KR20160062349A - 고순도 d-사이코스를 제조하는 방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 효소반응을 위한 과당용액을 준비하는 단계; 상기 과당용액을 효소반응 한 후 D-사이코스 용액을 열교환 냉각시켜 이온정제 하는 단계; 상기 불순물을 제거한 정제된 D-사이코스 용액을 농축한 뒤 D-사이코스 용액을 열교환 냉각시켜 연속식 크로마토그래피 분리하는 단계; 상기 연속식 크로마토그래피 분리모액을 열교환 냉각시켜 공정 내 재순환 시키는 단계; 상기 연속식 크로마토그래피 분리한 D-사이코스 용액을 농축하여 열교환 냉각시켜 결정화 하는 단계; 상기 결정화 분리모액을 열교환 냉각시켜 공정 내 재순환 시키는 단계;를 포함하는, 순도 99 %(w/w) 이상의 고순도 D-사이코스를 제조하는 방법에 관한 것이다.
본 발명의 D-사이코스의 제조 방법에 의해, 열교환기를 이용하여 공정 내 온도를 제어함에 따라 D-사이코스의 열변성을 방지하여 안정화된 공법으로 높은 수율로 D-사이코스 제조가 가능하다. 또한, 연속식 크로마토그래피 분리 과당모액과 결정화 분리모액을 회수하여 효소반응 공정에 투입함으로써 장기간 재순환하여도 연속식 크로마토그래피에서 D-사이코스의 안정적인 분리가 가능하여 D-사이코스의 높은 제조 수율을 실현할 수 있다.
본 발명의 D-사이코스의 제조 방법에 의해, 열교환기를 이용하여 공정 내 온도를 제어함에 따라 D-사이코스의 열변성을 방지하여 안정화된 공법으로 높은 수율로 D-사이코스 제조가 가능하다. 또한, 연속식 크로마토그래피 분리 과당모액과 결정화 분리모액을 회수하여 효소반응 공정에 투입함으로써 장기간 재순환하여도 연속식 크로마토그래피에서 D-사이코스의 안정적인 분리가 가능하여 D-사이코스의 높은 제조 수율을 실현할 수 있다.
Description
본 발명은 D-사이코스의 제조 방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 제조공정 중 열변성 없이 높은 수율로 고순도의 D-사이코스를 제조하는 방법에 관한 것이다.
D-사이코스는 과당이나 설탕과는 달리 인체 내에서 대사되지 않아 칼로리가 거의 없으며, 체지방 형성 억제 작용으로 체중 증가에 영향이 적은 감미료로 보고 되고 있다(Matuo, T. et . Al .. Asia Pac . J. Clin . Untr ., 10, 233-237, 2001; Matsuo, T. and K. Izumori, Asia Pac . J. Clin . Nutr ., 13, S127, 2004).
최근에 본 발명자들은 포도당을 과당으로 이성화한 후, 이를 D-사이코스 에피머화 효소를 생산하는 고정화 균체와 반응시켜 D-사이코스를 경제적으로 생산하는 방법을 보고하였다(대한민국 특허출원 제10-2009-0118465호).
효소 반응에 의해 생산된 D-사이코스를 포함하는 반응액은 약 20 내지 30 %(w/w)의 D-사이코스 고형분을 포함하는 저순도 제품이기 때문에, 98 %(w/w) 이상의 고순도 D-사이코스를 제조하기 위해서는 연속식 크로마토그래피를 사용하여 고순도 분리를 통해 결정화 제조하는 것이 요구된다.
D-사이코스의 생산에서 회수되는 모액의 재사용이 없는 단일공정일 경우(도 2 참조), 과당으로부터 생산되는 D-사이코스의 효소반응 전환율이 20 내지 30 %(w/w)이므로 D-사이코스의 생산물량에 비하여 발생되는 모액, 즉 연속식 크로마토그래피에서 분리된 과당 모액과 결정화 분리모액의 양이 많은 공정 흐름을 나타낸다. 결과적으로, D-사이코스 생산량 저하로 인한 원단위 증가로 제조원가가 상승되어 산업적 생산에 있어서 비경제적인 문제를 나타낸다.
