NO302475B1

NO302475B1 - 1-metylkarbapenemderivater og farmasöytisk preparat inneholdende disse

Info

Publication number: NO302475B1
Application number: NO922185A
Authority: NO
Inventors: Isao Kawamoto; Rokuro Endo; Masao Miyauchi; Katsuhiko Watanabe; Eiji Nakayama; Hiroshi Yasuda; Satoshi Ohya; Yukio Utsui
Original assignee: Sankyo Co
Priority date: 1991-06-04
Filing date: 1992-06-03
Publication date: 1998-03-09
Also published as: JPH05339269A; ES2120992T3; IE921796A1; IL102093A0; TW203612B; EP0518558A1; DE69226815T2; IL102093A; MX9202670A; DK0518558T3; NO922185L; CN1030767C; AU1739092A; CA2070305A1; NO922185D0; FI922561A; FI101226B; KR930000515A; FI101226B1; FI922561A0

Description

Den foreliggende oppfinnelse vedrører en serie 1-metylkarbapenemderivater som har utmerket antibiotisk akti-

vitet og fremragende stabilitet in vlvo.

Karbapenem-forbindelsene er en velkjent serie forbin-

delser som er i slekt med penicillinene og som har være angitt eller foreslått anvendt som antibiotika. De har en felles basisstruktur som kan representeres av formelen (A):

I denne formel er det vist nummereringen av de posi-

sjoner som er viktige når det gjelder karbapenemforbindelser,

ved anvendelse av den nummereringsmåte som vanligvis anvendes i faget og som benyttes i nomenklaturen til forbindelser ifølge oppfinnelse. Ifølge rekommandasjonene fra the International Union of Pure and Applied Chemistry (IUPAC),

Commission on Nomenclature of Organic Chemistry betegnes de forbindelser det henvises til heri halvsystematisk, ved anven-

delse av karbapenemstrukturen ovenfor som utgangspunkt.

Disse karbapenem-antibiotika som ikke har noen

substituent i 1-stillingen er potensielt en meget velegnet forbindelsesserie som har usedvanlig kraftig antibakteriell aktivitet. De er imidlertid uheldigvis kjemisk ustabile og dessuten følsomme overfor dehydropeptidase I in vlvo. Dehydropeptidase I er et enzym som hydrolyserer 8-laktamringen

i karbapenem-antibiotika og som foreligger i pattedyrvev,

eksempelvis i nyrebarken. Den er ansvarlig for den omfattende metabolisering av mange ellers verdifulle B-laktam-antibiotika i dyr, inklusive mennesker, hvilket i stor grad reduserer deres verdi. Trass i disse ulemper finner disse karbapenem-antibiotika økende anvendelse ved behandling av bakterieinfek-

sjoner. Et typisk og vanlig antibiotika av denne type er

tienamycin, som har formelen (B):

Antibiotikaets metabolisering in vivo kan demon-streres ved hjelp av et lavt utbytte av forbindelsen i seg selv (i motsetning til dets metabolitter) i urinen, og dette har vært demonstrert for tienamycin [H. Kropp et al., Anti-microb.Agents, Chemother., 22, 62 (1982); og S.R. Norrby et al., ibid., 23, 300 (1983)].

Selv om det har vært funnet at karbapenemforbindelser med en substituent i 1-posisjonen (ofte en 1-metylgruppe) ikke har denne sårbarhet overfor dehydropeptidase 1 in vivo, mangler mange forbindelser av denne type som til dato er oppdaget tilstrekkelig aktivitet. Det anses derfor høyst ønskverdig å finne et karbapenem-antibiotika som kombinerer tienamycinets gode aktivitet med motstandskraft overfor dehydropeptidase I in vivo.

Det er kjent mange karbapenemforbindelser. Noen er eksempelvis beskrevet i europeiske patentskrifter 126.587, 182.213 og 333.175. EP 182.213 og EP 333.175 omtaler forbindelser hvori en tiopyrrolidinylgruppe og dens karbonatomring-formede substituent er sammenkjedet ved hjelp av en alkylen-gruppe og dermed atskiller seg fra forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelse deri at det ikke er noen sammen-kjedende karbonylgruppe. De forbindelser som er omtalt i EP 126.587 er på den annen side karboksyliske tiopyrrolidinyl-p-laktamforbindelser og antas derfor å representere den hittil kjente utvikling som er nærmest forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelse. Imidlertid har de foreliggende forbindelser fremvist vesentlig bedre aktivitet enn tidligere kjente forbindelser.

For den foreliggende oppfinnelse er det derfor et formål å frembringe en serie nye 1-metylkarbapenemforbindel-ser.

Det er et ytterligere formål å frembringe slike forbindelser som har antibiotisk aktivitet.

For den foreliggende oppfinnelse er det nok et ytterligere formål å frembringe slike forbindelser som har velegnet antibiotisk aktivitet og en god motstandskraft overfor dehydropeptidase I in vivo.

Andre formål og fordeler vil vise seg idet beskrivel-sen skrider frem.

Oppfinnelsen angår således 1-metylkarbapenemderivater som er kjennetegnet ved at de har formel (I):

hvori:

R<1>betegner:

et hydrogenatom,

eller en usubstituert alkylgruppe med fra 1 til

6 karbonatomer, og

A betegner en gruppe av formelen (Al) eller (A2):

hvori:

R<*>betegner:

et hydrogenatom eller

en gruppe av formel -C(=NH)R<6>,

hvor R° betegner et hydrogenatom eller en usubstituert alkylgruppe med fra 1 til 6 karbonatomer,

R , R og R<7>er like eller forskjellige og hver betegner:

et hydrogenatom eller

en usubstituert alkylgruppe med fra 1 til 6 karbonatomer,

R° betegner:

et hydrogenatom eller

en usubstituert alkylgruppe med fra 1 til 6 karbonatomer;

q

R^ betegner:

et hydrogenatom,

en usubstituert alkylgruppe med fra 1 til 6 karbonatomer, eller

en gruppe av formel -C(=NH)R<1>^,

hvorR<10>betegner et hydrogenatom eller en usubstituert alkylgruppe med fra 1 til 6 karbonatomer;

d er 0 eller 1;

m er 1 eller 2; og

n er 2 eller 3;

FORUTSATT AT, hvor A betegner en gruppe av formel (Al): betegner R<2>, R^ og R<4>ikke alle hydrogenatomer når R<1>

betegner et hydrogenatom;

og farmasøytisk akseptable salter derav.

Oppfinnelsen frembringer også en farmasøytisk sammen-setning som omfatter en farmasøytisk akseptabel bærer, et fortynningsmiddel eller et hjelpestoff i blanding med en virksom mengde antibiotika, hvori antibiotikaet utvelges fra den gruppe som består av forbindelser med formel (I) og farma-søytisk akseptable salter og estere derav.

Forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelse kan også danne salter med baser. Eksempler på slike salter omfatter: salter med et alkalimetall, slik som natrium, kalium, eller litium, salter med et jordalkalimetall, slik som barium eller kalsium, salter med et annet metall, slik som magnesium eller aluminium, salter av organiske baser, slik som et salt med trietylamin, diisopropylamin, cykloheksylamin eller dicykloheksylamin, og salter med en basisk aminosyre, slik som lysin eller arginin. Dessuten, når forbindelsen ifølge den foreliggende oppfinnelse inneholder en basisk gruppe i sitt molekyl, kan den danne sure addisjonssalter. Eksempler på slike sure addisjonssalter innbefatter: salter med mineral-syrer, spesielt hydrohalidsyrer (slik som hydrofluorsyre, hydrobromsyre, hydrojodsyre, eller saltsyre), salpetersyre, kullsyre (karbonsyre), svovelsyre eller fosforsyre, salter med lavere alkylsulfonsyrer, slik som metansulfonsyre, trifluor-metansulfonsyre eller etansulfonsyre, salter med arylsulfon-syrer, slik som benzensulfonsyre eller p-toluensulfonsyre, salter med organiske karboksylsyrer, slik som eddiksyre, fumarsyre, vinsyre, oksalsyre, maleinsyre, malonsyre (malic acid), ravsyre, benzoesyre, mandelsyre, askorbinsyre, melke-syre, glukonsyre, eller sitronsyre, og salter med aminosyrer, slik som glutaminsyre eller asparaginsyre.

Foretrukne forbindelser av formel (I) er de hvori: r! betegner: et hydrogenatom eller en alkylgruppe med

fra 1 til 3 karbonatomer,

A betegner en gruppe av formel (Al),

R2 betegner:

et hydrogenatom; eller

en gruppe av formel -C(=NH)R^,

hvor R^ betegner

et hydrogenatom eller

en usubstituert alkylgruppe med fra 1 til 3 karbonatomer ,

A betegner en gruppe av formel (Al), ogR^ ogR<4>

betegner hver et hydrogenatom eller en alkylgruppe

med fra 1 til 3 karbonatomer,

A betegner en gruppe av formel (Al);

n er 2;

R<1>betegner et hydrogenatom eller en metylgruppe;

R^ betegner et hydrogenatom, en formimidoylgruppe

eller en acetimidoylgruppe; og

R^ ogR<4>er like eller forskjellige og hver betegner

et hydrogenatom eller en metylgruppe,

A betegner en gruppe av formel (Al);

n er 3;

r! betegner et hydrogenatom eller en metylgruppe;

R betegner et hydrogenatom, en formimidoylgruppe eller en acetimidoylgruppe; og

R^ ogR<4>er like eller forskjellige og hver betegner

et hydrogenatom eller en metylgruppe,

A betegner en gruppe av formel (Al);

n er 2;

R<1>betegner et hydrogenatom eller en metylgruppe;

R betegner et hydrogenatom, en formimidoylgruppe eller en acetimidoylgruppe;

R° betegner et hydrogenatom; og

R<4>betegner en metylgruppe,

A betegner en gruppe av formel (Al);

n er 3;

R<1>betegner et hydrogenatom eller en metylgruppe;

R betegner en formimidoylgruppe eller en acetimidoylgruppe; og

R^ ogR<4>er like eller forskjellige og hver betegner et hydrogenatom,

n

A betegner en gruppe av formel (A2), og R betegner:

et hydrogenatom eller en alkylgruppe med fra 1 til

3 karbonatomer,

A betegner en gruppe av formel (A2), og R° p betegner:

et hydrogenatom eller en alkylgruppe med fra 1 til

3 karbonatomer,

A betegner en gruppe av formel (A2), og R<9>betegner: et hydrogenatom; en alkylgruppe med fra 1 til 3 karbonatomer; eller en gruppe av formel -C(=NH)r<10>/hvori R<1>^ betegner et hydrogenatom eller en alkylgruppe med fra 1 til 3 karbonatomer,

A betegner en gruppe av formel (A2);

d er 0 eller 1;

m er 1 eller 2;

R<1>betegner et hydrogenatom eller en metylgruppe;

R^ betegner et hydrogenatom eller en alkylgruppe med fra 1 til 3 karbonatomer;

R? betegner et hydrogenatom, en alkylgruppe med fra 1 til 3 karbonatomer, en formimidoylgruppe eller en

acetimidoylgruppe,

A betegner en gruppe av formel (A2);

d er 0;

m er 1 eller 2;

r! betegner et hydrogenatom eller en metylgruppe;

R^ betegner et hydrogenatom;

R<®>betegner et hydrogenatom eller en alkylgruppe med fra 1 til 3 karbonatomer; og

R<9>betegner et hydrogenatom, en alkylgruppe med fra 1 til 3 karbonatomer, en formimidoylgruppe eller en acetimidoylgruppe.

Forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelse inneholder nødvendigvis flere asymmetriske karbonatomer i deres molekyler, og kan dermed danne optiske isomerer. Selv om disse hver for seg er representert heri med en enkelt molekyl-formel, omfatter oppfinnelsen både de individuelle, isolerte isomerer og blandinger, inklusive racemater derav. Når det anvendes stereospesifikke synteseteknikker eller det anvendes optisk aktive forbindelser som utgangsmaterialer, kan individuelle isomerer fremstilles direkte. På den annen side, dersom det fremstilles en blanding av isomerer, kan individuelle isomerer frembringes ved hjelp av konvensjonelle atskillings-teknikker.

Blant isomerene, foretrekkes spesielt de hvori kar-bonatomene befinner seg i samme konfigurasjoner som i tienamycin, dvs.: i R-konfigurasjon ved posisjon 1, i (5S, 6S)-konfigurasjon ved posisjonene 5 og 6 og i R-konf igurasjon ved den hydroksysubstituerte a-posisjon for sidekjeden ved posisjon 6.

De mest foretrukne spesifikke forbindelser ifølge den foreliggende oppfinnelse er forbindelser

2- [2-( 1-homopiperazinylkarbonyl )-l-metylpyrrolidin-4-yltio] -6-( 1-hydroksyetyl )-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksyl-

syre;

2-[2-(4-acetimidoylhomopiperazin-l-ylkarbonyl) - pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre;

2-[2-(4-formimidoylhomopiperazin-l-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre;

2-[2-(4-formimidoylhomopiperazin-l-ylkarbonyl)-l-metylpyrrolidin-4-y1tio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylsyre;

2-[1-metyl-(2-piperazin-l-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre;

2-[2-(3-metylpiperazin-l-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylsyre;

2-[2-(4-formimidoylpiperazin-l-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre;

2-[2-(4-acetimidoylpiperazin-l-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre;

2-[2-(4-formimidoylpiperazin-1-ylkarbony1)-1-metylpyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre;

2-[2-(4-acetimidoylpiperazin-l-ylkarbonyl)-l-metylpyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre;

2-12-(4-formimidoyl-3-metylpiperazin-l-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksy1syre;

2-[2-(4-acetimidoyl-3-metylpiperazin-l-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre;

2-[2-(2-metylpiperazin-l-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylsyre;

2-[2-(4-formimidoy1-2-metylpiperazin-1-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-l-metyl-l-karbapen-2-

em-3-karboksy1syre;

2-[2-(4-acetimidoyl-2-metylpiperazin-l-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre;

2-[2-(3-acetimidoylaminopyrrolidin-l-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylsyre;

2-[2-(3-formimidoylaminopyrrolidin-l-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksy1syre;

2-[2-(3-aminopyrrolidin-l-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksy1syre;

2-[2-(4-acetimidoylaminopiperidin-l-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre;

2-[2-(3-aminopyrrolidin-1-ylkarbony1)-1-metylpyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre;

2-[2-(3-acetimidoylaminopyrrolidin-l-ylkarbonyl)-l-metylpyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylsyre;

2-[2-(3-formimidoylaminopyrrolidin-1-ylkarbonyl)-1-metylpyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre;

2-[2-(4-acetimidoylaminopiperidin-1-ylkarbonyl)-1-metylpyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylsyre;

2-[2-(1-formimidoylpyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylsyre;

og farmasøytisk akseptable salter og estere derav.

Foreliggende forbindelser kan fremstilles ved hjelp av et utvalg fremgangsmåter, hvis generelle teknikker er kjent innen faget når det gjelder fremstilling av forbindelser av denne type. Eksempelvis kan de fremstilles ved å reagere en forbindelse med formel (II):

[hvoriR<24>representerer en karboksybeskyttende gruppe, som eksemplifisert i det følgende og R2** representerer en alkan-sulfonyloksygruppe, en arylsulfonyloksygruppe, en dialkyl-fosforyloksygruppe, en diarylfosforyloksygruppe (som eksemplifisert heretter i forbindelse med R<2>^) eller en gruppe med 97 97 formel -S(-0)R , hvor Tir' representerer en alkylgruppe, en halogenalkylgruppe, en acetamidoalkylgruppe, en acetamidoalkenylgruppe, en arylgruppe, eller en aromatisk heterocyklisk gruppe] med en forbindelse med formel (III):

9fi

(hvoriR^<0>representerer en hvilken som helst av de grupper eller atomer som er representert med R<1>eller enhver slik gruppe eller ethvert atom hvori eventuelle aktive grupper er beskyttet og A<1>representerer enhver av de grupper eller atomer som er representert med A eller enhver slik gruppe eller ethvert atom hvori eventuell aktiv gruppe er beskyttet) og dernest, om nødvendig, fjerning av eventuell beskyttelsesgruppe.

I de ovennevnte formler, representerer R<24>en karboksybeskyttende gruppe. Eksempler på slike grupper inkluderer: alkylgrupper, slik som metyl-, etyl- og t-butylgruppene, aralkylgrupper, slik som gruppene benzyl, benzhydryl, (difen-ylmetyl), 4-nitrobenzyl og 2-nitrobenzyl, alkenylgrupper, slik som allyl-, 2-klorallyl- og 2-metylallylgruppene, halogenerte alkylgrupper, slik som 2,2,2-trikloretyl-, 2,2-dibrometyl- og 2, 2,2-tribrometylgruppene og 2-trimetylsilyletylgruppen.

A'ogR<2>^ har hhv. samme betydning som definert for A og R1, eller dersom A' eller R<2>^ krever en beskyttelsesgruppe, inkludererA<1>eller R<2>^ en slik beskyttelsesgruppe. Eksempler på slike beskyttelsesgrupper inkluderer normal hydroksy-, imino-, amino- og karboksybeskyttelsesgruppe, og eksempler inkluderer: p-nitrobenzyloksykarbonyl- og p-nitrobenzyl-gruppene. Imidlertid er mange slike grupper velkjente for fagfolk og enhver gruppe som er i stand til å beskytte en aktiv gruppe i denne type forbindelser, kan likeledes anvendes her.

R 97' representerer:

en alkylgruppe, fortrinnsvis med fra 1 til 4 karbonatomer, slik som en metyl-, etyl-, propyl- eller isopro-pylgruppe, en halogenert alkylgruppe, fortrinnsvis med fra 1 til 4 karbonatomer, slik som en fluormetyl-, klor-metyl-, fluoretyl-, fluorpropyl-, difluormetyl-, difluor-etyl-, dikloretyl-, trifluormetyl- eller trifluoretyl-gruppen,

en acetamidoalkylgruppe, slik som en 2-acetamidoetyl-gruppe,

en acetamidoalkenylgruppe, slik som en 2-acetamido-vinylgruppe,

en arylgruppe, slik som en valgfritt substituert fenyl-eller naftylgruppe, som valgfritt kan ha fra 1 til 3 av de følgende substituenter, som kan være like eller forskjellige: fluor-, klor- og bromatomer, metyl-, etyl-, propyl-, isopropyl-, metoksy-, etoksy-, propoksy-, iso-propoksy-, metoksykarbonyl-, etoksykarbonyl-, t-butoksykarbonyl-, karbamoyl-, mono- og dialkylkarbamoyl-(hvori eksempler på alkylgrupper inkluderer eksempelvis metyl-, etyl- og propylgrupper), nitro-, hydroksy- og cyanogrupper, eller

en aromatisk heterocyklisk gruppe, slik som en valg-

fritt substituert pyridyl- eller pyrimidinylgruppe, som valgfritt kan ha fra 1 til 3 av de følgende substituenter, som kan være like eller forskjellige: fluor-, klor- og bromatomer, metyl-, etyl-, propyl- og isopro-pylgruppe.

Mer detaljert, kan forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelse fortrinnsvis fremstilles som illustrert i de følgende reaksjonsskjemaer A og B:

I de ovenstående formler, erA',R<1>,R5,R24,R26 ogR2<7>som definert ovenfor ogR2<5>er som definert i det følgende.

R<25>representerer en sulfonyl- eller fosforylgruppe, eksempelvis: en alkansulfonylgruppe, slik som en metan-sulfonyl-, trifluormetansulfonyl-, etansulfonyl- propan-sulfonyl-, isopropansulfonyl- eller butansulfonylgruppe, en arylsulfonylgruppe, slik som en fenylsulfonyl-, tolylsulfonyl-eller naftylsulfonylgruppe, en dialkylfosforylgruppe, slik som en dimetylfosforyl-, dietylfosforyl-, dipropylfosforyl-, diisopropylfosforyl-, dibutylfosforyl- eller dipentylfosforyl-gruppe, eller en diarylfosforylgruppe, slik som en difenyl-fosforyl- eller ditolylfosforylgruppe.

I reaksjonsskjemaets A trinn Al, fremstilles en forbindelse med formel (V) ved at en forbindelse med formel (IV) reageres med et alkansulfonylsyreanhydrid, et arylsulfonyl-syreanhydrid, et dialkylfosforylhalogenid eller et diaryl-fosforylhalogenid i nærvær av en base til frembringelse av en forbindelse med formel (V).

Eksempler på reagenser som kan anvendes i dette trinn inkluderer: alkansulfonylsyreanhydrider, slik som metan-sulfonylsyreanhydrid, trifluormetansulfonylsyreanhydrid eller etansulfonylsyreanhydrid, vannfrie arylsulfonsyreanhydrider, slik som vannfri benzensulfonsyreanhydrid eller p-toluen-sulfonsyreanhydrid, dialkylfosforylhalogenider, slik som dimetylfosforylklorid eller dietylfosforylklorid, og diaryl-fosforylklorider, slik som difenylfosforylklorid eller difenylfosforylbromid. Blant disse foretrekkes spesielt p-toluensulfonsyreanhydrid eller difenylfosforylklorid.

Reaksjonen utføres normalt og fortrinnsvis i nærvær av et løsningsmiddel. Det eksisterer ingen spesielle begrensninger på hvilken type løsningsmiddel som bør anvendes, forutsatt at det ikke har noen skadelig virkning på reaksjonen eller på de involverte reagenser og at det kan oppløse reagensene, i det minst i noen grad. Eksempler på egnede løsningsmidler inkluderer: halogenerte hydrokarboner, særlig halogenerte alifatiske hydrokarboner, så som metylenklorid, 1,2-dikloretan eller kloroform, nitriler, slik som acetonitril, og amider, spesielt fettsyreamider, slik som N,N-dimetylformamid eller N,N-dimetylacetamid.

Tilsvarende finnes det ingen spesiell begrensning på naturen av den base som anvendes til reaksjonen, forutsatt at den ikke har noen skadelig virkning på andre deler av molekylet, spesielt på/S-laktamringen. Foretrukne eksempler på slike baser inkluderer: organiske baser, spesielt tertiære aminer, så som trietylamin, diisopropyletylamin eller 4-dimetylaminopyridin.

Reaksjonen kan foregå over et vidt temperaturområde, og den nøyaktige reaksjonstemperatur er ikke kritisk for oppfinnelsen. Vanligvis vil det være hensiktsmessig å utføre reaksjonen ved en forholdsvis lav temperatur med sikte på å styre sidereaksjoner, eksempelvis ved en temperatur på fra -20°C til 40°C. Den tid som kreves for reaksjonen kan også variere sterkt, avhengig av mange faktorer, særlig reaksjonstemperaturen og naturen på de anvendte reagenser og løsningsmidlet. Forutsatt at reaksjonen utføres under de foretrukne betingelser som er angitt ovenfor, vil imidlertid et tidsrom på fra 10 minutter til 5 timer vanligvis være tilstrekkelig.

Den således frembragte reaksjonsblanding kan i reaksjonsskjemaets trinn A2, behandles med en forbindelse av formel (III) i nærvær av en base og uten noen som helst inter-mediær isolering eller rensing av forbindelsen med formel (V). Det finnes ingen spesielle begrensninger på naturen av den base som anvendes i dette trinn og foretrukne eksempler inkluderer: organiske baser, spesielt tertiære aminer, slik som trietylamin eller diisopropyletylamin, og inorganiske baser, slik som kaliumkarbonat eller natriumkarbonat.

Reaksjonen kan finne sted innen et bredt temperaturområde, og den nøyaktige reaksjonstemperatur er ikke kritisk for oppfinnelsen. Hovedsakelig vil det være hensiktsmessig å utføre reaksjonen ved en temperatur på fra -20°C til romtemperatur. Den tid som kreves for reaksjonen kan også variere sterkt, avhengig av mange faktorer, spesielt av reaksjons temperaturen og naturen på de anvendte reagenser og løsnings-midlet. Forutsatt at reaksjonen utføres under de foretrukne betingelser som er angitt ovenfor, vil imidlertid et tidsrom på fra 3 0 minutter til 108 timer vanligvis være tilstrekkelig.

Etter fullføring av reaksjonen, kan den ønskede forbindelse med formel (VI) utvinnes fra reaksjonsblandingen ved hjelp av konvensjonelle midler. Et eksempel på en slik teknikk omfatter konsentrering av reaksjonsblandingen ved at løsnings-midlet destilleres av, fortrinnsvis under redusert trykk, tilsats av et vannuløselig, organisk løsningsmiddel til inndampingsresten, vasking av den organiske fase med vann, og endelig avdestillering av det organiske løsningsmiddel. Hvis nødvendig, kan den således frembragte forbindelse ytterligere renses ved hjelp av konvensjonelle midler, eksempelvis ved hjelp av omkrystallisering, gjenutfelling eller de forskjellige kromatografiske teknikker, spesielt kolonnekromatografering eller preparativ tynnsjiktkromatografi. Alternativt kan den reaksjonsblanding som er fremkommet i dette trinn hvis ønsket også anvendes som utgangsmateriale til følgende trinn uten isolering av forbindelsen med formel (VI).

I trinn A3 kan forbindelsen med formel (VI) som ble frembragt i trinn A2, om nødvendig, omdannes til et fritt karboksylsyrederivat ved eliminering av den karboksy-beskyttende gruppe som er representert ved R<24>ved hjelp av konvensjonelle midler. Den reaksjon som anvendes for å fjerne beskyttelsesgruppen som er representert med R<24>vil selv-følgelig variere avhengig av beskyttelsesgruppens natur, men enhver reaksjon som innen faget er kjent for avbeskyttelse av forbindelser av denne type kan likeledes anvendes her.

Eksempelvis når substituenten, som er representert medR<24>, på forbindelsen med formel (VI) er en beskyttelsesgruppe som er i stand til å kunne fjernes ved reduksjon, eksempelvis en halogenert alkyl-, aralkyl- eller benzhydrylgruppe, kan reaksjonen fortrinnsvis utføres ved at forbindelsen med formel (VI) kontaktes med et reduksjonsmiddel. Foretrukne eksempler på reduksjonsmidler som kan anvendes til denne reaksjon inkluderer: når den karboksy-beskyttende gruppe eksempelvis er en halogenert alkylgruppe (slik som en 2,2-dibrometyl- eller 2,2,2-trikloretylgruppe) sink og eddiksyre, og når den eksempelvis er en aralkylgruppe (slik som en benzyl-, 4-nitrobenzylgruppe eller en benzhydrylgruppe) hydrogen og en kata-lysator til anvendelse i katalytisk reduksjon, slik som palladium på trekull (charcoal) eller et alkalimetallsulfid, slik som natriumsulfid eller kaliumsulfid. Reaksjonen utføres normalt og fortrinnsvis i nærvær av et løsningsmiddel. Det finnes ingen spesielle begrensninger på naturen til løsnings-midlet som skal anvendes under forutsetning av at det ikke har noen ugunstig virkning på reaksjonen eller på reaktantene og at det kan løse reaktantene, i det minste i en viss grad. Eksempler på egnede løsningsmidler omfatter: alkoholer, slik som metanol eller etanol, etere, så som tetrahydrofuran eller dioksan alifatiske syrer, så som eddiksyre, og blandinger av vann med én eller flere av disse organiske løsningsmidler.

Reaksjonen kan foregå over et vidt temperaturområde, og den nøyaktige reaksjonstemperatur er ikke kritisk for oppfinnelsen. Vanligvis vil det være hensiktsmessig å utføre reaksjonen ved en temperatur på fra 0°C til ca. romtemperatur. Den tid som kreves til reaksjonen kan også variere sterkt, avhengig av mange faktorer, særlig reaksjonstemperaturen og reaktantene og løsningsmidlet som anvendes. Imidlertid vil et tidsrom på fra 5 minutter til 12 timer vanligvis være tilstrekkelig, forutsatt at reaksjonen utføres under de foretrukne betingelser som er angitt ovenfor.

Etter at reaksjonen er fullført, kan den ønskede forbindelse utvinnes fra reaksjonsblandingen ved hjelp av konvensjonelle midler. Et eksempel på en slik teknikk omfatter: uløselige materialer som er avsatt i reaksjonsblandingen filtreres fra og løsningsmidlet destilleres av filtratet. Den forbindelse som således fremkommer kan om nødvendig ytterligere renses ved hjelp av konvensjonelle midler, eksempelvis ved hjelp av omkrystallisering, eller forskjellige kromatografiske teknikker, spesielt kolonnekromatografi eller preparativ tynnsjiktkromatografi. Dersom det er nødvendig, kan karboksygruppen avbeskyttes slik det er beskrevet ovenfor og omdannes til en estergruppe som er i stand til å hydrolyseres in vivo og esterforbindelsen kan ved hjelp av konvensjonelle midler renses som et farmakologisk akseptabelt salt.

NårA'eller R<2>^ inneholder en hydroksy-, imino-, amino- eller karboksybeskyttende gruppe (eksempelvis en p-nitrobenzoyloksykarbonylgruppe eller en p-nitrobenzylgruppe, kan beskyttelsesgruppen fjernes samtidig som den førnevnte fjerning av den karboksybeskyttende gruppe (nårR<25>er en p-nitrobenzylgruppe).

Alternative forbindelser med formel (Ia) kan også fremstilles ved hjelp av reaksjonsskjema B, slik det er vist ovenfor.

Forbindelsen med formel (VII) som anvendes som utgangs-forbindelse i dette reaksjonsskjema er eksempelvis omtalt i japansk patent Kokai publikasjonsnr. Sho 62-30781.

I dette reaksjonsskjemas trinn Bl, fremstilles en forbindelse med formel (VI) ved at forbindelsen med formel (VII) reageres med et merkaptan med formel (III) i nærvær av en base. Reaksjonen utføres også normalt og fortrinnsvis i nærvær av et løsningsmiddel. Det finnes ingen spesielle begrensninger på naturen av det løsningsmiddel som skal anvendes under forutsetning av at det ikke har noen ugunstig virkning på reaksjonen eller på reaktantene og at det kan løse reaktantene, i det minste i en viss grad. Eksempler på egnede løs-ningsmidler omfatter: estere, så som etylacetat, etere, så som tetrahydrofuran, nitriler, så som acetonitril, amider, spesielt fettsyreamider, slik som N,N-dimetylformamid, sulfoksider, slik som dimetylsulfoksid, vann, og blandinger av to eller flere av disse løsningsmidler. Det finnes heller ingen spesiell begrensning på naturen av den base som anvendes til reaksjonen, forutsatt at den ikke har noen skadelig virkning på andre deler av molekylet, spesielt på /3-laktamringen. Eksempler på slike baser inkluderer: organiske baser, spesielt tertiære aminer, så som diisopropyletylamin, trietylamin, N-metylpiperidin eller 4-dimetylaminopyridin, og organiske baser, spesielt alkalimetallkarbonater og hydrogenkarbonater, slik som kaliumkarbonat eller natriumhydrogenkarbonat.

Reaksjonen kan foregå over et vidt temperaturområde, og den nøyaktige reaksjonstemperatur er ikke kritisk for oppfinnelsen. Vanligvis vil det være hensiktsmessig å utføre reaksjonen ved en relativt lav temperatur med sikte på å redusere sidereaksjoner, eksempelvis ved en temperatur på fra -2 0°C til 40°C. Den tid som kreves for reaksjonen kan også variere over et bredt område, avhengig av mange faktorer, spesielt av reaksjonstemperaturen og naturen på de anvendte reagenser og løsningsmidlet. Imidlertid, forutsatt at reaksjonen utføres under de foretrukne betingelser som er angitt ovenfor, vil et tidsrom på fra 15 minutter til 75 timer vanligvis være tilstrekkelig.

Etter at reaksjonen er fullført, kan den ønskede forbindelse med formel (VI) fra reaksjonen utvinnes fra reaksjonsblandingen ved hjelp av konvensjonelle midler.

Forbindelser med formel (Ia) kan deretter fremstilles fra denne forbindelse med formel (VI) ved fjerning av beskyt-telsesgruppene som kan være tilstede i de grupper som representeres med A' og R<26>slik det er beskrevet i reaksjonsskjema A, dersom det er aktuelt, og ved fjerning av eventuelle andre beskyttelsesgrupper eller, dersom det er nødvendig, ved omdan-ning av en avbeskyttet karboksygruppe til en estergruppe som er i stand til å hydrolyseres in vivo.

Forbindelser med formel (Ia) som er fremstilt som beskrevet ovenfor kan omdannes til et farmakologisk akseptabelt salt ved anvendelse av prosedyrer og teknikker som er velkjente innen feltet Ø-laktamantibiotika.

Formelens (III) merkaptan som anvendes som utgangsmateriale i begge de ovennevnte reaksjonsskjemaer kan fremstilles ved at man følger den prosedyre som er beskrevet i japansk patent Kokai søknadsnr. Hei 2-28180 og nr. Hei 2-3687 og japansk patentsøknad nr. Hei 3-27059 og nr. Hei 3-131545.

Forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelse frem-viser utmerket antibakteriell aktivitet med et bredt anti-bakterielt spektrum og har evnen til å inhibere /3-1 akt ama sens aktivitet, i motsetning til de fleste forbindelser av typen tienamycin, som har tendens til å bli metabolisert i pattedyr- kroppen. Derivatene ifølge den foreliggende oppfinnelse frem-viser i tillegg utmerket stabilitet overfor dehydropeptidase I, som også er kjent for å katalysere inaktiveringen av forbindelser av tienamycintypen. Derivatene ifølge den foreliggende oppfinnelse fremviste en sterk antibakteriell aktivitet overfor et bredt utvalg patogene bakterier inklusive Gram-positive bakterier, slik som Staphylococcus aureus og Bacillus subtilis. Gram-negative bakterier, slik som Escherichia coli, Shigella- arter, Streptococcus pneumoniae, Proteus-artene Serratia-arter, Enterobacter-arter, Klebsiella-arter og Pseudomonas-arter og anaerobiske bakterier, slik som Bacteroides fragilis.

Den antibakterielle aktivitet ble bestemt ved hjelp av fremgangsmåten med agarplate-fortynning og de minimale inhi-berende konsentrasjoner av forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelse overfor et utvalg vanlige, patogene bakterier ble bestemt. Forbindelsene ifølge oppfinnelsen identifiseres med henvisning til én av de følgende eksempler som illustrerer deres fremstilling. Forbindelsene fra eksempler 1, 4, 5, 6, 11, 15, 23, 37, 42, 43, 44, 45, 50, 54, 55, 61 og 66 ble alle funnet å være mer aktive enn imipenem overfor stammer av Escherichia coli NIHJ, Klebsiella pneumoniae 846 og Pseudomonas aeruginosa 1001. Forbindelsene hadde også en i hovedsak overlegen virkning overfor Staphylococcus aureus 209P, i likhet med den for imipenem.

Disse resultater viser at forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelse har aktiviteter som i hovedsak er bedre enn den for imipenem. Dessuten er de, i motsetning til imipenem, resistente overfor dehydropeptidase I og laktamase.

Karbapenem-3-karboksylsyrederivatene ifølge den foreliggende oppfinnelse er derfor egnede som terapeutiske midler til behandling og forebyggelse av infeksjoner som forårsakes av disse patogene bakterier. Forbindelsene kan til dette formål tilføres i enhver konvensjonell form, og den nøyaktig anvendte formulering vil avhenge av den sykdom som skal behandles, pasientens alder og tilstand og andre faktorer som er velkjente innen faget. Til eksempelvis oral tilførsel, kan forbindelsene formuleres som tabletter, kapsler, granuler, pulvere eller siruper, og for parenteral tilførsel kan de formuleres for intravenøs injeksjon eller intramuskulær injeksjon. Doseringen kan variere over et vidt område, avhengig av pasientens alder, kroppsvekt, symptomer og tilstand, så vel som tilførselsmåten og antall tilførsler samt tilførsels-rutine. Imidlertid anbefales det for en voksen menneskelig pasient en daglig dose på fra ca. 100 mg til 3 000 mg, og denne kan tilføres som en enkeltdose eller i oppdelte doser.

I de følgende eksempler og synteser, ble det når ikke annet er angitt, ved utførelse av målinger av kjernemagnetisk resonansspektrum i deuteriumoksid anvendt tetrametylsilan som ekstern standard og disse i andre løsningsmidler ble utført med anvendelse av tetrametylsilan som intern standard. Videre ble det ved måling av partikkelstørrelser anvendt maske-størrelser i overensstemmelse med "Tyler"-standarden.

Eksempel 1

( IR, 5S. 65)- 2- f( 2S, 4S)- 2-( 4- acetimidoylpiperazin- l- ylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol- 6- f( IR)- l- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylsyre

1( a) 4- nitrobenzyl-( 1R. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)- piperazin- 1- yl- karbonyl1- 1-( 4-nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol - 6-\( IR)- 1-hydroksyetyl 1 - 1 - metyl - 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylat

127 fil dif enylf osf orylklorid og 108 /il diisopropyletyl-

amin ble dråpevis tilsatt, under is-avkjøling til en løsning av 210 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 2,6 ml tørr acetonitril og den resulterende blanding ble omrørt ved den samme temperatur i én time. Ved slutten av dette tidsrom, ble en løsning av 450 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[4-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-piperazin-l-yl-karbonyl]-1-(4-nitrobenzyl oksykarbonyl) -pyrrolidintrifluormetansulfonat (fremstilt som beskrevet i syntese 1) i 2,4 ml tørr acetonitril og 274/xl diisopropyletylamin samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling og blandingen ble tillatt å stå over natten ved samme temperatur. Reaksjonsblandingen ble deretter konsentrert ved inndamping under redusert trykk og konsentratet ble fortynnet med etylacetat. Den fortynnede løsning ble vasket, vekselvis med vann og med en vandig løsning av natriumklorid, hvoretter den ble tørket over vannfritt magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble deretter fjernet ved destillering under redusert trykk og den resulterende inndampingsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom 100 ml silikagel 60 (Merck artikkelnr. 9385), ved anvendelse av en 10:5:2 vektmessig blanding av etylacetat, metylenklorid og metanol som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert og konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk for å gi 120 mg av tittelforbindelsen, i form av et amorft, fast stoff.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr) , v^^s cm<-1>:

1772, 1709, 1663, 1607, 1562, 1521, 1495, 1431, 1405, 1346, 1291, 1261, 1210.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), d ppm:

1,27&1,28 (tilsammen 3H, to dubletter, J = 7,33&

6, 84 Hz), 1,3 7 (3H, dublett, J = 5,86 Hz),

1,60 (1H, bred singlett),

1,86 - 2,08 (1H, multiplett),

2,16 & 2,31 (tilsammen 3H, to singletter),

2,60 - 2,87 (1H, multiplett),

3,25 - 4,28 (15H, multiplett),

4,65 - 4,80 (1H, multiplett),

5,04 - 5,52 (6H, multiplett),

7,41 - 7,67 (6H, multiplett),

8,17 - 8,24 (6H, multiplett).

1( b) ( 1R. 5S. 6S)- 2- f( 2S. 4S)- 2-( 4- acetimidoylpiperazin- 1- ylkarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltiol - 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylsyre

114 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-[(2S,4S)-2- [4-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-piperazin-1-yl-karbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor] ble oppløst i 6 ml 2:1 volummessig blanding av tetrahydrofuran og vann og ble hydrogenert ved bobling av hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 300 mg 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble katalysatoren filtrert av og filtratet ble vasket med dietyleter. Den resulterende løsning ble konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og inndampingsresten ble renset ved hjelp av omvendt fase-kolonnekromatografi gjennom 5 ml "Cosmo Sil 75C18-PREP" (et varemerke for et produkt fra Nacalai Tesque), ved anvendelse av 20 vol% vandig etanol som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert, konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og frysetørret, for å gi 13 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks_ nm:

300 .

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm-1:

1753, 1603, 1447, 1385, 1284, 1251.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (270 MHz, D20, ved anvendelse av tetradeuterert natriumtrimetylsilylpropionat som intern standard), 6 ppm:

1,22 (3H, dublett, J = 6,84 Hz),

1,30 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,58 - 1,68 (1H, multiplett),

2,36 (3H, singlett),

2,66 - 2,78 (1H, multiplett),

3,02 - 3,18 (2H, multiplett),

3,34 - 3,45 (2H, multiplett),

3,65 - 3,93 (9H, multiplett),

4,10 (1H, triplett, J = 8,06 Hz),

4,19 - 4,30 (2H, multiplett).

Eksempel 2

( IR, 5S, 6S)- 2- f( 2S, 4S)- 2-( 4- acetimidoylhomopiperazin- l- yl-karbonvl)- pyrrolidin- 4- yltiol - 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylsyre

2( a) 4- nitrobenzvl-( 1R. 5S. 6S)- 2- r( 2S, 4S)- 2-\ A -( N- 4- nitro-benzyloksvkarbonylacetimidoyl)- homopiperazin- 1- yl- karbonyl 1 - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol- 6-\( IR)- 1-hvdroksvetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylat 82 fil dif enylf osf orylklorid og 70/il diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under is-avkjøling til en løsning av 136 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl] -1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 1,7 ml tørr acetonitril og den resulterende blanding ble omrørt ved den samme temperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble en løsning av 296 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[4-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-homopiperazin-1-yl-karbonyl] -1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidintrif luormetansulf onat (fremstilt som beskrevet i syntese 2) i 1,5 ml tørr acetonitril og 179fxl diisopropyletylamin samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling og den blanding som således fremsto ble omrørt ved samme temperatur i tre timer. Reaksjonsblandingen ble deretter konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og den resulterende inndampingsrest ble opparbeidet og renset på samme måte som beskrevet i eksempel l(a), for å gi 148 mg av tittelf orbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm<-1>:

1773, 1709, 1657, 1607, 1561, 1521, 1496, 1429, 1405, 1346, 1305, 1278, 1210.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz) , 6 ppm:

1.27 (3H, dublett, J = 7,33 Hz),

1,37 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,42 - 2,20 (4H, multiplett),

1.28 & 2,39 (tilsammen 3H, to singletter),

2,60 - 2,79 (1H, multiplett),

3,25 - 4,35 (15H, multiplett),

4,62 - 4,83 (1H, multiplett),

5,05 - 5,52 (6H, multiplett),

7,42 - 7,67 (6H, multiplett),

8,15 - 8,24 (6H, multiplett).

2( b) ( IR, 5S. 6S)- 2- \ ( 2S, 4S)- 2-( 4- acetimidoylhomopiperazin- l-ylkarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltiol - 6- r ( IR) - 1- hydroksyetyll - l-metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

144 mg 4-nitrobenzyl-(1R,5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[4-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl) -homopiperazin-1-ylkarbonyl] -1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-[(IR) -1-hydroksyetyl]-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor] ble oppløst i 7,5 ml 2:1 volummessig blanding av tetrahydrofuran og vann og ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom løs-

ningen ved romtemperatur i 1,5 time i nærvær av 375 mg 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 1(b), for å gi 24 mg tittelf orbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks_ nm:

298 .

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr) , ^a^g . cm<-1>:

1754, 1597, 1450, 1383, 1288, 1259.

Kjernemagnetisk resonans spektrum (270 MHz, D20, ved anvendelse av tetradeuterert natriumtrimetylsilylpropionat som intern standard), 6 ppm:

1,22 (3H, dublett, J = 6,84 Hz),

1.30 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,38 - 1,63 (1H, multiplett),

2.31 & 2,36 (tilsammen 3H, to singletter),

2,67 - 2,82 (1H, multiplett),

3,03 - 3,18 (2H, multiplett),

3,34 - 3,47 (2H, multiplett),

3,64 - 3,96 (9H, multiplett),

4,09 (1H, triplett, J = 8,06 Hz),

4,19 - 4,30 (2H, multiplett).

Eksempel 3

( 1R. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 2-\( 3S)- 4- acetimidovl- 3- metvlpiperazin-l- ylkarbonvll- pyrrolidin- 4- yltiol- 6- r( IR)- 1- hydroksYetyll- 1-metyl- 1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylsyre

3( a) 4- nitrobenzyl-( IR. 5S. 6S)- 2- T( 2S, 4S)- 2- f( 3S)- 4-( N- 4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)- 3- metvlpiperazin- 1- ylkarbonyl! - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol- 6-r( IR)- 1- hydroksyetyll- l- metyl- l- karbapen- 2- em- 3- karboksylat85fil dif enylf osf orylklorid og 72 fil diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling til en løsning av 140 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 1,8 ml tørr acetonitril og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. En løsning av 290 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[(3S)-4-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-3-metylpiperazin-l-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidintrifluormetansulfonat (fremstilt som beskrevet i syntese 3) i 1,6 ml tørr acetonitril og 182 fil diisopropyletylamin ble samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling og blandingen som derved fremsto ble tillatt å stå over natten ved samme temperatur. På slutten av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen bearbeidet og renset ved den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel l(a), for å gi118 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver. 3( b) ( IR. 5S. 6S)- 2- \ ( 2S. 4S)- 2-\( 3S)- 4- acetimidoyl- 3- metylpiperazin- l- ylkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltiol- 6- r( IR)- 1-hydroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre 85 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3S)-4-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-3-metylpiperazin-l-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor] ble oppløst i 4,1 ml 2:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann og ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom løs-ningen ved romtemperatur i to timer i nærvær av 210 mg 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutningen av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av samme fremgangsmåte som beskrevet i eksempel 1(b), for å gi 114 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks_ nm:

299 .

