CN114401993A - 使用il-17ra抗体治疗非酒精性脂肪肝疾病(nafld)的方法 - Google Patents

Abstract

本公开涉及一种使用IL‑17拮抗剂(例如特异性结合IL‑17受体A(IL‑17RA)的单克隆抗体)治疗非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)及其亚群(例如非酒精性脂肪性肝炎(NASH))的方法。

Description

使用IL-17RA抗体治疗非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)的方法

技术领域

非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)在世界范围内迅速流行，是慢性肝病和肝细胞癌(HCC)的越来越重要的病因(Younossi等人，Hepatology,62:1723-1730(2015)；Younossi等人，Hepatology,64(1):73-84(2016)；Wong等人，Hepatology,59(6):2188-2195(2014)；Gastroenterology,152(5):1090-1099(2017))。NAFLD包括一系列肝脏异常，从相对良性的单纯性脂肪变性到非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，预计到2020年，NASH将成为肝移植的主要适应症(Charlton等人，Clin Gastro&Hep.,2(12):1048-1058(2004))。NAFLD影响美国约9000万人(Gastroenterology,150(8):1778-1785(2016))。

背景技术

对于遗传易感个体中NAFLD的发展，提出了多重命中假说。饮食和环境因素加上肥胖导致代谢紊乱，这导致血清游离脂肪酸和胆固醇水平升高、胰岛素抵抗、脂肪细胞增殖和肠道微生物群变化。导致脂肪毒性的肝脂肪变性触发炎症级联反应的激活，这导致肝脏炎症、纤维化、肝硬化和HCC。

白细胞介素(IL)-17A(配体)属于促炎细胞因子家族，在包括皮肤、粘膜组织和肝脏在内的多个器官中产生。IL-17RA(IL-17A受体)在肝细胞、枯否细胞、肝星状细胞、胆管上皮细胞和肝窦内皮细胞中广泛表达。IL-17驱动的IL-17RA激活导致促炎细胞因子和中性粒细胞募集趋化因子的产生。据报道，在包括慢性乙型和丙型肝炎、肝癌和酒精性肝损伤的各种慢性肝病中，IL-17A的产生增加。据报道，在肥胖的人和小鼠中，IL-17表达增加，并与调节肥胖和NAFLD有关。

在动物模型中，IL-17A是NAFLD发病机制中IL-17的主要家族成员(Harley等人，Hepatology，Hepatology,59(5):1830-1839(2014)；Xu等人，Acta Biochem Biophys.,45(9):726-733(2013))。此外，与野生型小鼠相比，NASH小鼠模型的IL-17A表达显著增加，巨噬细胞向与肝脏炎症和肝细胞损伤相关的促炎症表型分化增加(Giles等人，PLOS One,11(2):e0149783(2016))。因此，在动物模型中，IL-17通路与NAFLD发病机制有关。目前，还没有食品和药物管理局(FDA)批准的治疗NAFLD的药物。

仍然需要治疗NAFLD及其亚群(如NASH)的组合物和方法。

发明内容

本公开提供了一种在受试者中治疗非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)的方法，其包括向受试者施用含有治疗有效量的IL-17拮抗剂，例如特异性结合白细胞介素17受体A(IL-17RA)的单克隆抗体，或其抗原结合片段；以及药学上可接受的载体的组合物，从而在受试者中治疗NAFLD。

本公开还提供了一种在有需要的受试者中减少肝脏炎症的方法，其包括向受试者施用含有治疗有效量的IL-17拮抗剂，例如特异性结合白细胞介素17受体A(IL-17RA)的单克隆抗体，或其抗原结合片段；以及药学上可接受的载体的组合物，由此减少受试者的肝脏炎症。

附图说明

图1是示出实施例2中所述临床方案的示意图。

具体实施方式

本公开至少部分基于以下发现来表明：肝脏炎症，特别是与非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)相关的炎症可以通过IL-17受体A(IL-17RA)的拮抗来治疗。

定义

为了便于理解目前的技术，一些术语和短语如下定义。其他定义在具体实施方式中给出。

本文使用的术语“免疫球蛋白”或“抗体”是指在脊椎动物的血液或其他体液中发现的蛋白质，免疫系统使用该蛋白质识别和中和异物，如细菌和病毒。通常，免疫球蛋白或抗体是包含至少一个互补决定区(CDR)的蛋白质。CDR形成抗体的“高变区”，其负责抗原结合(下文将进一步讨论)。整个免疫球蛋白通常由四种多肽组成：重(H)链多肽的两个相同拷贝和轻(L)链多肽的两个相同拷贝。每个重链包含一个N端可变(V_H)区和三个C端恒定(C_H1、C_H2和C_H3)区，每个轻链包含一个N端可变(V_L)区和一个C端恒定(C_L)区。抗体的轻链可以根据其恒定结构域的氨基酸序列被分配到两种不同类型中的一种，即κ(κ)或λ(λ)。在典型的抗体中，每个轻链通过二硫键连接到一个重链，且两个重链通过二硫键相互连接。轻链可变区与重链可变区对齐，轻链恒定区与重链第一恒定区对齐。重链的其余恒定区彼此对齐。

每对轻链和重链的可变区形成抗体的抗原结合位点。V_H和V_L区域具有相同的一般结构，每个区域包括四个框架(FW或FR)区。本文使用的术语“框架区”是指位于CDR之间的可变区内相对保守的氨基酸序列。每个可变结构域中有四个框架区，分别为FR1、FR2、FR3和FR4。框架区域形成β折叠，提供可变区的结构框架(参见C.A.Janeway等人(编辑)，Immunobiology,第5次编辑,Garland Publishing,New York,N.Y.(2001))。

框架区由三个CDR连接。如上所述，三个CDR，即CDR1、CDR2和CDR3，构成抗体的“高变区”，负责抗原结合。CDR形成回路，连接由框架区形成的β折叠结构，在某些情况下还包括其一部分。虽然轻链和重链的恒定区不直接参与抗体与抗原的结合，但恒定区可以影响可变区的方向。恒定区还表现出各种效应器功能，例如通过与效应器分子和细胞的相互作用参与抗体依赖性补体介导的裂解或抗体依赖性细胞毒性。

如本文所用，当抗体或其他实体(例如抗原结合域)“特异性识别”或“特异性结合”抗原或表位时，其优先识别蛋白质和/或大分子的复杂混合物中的抗原，并以实质上高于不显示该抗原或表位的其他实体的亲和力结合该抗原或表位。在这方面，“实质上关于…的亲和力”指的是足够高的亲和力，以便能够使用所需分析或测量仪器来检测与实体不同的抗原或表位。通常，它意味着结合亲和力具有至少10⁷M^-1(例如，>10⁷M^-1、>10⁸M^-1、>10⁹M^-1、>10¹⁰M^-1、>10¹¹M^-1、>10¹²M^-1、>10¹³M^-1等)的结合常数(Ka)。在某些这样的实施方式中，抗体能够结合不同的抗原，只要该抗原包含该特定表位即可。例如，在某些情况下，来自不同物种的同源蛋白质可能包含相同的表位。

在本文中，术语“抗体的片段”、“抗体片段”和抗体的“抗原结合片段”可互换使用，以指代保留特异性结合抗原能力的抗体的一个或多个片段(通常参见Holliger等人，Nat.Biotech.,23(9):1126-1129(2005))。本文所述抗体的任何抗原结合片段均在本公开的范围内。该抗体片段理想地包括例如一个或多个CDR、可变区(或其部分)、恒定区(或其部分)或其组合。抗体片段的示例包括但不限于：(i)Fab片段，其是由V_L、V_H、C_L和C_H1结构域组成的单价片段，(ii)F(ab')₂片段，其是由铰链区的二硫键连接的两个Fab片段组成的二价片段，(iii)由抗体单臂的V_L和V_H结构域组成的Fv片段，(iv)通过温和还原条件破坏F(ab')₂片段的二硫键而产生的Fab'片段，(v)二硫键稳定的Fv片段(dsFv)，以及(vi)结构域抗体(dAb)，其是一种特异性结合抗原的抗体单可变区结构域(V_H或V_L)多肽。

