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CN105842240A - 一种半定量检测早期慢性肾病的唾液测试卡及其方法 - Google Patents

一种半定量检测早期慢性肾病的唾液测试卡及其方法 Download PDF

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CN105842240A
CN105842240A CN201610330477.5A CN201610330477A CN105842240A CN 105842240 A CN105842240 A CN 105842240A CN 201610330477 A CN201610330477 A CN 201610330477A CN 105842240 A CN105842240 A CN 105842240A
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李智
李瑞红
费海波
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Sichuan University
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    • G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
    • G01N21/77—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator
    • G01N21/78—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator producing a change of colour

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Abstract

本发明为一种半定量检测早期慢性肾病的唾液测试卡及其方法，该测试卡同时集成三种指标：唾液中尿素氮、胱抑素C与β2微球蛋白的检测，通过分别与测试卡上的相应部分发生化学反应后所得到的不同颜色和标准色卡的对照来同时半定量判断三种指标的浓度范围，进而检测早期肾功能。该测试卡还包含有二维码，可通过扫描获得试纸的标准色谱、厂商、使用说明等。唾液中的这三种指标与血清中的相关指标具有很好的相关性，使用唾液作为样液，快速简单，排除了细菌干扰问题，可用于医院急诊或者家庭内部使用，特别是婴幼儿、老人和危重患者的肾功能检查，同时减轻了病人静脉穿刺的痛苦。

