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KR20180065782A - 효율적인 사이코스의 제조 방법 - Google Patents

효율적인 사이코스의 제조 방법 Download PDF

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KR20180065782A
KR20180065782A KR1020160167048A KR20160167048A KR20180065782A KR 20180065782 A KR20180065782 A KR 20180065782A KR 1020160167048 A KR1020160167048 A KR 1020160167048A KR 20160167048 A KR20160167048 A KR 20160167048A KR 20180065782 A KR20180065782 A KR 20180065782A
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Abstract

본 발명은 사이코스 제조 공정에서 사이코스 전환 반응물을 고순도 크로마토그래프로 분리 공정에서 얻어지는 과당 라피네이트를 효율적으로 활용하는 방법에 관한 것으로서, 구체적으로, 사이코스 제조 공정에서 얻어지는 과당 라피네이트를 과당 제조 공정에 투입하여 사이코스 제조를 위한 과당-함유 원료 용액 제조에 활용되는 것이다.

Description

효율적인 사이코스의 제조 방법{METHOD OF PRODUCING PSICOSE EFFICIENTLY}
본 발명은 사이코스 제조 공정에서 얻어지는 과당 라피네이트를 효율적으로 활용하는 방법에 관한 것으로서, 구체적으로, 사이코스 제조 공정에서 얻어지는 과당 라피네이트를 과당 제조 공정에 투입하여 사이코스 제조를 위한 과당-함유 원료 용액 제조에 활용하는 것이다.
사이코스(Pscicose)는 과당(D-fructose)의 에피머로서 희소당으로 알려진 기능성 당류의 일종으로, 설탕의 약 60 내지 70%의 높은 감미도를 나타내면서도 열량은 거의 제로 칼로리에 가까워 당뇨병의 예방 및 개선에 효능이 있는 것으로 알려져 있다. 또한 사이코스는 용해성도 우수한 것으로 알려져 있어, 식품에의 활용이 주목되고 있는 소재 중 하나이다.
사이코스를 제조하는 방법은 화학적 방법 및 생물학적 방법이 있으며 최근 생물학적 방법으로 사이코스를 제조하는 방법은, 과당-함유 기질 용액과 사이코스 에피머화 효소 또는 상기 효소를 생산하는 균체와 접촉하여 사이코스 전환반응을 수행한다.
사이코스 전환 공정에 사용되는 반응 원료인 과당 함유 용액이 전분 등의 분해로부터 얻어지는 포도당을 이성화 반응으로 얻어진 과당 이성화 반응물일 수 있다.
그러나, D-사이코스를 포함하는 반응액은 저순도 제품이기 때문에 고순도로 사이코스를 분리하는 것이 요구된다. 실제로 산업적으로 생산되는 소재들은 고순도로 분리하기 위해 다양한 방법들이 적용되고 있으며, 당의 경우 주로 크로마토그래피를 사용하여 고순도액을 만든 후, 결정화하여 제품을 생산하고 있다. 상기 사이코스 전환 반응액으로부터 고순도 사이코스 제품을 얻기 위해서는 고순도 분리공정을 수행하며, 또한 사이코스 결정을 얻기 위해서는 고순도의 사이코스 시럽을 이용하여 사이코스 결정화 공정을 수행할 수 있다.
상기 사이코스 분리공정에는 사이코스 분획뿐만 아니라 과당을 고농도로 포함하는 과당 분획이 라피네이트로 얻어지므로 상기 과당 라피네이트를 재활용하여 사이코스 순도 및 수율을 향상시키고 원료의 이용률을 높이는 방법이 필요한 실정이다.
본 발명의 목적은, 과당 라피네이트를 활용하여 사이코스 순도 및 수율을 향상시키고 원료의 이용률을 높이고자, 사이코스 제조 공정의 과당 라피네이트를 과당 제조의 분리 공정에 투입하여 과당-함유 원료를 제조하고, 상기 제조된 과당-함유 원료 사이코스 제조 공정의 원료로서 투입하여 사이코스를 제조하는 방법 및 이에 사용되는 장치에 관한 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 과당 라피네이트를 재활용하여 사이코스 순도 및 수율을 향상시키고 원료의 이용률을 높이고자, 사이코스 제조 공정의 과당 라피네이트를 과당 제조의 분리 공정에 투입하여 과당-함유 원료를 제조하는 방법 및 이에 사용되는 장치에 관한 것이다.
본 발명의 일예는 사이코스 제조의 분리공정에서 얻어지는 과당 라피네이트를 과당 제조의 분리공정에 투입하여 과당-함유 원료를 제조하고, 상기 제조된 과당-함유 원료를 사이코스 제조 공정의 원료로서 투입하여 사이코스를 제조하는 방법 및 장치에 관한 것이다. 본 발명에 따른 사이코스 제조를 위한 과당-함유 원료의 제조방법 및 상기 과당 라피네이트를 재활용하여 사이코스 순도 및 수율을 향상시키고 원료의 이용률을 높이는 방법이다.
본 발명에 따른 사이코스 제조방법에 있어서, 사이코스 제조의 분리공정에는 과당을 고농도로 포함하는 과당 라피네이트가 얻어지므로, 과당 라피네이트를 과당 제조의 분리공정에 투입하여 과당-함유 원료를 제조하고, 상기 제조된 과당-함유 원료를 사이코스 제조 공정의 원료로서 투입하여 사이코스를 제조하는 방법은, 사이코스 제조 공정에 과당 제조 공정을 활용하는 공정이다.
본 발명의 일예는, 사이코스 전환 반응물을 모사 이동층(simulated moving bed, SMB) 크로마토그래피로 분리하여 사이코스 분획과 과당 라피네이트를 얻고, 상기 과당 라피네이트를 사이코스 전환 반응의 원료로 재순환되는 단계를 포함하는 사이코스의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명의 추가 일예는, 사이코스 전환 반응물을 모사 이동층(simulated moving bed, SMB) 크로마토그래피로 분리하여 사이코스 분획과 과당 라피네이트를 얻고, 상기 과당 라피네이트를 과당 제조의 분리 공정에 투입하여, 사이코스 제조를 위한 과당-함유 원료를 제조하는 방법에 관한 것이다.
본 발명의 또 다른 일예는 생물학적 촉매를 이용하여 과당 원료로부터 사이코스 전환반응을 수행하는 사이코스 전환 반응기,
활성기가 부착된 양이온교환수지가 충진된 칼럼을 포함하고, 원료 투입구, 및 사이코스 분획과 과당 라피네이트를 배출하는 배출구를 구비한 모사 이동층(simulated moving bed, SMB) 크로마토그래피 분리기, 및
상기 분리기에서 배출된 과당 라피네이트를 제공받아 과당을 분리하는 과당 분리 장치를 포함하는 사이코스 제조 장치에 관한 것이다. 상기 사이코스 제조장치는 추가로 과당 분리 장치에서 얻어진 과당-함유 원료를 사이코스 전환 반응기로 투입하는 장치 또는 배출된 과당-함유 원료를 사이코스 제조 장치에 제공하기 위한 과당 제조 장치와 사이코스 제조 장치를 연결하는 연결부를 포함할 수 있다. 또한, 상기 사이코스 제조장치는, 선택적으로 상기 과당-함유 원료를 저장하는 저장조를 포함하여 사이코스 전환 반응기에 투입하는 원료량 및 투입속도를 조절할 수 있다.
이하, 본 발명을 더욱 자세히 설명하고자 한다.
본 발명에 따른 과당-함유 원료를 제조하는 방법은, 사이코스 전환 반응물을 모사 이동층(simulated moving bed, SMB) 크로마토그래피로 분리하여 사이코스 분획과 과당 라피네이트를 얻고, 상기 과당 라피네이트를 과당 제조의 분리공정으로 투입하여 과당-함유 원료를 제조하는 방법이다.
일 구체예에서, 과당-함유 원료를 제조하는 방법은 (1)과당-함유 원료로 사이코스 전환 반응물을 제조하는 사이코스 전환 공정; (2)상기 전환 반응물을 이온정제 및 모사 이동층(simulated moving bed, SMB) 크로마토그래피를 이용한 분리를 수행하여 사이코스 분획과 과당 라피네이트를 얻는 사이코스 분리 공정; 및 (3) 상기 과당 라피네이트를 과당 제조의 분리공정으로 투입하여 과당-함유 원료를 제조하는 공정을 포함한다.
본 발명에 따른 사이코스를 제조하는 방법은, 사이코스 전환 반응물을 모사 이동층(simulated moving bed, SMB) 크로마토그래피로 분리하여 사이코스 분획과 과당 라피네이트를 얻고, 상기 과당 라피네이트를 과당 제조의 분리공정으로 투입하여 과당-함유 원료를 제조하고, 상기 과당-함유 원료를 이용하여 사이코스 전환 반응을 수행하는 단계를 포함할 수 있다.
일 구체예에서, 사이코스 제조방법은 (1)과당-함유 원료로 사이코스 전환 반응물을 제조하는 사이코스 전환 공정; (2)상기 전환 반응물을 이온정제 및 모사 이동층(simulated moving bed, SMB) 크로마토그래피를 이용한 분리를 수행하여 사이코스 분획과 과당 라피네이트를 얻는 사이코스 분리 공정; (3) 상기 과당 라피네이트를 과당 제조의 분리공정으로 투입하여 과당-함유 원료를 제조하는 공정 및 (4) 상기 얻어진 과당-함유 원료를 사이코스 전환 공정으로 투입하는 공정을 포함한다. 상기 사이코스 제조방법은, (5)사이코스 제조의 분리 공정에서 얻어지는 상기 사이코스 분획을 이온정제, 농축 및 결정화하는 사이코스 결정화 공정을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 사이코스 제조 공정은 연속식과 배치식 모두 사용가능하며, 바람직하게는 연속식 공정이다.
