CN115052623A

CN115052623A - 抑制剂及其用途

Info

Publication number: CN115052623A
Application number: CN202180012883.6A
Authority: CN
Inventors: G·阿玛贝利
Original assignee: Ensera Co ltd
Current assignee: Ensera Co ltd
Priority date: 2020-02-20
Filing date: 2021-02-19
Publication date: 2022-09-13
Also published as: AU2021225061A1; CA3162043A1; CL2022002243A1; US20230192827A1; BR112022015473A2; EP3868396A1; MX2022009525A; KR20220143865A; WO2021165499A1; JP2023514254A; EP4106804A1; IL294941A

Abstract

本发明涉及IGFBP5和/或至少其受体之一的抑制剂，其中所述抑制剂具有抗纤维化作用，其生产方法、包含所述抑制剂的药物组合物和其用途。特别地，本发明涉及特异性结合至人IGFBP5和/或至少其受体之一的抗体或其抗原结合片段。

Description

抑制剂及其用途

技术领域

背景技术

IGFBP5

胰岛素样生长因子结合蛋白构成了由六种结合蛋白组成的家族，调节胰岛素样生长因子(IGF)的生物利用度。其中，胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP5)是IGFBP家族中最保守的成员(Schneider，等Journal of Endocrinology 172，423-440(2002))；它以高亲和力结合IGF，与IGF-1或-2和酸不稳定亚基(ALS)形成三元复合物(Baxter等Am J PhysiolEndocrinol Metab.278：E967-E976(2000))。

除了能够调节IGF利用度外，IGFBP5也被证明具有IGF-非依赖性功能(Schneider，等Journal of Endocrinology 172，423-440(2002))。事实上，它能够通过诱导胞外基质(ECM)基因的表达直接促进纤维变性，并间接地通过增加其他具有促纤维化活性的生长因子(例如结缔组织生长因子(CTGF))的水平，导致ECM产生的进一步增加。除了调节ECM和生长因子基因，IGFBP5还增加了赖氨酰(Lysyl)氧化酶(LOX)的表达，该酶负责交联基质，使ECM对蛋白水解降解更具抗性。此外，IGFBP5可以结合ECM组分并保护它们不被降解，从而促进ECM积累和纤维变性，并改变组织结构和功能。此外，IGFBP5促进其自身的表达，产生正反馈回路(Nguyen等Frontiers in Endocrinology.9：601(2018))。IGFBP5是纤维变性中重要的介导物，是已知促纤维化因子(如转化生长因子β(TGF-β)信号转导)的上游。所有这些数据强烈表明，IGFBP5通过直接诱导ECM和促纤维化基因的大部分的表达发挥其促纤维化活性。最后，虽然大多数药物只靶向级联下游的一个单个的促纤维化因子，但是通过靶向IGFBP5，我们将能够阻断整个通路，从而下调几种促纤维化因子和ECM基因。

据我们所知，目前尚无针对IGFBP5的，能够抑制IGFBP5促纤维化活性，和对靶组织/细胞的其他有害作用的市售单克隆抗体。

IGFBP5在特发性肺纤维化中

特发性肺纤维化(IPF)是一种非肿瘤性慢性肺部综合征，其特征在于成纤维细胞/肌成纤维细胞的异常积累和肺实质的进行性异常重塑，随后瘢痕形成和其结构与功能的破坏。尽管最近取得了相当大的进展，但是目前的治疗方案基本上没有希望，从诊断日起，中位生存率小于三年(Sureshbabu等Pulmonary Medicine.517687(2011))。

IPF的核心事件是肺损伤后成纤维细胞的异常增殖和向肺泡腔迁移。虽然在正常的情况下，成纤维细胞对伤口愈合和结缔组织的产生很重要，但在纤维化的肺中，它们功能失控，导致成纤维细胞灶(fibroblastic foci)的形成，所述成纤维细胞灶由高度增殖的成纤维细胞、某些免疫细胞和过度的ECM蛋白沉积组成。这些过程的后果是不成比例水平的疤痕组织、肺泡框架的改变、肺上皮结构的变化、功能性肺组织的硬化、肺的气体交换功能丧失以及血液的氧饱和度急剧下降(Coward，等Ther.Adv.Respir.Dis.4，367-388(2010))。

已经证明，当从IPF的患者的纤维化肺组织中培养原代成纤维细胞时，IGFBP5在胞外环境中增加，且IGFBP5沉积在这些细胞产生的ECM中。

此外，腺病毒介导的IGFBP5的表达，或加入重组的IGFBP5，导致原代正常成人肺成纤维细胞产生的ECM增加(Pilewski等Am J Pathol 166(2)：399-407(2005))。

有趣的是，还观察到鼠皮肤纤维变性模型的转基因小鼠利用IGFBP5的过度表达来促进促纤维化环境，导致成纤维细胞激活，肌成纤维细胞转化和ECM的沉积增加(Yasuoka等，Am.J.of Pathology 169(5)：1633-42.(2006))。使用该模型，证明了IGFBP5以IGF-非依赖性方式发挥其促纤维化作用(Yasuoka等Plos One 9(2)2014)。

IGFBP5在硬皮病中

全身性硬化症(SSc)是一种罕见的全身自身免疫性结缔组织疾病，特征为血管病变、免疫失调和进行性纤维变性，主要影响皮肤、胃肠道、肺、心脏和肾(Henes等Haematologica.(2020))。它与疾病相关的高死亡率有关，主要死因与心脏、肺部和肾脏受累有关。仍然没有有效的治疗以预防或阻止SSc和其他纤维变性疾病中纤维变性的进展(Tyndall等Ann Rheum Dis.69(10)：1809-1815(2010))。

皮肤和内脏器官的过度纤维变性是由于成纤维细胞增殖和ECM的过度产生(Henes等Haematologica.(2020))。纤维化改变导致皮肤和其他器官中的正常组织学结构的破坏。

IGFBP5似乎参与了纤维变性的早期，它可能是ECM产生的起始事件，表明它参与了SSc的纤维变性的发展。事实上，已经证明，与健康双胞胎的皮肤相比，从患有SSc的患者的疾病受累皮肤体外培养的原代成纤维细胞中，IGFBP5的mRNA和蛋白质水平的表达增加。还证明了IGFBP5诱导从成纤维细胞产生胶原蛋白和纤连蛋白(FN1)，并诱导成纤维细胞/肌成纤维细胞在体外和体内转分化(Yasuoka等，American Journal Of Pathology169(5)：1633-42.(2006))。此外，使用复制缺陷型腺病毒体内过表达IGFBP5，诱导小鼠中皮肤纤维变性，其包括真皮厚度增加和胶原束厚度增加(Henes等Haematologica.(2020))。随着IGFBP5的过度表达，真皮成纤维细胞中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和波形蛋白的表达也明显增加。

IGFBP5在SSc和IPF中过表达(Nguyen X-X，MuhammadL，Nietert PJ和Feghali-Bostwick C(2018)Front.Endocrinol.9：601.doi：10.3389/fendo.2018.00601表明，抑制IGFBP5功能的策略可能对改善纤维变性有效。

因此，需要强力的且特异性的IGFBP5抑制剂，特别是中和抗体。

发明内容

在本发明中，令人惊讶地发现IGFBP5轴(包括IGFBP5和其任何受体)的破坏、中和或阻断对纤维变性具有有益效果。

本文公开了一种IGFBP5和/或至少其受体之一的抑制剂，其中所述抑制剂具有抗纤维化活性。

抗纤维化活性可以通过本领域已知的任何手段测量，包括如本文所述。与无抗体或其抗原结合片段的对照条件相比，纤维变性被抑制至少10％时，分离的抗体或其抗原结合片段被认为具有抗纤维化作用。优选地，与无抗体或其抗原结合片段的对照条件相比，纤维变性被抑制至少15％、20％、25％、30％、35％、40％、50％、60％、70％、80％或90％时，该抑制剂被认为具有抗纤维化作用。

优选地，IGFBP5和/或至少其受体之一的抑制剂用于治疗和/或预防纤维变性和/或纤维化病症。

仍优选地，所述抑制剂选自下组：

a)多肽；

b)多核苷酸或编码所述多肽的多核苷酸；

c)包含或表达所述多核苷酸的载体；

d)经遗传工程改造表达所述多肽或所述多核苷酸的宿主细胞；

e)小分子；

f)肽、蛋白质、抗体、反义寡核苷酸、siRNA、反义表达载体或重组病毒。

更优选地，所述抑制剂是结合至人IGFBP5或结合至至少其受体之一的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述分离的抗体或其抗原结合片段具有抗纤维化作用。

优选地，该抑制剂抑制、减少或中和由促纤维化介导物诱导的αSMA的形成和/或其抑制、减少或中和由促纤维化介导物诱导的FN1的形成。

优选地，该抑制剂是结合至人IGFBP5的分离的抗体或其抗原结合片段，且具有抗纤维化活性。

优选地，该分离的抗体或其抗原结合片段包括：

a.重链可变结构域(VH)，其包括：

i.选自下组的氨基酸序列的CDR1序列：SEQ ID NO：1、2、3、4和5；

ii.选自下组的氨基酸序列的CDR2序列：SEQ ID NO：6、7、8、9、10和11；和

iii.选自下组的氨基酸序列的CDR3序列：SEQ ID NO：12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25和26；和/或

b.轻链可变结构域(VL)，其包含：

i.选自下组的氨基酸序列的CDR1序列：SEQ ID NO：27、28、29、30、31、32、33、34、35和36；

ii.选自下组的氨基酸序列的CDR2序列：SEQ ID NO：37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47；和

iii.选自下组的氨基酸序列的CDR3序列：SEQ ID NO：48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60。

仍优选地，该分离的抗体或其抗原结合片段包括：

a.重链可变结构域(VH)，其包括：

i.选自下组的氨基酸序列的CDR1序列：使用abysis工具分析(www.abysis.org)定义的序列，优选示于表4.1的；

ii.选自下组的氨基酸序列的CDR2序列：使用abysis工具分析(www.abysis.org)定义的序列，优选示于表4.1的；和

iii.选自下组的氨基酸序列的CDR3序列：使用abysis工具分析(www.abysis.org)定义的序列，优选示于表4.1的；和/或

b.轻链可变结构域(VL)，其包含：

iii.选自下组的氨基酸序列的CDR3序列：使用abysis工具分析(www.abysis.org)定义的序列，优选示于表4.1的。

仍优选地，该分离的抗体或其抗原结合片段包括：

a.重链可变结构域(VH)，其包括：

i.选自下组的氨基酸序列的CDR1序列：使用abysis工具分析(www.abysis.org)定义的序列，优选示于表5.1的；

ii.选自下组的氨基酸序列的CDR2序列：使用abysis工具分析(www.abysis.org)定义的序列，优选示于表5.1的；和

iii.选自下组的氨基酸序列的CDR3序列：使用abysis工具分析(www.abysis.org)定义的序列，优选示于表5.1的；和/或

b.轻链可变结构域(VL)，其包含：

iii.选自下组的氨基酸序列的CDR3序列：使用abysis工具分析(www.abysis.org)定义的序列，优选示于表5.1的。

仍优选地，该分离的抗体或其抗原结合片段包括：

a.选自下组的氨基酸序列的重链可变结构域序列：SEQ ID NO：61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74和75或

b.选自下组的氨基酸序列的轻链可变结构域序列：SEQ ID NO：76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89和90或

c.(a)的重链可变结构域和(b)的轻链可变结构域。

仍优选地，该分离的抗体或其抗原结合片段选自下组：A09、B06、C02、D10、F05、B09、B11、C11、C12、D12、E02、E03、E05、F04、G01，优选该分离的抗体或其抗原结合片段是抗体B06或B09。

仍优选地，该分离的抗体或其抗原结合片段，选自表2的VH CDR1、CDR2和CDR3和选自表3的VL CDR1、CDR2和CDR3。

还优选地，该分离的抗体或其抗原结合片段对于人IGFBP5具有低于或等于10^-8M的亲和常数。

还公开了一种分离的抗体或其抗原结合片段，其：

(a)特异性结合至IGFBP5上的表位，所述表位与表2-8中定义的单克隆抗体A09、B06、C02、D10、F05、B09、B11、C11、C12、D12、E02、E03、E05、F04、G01识别的表位相同或相似；或

(b)与表2-8中定义的单克隆抗体A09、B06、C02、D10、F05、B09、B11、C11、C12、D12、E02、E03、E05、F04、G01交叉竞争结合；或

(c)表现出与表2-8中定义的A09、B06、C02、D10、F05、B09、B11、C11、C12、D12、E02、E03、E05、F04、G0中任一个相同或相似的结合亲和力或特异性，或二者都具有；或

