CN118121514A - 一种美白植物组合物及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种美白植物组合物及其应用，属于护肤品领域。包括组分：松口蘑提取物、雪莲提取物、光甘草定、文旦果皮提取物。本发明提供的美白组合物为纯天然植物来源，满足消费者对于天然的喜好。本发明依靠植物提取物起到美白的效果；通过松口蘑提取物、雪莲提取物、光甘草定与文旦果皮提取物的复配起到良好美白的效果。

Description

一种美白植物组合物及其应用

技术领域

本发明属于化妆品或类似的梳妆用配制品领域，具体涉及一种美白组合物和在护肤品中的应用。

背景技术

近年来，天然产物提取物在美白技术领域的应用日益广泛。这主要得益于其丰富的来源、安全可靠的特性、显著的美白效果以及符合市场需求的趋势。

首先，天然产物提取物的来源非常丰富。自然界中存在着大量的植物、动物、矿物等资源，这些资源中蕴含着丰富的具有美白功效的成分。通过提取和精制，可以获得大量的天然美白提取物，为美白产品的研发和生产提供充足的原料。

其次，天然产物提取物具有安全可靠的特性。相比于化学合成的美白成分，天然产物提取物在安全性方面具有显著的优势。许多天然产物已经被长期用于食品、药品等领域，其安全性已经得到了充分的验证。因此，利用天然产物提取物制作美白产品可以降低对皮肤的刺激和过敏风险，为消费者提供更加安全的美白体验。

再者，天然产物提取物具有显著的美白效果。多数天然产物提取物具有抑制黑色素生成和传递的作用，从而达到美白效果。同时，这些提取物还具有抗氧化、抗炎、抗菌等生物活性，有助于解决肌肤问题，如色斑、暗沉、粗糙等。因此，天然产物提取物在美白技术中具有重要的作用。

最后，天然产物提取物符合市场需求。随着人们对健康和环保意识的提高，越来越多的消费者开始关注化妆品的安全性和环保性。天然产物提取物美白产品符合这一市场需求，成为越来越多消费者的选择。

总之，天然产物提取物在美白技术领域的应用具有广阔的发展前景。未来，随着技术的不断进步和市场需求的不断增长，天然产物提取物美白技术将继续发展创新，为消费者带来更加健康、安全和有效的美白体验。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种美白组合物，采用松口蘑提取物、雪莲提取物、光甘草定、文旦果皮提取物等成分使其达到美白效果。

为实现上述目的，本发明公开以下技术方案：

本发明提供了一种美白组合物，按质量份数计，包括以下组分：

松口蘑提取物 10～15份；

雪莲提取物 15～20份；

光甘草定 0.1～2份；

文旦果皮提取物 10～15份。

优选地，所述松口磨提取物方法，包括以下步骤：

S1 将松口磨菌株接种于马铃薯葡萄糖琼脂培养基中；

S2 将S1培养20～30天后，接种于液体培养基中；

S3 将S2中菌球直径≥5mm时，将菌球取出，过滤，取固形物；

S4 将S3产物冲洗后干燥，粉碎得到松口磨菌丝粉；

S5 将S4产物加入至60～85vol%甲醇中，提取2～4次，单次提取≥1h；

S6 将S5产物干燥，得到松口磨提取物。

甲醇溶液的添加量为植物干粉的8～10倍体积；每次提取时间为≥1h。

优选地，所述液体培养基所含原料葡萄糖、蛋白胨、酵母膏、可溶性淀粉、七水硫酸镁、磷酸二氢钾质量份数比为40：1：0.6：6：0.1：0.2。

优选地，所述液体培养基制备方法为将葡萄糖、蛋白胨、酵母膏、可溶性淀粉、七水硫酸镁、磷酸二氢钾以质量份数比40：1：0.6：6：0.1：0.2，称取相应质量物质，溶于1000mL水中，高温灭菌后即可。