본 명세서에서, 용어 "라피네이트(raffinate)"라 함은 추잔액이라고도 하며, 분리공정에 투입된 원료가 분리공정을 통과하여 얻어지는 산물에는 분리공정으로 함량을 높이고자 하는 목적 물질을 포함하는 목적 분획과, 분리공정에서 제거 또는 함량을 감소하고자 하는 물질등을 포함하는 잔류액을 포함하며, 상기 잔류액 라피네이트라고 한다. 본 발명의 일 예에서 사이코스 전환 공정에서 얻어지는 산물은 원료 기질인 과당과 생산물인 사이코스를 포함하는 혼합물이며, 고순도 분리공정을 거치면서 목적 물질인 사이코스의 함량이 증가된 사이코스 분획과 잔류액을 얻으며, 잔류액에는 사이코스 전환 반응의 기질인 과당이 다량 포함되므로 과당 라피네이트를 의미할 수 있다.
본 발명은 과당 라피네이트의 활용을 통한 효율적으로 사이코스를 생산하고, 과당 라피네이트를 과당 제조 공정에 투입하여 과당-함유 원료를 얻고, 이어지는 사이코스 전환 공정에 원료로 사용되어, 과당 제조 공정의 수율을 높일 수 있으며, 과당 제조 공정을 이용하여 과당 라피네이트를 처리하므로 별도로 처리 장치가 필요하지 않아 공정 설계 및 운영면에서 유리하다.
이하, 본 발명에 따라 사이코스 전환 반응의 산물의 고순도 분리 공정에서 얻어지는 과당 라피네이트 재순환을 통한 사이코스 제조 공정을 각 단계별로 자세히 기술하고자 한다.
(1) 사이코스 전환 공정
사이코스 전환 공정은, 사이코스 전환 반응을 수행하여 과당-함유 원료로부터 사이코스를 전환하는 공정으로서, 공정의 산물로서 과당으로부터 전환된 사이코스를 함유하는 반응액을 얻는다.
본 발명의 일 구체예에서, 생물학적 방법에 따라 사이코스를 제조하는 방법으로는 사이코스 에피머화 효소를 생산하는 균주 또는 사이코스 에피머화 효소를 암호화하는 유전자가 도입된 재조합 균주를 배양하고, 이로부터 얻어진 사이코스 에피머화 효소를 과당-함유 원료와 반응하여 생산할 수 있다. 상기 사이코스 에피머화 효소는 액상 반응 또는 고정화 효소를 이용한 고상 반응으로 수행될 수 있다.
또는, 사이코스 에피머화 효소를 생산하는 균주 또는 사이코스 에피머화 효소를 암호화하는 유전자가 도입된 재조합 균주를 얻고, 균주의 균체, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 및 상기 파쇄물 또는 배양물의 추출물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 사이코스 생산용 조성물을, 과당-함유 원료와 반응하여 제조될 수 있다. 사이코스 에피머화 효소를 생산하는 균주의 균체를 이용하여 사이코스를 제조하는 경우 액상 반응 또는 고정화 균체를 이용한 고상 반응으로 수행될 수 있다.
본 발명의 구체적 일예에서, 사이코스 에피머화 효소를 생산하는 균주로는 높은 안정성을 가지면서도 고수율로 사이코스 에피머화 효소를 생산할 수 있는 균주일 수 있으며. 상기 재조합 균주는 다양한 숙주세포, 예컨대 대장균, 바실러스속 균주, 살모넬라속 균주 및 코리네박테리움속 균주 등을 사용할 수 있으나, 바람직하게는 GRAS 균주인 코리네박테리움속 균주일 수 있으며, 코리네박테리움 글루타리쿰일 수 있다.
본 발명의 일 예에 따른 사이코스 전환 공정은 생물학적 방법으로 수행하며, 상기 사이코스 에피머화 효소를 담체에 고정화시키는 단계는 고정화된 효소를 컬럼에 충진시키는 단계 및 상기 충진된 컬럼에 과당 용액을 공급하는 단계를 더 포함할 수 있다. 효소나 균체가 고정화된 담체를 충진시킬 컬럼 및 상기 컬럼에 충진시키는 방법은 본 발명이 속하는 기술 분야의 당업자가 사용된 효소나 균체, 또는 고정화 담체에 따라 적합한 것으로 용이하게 선택하여 수행할 수 있다. 본 발명의 일 구체예에서, 상기 고정화된 효소를 컬럼에 충진시켜 충진상 컬럼(packed-bed column)을 제조할 수 있다. 충진상 컬럼에 기질인 과당 용액을 공급하는 것에 의해 효소 반응, 즉, 과당의 사이코스로의 전환이 수행될 수 있다.
상기 사이코스의 전환반응에 있어서, 상기 반응은 pH 4.5 내지 7.5, 예컨대, pH 4.7 내지 7.0, 또는 pH 5.0 내지 6.0 또는 pH 5.0 내지 5.5의 조건 하에서 수행될 수 있다. 또한, 상기 반응은 30℃ 이상, 예컨대 40℃ 이상의 온도 조건 하에서 수행될 수 있다. 상기 과당을 사이코스로 전환시키는 효소(예컨대, 에피머레이즈)는 금속 이온에 의하여 활성화가 조절될 수 있으므로, 상기 사이코스 생산에 있어서, 금속 이온을 첨가하면 과당에서 사이코스로의 전환 효율, 즉 사이코스 생산률이 증가될 수 있다. 따라서, 상기 사이코스 생산용 조성물은 구리 이온, 망간 이온, 칼슘 이온, 마그네슘 이온, 아연 이온, 니켈 이온, 코발트 이온, 철 이온, 알루미늄 이온 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 금속 이온을 추가로 포함하는 것일 수 있다.
사이코스 및 이의 제조방법에 관한 자세한 기술내용은 한국공개특허 제2014-0021974호, 한국공개특허 제2014-0054997, 한국공개특허 제2014-0080282호, 또는 한국등록특허 제10-1318422호에 기재되어 있다.
본 발명에 따른 사이코스 전환 공정에 투입되는 과당 원료는 생물학적 방법또는 화학적 방법으로 제조될 수 있으며, 바람직하게는 생물학적 방법이다. 상기 과당 원료는 과당 시럽과 같은 액상 원료, 또는 과당 분말과 같은 분말 원료로 제공될 수 있으며, 상기 과당 시럽의 경우 생물학적 방법 또는 화학적 제조 공정에서 얻어진 산물의 형태이거나, 과당 분말을 물과 같은 용매에 용해하여 제조된 것일 수 있다.
상기 과당 원료를 생물학적 방법으로 제조하는 일예는, 포도당-함유 원료를 과당 이성화 효소 또는 상기 효소를 생산하는 균체를 이용하여 이성화하는 과당 이성화 공정을 수행하고, 상기 과당 이성화 공정의 반응물을 제1차 이온정제, 고순도 크로마토그래피 분리공정, 제2차 이온정제 및 농축하는 공정을 통해 분리하여 얻을 수 있다. .
상기 사이코스 생산 방법에 있어서, 효율적인 사이코스 생산을 위하여, 기질로서 사용되는 과당의 농도는 전체 반응물 기준으로 85 w/v% 이상, 90 w/v% 이상, 또는 95 w/v% 이상일 수 있으며, 예를 들면 85 내지 99 w/v%, 88 내지 99 w/v%, 88 내지 99w/v%, 85 내지 87 %(w/v), 88 내지 90 %(w/v), 91 내지 93 %(w/v), 94 내지 99 %(w/v) 또는 97 내지 99 %(w/v)일 수 있다. 과당의 농도공정의 경제성 및 과당의 용해성을 고려하여, 결정할 수 있으며, 상기 과당은 완충용액 또는 물(예컨대 증류수)에 용해된 용액 상태로 사용될 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 따른 과당 제조 공정을 구체적으로 설명하면, 과당은 과당은 설탕 또는 포도당으로부터 얻어질 수 있다. 이를 통해, 포도당, 과당, 설탕과 같이 보편화되고 저렴한 원료를 사용하여 높은 수율의 사이코스를 제조하는 방법을 제공하여 사이코스의 대량 생산을 가능하게 할 수 있다.
본 발명의 과당 제조 공정의 일예를 설명하면, 옥수수 전분을 30 내지 35 중량%가 되도록 물과 혼합한 후, 효소 가수분해를 진행하여 포도당 함량 88 중량% 이상의 당화액을 수득한다. 그 다음, 상기 당화액의 불순물을 제거하는 공정과 과당 이성화 공정을 거쳐 과당 함량 40 내지 44 중량%의 과당 시럽을 수득한다. 그 다음, 모사 이동층 흡착 분리 방법(simulated moving bed, SMB)을 이용하여 포도당 라피네이트와 과당 분획을 얻고, 상기 과당 분획을 제2차 이온정제 및 농축 공정을 수행하여 과당 함량이 85 중량%이상, 예를 들면 85 내지 99 중량%의 과당-함유 용액을 얻는다. 모사 이동층 흡착 분리 방법은 하기 (2)번 항목에서 상술한 바와 같다. 상기 불순물을 제거하는 공정은 불용성 물질의 제거 공정, 및 활성탄을 이용한 탈색 공정, 유색 성분과 이온 성분 등의 불순물을 제거하기 위해 이온교환 수지가 충진된 컬럼에 통액시켜 수행할 수 있다.
