIOS 20 % CONCENTRE was applied 5 % diluted at the dose

of 0.5 ml on undammaged skin area and scarified skin area of six rabbits
according to an experimental protocol established from the official
method as defined in the Decree of February the 1st 1982 ("Journal
Officiel de la République Française", dated February the 21st 1982).

The scores attributed, allowed to obtain a primary cutaneous irritation

index of 3.2.

The results obtained allow to conclude that the product STERANIOS 20 %

CONCENTRE 5 % diluted is IRRITATING to skin.

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1. INTRODUCTION

At the request of the LABORATOIRES ANIOS, Pavé du Moulin, 59260 LILLE-

HELLEMMES, we assessed on albino Rabbit the primary cutaneous irritation
induced by the product :

STERANIOS 20 % CONCENTRE

To perform this trial, we received on March the 12th, 1993. sample with
the following characteristics :

. Container : plastic flask

. Quantity : about 200 ml

. Form : transparent liquid

. Colour : green

. pH : 4.1

5 ml of this product were introduced into a hermetically stoppered glass

flask, labelled 93-313. in order to be kept at room temperature for three
years at most.

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Page 162
 1C 93-313

2. AUTHENTICATION OF THE STUDY

I the undersigned, J.François PIÑÓN, Master in Veterinarian Sciences,

Scientific director,

attest that the study (Protocol BIOGIR S.A. REF. IC) was performed
according to the internal procedures, under the responsibility :

. Study director : Pierre FAURET,

. Technical : Corinne SCHEYDER,
. Scientific secretary : Catherine PRIAM.

This study was carried out on the premises of BIOGIR S.A. Laboratory
(F 33611 GAZINET CEDEX).

All the documents related to this study are stored under the reference
1C 93-313 in special premises of BIOGIR S.A. Laboratory for three years.

At the end of this period, the study documents will be, after sponsor
agreement, either transferred in sponsor premises or destroyed.

The present report is made up of 9 pages numbered from 1 to 9 and 1 table.

GAZINET, May the l8th, 1993

Marie-Joëlle GAUFRES Eric DEVAURE

CENTER DIRECTOR QUALITY ASSURANCE

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 1C 93.313

3. EXPERIMENTAL PROTOCOL

The trial, performed between April the 6th and the 9th, 1993. was carried
out according to the protocol described below, established from the
official method as defined in the Decree of February 1st 1982 ("Journal
Officiel de la République Française", dated February 21st 1982),taking
into account the following modification :

. the occlusive patch (from J.O.) is replaced by a semi-occlusive patch.

3.1. ANIMALS USED - HOUSING AND FEEDING

3.1.1. Strain

6 albino New-Zealand rabbits (3 males and 3 females), from the ELEVAGE

DES FEUILLETAS (40 -CAMPET LAMOLERE), about 12 weeks old at the start of
the trial.

3.1.2. Housing

The animals were housed in individual stainless steel cages

(61 x 46 x 3^ cm) with a grid floor. The door of each cage was equipped
with a watering device.

The cages were kept in a room :

• Lit in a complementary way by natural and artificial lighting,

• Air renewal (14 cycles per hour),
• Air-conditioned (upper and lower limits, from twice a day controls) :

. temperature of 20°5C ± 1°5C,

. relative humidity of 66.5 % ± 2.5.

3.1.3. Food and water

The animals received tap water and food (UAR 112) ad libitum.

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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 1C 93.313

3.2. TEST CONDITIONS

3.2.1. Preparation of the animals

Prior to the trial, the animals were kept for an acclimatization period
of 10 days in the same conditions of quarters and feeding as those used
during the trial.

The animals were identified on the day of their being placed in the
experiment by a numbered metal ring (CHEVILLOT-QUICK) clipped to the edge
of the ear (n° A 3730 to A 3732 and A 3763 to A 3765).