术语“核酸”、“多核苷酸”、“核苷酸序列”和“寡核苷酸”在本文中可互换使用，并且是指嘧啶和/或嘌呤碱的聚合物或寡聚体，优选胞嘧啶、胸腺嘧啶和尿嘧啶，以及腺嘌呤和鸟嘌呤，分别(参见Albert L.Lehninger,Principles of Biochemistry,at 793-800(Worth Pub.1982))。这些术语包括任何脱氧核糖核酸、核糖核苷酸或肽核酸成分，以及它们的任何化学变体，例如这些碱基的甲基化、羟甲基化或糖基化形式。聚合物或寡聚体的组成可以是异质的或同质的，可以从天然来源分离，或者可以人工或合成生产。此外，核酸可以是DNA或RNA或其混合物，并且可以以单链或双链形式永久或过渡地存在，包括同双链、异双链和杂交状态。在一些实施方式中，核酸或核酸序列包含其他种类的核酸结构，例如DNA/RNA螺旋、肽核酸(PNA)、吗啉核酸(参见例如Braasch和Corey，Biochemistry,41(14):4503-4510(2002)和美国专利5034506)，锁核酸(LNA；参见Wahlestedt等人，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.,97:5633-5638(2000))、环己烯基核酸(参见Wang，J.Am.Chem.Soc.,122:8595-8602(2000))和/或核酶。术语“核酸”和“核酸序列”还可包括包含非天然核苷酸、修饰核苷酸和/或非核苷酸构建块的链，其可表现出与天然核苷酸(例如，“核苷酸类似物”)相同的功能。

术语“肽”、“多肽”和“蛋白质”在本文中可互换使用，并指任何长度的氨基酸的聚合形式，其可包括编码和非编码氨基酸、化学或生物化学修饰或衍生的氨基酸，以及具有修饰肽主链的多肽。

术语“免疫原”和“抗原”在本文中可互换使用，并指在动物(例如哺乳动物)中诱导免疫反应的任何分子、化合物或物质。例如，“免疫反应”可能包括抗体产生和/或免疫效应细胞的激活。本公开上下文中的抗原可包含在哺乳动物中激发免疫应答的任何蛋白质或非蛋白质(例如碳水化合物或脂质)分子的任何亚单位、片段或表位。“表位”是指由抗体或抗原受体识别的抗原序列。表位在本领域中也被称为“抗原决定簇”。在某些实施方式中，表位是由抗体特异性结合的抗原区域。在某些实施方式中，表位可包括分子的化学活性表面基团，例如氨基酸、糖侧链、磷酰基或磺酰基。在某些实施方式中，表位可具有特定三维结构特征(例如，“构象”表位)和/或特定电荷特征。抗原可以是病毒、细菌、寄生虫、真菌、原生动物、朊病毒、细胞或细胞外来源的蛋白质或肽，其在哺乳动物中激发免疫应答，优选地导致保护性免疫。

IL-17拮抗剂

本文所述方法利用IL-17拮抗剂，例如IL-17结合分子(例如，可溶性IL-17受体或其IL-17结合抗体或抗原结合片段)或IL-17受体结合分子(例如，IL-17受体结合抗体或其抗原结合片段)。可在所述方法中使用的17-结合抗体的示例包括但不限于塞库单抗

伊克珠单抗

和CJM112(参见，例如，Riis等人，ExpertOpin.Investig.Drugs,27(1):43-53(2018))。IL-17拮抗剂在例如Wasilewska等人，Postepy.Dermatol.,Alergol.,33(4):247-252(2016)和Silfvast Kaiser等人，ExpertOpin.Biol.Ther.,19(1):45-54(2019)中有进一步描述。在一些实施方式中，IL-17拮抗剂是特异性结合IL-17受体A(“IL-17RA”)的抗体或其抗原结合片段。术语“IL-17受体A”、“IL-17RA”、“IL-17受体”和“IL-17R”在本文中可互换使用，以指结合到细胞因子IL-17A的细胞表面受体和受体复合物(例如，IL-17RA-IL-17RC复合物和IL-17RA-IL-17RB)。IL-17A是炎症细胞因子，最初被鉴定为由活化T细胞选择性表达的转录物。IL-17RA是广泛表达的IL-17A，其亲和力约为0.5nM(Yao等人，Immunity,3:811-821(1995))。另外五种IL-17样配体(即IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E和IL-17F)和另外四种IL-17RA样受体(即IL-17RB、IL-17RC、IL-17RD和IL-17RE)已被确定(Kolls和Linden,Immunity,21:467-476(2004))。已知不同的IL-17RA受体复合物结合一种或多种IL-17配体，从而在细胞内启动信号转导途径。IL-17RA的克隆、表征和制备如美国专利6072033所述。

本文所述的抗体或其抗原结合片段可特异性结合全长野生型IL-17RA，其氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示。可替代地，其抗体或抗原结合片段可特异性结合IL-17RA的变体、突变体和/或片段。IL-17RA的这种变体、突变体和/或片段希望保留与IL-17A和/或IL-17F结合的能力。例如，在一些实施方式中，其抗体或抗原结合片段可特异性结合到缺乏信号肽的IL-17RA的细胞外结构域或IL-17RA的成熟形式。只要IL-17RA突变体或变体保持结合IL-17A和/或IL-17F，或异聚体形式的IL-17A和/或IL-17F的能力，其抗体或抗原结合片段可特异性结合任何IL-17RA突变体或变体，该突变体或变体的氨基酸序列与SEQ ID NO:9约70％至99％相同，如美国专利6072033所述。在其他实施方式中，其抗体或抗原结合片段可特异性结合到包含翻译后修饰(例如，N-和O-连接糖基化)的IL-17RA蛋白质。

本文公开的抗体或其抗原结合片段包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:1的互补决定区1(CDR)氨基酸序列、SEQ ID NO:2的CDR2氨基酸序列和SEQ ID NO:3的CDR3氨基酸序列，并且所述轻链可变区包含SEQ ID NO:4的CDR1氨基酸序列、SEQ ID NO:5的CDR2氨基酸序列和SEQ ID NO:6的CDR3氨基酸序列。在其他实施方式中，其抗体或抗原结合片段可包含分别与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和/或SEQ ID NO:3至少90％相同的重链可变区CDR1、CDR2和CDR3氨基酸序列，以及分别与SEQ ID NO:4、SEQ IDNO:5和/或SEQ ID NO:6至少90％相同的轻链可变区CDR1、CDR2和CDR3氨基酸序列。

在一个实施方式中，重链可变区(V_H)CDR1氨基酸序列包含SEQ ID NO:1、基本上由其组成、或由其组成，V_H CDR2氨基酸序列包含SEQ ID NO:2、基本上由其组成、或由其组成，V_H CDR3氨基酸序列包含SEQ ID NO:3、基本上由其组成、或由其组成。当所公开抗体的V_HCDR1、V_H CDR2和V_H CDR3氨基酸序列分别基本上由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3组成时，CDR中可包括不会对其抗体或抗原结合片段产生实质性影响的额外组分(例如，促进纯化或分离的蛋白质部分，例如生物素)。当所公开抗体的V_H CDR1、V_H CDR2和V_H CDR3氨基酸序列分别由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3组成时，每个CDR不包含任何额外组分(即，不是CDR内源性的组分)。类似地，轻链可变区(V_L)CDR1氨基酸序列包含SEQ IDNO:4、基本上由其组成、或由其组成，V_L CDR2氨基酸序列包含SEQ ID NO:5、基本上由其组成、或由其组成，V_L CDR3氨基酸序列包含SEQ ID NO:6、基本上由其组成、或由其组成。当所公开抗体的V_L CDR1、V_L CDR2和V_L CDR3氨基酸序列分别基本上由SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6组成时，CDR中可包括不会对其抗体或抗原结合片段产生实质性影响的额外组分(例如，促进纯化或分离的蛋白质部分，例如生物素)。当所公开抗体的V_L CDR1、V_LCDR2和V_L CDR3氨基酸序列分别由SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6组成时，每个CDR不包含任何额外组分(即，不是CDR内源性的组分)。

在一些实施方式中，其抗体或抗原结合片段包含重链可变区(V_H)氨基酸序列，其包含SEQ ID NO:7、基本上由其组成、或由其组成，以及轻链可变区(V_L)氨基酸序列，其包含SEQ ID NO:8、基本上由其组成、或由其组成。当V_H氨基酸序列基本上由SEQ ID NO:7组成，且V_L氨基酸序列基本上由SEQ ID NO:8组成时，在重链或轻链可变区中可包括不会对其抗体或抗原结合片段产生实质性影响的额外组分(例如，促进纯化或分离的蛋白质部分，例如生物素)。当V_H氨基酸序列由SEQ ID NO:7组成且V_L氨基酸序列由SEQ ID NO:8组成时，重链和轻链可变区不包含任何额外组分(即，不是重链或轻链可变区内源性的组分)。

包含V_H氨基酸序列(包含SEQ ID NO:7)和V_L氨基酸序列(包含SEQ ID NO:8)的人单克隆抗体在美国由Ortho Detriologics，Inc.作为SILIQ^TM(布罗达单抗)上市，且在欧洲由LEO Pharma，Inc.作为

上市。布罗达单抗是人单克隆抗体和IL-17受体拮抗剂，最近被FDA批准用于治疗中重度银屑病。布罗达单抗与抑制银屑病和其他慢性炎症性疾病相关的炎症有关(Sherlock等人，Nat.Med.,18(7):1069-1076(2012))。