优选地，所述甲醇浓度为75vol%，甲醇溶液的添加量为植物干粉的9倍体积；单次提取时间为2.5h，提取3次。

优选地，按质量份数比计，所述松口蘑提取物、雪莲提取物、光甘草定、文旦果皮提取物质量份数比为5～140：7.5～180：1:5～140。

更优选地，按质量份数比计，所述松口蘑提取物、雪莲提取物、光甘草定、文旦果皮提取物质量份数比为20～80：25～60：1:15～60。

最优选地，按质量份数比计，所述松口蘑提取物、雪莲提取物、光甘草定、文旦果皮提取物质量份数比为25：32：1：22。

文旦及雪莲植物提取物制备方法包括以下步骤：

S1 选取样品，洗净、干燥、粉碎，得干粉；

S2 将S1产物用60～85vol%甲醇回流提取2～4次，合并过滤提取液，减压浓缩至恒重，喷雾干燥；

甲醇溶液的添加量为植物干粉的8～10倍体积；每次提取时间为≥1h。

优选地，甲醇浓度为75vol%，回流3次。

优选地，甲醇添加量为植物干粉的9倍体积；每次提取时间为2.5h。

本发明还提供了所述美白组合物在化妆品中的应用。

本发明还提供了一种化妆品，其含有所述美白组合物。所述化妆品可以是霜、乳液、精华液、面膜等剂型，但不局限于此。

优选地，所述美白组合物在化妆品中重量百分含量为至少为5wt%。

最优选地，所述美白组合物在化妆品中重量百分含量为8wt%。

所述美白组合物以该量应用于化妆品时，能有效提升化妆品的美白功效。

本发明还提供了一种美白凝胶，其由如下重量百分含量的组分组成：

所述美白组合物5wt％～10wt％、增稠剂1wt%、保湿剂45wt%及去离子水余量。

本发明配方的美白组合物凝胶对皮肤温和无刺激，使用安全，具有美白功效，适用于各种肤质。

优选地，所述保湿剂为甘油或透明质酸任意比例混合。

优选地，所述增稠剂为羟乙基纤维素。

优选地，所述凝胶制备方法包含以下步骤：

美白组合物、增稠剂、保湿剂加入烧杯中，加入去离子水，在60～75℃下搅拌均匀。

本发明所用提取物原料及其有效成分：

松口蘑提取物（Tricholoma matsutake）：松口蘑属于口蘑科、口蘑属真菌，是一种名贵的野生食药用菌。在我国多地均有分布。其菌菇菌丝中含有多种营养成分如脂肪酸、氧化酶、氨基酸等，尤其 Asp、Glu、Gly、Ala、Lys等氨基酸含量要明显优于其子实体含量，且其菌丝中还含有多种子实体所不具备的醇类、醛类、酮类等天然产物。

雪莲（Saussurea involucrata）根部提取物：雪莲属菊科风毛菊属，主要分布于新疆，西藏，青海等地高山之上，具有极高的药用价值；其根部富含多种多糖、黄酮、皂苷及生物碱，其中多糖是雪莲根中主要提取成分之一，具有显著的抗氧化，抗炎作用。

文旦（Citrus maxima (Burm.) Merr. cv. Wentan）果皮提取物：文旦属芸香科柑橘属常绿乔木，其果皮中含有丰富的挥发性成分如黄酮类、香豆素、多糖、挥发性油脂等；其中挥发性油脂是文旦果皮中主要成分之一，可以起到很强的舒缓作用，且黄酮类化合物，香豆素具有很强的抗氧化性能，可以有效地清除自由基，减缓衰老过程；多糖类化合物则可以有效地调节机体免疫。

本发明的有益效果：

与现有技术相比，本发明的有益效果在于：本发明开创性地将松口磨菌丝提取物、雪莲提取物、文旦果皮提取物及光甘草定相结合形成一种美白组合物，利用菌菇组培，获得松口磨菌丝提取物，相较于子实体，菌丝体中会产生多种代谢产物故而菌丝体相较于子实体更具有复杂的天然产物成分。故而使用菌丝体提取物与雪莲根提取物，文旦果皮提取物相配合，佐以光甘草定作为辅助成分形成一种美白组合物。

经实验发现，所述美白组合物具有美白，抑制酪氨酸酶活性等效果。适用于各种肤质。本发明发现，在相同使用量的前提下，本发明所限定的特定比例的松口蘑提取物、雪莲提取物、光甘草定、文旦果皮提取物比其中任意三种共同使用的效果更好，所产生协同增效的效果，使所述美白组合物的美白、抑制酪氨酸酶活性功效更好；在相同比例的前提下，松口磨菌丝在本发明所限定的特定环境内，可有效提高菌丝的活性物质含量，使得本发明所述美白组合物的美白、抑制酪氨酸酶活性功效更好。本发明还提供了使所述美白组合物在美白，抑制酪氨酸酶活性方面均达到较优效果的配方，还提供了所述美白组合物应用于美白凝胶的优选配方。