(d)具有本文所述抗体分子，例如，选自例如表2-8中定义的A09、B06、C02、D10、F05、B09、B11、C11、C12、D12、E02、E03、E05、F04、G01中任一个的抗体分子的一个或多个生物学特性和；或

(e)具有本文所述抗体分子，例如，选自例如，表2-8中定义的A09、B06、C02、D10、F05、B09、B11、C11、C12、D12、E02、E03、E05、F04、G01中任一个的抗体分子的一个或多个药代动力学性质。

在一个优选的实施方式中，如上所述的分离的抗体或其抗原结合片段：

优选地，如上定义的分离的抗体或其抗原结合片段是人或人源化的抗体，优选其为IgG2或IgG4抗体，优选IgG2κ抗体、IgG2λ抗体、IgG4κ抗体或IgG4λ抗体。

优选地，如上所述的抑制剂减少或抑制IGFBP5对其至少一个受体的结合，优选该至少一个受体为α2β1整合素或αvβ6整合素。

仍优选地，如上定义的抑制剂，i)减少或抑制胞外基质产生和/或ii)减少或抑制胞外基质沉积和/或iii)减少或抑制原代肺成纤维细胞中胶原蛋白和/或纤连蛋白产生和/或iv)减少或抑制原代肺成纤维细胞中胶原蛋白和/或纤连蛋白沉积。

本文公开了一种分离的多核苷酸，其包含编码上述定义的抗体或其抗原结合片段的至少一个序列，优选所述多核苷酸为cDNA。

本文公开了一种包含如上定义的多核苷酸的载体，优选地，所述载体选自质粒、病毒载体、非附加型哺乳动物载体(non-episomal mammalian vector)、表达载体和重组表达载体。

本文公开了一种包含如上定义的多核苷酸或如上定义载体的分离的细胞，优选所述分离的细胞为杂交瘤或中国仓鼠卵巢(CHO)细胞或人胚胎肾细胞(HEK293)。

优选地，该抑制剂、抗体或其抗原结合片段或如上定义的多核苷酸或载体或细胞，用作药物，优选用于治疗和/或预防纤维变性或纤维化病症，优选硬皮病或肺纤维变性，优选硬斑病(morphea)、作为移植物抗宿主病(GVHD)的结果的纤维变性、瘢瘤和肥厚性瘢痕、上皮下纤维变性、心肌心内膜纤维变性、子宫纤维变性、骨髓纤维化、腹膜后纤维变性(retroperitoneal fibrosis)、肾性全身纤维化症(nephrogenic systemic fibrosis)、手术后瘢痕形成、哮喘、异常的伤口愈合、多病灶性纤维硬化病(multifocalfibrosclerosis)、隐源性纤维性肺泡炎(cryptogenic fibrosing alveolitis)(CFA)和特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis)(IPF)。

本文公开了一种药物组合物，其包括抑制剂、分离的抗体或其抗原结合片段或多核苷酸或载体或细胞，如上所述，及药学上可接受的运载体，优选用于纤维变性或纤维化病症的治疗，优选所述组合物进一步包括治疗剂。

治疗剂可以是尼达尼布(nintedanib)和吡非尼酮(pirfenidone)。

本文公开了抗体和其抗原结合片段，其具有抗纤维化活性。

在一些实施方式中，公开了用于体内或体外抑制纤维变性的方法。在其他实施方式中，公开了用于治疗对象的纤维变性的方法。在一些特异性非限制性例子中，对象患有硬皮病或肺纤维化。

前述和其他特征和优势将从以下对几个实施方式的详细说明中变得更加明显，该实施方式参照附图进行。

附图简要说明

图1.在TGF-β1暴露的情况下，抗-IGFBP5 mAb对成纤维细胞-向-肌成纤维细胞转变(Fibroblast-to-Myofibroblast Transition)(FMT)试验的作用。来自三个IPF供者(IPF05、IPF06和IPF07)的人原代肺成纤维细胞被用1.25ng/mL的TGF-β1触发以诱导FMT。在FMT试验中测试了抗-IGFBP5 mAb、B06(A)和B09(B)，以检查其抑制αSMA表达的能力。载剂2：用3.6％PBS和1.25ng/mL of TGF-β1处理细胞。

图2.在TGF-β1暴露的情况下，抗-IGFBP5 mAb对上皮-向-间充质转变(Epithelial-to-Mesenchymal Transition)(EMT)试验的作用。来自三个IPF供者(IPF05、IPF06和IPF07)的人原代支气管上皮细胞(HBEC)被用5ng/mL的TGF-β1触发以诱导EMT。在EMT试验中测试了抗-IGFBP5 mAb、B06(A)和B09(B)，以检查其抑制FN1表达的能力。在IPF患者供者的组织中，抗-IGFBP5 mAb B06表现出对TGF-β1-介导的FN1表达的浓度依赖性抑制。载剂2：用3.6％PBS和5ng/mL of TGF-β1处理细胞。

具体实施方式

除非另有说明，根据本领域常规用法使用技术术语。

本发明的抗体特异性结合人IGFBP5。

如本文所讨论的，这些抗体统称为“抗-IGFBP5抗体”。所有这种抗体由本文讨论涵盖。在本发明的方法中，分别的抗体可以单独或组合使用。

通过“抗体特异性结合”IGFBP5意指使抗体不会与另一、非同源、人多肽有实质性地交叉反应。通过“基本上不交叉反应”意指抗体或片段对非同源蛋白质的结合亲和力小于10％、更优选小于5％、甚至更优选小于1％的对IGFBP5的结合亲和力。

在多个实施方式中，如本文所使用的，″特异性结合″IGFBP5的抗体包括结合人IGFBP5的抗体，其K_D小于约10-⁶M、小于约5x10^-7M、小于约3x10^-7M、小于约2x10^-7M、小于约10^-7M、小于约9x10^-8M、小于约8x10^-8M、小于约7x10^-8M、小于约6x10^-8M、小于约5x10^-8M、小于约4x10^-8M、小于约3x10^-8M、小于约2x10^-8M、小于约10^-8M、小于约5x10^-9M、小于约4x10^-9M、小于约3x10^-9M、小于约2x10^-9M、小于约10^-9M或约5x10^-10M，如在表面等离子体共振试验中测得，例如，使用BIAcore^TM系统(新泽西州皮斯卡塔韦GE医疗(GE Healthcare)的Biacore生命科学部门)或动力学排阻试验或使用Octet平台进行的生物分子相互作用分析，如本文所述。

本文所用术语″抗体″是在本领域所理解的最广泛的意义上使用的，包括在SumitG，Wei W，Tsutomu和Satoshi O，Antibodies 2013；2：452-500中描述为抗体的所有多肽，通过引用纳入本文。

例如，本文所用的术语″抗体″包括单克隆抗体、多克隆抗体、单特异性和多特异性抗体(如双特异性抗体)以及抗体片段，只要该片段表现出所需的抗原结合活性(抗原结合片段)。

本文所使用的术语抗体的″抗原结合片段″或等同于抗体的″抗原结合部分″等，包括任何天然存在的、可通过酶法获得的、合成的或基因工程的多肽或糖蛋白，其中包括部分抗体，并能特异性地结合抗原以形成复合物。抗体的抗原结合片段可以使用任何合适的标准技术，如蛋白酶解或重组基因工程技术从完整的抗体分子中衍生出来，这些技术涉及对编码抗体可变结构域和(任选地)恒定结构域的DNA的操作和表达。这种DNA是已知的和/或容易从例如商业来源、DNA文库(包括，例如，噬菌体-抗体文库)中获得的，或者可以被合成的。该DNA可以通过化学方法或使用分子生物学技术进行测序和操作，例如，将一个或多个可变结构域和/或恒定结构域排列成合适的构型，或引入密码子，创建半胱氨酸残基，修饰、添加或缺失氨基酸等。

与全抗体分子一样，抗原结合片段可以是单特异性或多特异性(例如，双特异性)。抗体的多特异性抗原结合片段通常会包括至少两个不同的抗原结合部分，其中每个抗原结合部分能够特异性地结合至分离的抗原或同一抗原上的不同表位。

在特别的实施方式中，抗体的抗原结合片段包含共价连接至至少一个恒定结构域的至少一个可变结构域。在抗体的抗原结合片段内可找到的可变域和恒定域的非限制性示范性的构象包括：(i)VH-CH1；(ii)VH-CH2；(iii)VH-CH1-CH2；(v)VH-CH1-CH2-CH3；(vi)VH-CH2-CH3；(vii)VH-CL；(VIII)VL-CH1；(ix)VL-CH2；(x)VL-CH3；(xi)VL-CH1-CH2；(XII)VL-CH1-CH2-CH3；(xiii)VL-CH2-CH3；和(xiv)VL-CL。在可变域和恒定域的任何构型中，包括上面列出的任何示例性构型，可变域和恒定域可以彼此直接连接，或者可以通过完全或部分铰链或接头区连接。铰链区在不同的实施方式中可由至少2个(如5、10、15、20、40、60或更多)氨基酸组成，这些氨基酸在单个多肽分子中相邻的可变和/或恒定结构域之间形成柔性或半柔性的连接。此外，抗体的抗原结合片段在各种实施方式中可包含上文所列任何可变和恒定结构域构型的同二聚体或异二聚体(或其他多聚体)，它们彼此非共价联合和/或与一个或多个单体VH或VL结构域(例如，通过一个或多个二硫键)非共价联合。

术语抗体的“抗原结合片段”进一步包括单域抗体。

单域抗体是由单个单体可变抗体结构域组成的抗体片段。在一些实施方式中，单域抗体来源于骆驼科动物的抗体重链的可变结构域(也被称为纳米抗体，或VHH片段)。在一些实施方式中，单域抗体是来自鲨鱼的自主人重链可变结构域(aVH)或VNAR片段。

抗原结合片段的非限制性实例包括：(i)Fab片段；(ii)F(ab′)2片段；(iii)Fd片段；(iv)Fv片段；(v)单链Fv(scFv)分子；(vi)dAb片段；和(vii)由模拟抗体高变区的氨基酸残基组成的最小识别单元(例如，一种分离的互补决定区(CDR)，例如CDR3肽)，或限制的FR3-CDR3-FR4肽。其他工程改造的分子，如结构域特异性抗体、单结构域抗体、结构域缺失抗体、嵌合抗体、CDR移植抗体、双抗、三抗、四抗、迷你抗体、纳米抗体(如单价纳米抗体和二价纳米抗体)、小模块免疫药物(SMIP)和鲨鱼可变IgNAR结构域，也包含在本文所用的″抗原结合片段″的表述中。

抗体的抗原结合片段将通常包含至少一个可变结构域。可变结构域可以是任何大小或氨基酸组成，将通常包含至少一个CDR，其邻近一个或多个框架序列或在框内。在具有与VL结构域相关联的VH结构域的抗原结合片段中，VH和VL结构域可以以任何合适的排列方式彼此相对。例如，可变结构域可以是二聚体，包括VH-VH、VH-VL或VL-VL二聚体。或者，抗体的抗原结合片段可以包含单体VH或VL结构域。

如本文所用术语″抗体″，也包括ADC(抗体药物偶联物)和有效负载融合抗体。

如本文所用，术语″抗原结合分子″在其最广泛的意义上是指特异性结合抗原决定簇的分子。抗原结合分子的例子是抗体，包括抗原结合片段和支架抗原结合蛋白。

术语″抗原结合部分″是指与抗原决定簇特异结合的抗原结合分子的部分。抗原结合部分包括抗体和其抗原结合片段，例如scFv，其能够特异性结合至靶细胞上的抗原。在特定方面，抗原结合部分能够将它所附接的实体(例如细胞)引导到靶位点。

此外，能够特异性结合到靶细胞抗原的抗原结合部分包括如下文所定义的支架抗原结合蛋白质，例如，基于设计的重复蛋白质或设计的重复结构域的结合结构域，例如设计的锚蛋白重复序列蛋白(DARPin)(参见例如WO 2002/020565)或脂质运载蛋白(Lipocalin)(Anticalin)。

设计的锚蛋白重复序列蛋白(DARPin)衍生自锚蛋白(Ankyrin)，是介导整合膜蛋白与细胞骨架附接的蛋白家族。单个锚蛋白重复是由两个α-螺旋和一个β-转角组成的33个残基基序。它们可以被工程化改造成通过随机化每个重复的β-转角和第一α-螺旋中的残基来结合不同的靶抗原。可以通过增加模块数量(亲和力成熟法)来增加它们的结合接触面。更多细节见J.Mol.Biol.332，489-503(2003)，PNAS 100(4)，1700-1705(2003)和J.Mol.Biol.369，1015-1028(2007)以及US200401320028。