根据III期临床研究，布罗达单抗于2017年被批准用于治疗银屑病(Strober等人，Journal of the American Academy of Dermatology,72(5):AB224(2015)；Lebwohl等人，N.Eng.J.Med.,373(14):1318-1328(2015))。布罗达单抗耐受性良好，安全性良好。在布罗达单抗的III期研究中观察到的最常见的治疗紧急不良反应(TEAE)是鼻咽炎、上呼吸道感染、头痛和关节痛。也观察到中性粒细胞减少，但并未转化为严重感染。此外，中性粒细胞减少是轻微的、短暂的和可逆的。与安慰剂组相比，布罗达单抗治疗组观察到更多念珠菌感染。尽管自杀意念已被列为框式警告，但对布罗达单抗项目患者的进一步分析并未证明因果关系的证据(Lebwohl等人，Journal of the American Academy of Dermatology,78(1):81-89.e5(2018))。

本公开还提供了一种抗体或其抗原结合片段，其包含与SEQ ID NO:7至少90％相同(例如，至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同)的重链可变区氨基酸序列以及与SEQ ID NO:8至少90％相同(例如，至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％相同)的轻链可变区氨基酸序列。如本文所述，核酸或氨基酸序列“同一性”可通过将感兴趣的核酸或氨基酸序列与参考核酸或氨基酸序列进行比较来确定。同一性百分比是指感兴趣序列和参考序列之间相同(即同样)的核苷酸或氨基酸残基数除以最长序列的长度(即感兴趣序列或参考序列的长度，以较长者为准)。已知用于获得最佳对准和计算两个或多个序列之间的一致性的许多数学算法，并将其并入许多可用的软件程序中。此类程序的示例包括CLUSTAL-W、T-Coffee和ALIGN(用于核酸和氨基酸序列的对齐)、BLAST程序(例如BLAST2.1、BL2SEQ及其更高版本)和FASTA程序(如FASTA3x、FAS^TM和SSEARCH)(用于序列比对和序列相似性搜索)。序列比对算法也公开于例如Altschul等人，J.Molecular Biol.,215(3):403-410(1990)，Beigert等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,106(10):3770-3775(2009)，Durbin等人编辑，Biological Sequence Analysis:Probabilistic Models of Proteins and Nucleic Acids,Cambridge UniversityPress,Cambridge,UK(2009),Soding,Bioinformatics,21(7):951-960(2005)，Altschul等人，Nucleic Acids Res.,25(17):3389-3402(1997)，和Gusfield，Algorithms onStrings,Trees and Sequences,Cambridge University Press,Cambridge UK(1997)。

上述抗体或其抗原结合片段的一个或多个氨基酸可以用不同的氨基酸替换或取代，只要其抗体或抗原结合片段保持特异性结合IL-17RA的能力。氨基酸“替换”或“取代”是指在多肽序列中，给定位置或残基上的一个氨基酸被相同位置或残基上的另一个氨基酸替换。

氨基酸大致分为“芳香族”或“脂肪族”。芳香氨基酸包括芳香环。“芳香”氨基酸的示例包括组氨酸(H或His)、苯丙氨酸(F或Phe)、酪氨酸(Y或Tyr)和色氨酸(W或Trp)。非芳香族氨基酸被广泛归类为“脂肪族”。“脂肪族”氨基酸的示例包括甘氨酸(G或甘氨酸)、丙氨酸(A或Ala)、缬氨酸(V或Val)、亮氨酸(L或Leu)、异亮氨酸(I或Ile)、蛋氨酸(M或Met)、丝氨酸(S或Ser)、苏氨酸(T或Thr)、半胱氨酸(C或Cys)、脯氨酸(P或Pro)、谷氨酸(E或Glu)、天冬氨酸(A或Asp)、天冬酰胺(N或Asn)，谷氨酰胺(Q或Gln)、赖氨酸(K或Lys)和精氨酸(R或Arg)。

脂肪族氨基酸可分为四个亚组。“大脂肪族非极性亚组”由缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸组成。“脂肪族微极性亚组”由蛋氨酸、丝氨酸、苏氨酸和半胱氨酸组成。“脂肪族极性/带电亚组”由谷氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、赖氨酸和精氨酸组成。“小残基亚组”由甘氨酸和丙氨酸组成。带电/极性氨基酸组可分为三个亚组：由赖氨酸和精氨酸组成的“带正电亚组”，由谷氨酸和天冬氨酸组成的“带负电亚组”，以及由天冬酰胺和谷氨酰胺组成的“极性亚组”。

芳香族氨基酸可分为两个亚组：由组氨酸和色氨酸组成的“氮环亚组”和由苯丙氨酸和酪氨酸组成的“苯基亚组”。

氨基酸替换或取代可以是保守的、半保守的或非保守的。“保守氨基酸替换”或“保守突变”是指一种氨基酸被另一种具有共同性质的氨基酸取代。定义单个氨基酸之间共同特性的一种功能性方法是分析同源生物体相应蛋白质之间的氨基酸变化的标准化频率(Schulz和Schirmer，Principles of Protein Structure,Springer-Verlag,New York(1979))。根据这些分析，氨基酸组可以定义为组内的氨基酸优先相互交换，因此它们对整体蛋白质结构的影响最为相似(Schulz和Schirmer，同上)。

保守氨基酸替换的示例包括上述亚组内氨基酸的替换，例如，赖氨酸替换精氨酸且反之亦然以保持正电荷，谷氨酸替换天冬氨酸且反之亦然以保持负电荷，丝氨酸代表苏氨酸使得可以保持游离-OH，谷氨酰胺代表天冬酰胺使得可以保持游离-NH₂。

“半保守突变”包括上述同组内氨基酸的氨基酸替换，但不包括同亚组内的氨基酸替换。例如，天冬氨酸替代天冬酰胺，或天冬酰胺替代赖氨酸，涉及同组而不是同亚组的氨基酸。“非保守突变”涉及不同组之间的氨基酸替换，例如，赖氨酸替换色氨酸，或苯丙氨酸替换丝氨酸等。

此外，只要抗体或抗原结合片段保留特异性结合IL-17RA的能力，就可以将一种或多种氨基酸插入其抗体或抗原结合片段(例如，插入重链和/或轻链可变区氨基酸序列)。可将任意数量的任何合适氨基酸插入抗体或其抗原结合片段的氨基酸序列中。在这方面，至少一个氨基酸(例如，2个或更多、5个或更多、或10个或更多氨基酸)可插入抗体或其抗原结合片段的氨基酸序列中，但不超过20个氨基酸(例如，18个或更少、15个或更少、或12个或更少氨基酸)。例如，可将1-10个氨基酸(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸)插入抗体或其抗原结合片段的氨基酸序列中。在这方面，可以将氨基酸插入其抗体或抗原结合片段的任何合适位置。优选地，将氨基酸插入抗体或其抗原结合片段的CDR(例如，CDR1、CDR2或CDR3)中。

本发明抗体或其抗原结合片段不限于包含本文所述的特定氨基酸序列的多肽。实际上，其抗体或抗原结合片段可包含与本发明抗体或其抗原结合片段竞争以结合IL-17RA的任何重链多肽或轻链多肽。抗体竞争可以使用常规肽竞争分析法进行分析，例如ELISA、Western blot或免疫组织化学方法(参见美国专利4828981和8568992；以及Braitbard等人，Proteome Sci.,4:12(2006))。

本文所述的抗体或其抗原结合片段理想地为单克隆抗体。本文所使用的术语“单克隆抗体”是指由针对抗原上单个表位的单个B淋巴细胞克隆产生的抗体。单克隆抗体通常是使用杂交瘤技术生产的，如欧洲

和Milstein，Eur.J.Immunol.,5:511-519(1976)中首次描述的。也可以使用从噬菌体展示抗体库中分离的重组DNA方法(例如，参见美国专利4816567)制备单克隆抗体(例如，参见Clackson等人，Nature,352:624-628(1991))；和Marks等人，J.Mol.Biol.,222:581-597(1991))，或从携带全人免疫球蛋白系统的转基因小鼠中产生(参见，例如，Lonberg,Nat.Biotechnol.,23(9):1117-25(2005)和Lonberg,Handb.Exp.Pharmacol.,181:69-97(2008))。相比之下，“多克隆”抗体是由动物体内不同B细胞谱系分泌的抗体。多克隆抗体是识别同一抗原上多个表位的免疫球蛋白分子的集合。