상기와 같이 저수율로 인한 원단위 상승을 낮추기 위해서는 높은 수율의 D-사이코스 생산이 필요하며, 이러한 높은 수율의 D-사이코스 생산을 위해서는 제조과정에서 발생하는 연속식 크로마토그래피 분리 과당모액과 결정화 분리모액을 회수하여 효소반응 공정으로 재사용하는 모액의 순환공정(도 1 참조)이 필요하다. 그러나, D-사이코스는 일정 온도에 지속 노출이 될 경우, 열변성에 의해 D-사이코스가 파괴되어 제조공정 흐름에서 D-사이코스 순도가 저하되고, 따라서 높은 수율의 D-사이코스 생산이 어려운 단점이 있다(도 3 내지 7 참조).
D-사이코스의 열변성에 의한 순도 저하는 결국엔 불순물 발생량의 증가를 의미하며, 이러한 제조공정 흐름에서 불순물의 증가로 인해 모액 순환공정의 불순물 누적량이 증가되어 연속식 크로마토그래피의 D-사이코스 분리순도와 분리수율에 문제를 일으켜 전체 공정 밸런스에 트러블이 발생된다. 따라서, 높은 수율의 D-사이코스를 생산하기 어렵다.
따라서, 본 발명에서는 높은 수율의 D-사이코스 생산을 위해서 연속식 크로마토그래피 분리 과당모액과 결정화 분리모액을 회수하여 효소반응 공정으로 재사용하는 모액의 순환공정을 포함하며, 제조공정에서 온도 관리를 통해 장기간 모액순환 공정흐름에서도 열변성 없는 D-사이코스 공정을 포함하는, 높은 수율로 고순도 D-사이코스를 제조하는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명의 일 예에서, 효소반응을 위한 과당용액을 준비하는 단계; 상기 과당용액을 효소반응 한 후 D-사이코스 용액을 열교환 냉각시켜 이온정제 하는 단계; 상기 불순물을 제거한 정제된 D-사이코스 용액을 농축한 뒤 D-사이코스 용액을 열교환 냉각시켜 연속식 크로마토그래피 분리하는 단계; 상기 연속식 크로마토그래피 분리모액을 열교환 냉각시켜 공정 내 재순환 시키는 단계; 상기 연속식 크로마토그래피 분리한 D-사이코스 용액을 농축하여 열교환 냉각시켜 결정화 하는 단계; 상기 결정화 분리모액을 열교환 냉각시켜 공정 내 재순환 시키는 단계;를 포함하는, 순도 99 %(w/w) 이상의 고순도 D-사이코스를 제조하는 방법이 제공된다.
본 발명의 다른 예에서, 본원에 기재된 고순도 D-사이코스를 제조하는 방법에 따라 제조된, 고순도 D-사이코스가 제공된다.
본 발명의 D-사이코스의 제조 방법에 의해, 열교환기를 이용하여 공정 내 온도를 제어함에 따라 D-사이코스의 열변성을 방지하여 안정화된 공법으로 높은 수율로 D-사이코스 제조가 가능하다.
또한, 본 발명의 D-사이코스의 제조 방법에 의해, 연속식 크로마토그래피 분리 과당모액과 결정화 분리모액을 회수하여 효소반응 공정에 투입함으로써 장기간 재순환하여도 연속식 크로마토그래피에서 D-사이코스의 안정적인 분리가 가능하여 D-사이코스의 높은 제조 수율을 실현할 수 있다.
도 1은 본 발명에 따른 D-사이코스 제조 방법의 공정을 간략히 나타낸 모식도이다.
도 2는 D-사이코스 제조방법에서 회수되는 모액의 재사용이 없는 단일공정을 간략히 나타낸 모식도이다.
도 3 내지 7은 온도와 D-사이코스의 농도에 따른 D-사이코스의 순도%(w/w) 변화를 보여주는 그래프이다.
도 2는 D-사이코스 제조방법에서 회수되는 모액의 재사용이 없는 단일공정을 간략히 나타낸 모식도이다.
도 3 내지 7은 온도와 D-사이코스의 농도에 따른 D-사이코스의 순도%(w/w) 변화를 보여주는 그래프이다.
이하, 본 발명에 대하여 보다 상세히 설명한다. 본 명세서에 기재되지 않은 내용은 본 발명의 기술 분야 또는 유사 분야에서 숙련된 자이면 충분히 인식하고 유추할 수 있는 것이므로 그 설명을 생략한다.