About 24 hours before the application of the product, the back and sides
of the rabbits were carefully clipped with a fine comb electric clipper
(height of cut : 0.1 mm) in order to obtain an area of skin of
approximately 14 x 14 cm.

3.2.2. Dose levels and Administration mode

The product was applied 5 % diluted at a dose of 0.5 ml on scarified skin
area of the right flank of each rabbit.

It was applied on a Codex hydrophilic eight layer gauze, about 2.5 cm

square, which is then laid down on the skin.

On the left flank was applied the same way 0.5 ml of product on undamaged
skin area.

After application, the square gauzes were kept in contact with the skin,
using a hypoallergenic microporous adhesive strip 50 mm wide. The whole
was then covered with a stretchable band (fixed with an adhesive tape)
wrapped round the animal without any restrain for the respiratory and
abdominal movements.

Animals were then put back into their cages.

After a skin contact period of 24 hours, the dressings were removed.

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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 1C 93.313

3.3- MACROSCOPIC EXAMINATIONS AND EVALUATION OF THE PRIMARY CUTANEOUS

IRRITATION

Within one hour after the removal of the dressings, i.e. about 25 hours
and then 72 hours after the application of the product, macroscopic
observations were carried out for each rabbit, always under the same
conditions (particularly with regard to lighting).
The purpose of the observation was to evaluate both IRRITATION REACTIONS
on the treated areas comparatively to the control ones, according to the
following scale :
ERYTHEMA AND ESCHAR FORMATION

• No erythema 0
• Slight erythema (barely perceptible) 1
• Well defined erythema 2
• Substantial erythema 3
• Severe erythema (crimsom red) with or without eschar (deep
injuries) 4

If there was any doubt between two values of the evaluation scale, the
higher one was selected.

OEDEMA

No oedema.........................................................0
Very slight oedema (barely perceptible) ........................... 1
Slight oedema (edges of area well defined, apparent swelling) ..... 2
Moderate oedema (approximately 1 mm thick) ........................ 3
Severe oedema (more than 1 mm thick and extending beyond the
area of exposure).................................................4
On the other hand, structure modifications of the skin were noticed
(thickening, roughness, burn).

3.4. DETERMINATION OF THE PRIMARY CUTANEOUS IRRITATION INDEX

The scores obtained on the healthy and scarified skin for erythema and
oedema, 2k hours and 72 hours after application of the bandages, were
added together. The values thus obtained were divided by 24 (total number
of data) to obtain the Primary Cutaneous Irritation Index, designated as
IPc) . As from this index, the primary irritation reactions were
interpreted as follows :

IPc PRODUCT CLASSIFICATION

IPc í 0.5 NOT IRRITANT

0.5 < IPc <. 2 SLIGHTLY IRRITANT
2 < IPc s 5 IRRITANT
5 < IPc ¿ 8 HIGHLY IRRITANT

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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1
1 1C 93.313

1
1 4. RESULTS - CONCLUSION

1 4.1. RESULTS

1
•
The individual results
in the inclosed table.
scored according to the official scale are shown

1 In half the animals,

spread out the whole
developped on undamaged skin.
a superficial necrosis (burn) was recorded. It
treated area of scarified skin but was less

1 The further development was that of normal healing.

In other animals, the inflammatory phenomena (clear erythema , together

1 with sometimes oedema) improved in a satisfactory way.

The scores attributed, allowed to obtain a primary cutaneous irritation

1 index of 3-2.

4.2. CONCLUSION
1
• According to the adopted classification, and under the experimental

1 conditions of the test, the product :

STERANIOS 20 % CONCENTRE

1 appeared to be IRRITATING to skin, when used 5 % diluted.