在某些实施方式中，改变本文提供的抗体和抗原结合分子以增加或减少抗原结合部分糖基化的程度。可以通过改变氨基酸序列，使一个或多个糖基化位点被创建或去除，而方便地获得分子的糖基化变体。当抗原结合分子包含Fc区域时，其上附接的碳水化合物可以被改变。一方面，提供抗原结合分子的变体，其碳水化合物结构缺乏(直接或间接地)附接至Fc区的岩藻糖。此类岩藻糖基化变体可具有改进的ADCC功能，参见例如美国专利公开号US 2003/0157108(Presta，L.)或US 2004/0093621(协和发酵工业株式会社(Kyowa HakkoKogyo Co.，Ltd))。本发明的抗原结合分子的其他变体包括那些具有二等分寡糖(bisectedo1igosaccharide)的分子，例如，其中附接到Fc区域的双触角寡糖(biantennaryoligosaccharide)被GlcNAc二等分。这种变体可以减少岩藻糖基化和/或改进ADCC功能，参见，例如，WO 2003/011878(Jean-Mairet等)；美国专利号6,602,684(Umana等)；和US2005/0123546(Umana等)。还提供了在低聚糖中具有至少一个半乳糖残基附接至Fc区的变体。此类抗体变体可具有改进的CDC功能，并在例如WO 1997/30087(Patel等)、WO 1998/58964(Raju，S.)和WO 1999/22764(Raju，S.)中描述。

在某些实施方式中，可能希望创建本发明的抗体或抗原结合分子的半胱氨酸工程化变体，例如″thioMAb″，其中分子的一个或多个残基被半胱氨酸残基取代。在特定的实施方式中，取代的残基出现在该分子的可及位点。通过用半胱氨酸取代这些残基，活性巯基由此定位于抗体的可及位点并且可用于将抗体与其它部分(例如药物部分或接头-药物部分)偶联以产生免疫偶联物。在某些实施方式中，以下残基中的任一个或多个可以被半胱氨酸取代：轻链的V205(Kabat编号)；重链的A118(EU编号)；和重链Fc区的S400(EU编号)。半胱氨酸工程改造的抗原结合分子可以如，例如，美国专利号7,521,541中所述生成。

在某些方面，本文提供的抗体或抗原结合分子可经进一步修饰以包含本领域已知且容易获得的其它非蛋白质部分。适合用于对抗体或抗原结合分子进行衍生化的部分包括但不限于水溶性聚合物。水溶性聚合物的非限制性实例包括但不限于聚乙二醇(PEG)、乙二醇/丙二醇的共聚物、羧甲基纤维素、葡聚糖、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚-1，3-二氧杂环戊烷、聚-1，3，6-三氧杂环己烷、乙烯/马来酸酐共聚物、聚酰胺酸(均聚物或无规共聚物)、葡聚糖或聚(n-乙烯基吡咯烷酮)聚乙二醇、丙二醇均聚物、环氧丙烷/环氧乙烷共聚物、聚氧乙烯化多元醇(例如甘油)、聚乙烯醇及其混合物。由于聚乙二醇丙醛在水中的稳定性，在制造上可能具有优势。所述聚合物可具有任何分子量，并且可以是支化或非支化的。附接在抗体上的聚合物的数量可以不同，如果附接了多于一个的聚合物，它们可以是相同或不同的分子。一般来说，用于衍生化的聚合物的数量和/或类型可以根据包括但不限于待改进的抗体的特殊性质或功能、抗体衍生物是否将在规定的条件下用于治疗等因素来决定。

在另一方面，提供抗体与可通过暴露于辐射而选择性加热的非蛋白质部分的偶联物。在一个实施方式中，非蛋白质部分是碳纳米管(Kam，N.W.等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA102(2005)11600-11605)。辐射可以是任何波长，并且包括但不限于不伤害普通细胞，但将非蛋白质部分加热到使接近该抗体非蛋白质部分的细胞被杀伤的温度的波长。另一方面，可以获得本文提供的抗原结合分子的免疫偶联物。″免疫偶联物″是与一种或多种异源性分子(包括但不限于细胞毒性剂)偶联的抗体。

抗体恒定区对抗体固定补体和介导细胞依赖性细胞毒性的能力是重要的。因此，抗体的同种型可以根据抗体是否需要介导细胞毒性来选择。在某些实施方式中，恒定区是IgG1、IgG2、IgG3或IgG4恒定区。

本发明在多种实施方式中涵盖了在铰链区、CH2或CH3区具有一个或多个突变的抗体，其可能是理想的，例如在生产中，以改进所需抗体形式的产量。在一些实施方式中，例如，本文所述抗体包括人IgG4恒定区。在特定的实施方案中，IgG4恒定区在人IgG4铰链的铰链区具有单个氨基酸取代，这使Fab臂交换(Angal等(1993)Molecular Immunology 30：105)降低到通常使用人IgG1铰链观察到的水平。

在某些实施方式中，抗体在恒定区包含一个或多个突变，其增加血清半衰期，其包括描述于美国专利号7,083,784、8,323,962和Dall Aqua等，J.Biol.Chem.281(33)：23514-23524(2006)；Hinton等，J.Immunology 176：346-356(2006)；Yeung等，J.Immunology 182：7663-7671(2009)；和Petkova等，Intn’l Immunology，18：1759-1769(2006)中的那些，通过引用全文纳入本文。

如本文所使用的术语″人抗体″意在包括具有衍生自人种系免疫球蛋白序列的可变和恒定区的抗体。尽管如此，本发明中所述的人抗体在各种实施方式中可包括未由人种系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基(例如，通过体外随机或位点特异性突变或通过体内体细胞突变引入的突变)，例如在CDR中和在一些实施方式中CDR3中。然而，本文所用术语″人抗体″不旨在包括这样的抗体，其中源自另一种哺乳动物物种(如小鼠)的种系的CDR序列已嫁接到人框架序列上。

本文所用的术语″重组人抗体″旨在包括通过重组方法制备、表达、创造或分离的所有人抗体，诸如使用转染到宿主细胞的重组表达载体表达的抗体(下文进一步描述)，分离自重组、组合人抗体库的抗体(下文进一步描述)，分离自人免疫球蛋白基因转基因动物(例如，小鼠)的抗体或通过涉及切割人免疫球蛋基因序列成其他DNA序列的任何其他方法制备、表达、创造或分离的抗体。这类重组人抗体可以具有源自人种系免疫球蛋序列的可变和恒定区。然而，在某些实施方式中，这类重组人抗体经历体外诱变(或者，当使用人Ig序列转基因动物时，体内体细胞诱变)，由此重组抗体的VH和VL区的氨基酸序列是虽然衍生自且与人种系VH和VL序列相关，但可能并不天然出现在体内人抗体种系库(repertoire)内的序列。

如本文所用的″分离的抗体″是指已被鉴定和分离和/或从其自然环境的至少一个组分中回收的抗体。例如，从生物体的至少一个组分，或从抗体自然存在或自然产生的组织或细胞中分离或移出的抗体是″分离的抗体″。在多个实施方式中，分离的抗体也包括重组细胞内的原位抗体。在其他实施方式中，分离的抗体是已经经过至少一个纯化或分离步骤的抗体。在多个实施方式中，分离的抗体可以基本不含其他细胞物质和/或化学物质。

术语″表位″是指与抗体分子可变区域中的特定抗原结合位点相互作用的抗原决定簇，称为互补位(paratope)。单一抗原可能具有多于一个表位。因此，不同的抗体可以结合至抗原上不同的区域且可以具有不同的生物学作用。表位可以是构象的或线性的。构象表位是由线性多肽链的不同区段的氨基酸在空间上并列产生的。线性表位是由多肽链中相邻的氨基酸残基产生的。在某些情况下，表位可包括抗原上的糖类、磷酰基或磺酰基的部分。

用于本文所述方法的本文所述的抗-IGFBP5抗体在各种实施方式中可包括与衍生抗体的相应种系序列相比的重链和轻链可变结构域的框架和/或CDR区中的一个或多个氨基酸取代、插入和/或缺失。这种突变可以通过比较本文所公开的氨基酸序列和例如可以获取自公共抗体序列数据库的种系序列而容易地确定下来。

本发明在多种实施方式中包括抗体和涉及使用抗体的方法以及其抗原结合片段，这些抗体和抗原结合片段来源于本文公开的任何氨基酸序列，其中一个或多个框架和/或CDR区域内的一个或多个氨基酸被突变为抗体所来源的种系序列的一个或多个相应残基，或另一个人种系序列的一个或多个相应残基，或一个或多个相应种系残基的保守氨基酸取代(这种序列变化在此统称为″种系突变″)。

可以构建多个抗体和抗原结合片段，其中包括一个或多个单独的种系突变或其组合。在某些实施方式中，VH和/或VL结构域内的所有框架和/或CDR残基都被突变回抗体来源的原始种系序列中发现的残基。在其他实施方式中，只有某些残基被突变回原始种系序列，例如，只有在FR1的前8个氨基酸或FR4的最末8个氨基酸内发现的突变残基，或只有在CDR1、CDR2或CDR3内发现的突变残基。在其他实施方式中，一个或多个框架和/或CDR残基被突变为不同种系序列的一个或多个相应残基(即不同于抗体最初来源的种系序列的种系序列)。此外，抗体可以包含框架和/或CDR区域内两个或更多个种系突变的任何组合，例如，其中某些单独的残基被突变为某个种系序列的相应残基，而与原始种系序列不同的某些其他残基被保留或被突变为不同种系序列的相应残基。一旦获得，含有一个或多个种系突变的抗体和抗原结合片段可以很容易地测试一种或多种所需的特性，例如改进的结合特异性、增加的结合亲和力、改进或增强的拮抗或激动的生物特性(视情况而定)、减少的免疫原性等。以这种一般方式获得的抗体和抗原结合片段的使用都包含在本发明中。

本发明还包括抗IGFBP5抗体和涉及使用抗IGFBP5抗体的方法，所述抗体包含本文公开的具有一个或多个保守取代的HCVR、LCVR和/或CDR氨基酸序列的任一者的变体。例如，本发明包括使用具有HCVR、LCVR和/或CDR氨基酸序列的抗IL-6R抗体，其相对于本文公开的任何HCVR、LCVR和/或CDR氨基酸序列具有例如10个或更少、8个或更少、6个或更少、4个或更少等保守的氨基酸取代。

本文所使用的术语“生物等效性”是指在相同摩尔剂量和类似条件(例如，相同给药途径)下给药后具有类似生物利用度(利用率和程度)的分子，使得在疗效和安全性方面，可以预期基本上与比较分子相同。两种包含抗IGFBP5抗体的药物组合物如果在药理学上是等效的，即它们含有相同量的活性成分(如IGFBP5抗体)，以相同的剂型，给药途径相同，并符合相同或相当的标准，则其为生物等效的。生物等效性可以通过体内研究来确定，例如，比较两种组合物的药代动力学参数。生物等效性研究中常用的参数包括峰值血浆浓度(C最大值)和血浆药物浓度时间曲线下面积(AUC)。

在某些实施方式中，本发明涉及抗体和包括向对象给予抗体的方法，所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含选自SEQ ID NO.61至SEQ ID NO.75的序列，所述轻链可变区包含选自SEQ ID NO.76至SEQ ID NO.90的序列。本发明提供了包含这种抗体的药物组合物，以及使用这些组合物的方法。

在各种实施方式中，抗体以包含合适运载体、赋形剂和其他药剂的制剂给予对象，以提供改善的转移、递送、耐受性等，并且适合于静脉或皮下注射。

可注射制剂可以通过已知快速方法制备。例如，可以制备可注射制剂，例如，通过将上述抗体或其盐溶解、悬浮或乳化于无菌水介质或常规用于注射的油性介质中。作为注射用的水性介质，例如，生理盐水、含有葡萄糖和其他助剂等的等渗溶液，其可与适当的增溶剂结合使用，例如，醇(如乙醇)、多元醇(如丙二醇、聚乙二醇)、非离子表面活性剂[如聚山梨酸酯20或80、HCO-50(氢化蓖麻油的聚氧乙烯(50mol)加合物)]等。作为油性介质，采用了例如芝麻油、大豆油等，其可与增溶剂如苯甲酸苄酯、苄醇等组合使用。这样制备的可注射制剂可以被装填于合适的安瓿中。