본 발명의 일 예는, 효소반응을 위한 과당용액을 준비하는 단계; 상기 과당용액을 효소반응 한 후 D-사이코스 용액을 열교환 냉각시켜 이온정제 하는 단계; 상기 불순물을 제거한 정제된 D-사이코스 용액을 농축한 뒤 D-사이코스 용액을 열교환 냉각시켜 연속식 크로마토그래피 분리하는 단계; 상기 연속식 크로마토그래피 분리모액을 열교환 냉각시켜 공정 내 재순환 시키는 단계; 상기 연속식 크로마토그래피 분리한 D-사이코스 용액을 농축하여 열교환 냉각시켜 결정화 하는 단계; 상기 결정화 분리모액을 열교환 냉각시켜 공정 내 재순환 시키는 단계;를 포함하는, 순도 99 %(w/w) 이상의 고순도 D-사이코스를 제조하는 방법에 관한 것이다.
상기 효소반응을 위한 과당용액을 준비하는 단계는, 구체적으로 과당을 30 내지 50 brix(%) 로, 30 내지 40℃의 온도에서 용해하는 단계를 포함할 수 있다. 보다 구체적으로, 상기 단계는 용해조 내에 30℃의 용수를 사용하여 순도 99 %(w/w) 이상의 결정과당과 회수된 30℃의 연속식 크로마토그래피 모액과 회수된 30℃의 결정화 모액을 혼합하여 30 내지 50 brix(%) 로 교반 용해한 용액을 효소반응에 이용하는 것을 포함할 수 있다.
상기 과당용액을 효소반응 한 후 D-사이코스 용액을 열교환 냉각시켜 이온정제 하는 단계에서, 상기 효소반응은 구체적으로 D-사이코스 에피머화 효소를 발현하는 코리네박테리움 속 균주 또는 그로부터 분리된 사이코스 에피머화 효소에 의한 것일 수 있으며, 상기 '사이코스 에피머화 효소'는 과당을 사이코스로 전환시키는 활성을 갖는 사이코스-3-에피머화 효소를 의미하는 것일 수 있다.
또한, 상기 효소반응한 D-사이코스 용액을 열교환 냉각시키는 것은, 열 교환기를 통하여 시간당 5 내지 10℃씩 40℃ 온도로 냉각시켜 SV [Space Velocity: 유량(L)/시간(Hr)/수지량(L)] 0.5 내지 3으로 반응시키는 것을 포함할 수 있다.
상기 효소반응 된 D-사이코스 용액을 이온정제 하는 것은, 강산성 양이온교환수지가 충진된 컬럼과 약염기성 음이온교환수지가 충진된 컬럼을 통과시키는 크로마토그래피에 의해 수행될 수 있으며, 강염기성 음이온수지를 사용할 경우 30 내지 40℃의 저온에서도 D-사이코스를 변성시켜 순도저하가 발생할 수 있으므로, 높은 수율의 D-사이코스 제조를 위해서 30 내지 40℃의 저온에서 100% 약알칼리성 음이온수지를 활용할 수 있다.
상기 효소반응 및 열교환 냉각시켜 이온정제하는 단계는, 구체적으로 다음과 같을 수 있다: D-사이코스 용액은 대한민국 특허출원 제2009-0118465호에 기재된 바와 같이, D-사이코스 에피머화 효소를 생산하는 코리네박테리움 글루타미쿰 KCTC 13032를 배양하여 수득된 균체 또는 균체로부터 분리된 효소를 소디움 알기네이트와 같은 고정화 담체에 고정화시킨 후, 상기와 같이 30℃에서 30 내지 50 brix(%) 로 용해한 과당 용액을 기질로 열 교환기를 통하여 시간당 5 내지 20℃ 씩 50℃ 온도로 승온시켜 SV [Space Velocity: 유량(L)/시간(Hr)/수지량(L)] 0.5 내지 3으로 100% 약알칼리성 음이온수지를 이용하여 수득될 수 있다.
상기 불순물을 제거한 정제된 D-사이코스 용액을 농축한 뒤 D-사이코스 용액을 열교환 냉각시켜 연속식 크로마토그래피 분리하는 단계에서, 구체적으로 상기 정제된 D-사이코스 용액을 농축하는 것은, 정제된 D-사이코스 용액을 저온 농축기 내에 투입하여 65 내지 75℃의 온도 하에서 10 내지 15 분 동안 단시간에 농축하여 농도를 60 brix(%)(D-사이코스 용액×100/전체 용액)로 조절하는 것을 포함할 수 있다.