과당 분리 공정의 구체적인 예는, 제1차 이온정제, 고순도 크로마토그래피 분리, 제2차 이온정제, 농축 및 결정화 공정을 포함할 수 있으며, 선택적으로 사이코스 전환 반응물을 탈염공정, 탈색공정 또는 탈색과 탈염 공정을 수행할 수 있다.
본 발명의 과당 제조 공정에 포함된 농축 공정은 다양한 방법으로 농축하여 과당 함량을 85중량% 이상으로 포함하도록 한다. 예를 들면, 모사 이동층 흡착 분리 방법으로 얻어진 과당 분획(예를 들면, 고형분 농도 20~30%)을 농축 공정을 통해 고형분 농도 45 내지 55 중량% 농축할 수 있다.
본 발명에 따른 사이코스 제조 공정은, 상기 사이코스 전환 반응물을 이온정제 및 모사이동층(SMB) 크로마토그래프 분리 공정을 포함하는 사이코스 전환 반응물의 분리공정을 수행할 수 있다. 구체적인 일예에서, 상기 사이코스 전환 반응물을 SMB 크로마토그래피 분리를 수행하여, 전환 반응물보다 사이코스 함량이 높은 사이코스 분획과 과당 라피네이트로 분리하고, 상기 사이코스 분획은 사이코스 농축 공정 또는 결정화 공정으로 투입되고, 과당 라피네이트는 과당 제조 공정으로 투입되어 재순환한다.
상기 사이코스 분획 내 사이코스의 함량은 85중량% 이상, 예를 들면 85 중량% 내지 95 %(w/w) 이상이 되도록 분리/정제하는 것을 포함할 수 있다. 상기 고순도 분리 공정에서 얻어지는 과당 라피네이트 내 과당 함량은 85 중량%이상, 예를 들면 85 중량% 내지 98 중량%일 수 있다. 과당 라피네이트 중에서 과당과 포도당을 제외한 기타 이당류 이상의 당류의 함량은 10 중량% 미만이 바람직하다. 상기 불순물중 이당류 이상의 당류는 말토오스, 이소말토오스 등을 포함하며, 말토오스 또는 이소말토오스 관련 올리고사카라이드를 포함할 수 있다.
상기 과당 라피네이트의 재순환 횟수가 증가할수록 불순물의 함량이 증가한다. 상기 과당 라피네이트의 불순물 함량이 특정 수치 범위 이하로 유지할 수 있도록 공정을 수행하는 것이 바람직하며, 상기 불순물 함량이 특정 수치 범위를 초과할 경우, 사이코스 제조 공정에서 일부 또는 전부를 배출하여 제거될 수 있다. 예를 들면, 과당 라피네이트 내 이당류 이상의 당류 함량이, 과당 라피네이트의 총 당류 100중량% 기준으로 10 중량%미만, 예를 들면 8 중량%미만, 6 중량%미만, 또는 5 중량% 미만으로 유지되는 것이 바람직하다.
상기 사이코스 제조 공정에서 이온 정제 공정은 반응물내 포함된 이온을 제거하는 공정으로서, SMB 크로마토그래피 분리 공정 전 및/또는 이후에 수행할 수 있다. 상기 SMB 크로마토그래피 분리를 수행하기 전에 이온정제 공정을 수행하는 제1차 이온정제는 하기 사이코스 분획의 제2차 이온정제와 동일 또는 상이한 방법으로 수행할 수 있으며, 예를 들면 동일 종류 또는 상이한 종류의 이온교환수지가 충진된 분리탑을 1 개 또는 2 개 이상 사용하여 수행할 수 있다. 상기 이온 정제 공정은 이온정제에 사용되는 수지의 물성 및 이온 정제 효율을 고려하여 35 내지 50℃ 온도, 예를 들면 38 내지 58℃에서 수행될 수 있다.
본 발명의 일예에서, 상기 사이코스 전환 반응물의 제1차 이온 정제 공정을 수행하기 전에, 선택적으로 사이코스 전환 반응물을 활성탄으로 처리하는 공정을 추가로 수행할 수도 있다.
본 발명의 일 예에서, SMB 크로마토그래피를 이용한 고순도 분리 공정은 분리과정에서 상 변화가 없어 물질의 안정성 확보에 용이한 분리방법이다. 이러한 흡착 분리방법 중에서 액상 흡착 분리방법으로는 크로마토그래피 분리방법이 많이 사용되고 있다. 이중, 모사 이동층 흡착 분리 방법(simulated moving bed, SMB)은 1961년 미국특허 제2,985,589호 에서 제안된 분리 기술로, 다수의 컬럼을 이용하여 연속적으로 분리함으로써 기존의 회분식 크로마토그라피에 비해 순도 및 생산성이 우수하고, 적은 용매의 사용이 가능하다는 장점을 지닌다. 상기 모사 이동층(SMB) 흡착 분리 공정은 분리대상 혼합물의 주입과 라피네이트 및 추출물의 생산이 연속적으로 이루어지는 공정이다.
SMB의 기본 원리는 칼럼 사이의 위치를 일정 시간 간격으로 움직임으로써 고정상과 이동상의 향류의 흐름을 모사하고 연속적인 분리를 가능하게 하는 것이다. 흡착제와 친화력이 약해서 빨리 움직이는 물질은 액상의 흐름 방향으로 움직여서 extract로 모이고 흡착제와 친화력이 강해서 느리게 움직이는 물질은 고정상의 흐름 방향으로 움직여서 라피네이트(raffinate)로 모인다. 칼럼은 연속적으로 연결되어 있으며 입구는 혼합물과 이동상, 출구는 목적 추출물(extract)과 라피네이트로 구성된다.
상기 SMB에서 분리수지로서 단당 분리 공정에도 널리 사용되고 있는 염이 첨가된 강산의 양이온 교환수지를 사용하므로 분리공정을 수행 후 얻어지는 산물에는 금속이온이 포함된다. 상기 강산의 양이온 교환수지의 예는 칼슘 활성기가 부착된 양이온교환수지일 수 있다.
도 1은 일반적인 모사 이동층(SMB) 흡착 분리 장치의 공정도를 나타낸다. 일반적인 모사 이동층(SMB) 흡착 분리 장치는 하나 또는 그 이상의 컬럼으로 구성된 4개의 구간과 각 구간 사이에 위치한 탈착제(desorbent) 유입 포트, 강 흡착질인 추출물(extract) 배출 포트, 분리대상 혼합물(feed) 유입 포트 및 약 흡착질인 라피네이트(raffinate) 배출 포트로 구성된다. 유사 이동층(SMB) 흡착 분리 장치를 사용한 혼합물의 분리방법은 방향족 탄화수소의 혼합물의 분리, 에틸벤젠의 분리 공정, 키랄 화합물의 분리 공정 등에 적용될 수 있으며, 의약품 제조 과정 중 최종 산물 혹은 중간 물질인 라세미 혼합 의약품의 분리 공정 등에 적용될 수 있다.
상기 고순도 분리 공정은 45 내지 70℃ 온도, 예를 들면 50 내지 65℃에서 수행될 수 있다.
(3) 과당 라피네이트의 과당 제조공정에 투입
본 발명에 따른 사이코스 제조의 고순도 크로마토그래피 분리 공정에서 얻어지는 과당 라피네이트를 과당 제조의 분리공정에 투입하여 과당-함유 원료를 제조하고, 상기 제조된 과당-함유 원료를 사이코스 제조 공정의 원료로서 투입하여 사이코스를 제조한다.
사이코스 제조의 과당 라피네이트를 재순환하여 반응 원료로 사용함으로써 사이코스의 생산 수율을 최대로 높이고 사이코스의 제조원가를 낮출 수 있다. 또한, 사이코스 제조의 과당 라피네이트를 과당 제조 공정을 이용하여 과당 라피네이트를 처리하므로 별도로 처리 장치가 필요하지 않아 공정 설계 및 운영면에서 유리하다. 상기와 같은 사이코스 제조 공정의 운영으로 사이코스와 같은 목적 산물을 연속적으로 생산하기 위해 생물 반응기를 초기 활성 대비 적합한 수준의 생산성을 유지하면서 운전할 수 있다.
본 발명의 일예에서, 사이코스 제조의 고순도 분리 공정에서 얻어지는 과당 라피네이트는 사이코스 전환 반응의 원료로 사용하기에 적절한 조건을 갖도록, 이온정제, 고순도 분리 공정(예, SMB 분리) 및 농축 공정으로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 공정을 추가로 수행할 수 있으며, 상기 공정은 과당 제조의 분리 공정에 투입하여 과당 제조 장치를 이용하여 수행할 수 있다.
본 발명의 일예에 따라 사이코스 제조 공정에서 얻어진 과당 라피네이트를 과당 제조의 분리공정으로 재순환하여 과당 분리공정을 수행하는 경우, 과당 제조 공정에서 수행되는 SMB 크로마토그래프 분리공정에서, 과당 라피네이트의 재순환이 없는 공정에 비해 과당 라피네이트의 재순환이 있는 공정이 과당 분획의 고형분 분리 수율이 증가하며, 예를 들면 과당 라피네이트의 재순환이 있는 공정SMB 분리 공정에 투입된 원료의 고형분 100중량%를 기준으로 과당 분획의 고형분 분리수율이 50 내지 80 중량%일 수 있다.