IL-17RA结合抗体或其抗原结合片段可以是人抗体、非人抗体、嵌合抗体或人源化抗体。“嵌合”指包含人类和非人类区域的抗体或其片段。“人源化”抗体是包含人抗体支架和至少一个从非人抗体获得或衍生的CDR的单克隆抗体。非人抗体包括从任何非人动物分离的抗体，例如啮齿动物(例如小鼠或大鼠)。人源化抗体可包括从非人抗体获得或衍生的一个、两个或三个CDR。在某些实施方式中，IL-17RA结合抗体或其抗原结合片段为人单克隆抗体。

人抗体、非人抗体、嵌合抗体或人源化抗体可以通过任何方式获得，包括通过体外来源(如杂交瘤或重组产生抗体的细胞系)和体内来源(如啮齿类动物)。本领域已知产生抗体的方法，并在欧洲

和Milstein Eur.J.Immunol.,5:511-519(1976)；Harlow和Lane编辑,Antibodies:A Laboratory Manual,CSH Press(1988)；和Janeway等人编辑,Immunobiology,5th Ed.,Garland Publishing,New York,N.Y.(2001)中描述。

组合物和制剂

本公开还提供了一种组合物，其包含IL-17拮抗剂，例如本文所述的IL-17RA结合单克隆抗体或其抗原结合片段。该组合物理想地为药学上可接受(例如，生理学上可接受)的组合物，其包含载体、优选药学上可接受(例如，生理学上可接受)的载体以及其单克隆抗体或抗原结合片段。在本公开上下文中可以使用任何合适的载体，并且此类载体在本领域中是众所周知的。例如，该组合物可含有防腐剂，例如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯甲酸钠和苯扎氯铵。可选择使用两种或两种以上防腐剂的混合物。此外，缓冲剂可包括在组合物中。合适的缓冲剂包括例如谷氨酸(谷氨酸)、柠檬酸、柠檬酸钠、磷酸、磷酸钾和各种其他酸和盐。可任选地使用两种或两种以上缓冲剂的混合物。本领域技术人员已知制备用于医药用途的组合物的方法，并在例如Remington:The Science and Practice ofPharmacy,Lippincott Williams&Wilkins；第21版(2005年5月1日)中描述。

该组合物理想地包含“治疗有效量”的IL-17拮抗剂，例如IL-17RA结合单克隆抗体或其抗原结合片段。“治疗有效量”指达到预期治疗效果所需的剂量和时间段内的有效量。治疗有效量可以根据诸如个体的疾病状态、年龄、性别和体重以及抗体在个体中引发所需反应的能力等因素而变化。例如，本发明的IL-17RA结合单克隆抗体的治疗有效量是降低人的IL-17A和/或IL-17F生物活性和/或减少肝脏炎症的量。

可替代地，药理学和/或生理学效应可以是预防性的，即，该效应完全或部分预防疾病或其症状。在这方面，本发明方法包括施用“预防有效量”的IL-17拮抗剂(例如，IL-17RA结合抗体)。“预防有效量”指达到预期预防效果(例如，预防炎症、牛皮癣、非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)或非酒精性脂肪性肝炎(NASH))所需的剂量和时间段内的有效量。

例如，抗体的典型剂量可在0.1μg/kg至30mg/kg动物或人身体重量范围内；然而，低于或高于该示例性范围的剂量在本发明的范围内。例如，每日肠外剂量可为总体重的约0.2μg/kg至约25mg/kg(例如，约0.5μg/kg、约1.5μg/kg、约5μg/kg、约10μg/kg、约100μg/kg、约500μg/kg、约1mg/kg、约5mg/kg、约10mg/kg、约20mg/kg，或由前述任何两个值定义的范围)，优选地，从总体重的约0.1μg/kg到约10mg/kg(例如，约0.5μg/kg，约1μg/kg，约50μg/kg，约150μg/kg，约300μg/kg，约750μg/kg，约1.5mg/kg，约5mg/kg，或由前述任何两个值定义的范围)，更优选总体重的约1μg/kg至5mg/kg(例如，约3μg/kg、约15μg/kg、约75μg/kg、约300μg/kg、约900μg/kg、约1mg/kg、约2mg/kg、约4mg/kg，或由前述任何两个值定义的范围)。在特定实施方式中，剂量可在0.1μg/kg至约30mg/kg范围内，任选地在1μg/kg至约30mg/kg范围内或在10μg/kg至约5mg/kg范围内。在某些实施方式中，该方法包括施用单克隆抗体约150mg至约250mg(例如，约160mg、约170mg、约180mg、约190mg、约200mg、约210mg、约220mg、约230mg或约240mg)的总日剂量。

含有IL-17RA结合单克隆抗体的制剂如布罗达单抗如美国专利10072085所述，这些制剂在本公开的范围内。在一个实施方式中，本公开提供了一种制剂，其包含约100至150mg/mL IL-17RA结合单克隆抗体(例如，约110mg/mL、约120mg/mL、约130mg/mL或约140mg/mL抗体)、约5mM至约30mM谷氨酸盐(例如，约10mM、约15mM、约20mM或约25mM谷氨酸盐)，2-4％脯氨酸(例如，约2.5％、约3.0％或约3.5％脯氨酸)和0.001-0.02％(w/v)聚山梨酯20(例如，约0.005％、约0.05％或约0.015％脯氨酸)，pH值约为4.4至约5.2(例如，约4.5、约4.6、约4.7、约4.8、约4.9、约5.0或约5.1)。例如，该制剂可包含1.5mL(210mg)的布罗达单抗，其在pH 4.8下与10mM L-谷氨酸、3％(w/v)L-脯氨酸和0.001％(w/v)聚山梨酯20配制。

可通过定期评估接受治疗的患者来监测治疗或预防效果。对于几天或更长时间的重复施用，根据病情，可以重复治疗直到出现预期的疾病症状抑制。然而，其他剂量方案可能是有用的，并且在本发明的范围内。所需剂量可通过单次施用该组合物、多次施用该组合物或通过连续输注施用该组合物来递送，如下所述。

本公开还提供了编码上述抗体或其抗原结合片段的核酸序列。在某些实施方式中，核酸序列呈载体形式。例如，载体可以是质粒、附加体、粘粒、病毒载体(例如逆转录病毒或腺病毒)或噬菌体。合适的载体和载体制备方法在本领域是众所周知的(例如，参见Sambrook等人，Molecular Cloning,a Laboratory Manual,第4版,Cold Spring HarborPress,Cold Spring Harbor,N.Y.(2012),以及Ausubel等人，Current Protocols inMolecular Biology,Greene Publishing Associates and John Wiley&Sons,New York,N.Y.(1994))。

除了编码抗体或其抗原结合片段的核酸外，载体还希望包含表达控制序列，例如启动子、增强子、多聚腺苷酸化信号、转录终止子和内部核糖体进入位点(IRES)等，其提供编码核酸序列的抗体在宿主细胞中的表达。本领域已知示例性表达控制序列，并在例如Goeddel，Gene Expression Technology:Methods in Enzymology,Vol.185,AcademicPress,San Diego,Calif.(1990)中描述。

单克隆抗体或其抗原结合片段可在试剂盒，即预定量试剂的包装组合中提供，并且与用于执行抗体使用方法(例如，治疗受试者NAFLD的方法)的说明书一起。因此，本公开提供了包含本文所述单克隆抗体或抗原结合片段的试剂盒及其使用(例如，用于治疗肝脏炎症或NAFLD)说明书。说明书可以是纸质的或计算机可读的形式，例如磁盘、CD、DVD等。可替代地或者另外地，试剂盒可以包括校准器或控制器，和/或至少一个容器和/或缓冲器。理想情况下，试剂盒包含执行该方法所需的所有成分，即试剂、标准品、缓冲液、稀释剂等。试剂盒中可包括其他添加剂，例如稳定剂、缓冲液(例如封闭缓冲液或裂解缓冲液)等。各种试剂的相对量可以改变，以提供试剂溶液中的浓度，从而显著优化该方法。试剂可作为干粉(通常为冻干)提供，包括赋形剂，其在溶解时将提供具有适当浓度的试剂溶液。

治疗方法

本公开提供了一种在受试者中治疗非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)和/或肝脏炎症的方法，其包括向有需要的受试者施用有效量的上述组合物，所述组合物包含治疗有效量的IL-17拮抗剂例如IL-17RA结合单克隆抗体，以及药学上可接受的载体。如本文所用，术语“治疗”、“治愈”等指获得期望的药理学和/或生理学效果。优选地，该效应是治疗性的，即，该效应部分或完全治愈疾病和/或可归因于该疾病的不良症状。如上所述，本文使用的术语“非酒精性脂肪肝疾病”(NAFLD)是一个通用术语，指的是一系列肝脏疾病，其特征是非酒精摄入导致的肝细胞中储存过量脂肪。NAFLD是一种代谢紊乱，代表一种疾病谱，从没有特定肝损伤的脂肪变性(单纯性脂肪肝)到非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，其中炎症导致疤痕、纤维化，可能还有肝硬化(Dowman等人，Ailment PharmacolTher.,33(5):525-540(2011))。风险因素包括男性性别、年龄、肥胖、胰岛素抵抗和代谢综合征(Bellentani等人，Dig.Dis.,28:155-161(2010))。在美国，NAFLD是最常见的慢性肝病，到2020年可能将成为全球肝移植的主要原因(Musso等人，Ann.Med.,43:617-649(2011))。研究表明，银屑病患者的非酒精性脂肪肝疾病发病率高于对照组(Van der Voort等人，J Amer.Acad.Dermatol.,70:517-524(2014)；以及Prussick等人，J.Clin.Aesthet.Dermatol.,8(3):43-45(2015))。与无银屑病的患者相比，非酒精性脂肪肝疾病和银屑病患者的皮肤病更严重，且发生严重肝纤维化的风险更高(Miele等人，《国际肝病杂志》，51:778-786(2009))。