根据本发明的抗体可以使用任何可接受的装置或机构给予对象。例如，可以用注射器和针头或用可重复使用的笔和/或自动注射器递送装置来完成给药。本发明的方法包括使用许多可重复使用的笔和/或自动注射器递送装置来给予抗体(或包含抗体的药物制剂)。此类装置的示例包括但不限于AUTOPEN^TM(欧文蒙福德有限公司(Owen Mumford，Inc.)，英国伍德斯托克)，DISETRONIC^TM笔(瑞士柏格多夫的迪思康医疗系统公司(DisetronicMedical systems))，HUMALOG MIX 75/25^TM笔，HUMALOG^TM笔，HUMALIN70/30^TM笔(伊利诺伊州印第安纳波利斯市礼来公司)，NOVOPEN^TM I、II和III(诺和诺德，丹麦哥本哈根)，NOVOPENJUNIOR^TM(诺和诺德，丹麦哥本哈根)，BD^TM笔(新泽西州富兰克林湖的BD公司)、OPTIPEN^TM，OPTIPEN PRO^TM、OPTIPEN STARLET^TM，和OPTICLIK^TM(赛诺菲安万特，德国法兰克福)，仅举几个例子。应用于皮下递送本发明药物组合物的一次性笔和/或自动注射器递送装置的实例包括但不限于SOLOSTAR^TM笔(赛诺菲-安万特)，FLEXPEN^TM(诺和诺德)和KWIKPEN^TM(礼来(EliLilly))，SURECLICK^TM自动注射器(安进，加利福尼亚州千橡)，PENLET^TM(海斯迈有限责任公司(Haselmeier)，德国斯图加特)，EPIPEN(Dey，L.P.)，HUMIRA^TM笔(伊利诺伊州雅培公园雅培实验室)、

自动注射器(SHL集团)和任何具有PUSHCLICK^TM技术的自动注射器(SHL集团)，仅举几个例子。

在一个实施方式中，用预先填充的注射器给予抗体。在另一个实施方式中，用预先填充的含有安全系统的注射器给予抗体。例如，安全系统可以防止意外的针刺伤害。在各种实施方式中，用含有

安全系统(西部医药服务公司(West Pharmaceutical ServicesInc.))的预填充注射器给予抗体。另请参见美国专利号5,215,534和9,248,242，通过引用将其全文纳入本文。

在另一实施方式中，用自动注射器给予抗体。在多个实施方式中，用具有PUSHCLICK^TM技术(SHL集团(SHL Group))的自动注射器给予抗体。在各种实施方式中，自动注射器是一种包括注射器的装置，其允许将一定剂量的组合物和/或抗体给予对象。另请参见美国专利号9,427,531和9,566,395，通过引用将其全文纳入本文。

根据本发明，“对象”是指人对象或人患者。

“纤维变性”是指在器官或组织中形成或发展过多的纤维性结缔组织，作为修复性或反应性过程，而不是形成作为器官或组织的正常成分的纤维组织。它是多种临床病症的主要组织病理学特征。许多器官容易发生病理性纤维变性，包括但不限于皮肤、肺、心脏和胃肠道。本发明涉及一种抑制剂，通过靶向IGFBP5(促纤维化介导物)，特异性靶向纤维变性的发病机制的抑制剂，具有“抗-纤维化活性或作用”。

纤维变性定义为通过在发炎或受损组织内和周围纤维性结缔组织(胞外基质(ECM)的组分，例如胶原蛋白和纤连蛋白)的积累，导致永久性瘢痕形成、组织功能障碍和，最终导致死亡。纤维变性是大多数慢性炎症性疾病的病理特征。纤维变性几乎影响体内所有组织。(Schruf等Respiratory Research(2019)20：87)。

在被促纤维化刺激物激活后，成纤维细胞分化为侵袭性表型，其分泌过量的富含胶原蛋白的胞外基质，从而构成主要病理性成纤维细胞表型(Geng等RespiratoryResearch(2015)16：124)。

示例性纤维化病症为：硬皮病、特发性肺纤维化(idiopathic pulmonaryfibrosis)、硬斑病(morphea)、作为移植物抗宿主病(GVHD)的结果的纤维变性、瘢瘤和肥厚性瘢痕、以及上皮下纤维变性、心肌心内膜纤维变性、子宫纤维变性、骨髓纤维化、腹膜后纤维变性(retroperitoneal fbrosis)、肾性全身纤维化症(nephrogenic systemicfibrosis)、手术后瘢痕形成、哮喘、异常的伤口愈合、肾小球肾炎和多病灶性纤维硬化病(multifocal fibrosclerosis)。

“特发性肺纤维化”是一种病症，也称为隐源性纤维性肺泡炎(CFA)，是一种慢性、进行性的肺部疾病形式，其特征为肺部支持框架(间质(interstitium))的纤维变性。根据定义，该术语仅在肺纤维化原因不明(“特发性”)时使用。当病理学家在显微镜下检查IPF患者的肺组织时，它表现出一组特有的组织学/病理学特征，称为普通型间质性肺炎(UIP)。UIP的特征在于两肺的进行性瘢痕形成，累及肺的支持框架(间质)。

抑制或治疗疾病：抑制疾病，例如纤维变性，指的是抑制或减缓疾病的全面发展。在一些例子中，抑制疾病指的是减轻纤维变性的症状，例如瘢痕组织的形成，或运动的范围增加或疼痛减少。“治疗”是指改善疾病(例如纤维变性)或与疾病相关的病理状况的迹象或症状的治疗干预。

“硬皮病”是一种慢性自身免疫疾病，特征在于纤维变性(或硬化)、血管改变和自身抗体。有两种主要形式，一种是局限性全身硬皮病形式，其包括局限的皮肤型硬皮病-主要影响手、臂和面部，尽管经常发生肺高压(pulmonary hypertension)。而弥漫性皮肤型硬皮病(或全身性硬化症)进展迅速，影响大面积的皮肤和一个或多个内脏，经常是肾脏、食道、心脏和肺。两种形式的全身性硬皮病都可能是致命的。其他形式的硬皮病包括全身性硬皮病，它缺乏皮肤变化的全身性表现，以及两种影响皮肤但不影响内脏的局部形式：硬斑病和线状硬皮病(linear scleroderma)。所公开的抗体可用于治疗任何形式的硬皮病。

治疗方法和药物组合物

本文公开的抗体可用于治疗发生在几种疾病病症中的纤维变性。本文公开的抗体可以减少已经发生的纤维变性，解决已有的纤维变性和/或可以减少额外的纤维变性的速度或量。在几个例子中，抗体用于减少致病过程的纤维变性，例如在对象中。

因此，在几个实施方式中，该方法包括给予对象治疗有效量的一种或多种本文公开的抗体，以减少纤维变性。本文公开的任何抗体都可用于减少纤维变性。在一些实施方式中，抗体可以作为单位剂型给予。

合适的对象包括那些有皮肤或肺纤维变性的对象，但是任何组织的纤维变性都可以使用本文公开的方法治疗。在一个例子中，对象患有硬皮病。在其他例子中，对象患有特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis)、硬斑病(morphea)、作为移植物抗宿主病(GVHD)的结果的纤维变性、瘢瘤或肥厚性瘢痕、上皮下纤维变性、心肌心内膜纤维变性、子宫纤维变性、骨髓纤维化、腹膜后纤维变性(retroperitoneal fibrosis)、肾性全身纤维化症(nephrogenic systemic fibrosis)、手术后瘢痕形成、哮喘、异常的伤口愈合、肾小球肾炎和多病灶性纤维硬化病(multifocal fibrosclerosis)。

在进一步的例子中，该方法用于治疗硬皮病的全身性形式，例如局限性皮肤型硬皮病或弥漫性皮肤型硬皮病(或全身性硬化症)。该方法可用于治疗硬皮病的局部形式，包括硬斑病和线状硬皮病(linear scleroderma)。

该方法可以包括选择需要治疗的对象，例如患有纤维化疾病的对象，例如硬皮病、特发性肺纤维化、硬斑病、瘢瘤、肥厚性瘢痕或上皮下纤维变性。在示例性应用中，组合物以足够减少纤维化的量被给予患有纤维化疾病的对象，例如患有硬皮病、特发性肺纤维化、硬斑病、瘢瘤、肥厚性瘢痕或上皮下纤维变性，或以上列举的紊乱中的任一个。该用途的有效量取决于疾病的严重程度、患者的一般健康状况以及患者免疫系统的稳健程度。在一个例子中，化合物的治疗有效量是提供一个或多个症状的主观缓解，或可由临床医师或其他合格观察者指出的客观的可鉴定的改善的量。

本文提供了用于减少皮肤厚度的方法。该方法包括给予治疗有效量的抗体，从而减少皮肤厚度。在另一个实施方式中，提供该方法以减少肺纤维化。该方法包括给予治疗有效量的抗体，从而减少皮肤厚度。本文公开的任何抗体可用于这些方法中。

本文提供了用于减少αSMA或FN1表达的方法，例如转化生长因子(TGF)-β诱导的αSMA或FN1表达。该方法包括使细胞接触有效量的抗体，从而减少αSMA或FN1表达。该方法可以在体内或体外实践。在一些实施方式中，该方法包括将与抗体接触的细胞产生的αSMA或FN1表达的量与对照比较。对照可以是标准值，或不与抗体接触的细胞产生的αSMA或FN1的量，例如与运载体接触的细胞。

本文公开的抗体可以通过本领域技术人员已知的任何方式给予，局部地或全身地，例如皮内、鞘内、肌肉内、皮下、腹膜内或静脉注射，但甚至可以考虑口服、鼻腔、透皮或肛门给药。在一个实施方式中，通过皮下、皮内或肌肉内注射给予。在另一个实施方式中，通过腹膜内或鞘内给予给药。为了延长抗体可用于刺激反应的时间，抗体可以作为植入物、油性注射物或颗粒系统提供。颗粒系统可以是微粒、微胶囊、微球、纳米胶囊或类似颗粒。(参见，例如，Banga，同上)。

对于皮肤的治疗，可以将治疗有效量的抗体至少局部给予皮肤的受影响区域，例如以软膏的形式(RGA Jones和A Marino，“治疗性抗体的靶向局部使用：非系统性、局部和口服应用的综述(Targeted localized use of therapeutic antibodies：a review ofnon-systemic，topical and oral applications)，Crit.Rev.Biotechnol.36(3)：506-520(2016)。

在一个实施方式中，软膏是完全均匀的半固体外用剂，其硬度适于易于在皮肤上应用。这种软膏可以包括脂肪、脂肪油、羊毛脂、凡士林、石蜡、蜡、硬膏、树脂、塑料、乙二醇、高级醇、甘油、水或乳化剂和悬浮剂。以这些成分为基底(base)，可以均匀地混合诱饵化合物(decoy compound)。根据基底的不同，该混合物可以是油质性软膏(oleaginousointment)、乳化软膏或水溶性软膏的形式。油质性软膏使用的基底例如植物和动物油和脂、蜡、凡士林和液体石蜡。乳化软膏由油质性物质和水构成，用乳化剂进行乳化。它们可以采取水包油形式(O/W)或油包水形式(W/O)。水包油形式(O/W)可以是亲水性软膏。油包水形式(W/O)最初缺乏水相，可以包括亲水性凡士林和纯羊毛脂，或者它可以包含吸水软膏(包括水相)和水合羊毛脂。水溶性软膏可以包含完全水溶性的Macrogol基底作为其主要成分。

药学上可接受的运载体包括石油膏(petroleum jelly)，例如

其中该石油膏包含5％硬脂醇，或仅石油膏，或包含液体石蜡的石油膏。这种运载体使得药物组合物能够以适合消耗的形式处方，例如片剂、丸剂、糖衣剂、胶囊、液体制剂、凝胶、软膏、糖浆、浆料和悬浮液。当局部给予到受影响区域或相关组织的细胞中时，可以在含有合成或天然亲水性聚合物作为运载体的组合物中给予至少一个C-末端内皮抑制素(endostatin)多肽，或编码该肽的多核苷酸。这种聚合物的例子包括羟丙基纤维素和聚乙二醇。一种或多种抗体可以在适当的溶剂中与亲水性聚合物混合。然后通过空气干燥等方法去除溶剂，然后剩余部分被塑造成所需的形式(例如，片状)并应用于目标部位。含有这种亲水性聚合物的制剂保持良好，因为它们含水量低。在使用时，它们吸收水分，成为凝胶，也能良好地储存。在片状的情况下，可以通过将多元醇与类似于上述的亲水性聚合物(如纤维素、淀粉及其衍生物或合成性聚合化合物)混合来调整其硬度。这样形成的亲水性片可以使用。治疗有效量的一种或多种抗体也可以被纳入绷带和敷料中。

对于通过吸入给药，藉由使用合适的推进剂，例如，二氯二氟甲烷，三氯氟甲烷，二氯四氟乙烷，二氧化碳或其他合适的气体，由加压包装或喷雾器中以气溶胶喷雾形式方便地递送抗体。增压气溶胶的情形中，剂量单位可通过用阀来递送计量好的量来确定。用于吸入器或吹入器中的胶囊或药筒可配制成含有化合物与合适粉末基料如乳糖或淀粉的粉末混合物。