구체적 일예에서, 상기 과당 라피네이트를, 과당 제조의 분리공정인 제1차 이온정제, SMB 크로마토그래피를 이용한 분리 및 제2차 이온정제로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 공정에, 투입하여 재순환할 수 있다. 바람직하게는, 상기 과당 라피네이트에서 과당과 함께 얻어지는 포도당 및 이당류 이상의 과당 이외의 불순물의 함량이 특정 함량 이하로 유지될 수 있도록, 과당 라피네이트를 제1차 이온정제 또는 고순도 분리 공정에 투입하여 진행할 수 있다. 제1차 이온정제 또는 고순도 분리 공정에 과당 라피네이트를 투입하는 경우, 과당 제조의 고순도 분리 공정에서 과당을 제외한 포도당 및 기타 이당류를 포함하는 불순물이 포도당 라피네이트에 포함되어 제거되어 과당 분획에는 농도가 감소하기 때문이다.
상기 과당 라피네이트의 불순물 함량이 특정 수치 범위를 초과할 경우, 사이코스 제조 공정에서 배출하여 제거될 수 있다. 예를 들면, 과당 라피네이트 내 이당류 이상의 당류 함량이, 과당 라피네이트의 총 당류 100중량% 기준으로 과당 라피네이트 내 이당류 이상의 당류 함량이, 과당 라피네이트의 총 당류 100중량% 기준으로 10 중량%미만, 예를 들면 8 중량%미만, 6 중량%미만, 또는 5 중량% 미만으로 유지되는 것이 바람직하다. 상기 불순물중 이당류 이상의 당류는 말토오스, 이소말토오스 등을 포함하며, 말토오스 또는 이소말토오스 관련 올리고사카라이드를 포함할 수 있다.
과당 라피네이트는 SMB 분리공정을 칼슘 함량이 증가하게 되며 이러한 칼슘은 사이코스 전환 반응의 활성을 떨어뜨리게 될 수 있어, 칼슘 이온 농도를 조절하기 위한 공정을 별도로 사용하거나, 과당 제조의 분리공정에서 SMB 분리 공정 이후에 제2차 이온정제 공정을 수행할 수 있다. 따라서, 과당 제조의 분리 공정을 거친 과당-함유 원료는 칼슘이온 농도가 0.05mM 이하의 범위, 0.01mM 이하, 0.005mM, 또는 0.001 mM이하의 농도 범위로 칼슘 농도를 조절할 수 있다.
상기 크로마토그래피 분리공정에서 얻어지는 과당 라피네이트는 전기 전도도가 20 내지 200 ㎲/cm이며, 상기 과당 라피네이트를 이온정제공정으로 처리할 수 있으며, 상기 처리 산물의 전기 전도도가 0 내지 15 ㎲/cm인 것일 수 있다.
SMB 크로마토그래피 공정에서 얻어지는 과당 라피네이트를 원료로 재순환하는데 있어서 SMB 크로마토그래피 공정에서 혼입되는 칼슘(Ca) 이온을 정제하지 않을 경우에는 망간을 단독으로 사용한 것보다 활성이 떨어지므로 사이코스 생산량에 부정적인 영향을 줄 수 있다.
상기 금속이온은 제거하기 위한 공정은 이온교환수지가 충진된 크로마토그래피를 이용하여 수행할 수 있다. 구체적으로 금속이온를 결합할 수 있는 히드록시기(OH-)로 치환된 강염기성 또는 약염기성 음이온 수지를 이용한 이온교환공정을 수행할 수 있다.
상기 과당 제조의 분리공정에서 이온정제는 상기 (2)항목의 사이코스 전환 반응물의 분리 공정에서 수행하는 이온정제 공정과 동일한 방법으로 수행할 수 있다.
사이코스 제조의 고순도 분리공정에서 얻어지는 과당 라피네이트는 15 내지 25 Brix 정도이므로, 사이코스 전환 공정에 공급되는 과당 함유 원료가 45-55 브릭스, 예컨대 약 50 Brix 임을 고려하면, 농축공정을 수행하여 과당 함량을 증가시키는 것이 바람직하다. 상기 과당 제조 공정에서 농축하는 공정은 사이코스보다 열안정성이 높기 때문에 70 내지 85의 온도 하에서 10 내지 15 분 동안 농축하는 것을 포함할 수 있다.
본 발명의 일예에서, 사이코스 제조의 고순도 분리공정에서 얻어지는 과당 라피네이트가 과당 제조의 분리 공정으로 투입되는 경우, 과당 라피네이트의 활용을 최대화하고, 기존 공정에서 얻어지는 과당 이성화 반응물과의 혼합비를 적절히 조절할 수 있다. 과당 라피네이트의 재활용이라는 측면을 고려하면, 고순도 분리 공정에서 얻어지는 과당 라피네이트를 최대한 활용할 수 있도록 혼합비를 설정하는 것이 바람직하다. 예를 들면, 과당 제조의 분리 공정으로 공급되는 과당 라피네이트는 과당 제조공정의 최종 과당-함유 원료의 수율 및 농도를 특정 수치이상으로 유지 가능한 함량까지 과당 라피네이트 혼합량을 증가시킬 수 있다. 필요한 경우, 과당 제조 공정의 과당 이성화 반응물과의 혼합비를 고려하여 과당 라피네이트의 투입량을 적절히 조절할 수 있으며, 과당 라피네이트의 저장조를 구비할 수 있다.
예를 들면, 과당 제조의 제1차 이온정제 공정에 투입되는 경우 과당 이성화 반응물과 혼합되어 처리되고, SMB 분리공정으로 투입되는 경우 제1차 이온정제물과 혼합되어 처리되고, 제2차 이온정제 공정에 투입되는 경우 SMB 분리 공정의 과당 분획과 혼합되어 처리될 수 있다.
본 발명에 있어서, 과당 제조 공정 내 과당액과 과당 제조 공정에 투입되는 과당 라피네이트의 혼합비(과당 라피네이트: 과당액)은, 과당 라피네이트와 과당액을 모두 동일하게 50 브릭스로 조정한 경우, 과당액과 과당 라피네이트의 총 함량 100중량%를 기준으로 과당액 65 내지 95 중량%와 과당 라피네이트 5 내지 35 중량%일 수 있으며, 바람직하게는 과당액 75 내지 92 중량%와 과당 라피네이트 8 내지 25 중량%일 수 있으며, 예를 들면 과당액 80 내지 90 중량%와 과당 라피네이트 10 내지 20 중량%일 수 있다.
본 발명의 일예에서, 설탕 또는 포도당으로부터 과당을 제조하는 공정을 들어 설명하며, 과당 제조 공정은, (A) 설탕 또는 포도당-함유 원료로 과당 이성화 반응을 수행하여 과당 이성화 반응물을 제조하는 과당 이성화 공정; (B)상기 과당 이성화 반응물을 제1차 이온정제 및 모사 이동층(simulated moving bed, SMB) 크로마토그래피를 이용한 분리를 수행하여 과당 분획과 포도당 라피네이트를 얻는 과당 분리 공정; 및 (C)상기 과당 분획을 제2차 이온정제 및 농축하는 공정을 포함할 수 있다.
본 발명의 과당 제조 공정은 연속식과 배치식 모두 사용가능하며, 바람직하게는 연속식 공정이다. 이하, 본 발명에 따른 과당 라피네이트 재순환을 통한 과당 제조 공정을 각 단계별로 자세히 기술하고자 한다.
본 발명의 일예에서, 포도당을 이성화하여 과당을 제조하는 경우, 포도당-함유 원료를 이성화하여 과당을 얻을 수 있다. 과당 이성화 공정은 과당을 제조하는 원료로서 설탕을 가수분해하거나 포도당을 이성화하여 과당을 얻는 단계이다.
상기 가수분해에 사용되는 효소는 ?-프럭토푸라노시다아제(fructofuranosidase), 인버타아제(invertase), 사카라제 등을 포함하는 β-D-프룩토시다아제(fructosidase), 수크라아제(sucrose), ?-글루코시다아제(glucosidase) 및 ?-D-글루코하이드롤라아제(glucohydrolase)로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 상기 포도당을 이성질화 효소로는 글루코스 아이소머라아제(glucose isomerase) 또는 포스포글루코 아이소머라아제(phosphoglucoisomerase)일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 일예에서, 과당 이성화 반응물을 분리 및 농축하기 위해서, 단계(A)에서 얻어진 과당 이성화 반응물을 제1차 이온정제 및 SMB 크로마토그래피 분리 공정을 수행할 수 있다. 상기 과당 제조의 분리 공정은 통상의 과당 제조 공정과 동일한 방법, 공정 및 반응 조건으로 수행할 수 있다. 상기 제1차 이온정제 및 SMB 크로마토 그래피는 상기 (2)항목의 사이코스 전환 반응물의 분리공정에서 기술한 바와 실질적으로 동일하다.
본 발명의 과당 제조의 분리 공정은 제1차 이온정제, 고순도 크로마토그래피 분리, 제2차 이온정제 및 농축 공정을 포함할 수 있으며, 선택적으로 과당 이성화 반응물의 불순물을 제거하는 공정은 탈염공정, 탈색공정 또는 탈색과 탈염 공정을 수행할 수 있다. 상기 불순물을 제거하는 공정은 여과를 이용한 불용성 물질의 제거 공정, 및 활성탄을 이용한 탈색 공정, 유색 성분과 이온 성분 등의 불순물을 제거하기 위해 이온교환 수지가 충진된 컬럼에 통액시켜 수행할 수 있다.