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr) , v^^g _ cm<-1>:

1755, 1642, 1607, 1448, 1385, 1283, 1249.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (270 MHz, D20, ved anvendelse av tetradeuterert natriumtrimetylsilylpropionat som intern standard), 5 ppm:

1,20 - 1,35 (9H, multiplett),

1,51 - 1,72 (1H, multiplett),

2,34 (3H, bred singlett),

2,66 - 2,86 (1H, multiplett),

3,02 - 3,20 (2H, multiplett),

3,25 - 3,47 (2H, multiplett),

3,48 - 4,38 (11H, multiplett),

Eksempel 4

( IR, 5S, 6S)- 2- f( 2S, 4S)- 2-( 4- formimidoylpiperazin- 1- ylkarbonyl)-pyrrolidin- 4- yltiol - 6- f( IR)- 1- hydroksyetyll - 1- metyl- l-karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

4( a) 4- nitrobenzyl-( IR. 5S, 6S)- 2-{ 2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)- piperazin- l- ylkarbonyll - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylat

98/xl dif enylf osf orylklorid og 84 fil diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling til en løsning av 162 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[ (IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 2 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved den samme temperatur i én time. En løsning av 337 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[4-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)-piperazin-1-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidintrifluor-metansulf onat [fremstilt som beskrevet i syntese 4(2)] i1,8

ml tørr acetonitril og 212^1 diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling og blandingen ble tillatt å stå over natten ved samme temperatur. Reaksjonsblandingen ble deretter opparbeidet og renset ved den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel l(a), for å gi 110 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1:

1774, 1709, 1660, 1604, 1520, 1345.

Kjernemagnetisk resonans spektrum (CDCI3, 270 MHz) 6 ppm:

1,26&1,28 (tilsammen 3H, to dubletter, J = 7,3 Hz);

1,36 (3H, dublett, J = 6,4 Hz),

1,80 - 2,10 (1H, multiplett),

2,60 - 2,80 (1H, multiplett),

3,26 - 4,30 (15H, multiplett),

4,70 - 4,85 (1H, multiplett),

5,15 - 5,53 (6H, multiplett),

7,40 - 7,70 (6H, multiplett),

8,15 - 8,26 (6H, multiplett),

8,48&8,53 (tilsammen 1H, to singletter).

4( b) ( IR, 5S, 6S)- 2- f( 2S. 4S)- 2-( 4- formimidoylpiperazin- 1- ylkarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltiol- 6- \ ( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre 98 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{2-[4-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl) -piperazin-l-ylkarbonyl] -1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR) -1-hydroksyetyl] -l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor] ble oppløst i 5 ml 2:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann og ble hydrogenert ved bobling med hydrogen gjennom løsningen ved romtemperatur i to timer i nærvær av 250 mg 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutningen av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som beskrevet i eksempel 1(b), for å gi 12 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

299 .

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm<-1>:

1756, 1711, 1647, 1589, 1448, 1384, 1248.

1,21 (3H, dublett, J = 7,3 Hz),

1,30 (3H, dublett, J = 6,4 Hz),

1,64 - 1,74 (1H, multiplett),

2,70 - 2,82 (1H, multiplett),

3,06 - 3,26 (2H, multiplett),

3,34 - 3,46 (2H, multiplett),

3,55 - 3,90 (9H, multiplett),

4,14 - 4,31 (3H, multiplett),

7,92 (1H, singlett).

Eksempel 5

( IR. 5S. 6S)- 2- f( 2S. 4S)- 2-( 4- formimidoylhomopiperazin- 1- ylkarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltiol - 6-\( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

5( a) 4- nitrobenzvl-( 1R. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 2- T4-( N- 4- nitro-benzyloksykarbonvlformimidoyl)- homopiperazin- 1- ylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzvloksykarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol- 6- r( IR)- 1-hydroksvetvl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylat 90/il dif enylf osf orylklorid og 77/il diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling til en løsning av 150 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 1,9 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. En løsning av 316 mg (2S,4S)-4-merkapto-2- [4-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)-homopiperazin-1-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidintrifluor-metansulf onat [fremstilt som beskrevet i syntese 5(1)] i 1,7

ml tørr acetonitril og 195/il diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling og blandingen ble tillatt å stå over natten ved samme temperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen

opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel l(b), for å gi 105 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr) , cm<-1>:

1773, 1709, 1657, 1601, 1521, 1346, 1209, 1161.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz) 6 ppm:

1,22 - 1,38 (6H, multiplett),

1,80 - 2,18 (3H, multiplett),

2,60 - 2,81 (1H, multiplett),

3,22 - 4,30 (15H, multiplett),

4,60 - 4,72 (1H, multiplett),

5,10 - 5,53 (6H, multiplett),

7,39 - 7,68 (6H, multiplett),

8,16 - 8,25 (6H, multiplett),

8,32 - 8,57 (1H, multiplett).

5( b) ( 1R. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 2-( 4- formimidoylhomopiperazin- 1-ylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyll- 1-metvi- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre 89 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-[(2S, 4S)-2-[4-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)-homopiperazin-1-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor] ble oppløst i 4,5 ml 2:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann og ble hydrogenert ved hjelp av at hydrogen ble boblet gjennom løsningen ved romtemperatur i to timer i nærvær av 230 mg 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutningen av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel l(b), for å gi 13 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

298 .

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr),<y>ma]cscm-1:

1754, 1706, 1638, 1588, 1383.

1,21 (3H, dublett, J = 7,3 Hz),

1,30 (3H, dublett, J = 6,4 Hz),

1,45 - 1,62 (1H, multiplett),

•1,90 - 2,02 (2H, multiplett),

2,67 - 2,83 (1H, multiplett),

3,03 - 3,20 (2H, multiplett),

3,30 - 3,47 (2H, multiplett),

3,60 - 3,97 (9H, multiplett),

4,02 - 4,16 (1H, multiplett),

4,20 - 4,31 (2H, multiplett),

7,84, 7,93&7,96 (tilsammen 1H, tre singletter).

Eksempel 6

( 1R. 5S. 6S)- 2- f( 2S. 4S)- 2- f( 3S)- 4- formimidoyl- 3- metvlpiperazin-1- ylkarbonyl) - pyrrolidin- 4- vltio}- 6- r ( IR) - 1- hydroksyetyll - 1-metvl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

6( a) 4- nitrobenzvl-( 1R. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2- r( 3S)- 4-( N- 4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl) - 3- metylpiperazin- 1- ylkarbonyl! - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltio}- 6-r ( IR) - 1- hydroksyetyll - l- metyl- l- karbapen- 2- em- 3- karboksylat 83/il dif enylf osf orylklorid og 17/il diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 138 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 1,7 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. En løsning av 290 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[ (3S) -4- (N-4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl) -3-metylpiperazin-l-ylkarbonyl] -1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidintrifluormetansulfonat (fremstilt som beskrevet i syntese 6) i 1,5 ml tørr acetonitril og 179/il diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til den resulterende løsning, og den blanding som derved fremsto ble tillatt å stå over natten ved samme temperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 1 (a) , for å gi 108 mg av tittelf orbindelsen, i form av et pulver. 6( b) ( 1R. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2- r( 3S)-( 4- formimidoyl- 3- metylpiperazin- 1- ylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- T( IR)- 1-hydroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre 87 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[(3S)-4-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)-3-metylpiperazin-1-ylkarbonyl] -1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor] ble oppløst i 4,5 ml 2:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann og ble hydrogenert ved at hydrogen ble boblet gjennom løsningen ved romtemperatur i to timer i nærvær av 220 mg 10 vekt% palladium på trekull. Reaksjonsblandingen ble deretter opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel l(b), for å gi 16 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Amaks_ nm:

299.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm<-1>:

1754, 1705, 1645, 1591, 1447, 1386, 1258.

1,17 - 1,43 (9H, multiplett),

1,52 - 1,73 (1H, multiplett),

2,66 - 2,87 (1H, multiplett),

3,01 - 3,26 (2H, multiplett),

3,33 - 3,48 (2H, multiplett),

3,48 - 3,43 (11H, multiplett),

7,84 & 7,96 (tilsammen 1H, to singletter).

Eksempel 7

Saltsur ( IR. 5S, 6S)- 2- \ ( 2S. 4S)- 2-( 2- metvl- l- piperazinvl-karbonyl)- pYrrolidin- 4- yltiol- 6- r( IR)- l- hydroksyetvll - 1- metyl-1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

7( a) 4- nitrobenzvl-( 1R. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2- r2- metvl- 4-( 4-nitrobenzyloksykarbonyl) - l- piperazinylkarbonyll - 1- ( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1 - metyl - 1 - karbapen- 2 - em- 3 - karboksylat

0,67 ml difenylfosforylklorid og 0,56 ml diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 1,05 g 4-nitrobenzyl-(IR,5R, 6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl] -l-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 10 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. En løsning av 1,98 g (2S,4S)-4-merkapto-2- [2-metyl-4- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) -1-piperazinylkarbonyl] -1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 7) i 10 ml tørr acetonitril og 0,56 ml diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, ved en temperatur på mellom 2°C og 10°C og den blanding som derved fremkom, ble omrørt i 90 minutter, under isavkjøling. Den ble deretter tillatt å stå over natten ved samme temperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved inndamping under redusert trykk og inndampingsresten ble fortynnet med etylacetat. Den fortynnede løsning ble vasket, vekselvis med vann og med en vandig løsning av natriumklorid. Etylacetatløsningen ble deretter tørret over vannfri magnesiumsulfat og løsningsmidlet

ble fjernet ved hjelp av destillasjon under redusert trykk. Den resulterende destillasjonsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi gjennom 250 ml silikagel 60 (Merck artikkelnr. 9385), ved anvendelse av en 95:5 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent, for å gi 2,48 g av tittelforbindelsen, i form av et amorft, fast stoff.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), ymaks cm"1:

1775, 1708, 1655, 1606, 1522, 1434, 1346.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), 6 ppm:

1,28 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1,36 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,06 - 1,47 (3H, multiplett),

1,66 - 2,06 (1H, multiplett),

2.47 - 5,15 (17H, multiplett),

5,20 - 5,52 (6H, multiplett),

7,43 - 7,52 (4H, multiplett),

7,65 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

8,23 (4H, to dubletter, J = 8,29 Hz),

8,17 - 8,25 (2H, multiplett).

7( b) Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 2-( 2- metyl- l- piperazinylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

2.48 g 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[2-metyl-4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 30 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann og deretter ble 2,9 ml IN vandig saltsyre tilsatt og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i 2,5 time i nærvær av 2,5 g 10% palladium på trekull. Katalysatoren ble filtrert fra og filtratet ble vasket med dietyleter. Den resulterende, vandige løsning ble konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og inndampings-

resten ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi med reversert fase gjennom 125 ml "Cosmo Sil 75C18-PREP" (et varemerke for et produkt fra Nacalai Tesque), ved anvendelse av vann som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert, konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og frysetørret, for å gi 440 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm-1:

1760, 1655, 1593, 1447, 1384, 1287.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (270 MHz, D20, ved anvendelse av tetradeuterert natriumtrimetylsilylpropionat som intern standard), <5 ppm:

1,21 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1,28 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,34 - 1,51 (3H, multiplett),

1,92 - 2,07 (1H, multiplett),

2,99 - 3,55 (9H, multiplett),

3,69 - 4,65 (6H, multiplett),

4,72 - 4,98 (1H, multiplett).

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), nt^:

296 .

Eksempel 8

Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 2-( 3- metvl- l- piperazinyl-karbonvl]- pyrrolidin- 4- yltiol- 6- r( IR)- 1- hydroksyetvll - 1- metyl-1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsvre

8( a) 4- nitrobenzyl-( 1R. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2- r3- metvl- 4-( 4-nitrobenzyloksykarbonyl) - 1- piperazinylkarbonyll - 1- ( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylat

0,60 ml difenylfosforylklorid og 0,51 ml diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 0,96 g 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl] -1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 10 ml tørr acetonitril og den resulterende blanding ble omrørt ved den samme temperatur i 40 minutter. En løsning av 1,55 g (2S,4S)-4-merkapto-2-[3-metyl-4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 8) i 20 ml tørr acetonitril og 0,46 ml diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen ved en temperatur på mellom 2°C og7°C og blandingen ble deretter å stå over natten ved samme temperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og den inndampingsresten ble fortynnet med etylacetat. Den fortynnede løsning ble vasket, vekselvis med vann og med en vandig løsning av natriumklorid, hvoretter den ble tørret over vannfri magnesiumsulfat og løsningsmidlet ble fjernet ved destillasjon under redusert trykk. Den resulterende destilla-

sjonsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi gjennom 250 ml silikagel 60 (Merck artikkelnr. 9385), ved anvendelse av en 95:5 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent, for å gi 1,98 g av tittelforbindelsen, i form av et amorft, fast stoff.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr) , v^^g cm<-1>:

1775, 1706, 1659, 1607, 1522, 1430, 1406, 1346.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), 6 ppm:

1,16 - 1,38 (6H, multiplett),

1,36 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,80 - 2,07 (1H, multiplett),

2,63 - 4,81 (17H, multiplett),

5,09 - 5,52 (6H, multiplett),

7,27 - 7,52 (4H, multiplett),

7,65 (2H, dublett, J = 8,30 Hz),

8,22 (4H, dublett, J = 8,79 Hz),

8,16 - 8,25 (2H, multiplett).

8 ( b) Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2- \ ( 2S. 4S)- 2-( 3- metyl- l- piperazinylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll - 1- metyl-l- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

1,97 g 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[3-metyl-4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR) -1-hydroksyetyl]-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 40 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann og deretter ble 2,3 ml IN vandig saltsyre tilsatt og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 2,0 g 10% palladium på trekull. Katalysatoren ble filtrert fra og filtratet ble vasket med dietyleter. Det ble konsentrert ved inndamping under redusert trykk og den resulterende inndampingsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi med reversert fase gjennom 100 ml "Cosmo Sil 75C18-PREP" (et varemerke for et produkt fra

Nacalai Tesgue), ved anvendelse av vann som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert, konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og frysetørring, for å gi 320 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr) , vmaks cm"1:

1760, 1660, 1594, 1453, 1386, 1263.

1,21 (3H, dublett, J = 7,33 Hz),

1,28 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,36 - 1,40 (3H, multiplett),

1,97 - 2,07 (1H, multiplett),

3,01 - 3,67 (9H, multiplett),

3,77 - 4,53 (6H, multiplett),

4,72 - 4,95 (1H, multiplett).

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks_ nm:

296 .

Eksempel 9

Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2- r( 2S)- 2- metyl- 1- piperazinvl-karbonyl!- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksvetvll- 1- metyl-1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

9( a) 4- nitrobenzyl-( 1R. 5S. 6S)- 2- f( 2S. 4S)- 2- r( 2S)- 2- metvl- 4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- 1- piperazinylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksy-etvi1 - l- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylat 57/il dif enylf osf orylklorid og 48 fil diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 89 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 1,0 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. En løsning av 168 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[(2S)-2-metyl-4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 9) i 0,5 ml tørr acetonitril og 48 fil diisopropyletylamin ble samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling. Blandingen ble deretter omrørt ved den samme temperatur i én time, hvoretter den ble tillatt å stå over natten ved samme temperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 7(a) for å gi 205 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver. 9 ( b) Saltsur ( IR, 5S, 6S)- 2-{( 2S, 4S)- 2- r( 2S)- 2- metyl- 1-piperazinylkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6-\( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

205 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[(2S)-2-metyl-4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 3 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann hvoretter 240 ( il IN vandig saltsyre ble tilsatt og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 250 mg 10 vekt% palladium på trekull. Reaksjonsblandingen ble deretter opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 7(b), for å gi 30 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

296.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr) , v^^g cm<-1>:

1759, 1653, 1591, 1447, 1384, 1287.

1,21 (3H, dublett, J = 7,83 Hz),

1,28 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,35 - 1,50 (tilsammen 3H, to dubletter, J = 6,83 Hz), 1,88 - 2,11 (1H, multiplett),

2,97 - 3,60 (8H, multiplett),

3,47 (1H, dublett av dubletter, J = 6,35 & 2,93 Hz), 3,63 - 3,90 (2H, multiplett),

4,03 - 4,13 (1H, multiplett),

4,20 - 4,29 (2H, multiplett),

4,33 - 4,98 (2H, multiplett).

Eksempel 10

Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2- r( 2R)- 2- metyl- l- pjperazinyl-karbonvll- pyrrolidin- 4- yltiol- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

10( a) 4- nitrobenzvl-( IR. 5S, 6S)- 2-(( 2S. 4S)- 2- r( 2R)- 2- metyl- 4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- l- piperazinylkarbonyll - 1-( 4- nitrobenzyl oksvkarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- T( IR)- 1- hydroksy-etvll - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylat 37/il dif enylf osf orylklorid og 31/il diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 58 g 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[ (IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 1,0 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. En løsning av 109 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[(2R)-2-metyl-4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 10) i 0,5 ml tørr acetonitril og 31/il diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen ved en temperatur på fra 5°C til 10°C og den blanding som således fremkom ble omrørt i 30 minutter, under isavkjøling, hvoretter den ble tillatt å stå over natten ved den samme temperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 7(a) for å gi 132 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver. 10 fb) Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2 -{( 2S. 4S)- 2-\( 2R)- 2- metvl- l-piperazinylkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hvdroksy-e tyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

132 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S, 4S)-2-[(2R)-2-metyl-4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-1-piperazinylkarbonyl]-l-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 3 ml1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann hvoretter 160 fil IN vandig saltsyre ble tilsatt og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 150 mg 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 7(b), for å gi 23 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

296.

Eksempel 11

Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S)- 2- f( 3S)- 3- metvl- l- pjperazinyl-karbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll - 1- metyl-1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

11( a) 4- nitrobenzvl-( 1R. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2-\( 3S)- 3- metyl- 4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- l- piperazinylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylat 50 fil dif enylf osf orylklorid og 43 fil diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 80 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 1,0 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i 50 minutter. En løsning av 130 mg (2S,4S)-4-merkapto-2- [ (3S)-3-metyl-4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 11) i 1,5 ml tørr acetonitril og 38 fil diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling og blandingen ble omrørt ved samme temperatur i to timer, hvoretter den ble tillatt å stå over natten ved samme temperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 8(b) for å gi 170 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

11( b) Saltsur ( IR. 5S, 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2- T( 3S)- 3- metvl- l-piperazinylkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylsyre

170 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[ (3S)-3-metyl-4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6- [ (IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 3,5 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann hvoretter 0,1 ml IN vandig saltsyre ble tilsatt og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i 2,5 time i nærvær av 170 mg 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsbland-

ingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 8(b), for å gi 25,0 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

296.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm"1:

1761, 1660, 1594, 1453, 1385, 1262.

1,20 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1,28 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,36 - 1,40 (3H, multiplett),

1,99 - 2,07 (1H, multiplett),

3,04 - 4,63 (9H, multiplett),

3,76 - 4,50 (6H, multiplett),

4,72 - 4,93 (1H, multiplett).

Eksempel 12

Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S)- 2-\( 2R )- 3- metvi- l- piperazinylkarbonyll - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

12( a) 4- nitrobenzvl-( 1R. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2- r( 3R)- 3- metyl- 4-14- nitrobenzyloksykarbonyl)- 1- piperazinylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltio)- 6- l ( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylat 55 fil dif enylf osf orylklorid og 47 fil diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 87 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 1,0 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. En løsning av 145 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[(3R)-3-metyl-4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 12) i 2,0 ml tørr acetonitril og 42 fil diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling, og blandingen ble omrørt ved samme temperatur i én time, hvoretter den ble tillatt å stå over natten ved samme temperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 8(a), for å gi 175 mg av tittelforbindelsen, i form av et amorft, fast stoff.

12( b) Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S)- 2-\( 3R)- 3- metvl- l-piperazinylkarbonyl]- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

175 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[(3R)-3-metyl-4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR) -1-hydroksyetyl]-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 35 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann hvoretter 0,20 ml IN vandig saltsyre ble tilsatt og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 175 mg 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjons-

blandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 8(b), for å gi 28,0 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

296.

Eksempel 13

Saltsur ( IR, 5S. 6S)- 2- f ( 2S. 4S)- 2-( trans- 2. 5- dimetvl- l-piperazinylkarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltiol - 6- r ( IR) - 1- hydroksyetyl 1 - l- metyl - 1 - karbapen- 2 - em- 3 - karboksyl syre

13 ( a) 4- nitrobenzyl-( 1R. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S) - 2- Ttrans- 2. 5-dimetyl- 4- ( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - 1- piperazinylkarbonyll - 1- ( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltio)- 6- f ( IR) - 1-hydroksyety 11 - 1 - metyl - 1 - karbapen- 2 - em- 3 - karboksylat

150/il dif enylf osf orylklorid og 127/il diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 248 mg (IR,5R,6S)-6-[ (IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylsyre i 3 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. En løsning av 533 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[trans-2, 5-dimetyl-4- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) -1-piperazinylkarbonyl] -1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 13) i 2,5 ml tørr acetonitril og 132/il diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen ved en temperatur på mellom 0 og 5°C, og blandingen ble omrørt i to timer, under isavkjøling, hvoretter den ble

tillatt å stå over natten i et kjøleskap. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 7(a), for å gi 281 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

13 ( b) Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 2-( trans- 2. 5- dimetvl- l-piperazinylkarbonyll- pyrrolidin- 4- Yltio1 - 6- f( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - l- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

281 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[trans-2, 5-dimetyl-4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR) -1-hydroksyetyl]-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 6 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann hvoretter 328 fil IN vandig saltsyre ble tilsatt, og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 0,3 g 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 7(b), for å gi 29 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks> nm:

296,5.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm-1:

1762, 1656, 1592, 1455, 1386, 1139.

1,20 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1,28 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,35 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1,41 & 1,46 (tilsammen 3H, to dubletter, J = 6,84 Hz), 1,92 - 2,08 (1H, multiplett),

2,96 - 3,65 (6H, multiplett),

3,47 (1H, dublett av dubletter, j = 6,35 & 2,93 Hz), 3,76 - 3,90 (3H, multiplett),

4,00 - 4,15 (1H, multiplett),

4,20 - 4,41 (3H, multiplett),

4,75 - 4,88 (1H, multiplett).

Eksempel 14

Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 2-( cis- 3. 5- dimetvl- l- pjper-azinvlkarbonyl)- pyrrolidin- 4- Yltiol - 6- T( IR)- l- hydroksyetyll - 1-mety1- 1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylsyre

14( a) 4- nitrobenzvl-( 1R. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 2-( cis- 3. 5- dimetvl-1- piperazinylkarbonyl)- 1-( 4- nitrobenzYloksykarbonyl)-pyrrolidin- 4- yltio)- 6- f( IR)- l- hvdroksyetyll - 1- metyl- l-karbapen- 2 - em- 3 - karboksylat 92 fil dif enylf osf orylklorid og 78 fil diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av152 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 2 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble 176 fil diisopropyletylamin og en løsning av 230 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-(cis-3,5-dimetyl-l-piperazinylkarbonyl)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 14) i 1,8 ml tørr acetonitril ble samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling, og blandingen ble omrørt ved samme temperatur i fem timer, hvoretter den ble tillatt å stå over natten i et kjøleskap. Reaksjonsblandingen ble deretter fridd fra løsningsmidlet ved destillasjon under redusert trykk og den resulterende destillasjonsrest ble blandet med en vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat og deretter ekstrahert med etylacetat. Ekstraktet ble tørret over vannfritt magnesiumsulfat og løsningsmidlet ble fjernet ved destillasjon under redusert trykk. Den resulterende destillasjonsrest ble opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 8(a), for å gi 224 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

14( b) Saltsur ( IR, 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 2-( cis- 3. 5- dimetyl- l-piperazinylkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltiol- 6- \ ( IR)- 1- hydroksy-etvi 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

Det hele av 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-(cis-3 , 5-dimetyl-l-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin-4-yltio]-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylatet fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor, ble oppløst i 4 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann, hvoretter 261/xl IN vandig saltsyre ble tilsatt, og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 0,2 g 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 8(b), for å gi 27 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

296,5.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), ymaks cm-1:

1761, 1661, 1599, 1459, 1386, 1268.

1,20 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1,28 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,35 - 1,39 (6H, multiplett),

1,96 - 2,06 (1H, multiplett),

2,72 - 3,53 (9H, multiplett),

3,75 - 4,29 (5H, multiplett),

4,53 - 4,94 (1H, multiplett).

Eksempel 15

Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S)- 2- T4-( 2- hvdroksvetvl)- 1- homo-piperazinylkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

15( a) 4- nitrobenzvl-( 1R. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2- T4-( 2- 4'- nitro-benzyloksykarbonyloksvetyl)- 1- homopiperazinylkarbonyll- 1-( 4-nitrobenzyloksykarbonvl)- pvrrolidin- 4- yltio}- 6- f( IR)- 1-hydroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylat

460/il dif enylf osf orylklorid og 390/il diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 761 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 10 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble 780 /il diisopropyletylamin og en løsning av 2,2 g (2S,4S)-4-merkapto-2-{4-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-oksyetyl]-1-homopiperazinylkarbonyl}-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-trifluormetansulfonat (fremstilt som beskrevet i syntese 15) i 5 ml tørr acetonitril samtidig tilsatt dråpevis til blan-

dingen, under isavkjøling, og blandingen ble omrørt over natten ved samme temperatur. Løsningsmidlet ble deretter fjernet ved hjelp av destillasjon under redusert trykk og den resulterende destillasjonsrest ble blandet med en vandig løs-ning av natriumhydrogenkarbonat. Blandingen deretter ekstrahert med etylacetat. Ekstraktet ble tørret over vannfri magnesiumsulfat og løsningsmidlet ble fjernet ved destillasjon under redusert trykk. Den resulterende destillasjonsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi gjennom 50 g silikagel (et produkt fra Merck, 230-400 mesh), ved anvendelse av en 9:1 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert og konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk, for å gi 857 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), J^g^g cm<-1>:

1768, 1750, 1710, 1649, 1522, 1347, 1260.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), 6 ppm:

1,27 (3H, dublett, J = 7,3 Hz),

1,36 (3H, dublett, J = 6,0 Hz),

1,80 - 2,05 (3H, multiplett),

2,40 - 3,00 (7H, multiplett),

3,23 - 3,78 (7H, multiplett),

4,00 - 4,29 (5H, multiplett),

4,61 - 4,77 (1H, multiplett),

5,03 - 5,53 (6H, multiplett),

7,42 - 7,67 (6H, multiplett),

8,16 - 8,25 (6H, multiplett).

15( b) Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2- T4-( 2- hvdroksyetyl)- 1-homopiperazinylkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- f( IR) - 1-hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

350 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[4-(2-4'-nitrobenzyloksykarbonyloksyetyl)-1-homopiperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR) -1-hydroksyetyl]-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt

som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 20 ml 3:2 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann, hvoretter 0,33 ml IN vandig saltsyre ble tilsatt, og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 0,5 g 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble katalysatoren filtrert fra og filtratet ble ekstrahert med dietyleter. Det gjenværende vannholdige lag ble deretter konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og den resulterende inndampingsrest ble renset ved hjelp av "Lobar"-kolonnekromato-graf i (et produkt fra Merck, LiChroprep RP-8, størrelse B), ved anvendelse av vann som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert, konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og frysetørret, for å gi 105 mg av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1:

1759, 1652, 1595, 1460, 1378, 1286.

1,21 (3H, dublett, J = 7,3 Hz),

1,28 (3H, dublett, J = 6,4 Hz),

1,96 - 2,10 (1H, multiplett),

2,25 - 2,34 (2H, multiplett),

3,00 - 3,15 (1H, multiplett),

3,33 - 3,54 (6H, multiplett),

3,66 - 3,84 (7H, multiplett),

3,91 - 3,96 (2H, multiplett),

4,04 - 4,13 (1H, multiplett),

4,20 - 4,29 (2H, multiplett),

4,81 - 4,91 (1H, multiplett).

Eksempel 16

Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2 - \ ( 2S. 4S)- 2-( 4- karbamoylmetvi- 1- homo-piperazinylkarbonvl)- pyrrolidin- 4- yltiol - 6- r( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

16( a) 4- nitrobenzyl-( IR, 5S. 6S)- 2- r( 2S . 4S)- 2-( 4- karbamovl-dimetyl- l- homopiperazinylkarbonyl)- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltiol - 6-\( IR) - 1- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylat

2,45 ml dif enylf osf orylklorid og 2,05 ml diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 3,98 g 4-nitrobenzyl-(IR, 5R, 6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 40 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble 1,85 ml diisopropyletylamin og en løsning av 4,88 g (2S,4S)-4-merkapto-2- (4-karbamoylmetyl-l-homopiperazinylkarbonyl) -1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 16) i 30 ml tørr acetonitril samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling, og blandingen ble omrørt ved samme temperatur i én time. Reaksjonsblandingen ble deretter fortynnet med 130 ml acetonitril og 200 ml vann, hvoretter det ble tilsatt 1,85 g natriumhydrogenkarbonat. Den blanding som således fremsto, ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi med reversert fase gjennom 500 g "Cosmo Sil 75Clg-PREP" (et varemerke for et produkt fra Nacalai Tesque), ved anvendelse av 50 vol% vandig acetonitril som eluent. De

fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert og konsentrert for å gi 6,05 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), ymaks cm<-1>:

1772, 1708, 1521, 1346.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (heksadeuterert dimetylsulfoksid, 270 MHz), 6 ppm:

1,14 - 1,20 (6H, multiplett),

1,59 - 1,75 (3H, multiplett),

2,30 - 3,02 (6H, multiplett),

3,13 - 3,38 (2H, multiplett),

3,42 - 3,70 (5H, multiplett),

3,75 - 4,00 (2H, multiplett),

4,10 - 4,28 (2H, multiplett),

4,68 - 4,83 (1H, multiplett),

5,05 - 5,49 (6H, multiplett),

7,08 - 7,22 (2H, multiplett),

7,54 - 7,75 (4H, multiplett),

8,20 - 8,25 (4H, multiplett).

16( b) Saltsur ( IR, 55, 6S)- 2-\( 2S. 4S)- 2-( 4- karbamoylmetyl- l-homopiperazinylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol- 6-\( IR)- 1-hydroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

200 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-(4-karbamoylmetyl-l-homopiperazinylkarbonyl)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin-4-yltio] -6-[(IR)-1-hydroksyetyl] -l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 20 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann, hvoretter 0,18 ml IN vandig saltsyre ble tilsatt, og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 0,3 g 10 vekt% palladium på trekull. Katalysatoren ble filtrert fra og filtratet ble ekstrahert med dietyleter. Det vandige lag ble deretter konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og

den resulterende inndampingsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi gjennom en "Lobar"-kolonne (et produkt fra Merck, LiChroprep RP-8, størrelse B), ved anvendelse av vann som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert, konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og frysetørret, for å gi 30 mg av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

297.

Eksempel 17

Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2- \ ( 2S. 4S)- 2-( 4- acetimidoylpiperazin- l-ylkarbonvl)- pyrrolidin- 4- yltiol- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1-me tyl- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

17( a) 4- nitrobenzyl-( 1R. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S)- 2- T4-( N- 4- nitro-benzyloksvkarbonylacetimidoyl)- piperazin- l- ylkarbonyll- 1-( 4-nitrobenzvloksykarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- f( IR)- 1-hydroksyetvl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylat

1,45 ml difenylfosforylklorid og 1,22 ml diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 2,43 g 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl] -1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 25 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i 30 minutter. En løsning av 3,99 g (2S,4S)-4-merkapto-2-[4-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-piperazin-l-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 17) i 15 ml tørr

acetonitril og 1,22 ml diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling, og blandingen ble omrørt over natten ved samme temperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og den reduserende inndampingsrest ble fortynnet med etylacetat. Den fortynnede løsning ble vasket, vekselvis ved en vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat, med vann og med en vandig løsning av natriumklorid. Etylacetatlaget ble deretter tørret over vannfri natriumsulfat og løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillasjon under redusert trykk. Destillasjonsresten ble renset ved hjelp kolonnekromatografi gjennom silikagel, ved anvendelse av en 6:4 volumetrisk blanding av etylacetat og acetonitril som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert og konsentrert for å gi 5,17 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Denne forbindelses spektrale data er identiske med dem for den forbindelse som ble fremstilt som beskrevet i eksempel Ka) .

17( b) ( IR. 5S, 6S)- 2- r ( 2S. 4S)- 2-( 4- acetimidoylpiperazin- l- ylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol- 6- \ ( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

5,10 g 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[4-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-piperazin-1-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl] -1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor] ble oppløst i 100 ml 6:4 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i 2,5 timer i nærvær av 5,0 g 10 vekt% palladium på trekull. Katalysatoren ble filtrert av og filtratet ble vasket med dietyleter og deretter konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk. Den resulterende inndampingsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi med reversert fase gjennom 250 ml "Cosmo Sil 75Clg-PREP" (et varemerke for et produkt fra Nacalai Tesque), ved anvendelse av

vann, 5 vol% vandig acetonitril og 7 vol% vandig acetonitril, i denne rekkefølge, som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert, konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og frysetørret, for å gi 940 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Denne forbindelses spektrale data er identiske med dem for den forbindelse som ble fremstilt som beskrevet i eksempel Kb) .

17( c) Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 2-( 4- acetimidoylpiperazin- l- yl- karbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol - 6- f( IR)- 1-hydroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

200 mg (IR,5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-(4-acetimidoylpiperazin-1-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-i-karbapen-2-em-3-karboksylsyre [fremstilt som beskrevet i trinn (b) ovenfor] ble oppløst i 5 ml vann, hvoretter 0,43 ml IN vandig saltsyre ble tilsatt. Den resulterende blanding ble opparbeidet og renset ved hjelp av kolonnekromatografi med reversert fase gjennom 30 ml "Cosmo Sil 75C18-PREP" (et varemerke for et produkt fra Nacalai Tesque), ved anvendelse av vann som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert og frysetørret, for å gi 149 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr) , vmaks # cm<-1>:

1756, 1656, 1620, 1450, 1382, 1252.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks_ nm:

297 .

Kjernemagnetisk resonansspektrum (D20, 270 MHz), 6 ppm:

1,21 (3H, dublett, J = 7,3 Hz),

1,29 (3H, dublett, J = 6,4 Hz),

1,97 - 2,07 (1H, multiplett),

2,35 Sc 2,36 (tilsammen 3H, to singletter) ,

3,02 - 3,14 (1H, multiplett),

3,31 - 3,43 (1H, multiplett),

3,45 - 3,53 (2H, multiplett),

3,68 - 3,88 (9H, multiplett),

4,03 - 4,12 (1H, multiplett),

4,20 - 4,30 (2H, multiplett),

4,82 - 4,90 (1H, multiplett).

Eksempel 18

Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S) - 2- r( 3S)- 3- aminopvrrolidin- 1- ylkarbonyl! - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl-l- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

OH CH3

J—N ^ ^—N H '^2

O COOH h

18( a) 4- nitrobenzyl-( 1R. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S)- 2- f( 3S)- 3-( 4- nitrobenzyl oksykarbonyl) - aminopyrrolidin- l- ylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltio}- 6-\( IR)- 1- hydroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylat

453 /il dif enylf osf orylklorid og 381/il diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 760 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 6 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. En løsning av 1,26 g (2S,4S)-4-merkapto-2-[(3S)-3-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-aminopyrrolidin-1-ylkarbonyl] -1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 18) i 5 ml tørr acetonitril og 364/il diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling, og blandingen ble omrørt ved samme temperatur i tre timer. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillasjon under

redusert trykk og den resulterende destillasjonsrest ble fortynnet med 70 ml etylacetat. Den fortynnede løsning ble deretter vasket, vekselvis med vann, med en mettet vandig løs-ning av natriumhydrogenkarbonat, med vann og med en mettet vandig løsning av natriumklorid, i nevnte rekkefølge. Den vaskede organiske løsning ble deretter tørret over vannfri magnesiumsulfat og løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillasjon under redusert trykk. Den resulterende destilla-sj onsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi gjennom silikagel ved anvendelse av en 4:96 volumetrisk blanding av metanol og etylacetat som eluent, for å gi 1,01 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm<-1>:

3377, 1774, 1713, 1648, 1607, 1521, 1346, 852, 736.

1,15 - 1,18 (6H, multiplett),

1,70 - 2,20 (2H, multiplett),

2,77 - 2,85 (1H, multiplett),

3,12 - 4,27 (14H, multiplett),

4,49 - 4,64 (1H, multiplett),

5,05 - 5,49 (7H, multiplett),

7,48 - 7,82 (6H, multiplett),

8,17 - 8,25 (6H, multiplett).

18( b) Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S) - 2- f( 3S)- 3- aminopyrrolidin- 1- ylkarbonyl]- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1-hvdroksyety11 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

1,0 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[(3S)-3-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-aminopyrrolidin-1-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 30 ml 2:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann, hvoretter det ble tilsatt 1,0 ml IN vandig saltsyre og blandingen ble hydro-

genert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 1,5 g 10 vol% palladium på trekull. Katalysatoren ble filtrert av og filtratet ble vasket med dietyleter. Den vaskede, vandige løsning ble konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og inndampingsresten ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi med reversert fase gjennom 19 ml "Cosmo Sil 75C18-PREP" (et varemerke for et produkt fra Nacalai Tesque), med anvendelse av vann som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert, konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og frysetørret, for å gi 169 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm"1:

1397, 1758, 1653, 1587, 1465, 1386.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (270 MHz, D20, ved anvendelse av tetradeuterert natriumtrimetylsilylpropionat som intern standard) , 6 ppm-.

1,21 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1,29 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1.97 - 2,19 (1H, multiplett),

2,21 - 2,29 (1H, multiplett),

2,36 - 2,60 (1H, multiplett),

3,02 - 3,14 (1H, multiplett),

3,32 - 3,43 (1H, multiplett),

3,45 - 3,53 (2H, multiplett),

3,57 - 3,90 (5H, multiplett),

3.98 - 4,17 (2H, multiplett),

4,20 - 4,29 (2H, multiplett),

4,63 - 4,82 (1H, multiplett).

Eksempel 19

Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2- 1 ( 2S. 4S)- 2- r ( 3S)- pyrrolidin- 3- vlamino-karbonyll - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

19( a) 4- nitrobenzyl- ( IR. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2- r( 3S)- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 3- ylaminokarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyl oksykarbonvl) - pyrrolidin- 4- yltio)- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1 - metyl - 1 - karbapen- 2 - em- 3 - karboksylat

251 fil dif enylf osf orylklorid og 212 fil diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 420 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 4,2 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. En løsning av 913 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[ (3S) -1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin-3-ylamino-karbonyl] -1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 19) i 5 ml tørr acetonitril og 404 fil diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling, og blandingen ble omrørt ved samme temperatur i syv timer og deretter tillatt å stå over natten ved samme temperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble 101 fil diisopropyletylamin tilsatt og blandingen ble omrørt ved samme temperatur i én time. Reaksjonsblandingen ble deretter opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 18(a), for å gi 504 av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1.

3385, 1775, 1709, 1607, 1522, 1346, 853, 737.

1,15 - 1,18 (6H, multiplett),

1,69 - 2,07 (3H, multiplett),

2,60 - 2,80 (1H, multiplett),

3,10 - 3,70 (9H, multiplett),

3,80 - 4,35 (6H, multiplett),

5,15 - 5,48 (6H, multiplett),

7,57 - 7,73 (6H, multiplett),

8,21 - 8,33 (6H, multiplett).

19( b) Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2-\( 3S)- pyrrolidin- 3-ylaminokarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyll-1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

475 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[(3S)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-3-ylaminokarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 15 ml 2:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann, hvoretter 0,45 ml IN vandig saltsyre ble tilsatt og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 1 g 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 18(b), for å gi 46 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), v ina] cs cm-i

3367, 1760, 1683, 1558, 1390, 1281.

1,21 (3H, dublett, J = 7,33 Hz),

1,28 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

2,04 - 2,24 (2H, multiplett),

2,33 - 3,00 (1H, multiplett),

2,88 - 3,00 (1H, multiplett),

3,31 - 3,56 (6H, multiplett),

5,59 - 3,67 (1H, multiplett),

3,77 - 3,84 (1H, multiplett),

4,04 - 4,13 (1H, multiplett),

4,20 - 4,29 (2H, multiplett),

4,47 - 4,56 (2H, multiplett).

Eksempel 20

Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2-\( 3R)- pyrrolidin- 3- vlamino-karbonyll - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- f( IR)- l- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

20( a) 4- nitrobenzyl-( 1R. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2- r( 3R)- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 3- ylaminokarbonyn- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylat

Idet det ble fulgt en fremgangsmåte som lignet den som er beskrevet i eksempel 19(a), men med anvendelse av 1,06 g (2S,4S)-4-merkapto-2-[(3R)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-3-ylaminokarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 20) i stedet for (2S, 4S)-4-merkapto-2-[(3S)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-3-ylaminokarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin fremsto 540 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

20( b) Saltsur ( IR. 5S, 6S)- 2-( ( 2S. 4S)- 2- r( 3R)- pyrrolidin- 3-yl aminokarbonyl1- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsvre

500 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)~ 2-{(2S,4S)-2-[(3R)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-3-ylaminokarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR) -1-hydroksyetyl]-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 20 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann, hvoretter 0,47 ml IN vandig saltsyre ble tilsatt og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 1 g 10 vekt% palladium på trekull. Reaksjonsblandingen ble deretter opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 18(b), for å gi 43 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

297 .

Eksempel 21

Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2- f( 3S)- 3- dimetylaminopyrrolidin- l- ylkarbonyn- pYrrolidin- 4- yltio}- 6- r ( IR) - 1-hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

21( a) 4- nitrobenzyl-( 1R. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2- r( 3S)- 3- dimetylaminopyrrolidin- l- ylkarbonyll - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin- 4- yltio}- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl- l-karbapen- 2- em- 3- karboksylat

880 iil dif enylf osf orylklorid og 740 fil diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 1,46 g 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 12 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i 1/2 time. En løsning av 1,70 g (2S,4S)-4-merkapto-2-[(3S)-3-dimetylaminopyrrolidin-l-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidintrifluormetansulfonat (fremstilt som

beskrevet i syntese 21) i 8 ml tørr acetonitril og 700 fil diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling, og blandingen ble omrørt ved samme temperatur i 2,5 time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 18(a), for å gi 1,65 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr) , v^^g cm"1-.

1773, 1711, 1650, 1607, 1522, 1346, 854, 738.

1,15 (3H, dublett, J = 3,42 Hz),

1,18 (3H, dublett, J = 3,90 Hz),

2,09 (2H, dublett, J = 8,3 Hz),

2,17 (1H, singlett),

2,70 - 3,93 (17H, multiplett),

3,95 - 4,08 (1H, multiplett),

4,11 - 4,20 (1H, multiplett),

4,23 - 4,29 (1H, multiplett),

4,55 - 4,66 (1H, multiplett),

5,06 - 5,75 (4H, multiplett),

7,53 - 7,74 (4H, multiplett),

8,21 - 8,25 (4H, multiplett).