1
1 <T" r 1
-— ^
<^=^_JL_±=±^
1 Jean-François PIÑÓN
Pharmacologist Toxicologist Expert

1
1
1
1
s
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1
• k RESULTATS : TABLEAU 1
• BIOGIRSjY. i (Results : Table 1)

1
• REF.PRODUIT : Stéranios 20% Concentré REF.ETUDE : 1C 93.3 13
(Product Ref.) (Study réf.)
• APPLICATION: 0.5 ml de solution du produit à 5% OPERATEUR: C. Scheyder
(Application) dans l'eau, sous pansement semi-occlusif (Operator)

1
JO le: 06/04/93
• (DO on)

INDICE D'IRRITATION PRIMAIRE CUTANEE

1 (Index of primary cutaneous irritation)

1 LAPINN0 A A A A A A TOTAL
(Rabbit n°) 3763 3764 3765 3730 3731 3732
1
• E R Y T HE M E N 4 4 1 2 1 4 16
( E r y t h e En a ) 24h
1 S 4 4 2 2 2 4 18
N 4 4 0 1 0 4 13
• 72h
1 S 4 4 1 4 1 4 ! 18

O E D E M E N 0 2 0 0 0 2 4
1 ( 0 e d e m i<) 24h
• S 1 2 1 0 0 2 ¡1 6
N 0 0 0 0 0 0 0
1 72h
S 0 0 0 0 0 1 1 1

1 N S

• N = peau Normale ; S = peau Scarifiée 33 43

(Normal skin) (Scarified skin)

1
1
f3'2
IPC = TOTAL(N)+TOTAL(S) =
24 • I

1
IRRITANT
1
1
1
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I
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I COMPANY : LABORATOIRES ANIOS

I Pavé du Moulin

59260 LILLE-HELLEMMES

I
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I
I ASSESSMENT OF OCULAR IRRITATION

I IN RABBIT

I INDEX OF OCULAR IRRITATION

STERANIOS 20 % CONCENTRE

I REPORT : 10 93-313

I
I
I
I
GAZINET, MAY 1993

GAZ1NET
Tél. : 56 68 02 S2
6 B 646 - Siret 33788201300C

Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre

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Page 169
 io 93.313

CONTENTS
I
I
Pages
I
I SUMMARY OF THE STUDY

I 1. INTRODUCTION

I 2. AUTHENTICATION OF THE STUDY

I
3. EXPERIMENTAL PROTOCOL 6

I 3.1. ANIMALS USED - HOUSING AND FEEDING 6

• 3.2. TEST CONDITIONS 7

3.3. MACROSCOPIC OBSERVATIONS AND EVALUATION OF THE

_ OCULAR IRRITATION 7

• 3.4. CALCULATION OF THE OCULAR IRRITATION INDICES 10

• 3.5. INTERPRETATION OF RESULTS 10

• 4. RESULTS - CONCLUSION 11

4.1. RESULTS 11

• 4.2. CONCLUSION 11

I
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I
I
I SUMMARY OF THE STUDY
I
I
I
I The product STERANIOS 20 % CONCENTRE 5 % diluted was instilled at the
single dose of 0.1 ml in the eye of three rabbits according to an
experimental protocol established from the official method as defined in

I the Decree of June the 9th, 1992 ("Journal Officiel de la République

Française", dated July the 10th 1992).

I The scores attributed, allowed

index of 23.3 on Dl.
to obtain a maximum ocular irritation

I The results obtained allow to conclude that the product STERANIOS 20 %

CONCENTRE 5 % diluted is MODERATELY IRRITATING to eye.

I
I
I
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I Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre
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I
I 1. INTRODUCTION

I
I At the request of the LABORATOIRES ANIOS, Pavé du Moulin, 59260 LILLE-
HELLEMMES, we assessed on albino Rabbit the ocular irritation induced by

I the product :

I STERANIOS 20 % CONCENTRE

I To perform this trial, we received on March the 12th, 1993 a sample with
the following characteristics :

I Container plastic flask

I Quantity about 200 ml

I Form

Colour
transparent liquid

green

I pH

I 5 ml of this sample were introduced into a hermetically stoppered glass

flask, labelled 93-313. in order to be kept at room temperature for three
years at most.