Description

一种半定量检测早期慢性肾病的唾液测试卡及其方法
技术领域
本发明属于疾病体外诊断范畴，特别涉及一种半定量检测早期慢性肾病的唾液测试卡及其方法，可用于医院急诊，特别是婴幼儿、老人和危重患者的肾功能检查。
背景技术
目前，慢性病的流行率、发病率每年都在不断地上升，½的慢性病患者都伴随有并发症的发生。CKD是全球范围内普遍存在的一个健康问题。在这些CKD病人中，有44%的是由糖尿病引起，86%的患者伴随有至少一种并发症，大部分CKD患者有心血管疾病。此外，终末期肾病（透析）病人的花费远大于全部医疗保健费用的2%。而尿素氮、胱抑素C、β2微球蛋白作为肾功能的主要指标，临床上经常采用这三者检测肾功能。
国外肾脏病杂志研究表明胱抑素C无肾小管分泌，无关性别和人种，可以检测出肌酐无法检测到的1期和2期肾病，实现CKD早期诊断，及时治疗，推迟它的恶化；当肾小球滤过率（GFR）下降到正常值的50%以下时，尿素氮的浓度会有显著变化，近年来患有尿毒症的人越来越多，定期检测尿素氮有利于及早地发现肾功能的异常状况，从而尽早采取治疗措施，避免恶化到严重透析期，同时也减轻了高额医药费的负担；β2微球蛋白是反映高血压病和糖尿病肾功能受损的敏感指标，可以为肾功能测定、糖尿病肾病等的临床诊断提供较早、可靠地指标，同时，它是反应肾小球滤过功能的敏感指标。
20世纪80年代以来，陆续有实验表明人的唾液中尿素氮、胱抑素C、β2微球蛋白和血清中的这三种指标具有很好的相关性，其相关系数在0.93到1.03之间，因此可以用它们作为检测肾功能的指标。传统的肾功能检查过程中，采用静脉抽血进行检测，对于病情严重的患者一般都需要频繁抽血，因此手臂要保持干净，抽血过后避免沾水，防止感染。与传统的检测方法相比，检测唾液可以避免感染问题，又不用抽血，方便快捷，减轻了病人静脉穿刺之苦及失血性贫血。
检测肾功能指标的方法很多，半定量检测简便快速，同时给出了分析物中某元素的大致含量，即某元素或某物是主要、大量、中量、少量和微量，而不用具体的量值。检测他它们的产品形式主要有干化学法和酶法，常用的干化学法包括放射免疫法、化学发光法、胶体金免疫层析法等。干化学技术，即被检成分与试剂的化学反应，均在试纸上完成，不需要任何外界添加试剂、加热、洗涤等繁杂操作，以化学反应后所呈现的颜色变化来判别某物质的有无及大致含量，本文提出的一种半定量检测早期慢性肾病的唾液测试卡及其方法正是采用这种干化学法来进行检测。
发明内容
本发明提供一种半定量检测早期慢性肾病的唾液测试卡及其方法，简单直观，缩短了检测时间，得到了尿素氮、胱抑素C、β2微球蛋白的大致浓度范围，具有较高的准确率。根据唾液中三种指标与血清中三种指标间的相关性，通过该测试卡能够快速检测浓度范围，可用于检测早期肾功能，尤其是婴幼儿、老人和危重患者的肾功能检查，同时减轻了病人抽血时静脉穿刺的痛苦，易于操作。
本发明包括手持端、尿素氮反应和显示部分、胱抑素C反应和显示部分、支持部分、扩散部分、β2微球蛋白反应和显示部分、二维码扫描部分，使用时将该测试卡尿素氮反应和显示部分、胱抑素C反应和显示部分、β2微球蛋白反应和显示部分上面覆盖的密封膜撕掉，再放入口中，手持端保持在外，根据唾液与这三种反应和显示部分发生化学反应后得到的不同颜色和标准色卡的对照来判断三种指标的大致浓度范围。
所述的二维码扫描部分在手持端上，通过扫描可以打开该测试卡的链接网址，查看该测试卡的配置参数，包括使用说明、厂商、标准色谱、示例等，服务于未来拍照识别测试卡颜色。
所述的手持端可以与支持部分成一定角度，方便操作的范围是90°到180°。
所述的测试卡使用的标准色卡分为6个色区，尿素氮测定范围和分辨率分别是0mg/dL、11.4mg/dL、20.4mg/dL、40.4mg/dL、60.4mg/dL、80.4mg/dL，颜色由黄色到蓝色逐步加深，分别为黄色、黄绿色、绿色、青色、蓝绿色、蓝色；胱抑素C测定范围和分辨率是0mg/L、0.53mg/L、0.79mg/L、1.05mg/L、1.31mg/L、1.57mg/L，颜色由淡黄色到红色逐步加深，分别为淡黄色、金色、橙色、番茄红色、橙红色、红色；β2微球蛋白测定范围和分辨率是0mg/L、0.12mg/L、0.28mg/L、0.44mg/L、0.60mg/L、0.76mg/L，颜色由红色到黄色逐步变化，分别为红色、番茄红色、玫瑰红色、珊瑚红色、金色、黄色。
附图说明
图1是本发明测试卡的俯视图（平放）。
图2是本发明测试卡的前视图（平放）。
图3是本发明测试卡手持部分与剩余部分成90°角的示意图（侧放时前视）。
图4是本发明测试卡手持部分与剩余部分成180°角的示意图（平放时俯视）。
图5是本发明测试卡的标准色卡图。
具体实施方式
如图1、2所示，本发明包括手持端（1）、尿素氮反应和显示部分（2）、胱抑素C反应和显示部分（3）、支持部分（4）、扩散部分（5）、β2微球蛋白反应和显示部分（7）、二维码扫描部分（8），使用时将该测试卡扩散部分（5）覆盖的密封膜撕掉，再放入口中，手持端保持在外，根据唾液中尿素氮、胱抑素C、β2微球蛋白分别与测试卡上的尿素氮反应和显示部分（2）、胱抑素C反应和显示部分（3）、β2微球蛋白反应和显示部分（7）发生化学反应后得到的不同颜色和标准色卡的对照来判断指标的大致浓度范围。
所述的二维码扫描部分（8）在手持端（1）上，通过扫描可以查看该测试卡的使用说明、厂商、标准色谱等，服务于未来拍照识别测试卡颜色。