如上所述，一些NAFLD患者可发展为非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，这是一种侵袭性的脂肪肝疾病，以肝脏炎症为特征，并可能发展为肝硬化、肝细胞癌或肝衰竭(Dowman等人，同上；Prussick等人，同上)。这种损害与酗酒造成的损害相似。肥胖者患NASH的风险超过33％，而瘦人患NASH的风险低于5％(Prussick等人，同上)。区分患者是否患有脂肪肝或更严重的NASH的唯一方法是肝活检。NASH的高危患者可能是代谢综合征、肥胖(BMI>30)和糖尿病患者(Dowman等人，同上)。在一些实施方式中，本文所述方法可用于治疗伴有肝纤维化(NC-NASH+LF)的NAFLD、NASH或非肝硬化NASH，这些肝纤维化发生在同样患有银屑病的患者中。在其他实施方式中，所公开的方法可用于治疗未患银屑病的患者中的NAFLD、NASH或NC-NASH+LF。此外，所公开的方法可用于一般治疗肝脏炎症，尤其是与NAFLD、NASH或NAFLD的其他亚型相关的肝脏炎症。

包含有效量的IL-17RA结合单克隆抗体或其抗原结合片段的组合物可使用标准施用技术，包括口服、静脉注射、腹腔注射、皮下注射、肺部注射、透皮注射、肌肉注射、鼻内注射、口腔注射、舌下注射，或栓剂施用。该组合物优选适合于肠外施用。本文使用的术语“肠外”包括静脉注射、肌肉注射、皮下注射、直肠注射、阴道注射和腹腔注射。理想情况下，通过静脉注射、腹腔注射或皮下注射，使用外周全身递送将该组合物施用于哺乳动物。

给药频率取决于所用制剂中特定IL-17RA抗原结合蛋白的药代动力学参数。通常，临床医生会施用直到达到预期效果的剂量。因此，该组合物可作为单剂量，或作为两个或更多剂量(可能含有或可能不含相同量的单克隆抗体)随时间施用，或作为经由植入装置或导管的持续输注施用。本公开的方法不限于特定的给药频率。在一些实施方式中，该组合物可每日施用一次，但优选在治疗期间至少每周施用一次。在其他实施方式中，该方法最初可包括每周施用一次该组合物，随后每两周施用一次该组合物。例如，该组合物可在三周内每周施用一次，然后在12周内每两周施用一次，总治疗期为15周。可替代地，可以每隔一周在施用开始之日进行连续施用。

施用包含IL-17RA结合单克隆抗体的组合物的治疗期不受特别限制，然而，治疗期期望为10周或更长、30周或更长，或52周(即1年)或更长。在一个实施方式中，治疗周期约为10-20周(例如，11、12、13、14、15、16、17、18或19周)。此外，治疗期可包括休息期。本领域普通技术人员可进一步细化适当的给药方案和治疗周期。例如，本文所述组合物的剂量可在时间“0”(即第一次施用)、时间“0”(即第二次施用)后一周、时间“0”(即第三次施用)后两周通过皮下注射施用，然后在第三次施用后每两周施用一次。可以每两周施用一次该组合物，为期12周，总治疗期为15周。

一旦给哺乳动物(例如，交叉反应的人)施用，可通过本领域已知的任何合适方法测量IL-17拮抗剂，例如公开的IL-17RA结合抗体或其抗原结合片段的生物活性和治疗效果。例如，可以通过测定受试者体内一种或多种肝酶的水平来评估生物活性，因为肝酶的增加通常与肝脏炎症和纤维化有关。因此，本文所述的方法理想地导致肝酶水平降低。与在公开的方法开始之前进行的初始测量(即基线)相比，肝酶的水平可以减少任何合适的量。例如，与基线相比，一种或多种肝酶的水平可降低20％或更多、30％或更多、40％或更多、50％或更多、60％或更多、70％或更多、80％或更多、90％或更多或100％。可测量任何合适的肝酶或酶的组合，以评估所述方法的治疗效果。在这方面，标准肝面板包括总胆红素、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、AST/ALT比值、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)和白蛋白的测量。在一些实施方式中，本文所述方法导致受试者中天冬氨酸氨基转移酶(AST)和/或丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平降低。可测量炎症或肝功能的其他生物标记物(生物标记物)以评估治疗效果，包括例如γ-谷氨酰转移酶(GGT)、乳酸脱氢酶(LDH)、c-反应蛋白(CRP)、载脂蛋白、G2巨球蛋白、透明质酸(HA)、结合珠蛋白、Ⅲ型前胶原氨基末端前肽(PIIINP)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)、α-2巨球蛋白(A2M)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素水平和血脂。在一个实施方式中，本文所述方法导致受试者中c-反应蛋白(CRP)水平降低。与在所公开的方法开始之前进行的初始测量(即基线)相比，CRP水平可以降低任何合适的量。例如，与基线相比，CRP水平可能降低20％或更多、30％或更多、40％或更多、50％或更多、60％或更多、70％或更多、80％或更多、90％或更多或100％。

IL-17拮抗剂，例如IL-17RA结合抗体或其抗原结合片段可单独施用或与其他药物或制剂组合施用。例如，IL-17拮抗剂可与其他药物联合使用，用于治疗或预防NAFLD或NASH。在这方面，IL-17拮抗剂可与至少一种其他抗炎剂结合使用，包括例如皮质类固醇(例如强的松和氟替卡松)、非甾体抗炎药(NSAID)(例如阿司匹林、布洛芬和萘普生)，和其他生物制剂(例如英夫利昔单抗、阿达木单抗、依那西普、阿来昔普特、乌司他单抗、伊克珠单抗、舍库单抗和/或古塞尔库单抗)。可在施用包含IL-17拮抗剂的组合物之前、同时或之后施用附加剂或药物。

以下实施例进一步说明了本发明，但当然不应被解释为以任何方式限制其范围。

实施例1

本实施例描述了布罗达单抗对具有早期非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)潜在指标的银屑病患者中炎症标志物的48周汇总分析。

本研究的目的是评估接受布罗达单抗治疗的具有银屑病和早期NAFLD指标的患者中炎症标志物c-反应蛋白(CRP)的变化。

数据来自两个相同设计、随机、双盲的银屑病试验。在基线，第4周，然后每12周时，使成人皮下注射布罗达单抗(每2周210mg)或乌司他单抗(治疗性人免疫球蛋白(Ig)G1-κ单抗，其结合白细胞介素(IL)-12和IL-2)45mg(体重)≤100kg)或90mg(>100kg)，持续48周。在第16周，疗效反应不足的乌司他单抗治疗患者可以改用布罗达单抗(每2周210mg)。对根据基线纤维化指标(天冬氨酸转氨酶(AST)/丙氨酸转氨酶(ALT)比值≥1.4，AST>40U/L，纤维化-4(FIB4)评分>1.3)分组的患者进行CRP变化分析。

在AST/ALT≥1.4亚组中，乌司他单抗/布罗达单抗治疗组(16.2mg/L(n＝6))与仅乌司他单抗治疗组(2.8mg/L(n＝56)；P＝0.01)相比，第48周时CRP较基线显著降低)。此外，在AST>40(3.3(n＝10)与0.1mg/L(n＝41))和FIB4评分>1.3(2.3(n＝18)与0.8mg/L(n＝85))亚组中，乌司他单抗/布罗达单抗组与乌司他单抗组相比，CRP从基线水平的下降在数值上更大。

在接受布罗达单抗治疗的早期NAFLD人群中，对CRP水平降低的长期事后观察表明，布罗达单抗可能具有降低肝脏炎症的活性。

实施例2

本实施例描述了一项IIa期临床研究，旨在评估布罗达单抗对非肝硬化非酒精性脂肪性肝炎(NC-NASH+LF)患者的安全性和有效性。

一项多中心随机、双盲、安慰剂对照的24周IIa期研究将评估布罗达单抗与安慰剂相比在NC-NASH+LF受试者中的抗炎和抗纤维化作用，以及安全性和耐受性。NC-NASH+LF受试者将根据美国肝病研究协会(AASLD)标准、VCTE估计F1-F3纤维化(2.88-4.67kPa)、磁共振成像(MRI)-质子密度脂肪分数(PDFF)-估计肝脂肪>5％、体重指数(BMI)>25kg/m²、以及肝酶升高(男性和女性ALT分别>30和>19)来鉴定。