상기 농축된 D-사이코스 용액을 열교환 냉각시켜 연속식 크로마토그래피를 통해 분리하는 것은, 열 교환기를 통하여 시간당 5 내지 25℃ 씩 냉각시켜 60℃ 에서 칼슘 활성기가 부착된 강산성 양이온교환수지가 충진된 컬럼에서의 크로마토그래피에 의해 D-사이코스의 순도가 90 내지 95 %(w/w) 이상이 되도록 분리 정제 하는 것을 포함할 수 있다.
상기 연속식 크로마토그래피 분리모액을 열교환 냉각시켜 공정 내 재순환 시키는 단계는, 분리된 모액을 열 교환기를 통하여 시간당 20 내지 30℃씩 냉각시켜 30℃ 에서 효소반응 공정으로 재순환시키는 것을 포함할 수 있다.
상기 분리모액은, 구체적으로 상기 연속식 크로마토그래피에 의해 분리된 과당의 획분을 회수하여 사용하는 것일 수 있다.
본 발명에서는 상기 분리모액을 효소반응 공정으로 재투입하는 과정을 포함함으로써, D-사이코스의 생산 수율을 높일 수 있는 이점이 있다.
상기 연속식 크로마토그래피 분리한 D-사이코스 용액을 농축하여 열교환 냉각시켜 결정화 하는 단계에서, 상기 농축은 65 내지 75℃의 온도 하에서 10 내지 15 분 동안 농축하는 것을 포함할 수 있다.
또한, 상기 열교환 냉각시켜 결정화하는 단계는, 열 교환기를 통하여 시간당 5 내지 20℃씩 30 내지 40℃로 급속히 냉각시킨 후, 30 내지 40℃ 범위 내에서 승온과 냉각이 5 내지 10 회 반복적으로 이루어지게 하여 80 내지 120 시간 동안 결정성장을 유도시키는 것을 포함할 수 있다.
상기 결정화 분리모액을 열교환 냉각시켜 공정 내 재순환 시키는 단계는, 회수된 모액을 열 교환기를 통하여 시간당 20 내지 30℃씩 냉각시켜 30℃ 에서 효소반응 공정으로 재순환시키는 것을 포함할 수 있다.
본 발명에서는 상기 연속식 크로마토그래피 분리모액 뿐만 아니라 결정화 분리모액 또한 효소반응 공정으로 재투입함으로써, D-사이코스의 생산 수율을 최대로 높이고 D-사이코스의 제조원가를 낮출 수 있다.
이하, 본 발명의 바람직한 실시예를 통해 본 발명의 구성 및 작용을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 다만, 이는 본 발명의 바람직한 예시로 제시된 것이며 어떠한 의미로도 이에 의해 본 발명이 제한되는 것으로 해석될 수는 없다.
여기에 기재되지 않은 내용은 이 기술 분야에서 숙련된 자이면 충분히 기술적으로 유추할 수 있는 것이므로 그 설명을 생략하기로 한다.
실시예
1
도 1에 도시된 방법에 따라 D-사이코스를 제조하였다.
순도 99 %(w/w) 이상의 결정과당과 회수된 30℃의 연속식 크로마토그래피 모액과 회수된 30℃의 결정화 모액과 30℃의 용수를 사용하여 용해조 내에서 교반 혼합하여 50 brix(%) 로 용해하여 효소반응 기질 용액을 준비하였다.
효소반응은 대한민국 특허출원 제10-2009-0118465호에 개시된 바와 같이, 코리네박테리움 글루타미쿰 KCTC 13032의 발효 배양 및 상기 미생물 또는 그로부터 분리된 D-사이코스 에피머화 효소를 소디움 알기네이트 담체에 고정화시키고 이성화반응 설비(이성화탑, 한주기계공업)에 충진 한 뒤, 상기 준비된 효소반응 기질 용액을 열 교환기를 통하여 시간당 5 내지 20℃ 씩 50℃ 온도로 승온시켜 SV [Space Velocity: 유량(L)/시간(Hr)/수지량(L)] 0.5 로 반응시켰고 이때의 D-사이코스의 순도는 약 24 %(w/w) 였다.
상기 순도 24 %(w/w)의 D-사이코스 용액을 열 교환기를 통하여 시간당 5 내지 10℃ 씩 30 내지 40℃ 온도로 냉각시킨 후, 수소기로 치환된 강산성 양이온 교환 수지(Bayer S1668) 또는 수산화기로 치환된 약염기성 음이온 교환 수지(Bayer Bayer S4528)가 충진된 컬럼에 SV [Space Velocity: 유량(L)/시간(Hr)/수지량(L)] 3 으로 통액하여 효소반응 용액 중의 이온 성분을 제거하였고, 이온 성분 제거의 확인은 전기 전도계 측정을 통해 단위 cm 당 10 마이크로 지맨스 이하가 되도록 조절하였으며 정제된 효소 반응액의 D-사이코스의 순도는 24 %(w/w)로 유지되었다.