과당 이성화 반응물의 불순물을 제거하는 공정을 거쳐 과당 함량 40 내지 44 중량%의 과당 시럽을 수득한다. 그 다음, 모사 이동층 흡착 분리 방법(simulated moving bed, SMB)을 이용하여 포도당 라피네이트와 과당 분획을 얻고, 상기 과당 분획을 제2차 이온정제 및 농축 공정을 수행하여 전체 고형분 100중량%를 기준으로, 고형분 농도 45 내지 55 중량%의 과당 용액을 얻을 수 있다.
상기 포도당과 과당의 분리를 위해서는 상기 (2) 사이코스 전환 반응물의 분리공정에서 사용한 SMB 크로마토마토그래프 분리공정과 실질적으로 동일하게 수행할 수 있으며, 예를 들면 220∼320 ㎛의 입도를 가지는 칼슘(Ca)형 강산성 양이온 수지를 사용할 수 있다. 상기 고순도 분리 공정은 40 내지 60 본 발명의 과당 제조 공정은 연속식과 배치식 모두 사용 가능하며, 바람직하게는 연속식 공정이다. 이하, 본 발명에 따른 과당 라피네이트 재순환을 통한 과당 제조 공정을 각 단계별로 자세히 기술하고자 한다.
본 발명의 일예에서, 포도당을 이성화하여 과당을 제조하는 경우, 포도당-함유 원료를 이성화하여 과당을 얻을 수 있다. 과당 이성화 공정은 과당을 제조하는 원료로서 설탕을 가수분해하거나 포도당을 이성화하여 과당을 얻는 단계이다.
상기 가수분해에 사용되는 효소는 베타-프럭토푸라노시다아제(fructofuranosidase), 인버타아제(invertase), 사카라제 등을 포함하는 베타-D-프룩토시다아제(fructosidase), 수크라아제(sucrose), 알파-글루코시다아제(glucosidase) 및 알파-D-글루코하이드롤라아제(glucohydrolase)로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 상기 포도당을 이성질화 효소로는 글루코스 아이소머라아제(glucose isomerase) 또는 포스포글루코 아이소머라아제(phosphoglucoisomerase)일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 일예에서, 과당 이성화 반응물을 분리 및 농축하기 위해서, 단계(A)에서 얻어진 과당 이성화 반응물을 제1차 이온정제 및 SMB 크로마토그래피 분리 공정을 수행할 수 있다. 상기 과당 제조의 분리 공정은 통상의 과당 제조 공정과 동일한 방법, 공정 및 반응 조건으로 수행할 수 있다. 상기 제1차 이온정제 및 SMB 크로마토 그래피는 상기 (2)항목의 사이코스 전환 반응물의 분리공정에서 기술한 바와 실질적으로 동일하다.
본 발명의 과당 제조의 분리 공정은 제1차 이온정제, 고순도 크로마토그래피 분리, 제2차 이온정제 및 농축 공정을 포함할 수 있으며, 선택적으로 과당 이성화 반응물의 불순물을 제거하는 공정은 탈염공정, 탈색공정 또는 탈색과 탈염 공정을 수행할 수 있다. 상기 불순물을 제거하는 공정은 여과를 이용한 불용성 물질의 제거 공정, 및 활성탄을 이용한 탈색 공정, 유색 성분과 이온 성분 등의 불순물을 제거하기 위해 이온교환 수지가 충진된 컬럼에 통액시켜 수행할 수 있다.
과당 이성화 반응물의 불순물을 제거하는 공정을 거쳐 과당 함량 40 내지 44 중량%의 과당 시럽을 수득한다. 그 다음, 모사 이동층 흡착 분리 방법(simulated moving bed, SMB)을 이용하여 포도당 라피네이트와 과당 분획을 얻고, 상기 과당 분획을 제2차 이온정제 및 농축 공정을 수행하여 전체 고형분 100 중량%를 기준으로, 고형분 농도 45 내지 55 중량%의 과당 용액을 얻을 수 있다.
상기 포도당과 과당의 분리를 위해서는 상기 (2) 사이코스 전환 반응물의 분리공정에서 사용한 SMB 크로마토마토그래프 분리공정과 실질적으로 동일하게 수행할 수 있으며, 예를 들면 220∼320 ㎛의 입도를 가지는 칼슘(Ca)형 강산성 양이온 수지를 사용할 수 있다. 상기 고순도 분리 공정은 40 내지 60℃ 온도, 예를 들면 60에서 수행될 수 있다.
제1차 이온정제방법으로, 유색 및 이온 성분 등의 불순물을 제거하기 위해 사이코스 제조의 제1차 이온정제와 동일 또는 상이한 방법으로 수행할 수 있으며, 동일 종류 또는 상이한 종류의 이온교환수지가 충진된 분리탑을 1개 또는 2이상 사용하여 수행할 수 있다. 상기 이온 정제 공정은 이온정제에 사용되는 수지의 물성 및 이온 정제 효율을 고려하여 공정 조건을 설정하여 수행할 수 있다.
상기 불순물을 제거하는 공정은 불용성 물질의 제거 공정, 및 활성탄을 이용한 탈색 공정, 유색 성분과 이온 성분 등의 불순물을 제거하기 위해 이온교환 수지가 충진된 컬럼에 통액시켜 수행할 수 있다.
고순도 분리 공정에서 얻어진 과당 분획을, 제2차 이온정제, 및 농축 공정을 수행하여 목적하는 과당 함량을 갖는 과당 원료를 제조할 수 있다.
본 발명의 과당 제조 공정에 포함된 농축 공정은 다양한 방법으로 농축하여 과당 함량을 85중량% 이상으로 포함하도록 한다. 예를 들면, 모사 이동층 흡착 분리 방법으로 얻어진 과당 분획(예를 들면, 고형분 농도 20∼30%)을 농축 공정을 통해 고형분 농도 45 내지 55 중량%로 농축할 수 있다. 상기 과당 제조 공정에서 농축하는 공정은 70 내지 85℃의 온도하에서 10 내지 15 분 동안 농축하는 것을 포함할 수 있다. 상기 농축은 연속진공농축장치(Falling Film Evaporator) 또는 박막진공농축기(Thin Film Evaporator)를 이용하여 감압 또는 진공 조건하에서 농축할 수 있다. 상기 과당 제조 공정에서 농축하는 공정은 70 내지 85℃의 온도하에서 10 내지 15 분 동안 농축하는 것을 포함할 수 있다.
(4) 과당-함유 원료의 사이코스 전환 반응으로 투입
본 발명에 따른 과당 제조 공정에서 얻어지는 최종 산물을 사이코스 전환 반응을 위한 반응 원료로서 사이코스 제조 공정에 투입한다.
상기 과당 제조 공정에서 과당 이성화 반응물의 과당 함량은 40 내지 44 중량% 이고, 고순도 분리 공정을 거쳐 얻어진 과당 분획의 과당 함량은 85중량% 이상이고, 농축 공정을 거쳐 얻어지는 최종 산물의 과당 함량은 85 내지 99 중량% 일 수 있다. 상기 사이코스 전환 반응에 투입되는 과당 원료는 과당 함량이 85중량%이상, 예를 들면 85중량% 내지 99중량%이고 포도당 함량은 1 중량% 내지 10 중량%일 수 있다.
본 발명의 일예로서, 상기 과당-함유 원료 용액의 과당 함량 88 중량%인 경우 사이코스 전환 반응물의 사이코스 전환 반응물의 과당 함량은 64 내지 67중량%이고, 사이코스 함량은 21 내지 24 중량%이고, 포도당 함량은 8 내지 10 중량% 일 수 있다. 또한 상기 과당-함유 원료 용액의 과당 함량 95 중량%인 경우 사이코스 전환 반응물의 사이코스 전환 반응물의 과당 함량은 68 내지 71 중량%이고, 사이코스 함량은 24 내지 27 중량%이고, 포도당 함량은 2 내지 5 중량%일 수 있다.
상기 과당 라피네이트에 포함된 과당 함량은 85 중량%이상, 예를 들면 85 중량% 내지 99 중량%일 수 있다. 사이코스 제조 공정에서 분리공정에서 얻어지는 과당 라피네이트를 과당 제조 공정으로 재순환 하는 경우, 재순환하지 않는 경우에 비해 과당 원료의 생산 부하를 효과적으로 줄이는 방법이다.
본 발명의 사이코스 제조 공정에서 고순도 분리공정에서 얻어진 사이코스 분획은 사이코스 농축 공정을 거쳐 액상으로 시럽으로 제품화하거나, 사이코스 결정화 공정을 거쳐 사이코스 결정으로 제품화할 수 있다.
(5) 사이코스 농축 또는 결정화 공정
본 발명의 사이코스 제조 공정에서 SMB 크로마토그래피를 이용한 고순도 분리공정에서 얻어진 사이코스 분획은 사이코스 농축 공정을 거쳐 액상 시럽으로 제품화하거나, 사이코스 결정화 공정을 거쳐 사이코스 결정으로 제품화할 수 있다.
상기 사이코스 결정화 공정은, 상기 고순도 분리 공정에서 얻어진 사이코스 분획을 제2차 이온정제하는 단계, 상기 이온 정제된 사이코스 분획을 농축하는 단계, 상기 농축물로부터 사이코스를 결정화하여 사이코스 결정과 사이코스 결정화 모액을 얻는 단계를 포함한다. 상기 사이코스 분리공정의 구체적인 예는, 제1차 이온정제, 고순도 크로마토그래피 분리, 제2차 이온정제, 농축 및 결정화 공정을 포함할 수 있으며, 선택적으로 사이코스 전환 반응물을 탈염공정, 탈색공정 또는 탈색과 탈염 공정을 수행할 수 있다.