获得知情同意后，将抽取血液，以确定受试者是否符合纳入研究的标准。本研究期间的所有实验室将在禁食状态下抽取，并送往研究指定的中心实验室进行处理。有生育潜力的妇女将接受血清或尿液妊娠试验。

将招募肝酶升高的受试者，因为测量的结果之一是肝酶的改善。对于肝脏炎症和肝脏合成功能的证据，实验室将包括：具有差异的全血计数(CBC)、基本代谢谱(BMP)、凝血酶原时间(PT)/INR、肝面板、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、乳酸脱氢酶(LDH)、c-反应蛋白(CRP)、载脂蛋白、G2巨球蛋白、透明质酸(HA)，结合珠蛋白、Ⅲ型前胶原氨基末端前肽(PIIINP)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)和α2巨球蛋白(A2M)。还将进行代谢检查，包括糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素水平和血脂水平。胰岛素抵抗将使用胰岛素抵抗的稳态模型评估(HOMA-IR)进行计算。此外，还将抽取血液，以排除肝病的其他原因(如病毒性肝炎、遗传性血色素沉着症、自身免疫性肝病、α-1-抗胰蛋白酶缺乏症和威尔逊病，如果临床合适)。如果受试者在提供知情同意书之前的6个月内没有进行肝脏扫描，将抽血检测甲胎蛋白(AFP)以排除肝癌。

以下综合评分将从可用的血液检查中计算，以确定纤维化的基线程度：AST/ALT比率、AST/血小板比率指数(APRI)评分、BAAT评分、BARD评分、增强型肝纤维化(ELF)试验、纤维测定仪、纤维化-4(FIB-4)评分、肝细胞计数和非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)纤维化评分(NFS)。

将抽取血液用于探索终点(Pro-C3(N末端III型胶原前肽，纤维化标记物)，以及CCR2和CCR5(促炎症和促纤维化标记物))。

为了评估肝脏硬度和肝脏脂肪变性的程度，每位受试者将接受带受控衰减参数(CAP)的VCTE、MRI PDFF和多扫描(如有的话)。

每位患者都将进行一次完整的体检、结构化访谈(收集有关酒精消费、处方药和非处方药以及草药补充剂的数据)，并回顾其肝脏成像和医疗记录。

总共有60名受试者在美国大约10个临床地点被诊断为NAFLD，符合所有纳入标准且没有一个排除标准的他们将被纳入本临床研究。从开始注册到完成最终科目的EOS评估，预计研究持续时间为52周。对于每名受试者，从基线检查到EOT访谈的研究药物治疗估计时间为15周。符合资格标准并给予书面知情同意的受试者将以1:1的比例随机分配到两个治疗组中的一个。一组接受布罗达单抗，另一组接受安慰剂。每次访谈时，将记录不良反应(AE)和严重不良反应(SAE)，并对病历和伴随用药进行审查。

布罗达单抗将以一次性预填充注射器提供，注射器中含有1.5mL(210mL)布罗达单抗，其配方为10mM L-谷氨酸盐、3％(w/v)L-脯氨酸和0.001％(w/v)聚山梨酸盐20，每个pH值为4.8。注射器带有一个27G1/2英寸的针头，并在上方贴有研究特定信息的标签。本II期研究的主动臂的拟议给药方案为：布罗达单抗210mg SC，每周一次，持续三周，然后每两周一次，持续12周。建议治疗的总持续时间为15周。布罗达单抗将与由注射用无菌生理盐水组成的安慰剂进行比较。安慰剂的给药方案将与布罗达单抗的给药方案相匹配。无菌生理盐水将以10mL单剂量小瓶的形式提供，并使用提供的27克1/2英寸针头，使用无菌技术将1.5mL的生理盐水注入3mL注射器。

在整个治疗期间，每四周重复一次实验室检查。治疗结束后一周(EOT(16周))，受试者将进行空腹血液检查(CBC差异、BMP、PT/INR、血清或尿液妊娠试验(适用于有生育潜力的女性)、GGT、LDH、CRP、载脂蛋白、G2巨球蛋白、HA、结合珠蛋白、PIIINP、TIMP-1、A2M、糖化血红蛋白、空腹胰岛素水平和脂质谱)。胰岛素抵抗将再次使用HOMA-IR计算。还将为探索结果抽血。临床研究的示意图如图1所示。

主要疗效终点是EOT(16周)与基线相比肝酶(AST和ALT)的改善。探索性终点包括以下内容：(a)与基线相比，在使用布罗达单抗治疗16周后，肝脏脂肪有所改善。肝脏脂肪将通过MRI-PDFF(肝脏脂肪的非侵入性标记物)和带CAP的VCTE进行测量；(b)与基线水平相比，布罗达单抗治疗后16周时肝纤维化的改善。这将通过多种非侵入性工具进行测量，包括Multiscan(如可用)、VCTE、AST/ALT比值计算、APRI评分、BAAT评分、BARD评分、ELF测试、FIB-4评分、纤维测定仪、肝细胞计数和NFS，(c)与基线相比，布罗达单抗治疗后16周时Pro-C3(N-末端III型胶原前肽，纤维化标记物)的变化；(d)与基线相比，在使用布罗达单抗治疗后16周时CCR2和CCR5(促炎症和促纤维化标记物)的变化。对于所有探索性终点，将按治疗组总结从基线到EOT(16周)的平均变化。将使用ANCOVA模型对治疗和研究中心的影响以及作为协变量的基线值，对基线均值变化的治疗差异进行测试。

安全性终点包括(a)治疗紧急不良反应(TEAE)和严重不良反应(SAE)的发生率；(b)临床实验室结果与基线相比的变化，以及(c)生命体征与基线相比的变化。安全性评估将基于不良反应(AE)的发生率、强度和类型，以及生命体征和临床实验室结果的变化。

一般来说，统计检验将在p＝0.05的显著性水平上进行双面检验。所有连续变量将使用描述性统计进行总结；N、平均值、标准差、中值、最大值和最小值。所有分类变量将使用频率计数和百分比进行汇总。基线值定义为第一剂研究药物前的最后可用值。治疗结束值(EOT(16周)值)定义为治疗期结束后第16周时进行的实验室检查和评估。

序列

SEQ ID NO:1(VH CDR1):RYGIS

SEQ ID NO:2(VH CDR2):WISTYSGNTNYAQKLQ

SEQ ID NO:3(VH CDR3):RQLYFDY

SEQ ID NO:4(VL CDR1):RASQSVSSNLA

SEQ ID NO:5(VL CDR2):DASTRAT

SEQ ID NO:6(VL CDR3):QQYDNWPLT

SEQ ID NO:7(VH):QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTRYGISWVRQAPGQGLEWMGWISTYSGNTNYAQKLQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARRQLYFDYWGQGTLVTVSS

SEQ ID NO:8(VL):EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSNLAWFQQKPGQAPRPLIYDASTRATGVPARFSGSGSGTDFTLTISSLQSEDFAVYYCQQYDNWPLTFGGGTKVEIK

SEQ ID NO:9(IL-17RA):

MGAARSPPSAVPGPLLGLLLLLLGVLAPGGASLRLLDHRALVCSQPGLNCTVKNSTCLDDSWIHPRNLTPSSPKDLQIQLHFAHTQQGDLFPVAHIEWTLQTDASILYLEGAELSVLQLNTNERLCVRFEFLSKLRHHHRRWRFTFSHFVVDPDQEYEVTVHHLPKPIPDGDPNHQSKNFLVPDCEHARMKVTTPCMSSGSLWDPNITVETLEAHQLRVSFTLWNESTHYQILLTSFPHMENHSCFEHMHHIPAPRPEEFHQRSNVTLTLRNLKGCCRHQVQIQPFFSSCLNDCLRHSATVSCPEMPDTPEPIPDYMPLWVYWFITGISILLVGSVILLIVCMTWRLAGPGSEKYSDDTKYTDGLPAADLIPPPLKPRKVWIIYSADHPLYVDVVLKFAQFLLTACGTEVALDLLEEQAISEAGVMTWVGRQKQEMVESNSKIIVLCSRGTRAKWQALLGRGAPVRLRCDHGKPVGDLFTAAMNMILPDFKRPACFGTYVVCYFSEVSCDGDVPDLFGAAPRYPLMDRFEEVYFRIQDLEMFQPGRMHRVGELSGDNYLRSPGGRQLRAALDRFRDWQVRCPDWFECENLYSADDQDAPSLDEEVFEEPLLPPGTGIVKRAPLVREPGSQACLAIDPLVGEEGGAAVAKLEPHLQPRGQPAPQPLHTLVLAAEEGALVAAVEPGPLADGAAVRLALAGEGEACPLLGSPGAGRNSVLFLPVDPEDSPLGSSTPMASPDLLPEDVREHLEGLMLSLFEQSLSCQAQGGCSRPAMVLTDPHTPYEEEQRQSVQSDQGYISRSSPQPPEGLTEMEEEEEEEQDPGKPALPLSPEDLESLRSLQRQLLFRQLQKNSGWDTMGSESEGPSA