I
I
I
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I Laboratoires ANIOS - 000182 = Steranios 20% concentre
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I
I 2. AUTHENTICATION OF THE STUDY

I
I I the undersigned, J.François
Scientific director,
PIÑÓN, Master in Veterinarian Sciences,

I attest that the study (Protocol BIOGIR S.A. REF. 10) was performed
according to the internal procedures, under the responsibility :

. Study director : Pierre FAURET,

I . Technical : Corinne SCHEYDER,

. Scientific secretary : Catherine PRIAM.

I This study was carried out on

(F 33611 GAZINET CEDEX).
the premises of BIOGIR S.A. Laboratory

I All the documents related to this study are stored under the reference
10 93'313 in special premises of BIOGIR S.A. Laboratory for three years.

I At the end of this period, the study documents will be, after sponsor
agreement, either transferred in sponsor premises or destroyed.

I The present
table.
report is made up of 11 pages numbered from 1 to 11 and 1

I GAZINET, May the 18th, 1993

=1

Marie-Joëlle GAUFRES Eric DEVAURE

CENTRE DIRECTOR QUALITY ASSURANCE

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I 10 93.313

I
I 3. EXPERIMENTAL PROTOCOL

I The trial, performed between April the 5th and the 12th, 1993 was carried

I out according to the official method as defined in the Decree of June the
9th 1992 ("Journal Officiel de la République Française", dated July the
10th 1992).

I 3.1. ANIMALS USED - HOUSING AND FEEDING

3.1.1. Strain

I 3 male albino New-Zealand rabbits, from the ELEVAGE DES FEUILLETAS (40 -
CAMPET LAMOLERE), about 12 weeks old at the start of the trial.

I 3.1.2. Housing

I The animals were individually housed in stainless steel cages (61 x 46 x

3^ cm) with a grid floor. The door of each cage was equipped with a
watering device.

I The cages were kept in a room :

I s Lit, in a complementary way, by natural and artificial lighting,

« Air renewal (14 cycles per hour),
" Air-conditionned (upper and lower limits, from twice a day controls) :

I . temperature 20°5C ± 1°5C,

. relative humidity 66.5 % ± 2.5-

I 3.1.3' Food and water

I The animals received tap water and food (UAR 112) ad libitum.

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I
I 3.2. TEST CONDITIONS

I 3-2.1. Preparation of the animals

I Prior to the trial, the animals were kept for an acclimatization period
of 10 days in the same conditions of quarters and feeding as those used
during the trial.

I The animals were identified on the day of their being placed in the
experiment by a numbered metal ring (CHEVILLOT-QUICK) clipped to the
edge of the ear (ne A 3730 to A 3732).

I Before the instillation, the eyes of the rabbits were inspected in order
to exclude animals showing ocular lesions.

I 3.2.2. Dose level - Administration mode

As the animals were immobilized on a restraining table, the product

I was applied 5 % diluted directly into the lower conjunctival sac of one
eye of each rabbit. The second eye was left untreated and served as a
control.

I 0.1 ml of the product was instilled using

(graduated in l/100th).
a sterile Í ml syringe

I Upper and lower eyelids were held in contact with each other for a few
seconds (10), in order to avoid any loss of product. Eyes were not rinsed.

I The animals were restrained for one hour before the first observation,
then were put back into their cages.

I 3.3- MACROSCOPICS OBSERVATIONS AND EVALUATION OF THE OCULAR IRRITATION

I Ocular examinations were performed on both right and left eyes :

1 hour after instillation and 1, 2, 3» ^ said 7 days later.

I These observations were always performed under the same conditions,

particularly with regard to lighting, and in the same order as at the

I time of the instillation.

Ocular examinations were carried out in the following order and according
to the numerical scale of the "Journal Officiel de la République

I Française" dated 07-10.1992 : if there was any doubt between two values
of the evaluation scale, the higher one was selected.