상기 사이코스 분획 내 사이코스의 함량은 85중량% 이상, 90중량% 이상, 91중량% 이상, 92중량% 이상, 93중량% 이상, 94중량% 이상 또는 95중량% 이상, 예를 들면 85 중량% 내지 99.9 %(w/w) 이상이 되도록 분리/정제하는 것을 포함할 수 있다.
상기 사이코스 결정에 포함된 사이코스는 순도 90중량%이상, 95 중량%이상, 또는 99중량%이상이며, 상기 결정화 모액 내 사이코스 함량은 85중량%이상, 90중량%이상, 93 중량%이상, 또는 95 중량%이상, 예를 들면 85 중량% 내지 95 중량%일 수 있다.
본 발명의 방법에 의하여 과당으로부터 수득된 사이코스는 통상적인 방법에 의해 정제될 수 있으며, 이러한 결정은 당업자에게 통상적인 기술에 속한다. 예를 들어 원심분리, 여과, 결정화, 이온교환 크로마토그래피 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 방법에 의하여 이루어질 수 있다.
일예에서, 상기 SMB 크로마토그래피를 이용한 고순도 분리공정에서 얻어진 사이코스 분획을 제2차 이온 정제할 수 있으며, 상기 사이코스의 분리 공정에서 사용한 제1차 이온정제와 동일 또는 상이한 방법으로 수행할 수 있다.
본 발명에 따른 D-사이코스 결정을 제조하는 방법은 정제된 D-사이코스 용액를 농축시키는 단계를 포함할 수 있다. 사이코스 결정을 수득하기 위한 사이코스 용액 중 사이코스의 함량은 70 중량% 이상이어야 한다. 사이코스 에피머화 효소에 의해 제조된 사이코스 용액 중 사이코스의 순도는 20 내지 30% 정도로 낮기 때문에 직접 결정화를 수행할 수 없으며 결정화 단계 전에 사이코스를 정제하고 원하는 수준까지 농축해야 한다. 본 발명의 일 구체예에서, 사이코스의 열변성 및 원하는 수준의 농축을 달성하기 위하여, 55 내지 75℃온도 범위에서 농축할 수 있다. 상기 농축 공정은 원하는 농축 수준을 달성할 때까지 1회 또는 2회 이상 반복 수행할 수 있다.
상기 냉각시켜 결정화하는 단계는, 열 교환기를 통하여 10 내지 25℃온도 범위로 급속히 냉각시킨 후, 승온과 냉각을 반복적으로 수행하여 결정성장을 유도시키는 것을 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 D-사이코스 결정을 제조하는 방법은 상기 결정화 단계에서 수득된 사이코스 결정을 원심분리에 의해 회수하고, 탈이온수로 세척한 후, 건조시키는 단계를 더 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 일예는, 생물학적 촉매를 이용하여 과당 원료로부터 사이코스 전환반응을 수행하는 사이코스 전환 반응기, 활성기가 부착된 양이온교환수지가 충진된 칼럼을 포함하고, 원료 투입구, 및 사이코스 분획과 과당 라피네이트를 배출하는 배출구를 구비한 모사 이동층(simulated moving bed, SMB) 크로마토그래피 분리기, 및 상기 분리기에서 배출된 과당 라피네이트를 제공받아 과당을 분리하는 과당 분리 장치를 포함하는 사이코스 제조 장치에 관한 것이다.
상기 제조 장치는 과당 라피네이트의 냉각을 위한 열교환기를 추가로 구비할 수 있으며, 사이코스 전환 반응기에 투입하기 전에, 상기 과당-함유원료를 저장하는 저장조를 추가로 포함할 수 있다.
상기 과당 분리 장치는 과당 이성화 반응물을 이온정제하는 이온교환수지가 충진된 칼럼을 구비한 이온정제기, 활성기가 부착된 양이온교환수지가 충진된 칼럼을 포함하고, 이온정제기를 통과한 반응물을 투입하는 투입구, 사이코스 분획과 과당 라피네이트를 배출하는 배출구를 구비한 모사 이동층(simulated moving bed, smb) 크로마토그래피 분리기, 상기 분리기에서 배출된 과당 분획을 농축하는 농축기, 및 상기 농축기에서 배출된 과당-함유 원료를 사이코스 제조 장치에 제공하기 위한 과당 제조 장치와 사이코스 제조 장치를 연결하는 연결부를 포함할 수 있다.
본 발명의 사이코스 제조공정은 과당 제조 공정에서 얻어진 과당 원료를 사이코스 전환공정에 투입하여 사이코스를 제조하고, 사이코스 분리공정에는 얻어지는 과당 라피네이트를 과당 제조 공정으로 투입하여 과당 원료를 제조하는 것으로서, 사이코스 순도 및 수율을 향상시키고 원료의 이용률을 높이는 방법을 제공한다.
도 1은 일반적인 SMB 공정의 일예를 나타내는 도면이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따라 사이코스 제조 공정 중 고순도 분리단계에서 얻어지는 과당 라피네이트를, 과당 이성화 공정에 투입하여 과당-함유 원료용액을 제조하고, 이를 이용하여 사이코스 전환반응을 수행하는 일련의 사이코스 제조공정의 일 예를 도식화한 것이다.
이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의하여 더욱 상세히 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의하여 한정되는 것은 아니다.
제조예 1. 사이코스 시럽의 제조
한국공개특허 제2014-0054997에 기재된 제조방법과 실질적으로 동일한 생물학적 방법으로 과당 기질로부터 사이코스 시럽을 제조하였다.
구체적으로, 크로스트리디움 신댄스(Clostridiuim scindens ATCC 35704)로부터 유래된 사이코스 에피머화 효소의 암호화 유전자(DPE gene; Gene bank: EDS06411.1)를 재조합 벡터(pCES_sodCDPE)에 도입하여, 상기 제조된 재조합 벡터(pCES_sodCDPE) 플라스미드를 전기천공법(electroporation)을 사용하여 코리네박테리움 글루타리쿰을 형질전환시켰다. 상기 형질전환된 코리네박테리움 글루타리쿰 세포를 포함하는 비드를 제조하고 고정화 반응 컬럼에 충진하고, 40 브릭스의 88 중량% 과당 또는 95 중량% 과당으로부터 사이코스 시럽을 제조하였다. 즉, 88 중량% 과당함유 기질로부터 포도당:과당:사이코스:올리고당의 고형분 혼합 중량비가 41:39:15:5인 21~23(w/w)% 사이코스 시럽을 수득하였고(사이코스 시럽 A), 과당 함량 95 중량%로 포함하는 원료로부터 포도당:과당:사이코스:올리고당 = 6:67:25:2인 24~26(w/w)% 사이코스 시럽을 수득하였다(사이코스 시럽 B).
제조예 2. 과당 라피네이트의 제조
제조예 1에서 얻어진 2 종류의 사이코스 시럽을 유색 및 이온 성분 등의 불순물을 제거하기 위해 양이온 교환수지, 음이온 교환수지 및 양이온과 음이온교환수지가 혼합된 수지로 충진된 상온의 컬럼에 시간당 이온교환수지 2배 부피의 속도로 통액시켜 탈염시켰다.
그 다음, 칼슘(Ca2 +) 타입의 이온교환수지로 충진된 크로마토그래피를 이용하여 고순도의 사이코스 분획을 분리한 후, 남은 것을 라피네이트로 수득하였다. 88 중량% 과당 함량의 원료로부터 얻어진 사이코스 시럽(사이코스 시럽 A)으로부터 수득한 라피네이트는 과당 85 내지 95 중량%, 포도당 1 내지 10 중량% 및 환원당 1 내지 5 중량%를 포함하고 있었다.
95 중량% 과당 함량의 원료로부터 얻어진 사이코스 시럽(사이코스 시럽 B)으로 부터 수득한 라피네이트는 과당 88 내지 98 중량%, 포도당 1 내지 8 중량% 및 환원당 1 내지 4 중량%를 포함하고 있었다.
실시예 1. 과당 라피네이트를 이용한 사이코스 생산
제조예 2에서 얻은 과당 함량 88 중량%의 과당-함유 원료용액을 이용하여 사이코스 함량 95 중량%의 고형분 10톤을 생산하기 위해, 유량 3.8 m3/hr로 사이코스 전환 공정과 분리 공정을 수행하였다. 사이코스 전환 공정을 거쳐 수득한 반응물의 사이코스 함량은 20 내지 23 중량%이며, 이온정제 후 45 내지 50 중량%의 농도로 분리 공정을 통과하였다. Ca+ type 분리 (SMB) 수지를 이용하여 분리 시 발생되는 라피네이트는 시간당 3 m3씩 발생하였다.
구체적으로, 과당 제조 공정에서, 옥수수 전분을 30 내지 35 중량%가 되도록 물과 혼합한 후, 효소 가수분해를 진행하여 포도당 함량 88 중량% 이상의 당화액을 수득한다. 그 다음, 상기 당화액을 진공드럼여과를 수행하여 불용성 물질들을 제거하여 과당 이성화 반응물(과당 함량 42 중량 % 시럽)을 얻었다.