SEQ ID NO:10(布罗达单抗重链):

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTRYGISWVRQAPGQGLEWMGWISTYSGNTNYAQKLQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARRQLYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK

SEQ ID NO:11(布罗达单抗轻链):

EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSNLAWFQQKPGQAPRPLIYDASTRATGVPARFSGSGSGTDFTLTISSLQSEDFAVYYCQQYDNWPLTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

本文引用的所有参考文献(包括出版物、专利申请和专利)均以引用方式并入本文，其程度与各参考文献单独明确表示以引用方式并入并在本文中完整阐述的程度相同。

在描述本发明的上下文(尤其是在以下权利要求的上下文中)中使用术语“一个”和“一种”和“所述”和“至少一个”以及类似的指代物应被解释为同时涵盖单数和复数，除非本文中另有说明或与上下文明显矛盾。术语“至少一个”后跟一个或多个项目的列表(例如，“A和B中的至少一个”)的使用应解释为指从所列项目(A或B)中选择的一个项目或两个或更多个所列项目(A和B)的任何组合，除非本文另有说明或与上下文明显矛盾。除非另有说明，否则术语“包含”、“具有”、“包括”和“含有”应解释为开放式术语(即，意思是“包括但不限于”)。除非本文另有说明，否则本文中对数值范围的叙述仅旨在作为单独指代该范围内的每个单独数值的简写方法，并且每个单独数值并入本说明书中，如同其在本文中单独叙述一样。除非本文另有说明或上下文另有明确矛盾，否则本文所述的所有方法均可按任何适当顺序执行。使用本文提供的任何及所有例示或示例性语言(例如，“例如”)仅旨在更好地说明本发明，且不构成对本发明范围的限制，除非另有要求。说明书中的任何语言都不应被解释为表明任何非权利要求保护的元素对本发明的实施至关重要。

本文描述了本发明的优选实施方式，包括发明人已知的用于实施本发明的最佳模式。在阅读前述描述后，这些优选实施方式的变化对于本领域的普通技术人员来说可能变得显而易见。发明人能预期熟练的技术人员在适当的情况下采用这种变化，并且发明人希望本发明在本文具体描述的情况之外实施。因此，本发明包括适用法律允许的对本发明所附权利要求所述主题的所有修改和等效内容。此外，除非本文中另有说明或上下文另有明确矛盾，否则本发明涵盖上述元素在其所有可能变体中的任何组合。

序列表

<110> 博世健康爱尔兰有限公司

<120> 使用IL-17RA抗体治疗非酒精性脂肪肝疾病（NAFLD）的方法

<130> B16826WO-HG

<150> US 62/898,903

<151> 2019-09-11

<160> 11

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VH CDR1

<400> 1

Arg Tyr Gly Ile Ser

1 5

<210> 2

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VH CDR2

<400> 2

Trp Ile Ser Thr Tyr Ser Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu Gln

1 5 10 15

<210> 3

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VH CDR3

<400> 3

Arg Gln Leu Tyr Phe Asp Tyr

1 5

<210> 4

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VL CDR1

<400> 4

Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn Leu Ala

1 5 10

<210> 5

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VL CDR2

<400> 5

Asp Ala Ser Thr Arg Ala Thr

1 5

<210> 6

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VL CDR3

<400> 6

Gln Gln Tyr Asp Asn Trp Pro Leu Thr

1 5

<210> 7

<211> 116

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VH

<400> 7

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr

20 25 30

Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Ser Thr Tyr Ser Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg Gln Leu Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val

100 105 110

Thr Val Ser Ser

115

<210> 8

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VL

<400> 8

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn

20 25 30

Leu Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Pro Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Asn Trp Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 9