21( b) Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2- r( 3S)- 3- dimetvlamino-pyrrolidin- l- ylkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1-hydroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

306 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[(3S)-3-dimetylaminopyrrolidin-l-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 12 ml 2:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann, hvoretter det ble tilsatt 0,38 ml IN vandig saltsyre og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 600 mg 10 vekt% palladium på trekull. Reaksjonsblandingen ble deretter opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 18(b), for å gi 19 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr) , v^^g cm"1.-

3385, 1764, 1656, 1553, 1466, 1375.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (270 MHz, D20, ved anvendelse av tetradeuterert natriumtrimetylsilylpropionat som intern standard), 6 ppm: 1,22 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1,28 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1.95 - 2,10 (1H, multiplett),

2,15 - 2,35 (3H, multiplett),

2,5 - 2,7 (1H, multiplett),

2.96 - 2,97 (6H, multiplett),

3,00 - 3,15 (1H, multiplett),

3,37 - 3,43 (1H, multiplett),

3,46 - 3,52 (2H, multiplett),

3,56 - 3,70 (2H, multiplett),

3,73 - 4,11 (6H, multiplett),

4,15 - 4,30 (2H, multiplett).

Eksempel 22

Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2-{ ( 2S. 4S)- 2- r( 3S)- 3- metylaminopyrrolidin-1- ylkarbonyll- pvrrolidin- 4- yltio)- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1-metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

22( a) 4- nitrobenzvl-( 1R. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S) - 2- r( 3S)- 3- N- metyl-N-( 4- nitrobenzvloksykarbonyl)- aminopyrrolidin- 1- ylkarbonyl1- 1-( 4- nitrobenzyloksvkarbonyl)- pvrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1-hydroksye tvi 1 - 1 - metyl - 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylat

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i eksempel 18(a), men med anvendelse av 820 mg (2S,4S)-4-merkapto-2- [ (3S)-3-N-metyl-N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -aminopyrrolidin-1-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 22) i stedet for (2S,4S)-4-merkapto-2-[(3S)-3-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -aminopyrrolidin-l-ylkarbonyl] -1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin fremkom 630 mg av tittelforbindelsen.

22( b) Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2- r( 3S)- 3- metylamino-pyrrolidin- l- ylkarbonyl 1 - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- f( IR)- 1-hydroksyety11 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

580 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S, 4S)-2-[(3S)-3-N-metyl-N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-aminopyrrolidin-l-ylkarbonyl] -1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 12 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann,

hvoretter 0,55 ml IN vandig saltsyre ble tilsatt og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 700 mg 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 18(b), for å gi 53 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Amaks. nm:

297. Eksempel 23 ( 1R. 5S. 6S)- l-(( 2S. 4S)- 2- F( 3S)- acetimidovlaminopvrrolidin- 1-ylkarbonyl!- pyrrolidin- 4- yltio)- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1-metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

23( a) 4- nitrobenzvl-( 1R. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2-\( 3S)- 3-( N- 4-nitrobenzyloksvkarbonylacetimidoylamino.) - pyrrolidin- 1- ylkarbonyl! - 1-( 4- nitrobenzvloksykarbonyl)- pvrrolidin- 4- vltio)- 6-f( IR)- 1- hydroksyetyll- l- metvl- l- karbapen- 2- em- 3- karboksylat 231/il dif enylf osf orylklorid og 194/il diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 384mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 6 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i 45 minutter. En løsning av 652 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[(3S)-3-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl-amino)-pyrrolidin-l-ylkarbonyl]-l-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 23) i 4 ml acetonitril og 185 pil diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, og blandingen ble omrørt ved samme temperatur i tre timer. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk. Den reduserende inndampingsrest ble fortynnet med etylacetat og den fortynnede løsning ble vasket med vann og en vandig løsning av natriumklorid. Etylacetatløsningen ble tørret over vannfri magnesiumsulfat og løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillasjon under redusert trykk. Den resulterende inndampingsrest ble

renset ved hjelp kolonnekromatografi gjennom silikagel, ved anvendelse av en 9:9:1 volumetrisk blanding av metylenklorid, etylacetat og metanol som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert og konsentrert for å gi 510 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1:

1774, 1709, 1654, 1607, 1551, 1521, 1441, 1404, 1346.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (heksadeuterert dimetylsulfoksid + D20, 270 MHz), 6 ppm:

1.15 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1.16 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1,60 - 2,28 (2H, multiplett),

2,10 (3H, singlett),

2,69 - 2,93 (1H, multiplett),

3,10 - 4,72 (14H, multiplett),

5,04 - 5,51 (6H, multiplett),

7,46 - 7,76 (6H, multiplett),

8,14 - 8,28 (6H, multiplett).

23 ( b) ( IR, 5S. 6S)- 1- 1( 2S. 4S)- 2-\( 3S)- acetimidoylamino-pyrrolidin- 1- ylkarbonyl!- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- f( IR) - 1-hydroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

500 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[(3S)-3-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoylamino)-pyrrolidin-1-ylkarbonyl] -1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor] ble oppløst i16 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 400 mg 10 vekt% palladium på trekull. Katalysatoren ble deretter filtrert av og filtratet ble vasket med dietyleter. Det vannholdige lag ble konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og konsentratet ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi med reversert fase gjennom 20 ml "Cosmo

Sil 75Cig-PREP" (et produkt fra Nacalai Tesgue), ved anvendelse av 6 vekt% vandig acetonitril som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert, konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og frysetørret, for å gi 136 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Amaks nm:

298.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1:

1756, 1632, 1590, 1451, 1386, 1283, 1259.

1.22 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1,30 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,57 - 1,71 (1H, multiplett),

1,97 - 2,51 (2H, multiplett),

2.23 & 2,25 (tilsammen 3H, to singletter),

2,64 - 2,81 (1H, multiplett),

3,05 (1H, dublett av dubletter, J = 12,21 & 3,91 Hz), 3,18 (1H, dublett av dubletter, J = 12,21 & 5,86 Hz), 3,43 (1H, dublett av dubletter, J = 6,35 & 2,24 Hz),

3,32 - 4,06 (7H, multiplett),

4,22 (1H, dublett av dubletter, J = 9,28&2,44 Hz), 4,18 - 4,43 (2H, multiplett).

Eksempel 24

( 1R. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2-\( 3S)- formimidovlaminopvrrolidin- 1-vlkarbonyll- pvrrolidin- 4- vltio)- 6-\( IR)- l- hydroksvetyll- l-metyl- 1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylsvre

24( a) 4- nitrobenzvl-( IR. 5S. 6S) - 2- (( 2S. 4S) - 2-\( 3S)- 3-( N- 4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoylamino)- pyrrolidin- l- ylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzvloksykarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltio)- 6-T( IR)- 1- hydroksyetyll- l- metyl- l- karbapen- 2- em- 3- karboksylat 250/zl dif enylf osf orylklorid og 210/il diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 417 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R, 6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 8 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. En løsning av 659 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[ (3S) -3- (N-4-nitrobenzyloksykarbonylf ormimidoylamino) - pyrrolidin-l-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 24) i 7 ml tørr acetonitril og 210/il diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling, og blandingen ble omrørt ved samme temperatur i én time og deretter tillatt å stå over natten ved samme temperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 23(a), for å gi 593 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr) , vmakg cm-1.

1772, 1707, 1655, 1605, 1521, 1444, 1346, 1210, 1136, lill.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3+ D20, 270 MHz),

ppm:

1,25 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1,36 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,75 - 1,80 (4H, multiplett),

3,22 - 4,32 (12H, multiplett),

4,40 - 4,65 (1H, multiplett),

5,12 - 5,55 (6H, multiplett),

7,38 - 7,69 (6H, multiplett),

8,06 - 8,31 (6H, multiplett),

8,42 (1H, singlett).

24 ( b) ( 1R. 5S, 6S) - 2-{( 2S. 4S) - 2- f( 3S) - formimidoylaminopyrrolidin- 1- ylkarbonyl1- pyrrolidin- 4- yltio)- 6- \ ( IR)- 1-hydroksyety11 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylsyre

570 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[ (3S)-3-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoylamino)-pyrrolidin-1-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor] ble oppløst i 20 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 450 mg 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 23(b), for å gi 125 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

300.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr),<y>maks_ cm<-1>:

1755, 1634, 1592, 1455, 1388, 1286, 1260, 1182, 1148.

1,22 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1,30 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,58 - 1,75 (1H, multiplett),

1,98 - 2,53 (2H, multiplett),

2,64 - 2,86 (1H, multiplett),

3,07 (1H, dublett av dubletter, J = 12,21&3,91 Hz), 3,21 (1H, dublett av dubletter, J = 12,21&5,86 Hz), 3,32 - 4,12 (8H, multiplett),

4,17 - 4,53 (3H, multiplett),

7,80, 7,82, 7,95 & 7,96 (tilsammen 1H, fire singletter).

Eksempel 25

( 1R. 5S. 6S)- 2-( ( 2S. 4S)- 2- \ ( 3R)- 1- formimidoylpyrrolidin- 3- vl-aminokarbonyll- pvrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hvdroksyetyD- 1-metvi- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

25( a) 4- nitrobenzvl-( 1R. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2- r( 3S)- 1-( N- 4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)- pyrrolidin- 3- ylamino-karbonyll - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltio)- 6-r( IR)- 1- hydroksyetyll- l- metyl- l- karbapen- 2- em- 3- karboksylat 225/il dif enylf osf orylklorid og 189 [ il diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 374 mg4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 5 ml tørr aceto-

nitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. En løsning av 620 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[(3S)-1-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)-pyrrolidin-3-ylaminokarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 25) i 5 ml tørr acetonitril og 189 itl diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling, og blandingen ble omrørt ved samme temperatur i én time, hvoretter den ble tillatt å stå over natten ved samme temperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 23(a), for å gi 250 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr) ,J^^g cm"<1>:

1774, 1710, 1605, 1520, 1450, 1346, 1220, 1157, 1108.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13+ D20, 270 MHz),

<5 ppm:

1,27 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1.36 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

2,01 - 2,38 (2H, multiplett),

3,23 - 4,62 (14H, multiplett),

5.10 - 5,36 (6H, multiplett),

5.37 - 5,52 (1H, multiplett),

7,42 - 7,68 (6H, multiplett),

8.11 - 8,28 (6H, multiplett),

8,63 (1H, singlett).

25( b) ( IR. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2-\( 3R)- formimidovlpyrrolidin- 3-ylaminokarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

205 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[(3S)-1-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)-pyrrolidin-3-ylaminokarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor] ble

oppløst i 12 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 160 mg 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 23(b), for å gi 50 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks_ nm:

299 .

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm<-1>:

1754, 1710, 1657, 1586, 1449, 1427, 1386, 1285, 1262, 1182, 1146.

1,21 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1.30 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,75 - 3,04 (4H, multiplett),

3.31 - 4,95 (12H, multiplett),

8,01&8,03 (tilsammen 1H, to singletter).

Eksempel 26

( 1R. 5S. 6S)- 2 - 1 ( 2S. 4S)- 2- r MS)- 1- formimidovlpvrrolidin-3-yl-aminokarbonyl1- pyrrolidin- 4- yltio}-6-r(IR)-1-hydroksyetyll-1-metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

26( a) 4- nitrobenzvl-( 1R. 5S. 6S)- 2- (( 2S. 4S)- 2- f( 3S)- 1-( N- 4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl) - pyrrolidin- 3- ylamino-karbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltio}- 6-r ( IR) - 1- hydroksyetyll - 1- metyl- l- karbapen- 2- em- 3- karboksylat Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i eksempel 23(a), men med anvendelse av 422 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl] -l-metyl-2-okso-1-karbapenam-3-karboksylat og 717 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[(3S)-1-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-pyrrolidin-3-yl aminokarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 26) , fremkommer tittelforbindelsen, i form av et pulver.

26( b) ( 1R. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2-\( 3S)- 1- acetimidoylpvrrolidin-3- ylaminokarbonyn- pyrrolidin- 4- yltio}- 6-\( IR)- 1-hydroksyety11 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylsyre

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i eksempel 23(b), men ved anvendelse av 523 mg 4-nitrobenzyl-(1R,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[(3S)-1-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-pyrrolidin-3-ylaminokarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], fremkom 128 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Amaks nm:

299. Eksempel 27 ( IR. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2- r( 3R)- 1- formimidovlpyrrolidin- S- yl-aminokarbonyn - pyrrolidin- 4- yltio)- 6- T( IR)- 1- hydroksyetYll- 1-metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

27( a) 4- nitrobenzyl-( 1R. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S)- 2- f( 3S)- 1-( N- 4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)- pyrrolidin- 3- ylamino-karbonyll- 1-( 4- nitrobenzYloksykarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltio}- 6-r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylat Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i eksempel 23(a), men med anvendelse av 464 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat og 788 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[(3R)-1-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)-pyrrolidin-3-ylaminokarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 27), fremkom 548 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

27( b) ( 1R. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2-\( 3R)- formimidovlpyrrolidin- 3-ylaminokarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyll-1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i eksempel 23(b), men med anvendelse av 530 mg4-nitrobenzyl-(1R,5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-1-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)-pyrrolidin-3-ylaminokarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor] fremkom 133 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Amaks. nm:

300.

Eksempel 28

Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2- TN- metyl- N-(( 3S)- 3-pyrrolidinyl)- karbamoyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1-hydroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylsyre

28( a) 4- nitrobenzvl-( 1R. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S)- 2-( N- metyl- N- T( 3S)-1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin- 3- yll- karbamoyl)- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonvl)- pyrrolidin- 4- yltio)- 6- r( IR)- 1-hydroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylat

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i eksempel 19 (b), men ved anvendelse av 1,09 g (2S, 4S)-4-merkapto-2-{(N-metyl-N-[(3S)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin-3-yl]-karbamoyl}-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin i stedet for (2S,4S)-4-merkapto-2-[(3S) - 1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-3-ylaminokarbonyl] -1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin fremkom 550 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

28( b) Saltsur ( 1R. 5S, 65)- 2- 1( 2S. 4S)- 2- TN- metyl- N-(( 3S)- 3-pyrrolidinyl)- karbamoyll- pyrrolidin- 4- vltio}- 6-\( IR)- 1-hydroksyetyl 1 - 1 - metyl - 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksyl syre

500 ml 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-{N-metyl-N- [(3S) -1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-3-yl]-karbamoyl}-1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin-4-yltio}-6- [ (IR) -l-hydroksyetyl] -l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor] ble oppløst i 20 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann, hvoretter 0,45 ml IN vandig saltsyre ble tilsatt, og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 700 mg 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 18 (b) , for å gi 30 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H2'0) , X^g^nm:

297. Eksempel 29 ( 1R. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S)- 2- fN- metvl- N-(( 3S) - 1- formimidoylpyrrolidin- 3- yl) - karbamovll - pyrrolidin- 4- yl tio}- 6- r ( IR) - 1-hydroksyetyl 1 - 1 - metyl - 1 - karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

29( a) 4- nitrobenzyl-( 1R. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2-{ N- metyl- N- r( 3S)-1-( 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)- pyrrolidin- 3- yll - karbamoyl}- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- T( IR)- 1- hydroksyetyl] - 1-metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylat

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i eksempel 23(a), men ved anvendelse av 400 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-1-karbapenam-3-karboksylat og 679 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-{ (N-metyl-N-[(3S)-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)-pyrrolidin-3-yl]-karbamoyl}-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 29) fremkom 420 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

29( b) ( 1R. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2- TN- metyl- N-(( 3S)- 1-formimidoylpyrrolidin- 3- yl)- karbamoyl]- pyrrolidin- 4- yltio}- 6-r( IR)- 1- hydroksyetyl]- l- metyl- l- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre Ved å følge en prosedyre som ligner den som er beskrevet i eksempel 23(b), men ved anvendelse av 410 mg 4-nitrobenzyl-(1R,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-{N-metyl-N-[(3S) -1-(4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)-pyrrolidin-3-yl] - karbamoyl}-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], fremkom 104 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Amaks nm:

299 .

Eksempel 30

Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2- \ ( 2S. 4S)- 2-( 3- karbamoyl- 1- piperazinylkarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltiol - 6- F ( IR) - 1- hydroksyetyll - 1- metyl-1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

30( a) 4- nitrobenzyl-( 1R. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S)- 2- T3- karbamoyl- 4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - l- piperazinylkarbonyll - 1- ( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1 - metvl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylat

0,78 ml difenylfosforylklorid og 0,65 ml diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 1,23 g 4-nitrobenzyl-(IR,5R, 6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl] -1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 20 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved den samme temperatur i én time. En løsning av 2,11 g (2S,4S)-4-merkapto-2- [3-karbamoyl-4- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) -1-piperazinylkarbonyl] -1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 30) i 20 ml tørr acetonitril og 0,59 ml diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling, og blandingen ble omrørt ved den temperatur isavkjølingen gir i 90 minutter og deretter omrørt ved romtemperatur i 90 minutter. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 7(a), for å gi 2,38 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

30( b) Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 2-( 3- karbamoyl- 1-piperazinylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol - 6- r( IR)- 1- hydroksye tvi 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

2,33 g 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[3-karbamoyl-4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[ (IR) -1-hydroksyetyl] -l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 25 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann og deretter ble 2,7 ml IN vandig saltsyre tilsatt og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 2,33 g 10% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 7(b), for å gi 160 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr) , v^^g cm-1:

1759, 1698, 1662, 1450, 1383, 1266.

1,21 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1,28 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

2,04 - 2,10 (1H, multiplett),

3,01 - 5,08 (16H, multiplett).

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20) , X^^g^ nm:

297 .

Eksempel 31

Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2- f4-( 2- fluoretvl)- l- homo-piperazinvlkarbonyn- pyrrolidin- 4- Yltio}- 6- r( IR)- 1- hvdroksyety11 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

31( a) 4- nitrobenzyl-( 1R. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2- T4-( 2- fluoretyl)-1- homopiperazinylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin- 4- yltio}- 6- \ ( IR)- 1- hydroksyetyll - 1- metyl- l-karbapen- 2- em- 3- karboksylat

1,37 ml difenylfosforylklorid og 1,15 ml diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 2,23 g 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl] -l-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 23 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. En løsning av 3,99 g (2S,4S)-4-merkapto-2- [4-(2-fluoretyl)-1-homopiperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidintrifluormetansulfonat (fremstilt som beskrevet i syntese 31) i 57 ml tørr acetonitril og 3,40 ml diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling, og blandingen ble omrørt ved samme temperatur i én time, hvoretter den ble tillatt å stå over natten ved samme temperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet15(a), for å gi 2,96 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr),^a^g cm<-1>:

1773, 1710, 1647, 1522, 1346, 1206.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

1,25 - 1,40 (6H, multiplett)

1,73 - 2,02 (3H, multiplett),

2,45 - 3,05 (7H, multiplett),

3,24 - 3,88 (8H, multiplett),

4,01 - 4,78 (6H, multiplett),

5,03 - 5,54 (4H, multiplett),

7,42 - 7,67 (4H, multiplett),

8,17 - 8,25 (4H, multiplett).

31( b) Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S)- 2- T4-( 2- fluoretvl)- 1-homopiperazinylkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6-\( IR)- 1-hvdroksyetyl]- 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

500 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[4-(2-fluoretyl)-1-homopiperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 12 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann, hvoretter 0,62 ml IN vandig saltsyre ble tilsatt, og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 500 mg 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 15(b), for å gi 96 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr) , vmak;scm"1:

1763, 1653, 1460, 1384, 1284.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks_ nm:

297.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (D20, 270 MHz), 6 ppm:

1,22 (3H, dublett, J = 7,3 Hz),

1,28 (3H, dublett, J = 6,4 Hz),

2,00 - 2,12 (1H, multiplett),

2,22 - 2,38 (2H, multiplett),

3,02 - 3,16 (1H, multiplett),

3,36 - 4,16 (15H, multiplett),

4,20 - 4,30 (2H, multiplett),

4,76 - 4,98 (3H, multiplett).

Eksempel 32

Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2-( ( 2S. 4S)- 2- \ ( 3S)- 3-( imidazol- l- yl)-pyrrolidin- 1- ylkarbonyl1- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR) - 1-hydroksyetyl 1 - 1 - metyl - 1 - karbapen- 2 - em- 3 - karboksyl syre

32( a) 4- nitrobenzvl- ( 1R. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2- r( 3S)- 3-( imidazol- l- yl) - pyrrolidin- 1- ylkarbonyl 1 - 1- ( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltio}- 6-\( IR)- 1- hydroksyetyll- 1-metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylat

970/il dif enylf osf orylklorid og 810/il diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 1,60 g 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 16 ml tørr acetonitril og den resulterende blanding ble omrørt i 30 minutter under de samme betingelser. En løsning av 1,9 g (2S, 4S)-4-merkapto-2- [ (3S)-3-(imidazol-l-yl)-pyrrolidin-1-ylkarbonyl] -1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 32) i 22 ml tørr acetonitril og 770/il

diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, og blandingen ble omrørt i to timer, under isavkjøling, og deretter tillatt å stå over natten ved 4°C. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen fortynnet med en ekvivalent mengde vann og blandet med 800 mg natriumhydrogenkarbonat. Den blanding som således fremkom ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi med reversert fase gjennom 300 g "Cosmo Sil 75C18-PREP" (varemerke for et produkt fra Nacalai Tesgue), ved anvendelse av 1:1 volumetrisk blanding av acetonitril og vann som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert og konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk, for å gi 2,31 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm"1:

1773, 1709, 1656, 1521, 1346.

Kjernemagnetisk resonans spektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm.-1,25 - 1,39 (6H, multiplett),

2,00 - 2,80 (4H, multiplett),

3,25 - 4,96 (13H, multiplett),

5,05 - 5,53 (4H, multiplett),

6,82 - 8,29 (11H, multiplett).

32( b) Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2-\( 3S)- 3-( imidazol- l-yl) - pyrrolidin- 1- ylkarbonyl1- pyrrolidin- 4- yltio}- 6-\( IR)- 1-hydroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

200 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[(3S)-3-(imidazol-l-yl)-pyrrolidin-1-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl] -l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i en blanding av 15 ml av tetrahydrofuran og 10 ml vann, og løsningen ble kraftig omrørt i 1,7 time ved en temperatur på mellom 28°C og

30 °C i et atmosfære av hydrogen og i nærvær av 0,3 g 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble katalysatoren fjernet ved hjelp av filtrering og filtratet ble vasket tre ganger, hver gang med 20 ml dietyleter. Den resulterende vandige løsning ble inndampet under redusert trykk og inndampingsresten ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi med reversert fase gjennom 20 ml "Cosmo Sil 75C18-PREP" ved anvendelse vann som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert frysetørret, for å gi 17 mg av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Amaks nm:

297.

Eksempel 33

Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2- (( 2S. 4S)- 2-\( 3S)- 3-( 1. 2. 4- triazol- l- vl)-pyrrolidin- 1- ylkarbonyl! - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1-hydroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

33( a) 4- nitrobenzyl-( IR. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S)- 2-\( 3S)- 3 -( 1. 2. 4-triazol- l- yl)- pyrrolidin- 1- ylkarbonyl 1 - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylat

290 itl dif enylf osf orylklorid og 250/il diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 486 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 5 ml tørr acetonitril og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. En løsning av 690 mg (2S,4S)-4-merkapto-2- [(3S)-3-(1,2,4-triazol-l-yl)-pyrrolidin-l-ylkarbonyl]-1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i

syntese 33) i 4 ml tørr acetonitril og 23 0 fil diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, og blandingen ble omrørt ved samme temperatur i fire timer. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 18(a), for å gi 744 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm<-1>:

3401, 1772, 1709, 1655, 1607, 1522, 1346, 854, 738.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (heksadeuterert dimetylsulfoksid, 270 MHz), <5 ppm:

1.14 - 1,20 (6H, multiplett),

1.50 - 1,70 (1H, multiplett),

2,30 - 2,50 (1H, multiplett),

2,70 - 2,95 (1H, multiplett),

3,10 - 4,30 (1H, multiplett),

4.51 - 4,70 (1H, multiplett),

5,05 - 5,49 (5H, multiplett),

7,48 - 7,74 (4H, multiplett),

8.15 - 8,27 (4H, multiplett),

8.52 - 8,63 (1H, multiplett).

33( b) Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2-\( 3S)- 3-( 1. 2. 4- triazol-1- yl)- pyrrolidin- 1- ylkarbonyl1- pyrrolidin- 4- yltiol- 6- f( IR)- 1-hvdroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

528 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[(3S)-3-(1,2,4-triazol-l-yl)-pyrrolidin-1-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl] -l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 10 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann, hvoretter 0,63 ml IN vandig saltsyre ble tilsatt og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 1 g 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblan-

dingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme prosedyre som er beskrevet i eksempel 18(b), for å gi 85 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Amaks nm:

297.

Eksempel 34

Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S)- 2- f( 3R)- 3- aminopyrrolidin- 1- ylkarbonyl 1 - pyrrolidin- 4- yltio)- 6- \ ( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

34 ( a) 4- nitrobenzvl- (- 1R. 5S. 6S) - 2- 1 ( 2S. 4S) - 2- r ( 3R) - 3- ( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - aminopyrrolidin- 1- ylkarbonyl 1 - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltio}- 6-\( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1- metvl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylat

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den. som er beskrevet i eksempel 18(a), men med anvendelse av 950 mg (2S,4S)-4-merkapto-2- [ (3R)-3- (4-nitrobenzyloksykarbonyl)-aminopyrrol idin-1-ylkarbonyl] -1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 34) i stedet for (2S,4S)-4-merkapto-2- [ (3S)-3- (4-nitrobenzyloksykarbonyl)-aminopyrrolidin-1-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin, fremkom 760 mg av tittelf orbindelsen, i form av et pulver.

34( b) Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2-\( 3R)- 3- aminopyrrolidin- 1- ylkarbonyl]- pyrrolidin- 4- Yltio}- 6-\( IR) - l- hydroksyetyll-1 - metyl- 1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylsyre

730 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S, 4S)-2-[(3R)-3-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -aminopyrrolidin-l-ylkarbonyl] -1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin-4-yltio}-6- [ (IR) -1-hydroksyetyl] -l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 20 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann, hvoretter 0,75 ml IN vandig saltsyre ble tilsatt og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 1,0 g 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme prosedyre som er beskrevet i eksempel 18(b), for å gi 120 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

297. Eksempel 35 ( IR. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S)- 2- r( 3R)- 3- acetimidoylpyrrolidin- l- ylkarbonyll - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- l- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylsyre

35( a) 4- nitrobenzvl-( IR. 5S, 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2-\( 3R)- 3-( N- 4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoylamino)- pyrrolidin- 1- ylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltio}- 6-r( IR)- 1- hydroksyetyll- l- metyl- l- karbapen- 2- em- 3- karboksylat Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i eksempel 23(a), men ved anvendelse av 92 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-2-okso-1-karbapenam-3-karboksylat og 156 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[(3R)-3-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoylamino)-pyrrolidin-1-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 35) fremkom 125 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

35 ( b) ( IR. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2-\( 3R)- 3- acetimidovlpvrrolidin-1- vlkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksvetyll- 1-me ty1- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i eksempel 23(b), men ved anvendelse av 120 mg 4-nitrobenzyl-(1R,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[(3R)-3-(N-4-nitrobenzyl-oksykarbonylacetimidoylamino)-pyrrolidin-1-ylkarbonyl]-l-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], fremkom 31 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Amaks_ nm:

299 .

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr) ,"^^g>cm-1:

1755, 1631, 1590, 1452, 1386, 1284, 1260.

1,22 (3H, dublett, J = 7,33 Hz),

1,30 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,57 - 1,73 (1H, multiplett),

2,06 - 2,46 (2H, multiplett).

2,24 (3H, singlett),

2,64 - 2,84 (1H, multiplett),

3,00 - 3,25 (2H, multiplett),

3,33 - 3,90 (7H, multiplett),

3,95 - 4,09 (1H, multiplett),

4,17 - 1,42 (3H, multiplett).

Eksempel 3 6

( IR, 55, 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2-\( 3R)- 3- formimidoylaminopyrrolidin- 1-ylkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6-\( IR)- 1- hydroksyetyll- 1-metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

36( a) 4- nitrobenzyl-( 1R. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2- r( 3R)- 3-( N- 4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoylamino)- pyrrolidin- 1- ylkarbonyl! - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltio}- 6-T( IR)- 1- hydroksyetyll- l- metyl- l- karbapen- 2- em- 3- karboksylat Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i eksempel 23(a), men ved anvendelse av 120 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat og 192 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[(3R)-3-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoylamino)-pyrrolidin-l-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 36) fremkom 172 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

36( b) ( 1R . 5S . 6S )- 2 - 1 ( 2S . 4S )- 2- F( 3R)- 3- formimidoylaminopyrrolidin- 1- ylkarbonyl!- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- F( IR) - 1-hvdroksyetyll- 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i eksempel 23(b), men ved anvendelse av 165 mg 4-nitrobenzyl-(1R,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2- [ (3R)-3-(N-4-nitrobenzyl-oksykarbonylformimidoylamino) -pyrrolidin- 1-ylkarbamoyl] -1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR) -1-hydroksyetyl]-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], fremkom 3 8 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20) , Amaks_ nm:

300 .

Eksempel 37

Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2- F( 2S. 4S)- 2-( 3- hydroksvmetvl- 1-piperazinylkarbonvl)- pyrrolidin- 4- yltio]- 6- F( IR)- 1- hydroksy-etvi 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

37( a) 4- nitrobenzvl-( IR. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2- T3-( 4- nitro-benzvlkarbonyloksymetyl)- 4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- 1-piperazinylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksvkarbonyl)- pyrrolidin-4- vltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksvetyll- 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3-karboksylat 46 fil dif enylf osf orylklorid og 3 8 fil diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 73 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1- metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 1,0 ml tørr acetonitril , og den resulterende blanding ble omrørt ved den samme temperatur i én time. En løsning av 157 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[3-(4-nitrobenzylkarbonyloksymetyl)-4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 37) i 1,0 ml tørr acetonitril og 35/il diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt blandingen, under isavkjøling, og blandingen ble omrørt ved samme temperatur i én time, hvoretter den ble tillatt å stå over natten ved samme temperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 7(a), for å gi 147 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr) , v^^g _ cm"<1>:

1758, 1706, 1660, 1608, 1522, 1432, 1347, 1268.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), 6 ppm:

1,27 (3H, dublett, J = 7,33 Hz),

1,37 (3H, dublett, J = 5,86 Hz),

2,53 - 3,02 (2H, multiplett),

3,10 - 3,78 (7H, multiplett).

3,81 - 4,37 (8H, multiplett),

4,47 - 4,85 (3H, multiplett),

5,09 - 5,52 (8H, multiplett),

7,47 (6H, dublett, J = 8,30 Hz),

7,65 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

8,15 - 8,23 (8H, multiplett).

37( b) Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2- r ( 2S. 4S)- 2-( 3- hydroksymetvl- l-piperazinylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

140 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[3-(4-nitrobenzylkarbonyloksymetyl)-4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-

karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 2 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann, hvoretter 0,13 ml IN vandig saltsyre tilsatt og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 140 mg 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 7(b), for å gi 20 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20) , Xma]cs nm:

297 .

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr) , vmaks cm<-1>:

1759, 1660, 1594, 1451, 1387, 1266.

1,21 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1,28 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,97 - 2,08 (1H, multiplett),

3,01 - 3,15 (1H, multiplett),

3.19 - 3,41 (3H, multiplett),

3,44 - 3,68 (4H, multiplett),

3,48 (1H, dublett av dubletter, J = 6,35&2,93 Hz), 3,73 - 4,15 (5H, multiplett),

4.20 - 4,29 (2H, multiplett),

4,42 - 4,60 (1H, multiplett),

4,75 - 4,96 (1H, multiplett).

Eksempel 3 8

( IR. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 2-( 3- karboksy- l- piperazinvlkarbonyl)-pyrrolidin- 4- yltiol- 6- f( IR)- l- hydroksyetyll - 1- metyl- l-karbapen- 2 - em- 3 - karboksy1syre

38a) 4- nitrobenzvl-( 1R. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2- T3-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - 4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- 1-piperazinylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin-4- yltio}- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3-karboks<y>lat

55 fil dif enylf osf orylklorid og 46 fil diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 88 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 1,5 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved den samme temperatur i én time. En løsning av 184 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[3-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 38) i 1,5 ml tørr acetonitril og 42 fil diisopropyletylamin .ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling, og blandingen ble tillatt å stå over natten ved samme temperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 7(a), for å gi 160 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.135

38( b) ( IR. 5S. 6S)- 2 -\( 2S. 4S)- 2-( 3- karboksv- l- piperazinyl-karbonvl)- pyrrolidin- 4- Yltiol - 6-\( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

160 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[3-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 3 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann, og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 160 mg 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 7(b), for å gi 35 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

297. Eksempel 39 ( 1R. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2- r( 3R)- l- acetimidoylpyrrolidin- 3- yl-aminokarbonyl 1 - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r ( IR) - 1- hydroksyetyll - i-me ty1- 1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylsyre 39 ( a) 4- nitrobenzyl-( 1R. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S)- 2-\( 3R)- 1-( N- 4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)- pyrrolidin- 3- ylamino-karbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltio}- 6-r( IR)- 1- hydroksyetyll- l- metyl- l- karbapen- 2- em- 3- karboksylat Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i eksempel 23(a) , men ved anvendelse av 300 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-2-okso-1-karbapenam-3-karboksylat og 510 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[(3R)-1-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-pyrrolidin-3-ylaminokarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 39) fremkom 206 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver. 39 ( b) ( IR. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S)- 2- f( 3R)- l- acetimidovlpvrrolidin- 3-ylaminokarbonyl1- pyrrolidin- 4- yltio}- 6-[( IR)- 1- hydroksyetyll-1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i eksempel 23(b), men ved anvendelse av 198 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-1-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-pyrrolidin-3-ylaminokarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1- hydroksyetyl]-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], fremkom 48 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20) , A^^g nm:

298 . Eksempel 40 ( 1R. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2- TN-( 2- acetimidovlaminoetyl)-karbamoyl] - pyrrolidin- 4- vltio)- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyl1- 1-metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

40 ( a) 4- nitrobenzyl-( IR. 5S. 6S)- 2-{ 2- N- T2-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl) - aminoetyll - karbamovl- 1- ( 4- nitro- f benzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltio)- 6- r ( IR) - 1- hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylat

105jxl dif enylf osf orylklorid og 88 fil diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 170 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[ (IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 2 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. En løsning av 290 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-{N-[2-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl) -aminoetyl] - karbamoyl}-1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 40) i 10 ml tørr acetonitril og 92 llI diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, og blandingen ble tillatt å stå over natten ved samme temperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reak-

sjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme prosedyre som er beskrevet i eksempel l(a) for å gi 270 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

40 ( b) ( IR, 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2- TN- ( 2- acetimidoylaminoetyl)-karbamoyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyll- 1-metyl- 1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylsyre

265 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{N-[2-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl) -aminoetyl] -karbamoyl-1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin-4-yltio}-6- [ (IR) -1-hydroksyetyl] -l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor] ble oppløst i 15 ml 2:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 270 mg 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel l(b), for å gi 60 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20) , X^^g _ nm:

299.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (D20, 270 MHz), 6 ppm:

1,21 (3H, dublett, J = 7,3 Hz),

1,30 (3H, dublett, J = 6,6 Hz),

1.68 - 1,70 (1H, multiplett),

2,23 (3H, singlett),

2,60 - 2,73 (1H, multiplett),

2,89 (1H, dublett av dubletter, J = 11,2 & e,0 Hz), 3,32 - 3,66 (7H, multiplett),

3.69 - 3,80 (1H, multiplett),

3,85 (1H, dublett av dubletter, J = 9,2 & 5,3 Hz),

4,18 - 4,32 (2H, multiplett).

Eksempel 41

( 1R. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2- TN-( 2- formimidovlaminoetvl)-karbamoyl 1- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyl1- 1-me ty1- 1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylsyre

41 ( a) 4- nitrobenzyl-( IR. 5S. 6S) - 2- I2- N- T2-( N- 4- nitrobenzvloksv-karbonylformimidoyl)- aminoetyll- karbamoyl- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltio)- 6- T( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylat 53 fil dif enylf osf orylklorid og 40 fil diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 90 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 1 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. En løsning av 150 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-{N-[2-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)-aminoetyl]-karbamoyl}-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 41) i 10 ml tørr acetonitril og 50 fil diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, og reaksjonsblandingen ble tillatt å stå over natten ved samme temperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel l(a) for å gi155 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

41( b) ( IR, 5S, 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2- TN-( 2- formimidovlaminoetvl)-karbamoyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1-metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

150 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{N-[2-(N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl f ormimidoyl) -aminoetyl]-karbamoyl-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor] ble oppløst i 10 ml 2:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 150 mg 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 1(b), for å gi 20 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20) , X^^g nm:

299 .

Kjernemagnetisk resonansspektrum (270 MHz, D20, med anvendelse av tetradeuterert natriumtrimetylsilylpropionat som intern standard), 6 ppm:

1,21 (3H, dublett, J = 7,3 Hz),

1,30 (3H, dublett, J = 6,4 Hz),

1,70 - 1,84 (1H, multiplett),

2,60 - 2,76 (1H, multiplett),

2,89 - 2,97 (1H, multiplett),

3,32 - 3,62 (7H, multiplett),

3,70 - 3,81 (1H, multiplett),

3,85 - 3,92 (1H, multiplett),

4,19 - 4,29 (2H, multiplett),

7,84 & 7,85 (1H, to singletter).

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm<-1>:

1755, 1717, 1660, 1590, 1388. Eksempel 42 ( IR, 5S. 6S) - 2- f ( 2S. 4S) - 2- ( 3- dimetvlamino- 1. 2 . 5 . 6- tetrahvdro-pyrazin- 1- ylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol- 6- r( IR)- 1- hvdroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylsyre

42 ( a) 4- nitrobenzyl-( IR. 5S. 6S)- 2- r( 2S, 4S)- 2-( 3- dimetviamino-1. 2. 5. 6- tetrahydropyrazin- 1- ylkarbonyl)- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltiol- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2- em- 3- karboksylat

126 fil dif enylf osf orylklorid og 106 itl diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 208 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 2,6 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. En løsning av 445 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-(3-dimetylamino-1,2,5,6-tetrahydropyrazin-1-ylkarbonyl)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidintrifluormetansulfonat (fremstilt som beskrevet i syntese 42) i 2,4 ml tørr acetonitril og 271 fil diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, og blandingen ble tillatt å stå over natten ved samme temperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempell(a), for å gi 38 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr) , v^^g cm-1:

1771, 1709, 1659, 1608, 1522, 1495, 1441, 1405, 1346, 1277, 1209.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3+ heksadeuterert dimetylsulfoksid, 270 MHz), 6 ppm:

1,28 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1,34 (3H, dublett, J = 6,34 Hz),

1,85 - 2,08 (1H, multiplett),

2,71 - 2,86 (1H, multiplett),

3,08 - 4,85 (20H, multiplett),

5,05 - 5,53 (4H, multiplett),

7,42 - 7,58 (2H, multiplett),

7,66 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

8,16 - 8,26 (4H, multiplett).

42 ( b) ( 1R. 5S. 6S)- 2- f( 2S. 4S)- 2-( 3- dimetylamino- l. 2. 5. 6- tetra-hydropyrazin- 1- ylkarbonyl)- l- pyrrolidin- 4- yltiol - 6- f( IR) - 1-hydroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre 95 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-(3-dimetylamino-l, 2,5, 6-tetrahydropyrazin-1-ylkarbonyl)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin-4-yltio]-6-[(IR)-1-hydroksyetyl] -l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor] ble oppløst i 5 ml 2:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann og ble hydrogenert. ved at hydrogen ble boblet gjennom løsningen ved romtemperatur i to timer i nærvær av 250 mg 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel l(b), for å gi 8 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

299.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr) , vmaks cm<-1>:

1751, 1659, 1598, 1455, 1391, 1346, 1247.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (270 MHz, D20, med anvendelse av tetradeuterert natriumtrimetylsilylpropionat som intern standard), 5 ppm:

1,22 (3H, dublett, J = 7,33 Hz),

1,30 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,60 - 1,83 (1H, multiplett),

2,68 - 2,92 (1H, multiplett),

3,03 - 4,43 (20H, multiplett).

Eksempel 43

( IR, 5S, 6S)- 2- r ( 2S. 4S)- 2-( 4- acetimidoylaminopiperidin- 1- ylkarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltiol - 6- T( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i eksempel 1, men ved anvendelse av 181 mg 4-nitrobenzyl- (IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat og 300 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-(4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-aminopiperidin-1-ylkarbonyl] -1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 43), fremkom 21 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

299 .

1.21 (3H, dublett, J = 7,3 Hz),

1,30 (3H, dublett, J = 6,4 Hz),

1,46 - 1,70 (3H, multiplett),

2,02 - 2,18 (2H, multiplett),

2.22 (3H, singlett),

2,69 - 2,83 (1H, multiplett),

2,90 - 3,04 (1H, multiplett),

3,06 - 3,46 (5H, multiplett),

3,78 - 3,99 (3H, multiplett),

4,12 - 4,44 (4H, multiplett).

Eksempel 44

( IR. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 2-( 4- acetimidoylpiperazin- l- ylkarbonyl)-l- metylpyrrolidin- 4- yltiol- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl- l-karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i eksempel1, men ved anvendelse av 181 mg 4-nitrobenzyl- (IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat og 220 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[4-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-piperazin-1-ylkarbonyl]-1-metylpyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 44), fremkom 20 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks_ nm:

299 .

1,21 (3H, dublett, J = 7,3 Hz),

1.30 (3H, dublett, J = 6,4 Hz),

1,66 (1H, doblet dublett av dubletter, J = 13,7, 8,8

& 5,4 Hz), 2,29 (3H, singlett),

2,35 (3H, singlett),

2,75 - 2,88 (2H, multiplett),

3,10 (1H, dublett av dubletter, J = 12,2 & 1,4 Hz), 3.31 - 3,43 (2H, multiplett),

3,52 (1H, triplett, J = 8,3 Hz),

3,60 - 4,00 (9H, multiplett),

4,18 - 4,30 (2H, multiplett).

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm-1:

1754, 1608, 1594, 1448, 1384, 1285.

Eksempel 45

Saltsur ( IR, 5S, 6S)- 2- f( 2S. 4S)- 2- \ ( 3S)- 3- aminopyrrolidin- 1-ylkarbonyll - l- metylpyrrolidin- 4- yltiol- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

45 ( a) 4- nitrobenzyl-( IR. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2-\( 3S)- 3-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - aminopyrrolidin- 1- ylkarbonyl!- 1- metylpyrrolidin- 4- yltio}- 6-\( IR)- 1- hydroksyetyll - 1- metyl- l-karbapen- 2- em- 3- karboksylat

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i eksempel 18(a), men ved anvendelse av 1,05 g (2S,4S)-4-merkapto-2-[(3S)-3-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-aminopyrrolidin-1-ylkarbonyl]-1-metylpyrrolidin i stedet for (2S,4S)-4-merkapto-2-[(3S)-3-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-aminopyrrolidin-1-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin, fremkom 1,20 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

45 ( b) Saltsur ( 1R. 5S. 6S) - 2- \ ( 2S. 4S) - 2- I" ( 3S) - 3- aminopyrrolidi-1- ylkarbonyll - l- metylpyrrolidin- 4- yltiol - 6- f ( IR) - 1- hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

1,0 g 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[(3S)-3-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-aminopyrrolidin-1-ylkarbonyl] -1-metylpyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 30 ml 2:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann, hvoretter 1,04 ml IN vandig saltsyre ble tilsatt og reaksjonsblandingen ble hydrogenert ved at det

ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 1,5 g 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme prosedyre som er beskrevet i eksempel 18(b), for å gi 1,75 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20) , Xmaks nm:

297.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks. cm"1:

3390, 1760, 1655, 1599, 1467, 1374.

1,21 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1.29 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1.95 - 2,30 (1H, multiplett),

2.30 - 2,70 (2H, multiplett),

2.96 (3H, dublett, J = 2,93 Hz),

3,15 - 3,27 (1H, multiplett),

3,27 - 3,40 (1H, multiplett),

3,46 - 3,49 (1H, multiplett),

3,50 - 4,35 (10H, multiplett),

4,45 - 4,65 (1H, multiplett).