제조예 2에서 얻은 사이코스 제조 공정의 과당 라피네이트를 과당 함량 88 중량% 및 총 고형분 50 중량%(50 브릭스)로 농축하여 상기 과당 이성화 공정을 통과한 반응물(과당 함량 42 중량 % 시럽)과 혼합하여, 강산성 수지, 약염기성 수지, 및 강산성 수지와 약염기성 혼합수지로 구성된 이온정제 공정으로 투입하였다. 즉, 제1차 이온정제 공정으로 투입된 과당 이성화 반응물과 과당 라피네이트의 총 고형분 함량을 50 중량%(50브릭스)로 조절하여, 상기 과당 이성화 반응물과 제조예 2의 과당 라피네이트의 혼합비는 8 : 2 내지 9 : 1 중량비로 사용하였다. 혼합된 과당 시럽은 1차 이온정제를 거쳐 다시 총 고형분 50 중량%로 농축 후 SMB 크로마토그래피 공정을 통과시켰다. SMB 공정을 수행하여 포도당 라피네이트와 과당 분획을 얻고, 상기 과당 분획을 제2차 이온정제 및 농축 공정을 수행하여 40브릭스의 88 중량% 과당 함량의 과당-함유 용액을 얻었다. 상기 과당-함유 용액을 제조예 1과 실질적으로 동일한 방법으로 사이코스 전환 반응과 분리 공정을 수행하였다.
상기 공정을 10회 반복하여 수행하였으며, 각 재순환 별 혼합 기질 및 라피네이트의 당류 조성을 분석하여 하기 표 1에 나타내었다. 하기 표 1에 나타낸 혼합액은 사이코스 제조의 분리 공정에서 얻어진 과당 라피네이트를 과당 제조의 분리공정에 투입한 후 얻어지는 과당-함유 원료를 의미한다.
구분　 이당류이상 Glucose Fructose Psicose 환원당 사이코스 수율
F95 원료 1.1% 5.0% 88.1% 0.0% 5.8% 22.9%
라피네이트 1.5% 8.3% 85.6% 0.3% 4.3%
1차 혼합액 1.1% 5.0% 88.2% 0.0% 5.7% 22.9%
1차 라피네이트 1.5% 8.3% 85.5% 0.4% 4.3%
5차 혼합액 1.3% 4.9% 88.2% 0.0% 5.6% 22.9%
5차 라피네이트 1.5% 8.3% 85.4% 0.4% 4.3%
10차 혼합액 1.3% 4.8% 88.3% 0.0% 5.8% 22.9%
10차 라피네이트 1.5% 8.3% 85.1% 0.4% 4.3%
상기 표 1에서 확인할 수 있듯이, 사이코스 제조 공정에서 얻어진 과당 라피네이트를 과당 제조 공정에 투입함으로써 재순환 횟수가 증가하여도 사이코스 전환 공정에 투입되는 원료의 과당 순도가 일정하게 유지되는 것을 확인하였다.
실시예 2. 과당 라피네이트를 이용한 과당 생산
과당 라피네이트의 재순환 유/무에 따른 당조성 및 수율 차이를 확인하고자본 실험을 수행하였다.
구체적으로, 구체적으로, 과당 제조 공정에서, 옥수수 전분을 30 내지 35 중량%가 되도록 물과 혼합한 후, 효소 가수분해를 진행하여 포도당 함량 88 중량% 이상의 당화액을 수득한다. 그 다음, 상기 당화액을 진공드럼여과를 수행하여 불용성 물질들을 제거하여 과당 이성화 반응물(과당 함량 42 중량 % 시럽)을 얻었다.
제조예 2에서 얻은 사이코스 제조 공정의 과당 라피네이트를 과당 함량 88 중량% 및 총 고형분 50 중량%(50 브릭스)로 농축하여 상기 과당 이성화 공정을 통과한 반응물(과당 함량 42 중량 % 시럽)과 혼합하여, 강산성 수지, 약염기성 수지, 및 강산성 수지와 약염기성 혼합수지로 구성된 이온정제 공정으로 투입하였다. 즉, 제1차 이온정제 공정으로 투입된 과당 이성화 반응물과 과당 라피네이트의 총 고형분 함량을 50 중량%(50브릭스)로 조절하여, 상기 과당 이성화 반응물과 제조예 2의 과당 라피네이트의 혼합비는 8 : 2 내지 9 : 1 중량비로 사용하였다. 혼합된 과당 시럽은 1차 이온정제를 거쳐 다시 총 고형분 50 중량%로 농축 후 SMB 크로마토그래피 공정을 통과시켰다. SMB 공정을 수행하여 포도당 라피네이트와 과당 분획을 얻었다. 각 공정 별 혼합물 및 라피네이트의 당류 조성을 분석하여 하기 표 2에 나타내었다.
구분 이당류
이상		 Glucose Fructose Psicose 환원당 고형분 분리 수율
순환없음 과당 이성화 반응물 2.6% 54.5% 42.3% 0.0% 0.6% -
SMB 분리 후
과당 분획		 0.3% 10.4% 88.0% 0.0% 1.2% 48.1%
SMB 분리 후
포도당 라피네이트		 4.7% 95.3% 0.0% 0.0% 0.0% 51.9%
순환
있음		 과당 이성화 반응물과 과당 라피네이트의 혼합물 2.6% 54.5% 48.8% 0.0% 0.6% -
고순도 분리 후 과당 분획 0.4% 10.0% 88.5% 0.0% 1.1% 55.4%
고순도 분리 후
포도당 라피네이트		 4.7% 95.3% 0.0% 0.0% 0.0% 44.6%
상기 표 2에서 과당 이성화 반응물, SMB 분리 후 과당 분획, SMB 분리 후 포도당 라피네이트, 및 과당 이성화 반응물과 과당 라피네이트의 혼합물의 총 고형분 함량을 100중량% 기준으로, 각각의 구성 성분의 고형분 함량을 중량%로 나타낸 것이다. 상기 분리 수율은 SMB 분리 공정에 제공된 투입물의 총 고형분 100 중량%를 기준으로, SMB 분리후 과당 분획의 총 고형분의 함량(중량%)와, 포도당 라피네이트의 총 고형분의 함량(중량%)로 나타낸 것이다.
상기 표 2에서 확인할 수 있듯이, 사이코스 전환 공정의 라피네이트 분획을 과당 제조 공정의 과당 이성화 반응물과 혼합하여 과당 분리 공정을 수행할 경우, SMB 분리 공정에 제공된 투입물의 총 고형분 100 중량%를 기준으로, SMB 분리 후 과당 분획의 총 고형분의 함량 48.1중량%와 포도당 라피네이트 51.9중량%로 분리되었다. 본 발명에 따라 과당 라피네이트를 혼합한 경우 SMB 분리 후 과당 분획의 총 고형분의 55.4중량%와 포도당 라피네이트 44.6중량%로 분리되었다. 따라서, 사이코스 제조의 과당 라피네이트를 과당 제조의 분리 공정에 투입한 경우, SMB 공정에서 얻어지는 과당 분획내 과당 함량이 증가할 뿐만 아니라 고형분 분리 수율도 115% 증가되는 것을 확인하였다. 따라서, 사이코스 제조 공정의 고순도 크로마토그래피에서 얻어진 과당 라피네이트 분획을 과당 이성화 공정을 통과한 반응산물과 혼합하여 분리하여도 동일한 과당 순도 및 수율 증가 효과를 확인할 수 있었다.
실시예 3. 라피네이트를 이용한 사이코스 생산
실시예 1과 동일한 방법으로 진행하되, 과당 함량 95 중량%의 시럽을 이용한 사이코스 함량 95 중량%의 고형분 10톤을 생산하기 위해, 유량 3.8 m3/hr로 사이코스 이성화 공정과 분리 공정을 수행하였다. 사이코스 전환 공정을 거쳐 수득한 반응산물의 사이코스 함량은 21 내지 25 중량%. 이며, 이온정제 후 45 내지 50 중량%의 농도로 분리 공정을 통과한다. Ca+ type 분리 수지를 이용하여 분리 시 발생되는 라피네이트(과당 분획)은 시간당 3 m3씩 발생하였다.
상기 공정을 10회 반복하여 수행하였으며, 각 공정별 혼합 기질 및 라피네이트의 당류 조성을 분석하여 하기 표 3에 나타내었다.
구분 이당류이상 Glucose Fructose Psicose 환원당 사이코스 수율
F95 원료 0.1% 3.5% 95.4% 0.0% 1.0% 27.1%
사이코스 전환 반응의 라피네이트 0.1% 3.9% 94.2% 1.2% 0.6%
5차 혼합액 0.1% 3.5% 95.4% 0.0% 1.0% 27.1%
사이코스 전환 반응의 5차 라피네이트 0.1% 3.9% 94.0% 1.2% 0.6%
10차 혼합액 0.1% 3.5% 95.4% 0.0% 1.0% 27.1%
사이코스 전환 반응의 10차 라피네이트 0.1% 3.9% 94.2% 1.2% 0.6%
상기 표 3에서 확인할 수 있듯이, 사이코스 제조 공정의 라피네이트 분획을 과당 제조 공정에 투입함으로써 재순환 횟수가 증가하여도 사이코스 전환 공정에 투입되는 원료의 과당 함량이 일정하게 유지되는 것을 확인하였다.
실시예 4. 라피네이트를 이용한 과당 생산
과당 라피네이트의 재순환 유/무에 따른 당조성 및 수율 차이를 확인하고자, 실시예 2와 실질적으로 동일한 방법으로 실험을 수행하되, 다만 실시예 2에서 과당 함량 88중량% 원료 대신에, 과당 함량 95 중량%의 원료를 이용하여 사이코스 전환 반응을 수행하였다.
SMB 공정을 수행하여 포도당 라피네이트와 과당 분획을 얻었다. 각 공정 별 혼합물 및 라피네이트의 당류 조성을 분석하여 하기 표 4에 나타내었다.