<211> 866

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> IL-17RA

<400> 9

Met Gly Ala Ala Arg Ser Pro Pro Ser Ala Val Pro Gly Pro Leu Leu

1 5 10 15

Gly Leu Leu Leu Leu Leu Leu Gly Val Leu Ala Pro Gly Gly Ala Ser

20 25 30

Leu Arg Leu Leu Asp His Arg Ala Leu Val Cys Ser Gln Pro Gly Leu

35 40 45

Asn Cys Thr Val Lys Asn Ser Thr Cys Leu Asp Asp Ser Trp Ile His

50 55 60

Pro Arg Asn Leu Thr Pro Ser Ser Pro Lys Asp Leu Gln Ile Gln Leu

65 70 75 80

His Phe Ala His Thr Gln Gln Gly Asp Leu Phe Pro Val Ala His Ile

85 90 95

Glu Trp Thr Leu Gln Thr Asp Ala Ser Ile Leu Tyr Leu Glu Gly Ala

100 105 110

Glu Leu Ser Val Leu Gln Leu Asn Thr Asn Glu Arg Leu Cys Val Arg

115 120 125

Phe Glu Phe Leu Ser Lys Leu Arg His His His Arg Arg Trp Arg Phe

130 135 140

Thr Phe Ser His Phe Val Val Asp Pro Asp Gln Glu Tyr Glu Val Thr

145 150 155 160

Val His His Leu Pro Lys Pro Ile Pro Asp Gly Asp Pro Asn His Gln

165 170 175

Ser Lys Asn Phe Leu Val Pro Asp Cys Glu His Ala Arg Met Lys Val

180 185 190

Thr Thr Pro Cys Met Ser Ser Gly Ser Leu Trp Asp Pro Asn Ile Thr

195 200 205

Val Glu Thr Leu Glu Ala His Gln Leu Arg Val Ser Phe Thr Leu Trp

210 215 220

Asn Glu Ser Thr His Tyr Gln Ile Leu Leu Thr Ser Phe Pro His Met

225 230 235 240

Glu Asn His Ser Cys Phe Glu His Met His His Ile Pro Ala Pro Arg

245 250 255

Pro Glu Glu Phe His Gln Arg Ser Asn Val Thr Leu Thr Leu Arg Asn

260 265 270

Leu Lys Gly Cys Cys Arg His Gln Val Gln Ile Gln Pro Phe Phe Ser

275 280 285

Ser Cys Leu Asn Asp Cys Leu Arg His Ser Ala Thr Val Ser Cys Pro

290 295 300

Glu Met Pro Asp Thr Pro Glu Pro Ile Pro Asp Tyr Met Pro Leu Trp

305 310 315 320

Val Tyr Trp Phe Ile Thr Gly Ile Ser Ile Leu Leu Val Gly Ser Val

325 330 335

Ile Leu Leu Ile Val Cys Met Thr Trp Arg Leu Ala Gly Pro Gly Ser

340 345 350

Glu Lys Tyr Ser Asp Asp Thr Lys Tyr Thr Asp Gly Leu Pro Ala Ala

355 360 365

Asp Leu Ile Pro Pro Pro Leu Lys Pro Arg Lys Val Trp Ile Ile Tyr

370 375 380

Ser Ala Asp His Pro Leu Tyr Val Asp Val Val Leu Lys Phe Ala Gln

385 390 395 400

Phe Leu Leu Thr Ala Cys Gly Thr Glu Val Ala Leu Asp Leu Leu Glu

405 410 415

Glu Gln Ala Ile Ser Glu Ala Gly Val Met Thr Trp Val Gly Arg Gln

420 425 430

Lys Gln Glu Met Val Glu Ser Asn Ser Lys Ile Ile Val Leu Cys Ser

435 440 445

Arg Gly Thr Arg Ala Lys Trp Gln Ala Leu Leu Gly Arg Gly Ala Pro

450 455 460

Val Arg Leu Arg Cys Asp His Gly Lys Pro Val Gly Asp Leu Phe Thr

465 470 475 480

Ala Ala Met Asn Met Ile Leu Pro Asp Phe Lys Arg Pro Ala Cys Phe

485 490 495

Gly Thr Tyr Val Val Cys Tyr Phe Ser Glu Val Ser Cys Asp Gly Asp

500 505 510

Val Pro Asp Leu Phe Gly Ala Ala Pro Arg Tyr Pro Leu Met Asp Arg

515 520 525

Phe Glu Glu Val Tyr Phe Arg Ile Gln Asp Leu Glu Met Phe Gln Pro

530 535 540

Gly Arg Met His Arg Val Gly Glu Leu Ser Gly Asp Asn Tyr Leu Arg

545 550 555 560

Ser Pro Gly Gly Arg Gln Leu Arg Ala Ala Leu Asp Arg Phe Arg Asp

565 570 575

Trp Gln Val Arg Cys Pro Asp Trp Phe Glu Cys Glu Asn Leu Tyr Ser

580 585 590

Ala Asp Asp Gln Asp Ala Pro Ser Leu Asp Glu Glu Val Phe Glu Glu

595 600 605

Pro Leu Leu Pro Pro Gly Thr Gly Ile Val Lys Arg Ala Pro Leu Val

610 615 620

Arg Glu Pro Gly Ser Gln Ala Cys Leu Ala Ile Asp Pro Leu Val Gly

625 630 635 640

Glu Glu Gly Gly Ala Ala Val Ala Lys Leu Glu Pro His Leu Gln Pro

645 650 655

Arg Gly Gln Pro Ala Pro Gln Pro Leu His Thr Leu Val Leu Ala Ala

660 665 670

Glu Glu Gly Ala Leu Val Ala Ala Val Glu Pro Gly Pro Leu Ala Asp

675 680 685

Gly Ala Ala Val Arg Leu Ala Leu Ala Gly Glu Gly Glu Ala Cys Pro

690 695 700

Leu Leu Gly Ser Pro Gly Ala Gly Arg Asn Ser Val Leu Phe Leu Pro

705 710 715 720

Val Asp Pro Glu Asp Ser Pro Leu Gly Ser Ser Thr Pro Met Ala Ser

725 730 735

Pro Asp Leu Leu Pro Glu Asp Val Arg Glu His Leu Glu Gly Leu Met

740 745 750

Leu Ser Leu Phe Glu Gln Ser Leu Ser Cys Gln Ala Gln Gly Gly Cys

755 760 765

Ser Arg Pro Ala Met Val Leu Thr Asp Pro His Thr Pro Tyr Glu Glu

770 775 780

Glu Gln Arg Gln Ser Val Gln Ser Asp Gln Gly Tyr Ile Ser Arg Ser

785 790 795 800

Ser Pro Gln Pro Pro Glu Gly Leu Thr Glu Met Glu Glu Glu Glu Glu

805 810 815

Glu Glu Gln Asp Pro Gly Lys Pro Ala Leu Pro Leu Ser Pro Glu Asp

820 825 830

Leu Glu Ser Leu Arg Ser Leu Gln Arg Gln Leu Leu Phe Arg Gln Leu

835 840 845

Gln Lys Asn Ser Gly Trp Asp Thr Met Gly Ser Glu Ser Glu Gly Pro

850 855 860

Ser Ala

865

<210> 10

<211> 442

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 布罗达单抗重链

<400> 10

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr

20 25 30

Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Ser Thr Tyr Ser Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg Gln Leu Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val

100 105 110

Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala

115 120 125

Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu

130 135 140

Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly

145 150 155 160

Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser

165 170 175

Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe

180 185 190

Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr

195 200 205

Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro

210 215 220

Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro

225 230 235 240

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys

245 250 255

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp

260 265 270

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu

275 280 285

Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val

290 295 300

His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn

305 310 315 320

Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly

325 330 335

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu

340 345 350

Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

355 360 365

Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn

370 375 380

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

385 390 395 400

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn

405 410 415

Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

420 425 430

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440

<210> 11

<211> 214

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 布罗达单抗轻链

<400> 11

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn

20 25 30

Leu Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Pro Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Asn Trp Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

Claims (30)

1.一种治疗受试者的非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)的方法，其包括向所述受试者施用包含治疗有效量的与白细胞介素17受体A(IL-17RA)特异性结合的单克隆抗体或其抗原结合片段、以及药学上可接受的载体的组合物，从而治疗所述受试者的NAFLD。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述受试者患有非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述受试者患有非肝硬化非酒精性脂肪性肝炎伴肝纤维化(NC-NASH+LF)。

4.一种减少有需要的受试者的肝脏炎症的方法，其包括向所述受试者施用包含治疗有效量的与白细胞介素17受体A(IL-17RA)特异性结合的单克隆抗体或其抗原结合片段、以及药学上可接受的载体的组合物，从而减少所述受试者的肝脏炎症。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述受试者患有非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)或非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述单克隆抗体包含：

(a)重链可变区，其包含SEQ ID NO:1的互补决定区1(CDR)氨基酸序列、SEQ ID NO:2的CDR2氨基酸序列和SEQ ID NO:3的CDR3氨基酸序列；和

(b)轻链可变区，其包含SEQ ID NO:4的互补决定区1(CDR)氨基酸序列、SEQ ID NO:5的CDR2氨基酸序列和SEQ ID NO:6的CDR3氨基酸序列。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述单克隆抗体包含SEQ ID NO:7的重链可变区氨基酸序列和SEQ ID NO:8的轻链可变区氨基酸序列。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述受试者患有银屑病。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其中所述组合物包含约150mg至约250mg的所述单克隆抗体。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述组合物包含约210mg的所述单克隆抗体。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述组合物包含用约10mM L-谷氨酸、约3％(w/v)L-脯氨酸和约0.001％(w/v)聚山梨酯20配制的约210mg布罗达单抗，并且所述组合物的pH值为约4.8。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的方法，其中在治疗期内，所述组合物以至少每周一次施用。

13.根据权利要求12所述的方法，其中在15周的治疗期内，所述组合物以三周内每周一次，随后12周内每两周一次施用。

14.根据权利要求1-13中任一项所述的方法，其中所述方法导致所述受试者的肝酶水平降低和/或c-反应蛋白(CRP)水平降低。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述方法导致所述受试者的天冬氨酸转氨酶(AST)和/或丙氨酸转氨酶(ALT)水平降低。

16.与白细胞介素17受体A(IL-17RA)特异性结合的单克隆抗体或其抗原结合片段用于治疗受试者的非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)的用途，其中所述抗体或抗原结合片段包含在包含药学上可接受的载体的组合物中，并且其中所述抗体或抗原结合片段优选以治疗有效量施用于所述受试者。

17.根据权利要求16所述的所用单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述受试者患有非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。

18.根据权利要求17所述的所用单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述受试者患有非肝硬化非酒精性脂肪性肝炎伴肝纤维化(NC-NASH+LF)。

19.与白细胞介素17受体A(IL-17RA)特异性结合的单克隆抗体或其抗原结合片段用于减少有需要的受试者的肝脏炎症的用途，其中所述抗体或抗原结合片段包含在包含药学上可接受的载体的组合物中，并且其中所述抗体或抗原结合片段优选以治疗有效量施用于所述受试者。

20.根据权利要求19所述的所用单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述受试者患有非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)或非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。

21.根据权利要求16-20中任一项所述的所用单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述单克隆抗体包含：

(a)重链可变区，其包含SEQ ID NO:1的互补决定区1(CDR)氨基酸序列、SEQ ID NO:2的CDR2氨基酸序列和SEQ ID NO:3的CDR3氨基酸序列；和

(b)轻链可变区，其包含SEQ ID NO:4的互补决定区1(CDR)氨基酸序列、SEQ ID NO:5的CDR2氨基酸序列和SEQ ID NO:6的CDR3氨基酸序列。

22.根据权利要求21所述的所用单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述单克隆抗体包含SEQ ID NO:7的重链可变区氨基酸序列和SEQ ID NO:8的轻链可变区氨基酸序列。

23.根据权利要求16至22中任一项所述的所用单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述受试者患有银屑病。

24.根据权利要求16至23中任一项所述的所用单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述组合物包含约150mg至约250mg的所述单克隆抗体。

25.根据权利要求24所述的所用单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述组合物包含约210mg的所述单克隆抗体。

26.根据权利要求16至25中任一项所述的所用单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述组合物包含用约10mM L-谷氨酸、约3％(w/v)L-脯氨酸和约0.001％(w/v)聚山梨酯20配制的约210mg布罗达单抗，并且所述组合物的pH值为约4.8。

27.根据权利要求16至26中任一项所述的所用单克隆抗体或其抗原结合片段，其中在治疗期内，所述组合物以至少每周一次施用。

28.根据权利要求27所述的所用单克隆抗体或其抗原结合片段，其中在15周的治疗期内，所述组合物以三周内每周一次，随后12周内每两周一次施用。

29.根据权利要求16至28中任一项所述的所用单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述方法导致所述受试者的肝酶水平降低和/或c-反应蛋白(CRP)水平降低。

30.根据权利要求29所述的所用单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述方法导致所述受试者的天冬氨酸转氨酶(AST)和/或丙氨酸转氨酶(ALT)水平降低。

Images