在一些实施方式中，抗体可以通过吸入给予。例如，它可以以气溶胶化的形式给药，如使用喷雾器或计量吸入器。使用的技术包括微泵喷雾器(例如AEROGEN

系统)，设计为产生大细粒(large fine particle)部分的喷射式雾化器(jet nebulizer)(例如PARILC

)，雾化过程中产生较小剪切力的喷射式雾化器(例如HUDSON

)以及超声雾化器(例如DeVilbiss ULTRA-

)。

该抗体可以溶解于运载体，例如盐水，并使用上述设备雾化。相关的气溶胶可以使用NEXT GENERATION

(NGI)(MSP公司(MSP Corp.)，明尼苏达州维尤(Shoreview))收集，它使用一系列的空气动力学阶段，基于液滴大小将气溶胶分离并收集为不同的部分。由于液滴大小是决定肺部沉积位置的主要因素，该设备允许我们特异性分离出将会沉积在小气道和肺泡的液体气溶胶部分。

气溶胶颗粒大小通常表示为术语质量中值空气动力学直径(MMAD)，为基于颗粒大小、形状和密度的参数。对于球形颗粒，MMAD等于MMD(p<1/2>)，其中MMD是质量中值直径，r是堆积密度。对于非球形颗粒，MMAD等于MMD(p/x)<1/2>，其中X是形状系数(shapefactor)。因此，大于单位密度的颗粒的实际直径将小于其MMAD。

颗粒在呼吸道内沉积的部位是基于颗粒大小划分的。在一个例子中，利用约1至约500微米的颗粒，例如利用约25至约250微米的颗粒，或约10至约25微米的颗粒。在其他实施方式中，利用了约1至50微米的颗粒。在计量吸入器中使用时，用于肺部给药，可以利用小于约10微米的颗粒，如约2至约8微米的颗粒，如约1至约5微米的颗粒，如2至3微米的颗粒。

治疗效果的量的抗体可以在药学上可接受的运载体中给予。药理学上可接受的运载体(例如生理上或药学上可接受的运载体)是本领域众所周知的，包括但不限于生理pH的缓冲溶液(例如pH为约7.0至约8.0，或pH为约7.4)。一个特定的非限制性的生理上相容的缓冲溶液的例子为磷酸盐缓冲盐水。其他药理学上可接受的运载体包括渗透剂，其特别适用于意于局部应用的药物制剂(例如在手术伤口的应用中促进愈合)。

本文公开的药理学组合物在体内或离体促进至少一种抗体的使用，以减少纤维变性。这种组合物可以适于向任何合适的对象递送活性成分，并且可以以本身已知的方式制造，例如，通过常规混合、溶解、造粒、乳化、包封、包埋或冻干过程。可以使用一种或多种药理学上(如生理学上或药学上)可接受的运载体，以及任选地，助剂，以常规方式配制药理学组合物，其促进活性化合物加工成药学上可使用的制剂。适当的制剂取决于所选的给药途径。因此，对于注射，可以将活性成分配制为水性溶液。对于经粘膜给药，在适合于待渗透屏障的制剂中采用渗透剂。这种渗透剂通常是本领域已知的。

对于口服给药，活性成分可以与适合纳入片剂、丸剂、胶囊、液体、凝胶、糖浆、浆料、悬浮液等的运载体组合。活性成分可以配制为用于通过注射的胃肠外给药，例如，通过推注注射或连续输注。这种组合物可以是诸如油性或水性载剂中的悬浮液、溶液或乳剂的形式，可含有配方试剂，如助悬剂、稳定剂和/或分散剂。其它药理学赋形剂是本领域已知的。

其他递送系统可以包括时间释放(time-release)、延迟释放或缓释(sustainedrelease)递送系统。这种系统可以避免上述本发明的组合物的重复给予，增加对象和医师的便利。许多类型的释放递送系统是可用的，且是本领域普通技术人员已知的。它们包括基于聚合物的系统，例如聚(丙交酯-乙交酯)、共聚草酸酯(copolyoxalate)、聚己内酯、聚酯酰胺、聚原酸酯、聚羟基丁酸(polyhydroxybutyric acid)和聚酸酐。含有药物的上述聚合物的微胶囊描述于，例如，美国专利号5,075,109。递送系统还包括非聚合物系统，如脂质，包括甾醇，例如胆固醇、胆固醇酯和脂肪酸或中性脂肪，例如单-、二-和三-甘油酯；水凝胶释放系统；硅橡胶系统(silastic system)；肽基系统；蜡涂层；使用常规粘合剂和赋形剂的压缩片剂；部分融合的植入物等。具体例子包括但不限于：(a)侵蚀系统(erosionalsystem)，其中至少一个C-末端内皮抑制素多肽，或编码该肽的多核苷酸，以基质内形式包含在内，例如描述于美国专利号4,452,775；4,667,014；4,748,034；5,239,660；和6,218,371以及(b)扩散系统，其中活性成分以受控速率从聚合物中渗透，如描述于美国专利号3,832,253和3,854,480。此外，还可以使用基于泵的硬件递送系统，其中一些适用于植入。

使用长期缓释植入物可能特别适合于治疗慢性病，如硬皮病。本文所使用的长期释放，指的是植入物被构建并设置成递送治疗水平的活性成分，至少持续30天，优选60天。长期缓释植入物是本领域普通技术人员众所周知的，包括上述的一些释放系统。这些系统已被描述用于寡脱氧核苷酸(参见美国专利号6,218,371)。用于体内使用，核酸和肽优选对于降解(例如通过内切核酸酶和外切核酸酶)具有相对抗性。因此，可以使用修饰，例如纳入C-末端酰胺。

抗体的治疗有效量将取决于所利用的抗体、要治疗的对象、疾病的严重程度和类型以及给药方式。例如，抗体的治疗有效量可以在约0.01μg/千克(kg)体重至约1g/kg体重间变化，例如约1μg至约5mg/kg体重，或约5μg至约1mg/kg体重。本领域技术人员容易根据特定化合物的效力、对象的年龄、体重、性别和生理状况确定确切剂量。

可根据对象所需并耐受的剂量和频率进行单次或多次组合物的给药。在一个实施方式中，推注给予一次剂量，但在另一个实施方式中，可以定期应用直到实现治疗效果。通常，该剂量在对对象不产生不可接受的毒性的情况下足以治疗或缓解疾病的症状或迹象。可以使用全身或局部给予。

在进一步的方法中给予其它试剂。在一个例子中，连续给药。在其他例子中，其它试剂与抗体同时给予。

对于硬皮病的治疗，可与该抗体一起使用的其它试剂的例子包括硝苯地平(nifedipine)、氨氯地平(amlodipine)、地尔硫卓(diltiazem)、非洛地平(felodipine)或尼卡地平(nicardipine)。一种研究性药物格列卫，也被用于治疗硬皮病。格列卫或其他酪氨酸激酶抑制剂可与本文公开的抗体一起使用。肺部受累的硬皮病患者受益于氧疗；本文公开的C-末端内皮抑制素多肽可与这种疗法一起给予。

对于皮肤纤维变性和硬皮病的治疗，可使用的其它试剂有d-青霉胺、秋水仙碱、松弛素、类固醇和环孢菌素。在一些实施方式中，其它试剂是SAR100842(参见Allanore等，Arthr.Rheum.70(10)：1634-1643(2018))。C-末端内皮抑制素多肽也可以与免疫抑制剂组合使用。此外，该抗体可与甲氨蝶呤、环磷酰胺、硫唑嘌呤、霉酚酸酯、罗格列酮、内皮素受体拮抗剂或氟维司群(Fulvestrant)(ICI-182，780)一起使用。

以下非限制性实施例说明了本发明的内容。

实施例

实施例1：单克隆抗体开发

从原始人噬菌体展示文库中发现单克隆抗-IGFBP5抗体。首先，非特异性或交叉反应性抗体-噬菌体被从文库中清除。为此，文库在存在以下的条件下孵育：a)链霉亲和素-珠和BSA，或b)链霉亲和素-珠和BSA、IGFBP1(R&D，目录号871-B1)、IGFBP2(R&D，目录号674-B2)、IGFBP3(R&D，目录号675-B3)、IGFBP4(R&D，目录号804-GB)和IGFBP6(R&D，目录号876-B6)。

结合至阴性抗原的抗体-噬菌体被从进一步的选择中去除。之后，针对靶抗原特异性抗体选择清除的文库。首先，生物素化的IGFBP5(R&D，人：目录号875-B5，小鼠：目录号578-B5)在阴性抗原存在的情况下被加入文库制备a)和b)中。结合至生物素化的靶抗原的抗体-噬菌体被从溶液中捕获并回收，使用磁性链霉亲和素珠。用BSA溶液(包含0.05％Tween20)和BSA洗涤珠多次以去除非特异性或弱结合的抗体-噬菌体颗粒。通过胰蛋白酶处理将抗原特异性抗体噬菌体从珠上洗脱下来，并通过大肠杆菌感染挽救。短暂繁殖后，用M13K07辅助噬菌体共同感染细菌，并诱导抗体-噬菌体扩增。扩增的噬菌体又被用于两个选择周期，如上所述。表1中给出了抗体选择策略的概述：

在发现过程的最后，对每个选择输出进行抗原特异性抗体筛选并分析单克隆抗体克隆的结合特征。为此目的，使用了3072个单克隆用于scFv抗体产生。然后，通过ELISA测试它们的特异性抗原结合，在链霉亲和素+生物素化的人IGFBP5、链霉亲和素+生物素化的鼠IGFBP5、链霉亲和素和BSA上，842个克隆显示出人和鼠IGFBP5之间的交叉反应性结合，其S/N比率＞10。其中192个ELISA阳性克隆被选作第二次筛选。为此，生产了第二批scFv并在更广泛的抗原上测试：链霉亲和素+生物素化的人IGFBP5、链霉亲和素+生物素化的鼠IGFBP5、链霉亲和素、BSA、人IGFBP1、人IGFBP2、人IGFBP3、人IGFBP4、人IGFBP5和人IGFBP6。

鉴定了17个领先的抗体克隆，其显示出与链霉亲和素-捕获的和直接固定的人和鼠IGFBP5结合。没有检测到结合至人IGFBP1、人IGFBP2、人IGFBP3、人IGFBP4和人IGFBP6。

对17个领先的抗体克隆的DNA序列分析显示，有15个候选者具有独特的抗体序列(在CDR中≥1个氨基酸差异)。通过PCR扩增scFv DNA序列并克隆到YUMAB的哺乳动物scFv-Fc表达载体中，导致scFv与人IgG4 Fc的遗传融合。具有正确克隆的scFv基因的细菌克隆被用于分离转染级DNA。该DNA被用于瞬时转染HEK细胞，其产生并分泌抗体到培养基中。该抗体通过亲和层析(蛋白A)进行纯化，并在PBS中重新缓冲。蛋白浓度通过UV/VIS光谱确定，纯度通过考马斯染色检查。15个抗体中有13个能成功地以scFv-Fc格式生产。

下表2-8报告了15种新的抗IGFBP5抗体的序列。

CDR定义也是使用来自http：//www.abysis.org/的注释工具提供的，基于表4和5中定义的完整VH和VL氨基酸序列。

例如，本文公开的任何抗体的VH或VL氨基酸序列被插入注释工具中，并提供Kabat定义的CDR序列、或IMGT、或Chothia、或AbM或Contact定义的CDR序列。使用“全部并列”特征，提供定义的CDR序列。

表4.1显示了关于B06 VH和VL的这种序列。

表4.1 B-06VH和VL CDR，根据不同的定义，通过在www.abysis.org注释工具中插入aa VH(SEQ ID No.62)和VL(SEQ ID No.77)序列进行分类。

表5.1显示了关于B09 VH和VL的这种序列。

表5.1 B-09VH和VL CDR，根据不同的定义，通过在www.abysis.org注释工具中插入aa VH(SEQ ID No.66)和VL(SEQ ID No.81)序列进行分类。

在CHO细胞中表达重组蛋白的方法

对应的B06和B09 cDNA被克隆进evitria的载体系统，使用常规的(基于非-PCR的)克隆技术。evitria载体质粒是基因合成的。在低内毒素条件下基于阴离子交换色谱法制备质粒DNA。序列的正确性用Sanger测序验证(每个质粒多达2次测序反应，取决于cDNA的大小)。