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I
I 3.3'1« Conjunctiva

I CHEMOSIS (Oedema)

I 0
0
0
No swelling
Slight swelling, including the nictating membrane
Swelling with eversión of the eyelids
0
1
2

I * Swelling with eyelids about half closed

* Swelling with eyelids about half closed to completely
closed k
3

I Let A be the score obtained

I 0
No lacrymation
" Slight lacrymation
LACRYMATION

(does not include small amounts

0

I normally observed in inner canthus)

" Lacrymation with moistening of the eyelids and hairs
just adjacent to eyelids
1

I * Lacrymation with moistening of the eyelids and hairs over a

considerable area around the eyes 3

I Let B be the score obtained

ENANTHEMA (redness)

I 0
Normal vessels
* Vessels definitely more injected than normally
0
1

I 0
Individual vessels not easily discerned :
- diffused bright red
- diffused dark red
2
3

I 3.3.2. Iris
Let C be the score obtained

I Iris examination was

an ophtalmoscope).
carried out with an electric lamp (eventually with

I * Normal
* Markedly more folded than normal, congestion, swelling,
iris still reacting to light by contraction, even slow (any,
0

I several or all these signs)

* No reaction to light, haemorrhage, serious destruction
( any, several or all these signs )
1

I Let D be the score obtained

I 8
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I
I 3.3.3. Cornea

The lesions were assessed by direct comparative examination of both eyes.

I Except for the 1 hour reading and in order to verify the absence of
corneal and/or epithelial lesions and to assess the surface affected, one

I drop of 2 % aqueous fluorescein sodium solution was instilled into the

eyes of each rabbit. The excess of fluorescein was eliminated by a rinse
with saline, taking care not to induce any lesion.

I OPACITY - DEGREE OF DENSITY

I Only the most opaque area is chosen for the reading.

I * No visible opacity at the direct examination

(neither loss of brilliance nor of gloss) or after
fluorescein instillation
* Scattered or diffuse translucent areas, details of
0

I iris clearly visible

* Easily discernible translucent area, details of
iris slightly obscured
1

I * Opalescent areas, no details of iris visible, size

of pupil barely discernible
* Complete corneal opacity, iris and pupil not
3

I discernible

Let E be the score obtained

4

I
I OPACITY AFFECTED AREA and/or EPITHELIAL LESION

I One quarter (or less) but not zero

More than one quarter, but less than a half
More than a half, but less than three quarters
More than three quarters, up to whole area
1
2
3
4

I Let F be the score obtained

I
I
I
I
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I
I 3.4. CALCULATION OF THE OCULAR IRRITATION INDICES

I 3.4.1. Individual ocular irritation index {I.O.I}

I For each animal and on each period of observation,

calculations were made :
the following

I . Conjunctiva : X = 2 x (A + B + C) (X a 20)

. Iris :Y = 5 x D (Y í 10)

I . Cornea :Z = 5 x E x F (Z ü 80)

By adding these values for each rabbit on each period of observation,

I individual ocular irritation indices (designated as I.O.I) were obtained.

3.4.2. Mean ocular irritation index (0.1)

I The average of the individual indices on each period of observation

allowed the calculation of mean ocular irritation indices (designated as

I 1.0).

I 3.4.3. Acute ocular irritation index (lOMax)

The highest mean ocular irritation index obtained was considered as the
acute or maximal ocular irritation index (designated as IQMax).

I 3.5. INTERPRETATION OF RESULTS

I From the value of the lOMax, the product was classified according to
the scale presented in the "J.O. de la République Française" dated 07-10,

I 1992 :

I lOMax CLASSIFICATION

I * 15
15 to s 30
SLIGHTLY IRRITANT

MODERATELY IRRITANT

I 30 to <, 50
> 50
IRRITANT

VERY IRRITANT

I
I 10

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. RESULTS - CONCLUSION

4.1. RESULTS

The scores obtained according to the official scale are collected in

the enclosed table.

Irritative phenomena were moderate in two animals but only slowly

reversible.