상기 정제된 D-사이코스 용액을 저온 농축기(강제박막형농축기(Forced Thin Film Evaporator, 웰크론한텍)) 내에 투입하여 65 내지 75℃의 온도 하에서 10 내지 15분 동안 단시간에 농축하여 농도를 60 brix(%)(D-사이코스 용액×100/전체 용액)로 조절하였고, 열 교환기를 통하여 시간당 5 내지 25℃ 씩 냉각시켜 60℃ 에서 칼슘 활성기가 부착된 강산성 양이온교환수지가 충진된 컬럼에서의 연속식 크로마토그래피에 의해 D-사이코스의 순도가 95 %(w/w) 이상인 획분과 과당의 순도가 95 %(w/w) 이상인 획분으로 분리하였다.
상기 연속식 크로마토그래피에서 분리된 모액 즉, 순도 95 %(w/w) 이상의 과당 획분은 회수하여 시간당 20 내지 30℃ 씩 냉각시켜 30℃ 에서 효소반응 공정으로 재순환시켰다.
상기 연속식 크로마토그래피에서 분리되어진 순도 95 %(w/w) 이상의 D-사이코스 용액을 65 내지 75℃의 온도 하에서 10 내지 15 분 동안 단시간에 농축하여 농도를 80 brix(%) 로 조절하였고, 농축된 순도 95 %(w/w) 이상의 D-사이코스 용액을 열 교환기를 통하여 시간당 5 내지 20℃씩 40℃의 온도로 급속히 냉각시킨 후 30 내지 40℃ 범위 내에서 승온과 냉각이 5 내지 10 회 반복적으로 이루어지게 하여 80 내지 120 시간 동안 결정화하여 D-사이코스를 제조하였다. 또한, 상기 결정화에서 분리된 모액 즉, 순도 90% 이상의 D-사이코스 획분을 회수하여 30℃ 에서 효소반응 공정으로 재순환시켰다.
상기와 같은 과정을 통해, 저온 농축기에서 단시간에 농축함과 동시에 열교환기를 이용하여 공정 내 온도를 저온으로 조절함으로써 생산 수율이 75 % 이상으로 월등한 순도 99% 이상의 고순도 D-사이코스를 얻을 수 있었다.
비교예
1
실시예 1에서 열 교환기로 냉각하는 과정을 생략한 것을 제외하고는, 실시예 1과 동일한 방법으로 수행하여 순도 99% 이상의 고순도 D-사이코스를 생산하였고, 이때의 생산 수율은 60 %임을 확인할 수 있었다.
이는, D-사이코스가 일정 농도와 일정 시간이 경과됨에 따라 순도가 줄어드는 특징을 가졌기 때문에(도 3 내지 7 참조) 공정 내 냉각 열교환단계 없이 연속식 크로마토그래피 분리 과당모액과 결정화 분리모액의 재순환 반복횟수가 지속적으로 누적될 경우, 연속식 크로마토그래피에 투입되는 D-사이코스 순도가 최초 24 %(w/w) 에서 반복횟수와 비례하여 그 순도가 낮아지고 결정화를 위한 95 %(w/w) 이상의 고순도 D-사이코스 획분 분리 수율이 낮아지는 결과를 나타내며, 이러한 95 %(w/w) 이상의 고순도 D-사이코스의 낮은 회수율은 순도 99% 이상의 고순도 D-사이코스 생산 수율 감소의 원인으로 작용하기 때문으로 보인다. 또한, D-사이코스 유래의 변성된 불순물이 연속식 크로마토그래피 분리단계에서 과당 획분으로 분리되므로, 공정 내 재순환 반복횟수가 누적됨에 따라 연속식 크로마토그래피 분리에 문제를 일으켜 누적되는 불순물의 제어를 위하여 분리된 과당 획분의 약 5 내지 10 %(v/v) 용액을 폐기하게 되고, 이는 결과적으로 순도 99% 이상의 고순도 D-사이코스 생산 수율 감소의 원인으로 작용한다.