附图说明

图1 实施例4～9细胞毒性试验。

图2 实施例1～6、对比例1～24 酪氨酸酶抑制率。

图3 实施例4～6、对比例1～24 ABTS^﹢自由基清除率。

图4 实施例7～9、对比例25～26黑色素存有率测试。

具体实施方式

为了更好地理解本发明，下面结合具体实施例对本发明做进一步的描述，其中实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，不构成对本发明保护范围的限制。

本发明中的部分原料来源如下：

松口磨：购自沃尔玛超市；

雪莲根：采自新疆维吾尔自治区伊犁哈萨克自治州阔克塔勒雪莲种植基地；

光甘草定：购自苏州阿拉丁生物科技有限公司；

文旦：采自浙江宁波大学；

桦褐孔菌：购自扶风斯诺特生物科技有限公司；

松口磨提取物制备，其包括如下步骤：

S1 将松口磨菌株接种于马铃薯葡萄糖琼脂培养基中；

S2 将S1培养20～30天后，接种于液体培养基中；

S3 将S2中菌球直径≥5mm时，将菌球取出，过滤，取固形物；

S4 将S3产物冲洗后干燥，粉碎得到松口磨菌丝粉；

S5 将S4产物加入至60～75vol%甲醇中，提取2～4次，单次提取1～4h；

S6 将S5产物干燥，得到松口磨提取物；

甲醇添加量为植物干粉的9倍体积；每次提取时间为2.5h。

具体制备环境参照表1。

雪莲根及文旦果皮提取物制备，其包括如下步骤：

S1 选取样品，洗净、干燥、粉碎，得干粉；

S2 将S1产物用75vol%甲醇回流提取3次，合并过滤提取液，减压浓缩至恒重，喷雾干燥；

甲醇添加量为植物干粉的9倍体积；每次提取时间为2.5h。

美白凝胶的制备，其包括如下步骤：

美白组合物、增稠剂、保湿剂加入烧杯中，加入去离子水，在60～75℃下搅拌均匀即可。

具体制备参数参照表2、表3。

表 1 菌丝提取物制备环境

表 2 美白组合物添加质量份数比例

注：松口磨子实体制备方法和菌丝制备方法S4、S5、S6一致；桦褐孔菌菌丝制备方法与松口磨菌丝制备方法一致；松口蘑提取物（子实体及菌丝）及桦褐孔菌（菌丝）提取物提取方法均采用实施例2提取配比；雪莲（花）制备方法与雪莲（根）制备方法一致。

表 3 美白凝胶制备质量百分比

注：表3中余量为去离子水。

安全性与性能测试

一、安全性测试

以2022年《化妆品安全技术规范》为参照标准，对实施例7～9的美白组合物凝胶进行化妆品刺激性评价，测试方法为皮肤贴斑试验，对年龄16～65岁随机分布的30人进行试验。

测试方法：将受试物放入斑试器中，用量为0.020～0.025g，将加有受试物的斑试器用无刺激布基胶带覆于受试者背部或前臂曲侧，用手掌轻压使之均匀贴附在皮肤表面，持续24小时，去除受试斑试器后30分钟，待压痕消失后观察皮肤反应。若结果为阴性，于斑贴试验后24小时和48小时分别再次进行观察。

评价标准：0级：阴性反应；1级：可疑反应，仅有微弱红斑；2级：弱阳性反应，红斑、浸润、水肿、可有丘疹；3级：强阳性反应，红斑、浸润、水肿、可有丘疹、反应可超出受试区；4级：极强阳性反应，明显红斑、严重浸润、水肿、融合性疱疹、反应超出受试区。

测试结果：所有受试者的皮肤反应均为阴性。

上述测试结果表明，本发明提供的美白组合物凝胶对皮肤温和无刺激，使用安全。

二、细胞毒性测试

进行CCK—8实验以验证实施例1～4的细胞毒性。

将人永生化表皮细胞（HaCaT）以3x10³的密度接种到96孔细胞培养板中。24小时后，将培养基替换为含有10%实施例4～6组合物的培养基中，空白对照组添加等量水，然后进一步温育24小时后使用更换新鲜无添加培养基，加入10微升的CCK—8处理细胞，在遮光状态下于37℃孵育1小时，此后，除去培养基，测量样品在450nm的吸光度。