구분 이당류이상 Glucose Fructose Psicose 환원당 고형분
분리 수율
순환없음 과당 이성화 공정후 과당 시럽 2.6% 54.5% 42.3% 0.0% 0.6% -
SMB 분리후
과당 분획		 0.0% 3.2% 95.4% 0.0% 1.4% 44.3%
SMB 분리후
포도당 분획		 4.7% 95.3% 0.0% 0.0% 0.0% 55.7%
순환 있음 과당 이성화 반응물과 과당 라피네이트의 혼합물 1.9% 45.3% 52.1% 0.0% 0.7% -
SMB 분리후 과당 분획 0.1% 3.2% 95.5% 0.0% 1.3% 54.6%
SMB 분리후
포도당 분획		 4.2% 95.8% 0.0% 0.0% 0.0% 45.4%
상기 표 4에서 확인할 수 있듯이, 사이코스 전환 공정의 라피네이트 분획을 과당 제조 공정의 과당 이성화 반응물과 혼합하여 과당 분리 공정을 수행할 경우, SMB 분리 공정에 제공된 투입물의 총 고형분 100 중량%를 기준으로, SMB 분리 후 과당 분획의 총 고형분의 함량 44.3 중량%와 포도당 라피네이트 55.7중량%로 분리되었다. 본 발명에 따라 과당 라피네이트를 혼합한 경우 SMB 분리 후 과당 분획의 총 고형분의 54.6 중량%와 포도당 라피네이트 45.4 중량%로 분리되었다. 따라서, 사이코스 제조의 과당 라피네이트를 과당 제조의 분리 공정에 투입한 경우, SMB 공정에서 얻어지는 과당 분획내 과당 함량이 증가할 뿐만 아니라 고형분 분리 수율도 123% 증가되는 것을 확인하였다. 따라서, 사이코스 제조 공정의 고순도 크로마토그래피에서 얻어진 과당 라피네이트 분획을 과당 이성화 공정을 통과한 반응산물과 혼합하여 분리하여도 동일한 과당 순도 및 수율 증가 효과를 확인할 수 있었다.
실시예 5. 혼합 금속이온에 따른 사이코스 전환율 비교 실험
사이코스 제조 과정에서 얻어진 과당 라피네이트와 유사한 조성에서의 사이코스 전환율을 평가하였다. 즉, 과당 순도 95 중량% 시럽을 50 중량%로 희석하여 Ca2+이온을 0.005~0.01mM로 첨가 후 1.0 mM의 Mn을 추가로 첨가하여 사이코스 전환 공정을 확인하여 표 5에 나타내었다.
Ca 이온 농도 Mn 이온 농도 무첨가 대조구 대비 상대활성 (%)
무첨가 무첨가 100.00
무첨가 1.0 mM 152.0
0.005 mM 1.0 mM 141.2
0.008 mM 1.0 mM 136.5
0.010 mM 1.0 mM 127.1
사이코스 전환 반응의 활성을 증가시키는 망간을 처리한 경우 상대활성 152%에서, 칼슘을 추가로 첨가한 칼슘과 망간이 혼합되어 있는 상태에서 사이코스 전환 반응의 상대활성은 망간을 단독 처리한 것보다 최대 약 16%까지 감소되며, 칼슘이온의 농도가 높아질 수록 상대활성은 점차 감소하는 경향을 확인하였다.
이러한 결과는 고순도 분리 크로마토그래피 공정에서 발생되는 과당 라피네이트를 재사용하는데 있어서 분리 크로마토그래피 공정에서 석출되는 0.01mM 이하의의 Ca 이온을 정제해야 되는 이유로 볼 수 있다. 이온정제를 하지 않을 시에는 망간을 단독으로 사용한 것보다 활성이 떨어지므로 사이코스 생산량에 부정적인 영향을 줄 수 있다.

Claims (22)

  1. 사이코스 전환 반응물을 모사 이동층(simulated moving bed, SMB) 크로마토그래피로 분리하여 사이코스 분획과 과당 라피네이트를 얻고,
    상기 과당 라피네이트를 과당 제조의 분리공정으로 투입하여 과당-함유 원료를 제조하고
    상기 과당-함유 원료를 이용하여 사이코스 전환 반응을 수행하는 단계를 포함하는, 사이코스의 제조방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 사이코스 전환 반응물은 과당 원료를 이용한 생물학적 사이코스 전환 공정으로 제조되는 것인 제조방법.
  3. 제1항에 있어서, 상기 과당 라피네이트는 과당 제조의 분리공정인 이온정제 공정 또는 모사이동층 크로마토그래피를 이용한 분리공정에 투입되는 것인 제조방법.
  4. 제3항에 있어서, 상기 과당 제조의 분리 공정은 과당 이성화 반응물을 이온정제하는 제1차 이온정제, 모사이동층 크로마토그래피를 이용한 분리, 제2차 이온정제 및 농축 공정을 포함하며, 상기 과당 라피네이트는 상기 제1차 이온정제, 모사이동층 크로마토그래피를 이용한 고순도 분리 및 제2차 이온정제로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 공정에 투입되는 것인 제조방법.
  5. 제4항에 있어서, 상기 이온정제 공정은 이온교환수지 크로마토그래피를 이용하여 수행하는 것인 제조방법.
  6. 제1항에 있어서, 상기 과당-함유 원료는 전기 전도도가 0 내지 15 ㎲/cm인 것인 제조방법.
  7. 제1항에 있어서, 상기 과당-함유 원료는 칼슘이온 농도가 0.05 mM 이하의 범위인 제조방법.
  8. 제1항에 있어서, 상기 모사 이동층 크로마토그래피 분리공정에서 얻어지는 과당 라피네이트는 전기 전도도가 20 내지 200 ㎲/cm인 것인 제조방법.
  9. 제1항에 있어서, 상기 과당 제조에서 분리공정의 과당액과 상기 과당 라피네이트는, 과당액과 과당 라피네이트를 각각 50 브릭스로 조정한 경우, 과당액과 과당 라피네이트의 전체 100중량%를 기준으로 과당액 65 내지 95 중량%와 과당 라피네이트 5 내지 35 중량%인 제조방법.
  10. 제1항에 있어서, 상기 사이코스 전환 반응에 투입되는 과당-함유 원료의 과당 함량은 전체 당류 함량 100중량%를 기준으로 85중량%이상인 제조방법.
  11. 제1항에 있어서, 상기 모사 이동층 크로마토그래피로 분리공정에서 얻어진 과당 라피네이트는 당류 총합 100중량%를 기준으로 85 내지 99 중량%의 과당 및 2.0 중량% 이하의 사이코스를 포함하는 것인 제조방법.
  12. 제1항에 있어서, 상기 모사 이동층 크로마토그래피 공정은 칼슘 활성기가 부착된 양이온교환수지가 충진된 칼럼 크로마토그래프로 수행되는 것인 제조방법.
  13. 제1항에 있어서, 상기 사이코스 전환반응은 사이코스 전환율은 15% 내지 70%인 생물학적 촉매를 사용하는 것인 제조방법.
  14. 제1항에 있어서, 상기 모사이동층 크로마토그래피로 분리공정에서 얻어지는 과당 라피네이트를 열교환기를 통하여 냉각하는 단계를 추가로 포함하는 제조방법.
  15. 제1항에 있어서, 상기 제조방법은 연속식으로 수행되는 것인 제조방법.
  16. 제1항에 있어서, 상기 사이코스 분획을 농축하고, 상기 농축물로 부터 사이코스를 결정화하여 사이코스 결정과 결정화 모액을 얻는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  17. 과당 원료로부터 사이코스 전환반응을 수행하는 사이코스 전환 반응기,
    활성기가 부착된 양이온교환수지가 충진된 칼럼을 포함하고, 원료 투입구, 및 사이코스 분획과 과당 라피네이트를 배출하는 배출구를 구비한 모사 이동층(simulated moving bed, SMB) 크로마토그래프 분리기, 및
    상기 분리기에서 배출된 과당 라피네이트를 제공받아 과당을 분리하는 과당 분리 장치를 포함하는 사이코스 제조 장치,
  18. 제17항에 있어서, 상기 사이코스 전환 반응기는 생물학적 방법으로 과당 원원료부터 사이코스로 전환하는 것인 제조 장치.
  19. 제17항에 있어서, 상기 크로마토그래프 분리기에서 배출된 과당 라피네이트의 냉각을 위한 열교환기를 추가로 구비하는 것인 제조 장치.
  20. 제17항에 있어서, 사이코스 전환 반응기에 투입하기 전에, 상기 과당-함유원료를 저장하는 저장조를 추가로 포함하는 제조 장치.
  21. 제17항에 있어서, 상기 과당 분리 장치는
    과당 이성화 반응물을 이온정제하는 이온교환수지가 충진된 칼럼을 구비한 이온정제기,
    활성기가 부착된 양이온교환수지가 충진된 칼럼을 포함하고, 이온정제기를 통과한 반응물을 투입하는 투입구, 사이코스 분획과 과당 라피네이트를 배출하는 배출구를 구비한 모사 이동층(simulated moving bed, smb) 크로마토그래프 분리기,
    상기 분리기에서 배출된 과당 분획을 농축하는 농축기, 및
    상기 농축기에서 배출된 과당-함유 원료를 사이코스 제조 장치에 제공하기 위한 과당 제조 장치와 사이코스 제조 장치를 연결하는 연결부를 포함하는 것인, 사이코스 제조 장치.
  22. 제21항에 있어서, 상기 이온교환수지가 충진된 칼럼을 구비한 이온정제기가, 크로마토그래프 분리기와 농축기 사이에 연결된 것인 제조 장치.
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