Eksempel 46

( 1R. 5S. 6S)- 2-{ ( 2S. 4S)- 2- r( 3S)- 3- formimidoylaminopyrrolidin- l-ylkarbonyll- metylpyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll-1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

46 ( a) 4- nitrobenzvl-( 1R. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S)- 2-\( 3S)- 3-( N- 4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoylamino)- pyrrolidin- 1- ylkarbonyl! - l- metylpyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyl1 - 1 - metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylat

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i eksempel 23(a), men ved anvendelse av 124 mg 4-nitrobenzyl- (IR, 5R, 6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat og 190 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[ (3S) -3- (N-4-nitrobenzyloksykarbonylf ormimidoyl amino) - pyrrolidin-1-ylkarbonyl]-1-metylpyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 46) fremkom 178 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

46 ( b) ( IR. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2-\( 3S)- 3- formimidoylaminopyrrolidin- 1- ylkarbonyl]- l- metylpyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1-hydroksyetyl1 - l- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i eksempel 23(b), men ved anvendelse av 170 mg 4-nitrobenzyl-(1R,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[(3S) -3-(N-4-nitrobenzyl-oksykarbonylf ormimidoyl amino) -pyrrolidin-1-ylkarbonyl] -1-metylpyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-1- karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], fremkom 35 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20) , X^^g nm:

298 .

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr) , J^^g cm<-1>:

3255, 1755, 1634, 1595, 1455, 1386.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (400 MHz, D20, med anvendelse av tetradeuterert natriumtrimetylsilylpropionat som intern standard), 6 ppm:

1,21 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1,31 (3H, dublett, J = 6,60 Hz),

1,60 - 1,75 (1H, multiplett),

2,30 (3H, dublett, J = 5,86 Hz),

2,05 - 2,50 (2H, multiplett),

2,75 - 2,95 (2H, multiplett),

3,05 - 3,15 (1H, multiplett),

3,30 - 3,50 (3H, multiplett),

3,50 - 3,95 (4H, multiplett),

3,96 - 4,05 (1H, multiplett),

4,20 (1H, dublett av dubletter, J = 2,57 & 9,17 Hz), 4,26 (1H, kvartett, J = 6,40 Hz),

4,30 - 4,47 (1H, multiplett),

7,80, 7,81 & 7,94 (tilsammen 1H, tre singletter).

Eksempel 47

Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2- {( 2S. 4S)- 2- T4-( imidazol- l- vl)- piperidin-1- ylkarbonYl)- pyrrolidin- 4- yltiol - 6- f( IR)- 1- hydroksyetyll- 1-metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

47 ( a) 4- nitrobenzyl-( 1R. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S)- 2- T4-( imidazol- l-vl) - piperidin- 1- ylkarbonyl 1 - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl- l-karbapen- 2- em- 3- karboksylat

560 [ il dif enylf osf orylklorid og 470/il diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 910 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 10 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt i 30 minutter under de samme betingelser. En løsning av 1140 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[4-(imidazol-l-yl)-piperidin-1-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 47) i 10 ml tørr acetonitril og 435/il diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, og blandingen ble omrørt i to timer, under isavkjø-ling, hvoretter den ble tillatt å stå over natten ved 4°C. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen fortynnet med en ekvivalent vannmengde og ble blandet med 800 mg natriumhydrogenkarbonat. Den blanding som således fremkom, ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi med reversert fase gjennom 200 ml "Cosmo Sil 75C18-PREP" (et varemerke for et produkt fra Nacalai Tesque) ved anvendelse av en 1:1 volumetrisk blanding av acetonitril og vann som eluent. De

fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert og konsentrert, for å gi 1,40 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

1,12 - 1,20 (6H, multiplett),

1,58 - 1,90 (3H, multiplett),

1,91 - 2,06 (2H, multiplett),

2,62 - 2,79 (1H, multiplett),

2.80 - 2,97 (1H, multiplett),

3,06 - 3,37 (4H, multiplett),

3,55 - 3,70 (1H, multiplett),

3,71 - 3,93 (1H, multiplett),

3,94 - 4,56 (5H, multiplett),

4,74 - 4,97 (1H, multiplett),

5,04 - 5,49 (5H, multiplett),

6.81 - 8,28 (11H, multiplett).

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1:

1773, 1710, 1656, 1522, 1346, 1208.

47 ( b) Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2-\ A -( imidazol- l- yl)-piperidin- 1- ylkarbonyl!- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- f( IR)- 1-hydroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

200 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[4-(imidazol-l-yl)-piperidin-1-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i en blanding av 15 ml tetrahydrofuran og 10 ml vann og blandingen ble kraftig omrørt ved en temperatur på mellom 28°C og 30°C i 1,7 time i en atmosfære av hydrogen og i nærvær av 0,3 g 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble katalysatoren fjernet ved hjelp av filtrering og filtratet ble vasket tre ganger, hver gang med 2 0 ml dietyleter. Den resulterende vandige løsning

ble konsentrert ved hjelp av inndampning under redusert trykk. Konsentratet ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering med reversert fase gjennom 20 ml "Cosmo Sil 75C18-PREP" (et varemerke for et produkt fra Nacalai Tesgue), ved anvendelse av vann som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert og frysetørret, for å gi 18 mg av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks>nm:

297.

Eksempel 48

Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2- r( 2S, 4S)- 2-( 3, 3- dimetyl- l- piperazinylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol- 6- F( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

48 ( a) 4- nitrobenzvl-( 1R. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2- \ 2 . 3- dimetvl- 4-( 4-nitrobenzyloksykarbonyl)- 1- piperazinylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksv-etyll - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylat 67/il dif enylf osf orylklorid og 56/il diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 100 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 1,5 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved den samme temperatur i én time. En løsning av 200 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[3, 3-dimetyl-4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-1-piperåzinylkarbonyl] - 1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 48) i 1,5 ml tørr acetonitril og 56 fil diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, og blandingen ble omrørt ved den samme temperatur i én time, hvoretter den ble tillatt å stå over natten ved samme temperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 7(a), for å gi 205 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

48 ( b) Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 2-( 3. 3- dimetyl- l-piperazinylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol - 6-\( IR)- 1- hydroksye tvi 1 - 1 - metyl - 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksyl syre

205 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[3,3-dimetyl-4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 5 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann, hvoretter 0,23 ml IN vandig saltsyre ble tilsatt, og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 200 mg 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 7(b), for å gi 35 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks_ nm:

296.

Eksempel 49

Saltsur ( IR, 5S. 6S)- 2- r ( 2S, 4S)- 2-( 1- homopiperazinylkarbonyl)- 1-metvlpyrrolidin- 4- yltiol- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl- l-karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

49 ( a) 4- nitrobenzyl-( 1R. 5S. 6S)- 2- f ( 2S, 4S)- 2- T4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - 1- homopiperazinylkarbonyll - 1- metylpyrrolidin- 4- yltiol- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl- l-karbapen- 2 - em- 3- karboksylat

0,89 ml difenylfosforylklorid og 0,75 ml diisopropyletylamin ble samtidig tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 1,4 g 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 14 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i 40 minutter. En løsning av 2,68 g (2S,4S)-4-merkapto-l-metyl-2-[4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-1-homopiperazinylkarbonyl]-pyrrolidintrifluormetansulfonat (fremstilt som beskrevet i syntese 49) i 14 ml tørr acetonitril og 1,64 ml diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling, og blandingen ble omrørt ved samme temperatur i fem timer, hvoretter den ble tillatt å stå over natten ved romtemperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndampning under redusert trykk og inndampingsresten ble fortynnet med etylacetat. Den resulterende løsning ble deretter vasket med en vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat, med en fosfatbufferløsning (pH 6,86), med vann og med en vandig løsning av natriumklorid, i nevnte rekkefølge, hvoretter den ble tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble deretter fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk og den resulterende destil-lasj onsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel (Merck artikkelnr. 7734), ved anvendelse av en fremgangsmåte med gradienteluering med blandinger av etylacetat og metanol i det volumetriske område fra 85:15 til 80:20 som eluent, for å gi 1,7 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm 1:

1769, 1702, 1642, 1521, 1346.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), 6 ppm:

1,27 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1,35 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,40 - 2,05 (6H, multiplett),

2,32 - 2,85 (3H, multiplett),

3,15 - 4,05 (13H, multiplett),

4,20 - 4,37 (2H, multiplett),

5,20 - 5,52 (4H, multiplett),

7,47 - 7,53 (2H, multiplett),

7,67 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

8,23 (4H, dublett, J = 8,79 Hz).

49 ( b) Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 2-( l- homopjperazinyl-karbonyll- l- metylpyrrolidin- 4- Yltiol - 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll-1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

En løsning av 1,3 g 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-[(2S,4S)-2- [4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-1-homopiperazinylkarbonyl]-1-metylpyrrolidin-4-yltio]-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor] i 20 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann ble blandet med 2,6 ml IN vandig saltsyre, og løsningen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 10 vekt% palladium på trekull. Katalysatoren ble deretter fjernet ved hjelp av filtrering og filtratet ble vasket med dietyleter. Den vandige løsning ble konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk, hvoretter inndampingsresten ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering med reversert fase gjennom en "Lobar"-kolonne (Merck, LiChroprep RP-8, størrelse B), ved anvendelse av vann som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble oppsamlet, konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og frysetørret, for å gi 260 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm

1759, 1650, 1598, 1458, 1389.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

297,6.

1,21 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1,29 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,99 - 2,32 (3H, multiplett),

2, 97 (3H, singlett),

3,18 - 4,05 (13H, multiplett),

4,12 - 4,35 (3H, multiplett),

4,66 - 4,82 (1H, multiplett).

Eksempel 50

( IR. 5S, 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 2-( 4- karboksymetyl- l- homopiperazinylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

50 ( a) 4- nitrobenzvl-( 1R. 5S. 6S)- 2- T( 2S. 4S)- 2- T4-( 4- nitrobenzyl oksykarbonylme tyl) - l- homopiperazinylkarbonyll- 1-( 4-nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol- 6-\( IR)- 1-hvdroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylat

0,37 ml difenylfosforylklorid.og 0,31 ml diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 580 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl] -1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 10 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. 0,99 ml diisopropyletylamin og en løs-ning av 1,43 g (2S,4S)-4-merkapto-2-[4-(4-nitrobenzyloksykarbonylmetyl)-1-homopiperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin-bis-(trifluormetansulfonat) (fremstilt som beskrevet i syntese 50) i 10 ml tørr acetonitril ble

deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling, og den resulterende blanding ble omrørt over natten ved samme temperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillasjon under redusert trykk og destillasjonsresten ble blandet med en vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat. Den ble deretter ekstrahert med etylacetat. Ekstraktet ble tørret over vannfri magnesiumsulfat og løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillasjon under redusert trykk. Destillasjonsresten ble underlagt kolonnekromatografi gjennom en "Lobar"-kolonne (Merck, LiChroprep Si60, størrelse B), ved anvendelse av en 5:1 voluetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent for å gi 1,1 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), v^^g cm<-1>:

1771, 1709, 1647, 1606, 1521, 1346.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (270 MHz, CDC13), 6 ppm:

1,28 (3H, dublett, J = 6,84 Hz),

1,37 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,74 - 2,04 (4H, multiplett),

2,62 - 2,96 (6H, multiplett),

3,27 (1H, dublett av dubletter, J = 6,83&2,44 Hz), 3,34 - 3,79 (9H, multiplett),

4,19 - 4,27 (2H, multiplett),

4,66 - 4,77 (1H, multiplett),

5,06 - 5,52 (6H, multiplett),

7,45 - 7,52 (4H, multiplett),

7,65 (2H, dublett, J = 8,79 Hz).,

8,23 (6H, dublett, J = 8,79 Hz).

50 ( b) ( IR. 5S. 6S)- 2- f ( 2S. 45)- 2-( 4- karboksvmetvl- l- homopiperazinylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol - 6- T( IR) - 1- hydroksyetyl 1 - 1 - metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

En løsning av 0,5 g 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[4-(4-nitrobenzyloksykarbonylmetyl)-1-homopiperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin- 4-yltio]-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 15 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann ble blandet med 0,26 ml IN vandig saltsyre, og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i 90 minutter i nærvær av 0,5 g 10 vekt% palladium på trekull. Katalysatoren ble deretter fjernet ved hjelp av filtrering og filtratet ble vasket med dietyleter. Den vaskede, vandige løsning ble deretter konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og konsentratet ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi med reversert fase gjennom en "Lobar"-kolonne (Merck, LiChroprep RP-8, størrelse B) , ved anvendelse av 1 vol% vandig metanol som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble oppsamlet, konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og frysetørret, for å gi 170 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm<-1>:

1754, 1638, 1460, 1374.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20) , nm:

296.6.

1,22 (3H, dublett, J = 7,33 Hz),

1,30 (3H, dublett, J = 6,34 Hz),

1,93 - 2,10 (1H, multiplett),

2,13 - 2,42 (2H, multiplett),

2,95 - 3,17 (1H, multiplett),

3,27 - 3,98 (13H, multiplett),

3,99 - 4,15 (2H, multiplett),

4,18 - 4,35 (2H, multiplett),

4,43 - 4,65 (1H, multiplett).

Eksempel 51

Saltsur ( IR, 5S , 6S) - 2- C ( 2S, 4S) - 2 - ( 4- metyl- l- piperazinylkarbonyl)- l- metylpyrrolidin- 4- yltiol - 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll-1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

51 ( a) 4- nitrobenzyl-( IR, 5S, 6S)- 2-\( 2S, 4S)- 2-( 4- metvl- l-piperazinylkarbonyl)- l- metylpyrrolidin- 4- yltiol - 6- f( IR)- 1-hydroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylat

540/il dif enylf osf orylklorid og 470/il diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 920 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 10 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. 1400/il diisopropyletylamin og en løsning av 1350 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-(4-metyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-metylpyrrolidin-bis-(trifluormetansulfonat) (fremstilt som beskrevet i syntese 51) i 5 ml tørr acetonitril ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i to timer, hvoretter den ble tillatt å stå over natten i et kjøleskap. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillasjon under redusert trykk og destillasjonsresten ble renset ved kromatografering gjennom en "Lobar"-kolonne (Merck, LiChroprep RP-8, størrelse B). Kolonnen ble vekselvis eluert med 65 vol% vandig metanol og med 70 vol% vandig metanol. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert og konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk, for å gi 730 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3270MHz^'^ ppm:

1,27 (3H, dublett, J = 7,3 Hz),

1,37 (3H, dublett, J = 6,3 Hz),

1,83 - 1,93 (1H, multiplett),

2,30 (3H, singlett),

2,35 (3H, singlett),

2,35 - 2,48 (4H, multiplett),

2,57 - 2,73 (2H, multiplett),

3,13 - 3,36 (4H, multiplett),

3,55 - 3,95 (5H, multiplett),

4,21 - 4,28 (2H, multiplett),

5,25 (1H, dublett, J = 14,2 Hz),

5,48 (1H, dublett, J = 14,2 Hz),

7,66 (2H, dublett, J = 8,8 Hz),

8,23 (2H, dublett, J = 8,8 Hz).

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm-1:

1769, 1706, 1639, 1606, 1521, 1450, 1346, 1208, 1137.

51 ( b) Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 2-( 4- metvl- l- piperazinvl-karbonyl)- l- metylpyrrolidin- 4- yltiol- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyll - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylsyre

En løsning av 720 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-(4-metyl-l-piperazinylkarbonyl)-1-metylpyrrolidin-4-yltio]-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor] i 60 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann ble blandet med 1,2 ml IN vandig saltsyre, og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 800 mg 10 vekt% palladium på trekull. Katalysatoren ble deretter fjernet ved hjelp av filtrering og filtratet ble vasket med dietyleter. Den vandige løsning ble konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk, inndampingsresten ble underlagt kolonnekromatografering ved anvendelse av en "Lobar"-kolonne (Merck, LiChroprep RP-8, størrelse B), og kolonnen ble eluert med 3 vol% vandig metanol. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert og konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk, for å gi 326 mg av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver.

1,21 (3H, dublett, J = 6,8 Hz),

1,29 (3H, dublett, J = 6,3 Hz),

1,97 - 2,07 (1H, multiplett),

2.96 (3H, singlett),

2.97 (3H, singlett) ,

3,18 - 3,50 (8H, multiplett),

3,67 - 3,84 (5H, multiplett),

4,17 - 4,30 (3H, multiplett),

4,70 - 4,77 (1H, multiplett).

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr),^maks, cm"1:

1754, 1658, 1600, 1456, 1385, 1261.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm (e):

297 (8660) .

Eksempel 52

Saltsur ( 1R. 5S, 6S)- 2-{ ( 2S. 4S)- 2- 14 -( 2- hydroksyetyl)- 1-piperazinylkarbonyll- l- metylpyrrolidin- 4- yltio}- 6- T( IR) - 1-hydroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

52 ( a) 4- nitrobenzyl-( 1R. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S)- 2- T4-( 2- hydroksyetyl) - 1- piperazinylkarbonyll- l- metylpyrrolidin- 4- yltiol- 6-r( IR) - 1- hydroksyetyll- l- metyl- l- karbapen- 2- em- 3- karboksylat 600 fil dif enylf osf orylklorid og 510^1 diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 1000 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 10 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. 1800 fil diisopropyletylamin og en løsning av 1680 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[4-(2-hydroksyetyl)-1-piperazinylkarbonyl] -1-metylpyrrolidin-bis- (trif luormetan-sulfonat) (fremstilt som beskrevet i syntese 52) i 5 ml tørr acetonitril ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i to timer, hvoretter den ble tillatt å stå over natten i et kjøleskap. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillasjon under redusert trykk og destillasjonsresten ble underlagt kolonnekromatografering gjennom en "Lobar"-kolonnekromatografi (Merck, LiChroprep RP-8, størrelse B). Kolonnen ble først eluert med 55 vol% vandig metanol og deretter med 60 vol% vandig metanol. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble oppsamlet, konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og frysetørret, for å gi 710 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

1,27 (3H, dublett, J = 7,3 Hz),

1,3 6 (3H, dublett, J = 5,9 Hz),

1,83 - 1,93 (1H, multiplett),

2,34 (3H, singlett),

2,40 - 2,76 (8H, multiplett),

3,10 - 3,38 (4H, multiplett),

3,55 - 4,04 (7H, multiplett),

4,18 - 4,31 (2H, multiplett),

5,24 (1H, dublett, J = 13,8 Hz),

5,48 (1H, dublett, J = 13,8 Hz),

7,66 (2H, dublett, J = 8,6 Hz),

8,22 (2H, dublett, J = 8,6 Hz).

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr),^m^g cm<-1>:

1756, 1651, 1596, 1464, 1390, 1373, 1286, 1261.

52 ( b) Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2 - 1 ( 2S. 4S)- 2- T4-( 2- hydroksyetyl)- 1-piperazinylkarbonyll- l- metylpyrrolidin- 4- yltio}- 6-\( IR)- 1-hydroksyetyl 1 - 1 - metyl - 1 - karbapen- 2 - em- 3 - karboksyl syre

En løsning av 700 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{ (2S,4S) - 2-[4-(2-hydroksyetyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-metylpyrrolidin-4-yltio}-6- [ (IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], i 60 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann ble blandet med 1,15 ml IN vandig saltsyre, og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 1000 mg 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble katalysatoren fjernet ved hjelp av filtrering og filtratet ble ekstrahert med dietyleter. Det gjenværende vandige lag ble konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og inndampingsresten ble underlagt kolonne-kromatograf ering gjennom en "Lobar"-kolonne (Merck, LiChroprep RP-8, størrelse B). Kolonnen ble eluert med 1,5 vol% vandig metanol og de fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert, konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og frysetørret, for å gi 300 mg av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver.

1,21 (3H, dublett, J = 7,3 Hz),

1,29 (3H, dublett, J = 6,3 Hz),

1,98 - 2,07 (1H, multiplett),

2,95 (3H, singlett),

3,17 - 3,45 (9H, multiplett),

3,45 - 3,52 (1H, multiplett),

3,64 - 3,86 (5H, multiplett),

3,86 - 3,95 (2H, multiplett),

4,13 - 4,30 (3H, multiplett),

4,68 - 4,77 (1H, multiplett).

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm<-1>:

1757, 1658, 1596, 1450, 1391, 1260.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20) , X^^g nm (e):

297 (9252).

Eksempel 53

Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2- f4-( 2- karbamovloksvetvl)- 1-piperazinylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol - 6- T( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

53( a) 4- nitrobenzyl-( 1R. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2- T4-( 2- karbamovl-oksyetyl)- 1- piperazinylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylat 91/il dif enylf osf orylklorid og 77/il diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 152 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 2,0 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved den samme temperatur i én time. 176/il diisopropyletylamin og en løsning av 318 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-[4-(2-karbamoyloksyetyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidintrifluor-metansulf onat (fremstilt som beskrevet i syntese 53) i 2,0 ml tørr acetonitril ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i to timer, hvoretter den ble tillatt å stå over natten i et kjøleskap. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillasjon under redusert trykk og destillasjonsresten ble blandet med en vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat. Blandingen ble deretter ekstrahert med etylacetat og ekstraktet ble tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løsnings-midlet ble deretter fjernet fra ekstraktet ved hjelp av destillasjon under redusert trykk og den resulterende destil-lasj onsrest ble renset ved hjelp av kromatografering gjennom en "Lobar"-kolonne (Merck, LiChroprep Si60, størrelse B) ved anvendelse av 5:1 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent for å gi 99 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), J^akg cm<-1>:

1773, 1711, 1650, 1521, 1345.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (270 MHz, heksadeuterert dimetylsulfoksid), 6 ppm:

1.15 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1.16 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1,51 - 1,72 (1H, multiplett),

2,10 - 2,57 (6H, multiplett),

2,72 - 2,93 (1H, multiplett),

3,06 - 4,30 (13H, multiplett),

4,76 & 4,85 (tilsammen 1H, to tripletter, J = 7,81 Hz), 5,03 - 5,27 (3H, multiplett),

5,30 & 5,46 (2H, AB-kvartett, J = 14,16 Hz),

6,46 (2H, bred singlett),

7,55&7,65 (2H, to dubletter, J = 8,79 Hz),

7,72 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

8,22 & 8,23 (4H, to dubletter, J = 8,79 Hz).

53 ( b) Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2- T4-( 2- karbamoyloksy-etyl)- 1- piperazinylkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR) - 1-hvdroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

1,0 g 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[4-(2-karbamoyloksyetyl) -1-piperazinylkarbonyl] -1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin-4-yltio}-6- [ (IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 60 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i tre timer i nærvær av 1,1 g 10% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble katalysatoren fjernet ved hjelp av filtrering og filtratet ble ekstrahert med dietyleter. Det gjenværende vandige lag ble konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og den resulterende inndampingsrest ble underlagt kolonnekromatografering gjennom en "Lobar"-kolonne (Merck, LiChroprep RP-8, størrelse B). Kolonnen ble eluert med 20 vol% vandig metanol. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert og pH ble justert til en verdi på 4 ved hjelp av tilsats av IN vandig saltsyre. Løsningen ble deretter konsentrert ved hjelp av

inndamping under redusert trykk og konsentratet ble fryse-tørret, for å gi 327 mg av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), cm<-1>:

1728, 1654, 1597, 1392.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20) , X^^g nm (e) :

297 (9706).

1,21 (3H, dublett, J = 7,3 Hz),

1,29 (3H, dublett, J = 6,3 Hz),

1,95 - 2,06 (1H, multiplett),

3.01 - 3,25 (7H, multiplett),

3.31 - 3,43 (1H, multiplett),

3,46 - 3,52 (2H, multiplett),

3,72 - 3,90 (5H, multiplett),

4.02 - 4,11 (1H, multiplett),

4,21 - 4,30 (2H, multiplett),

4.32 - 4,36 (2H, multiplett),

4,82 - 4,89 (1H, multiplett).

Eksempel 54

Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2-(( 2S. 4S)- 2- f4-( 2- hydroksvetvl)- 1-piperazinylkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6-\( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

54( a)( i) 4- nitrobenzyl-( IR. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 2- T4-( 2- hydroksyetyl)- 1- piperazinylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin- 4- yltiol- 6-\( IR)- 1- hydroksyetyl1- 1- metyl- l-karbapen- 2- em- 3- karboksylat

90 ixl dif enylf osf orylklorid og 76 fxl diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 148 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-2- okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 1,9 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. 257 p. 1 diisopropyletylamin og 361 mg (2S, 4S)-2-[4-(2-hydroksyetyl)-1-piperazinylkarbonyl]-4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin-bis-(trifluormetansulfonat)

(fremstilt som beskrevet i syntese 54) ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i seks timer, hvoretter den ble tillatt å stå over natten i et kjøle-skap. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet på en lignende måte som den som er beskrevet i eksempel 49(b). Det urene produkt som således fremkom, ble renset ved hjelp av kromatografering gjennom en "Lobar"-kolonne (Merck, LiChroprep Si60) ved anvendelse av en 5:1 volumetrisk blanding av acetonitril og metanol som eluent, for å gi 22 0 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (MeOH) , X^^-g nm:

268, 315.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1:

1772, 1710, 1652, 1606, 1521, 1489, 1440, 1405, 1345, 1280, 1207.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), 6 ppm:

1,27&1,28 (3H, to dubletter, J = 7,33 Hz),

1,37 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,82 - 2,00 (1H, multiplett),

2,33 - 2,78 (8H, multiplett),

3,25 - 3,29 (1H, multiplett),

3,32 - 3,82 (9H, multiplett),

4,00 - 4,30 (3H, multiplett),

4,69 & 4,74 (1H, to tripletter, J = 7,81 Hz),

5,05 - 5,52 (5H, multiplett),

7,44 & 7,51 (2H, to dubletter, J = 8,79 Hz),

7,64 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

8,23 (4H, dublett, J = 8,79 Hz).

54( a) ( i') 4- nitrobenzyl-( 1R. 5S. 6S)- 2-\( 2S. 4S) - 2- T4-( 2-hvdroksyetyl) - 1- piperazinylkarbonyll - 1- ( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltiol- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylat

1,82 ml difenylfosforylklorid og 1,54 ml diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 3,0 g 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl] -l-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 38 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. 1,54 ml diisopropyletylamin og en løs-ning av 3,63 g (2S,4S)-2-[4-(2-hydroksyetyl)-1-piperazinylkarbonyl] -4-merkapto-l- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 54) i 30 ml tørr acetonitril ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i tre timer, hvoretter den ble tillatt å stå over natten i et kjøleskap. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet på en måte som ligner den som er beskrevet i eksempel 49 (b) . Det urene produkt ble deretter renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av en 2:1 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent, for å gi 3,4 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver. Produktets infrarøde absorpsjonsspektrum og kjernemagnetiske resonansspektrum var iden-tisk med dem for den forbindelse som ble fremstilt som beskrevet i trinn 54(i) ovenfor.

54( a)( ii) Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2- T4-( 2- hvdroksyetvl)-l- pjperazinylkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- f( IR) - 1-hvdroksyetyl 1 - 1- metyl - 1 - karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

1,38 g 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[4-(2-hydroksyetyl) -1-piperazinylkarbonyl] -1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin-4-yltio]-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn 54(a)(i) eller trinn 54(a)(i') ovenfor], ble oppløst i 40 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom

den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 1,2 g 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble

katalysatoren fjernet ved hjelp av filtrering og filtratet ble ekstrahert med dietyleter. Det gjenværende vandige lags pH ble justert til en verdi på 4 ved tilsats av IN vandig saltsyre og deretter ble løsningen konsentrert ved hjelp av inndamping

under redusert trykk. Den resulterende inndampingsrest ble underlagt kolonnekromatografering gjennom en "Lobar"-kolonne (Merck, LiChroprep RP-8, størrelse B), og kolonnen ble eluert med 3 vol% vandig metanol. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert, konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og frysetørret, for å gi 314 mg av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver.

1,21 (3H, dublett, J = 7,3 Hz),

1,28 (3H, dublett, J = 6,4 Hz),

1,97 - 2,07 (1H, multiplett),

3,02 - 3,13 (1H, multiplett),

3,32 - 3,70 (10H, multiplett),

3,70 - 4,00 (6H, multiplett),

4,00 - 4,16 (1H, multiplett),

4,18 - 4,29 (2H, multiplett),

4,86 - 4,92 (1H, multiplett).

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm (e):

297 (8124).

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm<-1>:

1757, 1659, 1595, 1393, 1376, 1277.

54( b)( i) 4- nitrobenzvl-( 1R. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- T4-( 2- 4'- nitro-benzyloksYkarbonyloksyetyl)- 1- piperazinylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyl oksykarbonyl ) - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylat

6,38 g difenylfosforylklorid og 5,37 ml diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 10,63 g 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 75 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. 16,26 ml diisopropyletylamin og en løsning av 32,5 g (2S,4S)-4-merkapto-2-{4-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -oksyetyl]-1-piperazinylkarbonyl}-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin-bis-(trifluormetansulfonat) i 65 ml tørr acetonitril ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling. Den resulterende blanding ble deretter omrørt ved samme temperatur i én time, hvoretter den ble tillatt å stå over natten under isavkjøling. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillasjon under redusert trykk og den resulterende destillasjonsrest ble blandet med en vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat. Den ble deretter ekstrahert med etylacetat. Ekstraktet ble tørret over vannfri magnesiumsulfat og løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillasjon under redusert trykk. Destillasjonsresten ble renset ved hjelp av kromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av en 18:1 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent, for å gi 19,75 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), v^^g cm-<1>:

1769, 1751, 1710, 1653, 1607, 1521, 1443, 1347.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

1,27&1,28 (3H, to dubletter, J = 7,33 Hz),

1,37 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,78 - 1,98 (1H, multiplett),

2,31 - 2,80 (7H, multiplett),

3,27 (1H, dublett av dubletter, J = 6,83 & 2,44 Hz),

3,31 - 3,76 (8H, multiplett),

4,01 - 4,33 (5H, multiplett),

4,68 & 4,74 (1H, to tripletter, J = 7,81 Hz),

5,04 - 5,52 (6H, multiplett),

7,44 & 7,51 (2H, to dubletter, J = 8,79 Hz),

7,55 & 7,65 (4H, to dubletter, J = 8,79 Hz),

8,17 - 8,25 (6H, multiplett).

54( b)( i') 4- nitrobenzvl-( 1R. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)-\ 4 -( 2 - 4 '- nitro-benzyloksykarbonyloksyetyl)- l- piperazinylkarbonyn- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksy-etvi1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylat

675/il dif enylf osf orylklorid og 567/il diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 1,12 g 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 10 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. En løsning av 2,30 g (2S,4S)-4-merkapto-2-{4-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-oksyetyl]-1-piperazinylkarbonyl}-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin i 5 ml tørr acetonitril ble deretter tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset på en måte som ligner den som er beskrevet i trinn 54(b)(i) ovenfor, for å gi 2,70 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver. Det infra-røde absorpsjonsspektrum og kjernemagnetiske resonansspektrum av den forbindelse som fremkom på denne måte, var identiske med tilsvarende for de forbindelser som er fremstilt som beskrevet i trinn 54(b)(i) ovenfor.

54( b)( i") 4- nitrobenzvl-( 1R. 5S. 6S)- 2 - 1 ( 2S. 4S)-\ 4 -( 2 - 4 '- nitro-benzyloksykarbonyloksyetyl)- 1- piperazinylkarbonyll - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- \ ( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylat

En løsning av 28,3 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-2-fenyl-sulfinyl-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-1-karbapen-2-em-3- karboksylat i 1 ml tørr acetonitril ble tilsatt dråpevis til en løsning av 112 mg (2S,4S)-{4-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -oksyetyl]-1-piperazinylkarbonyl}-4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin i 0,5 ml tørr acetonitril, under isavkjøling, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen fridd fra løsningsmidlet ved hjelp av destillering under redusert trykk. Den resulterende destil-lasj onsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av en 20:1 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent, for å gi 14 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver. Det infrarøde absorpsjonsspektrum og kjernemagnetiske resonansspektrum av den forbindelse som således fremkom, var identiske med dem for den forbindelse som er fremstilt som beskrevet i trinn 54(b)(i) ovenfor.

54 ( b) ( i'") 4- nitrobenzvl - ( 1R. 5S. 6S) - 2- 1 ( 2S. 4S) - T4 - ( 2- 4' - nitrobenzyloksykarbonyloksyetyl)- 1- piperazinylkarbonyll - 1-( 4-nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- F( IR) - 1-hydroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylat

En løsning av 50 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-(4-klorfenyl)-sulfinyl-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat og 19,4 mg diisopropyletylamin i 0,5 ml tørr acetonitril ble tilsatt dråpevis til en løsning av 93 mg (2S,4S)-{4-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-oksyetyl]-1-piperazinylkarbonyl}-4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin i 0,5 ml tørr acetonitril, under isavkjøling, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen fridd fra løsningsmidlet ved hjelp av destillering under redusert trykk. Destillasjonsresten ble opparbeidet på en måte som ligner den som er beskrevet i 54(a)(i), for å gi 13 mg 4-nitrobenzyl-(1R,5S,6S)-2-{(2S,4S)- [4-(2-4'-nitrobenzyloksy-karbonyloksyetyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylat i form av et pulver. Det infra- røde absorpsjonsspektrum og kjernemagnetiske resonansspektrum av den forbindelse som således fremkom, var identiske med dem for den forbindelse som ble fremstilt som beskrevet i trinn 54 (b) (i) ovenfor.

54( b)( ii) Saltsur ( lR. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2- T4-( 2- hvdroksyetvl)-1- piperazinylkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1-hydroksyety11 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylsyre

0,962 g 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-[4-(2-4'-nitrobenzyloksykarbonyloksyetyl)-1-piperazinylkarbonyl]-l-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinnene 54(b) (i) til 54(b) (i''') ovenfor] ble oppløst i 30 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann, til hvilket det var tilsatt 1,2 ml IN vandig saltsyre,

og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den i nærvær av 1 g 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble katalysatoren fjernet ved hjelp av filtrering og filtratet ble ekstrahert med etylacetat. Det vandige lag ble konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk, og den resulterende inndampingsrest ble underlagt kolonnekromatografering gjennom en "Lobar"-kolonne (Merck, LiChroprep RP-8, størrelse B), ved anvendelse av 3 vol% vandig metanol som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert, konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og frysetørret, for å gi 181 mg av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver.

Den således frembragte forbindelses infrarøde absorpsjonsspektrum og kjernemagnetiske resonansspektrum var identiske med tilsvarende for den forbindelse som ble fremstilt som beskrevet i trinn 54(a)(ii) ovenfor.

Eksempel 55

Saltsur ( IR. 5S, 6S)- 2- r( 2S, 4S)- 2-( 1- piperazinylkarbonyl)- 1-metylpyrrolidin- 4- yltiol- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl- l-karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

55( a) 4- nitrobenzvl-( IR. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 2- F4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - 1- piperazinylkarbonyll- 1- metylpyrrolidin-4- yltiol- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyll- l- metyl- l- karbapen- 2- em- 3-karboksylat

7,0 g difenylfosforylklorid og 3,4 g diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 8,6 g 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 120 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. 6,7 g diisopropyletylamin og en løsning av 13,8 g (2S,4S)-4-merkapto-2-[4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-metylpyrrolidin-trifluormetansulfonat i tørr acetonitril ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling, og den resulterende blanding ble tillatt å stå over natten, under isavkjøling. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset på en måte som ligner den som er beskrevet i eksempel 49(a), for å gi 7,0 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm<-1>:

1771, 1706, 1647, 1521, 1436, 1346.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 5 ppm:

1,27 (3H, dublett, J = 6,84 Hz),

1,37 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,79 - 1,95 (1H, multiplett),

2,37 (3H, singlett),

2,60 - 2,81 (2H, multiplett),

3,10 - 3,92 (13H, multiplett),

3,97 - 4,33 (3H, multiplett),

5,21 - 5,52 (4H, multiplett),

7,53 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

7,66 (2H, dublett, J = 8,79z),

8,22 & 8,24 (4H, to dubletter, J = 8,79 Hz).

55( b) Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2- f( 2S. 4S)- 2-( 1- piperazinvlkarbonvl)-l- metylpyrrolidin- 4- yltiol- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl- l-karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

0,22 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -1-piperazinylkarbonyl]-1-metylpyrrolidin-4-yltio]-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i en 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann, og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 0,22 g 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble katalysatoren fjernet ved hjelp av filtrering og filtratet ble vasket med dietyleter. Det gjenværende vandige lag ble konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og inndampingsresten ble blandet med 0,35 ml IN vandig saltsyre. Blandingen ble renset ved hjelp av kolonnekrornato-grafering med reversert fase gjennom en "Lobar"-kolonne (Merck, LiChroprep RP-8, størrelse B) ved anvendelse av 2 vol% vandig metanol som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert, konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og frysetørret, for å gi 98 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm<-1>:

1759, 1657, 1600, 1451, 1383, 1266.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

296,6.

1,21 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1,29 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,91 - 2,19 (1H, multiplett),

2,96 (3H, singlett),

3,15 - 3,43 (6H, multiplett),

3,48 (1H, dublett av dubletter, J = 6,11&2,69 Hz), 3,66 - 3,82 (4H, multiplett),

3,89 - 3,93 (2H, multiplett),

4,13 - 4,31 (3H, multiplett),

4,64 - 4,83 (1H, multiplett).

Eksempel 56

( IR. 5S, 6S)- 2- r( 2S, 4S)- 2-( 4- karboksvmetyl- 1- piperazinylkarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltiol- 1- f( IR)- l- hydroksyetyll - 1- metyl-1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

56( a) 4- nitrobenzvl-( 1R. 5S. 6S)- 2 - {( 2S. 4S)- 2- F4-( 4- nitrobenzyloksykarbonylmetyl)- 1- piperazinylkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}-6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylat

290 fil dif enylf osf orylklorid og 245 fil diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 500 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[ (IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 5 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved den samme temperatur i én time. 520 fil diisopropyletylamin og en løsning av 1,57 g (2S,4S)-4-merkapto-2-[4-(4-nitrobenzyloksykarbonylmetyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-bis-(trifluormetansulfonat) (fremstilt som beskrevet i syntese 56) i 5 ml tørr acetonitril ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling, og den resulterende blanding ble tillatt å stå over natten ved samme temperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillasjon under redusert trykk og den resulterende destillasjonsrest ble underlagt kolonnekromatografering gjennom "Lobar"-kolonne (Merck, LiChroprep Si60, størrelse B), ved anvendelse av en 5:1 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent. De

fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert og konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk, for å gi 706 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), v^^g cm<-1>:

1772, 1710, 1652, 1521, 1346.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), 6 ppm:

1,27 (3H, dublett, J = 7,3 Hz),

1,37 (3H, dublett, J = 5,9 Hz),

1,85 - 2,06 (2H, multiplett),

2,53 - 2,77 (5H, multiplett),

3,25 - 3,76 (10H, multiplett),

4,03 - 4,28 (3H, multiplett),

4,67 - 4,79 (1H, multiplett),

5,06 - 5,52 (6H, multiplett),

7,43 - 7,66 (6H, multiplett),

8,20 & 8,25 (6H, multiplett).

56 ( b) ( IR. 5S. 6S)- 2- f( 2S, 4S)- 2-( 4- karboksymetyl- l- piperazinylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol- 1- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl-l- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

200 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2S,4S)-2-[4-(4-nitrobenzyloksykarbonylmetyl)-1-piperazinylkarbonyl]-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 20 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann, og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 0,3 g10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble katalysatoren fjernet ved hjelp av filtrering og filtratet ble ekstrahert med 30 ml eter. Det gjenværende vandige lag ble skilt ut og konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk. Den resulterende inndampingsrest ble underlagt kolonnekromatografering gjennom en "Lobar"-kolonne (Merck, LiChroprep RP-8, størrelse B) ved anvendelse av vann som eluent. De fraksjoner som inneholdt

tittelforbindelsen ble kombinert, konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og frysetørret, for å gi 20 mg av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), v maj cs cm-1:

1755, 1639, 1603, 1386.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm (e):

297 (7753) .

Kjernemagnetisk resonansspektrum (270 MHz, D20), 6 ppm:

1,02 (3H, dublett, J = 7,3 Hz),

1,10 (3H, dublett, J = 6,3 Hz),

1,72 - 1,82 (1H, multiplett),

2,77 - 2,88 (1H, multiplett),

2,95 - 3,10 (4H, multiplett),

3,10 - 3,32 (3H, multiplett),

3,39 (2H, singlett),

3,44 - 3,75 (6H, multiplett),

3,79 - 3,88 (1H, multiplett),

4,01 - 4,10 (2H, multiplett).

Eksempel 57

Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2- 1( 2R. 4S)- 2- T4-( 2- hvdroksyetvl)- 1-piperazinylkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 5-\( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

57 ( a) 4- nitrobenzvl-( 1R. 5S. 6S)- 2-{( 2R. 4S)- 2- T4-( 2- 4'- nitro-benzyloksykarbonyloksyetyl)- 1- piperazinylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltiol- 6-\( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylat

109 fil dif enylf osf orylklorid og 92 fil diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 181 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 2 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i 50 minuter. 87,1 fil diisopropyletylamin og en løs-

ning av 308 mg (2R,4S)-4-merkapto-2-{4-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -oksyetyl]-1-piperazinylkarbonyl}-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin (fremstilt som beskrevet i syntese 57) i l ml tørr acetonitril ble tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i fem timer. Ved avslutning av

dette tidsrom, ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillasjon under redusert trykk og den resulterende destillasjonsrest ble renset ved hjelp av kromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av en 5:1 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert og konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk, for å gi 277 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1:

1771, 1750, 1710, 1650, 1607, 1522, 1443, 1347.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

1,28 (3H, dublett, J = 6,84 Hz),

1,36 (3H, dublett, J = 6,34 Hz),

3,31 - 3,96 (8H, multiplett),

4.01 - 4,33 (5H, multiplett),

4,77 - 4,90 (1H, multiplett),

5.02 - 5,55 (6H, multiplett),

7,41 - 7,66 (4H, multiplett),

8,19 - 8,25 (4H, multiplett).

57 ( b) Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2-{( 2R. 4S)- 2-\ A -( 2- hydroksyetyl)- 1-piperazinylkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 5- f( IR)- l- hvdroksy-e tyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

240 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2R,4S)-2-[4-(2-4'-nitrobenzyloksykarbonyloksyetyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 8 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann, og blandet

med 0,3 ml IN vandig saltsyre. Blandingen ble deretter hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i to timer i nærvær av 0,3 g 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av dette tidsrom, ble katalysatoren fjernet ved hjelp av filtrering og filtratet ble ekstrahert med dietyleter. Det gjenværende vandige lag ble konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk. Den resulterende inndampingsrest ble underlagt kolonnekromatografering gjennom en "Lobar"-kolonne (Merck, LiChroprep RP-8, størrelse A) ved anvendelse av 3 vol% vandig metanol som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert, konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og frysetørret, for å gi 35 mg av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

297.

Eksempel 58

Saltsur ( IR. 5S. 6S)- 2 - 1 ( 2R. 4R)- 2- T4-( 2- hvdroksvetyl)- 1-piperazinylkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

58 ( a) 4- nitrobenzvl-( IR. 5S. 6S)- 2-(( 2R. 4R)- 2- T4-( 2- 4'- nitro-benzyloksykarbonyloksyetyl)- 1- piperazinylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyl 1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylat

164/il dif enylf osf orylklorid og 138/il diisopropyletylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 272 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroksyetyl]-1-metyl-2-okso-l-karbapenam-3-karboksylat i 3 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. 131/il diisopropyletylamin og en løsning av 463 mg (2R,4R)-4-merkapto-2-{4-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-oksyetyl]-1-piperazinylkarbonyl}-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin i 2 ml tørr acetonitril ble deretter samtidig tilsatt dråpevis til blandingen, under isavkjøling,

og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i 1,5 time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk og den resulterende destillasjonsrest ble renset ved hjelp av kromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av en 9:1 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert og konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk, for å gi 490 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm<-1>:

1770, 1751, 1711, 1654, 1606, 1522, 1496, 1444, 1404, 1347, 1263, 1208.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm.-1,27 (3H, dublett, J = 7,33 Hz),

1,36 (3H, dublett, J = 5,86 Hz),

1,82 - 2,05 (1H, multiplett),

2,25 - 3,10 (7H, multiplett),

3,25 - 3,85 (9H, multiplett),

4,05 - 4,86 (6H, multiplett),

5,05 - 5,51 (6H, multiplett),

7,43 - 7,67 (6H, multiplett),

8,18 - 8,25 (6H, multiplett).