式（1）

表 4 细胞毒性试验

据表4实验结果可知，添加实施例4～6组合物处理，细胞存活率依旧保持约97.42%及以上。据此结果可证实，即便使用10%的美白组合物处理，细胞仍可以活跃地分裂，且未观察到明显细胞毒性。

三、酪氨酸酶活性抑制试验

使用酪氨酸酶抑制实验验证实施例1～6及对比例1～24的酪氨酸酶抑制能力。

酪氨酸酶是黑色素合成过程中一个关键酶。抑制其能有效降低黑色素的合成，起到美白作用。

溶液配制：

配置浓度5U/L的酶溶液，分装至1.5mLEP管中，置于液氮保存。用前，以PBS稀释，配置为0.5U/L酪氨酸酶溶液，现用现配。精确称取L—酪氨酸、L—多巴，加入适量PBS溶液，室温超声溶解30分钟，制得浓度为3.0mmol/L的底物溶液；曲酸（阳性对照）溶液精确称取1g曲酸，DMSO溶解，加入适量PBS溶液稀释，最终DMSO含量为0.5%；称取1g组合物，DMSO溶解，加适量PBS溶液稀释，最终DMSO含量为0.5%。

酪氨酸酶活力抑制率测定：

依次吸取样品40μL，PBS10μL，酶溶液10μL混合，37摄氏度孵育10分钟，加底物溶液50μL，孵育25分钟，于多功能酶标仪检测475nm吸光度值，依据其吸光度值计算抑制率。

式（2）

表 5 酪氨酸酶抑制率

据表 5实施例1～3结果可知，本发明实施例提供的提取物具有较好抑制酪氨酸酶作用，尤其是实施例2的效果较好，说明以实施例2提取工艺参数对松口蘑菌丝提取时，所得到的提取物的酪氨酸酶抑制效果最好。

比较实施例4～6与对比例1～12的结果可知，松口蘑提取物、雪莲提取物、光甘草定、文旦果皮提取物使用本发明特定组合及特定配比时可明显提升美白组合物的酪氨酸酶抑制功效。

比较实施例4～6与对比例13～15的结果可知，松口蘑子实体提取物对酪氨酸酶的抑制率效果在本组合中远不及松口蘑菌丝提取物，故而使用本发明特定组合及特定配比时可明显提升美白组合物的酪氨酸酶抑制功效。

比较实施例4～6与对比例16～18的结果可知，雪莲花提取物对酪氨酸酶的抑制效果在本组合中远不及雪莲根提取物，故而使用本发明特定组合及特定配比时可明显提升美白组合物的酪氨酸酶抑制功效。

比较实施例4～6与对比例19～21的结果可知，桦褐孔菌菌丝提取物对酪氨酸酶的抑制率效果在本组合中远不及松口磨菌丝提取物，故而使用本发明特定组合及特定配比时可明显提升美白组合物的酪氨酸酶抑制功效。

比较实施例4～6与对比例22～24的结果可知，光甘草定对酪氨酸酶的抑制率效果随着浓度的提高而提高，但随着光甘草定的添加量增加，其产品成本也随之升高，相较于提升的微乎其微抑制率与成本的大幅增加，其高剂量添加性价比不足，故而使用本发明特定组合及特定配比时可明显提升美白组合物的酪氨酸酶抑制功效。

四、ABTS⁺自由基抑制实验

取7 mmol/L ABTS⁺ 5 mL和140 mmo l/L过硫酸钾88μL 混合均匀，配制成ABTS⁺自由基储备液，避光保存备用。取0.1 mL,10mg/L实施例4～6及对比例1～24待测液，加入3.9mL ABTS⁺工作液，振荡30s，室温下静置 6 min后，以无水乙醇为对照，于734nm 处测吸光度，采用Vc 作为阳性对照。每个样品重复测3次，按照下列公式计算 ABTS+自由基的清除率：

式中Ai为加入待测液的吸光度值；Aj为待测液的本底值；A0 为不加待测液的对照值。

表 6 ABTS⁺自由基清除率

比较实施例4～6与对比例1～12的结果可知，松口蘑提取物、雪莲提取物、光甘草定、文旦果皮提取物使用本发明特定组合及特定配比时可明显提升美白组合物对ABTS⁺自由基清除率。