연속식 크로마토그래피 분리과당 모액 약 5 내지 10 %(v/v)을 폐기하지 않을 경우, 누적되는 불순물에 의하여 연속식 크로마토그래피 투입원액의 D-사이코스 순도가 지속적으로 감소되므로, 95 %(w/w) 이상의 고순도 D-사이코스 분리를 위한 연속식 크로마토그래피의 분리 프로그램 조건을 지속적으로 변경해야 하는데 이것은 산업적 생산 효율화를 떨어뜨리는 요인이며, 연속식 크로마토그래피에서 95 %(w/w) 이상의 고순도 D-사이코스 분리를 위한 탈이온수 사용량 또한 증가되므로 농축공정의 부하를 초래하여 공정흐름의 병목현상을 일으켜 생산량 저하와 제조원가 상승의 결과를 일으킨다.
비교예
2
도 2에 도시된 방법에 따라 모액 회수 및 재사용 하는 단계를 생략한 것을 제외하고는, 제조과정을 실시예 1과 동일한 방법으로 수행하여 순도 99% 이상의 고순도 D-사이코스를 생산하였고, 이때의 생산 수율은 20 %임을 확인할 수 있었다.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시예일뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
Claims (10)
- 효소반응을 위한 과당용액을 준비하는 단계; 상기 과당용액을 효소반응 한 후 D-사이코스 용액을 열교환 냉각시켜 이온정제 하는 단계; 상기 불순물을 제거한 정제된 D-사이코스 용액을 농축한 뒤 D-사이코스 용액을 열교환 냉각시켜 연속식 크로마토그래피 분리하는 단계; 상기 연속식 크로마토그래피 분리모액을 열교환 냉각시켜 공정 내 재순환 시키는 단계; 상기 연속식 크로마토그래피 분리한 D-사이코스 용액을 농축하여 열교환 냉각시켜 결정화하는 단계; 상기 결정화 분리모액을 열교환 냉각시켜 공정 내 재순환 시키는 단계;를 포함하는, D-사이코스를 제조하는 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 효소반응을 위한 과당용액을 준비하는 단계가, 연속식 크로마토그래피의 분리모액인 순도 90 %(w/w)이상의 과당 획분과 결정화 분리모액인 순도 90 %(w/w) 이상의 D-사이코스 획분을 과당과 혼합하여 30 내지 40 ℃의 온도 하에서 30 내지 50 brix(%)의 농도로 준비하는 것을 포함하는, D-사이코스를 제조하는 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 과당용액을 효소반응 한 후 D-사이코스 용액을 열교환 냉각시켜 이온정제 하는 단계가 30 내지 40 ℃의 온도 하에서 수행되는 것을 포함하는, D-사이코스를 제조하는 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 정제된 D-사이코스 용액을 농축한 뒤 D-사이코스 용액을 열교환 냉각시켜 연속식 크로마토그래피 분리하는 단계가, 55 내지 65 ℃의 온도 하에서 수행되는 것을 포함하는, D-사이코스를 제조하는 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 연속식 크로마토그래피의 분리모액을 열교환 냉각시켜 공정 내 재순환 시키는 단계가, 순도 90 %(w/w) 이상의 과당 획분을 열교환 냉각시켜 30 내지 40 ℃의 온도 하에서 효소반응 공정으로 재순환 시키는 것을 포함하는, D-사이코스를 제조하는 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 연속식 크로마토그래피 분리한 D-사이코스 용액을 농축하여 열교환 냉각시켜 결정화하는 단계가, 순도 95 %(w/w) 이상의 D-사이코스 용액을 농축한 뒤, 열교환 냉각시켜 30 내지 40℃의 온도 하에서 결정화하는 것을 포함하는, D-사이코스를 제조하는 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 결정화 분리모액을 열교환 냉각시켜 공정 내 재순환 시키는 단계가, 순도 90 %(w/w) 이상의 D-사이코스 획분을 열교환 냉각시켜 30 내지 40 ℃의 온도 하에서 효소반응 공정으로 재순환 시키는 것을 포함하는, D-사이코스를 제조하는 방법.
- 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제조하는 방법이 순도 99 %(w/w) 이상의 D-사이코스를 제조하는 방법인, D-사이코스를 제조하는 방법.
- 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항의 방법에 따라 제조된, D-사이코스.
- 제9항에 있어서, 상기 제조된 D-사이코스가 99 %(w/w) 이상의 순도를 갖는, D-사이코스.
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