悬浮适应型CHO K1细胞(evitria)被用于生产。接种物在eviGrow培养基中生长，其为化学组成明确的、不含动物组分的、无血清的培养基。用evitria定制的专有的转染试剂eviFect转染细胞，转染后细胞在不含动物组分的、无血清的培养基eviMake中生长，37℃下5％CO₂中维持7天。通过离心和随后的过滤(0.2μm过滤器)收获上清液。

使用MabSelect^TM SuRe^TM纯化抗体，用Dulbecco的PBS(隆萨(Lonza)BE17-512Q)作为洗涤缓冲液，0.1M甘氨酸pH 3.5作为洗脱缓冲液。随后在HiLoad Superdex 200pg柱上进行尺寸排阻色谱，使用最终缓冲液作为运行缓冲液。

用Agilent AdvanceBio SEC柱(300A 2.7um 7.8x300mm)和DPBS作为运行缓冲液以0.8ml/分钟通过分析性尺寸排阻色谱确定单体性(monomericity)。

实施例2：亲和力测量

基于Octet BLI的′分析

为了更详细地评估结合亲和力，亲和力测量是使用Octet平台(BLItz系统)进行的生物分子相互作用分析进行的，Octet仪器是一种生物层干涉测量(BLI)平台。为了建立检测方法，将靶单克隆抗体(mAb，2个相同的抗原结合部分，2μg/ml，在含有0.05％Tween 20的1％BSA中)通过Fc固定在通过AHC生物传感器上，并测量不同浓度下与抗原人IGFBP5(R&D，目录号875-B5)和小鼠IGFBP5(R&D，目录号578-B5)的相互作用。

表9中报告了B06和B09全长mAb对靶人和鼠IGFBP5的亲和力测量。

新生成的抗IGFBP5 mAb表现出良好的人抗原结合亲和力，KD小于4x10^-10M。该抗体也显示出鼠交叉反应性。这一数据证实，小鼠可以被认为是临床前开发过程中测试单克隆抗体的相关动物物种。

实施例3：基于原代细胞的纤维变性相关试验(IPF)

纤维变性是持续的组织修复过程，其特征在于富含纤维胶原(fibrillarycollagen)的胞外基质(ECM)的形成和沉积，导致大多数组织和器官的进行性重塑。在受伤后的伤口愈合期间，纤维化瘢痕组织的形成对于恢复和维持组织和器官完整性是必需的。然而，当重复损伤后瘢痕形成机制加剧时，慢性纤维形成导致从支持性纤维化组织到瘢痕组织的转变。这与胞外基质生成细胞的数量和活性增加相吻合，最终导致正常组织/器官结构和功能的破坏。

在肺部，如在特发性肺纤维化疾病(IPF)中，发生组织瘢痕形成/纤维变性。组织损伤后，免疫系统激活，诱导释放一些细胞因子和生长因子，包括转化生长因子β-1(TGFβ-1)，向组织发出修复的信号。在机制上，上皮向间充质转变(EMT)是纤维变性的主要驱动之一，约30％的ECM-生成(myo-)成纤维细胞通过EMT衍生自上皮细胞。在EMT期间，组织紧密的上皮细胞失去紧密接合标志物E-钙粘蛋白的表达，转化为间充质细胞，表达间充质细胞标志物N-钙粘蛋白、波形蛋白和纤连蛋白。此外，这些细胞获得了迁移潜力，使它们能在整个组织内迁移。纤维变性过程中的另一个重要机制是成纤维细胞向肌成纤维细胞转化(FMT)，当EMT衍生的、驻留的和入侵的成纤维样细胞(fibroblastoid cell)被激活(例如，通过TGFβ-1)，并开始向肌成纤维细胞分化时。肌成纤维细胞是衍生自不同祖细胞的异质性群体，其特征为形成含有α平滑肌肌动蛋白(αSMA)的应力纤维(stress fiber)，表达和分泌纤维胶原(fibrillar collagen)、纤连蛋白和其他ECM组分。ECM的产生和积累增加产生永久性损伤的纤维化组织，其结构异常，无法正常发挥功能。

FMT和EMT体外试验是已建立的模型，以鉴定和表征抗纤维化化合物(参见Weigle等J Biol Methods(2019)卷6(2))。

成纤维细胞向肌成纤维细胞转变(FMT)试验

在384-孔板(目录号6057302，铂金埃尔默(Perkin Elmer))中，来源于三个IPF患者的人支气管肺成纤维细胞以750个细胞/孔的密度接种于2％FBS-DMEM(补充有2％胎牛血清(目录号10100-147，吉布可公司(Gibco))和1％青霉素和链霉素(目录号15140，吉布可公司)的DMEM)中。接种后两天，用2％FBS-DMEM更新细胞。接种后五天，用0.2％FBS-DMEM(补充有0.2％胎牛血清(目录号10100-147，吉布可公司)和1％青霉素和链霉素(目录号15140，吉布可公司)的DMEM)更新细胞，并加入抗-IGFBP5mAb(B06和B09)，在八步浓度反应曲线中，使用0.5LogM稀释步骤，B06的最高浓度为1.1μM，B09的最高浓度为1.5μM。ALK5抑制剂(SB525334；目录号S8822-25，西格玛(Sigma)以1μM在0.1％DMSO中(阳性对照)，0.1％DMSO(载剂对照1；目录号D8418，西格玛)和3.6％PBS(载剂对照2)被用于评估试验性能。加入抗-IGFBP5 mAb(B06和B09)、DMSO或PBS 1小时后，用1.25ng/mL TGF-β1(目录号240-B-010，R&D系统公司(R&D Systems))触发细胞以诱导成纤维细胞-向-肌成纤维细胞转变(FMT)。加入TGF-β1三(3)天后，用4％甲醛(目录号8187081000，默克公司(Merck))固定细胞，并对作为肌成纤维细胞标志物的α-平滑肌肌动蛋白(αSMA)和核(DAPI)进行染色。为了确定αSMA表达，固定的肺成纤维细胞在封闭缓冲液(含有5mg/mL BSA(目录号A2153，西格玛)和0.2％(体积/体积)Triton X-100(目录号T8787，西格玛)的PBS)中在室温下孵育1小时。然后用单克隆Alexa Fluor 488-偶联的抗-αSMA抗体(1μg/mL；目录号AB184675，Abcam)在室温下孵育细胞1小时，用PBS洗涤并用4’，6-联脒-2-苯基吲哚(fenylindole)(DAPI，0.5μg/mL；目录号D3571，生命技术公司)孵育，并在In Cell Analyzer 2200(GE医疗公司(GEHealthcare))上成像。用IN Cell显影软件(developer software)(GE医疗公司(GEHealthcare))对表达进行量化。αSMA表达以染色强度乘以染色面积来表示(DxA水平)。用DAPI对细胞核进行共染，以量化细胞数量，作为对潜在细胞毒性的测量。

经过分析，在IPF患者样品中，抗-IGFBP5 mAb表现出对TGF-β1-介导的αSMA表达的浓度依赖性抑制。此外，抗-IGFBP5 mAb没有显示出对细胞核数量的调节，表明没有潜在的细胞毒性副作用(图1)。

上皮-向-间充质转变(EMT)试验

在384-孔板(目录号6057302，铂金埃尔默(Perkin Elmer))中，来源于三个IPF患者(IPF05、IPF06和IPF07)的人支气管上皮细胞(HBEC)以900个细胞/孔的密度接种于KSFMComplete(无角质形成细胞血清培养基，补充有0.2ng/mL表皮生长因子、25μg/mL牛垂体提取物(均来自目录号17005-075，吉布可公司)、1μmol/L异丙肾上腺素(目录号I6504，西格玛)和1％青霉素和链霉素(目录号15140，吉布可公司))中。接种两天后，用KSFM Complete更新细胞。接种后六天，用KSFM Complete更新细胞，并添加抗-IGFBP5 mAb(B06和B09)，在八步浓度反应曲线中，使用0.5LogM稀释步骤，B06的最高浓度为1.1μM，B09的最高浓度为1.5μM。ALK5抑制剂(SB525334；目录号S8822-25，西格玛(Sigma)以1μM在0.1％DMSO中(阳性对照)，0.1％DMSO(载剂对照1；目录号D8418，西格玛)和3.6％受限的)PBS(载剂对照2)被用于评估试验性能。加入抗-IGFBP5 mAb(B06和B09)、DMSO或PBS后1小时，用5ng/mL TGF-β1(目录号240-B-010，R&D系统公司(R&D Systems))触发细胞以诱导表皮-向-间充质转变(EMT)。加入触发物三天后，用4％甲醛(目录号8187081000，默克公司(Merck))固定细胞，并对纤连蛋白(FN1)、间充质细胞标志物和核(DAPI)进行染色。为了确定FN1表达，固定的HBEC在封闭缓冲液(含有5mg/mL BSA(目录号A2153，西格玛)和0.2％(体积/体积)Triton X-100(目录号T8787，西格玛)的PBS)中在室温下孵育1小时。然后将细胞与单克隆抗-FN1抗体(0.125μg/mL；目录号610001，必欧瀚生物技术医疗公司(Biohit healthcare))在室温下孵育1小时，用0.05％Tween-20(目录号P1379，西格玛)的PBS溶液洗涤，并与Alexa Fluor546-偶联的驴抗-小鼠二抗(4μg/mL；目录号A10036，生命技术公司)在室温下孵育1小时。然后用PBS中0.05％Tween洗涤板，用4’，6-联脒-2-苯基吲哚(fenylindole)(DAPI，0.5μg/mL；目录号D3571，生命技术公司)孵育并在In Cell Analyzer 2200(GE医疗公司)上成像。

用IN-Cell显影软件(developer software)(GE医疗公司(GE Healthcare))对表达进行量化。FN1表达以染色强度乘以染色面积来表示(DxA水平)。用DAPI对细胞核进行共染，以量化细胞数量，作为对潜在细胞毒性的测量。

经过分析，在供者IPF05和IPF06的IPF患者样品中，抗-IGFBP5 mAb B06表现出对TGF-β1-介导的FN1表达的浓度依赖性抑制。此外，所有抗-IGFBP5 mAb都没有显示出对细胞核数量的调节，表明没有潜在的细胞毒性副作用(图2)。

通过引用纳入

全部出版物、专利、专利申请和/或其他本申请所引用的文献在此完整引入以供参考，其程度相当于每一出版物、专利、专利申请和/或其他本申请所引用的文献都单独说明对于所有目的引入以供参考。

等同形式

虽然已经示出和描述了各种具体实施方式，但是上述说明书并不具有限制性。应理解，可进行各种改进而不背离本发明的精神和范围。在阅读本说明书后，许多变化对于本领域技术人员而言将变得显而易见。

序列表

<110> 恩瑟拉有限责任公司(Enthera S.r.l.)

<120> 抑制剂及其用途

<130> PCT 145742

<150> EP20158553.6

<151> 2020-02-20

<160> 125

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 1

Ser Tyr Gly Ile Ser

1 5

<210> 2

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 2

Ser Tyr Ala Met Ser

1 5

<210> 3

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 3

Ser Tyr Ala Ile Ser

1 5

<210> 4

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 4

Ser Tyr Gly Met His

1 5

<210> 5

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 5

Gly Tyr Gly Met Asn

1 5

<210> 6

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 6

Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu Gln

1 5 10 15

Gly

<210> 7

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 7

Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 8

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 8

Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln

1 5 10 15

Gly

<210> 9

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 9

Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 10

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 10

Gly Ile Thr Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln

1 5 10 15

Gly

<210> 11

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 11

Tyr Val Gly Ser Ser Ser Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 12

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 12

Glu Trp Glu Leu Leu Gly Gly Leu Asp Tyr

1 5 10

<210> 13

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 13

Gly Ala Gly Thr Leu Asp Tyr

1 5

<210> 14

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 14

Gly Arg Gly Val Ile Asp Tyr

1 5

<210> 15

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 15

Asp Arg Tyr Leu Gly Trp Phe Asp Pro

1 5

<210> 16

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 16

Gly Arg Gly Ser Phe Asp Pro

1 5

<210> 17

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 17

Asp Leu Ala Val Gly Thr His Gly Asp Tyr

1 5 10

<210> 18

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 18

Asn Val Arg Leu Pro Gly Trp Phe Asp Pro

1 5 10

<210> 19

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 19

Gly Asp Tyr Ser Asp Thr Ser Gly Thr Asp Phe Phe Gln His

1 5 10

<210> 20

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 20

Leu Gly Arg Glu Leu Ser Phe Asp Tyr

1 5

<210> 21

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 21

Phe Gly Arg Pro Gln Leu Gly Tyr Ala Phe Asp Ile

1 5 10

<210> 22

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 22

Met Ser Val Ala Gly Pro Ser Ile Ser Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 23

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 23

Ala Gly Ile Leu Thr Gly Tyr Tyr Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 24