58 ( b) Saltsur ( 1R. 5S. 6S)- 2- 1( 2R. 4S)- 2-\ A -( 2- hydroksvetvl)- 1-piperazinylkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio)- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- l- metyl- l- karbapen- 2- em- 3 - karboksyl syre

191 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5S,6S)-2-{(2R,4R)-2-[4-(2-4'-nitrobenzyloksykarbonyl)-oksyetyl]-1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio}-6-[(IR)-1-hydroksyetyl] -1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylat [fremstilt som beskrevet i trinn (a) ovenfor], ble oppløst i 8 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann, og blandingen ble hydrogenert ved at det ble boblet hydrogen gjennom den ved romtemperatur i én time i nærvær av 218/il IN vandig saltsyre og 0,3 g 10 vekt% palladium på trekull. Ved avslutning av

dette tidsrom, ble katalysatoren fjernet ved hjelp av filtrering og filtratet ble ekstrahert med dietyleter. Det gjenværende vandige lag ble konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og den resulterende inndampingsrest ble underlagt kolonnekromatografering gjennom en "Lobar"-kolonne (Merck, LiChroprep RP-8, størrelse A) ved anvendelse av 3 vol% vandig metanol som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen ble kombinert, konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og frysetørret, for å gi 26 mg av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver.

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20) , X^^g nm:

297.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm<-1>:

1758, 1659, 1595, 1451, 1385, 1261, 1181, 1145.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (270 MHz, D20, med anvendelse av tetradeuterert natriumtrimetylsilylpropionat som intern standard), <5 ppm:

1.20 (3H, dublett, J = 7,33 Hz),

1,28 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

2,13 - 2,22 (1H, multiplett),

2,91 - 3,03 (1H, multiplett),

3,26 - 3,63 (9H, multiplett),

3,75 - 4,11 (8H, multiplett),

4.21 - 4,30 (2H, multiplett),

4,83 - 4,93 (1H, multiplett).

Eksempler 59 til 88

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i eksempel 1 eller eksempel 49, fremkom de følgende forbindelser ved anvendelse av det merkaptan som er vist i det tilsvarende av syntese 59 til 88.

Eksempel 59

( IR. 5S, 6S)- 2-{( 2S, 4S)- 2- \ ( 2S)-( 4- acetimidoyl- 2- metylpiperazin-1- vlkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio)- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyl]- 1-metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20) , X^^g nm:

300 .

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1:

1755, 1629, 1591, 1448, 1384, 1281.

1,21 - 1,36 (6H, multiplett),

1,30 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,58 - 1,75 (1H, multiplett),

2,35&2,39 (tilsammen 3H, to singletter),

2,63 - 2,85 (1H, multiplett),

3,06 (1H dublett av dubletter, J = 12,21 Sc 3,42 Hz), 3,18 (1H dublett av dubletter, J = 12,21 Sc 5,86 Hz), 3,26 - 3,62 (4H, multiplett),

3,65 - 4,67 (9H, multiplett).

Eksempel 60

( IR. 5S, 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 2- f( 2S)-( 4- formimidoyl- 2- metylpiperazin-1- ylkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyl]- 1-metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20) , Xmak;s nm:

296 .

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm<-1>:

1755, 1711, 1641, 1592, 1452, 1384.

1,22 (3H, dublett, J = 7,3 Hz),

1,58 (3H, dublett, J = 6,3 Hz),

1,24&1,35 (tilsammen 3H, to dubletter, J = 6,8 Hz), 1,62 - 1,77 (1H, multiplett),

2,68 - 2,89 (1H, multiplett),

3,06 - 4,50 (15H, multiplett),

7,93, 7,96, 8,03&8,19 (tilsammen 1H,fire singletter).

Eksempel 61

( IR, 5S, 6S)- 2-{ ( 2S, 4S)- l- metyl- 2- f( 3S)- 3- acetimidoyl- amino-pyrrol idin- 1- ylkarbonyl 1 - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- I" ( IR) - 1-hydroksyetyl1 - 1- metylkarbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20) , X^^-g nm:

301.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm<-1>:

1755, 1682, 1632, 1593, 1453, 1385.

1,21 (3H, dublett, J = 7,33 Hz),

1,30 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

1,60 - 1,75 (1H, multiplett),

2.24 (3H, dublett, J = 2,93 Hz),

2,28 (3H, dublett, J = 4,88 Hz),

2,70 - 2,90 (2H, multiplett),

3,05 - 3,15 (1H, multiplett),

3.25 - 3,50 (3H, multiplett),

3,50 - 4,05 (7H, multiplett),

4,15 - 4,40 (3H, multiplett).

Eksempel 62

( IR. 5S. 6S)- 2- f( 2S, 4S)- 2-( 3- acetimidoylaminopiperidin- 1- ylkarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltibl- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl-1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

300.

Eksempel 63

( IR. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- l- metyl- 2-( 4- acetimidoylaminopiperidin-1- ylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol - 6-\( IR)- 1- hydroksyetyll - 1-metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks_ nm:

300 .

Eksempel 64

( lR. 55. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- l- metyl- 2-( 4- formimidoylpiperazin- 1-vlkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll - 1-mety1- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

300 .

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), v^^s_ cm<-1>:

1754, 1707, 1651, 1595, 1450, 1385, 1285.

1,21 (3H, dublett, J = 7,3 Hz),

1,3 0 (3H, dublett, J = 6,4 Hz),

1,68 (1H, doblet dublett av dubletter, J = 13,7, 8,8

& 5,4 Hz), 2,34 (3H, singlett),

2,78 - 2,95 (2H, multiplett),

3,14 (1H, dublett av dubletter, J = 12,2 & 1,4 Hz),

3,30 - 3,45 (2H, multiplett),

3,53 - 3,95 (10H, multiplett),

4,18 - 4,30 (2H, multiplett),

7,92 (1H, singlett).

Eksempel 65

( IR. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- l- metvl- 2-\( 2S)-( 4- acetimidovl- 2- metvl-piperazin- l- ylkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1-hydroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

299 .

Eksempel 66

( IR. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- l- acetimidovl- 2-( 1- piperazinylkarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltiol- 6-\( IR)- 1- hydroksyetyll - 1- metyl-1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks_ nm:

297 .

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), v^^g cm<-1>:

1754, 1663, 1594, 1489, 1455, 1384, 1252, 1209.

1,21 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1,30 (3H, dublett, J = 6,35 Hz),

2,09 - 2,24 (1H, multiplett),

2,16 & 2,38 (tilsammen 3H, to singletter),

2,80 - 3,95 (13H, multiplett),

3,96 - 4,33 (3H, multiplett),

5,04 - 5,11 & 5,24 - 5,32 (tilsammen 1H, to multipletter).

Eksempel 67

( IR, 5S, 6S)- 2- r( 2S, 4S)- 1- formimidoyl- 2-( 1- piperazinyl karbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol- 6-\( IR)- 1- hydroksyetyll- 1- metyl 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmakg_ nm:

297.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr),^a^g cm<-1>:

1754, 1708, 1660, 1594, 1489, 1455, 1395, 1251, 1209.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (400 MHz, D20, ved anvendelse av tetradeuterert natriumtrimetylsilylpropionat som intern standard), 5 ppm:

1,22 (3H, dublett, J = 7,32 Hz),

1,29 (3H, dublett, J = 6,40 Hz),

2,08 - 2,19 (1H, multiplett),

2,98 - 4,33 (16H, multiplett),

5,06 - 5,10 Sc 5,19 - 5,23 (tilsammen 1H, to

multipletter), 7,86 Sc 8,11 (tilsammen 1H, to singletter) .

Eksempel 68

( IR, 5S. 6S)- 2- f( 2S, 4S)- l- acetimidoyl- 2-( 4- acetimidoylpiperazin-1- ylkarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltio) - 6- r ( IR) - 1- hydroksyetyll - 1-metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

300.

Eksempel 69

( IR, 5S, 6S)- 2- r( 2S, 4S)- l- acetimidoyl- 2-( 4- formimidoylpiperazin-1- ylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyll- 1-mety1- 1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

300 .

Eksempel 70

( IR. 5S, 6S)- 2- f ( 2S. 4S)- 1- formimidoyl- 2-( 4- formimidoylpiperazin-1- ylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol - 6-\( IR)- 1- hydroksyetyll- 1-metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

300 .

Eksempel 71

( IR, 5S, 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 1- formimidoy1- 2-( 4- acetimidoylpiperazin-1- ylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol - 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1-mety1- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

300.

Eksempel 72

( IR. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- l- acetimidovl- 2-\( 3S)- 3- acetimidoyl-aminopyrrolidin- 1- ylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol- 6- f ( IR)- 1-hydroksye tyl 1 - 1 - me tylkarbapen- 2 - em- 3 - karboksyl syre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20) , X^^g nm:

301.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), v^^g cm-1:

1756, 1633, 1594, 1452, 1385.

Eksempel 73

( IR. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- l- acetimidovl- 2-\( 3S)- 3- formimidoy1-aminopyrrolidin- 1- ylkarbonyl 1 - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- \ ( IR)- 1-hydroksyetyl1 - 1- me tylkarbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

301.

Eksempel 74

( 1R. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- l- acetimidoyl- 2- r( 3S)- 3- aminopyrrolidin-1- ylkarbonyll- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1-metylkarbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H2<0>), Xmaks nm:

297.

Eksempel 75

( IR. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 1- formimidoyl- 2- r( 3S)- 3- acetimidovl-aminopyrrolidin- l- ylkarbonyll - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1-hydroksyetyl1 - 1- metylkarbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

301.

Eksempel 76

( IR. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 1- formimidoyl- 2- r( 3S)- 3- formimidoy1-aminopyrrolidin- 1- ylkarbonyl1- pyrrolidin- 4- yltio}- 6-\( IR)- 1-hydroksyetyl 1 - 1- metylkarbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20) , X^^g nm:

301.

Eksempel 77

( IR. 5S. 6S)- 2-{( 2S. 4S)- 1- formimidoyl- 2- r( 3S)- 3- aminopyrrolidin-1- ylkarbonyll - pyrrolidin- 4- yltio}- 6- I" ( IR) - 1- hydroksyetyll - 1-metylkarbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20) , Xmaks nm:

297 .

Eksempel 78

( IR, 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- l- acetimidoyl- 2-( homopiperazin- l- ylkarbonyll - pyrrolidin- 4- yltiol- 6-\( IR)- 1- hydroksyetyll - 1- metyl-1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

297.

Eksempel 79

( IR. 5S. 6S)- 2- f( 2S. 4S)- l- acetimidoyl- 2-( 4- formimidoylhomopiperazin- 1- ylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol - 6-\( IR)- 1-hydroksyetyl1 - 1- metvi- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20) , X^^g nm:

300 .

Eksempel 80

( IR. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 1- formimidoy1- 1-( homopiperazin- 1- ylkarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltiol- 6-\( IR)- 1- hydroksyetyll - 1- metyl-1- karbapen- 2- em- 3 - karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20) , X^^g nm:

297 .

Eksempel 81

( IR, 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 1- formimidoyl- 2-( 4- formimidoylhomopiperazin- l- ylkarbonyl) - pyrrolidin- 4- yltiol - 6-\( IR)- 1-hydroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

300 .

Eksempel 82

( 1R. 5S. 6S)- 2- 1( 2S. 4S)- 2- \ ( 3S)- 3-( N- metyl- N- acetimidoylamino-pyrrolidin- 1- ylkarbonyl1- pyrrolidin- 4- yltio}- 6- r( IR)- 1-hydroksyetyl1 - 1- metylkarbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20) , Xmak;s nm:

300.

Eksempel 83

Saltsur ( IR. 5S, 6S)- 2- f( 2S. 4S)- 2-( 2- hydroksymetylpiperazin- l-ylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol- 6- f( IR)- 1- hydroksyetyll - 1-metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

297 .

Eksempel 84

( IR. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 2-( 4- acetimidoyl- 2- hydroksymetylpiperazin- 1- ylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol - 6-\( IR) - 1-hydr oksyetyl 1 - 1 - metyl - 1 - karbapen - 2 - em- 3 - karboksyl syre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

301.

Eksempel 85

Saltsur ( 1R. 5S, 6S)- 2- r( 2S. 4S)- 2-( 6- hydroksyhomopiperazin- l-ylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol- 6- \ ( IR)- 1- hydroksyetyll- 1-metyl- 1- karbapen- 2- em- 3- karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

296.

Eksempel 86

( IR. 5S, 6S)- 2- r( 2S, 4S)- 2-( 4- formimidoyl- 6- hydroksyhomopiperazin- 1- ylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol - 6- f( IR)- 1-hvdroksyetyl1 - 1- metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20) , X^j^g nm:

300 .

Eksempel 87

( IR. 5S, 6S)- 2- F( 2S. 4S)- l- acetimidoyl- 2-( 4- acetimidoylaminopiperidin- 1- ylkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol - 6-\( IR) - 1-hvdroksyetyl 1 - 1 - metyl - 1 - karbapen- 2 - em- 3 - karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks_ nm:

300 .

Eksempel 88

( IR. 5S. 6S)- 2- r( 2S. 4S)- l- metyl- 2-( 4- formimidoylhomopiperazin- 1-vlkarbonyl)- pyrrolidin- 4- yltiol- 6- r( IR)- 1- hydroksyetyll- 1-metyl- 1- karbapen- 2 - em- 3- karboksylsyre

Ultrafiolett absorpsjonsspektrum (H20), Xmaks nm:

300.

Syntese 1

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl) - piperazin- 1- ylkarbonyl! - 1- ( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- trifluormetansulfonat

1 ( i) ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2-( 4- t- butoksykarbonylpiperazin- 1- ylkarbonyl)- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

1,78 g N,N'-karbonyldiimidazol ble tilsatt en løsning av 4,46 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -2-pyrrolidinkarboksylsyre i 45 ml tørr acetonitril,

og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i én time. Reaksjonsblandingen ble deretter avkjølt med is og en løsning av 2,05 g 1-t-butoksykarbonylpiperazin i 45 ml tørr acetonitril ble tilsatt blandingen, som deretter ble tillatt å stå over natten ved romtemperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og konsentratet ble fortynnet med etylacetat. Etylacetat-løsningen ble vasket med vann og med en vandig løsning av natriumklorid og ble deretter tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk og den resulterende destillasjonsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av 3:2 volumetrisk blanding av etylacetat og cykloheksan som eluent, for å gi 5,4 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm<-1>:

1699, 1658, 1609, 1585, 1512, 1456, 1377, 1366, 1344, 1286, 1237, 1205.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

1,47 (9H, singlett),

1,73 - 1,87 (1H, multiplett),

2.40 - 2,52 (1H, multiplett),

3,03 - 3,17 (1H, multiplett),

3,25 - 4,09 (10H, multiplett),

3,73 (2H, singlett),

3,79 & 3,80 (tilsammen 3H, to singletter),

4,57&4,61 (tilsammen 1H, to tripletter, J = 8,30 Hz), 5,01 - 5,32 (2H, multiplett),

6,85 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

7,23 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

7.41 Sc 7,47 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz), 8,18 Sc 8,22 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz).

1( ii) Saltsur ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2-( 1- piperazinylkarbonyl) - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin 27 ml 4N etylacetatløsning av hydrogenklorid ble tilsatt til en løsning av 5,2 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-(4-t-butoksykarbonylpiperazin-1-ylkarbonyl)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor] i 27 ml etylacetat, og den resulterende blanding ble oppvarmet under tilbakeløpskjøling i to timer. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og det resulterende konsentrat ble finfordelt ved hjelp av dietyleter. Det pulver som således fremkom ble oppsamlet ved hjelp av filtrering og tørret for å gi 4,2 g av tittelforbindelsen.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks.cm-1:

1708, 1662, 1609, 1585, 1512, 1434, 1404, 1346, 1319, 1301, 1246, 1209.

1,53 - 1,68 (1H, multiplett),

2,58 - 2,75 (1H, multiplett),

2,90 - 3,94 (11H, multiplett),

3,71&3,74 (tilsammen 3H, to singletter),

3,78 (2H, singlett),

4,70&4,80 (tilsammen 1H, to tripletter, J = 8,06 Hz), 5,03 - 5,23 (2H, multiplett),

6,89 (2H, dublett, J = 8,30 Hz),

7,27 (2H, dublett, J = 8,30 Hz),

7,51 Sc 7,60 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz), 8,23 Sc 8,25 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz).

1( iii) ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)- piperazin- l- ylkarbonyll- 1-( 4-nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

11 ml metylenklorid, fulgt av 452 mg N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -acetamidin, ble tilsatt en løsning av 1,1 g saltsur (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-(1-piperazinylkarbonyl) -1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (ii) ovenfor] i 22 ml metanol, mens løs-ningen ble oppvarmet under tilbakeløpskjøling. Den resulterende blanding ble deretter oppvarmet under tilbakeløps-kjøling i ytterligere fire timer. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen fridd fra løsningsmidlet ved hjelp av destillasjon under redusert trykk og den resulterende destillasjonsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av en 20:1 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent for å gi 466 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), "^^g cm-1:

1709, 1662, 1608, 1570, 1520, 1430, 1405, 1346, 1291, 1254 .

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

1,73 - 1,94 (1H, multiplett),

2,30 & 2,40 (tilsammen 3H, to singletter),

2,38 - 2,52 (1H, multiplett),

3,03 - 3,18 (1H, multiplett),

3,11 - 4,05 (10H, multiplett),

3,73 (2H, singlett),

3,79 & 3,80 (tilsammen 3H, to singletter),

4,52 - 4,63 (1H, multiplett),

4,98 - 5,35 (4H, multiplett),

6,85 (2H, dublett, J = 8,30 hz),

7,23 (2H, dublett, J = 8,30 hz),

7,40 - 7,63 (4H, multiplett),

8,16 - 8,25 (4H, multiplett).

1 ( iv) ( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)- piperazin- l- yl- karbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- trifluormetansulfonat

3,2 ml trif luoreddiksyre og 103 ll! trif luormetansulf onsyre ble tilsatt til en løsning av 430 mg (2S,4S)-4-(4-met-

oksybenzyltio) -2- [4- (N-4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl) - piperazin-1-ylkarbonyl] -1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (iii) ovenfor], i 636 fil anisol og den resulterende blanding ble omrørt i én time, under isavkjøling. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen fridd fra løsningsmidlet ved hjelp av destillasjon under redusert trykk og destillasjonsresten ble gjentatte ganger vasket med dietyleter ved hjelp av dekanterihg, for å gi 450 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaJcscm"1:

1782, 1705, 1634, 1610, 1522, 1441, 1406, 1348, 1277, 1249, 1224.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (heksadeuterert dimetylsulfoksid + D20, 270 MHz), <5 ppm:

1,52 - 1,78 (1H, multiplett),

2,57 - 4,08 (15H, multiplett),

4,65 - 4,84 (1H, multiplett),

5,04 - 5,28 (4H, multiplett),

7,49 - 7,69 (4H, multiplett),

8,20 - 8,28 (4H, multiplett).

Syntese 2

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- [ 4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl) - homopiperazin- 1 - ylkarbonyl] - 1- ( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- trifluormetansulfonat

2 ( i) Saltsur ( 2S, 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2-( 1- homopiperazinylkarbonyl)- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

1,95 g N,N'-karbonyldiimidazol ble tilsatt til en løs-ning av 4,5 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -2-pyrrolidinkarboksylsyre i 45 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i én time. En løsning av 2,0 g homopiperazin i 10 ml tørr acetonitril ble deretter tilsatt reaksjonsblan-

dingen, og den blanding som derved fremkom ble omrørt ved romtemperatur i to timer og ved 35°C i 3 0 minutter. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og det resulterende konsentratet ble fortynnet med etylacetat. Den fortynnede løsning ble vasket med vann og med en vandig løsning av natriumklorid. Etylacetat-løsningen ble deretter tørret over vannfri magnesiumsulfat og konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk. Konsentratet ble oppløst i 44 ml etylacetat og den løsning som således fremkom ble blandet med 2,5 ml 4N-løsning av hydrogenklorid i etylacetat. Blandingen ble deretter konsentrert ved hjelp av avdamping under redusert trykk. Inndampingsresten ble finfordelt ved hjelp av dietyleter og det resulterende pulver ble oppsamlet ved hjelp av filtrering og deretter tørret, for å gi 4,6 g av tittelforbindelsen.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), i^aks cm-1:

1706, 1656, 1609, 1585, 1512, 1431, 1405, 1346, 1320, 1301, 1246, 1210.

1,54 - 1,72 (1H, multiplett),

1.86 - 2,14 (2H, multiplett),

2,60 - 2,72 (1H, multiplett),

2,94 - 3,96 (11H, multiplett),

3,72&3,74 (tilsammen 3H, to singletter),

3,79 (2H, singlett),

4,62 - 4,82 (1H, multiplett),

5,05 - 5,26 (2H, multiplett),

6.87 (2H, dublett, J = 8,30 Hz),

7,27 (2H, dublett, J = 8,30 Hz),

7,52&7,60 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz), 8,22&8,25 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz). 2 ( ii) ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksvbenzYltio)- 2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl) - homopiperazin- 1- ylkarbonyll - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin 25 ml metylenklorid ble tilsatt en løsning av 2,5 g saltsur (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-(1-homopiperazinylkarbonyl) -1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor] i 25 ml metanol, som ble holdt oppvarmet under tilbakeløpskjøling og deretter ble det tilsatt 904 mg N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-acetamidin til den resulterende blanding. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet under tilbakeløpskjøling i ytterligere fem timer, hvoretter den ble opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i syntese l(iii), for å gi 415 mg av tittelf orbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm"1:

1753, 1708, 1657, 1608, 1564, 1520, 1429, 1404, 1346, 1319, 1301, 1274, 1250, 1229.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz) , 6 ppm:

1,70 - 2,60 (7H, multiplett),

3,02 - 3,17 (1H, multiplett),

3,22 - 4,60 (11H, multiplett),

3,716&3,723 (tilsammen 2H, to singletter),

3,781 Sc 3,786 (tilsammen 3H, to singletter),

4,93 - 5,44 (4H, multiplett),

6,83 Sc 6,85 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz), 7,22 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

7,41 - 7,58 (4H, multiplett),

8,16 - 8,26 (4H, multiplett).

2( iii) ( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2-[ 4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)- homopiperazin- 1- ylkarbonvll - 1-( 4- nitrobenzyloksy-karbonvl) - pyrrolidin- trif luormetansulf onat

2,1 ml trif luoreddiksyre og 67 jxl trif luormetansulf onsyre ble tilsatt til en løsning av 285 mg (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio) -2- [4- (N-4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-

homopiperazin-1-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (ii) ovenfor] i 214 fil anisol, og den resulterende blanding ble omrørt i én time, under isavkjøling. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i syntese l(iv), for å gi 296 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), v^^g cm<-1>:

1781, 1701, 1632, 1609, 1523, 1495, 1437, 1406, 1348, 1279, 1258, 1225, 1213.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (heksadeuterert dimetylsulfoksid + D20, 270 MHz), 5 ppm:

1.55 - 4,12 (18H, multiplett),

4.56 - 4,83 (1H, multiplett),

5,03 - 5,31 (4H, multiplett),

7,48 - 7,68 (4H, multiplett),

8,17 - 8,27 (4H, multiplett).

Syntese 3

( 2S, 4S)- 4- merkapto- 2-\( 3S)- 4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)- 3- metylpiperazin- 1- ylkarbonyl]- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- trifluormetansulfonat

3( i) Saltsur ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2- r( 3S)- 3- metylpiperazin- 1- ylkarbonyl]- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 2(i), men ved anvendelse av 4,5 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre i 1,78 g N,N'-karbonyldiimidazol og 1,4 g (2S)-2-metylpiperazin, fremkom 5,3 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

3( ii) ( 2S, 4S)- 4-( 4- metoksybenzvltio)- 2- r( 3S)- 4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)- 3- metylpiperazin- l- ylkarbonyn-1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

2,26 g saltsur (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-[ (3S)-3-metyl-piperazin-l-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor] ble blandet med 1,14 g N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-acetamidin i 45 ml acetonitril og blandingen ble oppvarmet under tilbake-løpskjøling i 16 fem timer. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i syntese l(ii), for å gi 922 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

3( iii) ( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- r( 3S)- 4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)- 3- metylpiperazin- l- ylkarbonyn- 1-( 4-nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin- trifluormetansulfonat

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 2(iii), men ved anvendelse av 458 mg (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-[(3S)-4-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-3-metylpiperazin-1-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (ii) ovenfor] fremkom 475 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks>cm-1:

1782, 1704, 1623, 1523, 1441, 1407, 1348, 1280, 1252, 1225 .

1,09 - 1,28 (3H, multiplett),

1,53 - 1,78 (1H, multiplett),

2,22 - 2,42 (1H, multiplett),

2,67 - 3,46 (10H, multiplett),

3,90 - 4,31 (3H, multiplett),

4,63 - 4,90 (1H, multiplett),

5,02 - 5,28 (4H, multiplett),

7,46 - 7,70 (4H, multiplett),

8,19 - 8,28 (4H, multiplett).

Syntese 4

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl) - piperazin- l- ylkarbonyl)- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

4 ( i) ( 2S . 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2-\ 4 -( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)- piperazin- 1- ylkarbonyl])- 1-( 4-nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

En suspensjon av 5,51 g saltsur (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio) -2-(1-piperazinylkarbonyl)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i syntesel(ii)] og 2,45 g N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-formamidin i 10 ml tørr acetonitril ble omrørt i to timer på et vannbad som ble holdt ved 50°C. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen fridd fra urenheter ved hjelp av filtrering og filtratet ble konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk. Den resulterende inndampingsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av en 6:4 volumetrisk blanding av etylacetat og acetonitril som eluent, for å gi 5,48 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm"1:

1716, 1652, 1598, 1516, 1346, 1162, 1007.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

1,75 - 1,95 (1H, multiplett),

2,35 - 2,53 (1H, multiplett),

3,05 - 3,19 (1H, multiplett),

3,73 (2H, singlett),

3,79 (3H, singlett),

3,30 - 4,13 (9H, multiplett),

4,53 - 4,66 (1H, multiplett),

5,15&5,18 (2H, AB-kvartett, J = 13,7 Hz),

5,29 (2H, singlett),

6,85 (2H, dublett, J = 8,3 Hz),

7,23 (2H, dublett, J = 8,3 Hz),

7,46 (2H, dublett, J = 8,3 Hz),

7,58 (2H, dublett, J = 8,3 Hz),

8,21 (2H, dublett, J = 8,3 Hz),

8,23 (2H, dublett, J = 8,3 Hz),

8,52 (1H, singlett).

4 ( ii) ( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)- piperazin- 1- ylkarbonyl)- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin 15 ml trif luoreddiksyre og 460/il trifluormetansulfon-syre ble tilsatt til en løsning av 2,50 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio) -2-[4-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)-piperazin-l-ylkarbonyl])-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor] i 3 ml anisol, og den resulterende blanding ble omrørt i én time, under isavkøling. Løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og den resulterende destillasjonsrest ble vasket med dietyleter, for å gi 2,55 g (2S,4S)-4-merkapto-2- [4-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl) -piperazin-l-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin-trifluormetansulfonat, i form av et pulver. Hele dette produkt ble oppløst i en blanding av etylacetat og vann og løsningen ble gjort basisk ved tilsetning av en vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat. Etylacetatlaget ble skilt ut og vasket med vann og med en vandig løsning av natriumklorid, i nevnte rekkefølge. Løsningen ble tørret over vannfri natriumsulfat og deretter ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, for å gi 2,0 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), v^^g cm<-1>:

1709, 1660, 1603, 1521, 1440, 1346.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), 6 ppm:

1,89 (1H, dublett, J = 8,8 Hz),

1,85 - 2,02 (1H, multiplett),

2,63 - 2,83 (1H, multiplett),

3,22 - 4,17 (11H, multiplett),

4,71 (1H, triplett, J = 8,3 Hz)

5.19&5,22 (tilsammen 2H, AB-kvartett, J = 13,7 Hz), 5,27 (2H, singlett),

7,50 (2H, dublett, J = 8,8 Hz),

7,57 (2H, dublett, J = 8,8 Hz),

8.20 (2H, dublett, J = 8,8 Hz),

8,22 (2H, dublett, J = 8,8 Hz),

8,54 (1H, singlett).

Syntese 5

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl) - homopiperazin- l- ylkarbonyll - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 4, men ved anvendelse av 2,10 g saltsur (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-(1-homopiperazinylkarbonyl)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i syntese 2(i)] og 0,93 g N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -f ormamidin fremkom 2,38 g av tittelforbindelsens trifluormetansulfonat. Saltet ble behandlet ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i syntese 4(ii), for å gi 1,90 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks>cm-1.

1709, 1679, 1653, 1600, 1519, 1345, 1159.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), 6 ppm:

1,80 - 1,92 (2H, multiplett),

2,00 - 2,15 (1H, multiplett),

2,63 - 2,80 (1H, multiplett),

3,18 - 4,35 (11H, multiplett),

4,55 - 4,67 (1H, multiplett),

5,10 - 5,30 (4H, multiplett),

7,40 - 7,60 (4H, multiplett),

8,15 - 8,26 (4H, multiplett),

8,42 - 8,56 (1H, multiplett).

Syntese 6

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- T( 3S)- 4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl) - 3- metylpiperazin- 1- ylkarbonyl1- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- trifluormetansulfonat

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 4, men ved anvendelse av 1,13 g saltsur (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-[(3S)-3-metylpiperazin-l-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin og 491 mg N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-formamidin fremkom 1,0 g av tittelforbindelsen.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm-1:

1785, 1688, 1608, 1523, 1444, 1408, 1349, 1248, 1223.

1,10 - 1,28 (3H, multiplett),

1,60 - 1,78 (1H, multiplett),

2,65 - 3,45 (8H, multiplett),

3,88 - 4,30 (3H, multiplett),

3,65 - 3,89 (1H, multiplett),

5,02 - 5,27 (2H, multiplett),

5,36 (2H, singlett),

7,49 - 7,70 (4H, multiplett),

8,20 - 8,28 (4H, multiplett),

8, 89 (1H, singlett) .

Syntese 7

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2-[ 2- metyl- 4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-piperazin- l- ylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

7 ( i) ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2-( 4- t- butoksykarbonyl- 2-metylpiperazin- 1- ylkarbonyl)- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

3,41 ml trietylamin og 3,03 ml pivaloylklorid ble tilsatt dråpevis til en løsning av 9,99 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio) -1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre i 100 ml tørr acetonitril, under isavkjøling, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i 20 minutter. En løsning av 5,38 g l-t-butoksykarbonyl-3-metylpiperazin i 50 ml tørr tetrahydrofuran ble deretter tilsatt dråpevis til blandingen, og blandingen ble omrørt ved samme temperatur i 30 minutter og deretter ved romtemperatur i to timer. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og inndampingsresten ble fortynnet med etylacetat. Den fortynnede løsning ble vekselvis vasket med IN vandig løsning av oksalsyre med vann og med en vandig løsning av natriumklorid. Etylacetat-løsningen ble tørret over vannfri magnesiumsulfat og løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av

destillering under redusert trykk. Destillasjonsresten ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av en fremgangsmåte med gradienteluering, med blandinger av etylacetat og cykloheksan i det volumetriske område fra 1:1 til 3:2 som eluent, for å gi 8,56 g av tittelforbindelsen, i form av et amorft, fast stoff.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm<-1>:

1701, 1655, 1609, 1523, 1513, 1426, 1405, 1345, 1251, 1168 .

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm.-0,97 - 1,43 (3H, multiplett),

1,47 (9H, singlett),

1.46 - 1,98 (3H, multiplett),

2.47 - 2,50 (1H, multiplett),

2,71 - 3,67 (4H, multiplett),

3,73 (2H, singlett)

3,79 & 3,80 (tilsammen 3H, to singletter),

3,76 - 4,82 (5H, multiplett),

5,02 - 5,29 (2H, multiplett),

6,85 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

7,23 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

7,41 & 7,46 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz), 8,17 & 8,23 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz).

7 ( ii) ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2-( 2- metylpiperazin- 1- ylkarbonyl) - 2-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

31,6 ml 4N løsning av hydrogenklorid i etylacetat ble tilsatt dråpevis til en løsning av 9,55 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio) -2- (4-t-butoksykarbonyl-2-metylpiperazin-l-ylkarbonyl)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor] i 31,6 ml etylacetat, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i 90 minutter. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen fortynnet med etylacetat, hvoretter den ble nøytralisert ved tilsats av en vandig løsning av

karbonat. Etylacetatlaget ble skilt ut, vasket med en vandig løsning av natriumklorid og tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble deretter fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk og den resulterende destil-lasj onsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel ved anvendelse av en fremgangsmåte med gradienteluering, med blandinger av etylacetat og metanol innen det volumetriske område fra 4:1 til 7:3 som eluent, for å gi 7,0 g av tittelforbindelsen, i form av et amorft, fast stoff.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), " ttia] <:s cm<-1>:

1709, 1648, 1513, 1432, 1404, 1345, 1249.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

1,10 - 1,46 (3H, multiplett),

1,70 - 1,87 (1H, multiplett),

2,18 - 3,15 (8H, multiplett),

3,30 - 3,58 (2H, multiplett),

3,73 (2H, singlett),

3,79&3,80 (tilsammen 3H, to singletter),

3,67 - 4,64 (3H, multiplett).

4,97 - 5,34 (2H, multiplett),

6,85 (2H, dublett, J = 8,30 Hz),

7,23 (2H, dublett, J = 8,30 Hz),

7,42 & 7,47 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,30 Hz), 8,18&8,23 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,30 Hz).

7( iii) ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2- f2- metyl- 4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - piperazin- 1- ylkarbonyl1- 1-( 4-nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

0,51 g 4-dimetylaminopyridin ble tilsatt dråpevis ved romtemperatur til en løsning av 1,83 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio) -2-(2-metylpiperazin-1-ylkarbonyl)-2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (ii) ovenfor] i 25 ml tørr acetonitril og deretter ble en løsning av 0,90 g 4-nitrobenzylklorformiat i 15 ml tørr

acetonitril dråpevis tilsatt den resulterende blanding, under isavkjøling. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 30 minutter, hvoretter den ble konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og inndampingsresten ble fortynnet med etylacetat. Den fortynnede løsning ble vasket med vann og med en vandig løsning av natriumklorid, i nevnte rekkefølge, hvoretter den ble tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk og den resulterende destillasjonsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel ved anvendelse av en 7:1 volumetrisk blanding av etylacetat og cykloheksan som eluent, for å gi 2,28 g av tittelforbindelsen, i form av et amorft, fast stoff.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm-1:

1708, 1656, 1608, 1521, 1433, 1346, 1252.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

1,02 - 1,36 (3H, multiplett),

1,59 - 1,80 (3H, multiplett),

2,30 - 2,58 (1H, multiplett),

2.61 - 3,59 (5H, multiplett),

3,73 (2H, singlett),

3,78 & 3,79 (tilsammen 3H, to singletter),

3.62 - 4,92 (4H, multiplett),

4,97 - 5,30 (4H, multiplett),

6,85 (2H, dublett, J = 8,79 hz),

7,23 (2H, dublett, J = 8,79 hz),

7,41 - 7,52 (4H, multiplett),

8,17 Sc 8,23 (tilsammen 4H, to dubletter, J = 8,79 Hz).

7( iv) ( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- r2- metyl- 4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - piperazin- 1- ylkarbonyl1- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

23 ml trifluoreddiksyre, fulgt av 0,57 ml trifluormetan-sulf onsyre ble tilsatt dråpevis til en løsning av 2,26 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-[2-metyl-4-(4-nitrobenzyl oksykarbonyl)-piperazin-l-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (iii) ovenfor] i 3,48 ml anisol og den resulterende blanding ble opparbeidet og renset ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i syntese 4(ii), for å gi 1,88 g av tittelforbindelsen, i form av et amorft, fast stoff.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), ymaks cm<-1>:

1707, 1654, 1607, 1521, 1433, 1346.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

1,05 - 1,40 (3H, multiplett),

1,59 (1H, singlett),

1,85 - 2,00 (2H, multiplett),

2,71 - 3,73 (6H, multiplett),

3,78 - 5,08 (5H, multiplett),

5,15 - 5,31 (4H, multiplett),

7,40 - 7,52 (4H, multiplett),

8,17 - 8,25 (4H, multiplett).

Syntese 8

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- r3- metyl- 4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-piperazin- 1- ylkarbonyl]- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

8 ( i) ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksybenzvltio)- 2- r3- metvl- 4-( 4-nitrobenzyloksykarbonyl)- piperazin- 1- ylkarbonyl]- 1-( 4-nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese l(i), men ved anvendelse av 3,06 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 1,34 g N,N'-karbonyldiimidazol og 2,30 g 2-metyl-l-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-piperazin, fremkom 4,07 g av tittelforbindelsen. 8 ( ii) ( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- r3- metyl- 4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- piperazin- 1- ylkarbonyl!- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin 20 ml trifluoreddiksyre og deretter 0,50 ml trifluor-metansulf onsyre ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 2,0 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-[3-metyl-4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-piperazin-l-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor] i 3,08 ml anisol, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i 50 minutter. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen opparbeidet ved hjelp av den samme fremgangsmåte som er beskrevet i syntese 4(ii), for å gi 1,56 g av tittelforbindelsen, i form av et amorft, fast stoff.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), J^g^g<c>m"<1>:

1705, 1657, 1607, 1521, 1429, 1405, 1346.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), <5 ppm:

1.16 - 1,36 (3H, multiplett),

1,63 - 2,40 (3H, multiplett),

2,66 - 3,66 (6H, multiplett),

3,71 - 4,78 (5H, multiplett),

5,06 - 5,30 (4H, multiplett),

7,39 - 7,53 (4H, multiplett),

8.17 - 8,25 (4H, multiplett).

Syntese 9

( 2S, 4S)- 4- merkapto- 2- r( 2S)- 2- metyl- 4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - piperazin- 1- ylkarbonyl]- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 7, men ved anvendelse av 13,2 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 4,0 ml pivaloylklorid, 4,5 ml trietylamin og 6,5 g (3S)-l-t-butoksykarbonyl-3-metylpiperazin, fremkom 1,9 g av tittelforbindelsen, i form av et amorft, fast stoff.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), v^^g cm-1.

1706, 1653, 1607, 1521, 1434, 1406, 1346.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

1,19 - 1,30 (3H, multiplett),

1,62 (1H, singlett),

1,85 - 2,04 (2H, multiplett),

2,68 - 3,59 (6H, multiplett),

3,78 - 4,77 (5H, multiplett),

5,08 - 5,31 (4H, multiplett),

7,42 - 7,52 (4H, multiplett),

8,17 - 8,25 (4H, multiplett).

Syntese 10

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- r( 2R)- 2- metyl- 4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - piperazin- 1- ylkarbonyl1- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 7, men ved anvendelse av 1,3 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 0,40 ml pivaloylklorid, 0,45 ml trietylamin og 0,65 g (3R)-l-t-butoksykarbonyl-3-metylpiperazin, fremkom 0,17 g av tittelforbindelsen, i form av et amorft, fast stoff.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm"1:

1708, 1655, 1607, 1521, 1432, 1435.

Syntese 11

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- r( 3S)- 3- metyl- 4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- piperazin- 1- ylkarbonyl1- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 8, men ved anvendelse av 4,5 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 1,95 g N,N'-karbonyldiimidazol og 3,34 g (2S)-2-metyl-l-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-piperazin, fremkom 4,32 g av tittelforbindelsen, i form av et amorft, fast stoff.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm<-1>:

1705, 1657, 1607, 1522, 1429, 1405, 1346.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), 6 ppm:

1.16 - 1,36 (3H, multiplett),

1, 62 (1H, singlett),

1,70 - 2,04 (2H, multiplett),

2,69 - 2,86 (2H, multiplett),

2,98 - 4,18 (6H, multiplett),

4,23 - 4,74 (3H, multiplett),

5,02 - 5,33 (4H, multiplett),

7,40 - 7,53 (4H, multiplett),

8.17 - 8,26 (4H, multiplett).

Syntese 12

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- r( 3R)- 3- metyl- 4-( 4- nitrobenzyloksy-karbonvl)- piperazin- l- ylkarbonyll - 1-( 4- nitrobenzyloksy-karbonvl)- pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 8, men ved anvendelse av 0,23 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 0,10 g N,N'-karbonyldiimidazol og 0,17 g (2R)-2-metyl-l-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-piperazin, fremkom 0,21 g av tittelforbindelsen, i form av et amorft, fast stoff.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), _ cm<-1>:

1708, 1652, 1607, 1523, 1427, 1346.

Syntese 13

( 2S. 4S)- 2- rtrans- 2, 5- dimetyl- 4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-piperazin- 1- ylkarbonyl!- 4- merkapto- l-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 8, men ved anvendelse av 1,79 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 0,54 ml pivaloylklorid, 0,61 ml trietylamin og 1,29 g trans-2,5-dimetyl-l-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -piperaz in, fremkom 577 mg av tittelforbindelsen, i form av et amorft, fast stoff.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), v^^g cm-1:

1707, 1653, 1608, 1522, 1425, 1347.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

0,87 - 1,39 (6H, multiplett),

1,61 (1H, singlett),

1,68 - 2,04 (1H, multiplett),

2,60 - 2,88 (1H, multiplett),

2,95 - 3,59 (5H, multiplett),

4,07 - 4,95 (5H, multiplett),

4,97 - 5,36 (4H, multiplett),

7,40 - 7,53 (4H, multiplett),

8,16 - 8,25 (4H, multiplett).

Syntese 14

( 2S, 4S)- 2- rcis- 3. 5- dimetylpiperazin- l- ylkarbonyl)- 4- merkapto-1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 8, men ved anvendelse av 3,3 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 1,4 g N,N'-karbonyldiimidazol og 1,0 g cis-2,6-dimetylpiperazin, fremkom 1,56 g av tittelforbindelsen, i form av et amorft, fast stoff.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1.

1709, 1651, 1608, 1522, 1439, 1405, 1346.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 5 ppm:

1,05 - 1,29 (6H, multiplett),

1,85 - 1,96 (2H, multiplett),

2,12 - 3,72 (9H, multiplett),

4,04 - 4,17 (1H, multiplett),

4,40 - 4,74 (2H, multiplett),

5,03 - 5,36 (2H, multiplett),

7,40 - 7,52 (2H, multiplett),

8.17 - 8,23 (2H, multiplett).

Syntese 15

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- T4-\ 2 -( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-oksyetyl1- 1- homopiperazinylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- trifluormetansulfonat

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 8, men ved anvendelse av 5,0 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 2,2 g N,N'-karbonyldiimidazol og 6,81 g N-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-oksyetyl]-homopiperazin-bis-(trifluoracetat), fremkom 6,50 g av tittelforbindelsen.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (heksadeuterert dimetylsulfoksid, 270 MHz), 5 ppm:

1,60 - 1,83 (1H, multiplett),

1,94 - 2,25 (2H, multiplett),

2,65 - 2,90 (1H, multiplett),

3,00 - 4,85 (18H, multiplett),

5,02 - 5,40 (4H, multiplett),

7,49 - 7,71 (4H, multiplett),

8.18 - 8,30 (4H, multiplett).

Syntese 16

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2-( 4- karbamoylmetyI- l- homopiperazinylkarbonyl)- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 8, men ved anvendelse av 5,69 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 2,48 g N,N'-karbonyldiimidazol og 5,89 g N-karbamoylmetylhomopiperazin-bis-(trifluoracetat), fremkom 4,88 g av tittelforbindelsen.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm"1:

1707, 1680, 1647, 1520, 1432, 1404, 1344.

1,75 - 2,15 (3H, multiplett),

2,55 - 2,92 (4H, multiplett),

2,95 - 3,07 (1H, multiplett),

3,20 - 3,60 (6H, multiplett),

3,70 - 3,85 (1H, multiplett),

3,93 - 4,18 (2H, multiplett),

4,60 - 4,71 (1H, multiplett),

5,03 - 5,42 (2H, multiplett),

7,42 - 7,52 (2H, multiplett),

8,18 - 8,25 (2H, multiplett).

Syntese 17

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)- piperazin- l- ylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

17 ( i) Saltsur ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2-( 1- piperazinylkarbonyl) - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

3,57gN,N'-karbonyldiimidazol ble tilsatt til en løs-ning av 8,93 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -2-pyrrolidinkarboksylsyre i 89 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved rom-

temperatur i 30 minutter. Den reaksjonsblanding som derved fremkom, ble deretter tilsatt til en løsning av 5,17 g tørr piperazin i 178 ml tørr acetonitril, under isavkjøling, og blandingen ble omrørt i fire timer under de samme betingelser, hvoretter den ble konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk. Den resulterende inndampingsrest ble oppløst i 500 ml etylacetat og løsningen ble vasket fire ganger, hver gang med 300 ml vann og deretter én gang med 300 ml av en vandig løsning av natriumklorid. Etylacetatlaget ble utskilt og tørret over vannfri natriumsulfat, hvoretter 6 ml 4N løs-ning av hydrogenklorid i etylacetat ble tilsatt dråpevis til blandingen, under omrøring og deretter ble 500 ml dietyleter tilsatt. Det pulver som derved fremkom, ble oppsamlet ved hjelp av filtrering og tørret for å gi 11,49 g av tittelforbindelsen.