所述的支持部分（4）起支持作用，位于该测试卡的最底层，向上是手持端（1）、尿素氮反应和显示部分（2）和酸碱度测试部分（3），扩散部分（5）覆盖在尿素氮反应和显示部分（2）和酸碱度测试部分（3）上面。其中手持端（1）和支持部分（4）的五分之一组成手持部分（6）。
所述的尿素氮反应和显示部分（2）使用的指示剂为溴百里酚蓝，其变色范围是pH6.0（黄色）~7.6（蓝色），使用的试剂主要含有脲酶：5u/cm2，此时显色强度比较好。
所述的胱抑素C反应和显示部分（3）使用的指示剂为酚红，其变色范围是pH6.8（黄色）~8.0（红色），使用的试剂主要含有胱抑素C分解酶：10u/cm2。
所述的β2微球蛋白反应和显示部分（7）使用的指示剂为甲基橙，其变色范围是pH3.1（红色）~4.4（黄色），使用的试剂主要含有β2微球蛋白分解酶：5u/cm2。
所述的扩散部分（5）缓冲剂含有柠檬酸氢二铁大约0.05mol/L，因为此时反应产生的颜色梯度大。
如图5，标准色卡上一行代表唾液尿素氮比色，中间一行代表唾液胱抑素C比色，最后一行代表唾液β2微球蛋白比色，从左到右颜色依次加深。
该测试卡检测唾液尿素氮的原理为：测试时，撕掉密封膜，放入嘴中，当唾液中含有的尿素氮经由扩散部分（5）的缓冲剂扩散，与试剂脲酶发生反应时，产生氨气，与指示剂溴百里酚蓝结合，形成有色复合物，颜色与尿素氮浓度成正比。而尿素氮浓度正常范围是11.4~20.4mg/dL，当颜色比标准色卡0mg/dL的颜色深，比11.4mg/dL的颜色浅时，表明唾液尿素氮浓度处于0~11.4mg/dL，此时尿素氮浓度比正常范围低，可能肾功能失调或肝功能衰竭，应该去医院检查；当颜色比标准色卡11.4mg/dL的颜色深，比20.4mg/dL的颜色浅时，表明唾液尿素氮浓度处于11.4~20.4mg/dL，此时处于正常范围，表示健康；当颜色比标准色卡20.4mg/dL的颜色深，比40.4mg/dL的颜色浅时，表明唾液尿素氮浓度处于20.4~40.4mg/dL，此时比正常范围偏高一些，注意及时检查，以判断原因；当颜色比标准色卡40.4mg/dL的颜色深，比60.4mg/dL的颜色浅时，表明唾液尿素氮浓度处于40.4~60.4mg/dL，此时显著偏高，要及时就医，尽早治疗，避免进一步恶化；当颜色比标准色卡60.4mg/dL的颜色深，比80.4mg/dL的颜色浅时，表明唾液尿素氮浓度处于60.4~80.4mg/dL，此时严重偏高，可能进入尿毒症期或患有慢性肾炎等肾性疾病、肾结石等肾后疾病、充血性心力衰竭等肾前性疾病，要去医院做肾功能检测和其他相关检查。
该测试卡检测胱抑素C的原理为：测试时，撕掉密封膜，放入嘴中，当唾液中含有的胱抑素C经由扩散部分（5）的缓冲剂扩散，与试剂胱抑素C分解酶发生反应时，产生碱性物质，与指示剂酚红结合，形成有色复合物，颜色与胱抑素C浓度成正比。而唾液中胱抑素C浓度正常范围是0.53~0.79mg/L，当颜色比标准色卡0mg/dL的颜色深，比0.53mg/L的颜色浅时，表明唾液胱抑素C浓度处于0~0.53mg/L，此时胱抑素C浓度比正常范围低，临床意义不大，需去医院检查核实；当颜色比标准色卡0.53mg/L的颜色深，比0.79mg/L的颜色浅时，表明唾液胱抑素C浓度处于0.53~0.79mg/L，此时处于正常范围，表示健康；当颜色比标准色卡0.79mg/L的颜色深，比1.05mg/L的颜色浅时，表明唾液胱抑素C浓度处于0.79~1.05mg/L，此时比正常范围偏高一些，可能进入早期慢性肾病，注意及时检查，排除风险；当颜色比标准色卡1.05mg/L的颜色深，比1.31mg/L的颜色浅时，表明唾液胱抑素C浓度处于1.05~1.31mg/L，此时显著偏高，要及时就医，以判断是否进入中期慢性肾病，避免进一步恶化；当颜色比标准色卡1.31mg/L的颜色深，比1.57mg/L的颜色浅时，表明唾液胱抑素C浓度处于1.31~1.57mg/L，此时严重偏高，可能进入肾衰期或肾小管病变等，要去医院做肾功能检测和其他相关检查。
该测试卡检测β2微球蛋白的原理为：测试时，撕掉密封膜，放入嘴中，当唾液中含有的β2微球蛋白经由扩散部分（5）的缓冲剂扩散，与试剂β2微球蛋白分解酶发生反应时，产生酸性物质，与指示剂甲基橙结合，形成有色复合物，颜色与β2微球蛋白浓度成正比。而β2微球蛋白浓度正常范围是0.12~0.28mg/L，当颜色比标准色卡0mg/L的颜色深，比0.12mg/L的颜色浅时，表明唾液β2微球蛋白浓度处于0~0.12mg/L，此时β2微球蛋白浓度比正常范围低，说明肾小球滤过率很高，诊断意义不是特别大；当颜色比标准色卡0.12mg/L的颜色深，比0.28mg/L的颜色浅时，表明唾液β2微球蛋白浓度处于0.12~0.28mg/L，此时处于正常范围，表示健康；当颜色比标准色卡0.28mg/L的颜色深，比0.44mg/L的颜色浅时，表明唾液β2微球蛋白浓度处于0.28~0.44mg/L，此时比正常范围偏高一些，可能有糖尿病肾病、高血压肾病的风险，注意及时检查；当颜色比标准色卡0.44mg/L的颜色深，比0.60mg/L的颜色浅时，表明唾液β2微球蛋白浓度处于0.44~0.60mg/L，此时显著偏高，可能是急性肾损伤、肾小球或肾小管受损，需尽早治疗，避免进一步恶化；当颜色比标准色卡0.60mg/L的颜色深，比0.76mg/L的颜色浅时，表明唾液β2微球蛋白浓度处于0.60~0.76mg/L，此时严重偏高，可能进入肾衰期、慢性肾炎或糖尿病肾病等，需要及时去医院做肾功能检查，以确定治疗方案。