In the third (A 3731). blue keratitis together with purulent secretions

were observed. The lesions reached their maximal intensity on D4 in this
animal. Such findings suggest that some delayed extracontamination
occured after the efficacy time of the antiseptic elaped.

The scores attributed allowed to obtain a maximal ocular irritation

index of 23-3 on Dl near the limit score to class the product as
"IRRITANT". It was of 21.7 on D4 and 9-3 on D7, taking into account the
reactions of the animal A 3731-

4.2. CONCLUSION

Under the experimental conditions of the test, the product :

STERANIOS 20 % CONCENTRE

must be considered as MODERATELY IRRITATING to eye, when used 5 % diluted.

Jean-François PIÑÓN
Pharmacologist Toxicologist Expert

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 Regulation
___________________
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 Fiche de Données de Sécurité
Safety Data Sheet

La Fiche de Données de Sécurité (FDS) de ce produit est

disponible sur notre site web www.anios.com *. En plus de la
visualisation et/ou de l’impression, il vous est possible de la
télécharger.

La consultation de la FDS par internet vous permet de recevoir

ultérieurement par e-mail les mises-à-jour effectuées.

A défaut d’un accès internet, les FDS restent disponibles sur

demande auprès de nos laboratoires (tél. : +33 3 20 67 67 67 –
fax : +33 3 20 67 67 68)

* un accès est également possible par le site htpp://www.quickfds.com

The Safety Data Sheet (SDS) of this product is available on our Web site
www.anios.com. In addition to visualization and/or impression, it is possible
for you to download it.

The consultation of this SDS via internet enables you to receive later on by
email any updated version of this document.

In the absence of an Internet access, the SDS remains available on request

near our laboratories (tel.: +33 3 20 67 67 67 - fax: +33 3 20 67 67 68)

* an access is also possible at the site htpp://www.quickfds.com

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Protocols and brochures
for use
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 STERANIOS 20% Concentré
Concentrated cold sterilant for
instrumentations and medical devices

Instructions for use

Dilution Glutaraldehyde
concentration
5 % i.e.:
250 ml for 5 l 1%
500 ml for 10 l
10 % i.e.:
250 ml for 2.5 l 2%
500 ml for 5 l

1 Clean medical device with a 2 Rinse thoroughly with tap water. 3 Make the product dilution, according a
pre-disinfectant like ANIOSYME (Change rinsing water after every glutaraldehyde concentration required.
DD1, HEXANIOS G+R, use).
SALVANIOS pH7 or
ANIOSYME PLA.

4 Immerse the medical device. Cover 5 Rinse very thoroughly with 6 Dry with single-use tissue.
the soaking bath. Contact time: sterile or filtered water Keep medical device in an aseptic
10 minutes or 1 hour according to (0.2 µm). area.
Laboratoires ANIOS - 05a-0182GB

the activity required.

Indications Qualitative composition

Disinfection of endoscopic, surgical and medical equipment and 20% glutaraldehyde concentrated solution, stabilized by a hydro-
medical devices in static bath or in automatic machine. alcoholic complex.

Microbiological properties Precautions for use

STERANIOS 20% CONCENTRE is in compliance with AFNOR Please refer to safety data sheet and label.
and European standards of antimicrobial efficiency: Preparation classified according to the European Directive
• Bactericidal: NF EN 1040, NF T 72-151, NF T 72-171, « Dangerous preparations » 1999/45/EC.
NF T 72-190, T 72-301. Active against Mycobacterium
tuberculosis (T.B.).
• Fungicidal: NF EN 1275, NF T 72-190, NF T 72-201, T 72-301
• Virucidal: NF T 72-180. Active against HIV-I and HBV
• Sporicidal: NF T 72-230, NF T 72-231, T 72-301.

Pavé du Moulin
59260 Lille-Hellemmes . France
|
0459
Tel.: +33 3 20 67 67 67 AFAQ N°1995/3723a

Fax : +33 3 20 67 67 68

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