Dette produkts spektraldata er fullstendig identiske med dem for den forbindelse som er fremstilt som beskrevet i syntese 1(ii).

17( ii) ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2- f4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

En suspensjon av 5,0 g saltsur (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio) -2-(1-piperazinylkarbonyl)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor] og 2,35 g N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-acetamidin i 73 ml tørr acetonitril ble omrørt i et vannbad som ble holdt ved 48°C i tre timer. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen fridd fra urenheter ved hjelp av filtrering og filtratet ble konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk. Den resulterende inndampingsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av en 6:4 volumetrisk blanding av etylacetat og acetonitril som eluent, for å gi 5,41 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Dette produkts spektraldata er fullstendig identiske med dem for den forbindelse som ble fremstilt som beskrevet i syntese 1 (iii) .

17( iii) ( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- f4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)- piperazin- 1- ylkarbonyll - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin 25 ml trif luoreddiksyre og 1000/il trifluormetansulfon-syre ble tilsatt til en løsning av 4,90 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2- [4-(N-4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (ii) ovenfor] i 4,9 ml anisol, og den resulterende blanding ble omrørt i én time, under isavkøling, hvoretter løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk. Den resulterende destillasjonsrest ble vasket med dietyleter, for å frembringe et pulver. Dette pulver ble oppløst i en blanding av etylacetat og vann og den resulterende løsning ble gjort basisk ved tilsetning av en vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat. Etylacetatlaget ble utskilt, vasket med vann og med en vandig løsning av natriumklorid, i nevnte rekkefølge, og tørret over vannfri natriumsulfat. Løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, for å gi 4,0 g av tittelf orbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1:

1709, 1660, 1607, 1570, 1520, 1431, 1346, 1210, 1198, 1162 .

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz) , 5 ppm:

1,90 (1H, dublett, J = 8,8 Hz),

1,85 - 2,01 (1H, multiplett),

2,25&2,30 (tilsammen 3H, to singletter),

2,65 - 2,81 (1H, multiplett),

3,21 - 3,38 (1H, multiplett),

3.40 - 4,00 (8H, multiplett),

4,03 - 4,19 (2H, multiplett),

4,65 - 4,70 (tilsammen 1H, to tripletter, J = 7,8 Hz), 5,02 - 5,35 (4H, multiplett),

7.41 - 7,60 (4H, multiplett),

8,16 - 8,26 (4H, multiplett).

Syntese 18

( 2S . 4S)- 4- merkapto- 2-\( 3S)- 3-( 4- nitrobenzyloksYkarbonyl)-aminopyrrolidin- l- ylkarbonyll - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

18 ( i) ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2- r( 3S)- 3-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - aminopyrrolidin- l- ylkarbonyll- 1-( 4-nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

En løsning av 1,43 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre oppløst i 10 ml tørr tetrahydrofuran ble avkjølt til 0°C. 356 mg trietylamin, fulgt av 405 mg pivaloylklorid, ble tilsatt til den avkjølte løsning, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i 30 minutter. Ved avslutning av dette tidsrom, ble en blanding av 1,5 g (3S)-3-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -aminopyridin- trif luoracetat, 830 mg diisopropyletylamin og 7 ml tørr acetonitril tilsatt til løsningen og deretter ble temperaturen tillatt å stige. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2,5 timer, hvoretter den ble filtrert og filtratet ble fridd fra løsningsmidlet ved hjelp av destillering under redusert trykk. Den resulterende inndampingsrest ble fortynnet med etylacetat, og den fortynnede løs-ning ble vasket med en vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat og med en mettet vandig løsning av natriumklorid, i nevnte rekkefølge. Løsningen ble tørret over vannfri magnesiumsulfat og deretter ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk og destillasjonsresten ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av en 4:4:1 volumetrisk blanding av etylacetat, metylenklorid og acetonitril som eluent, for å gi 1,47 g av tittelforbindelsen, i form av pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm<-1>:

1716, 1625, 1609, 1519, 1346, 737.

1,54 - 1,65 (1H, multiplett),

1,72 - 1,86 (1H, multiplett),

2,57 - 2,69 (1H, multiplett),

2,99 - 3,13 (1H, multiplett),

3,72 (3H, dublett, J = 5,37 Hz),

3,15 - 4,15 (12H, multiplett),

4,36 - 4,58 (1H, multiplett),

5,00 - 5,23 (4H, multiplett),

6,87 (1H, dublett, J = 8,3 Hz),

7,26 (1H, dublett, J = 8,79 Hz),

7,46 - 7,62 (4H, multiplett),

7,70 - 7,80 (1H, multiplett),

8,15 - 8,25 (4H, multiplett).

18( ii) ( 2S■ 4S)- 4- merkapto- 2- r( 3S)- 3-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- aminopyrrolidin- l- ylkarbonyll - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

12 ml trifluoreddiksyre og 0,3 8 ml trifluormetan-sulf onsyre ble tilsatt til en løsning av 1,47 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-[(3S)-3-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-amino-pyrrol idin- 1-ylkarbonyl] -1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor] i 2,3 ml anisol, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i to timer. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk og destillasjonsresten ble vasket med heksan for å fjerne anisolen og deretter ble det tilsatt dietyleter. Blandingen ble deretter avkjølt til -78°C og det stivnede produkt ble brutt opp og utskilt ved hjelp av dekantering. Flere gjentakelser av denne fremgangsmåte gav et pulver- og oljeaktig materiale, som ble oppløst i 100 ml etylacetat for å gi en løsning. Den resulterende løsning ble vasket med en vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat og de vandige ut-vaskinger ble ekstrahert med 30 ml etylacetat. Utvaskingene ble kombinert med etylacetatløsningen og den kombinerte, organiske fase ble vasket med en vandig løsning av natriumklorid og tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble deretter fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, for å gi 1,26 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm"1:

1710, 1522, 1347, 854, 738.

1,60 - 2,20 (2H, multiplett),

2,62 - 2,75 (1H, multiplett),

3,08 - 3,13 (11H, multiplett),

4,37 - 4,59 (1H, multiplett),

5,02 - 5,26 (4H, multiplett),

7,47 - 7,81 (4H, multiplett),

8,16 - 8,26 (4H, multiplett).

Syntese 19

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- T( 3S)- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin- 3- ylaminokarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

19 ( i) ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksvbenzyltio)- 2- r( 3S)- 1-( t- butoksv-karbonyl)- pyrrolidin- 3- ylaminokarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

3,05 g N,N'-karbonyldiimidazol ble tilsatt til en løs-ning av 7,99 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -2-pyrrolidinkarboksylsyre i 80 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i to timer. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen avkjølt til 0°C, hvoretter en løsning av 3,34 g (3S)-3-amino-l-t-butoksykarbonylpyrrolidin i 30 ml tørr acetonitril ble tilsatt, og blandingen ble omrørt ved samme temperatur i 20 minutter. Den ble deretter omrørt ved romtem-

peratur i ytterligere 1,4 timer og ved 32°C i 45 minutter. Reaksjonsblandingen ble deretter konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og konsentratet ble fortynnet med 200 ml etylacetat. Den resulterende etylacetatløsning ble vasket to ganger med vann og deretter én gang med en mettet, vandig løsning av natriumklorid. Løsningen ble deretter tørret over vannfri magnesiumsulfat, hvoretter løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk. Destillasjonsresten ble omkrystallisert fra dietyleter, for å gi 9,11 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

19( ii) Saltsur ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksvbenzvltio)- 2- r( 3S)-pyrrol idin- 3- ylaminokarbonyll - 1- ( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

En blanding av 1,00 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-[(3S) -1-(t-butoksykarbonyl)-pyrrolidin-3-ylaminokarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor] og 10 ml etylacetat ble oppvarmet for å danne en løsning. 2,5 ml 4N løsning av saltsyre i etylacetat ble deretter tilsatt til denne løsning og den resulterende blanding ble oppvarmet under tilbakeløpskjøling i 30 minutter. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løsnings-midlet fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og deretter, med sikte på å fjerne syren, ble etylacetat tilsatt destillasjonsresten og løsningsmidlet ble igjen fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk. Destillasjonsresten ble finfordelt ved hjelp av dietyleter og vasket ved hjelp av dekantering for å gi 630 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

19( iii) ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2-\( 3S)- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 3- ylaminokarbonyll - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

23 0 mg diisopropyletylamin ble tilsatt til en suspensjon av 1,0 g saltsur (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-[(3S)-pyrrolidin-3-ylaminokarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (ii) ovenfor] og 240 mg 4-dimetylaminopyridin i 10 ml tørr acetonitril og den resulterende blanding ble avkjølt til 0°C. En løsning av 430 mg 4-nitrobenzylklorformiat i 4 ml tørr acetonitril ble deretter tilsatt til blandingen. Blandingen ble deretter omrørt ved romtemperatur i tre timer, hvoretter en løsning av 117 mg 4-nitrobenzylklorformiat i 2 ml acetonitril ble tilsatt og blandingen ble omrørt ved samme temperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen fridd fra løsningsmidlet ved hjelp av destillering under redusert trykk og destillasjonsresten ble fortynnet med 50 ml metylenklorid. Den fortynnede løsning ble vasket med en mettet, vandig løs-ning av natriumklorid. De vandige utvaskninger ble ekstrahert med metylenklorid. De organiske ekstrakter og metylenklorid-løsningen ble kombinert og tørret over vannfri magnesiumsulfat, og deretter ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk. Den resulterende destilla-sj onsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av en 4:1 volumetrisk blanding av metylenklorid og acetonitril som eluent, for å gi 862 mg av tittelforbindelsen, i form av pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks#cm<-1>:

1709, 1521, 1345, 1109, 854, 738.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), 6 ppm:

1,80 - 1,98 (1H, multiplett),

2,05 - 2,25 (1H, multiplett),

2,30 - 2,50 (1H, multiplett),

3,10 - 3,20 (1H, multiplett),

3,40 - 3,55 (2H, multiplett),

3,79 (3H, singlett),

3,20 - 3,90 (8H, multiplett),

4,20 - 4,30 (1H, multiplett),

4,42 - 4,48 (1H, multiplett),

5,13 - 5,26 (4H, multiplett),

6,82 - 6,87 (2H, multiplett),

7,19 - 7,26 (2H, multiplett),

7,45 - 7,53 (4H, multiplett),

8,19 - 8,24 (4H, multiplett).

19( iv) ( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- r( 3S)- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- 3- ylaminokarbonyll - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

6,5 ml trifluoreddiksyre og 0,21 ml trifluormetan-sulfonsyre ble tilsatt til en løsning av 835 mg (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-[(3S)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-3-ylaminokarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (iii) ovenfor] i 1,3 ml anisol, under isavkjøling, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk og den resulterende inndampingsrest ble først vasket med heksan for å fjerne anisolen og deretter blandet med dietyleter. Blandingen ble avkjølt til -78°C og det stivnede produkt ble brutt opp og utskilt ved hjelp av dekantering. Flere repetisjoner av denne fremgangsmåte gav 940 mg av tittelforbindelsen, i form av pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm"1:

1702, 1523, 1347, 856, 739.

1,55 - 2,15 (2H, multiplett),

2,55 - 2,65 (1H, multiplett),

3.05 - 3,61 (7H, multiplett),

3,87 - 4,02 (1H, multiplett),

4,10 - 4,26 (2H, multiplett),

5.06 - 5,20 (4H, multiplett),

7,55 - 7,65 (4H, multiplett),

8,18 - 8,25 (4H, multiplett).

Syntese 20

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2-\( 3R)- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin- 3- ylaminokarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 19, men ved anvendelse av 6,4 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 2,40 g N,N'-karbonyldiimidazol og 2,7 g (3R)-3-amino-l-t-butoksykarbonylpyrrolidin, fremkom 750 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm<-1>:

1705, 1522, 1347, 855, 735.

Syntese 21

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2-\( 3S)- 3- dimetylaminopyrrolidin- 1- ylkarbonyl! - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidintrifluor-metansulf onat

21 ( i) ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2- r( 3S)- 3- dimetylaminopyrrolidin- 1- ylkarbonyl 1 - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

En løsning av 924 mg (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre i 10 ml tetrahydrofuran ble avkjølt til -20°C og 209 mg trietylamin ble tilsatt, fulgt av 250 mg pivaloylklorid. Den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i fem minutter og deretter ble en blanding av 651 mg (3S)-3-dimetylamino-pyrrolidintrifluoracetat, 560 ml diisopropyletylamin og 7 ml tørr acetonitril tilsatt til blandingen. Reaksjonsblandingens temperatur ble tillatt å øke gradvis, og blandingen ble omrørt ved 0°C i én time. Løsningsmidlet ble deretter fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk. Den resulterende destillasjonsrest ble fortynnet med etylacetat, og løsningen ble vasket med en vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat og med en mettet, vandig løsning av natriumklorid, i nevnte rekkefølge. Den organiske løsning ble tørret over vannfri magnesiumsulfat, og løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk. Destillasjonsresten ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av en 3:1 volumetrisk blanding av acetonitril og etanol som eluent, for å gi 884 mg av tittelforbindelsen, i form av pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1:

1710, 1654, 1512, 1345, 1109, 857, 738.

1,49 - 3,31 (15H, multiplett),

3,35 - 3,57 (2H, multiplett),

3,71 - 4,00 (6H, multiplett),

4,44 - 4,56 (1H, multiplett),

5,00 - 5,21 (2H, multiplett),

6,88 (2H, dublett, J = 8,79 Hz)

7,27 (2H, dublett, J = 8,31 Hz),

7,51 - 7,61 (2H, multiplett),

8,19 - 8,26 (2H, multiplett).

21( ii) ( 2S, 4S)- 4- merkapto- 2- \ ( 3S)- 3- dimetylaminopyrrolidin- l-ylkarbonyll - 1- ( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin-trifluormetansulfonat

8,5 ml trifluoreddiksyre og 0,28 ml trifluormetan-

sulfonsyre ble tilsatt, under isavkjøling, til en suspensjon av 845 mg (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-[(3S)-3-dimetylaminopyrrolidin-1-ylkarbonyl-1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor] i 1,7 ml anisol, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løs-ningsmidlet fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk og den resulterende destillasjonsrest ble først vasket med heksan for å fjerne anisolen og deretter blandet med dietyleter. Blandingen ble avkjølt til -78°C og det stivnede produkt ble brutt opp og utskilt ved hjelp av dekantering. Flere repetisjoner av denne fremgangsmåte gav 1,14 g av tittelforbindelsen, i form av pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmakstcm-1:

1705, 1656, 1523, 1348, 857.

1,70 - 4,10 (18H, multiplett),

4,47 - 4,66 (1H, multiplett),

5,04 - 5,27 (2H, multiplett),

7,51 - 7,65 (2H, multiplett).

Syntese 22

( 2S, 4S)- 4- merkapto- 2-{ ( 3S)- 3- fN- metyl- N-( 4- nitrobenzyloksy-karbonvl) - amino] - pyrrolidin- 1- ylkarbonyl}- 1- ( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 18, men ved anvendelse av 1,21 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 343 mg pivaloylklorid og 1,27 g (3S)-3-[N-metyl-N- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) -amino] -pyrrolidin-trifluoracetat, fremkom 1,21 g av tittelf orbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1.

1709, 1651, 1522, 1346, 856, 737.

Syntese 23

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- f( 3S)- 3-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonyl-acetimidoylamino)- pyrrolidin- 1- ylkarbonyl]- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

23( i) ( 2S, 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2- r( 3S)- 3- aminopyrrolidin- 1- ylkarbonyl]- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

2,92 g N,N'-karbonyldiimidazol ble tilsatt til en løs-ning av 6,70 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -2-pyrrolidinkarboksylsyre i 50 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i én time. En løsning av 1,55 g (3S)-3-aminopyrrolidin i 10 ml tørr acetonitril ble deretter tilsatt til blandingen, under isavkjøling, og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble fridd fra løsningsmidlet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og destillasjonsresten ble fortynnet med etylacetat. Den fortynnede løsning ble vasket med vann og med en vandig løsning av natriumklorid, i nevnte rekkefølge, hvoretter den ble tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løsnings-midlet ble deretter fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og den resulterende inndampingsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av en 1:1 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent, for å gi 4,10 g av tittelforbindelsen, i form av pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr),<y>maks>cm<-1>:

1708, 1651, 1609, 1512, 1440, 1404, 1346, 1248, 1174.

1,40 - 2,04 (3H, multiplett),

2,57 - 2,77 (1H, multiplett),

2,90 - 3,93 (10H, multiplett),

3,72 & 3,74 (sammen 3H, to singletter),

3,78 (2H, singlett),

4,33 - 4,58 (1H, multiplett),

4,99 - 5,26 (2H, multiplett),

6,88 (2H, dublett, J = 8,79 H) ,

7,27 (2H, dublett, J = 8,79 H),

7,48 - 7,67 (2H, multiplett),

8,14 - 8,29 (2H, multiplett).

23 ( ii) Saltsur ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksvbenzYltio)- 2- r( 3S)- 3-aminopyrrolidin- l- ylkarbonyn- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

4,3 7 ml 4N løsning av hydrogenklorid i etylacetat ble tilsatt, under isavkjøling, til en løsning av 3,00 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-[(3S)-3-aminopyrrolidin-l-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor] i 30 ml etylacetat, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i 30 minutter. Ved avslutning av dette tidsrom, ble den fortynnet med etylacetat og det pulver som ble utfelt, ble oppsamlet ved hjelp av filtrering og tørret, for å gi 3,20 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1:

1707, 1656, 1609, 1585, 1512, 1440, 1405, 1346, 1249, 1175 .

1,49 - 1,78 (1H, multiplett),

1,88 - 2,33 (2H, multiplett),

2,59 - 2,75 (1H, multiplett),

2,96 - 3,12 (1H, multiplett),

3,12 - 3,97 (7H, multiplett),

3,72 & 3,74 (tilsammen 3H, to singletter),

3,78 & 3,79 (tilsammen 2H, to singletter),

4,36 - 4,61 (1H, multiplett),

5,00 - 5,28 (2H, multiplett),

6,88 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

7,20 - 7,31 (2H, multiplett),

7,46 - 7,65 (2H, multiplett),

8,19 - 8,28 (2H, multiplett),

8,30 - 8,60 (3H, multiplett).

23( iii) ( 2S. 45)- 4-( 4- metoksvbenzYltio)- 2- r( 3S)- 3-( N- 4- nitrobenzyl oksykarbonyl acet imidoyl amino) - pyrrol idin- l- yl- karbonyl 1 - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

En suspensjon av 1,00 g saltsur (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio) -2-[(3S)-3-aminopyrrolidin-1-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (ii) ovenfor] og 0,47 g N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-acetamidin i 2 ml tørr acetonitril. ble omrørt ved 53 °C i to timer. Reaksjonsblandingen ble deretter fridd fra urenheter ved hjelp av filtrering, og filtratet ble konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk. Konsentratet ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av en 45:45:5 volumetrisk blanding av metylenklorid, etylacetat og metanol som eluent, for å gi 0,89 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm<-1>:

1709, 1643, 1619, 1609, 1557, 1521, 1441, 1402, 1346, 1247, 1226, 1199, 1175.

1.49 - 2,25 (3H, multiplett),

2,09&2,10 (tilsammen 3H, to singletter),

2.50 - 2,74H, multiplett),

3,00 - 3,92 (7H, multiplett),

3,71&3,73 (tilsammen 3H, to singletter),

3,77 (2H, singlett),

4,15 - 4,63 (2H, multiplett),

5,00 - 5,31 (4H, multiplett),

6.87 (1H, dublett, J = 8,79 Hz),

6.88 (1H, dublett, J = 8,30 Hz),

7,25 (1H, dublett, J = 8,30 Hz),

7,27 (1H, dublett, J = 8,79 Hz),

7,43 - 7,70 (4H, multiplett),

8,13 - 8,29 (4H, multiplett).

23( iv) ( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2-\( 3S)- 3-( N- 4- nitrobenzyloksy-karbonylacetimidoylamino)- pyrrolidin- 1- ylkarbonyl]- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

4,56 ml trif luoreddiksyre og 208/xl trif luormetansulf onsyre ble tilsatt, under isavkjøling, til en løsning av 0,87 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-[(3S)-3-(N-4-nitro-benzyloksykarbonylacet imidoylamino)-pyrrolidin-1-yl-karbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (iii) ovenfor] i 1,29 ml anisol, og den resulterende blanding ble omrørt under de samme betingelser i 1,5 time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og den resulterende destillasjonsrest ble vasket med dietyleter og tørret under vakuum, for å gi 1,10 g av trifluormetan-sulf onatet av tittelforbindelsen, i form av pulver. Hele mengden av dette salt ble oppløst i en blanding av etylacetat og vann, og oppløsningen ble gjort basisk ved tilsetning av en IN vandig løsning av natriumhydroksid. Etylacetatsjiktet ble fraskilt, vasket med vann og med en vandig løsning av natriumklorid, i denne rekkefølge, og tørret over vannfritt

magnesiumsulfat. Oppløsningsmidlet ble fjernet ved destillering under redusert trykk for å gi 662 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-<1>:

1708, 1650, 1607, 1553, 1520, 1440, 1404, 1346, 1217, 1170 .

1.59 - 2,28 (2H, multiplett),

2,10 & 2,11 (tilsammen 3H, to singletter),

2.60 - 2,83 (1H, multiplett),

3,08 - 4,64 (10H, multiplett),

5,01 - 5,42 (4H, multiplett),

7,45 - 7,73 (4H, multiplett),

8,14 - 8,31 (4H, multiplett).

Syntese 24

( 2S, 4S)- 4- merkapto- 2- f ( 3S)- 3-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonyl-formimidoylamino)- pyrrolidin- 1- ylkarbonyl! - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntesene 23 (iii) og 23(iv), men ved anvendelse av 1,00 g saltsur (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-[(3S) -3-aminopyrrolidin-1-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i syntese 23 (ii)] og 410 mg N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -formamidin, fremkom 670 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), J^g^s _ cm<-1>:

1707, 1645, 1604, 1520, 1441, 1404, 1346, 1188, lill.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13+ D20, 270 MHz),

6 ppm:

1,71 - 2,32 (3H, multiplett),

2,60 - 2,84 (1H, multiplett),

3.19 - 4,18 (8H, multiplett),

4,36 - 4,57 (1H, multiplett),

4,93 - 5,40 (4H, multiplett),

7,40 - 7,61 (4H, multiplett),

8,12 - 8,30 (4H, multiplett),

8,42 (1H, singlett) .

Syntese 25

( 2S, 4S)- 4- merkapto- 2- I" ( 3S)- 1-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)- pyrrolidin- 3- ylaminokarbonyll - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntesene 23(iii) og 23(iv), men ved anvendelse av 1,20 g saltsur (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -2-[(3S)-pyrrolidin-3-ylaminokarbonyl]-pyrrolidin og 490 mg N-(4-nitrobenzyloksykarbonylformamidin, fremkom 750 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm<-1>:

1721, 1678, 1664, 1602, 1520, 1449, 1439, 1403, 1346, 1234, 1222.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3+ D20, 270 MHz) ,

6 ppm:

1,87 - 2,83 (4H, multiplett),

3,24 - 4,08 (7H, multiplett),

4.20 - 4,63 (2H, multiplett),

5.14 - 5,38 (4H, multiplett),

7,45 - 7,60 (4H, multiplett),

8.15 - 8,29 (4H, multiplett),

8, 60 (1H, singlett) .

Syntese 26

( 2S, 4S)- 4- merkapto- 2- f( 3S)- 1-( N- 4- nitrobenzyloksvkarbonyl-acetimidoyl)- pyrrolidin- 3- ylaminokarbonyll - 1-( 4- nitrobenzyloksvkarbonyl)- pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntesene 23 (iii) og 23(iv), men ved anvendelse av 1,08 g saltsur (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -2- [ (3S)-pyrrolidin-3-ylaminokarbonyl]-pyrrolidin og 440 mg N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-acetamidin, fremkom 608 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1:

1701, 1655, 1609, 1555.

Syntese 27

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- f( 3R)- 1-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)- pyrrolidin- 3- ylaminokarbonyll - 1-( 4- nitrobenzyloksvkarbonyl)- pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntesene 23 (iii) og 23(iv), men ved anvendelse av 1,38 g saltsur (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -2- [ (3R)-pyrrolidin-3-ylaminokarbonyl]-pyrrolidin og 564 mg N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-formamidin, fremkom 795 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), v^k^ cm-1:

1710, 1650, 1587, 1518, 1442, 1346, 1170.

Syntese 28

( 2S, 4S)- 4- merkapto- 2-{ N- metyl- N-\( 3S)- 1-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin- 3- yll - karbamoyl}-!-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 19, men ved anvendelse av 8,0 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 3,05 g N,N'-karbonyldiimidazol og 3,37 g

(3S)-3-metylamino-l-t-butoksykarbonylpyrrolidin, fremkom 504 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1:

1704, 1522, 1346, 854, 736.

Syntese 29

( 2S. 4S)- 4- merkaoto- 2-( N- metyl- N- r( 3S)- 1-( N- 4- nitrobenzvloksv-karbonvlformimidoyl)- pyrrolidin- 3- yll - karbamoyl}-!-( 4- nitrobenzvl oksvkarbonyl) - pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntesene 23(iii) og 23(iv), men ved anvendelse av 1,00 g saltsur (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -2-[N-metyl-N-[(3S)-pyrrolidin-3-yl]-karbamoyl]-pyrrolidin og 405 mg N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-formamidin, fremkom 620 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1:

1707, 1648, 1514, 1404, 1347, 1173.

Syntese 30

( 2S. 4S)- 2- r3- karbamoyl- 4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- 1-pjperazinvlkarbonyll- 4- merkapto- l-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 8, men ved anvendelse av 2,18 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 0,79 g N,N'-karbonyldiimidazol og 1,81 g 2-karbamoyl-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-piperazin, fremkom 2,13 g av tittelforbindelsen, i form av et amorft, fast stoff.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm"1:

1706, 1607, 1521, 1432, 1405, 1346.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

1,71 - 2,04 (3H, multiplett),

2,42 - 3,46 (5H, multiplett),

3,90 - 4,93 (6H, multiplett),

5,02 - 5,36 (4H, multiplett),

5,45 - 6,77 (2H, multiplett),

7,42 - 7,54 (4H, multiplett),

8,14 - 8,26 (4H, multiplett).

Syntese 31

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- T4-( 2- fluoretyl)- 1- homopiperazinyl-karbonyll - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidintrifluormetansulfonat

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 8, men ved anvendelse av 3,5 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 1,53 g N,N'-karbonyldiimidazol og 5,83 g N-(2-fluoretyl)-homopiperazin-bis-(trifluoracetat), fremkom 4,0 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm"<1>:

1784, 1698, 1662, 1524, 1441, 1348, 1286, 1225, 1170, 1030 .

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

1,62 - 1,83 (1H, multiplett),

1,96 - 2,25 (2H, multiplett),

2,65 - 2,90 (1H, multiplett),

2,95 - 4,20 (14H, multiplett),

4,60 - 4,95 (2H, multiplett),

5,00 - 5,30 (2H, multiplett),

7,50 - 7,70 (2H, multiplett),

8,19 - 8,26 (2H, multiplett).

Syntese 32

( 2S, 4S)- 4- merkapto- 2- r( 3S)- 3-( imidazol- l- yl)- pyrrolidin- 1- ylkarbonyl 1 - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

32 ( i) ( 2S. 4S) - 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2- T( 3S)- 3-( imidazol- l-yl) - pyrrolidin- 1- ylkarbonyl1- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

1,09 g N,N'-karbonyldiimidazol ble tilsatt til en løs-ning av 2,5 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -2 -pyrrolidinkarboksylsyre i 25 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 30 minutter. En løsning av 850 mg (3S)-3-(imidazol-l-yl) -pyrrolidin i 5 ml tørr acetonitril ble deretter tilsatt, og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i to timer og deretter ved 40°C i ytterligere fire timer. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og den resulterende inndampingsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering med reversert fase gjennom 200 ml "Cosmo Sil 75Clg-PREP" (et varemerke for et produkt fra Nacalai Tesque), ved anvendelse av en fremgangsmåte med gradienteluering, med blandinger av acetonitril og vann i det volumetriske område fra 50:50 til 55:45 som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen, ble kombinert og konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk, for å gi 2,54 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm<-1>:

1708, 1656, 1609, 1512, 1438, 1404, 1345, 1246, 1173, 1110 .

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

1,88 - 2,05 (1H, multiplett),

2,15 - 2,31 (1H, multiplett),

2,36 - 2,57 (2H, multiplett),

3,02 - 3,18 (1H, multiplett),

3,31 - 3,40 (1H, multiplett),

3,49 - 3,63 (1H, multiplett),

3,73 & 3,74 (tilsammen 2H, to singletter),

3,78 & 3,79 (tilsammen 3H, to singletter),

3,80 - 4,08 (3H, multiplett),

4,26 - 4,48 (2H, multiplett),

4,71 - 4,89 (1H, multiplett),

5,00 - 5,34 (2H, multiplett),

6,76 - 7,60 (9H, multiplett),

8,15 - 8,27 (2H, multiplett).

32 ( ii) ( 2S. 4S) - 4- merkapto- 2- I" ( 3S) - 3- ( imidazol- l- yl) - pyrrolidin- 1- ylkarbonyl1- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

585 ill trif luormetansulf onsyre ble tilsatt, under isav-kjøling, til en løsning av 2,5 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio) -2-[(3S)-3-(imidazol-l-yl)-pyrrolidin-1-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor] i en blanding av 5 ml anisol og 15 ml trifluoreddiksyre, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i én time og deretter ved 35°C i ytterligere 30 minutter. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk, og den resulterende inndampingsrest ble vasket fire ganger med dietyleter, for å gi et fargeløst pulver. Dette pulver ble suspendert i etylacetat, og suspensjonen ble gjort basisk ved tilsats av en vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat. Etylacetatlaget ble utskilt og vasket med en vandig løsning av natriumklorid, hvoretter den ble tørket over vannfritt natriumsulfat. Løsningsmidlet ble deretter fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, for å gi 1,9 g av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmakg cm-1.

1706, 1655, 1521, 1440, 1405, 1346.

Kjernemagnetisk resonansspektrum ((CDC13+ D20, 270 MHz), ppm:

1,90 - 2,09 (1H, multiplett),

2,15 - 2,37 (1H, multiplett),

2,42 - 2,83 (2H, multiplett),

3,20 - 3,35 (1H, multiplett),

3,41 - 4,93 (8H, multiplett),

5,02 - 5,37 (2H, multiplett),

6,79 - 8,26 (7H, multiplett).

Syntese 33

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2-\( 3S)- 3-( 1. 2. 4- triazol- l- yl)- pyrrolidin-1- yl- l-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

33( i) ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2- f( 3S)- 3-( 1. 2. 4- triazol-l- yl) - pyrrolidin- 1- ylkarbonyl!- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 18(a), men ved anvendelse av 768 mg (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 218 mg pivaloylklorid og 238 mg (3S)-3-[1,2,4-triazol-l-yl)-pyrrolidin-trifluoracetat, fremkom 803 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), "maks cm<-1>:

1709, 1656, 1521, 1346, 857, 738.

1.40 - 1,70 (1H, multiplett),

2,18 - 2,75 (2H, multiplett),

3,00 - 3,15 (1H, multiplett),

3,15 - 4,10 (13H, multiplett),

5.00 - 5,24 (3H, multiplett),

6,85 - 6,90 (2H, multiplett),

7,24 - 7,29 (2H, multiplett),

7,45 - 7,61 (2H, multiplett),

8,14 - 8,25 (2H, multiplett),

8.50 - 8,62 (1H, multiplett).

( 33( ii) ( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- r( 3S)- 3-( 1, 2. 4- triazol- l- yl)-pyrrolidin- l- yl- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 18(b), men ved anvendelse av det hele av (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-[(3S)-3-(1,2,4-triazol-l-yl)-pyrrolidin-1-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor], fremkom 803 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr),J^aks. cm"1:

1706, 1652, 1522, 1346, 857, 739.

1,56 - 1,78 (1H, multiplett),

2,20 - 2,55 (2H, multiplett),

2,61 - 2,82 (1H, multiplett),

3,09 - 4,09 (9H, multiplett),

4.41 - 4,64 (1H, multiplett),

5.01 - 5,26 (3H, multiplett),

7,47 - 7,65 (2H, multiplett),

8,14 - 8,26 (2H, multiplett),

8.51 - 8,62 (1H, multiplett).

Syntese 34

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2-\( 3R)- 3-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-aminopyrrolidin- l- ylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 18, men ved anvendelse av 1,29 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidinkarboksylsyre, 365 mg pivaloylklorid og 1,14 g (3R)-3-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-aminopyrrolidin-trifluoracetat, fremkom 1,09 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1:

1707, 1653, 1523, 1347, 855.

Syntese 35

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- r( 3R)- 3-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonyl-acetimidoylamino)- pyrrolidin- 1- ylkarbonyl1- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 23, men ved anvendelse av 3,00 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidinkarboksylsyre, 0,70 g (3R)-3-aminopyrrolidin, fremkom 1,31 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), v^^g cm"<1>:

1706, 1651, 1552, 1441, 1345, 1171.

1,56 - 2,25 (2H, multiplett),

2,09 & 2,11 (tilsammen 3H, to singletter),

2,62 - 2,83 (1H, multiplett),

3,04 - 4,09 (8H, multiplett),

4.14 - 4,62 (2H, multiplett),

4,98 - 5,37 (4H, multiplett),

7,43 - 7,70 (4H, multiplett),

8.15 - 8,30 (4H, multiplett).

Syntese 3 6

( 2S , 4S)- 4- merkapto- 2-\( 3R)- 3-( N- 4- nitrobenzyloksvkarbonyl-formimidoylamino)- pyrrolidin- 1- ylkarbonyl 1 - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntesene 23 (iii) og 23(iv), men ved anvendelse av 0,75 g saltsur (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-[(3R)-3-aminopyrrolidin-l-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin og 0,31 g N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-formamidin, fremkom 0,51 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), v^^s cm"<1>:

1706, 1644, 1521, 1405, 1345, 1186.

Syntese 37

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2-\ 2 -( 4- nitrobenzyloksykarbonyloksymetyl)-4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- 1- piperazinylkarbonyll- 1-( 4-nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

37 ( i) ( 2S. 4S)- 2-( 3- hydroksymetyl- l- piperazinylkarbonyl)- 4-( 4-metoksybenzyltio)- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 8, men ved anvendelse av 10,0 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 4,4 g N,N'-karbonyldiimidazol og 4,0 g 2-hydroksymetylpiperazin, fremkom 6,9 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

37( ii) ( 2S, 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2 - T3-( 4- nitrobenzyl-oksykarbonyloksymetyl) - 4- ( nitrobenzyloksykarbonyl) - 1-piperazinylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 7 (iii), men ved anvendelse av 3,5 g (2S,4S)-2-(3-hydroksymetyl-l-piperazinylkarbonyl)-4-(4-metoksybenzyltio) -1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor], 4,2 g 4-nitrobenzylklorformiat og 2,4 g 4-dimetylaminopyridin, fremkom 4,9 g av tittelforbindelsen, i form av et amorft, fast stoff.

37 ( iii). ( 2S. 4S) - 4- merkapto- 2- T3- ( 4- nitrobenzyloksykarbonyl-oksvmetyl)- 4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- 1- piperazinylkarbonyl 1 - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 4(b), men ved anvendelse av 0,23 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-[3-(4-nitrobenzyloksykarbonyloksy-metyl)-4-(nitrobenzyloksykarbonyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor], 0,28 ml anisol, 2,3 ml trifluoreddiksyre og 45 y. 1 trif luormetansulf onsyre, fremkom 190 mg av tittelforbindelsen, i form av et amorft, fast stoff.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm<-1>:

1707, 1608, 1521, 1430, 1406, 1345.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), <5 ppm:

1,68 (1H, singlett

1,86 - 1,99 (1H, multiplett),

2,62 - 2,69 (1H, multiplett),

2,93 (1H, dublett av dubletter, J = 13,67 & 3,91 Hz), 3.10 - 3,63 (4H, multiplett),

3,91 - 4,75 (8H, multiplett),

5.11 - 5,30 (6H, multiplett),

7,47 (6H, dublett, J = 8,30 Hz),

8,14 - 8,26 (6H, multiplett).

Syntese 38

( 2S, 4S)- 4- merkapto- 2- T3-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- 4-( 4-nitrobenzyloksykarbonyl)- 1- piperazinylkarbonyll- 1-( 4- nitro-benzvloksykarbonyl)- pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 8, men ved anvendelse av 0,47 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 0,20 g N,N'-karbonyldiimidazol og 0,70 g 2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -piperazin, fremkom 270 mg av tittelforbindelsen, i form av et amorft, fast stoff.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr),J^ma^g cm-1:

1707, 1653, 1607, 1522, 1430, 1346.

Syntese 39

( 2S, 4S)- 4- merkapto- 2-[( 3R)- 1-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)- pyrrolidin- 3- ylaminokarbonyll - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntesene 23(iii) og 23(iv), men ved anvendelse av 0,76 g saltsur (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -2-[(3R)-pyrrolidin-3-ylaminokarbonyl]-pyrrolidin og 0,33 g N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-acetamidin, fremkom 0,45 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1:

1720, 1665, 1520, 1437, 1345, 1234.

Syntese 40

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2-{ N-\ 2 -( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)- aminoetyll- karbamoyl}-!-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 17, men ved anvendelse av 815 mg (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 450 mg etylendiamin og 430 mg N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -acetamidin, fremkom 295 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm<-1>:

1705, 1665, 1568, 1517, 1346, 1225.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3+ D20, 270 MHz), ppm:

2,23 (3H, singlett),

2,1 - 2,4 (1H, bred),

2,5 - 2,8 (1H, bred),

3,3 - 3,65 (6H, multiplett),

3,95 - 4,45 (2H,- multiplett) ,

5,15 - 5,30 (4H, multiplett),

7,45 - 7,60 (4H, multiplett),

8.17 - 8,27 (4H, multiplett).

Syntese 41

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2-{ N-\ 2 -( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)- aminoetyll- karbamoyl}-!-( 4- nitrobenzyloksy-karbonvl)- pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 17, men ved anvendelse av 850 mg (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 450 mg etylendiamin og 400 mg N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -f ormamidin, fremkom 280 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), J^a^g cm<-1>:

1705, 1665, 1568, 1517, 1346, 1225.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

2,11 - 2,30 (1H, multiplett),

2,55 - 2,80 (1H, multiplett),

3,30 - 3,48 (3H, multiplett),

3,52 - 3,75 (3H, multiplett),

3,93 - 4,06 (1H, multiplett),

4.18 - 4,32 (1H, multiplett),

5,13 - 5,36 (4H, multiplett),

7,43 - 7,60 (4H, multiplett),

8,15 - 8,27 (4H, multiplett),

8,47 & 8,97 (1H, to singletter).

Syntese 42

( 2S , 4S)- 4- merkapto- 2-( 3- dimetylamino- l. 2, 5. 6- tetrahydro-pyrazin- 1- ylkarbonyl)- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin- trifluormetansulfonat

42 ( i) ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2-( 3- dimetylamino-1. 2 , 5 . 6- tetrahydropyrazin- l- ylkarbonyl)- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese l(i), men ved anvendelse av 446 mg (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 178 mg N,N'-karbonyldiimidazol, 289 mg 3-dimetylamino-1,2,5,6-tetrahydropyrazin-bis-(trifluoracetat) og 289/il diisopropyletylamin, fremkom 460 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

42( ii) ( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2-( 3- dimetylamino- l. 2, 5. 6- tetra-hydropyrazin- 1- ylkarbonyl) - 1- ( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- trifluormetansulfonat

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese l(iv), men ved anvendelse av det hele av (2S, 4S) -4- (4-metoksybenzyltio) -2- (3-dimetylamino-l, 2,5,6-tetrahydropyrazin-1-ylkarbonyl-1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor], fremkom 451 mg av tittelforbindelsen, i form av en viskøs olj e.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (væskefilm), vmaks cm-1:

1705, 1670, 1610, 1525, 1445, 1409, 1348, 1287, 1228.

1,58 - 1,78 (1H, multiplett),

2,71 - 2,86 (1H, multiplett),

2,88 - 3,86 (12H, multiplett),

3,90 - 4,10 (1H, multiplett),

4,48 - 4,68 (2H, multiplett),

4,75 - 4,92 (1H, multiplett),

5,02 - 5,23 (2H, multiplett),

7,52 Sc 7,63 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz), 8,21 Sc 8,23 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz).

Syntese 43

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)- aminopiperidin- 1- yl- karbonyl)- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 1, men ved anvendelse av 446 mg (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 220 mg 4-t-butoksykarbonylaminopiperidin og 119 mg N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-acetamidin, fremkom 307 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm"1:

1781, 1703, 1633, 1610, 1345.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), 5 ppm:

1,40 - 2,15 (7H, multiplett),

2,21 Sc 2,32 (tilsammen 3H, to singletter),

2,65 - 2,80 (1H, multiplett),

3,10 - 3,50 (3H, multiplett),

3,65 - 4,75 (6H, multiplett),

5,23 (4H, singlett),

7,48 - 7,60 (4H, multiplett),

8,18 - 8,26 (4H, multiplett).

Syntese 44

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksvkarbonyl-acetimidoyl)- piperazin- l- ylkarbonyll- 1- metylpyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 1, men ved anvendelse av 282 mg (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-l-metyl-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 203 mg 1-t-butoksykarbonylpiperazin og 258 mg N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -acetamidin, fremkom 225 mg av tittelforbindelsen, i form av en viskøs olje.

Tittelforbindelsen ble også fremstilt ved hjelp av acylering av 1-(N-4-nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-piperazin med 4-(4-metoksybenzyltio)-1-metylpyrrolidin-2-karboksylsyre med påfølgende avbeskyttelse av reaksjons-produktet.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (væskefilm) , v^^g cm<-1>:

1780, 1705, 1635, 1610, 1346.

1,77 - 1,90 (1H, multiplett),

2,14 (3H, singlett),

2,82 (3H, singlett),

2,95 - 3,05 (1H, multiplett),

3,10 - 3,28 (3H, multiplett),

3,45 - 3,80 (8H, multiplett),

4,60 (1H, dublett av dublétter, J = 9,3 & 8,3 Hz),

5,28 (2H, singlett),

7,66 (2H, dublett, J = 8,8 Hz),

8,25 (2H, dublett, J = 8,8 Hz).

Syntese 45

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- r( 3S)- 3-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-aminopyrrolidin- 1 - ylkarbonyl 1 - 1 - metvlpyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 18, men ved anvendelse av 1,0 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-l-metyl-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 463 mg pivaloylklorid og1,45 g (3S)-3-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-aminopyrrolidin-trifluoracetat, fremkom 1,07 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1:

1703, 1655, 1522, 1347, 854, 737.

1,65 - 3,85 (15H, multiplett),

3,85 - 4,20 (2H, multiplett),

5.19 (2H, singlett),

7,62 (2H, dublett, J = 8,3 0 Hz),

7,70 - 7,90 (1H, multiplett),

8.20 - 8,30 (2H, multiplett).

Syntese 46

( 2S, 4S)- 4- merkapto- 2-\( 3S)- 3-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonyl-formimidoylamino)- pyrrolidin- 1- ylkarbonyl! - 1- metylpyrrolidin

46( i) Saltsur ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2- T ( 3S)- 3- aminopyrrolidin- 1- ylkarbonyl]- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- 1-metvlpyrroiidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntesene 23(i) og 23(ii), men ved anvendelse av 2,55 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-metyl-pyrrolidinkarboksylsyre og 0,94 g (3S)-3-aminopyrrolidin, fremkom 2,91 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

46 ( ii) ( 2S, 4S)- 4- merkapto- 2- r( 3S)- 3-( N- 4- nitrobenzyloksy-karbonylformimidoylamino)- pyrrolidin- 1- ylkarbonyl]- 1- metylpyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntesene 23(iii) og 23(iv), men ved anvendelse av N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-formamidin i stedet for det N-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-acetamidin som ble anvendt i syntese 23(iii), fremkom 1,02 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (væskefilm), vmaks cm"1:

1705, 1650, 1510, 1440, 1345, 1173.