Claims (9)

1.一种半定量检测早期慢性肾病的唾液测试卡及其方法，其特征在于：该测试卡包括手持端（1）、尿素氮反应和显示部分（2）、胱抑素C反应和显示部分（3）、支持部分（4）、扩散部分（5）、β2微球蛋白反应和显示部分（7），二维码扫描部分（8）。
2.根据权利要求1所述的一种半定量检测早期慢性肾病的唾液测试卡及其方法，其特征在于：所述的测试卡可以同时检测唾液中尿素氮、胱抑素C、β2微球蛋白的大致浓度范围。
3.根据权利要求1所述的一种半定量检测早期慢性肾病的唾液测试卡及其方法，其特征在于：所述的测试卡二维码扫描部分（8）在手持端（1）上，通过扫描可以打开该测试卡的链接网址，查看该测试卡的使用说明、厂商、标准色谱、示例等，服务于未来拍照识别测试卡颜色。
4.根据权利要求1所述的一种半定量检测早期慢性肾病的唾液测试卡及其方法，其特征在于：所述的测试卡总长度为10cm，宽度为1cm，其中手持端长2cm，剩余部分的总长度为8cm，便于携带，其中手持端（1）和支持部分（4）的五分之一组成手持部分（6）。
5.根据权利要求1所述的一种半定量检测早期慢性肾病的唾液测试卡及其方法，其特征在于：所述的测试卡使用的唾液尿素氮标准色卡分为6个色区，测定范围和分辨率是0mg/dL、11.4mg/dL、20.4mg/dL、40.4mg/dL、60.4mg/dL、80.4mg/dL，颜色由黄色到蓝色逐步加深，分别为黄色、黄绿色、绿色、青色、蓝绿色、蓝色。
6.根据权利要求1所述的一种半定量检测早期慢性肾病的唾液测试卡及其方法，其特征在于：所述的测试卡使用的胱抑素C标准色卡分为6个色区，测定范围和分辨率是0mg/L、0.53mg/L、0.79mg/L、1.05mg/L、1.31mg/L、1.57mg/L，颜色由淡黄色到红色逐步加深，分别为淡黄色、金色、橙色、番茄红色、橙红色、红色。
7.根据权利要求1所述的一种半定量检测早期慢性肾病的唾液测试卡及其方法，其特征在于：所述的测试卡使用的β2微球蛋白标准色卡分为6个色区，测定范围和分辨率是0mg/L、0.12mg/L、0.28mg/L、0.44mg/L、0.60mg/L、0.76mg/L，颜色由红色到黄色逐步变化，分别为红色、番茄红色、玫瑰红色、珊瑚红色、金色、黄色。
8.根据权利要求1所述的一种半定量检测早期慢性肾病的唾液测试卡及其方法，其特征在于：所述的手持端（1）可以与支持部分（4）成一定角度，易于操作的范围是90°到180°。
9.根据权利要求1所述的一种半定量检测早期慢性肾病的唾液测试卡及其方法，其特征在于：所述的尿素氮反应和显示部分（2）、胱抑素C反应和显示部分（3）、β2微球蛋白反应和显示部分（7）都是边长为8mm的正方形，两两相距1cm，它们的上面为扩散部分（5），外侧使用密封膜密封，在使用该测试卡时，再将密封膜撕掉，使这三部分同时浸没在嘴中。
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