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 24

Gly Leu Gly Gly Asn

1 5

<210> 25

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 25

Leu Ser Gly Pro Asn Gly Val Asp Tyr

1 5

<210> 26

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 26

Ile Thr Glu Gly Ala Phe Asp Tyr

1 5

<210> 27

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 27

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser

1 5 10

<210> 28

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 28

Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu

1 5 10 15

Ser

<210> 29

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 29

Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu

1 5 10 15

Ala

<210> 30

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 30

Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Trp Leu Ala

1 5 10

<210> 31

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 31

Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 32

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 32

Arg Ala Ser Gln Ser Leu Ser Ala Asp Tyr Leu Ala

1 5 10

<210> 33

<211> 13

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 33

Thr Arg Ser Ser Gly Ser Ile Ala Ser Asn Tyr Val Gln

1 5 10

<210> 34

<211> 13

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 34

Ser Gly Ser Arg Ser Asn Ile Gly Ser Asn Tyr Val His

1 5 10

<210> 35

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 35

Gln Gly Asp Ser Val Arg Lys Tyr Tyr Thr Asn

1 5 10

<210> 36

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 36

Arg Ala Ser Arg Thr Val Gly Ser Trp Leu Ala

1 5 10

<210> 37

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 37

Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 38

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 38

Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser

1 5

<210> 39

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 39

Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 40

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 40

Lys Ala Ser Ser Leu Glu Ser

1 5

<210> 41

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 41

Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser

1 5

<210> 42

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 42

Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr

1 5

<210> 43

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 43

Ala Ala Ser Ser Leu Gln Arg

1 5

<210> 44

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 44

Glu Asp Asn Gln Arg Pro Ser

1 5

<210> 45

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 45

Arg Asn Asp Gln Arg Pro Ser

1 5

<210> 46

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 46

Gly Lys Asn Tyr Arg Pro Ser

1 5

<210> 47

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 47

Asp Ala Ser Asn Leu Gln Ser

1 5

<210> 48

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 48

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Val Val

1 5 10

<210> 49

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 49

Gln Gln Tyr Tyr Ser Thr Pro Leu Thr

1 5

<210> 50

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 50

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Pro Tyr Val

1 5 10

<210> 51

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 51

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Glu Val Val

1 5 10

<210> 52

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 52

Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu Thr

1 5

<210> 53

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 53

Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Gly

1 5

<210> 54

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 54

Gln Gln Ser Tyr Ser Glu Ser Trp Thr

1 5

<210> 55

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 55

Gln Gln Asn Asp Asn Trp Pro Tyr Thr

1 5

<210> 56

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 56

Gln Glu Thr Tyr Ser Asn Leu Trp Thr

1 5

<210> 57

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 57

Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Asn Arg Pro Trp Val

1 5 10

<210> 58

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 58

Ala Ala Trp Asp Asp Gly Leu Ser Val Leu

1 5 10

<210> 59

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 59

His Ser Arg Asp Thr Ser Asp Ile His Leu Asn Val

1 5 10

<210> 60

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 60

Gln Gln Tyr Asn Ser Ser Pro Tyr Thr

1 5

<210> 61

<211> 119

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 61

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Glu Trp Glu Leu Leu Gly Gly Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 62

<211> 116

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 62

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Ala Gly Thr Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val

100 105 110

Thr Val Ser Ser

115

<210> 63

<211> 116

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 63

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Arg Gly Val Ile Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val

100 105 110

Thr Val Ser Ser

115

<210> 64

<211> 118

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 64

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Arg Tyr Leu Gly Trp Phe Asp Pro Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 65

<211> 116

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 65

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Arg Gly Ser Phe Asp Pro Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val

100 105 110

Thr Val Ser Ser

115

<210> 66

<211> 119

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 66

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Leu Ala Val Gly Thr His Gly Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 67

<211> 119

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 67

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asn Val Arg Leu Pro Gly Trp Phe Asp Pro Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 68

<211> 123

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 68

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Asp Tyr Ser Asp Thr Ser Gly Thr Asp Phe Phe Gln His

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 69

<211> 118

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 69

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Thr Leu Gly Arg Glu Leu Ser Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 70

<211> 121

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 70

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Phe Gly Arg Pro Gln Leu Gly Tyr Ala Phe Asp Ile Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 71

<211> 121

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 71

Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Thr Met Ser Val Ala Gly Pro Ser Ile Ser Phe Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 72

<211> 120

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 72

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Thr Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Gly Ile Leu Thr Gly Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 73

<211> 114

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 73

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Gly Tyr

20 25 30

Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Tyr Val Gly Ser Ser Ser Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Asn Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Leu Gly Gly Asn Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val

100 105 110

Ser Ser

<210> 74

<211> 118

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 74

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Leu Ser Gly Pro Asn Gly Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 75

<211> 117

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 75

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ser Ile Thr Glu Gly Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 76

<211> 110

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 76

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser

85 90 95

Ser Thr Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 77

<211> 113

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 77

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser

20 25 30

Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln

35 40 45

Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln

85 90 95

Tyr Tyr Ser Thr Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile

100 105 110

Lys

<210> 78

<211> 113

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 78

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser

20 25 30

Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln

35 40 45

Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln

85 90 95

Tyr Tyr Ser Thr Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Asp Ile

100 105 110

Lys

<210> 79

<211> 111

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 79

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser

85 90 95

Ser Thr Pro Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 80

<211> 113

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 80

Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser

20 25 30

Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln

35 40 45

Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln

85 90 95

Tyr Tyr Ser Thr Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile

100 105 110

Lys

<210> 81

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 81

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser

85 90 95

Ser Thr Leu Glu Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 82

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 82

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Trp

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Lys Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 83

<211> 106

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 83

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Gly

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 84

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 84

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Glu Ser Trp

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Thr Val Asp Ile Lys

100 105

<210> 85

<211> 108

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 85

Glu Thr Thr Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly

1 5 10 15

Asp Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Leu Ser Ala Asp

20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Val Ser Ser Leu Gln

65 70 75 80

Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Asn Asp Asn Trp Pro

85 90 95

Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 86

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 86

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Ala Ile Pro Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Arg Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Glu Thr Tyr Ser Asn Leu Trp

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 87

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 87

Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro His Ser Val Ser Glu Ser Pro Gly Lys

1 5 10 15

Thr Val Thr Ile Ser Cys Thr Arg Ser Ser Gly Ser Ile Ala Ser Asn

20 25 30

Tyr Val Gln Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Ser Ser Pro Thr Thr Val

35 40 45

Ile Tyr Glu Asp Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Ile Asp Ser Ser Ser Asn Ser Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly

65 70 75 80

Leu Lys Thr Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser

85 90 95

Ser Asn Arg Pro Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 88

<211> 109

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 88

Gln Pro Gly Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Ala Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Arg Ser Asn Ile Gly Ser Asn

20 25 30

Tyr Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Ile

35 40 45

Ile Tyr Arg Asn Asp Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser

50 55 60

Ala Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Gly Leu

85 90 95

Ser Val Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105

<210> 89

<211> 109

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 89

Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ser Val Ser Val Ala Leu Gly Gln

1 5 10 15

Thr Val Thr Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Val Arg Lys Tyr Tyr Thr

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Ile Leu Val Leu Tyr

35 40 45

Gly Lys Asn Tyr Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Thr Ser Gly Asp Thr Ala Tyr Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Asp Tyr Tyr Cys His Ser Arg Asp Thr Ser Asp Ile His

85 90 95

Leu Asn Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu

100 105

<210> 90

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 90

Ala Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Arg Thr Val Gly Ser Trp

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Asp Asp Leu Ser Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Ser Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 91

<211> 357

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 91

caggtgcagc tggtggagtc tggagctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggtta cacctttacc agctatggta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcagcgctt acaatggtaa cacaaactat 180

gcacagaagc tccagggcag agtcaccatg accacagaca catccacgag cacagcctac 240

atggagctga gaagcctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gagagagtgg 300

gagctacttg gggggcttga ctactggggc cagggaaccc tggtcaccgt gtcctca 357

<210> 92

<211> 348

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 92

gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc agctatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac 180

gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaggggggct 300

ggtacgcttg actactgggg ccagggaacc ctggtcaccg tgtcctca 348

<210> 93

<211> 348

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 93

caggttcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggtta cacctttacc agctatggta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcagcgctt acaatggtaa cacaaactat 180

gcacagaagc tccagggcag agtcaccatg accacagaca catccacgag cacagcctac 240

atggagctga ggagcctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gagaggtcgg 300

ggagttatag actactgggg ccagggaacc ctggtcaccg tgtcctca 348

<210> 94

<211> 354

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 94

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggtta cacctttacc agctatggta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcagcgctt acaatggtaa cacaaactat 180

gcacagaagc tccagggcag agtcaccatg accacagaca catccacgag cacagcctac 240

atggagctga ggagcctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gagagatcga 300

tatttggggt ggttcgaccc ctggggccag ggaaccctgg tcaccgtgtc ctca 354

<210> 95

<211> 348

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 95

caggttcagc tggtgcagtc tggagctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggtta cacctttacc agctacggta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcagcgctt acaatggtaa cacaaactat 180

gcacagaagc tccagggcag agtcaccatg accacagaca catccacgag cacagcctac 240

atggagctga ggagcctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gagaggtaga 300

ggtagtttcg acccctgggg ccagggaacc ctggtcaccg tgtcctca 348

<210> 96

<211> 357

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 96

caggtgtagc tggtgcaatc tggagctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggtta cacctttacc agctatggta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcagcgctt acaatggtaa cacaaactat 180

gcacagaagc tccagggcag agttaccatg accacagaca catccacgag cacagcctac 240

atggagctga ggagcctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gagagatctg 300

gcagttggga cccacggtga ctactggggc cagggaaccc tggtcaccgt gtcctca 357

<210> 97

<211> 357

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 97

caggtccagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggaca aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaaacgtc 300

cgtctcccag gctggttcga cccctggggc cagggaaccc tggtcaccgt gtcctca 357

<210> 98

<211> 369

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 98

gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt agctatggca tgcactgggt ccgccaggct 120

ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcatatg atggaagtaa taaatactat 180

gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agctgaggac acagctgtat actactgtgc gagaggggac 300

tattctgata ccagtggtac cgatttcttc cagcactggg gccagggcac ccaggtcacc 360

gtgtcctca 369

<210> 99

<211> 354

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 99

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gaccctcggg 300

agggagctca gctttgacta ctggggccag ggaaccctgg tcaccgtgtc ctca 354

<210> 100

<211> 363

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 100

caggtccagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagattcgga 300

aggccgcagc tgggctatgc ttttgatatc tggggccaag ggacaatggt caccgtgtct 360

tca 363

<210> 101

<211> 363

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 101

caaatgcagc tggtgcaatc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc aacaatgtca 300

gtggctggtc cttcaatatc ttttgactac tggggccagg gaaccctggt caccgtgtcc 360

tca 363

<210> 102

<211> 360

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 102

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcaccccta tctttggtac agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagagcggga 300

attttgactg gttattactt tgactactgg ggccagggaa ccctggtcac cgtgtcctca 360

<210> 103

<211> 342

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 103

gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgaaactc 60

tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt ggctatggca tgaactgggt ccgccaggct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtttcatac gttggtagta gtagtagtac catatactac 180

gcagattctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca atgccaacaa ctcactgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggctgtgt attactgtgc gagaggcctc 300

ggtggtaatt ggggccaagg gacaatggtc accgtgtctt ca 342

<210> 104

<211> 354

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 104

gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt agctatggca tgcactgggt ccgccaggct 120

ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcatatg atggaagtaa taaatactat 180

gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agctgaggac acggctgtgt attactgtgc gaaactttcc 300

gggcccaacg gtgtggacta ctggggccag ggaaccctgg tcaccgtgtc ctca 354

<210> 105

<211> 351

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 105

caggttcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagcattacg 300

gagggggcct ttgactactg gggccaggga accctggtca ccgtgtcctc a 351

<210> 106

<211> 330

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 106

cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60

tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacag 120

cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgaggtca gtaatcggcc ctcaggggtt 180

tctaatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240

caggctgagg acgaggctga ttattactgc agctcatata caagcagcag cactgtggta 300

ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta 330

<210> 107

<211> 339

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 107

gacatcgtga tgacccagtc tccagactcc ctggctgtgt ctctgggcga gagggccacc 60

atcaactgca agtccagcca gagtgtttta tacagctcca acaataagaa ctacttatct 120

tggtaccagc agaaaccagg tcagcctcct aagctgctca tttactgggc atctacccgg 180

gaatccgggg tccctgaccg attcagtggc agcgggtctg ggacagattt cactctcacc 240

atcagcagcc tgcaggctga agatgtggca gtttattact gtcagcaata ttatagtact 300

ccgctcactt tcggcggagg gaccaaggtg gaaatcaaa 339

<210> 108

<211> 339

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 108

gaaatagtga tgacgcagtc tccagactcc ctggctgtgt ctctgggcga gagggccacc 60

atcaactgca agtccagcca gagtgtttta tacagctcca acaataagaa ctacttagct 120

tggtaccagc agaaaccagg acagcctcct aagctgctca tttactgggc atctacccgg 180

gaatccgggg tccctgaccg attcagtggc agcgggtctg ggacagattt cactctcacc 240

atcagcagcc tgcaggctga agatgtggca gtttattact gtcagcaata ttatagtact 300

ccgctcactt tcggcggagg gaccaaagtg gatatcaaa 339

<210> 109

<211> 333

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 109

cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60

tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacag 120

cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgaggtca gtaatcggcc ctcaggggtt 180

tctaatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240

caggctgagg atgaggctga ttattactgc agctcatata caagcagcag caccccttat 300

gtcttcggaa ctgggaccaa gctgaccgtc cta 333

<210> 110

<211> 339

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 110

gacatccagt tgacccagtc tccagactcc ctggctgtgt ctctgggcga gagggccacc 60

atcaactgca agtccagcca gagtgtttta tacagctcca acaataagaa ctacttagct 120

tggtaccagc agaaaccagg acagcctcct aagctgctca tttactgggc atctacccgg 180

gaatccgggg tccctgaccg attcagtggc agcgggtctg ggacagattt cactctcacc 240

atcagcagcc tgcaggccga agatgtggca gtttattact gtcagcaata ttatagtact 300

cctctcactt tcggcggagg gaccaaggtg gagatcaaa 339

<210> 111

<211> 336

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 111

cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60

tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacag 120

cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgaggtca gtaatcggcc ctcaggggtt 180

tctaatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240

caggctgagg acgaggctga ttattactgc agctcataca caagcagcag cactctcgag 300

gtggtattcg gcggagggac caagctgacc gtccta 336

<210> 112

<211> 321

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 112

gacatccaga tgacccagtc tccttccacc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggccagtca gagtattagt agctggttgg cctggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctataag gcgtctagtt tagaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240

gatgattttg caacttatta ctgccaacag tataatagtt acccgctcac tttcggcgga 300

gggaccaagg tggagatcaa a 321

<210> 113

<211> 318

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 113

gacatcgtga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240

gaagattttg caacttacta ctgtcaacag agttacagta ccccagggtt cggcggaggg 300

accaaggtgg agatcaaa 318

<210> 114

<211> 321

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 114

gatattgtga tgactcagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240

gaagattttg caacttacta ctgtcaacag agttacagtg agtcgtggac gttcggccag 300

gggaccacgg tggacatcaa a 321

<210> 115

<211> 324

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 115

gaaacgacac tcacgcagtc tccaggcacc ctgtctgtgt ctccagggga tagagccacc 60

ctctcctgca gggccagtca gagtcttagc gccgactact tagcctggta ccagcagaaa 120

cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggtgcatcca caagggccac tggtatccca 180

gccaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gagttcactc tcaccgtcag cagcctgcag 240

tctgaagatt ttgcagttta ttactgtcag cagaatgata actggccgta cacttttggc 300

caggggacca agctggagat caaa 324

<210> 116

<211> 321

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 116

gacatccaga tgacccagtc tccatcttcc ctgtccgcat ctgtgggaga cagagtcgcc 60

atcccttgcc gggcaagtca gagcattagc agctacttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaaactgct gatctacgct gcatccagtt tgcaaagagg ggtcccatca 180

aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240

gaagattttg caacttacta ttgtcaagag acttacagta acctgtggac gttcggccaa 300

gggaccaagg tggaaatcaa a 321

<210> 117

<211> 336

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 117

aattttatgc tgactcagcc ccactctgtg tcggagtctc cggggaagac ggtaaccatc 60

tcctgcaccc gcagcagtgg cagcattgcc agcaactatg tgcagtggta ccagcagcgc 120

ccgggcagtt cccccaccac tgtgatctat gaggataacc aaagaccctc tggggtccct 180

gatcggttct ctggctccat cgacagctcc tccaactctg cctccctcac catctctgga 240

ctgaagactg aggacgaggc tgactactac tgtcagtctt atgatagcag caatcggcct 300

tgggtgttcg gcggagggac caagctgacc gtccta 336

<210> 118

<211> 327

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 118

cagcctgggc tgactcagcc accctcagcg tctggggccc ccgggcagag ggtcaccatc 60

tcttgttctg gaagcaggtc caatatcggt tctaattatg tacactggta ccaacaactc 120

ccaggaacgg cccccaaact catcatttat aggaatgatc agcggccctc aggggtccct 180

gcccgattct ctgcctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccgg 240

tccgaggatg aagctgatta ctactgtgca gcgtgggatg acggactgag tgtcctattc 300

ggcggaggga ccaagttgac cgtccta 327

<210> 119

<211> 327

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 119

tcttctgagc tgactcagga cccctctgtg tctgtggcct tgggacaaac agtcactatc 60

acgtgccaag gagacagtgt cagaaagtat tatacgaact ggtatcaaca gaagccagga 120

caggccccta tccttgtcct ctatggtaaa aactaccggc cctcagggat cccagaccga 180

ttctctggct ccacgtccgg agacacagcg tacttgacca tcactggggc tcaggcggag 240

gatgcggcag actattattg tcactcccgg gacaccagtg atatccatct aaatgtcttc 300

ggcactggga ccaaggtcac cgtccta 327

<210> 120

<211> 321

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 120

gccatccagt tgacccagtc tccttccacc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggccagtcg gactgttggt agctggttgg cctggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctatgat gcctccaatt tgcaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240

gatgatttgt caacttatta ctgccaacag tataatagtt ccccgtacac ttttggccag 300

gggaccaagg tggagatcaa a 321

<210> 121

<211> 327

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 121

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg

1 5 10 15

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr

65 70 75 80

Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

85 90 95

Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro

100 105 110

Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys

115 120 125

Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val

130 135 140

Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp

145 150 155 160

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe

165 170 175

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp

180 185 190

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu

195 200 205

Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg

210 215 220

Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys

225 230 235 240

Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp

245 250 255

Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys

260 265 270

Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser

275 280 285

Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser

290 295 300

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser

305 310 315 320

Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

325

<210> 122

<211> 326

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 122

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg

1 5 10 15

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr

65 70 75 80

Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

85 90 95

Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro

100 105 110

Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp

115 120 125

Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp

130 135 140

Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly

145 150 155 160

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn

165 170 175

Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp

180 185 190

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro

195 200 205

Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu

210 215 220

Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn

225 230 235 240

Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile

245 250 255

Ser Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr

260 265 270

Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys

275 280 285

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys

290 295 300

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu

305 310 315 320

Ser Leu Ser Pro Gly Lys

325

<210> 123

<211> 106

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 123

Gly Gln Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser

1 5 10 15

Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp

20 25 30

Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro

35 40 45

Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn

50 55 60

Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys

65 70 75 80

Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val

85 90 95

Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser

100 105

<210> 124

<211> 106

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 124

Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser

1 5 10 15

Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp

20 25 30

Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro

35 40 45

Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn

50 55 60

Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys

65 70 75 80

Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val

85 90 95

Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser

100 105

<210> 125

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的

<400> 125

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

1 5 10 15

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

20 25 30

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

35 40 45

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

50 55 60

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

65 70 75 80

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

85 90 95

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

100 105

Claims

1.一种IGFBP5和/或至少其受体之一的抑制剂，其中所述抑制剂具有抗纤维化作用和/或抗纤维变性活性。

2.一种IGFBP5和/或至少其受体之一的抑制剂用于治疗和/或预防纤维变性和/或纤维化病症。

3.如权利要求1或2所述的抑制剂，其中所述抑制剂选自下组：

a)多肽；

b)多核苷酸或编码所述多肽的多核苷酸；

c)包含或表达所述多核苷酸的载体；

e)小分子；

4.如前述权利要求中任一项所述的抑制剂，其中所述抑制剂是结合至人IGFBP5或结合至至少其受体之一的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述分离的抗体或其抗原结合片段具有抗纤维化作用。

5.如前述权利要求中任一项所述的抑制剂，其中所述抑制剂抑制、减少或中和由促纤维化介导物诱导的αSMA的形成和/或其抑制、减少或中和由促纤维化介导物诱导的FN1表达的激活。

6.如前述权利要求中任一项所述的抑制剂，其中所述抑制剂是结合至人IGFBP5且具有抗纤维化作用的分离的抗体或其抗原结合片段。

7.如权利要求6所述的抑制剂，其包括：

a.重链可变结构域(VH)，其包括：

b.轻链可变结构域(VL)，其包含：

8.如权利要求6或7中任一项所述的抑制剂，其包括：

a.重链可变结构域(VH)，其包括：

iii.选自下组的氨基酸序列的CDR3序列：使用abysis工具分析(www.abysis.org)定义的序列，优选示于表4.1的；和

b.轻链可变结构域(VL)，其包含：

9.如权利要求6-8中任一项所述的抑制剂，其包括：

a.重链可变结构域(VH)，其包括：

iii.选自下组的氨基酸序列的CDR3序列：使用abysis工具分析(www.abysis.org)定义的序列，优选示于表5.1的；和

b.轻链可变结构域(VL)，其包含：

10.如权利要求6-9中任一项所述的抑制剂，其包括：

b.选自下组的氨基酸序列的轻链可变结构域序列：SEQ ID NO：76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89和90，或

c.(a)的重链可变结构域和(b)的轻链可变结构域。

11.如权利要求6-10中任一项所述的抑制剂选自下组：A09、B06、C02、D10、F05、B09、B11、C11、C12、D12、E02、E03、E05、F04、G01，优选所述分离的抗体或其抗原结合片段是抗体B06或B09。

12.如权利要求11所述的抑制剂，其包括选自表2的VH CDR1、CDR2和CDR3和选自表3的VL CDR1、CDR2和CDR3。

13.如权利要求6-12中任一项所述的抑制剂，其对于人IGFBP5具有低于或等于10^-8M的亲和常数。

14.如权利要求1-5中任一项所述的抑制剂，其是分离的抗体或其抗原结合片段，其：

15.如权利要求6所述的抑制剂，其是分离的抗体或其抗原结合片段，其：

16.如前述权利要求中任一项所述的抑制剂是人或人源化抗体。

17.如前述权利要求中任一项所述的抑制剂，其为：IgG2或IgG4抗体，优选IgG2κ抗体、IgG2λ抗体、IgG4κ抗体或IgG4λ抗体。

18.如前述权利要求中任一项所述的抑制剂，其中所述抑制剂减少或抑制IGFBP5对其至少一个受体的结合，优选所述至少一个受体为α2β1整合素或αvβ6整合素。

19.如前述权利要求中任一项所述的抑制剂，其中所述抑制剂i)减少或抑制胞外基质产生和/或ii)减少或抑制胞外基质沉积和/或iii)减少或抑制原代肺成纤维细胞中胶原蛋白和/或纤连蛋白产生和/或iv)减少或抑制原代肺成纤维细胞中胶原蛋白和/或纤连蛋白沉积。

20.一种分离的多核苷酸，其包含至少一个编码如权利要求4-18中任一项所述的抑制剂的序列，优选所述多核苷酸是eDNA或包含所述分离的多核苷酸的载体，优选所述载体选自下组：质粒、病毒载体、非附加型哺乳动物载体、表达载体和重组表达载体，或包含所述分离的多核苷酸或所述载体的分离的细胞，优选所述分离的细胞是杂交瘤或中国仓鼠卵巢(CHO)细胞或人胚胎肾细胞(HEK293)。

21.如权利要求1-18中任一项所述的抑制剂或如权利要求19所述的多核苷酸或所述载体或所述细胞，用作药物，优选用于治疗和/或预防纤维变性或纤维化病症，优选硬皮病或肺纤维变性，优选硬斑病、作为移植物抗宿主病(GVHD)的结果的纤维变性、瘢瘤和肥厚性瘢痕、上皮下纤维变性、心肌心内膜纤维变性、子宫纤维变性、骨髓纤维化、腹膜后纤维变性、肾性全身纤维化症、手术后瘢痕形成、哮喘、异常的伤口愈合、多病灶性纤维硬化病、隐源性纤维性肺泡炎(CFA)和特发性肺纤维化(IPF)。

22.一种药物组合物，其包括如权利要求1-19中任一项所述的抑制剂或如权利要求20所述多核苷酸或所述载体或所述细胞及药学上可接受的运载体，优选用于纤维变性或纤维化病症的治疗，优选所述组合物进一步包括治疗剂。