1,60 - 4,60 (19H, multiplett),

5,10 - 5,30 (2H, multiplett),

7,55 - 7,75 (2H, multiplett),

8,25 - 8,28 (2H, multiplett).

Syntese 47

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- T4-( imidazol- l- yl)- piperidin- l- ylkarbonyll - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

47 ( i) ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2- T4-( imidazol- l- yl)-piperidin- 1- ylkarbonyl!- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

660 mg N,N'-karbonyldiimidazol ble tilsatt til en løs-ning av 1,52 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl )-2-pyrrolidinkarboksylsyre i 15 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 3 0 minutter. En løsning av 538 mg 4-(imidazol-l-yl) -piperidin i 5 ml tørr acetonitril ble deretter tilsatt til løsningen og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 3 0 minutter og deretter ved 40°C i ytterligere syv timer. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og inndampingsresten ble oppløst i etylacetat. Den resulterende løsning ble vasket med en vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat, med vann og med en vandig løsning av natriumklorid, i nevnte rekkefølge. Den organiske løsning ble deretter tørret over vannfri natriumsulfat, og løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk. Destillasjonsresten ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering med

reversert fase gjennom 200 ml "Cosmo Sil 75Clg-PREP" (et varemerke for et produkt fra Nacalai Tesque), ved anvendelse av en fremgangsmåte med gradienteluering, med blandinger av acetonitril og vann i det volumetriske område fra 50:50 til 55:45 som eluent. De fraksjoner som inneholdt tittelforbindelsen, ble kombinert og konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk, for å gi 1,45 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (væskefilm) , vmaks cm-1:

1709, 1655, 1609, 1512, 1345, 1246, 1110.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), <5 ppm:

1,70 - 1,95 (2H, multiplett),

2,05 - 2,23 (3H, multiplett),

2,40 - 2,55 (1H, multiplett),

2,60 - 2,85 (1H, multiplett),

3,03 - 3,43 (3H, multiplett),

3,73 (3H, singlett),

3,77 - 4,25 (5H, multiplett),

4,59 - 4,84 (2H, multiplett),

5,02 - 5,35 (2H, multiplett),

6,85 (2H, dublett, J = 8,8 Hz),

6, 96 (1H, singlett),

7,07 & 7,09 (tilsammen 1H, to singletter),

7,23 (2H, dublett, J = 8,8 Hz),

7,47 (2H, dublett, J = 8,8 Hz),

7,56 (1H, singlett),

8,23 (2H, dublett, J = 8,8 Hz).

47( ii) ( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- T4-( imidazol- l- yl)- piperidin- 1-vlkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksvkarbonyl)- pyrrolidin

350 izl trif luormetansulf onsyre ble tilsatt, under isav-kjøling, til en løsning av 1,44 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio) -2-[4-(imidazol-l-yl)-piperidin-l-ylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor] i en løsning av 1,5 ml anisol og 7,5 ml

trifluoreddiksyre, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i én time og deretter ved 35°C i ytterligere 30 minutter. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og inndampingsresten ble vasket fire ganger med dietyleter, for å gi et fargeløst pulver. Det hele av dette pulver ble suspendert i etylacetat, og suspensjonen ble gjort basisk ved tilsats av en vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat. Etylacetatlaget ble utskilt, vasket med en vandig løsning av natriumklorid og tørret over vannfri natriumsulfat. Løsnings-midlet ble fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, for å gi 1,15 g av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver.

1,55 - 1,85 (3H, multiplett),

2,00 - 2,11 (2H, multiplett),

2,63 - 2,89 (2H, multiplett),

3,05 - 3,30 (4H, multiplett),

3,92 - 4,15 (2H, multiplett),

4,25 - 4,59 (2H, multiplett),

4,71 - 4,92 (1H, multiplett),

5,03 - 5,27 (2H, multiplett),

6,92 - 8,28 (7H, multiplett).

Infrarødt absorpsjonsspektrum (væskefilm) , vmaks cm-1:

1705, 1652, 1523, 1442, 1347, 1268, 1170, 1035.

Syntese 48

( 2S . 4S)- 2- T3. 3- dimetyl- 4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- 1-piperazinylkarbonyll- 4- merkapto- l-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

Ved å følge en fremgangsmåte som ligner den som er beskrevet i syntese 38, men ved anvendelse av 0,35 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, 0,15 g N,N'-karbonyldiimidazol og 0,13 g 2, 2-dimetylpiperazin, fremkom 250 mg av tittelforbindelsen, i form av et amorft, fast stoff.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), fmaks cm<-1>:

1707, 1652, 1607, 1521, 1431, 1347.

Syntese 49

( 2S. 4S)- 4- merkapto- l- metyl- 2- T4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- 1-homopiperazinylkarbonyll- pyrrolidin- trifluormetansulfonat

49 ( i) ( 2S. 4S)- 2- karbamoyl- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 1- metylpyrrolidin

10,86 ml dimetylsulfat ble tilsatt til en løsning av 30 g saltsur (2S,4S)-2-karbamoyl-4-(4-metoksybenzyltio)-pyrrolidin i en løsning av 36 ml 20% (vekt/vol) vandig løsning av natriumhydroksid og 470 ml dioksan, og den resulterende blanding ble omrørt ved en temperatur på mellom 22°C og 23°C i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk, og den resulterende inndampingsrest ble ekstrahert med 2 1 etylacetat. Ekstraktet ble vasket med en vandig løsning av natriumklorid og tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løsningen ble deretter konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk, inntil det fremkom krystaller og deretter ble det tilsatt 400 ml diisopropyleter til blandingen, og de krystaller som ble utfelt, ble oppsamlet ved hjelp av filtrering, for å gi 23 g av tittelforbindelsen, i form av krystaller, som smeltet ved 113-114°C.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1:

1636, 1609, 1512.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (60 MHz, CDC13) 6 ppm:

1,58 - 3,36 (6H, multiplett),

2,23 (3H, singlett),

3,68 (2H, singlett),

3,78 (3H, singlett),

5,95 (1H, bred singlett),

6,84 & 7,23 (4H, A2<B>2, J = 9,0 Hz),

7,20 (1H, bred singlett).

49( ii) ( 2S. 4S)- 2- karboksy- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 1- metylpyrrolidin

15,16 g (2S,4S)-2-karbamoyl-4-(4-metoksybenzyltio)-1-metylpyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor], ble oppløst i 170 ml 2N vandig hydrogenklorid, og løsningen ble omrørt i et bad som ble holdt ved 110°C i 3,5 timer. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen avkjølt til romtemperatur og dens pH ble justert til en verdi på 8,5 ved tilsats av natriumkarbonat. Blandingen ble deretter konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk, hvoretter den ble tillatt å stå i et kjøleskap for utfelling av krystaller. De utfelte krystaller ble oppsamlet ved hjelp av filtrering og vasket med en liten mengde kaldt vann. De ble deretter tørret, for å gi 10,4 g av tittelforbindelsen. Moder-luten ble deretter konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og inndampingsresten ble underlagt kolonne-kromatograf ering gjennom CHP20P (75-150/x, Mitsubishi Chemical Industries, Ltd.), ved anvendelse av 50% vol% vandig metanol som eluent, for å gi ytterligere 3,7 g av tittelforbindelsen, i form av krystaller, som smeltet ved 185-187,5°C.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmakS cm-1:

1641, 1623, 1512, 1373, 1311, 1253.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (270 MHz, D20), 6 ppm:

1,83 - 1,93 (1H, multiplett),

2,59 - 2,75 (1H, multiplett),

2,72 (3H, singlett),

3,16 - 3,23 (1H, multiplett),

3,03 - 3,43 (2H, multiplett),

3,62 (2H, singlett),

3,64 (3H, singlett),

3,74 (1H, dublett av dubletter, J = 9,53 & 6,96 Hz), 6,80 2H, dublett, J = 8,60 Hz),

7,15 2H, dublett, J = 8,60 Hz).

49(iii) ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksvbenzvltio)- l- metvl- 2- T4-( 4-nitrobenzyloksykarbonyl)- 1- homopiperazinylkarbonyl1- pyrrolidin

En suspensjon av 1,8 g (2S,4S)-2-karboksy-4-(4-metoksybenzyltio) -1-metylpyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (ii) ovenfor] og 1,26 g N,N'-karbonyldiimidazol i 18 ml tørr acetonitril ble omrørt ved 35°C i 25 minutter. En løsning av 3,7 g 1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-homopiperazin-trifluoracetat, i 20 ml tørr acetonitril og 2,0 ml N,N-diisopropyletylamin ble deretter samtidig tilsatt dråpevis, under is-avkjøling, til reaksjonsblandingen og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i åtte timer, hvoretter den ble tillatt å stå over natten ved samme temperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og inndampingsresten ble oppløst i etylacetat. Løsningen ble vasket med en vandig løsning av vasket med en vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat, med en fosfatbufferløsning (pH 6,86), med vann og en vandig løsning av natriumklorid, i nevnte rekke-følge. Etylacetatlaget ble deretter tørret over vannfri magnesiumsulfat og løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk. Den resulterende destilla-sj onsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel (Merck Art 9385), ved anvendelse av en 95:5 volumetrisk blanding av acetonitril og vann, for å gi 2,5 g av tittelforbindelsen.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (væskefilm) , vmaks cm-1.

1701, 1646, 1513, 1426, 1346, 1246.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), 6 ppm:

1,66 - 1,95 (4H, multiplett),

2,26&2,29 (tilsammen 3H, to singletter),

2,42 - 2,63 (2H, multiplett),

3,07 - 3,23 (3H, multiplett),

3,44 - 3,82 (7H, multiplett),

3,70 (2H, singlett),

3,79 (3H, singlett),

5,15 - 5,30 (2H, multiplett),

6,83 (2H, dublett, J = 8,30 Hz),

7,21 (2H, dublett, J = 8,30 Hz),

7,49 & 7,50 (tilsammen 2H, to dubletter, 8,30 Hz).

49( iv) ( 2S . 4S)- 4- merkapto- l- metyl- 2- T4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - l- homopiperazinylkarbonyn - pyrrolidin- trif luormetansulf onat

25 ml trifluoreddiksyre og 0,83 ml trifluormetansulfon-syre ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 2,5 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-l-metyl-2-[4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -1-homopiperazinylkarbonyl]-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (iii) ovenfor] i 5,2 ml anisol og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i 50 minutter. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under

redusert trykk og inndampingsresten ble dekantert, vekselvis med heksan og med dietyleter, for å gi 2,7 g av tittelforbindelsen, i form av et amorft, fast stoff.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (væskefilm) , vmaks>cm"1:

1688, 1650, 1522, 1483, 1434, 1349.

1,58 - 1,92 (2H, multiplett),

2,67 - 3,08 (3H, multiplett),

3,28 - 3,82 (13H, multiplett),

4,20 - 4,85 (2H, multiplett),

5,16 - 5,28 (2H, multiplett),

7,53 - 7,67 (2H, multiplett),

8,24 (2H, dublett, J = 8,31 Hz).

Syntese 50

( 2S. 4S) - 4- ( 4- merkapto) - 2- T4- ( 4- nitrobenzyloksykarbonylmetyl) - 1- homopiperazinylkarbonyl! - 1- ( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrol idin- bis- ( trif luormetansulf onat)

50 ( i) ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2- T4-( 4- nitrobenzyloksykarbonylmetyl) - l- homopiperazinvlkarbonyl! - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

3,5 g N,N'-karbonyldiimidazol ble tilsatt til en løsning av 8,0 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -2-pyrrolidinkarboksylsyre i 80 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 30 minutter. En løsning av 14,0 g 1-(4-nitrobenzyloksykarbonylmetyl) -homopiperazin-bis-(trifluoracetat)

i 80 ml tørr acetonitril og 14,1 ml diisopropyletylamin ble tilsatt, under isavkjøling, til blandingen og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 1,5 time og deretter ved 30°C i ytterligere 1,5 timer, hvoretter den ble tillatt å stå over natten ved romtemperatur. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og den resulterende inndampingsrest ble fortynnet med etylacetat. Den fortynnede løsning ble vasket med vann og en vandig løsning av natriumklorid, i nevnte rekkefølge, og den ble deretter tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble deretter fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og den resulterende destillasjonsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografe-

ring gjennom silikagel (Merck Art 9385), ved anvendelse av etylacetat som eluent, for å gi 7,6 g av tittelforbindelsen, i form av et amorft, fast stoff.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (væskefilm) , vmaks cm-1:

1748, 1709, 1650, 1608, 1520, 1429, 1404, 1346.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 5 ppm:

1,71 - 2,03 (3H, multiplett),

2.42 - 3,17 (6H, multiplett),

3,32 - 4,08 (8H, multiplett),

3,73 (2H, multiplett),

3,80&3,82 (tilsammen 3H, to singletter),

4,49 - 4,63 (1H, multiplett),

5,02 - 5,35 (4H, multiplett),

6,85 (2H dublett, J = 8,30 Hz),

7,23 (2H dublett, J = 8,30 Hz),

7.43 - 7,52 (4H, multiplett),

8,15 - 8,25 (4H, multiplett).

50( ii) ( 2S. 4S)- 4-( 4- merkapto)- 2- T4-( 4- nitrobenzyloksykarbonylmetyl)- 1- homopiperazinylkarbonyl!- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- bis-( trifluormetansulfonat) 15 ml trifluoreddiksyre og 0,36 ml trifluormetansulfon-syre ble tilsatt, under isavkjøling, til en løsning av 1,47 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-[4-(4-nitrobenzyloksykarbonylmetyl)-1-homopiperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin, [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor] i 2,2 ml anisol og den resulterende blanding ble om-rørt ved romtemperatur i én time. Løsningsmidlet ble deretter fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk og den resulterende inndampingsrest ble gjentatte ganger vasket med dietyleter ved hjelp av dekantering, og tørret i vakuum, for å gi 1,8 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm<-1>:

1757, 1700, 1608, 1523, 1441, 1408, 1348.

1,61 - 1,80 (1H, multiplett),

2,00 - 2,28 (2H, multiplett),

2,65 - 2,86 (1H, multiplett),

3,08 - 4,24 (13H, multiplett),

4,31 - 4,48 (2H, multiplett),

5,02 - 5,37 (2H, multiplett),

5,42 (2H, singlett),

7,52 & 7,62 (tilsammen 2H, to dubletter, 8,79 Hz),

8,23 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

8,27 (2H, dublett, J = 8,30 Hz).

Syntese 51

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2-( 4- metyl- 1- piperazinylkarbonyl)- 1- metylpyrrolidin- difluormetansulfonat

51 ( 1) ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2-( 4- metyl- 1- piperazinylkarbonyl) - l- metylpyrrolidin

700 mg N,N'-karbonyldiimidazol ble tilsatt til en suspensjon av 1,0 g (2S,4S)-2-karboksy-4-(4-metoksybenzyltio)-1-metylpyrrolidin i 15 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved 40°C i 30 minutter. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen isavkjølt og 440/il N-metylpiperazin ble tilsatt til blandingen. Temperaturen ble deretter tillatt å stige til romtemperatur i løpet av en periode på 30 minutter. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og inndampingsresten ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering med reversert fase ved anvendelse av "LiChroprep RP-8" (varemerke) som stasjonær fase og 70 vol% vandig metanol som eluent, for å gi 1060 mg av tittelforbindelsen, i form av en olje.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

1,77 - 1,85 (1H, multiplett),

2,30 (3H, singlett),

2,32 (3H, multiplett),

2,35 - 2,56 (5H, multiplett),

3,05 - 3,17 (3H, multiplett),

3,70 (2H, singlett),

3.80 (3H, singlett),

3,53 - 3,95 (5H, multiplett),

6,84 (2H, dublett, J = 8,8 Hz),

7,21 (2H, dublett, J = 8,8 Hz).

Infrarødt absorpsjonsspektrum (væskefilm), vmaks cm-1:

1635, 1611, 1511, 1460, 1445, 1292, 1248, 1033, 833. 51( ii) ( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2-( 4- metyl- 1- piperazinylkarbonyl)- 1-metylpyrrolidin- bis-( trifluormetansulfonat) 10 ml trifluoreddiksyre, fulgt av 510 1 trifluormetan-sulf onsyre ble tilsatt, under isavkjøling, til en løsning av 1050 mg (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-(4-metyl-1-piperazinylkarbonyl) -1-metylpyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor] i 3 ml anisol og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og inndampingsresten ble finfordelt ved hjelp av dietyleter for å forårsake stivning. Det faste stoff ble vasket med dietyleter fem ganger og tørret, for å gi 1350 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (270 MHz, heksadeuterert dimetylsulfoksid), 5 ppm:

1,74 - 1,8 6 (1H, multiplett),

2.81 (3H, singlett),

2,84 (3H, singlett),

2,94 - 3,20 (4H, multiplett),

3,28 - 3,87 (12H, multiplett).

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1.

1665, 1480, 1272, 1240, 1226, 1163, 1030, 640.

Syntese 52

( 2S. 4S)- 2- F4-( 2- hydroksyetyl)- 1- piperazinylkarbonyl)- 4-merkapto- l- metylpyrrolidin- bis- ( trif luormetansulf onat)

52 ( i) ( 2S. 4S)- 2- r4-( 2- hydroksyetyl)- 1- piperazinylkarbonyl)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 1- metylpyrrolidin

800 mg N,N'-karbonyldiimidazol ble tilsatt til en suspensjon av 1,13 g (2S,4S)-2-karboksy-4-(4-metoksybenzyltio)-1-metylpyrrolidin i 20 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved 40°C i 30 minutter. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen isavkjølt og 60 mg N-hydroksyetylpiperazin ble tilsatt til blandingen. Temperaturen ble tillatt å stige til romtemperatur i løpet av en periode på 3 0 minutter. Reaksjonsblandingen ble deretter konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og inndampingsresten ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering med reversert fase ved anvendelse av "LiChroprep RP-8" (varemerke) som stasjonær fase og 70 vol% vandig metanol som eluent, for å gi 1160 mg av tittelforbindelsen, i form av en fargeløs olje.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

1,76 - 1,87 (1H, multiplett),

2,32 (3H, singlett),

2,43 - 2,58 (9H, multiplett),

3,06 - 3,18 (3H, multiplett),

3,64 (2H, triplett, J = 5,4 Hz),

3,70 (2H, singlett),

3,80 (3H, singlett),

3,52 - 4,08 (4H, multiplett),

6,84 (2H, dublett, J = 8,8 Hz),

7,21 (2H, dublett, J = 8,8 Hz).

Infrarødt absorpsjonsspektrum (væskefilm) , J^^g^ cm-1:

1637, 1611, 1511, 1461, 1444, 1247, 1034, 834. 52( ii) ( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- T4-( 2- hydroksyetYl)- 1-piperazinylkarbonyl)- 1- metylpyrrolidin- bis-( trif luormetansulf onat) 10 ml trif luoreddiksyre og 520 iii trifluormetansulfon-syre ble tilsatt, under isavkjøling, til en løsning av 1150 mg (2S,4S)-2-[4-(2-hydroksyetyl)-1-piperazinylkarbonyl)-4- (4-metoksybenzyltio)-1-metylpyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor] i 3 ml anisol og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk, for å gi 1680 mg av tittelforbindelsen, i form av en olje.

1,99 - 2,09 (1H, multiplett),

2,98 (3H, singlett),

3,11 - 3,40 (8H, multiplett),

3,60 - 3,85 (3H, multiplett),

3,90 - 3,99 (6H, multiplett).

Syntese 53

( 2S, 4S)- 4- merkapto- 2- T4-( 2- karbamoyloksyetyl)- 1-piperazinylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin-trifluormetansulfonat

53( i) ( 2S. 4S)- 2-[ 4-( 2- hydroksyetyl)- 1- piperazinylkarbonyl]- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin 10,9 g N,N'-karbonyldiimidazol ble tilsatt til en løs-ning av 25,0 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -2-pyrrolidinkarboksylsyre i 200 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i én time. En løsning av 10,9 g 1-(2-hydroksyetyl)-piperazin i 50 ml tørr acetonitril ble tilsatt til reaksjonsblandingen og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 45 minutter. Ved avslutning av dette tidsrom, ble

reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk, hvoretter den ble fortynnet med 800 ml etylacetat. Den fortynnede løsning ble vasket, vekselvis med vann (200 ml, tre ganger) og en vandig løsning av natriumklorid (150 ml, én gang). Den resulterende etylacetatløsning ble konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk til et volum på100 ml og de krystaller som falt ut, ble oppsamlet ved hjelp av filtrering, for å gi 28,6 g av tittelforbindelsen, i form av fargeløse krystaller som smeltet ved 140-141°C.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), ^ xaaks. cm~1:

1710, 1653, 1670, 1512, 1439, 1404, 1344.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

1,48 - 1,85 (2H, multiplett),

2,32 - 2,64 (6H, multiplett),

2,59 (2H, triplett, J = 5,37 Hz),

3,03 - 3,16 (1H, multiplett),

3,30 - 3,71 (5H, multiplett),

3,65 (2H, triplett, J = 5,37 Hz),

3,73 (2H, singlett),

3,79&3,80 (tilsammen 3H, to singletter),

3,82 - 4,07 (1H, multiplett),

3,56 Sc 4,61 (tilsammen 1H, to tripletter, J = 8,30 Hz), 5,02 - 5,31 (2H, multiplett),

6,85 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

7,23 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

7,43 Sc 7,47 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz), 8,18 & 8,23 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz).

53( ii) ( 2S. 4S)- 2- f4-( 2- karbamoyloksyetyl)- 1- piperazinylkarbonyll - 4- ( 4- metoksybenzyltio) - 1- ( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

1,43 ml trikloracetyl-isocyanat ble tilsatt, under isav-kjøling, til en løsning av 5,59 g (2S,4S)-2-[4-(2-hydroksyetyl) -1-piperazinylkarbonyl]-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-

nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor] i 50 ml tørr metylenklorid, og den resulterende blanding ble omrørt ved den samme temperatur i 3 0 minutter. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og den resulterende destillasjonsrest ble oppløst i 120 ml metanol. Denne løsning ble deretter omrørt ved romtemperatur i 4,5 time i nærvær av 35 g silikagel (Merck, silikagel 60, 230-400 mesh). Silikagelen ble fjernet ved hjelp av filtrering og filtratet ble fridd fra løsningsmidlet. Inndampingsresten ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av en 8:1 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent, for å gi 5,76 g av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), v^j^g^ cm<-1>:

3353, 1711, 1652, 1608, 1513, 1344, 1242.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (270 MHz, heksadeuterert dimetylsulfoksid), <5 ppm:

1,38 - 1,57 (1H, multiplett),

2,14 - 2,70 (7H, multiplett),

2,98 - 4,08 (9H, multiplett),

3,72 & 3,74 (tilsammen 3H, to singletter),

3,77 (2H, singlett),

4,66&4,77 (tilsammen 1H, to tripletter, J = 7,81 Hz), 5,02 - 5,25 (2H, multiplett),

6,45 (2H, bred, singlett),

6,88 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

7,26 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

7,52 Sc 7,60 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz), 8,20 Sc 8,24 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz).

53( iii) ( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- T4-( 2- karbamoyloksyetyl)- 1-piperazinylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin-trifluormetansulfonat

2,67 ml trifluoreddiksyre og 122 iii trif luormetansulf onsyre ble tilsatt, under isavkjøling, til en løsning av 417 mg (2S,4S)-4- (4-metoksybenzyltio)-2-[4-(2-karbamoyloksyetyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (ii) ovenfor] i 753/il anisol og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og destillasjonsresten ble gjentatte ganger vasket med dietyleter ved hjelp av dekantering. Etter at destillasjonsresten var blitt tørret i vakuum, fremkom 325 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm<-1>:

1707, 1608, 1524, 1438, 1347, 1280, 1169, 1030.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (270 MHz, heksadeuterert dimetylsulfoksid + D20), 6 ppm:

1,60 - 1,84 (1H, multiplett),

2,65 - 2,90 (1H, multiplett),

2,85 - 4,60 (14H, multiplett),

4,63 - 5,30 (4H, multiplett),

7,52&7,64 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz), 8,23 & 8,24 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz).

Syntese 54

( 2S. 4S)- 2- T4-( 2- hydroksyetyl)- 1- piperazinylkarbonyll- 4-merkapto- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

54( a)( i) Trans- 4- metansulfonyloksv- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - L- prolin

12,20 ml trietylamin og 6,81 ml metansulfonylklorid ble tilsatt, under isavkjøling, til en løsning av 12,41 g trans-4-hydroksy-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-L-prolin i 100 ml tørr

tetrahydrofuran, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i 40 minutter. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og inndampingsresten ble blandet med 350 ml etylacetat og 50 ml IN vandig hydrogenklorid. Blandingen ble deretter omrørt ved romtemperatur i 2,5 time, hvoretter det organiske lag ble utskilt og vasket tre ganger med en vandig løsning av natriumklorid. Det ble deretter tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp destillering under redusert trykk, for å gi 12,57 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks>cm"1:

1834, 1753, 1713, 1524, 1346, 1173.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), <5 ppm:

2,31 - 2,88 (2H, multiplett),

3,08 (3H, singlett),

3,76 - 4,07 (2H, multiplett),

4,58 (1H, triplett, J = 7,81 Hz),

5,05 - 5,41 (3H, multiplett),

7,46&7,52 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz), 7,50 (1H, bred singlett),

8,19 Sc 8,22 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz).

54 ( a) ( ii) ( 2S. 4R)- 2- T4-( 2- hydroksyetyl)- 1- piperazinylkarbonyll - 4- metansulfonyloksy- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

1,11 g 1-(2-hydroksyetyl)-piperazin, 1,29 ml dietylcyanofosfonat og 1,18 trietylamin ble tilsatt, i nevnte rekke-følge, under isavkjøling, til en løsning av 3,00 g trans-4-metansulfonyloksy-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-L-prolin [fremstilt som beskrevet i trinn 54(a)(i) ovenfor] i 35 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 3 0 minutter. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og inndampingsresten ble renset ved hjelp

av kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av en 5:1 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent, for å gi 2,60 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1:

1712, 1652, 1523, 1345, 1171.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

2,23 - 2,80 (9H, multiplett),

3,06 & 3,07 (tilsammen 3H, to singletter),

3,44 - 4,06 (8H, multiplett),

4,81 - 4,95 (1H, multiplett),

5,04 - 5,41 (3H, multiplett),

7,46 & 7,51 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79.Hz), 8,21 & 8,22 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz).

54 ( a) ( ii7) ( 2S, 4R)- 2- T4-( 2- hydroksyetyl)- 1- piperazinyl-karbonvll - 4- metansulfonyloksy- 1- ( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

584 mg N,N'-karbonyldiimidazol ble tilsatt til en løs-ning av 1,16 g trans-4-metansulfonyloksy-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -L-prolin i 10 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved 40°C i én time. 586 mg l-(2-hydroksyetyl)-piperazin ble deretter tilsatt til blandingen, under isavkjøling, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i 35 minutter. Løsningsmidlet ble deretter fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk og destillasjonsresten ble renset på en måte som ligner den som er beskrevet i trinn 54(a)(ii), for å gi 930 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver. Produktets infrarøde absorpsjonsspektrum og kjernemagnetiske resonansspektrum var identiske med dem for den forbindelse som fremkom som beskrevet i trinn 54 (a) (ii) ovenfor.

54( a)( ii") ( 2S, 4R)- 2- f4-( 2- hydroksyetyl)- 1- piperazinylkarbonyll- 4- metansulfonyloksy- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

0,21 ml trietylamin, fulgt av 0,19 ml pivaloylklorid, ble tilsatt dråpevis ved -20°C til en løsning av 0,5 g trans-4-metansulfonyloksy-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-L-prolin i 5 ml tørr tetrahydrofuran, og den resulterende blanding ble om-rørt ved den samme temperatur i fem minutter. En løsning av 0,25 g 1-(2-hydroksyetyl)-piperazin i 3 ml tørr tetrahydrofuran ble deretter tilsatt og reaksjonsblandingen ble omrørt ved samme temperatur i 30 minutter, hvoretter løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk. Den resulterende destillasjonsrest ble opparbeidet og renset på en måte som ligner den som er beskrevet i trinn 54(a)(ii), for å gi 0,42 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver. Produktets infrarøde absorpsjonsspektrum og kjernemagnetiske resonansspektrum var identiske med dem for den forbindelse som fremkom som beskrevet i trinn 54(a)(ii) ovenfor.

54( a) ( iii) ( 2S. 4S)- 4- acetvltio- 2- T4-( 2- hydroksvetvl)- 1-piperazinylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

685 mg kaliumtioacetat ble tilsatt til en løsning av 2,0 g (2S,4R)-2-[4-(2-hydroksyetyl)-1-piperazinylkarbonyl]-4-metansulfonyloksy-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn 54(a) (ii), 54 (a) (ii') og 54(a)(ii") ovenfor] i 20 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved 80°C i fem timer. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk, inndampingsresten ble fortynnet med 200 ml etylacetat, og den fortynnede løsning ble vasket med en vandig løsning av natriumklorid. Den ble deretter tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp destillering under redusert trykk, og destillasjonsresten ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel ved anvendelse av en fremgangsmåte med gradienteluering med blandinger av etylacetat og metanol

som volumetrisk spant over området fra 9:1 til 4:1 som eluent, for å gi 1,35 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), ymaks cm<-1>:

3437, 1710, 1652, 1522, 1345, 1113.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

1,82 - 1,98 (1H, multiplett),

2,34 (3H, singlett),

2,31 - 2,88 (8H, multiplett),

3,40 - 4,21 (9H, multiplett),

4,65 - 4,78 (1H, multiplett),

5,03 - 5,36 (2H, multiplett),

7,45 & 7,51 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz), 8,17 - 8,24 (2H, multiplett).

54( a)( iv) ( 2S, 4S) - 2- T4-( 2- hydroksyetyl)- 1- piperazinylkarbonyll- 4- merkapto- l-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

En løsning av natriummetoksid (fremstilt ved tilsats av 56 mg metallisk natrium til 2,4 ml metanol) ble tilsatt til en løsning av 1,06 g (2S,4S)-4-acetyltio-2-[4-(2-hydroksyetyl)-1-piperazinyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn 54(a)(iii) ovenfor] i 10 ml metanol, og den resulterende blanding ble omrørt ved 15°C i 30 minutter. 610 itl av en 4N løsning av hydrogenklorid i etylacetat ble deretter tilsatt til blandingen ved samme temperatur, hvoretter blandingen ble omrørt i ti minutter. Reaksjonsblandingen ble deretter konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og inndampingsresten ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av en 4:1 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent, for å gi 710 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm"<1>:

3430, 2944, 1700, 1647, 1521, 1439, 1350.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

1,81 - 1,98 (2H, multiplett),

2,28 - 2,84 (8H, multiplett),

3,20 - 3,82 (8H, multiplett),

4,04 - 4,20 (1H, multiplett),

4,60 - 4,77 (1H, multiplett),

5,01 - 5,38 (2H, multiplett),

7,45&7,51 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz), 8,15 - 8,25 (2H, multiplett).

54( a)( iv') ( 2S. 4S)- 2- f4-( 2- hydroksyetyl)- 1- piperazinylkarbonyll- 4- merkapto- l-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin 40 ml av 10% (vekt/vol) metanolisk løsning av hydrogenklorid ble tilsatt til en løsning av 1,0 g (2S,4S)-4-acetyltio-2-[4-(2-hydroksyetyl)-1-piperazinyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin i 10 ml 1,4 dioksan, og den resulterende blanding ble omrørt ved 50°C i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og destillasjonsresten ble blandet med 40 ml tetrahydrofuran og 2 ml av en mettet, vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat. Den ble deretter tørret over vannfri natriumsulfat. Løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og destillasjonsresten ble renset ved hjelp av kolonnekromato-graf ering gjennom silikagel på en lignende måte som den som er beskrevet i trinn 54(a)(iv) ovenfor, for å gi 712 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver. Produktets infrarøde absorpsjonsspektrum og kjernemagnetiske resonansspektrum var identiske med dem for den forbindelse som fremkom som beskrevet i trinn 54(a)(iv) ovenfor. 54 ( b) ( i) ( 2S. 4S)- 2- T4-( 2- hydroksyetyl)- 1- piperazinylkarbonyll-4- merkapto- l-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin- bis-( trifluormetansulfonat)

2,8 ml trif luoreddiksyre og 91/xl trif luormetansulf onsyre ble tilsatt, under isavkjøling, til en løsning av 280 mg (2S,4S)-2-[4-(2-hydroksyetyl)-1-piperazinylkarbonyl]-(4-

580 fil anisol, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og den resulterende destillasjonsrest ble vasket med dietyleter ved hjelp av dekantering og tørret i vakuum, for å gi 380 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm<-1>:

1795, 1705, 1666, 1609, 1525, 1442, 1408, 1348, 1281, 1226, 1169.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (270 MHz, D20), 5 ppm:

1,54 - 1,63 (1H, multiplett),

2,61 - 2,72 (1H, multiplett),

2,90 - 4,46 (14H, multiplett),

4,64 - 4,96 (2H, multiplett),

5,08 (2H, singlett),

7,42 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

8,08&8,10 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz).

54( b)( ii) ( 2S. 4S)- 2-[ 4-( 2- hydroksyetyl)- 1- piperazinylkarbonyll- 4- merkapto- l-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

En løsning av 266 mg (2S,4S)-2-[4-(2-hydroksyetyl)-1-piperazinylkarbonyl]-4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-bis-(trifluormetansulfonat) [fremstilt som beskrevet i trinn 54(b)(i) ovenfor] i en blanding av 5 ml tetrahydrofuran og 0,2 ml vann ble nøytralisert ved tilsats av 76 mg natriumhydrogenkarbonat, hvoretter den ble tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble deretter fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og den resulterende inndampingsrest ble renset ved hjelp av kolonne-kromatograf ering gjennom silikagel, ved anvendelse av en 4:1 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent, for å gi 188 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver. Produktets infrarøde absorpsjonsspektrum og kjernemagnetiske resonansspektrum var identiske med dem for den forbindelse som fremkom som beskrevet i trinn 54(a)(iv) ovenfor.

Syntese 55

( 2S, 4S)- 4- merkapto- 2-( 4- nitrobenzyloksvkarbonyl- 1- piperazinylkarbonyl) - 1- metylpyrrolidintrifluormetansulfonat

55 ( i) ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl - 1- piperaz inylkarbonyl)- 1- metvlpyrrolidin

16,6 g N,N'-karbonyldiimidazol ble tilsatt til en suspensjon av 24 g (2S,4S)-2-karboksy-4-(4-metoksybenzyltio)-1-metylpyrrolidin i 200 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved 35°C i 40 minutter. En løsning av 14,7 g tørr piperazin ble deretter tilsatt dråpevis til

blandingen ved en temperatur på mellom 3 0°C og 35°C, hvoretter blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 30 minutter. En løs-ning av 36,8 g 4-nitrobenzyloksykarbonylklorid i 100 ml acetonitril ble deretter tilsatt, under isavkjøling, til reaksjonsblandingen, og den blanding som således fremkom, ble omrørt

ved romtemperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble blandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og inndampingsresten ble blandet med en vandig løsning av natriumklorid og 10% vandig løsning natriumkarbonat. Den resulterende blanding ble ekstrahert med etylacetat. Ekstraktet ble vasket med en vandig løsning av natriumklorid og tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og den destillasjonsresten ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av en 9:1 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent, for å gi 27,7 g av tittelforbindelsen.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (væskefilm), vmaks cm"<1>:

1706, 1648, 1513, 1435, 1347, 1248, 1232.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), 5 ppm:

1,74 - 1,89 (1H, multiplett),

2,32 (3H, multiplett),

2,40 - 2,62 (2H, multiplett),

2,99 - 3,21 (3H, multiplett),

3,31 - 4,20 (8H, multiplett),

3,70 (2H, singlett),

3,80 (3H, singlett),

5,24 (2H, singlett),

6,84 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

7,20 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

7,52 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

8,23 (2H, dublett, J = 8,79 Hz).

55( ii) ( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl- l-piperazinylkarbonyl)- 1- metylpyrrolidin- trifluormetansulfonat 13 0 ml trifluoreddiksyre og 4,6 ml trifluormetansulfon-syre ble tilsatt dråpevis til en løsning av 1,8 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl-1-piperazinylkarbonyl) -1-metylpyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor] i 28,3 ml anisol og den resulterende blanding ble omrørt i 30 minutter, under isavkjøling. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og den resulterende inndampingsrest ble vasket med heksan og eter i nevnte rekke-følge, ved dekantering for å gi 13,9 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), ^^3 cm<-1>:

1695, 1643, 1518, 1446, 1345, 1251.

1,74 - 1,89 (1H, multiplett),

2,81 & 2,82 (tilsammen 3H, to singletter),

2,92 - 3,08 (1H, multiplett),

3,17 (1H, singlett),

3,31 - 3,80 (12H, multiplett),

4,58 - 4,72 (1H, multiplett),

5,26 (2H, singlett),

7,65 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

8,24 (2H, dublett, J = 8,79 Hz).

Syntese 56

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- T4-( 4- nitrobenzyloksykarbonylmetyl)- 1-piperazinylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin-bis-( trifluormetansulfonat)

8,0 ml trif luoreddiksyre og 160llI trif luormetansulf onsyre ble tilsatt, under isavkjøling, til en suspensjon av 1120 mg (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-[4-(4-nitrobenzyloksykarbonylmetyl) -1-piperazinkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin i 1,75 ml anisol og den resulterende blanding ble omrørt i ved romtemperatur i 1,5 time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og den resulterende destillasjonsrest ble gjentatte ganger vasket med dietyleter ved hjelp av dekantering og tørret i vakuum, for å gi 1,58 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), v maj cs cm-1:

1756, 1704, 1667, 1523, 1441, 1348.

1,60 - 1,76 (1H, multiplett),

2,70 - 2,85 (1H, multiplett),

3,08 - 3,42 (9H, multiplett),

3,65 - 3,83 (3H, multiplett),

3,94 & 4,05 (tilsammen 1H, to dubletter av dubletter,

J = 9,8 Sc 6,8 Hz), 4,72 Sc 4,81 (1H, to tripletter, J = 8,1 Hz),

5,05 - 5,26 (2H, multiplett),

5,42 Sc 5,43 (2H, to singletter),

7,52, 7,64, 7,69&7,70 (tilsammen 4H, fire dubletter,

J = 8,8 Hz),

8,23, 8,24&8,28 (tilsammen 4H, 3 dubletter,

J = 8,8 Hz).

Syntese 57

( 2R. 4S)- 4- merkapto- 2-{ 4- T2-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - oksyetyl] - 1- piperazinylkarbonyl}- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

57 ( i) ( 2R. 4R)- 4- hydroksy- 2-( 4- \ 2 -( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-oksyetyl 1 - 1- piperazinylkarbonyl}- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

3,34 ml dietylcyanofosfat og 8,92 ml trietylamin ble tilsatt, under isavkjøling, til en suspensjon av 6,2 g cis-4-hydroksy-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-D-prolin og 8,41 g 1-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyloksy)-etyl]-piperazin-dihydro-klorid i 62 ml tørr dimetylformamid, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i 30 minutter. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen fortynnet med 250 ml etylacetat og den fortynnede løsning ble vasket med vann og deretter tørret over vannfri magnesiumsulfat. Blandingen ble konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og den resulterende inndampingsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse

av en 4:1 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent, for å gi 7,84 g av tittelforbindelsen, i form av en olje.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (væskefilm), vmaks cm-<1>:

1748, 1710, 1658, 1624, 1608, 1522, 1439, 1403, 1347, 1262 .

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), <5 ppm:

1,98 - 2,80 (9H, multiplett),

3,37 - 3,90 (6H, multiplett),

4,22 - 4,46 (3H, multiplett),

4,60 - 5,60 (5H, multiplett),

7,42 - 7,57 (4H, multiplett),

8,17 - 8,26 (4H, multiplett).

57( ii) ( 2R. 4S)- 4- acetyltio- 2-{ 4-\ 2 -( 4- nitrobenzyloksy-karbonvl)- oksyetyl1- 1- piperazinylkarbonyl}- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

En løsning av 0,73 g dietylazodikarboksylat i 2 ml tetrahydrofuran ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 2,1 g (2R,4R)-4-hydroksy-2-{4-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl ) -oksyetyl]-1-piperazinylkarbonyl}-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor] og 1,1 g trifenylfosfin i 14 ml tetrahydrofuran, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i 10 minutter. En løsning av 0,32 g merkaptoeddiksyre i 2 ml tetrahydrofuran ble deretter tilsatt dråpevis til blandingen og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og den resulterende destillasjonsrest ble renset ved hjelp av kolonne-kromatograf ering gjennom silikagel ved anvendelse av en 20:1 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent, for å gi 1,2 g (2R,4S)-4-acetyltio-2-{4-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -oksyetyl]-1-piperazinylkarbonyl}-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin, i form av et fargeløst pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (væskefilm), vmakS cm-1.

1748, 1709, 1654, 1607, 1522, 1439, 1404, 1347, 1263, 1122 .

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), 6 ppm:

2,15 - 2,80 (8H, multiplett),

2.34 - ( 3E; singlett),

3.35 - 3,76 (5H, multiplett),

3,91 - 4,40 (4H, multiplett),

4,68 - 4,81 (1H, multiplett),

5,03 - 5,35 (4H, multiplett),

7,26 - 7,57 (4H, multiplett),

8,19 - 8,26 (4H, multiplett).

57( iii) ( 2R, 4S)- 4- merkapto- 2-{ 4- T2-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - oksyetyl]- 1- piperazinvlkarbonyl}- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin 40 ml 10% (vekt/vol) metanolisk løsning av hydrogenklorid ble tilsatt til en løsning av 1,0 g (2R,4S)-4-acetyltio-2-{4-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-oksyetyl]-1-piperazinylkarbonyl} -1- (4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin, [fremstilt som beskrevet i trinn (ii) ovenfor] i 10 ml 1,4-dioksan, og den resulterende blanding ble omrørt ved 50°C til 52°C i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og konsentratet ble fortynnet med 100 ml etylacetat. Den fortynnede løsning ble nøytralisert med en mettet, vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat og vasket, vekselvis, med 30 ml vann og 30 ml av en vandig løsning av natriumklorid. Løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og den resulterende destillasjonsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av en 20:1 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent, for å gi 566 mg av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (væskefilm), vmaks cm-l.

1748, 1709, 1653, 1607, 1521, 1439, 1404, 1346, 1263.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), 6 ppm:

1.74 (1H, dublett, J = 7,32 Hz),

2,07 - 2,86 (8H, multiplett),

3,39 - 3,80 (6H, multiplett),

4,04 - 4,46 (3H, multiplett),

4.75 - 4,85 (1H, multiplett),

5,03 - 5,35 (4H, multiplett),

7,42 - 7,58 (4H, multiplett),

8,17 - 8,26 (4H, multiplett).

Syntese 58

( 2R. 4R)- 4- merkapto- 2-( 4- 12 -( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- oksyetyl! - 1- piperazinylkarbonyl}- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

58 ( i) ( 2R. 4S)- 4- formyloksy- 2-{ 4-\ 2 -( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - oksyetyll- 1- piperazinylkarbonyl}- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

En løsning av 1,31 g dietylazodikarboksylat i 5 ml tetrahydrofuran ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 3,0 g (2R,4R)-4-hydroksy-2-{4-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl ) -oksyetyl]-1-piperazinylkarbonyl}-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i syntese 57(i)] og 1,97 g trifenylfosfin i 25 ml tetrahydrofuran, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i 10 minutter. 283/xl maursyre ble deretter tilsatt dråpevis til blandingen og blandingen ble omrørt ved samme temperatur i fem minutter og ved romtemperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og den resulterende destillasjonsrest ble renset ved hjelp av kolonnekro-matograf ering gjennom silikagel ved anvendelse av en 20:1 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent, for å gi 1,42 g av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1:

1749, 1720, 1654, 1606, 1522, 1439, 1405, 1347, 1262.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), 6 ppm:

2,20 - 2,95 (8H, multiplett),

3,35 - 3,95 (6H, multiplett),

4,15 - 4,55 (2H, multiplett),

4,79 & 4,85 (tilsammen 1H, to tripletter, J = 7,81 Hz), 5,05 - 5,37 (4H, multiplett),

5.43 - 5,50 (1H, multiplett),

7.44 - 7,57 (4H, multiplett),

8,02 (1H, singlett),

8,19 - 8,26 (4H, multiplett).