比较实施例4～6与对比例13～15的结果可知，松口蘑子实体提取物对酪氨酸酶的抑制率效果在本组合中远不及松口蘑菌丝提取物，故而使用本发明特定组合及特定配比时可明显提升美白组合物对ABTS⁺自由基清除率。

比较实施例4～6与对比例16～18的结果可知，雪莲花提取物对酪氨酸酶的抑制率效果在本组合中远不及雪莲根提取物，故而使用本发明特定组合及特定配比时可明显提升美白组合物对ABTS⁺自由基清除率。

比较实施例4～6与对比例19～21的结果可知，桦褐孔菌菌丝提取物对酪氨酸酶的抑制率效果在本组合中远不及松口磨菌丝提取物，故而使用本发明特定组合及特定配比时可明显提升美白组合物对ABTS⁺自由基清除率。

五、美白性能测试

5组实验者分别使用实施例7～9与对比例25～26，每日早晚洁面后各使用一次，连续十一周，其间禁止使用其他化妆品，而后使用北京北信科仪分析仪器有限公司JC08～SHM100皮肤黑色素测试仪对面部同一部位测量黑色素的数量，连续三次，取平均值。

式（3）

表 7黑色素存有率测试结果

据表7比较实施例7～9与对比例25的结果可知，使用本发明提供的美白组合物的特定组合能够有效地提升凝胶的美白功效。

比较实施例7～9与对比例26的结果可知，随着组合物的提高，皮肤的黑色素并未显著降低，这说明实施例9即9wt%的组合物添加量已经达到了皮肤表皮细胞所能摄取上限，即使继续提高剂量也不会增大其在表皮细胞中的摄取率。因此对于美白效果也不存在显著提升。因此使用本发明特定添加量的美白组合物的美白凝胶，美白效果最好，且成本较低。

虽然以上描述了本发明的具体实施方式，但是本领域的技术人员应当理解，这仅是举例说明，本发明的保护范围是由所附权利要求书限定的。本领域的技术人员在不背离本发明的原理和实质的前提下，可以对这些实施方式做出多种变更或修改，但这些变更和修改均落入本发明的保护范围。

Claims (8)

1.一种美白组合物，其特征在于，以质量份计算包括以下组分：

松口蘑提取物 10～15份；

雪莲提取物 15～20份；

光甘草定 0.1～2份；

文旦果皮提取物 10～15份。

2.根据权利要求1所述的美白组合物，其特征在于，所述松口磨提取物所使用的提取部位为松口磨菌丝；雪莲提取物的提取物部位为雪莲根。

3.根据权利要求1所述的美白组合物，其特征在于，所述松口磨提取物的制备方法为：

S1 将松口磨菌株接种于马铃薯葡萄糖琼脂培养基中；

S2 将S1培养20～30天后，接种于液体培养基中；

S3 将S2中菌丝球直径≥5mm时，将菌丝球取出，过滤，取固形物；

S4 将S3产物冲洗后干燥，粉碎得到松口磨菌丝粉；

S5 将S4产物加入到60～85vol%甲醇中，提取；

S6 将S5产物干燥，得到松口磨提取物；

上述S5甲醇的添加量为S4产物的5～10倍体积；每次提取时间为≥1h。

4.根据权利要求1所述的美白组合物，其特征在于，所述雪莲根及文旦果皮提取物的制备方法为：

S1 选取样品，洗净、干燥、粉碎；

S2 将S1产物用60～85vol%甲醇回流提取2～4次，合并过滤提取液，减压浓缩至恒重，喷雾干燥；

上述S2甲醇的添加量为S1产物的8～10倍体积；每次提取时间为≥1h。

5.权利要求1～4任一所述的美白组合物在制备护肤品中的应用。

6.一种驻留类皮肤外用剂，其特征在于，包含权利要求1～5任一所述的美白组合物。

7.根据权利要求6所述的驻留类皮肤外用剂，其特征在于，所述美白组合物的添加百分比为≥5wt%。

8.根据权利要求7所述的驻留类皮肤外用剂，其特征在于，还包括辅料，所述辅料选自增稠剂、乳化剂、皮肤调理剂、抗氧化剂、保湿剂、pH调节剂和防腐剂中的一种或多种；驻留类皮肤外用剂的剂型为乳液、凝胶或霜剂。