58( ii) ( 2R. 4S)- 4- hydroksy- 2-( 4-\ 2 -( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-oksyetyl1- 1- piperazinylkarbonyl}- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

28 ml 10% (vekt/vol) metanolisk løsning av hydrogenklorid ble tilsatt dråpevis til en løsning av 1,42 g (2R,4S)-4-formyloksy-2-{4-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-oksyetyl]-1-piperazinylkarbonyl}-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin

[fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor] i 14 ml 1,4-dioksan, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løs-ningsmidlet fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og den resulterende destillasjonsrest ble blandet med vann. Den vandige blanding som således fremkom ble gjort basisk ved tilsats av en mettet, vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat og deretter ble blandingen ekstrahert med etylacetat. Ekstraktet ble vasket med en vandig løsning av natriumklorid og tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løs-ningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillering under redu-

kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av en 9:1 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent, for å gi 1,33 g av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm"1:

1750, 1709, 1648, 1608, 1522, 1439, 1406, 1347, 1263.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (270 MHz, CDCI3+ D20),

ppm:

2,04 - 2,80 (8H, multiplett),

3,38 - 3,82 (6H, multiplett),

4,24 - 4,38 (2H, multiplett),

4,50 - 4,64 (1H, multiplett),

4,70 - 4,90 (1H, multiplett),

5,30 - 5,34 (4H, multiplett),

7,43 - 7,57 (4H, multiplett),

8,17 - 8,25 (4H, multiplett).

58( iii) ( 2R. 4R)- 4- acetyltio- 2-( 4- 12 -( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - oksyetyl!- 1- piperazinylkarbonvl}- 1-( 4- nitrobenzyloksvkarbonyl)- pyrrolidin

En løsning av 421 mg dietylazodikarboksylat i 1,2 ml tetrahydrofuran ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 1,21 g (2R,4S)-4-hydroksy-2-{4-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -oksyetyl]-1-piperazinylkarbonyl}-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin og 634 mg trifenylfosfin i 8 ml tetrahydrofuran, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i 10 minutter. 171/il merkaptoeddiksyre ble deretter tilsatt dråpevis til blandingen, og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i én time. Ved å følge den samme fremgangsmåte som er beskrevet i syntese 57 (ii), ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset, for å gi 1,04 g av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1.

1750, 1712, 1656, 1607, 1522, 1496, 1438, 1404, 1347, 1263, 1207.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), 6 ppm:

1,82 - 1,93 (1H, multiplett),

2,34 (3H, singlett),

2,30 - 2,82 (7H, multiplett),

3,36 - 3,72 (5H, multiplett),

3,90 - 4,16 (2H, multiplett),

4,24 - 4,31 (1H, multiplett),

4,67 & 4,74 (tilsammen 1H, to tripletter, J = 7,81 Hz), 5,03 - 5,35 (4H, multiplett),

7,43 - 7,57 (4H, multiplett),

8,17 - 8,25 (4H, multiplett).

58( iv) ( 2R. 4R)- l- merkapto- 2-( 4-\ 2 -( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-oksyetyl1- 1- piperazinylkarbonyl}- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin 40 ml 10% (vekt/vol) metanolisk løsning av hydrogenklorid ble tilsatt til en løsning av 1,0 g (2R,4R)-4-acetyltio-2-{4-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-oksyetyl]-1-piperazinylkarbonyl}-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn (iii) ovenfor] i 10 ml 1,4-dioksan, og den resulterende blanding ble omrørt ved mellom 50°C og 52°C i én time. Ved å følge den samme fremgangsmåte som er beskrevet i syntese 57(iii), ble reaksjonsblandingen opparbeidet og renset, for å gi 648 mg av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm"<1>:

1749, 1710, 1653, 1607, 1522, 1496, 1439, 1404, 1346, 1263, 1206.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz) , 6 ppm:

1,82 - 1,96 (2H, multiplett),

2,30 - 2,91 (7H, multiplett),

3,18 - 2,78 (6H, multiplett),

4,05 - 4,46 (3H, multiplett),

4,63 & 4,46 (3H, multiplett),

5.03 - 5,33 (4H, multiplett),

7,43 - 7,57 (4H, multiplett),

8,17 - 8,26 (4H, multiplett).

Syntesene 59 til 88

De merkaptaner som er vist i syntesene 59-88 ble fremstilt på en lignende måte som det som er beskrevet i syntesene 1, 49 og 66, men ved anvendelse av (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio) -1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, (2S,4S)-2-karboksy-4-(4-metoksybenzyltio)-1-metylpyrrolidin og (2S, 4S) -1-(t-butoksykarbonyl)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-pyrrolidinkarboksylsyre som utgangsmaterialer.

Syntese 59

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- r( 2S)- 4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)- 2- metylpiperazin- 1- ylkarbonyl 1 - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

Infrarødt absorpsjonsspektrum (væskefilm) , vma] <iS cm"1:

1709, 1656, 1606, 1569, 1520, 1430, 1346, 1252.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

1,12 - 1,38 (3H, multiplett),

1,75 - 2,10 (2H, multiplett),

2,12 - 2,38 (3H, multiplett),

2,55 - 3,93 (8H, multiplett),

4,01 - 4,89 (4H, multiplett),

5.04 - 5,30 (4H, multiplett),

7,42 - 7,59 (4H, multiplett),

8,17 - 8,23 (4H, multiplett).

Syntese 60

( 2S , 4S)- 4- merkapto- 2- r( 2S)- 4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)- 2- metylpiperazin- l- ylkarbonyll - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- trifluormetansulfonat

1,10 - 1,40 (3H, multiplett),

1,62 - 1,78 (1H, multiplett),

2,60 - 3,40 (8H, multiplett),

3,91 - 4,08 (2H, multiplett),

4,58 - 4,81 (1H, multiplett),

5,06 - 5,27 (2H, multiplett),

5,36 (2H, singlett),

7,53 - 7,70 (4H, multiplett),

8,19 - 8,28 (4H, multiplett),

8, 89 (1H, singlett) .

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1:

1785, 1695, 1609, 1523, 1442, 1349, 1283, 1246, 1031.

Syntese 61

( 2S. 4S)- 4- merkapto- l- metyl- 2- F( 3S)- 3-( N- 4- nitrobenzyloksy-karbonylacetimidoylamino)- pyrrolidin- 1- ylkarbonyl]- pyrrolidin

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), v^^g cm-1:

1522, 1348, 858, 740.

1,70 - 2,00 (3H, multiplett),

2.00 - 2,25 (3H, multiplett),

2,30 - 3,95 (13H, multiplett),

3,95 - 4,07 (1H, multiplett),

4,30 - 4,50 (1H, multiplett),

7,62 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

8,23 (2H, dublett, J = 8,79 Hz).

Infrarødt absorpsjonsspektrum (væskefilm), vmaks cm-1: 1709, 1656, 1606, 1569, 1520, 1430, 1346, 1252.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), 6 ppm:

1,12 - 1,38 (3H, multiplett),

1,75 - 2,10 (2H, multiplett),

2,12 - 2,38 (3H, multiplett),

2,55 - 3,93 (8H, multiplett),

4.01 - 4,89 (4H, multiplett),

5,04 - 5,30 (4H, multiplett),

7,42 - 7,59 (4H, multiplett),

8,17 - 8,23 (4H, multiplett).

Syntese 62

( 2S. 4S) - 4- merkapto- 2-[ 3-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonyl-acetimidoylamino)- piperidin- 1- ylkarbonyl1- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm"1:

1705, 1650, 1600, 1550, 1520, 1440, 1340, 1205.

Syntese 63

( 2S. 4S)- 4- merkapto- l- metyl- 2- f4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonyl-acetimidoylamino)- piperidin- 1- ylkarbonyl]- pyrrolidin

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-<1>:

1710, 1520, 1345, 1210.

Syntese 64

( 2S. 4S)- 4- merkapto- l- metyl- 2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonyl-formimidoylamino)- piperazin- 1- ylkarbonyl1- pyrrolidin- bis-( trifluormetansulfonat)

1,79 - 1,91 (1H, multiplett),

2,83 (3H, singlett),

2,96 - 3,07 (1H, multiplett),

3,10 - 3,28 (4H, multiplett),

3,47 - 3,85 (7H, multiplett),

4,61 (1H, triplett, J = 9,4 Hz),

5,36 (2H, singlett),

7,68 (2H, dublett, J = 8,8 Hz),

8,26 (2H, dublett, J = 8,8 Hz),

8, 89 (1H, singlett) .

Syntese 65

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- r( 2S)- 4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)- 2- metylpiperazin- 1- ylkarbonyl!- 1- metylpyrrolidin

Syntese 66

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- f4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- piperazin-l- ylkarbonyl! - 1-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-pyrrolidin

(2S,4S)-1-(t-butoksykarbonyl)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-[4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-piperazin-l-ylkarbonyl] - pyrrolidin ble fremstilt fra (2S,4S)-1-(t-butoksykarbonyl)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-pyrrolidinkarboksylsyre, N,N'-karbonyl-

diimidazol og 4-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-piperazin. Denne forbindelse ble deretter behandlet med en 4N-løsning av hydrogenklorid i etylacetat og produktet ble deretter underlagt lignende reaksjoner som dem som er beskrevet i syntesene1og 17(iii), for å gi tittelforbindelsen, som smeltet ved 181,5°C.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), 5 ppm:

1,93 (1H, dublett, J = 9,2 Hz),

1,90 - 2,02 (1H, multiplett),

2,33 (3H, singlett),

2,61 - 2,72 (1H, multiplett),

3,08 - 3,88 (9H, multiplett),

4,03 (2H, dublett av dubletter, J = 10,6&7,3 Hz), 4,89 (1H, triplett, J.= 7,3 Hz),

5,06 - 5,31 (4H, multiplett),

7,43 - 7,52 (4H, multiplett),

8,12 - 8,26 (4H, multiplett).

Syntese 67

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- T4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- piperazin-1- ylkarbonyll- 1-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)-pyrrolidin- trifluormetansulfonat

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), v^^g^ cm<-1>:

1783, 1693, 1660, 1608, 1523, 1465, 1441, 1349, 1256, 1228 .

1.67 - 1,79 (1H, multiplett),

2,82 - 2,92 (1H, multiplett),

3,02 - 3,10 (1H, multiplett),

3,40 - 3,80 (10H, multiplett),

4,62 (1H, triplett, J = 8,30 Hz),

5,26 (2H, singlett),

5,36 (2H, singlett),

7,65 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

7.68 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

8,25 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

8,86 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

8,89 (1H, singlett).

Syntese 68

( 2S. 4S) - 4- merkapto- l- ( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl) - 2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)- piperazin- l-ylkarbonyl 1 - pyrrolidin

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-1:

1782, 1705, 1635, 1522, 1440, 1348, 1280, 1250, 1225.

Syntese 69

( 2S. 4S) - 4- merkapto- l- ( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl) - 2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)- piperazin- l-ylkarbonyl 1 - pyrrolidin

Syntese 70

( 2S. 4S) - 4- merkapto- l- ( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl) - 2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)- piperazin- l-ylkarbonyl 1 - pyrrolidin

Syntese 71

( 2S. 4S) - 4- merkapto- l- ( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl) - 2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)- piperazin- l-ylkarbonyl 1 - pyrrolidin

Syntese 72

( 2S. 4S) - 4- merkapto- l-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-2- f( 3S)- 3-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoylamino)-pyrrolidin- 1- ylkarbonyl!- pyrrolidin

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), ^g^g cm<-1>:

1710, 1645, 1522, 1445, 1347.

Syntese 73

( 2S. 4S)- 4- merkapto- l-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-2- r( 3S)- 3-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoylamino)-pyrrolidin- 1- ylkarbonyl!- pyrrolidin

Syntese 74

( 2S. 4S)- 4- merkapto- l-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-2- f( 3S)- 3-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylamino)- pyrrolidin- 1-ylkarbonyl!- pyrrolidin

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr),J^a^g.cm-1:

1708, 1646, 1525, 1442, 1348.

Syntese 75

( 2S. 4S)- 4- merkapto- l-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)-2- r( 3S)- 3-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoylamino)-pyrrolidin- 1- ylkarbonyl!- pyrrolidin

Syntese 76

( 2S. 4S)- 4- merkapto- l-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)-2- r( 3S)- 3-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoylamino)- pyrrol idin- 1- ylkarbonyl!- pyrrolidin

Syntese 77

( 2S. 4S)- 4- merkapto- l-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)-2- r( 3S) - 3-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylamino)- pyrrolidin- 1-ylkarbonyl!- pyrrolidin

Syntese 78

( 2S. 4S)- 4- merkapto- l-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-2- T4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- homopiperazin- l- ylkarbonyll-pyrrolidin

Syntese 79

( 2S. 4S)- 4- merkapto- l-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)- homopiperazin- l-ylkarbonyll - pyrrolidin

Syntese 80

( 2S. 4S)- 4- merkapto- l-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)-2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- homopiperazin- l- ylkarbonyll - pyrrolidin

Syntese 81

( 2S. 4S)- 4- merkapto- l-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)-2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl)- homopiperazin- l-ylkarbonyll - pyrrolidin

Syntese 82

( 2S, 4S)- 4- merkapto- 2-{( 3S)- 1- TN- metyl- N-( N- 4- nitrobenzyloksy-karbonylacet imidoyl) - amino]- pyrrolidin- l- ylkarbonyl}- 1-( 4-nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

Syntese 83

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2-\ 2 -( 4- nitrobenzyloksykarbonyloksymetyl)-4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- piperazin- l- ylkarbonyl]- 1-( 4-nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

Syntese 84

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)- 2-( 4- nitrobenzyloksykarbonyloksymetyl)- piperazin- 1-ylkarbonyll- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

Syntese 85

( 2S. 4S)- 4- merkapto- T4-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- 6-( 4- nitro-benzyloksykarbonyloksy) - homopiperazin- l- ylkarbonyll - 1- ( 4-nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

Syntese 86

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl) - 6-( 4- nitrobenzyloksykarbonyloksy)- homopiperazin- l-ylkarbonyll - 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

Syntese 87

( 2S. 4S)- 4- merkapto- l-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoyl)-2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylacetimidoylamino)- piperidin-1- ylkarbonyll - pyrrolidin

Syntese 88

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 1- metyl- 2- T4-( N- 4- nitrobenzyloksykarbonylformimidoyl) - homopiperazin- l- ylkarbonyll - pyrrolidin

Syntese 89

( 2S. 4S)- 4-( metoksybenzyltio)- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- 2-pyrrolidinkarboksylsyre

89 ( i) ( 2S. 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2- pyrrolidinkarboksylsyre

En løsning av 4,0 g saltsur (2S,4S)-2-karbamoyl-4-(4-metoksybenzyltio)-pyrrolidin oppløst i 40 ml 2N vandig hydrogenklorid ble omrørt i et oljebad som ble holdt ved 95-110°C i 1,5 time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen avkjølt til romtemperatur og dens pH ble justert til en verdi på fra 4 til 6 ved tilsats av ca. 40 ml 2N vandig løsning av natriumhydroksid, under omrøring. De krystaller ble utfelt, ble oppsamlet ved hjelp av filtrering, vasket med vann og underlagt lufttørring, for å gi 3,25 g av tittelforbindelsen, som smeltet ved 198-200°C.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (270 MHz, heksadeuterert dimetylsulfoksid), 6 ppm: 1,69 (1H, dublett av tripletter, J = 13,2 & 8,3 Hz), 2,44 (1H, dublett av tripletter, J = 13,2 & 6,8 Hz), 2,90 (1H, dublett av dubletter, J = 11,2 & 7,8 Hz), 3,15 - 3,60 (4H, multiplett),

3,66 (1H, triplett, J = 8,3 Hz),

7.73 (3H, singlett),

3.74 (2H, singlett),

6,88 (2H, dublett, J = 8,8 Hz),

7,25 (2H, dublett, J = 8,8 Hz).

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm<-1>:

1610, 1576, 1511, 1445, 1376, 1243.

89( ii) ( 2S, 4S)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl )- 2- pyrrolidinkarboksylsyre

En suspensjon av 1,87 g (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-pyrrolidinkarboksylsyre [fremstilt som beskrevet i trinn (i) ovenfor] i 80 ml 1:1 volumetrisk blanding av tetrahydrofuran og vann ble omdannet til en homogen løsning ved tilsats av 7 ml IN vandig løsning av natriumhydroksid. Løsningen ble is-avkjølt og omrørt, og litt etter litt ble en løsning av 1510 mg 4-nitrobenzyloksykarbonylklorid i 10 ml tetrahydrofuran og 7 ml IN vandig løsning av natriumhydroksid samtidig tilsatt dråpevis. Den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i ti minutter. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen fridd fra tetrahydrofuranet ved hjelp destillering under redusert trykk og dens pH ble justert til en verdi på mellom 2 og 3 ved tilsats av IN vandig hydrogenklorid. De krystaller som falt ut, ble oppsamlet ved hjelp av filtrering, vasket godt med vann og underlagt lufttørring. Krystallene ble ytterligere vasket med en liten mengde dietyleter og tørret, for å gi 2,42 g av tittelforbindelsen, som smeltet ved 96-98°C.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-l.

3000, 1746, 1673, 1511, 1341, 1178.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 5 ppm:

2,03 - 2,18 (1H, multiplett),

2,52 - 2,68 (1H, multiplett),

3,08 - 3,22 (1H, multiplett),

3,27 - 3,42 (1H, multiplett),

3,72 (2H, singlett),

3,79 (3H, singlett),

3,77 - 3,98 (1H, multiplett),

4,38 (1H, triplett, J = 7,3 Hz),

5.03 - 5,35 (2H, multiplett),

6,85 (2H dublett, J = 8,8 Hz),

7,22 (2H dublett, J = 8,8 Hz),

7,42&7,48 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,3 Hz), 8,16&8,22 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,3 Hz), 5.4 - 6,6 (1H, bred dublett).

Syntese 90

( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2-( 4- \ 2 -( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- oksy-etyll- 1- piperazinylkarbonyl}- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin

90( a)( i) ( 2S. 4S)- 2-( 4-\ 2 -( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- oksyetyl! - 1- piperazinylkarbonyl}- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 1- ( 4-nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

En løsning av 5,86 g 4-dimetylaminopyridin og 10,35 g p-nitrobenzylklorformiat i 40 ml tørr metylenklorid ble tilsatt, under isavkjøling, til en løsning av 22,35 g (2S,4S)-2-[4-(2-hydroksyetyl)-1-piperazinylkarbonyl]-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin i 160 ml tørr metylenklorid, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i én time. Reaksjonsblandingen ble deretter fortynnet med 3 00 ml etylacetat og den fortynnede løsning ble vasket, vekselvis med vann (100 ml, én gang), med en vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat (100 ml, én gang) og med en vandig løsning av natriumklorid (100 ml, én gang). Løsningsmidlet ble deretter fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og den resulterende destillasjonsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av etylacetat som eluent, for å gi 2 6,35 g av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks cm-<1>:

1748, 1710, 1655, 1608, 1521, 1346, 1251.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

1,72 - 1,84 (1H, multiplett),

2,26 - 2,73 (6H, multiplett),

2,97 - 3,16 (1H, multiplett),

3,29 - 4,10 (7H, multiplett),

3,72 (2H, singlett),

3,79&3,80 (tilsammen 3H, to singletter),

4,24 - 4,31 (2H, multiplett),

4,52 - 4,63 (1H, multiplett),

5,00 - 5,35 (4H, multiplett),

6,85 (2H dublett, J = 8,79 Hz),

7,23 (2H dublett, J = 8,79 Hz),

7,41 - 7,57 (4H, multiplett),

8,16 - 8,25 (4H, multiplett).

90( a)( ii) ( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2-{ 4- 12 -( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - oksyetyll- 1- piperazinylkarbonyl}- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin- bis-( trifluormetansulfonat)

135,75 mg trifluoreddiksyre og 6,18 ml trifluormetan-sulf onsyre ble tilsatt, under isavkjøling, til en løsning av 2 6,00 g (2S,4S)-2-{4-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-oksyetyl]-1-piperazinylkarbonyl}-4-(4-metoksybenzyltio)-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin i 38,3 ml anisol og den resulterende blanding ble omrørt i ved samme temperatur i 1,5 time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og den resulterende destillasjonsrest ble gjentatte ganger vasket med

dietyleter ved hjelp av dekantering og tørret i vakuum, for å gi 32,5 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

90( a) ( iii) (2S,4S)-4-merkapto-2-{4- [2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -oksyetyl]-1-piperazinylkarbonyl}-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin 20 ml 5% (vekt/vol) vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat ble tilsatt til 862 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-{4-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-oksyetyl]-1-piperazinylkarbonyl}-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin-bis-(trifluormetan-sulf onat) , og blandingen ble ekstrahert med 50 ml etylacetat. Ekstraktet ble vasket med vann og tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og den resulterende destil-lasj onsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av 20:1 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent, for å gi 514 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmaks_ cm-1:

2530, 1748, 1710, 1653, 1521, 1347.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), 6 ppm:

1,83 (1H, multiplett),

2,44 - 2,79 (7H, multiplett),

3,22 - 3,64 (6H, multiplett),

4,06 - 4,17 (1H, multiplett),

4,26 - 4,36 (2H, multiplett),

4,60 - 4,71 (1H, multiplett),

5,02 - 5,33 (4H, multiplett),

7,42 - 7,58 (4H, multiplett),

8,17 - 8,26 (4H, multiplett).

90( b)( i) ( 2S. 4R)- 4- hvdroksv- 2-( 4-\ 2 -( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- oksyetyll- 1- piperazinylkarbonyl}- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

25,7 ml dietylcyanofosfonat og 68,7 ml trietylamin ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en suspensjon av 47,8 g trans-4-(2-hydroksy-l-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-L-prolin og 64,8 1-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyloksy)-etyl]-piperazin-dihydroklorid i 400 ml tørr dimetylformamid og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i 30 minutter. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen fortynnet med 1,5 1 etylacetat og den fortynnede løsning ble vasket med vann og tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, for å gi 87,6 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr),J^^g cm<-1>:

1749, 1709, 1650, 1607, 1522, 1499, 1347, 1263.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

1,63 (1H, singlett),

1,92 - 2,38 (8H, multiplett),

3,41 - 3,83 (6H, multiplett),

4,24 - 4,32 (2H, multiplett),

4,55 - 4,60 (1H, multiplett),

4,79 - 4,90 (1H, multiplett),

5,03 - 5,35 (4H, multiplett),

7,44 - 7,57 (4H, multiplett),

8,17 - 8,25 (4H, multiplett).

90( b)( i') ( 2S. 4R)- 4- hydroksy- 2-{ 4-[ 2 -( 4- nitrobenzyloksy-karbonvl)- oksyetyll- 1- piperazinylkarbonyl}- 1-( 4- nitrobenzyl-oksykarbonvl)- pyrrolidin

608/il klortrimetylsilan og 670 til trietylamin ble, under isavkjøling, tilsatt til en løsning av 620 mg trans-hydroksy-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-L-prolin i 20 ml tørr acetonitril og den resulterende blanding ble omrørt i ved

romtemperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble løsningsmidlet fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og den resulterende destillasjonsrest ble blandet med en vandig løsning av natriumklorid. Blandingen ble deretter ekstrahert med etylacetat. Ekstraktet ble vasket med en vandig løsning av natriumklorid og tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble deretter fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, for å gi 648 mg trans-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-4-trimetylsilyloksy-L-prolin, i form av et pulver. Det hele av dette ble oppløst i 14 ml tørr acetonitril og deretter ble 330 mg N,N'-karbonyldiimidazol tilsatt. Den blanding som derved fremkom, ble omrørt ved romtemperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble en løsning av 630 mg 1-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-oksyetyl]-piperazin i 2 ml tørr acetonitril tilsatt til reaksjonsblandingen, og den resulterende blanding ble omrørt over natten ved romtemperatur og deretter ved 40°C i ytterligere én time. Reaksjonsblandingen ble deretter blandet med 14 ml IN vandig hydrogenklorid og omrørt ved romtemperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk, og konsentratet ble gjort svakt basisk ved tilsats av en vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat. Det ble deretter ekstrahert med etylacetat. Ekstraktet ble vasket med vann og tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og den resulterende destillasjonsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av en 9:1 volumetrisk blanding av etylacetat og metanol som eluent, for å gi 589 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver. Det infrarøde absorpsjonsspektrum og kjernemagnetiske resonansspektrum av den forbindelse som således fremkom, var identiske med dem for den forbindelse som ble fremstilt som beskrevet i trinn 90(b)(i) ovenfor.

90 ( b) ( i") ( 2S. 4R)- 4- hvdroksy- 2-{ 4-\ 2 -( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- oksyetyll- 1- piperazinylkarbonyl}- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin

343 mg N,N'-karbonyldiimidazol ble tilsatt til en løs-ning av 1,16 g trans-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-4-trimetyl-silyloksy-L-prolin i 14 ml tørr acetonitril, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i én time. En løs-ning av 275 mg 1-(2-hydroksyetyl)-piperazin i 1 ml tørr acetonitril ble deretter tilsatt til blandingen, og den blandingen ble omrørt over natten ved romtemperatur. Ved avslutning av

dette tidsrom, ble blandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk, og konsentratet ble blandet med en vandig løsning av natriumklorid. Blandingen ble deretter ekstrahert med etylacetat. Ekstraktet ble vasket med vann og tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble deretter fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, å gi 574 (2S,4R)-2-[4-(2-hydroksyetyl)-1-piperazinylkarbonyl]-4-trimetylsilyloksy-l- (4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin, i form av en olje. Det hele av den forbindelse som således fremkom, ble oppløst i 5,7 ml metylenklorid og 170 mg 4-dimetylaminopyridin og 300 mg 4-nitrobenzylklorf ormiat ble tilsatt løsningen under isavkjøling. Den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i én time og deretter ble løs-ningsmidlet fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk. 15 ml IN vandig hydrogenklorid ble tilsatt destillasjonsresten og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i én time. Reaksjonsblandingen ble deretter gjort svakt basisk ved tilsats av en vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat, hvoretter den ble ekstrahert med etylacetat. Ekstraktet ble vasket med vann og tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble deretter fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk. Ved å følge den fremgangsmåte som er beskrevet i trinn 90(b) (i') ovenfor, ble destillasjonsresten renset for å gi 348 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver. Det infrarøde absorpsjonsspektrum og kjernemagnetiske resonansspektrum av den forbindelse som således fremkom, var identiske

med dem for den forbindelse som ble fremstilt som beskrevet i trinn 90(b)(i) ovenfor.

90( b)( ii) ( 2S. 4S)- 4- acetyltio- 2-( 4-\ 2 -( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - oksyetyll- 1- piperazinylkarbonyl}- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

En løsning av 36,5 g dietylazodikarboksylat i 100 ml tetrahydrofuran ble tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av 105 g (2S,4R)-4-hydroksy-2-{4-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl ) -oksyetyl]-1-piperazinylkarbonyl}-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl) -pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinnene 90(b)(i), 90(b)(i'), og 90(b)(i") ovenfor] og 55 g trifenylfosfin i 700 ml tetrahydrofuran, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i 10 minutter. En løsning av 15,9 g merkaptoeddiksyre i 100 ml tetrahydrofuran ble deretter tilsatt dråpevis til blandingen, og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og konsentratet ble oppløst i 1,5 1 etylacetat. Den resulterende løsning ble deretter vasket med vann og med en vandig løsning av natriumklorid, i nevnte rekkefølge, hvoretter den ble tørret over vannfri natriumsulfat. Løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og deretter ble destillasjonsresten blandet med 400 ml diisopropyleter. Det diisopropyleter-løselige materiale ble ekstrahert og kastet. Den samme ekstraksjonsprosedyre ble gjentatt fire ganger og deretter ble den resulterende ekstraksjonsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom 3 kg silikagel, ved anvendelse av en fremgangsmåte med gradienteluering, med blandinger av etylacetat og metanol som volumetrisk spant fra 1:0 til 20:1, som eluent, for å gi 88,4 g av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), vmakS-cm-1:

1749, 1711, 1655, 1522, 1347, 1262, 1110.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz), 6 ppm:

1,82 - 1,93 (1H, multiplett),

2.34 (3H, singlett),

2.35 - 2,82 (7H, multiplett),

3,37 - 3,70 (5H, multiplett),

3,91 - 4,05 (1H, multiplett),

4,07 - 4,17 (1H, multiplett),

4,23 & 4,36 (tilsammen 2H, multiplett),

4,64 - 4,77 (1H, multiplett),

5,02 - 5,35 (4H, multiplett),

7,43 - 7,57 (4H, multiplett),

8,18 - 8,26 (4H, multiplett).

90( c)( i) ( 2S. 4R)- 4- metansulfonylokSY- 2-{ 4-\ 2 -( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- oksyetyll- 1- piperazinylkarbonyl}- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin 89fxl trietylamin og 50 fj. 1 metansulf onylkl or id ble tilsatt, under isavkjøling, til en løsning av 321 mg (2S,4R)-4-hydroksy-2-{4-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-oksyetyl]-1-piperazinylkarbonyl}-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin i 3,2 ml tørr tetrahydrofuran, og den resulterende blanding ble omrørt ved mellom 0°C og 5°C i 30 minutter og deretter ved romtemperatur i ytterligere én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og den resulterende inndampingsrest ble blandet med en vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat. Blandingen ble deretter ekstrahert med etylacetat. Ekstraktet ble vasket med en vandig løsning av natriumklorid og tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp destillering under redusert trykk, for å gi 345 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (KBr), J^a^g cm-1:

1751, 1710, 1654, 1607, 1523, 1436, 1406.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz), 6 ppm:

2,22 - 3,01 (8H, multiplett),

3,06 (3H, singlett),

3,40 - 4,03 (6H, multiplett),

4,25 - 4,47 (2H, multiplett),

4,84 & 4,89 (tilsammen 1H, to tripletter, J = 7,33 Hz), 5,04 - 5,37 (5H, multiplett),

7,46 Sc 7,50 (tilsammen 2H, to dubletter, J = 8,79 Hz), 7,56 (2H, dublett, J = 8,79 Hz),

8,19 - 8,26 (4H, multiplett).

90( c)( ii) ( 2S, 4S)- 4- acetyltio- 2-{ 4- T2-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - oksyetyll- 1- piperazinylkarbonyl}-!-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- pyrrolidin 51/il tioeddiksyre ble tilsatt, under isavkjøling, til en suspensjon av 26 mg natriumhydrid (i form av en 55 vekt% dispersjon i mineralolje) i 1,4 ml tørr N,N-dimetylformamid, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 30 minutter. En løsning av 340 mg (2S,4R)-4-metansulfonyloksy-2-{4-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-oksyetyl]-1-piperazinylkarbonyl}-!- (4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinnene 90(c)(i) ovenfor] i 2 ml tørr N,N-dimetylformamid ble deretter tilsatt blandingen, og blandingen ble omrørt ved mellom 80°C og 90°C i fire timer. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingens temperatur tillatt å synke til romtemperatur, hvoretter blandingen ble tømt over i en vandig løsning av natriumklorid og ekstrahert med etylacetat. Ekstraktet ble vasket med vann og tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og den resulterende destillasjonsrest ble opparbeidet og renset ifølge den fremgangsmåte som er beskrevet i trinn 90(b)(i) ovenfor, for å gi 166 mg av tittelforbindelsen, i form av et pulver. Det infra-røde absorpsjonsspektrum og kjernemagnetiske resonansspektrum av den forbindelse som således fremkom, var identiske med dem for den forbindelse som ble fremstilt som beskrevet i trinn 90(b)(ii) ovenfor.

90( c) ( ii*) ( 2S. 4S)- 4- acetvltio- 2-{ 4- 12 -( 4- nitrobenzyloksykarbonyl)- oksyetyll- 1- piperazinylkarbonyl}- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

En løsning av 1,10 g p-nitrobenzylklorformiat i 10 ml metylenklorid ble tilsatt, under isavkjøling, til en løsning av 1,63 g (2S,4S)-4-acetyltio-2-[4-(2-hydroksyetyl)-1-piperazinylkarbonyl]-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin og 0,62 g 4-dimetylaminopyridin i 15 ml metylenklorid, og den resulterende blanding ble omrørt ved samme temperatur i to timer. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen fortynnet med 100 ml etylacetat, og den fortynnede løs-ning ble vasket vekselvis med 100 ml av en vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat, med 100 ml vann og med 100 ml av en vandig løsning av natriumklorid. Oppløsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk og den resulterende destillasjonsrest ble renset ved hjelp av kolonnekro-matograf ering gjennom silikagel, ved anvendelse av en fremgangsmåte med gradienteluering med volumetriske blandinger av etylacetat og metanol som spant fra 30:1 til 25:1 som eluent, for å gi 1,86 g av tittelforbindelsen, i form av et pulver. Det infrarøde absorpsjonsspektrum og kjernemagnetiske resonansspektrum av den forbindelse som således fremkom, var identiske med dem for den forbindelse som ble fremstilt som beskrevet i trinn 90(b)(ii) ovenfor.

90( c) ( iii) ( 2S. 4S)- 4- merkapto- 2-{ 4- \ 2 -( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - oksyetyll- 1- piperazinylkarbonyl}- 1-( 4- nitrobenzyloksykarbonyl) - pyrrolidin

600 ml 10% (vekt/vol) metanolisk løsning av hydrogenklorid ble tilsatt til en løsning av 140 g (2S,4S)-4-acetyltio-2-{4-[2-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-oksyetyl]-1-piperazinylkarbonyl}-1-(4-nitrobenzyloksykarbonyl)-pyrrolidin [fremstilt som beskrevet i trinn 90(b)(ii) eller 90(c)(ii) ovenfor] i 150 ml 1,4-dioksan, og den resulterende blanding ble omrørt ved 50°C i én time. Ved avslutning av dette tidsrom, ble reaksjonsblandingen konsentrert ved hjelp av inndamping under redusert trykk og konsentratet ble fortynnet med

1500 ml etylacetat. Den fortynnede løsning ble nøytralisert med en vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat og vasket, vekselvis med 300 ml vann og med 300 ml av en vandig løsning av natriumklorid. Løsningsmidlet ble fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, og den resulterende destil-lasj onsrest ble renset ved hjelp av kolonnekromatografering gjennom silikagel, ved anvendelse av en fremgangsmåte med gradienteluering, med anvendelse av volumetriske blandinger av etylacetat og metanol som spant fra 30:1 til 20:1 som eluent, for å gi 96,44 g av tittelforbindelsen, i form av et fargeløst pulver. Det infrarøde absorpsjonsspektrum og kjernemagnetiske resonansspektrum av den forbindelse som således fremkom, var identiske med dem for den forbindelse som ble fremstilt som beskrevet i trinn 90(a)(iii) ovenfor.

Syntese 91

( 2S. 4S)- 1-( t- butoksykarbonyl)- 4-( 4- metoksybenzyltio)- 2-pyrrolidinkarboksylsyre

En løsning av 0,95 g di-t-butyldikarbonat i 4 ml tetrahydrofuran og 4,4 ml IN vandig løsning av natriumhydroksid ble samtidig tilsatt dråpevis, under isavkjøling, til en løsning av (2S,4S)-4-(4-metoksybenzyltio)-2-pyrrolidinkarboksylsyre i 18 ml tetrahydrofuran og 3,6 ml IN vandig løsning av natriumhydroksid. Blandingen ble deretter omrørt ved romtemperatur i én time, hvoretter tetrahydrofuranet ble fjernet ved hjelp av inndamping under redusert trykk og inndampingsresten ble surgjort til en pH-verdi på 2-3, ved tilsats av IN vandig hydrogenklorid og den resulterende blanding ble ekstrahert med etylacetat. Etylacetatløsningen ble vasket med vann og med en vandig løsning av natriumklorid, hvoretter den ble tørret over vannfri magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble deretter fjernet ved hjelp av destillering under redusert trykk, for å gi 1,33 g av tittelforbindelsen.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (væskefilm), vmaks cm-1:

1808, 1732, 1626, 1586, 1552, 1509, 1482, 1436, 1367, 1325, 1315, 1299, 1286, 1246, 1221.

Kjernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3+ D20, 270 MHz), ppm: 1,45 (9H, singlett),

1,88 - 2,61 (3H, multiplett),

3,03 - 3,34 (2H, multiplett),

3,64 - 3,95 (1H, multiplett),

3,72 (2H, singlett),

3,80 (3H, singlett) ,

4,15 - 4,35 (1H, multiplett),

6,85 (2H, dublett, J = 8,79 (Hz),

7,23 (2H, dublett, J = 8,79 (Hz).

Claims

1. 1-metylkarbapenemderivat,karakterisert vedat det har formel (I):

hvori: R<1>betegner: et hydrogenatom, eller en usubstituert alkylgruppe med fra 1 til 6 karbonatomer, og A betegner en gruppe av formelen (Al) eller (A2):

hvori: R betegner: et hydrogenatom eller en gruppe av formel -C(=NH)R^, hvorR^ betegner et hydrogenatom eller en usubstituert alkylgruppe med fra 1 til 6 karbonatomer , R^, r<4>ogR<7>er like eller forskjellige og hver betegner: et hydrogenatom eller en usubstituert alkylgruppe med fra 1 til 6 karbonatomer ,R^ betegner: et hydrogenatom eller en usubstituert alkylgruppe med fra 1 til 6 karbonatomer ;R^ betegner: et hydrogenatom, en usubstituert alkylgruppe med fra 1 til 6 karbonatomer, eller en gruppe av formel -C(=NH)R^, hvorR<1>^ betegner et hydrogenatom eller en usubstituert alkylgruppe med fra 1 til 6 karbonatomer ; d er 0 eller 1; m er 1 eller 2; og n er 2 eller 3; FORUTSATT AT, hvor A betegner en gruppe av formel (Al): betegnerR2,R^ ogR<4>ikke alle hydrogenatomer nårR<1>betegner et hydrogenatom; og farmasøytisk akseptable salter derav.

2. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisert vedat R<1>betegner: et hydrogenatom eller en alkylgruppe med fra 1 til 3 karbonatomer.

3. Forbindelse ifølge krav 1 eller 2,karakterisert vedat A 'betegner en gruppe av formel (Al).

4. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-3,karakterisert vedat R2 betegner: et hydrogenatom; eller en gruppe av formel -C(=NH)R^, hvor R* betegner et hydrogenatom eller en usubstituert alkylgruppe med fra 1 til 3 karbonatomer .;

5. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1 til 4, karakterisert vedat A betegner en gruppe av formel. (Al), og R<3>og R<4>betegner hver et hydrogenatom eller en alkylgruppe med fra 1 til 3 karbonatomer.;

6. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisert vedat: A betegner en gruppe av formel (Al); n er 2; R<1>betegner et hydrogenatom eller en metylgruppe; R<2>betegner et hydrogenatom, en formimidoylgruppe eller en acetimidoylgruppe; ogR<3>ogR<4>er like eller forskjellige og hver betegner et hydrogenatom eller en metylgruppe.;

7. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisert vedat: A betegner en gruppe av formel (Al); n er 3; R<1>betegner et hydrogenatom eller en metylgruppe; R betegner et hydrogenatom, en formimidoylgruppe eller en acetimidoylgruppe; ogR<3>ogR<4>er like eller forskjellige og hver betegner et hydrogenatom eller en metylgruppe.;

8. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisert vedat: A betegner en gruppe av formel (Al); n er 2; R<1>betegner et hydrogenatom eller en metylgruppe;R<2>betegner et hydrogenatom, en formimidoylgruppe eller en acetimidoylgruppe;R<3>betegner et hydrogenatom; ogR<4>betegner en metylgruppe.;

9. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisert vedat: A betegner en gruppe av formel (Al); n er 3; R<1>betegner et hydrogenatom eller en metylgruppe; R<2>betegner en formimidoylgruppe eller en acetimidoylgruppe; ogR<3>ogR<4>er like eller forskjellige og hver betegner et hydrogenatom .;

10. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisert vedat: A betegner en gruppe av formel (A2), og R' betegner: et hydrogenatom eller en alkylgruppe med fra 1 til 3 karbonatomer .;

11. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisert vedat A betegner en gruppe av formel (A2), og R betegner: et hydrogenatom eller en alkylgruppe med fra 1 til 3 karbonatomer.;

12. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisert vedat A betegner en gruppe av formel (A2), og R 9 betegner: et hydrogenatom; en alkylgruppe med fra 1 til 3 karbonatomer; eller en gruppe av formel -C(=NH)R<10>, hvoriR<10>betegner et hydrogenatom eller en alkylgruppe med fra 1 til 3 karbonatomer.;

13. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisert vedat: A betegner en gruppe av formel (A2); d er 0 eller 1; m er 1 eller 2; R<1>betegner et hydrogenatom eller en metylgruppe; R<7>betegner et hydrogenatom eller en alkylgruppe méd fra 1 til 3 karbonatomer; R° Q betegner et hydrogenatom eller en alkylgruppe med fra 1 til 3 karbonatomer; R<q*>betegner et hydrogenatom, en alkylgruppe med fra 1 til 3 karbonatomer, en formimidoylgruppe eller en acetimidoylgruppe.

14. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisert vedat: A betegner en gruppe av formel (A2); d er 0; m er 1 eller 2; R<1>betegner et hydrogenatom eller en metylgruppe;R' betegner et hydrogenatom; R° Q betegner et hydrogenatom eller en alkylgruppe med fra 1 til 3 karbonatomer; og Rq3 betegner et hydrogenatom, en alkylgruppe med fra 1 til 3 karbonatomer, en formimidoylgruppe eller en acetimidoylgruppe.

15. Forbindelser ifølge krav 1,karakterisert vedat disse er: 2- [2-( 1-homopiperazinylkarbonyl )-l-metylpyrrolidin-4-yltio] -6-(1-hydroksyetyl )-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre; 2-[2-(4-acetimidoylhomopiperazin-l-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre; 2-[2-(4-formimidoylhomopiperaz in-1-ylkarbonyl)-pyrroiidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylsyre; 2-[2-(4-formimidoylhomopiperazin-l-ylkarbonyl)-1-metylpyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksy1syre; 2-[1-metyl-(2-piperazin-l-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylsyre; 2-[2-(3-metylpiperazin-l-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre; 2-[2-(4-formimidoylpiperazin-1-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre; 2-[2-(4-acetimidoylpiperazin-l-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre; 2-[2-(4-formimidoylpiperazin-1-ylkarbonyl)-l-metylpyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksy1syre; 2-[2-(4-acetimidoylpiperazin-1-ylkarbonyl)-1-metylpyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre; 2-[2-(4-formimidoyl-3-metylpiperazin-l-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre; 2-[2-(4-acetimidoyl-3-metylpiperazin-l-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylsyre; 2-[2-(2-metylpiperazin-1-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylsyre; 2-[2-(4-formimidoyl-2-metylpiperazin-l-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre; 2-[2-(4-acetimidoyl-2-metylpiperazin-l-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylsyre; 2-[2-(3-acetimidoylaminopyrrolidin-1-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre; 2-[2-(3-formimidoylaminopyrrolidin-1-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre; 2-[2-(3-aminopyrrolidin-1-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre; 2-[2-(4-acetimidoylaminopiperidin-l-ylkarbonyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylsyre; 2-[2-(3-aminopyrrolidin-l-ylkarbonylJ-l-metyl-pyrrol idin-4 -yl t io ] -6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylsyre; 2-[2-(3-acetimidoylaminopyrrolidin-1-ylkarbonyl)-1-metylpyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylsyre; 2-[2-(3-formimidoylaminopyrrolidin-l-ylkarbonyl)-l-metylpyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-1-metyl-1-karbapen-2-em-3-karboksylsyre; 2-[2-(4-acetimidoylaminopiperidin-l-ylkarbonyl)-1-metylpyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksylsyre; 2-[2-(1-formimidoylpyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-pyrrolidin-4-yltio]-6-(1-hydroksyetyl)-l-metyl-l-karbapen-2-em-3-karboksy1syre; og farmasøytisk akseptable salter og estere derav.

16. Farmasøytisk preparat, karakterisert vedat det omfatter en farma-søytisk akseptabel bærer, et fortynningsmiddel eller adjuvans i blanding med en effektiv mengde av et antibiotikum, og hvor antibiotikumet er valgt fra forbindelser av formel (I) og far-masøytisk akseptable salter og estere derav, ifølge hvilket som helst av kravene 1-15.